EA018746B1 - Иммуноцитокины для лечения рака в сочетании с химиотерапевтическими агентами - Google Patents

Иммуноцитокины для лечения рака в сочетании с химиотерапевтическими агентами Download PDF

Info

Publication number
EA018746B1
EA018746B1 EA200971103A EA200971103A EA018746B1 EA 018746 B1 EA018746 B1 EA 018746B1 EA 200971103 A EA200971103 A EA 200971103A EA 200971103 A EA200971103 A EA 200971103A EA 018746 B1 EA018746 B1 EA 018746B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
antibody
sequence
domain
tenascin
cancer
Prior art date
Application number
EA200971103A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200971103A1 (ru
Inventor
Эвелин Трачсел
Мануэла Каспар
Дарио Нери
Джессика Марлинд
Original Assignee
Филоген Эс.Пэ.Эй
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Филоген Эс.Пэ.Эй filed Critical Филоген Эс.Пэ.Эй
Publication of EA200971103A1 publication Critical patent/EA200971103A1/ru
Publication of EA018746B1 publication Critical patent/EA018746B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6813—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin the drug being a peptidic cytokine, e.g. an interleukin or interferon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6855—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from breast cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6857—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from lung cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретение относится к лечению рака с применением противоопухолевых агентов, таких как доксорубицин или паклитаксел, в сочетании с конъюгатами антитело-интерлейкин 2 (IL2), которые нацелены на тенасцин-С.

Description

Изобретение относится к лечению рака с помощью комбинации химиотерапевтических агентов и иммуноцитокинов.
Тенасцин-С представляет собой большой гексамерный гликопротеин внеклеточного матрикса, который модулирует клеточную адгезию. Он участвует в таких процессах, как клеточная пролиферация и клеточная миграция, и связан с изменениями в строении ткани, которые происходят в процессе морфогенеза и эмбриогенеза, а также при онкогенезе или ангиогенезе.
О существенной сверхэкспрессии большой изоформы тенасцина-С сообщали для ряда опухолей [Βοτκί 1992, выше], а моноклональные антитела, специфичные к доменам А1 и И соответственно, были широко описаны во врачебной практике |Ρίν;·ι Р. и др. Ιηΐ 1. Сапсег 1992; 51:7-13, Ρίνα Р. и др. Сапсег Век 1995; 55:5952к-5956к, РадапеШ С. и др. Еиг 1. Иис1 Меб 1994; 21:314-321, Кеатбоп Ό.Α. и др. 1. С11п Опсо1 2002; 20:1389-1397, В1дпег И.И. и др. 1. С1т Опсо1 1998; 16:2202-2212.
Фрагменты моноклональных антител человека, специфичные к тенасцину-С, описаны в \УО 2006/050834, и показано, что они предпочтительно связываются с опухолевой тканью по сравнению с нормальной тканью. Эти антитела применимы, например, для доставки токсинов, таких как цитокины, в частности, к опухолевым клеткам.
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что конъюгаты антитело-цитокин, которые нацелены на тенасцин-С, имеют неожиданный синергизм с противоопухолевыми соединениями, такими как доксорубицин и паклитаксел, при лечении рака.
В одном аспекте настоящего изобретения предусмотрен способ лечения рака, включающий введение противоопухолевого соединения и конъютата антитело-интерлейкин 2 (1Ь2) индивидууму, нуждающемуся в этом, при этом конъюгат антитело-1Е2 включает интерлейкин 2 (1Ь2), конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С.
В других аспектах настоящего изобретения предусмотрено противоопухолевое соединение для применения в способе лечения рака, включающем введение противоопухолевого соединения в сочетании с конъюгатом антитело-1Е2, включающим 1Ь2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С, индивидууму, нуждающемуся в этом, и применение противоопухолевого соединения в производстве лекарственного средства для применения в способе лечения рака, включающем введение противоопухолевого соединения в сочетании с конъюгатом антитело-1Е2 индивидууму, нуждающемуся в этом, указанный конъюгат антитело-1Е2 включает 1Ь2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С.
В других аспектах настоящего изобретения предусмотрен конъюгат антитело-1Е2, включающий 1Ь2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С для применения в способе лечения рака, включающем введение конъюгата антитело-1Е2 в сочетании с противоопухолевым соединением индивидууму, нуждающемуся в этом, и применение конъюгата антитело-1Е2, включающего 1Ь2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С в производстве лекарственного средства для применения в способе лечения рака, включающем введение конъюгата антитело-1Е2 в сочетании с указанным противоопухолевым соединением индивидууму, нуждающемуся в этом.
В других аспектах настоящего изобретения предусмотрена комбинация противоопухолевого соединения и конъюгата антитело-1Е2, включающего 1Ь2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С, для применения в способе лечения рака, включающем введение конъюгата антитело-1Е2 и указанного противоопухолевого соединения индивидууму, нуждающемуся в этом, и применение комбинации противоопухолевого соединения и конъюгата антитело-1Е2, включающего 1Ь2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С, в производстве лекарственного средства для применения в способе лечения рака, включающем введение конъюгата антитело1Ь2 и противоопухолевого соединения индивидууму, нуждающемуся в этом.
Способ лечения, описанный в данном изобретении, подходит для лечения опухолевого заболевания, включающего любой тип солидного или несолидного рака или злокачественную лимфому и, в частности, лейкемию, саркомы, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак груди, рак матки, рак яичников, рак предстательной железы, рак легких, колоректальный рак, рак шейки матки, рак печени, рак головы и шеи, рак пищевода, рак поджелудочной железы, рак почки, рак желудка и рак мозга. Рак может быть наследственным или спорадическим.
В некоторых предпочтительных вариантах реализации рак может представлять собой рак груди.
Противоопухолевые соединения представляют собой цитотоксические соединения, которые ингибируют рост, деление и/или пролиферацию раковых клеток. Противоопухолевые соединения в некоторых случаях могут оказывать влияние на нормальные неопухолевые клетки у пациента. Противоопухолевое соединение, например, может ингибировать клеточный цикл или активировать апоптоз. Подходящие противоопухолевые соединения, которые ингибируют клеточный цикл, включают агенты, повреждающие ДНК, и антимитотические агенты, включая ингибиторы сборки митотического веретена.
Повреждающий ДНК агент представляет собой химиотерапевтическое соединение, которое индуцирует двунитевые разрывы клеточной ДНК (ΌΝΑ ΌδΒκ), тем самым ингибируя или прекращая репликацию ДНК. Многие подходящие соединения известны в данной области техники для применения при
- 1 018746 лечении рака, включая, например, блеомицин, гидроксимочевину, митомицин и актиномицин и ингибиторы активности топоизомеразы I и II, включая антрациклины, такие как даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, митоксантрон и валрубицин, этопозид и тенипозид, и члены семейства теканов, например иринотекан, топотекан, рубитекан. Агенты, повреждающие ДНК, можно применять, как описано в данном изобретении, в любой удобной форме или составе. Например, можно использовать любой подходящий изомер, соль, сольват, химически защищенную форму или пролекарство конкретного повреждающего ДНК агента.
В некоторых предпочтительных вариантах реализации указанный повреждающий ДНК агент представляет собой доксорубицин ((88,108)-10-(4-амино-5-гидрокси-6-метилтетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)6,8,11-тригидрокси-8-(2-гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион). Доксорубицин представляет собой антрациклиновый интеркалирующий агент, который широко применяется для лечения рака под торговыми наименованиями, такими как Адриамицин™ и Рубеке™.
Противоопухолевые соединения, которые ингибируют сборку митотического веретена, например, могут связываться с микротрубочками и изменять полимеризацию или стабильность микротрубочек, что приводит к ингибированию развития клеточного цикла и, в конечном счете, к апоптозу. Примеры ингибиторов сборки митотического веретена включают таксаны, например паклитаксел (таксол™: β(бензоиламино)-а-гидрокси-6,12Ь-бис-(ацетилокси)-12-(бензоилокси)-2а,3,4,4а,5,6,9,10,11,12,12а,12Ьдодекагидро-4,11 -дигидрокси-4а,8,13,13 -тетраметил-5-оксо-7,11 -метано-1Н-циклодека(3,4)бенз( 1,2Ь)оксет-9-иловый эфир (2аК-(2а-а,4-р,4а-в,6-в,9-а(а-К*,в-8*), 11-α, 12-α, 12а-а,2Ь-а))бензолпропановая кислота) и его аналоги или производные.
Таксаны представляют собой сложные эфиры, состоящие из 15-членной таксановой кольцевой системы, связанной с 4-членным окситановым кольцом. Предпочтительные таксаны представляют собой такие, которые имеют составляющие, которые, как известно в данной области техники, требуются для усиления образования микротрубочек, например паклитаксел и доцетаксел. Структуры паклитаксела и доцетаксела отличаются по заменам в положении С-10 таксанового кольца и по эфирной боковой цепи, присоединенной в положении С-13. Доцетаксел включает трет-бутоксикарбонил вместо бензоила на аминогруппе фрагмента (2В,38)-фенилизосерина в положении С-13 и гидроксильную группу вместо ацетоксильной группы в положении С-10. Структуры паклитаксела и доцетаксела хорошо известны в данной области техники.
Другие таксаны, подходящие для применения, описанного в данном изобретении, представляют собой производные паклитаксела, имеющие структурные изменения в той части молекулы паклитаксела, которая включает атомы углерода 6-12, с функциональными группами, содержащими кислород, в положениях С-7, С-9 и С-10. Многие такие производные известны в данной области техники, и известно, что такие производные проявляют биологическую активность, которая сравнима с биоактивностью паклитаксела. Например, ацилирование гидроксильной группы С-7, или ее замещение на водород, значительно не снижает активность паклитаксела. Дополнительно, замещение 10-ацетоксильной группы на водород вызывает лишь незначительное снижение активности.
