EA013806B1 - Применение эритропоэтина для лечения миелобластного лейкоза - Google Patents
Применение эритропоэтина для лечения миелобластного лейкоза Download PDFInfo
- Publication number
- EA013806B1 EA013806B1 EA200900517A EA200900517A EA013806B1 EA 013806 B1 EA013806 B1 EA 013806B1 EA 200900517 A EA200900517 A EA 200900517A EA 200900517 A EA200900517 A EA 200900517A EA 013806 B1 EA013806 B1 EA 013806B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- erythropoietin
- days
- mice
- option
- experiment
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины и касается применения эритропоэтина, в частности эритропоэтина-бета, для лечения миелобластного лейкоза на начальной и развернутой стадиях, а также оптимальной схемы такого применения. Эритропоэтин является эффективным средством, расширяющим возможности лечения и улучшающим результаты терапии миелобластного лейкоза.
Description
Уровень техники
В течение 15 лет в онкогематологии широко используется рекомбинантный человеческий эритропоэтин с целью профилактики и лечения анемии, индуцированной интенсивной высокодозной химиотерапией. Наибольший эффект от применения эритропоэтина достигнут у больных с немиелоидными опухолями: неходжкинская лимфома, хронический лимфолейкоз, миеломная болезнь (1).
К настоящему времени накоплены многочисленные данные, свидетельствующие о том, что кроме стимуляции эритропоэза эритропоэтин обладает выраженной плейотропной активностью. В экспериментальных исследованиях изучается влияние эритропоэтина на опухолевую прогрессию. В частности, Μίί1е1шаи с1 а1. (2), используя модели мышиной множественной миеломы МОРС-315-1дА 1ашЬба и 5Т33 ММ-1дС, показали, что ежедневное введение мышам с множественной миеломой эритропоэтина в течение нескольких недель вызвало полную регрессию опухоли у 30-60% особей, увеличивая продолжительность их жизни и сокращая смертность. Ка1х О. е1 а1. (3), продолжая эксперименты по изучению влияния эритрпоэтина на течение множественной миеломы мышей, установили, что в противоопухолевых реакциях участвуют не только СЭ8(+) Т-лимфоциты, но и активированные В-лимфоциты. Было продемонстрировано влияние эритропоэтина на ускорение пролиферации спленоцитов, индуцированной ίη νίίτο липополисахаридом.
В экспериментах ίη νίίτο и ίη νίνο изучаются возможные механизмы влияния эритропоэтина на чувствительность злокачественных клеток к химио- и лучевой терапии (4). Рассматривая вопросы расширения использования эритропоэтина и его рецепторов, Ма1е8е К. еί а1. (5) отмечают, что они играют важную роль не только в системе кроветворения. С11ех/1 Р. еί а1. (6) анализируют механизмы действия эритропоэтина, не относящиеся к стимуляции эритропоэза, в частности, тканепротективные и восстановительные эффекты. Установлено, что эритропоэтин уменьшает проявления периферической нейропатии и кардиотоксичности, вызванные химиотерапией. Обсуждается применение эритропоэтина как цитопротективного агента для нейронов и клеток сердечно-сосудистой системы. Это касается назначения эритропоэтина при церебральной ишемии, инфаркте миокарда, хронической сердечной недостаточности. Эритропоэтин является модулятором клеточных процессов, таких как развитие стволовых клеток, клеточная интеграция и ангиогенез. Эритропоэтин ингибирует механизм апоптоза при травме, включая защиту клеточной мембраны и предотвращая воспаление. Изучая негематологические эффекты эритропоэтина и ЭПО - рецепторов, расположенных на клетках некроветворных тканей, Зеопд 8.В. еί а1. (7) показали возможность восстановления роста клеточных культур РА\У264.7 и РС12, из которой удалена фетальная бычья сыворотка, путем добавления эритропоэтина. Механизм восстановления роста клеток связан с экспрессией с-Ро§ и е-1ип, а также с активацией фактора транскрипции АР-1. Важные данные были получены Нагооп Ζ.Α. еί а1. (8) в эксперименте, заключавшемся в подкожной имплантации крысам камеры из полупроницаемой мембраны, где изучался процесс замещения фибрина, находящегося в камере, грануляционной тканью, содержащей новые кровеносные сосуды, макрофаги и фибробласты, т.е. компоненты репаративной реакции. Введение рекомбинантного эритропоэтина в фибриновый матрикс ускоряло образование грануляционной ткани. Для оценки роли эндогенного эритропоэтина в процессе заживления раны были использованы растворимые рецепторы эритропоэтина и анти-ЭПО моноклональные антитела, нейтрализующие эритропоэтин и вызывающие дозозависимую ингибицию образования грануляционной ткани. Показано, что способность эритропоэтина ускорять процесс заживления раны, ассоциирована с проангиогенезом, происходящем в грануляционной ткани. Была установлена выраженная экспрессия ЭПО - рецепторов на макрофагах - клетках, играющих важнейшую роль в репарации раны. Возможность модуляции процесса заживления раны путем назначения эритропоэтина демонстрирует новое направление его использования при развитии фибрин-индуцированного раневого процесса.
В обзорной статье (9) приводятся подтверждения плейотропной активности эритропоэтина. Доказано, что эритропоэтин действует не только на эритроидные клетки, но и на миелоидные, на лимфоциты и мегакариоциты. Этот гормон способен активизировать фагоцитарную функцию полиморфноядерных клеток, модулируя таким образом воспалительный процесс. Рецепторы к эритропоэтину найдены на эндотелиальных и мезангиальных клетках, на миокардиоцитах, на гладкомышечных клетках и нейронах. Эти открытия стимулируют исследования негематологических эффектов эритропоэтина.
В настоящее время к нерешенным проблемам онкогематологии относится ограниченное использование эритропоэтина при лечении миелоидных опухолей, в частности, миелобластного лейкоза.
Миелобластный лейкоз - злокачественное заболевание, поражающее миелоидный росток кроветворения и сопровождающееся накоплением миелобластов с вытеснением всех остальных клеток из крови и костного мозга. Основным современным методом лечения миелобластного лейкоза является химиотерапия с применением миелотропного цитостатика - цитарабина, который можно рассматривать как наиболее близкий аналог заявленного изобретения. К недостаткам указанного средства относится его высокая токсичность, которая ведет к поражению жизненно важных органов и систем и развитию фатальных осложнений.
Таким образом, задачей изобретения является поиск высокоэффективного средства и разработка схемы его применения для лечения миелобластного лейкоза. Задача решается за счет применения эритропоэтина бета.
- 1 013806
Осуществление изобретения
В качестве объекта исследования использованы мыши линии ΆΚΚ/1Υ. Мыши получали стандартный лабораторный корм, воду из автопоилок, содержались в общих клетках при комнатной температуре и естественном световом дне.
Мыши линии ΆΚΚ являются короткоживущими, со средней продолжительностью жизни около 12 месяцев и характеризуются высокой частотой (80-95%) развития спонтанного лейкоза в возрасте от 8 до 9 месяцев. Существует несколько субтипов спонтанного лейкоза, которые можно использовать для получения перевивных лейкозов.
Для достижения поставленных задач была выбрана модель перевивного миелобластного лейкоза.
Методика создания перевивного лейкоза
Мышь с явными признаками спонтанного лейкоза подвергали декапитации. В асептических условиях из брюшной полости мыши извлекалась селезенка, измельчалась ножницами, на капроновом фильтре перетиралась стеклянной палочкой. Суспензия селезеночных клеток готовилась на изотоническим растворе хлорида натрия до конечной концентрации 0,01%.
Для создания перевивного лейкоза отбирались мыши линии ΆΚΚ/1Υ в возрасте 2-3 месяцев. Интраперитонеально каждой из них вводилась подготовленная предварительно суспензия селезеночных клеток по 0,5 мл.
В зависимости от распространенности злокачественного процесса перевивной лейкоз подразделяется на три стадии:
начальная (умеренная инфильтрация некоторых органов опухолевыми клетками);
развернутая (выраженная инфильтрация опухолевыми клетками большинства органов); терминальная (тотальная метаплазия злокачественными клетками всех органов).
Особенности развития данной модели перевивного лейкоза заключаются в том, что злокачественный процесс прогрессирует значительно быстрее, чем развивается анемия.
Оценка влияния эритропоэтина бета на культуру кроветворных клеток-предшественников, выделенных из селезенок мышей
Целью данного исследования являлся поиск дозы эритропоэтина бета, эффективно стимулирующей колониеобразование в культуре мышиных кроветворных клеток-предшественников.
Из селезенки мыши готовится суспензия клеток, из которой выделяют клетки-мишени в концентрации 2-4· 104 и добавляют 1 мл метилцеллюлозной среды Ме1ИоСи11 (81етСе11 ТееИпоЬддез). Культивирование осуществляется в течение 14 суток в СО2 - инкубаторе 8апуо - МСО. По окончанию культивирования производится подсчет колоний и кластеров с использованием инвертированного микроскопа ЛОМО Биолам П-1.
Проведено 10 экспериментов.
В качестве контроля использован стандартный Ме1йоСи11, содержащий 3 и\т1 эритропоэтина.
В экспериментальные чашки добавлялся эритропоэтин бета в количестве 9 и\т1, т.е. в 3 раза больше, чем в контроле и 28 и\т1, т.е. в 9 раз больше, чем в контроле. При содержании эритропоэтина в культуральной среде 9 и\т1, стимуляции колониеобразования не получено. При содержании эритропоэтина 28 и\т1 в среде отмечен рост макрофагальных колоний. Результаты исследования представлены в табл. 1.
Таблица 1. Влияние эритропоэтина бета на колониеобразующую способность кроветворных клетокпредшественников, выделенных из селезенки мыши
Контроль 3 и\т1 ЭПО (N = 3) | Смешанные колонии | Эритроидные колонии | Г ранулоцитарные колонии | Макрофагальные колонии 19 |
Эритропоэтин 28 и\т1 ЭПО (N = 7) | 1 | 1 | 7 | 44 |
Таким образом, при проведении культуральных исследований установлено, что колониестимулирующим эффектом обладает доза эритропоэтина, превышающая нормальный уровень эритропоэтина не менее чем в 9 раз. При этом отмечен рост преимущественно макрофагальных колоний.
Изучение влияния эритропоэтина бета на течение миелобластного перевивного лейкоза у мышей инбредной линии ΑΚΚ/1Υ
Эксперименты выполнены на 56 мышах (32 и 24 ?) линии ΑΚΚ./1Υ поколений Р 210-212. Возраст самцов составил 126+13,5 (п = 32) суток. Масса тела самцов 25,9+0,9 (п = 32) г. Возраст самок составил 117+5,5 (п = 24) суток. Масса тела самок 23,0+0,55 (п = 24) г.
Мыши были разделены на контрольную и опытную группы случайным образом с ограничением на
- 2 013806 рандомизацию по возрасту и массе тела. Всем животным перевит 94-й пассаж миелобластного лейкоза. В тот же день им начато внутрибрюшное введение физиологического раствора (контрольная группа) по 0,5 мл и раствора эритропоэтина бета (опытная группа) по 0,5 мл. Введение осуществлялось ежедневно, кроме выходных дней. Доза эритропоэтина составила 1000 МЕ/кг. Сравнительная оценка продолжительности жизни проведена через 20 суток.
Через 20 суток после инокуляции лейкозных клеток количество оставшихся в живых мышей опытной группы составило 15, погибло 13. В контрольной группе живых мышей осталось 8, погибло 19. В целом, средняя продолжительность жизни животных опытной группы (п=27) составила 19,7±0,306 суток, в контрольной группе (п=25) - 18,7±0,29 суток (Р < 0,05).
Таким образом, эритропоэтин бета обеспечил продление жизни мышам линии ΑΚΚ/1Υ с перевивным миелобластным лейкозом.
С целью определения наиболее эффективной схемы лечения миелобластного перевивного лейкоза у мышей инбредной линии ΛΚΡ/ΙΥ проведено сравнение результатов двух экспериментов. В первом эритропоэтин бета применялся в течение 13 дней и во втором - в течение 7 дней. Других различий между схемами лечения не было. Каждое экспериментальное исследование включало 4 варианта (в 1-м вводился физиологический раствор, во 2-м - эритропоэтин, в 3-м - цитарабин, в 4-м - эритропоэтин с цитарабином).
Статистическая обработка материала
Все показатели представлены в виде среднего ± одно стандартное отклонение среднего значения (М ± т).
Результаты исследований подвергнуты статистической обработке с использованием 1-критерия Стьюдента, критериев для исключения выскакивающих значений варианта и непараметрического критерия и (1), а также математического аппарата для обработки многофакторных экспериментов (10,11).
Изучение эффективности лечения миелобластного перевивного лейкоза у мышей инбредной линии ΑΚΚ/ΊΥ при использовании эритропоэтина бета в течение 13 дней
Эксперимент выполнен на 40 самках мышей инбредной линии ΑΚΚ/ΤΥ поколения Е 212. Возраст мышей составил 124,4 ± 2,7 дня. Масса тела - 22,6 ± 0,73 г. Продолжительность опыта - 20 дней.
Мыши были разделены на 4 варианта случайным образом с ограничением на рандомизацию по возрасту и массе тела. Всем животным перевит 99-й пассаж миелобластного лейкоза. В тот же день им начато внутрибрюшное введение растворов по следующее схеме.
вариант - в течение четырех дней однократное введение физиологического раствора, затем в течение пяти дней двукратное введение физиологического раствора, затем в течение четырех дней однократное введение физиологического раствора.
вариант - в течение четырех дней введение эритропоэтина бета, затем в течение пяти дней введение эритропоэтина бета и физиологического раствора, затем в течение четырех дней введение эритропоэтина бета.
вариант - в течение четырех дней введение физиологического раствора, затем в течение пяти дней введение цитарабина и физиологического раствора, затем в течение четырех дней введение физиологического раствора.
вариант - в течение четырех дней введение эритропоэтина бета, затем в течение пяти дней введение эритропоэтина бета и цитарабина, затем в течение четырех дней введение эритропоэтина бета.
Доза эритропоэтина составила 1000 МЕ/кг. Доза цитарабина составила 0,003 мг на кг.
Были изучены: продолжительность жизни животных, снижение массы тела в ходе исследования, масса органов после завершения эксперимента.
Результаты
Продолжительность жизни мышей в зависимости от варианта применения исследуемых препаратов представлена в табл. 2.
- 3 013806
Таблица 2. Продолжительность жизни мышей линии ΆΚΚ/ΊΥ при введении эритропоэтина в течение 13 дней
Статист, показатели | Дата рождения | Дата гибели | Возраст к началу эксперимента (в сутках) | Длительность жизни в эксперименте (в сутках) |
Вариант 1 | ||||
25.02.2007 | 06.08.2007 | 149 | 13 | |
25.02.2007 | 06.08.07(3) | 149 | 13 | |
15.03.2007 | 13.08.07(3) | 131 | 20* | |
15.03.2007 | 06.08.2007 | 132 | 13 | |
25.03.2007 | 07.08.2007 | 121 | 14 | |
25.03.2007 | 08.08.2007 | 121 | 15 | |
26.03.2007 | 07.08.2007 | 117 | 14 | |
26.03.2007 | 08.08.2007 | 117 | 15 | |
09.04.2007 | 12.08.2007 | 106 | 19* | |
23.04.2007 | 08.08.2007 | 91 | 15 | |
η | 8 | 8 | ||
М | 124,4 | 14 | ||
18,9 | 0,93 | |||
т | 6,7 | 0,327 | ||
Вариант2 | ||||
25.02.2007 | 10.08.2007 | 149 | 17 | |
25.02.2007 | 08.08.2007 | 149 | 15 | |
08.03.2007 | 09.08.2007 | 138 | 16 | |
19.03.2007 | 09.08.2007 | 127 | 16 | |
22.03.2007 | 06.08.07(3) | 124 | 13 | |
25.03.2007 | 09.08.2007 | 121 | 16 | |
26.03.2007 | 08.08.2007 | 120 | 15 | |
26.03.2007 | 12.08.2007 | 106 | 19 | |
09.04.2007 | 12.08.2007 | 92 | 19 | |
23.04.2007 | 10.08.2007 | 17 | ||
η | 10 | 10 | ||
М | 124,6 | 16,3 | ||
17,8 | 1,829 | |||
т | 5,6 | 0,978 | ||
(Р=0,98) | (Р1-2<0,01) | |||
Вариант 3 | ||||
25.02.2007 | 11.08.2007 | 149 | 18 | |
25.02.2007 | 09.08.2007 | 149 | 16 | |
08.03.2007 | 10.08.2007 | 138 | 17 |
19.03.2007 | 08.08.2007 | 127 | 15 | |
20.03.2007 | 11.08.2007 | 126 | 18 | |
25.03.2007 | 09.08.2007 | 121 | 16 | |
26.03.2007 | 10.08.2007 | 120 | 17 | |
26.03.2007 | 13.08.07(3) | 120 | 20 | |
27.03.2007 | 06.08.07(3) | 119 | 13 | |
11.04.2007 | 10.08.2007 | 104 | 17 | |
η | 10 | 10 | ||
М | 126,4 | 16,7 | ||
15,1 | 1,888 | |||
гл | 4,8 | 0,597 | ||
(Р=0,8) | (Ρ1.3<0,01ύ | |||
Вариант 4 | ||||
08.03.2007 | 08.08.2007 | 138 | 15 | |
25.02.2007 | 09.08.2007 | 149 | 16 | |
08.03.2007 | 10.08.2007 | 152 | 17 | |
19.03.2007 | 09.08.2007 | 126 | 16 | |
19.03.2007 | 09.08.2007 | 126 | 16 | |
25.04.2007 | 10.08.2007 | 90 | 17 | |
25.03.2007 | 13.08.07(3) | 121 | 20 | |
26.03.2007 | 09.08.2007 | 120 | 16 | |
27.03.2007 | 06.08.07(3) | 119 | 13 | |
11.04.2007 | 11.08.2007 | 104 | 18 | |
η | 10 | 10 | ||
М | 126,2 | 16,4 | ||
22,1 | 1,838 | |||
гл | 7 | 0,58 | ||
(Р=0,8) | (Р1-4<0,01) |
- 4 013806
Результаты измерения массы органов у мышей (в граммах), полученные в ходе эксперимента и при его завершении, представлены в табл. 3.
Таблица 3. Массы органов мышей линии ΛΚΚ/1Υ, полученные в эксперименте с введением эритропоэтина бета в течение 13 дней
стат, показатели | м.селезенки | м. тимуса | м. сердца | м.печени | м. почек | м. брюш. л/у |
Вариант 1 | ||||||
0,3 | 0,155 | 0,142 | 2,55 | 0,339 | 0,164 | |
0,35 | 0,198 | 0,107* | 2,2 | 0,207 | 0,104 | |
0,415 | 0,137 | 0,133 | 2,4 | 0,249 | 0,25 | |
0,384 | 0,145 | 0,138 | 1,54* | 0,138* | 0,15 | |
0,283 | 0,136 | 0,125 | 2,4 | 0,346 | 0,335 | |
0,372 | 0,175 | 0,138 | 2,57 | 0,297 | 0,117 | |
0,405 | 0,111 | 0,135 | 2,5 | 0,297 | 0,188 | |
0,457 | 0,101 | 0,128 | 2,32 | 0,313 | 0,113 | |
0,385 | 0,1 | 0,114 | 2,55 | 0,275 | 0,237 | |
0,33 | 0,176 | 0,123 | 2,47 | 0,3 | 0,131 | |
η | 10 | 10 | 9 | 9 | 9 | 10 |
М | 0,388 | 0,143 | 0,131 | 2,44 | 0,291 | 0,179 |
0,05534 | 0,0333 | 0,0089 | 0,123 | 0,0434 | 0,0715 | |
т | 0,0105 | 0,0105 | 0,003 | 0,041 | 0,0145 | 0,0236 |
- 5 013806
Вариант 2 | ||||||
0,533 | 0,11 | 0,135 | 3,2 | 0,314 | 0,287 | |
0,6 | 0,053 | 0,132 | 3,15 | 0,286 | 0,203 | |
0,609 | 0,14 | 0,135 | 2,75 | 0,289 | 0,149 | |
0,697 | 0,135 | 0,128 | 3,05 | 0,3 | 0,244 | |
0,326* | 0,076 | 0,13 | 1,5* | 0,275 | 0,085 | |
0,696 | 0,105 | 0,158* | 3,17 | 0,302 | 0,152 | |
0,579 | 0,094 | 0,123 | 2,65 | 0,138* | 0,225 | |
0,469 | 0,0068 | 0,102* | 2,6 | 0,259 | 0,2 | |
0,465 | 0,083 | 0,11* | 2,75 | 0,277 | 0,237 | |
0,692 | 0,175 | 0,131 | 3,4 | 0,293 | 0,267 | |
η | 9 | 10 | 7 | 9 | 9 | 10 |
М | 0,593 | 0,104 | 0,131 | 2,97 | 0,288 | 0,205 |
0,0916 | 0,0374 | 0,042 | 0,286 | 0,0165 | 0,0614 | |
ΠΊ | 0,0305 | 0,0118 | 0,0016 | 0,095 | 0,0055 | 0,0194 |
Вариант 3 | ||||||
0385 | 0Д85 | η 1 ς? | э 7^ <-/Ζ -ζ | Л 944 '-'л-' · | Л 1Я7 | |
0,265 | 0,067 | 0,125 | 2 | 0,291 | 0,173 | |
0,33 | 0,139 | 0,139 | 2,2 | 0,28 | 0,215 | |
0,382 | 0,135 | 0,118 | 2,27 | 0,29 | 0,145 | |
0,347 | 0,103 | 0,131 | 2,15 | 0,332 | 0,2 | |
0,365 | 0,121 | 0,139 | 2,59 | 0,33 | 0,086 | |
0,319 | 0,08 | 0,132 | 2,19 | 0,353 | 0,335 | |
0,415 | 0,137 | 0,133 | 2,4 | 0,249 | 0,25 | |
0,052* | 0,037 | 0,109 | 0,97* | 0,226 | нет | |
0,299 | 0,121 | 0,137 | 1,95 | 0,277 | 0,122 | |
η | 9 | 10 | 10 | 9 | 10 | 9 |
М | 0,345 | 0,112 | 0,132 | 2,28 | 0,297 | 0,19 |
0,047 | 0,0423 | 0,012 | 0,262 | 0,0419 | 0,0734 | |
т | 0,0157 | 0,0134 | 0,0038 | 0,087 | 0,0132 | 0,0245 |
Вариант 4 | ||||||
0,487 | 0,122 | 0,134 | 2,95 | 0,295 | 0,184 | |
0,472 | 0,088 | 0,136 | 2,3 | 0,291 | 0,202 | |
0,444 | 0,127 | 0,122 | 2,1 | 0,251 | 0,262 | |
0,549 | 0,127 | 0,141 | 2,57 | 0,329 | 0,155 | |
0,41 | 0,109 | 0,137 | 1,95 | 0,272 | 0,105 | |
0,61 | 0,103 | 0,15 | 3,15 | 0,33 | 0,339 | |
0,411 | 0,15 | 0,117 | 2,55 | 0,244 | 0,35 | |
0,62 | 0,091 | 0,141 | 2,77 | 0,297 | 0,221 | |
0,031* | 0,044* | 0,096* | 0,77* | 0,218 | нет | |
0,514 | 0,112 | 0,155 | 3,4 | 0,323 | 0,169 | |
η | 9 | 9 | 9 | 9 | 10 | д |
м | 0,502 | 0,114 | 0,137 | 2,64 | 0,285 | 0,221 |
- | 0,047 | 0,0195 | 0,012 | 0,48 | 0,0383 | 0,0825 |
т | 0,0157 | 0,0065 | 0,004 | 0,16 | 0,0121 | 0,0275 |
Р(1.2)<0,001 | Ρ (ι-2)<0,05 | Р(1.2)<0,001 | ||||
Р(м)<0,01 | Ρ (ι-4)<0,05 | |||||
Р(2-3)<0,001 | Р(2.3)<0,001 | |||||
Р (2-4)<0,05 | ||||||
Р(з-4)<0,001 |
Мышей взвешивали перед началом проведения эксперимента и после завершения (ροδί тоИаНз). Результаты представлены в табл. 4.
- 6 013806
Таблица 4. Результаты снижения массы тела мышей линии ΆΚΚ/1Υ в эксперименте с введением эритропоэтина бета в течение 13 дней
стат, показатели | м.тела исходная | м.тела роз! тог1аН5 | Δ м.т.рш.-м.т. исх. |
Вариант 1 | |||
34,5 | 32 | -2,5 | |
24 | 22,5 | -1,5 | |
26,8 | 21,4 | -5,4* | |
31,3 | 29,1 | -2,2 | |
21,9 | 22,2 | 0,3 | |
23,9 | 21,3 | -2,6 | |
23,8 | 23,5 | -0,2 | |
19,9 | 20 | 0,1 | |
эп η | η и | ||
ζυ,ο | ±/,/ | -э,± | |
20,9 | 21,1 | 0,2 | |
η | 9 | ||
М | - 1,29 | ||
1,37 | |||
гл | 0,456 | ||
Вариант 2 | |||
25,5 | 24,7 | -0,8 | |
24,5 | 25,2 | 0,5 | |
22,3 | 22,7 | 0,4 | |
25,8 | 24,8 | -0,1 | |
22 | 21,7 | -0,3 | |
25,8 | 25,2 | -0,6 | |
21,5 | 22,9 | 1,4 | |
19,5 | 17,2 | -2,3 | |
20,7 | 18,1 | -2,6 | |
25,1 | 24,1 | -1 | |
η | 10 | ||
м | -0,5 | ||
1,23 | |||
т | 0,395 | ||
Вариант 3 | |||
18 | 30,9 | 28,8 | |
16 | 23,7 | 22,4 | |
17 | 23,4 | 25,1 | |
15 | 24,4 | 25,1 | |
18 | 23,9 | 21,8 | |
16 | 25,3 | 24,7 | |
17 | 23 | 22,5 | |
20 | 22,9 | 19,9 | |
13 | 20,7 | 20,2 | |
17 | 21,3 | 21,3 | |
η | 10 | ||
М | -0,77 | ||
1,41 | |||
т | 0,445 | ||
Вариант 4 |
24,4 | 24,4 | 0 | |
26,1 | 24,7 | -1,4 | |
20 | 20,2 | 0,2 | |
27,2 | 26,5 | -0,7 | |
22,2 | 22,9 | 0,7 | |
26,1 | 27,8 | 1,7 | |
21,9 | 18,7 | -3,2* | |
25,2 | 24,7 | -0,5 | |
20,1 | 20,1 | 0 | |
27,2 | 26,1 | -1,1 | |
η | 9 | ||
М | - 0,122 | ||
0,948 | |||
ш | 0,316 | ||
Ρ(ΐ-4ΐ <0,05 |
- 7 013806
Таким образом, продолжительность жизни мышей линии ЛКК./1У достоверно увеличивается во 2-м, 3-м и 4-м вариантах: при введении эритропоэтина, цитарабина и при их сочетанном использовании.
Изучение массы органов показало увеличение массы селезенки во 2-м и 4-м вариантах по сравнению с 1-м вариантом, при этом масса селезенки во 2-м варианте была больше, чем в 3-м и 4-м, а в 4-м больше, чем в 3-м.
Масса тимуса оказалась меньше во 2-м варианте, чем в 1-м и 4-м.
Масса печени во 2-м варианте превышает массу печени 1-го и 3-вариантов.
Снижение массы тела отмечено во всех вариантах, однако наименее выраженным оно является во 2-м и в 4-м вариантах.
Изучение эффективности лечения миелобластного перевивного лейкоза у мышей инбредной линии ΑΚΚ/ΊΥ при использовании эритропоэтина бета в течение 7 дней
Эксперимент выполнен на 24 самках мышей инбредной линии АКК./1У поколения Р 212. Возраст мышей составил 118,6 ± 3,76 дней. Масса тела 28,18 ± 1,48 г. Продолжительность опыта - 20 дней.
Мыши были разделены на 4 варианта случайным образом с ограничением на рандомизацию по возрасту и массе тела. Всем животным перевит 101-й пассаж миелобластного лейкоза. В тот же день им начато внутрибрюшное введение растворов по следующей схеме.
вариант - в течение четырех дней однократное введение физиологического раствора, затем в течение пяти дней двукратное введение физиологического раствора, далее - до конца эксперимента введение препаратов не проводилось.
вариант - в течение четырех дней введение эритропоэтина бета, затем в течение трех дней введение эритропоэтина бета и физиологического раствора, затем в течение двух дней физиологического раствора и далее до конца эксперимента введение препаратов не проводилось.
вариант - в течение четырех дней введение физиологического раствора, затем в течение пяти дней введение цитарабина и физиологического раствора, далее до конца эксперимента введение препаратов не проводилось.
вариант - в течение четырех дней введение эритропоэтина бета, затем в течение пяти дней введение эритропоэтина бета и цитарабина, далее до конца эксперимента введение препаратов не проводилось.
Доза эритропоэтина составила 1000 МЕ/кг.
Доза цитарабина составила 0,003 мг/кг.
Были изучены: продолжительность жизни животных, снижение массы тела в ходе исследования, масса органов после завершения эксперимента.
Результаты
Продолжительность жизни мышей в зависимости от варианта применения исследуемых препаратов представлена в табл. 5.
- 8 013806
Таблица 5. Продолжительность жизни мышей линии ΛΚΚ/1Υ при введении эритропоэтина в течение 7 дн ей
Стат. показатели | Дата рождения | Дата гибели | Возраст к началу эксперимента (в сутках) | Длительность жизни в эксперименте (в сутках) |
Вариант 1 | ||||
29.03.2007 | 04.09.2007 | 146 | 13 | |
05.04.2007 | 03.09.07(3) | 139 | 12 | |
29.04.2007 | 03.09.2007 | 115 | 12 | |
07.05.2007 | 06.09.07(3) | 108 | 15 | |
07.05.2007 | 04.09.07(3) | 108 | 13 | |
22.05.2007 | 05.09.2007 | 93 | 14 | |
η | 6 | 6 | ||
М | 118,2 | 13,2 | ||
- | 20,3 | ±1,17 | ||
т | 8,3 | ±0,48 | ||
Вариант2 | ||||
02.04.2007 | 04.09.07(3) | 142 | 13 | |
03.04.2007 | 07.09.2007 | 141 | 16 | |
29.04.2007 | 09.09.2007 | 115 | 18 | |
07.01.2007 | 09.09.2007 | 228 | 18 | |
12.05.2007 | 09.09.2007 | 102 | 18 | |
12.05.2007 | 09.09.2007 | 102 | 18 | |
η | 5 | 5 | ||
М | 120,1 | 17,6 | ||
20 | ±0,89 | |||
ш | Вариант 3 | 8,9 (Р-0,9) | ±0,4 | |
02.04.2007 | 04.09.07(3) | 142 | 13 | |
05.04.2007 | 09.09.2007 | 139 | 18 | |
29.04.2007 | 09.09.2007 | 115 | 18 | |
03.05.2007 | 09.09.2007 | 111 | 18 | |
12.05.2007 | 09.09.2007 | 102 | 18 | |
12.05.2007 | 09.09.2007 | 102 | 18 | |
η | 6 | 5 | ||
М | 118,5 | 18 | ||
17,8 | 0 | |||
т | Вариант 4 | 7,3 (Р=1) | 0 | |
03.04.2007 | 04.09.07(3) | 141 | 13 | |
05.04.2007 | 09.09.2007 | 139 | 18 | |
29.04.2007 | 09.09.2007 | 115 | 18 | |
29.04.2007 | 10.09.2007 | 115 | 19 | |
12.05.2007 | 09.09.2007 | 102 | 18 | |
21.05.2007 | 09.09.2007 | 93 | 18 | |
η | 6 | 5 | ||
М | 117,5 | 18,2 | ||
19,3 | ±0,45 | |||
т | 7,9 (Р=0,95) | ±0,2 |
Результаты измерения массы органов у мышей (в граммах), полученные в ходе эксперимента и при его завершении, представлены в табл. 6.
- 9 013806
Таблица 6. Массы органов мышей линии ΆΚΚ/1Υ, полученные в эксперименте с введением эритропоэтина бета в течение 7 дней
стат, показатели | м.селезенки | м.тимуса | м.сердца | м.печени | м.почек | м. брюш. л/у |
Вариант! | ||||||
0,25 | 0,128 | 0,188 | 2,82 | 0,433 | 0,096 | |
0,25 | 0,141 | 0,166 | 2,2 | 0,38 | 0,196 | |
0,27 | 0,038* | 0,119 | 2,5 | 0,038 | 0,185 | |
0,442 | 0,17 | 0,158 | 3,45 | 0,303 | 0,259 | |
0,136 | 0,101 | 0,136 | 1,22 | 0,295 | 0,04 | |
0,366 | 0,132 | 0,124 | 2,35 | 0,271 | 0,194 | |
η | 6 | 5 | 6 | 6 | 6 | |
М | 0,286 | 0,134 | 0,148 | 2,42 | 0,344 | |
• | 0,106 | 0,0249 | 0,0268 | 0,74 | 0,0631 | |
т | 0,0432 | 0,0112 | 0,0109 | 0,301 | 0,0258 |
Вариант 2
0,331 | 0,168 | 0,137 | 1,29 | 0,271 | 0,071 | |
0,784 | 0,253 | 0,179* | 4 | 0,41 | 0,182 | |
0,44 | 0,114 | 0,125 | 2,5 | 0,296 | 0,218 | |
0,448 | 0,138 | 0,14 | 3,05 | 0,361 | 0,25 | |
0,626 | 0,091 | 0,142 | 2,8 | 0,29 | 0,234 | |
0,605 | 0,13 | 0,125 | 2,8 | 0,296 | 0,273 | |
η | 6 | 6 | 5 | 6 | 6 | |
М | 0,539 | 0,149 | 0,134 | 2,74 | 0,321 | |
0,1633 | 0,057 | 0,0082 | 0,878 | 0,0534 | ||
т | 0,0666 | 0,0233 | 0,0037 | 0,398 | 0,0218 | |
Р п-21<0,01 | ||||||
Вариант 3 | ||||||
0,063* | 0,063 | 0,151 | 1,32 | 0,327 Ί | нет | |
0,275 | 0,167 | 0,182 | 2,25 | 0,342 | 0,43 | |
0,338 | 0,076 | 0,136 | 2,64 | 0,32 | 0,259 | |
0,255 | 0,115 | 0,139 | 2,7 | 0,329 | 0,195 | |
0,259 | 0,117 | 0,127 | 1,75 | 0,287 | 0,187 | |
0,393* | 0,105 | 0,153 | 2,75 | 0,361 | 0,418 | |
η | 4(6) | 6 | 6 | 6 | 6 | |
М | 0,282(0,283) | 0,107 | 0,148 | 2,24 | 0,328 | |
0,163(0,112) | 0,0365 | 0,0193 | 0,588 | 0,0246 | ||
т | 0,066(0,045) | 0,0149 | 0,0079 | 0,239 | 0,0105 | |
Рг2-зч<0,01 | ||||||
Вариант 4 | ||||||
0,239 | 0,094 | 0,14 | 1,37 | 0,395 | 0,055 | |
0,491 | 0,108 | 0,185* | 2,69 | 0,415 | 0,287 | |
0,494 | 0,145 | 0,143 | 2,59 | 0,314 | 0,214 | |
0,299 | 0,067 | 0,133 | 1,8 | 0,31 | 0,174 | |
0,367 | 0,205 | 0,135 | 1,9 | 0,319 | 0,362 | |
0,554 | 0,134 | 0,142 | 2,93 | 0,356 | 0,15 | |
η | 6 | 6 | 5 | 6 | 6 | |
М | 0,407 | 0,126 | 0,139 | 2,21 | 0,352 | |
0,1247 | 0,0479 | 0,0044 | 0,81 | 0,045 | ||
ш | 0,0509 | 0,0196 | 0,002 | 0,249 | 0,0184 |
Мышей взвешивали перед началом проведения эксперимента и после завершения (ροδί тоИаНз). Результаты представлены в табл. 7.
- 10 013806
Таблица 7. Результаты снижения массы тела мышей линии АКЕЛУ в эксперименте с введением эритропоэтина бета в течение 7 дней
стат, показатели | м.т.исходная | м.тела ροδί тог(а115 | Ам.т.рт.м.т.исх. |
Вариант 1 | |||
38,6 | 35,6 | -3 | |
42,5 | 38,4 | -4,1 | |
23,3 | 19,9 | -3,4 | |
33,8 | 32,1 | -1,7 | |
23 | 21,6 | -1,4 | |
23,1 | 21 | -1,3 | |
η | 6 | ||
М | -2,5 | ||
1,18 | |||
т | 0,48 | ||
Вариант 2 | |||
33,1 | 29 | '-4,1* | |
42 | 40 | -2 | |
23,2 | 21,7 | -1,5 | |
23,3 | 23,9 | '+0,6 | |
22,3 | 22 | -0,3 | |
24 | 22,4 | -1,6 | |
η | 5 | ||
М | -0,98 | ||
1,08 | |||
т | 0,48 | ||
Ря-2)<0,05 | |||
Вариант 3 | |||
32 | 27,8 | -4,2 | |
36,7 | 33 | -3,7 | |
24 | 22 | -2 | |
21,3 | 19,3 | -2 | |
22 | 18,5 | -3,5 | |
22,3 | 23,7 | '+0,7 | |
η | 6 | ||
М | -2,45 | ||
1,7 | |||
т | 0,73 | ||
Вариант 4 | |||
34,8 | 31,1 | -3,7 | |
38,2 | 34,9 | -з,з | |
24,2 | 22,6 | -1,4 | |
22,8 | 20,5 | -2,3 | |
21 | 20,6 | -0,4 | |
24,8 | 23 | -1,8 | |
η | 6 | ||
М | -2,15 | ||
1,22 | |||
т | 0,5 |
Таким образом, отмечена тенденция в увеличении продолжительности жизни мышей линии АКЕЛУ во 2-м, 3-м и 4-м вариантах: при введении эритропоэтина, цитарабина и при их сочетанном использовании.
Изучение массы органов показало увеличение массы селезенки во 2-м варианте по сравнению с 1-м
- 11 013806 и 3-м вариантами. Достоверной разницы в массе органов между другими вариантами не установлено.
Снижение массы тела отмечено во всех вариантах, однако наименее выраженным оно является во 2-м варианте.
Сравнительный анализ двух схем лечения миелобластного перевивного лейкоза у мышей инбредной линии ΑΚΚ/.1Υ с использованием эритропоэтина бета
При оценке различий в изменении массы тела мышей в ходе двух экспериментов установлено, что при 13-дневном применении эритропоэтина, меньше всего теряется масса во 2-м и 4-м вариантах, причем в 4-м варианте сохранение массы тела достоверно выше, чем в 1-м варианте (Р < 0,05). При 7-дневном применении эритропоэтина масса тела достоверно сохраняется во 2-м варианте (Р < 0,05).
Показатели продолжительности жизни мышей, а также динамика массы селезенки и массы печени подвергнуты анализу с помощью двухфакторного эксперимента 22 [12, 10].
Каждый фактор исследовался на двух уровнях.
Первый фактор - длительность применения эритропоэтина: верхний уровень - 13 дней, нижний уровень - 7 дней.
Второй фактор - влияние цитарабина: верхний уровень - с введением цитарабина, нижний уровень без цитарабина.
Таблица плана факторного эксперимента выглядит следующим образом:
Полный двухфакторный эксперимент 22
Факторы Функция отклика
Номер опыта
.....
1М|И111И1м | 1 | III··· | |11^ |
2 | +1 | -1 | У. |
111^· | 1 И1· | 111И11 ΐΐΐΐΐιΜίι | |
4 | +1 | +1 | у4 |
План состоит из четырех опытов.
Опыт № 1 - оба фактора на нижнем уровне: эритропоэтин применялся 7 дней, цитарабин не вводился.
Опыт № 2 - первый фактор - на верхнем уровне, второй фактор - на нижнем уровне: эритропоэтин применялся 13 дней, цитарабин не вводился.
Опыт № 3 - первый фактор - на нижнем уровне, второй фактор - на верхнем уровне: эритропоэтин применялся 7 дней, вводился цитарабин.
Опыт № 4 - оба фактора на верхнем уровне: эритропоэтин применялся 13 дней, вводился цитарабин.
По результатам эксперимента составлены уравнения регрессии типа у = Ь0 + Ь1х1 + Ь2х2 + Ь12х1х2, где у - продолжительность жизни мышей (в сутках);
х1 - фактор эритропоэтина;
х2 - фактор цитарабина;
х1х2 - взаимодействие обоих факторов (эритропоэтина и цитарабина); Ь0 - первый член уравнения, среднее значение исследуемого показателя всех четырех опытов факторного эксперимента, Ь1, Ь2, Ь12, стоящие перед знаками факторов, - это коэффициенты, указывающие на силу влияния данного фактора. Если модуль коэффициента |Ь| равен или превышает произведение ошибки в определении коэффициента регрессии (8Ь) на критерий Стьюдента (1) - |Ь| > 8Ь-1, то такой коэффициент считается достоверным, и данный фактор оказывает статистически достоверное влияние на исследуемый показатель. Знак +, стоящий перед коэффициентом, указывает на то, что под влиянием данного фактора исследуемый показатель увеличивается, знак- на то, что исследуемый показатель под влиянием данного фактора уменьшается.
Уравнение регрессии для оценки продолжительности жизни мышей в двух опытах имеет следующий вид:
у = 16,8 - 1,05х1 + 0,25х2 - 0,05х1х2, где у - продолжительность жизни мышей в сутках;
х1 - фактор эритропоэтина;
х2-фактор цитарабина;
х1х2 - взаимодействие двух факторов; |Ь| = 0,3.
Коэффициенты, стоящие перед знаками факторов х2 и х1х2, меньше критического значения 0,3, а перед фактором х1 - больше 0,3. Таким образом, у = 16,8 - 1,05х1. Следовательно, под влиянием эритропоэтина, применяемого в течение 7 дней, продолжительность жизни мышей увеличивается, а применение эритропоэтина в течение 13 дней сокращает продолжительность жизни. Цитарабин не оказал влияния на
- 12 013806 продолжительность жизни животных. Сочетанное применение эритропоэтина и цитарабина также не привело к увеличению продолжительности жизни.
Уравнение регрессии для оценки изменения массы селезенки мышей в двух опытах имеет следующий вид:
у = 0,533 + 0,022χι - 0,08х2 - 0,0065χιΧ2, где у - изменение массы селезенки в граммах;
χι - фактор эритропоэтина;
х2 - фактор цитарабина; χιχ2 - взаимодействие двух факторов; |Ь| = 0,046.
Таким образом, у = 0,533 - 0,08х2. Следовательно, масса селезенки под действием эритропоэтина достоверно не изменяется, а под влиянием цитарабина достоверно уменьшается.
Уравнение регрессии для оценки изменения массы печени мышей в двух опытах имеет следующий вид:
у = 2,68 - 0,0225х! - 2,68х2 + 0,0175χ!χ2, где у - изменение массы печени в граммах;
χ1- фактор эритропоэтина;
х2 -фактор цитарабина;
χ1χ2 - взаимодействие двух факторов; |Ь| = 0,21.
Таким образом, у = 2,68 - 2,68х2. Следовательно, масса печени под действием эритропоэтина достоверно не изменяется, а под влиянием цитарабина достоверно уменьшается.
Иммуногистохимическое исследование селезенки у мышей в ходе экспериментов
При изучении механизмов влияния эритропоэтина на течение миелобластного перевивного лейкоза проведен иммуногистохимический анализ селезенки с использованием поликлона 8-100 (ΚΤϋ) производства Пако СуЮтайоп. выявляющего интердигитальные дендритные клетки в лимфоидной ткани.
Оценка результатов проводилась по количеству 8-100 положительных (дендритных) клеток в селезенке мышей в поле зрения на 13 день эксперимента.
Установлено, что независимо от длительности применения эритропоэтина, содержание 8-100 положительных клеток оказалось существенно выше в селезенках мышей с перевивным лейкозом, получавших эритропоэтин и эритропоэтин с цитарабином, чем у мышей контрольной группы, получавших физиологический раствор и у мышей, получавших цитарабин.
Таким образом:
1. Эритропоэтин бета эффективно сдерживает развитие перевивного миелобластного лейкоза мышей линии ΆΚΚ/1Υ, что проявляется увеличением продолжительности жизни и сохранением массы тела животных.
2. Установлено, что обеспечение противоопухолевого действия на модели перевивного лейкоза связано с использованием высоких доз эритропоэтина бета, существенно превышающих эритропоэзстимулирующие дозы.
3. Разработана оптимальная схема применения эритропоэтина бета при лечении перевивного миелобластного лейкоза, которая заключается в назначении эритропоэтина в начальной и развернутой стадиях лейкоза. Использование эритропоэтина в терминальной стадии ведет к стимуляции лейкозного процесса.
4. В группах мышей с перевивным лейкозом, получавших эритропоэтин бета, обнаружено высокое содержание 8-100 положительных (дендритных) клеток в селезенках, что можно расценивать, как стимуляцию стромальных элементов и как один из возможных механизмов противоопухолевого действия эритропоэтина бета.
Список литературы
1. Зак К.П., Грыцюк С.Н. Эритропоэтины в онкологии. - Онкология.- 2001., т.3., № 2-3., с.107-109.
2. М1йе1шап М., Ыеитапп Ό, Ре1еб А, КагИег Р, Нагап-СНега N. Егу111горо1с1ш шбисек (итог гедгеккюп апб апШитог 1ттипе гекропкек ίη тигше туе1ота тобе1к. Ргос №111 Асаб 8с1 И8А. 2001 Арг 24; 98(9): 5181-6.
3. ΙΚ·ιΙζ О, Οί1 Ь, ЫГкН|1х Ь, РгШсЫ-8ад1У 8, Оакктапп М, М1йе1тап М, №итапп Ό. ЕгуШгороюбп епйапсек 1ттипе гекропкек ш тке., Еиг 1 1ттипо1. 2007 1ип; 37(6): 1584-93.
4. Нагбее М.Е, РаЬЬаш Ζ.Ν, Агсакоу М.О, с! а1. ЕгуИгороюйп шЫЬйк арорЮйк ш Ьгеак( сапсег се11к У1а ап Ак1-берепбеп1 раИгау \\й1юи1 тоби1айпд ш у1уо сйетокепкйзуйу. Мо1 Сапсег Тйег. 2006 ЕеЬ; 5(2): 356-61.
5. Ма1еке Κ, Ь1 Е, Сйопд ΖΖ. №ν ауепиек оГ еxр1о^аί^оη Гог егу111горо1еОп. 1АМА. 2005 Арг 20; 293(15): 1858; 1858-9.
6. Οίκζζί Р, Меηдоζζ^ М. АсОуШек оГ сгу111горо1е1ш оп (итогк: Ап 1ттипо1одюа1 регкресйуе. Еиг. 1. 1ттипо1. 2007 1ип; 37(6): 1427-30.
7. 8еопд 8.В, Ьее 1/Ψ, Ьее Υ.Κ, К1т Τ.Ι, 8оп Ό1, Мооп И.С, Υиη Υ/Ψ, Υооη бо Υ, Нопд 1.Т. 8йти1а1юп оГ се11 дго\\111 Ьу сгу111горо1е1ш ш К.А\С264.7 се11к: аккошайоп νίίΐι АР-1 асОуаОоп. Агсй РНагт Век. 2006 Маг; 29(3): 218-23.
8. Нагооп ΖΑ, Атш К, Лапд X, Агсакоу М.О. А поуе1 го1е Гог сгу111горо1еОп бигшд ДЬгш-шбисеб
- 13 013806 \уоипб-НеаНпд гекропке. Ат. б. Ра(Но1. 2003 8ер;163(3): 993-1000.
9. Виет1 Μ., Νοκ(γο Ь, Котео А. Εΐ а1. Ргот (Не охудеп ΐο (Не огдап рго(ес(юп: егу(Нгоро1е(т ак рго(адошк( ίη 1п(егпа1 тебкте. Сагбюгакс. Нета(о1. Адеп(к Меб. СНет. 2006 Ос(; 4(4): 299-311.
10. Воробьев Ф.П., Голобородько Η.Κ., Мануйлова А.М. Математическое планирование эксперимента в биохимии и медицине. Харьков. -Издательское объединение Вища школа., 1977, с. 20-27.
11. Лисенков А.Н. Математические методы планирования многофакторных медико-биологических экспериментов. М.- Медицина, 1979, с. 97-115.
12. Ашмарин И.П., Васильев Н.Н., Амбросов В.А. Быстрые методы статистической обработки и планирование экспериментов. Л., Издательство ЛГУ, 1971, 78 с.
Claims (4)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Применение эритропоэтина для лечения миелобластного лейкоза на начальной и развернутой стадиях.
- 2. Применение по п.1, отличающееся тем, что эритропоэтин представляет собой эритропоэтин бета.
- 3. Применение по п.1 или 2, отличающееся тем, что дозы эритропоэтина превышают эритропоэзстимулирующие дозы не менее чем в 3 раза.
- 4. Применение по любому из пп.1-3, отличающееся тем, что эритропоэтин вводится ежедневно.Евразийская патентная организация, ЕАПВРоссия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EA200900517A EA200900517A1 (ru) | 2009-04-01 | 2009-04-01 | Применение эритропоэтина для лечения миелобластного лейкоза |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EA200900517A EA200900517A1 (ru) | 2009-04-01 | 2009-04-01 | Применение эритропоэтина для лечения миелобластного лейкоза |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA013806B1 true EA013806B1 (ru) | 2010-08-30 |
EA200900517A1 EA200900517A1 (ru) | 2010-08-30 |
Family
ID=42779156
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA200900517A EA200900517A1 (ru) | 2009-04-01 | 2009-04-01 | Применение эритропоэтина для лечения миелобластного лейкоза |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
EA (1) | EA200900517A1 (ru) |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999052543A2 (en) * | 1998-04-08 | 1999-10-21 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Pharmaceutical compositions comprising erythropoietin for treatment of cancer |
-
2009
- 2009-04-01 EA EA200900517A patent/EA200900517A1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999052543A2 (en) * | 1998-04-08 | 1999-10-21 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Pharmaceutical compositions comprising erythropoietin for treatment of cancer |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Anargyrou K. et al.: Low dose melphalan is a treatment option in elderly patients with high risk myelodysplastic syndrome or secondary acute myeloblastic leukaemia. Haematologia (Budap). 2002;32(2): 169-73. [on-layn], [naydeno 2009.07.08]. Naydeno iz bazy dannykh PubMed PMID: 12412738 * |
Mashkovskiy M.D. Lekarstvennye sredstva. M., Novaya volna, 2005, s. 718 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EA200900517A1 (ru) | 2010-08-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
de Groot et al. | Effects of short-term fasting on cancer treatment | |
Chamseddine et al. | Modulating tumor-associated macrophages to enhance the efficacy of immune checkpoint inhibitors: A TAM-pting approach | |
Pentassuglia et al. | The role of Neuregulin-1β/ErbB signaling in the heart | |
Puhl et al. | Exercise attenuates inflammation and limits scar thinning after myocardial infarction in mice | |
Kantarjian et al. | Phase I study assessing the safety and tolerability of barasertib (AZD1152) with low-dose cytosine arabinoside in elderly patients with AML | |
Harris et al. | Comparison of short-term and continuous chemotherapy (mitozantrone) for advanced breast cancer | |
CZ154898A3 (cs) | Oligonukleotidy pro inhibici růstu nádorů zprostředkovaných IL-8 a receptorem IL-8 | |
Advani et al. | Report of the relapsed/refractory cohort of SWOG S0919: A phase 2 study of idarubicin and cytarabine in combination with pravastatin for acute myelogenous leukemia (AML) | |
EP3701949A1 (en) | Pharmaceutcal composition for preventing or treating cancer, containing streptonigrin and rapamycin as active ingredients | |
Wang et al. | Remote ischemic postconditioning protects against myocardial ischemia‐reperfusion injury by inhibition of the RAGE‐HMGB1 pathway | |
JP2013516500A (ja) | 炎症性疾患および障害を治療するための方法 | |
Guan et al. | Decitabine represses osteoclastogenesis through inhibition of RANK and NF-κB | |
US20220273688A1 (en) | Treatment of Glycosylation Deficiency Diseases | |
Follo et al. | Revisiting nuclear phospholipase C signalling in MDS | |
CN108603194A (zh) | 在癌症治疗中用作治疗剂的单羧酸转运蛋白4(mct4)反义寡核苷酸(aso)抑制剂 | |
Rajgarhia et al. | Extracellular superoxide dismutase (EC-SOD) regulates gene methylation and cardiac fibrosis during chronic hypoxic stress | |
Zhao et al. | Glycolytic inhibition with 3-bromopyruvate suppresses tumor growth and improves survival in a murine model of anaplastic thyroid cancer | |
Bladé et al. | Thalidomide in refractory and relapsing multiple myeloma | |
Liu et al. | Leucine-rich repeat kinase-2 deficiency protected against cardiac remodelling in mice via regulating autophagy formation and degradation | |
Schecter et al. | MDS: Refining existing therapy through improved biologic insights | |
Hofmann et al. | Treatment of patients with low-risk myelodysplastic syndromes using a combination of all-trans retinoic acid, interferon alpha, and granulocyte colony-stimulating factor | |
Simpson et al. | β-Aminopropionitrile-induced dissecting aneurysms of turkeys: Treatment with propranolol | |
Tada et al. | The novel IκB kinase β inhibitor IMD-0560 prevents bone invasion by oral squamous cell carcinoma | |
Fujiwara et al. | Effect of cumulative daunorubicin dose on cardiotoxicity after allogeneic stem cell transplantation | |
EA013806B1 (ru) | Применение эритропоэтина для лечения миелобластного лейкоза |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TK4A | Corrections in published eurasian patents | ||
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU |