EA017613B1 - Универсальная вакцина из опухолевых клеток для противораковой терапии и профилактического использования - Google Patents
Универсальная вакцина из опухолевых клеток для противораковой терапии и профилактического использования Download PDFInfo
- Publication number
- EA017613B1 EA017613B1 EA200970607A EA200970607A EA017613B1 EA 017613 B1 EA017613 B1 EA 017613B1 EA 200970607 A EA200970607 A EA 200970607A EA 200970607 A EA200970607 A EA 200970607A EA 017613 B1 EA017613 B1 EA 017613B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- cancer
- allogeneic
- tumor
- cells
- tumor cells
- Prior art date
Links
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 title description 3
- 229940030325 tumor cell vaccine Drugs 0.000 title description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 title 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 162
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims abstract description 129
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims abstract description 116
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 98
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 74
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 74
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 74
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 70
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 67
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims abstract description 61
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims abstract description 60
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 51
- 230000000762 glandular Effects 0.000 claims abstract description 46
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims abstract description 46
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims abstract description 45
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 claims abstract description 43
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 claims abstract description 43
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 41
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims abstract description 38
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 33
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims abstract description 32
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims abstract description 26
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 claims abstract description 20
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 44
- 201000007455 central nervous system cancer Diseases 0.000 claims description 28
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 26
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 claims description 20
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 claims description 20
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 claims description 20
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 17
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 15
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 13
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 claims description 12
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 11
- 101150023114 RNA1 gene Proteins 0.000 claims description 10
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 claims description 5
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 claims description 5
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 claims description 3
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 claims description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 claims 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 201000003914 endometrial carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 208000013077 thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 abstract description 29
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 abstract description 13
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 abstract description 5
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 abstract description 4
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 abstract description 4
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 abstract description 4
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000006028 immune-suppresssive effect Effects 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 45
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 44
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 34
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 33
- 230000004044 response Effects 0.000 description 29
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 22
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 20
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 17
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 14
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 14
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 14
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 14
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 13
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 13
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 13
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 12
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 12
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 11
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 11
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 11
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 11
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 11
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 10
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 10
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 10
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 10
- 235000009421 Myristica fragrans Nutrition 0.000 description 9
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 9
- 239000001115 mace Substances 0.000 description 9
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 9
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 9
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 8
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 8
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 8
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 8
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 8
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 7
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 7
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 7
- 108091027757 Deoxyribozyme Proteins 0.000 description 6
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 6
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 5
- 102100031940 Epithelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 5
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 5
- 210000004882 non-tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 4
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 4
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 230000002434 immunopotentiative effect Effects 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 230000000869 mutational effect Effects 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 4
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000012552 review Methods 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 3
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 3
- 206010007953 Central nervous system lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 3
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 3
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 3
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 3
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 3
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 3
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 3
- 108020005543 Satellite RNA Proteins 0.000 description 3
- 102100033663 Transforming growth factor beta receptor type 3 Human genes 0.000 description 3
- 241000726445 Viroids Species 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940030664 allogeneic tumor cell vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 3
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 3
- 108010079292 betaglycan Proteins 0.000 description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 3
- 229940030156 cell vaccine Drugs 0.000 description 3
- 210000002230 centromere Anatomy 0.000 description 3
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 3
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 3
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 3
- 208000016800 primary central nervous system lymphoma Diseases 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 230000017105 transposition Effects 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 102100039496 Choline transporter-like protein 4 Human genes 0.000 description 2
- 108010055325 EphB3 Receptor Proteins 0.000 description 2
- 102100031982 Ephrin type-B receptor 3 Human genes 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 108010034791 Heterochromatin Proteins 0.000 description 2
- 101000889282 Homo sapiens Choline transporter-like protein 4 Proteins 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 101710203526 Integrase Proteins 0.000 description 2
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 2
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 2
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 2
- 241000251131 Sphyrna Species 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 2
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 2
- 108010078814 Tumor Suppressor Protein p53 Proteins 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 2
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 2
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- -1 for example Diseases 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 210000004458 heterochromatin Anatomy 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 108020004084 membrane receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 2
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 2
- 210000003739 neck Anatomy 0.000 description 2
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 2
- 108091008819 oncoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000027450 oncoproteins Human genes 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000004713 phosphodiesters Chemical group 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 230000033300 receptor internalization Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 2
- 102000035025 signaling receptors Human genes 0.000 description 2
- 108091005475 signaling receptors Proteins 0.000 description 2
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 2
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 208000009594 Animal Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 108020004491 Antisense DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101150114515 CTBS gene Proteins 0.000 description 1
- 102100029968 Calreticulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000549 Calreticulin Proteins 0.000 description 1
- 108090000209 Carbonic anhydrases Proteins 0.000 description 1
- 102000003846 Carbonic anhydrases Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- 108010060385 Cyclin B1 Proteins 0.000 description 1
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N DDT Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(C(Cl)(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102100030013 Endoribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 101710199605 Endoribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 101100395869 Escherichia coli sta3 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010022894 Euchromatin Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 102100032340 G2/mitotic-specific cyclin-B1 Human genes 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 101710178376 Heat shock 70 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 108020005196 Mitochondrial DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000015728 Mucins Human genes 0.000 description 1
- 108010063954 Mucins Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 102000048850 Neoplasm Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700019961 Neoplasm Genes Proteins 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108020005089 Plant RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 101800001821 Precursor of protein E3/E2 Proteins 0.000 description 1
- 102000006478 Protein Phosphatase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108010058956 Protein Phosphatase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000009516 Protein Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010009341 Protein Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 102000000574 RNA-Induced Silencing Complex Human genes 0.000 description 1
- 108010016790 RNA-Induced Silencing Complex Proteins 0.000 description 1
- 102100026436 Regulator of MON1-CCZ1 complex Human genes 0.000 description 1
- 101710180672 Regulator of MON1-CCZ1 complex Proteins 0.000 description 1
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 1
- 206010038910 Retinitis Diseases 0.000 description 1
- 108090000621 Ribonuclease P Proteins 0.000 description 1
- 108090000638 Ribonuclease R Proteins 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102100020814 Sequestosome-1 Human genes 0.000 description 1
- 101710113029 Serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 101710183280 Topoisomerase Proteins 0.000 description 1
- 108030003004 Triphosphatases Proteins 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- SIIZPVYVXNXXQG-KGXOGWRBSA-N [(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-4-[[(3s,4r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-3-hydroxyoxolan-2-yl]methyl [(2r,4r,5r)-2-(6-aminopurin-9-yl)-4-hydroxy-5-(phosphonooxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OC2[C@@H](O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@H]2O)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)[C@@H](O)[C@H]1OP(O)(=O)OCC([C@@H](O)[C@H]1O)OC1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 SIIZPVYVXNXXQG-KGXOGWRBSA-N 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002679 ablation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 description 1
- 239000003816 antisense DNA Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 230000008436 biogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 235000021217 cabbage soup Nutrition 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 230000030570 cellular localization Effects 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- 208000025997 central nervous system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 1
- 230000019113 chromatin silencing Effects 0.000 description 1
- 108091006090 chromatin-associated proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 238000002052 colonoscopy Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 1
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 230000007783 downstream signaling Effects 0.000 description 1
- 208000023965 endometrium neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000002616 endonucleolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000000632 euchromatin Anatomy 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- 238000012226 gene silencing method Methods 0.000 description 1
- 231100000722 genetic damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 108010014723 immunosuppressive acidic protein Proteins 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000010189 intracellular transport Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000006385 lung benign neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000009607 mammography Methods 0.000 description 1
- 238000010339 medical test Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000021121 meiosis Effects 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 108091007426 microRNA precursor Proteins 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 150000002780 morpholines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 229940051875 mucins Drugs 0.000 description 1
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 101800002664 p62 Proteins 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 210000002824 peroxisome Anatomy 0.000 description 1
- 238000009522 phase III clinical trial Methods 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000014493 regulation of gene expression Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011255 standard chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 208000013076 thyroid tumor Diseases 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 208000024719 uterine cervix neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPRKINNVBONSF-UHFFFAOYSA-M zinc;dioxido(oxo)phosphanium Chemical compound [Zn+2].[O-][P+]([O-])=O CZPRKINNVBONSF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5152—Tumor cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K2039/55527—Interleukins
- A61K2039/55533—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к композиции для стимуляции иммунного ответа у больных различными формами рака, включая больных аденокарциномой (аденокарцинома, например, толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозный рак, меланома, рак центральной нервной системы и лимфома), содержащей комбинацию аллогенных опухолевых клеток и/или опухолевых стволовых клеток, которые выбраны на основе секретирования по меньшей мере одного иммуносупрессирующего средства, например TGF-β, и которые являются генетически модифицированными для того, чтобы уменьшить или ингибировать экспрессию указанного по меньшей мере одного иммуносупрессирующего средства, например TGF-β, и которые совместно экспрессируют спектр связанных с опухолью антигенов, представительных для карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы. Изобретение также относится к композиции, содержащей указанную комбинацию аллогенных опухолевых клеток и/или опухолевых стволовых клеток и аллогенную клетку, экспрессирующую цитокин или антитело, которое ингибирует иммуносупрессирующие молекулы.
Description
По заявке на данный патент испрашивается приоритет предварительной заявки США № 60/876222, поданной 20 декабря 2006 г., полное содержание которой приведено в описании посредством ссылки.
Уровень техники изобретения Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение в целом относится к противораковой терапии, а более конкретно к противоопухолевым вакцинам.
Описание предшествующего уровня техники
Вакцины представляют собой инъекции веществ, разработанных для активации иммунной системы больного на атаку специфической мишени, такой как раковая клетка. В течение 30 последних лет ученые проводят эксперименты по использованию опухолевых клеток в качестве вакцин. Теория проста: вакцинируя больных раком опухолевыми клетками, вакцина будет индуцировать иммунный ответ, разрушающий опухолевые клетки во всем организме. К несчастью, главный барьер, называемый иммуносупрессия, ограничивает эффективность этой технологии. Иммуносупрессия происходит вследствие продукции большинством опухолевых клеток молекул, которые обеспечивают невидимость клеток для иммунной системы, препятствуя развитию клинически эффективных иммунных ответов.
Запатентованная технология ИоуаКх помогает преодолеть иммуносупрессивный барьер. Авторы настоящего изобретения обнаружили, что молекула, называемая трансформирующий фактор роста бета (ТСР-β), является одной из наиболее мощных иммуносупрессивных молекул, продуцируемых опухолевыми клетками. Предлагаемая технология блокирует иммуносупрессивные эффекты ТСР-β в вакцине, делая вакцину более эффективной.
Ученые ΝοναΚ,Χ впервые в мире продемонстрировали, что новый метод блокирования ТСР-β сделал вакцины из опухолевых клеток более эффективными. В исследовании, опубликованном в престижном научном журнале Ргоееебшдв οί Изе Ναΐίοηαΐ Леабсшу οί Заеисев, ими было продемонстрировано на животных моделях, что технология могла полностью уничтожить быстро растущие опухоли. Позже это исследование было продолжено у пациентов с глиомой (раком головного мозга) и раком легких. В другой работе научные сотрудники ΝοναΡ.χ также показали, что инокуляция аллогенных опухолевых клеток больным колоректальным раком вызывала иммунные ответы, распознающие и нацелено действующие на опухолевые клетки пациента. Однако по причине возникновения иммуносупрессивных эффектов в клетках вакцины терапевтические эффекты не наступали.
Сущность изобретения
Изобретение относится к композиции для стимуляции иммунного ответа у больных аденокарциномой (аденокарцинома толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также опухоли центральной нервной системы, меланома, лимфома), сквамозным или другими формами рака и включает комбинацию аллогенных опухолевых клеток и/или стволовых опухолевых клеток, выбранных на основании секретирования по меньшей мере одного иммуносупрессивного средства, например ТСР-β, и генетически модифицированных с целью уменьшения или ингибирования экспрессии по меньшей мере одного указанного иммуносупрессивного средства, например ТСР-β. и совместной экспрессии спектр опухолеассоциированных антигенов, характерных для карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы и другой железистой ткани, а также для опухолей центральной нервной системы, меланомы, лимфомы, и физиологически приемлемого носителя. Изобретение также относится к композиции, содержащей указанную комбинацию аллогенных опухолевых клеток и аллогенную клетку, экспрессирующую цитокин или экспрессирующую антитела, которые блокируют специфические молекулы. Кроме того, изобретение относится к способу стимуляции иммунного ответа больных раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также больных с опухолями центральной нервной системы, больных меланомой, лимфомой, путем введения больным указанной комбинации аллогенных опухолевых клеток, которая стимулирует иммунный ответ к аутологичным опухолевым клеткам больного. Способ дополнительно может включать аллогенную клетку, такую как фибробласт, генетически модифицированную для экспрессии цитокина или экспрессирующую антитело, которое блокирует специфические молекулы.
- 1 017613
Подробное описание предпочтительного варианта осуществления
Если не указано иного, технические и научные термины, используемые в настоящем описании, имеют то же значение, которое понятно любому специалисту в данной области техники, к которой относится изобретение. См., например, 8шд1е1оп Р. апб ЗашкЬшу Ό., ИШюпагу οί МютоЬю1оду апб Мо1еси1аг Вю1оду 3гб еб., 1. ХУбеу & 8оп5. Сысйейет, Иете Уотк, 2001.
Нестандартный термин содержащий является синонимом включающий, отличающийся тем, что или характеризующийся тем, что и является включающее/содержащей формой или открытой и не исключает другие, не перечисленные элементы или стадии способа.
Нестандартная фраза состоящий из исключает любые элемент, стадию или составную часть, не перечисленные в формуле, но не исключает дополнительные компоненты или стадии, которые не имеют отношения к изобретению, например включения, обычно с ним связанные.
Нестандартная фраза по существу, состоящий из ограничивает объем пункта формулы конкретно указанными материалами или стадиями, и теми, которые существенно не влияют на основные и новые признаки заявленного изобретения.
Изобретение относится к композициям и способам стимуляции иммунного ответа у больного аденокарциномой или другими видами рака, используя аллогенные опухолевые клетки и/или стволовые опухолевые клетки. Композиции и способы по изобретению особенно эффективны для стимуляции иммунного ответа у больного, например, раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой. Аллогенные опухолевые клетки и/или стволовые опухолевые клетки могут быть генетически модифицированы для усиления иммунного ответа. Аллогенная вакцина может дополнительно включать аллогенную клетку, генетически модифицированную для экспрессии цитокина или экспрессии антитела, которые блокируют другие иммунные ингибирующие молекулы. Изобретение также относится к способам стимуляции иммунного ответа у больных различными типами рака, в том числе аденокарциномой, включая больных, например, раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы, и лимфомой, путем введения одной или нескольких аллогенных опухолевых клеток, и/или стволовых опухолевых клеток, где аллогенная опухолевая клетка стимулирует иммунный ответ к аутологичной опухолевой клетке больного.
Способы по изобретению имеют преимущество, заключающееся в применении одной или нескольких аллогенных опухолевых клеток и/или стволовых опухолевых клеток, экспрессирующих антигены, экспрессирующиеся у больного, аденокарциномой, например аденокарциномой толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой, таким образом, стимулируя иммунный ответ к антигенам. Использование аллогенных опухолевых клеток и/или стволовых опухолевых клеток обеспечивает универсальный источник антигенов, которые могут быть введены различным больным по сравнению с использованием аутологичных опухолевых клеток, которые следует выделять у каждого конкретного больного. Способы по изобретению имеют преимущество, заключающееся в использовании аллогенных клеток и/или стволовых опухолевых клеток в качестве противораковой вакцины и стимуляции иммунного ответа против аутологичных опухолевых клеток больного раком.
Как используется в настоящем описании, аутологичная клетка относится к клетке, полученной у конкретного индивидуума. В способах по изобретению конкретный индивидуум, у которого получают аутологичную клетку, относится к индивидууму, которому вводят аллогенную вакцину по изобретению. Как используется в настоящем описании, аутологичная опухолевая клетка относится к клетке, полученной из опухоли этого индивидуума.
Как используется в настоящем описании, аллогенная клетка и/или опухолевая стволовая клетка относится к клетке, которую получают не у индивидуума, которому вводят вакцину по изобретению, т. е. к клетке с генетической структурой, отличной от генетической структуры индивидуума. Как правило, аллогенную клетку и/или опухолевые стволовые клетки получают у того же самого вида, что и индивидуум, которому вводится вакцина по изобретению. В частности, аллогенная клетка человека может использоваться для стимуляции иммунного ответа у человека, больного раком. Как используется в настоящем описании, аллогенная опухолевая клетка и/или опухолевые стволовые клетки относится к опухолевой клетке, которую получают не у индивидуума, которому вводят аллогенную клетку. Аллогенная опухолевая клетка и/или опухолевые стволовые клетки экспрессируют по меньшей мере один опухолевый антиген, который является общим с антигеном аутологичной опухолевой клетки пациента. Как правило, аллогенную клетку и/или опухолевую стволовую клетку получают из того же или другого типа опухоли, лечение которой осуществляют у пациента. Например, как описано в настоящем документе, пациенту, получающему противораковое лечение в отношении, например, рака толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки,
- 2 017613 яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, также как от сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы, можно вводить аллогенную опухолевую клетку, полученную, например, из опухоли толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы, и лимфомы, имеющего общие антигены, или опухолевые стволовые клетки, выделенные из одной опухоли и стимулированной на дифференцировку в различные типы опухолей, благодаря использованию факторов стволовых клеток и кондиционированной среды опухолей, подобных опухоли-мишени. Использование последней процедуры может привести к получению специальной вакцины для индивидуума.
Несмотря на то что аллогенная опухолевая клетка и/или опухолевая стволовая клетка могут быть выделены, например, из опухоли толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы, в способах по изобретению также могут использоваться аллогенные клетки и/или опухолевые стволовые клетки, экспрессирующие один или несколько опухолевых антигенов. Например, аллогенная клетка и/или опухолевая стволовая клетка могут быть изменены или сконструированы таким образом, чтобы экспрессировать один или несколько опухолевых антигенов, специфичных для конкретной опухоли. Например, для лечения карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы, клетка может быть генетически сконструирована так, чтобы экспрессировать опухолевые антигены, экспрессируемые, например, соответственно в карциноме толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозном раке, меланоме, раке центральной нервной системы и лимфоме. Характерные опухолевые антигены, подходящие для аллогенной опухолевой клетки, используемой для лечения, например, карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы, и лимфомы, включают, например, карцинооэмбриональные антигены (СЕА), МиС-1, Ер-САМ, НЕК2/пеи, р53, и МАСЕ, включая 1, 2, 3, 4, 6 и 12. Другие опухолевые антигены также могут быть экспрессированы в аллогенной клетке и использоваться в аллогенной вакцине по изобретению. Дополнительные опухолевые антигены могут быть идентифицированы с использованием хорошо известных способов скрининга опухолевых антигенов, используя, например, опухолеспецифические антитела. Дополнительные опухолевые антигены могут быть клонированы в аллогенной клетке и экспрессированы. Способы генной инженерии клетки для экспрессии конкретного гена хорошо известны специалистам в данной области (см. 8атЬгоок е! а1., Мо1еси1аг С1ойпд: А ЬаЬога!огу Мапиа1, 2пб еб., Со1б 8рпп§ НагЬог Ргезз, Р1аш\зе\\·. Ν.Υ. (1989); Аи8иЬе1 е! а1. Сиггей РгоЮсоЕ ш Мо1еси1аг Вю1оду (8ирр1етей 47), 1ойп \УПеу & 8опз, Νονν Υо^к (1999)).
Кроме, например, рака толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы, вакцина по изобретению может использоваться для лечения больных другими типами рака. Поскольку многие аденокарциномы имеют общие антигены, как более подробно описано ниже, вакцина по изобретению, используемая для лечения одного типа аденокарциномы, может также использоваться для лечения других типов аденокарцином, если опухоли имеют антигены, общие с аллогенной опухолевой клеткой вакцины по изобретению. Подобным образом, вакцина по изобретению может быть эффективна для лечения других типов опухолей, имеющих общие антигены. Как использовано в настоящем описании, больной аденокарциномой относится к индивидууму с признаками или симптомами аденокарциномы. Аденокарцинома представляет собой злокачественное новообразование эпителиальных клеток железистого или железистоподобного типа. Характерные аденокарциномы включают аденокарциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или других железистых тканей.
Как используется в настоящем описании, больной раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы, и лимфомой относится к индивидууму с признаками или симптомами рака толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы. Существует большое число различных используемых медицинских анализов для выявления рака и для них используют различные способы распознавания и определения локализации рака. Некоторые методики обнаружения рака, такие как маммография и колоноскопия, используются для выявления отдельных типов рака. Другие являются более общи
- 3 017613 ми и способны выявить ряд различных типов рака. Специалисты в данной области могут легко определить, имеется ли у индивида признаки или симптомы рака толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы.
Как используется в настоящем описании, иммунный ответ относится к измеряемому ответу на антиген, опосредованный одной или более клетками иммунной системы. Иммунный ответ может включать в себя гуморальный или клеточный ответ. Как используется в настоящем описании, иммунный ответ на антиген аутологичной опухолевой клетки относится к измеряемому иммунному ответу по меньшей мере на один антиген, экспрессируемый на поверхности аутологичной опухолевой клетки. Подобным образом, иммунный ответ на аутологичную опухолевую клетку относится к обнаруживаемому иммунному ответу, который является специфичным в отношении аутологичной опухолевой клетки. Как раскрыто в настоящем описании, использование аллогенной вакцины по изобретению у больных карциномой толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой приводит к обнаруживаемому иммунному ответу на аутологичные опухолевые клетки.
Как используется в настоящем описании, ответ цитотоксического Т-лимфоцита или ответ СТЬ относится к иммунному ответу, при котором активируются цитотоксические Т-клетки. Ответ СТЬ включает в себя активацию предшественников СТЬ, а также дифференцированных СТЬ. Например, как раскрыто в настоящем описании, введение вакцины, содержащей аллогенные клетки карциномы, повышает концентрацию предшественников СТЬ, специфичных в отношении опухолевых антигенов аллогенных клеток. Вакцина стимулирует также концентрацию СТЬ в отношении аутологичных опухолевых клеток.
Как используется в настоящем описании, ответ СТЬ подразумевает включение любого обнаруживаемого ответа СТЬ в отношении определенного антигена. Предпочтительно ответ СТЬ включает по меньшей мере один СТЬ, который является специфичным по отношению к антигену, экспрессируемому на поверхности аутологичной опухолевой клетки. Уровень ответа СТЬ может изменяться от умеренного ответа до промежуточного ответа, а также выраженного ответа СТЬ. Даже умеренный ответ может быть эффективным для лечения раковых больных, если такое лечение стимулирует иммунный ответ против аутологичных опухолевых клеток пациента.
Как раскрыто в настоящем описании, вакцина из аллогенных опухолевых клеток повышает концентрацию предшественников СТЬ у пациента, которому вводили вакцину. Аллогенная вакцина стимулирует 5-10-кратное увеличение концентрации предшественников СТЬ. Понятно, что любое усиление ответа СТЬ считается стимулированным ответом СТЬ, так как ответ СТЬ направлен против по меньшей мере одного антигена, связанного с аутологичной опухолью пациента.
Как используется в настоящем описании, экзогенный цитокин относится к цитокину, который вводят индивидууму. Например, экзогенный цитокин может быть введен в виде композиции цитокинов, или цитокин может быть введен в виде клетки, которая экспрессирует цитокин.
Вакцина из аллогенных опухолевых клеток по изобретению может быть введена с аллогенной клеткой, экспрессирующей цитокин. Цитокин-экспрессирующая аллогенная клетка может представлять собой неопухолевую клетку, такую как фибробласт, или опухолевую клетку. Например, как раскрыто в настоящем описании, цитокин-экспрессирующая аллогенная клетка фибробласт, генетически модифицированная на экспрессию 1Ь-2, вводится как компонент вакцины аллогенных опухолевых клеток. Цитокины, используемые в способах по изобретению, являются цитокинами, которые усиливают иммунный ответ в отношении опухолевого антигена. Характерные цитокины включают в себя интерлейкин-1 (1Ь-1), 1Ь-2, 1Ь-3, 1Ь-4, 1Ь-5, 1Ь-6, 1Ь-12, гамма-интерферон и гранулоцитарный макрофагальноколониестимулирующий фактор (СМ-С8Е). При желании, цитокин может быть экспрессирован в различных функциональных формах при условии, что цитокин сохраняет активность усиливать иммунный ответ. Например, цитокин, такой как СМ-С8Р, может функционировать в растворимой или мембраносвязанной форме. Особенно эффективными для использования цитокинами в вакцине из аллогенных опухолевых клеток по изобретению являются 1Ь-2 и СМ-С8Р. Способы модифицирования клеток для экспрессии цитокина с целью стимуляции иммунного ответа хорошо известны специалистам данной области. Характерным экспрессирующимся антителом в противоопухолевой вакцине или вакцине из стволовых опухолевых клеток представляет собой антитело, которое ингибирует РСЕ2 или СТЬА4. Эти молекулы могут быть экспрессированы в рекомбинантных клеточных вакцинах или различных группах аллогенных клеток, таких как аллогенный фибробласт, который комбинирован с вакциной из опухолевых клеток.
Цитокин-экспрессирующая аллогенная клетка может представлять собой любую клетку-носитель, которая обеспечивает экспрессию цитокина на уровне, достаточном для усиления иммунного ответа. Как используется в настоящем описании, усиленный иммунный ответ представляет собой любое измеряемое усиление иммунного ответа. По существу, любой тип клеток, который обеспечивает экспрессию цитокина на уровне, достаточном для усиления иммунного ответа, может быть использован в способах по изобретению. Особенно эффективными аллогенными клетками, экспрессирующими цитокин, являются ал
- 4 017613 логенные клетки фибробласты и аллогенные опухолевые клетки. Способы генетического модифицирования аллогенной клетки для экспрессии цитокина хорошо известны специалистам в данной области (8атЬгоок с1 а1., кирга, 1989; Аи5иЬе1 с1 а1., кирга, 1999). Например, клетка фибробласт генетически модифицирована для экспрессии 1Ь-2.
Кроме того, аллогенные опухолевые клетки и/или опухолевые стволовые клетки могут быть модифицированы для экспрессии цитокина. Аллогенная опухолевая клетка или опухолевая стволовая клетка, экспрессирующая антигены, общие с опухолью пациента, могут быть генетически модифицированы для экспрессии цитокина или антитела, блокирующего иммунные ингибиторы. Например, у больного раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой, аллогенная клетка рака толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы, соответственно раковые клетки могут быть генетически модифицированы для экспрессии цитокина или антитела, блокирующего иммунные ингибиторы, с помощью аллогенных клеток, экспрессирующих общие с опухолью пациента антигены. При желании, цитокин-экспрессирующая опухолевая клетка и/или опухолевые стволовые клетки могут быть генетически модифицированы другими молекулами, используемыми для стимуляции или усиления иммунного ответа, например В7.1 и В7.2. Цитокин, экспрессируемый аллогенной клеткой, может представлять собой любой цитокин, который усиливает иммунный ответ, в том числе те цитокины, что раскрыты в настоящем описании. Особенно эффективные цитокины для использования в способах по изобретению включают 1Ь-2 и СМ-С8Р, а конкретными антителами являются антитела, которые ингибируют РСЕ2 или СТЬА4. В случае, если цитокин и/или антитело экспрессируются в аллогенной опухолевой клетке, то СМ-С8Р может быть экспрессирован в мембраносвязанной форме для усиления иммунного ответа против опухолевых антигенов аллогенной опухолевой клетки.
Как используется в настоящем описании, физиологически приемлемый носитель, используемый в вакцинах по изобретению, относится к любым известным компонентам, используемым для иммунизации. Компоненты физиологического носителя предназначены для индукции или усиления иммунного ответа на вводимый в вакцине антиген. Композиции могут содержать буферы для поддержания предпочтительного диапазона рН, соли и другие компоненты, которые презентируют антиген индивидууму в композиции, которая стимулирует иммунный ответ на антиген. Физиологически приемлемый носитель также может содержать один или более адъювантов, которые усиливают иммунный ответ к антигену. Композиции могут быть введены подкожно, внутримышечно, внутрикожно или любым другим способом, подходящим для иммунизации.
Как используется в настоящем описании, термин адъювант относится к веществу, которое при добавлении к иммуногенному средству, такому как аллогенная опухолевая клетка, неспецифически усиливает или потенцирует иммунный ответ хозяина-реципиента на средство, под воздействием смеси. Адъюванты могут включать, например, масляно-водные эмульсии, водно-масляные эмульсии, квасцы (соли алюминия), липосомы и микрочастицы, такие как полистирол, крахмал, полифосфазен и полиактид/полигликозиды. Адъюванты могут также включать, например, скваленовые смеси (8АР-1), мурамилпептид, дериваты сапонина, препараты клеточных стенок микобактерий, монофосфорил липид А, дериваты миколевой кислоты, неионные блок-сополимерные поверхностно-активные вещества, Ои1Ь А, субъединица холерного эндотоксина В, полифосфазен и дериваты и иммуностимулирующие комплексы (18СОМ). Для использования в ветеринарии и для получения антител у животных могут быть использованы митогенные компоненты адъюванта Фрейнда (как полный, так и неполный). Для людей предпочтительным адъювантом является неполный адъювант Фрейнда (1РА). В области техники известны различные подходящие адъюванты. Дополнительные адъюванты включают, например, бациллу КальметаГерена (ВСС), ДЕТОКС (содержащий остов клеточных стенок МусоЬас1епит рЫе1 (С\У8) и монофосфорил липид А из 8а1топе11а Мтпе5о1а (МРЬ)), и им подобные.
Кроме того, цитокин или антитело, которое блокирует иммунные ингибиторы, также может быть использован в качестве адъюванта, усиливающего иммунный ответ, как описано в настоящем описании. В частности, в способах по изобретению могут преимущественно использоваться вакцина, содержащая аллогенные опухолевые клетки, и генетически модифицированные аллогенные клетки, экспрессирующие цитокины, такие как 1Ь-2, СМ-С8Р или другие цитокины, а также антитела, такие как антитела, ингибирующие РСЕ2 или СТЬА4, как раскрыто в настоящем описании. Использование клеток, экспрессирующих цитокин, позволяет усилить иммунный ответ на антигены аллогенных опухолевых клеток, как описано в настоящем описании. Понятно, что при желании можно ввести более одного цитокина, либо прямым введением одного или более цитокинов, или введением цитокинов в виде клетки, экспрессирующей множество цитокинов, или в виде множества клеток, экспрессирующих множество цитокинов, или их комбинацией.
Изобретение относится к композиции, стимулирующей иммунный ответ у больного аденокарциномой. Например, изобретение относится к композиции, стимулирующей иммунный ответ у больного ра
- 5 017613 ком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой. Композиция содержит одну или несколько аллогенных опухолевых клеток и/или опухолевую стволовую клетку и физиологически приемлемый носитель. Изобретение также относится к композиции вещества, содержащей только клетки. Изобретение, кроме того, относится к композиции, содержащей одну или несколько аллогенных опухолевых клеток, генетически модифицированной клетки аллогенного фибробласта, экспрессирующей цитокин, такой как 1Ь-2 или СМ-С8Е, и физиологически приемлемый носитель. Более того, в композицию, стимулирующую иммунный ответ по изобретению, могут быть включены другие аллогенные опухолевые клетки, как раскрыто в настоящем описании.
Как в настоящем описании раскрыто, аллогенные опухолевые клетки и/или опухолевые стволовые клетки могут быть генетически модифицированы для экспрессии молекул, усиливающих иммунный ответ. Например, аллогенные клетки могут быть модифицированы для экспрессии В7.1 и В7.2. Кроме того, как описано выше, аллогенные опухолевые клетки могут быть модифицированы для экспрессии цитокина.
Аллогенные опухолевые клетки и/или опухолевую стволовую клетку вводят в дозе, достаточной для стимуляции иммунного ответа к одному или более антигенам аллогенной опухолевой клетки, которые являются общими с аутологичной опухолью пациента. Специалист в данной области техники может без труда определить соответствующий уровень дозы для введения подходящих аллогенных опухолевых клеток для индукции иммунного ответа. Подобная доза может составлять по меньшей мере приблизительно 2 в степени 1x10 клеток, приблизительно 3 в степени 1x10 клеток, приблизительно 4 в степени 1x10 клеток, приблизительно 5 в степени 1x10 клеток, приблизительно 6 в степени 1x10 клеток, приблизительно 7 в степени 1x10 клеток, приблизительно 8 в степени 1x10 клеток, приблизительно 9 в степени 1x10 клеток или приблизительно 10 в степени 1x10 клеток или более. Например, как раскрыто в настоящем описании, общая доза введенных аллогенных опухолевых клеток приблизительно 7 в степени 6x10 клеток является достаточной для стимуляции ответа СТЬ. Если вводят более чем одну аллогенную опухолевую клетку, то каждая клетка может быть введена в индивидуальной дозе так, чтобы была введена соответствующая общая доза клеток.
Изобретение также относится к способу стимуляции иммунного ответа у больного аденокарциномой. Например, изобретение также относится к способу стимуляции иммунного ответа у больного раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой. Способ может включать стадию введения пациенту одной или несколько аллогенных опухолевых клеток, где аллогенная клетка стимулирует иммунный ответ к аутологичной опухолевой клетке пациента. Преимуществом введения аллогенных опухолевых клеток для стимуляции иммунного ответа против опухоли у пациента является отсутствие необходимости выделения клеток у пациента для получения такой противоопухолевой вакциной.
Изобретение, кроме того, относится к способу стимуляции иммунного ответа у больного аденокарциномой, включая больного раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой. Способ включает стадию введения пациенту одной или нескольких аллогенных опухолевых клеток, которые стимулируют ответ цитотоксичных Т-лимфоцитов (СТЬ) против аутологичных опухолевых клеток пациента.
Изобретение дополнительно относится к способу стимуляции профилактического противоракового иммунного ответа у индивидуумов, вакцинированных рекомбинантной опухолевой клеткой и/или вакциной из опухолевых стволовых клеток, которые будут препятствовать развитию аденокарциномы, включая больного раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой. Способ включает стадию введения индивидууму одной или нескольких рекомбинантных аллогенных опухолевых клеток и/или опухолевых стволовых клеток, где аллогенные клетки стимулируют ответ цитотоксичных Т-лимфоцитов (СТЬ) к опухолевым клеткам, которые могут возникать у индивидуумов.
Изобретение, кроме того, относится к способу стимуляции профилактического противоракового иммунного ответа у индивидуумов, вакцинированных рекомбинантной опухолевой клеткой и/или вакциной из опухолевых стволовых клеток, которые будут защищать пациента от скрытых опухолей или которые могут представлять собой риск развития аденокарциномы, включая больного раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой. Способ включает стадию введения индивидуу
- 6 017613 мам одной или более рекомбинантных аллогенных опухолевых клеток, где аллогенные клетки стимулируют ответ цитотоксичных Т-лимфоцитов (СТЬ) к аутологичным опухолевым клеткам и/или опухолевых стволовых клеток, где аллогенные клетки стимулируют ответ цитотоксичных Т-лимфоцитов (СТЬ) к опухолевым клеткам, которые могут возникать у индивидуумов или протекать в скрытой форме.
Количество разных аллогенных опухолевых клеток, которые могут быть введены, может изменяться в зависимости от конкретных потребностей вакцины. Например, при желании, ответ СТЬ может быть стимулирован одной или несколькими аллогенными опухолевыми клетками, двумя или более, тремя или более, четырьмя или более, пятью или более, шестью или более, семью или более, восемью или более, девятью или более и даже десятью или более аллогенными опухолевыми клетками. Количество разных аллогенных опухолевых клеток для введения, может быть легко определено специалистом в данной области путем введения различных количеств опухолевых клеток и линий и определения стимулирован или усилен ли иммунный ответ.
Типичные аллогенные опухолевые клетки и/или опухолевые стволовые клетки, используемые в изобретении, включают клетки, полученные из стационарных линий раковых клеток и из опухолевых клеточных линий, выделенных из раковых биопсий.
Изобретение относится к способу стимуляции иммунного ответа у больного различными видами рака, включая больного аденокарциномой, посредством чего минимизирован ответ СТЬ к аутологичным не опухолевым клеткам. Например, способ изобретения может быть использован для стимуляции иммунного ответа у больного раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани. Преимущества изобретения состоят в том, что аллогенная вакцина стимулирует ответ СТЬ против аутологичных опухолевых клеток пациента с минимальным ответом СТЬ на неопухолевые клетки. В частности, аллогенная вакцина по изобретению дает минимальный ответ СТЬ на мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС). Как использовано в настоящем описании, минимизированный ответ СТЬ в отношении аутологических неопухолевых клеток относится к ответу СТЬ против аутологических неопухолевых клеток, который не определяется или имеет небольшой отрицательный эффект или не имеет отрицательного эффекта у пациента.
Способы по изобретению относятся к лечению больного аденокарциномой, включая больного раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой. По существу, аллогенные опухолевые клетки, используемые в изобретении, представляют собой в целом клетки аденокарциномы, так как эти клетки экспрессируют различные антигены аденокарциномы. Например, аллогенные опухолевые клетки могут представлять собой клетки рака толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы, имеющих общие антигены с антигенами карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы соответственно.
Карцинома толстой кишки, которая является одной из наиболее встречаемых форм рака, является идеальным кандидатом для развития адъювантных иммунотерапевтических подходов. Несмотря на то что лечение большинства больных раком толстой кишки заключается в резекции опухоли и отсутствии клинически выявляемого заболевания сразу после хирургического вмешательства, у многих со временем наблюдается рецидив заболевания в печени или органов брюшной полости из-за наличия не детектируемых диссеминированных микроскопических метастазов. Сравнительная устойчивость к химиотерапии этих рецидивирующих метастазов при раке толстой кишки дополнительно усиливает необходимость в новых способах лечения, таких как адъювантная иммунотерапия.
В настоящем изобретении описаны способы разработки и анализа вакцины из клеточных линий рака толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы, в которых генетически уменьшена или ингибирована экспрессия секретированного другим способом по меньшей мере одного иммуносупрессивного средства, например ТОР-β. Опухолевые клетки и линии, выбранные для введения в вакцину на основе секреции по меньшей мере одного иммуносупрессивного средства, например ТОР-β, генетически модифицируют для снижения или ингибирования экспрессии указанного по меньшей мере одного иммуносупрессивного средства, например ТОР-β, и экспрессии спектра связанных с опухолью антигенов (ТАА), характерных для карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы. Еще в одном варианте осуществления вакцинация больных раком толстой кишки, молочной
- 7 017613 железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой, такими опухолевыми клетками и/или линиями опухолевых стволовых клеток, объединенная с 1Ь-2, секретируемым аллогенными клетками, индуцирует ответ СТЬ вместе с аутологичной опухолью пациента.
Кроме больных раком толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозным раком, меланомой, раком центральной нервной системы и лимфомой, способы вакцины аллогенных опухолевых клеток могут быть использованы подобным образом и для других типов рака, таких как меланома головного мозга и т.п. Способы по изобретению, в частности, можно использовать для лечения аденокарцином, включая аденокарциному толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, а также сквамозного рака, меланомы, рака центральной нервной системы и лимфомы. Для каждого типа рака, на который нацелено лечение, вакцина может содержать аллогенные опухолевые клетки и/или опухолевые стволовые клетки, экспрессирующие общие антигены с типом рака, на который направлено лечение. Кроме того, вакцина может содержать аллогенные опухолевые клетки типов опухоли. Например, вакцина, содержащая аллогенные клетки карциномы толстой кишки, такие как описаны в описании настоящего изобретения, может быть использована в вакцине для стимуляции иммунного ответа у больного аденокарциномой, например, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани и так далее. Такая вакцина может использоваться, так как аллогенные опухолевые клетки имеют антигены, общие с различными типами опухолей. Например, аденокарцинома молочной железы и легких, а также карцинома толстой кишки экспрессируют СЕА, как описано в настоящем патенте.
Кроме вакцины, содержащей только аллогенные опухолевые клетки, изобретение относится к способам, в которых аллогенные опухолевые клетки вводят вместе с цитокином-адъювантом. Вакцина из аллогенных опухолевых клеток может включать введение цитокина, такого как 1Ь-2, СМ-С8Е или других цитокинов или антител, которые ингибируют молекулы, супрессирующие иммунитет, такие как РСЕ2 и СТЬА4, как описано выше. Кроме того, цитокин-адъювант может быть введен в форме аллогенной клетки, такой как фибробласт или опухолевой клетки, генетически модифицированной для того, чтобы секретировать цитокин, такой как 1Ь-2, СМ-С8Е или другие иммуностимулирующие цитокины.
Количество вводимого цитокина может быть легко определено специалистом в данной области путем введения различных количеств цитокина и определения того, усилен ли иммунный ответ предпочтительно без возникновения тяжелых или угрожающих жизни побочных эффектов. Клетки можно вводить в различных количествах для достижения желаемого количества цитокина. Как правило, цитокин вводят в дозе, равной по меньшей мере приблизительно 50 единиц, приблизительно 100 единиц, приблизительно 200 единиц, приблизительно 300 единиц, приблизительно 400 единиц, приблизительно 500 единиц, приблизительно 600 единиц, приблизительно 700 единиц, приблизительно 800 единиц, приблизительно 900 единиц, приблизительно 1000 единиц, приблизительно 2000 единиц, приблизительно 3000 единиц, приблизительно 4000 единиц, приблизительно 5000 единиц или выше, если такая доза усиливает иммунный ответ, не вызывая тяжелых или угрожающих жизни побочных эффектов у больного. Как раскрыто в настоящем описании, аллогенная клеточная линия фибробластов может быть генетически модифицирована и секретировать 1Ь-2 и вводиться в различных количествах для того, чтобы подобрать дозу 1Ь-2 в диапазоне от 0 до 4000 единиц.
При иммуногенной терапии использование для иммунизации аллогенных клеток исключает необходимость выявлять для каждого пациента и генетически модифицировать первичный фибробласт и аденокарциному, такую как культуру опухолевых клеток толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани. Логическое объяснение использования аллогенных опухолевых клеток основано на экспрессии общих связанных с опухолью антигенов (ТАА), экспрессируемых как опухолевыми клетками, используемыми для иммунизации, так и клетками опухоли пациента. В карциноме толстой кишки клональная СТЬ реактивность была использована для определения количества общих ТАА.
Как раскрыто в настоящем описании, вакцина из аллогенных опухолевых клеток, которая может применяться на практике, разработана для иммуногенной терапии рака толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, основанной на иммунологических параметрах стационарных клеточных линий карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани соответственно по сравнению со свежими культурами карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани, соответственно, полученными из
- 8 017613 материала биопсии. Вакцину получают из опухолевых клеток или линий, идентифицированных на основе секреции ими по меньшей мере одного иммуносупрессивного средства, например ТСР-β, генетически модифицированных для уменьшения или ингибирования экспрессии указанного по меньшей мере одного иммуносупрессивного средства, например ΤΟΡ-β, и совместно экспрессировать спектр связанных с опухолью антигенов (ТАА), характерных для карцином толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани.
Вакцинация против рака представляет собой введение опухолевых антигенов в форме либо инактивированных опухолевых клеток или лизатов опухолевых клеток, из которых антиген презентирующие клетки (АРС) захватывают опухолевые антигены, и перемещение к лимфоидным тканям для стимуляции ί.Ό8' цитотоксичные Т-лимфоциты (СТЬ) или СО4+ клетки-хелперы иммунной системы. Кроме использования специфических опухолевых антигенов, вакцинацию наиболее часто проводят с помощью дендритных клеток (ОС), несущих подходящий белок или пептид или ОС, трансфицированными вектором ДНК или РНК. Каждый из этих подходов будет оказывать конкретные воздействия на иммунную систему. Опухолевые антигены, распознаваемые Т-клеткой, могут быть классифицированы либо как опухолеспецифичные антигены (Т8А), где гены, кодирующие Т8А, обнаруживаются только в опухолевых клетках, и не обнаруживаются в нормальных тканях, или как связанные с опухолью антигены (ТАА), где гены, кодирующие ТАА, сверхэкспрессируются в опухолевых клетках, но при этом также презентированы на низких уровнях в нормальных тканях.
Т8А являются, наверное, наиболее желаемой целью противоопухолевой вакцинации или адаптивной терапии. Их опухолеспецифичная экспрессия предотвращает любую ранее существовавшую иммунологическую аутотолерантность, которая может быть обнаружена антигенами, экспрессируемыми в нормальных условиях, даже на низких уровнях и, таким образом, иммунные ответы, направленные против Т8А, вряд ли будут повреждать нормальные ткани. Примеры Т8А включают антигены видоизмененных вирусов, которые являются причиной того, что инфицированные клетки становятся злокачественными, такие как генетические продукты вируса папилломы человека (НРУ) или вирус Эпштейна-Барр (ЕВУ) и продукты мутантных генов, экспрессируемых только в опухолевых клетках, таких как онкогенный белок ЯА8 и ВСЯ/АВЬ пептидилированный белок.
Данное неполное представление об опухолеспецифичных мутировавших антигенах в качестве СТЬ мишеней обнаруживает, что большинство пептидов, вовлеченных в ответы СТЬ у больных раком, представляют собой связанные с опухолью антигены. Этот факт обеспечивает очень много жизнеспособных целей, так как большинство опухолей происходят из нормальных тканей и, таким образом, уровни экспрессии своих белков, обнаруженных в этих нормальных тканях, могут стать повышающими, внося вклад в рост злокачественных образований и обеспечивая подходящие СТЬ цели. Нет затруднений с презентацией ТАА посредством общих НЬА аллелей.
Известно, что карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани экспрессируют множество общих ТАА. ТАА включают такие известные онкобелки, как НЕЯ-2/Ыеи и с-МУС (Веп-Майгех, К. е! а1. 1988, Вг. 1. Сапсег 57, 529-534; Όίδίδ, М.Ь. е! а1. 1994, Сапсег Яе§. 54, 16-20; Όίδίδ, М.Ь. апб Сйееуег, М.А. 1996, 8, 637-642; Уататоф А. е! а1. 1996, 1п!. 1. Сапсег 69, 283-289); такие белки, супрессирующие опухоли, как р53 (8ои551, Т. 2000. Сапсег Яе§. 60, 1777-1788); такие устойчивые белки, как сурвинин и фактор роста, выделяемый из эпителия (ЬЕООР/р75) (ОашеН, Т. е! а1. 2005, Ргойа!е 62, 14-26; Яойаует, 1. е! а1. 2000, Сапсег Яе§. 60, 815-817); такие белки, регулирующие клеточный цикл, как циклин В1 (Соу1ш, О. е! а1. 1997, Нера!о1оду 25, 75-80); такие митозоассоциированные белки, как центромерный белок Ρ (СЕЫР-Ρ) (Соу1ш, О е! а1. 1997, 1. Нера!о1. 26, 255265; Саыапо, С. А. е! а1. 1995 1. Аи!о1ттип. 8, 575-586; ЯаПпег, ЕВ. е! а1. 1997, С1ш. 1пуе8Йд. Меб. 20, 308319); такие хроматин-ассоциированные белки, как топоизомеразы (ЕеРНКпбех Мабпб, Ρ. 2005, Сапсег Ье!!. 230, 187-198; 1та1, Н. е! а1. 1995, С1ш. Сапсег Яе§. 1, 417-424); такие мРНК-связанные белки, как р62, 1МР1 и Кос (Н1то!о, Т. е! а1. 2005, 1п!. 1. Опсо1. 26, 311-317; 2йапд, 1. Υ. е! а1. 2001, Сйп. 1ттипо1. 100, 149-156) и такие дифференцировочные и антигены рака семенников, как ΝΥ-Ξ8Ο-Ι (8!оскей, Е. е! а1. 1998, 1. Ехр. Меб. 187, 1349 -1354) и Ме1ап-А, 88X2, МАОЕ-Ι, МАОЕ-3, тирозиназа и карбоангидраза.
Различные группы используют серологические протеомные анализы (8ЕЯРА) для идентификации ТАА-кандидатов, связанных с раком молочной железы, включая РНК-связанную белковую регуляторную субъединицу (Я8), онкоген Ό1-Ι, глюкозо-6-фосфат дегидрогеназу (О6РО), 70-кДа белок теплового шока 1 (Н871) и дегидролипоамид дегидрогеназу (ОЬНО) (Сапе11е, Ь. е! а1. 2005, 1. 1ттипо1. Ме1йоб§ 299, 77-89; ЕеРНКпбе/ Мабпб, Ρ. 2005, Сапсег Ьей. 230, 187-198; К1абе, С.8. 2001, Рго!еотю8 1, 890-898; №оиг, Р.Ь. е! а1. 2002, Тесйпо1. Сапсег Яе§. Тгеа!. 1, 257-262). Подход 8ЕЯРА также был использован для идентификации белка кальретикулина ОЕАО-йох 48 (ΌΌΧ48) в качестве аутоантигенов мишеней при раке поджелудочной железы (Нопд, 8.Н. е! а1. 2004, Сапсег Яе§. 64, 5504-5510; Х1а, О. е! а1. 2005, Вюсйет. Вюрйук. Яе§. Соттип. 330, 526-532) и Яйо СОР диссоциирующий ингибитор 2 в качестве главного ТАА-кандидата при лейкозе (Сш, Е\¥. е! а1. 2005, Мой Се11. Рго!еот1с§ 4, 1718-1724).
- 9 017613
Как раскрыто в настоящем описании, как свежие культуры клеток карциномы толстой кишки, так и стабильные клеточные линии карциномы толстой кишки экспрессируют ряд прежде охарактеризованных ТАА, включая сверхэкспрессию СЕА, МиС-Ι, Ер-САМ, НЕК-2/пеи, семейство МАСЕ и р53. 8йате1ег, Ό. Ь. е1 а1. 2002, С1ш Ехр 1ттипо1. 129, 99-106. СЕА, возможно, является наилучшим охарактеризованным антигеном, связанным с карциномой толстой кишки. Он экспрессируется в 80% случаях рака толстой кишки, причем было показано, что он служит мишенью как гуморального, так и клеточного иммунного ответа и содержит в себе НЬА-А2 связанные эпитопы.
Ер-САМ представляет собой антиген клеточной поверхности, связанный с карциномой толстой кишки, который, как было показано, является важной мишенью как для гуморального, так и клеточного иммунитета. МИС-Ι представляет собой необычный антиген, который может опосредовать МНСограниченную и МНС-неограниченную цитотоксичность, предположительно, посредством перекрестного сшивания Т-клеточных рецепторов повторяющимися аминокислотными последовательностями. НЕК2/пеи представляет собой хорошо характеризуемый ТАА, который может функционировать в качестве антигена для НЬА-А2 направленных СТЬ.
Ген-супрессор опухоли р53 является патологически экспрессируемым в половине карцином толстой кишки. Эпитоп р53, связанный с НЬА-А2, относится к дикому типу аминокислотных последовательностей, идентифицированных за последнее время. СТЬ человека могут выделять данный общий эпитоп в опухолевых клетках, которые сверхэкспрессируют р53.
Как раскрыто в настоящем описании, семейство генов МАСЕ является часто экспрессируемым в карциномах толстой кишки. МАСЕ-Ι был впервые охарактеризован, как связанный с опухолью антиген меланомы, распознаваемый СТЬ. Такое первоначальное наблюдение распространилось на включение белков семейства МАСЕ, экспрессируемыми опухолями различных гистологических типов. Было продемонстрировано, что продукты генов МАСЕ индуцируют активность НЕА-А2-ограниченных СТЬ.
Известно, что карциномы толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другой железистой ткани экспрессируют ряд общих ТАА. Как раскрыто в настоящем описании, как свежие культуры клеток карциномы толстой кишки, так и постоянные клеточные линии карциномы толстой кишки экспрессируют ряд прежде охарактеризованных ТАА, включая сверхэкспрессию СЕА, МИС-Ι, Ер-САМ, НЕК-2/пеи, семейство МАСЕ и р53. 8йате1ег, И.Ь. е1 а1. 2002, С1ш Ехр 1ттипо1. 129, 99-106. СЕА, возможно, представляет собой наилучшим образом характеризованный антиген, связанный с карциномой толстой кишки. Он экспрессируется в 80% случаев рака толстой кишки, причем было показано, что он является мишенью как гуморального, так и клеточного иммунного ответа и содержит связывающие эпитопы НБА-А2.
Ер-САМ представляет собой антиген клеточной поверхности, связанный с карциномой толстой кишки, который, как было показано, является важной мишенью как для гуморального, так и клеточного иммунитета. МИС-Ι является необычным антигеном, который может опосредовать как МНСограниченную, так и МНС-неограниченную цитотоксичность, предположительно, посредством перекрестного связывания Т-клеточными рецепторами с помощью повторяющихся аминокислотных последовательностей. НЕК-2/пеи представляет собой хорошо охарактеризованный ТАА, который может функционировать как антиген НБА-ХА2 направленного СТЬ.
Ген-супрессор опухоли р53 является патологически экспрессируемым в половине карцином толстой кишки. Эпитоп р53, связанный с НБА-А2, относится к дикому типу аминокислотных последовательностей, идентифицированных за последнее время. СТЬ человека могут иметь этот общий эпитоп в опухолевых клетках со сверхэкспрессией р53.
Как раскрыто в настоящем описании, семейство генов МАСЕ зачастую экспрессируется в карциномах толстой кишки. МАСЕ-Ι был впервые охарактеризован, как связанный с опухолью антиген меланомы, распознаваемый СТЬ. Это первоначальное наблюдение распространилось на белки семейства МАСЕ, экспрессируемые опухолями различных гистологических типов. Было показано, что продукты генов МАСЕ индуцируют активность НЬА-А2-ограниченных СТЬ.
РСЕ2 представляет собой молекулу, экспрессируемую опухолевыми клетками, которая ингибирует иммунитет, что обеспечивает возможность опухолевым клеткам избежать воздействия иммунной реакции.
Антиген СТБА4 цитотоксичных Т-лимфоцитов представляет собой молекулу, ингибирующую иммунитет, которая оказывает супрессивное воздействие на индуцию иммунного ответа.
Как использовано в настоящем описании, термин иммуносупрессивное средство относится к генному продукту, который оказывает ингибиторное воздействие на функции иммунного ответа. Иммуносупрессивное средство может, например, препятствовать функционированию цитокинов или может ингибировать или супрессировать иммунный ответ посредством других механизмов. Иммуносупрессивные средства известны из уровня техники и включают, например, трансформирующий фактор роста (ТСЕ-β), фактор роста эндотелия сосудов, простагландин Е2 (РСЕ2), интерлейкин (ЕС)-10 и (ΙΕ)-6, также белок р15Е, муцины, супрессивный Е-рецептор, иммуносупрессивный кислый белок и адгезивные молекулы.
- 10 017613
Например, известно, что существуют различные изоформы ТСР-β и что иммуносупрессивный эффект одной или более данных изоформ ТСР-β зависит, например, от мишеневой клетки. Термин ТСР-β, как правило, используется в настоящем описании для обозначения любой изоформы ТСР-β при условии, что эта изоформа обладает иммуносупрессивной активностью.
Как использовано в настоящем описании, термин секретировать иммуносупрессивное средство означает, что опухолевые клетки секретируют измеримый иммуносупрессивный агент. В клеточных линиях, выделенных из биопсий карциномы толстой кишки, ТСР-β секретируется со значением, равным 480 пг/6 в степени 10 клеток/24 ч и доходит до 1400 пг/6 в степени 10 клеток/24 ч. Как использовано в настоящем описании, термин уменьшить или ингибировать экспрессию иммуносупрессивного средства используется в широком смысле и обозначает, что уровень молекулы РНК, кодирующей иммуносупрессивное средство или уровень активности самого иммуносупрессивного средства уменьшен до уровня, меньшего, чем экспрессируемый уровень перед генетической модификацией. Оба термина уменьшить или ингибировать используются, так как в некоторых случаях, уровень экспрессии иммуносупрессивного средства может быть уменьшен до уровня ниже, чем уровень, который может быть обнаружен посредством конкретного анализа, и, вследствие этого, не может быть определен, если экспрессия иммуносупрессивного средства уменьшена или полностью ингибирована. Использование термина уменьшить или ингибировать исключает любую возможную двусмысленность из-за, например, ограничений конкретного анализа.
Трансформирующий фактор роста бета.
Роль членов семейства трансформирующих факторов роста бета (ТСР-β) в канцерогенезе является сложной. Названные первоначально благодаря своей трансформирующей активности в опытах ίη νίίτο, ТСР-β теперь четко указывают и на опухолесупрессирующую, и на онкогенную активность. В соответствие с существующим принципом супрессорная активность доминирует в нормальных тканях, а во время опухолегенеза изменения в экспрессии ТСР-β и клеточные ответы преобладают в пользу онкогенной активности.
Путь передачи сигнала ТСР-β находился в фокусе нескольких обзоров научной литературы. У млекопитающих экспрессируется три изоформы ТСР-β, ТСР-βΙ, ТСР-(/2 и ТСР-ββ, и каждая кодируется уникальным геном и экспрессируется как в тканеспецифичной, так и в развивающейся регулируемой формах. См., например, последовательность кДНК человека для ТСР-βΙ (Х02812), ТСР-(/2 (М19154) и ТСР-ββ (Х14149). ТСР-β 1 является наиболее распространенной и универсально экспрессируемой изоформой; большинство исследований либо рассматривались или выполнялись с экзогенной ТСР-β 1. ТСР-β секретируется во внеклеточный матрикс, как латентный белковый комплекс, связанный с латентным связанным белком и одной из четырех изоформ латентного связывающего с ТСР-β белка. Активация ТСР-β, которая требуется для биологической активности, происходит посредством не до конца известных механизмов предполагаемого вовлечения протеолитического процессинга связанных белков и высвобождения лиганда ТСР-β. После активации лиганды ТСР-β регулируют клеточные процессы путем связывания с тремя высокоаффинными рецепторами клеточной поверхности: тип I ТСР-β рецептора ΗβΕΙ), тип II ТСР-β рецептора ^βΡΙΙ) и тип III ТСР-β рецептора ΗβΕΙΠ, называемый также бетагликан). При экспрессии Т[ЗК[[[ является наиболее распространенным рецептором ТСР-β и обычно функционирует путем связывания лигандом ТСР-β и перемещения его к его сигнальным рецепторам ТβΕI и Т[ЩП. Т[ЗН[ и Т[ЗКЛ[ содержат серин/треонинпротеинкиназы в своих внутриклеточных доменах. ТβΕI инициирует внутриклеточную передачу сигнала путем фосфорилирования семейства факторов транскрипции, 8таб. 8таб2 и 8таб3 представляют собой рецептор-активированные 8таб для ТСР-β, так как они фосфорилируются ТβΚ.I. 8таб4 является общим партнером для всех рецепторактивированных 8таб§. 8таб6 и 8таб7 являются ингибиторными 8таб, которые блокируют фосфорилирование 8таб2 или 8таб3, ингибируя, таким образом, передачу сигнала ТСР-β.
Выяснен главный механизм для передачи сигнала ТСР-β. Лиганд ТСР-β либо связывается с ТβΕIII, который презентирует ТСР-β к ТβΕII или связывается непосредственно с Т[ЩП. Однажды связанный с ТСР-β, ТβΕII набирает, связывает и трансфосфорилирует Т[ЗН[, стимулируя, таким образом, свою протеинкиназную активность. Активированный Т[ЗН[ фосфорилирует 8таб2 или 8таб3, которые связываются с 8таб4. Полученный в результате комплекс 8таб транслоцируется в ядра и взаимодействует клеточноспецифичным образом с факторами транскрипции для того, чтобы специфически регулировать транскрипцию большого числа ТСР^-отвечающих генов. Передача сигналов ТСР-β регулируется уровнем и продолжительностью активации рецепторов ТСР-β, с непрерывным ядерно-цитоплазматическим движением вперед и назад 8таб, позволяющим им непрерывно отслеживать уровни активированных рецепторов. В дополнение, передача сигналов ТСР-β может регулироваться посредством интернализации рецепторов, причем некоторые исследования предполагают, что интернализация рецепторов требуется для передачи сигналов, а другие предполагают роль интернализации в нисходящей регуляции передачи сигналов. Хотя Т[Щ!. Т[ЗК[[. 8таб2, 8таб3 и 8таб4 охватывают основной 8таб-зависимый ТСР-β путь пе
- 11 017613 редачи данных, сообщалось о 8таб-независимой передаче данных посредством митоген-активируемого протеинкиназного (МАРК) пути передачи сигналов, Р1то гуанозин трифосфатазы, ΡΙ-3 киназы/Ак! и протеинфосфатазы 2А.
Методики с использованием антигенов.
По меньшей мере два различных подхода могут быть использованы для направленного воздействия на гены. Золотой стандарт представляет собой генный нокаут, достигаемый гомологичной рекомбинацией (Вгопкоп 8.К., 8тйЫек О. 1. ΒίοΙ С1ет 1994; 269:27155-27158). Данный подход приводит к реальному физическому разрыву намеченного гена в результате кроссоверных превращений, которые происходят во время клеточного деления между направленным вектором и геном, выбранным для разрушения. Гомологичная рекомбинация чрезвычайно эффективна, но технология затруднена тем фактом, что она остается в своей основе малопроизводительной, отнимающей много времени и дорогой. Однако было достигнуто повышение эффективности данного процесса.
Вторым средством для воздействия на гены служат синтетические олигодезоксинуклеотиды (ΘΌΝ), способные к гибридизации с двухцепочечной ДНК. Подобные гибриды обычно образуются внутри большой бороздки спирали, хотя о гибридизации внутри малой бороздки также сообщалось. В любом случае образуется трехцепочечная молекула, отсюда происхождение термина образующий тройную спираль олигодезоксинуклеотид (ГРО). ТРО не разрушают ген, но препятствуют его транскрипции либо посредством предотвращения разматывания дуплекса или предотвращения связывания факторов транскрипции с генным промотором. Требования к последовательностям ТРО основаны на необходимости для каждого основания, содержащего ТРО, образовывать водородные связи (Хугстеновские связи) со своим комплементарным основанием в дуплексе. Это приводит к тому, что ТРО вынуждены гибридизироваться с пуриновыми основаниями, составляющими полипуриновые-полипиримидиновые треки в ДНК. Эффективность воздействия ТРО дополнительно связана с рядом факторов, включая необходимость в двухвалентных катионах и, возможно, наиболее важно, доступом к ДНК, сжатой в хромосомной структуре. Недавние эксперименты исследователей предоставили свидетельство о том, что образование тройной спирали может наблюдаться в живых клетках, что делает возможным предположить, что такие сложности могут быть в итоге преодолены.
Подходы для специфического нокдауна последовательности мРНК.
Антисмысловые олигонуклеотиды.
Предположение, что малые антисмысловые олигонуклеотиды (ОЭЦ) могут быть использованы для специфичного ингибирования генной экспрессии, впервые было высказано в 1978 году 81ерйеп8оп апб 2атееп1к, Ргос. Ναΐΐ. Асаб. δει. И8А 75: 285 (1978), апб 2атесшк апб ЗЮрНепкоп, Ргос. Νηΐί. Асаб. δει. И8А 75: 280 (1978). Их исследования показали, что тридекамер (13-мерный) ОЭ№ комплементарный к концевым повторам последовательностей в длинном концевом повторе (ЬТК) вируса саркомы Рауса (К8У), ингибируют как трансляцию Р8У в бесклеточной системе, так и вирусную репликацию в культивируемых клетках. Исследователям потребовалось несколько лет после этих остроумных экспериментов для того, чтобы начать полностью реализовывать потенциал антисмыслового опосредованного генного ингибирования. С автоматизацией синтеза О^N в начале 1980-х годов, стало относительно несложно получать О^N любой последовательности и тестировать их способность блокировать экспрессию генов посредством спаривания антисмысловых оснований.
Вскоре после демонстрации того, что О^N с фосфодиэфирным остовом были эффективны в качестве специфичных средств-мишеней для блокирования экспрессии генов, было разработано несколько новых модификаций остовов для улучшения стабильности О^N и повышения их эффективность. Наиболее широко использующейся модификацией является модификация, при которой немостиковый кислород заменяют атомом серы, получая фосфоротиоатные ОЭ№ Такой тип остова, сформировавший основу для антисмыслового препарата, одобренного Рооб апб Эгид Абт1Ш81табоп (РЭА, КоскуШе, ΜΌ, И8А), Уйтауепе (Ικίκ Рйаттасеибсак, Саг1кЬаб, СА, И8А), который выделяет цитомегаловирус ΙΕ2 мРНК и используется для лечения цитомегаловирус-ассоциированного ретинита. Второй ОЭ№ Оепакепке, который выделяет Вс12 (Оеп1а, Вегке1у НещЫк. Ν.Γ, И8А), недавно прошел фазу III клинических испытаний для метастатической меланомы, где он используется в сочетании со стандартной химиотерапией, усиливающей антисмысловой эффект. Несколько других фосфоротиоатных антисмысловых О^N находятся на ранних стадиях клинических испытаний против ряда типов рака и воспалительных заболеваний.
Механизмы действия О^N в отношении функции блокирования генов меняется в зависимости от остова ОЭ№ Сеть отрицательно заряженных ОЭ№ таких как фосфодиэфирные и фосфоротиоатные, вызывает рибонуклеазное Н-опосредованное расщепление меченых мРНК. Другие модификации остова, которые не задействуют рибонуклеазу Н, по причине отсутствия у них заряда или типа спирали, образованного РНК-мишенью, могут быть классифицированы как стерически затрудненные ОЭ№. Широко используемые члены данной последней группы включают морфолины, 2'-О-метилы, 2'-О-аллилы, замкнутые нуклеиновые кислоты и пептидные нуклеиновые кислоты (ΡNА). Данные О^N могут блокировать сплайсинг, трансляцию, ядерно-цитоплазматический перенос и трансляцию, среди других целей ингибирования. Выходя далеко за пределы данного описания для того, чтобы дополнительно углубиться в механизмы действия данного многопланового анализа модификаций О^N и для более подробной инфор
- 12 017613 мации, читатель отсылается к специальному обзору по данному предмету, который подробно описывает каждую из данных модификаций.
Рибозимы.
Рибозимы представляют собой молекулы РНК, которые функционируют как энзимы, даже при полном отсутствии белков. Они проявляют каталитическую активность при разрыве и/или формировании ковалентных связей с исключительной специфичностью, ускоряя, таким образом, спонтанную интенсивность намеченных реакций на порядок величин. Способность РНК выступать в качестве катализатора была впервые показана для самосплайсинга интронов группы I Тс1гаНутспа 111егтор1и1а и участка РНК рибонуклеазы Р. После обнаружения двух данных энзимов РНК, был открыт РНК-опосредованный катализ, связанный с самосплайсингом интронов группы II дрожжевых грибков, митохондрий грибов и растений (равно как и хлоропластов), одноцепочечной РНК вироидов и вирусоидов, дельта вируса гепатита и сателлитной РНК из митондрии Ыеигокрога сгакка. Рибозимы встречаются в природе, но могут также быть сконструированы искусственно для экспрессирования и выделения специфических последовательностей в цис-положении (на той же цепи нуклеиновой кислоте) или транс-положении (нековалентно связанной нуклеиновой кислоты). Новая биохимическая активность развивалась, используя протоколы выбора ίη νίΐΓΟ, а также создавая новые рибозимные мотивы, которые действуют на субстрат иначе, чем РНК.
Эндорибонуклеаза РНКаза Р обнаружена в организмах повсюду в природе. Данный энзим имеет РНК и один или более компонентов белка, в зависимости от организма, из которого его выделили. Компонент РНК из энзимов ЕксйейсЫа сой апй ВасШик киЫШк может действовать в качестве сайтспецифического средства расщепления в отсутствии белка в некоторых солевых и ионных условиях. Изучение потребностей субстрата для ферментов человека и бактерий показывают, что минимальные субстраты для любого энзима имеют сходство с сегментом транспортной молекулы РНК. Данная структура может быть имитирована посредством специально сконструированных антисмысловых РНК, которая образует пару к РНК-мишени и служит в качестве субстрата для РНКазы Р-опосредованного, сайтспецифического расщепления как в пробирке, так и в клетках. Показано также, что антисмысловые компоненты могут быть ковалентно присоединены к РНКазе Р РНК, таким образом, направляя энзим только к интересующей РНК мишени. Исследователи использовали данное свойство в конструировании антисмысловых РНК-аз, которые образуют пары с интересующими мРНК мишенями для того, чтобы стимулировать сайт-специфическое расщепление мишени и для нацеленного ингибирования, как симплексного вируса герпеса, так и цитомегаловируса в клеточной культуре.
Ряд малых патогенных РНК растений (вироидов, сателлитных РНК и вирусоидов), транскрипт плазмиды митохондриальной ДНК КСгакка и дельта вирус гепатита животных подвергаются реакции саморасщепления ίη νίίΐΌ в отсутствии белка. Реакция требует нейтральной РН и Мд2+. Реакция саморасщепления представляет собой составную часть механизма репликации ίη νί\Ό по типу разматывающегося рулона. Данные саморасщепляющиеся РНК могут подразделяться на группы в зависимости от последовательности и вторичной структуры, образованной около сайта расщепления. Небольшие рибозимы были получены из мотива, найденного в РНК одноцепочечного вироида растения и вирусоида. На основе формы вторичной структуры и сохраненного набора нуклеотидов термин головка молотка был дан группе данных саморасщепляющихся доменов. Рибозим по типу головки молотка составлен из 30 нуклеотидов. Простота каталитического домена по типу головки молотка сделала его популярным выбором при конструировании транс-активных рибозимов. Используя пары оснований Уотсона-Крика, можно сконструировать рибозим по типу головки молотка для того, чтобы расщепить РНК-мишень. Требования сайта расщепления относительно просты и, практически, может быть выделен любой мотив ИН последовательностей (где Н представляет собой и, С или А).
Второй саморасщепляющийся мотив, полученный из растений, первоначально идентифицированный в отрицательной цепи сателлитной РНК кольцевой пятнистости табака, был назван шпилька или скрепка. Рибозимы по типу шпильки расщепляют субстраты РНК в обратимой реакции, которая вырабатывает 2',3'-циклофосфаты и 5'-гидроксильные окончания. Созданные варианты данного каталитического мотива также расщепляют и переворачивают в транс-положение многочисленные копии различных целей. Требования субстрата для шпильки включают ОИС с немедленно возникающим расщеплением, выше О. Рибозим по типу шпильки катализирует также реакцию сшивания, хотя более часто он используется для реакций расщепления.
Было подано множество заявок по рибозимам в клетках как по типу головки молотка, так и по типу шпильки для понижающего регулирования специфических клеточных и вирусных мишеней. Наке1оГГ апб Оег1асй, №1иге 334: 585 (1988) в 1988 году сконструировали мотив по типу головки молотка, который может быть создан для того, чтобы расщеплять любую мишень, модифицируя плечи, которые образуют пары с мишенью. Еще одна лаборатория продемонстрировала, что данный мотив рибозимы по типу головки молотка имел потенциальное терапевтическое применение, основанное на исследовании клеток, созданных для того, чтобы экспрессировать рибозим вируса иммунодефицита человека (Н1У), в котором происходило практически полное ингибирование вирусного гена экспрессии и репликации. Со времени данного исследования были буквально тысячи заявок по рибозимному выделению клеточных и вирус
- 13 017613 ных мишеней. Был написан ряд всеобъемлющих обзоров, которые рассмотрели данные заявки и читатель отсылается к ним для дополнительного рассмотрения данного предмета.
ДНКзимы.
Категория сайт-специфически расщепляющих нуклеиновых средств, которая привлекла значительное внимание за последние несколько лет, представляет собой каталитические ДНК. Небольшие ДНК, способные к сайт-специфическому расщеплению РНК-мишеней, получили путем эволюции ίη νίΙΐΌ (поскольку не известно о существовании в природе ДНК энзимов). В результате данного исследования были обнаружены два разных каталитических мотива с различными расщепляющими сайт специфичностями. Наиболее широко используемые 10-20 (нуклеотидные) энзимы связаны со своим РНК субстратам посредством пар оснований Уотсона-Крика и сайт специфически расщепляют РНК мишень, как делают рибозимы по типу головки молотка и шпильки, что приводит к 2',3'-циклофосфату и 5'-ОН окончаниям. Расщепление мРНК-мишеней приводит к их разрушению и ДНКзимы повторно используют и расщепляют множество субстратов. Каталитические ДНК относительно недорогие для синтеза и имеют хорошие каталитические способности, что делает их пригодными субститутами либо для антисмысловой ДНК или для рибозимов.
Было опубликовано несколько заявок по ДНКзимам в культуре клеток, включая ингибирование νед Р тРНК и последующего предотвращения ангиогенеза и ингибирование экспрессии Ьсг/аЫ характеристики слияния транскриптов хронического миелолейкоза. Обратной стороной каталитических ДНК по сравнению с рибозимами является то, что их можно доставлять только экзогенно, но они могут быть с модифицированным остовом, что, возможно, позволяет им быть доставленными в отсутствии носителя.
РНК1 и 51РНК.
РНК1 относится к группе механизмов, связанных со сайленсингом генов, имеющих много общих биохимических компонентов, в которых концевая эффекторная молекула представляет собой небольшую 21-23 нуклеотидную антисмысловую РНК. Один механизм использует относительно длинный дсРНК триггер, процессированный клеточным ферментом Э|5ег в короткие, 21-23 нуклеотидную дсРНК, называемые 51РНК. Цепь 51РНК, комплементарная к РНК мишени, становится включенной в мультипротеиновый комплекс, именуемый РНК-индуцированный сайленсинговый комплекс (К18С), где она служит в качестве направляющей для эндонуклеолитического расщепления цепи мРНК в сайте мишени. Это ведет к деградации всей мРНК; антисмысловая 51РНК затем может быть использована повторно. У низших организмов РНК-зависимая РНК полимераза также использует ренатурированную ведущую 51РНК в качестве затравки, генерируя дополнительную дсРНК из мишени, которая, в свою очередь, используется в качестве субстрата для Экет, генерируя больше 51РНК и усиливая сигнал 51РНК. Этот путь обычно используется в качестве механизма вирусной защиты у растений.
Термин 51РНК теперь используется повсеместно, всякий раз когда антисмысловая цепь полностью комплементарна сайту мишени мРНК. 51РНК может состоять из двух отдельных, ренатурированных одиночных цепочек по 21 нуклеотид, где два концевых З'-нуклеотида являются непарными (3'-липкие концы). Как вариант, 51РНК может быть в форме одиночной стебля-петли, часто относящейся к короткой шпильке РНК (вйРНК). Обычно, но не всегда, антисмысловая цепочка 51РНК является также комплементарной к кодирующей цепочке партнеру βί/вйРНК.
Текущие эксперименты показывают, что у делящихся дрожжей дсРНК, кодированная центромерной ДНК, также опосредует сайленсинг центромерного гетерохроматина и зависит от компонентов пути РНК1. Сходные РНКБподобные механизмы вовлечены в сайленсинг МЛЯ-локуса 80ιίζο5αα1ιαΐΌΐη\^5 ροтЬе. Хроматиновый сайленсинг эндогенного ига4+ гена в транс-положении, инициирован ига4+ длинноствольной (280 пар оснований) шпилькой, кодированной на экстрахромосомной плазмиде, требующей как компонентов РНК1, так и С1г4 (гистонметилазу); распространение гетерохроматина через эухроматин требует ортолог 8. ροтЬе 8\νί6. Кроме того, подобный механизм, использующий встречающиеся в природе 51РНК, полученные от эндогенных транспозон, был вовлечен в регулирование обычной экспрессии генов хозяина у 8. ροтЬе во время мейоза.
В клетках млекопитающих длинные дсРНК (обычно больше, чем 30 нуклеотидов в длину) инициируют путь интерферона, активируя протеинкиназу Я и 2',5'-олигоаденилатсинтетазу2. Активация пути интерферона может привести к общей реактивации трансляции, а также общей деградации РНК. Однако сообщалось, что более короткие 51РНК, экзогенно введенные в клетки млекопитающих, обходят путь интерферона, хотя недавние свидетельства предполагают, что это не всегда может быть верным.
Антисмысловой продукт 51РНК также может быть получен от эндогенных микроРНК. Данные, полученные из экспериментов в нескольких системах воззрений, такой как путь С. е1едаи8 11и4/Ни14, предполагают следующий путь для биогенеза микроРНК и регуляции генов в клетках животных. В ядрах удаляются концы транскриптов посредством экзо III РНКазы (ЭговНа, в клетках человека), с образованием 70 нуклеотидной пре-микроРНК отогнутого назад посредника. Пре-микроРНК могут представлять собой мультицистронные, содержащие в себе множество шпилек, направленных против различных РНКмишеней. Пре-микроРНК активно поставляется в цитоплазму, где Экег процессинг обрезает стебель шпильки и удаляет петлю и кодирующую цепочку для того, чтобы создать итоговый 21-23 нуклеотидный антисмысловой РНК1 эффектор. В отличие от прототипной βί/вйРНК кодирующий и антисмысловой
- 14 017613 стебли цепочек партнеров не являются полностью комплементарными, заключая в себе глазки или петли; как структура, так и термодинамические свойства пар оснований являются критическими для правильного процессинга. Кроме того, антисмысловая цепочка содержит в себе некомплементарность к одному или более сайтам в З'-нетранслированном участке мРНК мишени, где связывание опосредует репрессию трансляции скорее, чем деградацию мРНК. МикроРНК являются филогенетически широко распространенными и в некоторых случаях консервативными; они также показывают временное и пространственное регулирование. Текущая оценка количества микроРНК человека представляет собой 200250.
В клетках человека эксперименты с 81РНК и микроРНК показали, что независимо от изначальной формы или пути процессинга, расщепление мРНК будет направлять конечная зрелая 21-23 нуклеотидная антисмысловая РНК, полностью гомологичная к мРНК. В целом, эффект от некомплементарностей между 81РНК и сайтами мишенями может изменяться от минимальной до полной отмены активности, по причине того, что она понята только частично; однако по меньшей мере в одном случае частичная гомология приводит к ингибированию трансляции мРНК. В данном отчете 81РНК с некомплементарностямимишенями, сконструированными для того, чтобы имитировать взаимодействие прототипичной микроРНК-мишени, опосредовала ту или иную степень репрессии трансляции, в зависимости, как от специфичного взаимодействия, так и от количества сайтов-мишеней в мРНК. Следовательно, является правдоподобным, что структурные особенности, характерные для 81РНК или микроРНК являются важными для процессинга и выбора антисмысловой цепочки в К18С и имеют важное значение для конструирования средств, включающих РНК1.
РНК1 может быть активирована либо посредством экзогенной доставки преформированных 81РНК или посредством промоторной экспрессии ДРНК или 8ЙРНК. Таким образом, РНК1 показал себя в качестве потенциального механизма для специфичного нокдауна мРНК транскриптов для нескольких процентов их оригинальных уровней посредством большинства методов определения. РНК1 представляется более эффективным, чем антисмысловые РНК, рибозимы или РНКзимы для направленной деструкции сообщений кода, предположительно по причине того, что она использует клеточный механизм, который эффективно направляет антисмысловые компоненты на мРНК мишень для сайт-направленного расщепления.
Аптамеры.
Олигонуклеотиды могут представлять собой не только потенциальные лекарственные средства путем связывания комплементарным способом в РНК, но они также могут развиваться путем селекционных процедур через систематическую эволюцию лигандов путем экспоненциального обогащения (8ЕЬЕХ) комбинаторными библиотеками нуклеиновых кислот для того, чтобы связывать с большим количеством мишеней. Подобные олигонуклеотиды называются аптамеры. Их отбирали направленными не только против белков, но также против пептидов и непептидных молекул. Их специфичность и сродство с мишенями можно сравнивать со специфичностью и сродством антител. В научной литературе производят обзоры потенциала для развития аптамеров в качестве лекарственных средств.
Ловушки.
Ловушка представляет собой олигонуклеотид, сконструированный в соответствии с согласованной последовательностью нуклеиновых кислот, узнаваемый конкретным белком, таким как факторы транскрипции, для того, чтобы препятствовать взаимодействию с геномной ДНК мишенью. Ловушки факторов транскрипции представляют собой молекулы, которые имитируют связывающие сайты белков факторов транскрипции и конкурируют с областями промоторов для того, чтобы нейтрализовать данную связывающую активность в ядрах клеток. Белки факторов транскрипции регулируют экспрессию генов путем связывания со специфическими последовательностями ДНК, обнаруженными в области промотора/энхансера генов, которые они контролируют. Хотя большинство связей факторов транскрипции связаны с усилением экспрессии генов, также описывается супрессия генов. Блокируя взаимодействие фактора транскрипции с хромосомной ДНК, ловушки предоставляют мощные средства для воздействия на регуляцию экспрессии генов, особенно по мере того, как факторы транскрипции становятся все больше и больше понятными для того, чтобы изменять экспрессию генов в процессе протекания нормальных и патологических процессов в биологических клетках.
Внутриклеточные антитела.
Сочетая сильную специфичность и высокое антигенсвязывающее сродство, интратела используют в качестве биотехнологического средства для того, чтобы прерывать, модулировать и определять функции широко спектра антигенов мишеней на посттрансляционном уровне. Интратело представляет собой антитело, которое было сконструировано для того, чтобы внутриклеточно экспрессироваться, и которое может быть направлено на специфическое антитело-мишень, представленное в различных субклеточных локализациях, включая цитозоль, ядра, эндоплазматический ретикулум (ЕК), митохондрии, пероксисомы, плазматическую мембрану и комплекс Гольджи (ΤΟΝ), путем лигирования с внутриклеточным транспортом/локализацией пептидных последовательностей. Хотя интратела могут быть экспрессированы в различных формах. Наиболее обычно используемый формат представляет собой одноцепочечное антитело (ксБу АЬ), созданное посредством объединения различных антигенсвязанных доменов тяжелой
- 15 017613 и легкой цепи с межцепочечным линкером (1СЬ), наиболее часто 15 аминокислотным линкером (00008)(3) между различными тяжелыми (УН) и различными легкими (УЪ) цепочками. Интратела использовали в изучении рака, Н1У, аутоиммунного заболевания, нейродегенеративного заболевания и трансплантации. Используя преимущество высокой специфичности и сродства антитела для его антигена и, практически, неограниченное разнообразие антигенсвязывающих различных доменов, доступных для молекулярного воздействия, интратела технологии выступают, как многообещающие инструменты для того, чтобы создать фенотипический нокаут для того, чтобы управлять биологическими процессами и чтобы получить более детальное понимание геномного функционала.
ТОР-β связывающие белки.
Рецептор III типа ТОР-β, известный также как бетагликан, представляет собой закрепленный на мембране протеогликан, который представляет ТОР-β к сигнальному рецептору II типа. Внеклеточный участок данного рецептора может быть сброшен клеткой в среду. Растворимый бетагликан связывает ТОР-β, но не укрепляет связывание с мембранными рецепторами. По существу, рекомбинантный растворимый бетагликан действует в качестве патентного ингибитора связывания ТОР-β с мембранными рецепторами и блокирует функционирование ТОР-β. Данный результат особенно ясно выражен с изоформой ТОР-(!2. Воздействие рекомбинантным рецептором III типа ТОР-β (растворимый КШ) ингибировал ангиогенез и рост опухоли в ксенотрансплантатах рака молочной железы человека и значительно снижал число метастазов в легком и подмышечных лимфатических узлах в данных моделях. Растворимый рецептор II ТОР-β, похоже, имеет такие же свойства, и как было показано, супрессирует онкогенные свойства в мышиной опухолевой модели. Конституциональная экспрессия растворимого антагониста ТОР-β, который включает в свою структуру внеклеточный домен рецептора II типа, защищает от метастазирования в мышиной модели. Похоже, что ингибиторы, воздействующие на ТОР-β рецептор I типа серинтреонин киназу, имеют подобное действие.
Стратегии терапии опухолевых генов.
Успехи молекулярной и опухолевой биологии сильно повлияли на наше понимание генетических изменений, связанных с преобразованием опухоли. Таким образом, были предложены стратегии генной терапии, которые наметили специфические изменения для опухолевых клеток и опухолевой патофизиологии. Данные стратегии воздействия включают, среди других, мутационную компенсацию и иммунопотенцирование.
Мутационная компенсация.
Мутационная компенсация включает коррекцию генетических повреждений, которые являются этиологическими для злокачественного перерождения. Данная стратегия генной терапии известна также, как коррекционная генная терапия, и фокусируется на функциональной абляции экспрессивнонеуправляемых онкогенов, обновлении или аугментации экспрессии опухолесупрессорных генов или вмешательствах в пути передачи сигнала некоторых факторов роста или других биохимических процессах, которые оказывают влияние на появление или развитие опухоли. Яркими примерами данной стратегии генной терапии являются восстановление нормального функционирования опухолесупрессирующих генов и блокирование онкогенной активности. В генно-терапевтической стратегии мутационной компенсации было использовано несколько подходов. Они включают антисмысловые олигонуклеотиды, каталитические рибозимы и небольшие олигонуклеотиды, доминантно-отрицательные генные мутации и, совсем недавно, технология малой интерферирующей РНК (ыРНК).
Иммунопотенциация.
Модулирование иммунного ответа является особенно привлекательным в качестве разновидности раковой генной терапии. Ключевым фокусом опухолевой генной терапии является усиление способности иммунных систем разрушать опухолевые клетки. Пассивная иммунопотенциация заключается в усилении естественного иммунного ответа для того, чтобы сделать его более эффективным. Активная иммунопотенциация требует инициирование иммунного ответа против неопознанной предварительной опухоли. Иммунопотенциальная генная терапия использует такие стратегии, как экспрессия генов цитокина, который может усилить активность антиген-презентирующих клеток и Т-клеток, экспрессию костимулирующих молекул, таких как В7.1 и В7.2, которые облегчают распознавание и уничтожение опухолевых клеток или доставку экзогенных иммуногенов, которые вызывают локальные воспалительные реакции, повышающие способность антиген-презентирующих клеток узнавать опухолеассоциированные антигены.
Несмотря на то что настоящее изобретение описано довольно подробно для целей ясности и понимания, любому специалисту в данной области техники следует понимать, что может быть произведен ряд изменений в форме и деталях, не выходя из объема правомерных правовых притязаний изобретения. Все чертежи, таблицы и приложения, равно как и патенты, заявки и публикации, относящиеся к вышеизложенному, являются, таким образом, включенными посредством ссылки.
Claims (16)
1. Композиция для стимуляции универсального иммунного ответа у больного любым типом рака, где указанная композиция содержит смесь двух или более различных типов аллогенных опухолевых клеток, где по меньшей мере один тип указанной аллогенной опухолевой клетки содержит опухолевые стволовые клетки, причем для каждого из типов опухолевых клеток характерна секреция иммуносупрессивного средства, которое представляет собой ТСЕ-β, РСЕ-2 или СТЬА-4, каждый из типов опухолевых клеток генетически модифицирован и ингибирует экспрессию или активность указанного иммуносупрессивного средства, а различные типы клеток в указанной смеси совместно экспрессируют связанные с опухолью антигены таким образом, что представлен весь спектр связанных с опухолью антигенов, представляющий все типы рака.
2. Композиция по п.1, где указанная смесь аллогенных опухолевых клеток содержит три или более различных типов аллогенных опухолевых клеток.
3. Композиция по п.2, где указанная смесь аллогенных опухолевых клеток содержит четыре или более различных типов аллогенных опухолевых клеток.
4. Композиция по п.3, где указанная смесь аллогенных опухолевых клеток содержит пять или более различных типов аллогенных опухолевых клеток.
5. Композиция по п.4, где указанная смесь аллогенных опухолевых клеток содержит восемь или более различных типов аллогенных опухолевых клеток.
6. Композиция по любому из пп.1-5, дополнительно содержащая генетически модифицированную аллогенную клетку, экспрессирующую цитокин.
7. Композиция по п.6, где указанный цитокин представляет собой 1Ь-2.
8. Композиция по п.6 или 7, где указанная аллогенная клетка, экспрессирующая цитокин, представляет собой фибробласт.
9. Композиция по любому из пп.1-8, где указанная генетическая модификация произведена с помощью гомологической рекомбинации.
10. Композиция по любому из пп.1-8, где указанная генетическая модификация генерирует антисмысловую молекулу.
11. Композиция по любому из пп.1-8, где указанная генетическая модификация генерирует рибозим.
12. Композиция по любому из пп.1-8, где указанная генетическая модификация генерирует РНК1 или 81РНК.
13. Композиция по любому из пп.1-12, где указанный тип рака включает рак толстой кишки, молочной железы, легких, предстательной железы, поджелудочной железы, почек, эндометрия, шейки матки, яичников, щитовидной железы или другую карциному или меланому железистой ткани, рак центральной нервной системы или лимфому.
14. Способ стимуляции иммунного ответа у больного раком пациента, включающий введение указанному больному композиции по любому из пп.1-13.
15. Способ стимуляции иммунного ответа у индивидуума с риском развития рака, включающий введение указанному индивидууму композиции по любому из пп.1-13.
16. Способ стимуляции иммунного ответа у индивидуума со скрытой формой рака, включающий введение указанному индивидууму композиции по любому из пп.1-13.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US87622206P | 2006-12-20 | 2006-12-20 | |
| PCT/US2007/088457 WO2008105978A1 (en) | 2006-12-20 | 2007-12-20 | Universal tumor cell vaccine for anti cancer therapeutic and prophylactic utilization |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200970607A1 EA200970607A1 (ru) | 2010-04-30 |
| EA017613B1 true EA017613B1 (ru) | 2013-01-30 |
Family
ID=39233098
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200970607A EA017613B1 (ru) | 2006-12-20 | 2007-12-20 | Универсальная вакцина из опухолевых клеток для противораковой терапии и профилактического использования |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8293252B2 (ru) |
| EP (2) | EP2101812A1 (ru) |
| JP (2) | JP2010514697A (ru) |
| KR (1) | KR20090107507A (ru) |
| AU (1) | AU2007347689B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0720689A2 (ru) |
| CA (1) | CA2673607A1 (ru) |
| EA (1) | EA017613B1 (ru) |
| ES (1) | ES2547958T3 (ru) |
| HU (1) | HUE027617T2 (ru) |
| MX (1) | MX2009006691A (ru) |
| NO (1) | NO20092339L (ru) |
| NZ (1) | NZ578181A (ru) |
| SG (1) | SG192304A1 (ru) |
| WO (1) | WO2008105978A1 (ru) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2342334A4 (en) * | 2008-09-29 | 2012-03-14 | Univ Pennsylvania | TARGETED VACCINES ON A TUMOR VASCULAR MARKER |
| CN106434648A (zh) * | 2010-07-19 | 2017-02-22 | F·C·贝内特 | 肌强直性营养障碍蛋白激酶(dmpk)表达的调节 |
| AU2012257377B2 (en) | 2011-05-17 | 2017-09-07 | Hadasit Medical Research Services And Development Ltd. | Allogeneic tumor cell vaccination |
| US20130095575A1 (en) * | 2011-10-03 | 2013-04-18 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods for Fractionation, Analysis and Collection of Microvesicles From Patient Samples |
| TW201536329A (zh) | 2013-08-09 | 2015-10-01 | Isis Pharmaceuticals Inc | 用於調節失養性肌強直蛋白質激酶(dmpk)表現之化合物及方法 |
| JP7246617B2 (ja) * | 2017-02-01 | 2023-03-28 | アクセルロン ファーマ インコーポレイテッド | 免疫活性の増加における使用のためのＴＧＦβおよびＡＣＴＲＩＩアンタゴニスト |
| WO2021113328A1 (en) * | 2019-12-03 | 2021-06-10 | Neuvogen, Inc. | Tumor cell vaccines |
| CN111351942B (zh) * | 2020-02-25 | 2024-03-26 | 北京尚医康华健康管理有限公司 | 肺癌肿瘤标志物筛选系统及肺癌风险分析系统 |
| AU2021368780A1 (en) * | 2020-11-02 | 2023-06-22 | Neuvogen, Inc. | Tumor cell vaccines |
| US11833221B2 (en) | 2021-09-01 | 2023-12-05 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds for reducing DMPK expression |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996002143A1 (en) * | 1994-07-18 | 1996-02-01 | Sidney Kimmel Cancer Center | Compositions and methods for enhanced tumor cell immunity in vivo |
| WO2001054716A2 (en) * | 2000-01-27 | 2001-08-02 | Sidney Kimmel Cancer Center | Genetically engineered tumor cell vaccines |
| WO2001074404A2 (en) * | 2000-03-31 | 2001-10-11 | Novarx | Compositions containing genetically modified lung cancer cells expressing a tgf-beta inhibitor |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6984522B2 (en) | 2000-08-03 | 2006-01-10 | Regents Of The University Of Michigan | Isolation and use of solid tumor stem cells |
| GB0406215D0 (en) * | 2004-03-19 | 2004-04-21 | Procure Therapeutics Ltd | Prostate stem cell |
-
2007
- 2007-12-20 EP EP07873860A patent/EP2101812A1/en not_active Withdrawn
- 2007-12-20 NZ NZ578181A patent/NZ578181A/en not_active IP Right Cessation
- 2007-12-20 ES ES11184308.2T patent/ES2547958T3/es active Active
- 2007-12-20 US US12/520,485 patent/US8293252B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-12-20 MX MX2009006691A patent/MX2009006691A/es not_active Application Discontinuation
- 2007-12-20 SG SG2012005021A patent/SG192304A1/en unknown
- 2007-12-20 EP EP11184308.2A patent/EP2404614B1/en not_active Not-in-force
- 2007-12-20 BR BRPI0720689-5A2A patent/BRPI0720689A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-12-20 HU HUE11184308A patent/HUE027617T2/en unknown
- 2007-12-20 KR KR1020097015217A patent/KR20090107507A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-12-20 JP JP2009543236A patent/JP2010514697A/ja not_active Withdrawn
- 2007-12-20 CA CA002673607A patent/CA2673607A1/en not_active Abandoned
- 2007-12-20 WO PCT/US2007/088457 patent/WO2008105978A1/en active Search and Examination
- 2007-12-20 AU AU2007347689A patent/AU2007347689B2/en not_active Ceased
- 2007-12-20 EA EA200970607A patent/EA017613B1/ru not_active IP Right Cessation
-
2009
- 2009-06-18 NO NO20092339A patent/NO20092339L/no not_active Application Discontinuation
-
2012
- 2012-10-23 US US13/658,688 patent/US20130064856A1/en not_active Abandoned
-
2013
- 2013-03-29 JP JP2013071300A patent/JP2013129677A/ja active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996002143A1 (en) * | 1994-07-18 | 1996-02-01 | Sidney Kimmel Cancer Center | Compositions and methods for enhanced tumor cell immunity in vivo |
| WO2001054716A2 (en) * | 2000-01-27 | 2001-08-02 | Sidney Kimmel Cancer Center | Genetically engineered tumor cell vaccines |
| WO2001074404A2 (en) * | 2000-03-31 | 2001-10-11 | Novarx | Compositions containing genetically modified lung cancer cells expressing a tgf-beta inhibitor |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2009006691A (es) | 2009-09-09 |
| EA200970607A1 (ru) | 2010-04-30 |
| EP2404614B1 (en) | 2015-06-17 |
| NZ578181A (en) | 2012-02-24 |
| AU2007347689A1 (en) | 2008-09-04 |
| AU2007347689A2 (en) | 2009-07-30 |
| ES2547958T3 (es) | 2015-10-09 |
| NO20092339L (no) | 2009-08-25 |
| AU2007347689B2 (en) | 2013-08-15 |
| JP2010514697A (ja) | 2010-05-06 |
| CA2673607A1 (en) | 2008-09-04 |
| SG192304A1 (en) | 2013-08-30 |
| KR20090107507A (ko) | 2009-10-13 |
| EP2404614A1 (en) | 2012-01-11 |
| US20130064856A1 (en) | 2013-03-14 |
| HUE027617T2 (en) | 2016-11-28 |
| EP2101812A1 (en) | 2009-09-23 |
| US20100047289A1 (en) | 2010-02-25 |
| JP2013129677A (ja) | 2013-07-04 |
| WO2008105978A1 (en) | 2008-09-04 |
| US8293252B2 (en) | 2012-10-23 |
| BRPI0720689A2 (pt) | 2014-02-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA017613B1 (ru) | Универсальная вакцина из опухолевых клеток для противораковой терапии и профилактического использования | |
| Wong et al. | Advances in therapeutic cancer vaccines | |
| JP6921750B2 (ja) | ペプチドミニ遺伝子発現系を含むリステリアベースの組成物およびその使用方法 | |
| EP1434596B1 (en) | Enhancement of immune responses by agonist 4-1bb-antibodies | |
| JP2018515588A (ja) | 個別化送達ベクターに基づく免疫療法とその使用 | |
| Hegazy et al. | Evaluation of Salmonella enterica type III secretion system effector proteins as carriers for heterologous vaccine antigens | |
| Motomura et al. | Embryonic Stem Cell–Derived Dendritic Cells Expressing Glypican-3, a Recently Identified Oncofetal Antigen, Induce Protective Immunity against Highly Metastatic Mouse Melanoma, B16-F10 | |
| Huang et al. | DNA vaccines for cervical cancer | |
| Aldrich et al. | Vaccines and immunotherapeutics for the treatment of malignant disease | |
| US10799579B2 (en) | Methods for enhancing antigen-specific immune responses | |
| Chen et al. | Recombinant DNA vaccines protect against tumors that are resistant to recombinant vaccinia vaccines containing the same gene | |
| Andreasson et al. | Murine pneumotropic virus chimeric Her2/neu virus‐like particles as prophylactic and therapeutic vaccines against Her2/neu expressing tumors | |
| Smorlesi et al. | Evaluation of different plasmid DNA delivery systems for immunization against HER2/neu in a transgenic murine model of mammary carcinoma | |
| Lv et al. | Suppression of breast tumor growth by DNA vaccination against phosphatase of regenerating liver 3 | |
| Payton et al. | Vaccination with metastasis-related tumor associated antigen TPD52 and CpG/ODN induces protective tumor immunity | |
| Lai et al. | The effects of DNA formulation and administration route on cancer therapeutic efficacy with xenogenic EGFR DNA vaccine in a lung cancer animal model | |
| JP2024504924A (ja) | 腫瘍及びがんを予防するための組成物及び方法 | |
| Chen et al. | Induction of humoral and cellular immune responses in mice by multiepitope vaccines composing of both T and B lymphocyte epitopes of MAGE-A3 which are recombined into HBcAg | |
| Cohen et al. | Enhancing cellular cancer vaccines | |
| TWI259206B (en) | A DNA vaccine containing a tumor associated gene and a cytokine gene and the method producing thereof | |
| EP1428879A1 (en) | Polynucleotide vaccine | |
| Tarhini et al. | Early development of the toll-like receptor 9 agonist, PF-3512676, for the treatment of patients with advanced cancers | |
| Recagni | SELF-AMPLIFYING RNA VECTORS ENCODING FOR SURVIVIN AS ANTI-TUMORAL VACCINE CANDIDATES | |
| Zappasodi et al. | Cancer vaccines and active immunotherapy | |
| KR20100023696A (ko) | Ｔａｔ-항원 융합단백질과 아쥬번트를 포함하는 백신 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM |
|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): RU |