Восстановление карбонильной группы С-9 до α-ОН группы, как известно, вызывает небольшое повышение активности сборки тубулина. Дополнительно, известно, что продукт перегруппировки с циклопропановым кольцом, связывающим седьмое и восьмое положения, практически так же цитотоксичен, как и паклитаксел. Также сообщали, что производные бензоила с заместителями в мета-положении более активны, чем их аналоги, содержащие заместители в пара-положении, и часто более активны, чем сам паклитаксел.
Другой аналог паклитаксела, подходящий для применения, описанного в данном изобретении, представляет собой А-норпаклитаксел. Этот аналог обладает активностью в отношении сборки тубулина, которая лишь в три раза меньше, чем у паклитаксела. А-норпаклитаксел и паклитаксел имеют очень схожие молекулярные структуры, которые могут объяснить их похожие активности по отношению к сборке тубулина.
Другими подходящими таксанами являются таксазм, 7-эпипаклитаксел, трет-ацетилпаклитаксел, 10-дезацетилпаклитаксел, 10-дезацетил-7-эпипаклитаксел, 7-ксилозилпаклитаксел, 10-дезацетил-7глутарилпаклитаксел, 7-Ы,Н-диметилглицилпаклитаксел, 7-Ь-аланилпаклитаксел и их смеси.
В некоторых предпочтительных вариантах реализации указанное противоопухолевое соединение представляет собой паклитаксел.
Конъюгат антитело-1Ь2 для применения, описанного в данном изобретении, может включать 1Ь2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С.
1Ь2 представляет собой секретируемый цитокин, который участвует в иммунорегуляции и пролиферации Т и В лимфоцитов. Было показано, что 1Ь2 оказывает цитотоксическое действие на опухолевые клетки, и рекомбинантный 1Ь2 человека (альдеслейкин: Рго1еиктк) получил одобрение Управления по контролю за продуктами питания и лекарственными средствами ΡΌΑ для лечения метастатического рака почки и метастатической меланомы. Последовательность 1Ь2 человека приведена в 8ЕО Ш N0: 11 и общедоступна по ссылке в базе данных последовательностей ΝΡ_000577.2 01: 28178861.
- 2 018746
В некоторых предпочтительных вариантах реализации фрагмент 1Ь2 конъюгата антитело-1Ь2 включает последовательность, которая имеет по меньшей мере 90% идентичности последовательностей, по меньшей мере 95% идентичности последовательностей или по меньшей мере 98% идентичности последовательностей со зрелой последовательностью 1Ь2 человека, приведенной в 8ЕО ГО N0: 11.
Идентичность последовательностей обычно определяют со ссылкой на алгоритм САР (пакет \У1кеои8ш ССС, Ассе1егук 1пс, Сан-Диего, США). В САР используется алгоритм №еб1етаи и ^ииксй для выравнивания двух целых последовательностей, которое позволяет максимизировать количество совпадений и минимизировать количество гэпов. Как правило, используют параметры по умолчанию, со штрафом за открытие гэпа = 12 и штрафом за продолжение гэпа = 4. Применение САР может быть предпочтительным, но можно применять и другие алгоритмы, например ВБА8Т (в котором используется способ А11кс1ш1 и др. (1990), 1. Мо1. Вю1. 215: 405-410), БА8ТА (в котором используется способ Реагкои и Ыртаи (1988), РNА8 И8А 85: 2444-2448), или алгоритм 8тйй-^а1егтаи (8тй11 и \Уа1егтап (1981), 1. Мо1. Вю1. 147: 195-197), или программу ТВ^А8ТN от А11кс1ш1 и др. (1990), выше, как правило, используя параметры по умолчанию. В частности, можно применять алгоритм рк1-В1ак1 (№с1. Ас1бк Век. (1997), 25 3389-3402).
В некоторых особенно предпочтительных вариантах реализации молекула Ш2 конъюгата антителоШ2 включает последовательность зрелого Ш2 человека, приведенную в 8ЕО ГО N0: 11.
Фрагмент Ш2 может быть слит в обратном направлении (по Ν-концу) или в прямом направлении (по С-концу) с антителом или его полипептидным компонентом.
Фрагмент Ш2 может быть связан или присоединен к фрагменту антитела в конъюгате антитело-Ш2 с помощью любых подходящих ковалентных или нековалентных средств. В предпочтительных вариантах реализации конъюгат антитело-Ш2 может представлять собой слитый белок, включающий Ш2 и антитело против тенасцина-С или его полипептидный компонент, например, тяжелую цепь или легкую цепь антитела или многоцепочечный фрагмент антитела, такой как ЕаЬ. Таким образом, например, фрагмент Ш2 может быть слит с УН доменом или УЬ доменом указанного антитела. Обычно, антитело или его компонент и фрагмент Ш2 соединены с помощью пептидного линкера, например пептида, состоящего из приблизительно 5-25 остатков, например 10-20 остатков, предпочтительно приблизительно 15 остатков. Подходящие примеры пептидных линкеров хорошо известны в данной области техники. В некоторых вариантах реализации линкер может иметь последовательность аминокислот, приведенную в 8Е0 ГО N0: 12. Как правило, линкер имеет последовательность аминокислот, включающую один или более тандемных повторов мотива. Обычно указанный мотив представляет собой последовательность из пяти остатков, и предпочтительно по меньшей мере 4 из этих остатков представляют собой С1у или 8ет. Когда четыре из пяти остатков представляют собой С1у или 8ет, другой остаток может быть А1а. Более предпочтительно, каждый из пяти остатков представляет собой С1у или 8ет. Предпочтительными мотивами являются СССС8, 8888С, С8С8А и СС8СС. Предпочтительно мотивы являются смежными в последовательности, без дополнительных нуклеотидов между повторами. Линкерная последовательность может включать или состоять из одного до пяти, предпочтительно трех или четырех повторов этого мотива. Например, линкер с тремя тандемными повторами может иметь одну из следующих последовательностей аминокислот:
СССС8СССС8СССС8 - 8ЕО ГО N0: 13;
8888С8888С8888С - 8ЕО ГО N0: 14; С8С8АС8С8АС8С8А-8ЕО ГО N0: 15; СС8СССС8СССС8СС - 8ЕО ГО N0: 16.
В предпочтительных вариантах реализации фрагмент антитела конъюгата антитело-1Ь2 специфично связывается с большой изоформой тенасцина-С. Например, антитело может связываться предпочтительно с большой изоформой тенасцина-С по сравнению с малой изоформой тенасцина-С. Наиболее предпочтительно антитело связывается с доменом А1 большой изоформы тенасцина-С.
Предпочтительные антитела являются опухолеспецифичными и связываются предпочтительно с опухолевой тканью по сравнению с нормальной тканью. Антитела, например, могут связываться со стромой и/или нео- и периваскулярными структурами опухолевой ткани, предпочтительно по сравнению с нормальной тканью.
Примеры подходящих антител для применения в конъюгатах антитело-1Ь2 описаны в \У0 2006/050834.
В некоторых вариантах реализации, фрагмент антитела конъюгата антитело-1Ь2, описанного в данном изобретении, конкурирует за связывание с тенасцином-С с антителом, включающим домен 4А1-Б16 УН, имеющий последовательность 8Е0 ГО N0: 2, и домен 4А1-Б16 УЬ, имеющий последовательность 8ЕО ГО N0: 4.
Конкурирование между антителами можно легко протестировать ίη У11го. например, применяя ЕЫ8А, и/или путем мечения специфичной репортерной молекулой одного антитела, которое можно обнаружить в присутствии другого немеченого антитела (антител), для обеспечения идентификации антител, которые связывают такой же эпитоп или перекрывающийся эпитоп.
Подходящее антитело для применения в конъюгате антитело-1Ь2, описанном в данном изобретении,
- 3 018746 может включать сайт связывания антиген-антитело, включающий домен УН и домен УБ, домен УН, включающий СЭК1 УН, имеющий последовательность 8ЕО Ш N0: 5, СЭБ2 УН, имеющий последовательность 8Е0 Ш N0: 6, и СЭБ3 УН, имеющий последовательность 8Е0 Ш N0: 7; и домен УБ, включающий СЭВ1 УБ, имеющий последовательность 8Е0 Ш N0: 8, СЭБ2 УБ, имеющий последовательность 8Е0 Ш N0: 9, и СЭБ3 УБ, имеющий последовательность 8Е0 Ш N0: 10.
В некоторых предпочтительных вариантах реализации антитело может включать сайт связывания антиген-антитело, включающий домен 4Л1-Е16 УН, имеющий последовательность 8Е0 Ш N0: 2, и домен 4Л1-Е16 УБ, имеющий последовательность 8Е0 Ш N0: 4.
Варианты этих доменов УН и УБ и гипервариабельных участков (СЭБз) также можно использовать в антителах для применения в конъюгатах антитело-1Б2, описанных в данном изобретении. Подходящие варианты можно получить с помощью способов изменения последовательности или мутации и скрининга.
Конкретные варианты для применения, описанного в данном изобретении, могут включать одно или более изменений последовательности аминокислот (присоединение, делецию, замену и/или вставку аминокислотного остатка), возможно, менее чем приблизительно 20 изменений, менее чем приблизительно 15 изменений, менее чем приблизительно 10 изменений или менее чем приблизительно 5 изменений, 4, 3, 2 или 1 изменение. Изменения можно внести в одном или более каркасных участках и/или одном или более гипервариабельных участках. В частности, изменения можно внести в СЭБ1 УН, СЭБ2 УН и/или С1)Н.3 УН, особенно в С1)Н'3 ун.
Введение противоопухолевого соединения, конъюгата антитело-1Б2 и композиции, включающей одну или обе эти молекулы, осуществляют предпочтительно в терапевтически эффективном количестве, которого достаточно, чтобы принести пользу пациенту. Такой пользой может быть, по меньшей мере, снижение выраженности по меньшей мере одного симптома. Фактически вводимое количество, режим и курс введения будут зависеть от природы и тяжести заболевания, от которого лечат. Назначение лекарства, например выбор дозировки и т.д., находится в компетенции практикующих врачей и других врачей.
Точная доза будет зависеть от ряда факторов, размера и расположения области, нуждающейся в лечении, конкретной природы конъюгата антитело-1Б2 (например, целое антитело, фрагмент или димерное антитело). Обычная доза конъюгата антитело-1Б2 будет лежать в диапазоне от 0,5 мг до 100 г для системного применения и от 10 мкг до 1 мг для местного применения. Обычно фрагмент антитела в конъюгате представляет собой целое антитело, предпочтительно, 1дС1 или 1дС4 изотипа. Это представляет собой дозу для однократного лечения взрослого пациента, которую можно пропорционально изменить для детей и младенцев и также изменить для других форматов антител пропорционально молекулярной массе. Подходящие дозы и схемы лечения для противоопухолевых соединений хорошо известны в данной области техники.
Лечение можно повторять ежедневно, два раза в неделю, еженедельно или ежемесячно, по усмотрению лечащего врача.
Конъюгат антитело-1Б2 и указанное противоопухолевое соединение можно вводить последовательно или одновременно в соответствии с любой подходящей схемой лечения.
Конъюгат антитело-1Б2 и указанное противоопухолевое соединение, как правило, вводят индивидууму в виде фармацевтической композиции, которая может включать по меньшей мере один компонент, дополнительно к активному соединению.
Подходящие компоненты включают фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, носитель, буфер, стабилизатор или другие материалы, хорошо известные специалистам в данной области техники Такие материалы должны быть нетоксичны и не должны препятствовать эффективности действующего ингредиента. Конкретная природа носителя или другого материала будет зависеть от пути введения, который может быть пероральным, или с помощью инъекции, например внутривенным.
Конъюгат антитело-1Б2 и указанное противоопухолевое соединение могут входить в состав раздельных фармацевтических композиций или, когда это целесообразно, в той же фармацевтической композиции.
Другой аспект настоящего изобретения обеспечивает фармацевтическую композицию для применения при лечении рака, включающую противоопухолевое соединение и конъюгат антитело-1Б2, включающий 1Б2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С.
Другой аспект настоящего изобретения обеспечивает способ получения фармацевтической композиции для применения при лечении рака, включающий составление лекарственной формы противоопухолевого соединения и конъюгата антитело-1Б2, включающего 1Б2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С
Фармацевтические композиции для перорального введения могут быть в форме таблетки, капсулы, порошка или в жидкой форме. Таблетка может включать твердый носитель, такой как желатин или адъювант. Жидкие фармацевтические композиции, как правило, включают жидкий носитель, такой как вода, нефтепродукты, животные или растительные масла, минеральное масло или синтетическое масло. Могут быть также включены физиологический солевой раствор, декстроза или раствор другого сахарида, или
- 4 018746 гликоли, такие как этиленгликоль, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль.
Для внутривенной инъекции или инъекции в участок повреждения действующий ингредиент должен быть в виде приемлемого для парентерального применения водного раствора, который апирогенен и имеет подходящие рН, изотоничность и стабильность. Рядовые специалисты в данной области техники смогут легко приготовить подходящие растворы, применяя, например, изотонические среды, такие как инъекция хлорида натрия, инъекция Рингера, инъекция Рингера с лактатом. Консерванты, стабилизаторы, буферы, антиоксиданты и/или другие добавки можно включить при необходимости.
Другой аспект настоящего изобретения обеспечивает терапевтический набор для применения для лечения рака, включающий противоопухолевое соединение и конъюгат антитело-1Б2, включающий 1Б2, конъюгированный с антителом, которое специфично связывается с тенасцином-С.
Компоненты набора (т.е. противоопухолевое соединение и конъюгат антитело-1Б2) стерильны и находятся в запечатанных ампулах или других контейнерах. Набор может дополнительно включать инструкции для применения компонентов в способе, описанном в данном изобретении. Компоненты указанного набора могут быть включены или упакованы в контейнер, например в пакет, коробку, банку, жестяной сосуд или блистерную упаковку.
Терминология.
Антитело.
Этот термин описывает иммуноглобулин либо природный, либо частично или полностью полученный синтетическим путем. Термин также включает любой полипептид или белок, включающий домен связывания, который является, или по существу является, гомологичным домену связывания антитела. Примерами антител являются изотипы иммуноглобулинов и их изотипические подклассы; фрагменты, которые включают антиген-связывающий домен, такой как ЕаЬ, 8сГу, Εν, бАЬ, Гб; и димерные антитела.
Можно получить моноклональные и другие антитела и использовать методики технологии рекомбинантной ДНК для получения других антител или химерных молекул, которые сохраняют специфичность исходного антитела. Такие методики могут включать внедрение ДНК, кодирующей вариабельный участок иммуноглобулина, или гипервариабельные участки (СЭК), антитела и их слияние с константными областями, или константными областями с каркасными участками различного иммуноглобулина. См., например, ЕР-А-184187, СВ 2188638А или ЕР-А-239400. Гибридому или другую клетку, продуцирующую антитело, можно подвергнуть генетической мутации или другим изменениям, которые могут изменять или не изменять специфичность связывания продуцируемых антител.
Так как антитела можно модифицировать множеством способов, термин антитело должен включать любой специфичный связывающий элемент или вещество, включающее домен связывания, с требуемой специфичностью. Таким образом, этот термин включает фрагменты антител, производные, функциональные эквиваленты и гомологи антител, включая любой полипептид, включающий домен связывания иммуноглобулина, либо природный, либо полностью или частично синтетический. Химерные молекулы, включающие домен связывания иммуноглобулина, или эквивалент, слитый с другим полипептидом, следовательно, являются включенными. Клонирование и экспрессия химерных антител описаны в ЕР-А-0120694 и ЕР-А-0125023.
Было показано, что фрагменты целого антитела могут выполнять функцию связывания антигенов. Примерами связывающих фрагментов являются (г) ГаЬ-фрагмент, состоящий из доменов УБ, УН, СЬ и СН1; (и) Εά-фрагмент, состоящий из УН и доменов СН1; (ΐΐϊ) Εν-фрагмент, состоящий из доменов УБ и УН одного антитела; (ίν) бАЬ-фрагмент (^агб, Е.8. и др., №Ш1ге 341, 544-546 (1989)), который состоит из домена УН; (ν) изолированные гипервариабельные участки; (νί) Е(аЬ')2-фрагменты, двухвалентный фрагмент, включающий два связанных ЕаЬ фрагмента, (νίί) одноцепочечные молекулы Εν (ксРу), в которых домен УН и домен УБ связаны посредством пептидного линкера, который позволяет двум доменам взаимодействовать с образованием сайта связывания антигена (Вйб и др., Бсгепсе, 242, 423-426, 1988; Нийои и др., ΡΝΑ8 И8А, 85, 5879-5883, 1988); (νίίί) биспецифичные одноцепочечные димеры Εν (РСТ/И892/09965) и (ίχ) димерные антитела, мультивалентные или мультиспецифичные фрагменты, созданные путем слияния генов (\УО 94/13804; Р. НоШдег и др., Ргос. №11. Асаб. 8сг. И8А 90, 6444-6448, 1993). Молекулы Εν, ксРу или димерное антитело можно стабилизировать путем введения дисульфидных мостиков, связывающих домены УН и УБ (Υ. Кейег и др. №ш.1ге Вю1ес11 14, 1239-1245, 1996). Также можно получить мини-антитела, включающие ^Εν, соединенный с СН3 доменом (8. Ни и др., Сапсег Кек. 56, 3055-3061, 1996).
Димерные антитела представляют собой мультимеры полипептидов, каждый полипептид включает первый домен, включающий участок связывания легкой цепи иммуноглобулина, и второй домен, включающий участок связывания тяжелой цепи иммуноглобулина, указанные два домена связаны (например, с помощью пептидного линкера), но не могут взаимодействовать друг с другом с образованием сайта связывания антигена: сайты связывания антигена образуются путем взаимодействия первого домена одного полипептида в мультимере со вторым доменом другого полипептида в мультимере (\УО 94/13804).
Антигенсвязывающий домен.
Этот термин описывает часть антитела, которая включает область, которая специфично связывается и комплементарна части или всему антигену. Если антиген большой, антитело может связываться лишь с
- 5 018746 конкретной частью этого антигена, эта часть называется эпитопом. Антигенсвязывающий домен может обеспечить один или более вариабельных доменов антитела (например, так называемый Ей-фрагмент антитела, состоящий из домена УН). Предпочтительно антигенсвязывающий домен включает вариабельный участок легкой цепи антитела (УЬ) и вариабельный участок тяжелой цепи антитела (УН).
Специфичный.
Этот термин можно применять по отношению к случаю, когда один партнер из специфично связывающейся пары не будет проявлять какое-либо значительное связывание с молекулами, отличными от его специфично связывающего партнера(ов). Например, антитело, специфичное к тенасцину-С, может проявлять небольшое или не проявлять связывания с другими компонентами внеклеточного матрикса, такими как фибронектин. Аналогично, антитело, специфичное к большой изоформе тенасцина-С, может проявлять небольшое или не проявлять связывания с малой изоформой тенасцина-С.
Термин также применим, когда, например, антигенсвязывающий домен специфичен к конкретному эпитопу, который несет множество антигенов, в этом случае, специфично связывающийся партнер, несущий антигенсвязывающий домен, будет способен связываться с различными антигенами, несущими указанный эпитоп.
Включать.
Этот термин, как правило, используют в смысле содержит, иначе говоря, допускает присутствие одного или более признаков или компонентов.
Под по существу описанный подразумевают, что рассматриваемый гипервариабельный участок или домен УН или УЪ согласно настоящему изобретению будут либо идентичными, либо очень схожими с конкретными участками, последовательность которых описана в данном изобретении. Под очень схожие подразумевают, что можно произвести от 1 до 5, предпочтительно от 1 до 4, как, например, от 1 до 3, или 1 или 2, или 3 или 4 замены в гипервариабельном участке и/или домене УН или УЪ.
Структура, несущая гипервариабельный участок согласно настоящему изобретению, будет, как правило, иметь последовательность тяжелой или легкой цепи антитела или существенной ее части, в которой гипервариабельный участок расположен в положении, соответствующем гипервариабельному участку встречающихся в природе вариабельных доменов УН и УЪ антитела, кодируемых перестроенными генами иммуноглобулинов. Структуры и положения вариабельных доменов и гипервариабельных участков иммуноглобулина можно найти в литературе (КаЬа1, Е.А. и др., 8сцисисс5 οί Рго1еш5 οί 1ттиио1од1са1 1и1сгс51. 4-е издание. Министерство здравоохранения и социального обеспечения США. 1987, и его исправленных и дополненных изданиях, доступных в сети Интернет (ййр://1ттипо.Ьте.иети.ейи)).
Различные дополнительные аспекты и варианты реализации настоящего изобретения должны быть очевидны для специалистов в данной области техники в духе настоящего описания изобретения. Все документы и данные, приводимые в базах данных, указанные в настоящем описании, полностью включены в данное изобретение посредством ссылки.
И/или в данном изобретении должно пониматься, как конкретное описание каждого из двух установленных признаков или компонентов, в присутствии или без другого. Например А и/или В должно пониматься, как конкретное описание каждого из (ί) А, (и) В и (ίίί) А и В, точно так же, как если бы каждый был отдельно описан в данном изобретении.
Если из контекста не очевидно иное, описания и определения признаков, описанных выше, не ограничены любым конкретным аспектом или вариантом реализации настоящего изобретения и применимы в равной степени ко всем аспектам и вариантам реализации, которые описаны.
Некоторые аспекты и варианты реализации настоящего изобретения далее проиллюстрированы с помощью примеров со ссылками на фигуры и таблицы.
На фиг. 1-4 показано биораспределение меченого Е16-Ш2, который вводили после предварительной инъекции доксорубицина.
На фиг. 5 показано действие доксорубицина, Е16-1Ь2 и рекомбинантного 1Ь2 на опухоли рака груди человека ΜΌΑ-ΜΒ231, имплантированные в голых мышей.
На фиг. 6 показано действие паклитаксела (таксола™) и Е16-Ш2 на опухоли рака груди человека ΜΌΑ-ΜΒ231, имплантированные в голых мышей.
На фиг. 7 показано схематическое изображение малой (А) и большой (В) изоформ тенасцина-С. Некоторые фибронектин типа ΙΙΙ-подобные домены подвергаются альтернативному сплайсингу, либо включаясь (В), либо не включаясь (А) в молекулу. Последовательность аминокислот и кодирующая последовательность нуклеотидов тенасцина-С общедоступны по ссылкам в базе данных последовательностей ΝΡ_002151.1 61:4504549 и ΝΜ_002160.1 61:4504548 соответственно.
- 6 018746
Эксперименты.
Биораспределение.
Эффективность нацеливания ίη νίνο оценивали с помощью анализа биораспределения. Мышей, несущих опухоль, получали путем подкожного инъецирования 107 клеток рака груди человека ΜΌΆ-ΜΒ231 самкам голых мышей Ва1Ь/с 10-12-недельного возраста (Сйат1е8 РБ'СГ БаЬогаЮпсЦ. Мышей распределяли по группам (п>5), когда опухоли были отчетливо пальпируемы, и инъецировали внутривенно в боковую хвостовую вену 10 мг/кг доксорубицина за 8 дней, 24 ч или 2 ч до анализа биораспределения. Контрольную группу освобождали от введения доксорубицина. Очищенные Е16-1Б2 метили радиоактивным йодом и инъецировали в боковую хвостовую вену всех мышей. Мышей умерщвляли через 24 ч после инъекции (12,5 мкг, 3,3 мкКи на мышь). Органы взвешивали и радиоактивность подсчитывали с помощью счетчика гамма-излучения Раскатб СоЬга. Содержание радиоактивности типичных органов выражали в виде процента от инъецированной дозы на грамм ткани (%ИД/г).
Результаты этих экспериментов показали, что предварительная инъекция доксорубицина не нарушала нацеливание иммуноцитокина на опухоль (фиг. 1-4).
Терапия.
Мышей, несущих опухоль, получали путем подкожного инъецирования 2х 107 клеток рака груди человека ΜΌΆ-ΜΒ-231 самкам голых мышей Ва1Ь/с 10-12-недельного возраста (Сйат1е8 Ищет ЬаЬот а1опе5). Мышей распределяли по группам (η=5) через 9 дней после имплантации опухолевых клеток, когда опухоли были отчетливо пальпируемы, и инъецировали внутривенно в боковую хвостовую вену солевой раствор, 20 мкг Е16-1Б2 (что соответствовало 6,6 мкг 1Ь2), 6,6 мкг рекомбинантного 1Ь2 (Рго1еикт®), и 4 или 1 мг/кг доксорубицина в максимальном объеме, равном 250 мкл. За мышами наблюдали ежедневно и рост опухоли измеряли три раза еженедельно с помощью штангенциркуля, используя следующую формулу: объем=длинахширина2х0.5. Животных умерщвляли, когда опухоли достигали объема >2000 мм3 или когда опухоли становились некротическими, согласно швейцарским нормативным требованиям и согласно лицензии проекта, предоставленной Уе1еттбгат1 без Кайопз ΖιιγΚΙι (198/2005). Размеры опухоли выражали в виде среднего±среднеквадратическая ошибка.
Синергичное действие наблюдали между Е16-1Б2 и доксорубицином в модели рака груди человека ΜΌΆ-ΜΒ231, имплантированного голым мышам (фиг. 5). Также наблюдали, что более высокие дозы доксорубицина были еще более эффективны, чем низкие дозы.
Мышам, несущим опухоли, полученным тем же способом, инъецировали внутривенно в боковую хвостовую вену солевой раствор, 20 мкг Е16-1Б2 (что соответствует 6,6 мкг 1Ь2), и 1 или 5 мг/кг таксола™ в максимальном объеме, равном 250 мкл. За мышами наблюдали и рост опухоли измеряли, как описано выше.
Синергичное действие наблюдали между Е16-Ш2 и таксолом™ в модели рака груди человека ΜΌΆΜΒ231, имплантированного голым мышам (фиг. 6).
Последовательности.
8ЕО ГО N0: 1. Последовательность нуклеотидов домена 4Л1-Е16 УН
САС СТС САС СТС ТТС САС ТСТ ССС ССА ССС ТТС СТА САС ССТ ССС ССС
ТСС СТС АСА СТС ТСС ТСТ ССА ССС ТСТ ССА ТТС АСС ТТТ АСС ССС ТАТ ССТ ССС АСС ТСС СТС ССС САС ССТ ССА ССС ААС ССС СТС САС ТСС СТС ТСА ССТ АТТ АСТ ССТ АСТ ССТ ОСТ АСС АСА ТАС ТАС ССА САС ТСС СТС ААС ССС ССС ТТС АСС АТС ТСС АСА САС ААТ ТСС ААС ААС АСС СТС ТАТ СТС САА АТС ААС АСС СТС АСА ССС САС САС АСС ССС СТА ТАТ ТАС ТСТ ССС ААА ССС САТ ААТ ССТ ТТТ САС ТАС ТСС ССС САС ССА АСС СТС СТС АСС СТС ТСС АСА
8ЕО ГО N0: 2. Последовательность аминокислот домена 4А1-Е16 УН
ЕУОЬЬЕЗССС 13/0РСС81_к1_ 8САА8ОЕТЕЗ * ΗΥΟΑβνννΗΟΑ РСКС1_Е\ЛЛ/ЗА
Ι3Ο3ΟΟ8ΤΥΥ ΑϋδνΚΟΒΕΤΙ 8Κ0Ν8ΚΝΤΙ.Υ 1_0ΜΝ8Ι_Ε?ΑΕ0 ΤΑνΥΥΟΑΚΑΗ ΝΑΕϋΥννΟΟΟΤ 1_ντν3ΚΕν01_ΙΕ3000 1_νθΡΟΟ5Ι_Κ1_ ЗСАА8СЕТРЗ ΚΥΟΑδνννΚΟΑ РСКС1_Е\АЛ/ЗА Ι3Ο3ΟΟ3ΤΥΥ ΑϋβνΚΟΡΕΤΙ 3ΚϋΝ3ΚΝΤίΥ ΙΟΜΝδΙ-ΕΑΕΟ ΤΑνΥΥΟΑΚΑΗ ΝΑΕϋΥννΟΟΟΤ ίντν3Β5Ε0 Ю ΝΟ: 3
- 7 018746
Последовательность нуклеотидов домена 4Л1-Е16 УЬ
ТСС ТСТ САС СТС АСТ САС САС ССТ ССТ СТС ТСТ СТС ССС ТТС ССА САС
АСА СТС АСС АТС АСА ТСС САА ССА САС АСС СТС АСА АСС ТАТ ТАТ ССА
АСС ТСС ТАС САС САС ААС ССА ССА САС ССС ССТ СТА СТТ СТС АТС ТАТ
ССТ ААА ААС ААС ССС ССС ТСА ССС АТС ССА САС ССА ТТС ТСТ ССС ТСС
АСС ТСА ССА ААС АСА ССТ ТСС ТТС АСС АТС АСТ ССС ССТ САС ССС САА
САТ САС ССТ САС ТАТ ТАС ТСТ ААС ТСС ТСТ СТТ ТАТ АСТ АТС ССС ССС
СТС СТА ТТС ССС ССА ССС АСС ААС СТС АСС СТС СТА ССС
ВЕС) ΙΌ N0: 4. Последовательность аминокислот домена 4Л1-Е16 УЬ
83Е1_ТС10РАУ 8УА1_С0ТУР1 ТС0СЭ51_Р8У УАбУУУСЮКРС 0АРУ1Л/1УСК
ΝΝΚΡ88ΙΡϋΡ ЕЗС83861МТА 31Т1ТСАОАЕ 0ΕΑϋΥΥΌΝ38 УУТМРРУУРС ССТК1_ТУ1_С
ВЕС) ΙΌ N0: 5. Последовательность аминокислот 0ΌΚ1 4Л1-Е16 УН
РУСАЗ
8ЕР ΙΌ N0: 6. Последовательность аминокислот 0ΌΚ2 4Л1-Е16 УН
8ЕР ΙΌ N0: 7. Последовательность аминокислот 0ΌΚ3 4Л1-Е16 УН
ΑΗΝΑΡΌΥ
8ЕР ΙΌ N0: 8. Последовательность аминокислот 0ΌΚ1 4Л1-Е16 УЬ
8ЕР ΙΌ N0: 9. Последовательность аминокислот 0ΌΚ2 4Л1-Е16 УЬ
8ЕР ΙΌ N0: 10. Последовательность аминокислот 0ΌΚ3 4Л1-Е16 УЬ
ЫЗЗУУТМРРУУ
8ЕР ΙΌ N0: 11. Последовательность предшественника ΙΕ2 человека (зрелый 4-ΙΕ2: остатки 7-150)
МУРМ01_1_8С1 ΑΙ_51_ΑΙ_νΤΝ8 АРТ838ТККТ 01_01_ЕНШ_0 Ι_ΩΜΙΙ_ΝΟΙΝΝ
ΥΚΝΡΚΙ_ΤΡΜΙ_ .
ΤΡΚΕΥΜΡΚΚΑ ТЕ1_КН1_0С1_Е ЕЕ1_КР1_ЕЕУ1_ ΝΙ_ΑΘ8ΚΝΕΗΙ_ ΡΡΡ0Ι-Ι8ΝΙΝ νΐνΐ_ΕΙ_Κ03Ε ТТЕМСЕУАЭЕ ΤΑΤίνΕΕΙΝΡ УУ1ТРСОЗНЗ ΤΙ_Τ
8ЕР ΙΌ N0: 12. Последовательность аминокислот пептидного линкера
СССС8СССС8СССС
8ЕР ΙΌ N0: 13. Последовательность аминокислот пептидного линкера
8ЕР ΙΌ N0: 14. Последовательность аминокислот пептидного линкера
8ЕР ΙΌ N0: 15. Последовательность аминокислот пептидного линкера
8ЕР ΙΌ N0: 16. Последовательность аминокислот пептидного линкера
СС36ССС8СССС8СС
Перечень последовательностей нуклеотидов_165-32ЕА
Перечень последовательностей <110> ФИЛОГЕН эс.пэ.эй
ТРАЧСЕЛ, Эвелин каспар, Мануэла нери, Дарио марлинд, Джессика <120> ИММУНОЦИТОКИНЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА В СОЧЕТАНИИ С ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИМИ АГЕНТАМИ <130> ΝΚ5ΕΡ6553838 <140> РСТ/1В2008/002310 <141> 2008-06-25 <150> 05 60/946,761 <151> 2007-06-28 <160> 20 <170> ПАТЕНТНАЯ ВЕРСИЯ 3.3 <210> 1 <211> 348 <212> ДНК <213> искусственная последовательность <220>
<223> БуптНеттс Бедиепсе: 4А1-Р16 УН Дошатп пис1еоГ1с1е зедиепсе <400> 1
даддгдсадс ТдТТддадТс гдддддаддс ТТддТасадс сгддддддтс сстдадасьс 60
ГссгдГдсад ссгстддаьь сассггсадс сддтатддтд сдадсгдддт ссдссаддст 120
ссадддаадд ддсГддадтд дд-есссадсг агтадтддта дГддТддТад сасатастас 180
дсадасСссд Тдаадддссд дИсассагс Ьссададаса аттссаадаа сасдстдтат 240
с!дсааасда асадссТдад адссдаддас асддссдтаТ атьастдтдс дааадсдсат 300
аагдссггтд астастдддд ссадддаасс стддьсассд ТдТсдада 348
<210> 2 <211> 232 <212> ркт <213> искусственная последовательность <220>
<223> БупгЬеТтс Бедиепсе: 4А1-Р16 УН άοπιβίπ аттпо астс! ведиепсе <400> 2
61 и уа! 61 η Ьеи Ьеи 61 и Бег 61 у 61 у 61 у Ьеи Уа1 61η Рго С1 у 61 у
1 5 10 15
Бег ьеи Агд ьеи 5ег Сув А1 а А1а Бег 61 у РЬе Тпг рНе Бег дгд туг
20 25 30
б!у А1а Бег Тгр Уа1 Агд 61п А1а Рго 61у ьув б!у Ьеи 61 и тгр Уа1
40 45
- 9 018746
Зег А1а 50 11е Зег сТу Зег б!у 61 у Зег тНг туг туг А1а Азр 5ег Уа1
55 60
Ьуз б1у Агд РЬе тНг Не Зег Агд Азр Азп Зег ьуз А5П ТЬг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Нет АЗП зег Ьеи Агд А1 а 61 и Азр тНг А1а Уа1 Туг Туг суз
85 90 95
А1а Ьуз А1а Нт 5 АЗП А1а РЬе Азр Туг тгр 61 у 61 η 61 у ТЬг Ьеи Уа1
100 105 по
ТЬг Уа1 Зег Агд 61 и Уа1 61 η Ьеи Ьеи 61 и Зег 61 у 61 у 61 у Ьеи Уа1
115 120 12 5
61 η Рго 61 у б!у Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег 61 у рбе тНг
130 13 5 140
рКе 5ег Агд туг 61у А1а Зег тгр Уа1 Агд 61п А1а Рго 61 у ьуз С1у
145 150 155 160
Ьеи 61 и Тгр Уа1 5ег А1а 11 е 5ег 61 у Зег 61 у 61 у Зег ТНг туг туг
165 170 175
А1 а Аэр Зег Уа1 Ьуз б1у Агд Рбе тбг 11е Зег Агд А5р А5П Зег ьуз
180 185 190
АЗП тНг Ьеи Туг Ьеи 61п МеГ АЗП Зег Ьеи Агд А1а 61 и Аэр ТНг А1 а
195 200 205
Уа1 туг Туг Суз А1а ьуз А1а НТ 5 Азп А1а РНе Азр Туг Тгр б!у 61 η
210 215 220
б1у тНг ьеи Уа1 тНг уа! Зег Агд
225 230
<210> 3 <211> 327 <212> ДНК <213> искусственная последовательность <22О>
<223> БуптКегтс Бедиепсе: 4А1-Р16 VI. ботатп пис1еоьтс1е Бедиепсе <400>3
Ьсдтстдадс тдастсадда сссСдсГдТд ЬсЬдЬддссТ ьдддасадас адтсаддатс60 асаСдссаад дадасадссь садаадсгат ьаьдсаадсг ддтассадса даадссадда120 саддссссгд гасттдтсаг сгатддтааа аасаассддс сстсадддат сссадассда180 ттстстддст ссадсьсадд ааасасадсь ьссндасса гсасгддддс тсаддсддаа240 датдаддстд астаттастд таастссгст дьгьагасга Гдссдсссдт ддбаТ1сддс300
- 10 018746 ддадддасса адстдассдт сстаддс327 <210>4 <211>109 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <22О>
<223> БупьКеЬтс аедиепсе: 4А1-Р16 уь йотатп аттпо астс! аедиепсе <400> 4
Бег Бег С1и ьеи тКг 61 η Аар рго А1а Уа1 10 Бег Уа1 А1а ьеи С1у 15 61 η
1 5
тНг Уа1 Агд 11е тпг Суз 61 η 61 у Аар Бег ьеи Агд Бег Туг туг А1а
20 25 30
Бег тгр Туг 61 п С1п 1_уа Рго 61 у 61 η А1а РГО уа! ьеи Уа1 11 е туг
35 40 45
61 у |_уа Аап Аап Агд Рго Бег 61 у Не Рго Аар Агд РЬе Бег 61 у Бег
50 55 60
Бег Бег 61 у Α5Π тНг А1а Бег ьеи ТИг 11 е тКг С1у А1а 61 п А1а 61 и
65 70 75 80
Аар 61 и А1а Аар туг туг суа Аап Бег Бег Уа1 туг ТНг меь РГО РГО
85 90 95
уа! Уа1 РЬе 61 у 61 у 61 у ТНг |_уа Ьеи тИг Уа! ьеи С1у
100 105 <210> 5 <211> 5 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> Буптпеттс аедиепсе: 4А1-Р16 УН сок! аттпо астс! эедиепсе <400> 5
Агд туг б1у А1а Бег
5 <210> 6 <211> 17 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> БупьНеЬтс аедиепсе: 4А1-Е16 УН СОК2 аштпо астО аедиепсе <400> 6
- 11 018746
А1а 11 е Зег С1у Бег 61 у б1у Зег тбг Туг туг д1'а дзр Зег Уа1 Ьуз 15 1015 у
<210>7 <211>7 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> БуптНегтс зедиепсе: 4А1-Р16 УН сэкЗ апИпо астО зедиепсе <40 0> 7
А1а н15 Азп А1а Рбе Азр туг
5 <210> 8 <211> И <212> РКТ <213> искусственная последовательность <22О>
<223> ЗупсКеТтс йедиепсе: 4А1-Р16 VI. СОК1 аттпо астс! зечиепсе <400>8
6ΐη б1у Азр Зег Ьей Агд 5ег Туг Туг А1а 5ег
510 <210>9 <211>7 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> ЗупгЬеТтс зедиепсе: 4А1-Р16 VI. сок 2 апл'по астс! зедиепсе <400> 9
С1у Ьуз Азп Азп Агд Рго Зег
5 <210> 10 <211> 11 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> зуптНеТтс зечиепсе: 4А1-Р16 νι. СокЗ апнпо ас1Ч зедиепсе <400> 10
Азп Зег Зег Уа1 туг тЬг мет Рго Рго Уа1 Уа1 15 10
- 12 018746 <210> 11 <211>153 <212> РКТ <213> ното зартепз <400>11
мет 1 туг Агд мет 61п 5 Ьеи Ьеи Зег Суз 11 е 10 А1 а Ьеи Зег ьеи А1а 15 ьеи
Уа1 тКг АЗП Зег А1а РГО тЬг Зег Зег Зег ТЬг ьуз ьуз тЬг 61 π ьеи
20 25 30
61 П ьеи 61 и НТ 5 Ьеи ьеи ьеи АЗр ьеи 61 п Мет 11е ьеи АЗП 61 у И е
35 40 45
А5П Азп туг ьуз АЗП РГО Ьуз Ьеи ткг Агд мет ьеи тЬг Рке ьуз РЬе
50 55 60
Туг мет РГО ьуз ьуз А1а ТЬг 61 и ьеи ьуз Н15 Ьеи 61 п Суз ьеи 61 и
65 70 75 80
б!и 61 и Ьеи ьуз Рго Ьеи С1и 61 и Уа1 ьеи Азп Ьеи А1а 61 п 5ег Ьуз
85 90 95
АЗП РЬе нт 5 Ьеи Агд РГО Агд АЗр Ьеи 11е Зег Азп 11е Азп Уа1 11е
100 105 но
Уа1 ьеи 61 и Ьеи Ьуз 61 у Зег 61 и ТЬг тНг РЬе мет Суз 61 и Туг А1а
115 120 12 5
АЗр <51 и тЬг А1а ТЬг 11 е Уа1 61 и РЬе ьеи Азп Агд тгр 11е ТЬг рЬе
130 135 140
Су 5 <51 п Зег 11е Не Зег тЬг Ьеи ТЬг
145 150 <210> 12' ι <211>14 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> зуптЬеттс зециепсе: РерТтйе 1тпкег апппо астй зециепсе <400>12 б1у <51 у С1у б!у Зег 61у 61у <51 у С1у Зег 61 у 61у 61у 61у
5 10·.
<210>13 <211>15 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> зуптЬегтс зедиепсе: РерТтйе 1тпкег апппо ас1с! зедиепсе
- 13 018746 <400>13
61у 61 у С1у 61 у Бег С1у С1у С1у С1у Бег С1у 61 у С1у 61 у Бег 15 1015 <210> 14 .' <211>15 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> БупТйеттс ведиепсе: РерТ1с1е Ипкег аттпо астс! ведиепсе <400>14
5ег 5ег 5ег 5ег 61 у Бег Бег Бег Бег б1у Бег Бег Бег Бег б1у 15 1015 <210>15 <211>15 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <22О>
<223> БупгЬеСтс ведиепсе: РерГтйе Ипкег аттпо астб 5едиепсе <400>15
С1у Бег С1у Бег А1а б1у Бег б1у Бег А1а б!у Бег б!у Бег А1а 15 1015 <210> 16 <211>15 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <220>
<223> Буп^НеТтс ведиепсе: Рер11<1е Илкег аштпо ас1д ведиепсе <400>16 у 61 у Бег 61 у 01у С1у 61 у Бег б1у б1у б1у б!у Бег б!у С1у
1015 <210>17 <211>5 <212> РКТ <213> искусственная последовательность <22О>
<223> БуптЬеГтс ведиепсе: ьтпкег ιηοΐίί <400>17 б1у б!у С1у С1у Бег <210> 18 <211>5 <212> РКТ <213> искусственная последовательность
- 14 018746 <22О>
<223> БупгЬетдс зедиепсе: ьтпкег тогтЕ <400>18
Бег Бег Бег Бег С1у <210>19 <211>5 <212> ΡΚΤ <213> искусственная последовательность <220>
<223> 5упГНе11с вециепсе: Гтпкег πιοΐτί <400>19 у Бег 61 у Бег А1а <210> 20 <211>5 <212> ΡΚΤ <213> искусственная последовательность <220>
<223> БупгЬеТяс ведиепсе: ьтпкег πιοΐτί <400> 20
С1у С1у Бег б1у б1у

Claims (23)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ лечения рака у нуждающегося в этом индивидуума, включающий введение комбинации противоопухолевого соединения и антитела, которое специфично связывается с тенасцином-С, конъюгированного с интерлейкином 2 (1Ь2).
2. Способ согласно п.1, отличающийся тем, что указанное антитело специфично связывается с большой изоформой тенасцина-С.
3. Способ согласно п.2, отличающийся тем, что указанное антитело специфично связывается с доменом А1 большой изоформы тенасцина-С.
4. Способ согласно п.3, отличающийся тем, что указанное антитело конкурирует за связывание с большой изоформой тенасцина-С с антителом, включающим домен 4А1-Б16 УН, имеющий последовательность 8ЕО ΙΌ N0: 2, и домен 4А1-Е16 УЪ, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 4.
5. Способ согласно п.4, отличающийся тем, что указанное антитело включает антигенсвязывающий сайт, содержащий домен УН и домен УЪ, причем указанный домен УН включает ί.ΌΒ1 УН, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 5, СЭК2 УН, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 6, и СЭК3 УН, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 7; и указанный домен УЪ включает СОК! УЪ, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 8, СЭК2 УЪ, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 9, и СЭК3 УЪ, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 10.
6. Способ согласно п.5, отличающийся тем, что указанное антитело включает антигенсвязывающий сайт, содержащий домен 4А1-Е16 УН, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 2, и домен 4А1-Е16 УЪ, имеющий последовательность 8Е0 ΙΌ N0: 4.
7. Способ согласно любому из пп.1-6, отличающийся тем, что указанное противоопухолевое соединение представляет собой агент, повреждающий ДНК.
8. Способ согласно п.7, отличающийся тем, что указанное противоопухолевое соединение представляет собой доксорубицин.
9. Способ согласно любому из пп.1-6, отличающийся тем, что указанное противоопухолевое соединение представляет собой ингибитор сборки митотического веретена.
10. Способ согласно п.9, отличающийся тем, что указанное противоопухолевое соединение представляет собой паклитаксел.
11. Способ согласно любому из пп.1-10, отличающийся тем, что рак представляет собой рак груди.
12. Применение комбинации противоопухолевого соединения и антитела, которое специфично связывается с тенасцином-С, конъюгированного с ГБ2 в производстве лекарственного средства для лечения рака.
13. Применение согласно п.12, отличающееся тем, что указанное антитело специфично связывается с большой изоформой тенасцина-С.
14. Применение согласно п.13, отличающееся тем, что указанное антитело специфично связывается
15. Применение согласно п.14, отличающееся тем, что указанное антитело конкурирует за связывание с большой изоформой тенасцина-С с антителом, включающим домен 4А1-Г16 УН, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 2, и домен 4А1-Г16 УЬ, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 4.
- 15 018746 с А1 доменом большой изоформы тенасцина-С.
16. Применение согласно п.15, отличающееся тем, что указанное антитело включает антигенсвязывающий сайт, содержащий домен УН и домен УЬ, причем домен УН включает СЭК1 УН, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 5, С’1)К2 УН, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 6, и С’1)К3 УН, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 7; и домен УЬ включает СЭК1 УЬ, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 8, С’1)К2 УЬ, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 9, и С’1)К3 УЬ, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 10.
17. Применение согласно п.16, отличающееся тем, что указанное антитело включает антигенсвязывающий сайт, содержащий домен 4А1-Г16 УН, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 2, и домен 4А1-Г16 УЬ, имеющий последовательность 8ЕР И) N0: 4.
18. Применение согласно любому из пп.12-17, отличающееся тем, что указанное противоопухолевое соединение представляет собой агент, повреждающий ДНК.
19. Применение согласно п.18, отличающееся тем, что указанное противоопухолевое соединение представляет собой доксорубицин.
20. Применение согласно любому из пп.12-17, отличающееся тем, что указанное противоопухолевое соединение представляет собой ингибитор сборки митотического веретена.
21. Применение согласно п.20, отличающееся тем, что указанное противоопухолевое соединение представляет собой паклитаксел.
22. Применение согласно любому из пп.12-21, отличающееся тем, что указанный рак представляет собой рак груди.
23. Набор для лечения рака в соответствии со способом по любому из пп.1-11, включающий противоопухолевое соединение и антитело, которое специфично связывается с тенасцином-С, конъюгированное с П.2.
Через 8 дней после введения доксорубицина, биораспределение Η 6-11.2 через 24 часа
EA200971103A 2007-06-28 2008-06-25 Иммуноцитокины для лечения рака в сочетании с химиотерапевтическими агентами EA018746B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US94676107P 2007-06-28 2007-06-28
PCT/IB2008/002310 WO2009001219A2 (en) 2007-06-28 2008-06-25 Immunocytokines for cancer treatment in combination with chemotherapeutic agents

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200971103A1 EA200971103A1 (ru) 2010-08-30
EA018746B1 true EA018746B1 (ru) 2013-10-30

Family

ID=40029217

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200971103A EA018746B1 (ru) 2007-06-28 2008-06-25 Иммуноцитокины для лечения рака в сочетании с химиотерапевтическими агентами

Country Status (11)

Country Link
US (3) US20100215615A1 (ru)
EP (1) EP2162156A2 (ru)
JP (1) JP2010531349A (ru)
KR (1) KR20100040884A (ru)
CN (1) CN101687049B (ru)
AU (1) AU2008269441B2 (ru)
BR (1) BRPI0812924A2 (ru)
CA (1) CA2692263C (ru)
EA (1) EA018746B1 (ru)
MX (1) MX2009013752A (ru)
WO (1) WO2009001219A2 (ru)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011001276A1 (en) * 2009-06-30 2011-01-06 Philogen S.P.A. Immunocytokines in combination with anti-erbb antibodies for the treatment of cancer
JP6241912B2 (ja) * 2012-04-27 2017-12-06 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構 核医学診断装置の制御方法、核医学診断装置、および診断剤キット
CN102977214B (zh) * 2012-09-29 2014-03-12 重庆原伦生物科技有限公司 用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（mrsa）疫苗的重组蛋白hf2及制备方法和应用
EP2988784A1 (en) 2013-04-25 2016-03-02 Philogen S.p.A. Antibody-drug conjugates
JP2020535145A (ja) * 2017-09-25 2020-12-03 ディンフー バイオターゲット カンパニー リミテッド 癌治療のための方法及び組成物

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003093478A1 (en) * 2002-04-30 2003-11-13 Molmed Spa Immunoconjugates for the treatment of tumours
WO2006050834A2 (en) * 2004-11-09 2006-05-18 Philogen Spa Antibodies against tenascin-c

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2272644C2 (ru) * 2000-06-29 2006-03-27 Мерк Патент Гмбх Усиление иммунной реакции, медиатором которой является слитый протеин антитело-цитокин, при помощи комбинированного лечения агентами, увеличивающими поглощение иммуноцитокина
WO2011001276A1 (en) * 2009-06-30 2011-01-06 Philogen S.P.A. Immunocytokines in combination with anti-erbb antibodies for the treatment of cancer

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003093478A1 (en) * 2002-04-30 2003-11-13 Molmed Spa Immunoconjugates for the treatment of tumours
WO2006050834A2 (en) * 2004-11-09 2006-05-18 Philogen Spa Antibodies against tenascin-c

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KHAWLI L.A. ET AL.: "NHS76/PEP2, a fully human vasopermeability-enhancing agent to increase the uptake and efficacy of cancer chemotherapy". CLINICAL CANCER RESEARCH, vol. 11, no. 8, 2005, pages 3084-3093, XP003016188, ISSN: 1078-0432, abstract, page 3084, figures 6, 7 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2162156A2 (en) 2010-03-17
US20130108581A1 (en) 2013-05-02
EA200971103A1 (ru) 2010-08-30
US20100215615A1 (en) 2010-08-26
AU2008269441B2 (en) 2013-10-10
WO2009001219A2 (en) 2008-12-31
MX2009013752A (es) 2010-02-01
JP2010531349A (ja) 2010-09-24
CN101687049A (zh) 2010-03-31
CN101687049B (zh) 2013-01-23
AU2008269441A1 (en) 2008-12-31
KR20100040884A (ko) 2010-04-21
WO2009001219A9 (en) 2010-02-11
CA2692263C (en) 2015-11-24
BRPI0812924A2 (pt) 2014-12-09
US20150010498A1 (en) 2015-01-08
WO2009001219A3 (en) 2009-09-03
CA2692263A1 (en) 2008-12-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7217819B2 (en) Cytotoxic agents comprising taxanes and their therapeutic use
US20110318302A1 (en) Cancer Treatment
ES2694784T3 (es) Combinaciones antitumorales que contienen anticuerpos que reconocen específicamente CD38 y bortezomib
US20140341844A1 (en) Immunocytokines in combination with anti-erbb antibodies for the treatment of cancer
CA2747154C (en) Immunocytokines for tumour therapy with chemotherapeutic agents
CN102264385A (zh) 含特异性识别cd38的抗体和苯丙氨酸氮芥的抗肿瘤组合
EA018746B1 (ru) Иммуноцитокины для лечения рака в сочетании с химиотерапевтическими агентами
AU2022302907A1 (en) Antibody-drug conjugates comprising humanized antibodies targeting urokinase type plasminogen activator receptor associated protein (uparap)
WO2024141575A1 (en) Antibody-drug conjugates targeting uparap comprising exatecan derivatives

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU