EA011861B1 - Селективные агонисты рецепторов y2/y4 для терапевтического воздействия - Google Patents
Селективные агонисты рецепторов y2/y4 для терапевтического воздействия Download PDFInfo
- Publication number
- EA011861B1 EA011861B1 EA200601722A EA200601722A EA011861B1 EA 011861 B1 EA011861 B1 EA 011861B1 EA 200601722 A EA200601722 A EA 200601722A EA 200601722 A EA200601722 A EA 200601722A EA 011861 B1 EA011861 B1 EA 011861B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- agonist
- agd
- receptor
- amino acid
- use according
- Prior art date
Links
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 title claims abstract description 36
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 title description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 227
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims abstract description 37
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims abstract description 36
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims abstract description 36
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 30
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 30
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 30
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims abstract description 28
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims description 240
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 94
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 68
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 48
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 26
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 25
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims description 23
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 21
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 18
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 18
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 15
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 15
- 206010033307 Overweight Diseases 0.000 claims description 14
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 14
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 14
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 13
- -1 X denotes Ua1 Chemical compound 0.000 claims description 12
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 claims description 12
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 10
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 10
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 9
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 9
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 9
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 8
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 7
- 125000002801 octanoyl group Chemical group C(CCCCCCC)(=O)* 0.000 claims description 7
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 claims description 6
- 206010006550 Bulimia nervosa Diseases 0.000 claims description 6
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 6
- 208000032841 Bulimia Diseases 0.000 claims description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims description 5
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 claims description 5
- 229920000037 Polyproline Polymers 0.000 claims description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 5
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 claims description 5
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 claims description 5
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 5
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 claims description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims description 4
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 claims description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000002011 intestinal secretion Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 4
- 108010026466 polyproline Proteins 0.000 claims description 4
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 claims description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 3
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000002705 Glucose Intolerance Diseases 0.000 claims description 3
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 claims description 3
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000020694 gallbladder disease Diseases 0.000 claims description 3
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 claims description 3
- 230000004899 motility Effects 0.000 claims description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 201000010065 polycystic ovary syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 201000009104 prediabetes syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 3
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000007958 sleep Effects 0.000 claims description 3
- 125000003892 C18 acyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims description 2
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 claims description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 2
- 125000001419 myristoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 claims description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 2
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 claims description 2
- 241001070947 Fagus Species 0.000 claims 2
- 235000010099 Fagus sylvatica Nutrition 0.000 claims 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 claims 1
- IUHFWCGCSVTMPG-UHFFFAOYSA-N [C].[C] Chemical group [C].[C] IUHFWCGCSVTMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 claims 1
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 claims 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 abstract description 225
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 abstract description 223
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 91
- 102100038991 Neuropeptide Y receptor type 2 Human genes 0.000 abstract 1
- 101710197945 Neuropeptide Y receptor type 2 Proteins 0.000 abstract 1
- 102000028435 Neuropeptide Y4 receptor Human genes 0.000 abstract 1
- 108010002245 Neuropeptide Y4 receptor Proteins 0.000 abstract 1
- OFHCOWSQAMBJIW-AVJTYSNKSA-N alfacalcidol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C OFHCOWSQAMBJIW-AVJTYSNKSA-N 0.000 abstract 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 42
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 35
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 34
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 28
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 28
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 26
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 25
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 25
- 230000009471 action Effects 0.000 description 21
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 20
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 19
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 18
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 17
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 15
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 13
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 13
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 12
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 11
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 11
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 10
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 10
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 10
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 9
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 8
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- 235000019577 caloric intake Nutrition 0.000 description 7
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 6
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 6
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 6
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 5
- 102100029113 Endothelin-converting enzyme 2 Human genes 0.000 description 5
- 101710144982 Endothelin-converting enzyme 2 Proteins 0.000 description 5
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 5
- 210000003295 arcuate nucleus Anatomy 0.000 description 5
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 5
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 5
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 4
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 4
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 4
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 4
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 4
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 4
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 4
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 4
- 239000005428 food component Substances 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 4
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- 230000036186 satiety Effects 0.000 description 4
- 235000019627 satiety Nutrition 0.000 description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 4
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 3
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 3
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 3
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 3
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 230000008484 agonism Effects 0.000 description 3
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 3
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 3
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001262 anti-secretory effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 3
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- 239000000306 component Substances 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 230000030136 gastric emptying Effects 0.000 description 3
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 3
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 3
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 230000003518 presynaptic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 3
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 3
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- 210000002438 upper gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 230000001515 vagal effect Effects 0.000 description 3
- UQXNEWQGGVUVQA-UHFFFAOYSA-N 8-aminooctanoic acid Chemical compound NCCCCCCCC(O)=O UQXNEWQGGVUVQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000585591 Bos taurus Pancreatic prohormone Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 208000030814 Eating disease Diseases 0.000 description 2
- 208000019454 Feeding and Eating disease Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 108010008364 Melanocortins Proteins 0.000 description 2
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 2
- 241000594189 Neurogenia Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940122985 Peptide agonist Drugs 0.000 description 2
- 229920012196 Polyoxymethylene Copolymer Polymers 0.000 description 2
- 201000010769 Prader-Willi syndrome Diseases 0.000 description 2
- 108010069820 Pro-Opiomelanocortin Proteins 0.000 description 2
- 102100027467 Pro-opiomelanocortin Human genes 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 210000004900 c-terminal fragment Anatomy 0.000 description 2
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 2
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 2
- 235000014632 disordered eating Nutrition 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 229940066758 endopeptidases Drugs 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000003629 gastrointestinal hormone Substances 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- 238000007455 ileostomy Methods 0.000 description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 2
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000002865 melanocortin Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 2
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 2
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 229920000233 poly(alkylene oxides) Polymers 0.000 description 2
- 230000001242 postsynaptic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 239000002469 receptor inverse agonist Substances 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 2
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006700 (C1-C6) alkylthio group Chemical group 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WXTMDXOMEHJXQO-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=CC=C1O WXTMDXOMEHJXQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHSMWDVLDUDINY-UHFFFAOYSA-N 2-(2-cyanoethoxy)ethyl prop-2-enoate Chemical compound C=CC(=O)OCCOCCC#N NHSMWDVLDUDINY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTPDSKVQLSDPLC-UHFFFAOYSA-N 2-(oxolan-2-ylmethoxy)ethanol Chemical compound OCCOCC1CCCO1 CTPDSKVQLSDPLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZXYQEHISUMZAT-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-hydroxy-5-methylphenyl)methyl]-4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C(CC=2C(=CC=C(C)C=2)O)=C1 XZXYQEHISUMZAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVCTYSKUHKXJDZ-UHFFFAOYSA-N 2-[[3-(1h-imidazol-5-yl)-2-[(5-oxopyrrolidine-2-carbonyl)amino]propanoyl]amino]acetic acid Chemical compound C1CC(=O)NC1C(=O)NC(C(=O)NCC(=O)O)CC1=CN=CN1 GVCTYSKUHKXJDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JINGUCXQUOKWKH-UHFFFAOYSA-N 2-aminodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(N)C(O)=O JINGUCXQUOKWKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AKVBCGQVQXPRLD-UHFFFAOYSA-N 2-aminooctanoic acid Chemical compound CCCCCCC(N)C(O)=O AKVBCGQVQXPRLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGNCLSQOOODALH-UHFFFAOYSA-N 2-cyano-3-hydroxy-3-phenylprop-2-enoic acid Chemical compound OC(=O)C(C#N)=C(O)C1=CC=CC=C1 QGNCLSQOOODALH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dithiobis(6-nitrobenzoic acid) Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(C(=O)O)=CC(SSC=2C=C(C(=CC=2)[N+]([O-])=O)C(O)=O)=C1 KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 7-Aminoheptanoic acid Chemical compound NCCCCCCC(O)=O XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VWPQCOZMXULHDM-UHFFFAOYSA-N 9-aminononanoic acid Chemical compound NCCCCCCCCC(O)=O VWPQCOZMXULHDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 208000000103 Anorexia Nervosa Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 102100035606 Beta-casein Human genes 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009132 CB1 Cannabinoid Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010073366 CB1 Cannabinoid Receptor Proteins 0.000 description 1
- 229940124802 CB1 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 101100340271 Caenorhabditis elegans ida-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229940122820 Cannabinoid receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical group NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000003779 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108090000194 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Proteins 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 102100024785 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 206010071602 Genetic polymorphism Diseases 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 101800001586 Ghrelin Proteins 0.000 description 1
- 102400000442 Ghrelin-28 Human genes 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000947120 Homo sapiens Beta-casein Proteins 0.000 description 1
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FSBIGDSBMBYOPN-VKHMYHEASA-N L-canavanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCONC(N)=N FSBIGDSBMBYOPN-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GHSJKUNUIHUPDF-BYPYZUCNSA-N L-thialysine Chemical compound NCCSC[C@H](N)C(O)=O GHSJKUNUIHUPDF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127470 Lipase Inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- 239000004909 Moisturizer Substances 0.000 description 1
- SOWBFZRMHSNYGE-UHFFFAOYSA-N Monoamide-Oxalic acid Natural products NC(=O)C(O)=O SOWBFZRMHSNYGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FSBIGDSBMBYOPN-UHFFFAOYSA-N O-guanidino-DL-homoserine Natural products OC(=O)C(N)CCON=C(N)N FSBIGDSBMBYOPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100049197 Rattus norvegicus Vegp1 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010038669 Respiratory arrest Diseases 0.000 description 1
- 241000965606 Saccopharyngidae Species 0.000 description 1
- 102000040739 Secretory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091058545 Secretory proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000000231 Sesamum indicum Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800001707 Spacer peptide Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 108700023707 TUG1 Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008316 Type 4 Melanocortin Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010021436 Type 4 Melanocortin Receptor Proteins 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- 108010003205 Vasoactive Intestinal Peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400000015 Vasoactive intestinal peptide Human genes 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 210000003766 afferent neuron Anatomy 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000003277 amino acid sequence analysis Methods 0.000 description 1
- 229940107816 ammonium iodide Drugs 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 239000000883 anti-obesity agent Substances 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical group OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010079452 beta Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000003536 cannabinoid receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 235000021074 carbohydrate intake Nutrition 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 229940112822 chewing gum Drugs 0.000 description 1
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 1
- 210000003837 chick embryo Anatomy 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 238000000243 collision-induced dissociation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 235000005686 eating Nutrition 0.000 description 1
- 230000020595 eating behavior Effects 0.000 description 1
- 239000007938 effervescent tablet Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002895 emetic Substances 0.000 description 1
- 210000003890 endocrine cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003158 enteroendocrine cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 210000001105 femoral artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000019525 fullness Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 1
- 230000005176 gastrointestinal motility Effects 0.000 description 1
- 238000012252 genetic analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- GNKDKYIHGQKHHM-RJKLHVOGSA-N ghrelin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)COC(=O)CCCCCCC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 GNKDKYIHGQKHHM-RJKLHVOGSA-N 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036449 good health Effects 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000006486 human diet Nutrition 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001631 hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 206010021654 increased appetite Diseases 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000030214 innervation Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 229940125425 inverse agonist Drugs 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- 229940040145 liniment Drugs 0.000 description 1
- 239000000865 liniment Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 235000020845 low-calorie diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000001333 moisturizer Effects 0.000 description 1
- 230000007659 motor function Effects 0.000 description 1
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000007908 nanoemulsion Substances 0.000 description 1
- 230000001452 natriuretic effect Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000007230 neural mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000003901 neurotransmitter uptake inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 231100000344 non-irritating Toxicity 0.000 description 1
- 239000002687 nonaqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000003715 nutritional status Nutrition 0.000 description 1
- 238000011369 optimal treatment Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 235000015074 other food component Nutrition 0.000 description 1
- 235000020830 overeating Nutrition 0.000 description 1
- 235000020825 overweight Nutrition 0.000 description 1
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 108091005474 pancreatic polypeptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 210000002963 paraventricular hypothalamic nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 239000011236 particulate material Substances 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000014187 peptide receptors Human genes 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000012495 positive regulation of renal sodium excretion Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 210000002248 primary sensory neuron Anatomy 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 235000021075 protein intake Nutrition 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 108010022711 pyroglutamyl-histidyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 201000009881 secretory diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 230000021317 sensory perception Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 1
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M sodium acetic acid acetate Chemical compound [Na+].CC(O)=O.CC([O-])=O BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007962 solid dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000006104 solid solution Substances 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000037351 starvation Effects 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- UGNWTBMOAKPKBL-UHFFFAOYSA-N tetrachloro-1,4-benzoquinone Chemical compound ClC1=C(Cl)C(=O)C(Cl)=C(Cl)C1=O UGNWTBMOAKPKBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 235000021076 total caloric intake Nutrition 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037317 transdermal delivery Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 125000000876 trifluoromethoxy group Chemical group FC(F)(F)O* 0.000 description 1
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 1
- ZHOVAWFVVBWEGQ-UHFFFAOYSA-N tripropylsilane Chemical compound CCC[SiH](CCC)CCC ZHOVAWFVVBWEGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K trisodium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- LEAHFJQFYSDGGP-UHFFFAOYSA-K trisodium;dihydrogen phosphate;hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OP(O)([O-])=O.OP([O-])([O-])=O LEAHFJQFYSDGGP-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 210000001186 vagus nerve Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 210000005167 vascular cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006426 vascular sprouting Effects 0.000 description 1
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70571—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for neuromediators, e.g. serotonin receptor, dopamine receptor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
Abstract
Y-Рецепторные агонисты, селективные к Y2 и Y4 рецепторам по сравнению с Y1 рецептором, пригодные для лечения, например, ожирения, представляют собой (a) PP-складчатые пептиды или РР-складчатые пептиды-миметики, которые содержат (i) C-концевую аминокислотную последовательность Y-рецепторного распознавания, представленную -X-Thr-Arg-X-Arg-Tyr-C(=O)NRR, где Rи Rнезависимо обозначают водород или C-Cалкил, X обозначает Val, Ile, Leu или Ala, a Xобозначает Gln или Asn, или её консервативно замещённый вариант, в котором Thr замещён на His или Asn, и/или Tyr замещён на Trp или Phe; и/или Arg замещён на Lys, и (ii) N-концевую аминокислотную последовательность Y-рецепторного распознавания, представленную как HN-X-Pro-X-(Glu или Asp)-, где Xотсутствует или обозначает аминокислотный остаток, a Xобозначает Leu или Ser, или консервативные замены Leu или Ser, или (б) указанный агонист содержит С-концевую аминокислотную последовательность Y-рецепторного распознавания по определению в (i), см. выше, и указанную последовательность Y-рецепторного распознавания, связанную с амфифильным доменом аминокислотной последовательности, содержащим по меньшей мере один альфа-спиральный поворот, прилегающий к N-концу указанной гексапептидной последовательности, причём указанный поворот заключён в спиральной конфигурации с помощью ковалентной внутримолекулярной связи, и, необязательно, N-концевую последовательность, которая начинается с аминокислотной последовательности Y-рецепторного распознавания по определению в (ii), см. выше.
Description
Данное изобретение относится к пептидам или пептидным соединениям, которые ведут себя как селективные агонисты Υ2 и Υ4 относительно Υ1 рецепторов, и их применению при лечении состояний, чувствительных к активации Υ2 и/или Υ4 рецепторов, например при лечении ожирения и избыточного веса, и состояний, при которых они рассматриваются как содействующие факторы, и для регуляции/понижения секреции ЖКТ.
Предпосылки создания изобретения
Семейство пептидов с РР-складкой.
ΝΡΥ (нейропептид Υ) (человеческая последовательность 8ЕО ΙΌ Νο: 1), ΡΥΥ (пептид ΥΥ) (человеческая последовательность 8ЕО ΙΌ Νο: 2) и ΡΡ (панкреатический пептид) являются секретируемыми в природе гомологичными, содержащими последовательность из 36 аминокислот, амидированными по С-концу пептидами, которые характеризуются общей трёхмерной структурой (РР-складкой), поразительно устойчивой даже в разбавленном водном растворе и являющейся важной для рецепторного распознавания.
Первоначально с помощью рентгеновского кристаллографического анализа (РСА) более подробно была охарактеризована рентгеновская структура птичьего ΡΡ с разрешением до 0,98 А, и уникальная структура получила своё название от этого пептида (В1ипбе11 е! а1., 1981, Ргос. №111. Асаб. 8с1. И8А, 78: 4175-79; С1оуег е! а1., 1984, Еиг. 1. Вюсйеш. 142: 379-85). Затем РР-складчатая структура других членов семейства была проанализирована, главным образом, с помощью ЯМР-спектроскопии. Как РСА, так и ЯМР-спектроскопии осуществляют, несомненно, в концентрированном или твёрдом состоянии; однако точный анализ методом кругового дихроизма подтверждает, что ΝΡΥ и ΡΡ даже в водном растворе принимают РР-складчатую структуру, необычную для такого малого пептида (ЕиЫепбогГГ е! а1., 1990, 1. Вю1. Сйеш. 265:11706-12). Важно отметить, что анализ протеолитической устойчивости пептидов и их фрагментов и аналогов чётко показывает, что, например, полноразмерный РР1-36 в разбавленном водном растворе сохраняет складчатую конфигурацию, которая защищает его от разрушения под действием некоторых ферментов, которые быстро и легко разрушают аналоги, не способные принять РР-складчатую структуру вследствие минорных замен (8с11\\'аг1х е! а1., 1990, Аппа1к ΝΥ Асаб. 8сЕ 611: 35-47).
РР-складчатая структура, общая для ΝΡΥ, ΡΥΥ и РР, состоит из: 1) Ν-концевой полипролиноподобной спирали (соответствующей остаткам 1-8 с Рго2, Рго5 и Рго8), за которой следует 2) участок бетаповорота типа I (соответствующий остаткам с 9 по 12), далее следуют 3) амфифильная альфа-спираль (остатки 13-30), которая расположена антипараллельно полипролиновой спирали с углом около 152° между осями спиралей, и 4) С-концевой гексапептид (остатки 31-36). Складчатая структура стабилизирована за счёт взаимодействий между боковыми цепями амфифильной альфа-спирали, которые тесно переплетаются с тремя гидрофобными остатками пролина (8с11\\'аг1х е! а1., 1990). Помимо ключевых остатков в рецепторе, распознающем С-концевой гексапептид, именно ядерные гидрофобные остатки, которые являются консервативными в целом семействе РР-складчатых пептидов, стабилизируют РР-складчатую структуру. На фиг. 1А изображена последовательность №У с остатками, консервативными в ряду №У, РУУ и РР, показанными белыми буквами на тёмном фоне. На фиг. 1А также показаны элементы РР-складчатой структуры, описанные выше. Полагают, что С-концевой гексапептид, важный для рецепторного узнавания, является неструктурированным, но РР-складка обеспечивает устойчивый каркас, который презентирует С-концевой гексапептид рецепторам (иллюстрируется на фиг. 1В), которые до некоторой степени зависят или не зависят также от участков Ν-конца пептида. Анализ методом ЯМР-спектроскопии также показал, что дальние С- и Ν-концевые участки, например №Υ, являются скорее подвижными, это означает, что РР-складке постоянно угрожает опасность расстегнуть молнию на свободном конце.
№Υ является весьма распространённым нейропептидом, обладающим разнообразным действием в различных частях как центральной, так и периферической нервной системы, действующий с помощью различных субтипов рецептора в организме людей: Υ1, Υ2, Υ4 и Υ5. Основными №Υ рецепторами являются Υ1 рецептор, который обычно является постсинаптическим рецептором, передающим действие NΡΥ нейронов, и Υ2 рецептор, который обычно является пресинаптическим, ингибирующим рецептором. Это действительно имеет место в гипоталамусе, где NΡΥ нейроны, которые также экспрессируют антагонист/обратный агонист рецептора мелакортина АдКР (агути-родственный пептид), ведут себя как первичные сенсорные нейроны в стимулирующей ветвь дугообразного (аркуатного) ядра. Поэтому в этом сенсорном ядре для регуляции аппетита и потребления энергии ^Υ/Λ^ΚΡ нейроны, вместе с ингибирующими РОМС/САКТ нейронами, контролируют гормональный и питательный статус организма, так как эти нейроны являются мишенью как действующих продолжительно регуляторов, таких как лептин и инсулин, так и кратковременных регуляторов, таких как грелин и ΡΥΥ (см. ниже). Стимулирующие NΡΥ/АдΚΡ нейроны распространяются, например, на паравентрикулярное ядро - также гипоталамуса - где, как полагают, их постсинаптическими нацеленными рецепторами являются Υ1 и Υ5 рецепторы. NΡΥ является наиболее эффективным из известных соединений, способствующих повышению потребления пищи, так грызуны после интрацеребровентрикулярной (1СУ) инъекции №Υ едят до тех пор, пока они в буквальном смысле не лопнут. АдКР, полученный при использовании ^Υ/Λ^ΚΡ нейронов, ведёт себя как антагонист, главным образом, в отношении рецепторов меланокортинов типа 4 (МС-4) и блоки
- 1 011861 рует действие пептидов из РОМС, в основном аМЗН, на этот рецептор. Так как МС4 рецепторный сигнал действует как ингибитор потребления пищи, действие ЛдКР точно так же, как действие ΝΡΥ, является стимулирующим сигналом для потребления пищи (т.е. ингибирование ингибирования, угнетение угнетения). На ΝΡΥ/ЛдКР нейронах обнаружены ингибирующие пресинаптические Υ2 рецепторы, которые являются мишенью как локально высвобождающегося ΝΡΥ, так и кишечного гормона ΡΥΥ - другого РР-складчатого пептида.
ΡΥΥ выделяется в процессе еды пропорционально калорийности пищи энтероэндокринными клетками в дистальной части тонкого кишечника и ободочной кишки, действуя как на периферии на функцию ЖКТ, так и в центральной области как сигнал насыщения. Полагают, что периферически ΡΥΥ действует как ингибитор (удар под дых), например, двигательной функции верхнего ЖКТ, секреции желудочной кислоты и секреции экзокринных клеток поджелудочной железы. Полагают, что центрально ΡΥΥ действует, главным образом, на пресинаптические ингибирующие Υ2 рецепторы на ΝΡΥ/ЛдКР нейронах в дугообразном (аркуатном) ядре, к которому он поступает из крови (Вайегйат с1 а1., 2002, №1Шгс. 418: 650-4). Пептид выделяется в виде ΡΥΥ1-36, но часть (около 50%) циркулирует в кровотоке в виде ΡΥΥ3-36, который является продуктом разложения дипептидилпептидазы-ΐν, фермента, который удаляет дипептид с Ν-конца пептида при условии, что Ργο или А1а находятся в положении два, как во всех трёх РР-складчатых пептидах ΡΡ, ΡΥΥ и ΝΡΥ (ЕЬейеш е1 а1., 1989, Ρер!^бек, 10: 797-803). Таким образом, ΡΥΥ в кровотоке представляет собой смесь ΡΥΥ1-36, который действует как на Υ1, так и на Υ2 рецепторы (так же как Υ4 и Υ5 с различной аффинностью), и ΡΥΥ3-36, который обладает более низкой аффинностью в отношении рецепторов Υ1, Υ4 и Υ5 рецепторов, чем в отношении Υ2 рецептора.
ΡΡ представляет собой гормон, который выделяется эндокринными клетками в панкреатических островках, хотя регулируется исключительно вагусно холинергическими влияниями, выявляемыми, главным образом, при потреблении пищи (Зсйетай/, 1983, 6ак!гоеп!его1оду 85: 1411-25). ΡΡ оказывает различное действие на желудочно-кишечный тракт, но оно обычно не наблюдается в изолированных клетках и органах и, очевидно, зависит от отсутствия нарушения вагусной иннервации (Зсйетай/, 1983, 6ак!гоеп!его1оду 85: 1411-25). В соответствии с этим ΡΡ рецепторы, называемые Υ4 рецепторами, расположены, главным образом, в области пострема в стволе мозга с сильной экспрессией в моторных вагусных нейронах, активация которых вызывает периферические эффекты ΡΡ, и в ядрах одиночного пучка (ΝΤ8), активация которых вызывает действие ΡΡ как гормона насыщения (\У1ШесотЬ е! а1., 1990, Ат. 1. Ροδιοί. 259: 6687-91, Багкеп & Кг1к!епкеп 1997 Вгаш Век. Мо1. Вгаш Век. 48: 1-6). Следует отметить, что ΡΡ в крови имеет доступ к этой области мозга, так как гематоэнцефалический барьер пропускает в этой области, где обнаруживаются различные гормоны с периферии.
Недавно были приведены доводы, что влияние ΡΡ на потребление пищи частично опосредуется действием на нейроны - в особенности ΡОМС/САВΤ нейроны в дугообразном ядре (Вайегйат е! а1., 2004, АЬк!гас! 3.3 1п!етабопа1 ΝΡΥ Зутрокшт ίη Со1тЬга, ΡοΠυβηΙ). ΡΡ действует через Υ4 рецепторы, к которым он обладает аффинностью в субнаномолярных концентрациях, в отличие от ΡΥΥ и ΝΡΥ, которые проявляют аффинность к этому рецептору в наномолярных концентрациях (М1сйе1 е! а1., 1998, ΡΙκ-ιγтасо1. Веу. 50:143-150). ΡΡ также проявляет заметную аффинность к рецептору Υ5, но она, по-видимому, не имеет физиологического значения для циркуляции ΡΡ вследствие как отсутствия доступа к клеткам в ЦНС, где этот рецептор главным образом экспрессируется, и вследствие относительно низкой аффинности к ΡΡ.
Рецепторы ΡΡ-складчатых пептидов
Существует четыре точно установленных типа рецепторов РР-складчатых пептидов у человека: Υ1, Υ2, Υ4 и Υ5, которые распознают ΝΡΥ1-36 и ΡΥΥ1-36 с аналогичной аффинностью. Было высказано предположение о типе рецептора Υ3, который мог иметь предпочтение в отношении ΝΡΥ по сравнению с ΡΥΥ, но в настоящее время его не принимают как реальный подтип рецепторов (М1сйе1 е! а1., 1998, Ρ1κ·ιπικκο1. Веу. 50:143-150). Был клонирован подтип рецепторов Υ6, который в организме человека экспрессируется в усечённой форме, не содержащей ТМ-νΐΙ, а также в виде хвоста рецептора, и, следовательно, по меньшей мере, сам по себе, по-видимому, не может образовывать функциональную рецепторную молекулу.
Υ1 гесер!огк.
Исследования по аффинности наводят на мысль, что Υ1 одинаково хорошо связывается как с ΝΡΥ, так и с ΡΥΥ, но, в принципе, не с ΡΡ. Аффинность к Υ1 зависит от идентичности обеих концевых последовательностей РР-складчатой молекулы (ΝΡΥ/ΡΥΥ), например являются важными остатки Туг1 и Ργο2, и зависит от того, чтобы пептидные концы были представлены правильным образом. На С-конце, где важными являются боковые цепи некоторых остатков, Υ1 рецептор подобно Υ5 и Υ4 рецептору, но не Υ2 рецептору, допускает некоторые замены в положении 34 (обычно 61п), такие как Ργο (РиЫепбогГГ е! а1., 1990, 1. Вю1. Сйет. 265: 11706-12; ЗсйетаПх е! а1. 1990, Аппа1к ΝΥ Асаб. 8сг 61: 35-47). Сообщалось о некоторых исследованиях зависимости структура-функция, касающихся требований Υ1 и Υ2 рецепторов (Веск Зккшдег е! а1., 1994, Еиг. 1. Вюсйет. 225: 947-58; Веск Зюкшдег апб 1ипд, 1995, Вюро1утегк 37: 123-42; Зо11 е! а1., 2001, Еиг. 1. Вюсйет. 268: 2828-37).
- 2 011861
Υ2 рецепторы.
Исследования аффинности наводят на мысль, что Υ2 одинаково хорошо связывается как с ΝΡΥ, так и с ΡΥΥ, но, в принципе, не с РР. Для рецептора нужен, главным образом, С-конец ΡΡ-складчатого пептида (ΝΡΥ/ΡΥΥ). Таким образом, длинные С-концевые фрагменты, например вплоть до ΝΡΥ13-36 (целая альфа-спираль плюс С-концевой гексапептид), распознаются с относительно высокой аффинностью, т.е. в пределах десятикратной величины аффинности полноразмерного пептида (8йе1кй е! а1., 1989, РЕВ8 Ьей. 245: 209-14, 81κί1<1ι е! а1., 1989, 1. Вю1. Сйеш. 264: 6648-54). Следовательно, различные Ν-концевые делеции, которые приводят к утрате связывания с Υ1 рецептором, позволяют всё ещё до некоторой степени сохранять связывание с Υ2 рецептором. Однако аффинность С-концевых фрагментов снижается, примерно, в 10 раз по сравнению с ΝΡΥ/ΡΥΥ даже для сравнительно длинных фрагментов. Остаток О1и в положении 34 ΝΡΥ и ΡΥΥ является в высшей степени важным для распознавания лиганда Υ2 рецептором (8с11\\'аг1х е! а1., 1990, Апиак ΝΥ Асаб. 8с1. 611: 35-47).
Υ4 рецепторы.
Исследования аффинности указывают, что Υ4 связывает ΡΡ в субнаномолярных концентрациях (субнаномолярная аффинность), соответствующих концентрациям, обнаруживаемым в плазме, тогда как ΝΡΥ и ΡΥΥ распознаются со значительно более низкой аффинностью. Такие исследования наводят на мысль, что Υ4 рецептор в высшей степени зависим от С-конца ΡΡ-складчатых пептидов и что относительно короткие Ν-концевые делеции уменьшают аффинность лигандов. Сообщалось о некоторых исследованиях структура-активность, относящихся к Υ4 рецептору (ОеЫей е! а1., 1996, Мо1. Ρйа^тасο1. 50: 112-18; \\а1кег е! а1., 1997, Ρеρ!^беκ 18: 609-12).
Υ5 рецепторы.
Исследования аффинности показывают, что Υ5 одинаково хорошо связывается с ΝΡΥ и ΡΥΥ, но также связывается с ΡΡ с более низкой аффинностью, которая, однако, ниже обычных уровней этого гормона в кровотоке. ΡΥΥ3-36 также хорошо распознаётся рецептором Υ5, однако этот рецептор по большей степени экспрессируется в ЦНС, где такой пептид не может легко получить доступ к рецептору при введении на периферии.
ΡΡ-складчатые пептиды и их аналоги были предложены для применения при лечении ожирения и связанных с этим заболеваний, включая, например, синдром Прадера-Вилли, на основании действия этих пептидов, продемонстрированного на животных моделях и на человеке, и на основании того факта, что у людей с избыточным весом (ожирением) наблюдаются низкие базальные уровни ΡΥΥ и ΡΡ, а также более слабые реакции этих пептидов на пищу (Нок! 1.1. е! а1., 1983, Ιη!. 1. ОЬек. 7: 529-38; Вайетйаш е! а1., 1990, №1Шге). Первоначально было показано, что вливание ΡΡ больным с синдромом Прадера-Вилли ΡΡ снижает потребление пищи (Веткой е! а1., 1993, Ρеρ!^беκ, 14: 497-503), и этот эффект был подтверждён вливанием ΡΡ здоровым людям (Вайетйаш е! а1., 2003, С1ш. Епбосгшок Ме!аЬ. 88: 3989-92). РР-складчатые пептиды также были предложены для применения при аналогичном терапевтическом ангиогенезе (2икотека е! а1., 2003, Тгепбк Сатбюуакс. Меб. 13: 86-92) и при воспалительном заболевании кишечника (см., например, Международную заявку \УО 03/105763).
Однако нативные РР-складчатые пептиды не являются оптимальными для применения в качестве биофармацевтических веществ. Например, полноразмерные пептиды ΡΥΥ1-36 и ΝΡΥ1-36 реагируют слишком неизбирательно со всеми типами рецепторов Υ и, следовательно, будут вызывать побочные эффекты в сердечно-сосудистой системе и, например, рвоту, кроме того, природные пептиды не оптимизированы по устойчивости белка, так как их готовят таким образом, чтобы они действовали в течение сравнительно короткого времени в качестве нейропептида или гормона. Природный, более селективный в отношении Υ2 пептид, ΡΥΥ3-36, имеет, например, искажённую тыльную сторону, так что его РР-складчатая структура ухудшена вследствие элиминирования важного остатка Ρ^ο2 полипролиновой спирали, который в полноразмерном пептиде взаимодействует с Туг27 в амфифильной спиральной области молекулы.
Для лечения состояний, откликающихся на Υ-рецепторную модуляцию, желательно, следовательно, использовать Υ-рецепторные РР-складчатые пептиды или РР-складчатые пептиды-миметики, специфические в отношении выбранного Υ рецептора, предполагаемого в качестве мишени, и которые устойчиво сохраняют элементы ΡΡ-складчатой структуры, важные для рецепторного связывания. В частности, было бы в высшей степени желательно использовать такие агенты, которые селективны в отношении Υ2 и Υ4 рецепторов по сравнению с Υ1 рецептором. При некоторых состояниях, таких как ожирение и секреторная диарея, применение агониста как Υ2, так и Υ4 является благотворным. Поэтому одно соединение, обладающее обоими этими свойствами - агонизм Υ2 и Υ4 - было бы в высшей степени выгодным. Однако для клинических показателей важно, чтобы такое соединение было не только заметным агонистом рецептора Υ1, так как стимуляция Υ1 рецептора ведёт к нежелательным побочным эффектам, таким как вредное воздействие на сердечно-сосудистую систему (например, повышение артериального давления) и на почки (например, натрийурез). Существуют природные соединения, которые являются селективными агонистами Υ2 рецептора в противоположность Υ2 рецептору, такие как ΡΥΥ3-36, и которые предлагаются, например, для лечения ожирения. Имеются также соединения, которые являются селективными агонистами Υ4 рецептора по сравнению с Υ1 рецептором, такие как природный пептид ΡΡ, которые так
- 3 011861 же предлагаются для лечения ожирения. Имеются также соединения, которые, например, являются комбинированными агонистами Υ1 и Υ2 рецепторов, такие как природные пептиды ΡΥΥ и ΝΡΥ. Однако не сообщалось ни об одном известном соединении, которое было бы эффективным агонистом как Υ2, так и Υ4 рецептора. Более того, ранее не предлагалось использовать комбинированный Υ2 и Υ4 агонист с селективностью к Υ1 рецептору для терапевтического применения.
Некоторые общие термины, применяемые в описании
Аффинность: Аффинность пептида к специфическому рецептору выражается, например, величиной 1С5о, или величиной К1, или Кб, которая в конкретном неограничивающем примере определяется анализом, например, таким как анализ конкурентного связывания. Значение 1С50 соответствует концентрации пептида, который замещает (релевантный для данного рецептора) радиоактивный лиганд, применяемый в количестве, значительно меньшем, чем Кб для этого радиоактивного лиганда, на 50%.
Аппетит: Естественная потребность в еде или сильное желание еды. Повышенный аппетит обычно приводит к повышенному пищевому поведению.
Супрессоры аппетита: Соединения, понижающие потребность в еде.
Связывание: Специфическое взаимодействие между двумя молекулами такое, что две молекулы взаимодействуют. Связывание с рецептором может быть специфическим и селективным, так что преимущественно связывается одна молекула по сравнению с другой молекулой. Специфическое связывание можно определять константой диссоциации Кб. Эта величина зависит от селективности испытуемого соединения. Например, соединение с Кб ниже 10 нМ обычно считается прекрасным возможным лекарством. Однако соединение с низкой аффинностью, но селективное в отношении конкретного рецептора, также может быть хорошим возможным лекарством.
Индекс массы тела (ИМТ, ΒΜΙ): Математическая формула для измерения массы тела, иногда также называемая индексом Кветеля. ΒΜΙ рассчитывают как частное от деления массы (кг) на рост (м). Современными стандартами как для мужчин, так и для женщин, принятыми за нормальные, являются ΒΜΙ около 20 кг/м2. В одном варианте изобретения для определения страдающего ожирением субъекта можно применять ΒΜΙ выше 25 кг/м2. Первая степень ожирения соответствует ΒΜΙ 25 кг/м2. Вторая степень ожирения соответствует ΒΜΙ 30-40 кг/м2 и третья степень ожирения соответствует ΒΜΙ выше 40 кг/м2 Исс.|шсг. 1987, Αίη. 1. Сйи. ΝιιΙγ. 45: 1035-47). Идеальный вес тела различен у разных видов и индивидуумов и зависит от роста, строения тела, строения костей и пола.
Потребление калорий, потребление в калориях: Число калорий (энергия), потребляемых индивидуумом. В контексте настоящего изобретения этот термин идентичен термину потребление энергии.
Косметическое лечение: Предполагается, что этот термин обозначает лечение не с медицинской целью, но для улучшения качества жизни субъекта, например внешнего вида субъекта. Этот термин включает лечение субъекта, желающего снизить свой вес, не будучи человеком, страдающим избыточным весом или ожирением.
Потребление пищи: Количество пищи, потребляемой индивидуумом. Потребление пищи можно измерять объёмом или весом. Это выражение включает: ί) потребление пищи как общее количество поглощённой индивидуумом пищи; и ιί) потребление пищи как количество белков, жиров, углеводов, холестерина, витаминов, минералов или любых других пищевых компонентов, поглощённых индивидуумом. Соответственно, выражение потребление пищи в контексте настоящего изобретения аналогично выражению потребление энергии.
Нормальная дневная диета: Среднее потребление пищи индивидуумом данного вида. Нормальную дневную диету можно выражать терминами потребление калорий, потребление белков, потребление углеводов и/или потребление жиров. Нормальная дневная диета человека обычно содержит следующее: от около 2000, около 2400 или около 2800 до значительно большего числа калорий. Кроме того, нормальная дневная диета человека обычно включает примерно 12-45 г белка, около 120-610 г углеводов и около 11-90 г жиров. Низкокалорийная диета составляет, примерно, не более 85% и предпочтительно не более 70% нормального потребления в калориях человека. У животных потребности в калориях или в пище меняются в зависимости от вида и размера животного. Например, у кошек общее потребление калорий на кг, а также распределение белков, жиров и углеводов в процентах меняется с изменением возраста кошки и репродуктивного состояния.
Ожирение: Состояние, при котором избыточный вес тела может стать причиной повышенного риска для здоровья человека (см. ΒαΗο\ν аиб Эхе!/, Реб1а!пс8 102:Е29, 1998; Ναΐίοηαΐ ΙηδΙίΙηΙοδ о£ НеаИй, Να!юиа1 Неай, Биид аиб Β1οο6 ИъШЩе (ΝΗΕΒΙ), ОЬек. Век. (§ирр1. 2): 51 82098, 1998). Избыточный телесный жир является результатом дисбаланса между потреблением и расходом энергии. В одном варианте изобретения для оценки ожирения применяют индекс массы тела (ΒΜΙ). В одном варианте изобретения ΒΜΙ примерно от 22 кг/м2 (т.е. примерно на 10% выше нормального значения) и примерно до 30 кг/м2 рассматривается как избыточный вес, особенно примерно от 25 до 30 кг/м2, тогда как ΒΜΙ 30 кг/м2 или выше рассматривается как ожирение.
Избыточный вес: Вес индивидуума (человека), который выше идеального веса его тела. Человек с избыточным весом может страдать ожирением, но необязательно ожирением. В одном варианте изобретения человеком, страдающим избыточным весом, является любой индивидуум, желающий снизить свой
- 4 011861 вес. В другом варианте изобретения человек с ΒΜΙ примерно от 22 кг/м2 (т.е. примерно на 10% выше нормального значения) и примерно до 30 кг/м2 рассматривается как человек, страдающий избыточным весом, особенно примерно от 25 до 30 кг/м2. Следует отметить, что субъекты, имеющие ΒΜΙ немногим выше нормального значения (например, около 22-25 кг/м2), очень часто желают снизить вес, хотя только в косметических целях.
Эффективность (активность): Ιη νίΐτο эффективность соединения определяется величиной ЕС50, т.е. концентрацией, которая даёт 50% максимально достижимого эффекта, определяемого релевантным для данного рецептора анализом передачи сигнала.
Субъект: Субъект может быть любым субъектом, включая как человека, так и млекопитающих, следовательно, субъект может быть человеческим или нечеловеческим приматом, сельскохозяйственным животным, таким как свиньи, крупный рогатый скот, овцы и птицы, спортивным или домашним животным, таким как собаки, кошки, лошади, хомяки, и грызунами.
Терапевтически эффективное количество: Доза, достаточная для предупреждения, лечения или уменьшения интенсивности состояния или заболевания и/или для ослабления специфических признаков или симптомов конкретного состояния или заболевания. Термин (выражение) включает дозу, достаточную для предупреждения прогрессирования или для того, чтобы вызвать регрессию нарушения, или дозу, способную облегчить признак или симптом нарушения, или дозу, которая позволяет достичь нужного результата. В вариантах изобретения, относящихся к косметическому лечению или к лечению избыточного веса или ожирения, терапевтический эффект рецепторного агониста определяется количеством, достаточным для ингибирования или прекращения увеличения веса тела, или количеством, достаточным для снижения аппетита, или количеством, достаточным для уменьшения потребления энергии или пищи или для повышения расхода энергии. Предполагается, что выражение (термин) косметически эффективное количество обозначает дозу, достаточную для достижения нужного эффекта при лечении субъекта.
Подробное описание изобретения
В своём самом широком аспекте настоящее изобретение охватывает применение Υ-рецепторного агониста, селективного в отношении Υ2 и Υ4 рецепторов по сравнению с Υ1 рецептором, для получения композиции для лечения состояний, откликающихся на активацию Υ2 и/или Υ4 рецепторов, причём:
(а) указанный агонист является РР-складчатым пептидом или РР-складчатым пептидом-миметиком, который содержит:
(ί) С-концевую аминокислотную последовательность Υ-рецепторного распознавания, представленную как Х-ТЬг-Агд-Х3-Агд-Туг-С(=О)НВ1В2, где К.1 и В2, независимо, обозначают водород или С1-С6 алкил, X обозначает Уа1, 11е, Ьеи или А1а, а X3 обозначает С1п или Акп, или её консервативно замещённый вариант, в котором ТЬг замещён на Ηίκ или Акп, и/или Туг замещён на Тгр или РЬе: и/или Агд замещён на Ьук, и (ίί) Ν-концевую аминокислотную последовательность Υ-рецепторного распознавания, представленную как Η2Ν-Χ1-Ργο-Χ2-(Ο1π или Акр)-, где X1 отсутствует или обозначает любой аминокислотный остаток, а X2 обозначает Ьеи или 8ег, или консервативные замены Ьеи или 8ег, или (б) указанный агонист содержит:
С-концевую аминокислотную последовательность Υ-рецепторного распознавания по определению в (ί), см. выше, указанную последовательность Υ-рецепторного распознавания, слитую с амфифильным доменом аминокислотной последовательности, содержащим по меньшей мере один альфа-спиральный поворот, прилегающий к Ν-концу указанной гексапептидной последовательности, указанный поворот заключён в спиральной конфигурации с помощью ковалентной внутримолекулярной связи, и, необязательно,
Ν-концевую последовательность, которая начинается с аминокислотной последовательности Υрецепторного распознавания по определению в (ίί), см. выше.
Специфическая терминология, относящаяся к изобретению
Агонисты, к которым относится настоящее изобретение, являются селективными в отношении Υ2 и Υ4 рецепторов по сравнению с Υ1 рецептором. В контексте настоящего изобретения это условие выполняется, если величина 1С50 агониста по меньшей мере в 10 раз ниже в отношении Υ2 и Υ4 рецепторов, чем в отношении Υ1 рецептора, при определении методами анализа аффинности по данному описанию. В целом, что касается эффективности (активности), величина ЕС50 агонистов по данному изобретению также по меньшей мере в 10 раз ниже для Υ2 и Υ4 рецепторов, чем в отношении Υ1 рецептора, как определено анализом активности по данному описанию. Некоторые из предпочтительных агонистов по данному изобретению имеют величины аффинности и эффективности по меньшей мере в 100 раз выше в отношении Υ2 и Υ4 рецепторов, чем в отношении Υ1 рецептора.
Для целей данного описания РР-складчатый пептид представляет собой молекулу, имеющую 3-Ό структуру, которая, будучи картирована в оригинальной 3-Ό структуре птичьего РР, определённой методом РСА (В1ипбе11 е1 а1., 1981, Ргос. Να11. Асаб. 8с1. И8А 78: 4175-79; С1отег е1 а1., 1984, Еиг. 1. Вюсбеш. 142: 379-85), имеет домены, соответствующие доменам Ν-концевой полипролиноподобной спирали, области бета-поворота типа I, амфифильной альфа-спирали и С-концевого гексапептида указанного ΝΓΥ,
- 5 011861
ΡΥΥ и/или РР и практически выравниваемые в них (фиг. 1). Таким образом, описание различных доменов РР-складчатых пептидов, применяемых в данном изобретении, относится к оригинальной рентгеновской структуре птичьего РР (В1ипйе11 е! а1., 1981, Ргос. ЫаЙ. Асай. 8с1. И8А 78: 4175-79; С1оуег е! а1., 1984, Еиг. 1. ВюсНет. 142: 379- 85; 8с11\\'аг1х е! а1., 1990).
РР-складчатый пептид-миметик по настоящему описанию обозначает молекулу, имеющую 3-Ό структуру, которая, при картировании на оригинальной 3-Ό структуре птичьего РР, по меньшей мере, имеет домены, соответствующие доменам последнего поворота амфифильной альфа-спирали и С-концевого гексапептида РР и практически выравниваемые в них. РР-складчатые пептид-миметики могут также, при вышеуказанном картировании, иметь домены, соответствующие одному или более остальных поворотов амфифильной альфа-спирали, Ν-концевой полипролиноподобной спирали и области бета-поворота типа I. Пептид-миметик необязательно состоит исключительно из последовательности альфа-аминокислот, связанных классическими пептидными связями. Одна или более связей в такой последовательности может быть замещена пептидомиметическими связями, такими как обратная амидная и восстановленная пептидная связи, так что пептид-миметик можно рассматривать как псевдопептидную последовательность. Такие замены связей могут придать устойчивость к расщеплению эндопептидазой и улучшить фармакодинамические свойства молекулы.
Такие сравнения 3-Ό структуры, как упомянутые в выше приведённых определениях РР-складчатого пептида и РР-складчатого пептида-миметика, можно делать, конструируя модели молекул сравнения на основании координат их атомов, определяемых, например, методом РСА, или с помощью одной или более компьютерных программ, выпускаемых для визуализации прогнозируемой на основании структурной формулы 3-Ό структуры молекулы, например МаеЧго Мойе1шд Епуноптеп! от 8сЬгойшдег 1пс, 1500 8. Ига! Ауепие, 8ш!е 1180 Рогйапй, ОК. 97201; Ιπδίβΐιΐ II Мойейпд Епуноптеп!, версия 4.0, от Ассе1гу§ 1пс. 8ап Эгецо и 8ΥΒΥΕ® 7.0 от Тйрок 1пс., 1699 8оШ11 Нап1еу Кй., 8!. Ьоига, Мгакошт, 63144, И8А. Следует отметить, что 3-Ό структура РР-складчатого пептида или РР-складчатого пептида-миметика по настоящему изобретению необязательно должна точно соответствовать, и обычно не соответствует точно, 3-Ό структуре природного №Υ, ΡΡΥ или РР. Наблюдаемая 3-Ό структура РР-складчатого пептида или РР-складчатого пептида-миметика в значительной степени зависит от применяемых экспериментальных условий, и в особенности малые пептиды могут казаться более или менее скрученными в определённых условиях. Однако достаточно, чтобы РР-складчатый пептид или РР-складчатый пептид-миметик имел домены, соответствующие РР-складчатым доменам, описанным выше, и чтобы он имел структурные элементы для того, чтобы принять общую определённую форму, аналогичную форме нативного пептида, в котором С-концевая и, при наличии, Ν-концевая последовательности были нормально ориентированы.
Агонисты, к которым относится данное изобретение, имеют С-концевую последовательность Υ-рецепторного распознавания (распознавания Υ рецептором). Эта последовательность, обычно содержащая около 5-7 остатков и, в особенности, гексапептидную последовательность, расположена на С-конце агониста, которая, в случае её присутствия в РР-складчатом пептиде или РР-складчатом пептиде-миметике, связывается с Υ рецептором и активирует рецептор за счёт только лишь этого связывающего взаимодействия, или в результате такого связывающего действия и связывания с Υ рецептором Ν-концевой Υ-рецепторной последовательности, имеющейся в агонисте. Ν-концевая последовательность Υ-рецепторного распознавания (распознавания Υ рецептором) представляет собой последовательность, обычно содержащая около 3-5 остатков, главным образом, 4 остатка, расположенную на Ν-конце агониста, которая, в случае её присутствия в РР-складчатом пептиде или РР-складчатом пептиде-миметике, связывается с Υ рецептором и активирует рецептор за счёт комбинации такого связывающего действия и связывания с Υ рецептором С-концевой Υ-рецепторной последовательности, имеющейся в агонисте. Классические С- и Ν-концевые последовательности Υ-рецепторного распознавания представляют собой последовательности, обнаруживаемые в природных РР, №У и ΡΡΥ пептидах, но как станет очевидно из данного описания, эти классические последовательности можно модифицировать для того, чтобы распознавать Υ2 и Υ4, но уменьшить распознавание Υ1. В данном описании выражение, такое как остаток, соответствующий положению Ν №У', является ссылкой на аминокислотный остаток агониста, который, при картировании 3-Ό структуры агониста на №Υ, отображается (картируется) наиболее близко к остатку Ν №Υ. Действительная нумерация конкретного остатка в специфическом пептиде может отличаться от Ν, например, вследствие делеций в специфическом пептиде относительно природных пептидов.
В целом, РР-складчатые агонисты или РР-складчатые агонисты-миметики, которые рассматриваются в настоящем изобретении, обычно имеют пептидный каркас или частично пептидный каркас, по меньшей мере, имеют С-концевую аминокислотную последовательность и, обычно, Ν-концевую аминокислотную последовательность, хотя остальная часть каркаса может представлять собой непептидный линкерный радикал, например линейную или разветвлённую алкиленовую цепь. Аминокислоты, присутствующие на пептидном(ых) участке(ах) агонистов, обычно являются природными, особенно в С- и Ν-концевых последовательностях, которые взаимодействуют с Υ2 и Υ4 рецепторах, но также могут присутствовать неприродные альфа-аминокислоты, которые поддерживают РР-складку, но не предупреждают Υ2- и Υ4-рецепторное связывание.
- 6 011861
Если агонист по настоящему изобретению содержит С- и Ν-концевые аминокислотные последовательности, то С-концы могут быть амидированы и/или Ν-концы могут быть ацилированы с целью придать резистентность карбокси- и/или аминопептидазам. На самом деле С-конец нативных ΝΡΥ, ΡΥΥ и РР пептидов амидирован, так что С-концевая аминокислота агониста по изобретению также амидирована.
В данном описании ссылки на аминокислоты даются в виде их обычных названий или в виде сокращений, например валин (Уа1), лейцин (Ьеи), изолейцин (11е), метионин (Ме'!), фенилаланин (РЬе), аспарагин (Лзп), глутаминовая кислота (О1и), глутамин (О1п), гистидин (Η13), лизин (Ьуз), аргинин (Агд), аспарагиновая кислота (Азр), глицин (О1у), аланин (А1а), серин (8ег), треонин (ТЬг), тирозин (Туг), триптофан (Тгр), цистеин (Суз) и пролин (Рго). Когда называется обычное название или аббревиатура без указания стереоизомерной формы, следует понимать, что речь идёт об Ь-форме рассматриваемой кислоты. Когда подразумевается Ό-форма, она специально указывается в названии аминокислоты. Иногда, когда этого требует контекст, I .-форма скорее описывается, нежели подразумевается.
Термин консервативная замена по данному описанию обозначает, что одна или более аминокислот замещены на другой, биологически сходный остаток. Примеры включают замену на аминокислотные остатки со сходными характеристиками, например малые аминокислоты, кислые аминокислоты, полярные аминокислоты, основные аминокислоты, гидрофобные аминокислоты и ароматические аминокислоты. Неограничивающие примеры консервативных аминокислотных замен, пригодных для применения в настоящем изобретении, включают консервативные аминокислотные замены, представленные в приведённой ниже таблице, и аналогичные замены исходного остатка неприродными альфа-аминокислотами с аналогичными характеристиками. Например, в предпочтительном варианте изобретения остатки Ме! замещаются на норлейцин (Ме), биоизостер Ме!, который, в отличие от Ме!, трудно окисляется. Другим примером консервативной замены на остаток, обычно не присутствующий в эндогенных пептидах и белках млекопитающих, является консервативная замена Агд или Ьуз, например, на орнитин, канаванин, аминоэтилцистеин, или другая основная аминокислота. Более подробные сведения о фенотипически молчащих заменах в пептидах и белках даны, например, в Бомте е! а1. 8с1епсе, 247, 1306-1310, 1990.
Исходный остаток | Консервативная замена |
А1а | О1у |
Агд | Ьуз |
Азп | С1п, Н18, ТЬг |
Азр | Сг1и |
С1п | Азп, Н1з |
О1и | Азр |
Н1з | Азп, С1п |
Не | Ьеи, Уа1 |
Ьеи | Пе, Уа1 |
Ьуз | Агд |
Ме! | Ьеи, Пе |
РЬе | Туг, Тгр, Н18 |
Зег | ТЬг, Азп |
ТЬг | Зег, Азп, С1п |
Тгр | Туг, РЬе, Н18 |
Туг | Тгр, РЬе, Н18 |
Уа1 | Пе, Ьеи |
Если не указано иначе в контексте, в котором он встречается, термин замещённый в применении к любому фрагменту по данному описанию означает имеющий до четырёх совместимых заместителей, каждый из которых, независимо, может представлять собой, например, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, гидрокси, гидрокси(С1-С6)алкил, меркапто, меркапто(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкилтио, галоген (включая фтор, бром и хлор), трифторметил, трифторметокси, нитро, нитрил (-ίΝ), оксо, фенил, -СООН, -СООКА, -СОКА, -У )А/ -СОЯ^, -^2ΝΗ2, -С( )ΝΗ[χ\ -У ΓΝΙΙΙ// -СОИКАВв, -У )Л'[С[Г. -ΝΗ2, -\Н1</ -У1С1Г. -()С( )\1 М/ -()С( -Ν 1С( Ш / -\11С()(Ш / -\1ГС()(Ш/ -\11У Н )1С. -NΚв8О2ОΗ, -ΝΗ^Ν^,
-ΝΡΎΌΝΙ 12, -\11С( )\1 НЕ/ -\[С'С( )\Ί ΙΙΓ. -\11С( )\[С1Г или -У! СО\У К, где КА и Кв, независимо, обозначают (С1-С6)алкильную группу. Возможный (необязательный) заместитель может представлять собой одну из приведённых выше замещающих групп.
Если контекст не диктует иначе, ссылки по данному описанию на ΝΡΥ, ΡΥΥ и РР пептиды и их последовательности относятся к человеческим формам этих пептидов и их последовательностям. Однако часто ΝΡΥ, ΡΥΥ и РР пептиды других млекопитающих составляют РР-складчатые пептиды-миметики человеческих ΝΡΥ, ΡΥΥ и РР или консервативно замещённых человеческих ΝΡΥ, ΡΥΥ и РР, когда эти термины применяются в данном описании.
Агонисты типа (а) для применения по данному изобретению
Обычно агонисты типа (а) являются РР-складчатыми аналогами ΝΡΥ, ΡΥΥ и РР или РРскладчатыми миметиками ΝΡΥ, ΡΥΥ и РР, имеющими модификации для того, чтобы гарантировать различие (разделение) аффинности и активности в отношении Υ2 и Υ4 рецепторов по сравнению с Υ1 рецетором. Такие РР-складчатые аналоги и миметики включают пептиды, имеющие полный комплемент ха
- 7 011861 рактеристик РР-складчатых пептидов (Ν-концевую полипролиноподобную спираль, бета-поворот, амфифильную альфа-спираль и С-концевой гексапептид), пептидные аналоги, в которых часть каркаса (например, остатки бета-поворота и прилегающие остатки) замещена на непептидную спейсерную цепь, и усечённые (процессированные) пептиды, содержащие С-концевой гексапептид и последний поворот амфифильной альфа-спирали, но не содержащие целую полипролиноподобную спираль или её часть и/или весь бета-поворот или его часть.
В С-концевой аминокислотной последовательности Υ-рецепторного распознавания агонистом по данному изобретению В1 и В2, каждый независимо, предпочтительно обозначают водород. Предпочтительно также остаток X обозначает Уа1 или 11е. В тех случаях, когда агонист по изобретению является РР последовательностью с модификациями по изобретению на С-конце, остаток X может представлять собой, например, Ьеи, Уа1 или 11е. В тех случаях, когда агонист по изобретению представляет собой ΡΥΥ или ΝΡΥ последовательность с С-концевыми модификациями по данному изобретению, остаток X может являться, например, Уа1 или 11е.
В одном варианте изобретения агонисты, которые рассматривает данное изобретение, содержат Сконцевую последовательность Υ-рецепторного распознавания, представленную как -ХА-Х-Тйг-Агд-Х3Агд-Туг-С(=О)ХВ1В2, где остаток ХА не является основным или кислым, а последовательность -Х-ТЬгΑΓβ-Χ3-ΑΓβ-ΤνΓ-ί''(=Ο)ΝΒιΒ2 определяется выше. В этом случае не основный и не кислый аминокислотный остаток ХА может представлять собой, например, Ьеи, Ме! или Ме, 11е, Уа1 или А1а.
В другом варианте изобретения агонист содержит С-концевой ундекапептид, представленный как -ХС-Туг-Хв-Аки-ХА-Х-Тйг-Агд-Х3-Агд-Туг-С(=О)ХВ1В2, где последовательность -ХА-Х-Тйг-Агд-Х3-АгдТуг-С(=О)МВ1В2 определяется выше, Хс обозначает Агд или Ьук, а Хв обозначает 11е, Ьеи или Уа1. В агонисте такого класса С-концевая ундекапептидная последовательность представляет собой -Агд-Туг-ЬеиАки-(Ъеи или Ме!)-Уа1-Тйг-Агд-61и-Агд-Туг-С(=О)МН2.
В другом варианте изобретения агонист содержит С-концевую ундекапептидную последовательность, представленную как -ХС-Туг-Хв-Аки-ХА-Х-Тйг-Агд-Х3-Агд-Туг-С(=О)ХВ1В2, где определение последовательности -ХА-Х-Тйг-Агд-С1и-Агд-Туг-С(=О)ХВ1В2 дано выше, ХС обозначает НА Акп или Ст. а Хв обозначает 11е, Ьеи или Уа1. В агонисте такого класса С-концевая ундекапептидная последовательность представляет собой -Н1к-Туг-(11е или Ьеи)-Аки-Ме!-Ьеи-Тйг-Агд-С1и-Агд-Туг-С(=О)МН2.
В С-концевой аминокислотной последовательности Υ-рецепторного распознавания агонистов типа (а), которые рассматриваются в настоящем изобретении, остаток Х1 предпочтительно обозначает А1а, или может отсутствовать, а остаток Х2 предпочтительно обозначает Ьеи, 11е или 8ег. Следовательно, одной предпочтительной Ν-концевой последовательностью является Н2М-А1а-Рго-Ьеи-С1и-. Другой предпочтительной Ν-концевой последовательностью является последовательность Н2М-Рго-Ьеи-С1и-.
Агонисты типа (Ь) для применения по данному изобретению
Обычно агонисты типа (Ь) можно рассматривать как типа (а) аналоги РР-складчатых пептидов или РР-складчатые миметики, минимальные структурные признаки которых (С-концевая последовательность Υ-рецепторного распознавания и последний поворот альфа-спирали) стабилизированы с помощью определённой внутримолекулярной ковалентной связи.
Типа (Ь) агонисты, рассматриваемые в настоящем изобретении, могут являться РР-складчатыми миметиками, которые содержат Ν-концевую последовательность Υ-рецепторного распознавания, обсуждавшуюся выше в связи с агонистами типа (а), или они могут быть усечёнными по Ν-концу РР-складчатыми миметиками, которые не содержат Ν-концевой последовательности Υ-рецепторного распознавания типа, описанного для агонистов типа (а) (хотя они могут иметь другие Ν-концевые аминокислотные последовательности). Следовательно, Ν-концевая последовательность распознавания рецептором по определению для агонистов типа (а) не обязательна для класса агониста типа (Ь).
Агонисты этого типа характеризуются внутримолекулярной связью, которая либо не имеет эквивалента в нативных №Υ, ΡΥΥ или РР пептидах, либо соответствует нековалентному взаимодействию, или замещает нековалентное взаимодействие с ковалентной связью, например, ковалентный дисульфидный мостик между Сук2 и Э-Сук27 в [Сук2,П-Сук27,С1и34]РР (8ЕО ΙΌ Νο: 22). Установлено, что такая связь может служить для стабилизации обязательных элементов РР-складчатой структуры, в частности подвижной С-концевой последовательности Υ2-распознавания и последнего поворота альфа-спирали, и/или презентации Ν-конца. В полноразмерных или близких к полноразмерным пептидах такая связь может стабилизировать нативную РР-складчатую структуру как таковую. Это выгодно по двум причинам: вопервых, она стабилизирует С-концевую аминокислотную последовательность Υ-рецепторного распознавания, оптимально повышая активность в отношении Υ рецептора; во-вторых, за счёт стабилизации целой РР-складки как таковой пептид становится менее чувствительным к протеолитическому расщеплению, так как для таких ферментов часто требуется, чтобы такие целевые последовательности находились в относительно нескрученной форме (8ο1ι\ν;·ΐΓΐζ е! а1., 1990). Внутримолекулярная связь может также способствовать Υ2/Υ4-селективным агонистам, которые трудно модифицируются сравнительно со структурой нативных пептидов, например агонистам, у которых отсутствует один или более доменов, или участков доменов, имеющихся в нативных пептидах.
- 8 011861
Одна группа такого типа (Ь) имеет РР-складчатую структуру, в которой ограничивающая спиральный поворот внутримолекулярная связь тянется от аминокислотного остатка в амфифильном домене до точки связывания с Ν-концевым участком агониста, в соответствии с доменом полипролина РР-складчатого пептида, который тянется антипараллельно амфифильному домену. Сдерживающая спиральный поворот внутримолекулярная связь, например дисульфидная или лактамная связь, в вышеприведённых случаях может простираться от аминокислотного остатка в амфифильном домене до одного из остатков в полипролиноподобном домене. Если агонист является РР-складчатым миметиком, первые четыре аминокислотных остатка которого картируются на соответствующие Ν-концевые положения РР, ΝΡΥ или ΡΥΥ, сдерживающая спиральный поворот внутримолекулярная связь, например дисульфидная или лактамная связь, в вышеприведённых случаях может тянуться от аминокислотного остатка в амфифильном домене до одного из этих четырёх Ν-концевых остатков, как, например, в [Сук2,П-Сук27,О1п34]РР (81Т) ГО Νο: 22).
В другой группе агонистов типа (Ь) сдерживающая спиральный поворот внутримолекулярная связь соединяет остатки в последнем спиральном повороте домена альфа-спирали, например лактамная связь между остатками Ьук и О1и в спиральном повороте, или остаток в С-концевой аминокислотной последовательности Υ2-распознавания и остаток в последнем спиральном повороте домена альфа-спирали, например лактамный мостик между Ьук28 и О1и32 [Ьук28,61и32]РР25-36 (8ЕЦ ГО Νο: 28).
Агонисты типа (а) и (Ь)
В одной группе РР-складчатых агонистов-миметиков, рассматриваемых в данном изобретении, типа (а) и (Ь), в которых агонист содержит как С-концевую, так и Ν-концевую последовательность Υ-рецепторного распознавания, С-концевая последовательность может быть слита по своему Ν-концу с доменом амфифильной аминокислотной последовательности, содержащим по меньшей мере один альфаспиральный поворот, прилегающий к Ν-концу С-концевой гексапептидной последовательности, причём указанные С- и Ν-концевые аминокислотные последовательности соединены линкерным радикалом, который может представлять собой линейный или разветвлённый алкиленовый радикал, необязательно содержащий одну или более двойных или тройных связей. Например, С- и Ν-концевые аминокислотные последовательности могут соединяться пептидными связями, соответственно, с карбоксильной или аминогруппами аминокислоты формулы НН2(СН2)пСО2Н, где η имеет значение от 2 до 12, главным образом 6, 7, 8, 9 или 10. Так, агонист может являться РР-складчатым миметиком №Υ, ΡΡΥ или РР, который содержит вышеуказанные С-концевую и Ν-концевую последовательности Υ-рецепторного распознавания с описанным мостиком Сук-Сук, но при этом его аминокислотные остатки, соответствующие 5-24 нативного пептида, замещены на аминокарбоновую кислоту с углеродной цепью, содержащей 6-10 атомов углерода, выбранную их группы, состоящей из 6-аминогексановой кислоты (ипсилон-аминокапроновой кислоты), 7-аминогептановой кислоты, 8-аминооктановой кислоты, 9-аминононановой кислоты и аминодекановой кислоты. В конкретных вариантах изобретения предпочтительны 8-аминооктановые кислоты (в данном описании иногда сокращённо называемые Аос). Примером такого агониста является [Сук2,Аос5-24,П-Сук27,О1п34]РР (8ЕС) ГО Νο: 23).
Некоторые агонисты тех типов, к которым относится настоящее изобретение, можно рассматривать либо 1) как аналоги №У или ΡΥΥ пептидов, в которых остатки, имеющиеся в некоторых важных положениях в РР, но не в соответствующих положениях или ΡУУ, замещены на остатки, соответствующие РР остаткам, или на природные или неприродные остатки, сходные по структуре (консервативная замена) остаткам, соответствующим РР остаткам, или 2) как аналоги РР, в котором остатки в некоторых важных положениях или ΡУУ, но не в соответствующих положениях РР, замещены на остатки, соответствующие или ΡУУ остаткам, или на природные или неприродные остатки, сходные по структуре остаткам, соответствующим или ΡΥΥ остаткам. Как описано выше и как показано на фиг. 1, Υ рецепторы распознают остатки, локализованные на общих С- и Ν-концах пептидов, представленных РР-складчатыми пептидами или РР-складчатыми миметиками. Обычно РР пептиды не распознаются Υ2 рецептором вследствие присутствия остатков, главным образом, на С-конце РР, несовместимых с высокоаффинным связыванием и активностью пептида на Υ2 рецепторе. Однако заменой одного или более остатков в молекуле РР или РР-складчатого миметика РР на соответствующий остаток или ΡУУ можно повысить аффинность пептида на Υ2 рецепторе без потери аффинности и активности на Υ4 рецепторе, или только в сравнительно малой степени уменьшив аффинность и активность на Υ4 рецепторе.
В представленной ниже таблице показаны остатки, отличающиеся в Ν- и С-концевых последовательностях РР, и ΡУУ, т.е. остатки в положениях 1, 3, 4, 26, 28, 30, 31 и 34. Заданную общую Υ2 и
Υ4 высокую аффинность можно получить с помощью вышеописанной гомологичной замены в одном или более этих положений. Однако предпочтительной заменой в РР для достижения высокой аффинности и активности на Υ2 рецепторе при сохранении аффинности и активности на Υ2 рецепторе является замена Рго34 на О1п или на неприродный остаток с аналогичными физико-химическими свойствами. Поэтому [О1п34]РР является в высшей степени предпочтительным пептидом, так же как РР аналоги или миметики, в которых О1п34 совмещается с заменой одного или более не-NΡΥ/Не-ΡУУ остатка в РР на соответствующий остаток, или остаток с аналогичными физико-химическими свойствами, или неприродную аминокислоту с аналогичными свойствами.
- 9 011861
Следует, однако, отметить, что разрешённые гомологичные замены по настоящему изобретению представляют собой такие замены, которые приводят к агонистам по данному описанию, так как не все возможные замены, предлагаемые в таблице, обеспечивают заданные свойства пептида. Например, введение Рго в положение 34 в ΡΥΥ или ΝΡΥ уменьшает аффинность пептидов в отношении Υ2 рецептора слишком заметно для того, чтобы этот аналог применялся в настоящем изобретении, хотя эта замена обеспечивает высокую аффинность в отношении Υ4 рецептора.___________________
Положение | 1 | 3 | 4 | 26 | 28 | 30 | 31 | 34 |
РР | А1а | 1_еи | ΘΙυ | Агд | Не | Ме! | Ьеи | Рго |
ΝΡΥ | Туг | Зег | Цуэ | ΗΪ5 | Не | Ьеи | Не | ΘΙη |
ΡΥΥ | Туг | Не | ^У5 | ΗΪ8 | Геи | (_еи | Уа1 | ΘΙη |
Специфические агонисты для применения по данному изобретению
Ниже представлены конкретные примеры агонистов для применения по данному изобретению [С1п34] РР (ЗЕр ГО Νο: 4) [Ν- (Ν'- гексадеканоил)- гамма- глутамоил- Ьу813,С1п34]РР (8ЕС) ГО Νο: 34) [Ν- (А1а-Аг§- Аг§- Аг§- А1а- А1а-Аг§-А1а)3- Еу818,О1п34]РР (8Е$ ГО Νο: 35) [Ν- РЕ05000- Ьу513,О1п34]РР (8Е0 ГО Νο: 36) [11е31,О1п34]РР (8Ер ГО Νο: 5) [Уа131,Ст1п341РР (8РП ГО Νο: 6) [Ьеи30,С1п34]РР (8Ες ГО Νο: 7) [Ν1ε30,Ο1η34]ΡΡ (8Е(2 ГО Νο: 8) [Ьеи28,О1п34]РР (8Е(^ ГО Νο: 9) [Ηϊ826,011134]РР (8Е(2 ΙΟ Νο: 10) [11еЗ,О1п34]РР (8Ер ГО Νο: 11) [А1а1,01и4,Аг§26,(Ме130 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Ер ΙΟΝο: 12) [ΑΗ1,Ο1ιι4,Ν- (Ν'- гексадеканоил)- гамма- глутамоил- Εγδ13,Ατ§26,Ν1ε30]ΡΥΥ (8Е(^ ГО Νο: 37) [А1а1, 01ιι4,Ν- (А1а-Аг§- Аг§- Аг§- А1а- А1а-Ат§- А1а)3- Εγδ13,Ατ§26,Ν1ε30]ΡΥΥ (8Е(^ ГО Νο:38) [ΑΗ1,Ο1ιι4,Ν- РЕС5000- Εγδ13,ΑΓ§26,Ν1ε30]ΡΥΥ (8Е<2 ГО Νο: 39) [А1а1,01и4,Аг§26(Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Е0 ГО Νο: 13) [Α1η1,01ιι4]ΡΥΥ (8Е(3 ГО Νο: 14) и [А1а1,01и4]ИРУ (8Е(^ ГО Νο: 15) [Аг§26, (Ме130 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Е(^ ГО Νο: 16) и [Аг§26, (Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Е0 ГО Νο: 17) [01и4, (Ме130 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Е<2 ГО Νο: 18) и [С1и4, (Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Е0 ГО Νο: 19) [Ο1η4,Αγ§26]ΡΥΥ (8Е0 ΙϋΝο: 20) и [Ο1ιι4,Αγ§26]ΝΡΥ (8Е0 Π)Νο: 21) [Ονώ,ϋ- Суз27,О1п34]РР (8Е0 ГО Νο: 22) [Суз2,Аос5- 24,ϋ- Суз27,О1п34]РР (8Е0 ГО Νο:23) [Су82,ЬУ813,О- Су827,О1п34]РР (8Е0 ΙΟΝο: 30) [Суз2, Ν- (8- (8- гамма-глутамоиламинооктаноиламино)октаноил)- Еуз13, ОСу827,С1п34]РР (8Е0 ГО Νο:31).
[Суз2Л- {(А1а-Аг§- Ат§- Аг§- А1а- А1а-Аг§- А1а)3}- Ьуз13,О- Суз27,О1п34]РР <
(8Е0 ГО Νο: 32) [Суз2, Ν-{№- (21- амино-4,7,10,13,16,19- гексаоксагенэйкозаноил)}- гамма-глутамоилЬуз13,О- Су827,О1п34]РР (8Е(^ ГО Νο: 33)
- 10 011861 и их аналоги с консервативными заменами.
Особенно предпочтительными У2/У4-селективным агонистами для применения по настоящему изобретению являются [О1п34]РР (8ЕР ΙΌ Νο: 4) и [А1а1,О1и4,Аг§26,(Ме130 или Ν1β30)]ΡΥΥ N14) ГО N0: 12) или их аналоги с консервативными заменами.
Агонисты, пригодные для применения по данному изобретению
До настоящего времени основные Υ2/Υ4-селективные агонисты для применения по настоящему изобретению были описаны в целом и приводились конкретные примеры таких агонистов. Однако такие агонисты, включая специфически идентифицированные агонисты, можно подвергнуть различным модификациям с целью улучшения их фармакокинетических, фармакодинамических и метаболических свойств. Такие модификации могут включать связывание агониста с функциональными группами (также известными как мотивы), известными сами по себе в технике пептидных или белковых фармацевтических веществ. Три конкретные модификации, дающие конкретное преимущество в случае агонистов, которые рассматривает настоящее изобретение, вне зависимости от типа (а) или (Ь), представляют собой элемент с мотивами связывания с сывороточным альбумином, или мотив связывания гликозаминогликана (ОАО), или ПЭГилирование.
Мотивы связывания сывороточного альбумина
Мотивы связывания сывороточного альбумина (мотивы, связывающие сывороточный альбумин) обычно являются липофильными группами, вводимыми для того, чтобы способствовать продолжительному пребыванию в организме после введения, или по другим причинам, которые могут связываться различными известными способами с пептидными или белковыми молекулами, например, 1) ковалентной связью, например, с помощью функциональной группы в боковой цепи аминокислотного остатка, п) за счёт функциональной группы, встроенной в пептид или подходящим образом дериватизированный пептид, ίίί) в виде единого участка пептида. Например, в Международной заявке АО 96/29344 (Νονο ΝοιτΙίΑ А/8) и в статьях Р. КшТгйаН е! а1., 1995, Вюсйеш1са1 I. 312: 725-31 и Ь.В. Кпибзеп е! а1., 2000, I. Меб. СНет. 43: 1664-69, описан ряд липофильных модификаций, которые можно использовать для агонистов, которые рассматриваются в данном изобретении.
Подходящие липофильные группы включают необязательно замещённые, насыщенные или ненасыщенные, линейные или разветвлённые углеводородные группы, содержащие 10-24 углеводных атома. Такие группы могут образовывать целую боковую цепь или часть боковой цепи в каркасе агониста, например, за счёт простой эфирной, тиоэфирной, сложноэфирной или амидной связи с боковой цепью аминокислотного остатка скелета, или с углеродным атомом скелета или боковой цепи каркаса (скелета) непептидного линкерного радикала в скелете РР-складчатого миметика-агониста. Химический способ присоединения липофильной группы не важен, но приведённые боковые цепи, включая липофильные группы, являются примерами групп, которые могут связываться со скелетным углеродом агониста или его подходящего ответвления и состоят из
ΟΗ3(ΟΗ2)ηΟΗ(ΟΟΟΗ)ΝΗ- СО(СН2)2СОХН-, где п обозначает целое число от 9 до 15,
СНз(СН2),.СО- ΝΗΟΗ(ΟΟΟΗ)(ΟΗ2)2ΟΟΝΉ-, где г обозначает целое число от 9 до 15,
СН3(СН2)5С0-ΝΉΟΗ((ΟΗ2)2ΟΟΟΗ)ΟΟΝΗ-, где 8 обозначает целое число от 9 до 15,
СН3(СН2)тСОЖ-, где т обозначает целое число от 8 до 18,
-ЖСОСН((СН2)2СООН)Ж- СО(СН2)рСНз, где р обозначает целое число от 10 до 16,
-ΝΗΟΟ(ΟΗ2)2ΟΗ(ΟΟΟΗ)ΝΉ- СО(СН2)чСНз, где с] обозначает целое число от 10 до 16,
СН3(СН2)пСН(СООН)ННСО->
где п обозначает целое число от 9 до 15,
СН3(СН2)РМНСО-, где р обозначает целое число от 10 до 18,
-ΟΟΝΗΟΗ(ΟΟΟΗ)(ΟΗ2)4ΝΗ- СО(СН2)тСН3, где т обозначает целое число от 8 до 18,
-СОЖСН(СООН)(СН2)4Ж- СОСН((СН2)2СООН)КН- СО(СН2)рСН3, где р обозначает целое число от 10 до 16,
-ΟΟΝΉΟΗ(ΟΟΟΗ)(ΟΗ2)4ΝΗ- СО(СН2)2СН(СООН)НН-СО(СН2)чСНз, где с] обозначает целое число от 10 до 16, и частично или полностью гидрированного циклопентанофенантренового скелета.
- 11 011861
В одном методе химического синтеза боковая цепь, содержащая липофильную группу, представляет собой С12, С14, С16 или С18 ацильную группу, ацилирующую аминогруппу в боковой цепи остатка каркаса агониста.
Как указывалось, модификация агонистов для применения с целью улучшить характеристики связывания с сывороточным белком является методом, который можно применять в целом и, в частности, в случае специфических агонистов, перечисленных выше. Так, например, [Ьу811,О1п34]РР и его аналоги с консервативными заменами могут быть модифицированы вышеописанным способом, например тетрадеканоилацетилированием Ьу811, или [Ьу813,О1п34]РР может модифицироваться с образованием [М-(М'-гексадеканоил)-гамма-глутамоил-Ьу813,С1и34]РР, а |Л1а1.С1и4.Бу513.Лг§26.Н1с30|РУУ может модифицироваться с образованием [А1а1,С1и4,М-(М'-гексадеканоил)-гамма-глутамоилЬу813,Агд26,М1е30]Р¥У.
ОАО-связывание
Как и в случае мотивов липофильного связывания с сывороткой, обсуждавшегося выше, агонисты, рассматриваемые в данном изобретении, можно модифицировать, вводя мотив ОАО связывания в качестве боковой цепи, или участка боковой цепи скелета агониста. Известные ОАО-связывающие мотивы для введения таким способом включают аминокислотные последовательности ХВВХВХ и/или ХВВВХХВХ, где В обозначает остаток основной аминокислоты, а X обозначает любую аминокислоту.
Несколько, например три, таких последовательностей можно ввести с образованием конкатамерных (линейная цепь) или дендримерных (боковая цепь) мотивов. Специфические конкатамерные ОАО мотивы включают А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а и А1а-Агд-Агд-Агд-А1аА1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а (каждый из которых может, например, соединяться амидной связью, образующейся между С-концом конкатамерного мотива ОАО-связывания и аминогруппой в боковой цепи аминокислоты в каркасе агониста, такой как ипсилонаминогруппа Ьу518 в агонисте [Ьу518,О1п34]РР (8ЕО Ш N0: 24), с образованием [Ы-(А1а-Агд-Агд-АгдА1а-А1а-Агд-А1а)з-Ьу518,О1и34]РР, или Ьу813 в агонисте [А1а1,О1и4,Ьу813,Агд26,№е30]Р¥У с образованием [А1а1,О1и4,№(А1а-Ахд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а)з-Ьу813 ,Агд26,Ме30]РУУ.
Вместо того, чтобы присоединяться к агонисту в виде боковой цепи, или части боковой цепи каркасного остатка, ОАО мотив может ковалентно связываться с С- или (предпочтительно) с Ν-концом агониста либо непосредственно, либо через линкерный радикал. В этом случае ОАО-связывающий мотив может также содержать аминокислотную последовательность ХВВХВХ и/или ХВВВХХВХ, где В обозначает основной аминокислотный остаток, а Х обозначает любой аминокислотный остаток, например последовательность [ХВВВХХВХ]П, где η обозначает число от 1 до 5, В обозначает основной аминокислотный остаток, а Х обозначает любой аминокислотный остаток, в частности А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1аАгд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-[О1п34]РР (8ЕО Ш Νο: 26).
Υ2/Υ4 селективные агонисты, к которым относится настоящее изобретение, применимы, среди прочего, для терапевтического ангиогенеза. В частности, для такого применения агонисты предпочтительно содержат мотив, связывающий гликозаминогликан (ОАО), обсуждавшийся выше. Такие мотивы гарантируют, что агонисты связываются с ОАО во внеклеточной матрице, и тем самым обеспечивают пролонгированную локальную экспозицию Υ рецепторов в этой ткани. Факторы роста, хемокины и т.д. связываются с ОАО за счёт участков основных аминокислот, которые взаимодействуют с кислыми сахарами ОАО. Эти положительно заряженные эпитопы на факторах роста обычно состоят из боковых цепей основных остатков, которые в последовательности необязательно расположены последовательно, но часто находятся в непосредственной близости за счёт элемента вторичной структуры, такого как альфаспираль или поворот, или за счёт общей трёхмерной структуры белка. Описаны некоторые ОАОсвязывающие линейные последовательности, обсуждавшиеся выше, например ХВВХВХ и ХВВВХХВХ, где В представляет собой основной остаток (Нйешап е! а1. Вюаккаук, 1998, 20: 156-67). Методом кругового дихроизма было показано, что эти сегменты при связывании с ОАО образуют альфа-спирали. Если такие последовательности помещены, например, в конкатамерную или дендримерную конструкцию, где присутствуют три таких последовательности, например каждая в виде АКККААКА последовательности, результирующий 24-мерный пептид, например АКККААКА-АКККААКА-АКККААКА, гарантирует сохранение во внеклеточной матрице, аналогичной высокомолекулярному полилизину, т.е. он не вымывается в течение 4-часового вливания (8акйагоу е! а1. ЕЕВ8 Ьей., 2003, 27: 6-10).
Таким образом, факторы роста и хемокины естественно создаются с двумя типами связывающих мотивов: один мотив связывания рецептора, с помощью которого осуществляется сигнальная трансдукция, и один мотив связывания с ОАО, с помощью которого достигается присоединение и пролонгированная локальная активность. Пептиды, такие как Ν₽Υ и РР, являются нейропептидами и гормонами, которые достаточно быстро вымываются из ткани, а не оптимизируются для пролонгированной активности. Присоединяя ОАО-связывающий мотив к Υ2/Υ4 селективному агонисту по настоящему изобретению создают бифункциональную молекулу, аналогичную факторам роста и хемокинам, содержащую как эпитоп, ответственный за связывание с рецептором на РР-складчатом пептидном участке, так и ОАОсвязывающий мотив. Кроме того, за счёт включения ОАО-связывающего мотива модифицированный пептид имеет свойство дольше оставаться в ткани при инъекции, например, подкожно или внутримы
- 12 011861 шечно или трансдермально, или аналогичным образом доставляться в ткань как таковой. Поэтому САСмодифицированный пептид также входит в состав препарата пролонгированного действия, который может быть в высшей степени предпочтительным для медленного высвобождения в кровоток и пролонгированного способа действия.
Другим подходящим положением для введения САС-связывающего мотива, такого как конкатамерная или дендримерная конструкция, РР-складчатых пептидов является положение 14 для ΝΓΥ пептидов и их аналогов, и положение 13 для РΥΥ и РР пептидов. Как для пептидов типа NРΥ, РΥΥ, так и для пептидов типа РР другими предпочтительными положениями являются положения 11 и 18. Однако, как обсуждалось выше, остаток, содержащий САС-связывающий мотив, можно ввести в любое положение в агонистах при условии, что это введение согласуется с сохранением РР-складчатой структуры, требуемой в агонистах типа (а), (Ь) и (с), рассматриваемых в данном изобретении, и нужной С-концевой последовательностью Υ2-распознавания. Так, САС-связывающий мотив можно в качестве части спейсерной конструкции поместить в аналоги, в которых часть РР-складки замещена на непептидный спейсер.
ПЭГилирование
При ПЭГилировании полиалкиленоксидный радикал или радикалы ковалентно связан/связаны с пептидными или белковыми лекарствами с целью увеличения эффективного периода полужизни в организме после введения. Термин происходит от названия предпочтительного полиалкиленоксида, применяемого в таких процессах, а именно образованного из этиленгликоля полиэтиленгликоля, или ПЭГ (РЕС).
Подходящий радикал ПЭГ может присоединяться к агонисту любым подходящим химическим методом, например, за счёт каркасного аминокислотного остатка агониста. Например, в случае молекулы, подобной ПЭГ, в качестве присоединяющей группы часто применяется ипсилон - аминогруппа лизина или Ν-концевая аминогруппа. Другие присоединяющие (встраивающие) группы включают свободную карбоксильную группу (например, свободная карбоксильная группа С-концевого аминокислотного остатка или остатка аспарагиновой или глутаминовой кислоты), подходящим образом активированные карбонильные группы, меркаптогруппы (например, меркаптогруппы цистеинового остатка), остатки ароматических кислот (например, РЬе, Туг, Тгр), гидроксигруппы (например, гидроксигруппы в 8ег, ТЬг или ОН-Ьук), гуанидин (например, Агд), имидазол (например, Ηίκ) и частицы окисленных углеводов.
Если агонист является ПЭГилированным, он обычно содержит 1-5 молекул полиэтиленгликоля (ПЭГ), например 1, 2 или 3 молекулы ПЭГ. Каждая молекула ПЭГ имеет молекулярную массу примерно от 5 до примерно 100 кДа, например молекулярная масса составляет около 10-40 кДа, около 12 кДа или предпочтительно не более 20 кДа.
Подходящие молекулы ПЭГ выпускаются фирмами 8Ьеаг\\'а1ег Ро1утегк, 1пс. и Εηζοη, 1пс. и их можно выбрать из 88-РЕС, №С-РЕС, альдегид-ПЭГ, тРЕС-8РА, тРЕС-8СМ, тРЕС-ВТС, 8С-РЕС, трезилированный тРЕС (патент США 5880255), или оксикарбонил-окси-Ы-дикарбоксиимид-ПЭГ (патент США 5122614).
В особом варианте изобретения вышеупомянутый агонист [Ьук13,С1п34]РР можно ПЭГилировать по Ьук13 с образованием [N-РΕС5000-^уκ13,С1η34]РР (8ЕО ΙΌ Νο: 40) или [А1а1,С1и4,Ьук18,Агд26, (Ме!30 или N1е30)]РΥΥ (8ЕО ΙΌ Νο: 25) можно ПЭГилировать по Ьук18.
Сывороточный альбумин, САС и ПЭГ
Вне зависимости от того, осуществляется ли модификация агониста за счёт присоединения групп для того, чтобы способствовать связыванию сывороточного альбумина, САС-связыванию или повысить устойчивость с помощью ПЭГилирования, мотив связывания сывороточного альбумина, или мотив САС-связывания, или ПЭГ радикал может являться боковой цепью или образовывать часть боковой цепи при каркасном углероде агониста, соответствующем любому из следующих положений РΥΥ или РР: 1, 3, 6, 7, 10, 11, 12, 13, 15, 16, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 30 и 32, соответствующем любому из следующих положений ΝΤΥ: 1, 3, 6, 7, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 30 и 32. Конъюгация с биомолекулами большего размера
Как описывается выше, можно присоединять некоторые мотивы в различных положениях в РР-складчатом пептиде или РР-складчатом пептиде-миметике, не ослабляя их высокую Υ-рецепторную аффинность (см. примеры). Аналогичным образом комбинированные селективные в отношении Υ2-Υ4 рецепторов агонисты можно использовать в качестве химерных (гибридных, слитых) белков, в которых они связаны, например, с альбумином или молекулой другого белка или носителя, что обеспечивает благоприятную фармакокинетику или другие свойства, например пониженное выведение почками. Как известно в технике, существует множество химических модификаций и линкеров, которые можно использовать для такого ковалентного соединения, так же как можно использовать множество белков или носителей. Особенно предпочтительно ковалентное присоединение селективного Υ2-Υ4 пептидного агониста к альбумину и в одном из положений РР-складчатой структуры, которое указано в другом месте данного описания в связи с модификациями с помощью различных мотивов. Такие гибридные белки можно получать различными полусинтетическими методами, когда пептид можно получать пептидным синтезом по данному описанию, а биомолекулу - методом рекомбинантной ДНК. Гибридный белок можно также получать целиком как рекомбинантную молекулу, экспрессированную, например, в виде молекулы
- 13 011861 предшественника, удлинённую за счёт последовательности С1у-Ьук-Агд, которая, будучи экспрессирована в виде секреторного белка в эукариотических клетках, отщепляется биосинтетическими ферментами, и С1у превращается в карбоксамид на С-концевом остатке Туг С-концевой последовательности Υ2-рецепторного распознавания.
Стабилизация
Как указывается в разных местах в данном описании, многие из селективных Υ2-Υ4 агонистов по настоящему изобретению стабилизируются различными способами, например Ν-концевым ацилированием или замещением каркасных участков агониста на непептидный линкер, или внутренней циклизацией за счёт мостиковых связей для стабилизации РР-складчатой структуры. Эта стабилизация в большинстве случаев служит двум целям, причём одной целью является презентировать эпитопы рецепторного распознавания оптимальным образом в отношении Υ2 и Υ4 рецепторов за счёт сохранения РР-складки; а второй целью является стабилизация пептида против расщепления, т. е. главным образом против протеолитического расщепления. Это особенно важно, когда селективные Υ2-Υ4 агонисты также модифицированы для того, чтобы продлить период полужизни, достичь пролонгированного высвобождения и/или продолжительной экспозиции с тканями, за счёт присоединения различных мотивов, обсуждавшихся выше.
Обычно пептидные агонисты очень быстро выводятся, главным образом, через почки, и устойчивость белка как таковая может быть неважна; однако, когда присутствие пептида в различных жидкостях организма продлевается одним или более способами на несколько часов, особенно важно, чтобы биологическая активность пептида также оставалась интактной, т. е. чтобы пептид стабилизировался в форме, устойчивой к протеолитическому воздействию, описанному как вообще, так и в отношении специфических примеров селективных Υ2-Υ4 пептидов-агонистов, например ΡΡ-складчатых стабилизированных, циклических [Сук2,О-Сук27]РР и их различных аналогов. Так, в предпочтительных вариантах изобретения объединенные Υ2-Υ4 селективные агонисты как стабилизированы структурно, с помощью структурных изменений, некоторые из них конкретно указаны в представленных ниже примерах, так и декорированы различными мотивами и/или слиты с биомолекулами и/или приготовлены фармацевтическими методами, которыми добиваются продолжительного высвобождения и т. д., для пролонгированной экспозиции с рецептором.
Пептиды, индуцирующие спираль
Ацилирование по Ν-концу агонистов, которые рассматривает данное изобретение, упоминалось как способ стабилизации агониста против действия аминопептидаз. Другая стабилизирующая модификация включает ковалентное присоединение стабилизирующей пептидной последовательности из 4-20 аминокислотных остатков ковалентно на Ν- и/или С-конце, предпочтительно на Ν-конце. Аминокислотные остатки в таком пептиде выбирают из группы, состоящей из А1а, Ьеи, 8ег, ТЬг, Туг, Аки, С1и, Акр, С1и, Ьук, Агд, Ηίκ, Μеΐ и т.д. В интересном варианте изобретения присоединяемый Ν-концевой пептид содержит 4, 5 или 6 остатков Ьук, например Тук-Тук-Тук-Тук-Тук-Ьук-[61и34РР] (8ЕО ΙΌ Νο: 29). Они могут присоединяться на Ν-конце РР-складчатого пептидного агониста или они могут быть помещены на Ν-конце усечённого по Ν-концу РР-складчатого агониста-миметика, или укороченного на Ν-конце РР-складчатого агониста-миметика, если спейсерный пептид вводится между новым Ν-концом стабилизирующего пептида. Общее описание таких удлинений (расширений) стабилизирующего пептида дано в Международной заявке \¥О 99/46283 (2еа1аиб Рйагтасеийса1к), которая вводится в данное описание в качестве ссылки.
Рецепторные агонисты, которые рассматриваются в настоящем изобретении, можно получать общеизвестными методами, например синтетическими, полусинтетическими и/или методами рекомбинантной ДНК. Способы включают стандартные методы получения пептидов, такие, например, как синтез в растворе и твердофазный синтез. Руководствуясь учебником и общими знаниями в данной области техники, специалист в этой области поймёт, как получать агонисты и их производные и модификации.
Далее описаны конкретные агонисты по изобретению наряду с их молекулярными фармакологическими свойствами, а также химическими свойствами и описанием устойчивости пептидов.
[Пе31,61и34]РР (8ЕО ΙΌ Νο: 5)
Этот пептид является аналогом РР, созданным с целью достижения высокой аффинности к Υ2 рецептору путём введения Не в положение 31 и С1и в положение 34, соответствующих остаткам, обнаруженным в этих положениях в №У (ЕиЫеибогГГ е! а1. 1БС 1990, 265: 11706-12).
Профиль рецепторного распознавания.
[Пе31,С1и34]РР имеет выражаемую однозначным числом наномолярную активность к человеческому Υ4 рецептору (Κ50=1,2 нМ), сходную с аффинностью РР (ТС50=0,5 нМ), а аффинность [Пе31,61и34]РР к Υ2 рецептору 54 нМ, а ΙΟ50 в отношении Υ1 рецептора составляет более 1000 нМ и, соответственно, [Не31,61и34]РР является селективным Υ2-Υ4 агонистом по сравнению с Υ1 рецептором (табл. 1). Величины аффинности к Υ рецепторам сообщались ранее, в то время был доступен только Υ4 рецептор крысы, где было показано, что аффинность [Пе31,61и34]РР равна около 50 нМ к Υ4 рецептору крысы, что примерно в 100 раз ниже аффинности РР (ЕиЫеибогГГ е! а1. ШС 1990, 265: 11706-12, 8с11\\'аг1х е! а1. NУΑС, 1990, 611: 35-47). Что касается активности, [Не31,61и34]РР проявляет ш νίίτο активность в случае
- 14 011861
Υ4 рецептора 0,91 нМ (величина ЕС50), в отношении Υ2 рецептора ЕС50 6,5 нМ и в отношении Υ1 рецептора величина ЕС50 составляет 48 нМ (табл. 2). Таким образом, по сравнению с ранее опубликованными данными по аффинности (ЕиЫепбогГГ е! а1. 1ВС 1990, 265: 11706-12, 8с11\\'аг!х е! а1. NΥАС, 1990, 611: 3547) удивительным является то, что [11е31,С1п34]РР на самом деле является агонистом с активностью, выражаемой однозначным числом, как против Υ2, так и против Υ4 рецептора, в отличие от выражаемой двузначным числом активности в отношении Υ1 рецептора. Устойчивость белка аналогична устойчивости РР1-36.
[Уа131,61п34]РР (8Ер ГО 6)
Так же как и [11е31,С1п34]РР (8Е0 ГО №: 5), этот пептид является РР аналогом, созданным с целью достижения высокой аффинности к Υ2 рецептору, но при сохранении высокой аффинности к Υ4 рецептору, однако в данном случае путём введения Уа1 в положение 31, соответствующего остатку, находящемуся в ΡУУ в этом положении, и, опять же, С1п в положение 34, соответствующего остатку, обнаруженному в этом положении в ΝΓΥ и ΡУУ. Это новое соединение.
Профиль рецепторного распознавания.
Аффинность [Уа131,61п34]РР к Υ4 рецептору составляет 0,93 нМ, а к Υ2рецептору - 69 нМ, тогда как аффинность к Υ1 рецептору не удаётся измерить даже при концентрациях >1000 нМ (табл. 1). Таким образом, [Уа131,С1п34]РР является Υ2-Υ4 селективным лигандом. Что касается ίη νίΐΐΌ активности, [Уа131,61п34]РР имеет величину ЕС50 1,0 нМ в отношении Υ4 рецептора и 9,9 нМ в отношении Υ2 рецептора, тогда как его активность в отношении Υ1 рецептора составляет 99 нМ (табл. 2).
Устойчивость белка аналогична устойчивости РР1-36.
[61п34]РР (8ЕО ГО №: 4)
Так же как [11е31,61п34]РР (8Е0 ГО №: 5) и [Уа131,61п34]РР (8Е0 ГО №: 6), этот пептид является РР аналогом, созданным с целью достижения высокой аффинности к Υ2 рецептору, однако в данном случае, за счёт введения одного лишь С1п в положение 34, соответствующего остатку, обнаруженному в этом положении как в ΝΓΥ, так и в ΡУУ. Вследствие того, что положение 34 не является важным для распознавания РР Υ4 рецептором, пептид проявляет двойственную высокую аффинность к Υ2 и к Υ4 рецепторам. В бычьем РР С1п вводят в положение 34, и обнаружено, что его аффинность к Υ4 рецептору очень сходна с аффинностью самого бычьего РР, но этот пептид не испытывался в отношении Υ2 рецептора (СеЫег! е! а1., 1996, Мо1 Рйагшасо1. 1996 50: 112-8). В настоящем изобретении сделана замена Рго на С1п в человеческом РР1-36 и показано, что |С1п34|РР неожиданно имеет высокую аффинность к Υ2 рецептору, сходную с аффинностью №Υ и ΡУУ, и что он не связывается с Υ1 рецептором. Таким образом, [С1п34]РР (т.е. [С1п34]человеческий РР1-36) является новым соединением, селективным к Υ2 и Υ4 рецептору в отличие от Υ рецептора.
Профиль рецепторного распознавания.
Аффинность связывания [61п34]РР с Υ4 рецептором равна 1,2 нМ, а с Υ2 рецептором - 9,0 нМ, тогда как аффинность к Υ1 рецептору не удаётся измерить даже при концентрациях >1000 нМ (табл. 1). Что касается ίη νίίΐΌ активности, [С1п34]РР имеет величину ЕС50 1,1 нМ в отношении Υ4 рецептора и 3,0 нМ в отношении Υ2 рецептора, тогда как его активность в отношении Υ1 рецептора составляет 388 нМ (табл. 2).
Устойчивость белка аналогична устойчивости РР1-36.
Ιη νί\Ό селективность рецептора.
В исследовании с эскалацией дозы [С1п34]РР вводили внутривенным вливанием анестезированным собакам с последующей 30-минутной инфузией в дозах 0,3, 1, 3, 10, 30 и 100 мкг/кг. Уровни [С1п34]РР в плазме измеряют радиоиммунным анализом, который показывает линейную зависимость от дозы. При наивысших дозах уровни в плазме 100 нМ получают у собак. Тем не менее, никакого зависящего от дозы действия ни на кровяное давление, ни на частоту сердечных сокращений не наблюдают. Хорошо известно, что NΡΥ и ΡУУ, которые являются агонистами как к Υ1, так и к Υ2 рецепторам, при значительно более низких уровнях в плазме повышают кровяное давление. Таким образом, эти эксперименты показывают, что [С1п34]РР также ίη νί\Ό является высокоселективным пептидом в отсутствие измеримой Υ1-рецепторной активности.
Ιη νί\Ό действие на срочный приём пищи у мышей - ΡУУ3-36, [С1п34]РР или физиологический солевой раствор вводят в виде подкожных инъекций группам из 8 мышей в дозах 3 или 30 мкг (ΡУУ3-36) или 1 и 10 мкг ([С1п34]РР) каждому животному после 16 ч в отсутствие пищи. На фиг. 2 показано аккумулированное потребление пищи у мышей. ΡУУ3-36 в дозе 30 мкг ингибирует потребление пище в течение первых двух часов, но действие постепенно ослабевает в последующие 2-6 ч. [С1п34]РР проявляет более выраженный и продолжительный ингибирующий эффект в отношении потребления пищи у мышей, чем ΡУУ3-36. Так, даже в дозе 1 мкг наблюдается более эффективное ингибирование потребления пищи и этот эффект длится более 8 ч (фиг. 2). Таким образом, [С1п34]РР, который в 10 раз менее активен в отношении Υ2 рецептора, как определено ίη νί!ΐΌ анализами (значения ЕС50 3,0 по сравнению с 0,24 для ΡУУ3-36, табл. 2), тем не менее, очевидно, более активен и оказывает более продолжительное действие на срочный приём пищи у мышей, предположительно, благодаря его действию также в качестве Υ4 агониста.
- 15 011861 [Ο1η34]ΡΡ может по аналогии с другими представленными в данном описании примерами пептидов модифицироваться далее для различных фармакокинетических или других целей, при этом сохраняя общую Υ2-Υ4 селективность по сравнению с Υ1. Например, остатки Ме! в положении 17 и/или 30 можно заместить, например, на Ьеи или И1е, один или более Ьук или других предрасположенных к присоединению остатков можно ввести в различные положения для введения различных мотивов и т. д. При этом можно получить группу селективных Υ2-Υ4 пептидных агонистов, из которых можно выбрать соединения в качестве лекарств для лечения ожирения и т.д., представленные в другом месте данного описания.
^π30,61η34]ΡΡ (8ЕЬ) ΙΌ Ыо: 7), [№30,61η34]ΡΡ (8ЕЬ) ΙΌ Ыо: 8), ^π28,61η34]ΡΡ (8ЕЬ) ΙΌ Ыо: 9), [Ηίκ26,61η34]ΡΡ (8ЕЬ) ΙΌ Ыо: 10)
Так же как |Не31,61η34|ΡΡ (8ЕО ΙΌ №: 5) и [Vа131,61η34]ΡΡ (8ЕО ΙΌ №: 6), эти пептиды являются аналогами ΡΡ, созданными с целью высокой аффинности к Υ2 рецептору, однако в этих случаях замена Ριό34 на С1п совмещается с заменой других №-ΝΡΥ/№-ΡΥΥ остатков в С-концевой последовательности ΡΡ: Ме!30 на Ьеи (как в ΝΡΥ и ΡΥΥ), или Пе28 на Ьеи (как в ΡΥΥ, ΝΡΥ имеет Не, как ΡΡ), или Агд26 на Ηίκ (как в ΝΡΥ и ΡΥΥ). Например, замена Ме!30 на Ьеи или Ы1е имеет то преимущество, что она исключает возможность окисления природного остатка Ме!. ^π30,61η34]ΡΡ, [Ν^30,61η34]ΡΡ, ^π28,61η34]ΡΡ и [Ηίκ26,61η34]ΡΡ представляют собой новые соединения.
[Ι^3,61η34]ΡΡ (8ЕЬ) ΙΌ Ыо: 11) [Ι^3,Ο1η34]ΡΡ представляет собой пептиды, модифицированные как на С, так и на Ν-конце каркаса ΡΡ с целью получить объединённую (общую) Υ2-Υ4 селективность относительно Υ1. Так же как, например, [Ι^31,Ο1η34]ΡΡ и |Vа131.С1η34|ΡΡ. этот пептид является аналогом ΡΡ, созданным с целью получения высокой аффинности к Υ2 рецептору, однако в этом случае замена Ριό34 на С1п совмещается с заменой других №-ΝΡΥ/^-ΡΥΥ остатков в Ν-концевой последовательности ΡΡ: Ьеи3 на Не (как в ΡΥΥ - в ΝΡΥ это 8ег). [Ι^3,61η34]ΡΡ является новым соединением.
[Α1а1,61и4,Α^д26,Ме!30]ΡΥΥ (8ЕЬ) ΙΌ Но: 12)
Этот пептид представляет в данном описании группу аналогов ΡΥΥ и ΝΡΥ, в которых один или более не-ΡΡ остатков на Ν- и/или С-конце (концах) заменяе(ю)тся остатком(ами), имеющимися в ΡΡ, с целью получения заданной общей Υ2-Υ4 селективности относительно Υ1. [Α1а1,61и4,Α^д26,Ме!30]ΡΥΥ создан с целью получения высокой аффинности к Υ4 рецептору за счёт введения в целом четырёх ΡΡ-подобных остатков в С- и Ν-концевые последовательности. Остаток Ριό не вводится в положение 34, так как это оказывает большое влияние на аффинность пептидов к Υ2 рецептору, хотя и повышает аффинность пептидов к Υ4 рецептору. [Α1а1,61и4,Α^д26,Ме!30]ΡΥΥ является новым соединением.
Профиль рецепторного распознавания.
[Α1а1,^1и4,Α^д26,Ме!30]ΡΥΥ проявляет высокую активность в отношении стимулирования человеческого Υ2 рецептора (ЕС50=1,0 нМ) и человеческого Υ4 рецептора (ЕС50=1,4 нМ), тогда как его активность в отношении человеческого Υ1 составляет лишь 87 нМ (табл. 2).
Устойчивость белка аналогична устойчивости ΡΥΥ1-36.
[Α1а1,^1и4,Α^д26,Ме!30]ΡΥΥ можно по аналогии с другими представленными в данном описании примерами пептидов модифицировать далее для различных фармакокинетических или других целей, при этом сохраняя общую Υ2-Υ4 селективность по сравнению с Υ1. Например, остатки Ме! в положении 17 и/или 30 можно заместить, например, на Ьеи или Ме, один или более Ьук или других, предрасположенных к присоединению, остатков можно ввести в различные положения для введения различных мотивов и т.д. При этом можно получить группу селективных Υ2-Υ4 пептидных агонистов, из которых можно выбрать соединения в качестве лекарств для лечения ожирения и т.д., представленные в другом месте данного описания.
[ΑΜ,ΟΜΙΡΥΥ (8ЕЬ) ΙΌ Цо: 14), [Αγ§26^!30]ΡΥΥ (8ЕЬ) ΙΌ Цо: 16), [61π4^!30]ΡΥΥ (8ЕЬ) ΙΌ №: 18), [61π4,Αγ§26]ΡΥΥ (8ЕЬ) ΙΌ Ко: 20)
Эти новые пептиды, наряду с [Α1а1,^1и4,Α^д26,Ме!30]ΡΥΥ, представляют собой группу пептидных агонистов на основе ΡΥΥ или ΝΡΥ, в которых на С- и/или на Ν-концах заменены остатки, чтобы получить селективность к Υ2 плюс Υ4 рецепторам в отличие от Υ1 рецептора. Тем самым, и вместе с другими пептидами на основе ΡΡ, получены многообразные пептиды, из которых можно выбрать пептиды с оптимальным сочетанием высокой активности в отношении Υ2 и Υ4 с меняющейся активностью в отношении Υ1 с целью использования в качестве лекарств против ожирения и т. д.
Профили рецепторного распознавания.
В качестве примеров в табл. 1 показано, что аффинность [Α^д26,Ме!30]ΡΥΥ к Υ2 и Υ4 рецепторам составляет 0,13 и 2,3 нМ, соответственно, в отличие от аффинности к Υ1 рецептору, равной 65 нМ. Другой пример, аффинность ΡΥΥ к Υ1 рецептору снижается с 16 до 367 нМ при замене С1и вместо Ьук в положении 4 и Агд вместо Ηίκ в положении 26 в [^1и4,Α^д26]ΡΥΥ, в то же время за счёт этих замен повышается аффинность к Υ4 с 30 нМ (для ΡΥΥ) до 3,3 нМ для [61и4,Α^д26]ΡΥΥ, таким образом создаётся окно селективности более чем в 100 раз (табл. 1).
- 16 011861 [Сук2,Э-Сук27,С1п34]РР (81X) ΙΌ Νο: 22)
Здесь данный аналог РР представляет группу Υ2-Υ4 селективных агонистов, в которых повышенная устойчивость белка [Сук2,Э-Сук27]РР пептида сочетается с двойной селективностью в отношении Υ2 и Υ4 в сравнении с Υ1-рецепторной селективностью пептида [С1п34]РР. Это новое соединение. На основании рассмотрения вышеприведённых пептидов ясно, что этот пептид можно модифицировать далее для различных фармакокинетических или других целей, при этом сохраняя общую Υ2-Υ4 селективность по сравнению с Υ1. Например, остатки Ме! в положении 17 и/или 30 можно заместить, например, на Ьеи или №е, один или более Ьук или других, предрасположенных к присоединению, остатков можно ввести в различные положения для введения различных мотивов и т.д. При этом можно получить группу селективных Υ2-Υ4 пептидных агонистов, из которых можно выбрать соединения в качестве лекарств для лечения ожирения и т.д., представленные в другом месте данного описания.
^82^-24^-^827,0^4^ (81 Б) ΙΌ Νο: 23)
В данном РР аналоге двойная рецепторная специфичность [С1п34]РР встроена в малый подходящий аналог РР типа [Сук2,Аοс-24,^-Сук27]ΡΡ. Это новое соединение.
Клинические показания
Υ2/У4-специфические агонисты, которые рассматриваются в настоящем изобретении, важны для лечения состояний, откликающихся на активацию Υ2 и/или Υ4 рецепторов. Такие состояния включают состояния, для которых показаны регуляция потребления энергии или энергетический метаболизм, контроль интестинальной секреции или индукция ангиогенеза. Для применения в каждом таком случае агонист может включать модификацию или мотив, которые придают устойчивость к пептидазам, свойства связывания с сывороточным белком, или ПЭГилирование для того, чтобы продлить период полужизни в сыворотке и/или в ткани. Главным образом, для индукции ангиогенеза агонист может содержать САСсвязывающий мотив для продления периода полужизни в тканях и экспозиции с Υ рецептором.
Заболевания или состояния, при которых показана регуляция потребления энергии или энергетический метаболизм, включают ожирение и избыточный вес и состояния, при которых ожирение и избыточный вес рассматриваются как способствующие факторы, такие как булимия, нейрогенная булимия, Синдром X (метаболический синдром), диабет, сахарный диабет типа 2 или инсулиннезависимый сахарный диабет (ΝΙΌΌΜ), гипергликемия, устойчивость к инсулину, нарушенная толерантность к глюкозе, сердечно-сосудистое заболевание, гипертензия, атеросклероз, заболевание коронарных артерий, инфаркт миокарда, заболевание периферических сосудов, удар, тромбоэмболическое заболевание, гиперхолистеринемия, гиперлипидемия, болезни желчного пузыря, остеоартрит, остановка дыхания во сне, репродуктивные нарушения, такие как синдром поликистоза яичников, или рак молочной железы, простаты или толстой кишки.
Заболевания или состояния, при которых показана регуляция интестинальной секреции, включают различные формы диареи или кишечную гиперсекрецию.
Заболевания или состояния, при которых показана индукция ангиогенеза, включают заболевание периферических сосудов, заболевание коронарных сосудов, инфаркт миокарда, удар, состояния, при которых всё вышеперечисленное рассматривается как способствующий фактор, заживление ран и восстановление тканей.
1. Ожирение и избыточный вес.
Было показано, что ΡУУ3-36 снижает аппетит, потребление пищи и вес тела у различных у различных грызунов при периферическом введении (Вайетйат е! а1. №11иге 2002, 418: 595-7; ΟΙιαΠίκ е! а1. ВВКС Νον. 2003, 311: 915-9), а также для снижения аппетита у человека также при периферическом введении (Вайетйат е! а1., 2002). Данные на животных, включая исследования нокаутированных по рецептору животных, чётко показывает, что это действие ΡУУ3-36 опосредуется с помощью Υ2 рецепторов и ^Υ/ΑβΡΕ и РОМС нейронов в дугообразном ядре. Сообщалось, что уровни ΡУУ и пищевая реакция на ΡУУ часто ниже у субъектов, страдающих ожирением, и находятся в обратной корреляции с их ΒΜΙ (индексом массы тела). Важно отметить, что субъект, страдающий ожирением, не резистентен к действию ΡУУ, так как инфузия ΡΥΥ3-36 в течение 90 мин снижает потребление пищи у субъектов, страдающих ожирением, аналогичным образом в течение длительного времени (Вайетйат е! а1., 2003, ΝΉΙΜ 349: 94148).
Накопленные в последних исследованиях на животных многочисленные данные показывают, что РР является мощным и эффективным анорексигенным пептидом при периферическом введении репрйета11у (Акака^а е! а1. Рерйбек 1999, 20; 1445-8; Ка!киига е! а1. Рерйбек 2002, 23: 323-9; Акака^а е! а1. Сак!гоейегоЦду 2003,124: 1325-36). Так как РР не оказывает влияния на аппетит, потребление пищи и т.д. у нокаутированных по Υ4 животных, весьма вероятно, что РР действует с помощью Υ4 рецептора, снижая аппетит и потребление пищи (Вайетйат е! а1., 2004, тезисы 83.3 Гют [п1егпа1юпа1 №Υ кутрοк^ит ш С^тЬта Ρο^ίида1). РР также оказывает влияние на потребление пищи у животных, чьё ожирение вызвано диетой. РР рецепторы обнаружены в основном в стволе мозга в двигательных нейронах блуждающего нерва и в ядрах одиночного пучка (ΝΤ8), каждый из которых является поверхностью, где гематоэнцефалический барьер неэффективен и где гормоны кровотока, такие как РР, могут получить доступ к нейронам. Весьма вероятно, что Υ4 рецепторы в ΝΤ8 в стволе мозга являются основной мишенью, через кото
- 17 011861 рую действует ΡΡ, подавляя аппетит и потребление пищи. Однако последние результаты также указывают на возможность того, что ΡΡ могут действовать с помощью Υ рецептора в дугообразном ядре, возможно, на ΡОМС, а, возможно, также на ΝΡΥ/АдВГ нейронах (Вайегйат е! а1. Со1тЬга ΝΡΥ теейпд аЬкйас! 83.3). Низкие уровни ΡΡ обнаружены у субъектов, страдающих ожирением, особенно у субъектов с синдромом Прадера-Вилли (ΖίρΓ е! гб. ТС.Е.М. 1981, 52: 1264-6, Но1к! е! а1., 1983, 1п!. I. ОЬек. 7: 529-38; 61акег е! а1. Ногт. Ме!аЬ. 1988, 20: 288-92), а высокие уровни ΡΡ обнаружены у пациентов с нейрогенной анорексией. Важно отметить, что инфузия ΡΡ человеку понижает аппетит и потребление пищи в течение до 24 ч (Ва!!егйат е! а1. 1СЕМ 2003, 88: 3989-92). Таким образом, действие ΡΡ на потребление пищи наблюдают после того, как уровни ΡΡ в кровотоке вернулись к нормальным значениям. Такое продолжительное действие на аппетит и т.д. хорошо известно также после инъекции ΙΟν, особенно АдВ₽.
Важно отметить, что также показано, что инфузия ΡΡ снижает потребление пищи у больных с синдромом Прадера-Вилли, страдающих вызванным болезнью ожирением (Вегп!коп е! а1., 1993, Ρеρΐ^бек 14: 497-503).
Вследствие того, что действие ΡΥΥ с помощью Υ2 рецепторов - ингибирование стимулирующих ΝΡΥ/ΛβΡΡ нейронов - возможно, главным образом, в дугообразном ядре, а действие ΡΡ с помощью Υ4 рецепторов, по-видимому стимуляция ингибирующих ΡОМС нейронов, главным образом, в области пострема и в ΝΤ8 в стволе мозга, но также в дугообразном ядре (Вайегйат е! а1., 2004, 1п!ета!юпа1 ΝΡΥ кутрокшт, Со1тЬга аЬкйас! 83.3), общий эффект Υ2 агониста и Υ4 агониста является аддитивным или даже синергическим эффектом, т.е. более эффективное действие достигается при совместном лечении, чем при лечении каждым из них по отдельности.
Известно, что сам по себе ΡΥΥ при периферическом введении является сильным рвотным средством, на самом деле, ΡΥΥ был открыт - во второй раз - в 1989 г. как биологически активный компонент в хроматографической фракции интестинального экстракта, вызывающий рвоту у собак (Нагбшд апб МсЭопа1б, 1989, Ρеρ!^бек 10: 21-24).
Был сделан вывод, что ΡΥΥ является наиболее мощным идентифицированным пептидом в кровотоке, вызывающим рвоту, и что этот эффект опосредуется с помощью области пострема, известной тем, что она имеет негерметичный гематоэнцефалический барьер. Также сообщалось, что ΡΥΥ3-36 может вызывать тошноту при периферическом введении людям (Ыак!есй ргекк ге1еаке 29'1' оГ 1ипе 2004). С физиологической точки зрения кажется логичным, что ΡΥΥ, и биологически активные продукты его превращения, который обычно сначала секретируется в больших количествах в процессе приёма большого количества пищи, или когда происходит демпинг (сбрасывание) пищи в нижние отделы кишечника в результате различных хирургических вмешательств, способен вызывать рвоту, чтобы избавить субъекта от ситуации явного переедания. Интересно, что в статье было отмечено, что ΡΡ в сходных дозах не вызывает рвоты у этих собак (Нагбшд апб МсЭопа1б, 1989). ΡΡ действует с помощью Υ4 рецепторов, также расположенных в области пострема ствола мозга, но не вызывает рвоту. Большие дозы комбинированных Υ2-Υ4 пептидных агонистов, таких как [61η34]ΡΡ, можно вводить животным, таким как обезьяны циномолгус (супо), достигая уровня в плазме 12-13 нМ, не наблюдая никакой рвоты у животных и никаких побочных эффектов со стороны ЖКТ. Это является неожиданным, так как |Ο1π34|ΡΡ имеет относительно высокую активность в отношении Υ2 рецептора, к которому ΡΥΥ3-36 является полностью селективным. Так, неожиданно, комбинированный Υ2-Υ4 селективный агонист не вызывает рвоты в той же степени, в какой селективный Υ2 агонист - соединение ΡΥΥ3-36 - вызывает. Очевидно, Υ4-рецепторная активация, предположительно, в области пострема, предупреждает рвотное действие Υ2 активации того же соединения. Это свойство комбинированного Υ2-Υ4 селективного агониста является очень благоприятным для лечения ожирения и связанных с ним состояний.
Следовательно, Υ2/Υ4 селективные агонисты, которые рассматриваются в настоящем изобретении, пригодны для применения для субъекта, такого как млекопитающее, включая человека, чтобы регулировать потребление энергии. Соответственно, изобретение относится к способам изменения потребления энергии, потребления пищи, аппетита и расхода энергии. В данном описании раскрывается способ уменьшения потребления энергии или пищи путём введения субъекту косметически или терапевтически эффективного количества такого агониста. В одном варианте изобретения введение рецепторного агониста приводит к снижению количества, или общего веса, или общего объёма, или калорийности (содержания калорий) пищи. В другом варианте изобретения это может вызывать снижение потребление компонента пищи, например снижение приёма липидов, углеводов, холестерина или белков. В некоторых других способах по данному описанию могут вводиться предпочтительные соединения, которые подробно обсуждаются в данном описании. В дополнительном варианте изобретения раскрывается способ снижения аппетита путём введения терапевтически эффективного количества такого агониста. Аппетит можно измерять (определять) любыми способами, известными специалисту в данной области техники.
Например, пониженный аппетит можно определять с помощью физиологической оценки. В таком варианте изобретения введение рецепторного агониста приводит к изменению чувства голода, насыщения и/или сытости. Голод можно оценивать любыми способами, известными специалисту в данной области техники. В одном варианте изобретения голод оценивают с помощью физиологических анализов, таких как оценка чувства голода и сенсорного восприятия, используя, например, анкету.
- 18 011861
В другом варианте изобретения раскрывается способ снижения моторики верхних отделов ЖКТ, например замедление опорожнения желудка. Способ включает введение терапевтически эффективного количества такого агониста субъекту, тем самым снижается моторика ЖКТ. Общеизвестно, что соединения, которые замедляют опорожнение желудка, также оказывают благотворное действие при снижении потребления пищи, так как субъект чувствует насыщение или сытость. Известно, что как ΡУУ3-36, прототип Υ2 агониста, так и РР, прототип Υ4 агонистов, замедляют опорожнение желудка. Комбинированный Υ2-Υ4 агонист оказывает аддитивное или даже синергическое действие при ингибировании моторики верхних отделов ЖКТ.
В другом варианте изобретения раскрывается способ по данному описанию изменения энергетического метаболизма у субъекта. Способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества такого агониста, тем самым изменяется расход энергии. Энергия сжигается в физиологических процессах. Организм может непосредственно изменять расход энергии, модулируя эффективность этих процессов или изменяя количество или природу протекающих процессов. Например, в процессе пищеварения повышается энергия в организме при прохождении через пищеварительный тракт и усвоении пищи, и в клетках, при этом эффективность клеточного метаболизма может меняться, выделяя больше или меньше тепла. В другом варианте изобретения раскрывается способ по данному описанию любых и всех манипуляциях дугообразной цепи, описанных в данной заявке, которые согласованно изменяют потребление пищи и соответственно изменяют расход энергии. Расход энергии является результатом клеточного метаболизма, белкового синтеза, интенсивности обмена веществ и усвоения калорий. Таким образом, периферическое введение приводит к повышенному расходу энергии и пониженной эффективности усвоения калорий. В одном варианте изобретения терапевтически эффективное количество рецепторного агониста по изобретению вводят субъекту, тем самым повышая расход энергии.
В некоторых вариантах изобретения как при терапевтическом, так и при косметическом применении Υ2/Υ4 селективный агонист можно использовать для контроля веса и лечения, снижения или предупреждения ожирения, в частности для достижения одного или более из нижеприведённых результатов: предупреждение и снижение увеличения массы тела; индукция и промотирование потери веса; уменьшение ожирения, определяемого с помощью индекса массы тела. Как указано выше, изобретение также относится к применению Υ2/Υ4 селективного агониста для регуляции одного или более чувств: аппетита, сытости или голода, в частности одного или более из нижеперечисленного: индукции, увеличения, повышения и промотирования сытости и ощущения насыщения; уменьшения, ингибирования и подавления голода и ощущения голода. Это раскрытие относится далее к применению Υ2/Υ4 селективного агониста для поддержания одного или более из нижеперечисленного: заданного веса тела, заданного индекса массы тела, желаемого внешнего вида и хорошего здоровья.
В другом, или альтернативном, аспекте данное изобретение относится к способу лечения и/или предупреждения пониженного энергетического метаболизма, нарушений питания, нарушения аппетита, избыточного веса, ожирения, булимии, нейрогенной булимии, Синдрома X (метаболического синдрома), или связанных с этим осложнений или рисков, включая диабет, сахарный диабет типа 2 или инсулиннезависимый сахарный диабет (МОЭМ), гипергликемию, устойчивость к инсулину, нарушенную толерантность к глюкозе, сердечно-сосудистое заболевание, гипертензию, атеросклероз, застойную сердечную недостаточность, удар, инфаркт миокарда, тромбоэмболические заболевания, гиперхолистеринемию, гиперлипидемию, болезни желчного пузыря, остеоартрит, остановка дыхания во сне, репродуктивные нарушения, такие как синдром поликистоза яичников, или рак молочной железы, простаты или толстой кишки, причём способ заключается во введении субъекту, такому как млекопитающее, включая человека, эффективной дозы одного или более Υ2/Υ4 селективных агонистов по данному описанию.
2. Кишечная гиперсекреция.
Известно, что как NΡΥ, так и ΡΥΥ оказывают антисекреторное действие как на тонкий, так и на толстый кишечник. С помощью исследований, проведённых на выделенных тканях человеческой толстой кишки, было продемонстрировано, что это действие опосредуется как Υ1, так и Υ2 рецепторами, а с помощью ТТХ было показано, что основная часть Υ2 компонента опосредуется с помощью нейронного компонента (Сох & ТоидЬ 2001 Вг. I. РЬагтасо1. 135: 1505-12). РР также оказывает сильное антисекреторное действие, и оно, очевидно, опосредуется Υ4 рецепторами, расположенными на эпителиальных клетках, а не по нейронным механизмам (Сох & ТоидН 2001). Таким образом, вследствие аналогичного эффекта, но опосредуемого другими механизмами, комбинированный Υ2-Υ4 агонист оказывает аддитивное или даже синергическое антисекреторное действие на ЖКТ. Было показано ш у1уо, что периферическое введение ΡУУ может вызвать продолжительную реакцию на кишечную секрецию, индуцированную вазоактивным кишечным полипептидом у людей с илеостомией (Р1ау£огй е! а1., 1990, Ьапсе!, 335: 1555-57). Был сделан вывод, что ΡУУ пептид может быть терапевтическим агентом против диареи, однако, например, натрийуретический и гипертензивный эффекты комбинированного Υ1 и Υ2 агониста препятствуют этому. Комбинированные селективные Υ2-Υ4 агонисты по настоящему изобретению особенно применимы для лечения или защиты против гиперсекреции ЖКТ, включая различные формы диареи, вне зависимости от того, вызваны они непосредственно гиперсекрецией или нет. Одно особенно интересное показание представляет собой гиперсекрецию у пациентов с илеостомией, которые часто теряют
- 19 011861 большие количества жидкости.
2.1. Терапевтический ангиогенез.
Ряд 1и У1!го исследований влияния на рост клеток сосудов гладких мышц, гипертрофию вентрикулярных кардиомиоцитов, а также на пролиферацию и миграцию эндотелиальных клеток наводят на мысль, что №У может действовать как ангиогенный фактор (2ико\Укка-Сго)ек е! а1., 1998, Спс. Век. 83: 187-95). Важно отметить, что исследования ш у1уо как на мышиной модели корнеальных микрокарманов, так и анализ хорион-аллантоисной мембраны (САМ) цыплят подтвердили, что NΡΥ является мощным ангиогенным фактором, который приводит к возникновению васкулярных структур, подобных сосудистому дереву, с проявляющейся вазодилатацией, как наблюдалось в ином случае только для фактора роста фибробластов-2 (ЕСЕ-2), а не на примере ангиогенных структур сосудистого эндотелиального фактора роста (СЭФР, УЕСЕ) (Екк!гаиб е! а1., 2003, РХАА 100: 6033-38). При развитии эмбрионов цыплят NΡΥ индуцировал прорастание сосудов из ранее имевшихся кровеносных сосудов. Действие №Υ не наблюдается у животных, нокаутированных по Υ2 рецептору, это указывает, что Υ2 рецептор отвечает за ангиогенный эффект №Υ (Екк!гаиб е! а1., 2003). Это замечание подтверждается также наблюдениями, показывающими, что Υ2 рецептор является высокоактивированным в ишемических сосудах, и фермент, который генерирует эндогенный, селективный Υ2 лиганд ΡУУ3-36, дипептидилпептидазу-1У, также является высокоактивированным. Пептиды по настоящему изобретению, все, представляют собой Υ2 агонисты, имеющие, по меньшей мере, дополнительное свойство - являться также Υ4 агонистами и быть селективными, в то же время они являются слабыми агонистами Υ1. Таким образом, свойство этих пептидов быть Υ2 агонистами делает их пригодными в качестве терапевтических ангиогенных агентов, а Υ4 агонизм оказывает благотворное действие на снижение или избавление от нежелательной стимуляции тошноты или рвоты, как известно, ассоциируемых с высокими уровнями Υ2 агонистов в плазме.
При различных сердечно-сосудистых заболеваниях, например, таких как атеросклероз, считается, что в периферических сосудах, а также в коронарных сосудах индукция ангиогенеза является благотворной. Также считают, что индукция благотворна для обеспечения реперфузии после инфаркта микарда. Полагают, что ЕСЕ-2 является эффективным агентом для индукции ангиогенеза у пациентов с сердечнососудистыми заболеваниями. Однако, подобно большинству ангиогенных факторов, ЕСЕ-2 является фактором роста и может также стимулировать рост опухолей, вызывая ангиогенез. Как представлено выше, NΡΥ, действующий через Υ2 рецепторы, индуцирует неоваскуляризацию типа, аналогичного неоваскуляризации, индуцируемой ЕСЕ-2, однако №Υ является нейропептидом, а не классическим фактором роста и не вызывает осложнений в виде индукции роста опухоли, таким образом, Υ2 агонист является агентом, пригодным для терапевтического ангиогенеза. Однако особенно важно для такого применения то, что агонист не проявляет Υ1-рецепторного агонизма, так как это оказывало бы нежелательное действие на сердечно-сосудистую систему. Это означает, что пептиды, которые рассматриваются в данном изобретении, являющиеся Υ2 селективными рецепторными агонистами, являются особенно подходящими терапевтическими агентами с учётом того, что они вызывают ангиогенез. Они особенно применимы после модификации с присоединением САС-связывающего мотива, обсуждавшегося выше.
Дальнейшее уточнение: действие ЕСЕ-2, как действие большинства классических факторов, частично опосредуется или регулируется с помощью их связывания с гликозаминогликаном (САС) во внеклеточной матрице. Это связывание с САС гарантирует, что ангиогенный фактор действует в соответствующем пространстве и времени и что он не скоро вымывается из ткани. Для применения в терапевтическом ангиогенезе малых пептидов и пептидов-миметиков, таких как описанные в настоящем изобретении, это особенно важно. Поэтому в предпочтительном варианте изобретения пептиды включают один или более САС-связывающих мотивов, которые гарантируют, что они присоединятся к САС во внеклеточной матрице, с целью индуцировать оптимальный ангиогенез после введения. Это можно осуществлять, например, внутривенным или внутриартериальным введением, или, например, можно вводить непосредственно в коронарные артерии, чтобы индуцировать ангиогенез в сердце при болезни коронарной артерии и/или после острого инфаркта миокарда. Аналогично, такое соединение можно вводить внутриартериальной инъекцией в бедренную артерию для лечения болезни периферических сосудов. Его можно также, например, применять для топического, местного введения в кожные поражения, чтобы стимулировать более быстрое заживление ран. Продолжительной экспозиции с Υ рецептором, эффективной для индукции ангиогенеза, можно также добиться, используя пептид по настоящему изобретению, модифицированный мотивом, связывающим сывороточный альбумин.
Таким образом, в предпочтительном варианте изобретения Υ2/Υ4 селективные агонисты содержат САС-связывающий мотив, который вводят в положение, где он не снижает устойчивости пептида или не снижает активности и селективности пептида. Соответственно, в одном варианте данное изобретение относится к применению модифицирующих изменений Υ2/Υ4-рецепторного агониста в системе ангио генеза, особенно, для индукции ангиогенеза, такого как ангиогенез, ассоциированный заболеваниями или состояниями, например, такими как сердечно-сосудистые заболевания, включая болезнь периферических сосудов и инфаркт миокарда; процессы репарации тканей, включая заживление ран на коже, воспалительные состояния, включая воспалительные состояния в желудочно-кишечном тракте, такие, например, как язвы, колит, воспалительное заболевание кишечника, болезнь Крона и т. д.
- 20 011861
Специфический вариант изобретения включает применение рецепторного агониста для индукции ангиогенеза в сердце или в кровеносных сосудах, или в тканях, таких как ткань слизистой оболочки, включая слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта и кожу.
3. Заживление ран.
Сообщалось, что у животных, у которых Υ2 рецептор селективно выделяется (элиминирует) за счёт делеции его гена, заживление ран замедляется, и что ухудшается ассоциированная с этим неоваскуляризация (Екк!тапб е! а1., 2003, РНАЗ, 100: 6033-38).
Поэтому селективные Υ2-Υ4 агонисты по настоящему изобретению применимы для улучшения заживления ран за счёт их свойства - быть агонистами Υ2. Для этого пептиды можно вводить различными способами, включая парентеральное введение. Однако предпочтительным способом применения является топическое введение, например, в виде раствора, дисперсии, порошков, плиток, крема, мази, лосьона, геля, гидрогеля, трансдермальной системы доставки, включая пластыри и т. д. Для топического применения их можно использовать в обычной форме. Однако в предпочтительном варианте изобретения пептиды модифицируют с помощью одного или более САС-связывающих мотивов по данному описанию для того, чтобы гарантировать продолжительное местное действие пептида с помощью связывания САС в ткани.
4. Воспалительное заболевание кишечника.
Ранее было описано применение РΥΥ для предупреждения и/или лечения воспалительного заболевания кишечника; см. международную заявку 03/105763, принадлежащую Ату11п РЬагтасеибса1к, Шс., вводимую в данное описание в качестве ссылки. Следовательно, агонисты по данному изобретению являются также эффективными для лечения или предупреждения воспалительного заболевания кишечника. Соответственно, настоящее изобретение также относится к применению агонистов по данному описанию для такой медицинской цели. В представляющем интерес варианте изобретения пептиды содержат один или более САС-связывающих мотивов, см. выше.
Дополнительные комментарии относительно применения Υ2/Υ4 агонистов для лечения или предупреждения ожирения и родственных заболеваний
В процессе еды широкий спектр желудочно-кишечных гормонов и нейромедиаторных систем активируется тщательно согласованно, последовательно или с наложением. Кроме того, компоненты пищи влияют не только на секрецию ЖК гормонов и активность различных путей афферентных нейронов, но эти компоненты пищи, после всасывания, также непосредственно влияют на различные гормоны и центры в ЦНС. Поэтому регуляция потребления пищи и расхода энергии представляет собой в высшей степени сложный и многоаспектный процесс. С этой точки зрения удивительным является, что некоторые гормоны, такие как агонисты Υ2, могут на самом деле заметно влиять на систему при введении таким образом, который приводит, например, только к 3-4-кратным уровням в плазме, которые достигаются в процессе еды.
Частью проблемы является то, что применение таких соединений - комбинированных Υ2-Υ4 агонистов - вызывает оптимальный эффект, если соединения дают натощак в описанных эффективных дозах. Если Υ2-Υ4 агонисты дают в ситуации, когда различные гормональные и нейронные системы активны вследствие присутствия компонентов пищи в ЖКТ или ожидания пищи, эффекта не наблюдается или наблюдаемый эффект значительно меньше. Поэтому в предпочтительном варианте изобретения комбинированный Υ2-Υ4 агонист вводят натощак в эффективной дозе либо подкожно, назально, либо другими способами, указанными в другом месте данного описания. В данном контексте термин натощак означает, что субъект не принимал никакой пищи или питья в течение, по меньшей мере, последних 2 ч перед введением комбинированного Υ2-Υ4-рецепторного агониста, например, по меньшей мере, в течение последних 3 ч, по меньшей мере, в течение последних 4 ч, по меньшей мере, в течение последних 5 ч, по меньшей мере, в течение последних 6 ч, по меньшей мере, в течение последних 7 ч, по меньшей мере, в течение последних 8 ч, по меньшей мере, в течение последних 9 ч, по меньшей мере, в течение последних 10 ч, по меньшей мере, в течение последних 11 ч, по меньшей мере, в течение последних 12 ч перед введением дозы.
В подгруппе популяции комбинированный Υ2-Υ4 агонисты могут не оказывать предполагаемого действия вследствие генетических изменений, таких как полиморфизм в гене Υ4 рецептора. Утрата функциональных мутаций в этих рецепторах связана, по-видимому, с ожирением. Поэтому в предпочтительном варианте изобретения осуществляют анализ Υ4-рецепторного гена субъекта, которого нужно лечить, чтобы проверить эти гены на полиморфизм/мутации и идентифицировать такой полиморфизм. На основании такого анализа можно проводить оптимальное лечение субъектов. Например, только субъекты с нормальным генотипом или с полиморфизмом, который не влияет на функцию Υ4 агонистов, включая комбинированные Υ2-Υ4 агонисты, можно лечить с применением таких агонистов. Другая возможность - повысить дозу комбинированного Υ2-Υ4 агониста, вводимую субъектам с ослабленным рецептором, чтобы гарантировать оптимальное действие лекарства. В случае, когда ожирение субъекта вызвано недостаточностью функции Υ4 рецептора, можно утверждать, что лечение, например большими дозами, комбинированного Υ2-Υ4 агониста является формой заместительной терапии при условии, что релевантная рецепторная функция всё ещё сохраняется, например, у гетерозиготных пациентов. В ситуа
- 21 011861 ции, когда невозможно или по финансовым причинам не удаётся провести такой генетический анализ, применение селективного комбинированного Υ2-Υ4 агониста особенно подходит, так как он вследствие его двойного действия на две различные мишени будет эффективен даже в тех случаях, когда одна из мишеней не функциональна или имеет пониженную функциональность из-за генетического полиморфизма.
Перед началом постоянного лечения, чтобы быть уверенными, что лечение проходят только чувствительные к нему субъекты, можно провести тщательный тест для того, чтобы гарантировать, что эти соединения оказывают предполагаемое действие на субъекта, которого нужно лечить.
Селективные Υ2-Υ4 агонисты по изобретению можно комбинировать при лечении ожирения, диабета и родственных заболеваний с различными другими лекарствами, имеющими целью аппетит и расход энергии, эти лекарства включают, но без ограничения, лекарства, такие как ингибиторы липаз ЖКТ, ингибиторы обратного захвата нейромедиаторов, антагонисты каннабиноидных рецепторов и обратные агонисты, а также другие типы нейромедиатора, включая, но без ограничения, 5Н рецепторы, и/или гормона, включая, но без ограничения, агонисты или антагонисты СЬР-1, МС4, МСЗ-рецепторов. Так как селективные Υ2-Υ4 агонисты направлены на гомеостатический регуляторный механизм для связи между ЖКТ и ЦНС, т.е. на Υ2 и Υ4 рецепторы обычно нацелен опосредующий насыщение гормон ΡΥΥ из кишечника и РР из поджелудочной железы, особенно полезно совмещать лечение комбинированными Υ2Υ4 селективными агонистами с лечением лекарством, направленным на важнейший гедонический механизм аппетита и расхода энергии, таким как СВ1 рецепторы, например, являющиеся частью системы поощрения. Поэтому применение селективных Υ2-Υ4 агонистов при лечении ожирения и родственных заболеваний в комбинации с СВ1 антагонистом является предпочтительным вариантом настоящего изобретения.
Дозировки
Терапевтически эффективное количество Υ2/Υ4-рецепторного агониста по данному изобретению зависит от конкретного применяемого агониста, возраста, веса и состояния субъекта, проходящего лечение, тяжести и типа состояния или заболевания, которое нужно лечить, способа введения и эффективности применяемой композиции. Например, терапевтически эффективное количество Υ2/Υ4-рецепторного агониста может меняться, примерно, от 0,1 мкг на кг массы тела, примерно, до 1 г на кг массы тела, например от около 5 мкг до около 1 мг на кг массы тела. В другом варианте изобретения рецепторный агонист вводят субъекту в количестве 0,5-135 пикомолей (пмоль) на кг массы тела или 72 пмоля на кг массы тела. В одном конкретном неограничивающем примере приблизительно 5-50 нмоль вводят в виде подкожной инъекции, например, около 2-20 нмоль или около 1,0 нмоль. Точную дозу специалист в данной области техники легко определит, исходя из активности конкретного применяемого соединения (такого как агонист рецептора), возраста, веса, пола и физиологического состояния субъекта. Доза агониста может быть молярным эквивалентом терапевтически эффективной дозы ΡΥΥ3-36. Это количество можно разделить на одну или несколько доз для применения ежедневно, через день, еженедельно, через каждые две недели, ежемесячно или с любой другой подходящей частотой. Обычно приём осуществляют один или два раза в день.
Способы применения
Агонист можно вводить любым способом, включая энтеральный (например, оральное введение) или парентеральный способ. В конкретном варианте изобретения предпочтительным является парентеральный способ, он включает внутривенную, внутрисуставную, интраперитонеальную (внутрибрюшинную), подкожную, внутримышечную, надчревную инъекцию и инфузию, а также сублингвальный (подъязычный), трансдермальный (чрескожный), топический, трансмукозный, включая назальный, способ, или ингаляция, например лёгочная ингаляция. В конкретных вариантах изобретения предпочтительным является подкожный и/или назальный способ применения.
Агонисты рецепторов можно вводить как таковые в подходящем носителе, или их можно вводить в виде подходящей фармацевтической или косметической композиции. Такие композиции также входят в объём настоящего изобретения. Ниже описаны подходящие фармацевтические композиции. Специалист в данной области техники знает, что такая композиция может быть также пригодна для косметического применения, или он знает, как скорректировать композицию, чтобы сделать ее косметической, используя подходящие косметически приемлемые эксципиенты.
Фармацевтические композиции
Агонисты рецепторов (рецепторные агонисты, также называемые соединения) по данному изобретению для применения в медицине или косметике обычно бывают в виде фармацевтической композиции, содержащей конкретное соединение или его производное совместно с одним или более физиологически или фармацевтически приемлемых эксципиентов.
Соединения можно вводить животному, включая млекопитающих, таких как, например, человек, любым подходящим способом введения, например, таким как оральный, трансбуккальный, назальный, окулярный, лёгочный, топический, трансдермальный, вагинальный, ректальный, парентеральный (включая, наряду с другими, подкожный, внутримышечный и внутривенный, см. выше) способ, в дозе, которая эффективна для индивидуальных целей. Специалист в данной области техники знает, как выбрать под
- 22 011861 ходящий способ введения. Как указывалось выше, предпочтительным является парентеральное введение. В конкретном варианте изобретения рецепторный агонист вводят подкожно и/или назально. Общеизвестно в уровне техники, что подкожные инъекции может делать себе сам пациент.
Композицию, пригодную для конкретного способа применения, индивидуально для каждого пациента легко определит практикующий врач. Различные фармацевтически приемлемые носители и их состав описаны в обычных монографиях о препаратах, например в РеттдЮп'х РНагтасеийса1 8аепсе5 Ьу Е.А. Майш.
Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по изобретению, может быть в виде твёрдой, полутвёрдой или жидкой композиции. Для парентерального применения композиция обычно находится в жидком виде или в виде полутвёрдом или твёрдом виде для имплантации.
Жидкие композиции, которые представляют собой стерильные растворы или дисперсии, могут применяться, например, для внутривенной, внутримышечной, внутриоболочечной, эпидуральной, интраперитонеальной или подкожной инъекции или инфузии. Соединения можно также приготовить в виде стерильной твёрдой композиции, которую можно растворять или диспергировать до или во время введения, например, в стерильной воде, физиологическом растворе или другой подходящей стерильной среде для инъекций.
Композиции в жидком виде может представлять собой раствор, эмульсию, включая наноэмульсии, суспензию, дисперсию, липосомную композицию, смесь, спрей или аэрозоль (два последних типа являются особенно релевантными для назального применения).
Подходящие среды для растворов или дисперсий обычно бывают на водной основе или на основе фармацевтически приемлемых растворителей, например, таких как масло (например, кунжутное или арахисовое масло) или органический растворитель, например, такой как пропанол или изопропанол. Кроме того, композиция по изобретению содержит фармацевтически приемлемые эксципиенты, например, такие как агенты, корректирующие рН, осмотически активные агенты, например, для того, чтобы довести изотоничность композиции до физиологически приемлемых уровней, агенты коррекции вязкости, суспендирующие агенты, эмульгаторы, стабилизаторы, консерванты, антиоксиданты и т.д. Предпочтительной средой является вода.
Композиции для назального применения могут также содержать нераздражающие носители, например, такие как полиэтиленгликоли, гликофурол, и т.д., а также энхансеры всасывания, хорошо известные специалисту в данной области техники (например, со ссылкой на РеттдЮп'х РйагтасеиБса1 8с1епсе).
Для парентерального применения в одном варианте изобретения агонист рецептора можно вообще готовить смешением агониста рецептора заданной степени чистоты в виде стандартной лекарственной формы для инъекций (в виде раствора, суспензии или эмульсии) с фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, т.е. таким, который не является токсическим для реципиентов в применяемых дозах и концентрациях и который совместим с другими ингредиентами композиции.
Обычно препараты готовят с помощью однородного и тщательного смешения (контактирования) рецепторного агониста с жидкими носителями, или с тонкоизмельчёнными твёрдыми носителями, или с теми и другими.
Затем, при необходимости, продукту придают форму нужного препарата. Предпочтительно носитель представляет собой парентеральный носитель, более предпочтительно раствор, изотонический с кровью реципиента. Примеры таких носителей включают воду, физиологический солевой раствор, раствор Рингера и раствор декстрозы. Также применимы по данному описанию неводные носители, такие как нелетучие масла и этилолеат, а также липосомы. Благодаря амфифильной природе пептидов по данному описанию подходящие формы также включают мицеллярные препараты, липосомы и другие типы препаратов, содержащие один или более соответствующих липидов, таких, например, как фосфолипиды и т. п.
Предпочтительно они суспендируются в водном носителе, например в изотоническом буферном растворе при рН около 3,0-8,0, предпочтительно при рН около 3,5-7,4, 3,5-6,0 или около 3,5-5. Применимые буферные вещества включают ацетатный, цитратный, фосфатный, боратный, карбонатный буферы, например, такие как цитрат натрия-лимонная кислота или фосфат натрия-фосфорная кислота и ацетат натрия-уксусная кислота.
Композиции также могут быть предназначены для контролируемой или пролонгированной доставки рецепторного агониста после введения, чтобы создать схему с менее частым введением. Обычно подходящей считается схема приёма лекарственного вещества 1-2 раза в сутки, но в объём настоящего изобретения также входят другие схемы применения, такие, например, как более частое и более редкое введение. Для осуществления пролонгированной доставки рецепторного агониста можно применять подходящий носитель, включающий, например, липиды или масла, чтобы образовать депо в месте введения, из которого рецепторный агонист медленно высвобождается в систему кровообращения, или можно использовать имплантат. Подходящие с этой точки зрения композиции включают липосомы и биоразрушаемые частицы, в которые включён рецепторный агонист.
- 23 011861
В таких ситуациях, когда нужны твёрдые композиции, эти композиции могут быть в виде таблеток, таких как обычные таблетки, шипучие таблетки, таблетки, покрытые оболочкой, формованные таблетки, в виде пеллет, порошков, гранул, гранулятов, материала в виде макрочастиц, твёрдых дисперсий или твёрдых растворов.
Полутвёрдая форма композиции может представлять собой жевательную резинку, мазь, крем, линимент, пасту, гель или гидрогель.
Другие подходящие лекарственные формы фармацевтических композиций по изобретению могут представлять собой вагитории, суппозитории, пластыри, накладки, таблетки, капсулы, саше, пастилки, устройства и т. д.
Лекарственная форма может быть предназначена для неограниченного (свободного) или контролируемого высвобождения, например, за счёт того, что таблетки могут иметь соответствующие покрытия.
Фармацевтическая композиция может содержать терапевтически эффективное количество соединения по изобретению.
Содержание соединения по изобретению в фармацевтической композиции по изобретению составляет, например, около 0,1-100% вес./вес. фармацевтической композиции.
Фармацевтические композиции можно готовить любым способом, хорошо известным специалисту в области приготовления фармацевтических препаратов.
В фармацевтических композициях соединения обычно объединяются с фармацевтическим эксципиентом, т. е. терапевтически инертным веществом или носителем.
Носитель может иметь весьма разнообразные формы в зависимости от заданной лекарственной формы и способа применения.
Фармацевтически приемлемые эксципиенты могут представлять собой, например, наполнители, связующие, вещества, способствующие расщеплению, разбавители, вещества, способствующие проглатыванию, растворители, эмульгаторы, суспендирующие агенты, стабилизаторы, энхансеры, вещества, придающие вкус и запах, агенты коррекции рН, замедлители, увлажняющие средства, поверхностноактивные агенты, консерванты, антиоксиданты и т. д. Подробности можно найти в фармацевтических справочниках, например, таких как Кет1пд!оп'§ Рйагтасеи!1са1 8с1епсе или Рйагтасеийса1 Ехс1р1еп! НапйЬоок.
Синтез
Пептидные агонисты по данному изобретению можно синтезировать твердофазным пептидным синтезом, применяя либо автоматический синтезатор пептидов, либо обычный лабораторный синтез. Твёрдым носителем может являться, например, полимер хлортритила (С1) или Ванга (^апд), каждый из которых можно легко приобрести. Активные группы этих полимеров легко реагируют с карбоксильной группой Ν-Ртос аминокислоты, при этом связывая её с полимером ковалентной связью. Связанный с полимером амин можно депротекционировать экспозицией с пиперидином. Затем вторую Ν-аминокислоту можно присоединить к элементу полимер-аминокислота. Эти стадии повторяют до тех пор, пока не получат нужную последовательность. По окончании синтеза связанный с полимером защищенный пептид можно депротекционировать и отщепить от смолы под действием трифторуксусной кислоты (ТФК, ТРА). Ниже даны примеры реагентов, облегчающих присоединение новых аминокислот к связанной с полимером аминокислотной цепи: тетраметилурония гексафторфосфат (НАТи), О-(1Н-бензотриазол-1-ил)-^^№,№-тетраметилурония гексафторфосфат (НВТи), О-(1Н-бензотриазол-1ил)-^^№,№-тетраметилурония гексафторборат (ТВТи), 1Н-гидроксибензотриазол (НОВ!).
Также предпочтительнее бывает пептидный синтез в растворе, нежели твердофазный пептидный синтез.
Модификация боковых амино- и карбоксильных групп аминокислоты пептидной цепи, например, введением ОАО-связывающего или другого мотива, описанного выше, является простым способом введения и снятия (депротекции) защиты других реакционноспособных групп боковых цепей, не участвующих в реакции.
- 24 011861
Пример.
Для иллюстрации способов, применяемых в синтезе агонистов по изобретению, описано получение последовательности [О1п34]РР.
Схема синтеза
Химические реактивы.
Используют следующие исходные материалы и растворители. Исходные материалы
Ртос- Ктк- Теп!аОе1- гезт (полимер)
Ртос- А1а- ОН.Н2О
Ртос- Аг§(РЫ)- ОН
Ртос- А8п(ТП)- ОН
Ртос- Азр(О!Ви)- ОН
Ртос- О1п(ТН)- ОН
Ртос- О1и(О!Ви)- ОН
Ртос- С1у- ОН
Ртос- Не- ОН.
Ртос- Ьеи- ОН
Ртос- Ме!- ОН
Ртос- Рю- ОН
Ртос- ТЬг(!Ви)- ОН
Ртос- ТугДВи)- ОН
Ртос- Уа1- ОН
Растворители и реагенты, применяемые в синтезе и для очистки Уксусная кислота
Растворитель
Уксусный ангидрид
Реагент
Аммония ацетат
Реагент
Аммония йодид
Реагент
Диизопропилкарбодиимид (ТЛС)
Диметил формамид (ДМФА, ОМР)
Дитиотреитол (ϋΤΤ)
Реагент
Растворитель
Реагент
Этанол
1- Гидроксибензотриазол (НОВ!)
Изопропанол
Ν- Метилморфолин (ΝΜΜ)
Пиперидин
Трифторуксусная кислота (ТФК, ТРА)
Растворитель
Реагент
Растворитель
Реагент
Реагент
Растворитель
Нужный продукт собирают с помощью Ртос-8РР8 на полимере Ртос-К1пк-Теп!аОе1-ге§т. Аминокислоты с защитными группами в боковой цепи суть следующие: Агд(РЪР), А§п(Тг1), А§р(О!Ви), О1п(Тг!), О1и(О!Ви), ТЬг(!Ви) и Туг(!Ви).
- 25 011861
Взаимодействие (связывание) осуществляют в ДМФА, изменяя эквиваленты аминокислот, с применением ϋΙί'' и ΗΟΒ1 для активации. После каждой конденсации (связывания) следует кэпирование уксусным ангидридом и ΝΜΜ. Мониторинг каждой конденсации (связывания) осуществляют с применением теста Кайзера/с нингидрином или хлоранилом. Между каждыми циклами связывания группу Гтос удаляют пиперидином в ДМФА.
Защищённый пептид-полимер отщепляют от носителя с помощью ТФК и нейтрализуют в водном растворе ацетата аммония, получают сырой продукт. После обработки полимер отфильтровывают.
Сырой продукт очищают препаративной ВЭЖХ, используя материал для обращенно-фазовой хроматографии на основе силикагеля или полистирола. Раствор пептида концентрируют упариванием и фильтруют перед выделением лиофилизацией.
Структура подтверждена масс-спектрометрией с диссоциацией, индуцированной столкновениями/масс-спектрометрии (СШ Μ8/Μ8), аминокислотным анализом, Γί'.'-Μ8 и хиральной чистотой. Чистоту проверяют с помощью ВЭЖХ и хиральной чистоты.
Химический анализ пептидов.
Для иллюстрация применяемых способов и полученных результатов ниже представлены аналитические данные пептидов по изобретению, синтезированные вышеуказанными методами.
Данные
Пептид | Молекулярная формула | МУ/ | Теоретическая величина т/ζ | Полученная масса Μ/ζ | Κΐ мин | Чис- тота | Метод ВЭЖХ |
[О1п34]РР | Ο185Η288Ν 5405552 | 4212.8 | 4212 | 20.8 | 94.8 | С | |
Не31,61п34]РР | Ο185Η288Ν 5405552 | 4212.8 | 4211.6 | 20.5 | 97.1 | С | |
[Уа131,О1п34]РР | Ο184Η286Ν 5405552 | 4198.8 | 4197.2 | 25.0 | 96.3 | С | |
Ьеи30,С1п34]РР | Ο186Ν289Ν 530568 | 4195.8 | 840.2 [М+5Н] | 840.0 [М+5Н] | 19.7 | 96.5 | В |
Ηί526,ΟΙη34]ΡΡ | Ο185Η282Ν 5205682 | 4194.8 | 839.9 [М+5Н] | 839.9 [М+5Н] | 19.1 | 95.0 | В |
[А1а1,С1и4,Агд26, Μθί30]ΡΥΥ | Ο186Η288Ν 540598 | 4256.8 | 710.4 [М+6Н] | 710.4 [М+6Н] | 19.4 | 96.4 | В |
[Агд26,Ме130]РУУ | Ο193Η298Ν 5605781 | 4346.9 | 870.7 [М+5Н] | 870.7 [М+5Н] | 20.2 | 91.3 | В |
С!и4,Агд26]РУУ | Ο193Η295Ν 55059 | 4329.8 | 867.5 [М+5Н] | 867.5 [М+5Н] | 17.4 | 95.3 | В |
Аналитическая ВЭЖХ, метод А
Колонка = Уубас С18 Рерйбе-Ргсйет (для пептидов- белков), 250 х 4.6 мм
Буфер А = 0.05% ТФК в воде
Буфер В = 0.05% ТФК в 100% МеСХ
Градиент = 0% В - 60% В за 20 мин
Скорость потока =1.00 мл/мин
Длина волны =215 нм
Масс-спектроскопия = ΜΑ^^I-ТΟΓ с гентизиновой или альфа-цианогидроксикоричной кислотой в качестве матрицы
Аналитическая ВЭЖХ, метод В
Колонка = Нурегзй Οϋδ- 2, 250 х 4.6 мм
Буфер А =0.1 % ТФК в 100% МеСИ
Буфер В =0.1 % ТФК в 100% воде
Градиент = 24% А - 35% А за 25 мин
Скорость потока = 1.00 мл/мин
Длина волны = 220 нм
Масс-спектроскопия = Ε8Ι [скорость газа в распылителе: 1,5 л/мин; СОР - 20,0 В; СОР темп.: 250°С; Темп. блока: 200°С; напряжение (смещение) в датчике: +4,5 кВ; Детектор: 1,5 кВ; Т. поток: 0,2 мл/мин; В конц.: 50% Н20/50% САХ.]
- 26 011861
Аналитическая ВЭЖХ, метод С
Колонка | = Ууйас С18 218ТР54, 250 х 4.6 мм |
Буфер А | = 20 мл ΜβΟΝ и 2 мл ТФК в воде (общий объём 2000 мл) |
Буфер В | = 2 мл ТФК в 100% воде (общий объём 2000 мл) |
Градиент | = 25% В - 75% В за 27 мин |
Скорость потока | = 1.00 мл/мин |
Длина волны = 215 нм
Для дальнейшей иллюстрации синтетических методов, которые можно применять для получения Υ2/Υ4 селективных агонистов, которые рассматриваются в настоящем изобретении, только в качестве примера, представлены нижеприведённые протоколы:
Синтез [Сук2,Ьук13,О-Сук27,С1п34]РР (8ЕР И) Νο: 30) и его аналогов.
Ниже описывается синтез циклического Υ2 селективного пептида [Сук2,Ьук13,О-Сук27,С1п34]РР (8Е(,) П) Νο: 30) и синтез его аналогов с САС-связывающим мотивом, мотивом, связывающим сывороточный белок или фрагментом полиэтиленгликоля, присоединёнными к ипсилон-аминогруппе Ьук13.
Как правило, защитной группой в боковой цепи является Γтοс, за исключением:
Агу = Ртос Аг§(РЬ£)- ОН
Азп, Ст = Ртос Азп(Тг!)- ОН
ΤΙίτ, бег, Азр, С1и, Туг = 1Ви1у1 (трет- бутил)
Ьуз = Ртос ЬузДВос)- ОН
А1а-8ег 22-23 = Ртос А1а8ег псевдопролин
В случае [Сук2,Ьук13,О-Сук27,С1п34]РР для того, чтобы добиться селективной депротекции, используют следующие защитные группы:
Ьуз 13 = Ртос Ьуз(В(1е)- ОН
Суз 27 = Ртос ВЬуз(Тй)- ОН
Пептид синтезируют твердофазным синтезом на полимере РАЬ Ред-Р8 (полимер, который при отщеплении образует биологически важную карбоксиамидную группу) с применением Ρтοс защиты с 5-кратным молярным избытком реагента. Конденсацию осуществляют с помощью НСТи в ДМФА в качестве реагента. Снятие Ρтοс после каждой стадии конъюгации осуществляют 20% раствором пиперидина в ДМФА в течение 10-15 мин. Присоединение проверяют на каждой стадии количественным анализом с нингидрином. В некоторых случаях можно осуществлять двойное связывание (присоединение).
После синтеза полноразмерных пептидов защитную группу в ипсилон-аминогруппе Ьук 13 селективно снимают обработкой 2% раствором гидразина в ДМФА в течение 15-20 мин, в то же время пептид ещё остаётся связанным с полимером.
Затем полимер делят на три различных части для получения недериватизированного пептида, а также пептидов, модифицированных тремя различными мотивами:
1. [Сук2,Ьук13,О-Сук27,С1п34]РР (8Ер И) Νο: 30).
Материнский пептид отщепляют от полимера и депротекционируют обработкой смесью 95% трифторуксусной кислоты, 2,5% воды, 2,5% трипропилсилана в течение 2-3 ч.
Внутримолекулярный стабилизирующий дисульфидный мостик между Сук2 и 1)-С’\;к27 получают окислением на воздухе, растворяя пептид с концентрацией <1 мг/мл в ацетате аммония рН 8,5-9 при перемешивании в течение 24-28 ч до тех пор, пока не исчезнут свободные тиолы, определяемые реактивом Эллмана.
Пептид очищают обращенно-фазовой ВЭЖХ: колонка Уубас 300 А, 250 ммх10 мм, элюент (буфер А=0,05% ТФК в воде; буфер В=60% ΜβΟΝ: 40% воды: 0,05% ТФК) в градиенте 30-80% буфера В в течение 20 мин, 2 мл/мин. Определяют О1) при 215 нм и элюент, содержащий конкретный пептид, собирают и лиофилизируют.
Структуру пептида подтверждают масс-спектрометрией, аминокислотным анализом и, при необходимости, также анализом аминокислотной последовательности.
2. [Сук2,№(8-(8-гамма-глутамоиламинооктаноиламино)октаноил)-Ьук13,В-Сук27,С1п34]РР (8ЕР И) Νο: 31).
Для того чтобы присоединить мотив связывания сывороточного альбумина, 8-(8-гаммаглутамоиламинооктаноиламино)октаноильную группу связывают со свободной ипсилон-аминогруппой остатка Ьук 13 после удаления защитной Обе группы, пептидным синтезом, с помощью защищённой аминооктановой кислоты, а затем дважды с помощью защищённой гамма-глутаминовой кислоты, в то время как пептид всё ещё остаётся связанным со смолой.
- 27 011861
Пептид, модифицированный с применением мотива, депротекционируют, циклизуют и очищают, как описано выше для материнского пептида.
3. Флуоресцеин-[Сук2,N-{(А1а-А^д-А^д-А^д-А1а-А1а-А^д-А1а)з}-^ук13,^-Сук27,Ο1η34]ΡΡ (ЗЕР II) Νο: 32).
Для того чтобы присоединить ОАО-связывающий мотив, мотив строят постадийно пептидным синтезом, используя свободную ипсилон-аминогруппу Ьук 13, после удаления Обе группы, на пептиде [Сук2,^ук13,^-Сук27,Ο1η34]ΡΡ, всё ещё связанном с полимером, используя стандартный метод с Ртос, как в целом описано выше: 6А6-связывающая последовательность, полученная таким образом, представляет собой А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1аА1а-Агд-А1а. Флуоресцеиновую метку присоединяют для ίίί νι!ΐΌ и т νίνο для аналитических целей в виде его 5,6 изомера - ΝΙΙ8 эфира, 10х избыток в течение 72 ч - к Ν-концу окончательной 6А6-связывающей последовательности.
Пептид, модифицированный с помощью 6А6-связывающего мотива, отщепляют от полимера, депротекционируют, циклизуют и очищают, как описано выше для материнского пептида.
4. | С у к2, Ν -{Ν'-(21 -амино-4,7,10,13,16,19-гексаоксагенэйкозаноил)}-гамма-глутамоил-Ьук13,ПСу^О^^ (ЗЕр II) Νο: 33).
Для того чтобы присоединить фрагмент полиэтиленгликоля к Υ2-Υ4 селективному пептиду, защищённую 21-амино-4,7,10,13,16,19-гексаоксагенэйкозановую кислоту связывают пептидным синтезом, используя свободную ипсилон-аминогруппу Ьук 13, после удаления Обе группы, на пептиде [Сук2,^ук13,^-Сук27,Ο1η34]ΡΡ, всё ещё связанном с полимером, а затем присоединяют защищённую гамма-глутаминовую кислоту.
ПЭГилированный пептид отщепляют от полимера, депротекционируют, циклизуют и очищают, как описано выше для материнского пептида.
Используя описанные выше методы, синтезируют следующие агонисты по изобретению, приведённые в качестве примеров:
[Ν- (Ν’- гексадеканоил)- гамма- глутамоил- Еуз13,О1п34]РР (8Εζ) ГО Νο: 34) [Ν-(Α1η-Αγ§- Аг§- Аг§- А1а- А1а-Аг§- А1а)3- Ьу818,О1п34]РР (8Ες ГО Νο: 35) [Ν- РЕС5000- Ьу813,С1п34]РР (8Ες ГО Νο: 36) [11е31,О1п34]РР (8Е(} ГО Νο: 5) [Уа131,О1п34]РР (8Е(} ГО Νο: 6) [Ьеи30,О1п34]РР (8Ες ГО Νο: 7) [Ν1ε30,Ο1η34]ΡΡ (8Е(^ ГО Νο: 8) [Ьеи28.С1п34]РР (8Е(^ ГО Νο: 9) [Ηΐδ26,Ο1η34]ΡΡ (8Е0 ГО Νο: 10) [11еЗ,С1п34]РР (8Е<2 ГО Νο: 11) [А1а1,(Э1и4,Аг§26,(Ме130 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Е() ГО Νο: 12) [А1а1,О1и4,№- (Ν’- гексадеканоил)-гамма-глутамоил- Ьу813,Аг§261Ы1е30]РУУ (8Εζ) ГО Νο:37) [А1а1,О1и4,Ы- (А1а-Аг§- Аге- Аг§- А1а- А1а-Аг§- А1а)3- Ьу813,Аг£26Д\ГО30]РУУ (8Ες Π)Νο: 38) [А1а1,01114,Ν-ΡΕ05ООО- Εγ813,Ατ§26,Ν1ε30]ΡΥΥ (8Е(^ ΙϋΝο: 39) [А1а1,С1и4,Аг§26(Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Ες ГО Νο: 13) [А1а1,С1и4]РУУ (8Е() ГО Νο: 14) и [А1а1 ,Ο1ιι4]ΝΡΥ (8Е(} ГО Νο: 15) [Аг§26, (Ме130 или Ν1ε30)]ΡΥΎ (8Εζ) ГО Νο: 16) и [Аг§26, (Ме130 или
Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Е(^ ГО Νο: 17) [О1и4, (Μεΐ30 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Е() ГО N0:18) и [О1и4, (Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Εζ) ГО Νο: 19) [О1и4,Аг§2б]РУУ (8Е(} ГО Νο: 20) и [Ο1ιι4,Ατ§26]ΝΡΥ (8Е() ГО Νο: 21) [Суз2ГО- Суз27,О1п34]РР (8Е() ΙΟΝο: 22) [Суз2,Аос5-24ГО- Суз27,О1п34]РР (8Е(2 ГО Νο: 23)
- 28 011861
Биологические анализы и результаты
I. Ιη νίΐΐΌ анализы для определения аффинности и активности пептидов.
Анализ аффинности к человеческому Υ2 рецептору.
Аффинность тестируемых соединений к человеческому Υ2 рецептору определяют анализом конкурентного связывания, используя 125Ι-ΡΥΥ связывание в клетках СО8-7, транзиторно трансфецированных человеческим Υ2 рецептором трансфекцией с фосфатом кальция.
Трансфецированные СО8-7 клетки переносят в культуральные планшеты через день после трансфекции при плотности 40х103 клеток на лунку, добиваясь 5-8% связывания радиоактивного лиганда. Через два дня после трансфекции проводят эксперименты по конкурентному связыванию в течение 3 ч при 4°С, используя 25 пМ 125Ι-ΡΥΥ (АтегзЬат, ЬЬ11е СЬаИоп!, ϋΚ). Анализы связывания проводят в 0,5 мл 50 мМ буфера 11ерез, ρΗ 7,4, дополненного 1 мМ СаС12, 5 мМ МдС12 и 0,1% (вес./об.) бычьего сывороточного альбумина и 100 мкг/мл бацитрацина. Неспецифическое связывание определяют как связывание в присутствии 1 мкМ немеченого ΡΥΥ. Клетки дважды отмывают в 0,5 мл охлаждённого льдом буфера и добавляют 0,5-1 мл буфера для лизиса (8 М мочевина, 2% ΝΡ40 в 3 М уксусной кислоте) и гаммасчётчиком считают связанную радиоактивность. Определения делают в двойном повторе. Связывания в стационарном (равновесном) состоянии достигают в этих условиях. Величины ЕС50 рассчитывают, используя программу работы со стандартными фармакологическими данными, Рпзт 3.0 (дгарЬРад 8о1Ааге, 8ап П1едо, И8А).
Анализ аффинности к человеческому Υ4 рецептору.
Используется такой же протокол, как для анализа аффинности к Υ2, за исключением того, что применяют человеческие трансформированные с помощью Υ4 клетки СО8-7, в конкурентном анализе используют 125Ι-ΡΡ, и для определения неспецифического связывания используют РР.
Анализ аффинности к человеческому Υ1 рецептору.
Используется такой же протокол, как для анализа аффинности к Υ2, за исключением того, что применяют человеческие трансформированные с помощью Υ1 клетки СОУ-7 и переносят в культуральные планшеты при плотности 1,5 х106 (?) клеток на лунку, в конкурентном анализе используют 125Ι-ΝΡΥ и для определения неспецифического связывания используют ΝΡΥ.
Результаты тестирования ΝΡΥ, ΡΥΥ, ΡΥΥ3-36, РР и [О1п45]РР, [Ие31,О1п34]РР, [Уа131,О1п34]РР, [А^β26,Меΐ30]ΡΥΥ, [^1и4,А^β26]ΡΥΥ агонистов по изобретению в вышеуказанных анализах аффинности даны в табл. 1.
Таблица 1
Агонист | Υ2 | Υ4 | Υ1 | ||||||
1С50 пт | ЗЕМ | η | 1С50 пт | ЗЕМ | η | 1С50 пт | ЗЕМ | п | |
ΝΡΥ | 0.30 | 0.07 | 4 | 26 | 5. | 4 | 2.3 | 0.3 | 4 |
ΡΥΥ | 0.22 | 0.02 | 2 | 30 | 8.0 | 2 | 16 | 1 | 2 |
ΡΥΥ(3-36) | 0.20 | 0.03 | 10 | 343 | 42 | 4 | >1000 | 2 | |
РР | >1000 | 4 | 0.41 | 0.05 | 11 | >1000 | 1 | ||
[<31п34]-РР | 9.0 | 1.8 | 3 | 1.2 | 0.1 | 4 | >1000 | 2 | |
Пе31,С1п34]-РР | 54 | 22 | 3 | 1.1 | 0.1 | 3 | >1000 | 2 | |
[Уа131,С1п34]-РР | 69 | 20 | 3 | 0.93 | 0.16 | 3 | >1000 | 2 | |
[Агд26,Ме130]РУУ | 0.13 | 1 | 2.3 | 1 | 65 | 1 | |||
[С1и4,Агд26]РУУ | 3.3 | 1 | 367 | 1 |
Анализ активности к человеческому Υ2 рецептору.
Активность тестируемых соединений к человеческому Υ2 рецептору измеряют (определяют) в экспериментах доза-эффект в клетках СОУ-7, транзиторно трансфецированных человеческим Υ2 рецептором, а также смешанным О белком, Оф5, который гарантирует, что Υ2 рецептор связывается через Оц путь, ведущий к повышению метаболизма инозитолфосфатов.
Метаболизм фосфатидилинозитола. Через день после трансфекции клетки СОУ-7 инкубируют в течение 24 ч, используя 5 мкКи ^^миоинозитола (АтегзЬат, РТ6-271) в 1 мл среды, дополненной 10% фетальной бычьей сыворотки, 2 мМ глутамина и 0,01 мг/мл гентамицина на лунку. Клетки дважды отмывают в буфере, 20 мМ ΗΕΡΕ8, ρΗ 7,4, дополненном 140 мМ КаС1, 5 мМ КС1, 1 мМ М§8О4, 1 мМ СаС12, 10 мМ глюкозы, 0,05% (вес./об.) бычьей сыворотки; и инкубируют в 0,5 мл буфера, дополненного 10 мМ ЫС1 при 37°С в течение 30 мин. После стимуляции при различных концентрациях пептида в течение 45 мин при 37°С клетки экстрагируют 10% ледяной перхлорной кислотой с последующей инкубацией на льду в течение 30 мин. Полученные супернатанты нейтрализуют Κ(Η в буфере ΗΕΡΕ8 и полученный ОЩинозитолфосфат очищают на анионообменной смоле Вю-Кад АО1-Х8 и считают бетасчётчиком. Определения делают в двойном повторе. Величины ЕС50 рассчитывают, используя программу для работы со стандартными фармакологическими данными. Рпзт 3.0 (дгарЬРад 8о£маге, 8ап П1едо, И8А).
- 29 011861
Анализ активности к человеческому Υ4 рецептору.
Используется такой же протокол, как для анализа активности к Υ2, за исключением того, что применяют человеческие трансформированные с помощью Υ4 клетки СОВ-7.
Анализ активности к человеческому Υ1 рецептору.
Используется такой же протокол, как для анализа активности к Υ2, за исключением того, что применяют человеческие трансформированные с помощью Υ1 клетки СОВ-7.
Результаты тестирования Ν₽Υ, РУУ, РУУ3-36, РР и [С1п45]РР, [Пе31,О1п34]РР, [Уа131,О1п34]РР (ВЕр ЕЙ Νο: 6), [А1а1,О1и4,А^д26,Μеί30]РУУ, [Ьеи30,С1п34]РР (ВЕр ΙΌ Νο: 7) и [Н1к26,С1п34]РР (ВЕР ЕЙ Νο: 10) агонистов по изобретению в вышеуказанных анализах активности даны в табл. 2.
Таблица 2
Агонист | Υ2 | Υ4 | Υ1 | ||||||
ЕС50 пт | ЗЕМ | N | ЕС50 пт | ЗЕМ | п | ЕС50 пт | ЗЕМ | п | |
ΝΡΥ | 1.5 | 0.5 | 11 | 167 | 56 | 7 | 1.7 | 0.4 | 11 |
ΡΥΥ | 0.23 | 0.06 | 8 | 34 | 5 | 6 | 0.6 | 0.1 | 5 |
ΡΥΥ(3-36) | 0.36 | 0.07 | 16 | >1000 | 8 | 74 | 5 | 7 | |
РР | 8 | 0.64 | 0.07 | 17 | 83 | 13 | 5 | ||
[С1п34]-РР | 3.5 | 0.7 | 5 | 1.2 | 0.1 | 5 | 388 | 95 | 3 |
Не31,О1п34]-РР | 6.5 | 2.0 | 2 | 0.91 | 0.04 | 3 | 48 | 9 | 3 |
[Уа131,С1п34]-РР | 9.9 | 3.2 | 2 | 1.0 | 0.04 | 2 | 99 | 14 | 3 |
[1 еи30,С1п34]РР | 8.6 | 0.7 | 3 | 4.5 | 0.4 | 3 | 102 | 7 | 4 |
[Ηίε26,ΟΙπ341ΡΡ | 6.1 | 1.1 | 3 | 9.2 | 0.3 | 3 | 130 | 23 | 4 |
[А1а1,(31и4,Агй26,Ме(30]РУУ | 1.0 | 0.2 | 3 | 1.4 | 0.2 | 3 | 87 | 16 | 3 |
ΙΙ. !п νίίΓο анализы для определения устойчивости белков.
Важным показателем для многих пептидов по изобретению является устойчивость белков, в особенности устойчивость, например, к расщеплению ферментами, так как эти пептиды создаются так, чтобы иметь повышенную устойчивость по сравнению, например, с РУУ3-36, или даже повышенную устойчивость по сравнению с полноразмерными РУУ и РР.
Устойчивость РР-складки определяют как устойчивость пептидов к расщеплению эндопептидазами, которые расщепляют, например, в области петли, которая является относительно гибкой (как описано в О'Наге, М. & Вс1тагШ, Т.^. 1990. !п Педгаба1юп οί Вюас!гсе ВиЬк!апсек: РЬукюЬду апб Ра^рЬу^ο1ομν. б. Неплккеп, еб. СКС Ргекк, Βοса ΙΚηΙοιι, Е1). В качестве модельного фермента используют эндопротеиназу Акр-Ν (Р1егсе). Этот фермент расщепляет на Ν-концевой стороне остатков Акр, например между остатками 9 и 10 (Акр) РР. Пептиды инкубируют с эффективной дозой эндопептидазы Акр-Ν, как указано производителем в 0,01 М Тпк/НС1 буфере, рН 7,5 при комнатной температуре и образцы извлекают через 24 ч. Образцы анализируют методом ВЭЖХ и затем проводят последовательную деградацию (отщепление) во времени. Пептиды сравнивают по стабильности с РУУ, РУУ3-36 и РР.
Устойчивость к аминопептидазам определяют, как описано выше для эндопептидаз, но вместо них используют аминопептидазу Ν и дипептидилпептидазу Ιν. Некоторые из пептидов специально предназначены для того, чтобы быть устойчивыми к этим аминопептидазам, например РУУ2-36, ацилированные по Ν-концу, пептидные производные и пептидные дериваты, алкилированные фрагментом, связывающим альбумин, на Ν-конце. Пептиды сравнивают по стабильности (устойчивости) с РУУ, РУУ3-36 и РР.
ΙΙΙ. !п νίίτο анализы для определения связывания с гликозаминогликанами (САСВ).
Способность тестируемых соединений связываться с ОАОВ проверяют ш νίίτο анализом с применением иммобилизованного гепарина, т.е. гепарин-агарозы, в качестве аффинной матрицы. Применяют либо колонку Н1Тгар с гепарин-сефарозой (АтегкЬат РЬагтаОа Вю1есЬ, иррка1а, В^ебеп), либо колонки с гепарином для ВЭЖХ, элюируют в 50-мин. линейном градиенте 0-0,5 М \аС1 в 50 мМ растворе фосфата натрия (рН 7,3), содержащем 2 мМ ОТТ и 1 мМ МдЕОТА при скорости потока 1 мл/мин. Для регенерации колонку промывают 1 М \аС1 в буфере А в течение 51-55 мин.
Ιν. !п νίνο исследование действия пептидов на аппетит, потребление пищи и массу тела.
Действие селективных к Υ2/Υ4, по сравнению с Υ1, агонистов, на быстрое потребление пищи у мышей.
Берут мышей линии ббу весом 34-37 г в возрасте 8-9 недель (баран ВЕС, ВЬ^ζииοка, барап). Мышей индивидуально помещают в регулируемую среду (22°С, влажность 55%) с 12-часовым световым циклом день-ночь с включением света в 7 часов утра. Пищу и воду дают неограниченно, за исключением времени непосредственно перед экспериментами (см. ниже). Мыши привыкают к подкожным инъекциям в течение недели перед началом экспериментов. Мышей в экспериментах используют по одному разу. Непосредственно перед применением пептиды разводят в физиологическом солевом растворе и вводят в виде подкожной инъекции в объёме 100 мкл. Результаты представлены как среднее +/-ВЕ. Для оценки разницы между группами применяют дисперсионный анализ, а затем тест Бонферрони.
Мышей отлучают от пищи, но оставляют свободный доступ к воде за 16 ч до данного теста и эксперименты начинают в 10 часов утра на следующий день. Используют стандартную диету (СЕЕА барап,
- 30 011861
1пс., Токуо, ,1арап) и потребление пищи измеряют, вычитая вес несъеденной пищи из начальной предварительно взвешенной пищи после введения и проверки потерь пищи. Восемь животных в каждой группе получают физиологический раствор, 3 мкг ΡΥΥ3-36, 30 мкг ΡΥΥ3-36, 10 мкг тестируемого соединения или 100 мкг тестируемого соединения.
Результаты для [С1п34]РР (названного на фигуре ТМ30333) в качестве испытуемого соединения даны на фиг. 2.
Последовательности
ΝΡΥ (8ЕО Π) Νο: 1)
НгХ-Туг—Рго-8ег-Ьу5-Рго-А5р-А8п-Рго-Ст1у-Сг1и-А5р-А1а-Рго-А1а-Сг1и-А8р-Ме1-А1аАг§-Туг-Туг-8ег-А1а-Ьеи-Аг§-Н18-Туг-11е-А5п-Ьеи-11е-Т11г-Аг§-С1п-Аг§-Туг-СОНН2
ΡΥΥ (8Е0 Ιϋ Νο: 2) Н2ХТуг-Рго-11е-Ьу8-Рго-Сг1и-А1а-Рго-С1у-Сг1и-А8р-А1а-8ег-Рго-С1и-(31и-Ееи-А8п-Аг§Туг-Тут-А1а-8ег-Ьеи-Аг§-Н18-Туг-Ьеи-А811-Ьеи-Уа1-Т11г-Аг§-С1п-Аг§-Туг-СО1кН2
РР (8Е<2 ГО ΝΟ: 3)
Н2Х-А1а-Рго-Беи-С1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-Азр-А5п-А1а-ТЬг-Рго-С1и-Ст1п-Ме1-А1аО1п-Туг-А1а-А1а-Азр-Беи-Аг§-Аг§-Туг-11е-Азп-Ме1-Беи-Т11г-Аг§-Рго-Аг§-Туг-СОХН2 [С1п34| РР (8Εζ) ГО Νο: 4)
Н2К-А1а-Рго-Беи-С1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-Азр-А8п-А1а-Т11г-Рго-О1и-С1п-Ме1-А1аС1п-Туг-А1а-А1а-Азр-Ьеи-Ах§-Аг§-Туг-11е-Азп-Ме1-Ьеи-Т11г-Аг§-С1п-Аг§-Туг-С(ЖН2 [11е31,С1п34]РР (8Е(^ ГО Νο: 5) Н2Н-А1а-Рго-Беи-С1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-Азр-А8п-А1а-Т11г-Рго-01и-(31п-Ме1-А1аС1п-Туг-А1а-А1а-Авр-Беи-Аг§-Аг§-Туг-11е-Азп-Ме1-11е-Т11г-Аг§-О1п-Аг§-Туг-СС)КН2 [Уа131,С1п34]РР (8ЕО ГО Νο: 6)
Н2Х-А1а-Рго-Беи-О1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-А5р-Азп-А1а-Т11Г-Рго-С1и-Сг1п-Ме1-А1аС111-Туг-А1а-А1а-Азр-Беи-Аг§-Ат§-Туг-11е-А8п-Ме1-Уа1-Т11г-Аг§-Сг1п-Аг§-Туг-СС)КН2 [Беи30,С1п34]РР (8Е(^ ГО Νο: 7)
Н2Х-А1а-Рго-Беи-61и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-Азр-Азп-А1а-Т11г-Рго-Ст1и-Сг1п-Ме1-А1аО1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Беи-Аг§-Аг§-Туг-11е-Азп-Беи-Ееи-Т11г-Аг§-О1п-Аг§-Туг-С(ЖН2 [Ме30,С1п34]РР (8Е(? ГО Νο: 8)
Н2Х-А1а-Рго-Беи-01и-Рго-Уа1-Туг-Рго-01у-Азр-Азп-А1а-Т1т1Г-Рго-01и-01п-Ме1-А1аО1п-Туг-А1а-А1а-Азр-Беи-Аг§-Аг§-Туг-11е-Азп-№е-Беи-Т1к-Ат§-О1п-Аг§-Туг-СС)ЫН2 [Беи28,С1п34]РР (8Εζ) ГО Νο: 9) Н2М-А1а-Рго-Беи-С1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-А8р-А8п-А1а-Т11г-Рго-О1и-С1п-Ме1-А1аСг1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Беи-Аг§-Аг§-Туг-Беи-А8п-Ме1-Беи-Т11г-Аг§-Сг1п-Аг§-Туг-СО]МН2 [Н1826,С1п34]РР (δΕζ) ГО Νο: 10)
Н2Х-А1а-Рго-Беи-С1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-О1у-Азр-Азп-А1а-Т11г-Рго-О1и-О1п-Ме1-А1аС1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Беи-Аг§-Н18-Туг-Пе-А8п-Ме1-Беи-Т11г-Аг§-О1п-Аг§-Туг-С(ЖБ[2 [11еЗ,С1п34]РР (8Е(2 ГО Νο: 11 )
Н2№А1а-Рго-11е-С1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-А8р-А8п-А1а-ТЬг-Рго-Сг1и-Сг1п-Ме1-А1а-С1пТуг-А1а-А1а-А8р-Беи-Агё-Аг§-Туг-11е-А8п-Ме1-Беи-ТЬг-Аг§-С1п-Аг§-Туг-СО1МН2 [А1а1,С1и4,Аг§26,(Ме130 или Ν1β30)]ΡΥΥ (8Εζ) ГО Νο: 12) Н2М-А1а-Рго-11е-С1и-Рго-О1и-А1а-Рго-О1у-Сг1и-А8р-А1а-8ег-Рго-(л1и-Сг1и-Беи-А5п-Аг§Туг-Туг-А1а-8ег-Беи-Аг§-Аг§-Туг-Беи-А8п-(Ме1 ог М1е)-Уа1-Т11г-Аг§-С1п-Аг§-Тугсоян2
- 31 011861 [А1а1,С1и4,Аг§26,(Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Ер ГО Νο: 13)
Н2К-А1а-Рго-8ег-01и-Рго-Азр-Азп-Рго-Сг1у-01и-Азр-А1а-Рго-А1а-Сг1и-А8р-Ме1-А1аАгд-Туг-Туг-8ег-А1а-Ьеи-Аг§-Аг§-Туг-11е-А8п-(Ме1 ог Ы1е)-11е-Тйг-Аг§-С]п-Аг§-Туг· ссжн2 [А1а1,С1и4]РУУ (8Е0 ГО Νο: 14)
Н2К-А1а-Рго-11е-С1и-Рго-01и-А1а-Рго-Сг1у-Сг1и-А8р-А1а-8ег-Рго-01и-Сг1и-Ьеи-А8п-Аг§Туг-Туг-А1а-8ег-Ьеи-Аг£-Н18-Туг-Ьеи-А8п-Ьеи-Уа1-Т11г-Агд-О1п-Агд-Туг-СОКН2 [Α131,Ο1ιι4]ΝΡΥ (8Е0 ГО Νο: 15)
Н2К-А1а-Рго-8ег-01и-Рго-Азр-Азп-Рго-61у-01и-Азр-А1а-Рго-А1а-(л1и-А8р-Ме1-А]аАг§-Туг-Туг-8ег-А1а-Ьеи-Аг£-Н18-Туг-11е-Азп-Ьеи-11е-Т11Г-Аг£-О1п-Агд-Туг-СОКН2 [Аг§26, (Ме130 ог Ν I еЗ О)] ΡΥΥ (8Е9 ίί) Νο: 16)
Н2Н-Туг-Рго-11е-Ьуз-Рго-О1и-А1а-Рго-О1у-О1и-А8р-А1а-8ег-Рго-О1и-О1и-Ьеи-А8п-Аг§Туг-Туг-А1а-8ег-Ьеи-Аг§-Аг§-Туг-Ьеи-Азп-(Ме1 ог Ме)-Уа1-Ткг-Аг§-С1п-Аг§-ТугСС)КН2 [Аг§26, (Ме130 ог Ν1ε30)]ΝΡΥ (8ЕО ГО Νο: 17)
НгИ-Туг—Рго-8ег-Ьу8-Рго-А8р-А8п-Рго-Сг1у-Сг1и-А8р-А1а-Рго-А1а-Сг1и-А8р-Ме1:-А1аАг§-Туг-Туг-8ег-А1а-Ьеи-Аг£-Агд-Туг-11е-А8п-(Ме1 ог М1е)-Пе-Тйг-Аг§-Сг1п-Аг§-Туг6ΌΝΗ2 [С1и4, (Ме130 ог Ν1ε30)]ΡΥΥ (δίρ ГО Νο: 18) Н2К-Туг-Рго-11е-О1и-Рго-(31и-А1а-Рго-О1у-О1и-А8р-А1а-8ег-Рго-Сг1и-Сг1и-Ьеи-А8П-Аг§Туг-Туг-А1а-8ег-Ьеи-Аг£-Н18-Туг-Ьеи-Азп-(Ме1 ог Ν1ε)-ν а1-Тйг-Аг§-Сг1п-Аг§-ТугС’(ЖН2 [Сг1и4, (Ме130 ог Ν1ε30)]ΝΡΥ (8ЕО ГО Νο: 19)
Н2М-Туг-Рго-5ег-Ст1и-Рго-Азр-А8п-Рго-С1у-Сг1и-А8р-А1а-Рго-А1а-О1и-А8р-Ме1-А1аАг£-Туг-Туг-8ег-А1а-Ьеи-Аг§-Н1з-Туг-11е-А8п-(Ме1 ог Я1е)-11е-Т11г-Аг§-Сг1п-Аг§-ТугСОМН2 [61ιι4,Αγ§26]ΡΥΥ (8Е(? ГО Νο: 20)
Н2Ат-Туг-Рго-Пе-Ст]и-Рго-Сг1и-А1а-Рго-С1у-С1и-Азр-А1а-8ег-Рго-Сг1и-С}1и-Ьеи-А8п-Аг£Туг-Туг-А1а-8ег-Ьеи-Аг§-Аг§-Туг-Ьеи-А8п-Ьеи-Уа1-ТЬг-Агд-О1п-Аг§-Туг-СОКН2 [Ο1π4,Αγ§26]ΝΡΥ (8Е(? ГО Νο: 21)
Н2К-Туг-Рго-8ег-01и-Рго-А8р-А8П-Рго-С1у-01и-А8р-А1а-Рго-А1а-С1и-А8р-Ме1-А1аАг£-Туг-Туг-5ег-А1а-Ьеи-Аг£-Аг£-Туг-11е-А8п-Ееи-11е-Т11г-Аг§-Сг1п-Аг§-Туг-ССЖН2 [Суз2,В-Су827,С1п34]РР (8 Ер ГО Νο: 22)
Н2К-А1а- Суз -Ьеи -СТй^го-Уа1-Туг-Рго-С1у-А8р-Азп-А1а-Т11г-Рго-О1и-О1п-Ме1:-А1аСт1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Ьеи-Хт§А\.Г£-(О-Су8)—Пе-Азп-МекЬеи-Тйг-Агд-СИп-Агд-ТугССЖН2 [Су82,Аос5-24,О-Су»27,С1п34]РР (8Е<3 Π) Νο: 23)
8---------------------------- 8
- 32 011861
Н2К-А1а-Су5-Ьеи-О1и-Аос5-24-Аг£-Аг£-(О-Су8)-11е-А5п-МеТЬеи-Тйг-Аг£-Сг1п-А1дΤγΓ-ΟΟΝΗ2 [Ьу818,С1п34]РР (8Е() ГО Νο: 24)
Н2М-А1а-Рго-Ьеи-Ст1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-А8р-А8п-А1а-Т11г-Рго-Сг1и-С1п-Ме1-Ьу8С1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Ьеи-Аг§-Аг§-Туг41е-А8П-Ме1-Ьеи-Тйг-Агд-Сг1п-Агд-Туг-СОНН2 [А1а1 ,(Ии4,Ьу811 ,Аг§26,(Ме130 ог Ν1β30)]ΡΥΥ (8Εζ) ГО Νο: 25)
Н2Н-А1а-Рго41е-О1и-Рго-61и-А1а-Рго-О1у-О1и-Ьу8-А1а-8ег-Рго-С1и-Сг1и-Ееи-А5п-Аг§Т уг-Туг-А1а-8ег-Ьеи-Агд-Агд-Туг-Ьеи-Азп-(Ме1 ог Νΐε)-V а1-ТЬг- Агд-СНп- Агд-Т угССЖ'Н2
А1а-Аг§-Аг§-Аг§-А1а-А1а-Аг§-А1а-А1а-Аг§-Аг§-Аг§-А1а-А1а-Аг§-А1а-А1а-Аг§-Аг§Аг§-А1а-А1а-Аг§-А1а-[С1п34]РР (8Εζ) ГО Νο:26)
Н2М-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Аг§·
Аг§-А1а-А1а-Аг§-А1а-А1а-Рго-Ьеи-Сг1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-(д1у-А8р-А8п-А1а-Т11г-Рго-О1иО1п-Ме!-А1а-О1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Ьеи-Аг@-Агд-Туг-11е-А8п-Ме!-Ееи-Тйг-Аг§-(л1п-АгдТуг-СОЫН2 [А1а1 ,С1и45Ьу818, Аг§26, (Ме130 ог Ν1ε30)]ΡΥΥ (81'9 ГО Νο: 27)
Н2^А1а-Рго-11е-01и-Рго-С1и-А1а-Рго-01у-01и-А8р-А1а-8ег-Рго-Сг1и-Ст1и-Ьеи-Еу8-АгдТуг-Туг-А1а-8ег-Ееи-Агд-Агд-Туг-Ьеи-Азп-(Ме! ог М1е)-Уа1-Т11г-Агд-Сг1п-Агд-ТугСОЫН2 [Еу828,О1и32]РР25-36 (8Е0 ГО Νο: 28)
ЕЕМ-Агд-Туг-Еуз-Азп-МейЕеи-СИи-Агд-Рго-Агд-Туг-ССЖНг
Еу8-Еу8-Ьу8-Ьу8-Еу8-Еу8-[О1п34РР} (81р ГО Νο: 29).
Η2Ν- Еу8-Еу8-Ьу5-Ьу8-Еу5-Ьу8-А1а-Рго-Ееи-О1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-О1у-А8р-А5п-А1аТйг-Рго-СЖ1-СЛп-Ме1-А1а-61п-Туг-А1а-А1а-А8р-Ееи-Аге-Аг2-Туг41е-Лзп-Ме!--Ееи-Е1!ГАгд-Сг1п-Агд-Туг-С0НН2 [Су82,Ьу 8 1-Сув27,С1п34]РР (8Е0 ГО Νο: 30).
Н2Ж-А1а-Су8-ЕеиАо1ц-рГо-Уа1-Туг-Рго-О1у-А8р-А8п-А1а-Еу8-Рго-О1и-О1п-Ме!-А1аО1п-Туг-А1а-А1а-А8р-ЕегьДгд-Агд-В-Суз-11е-А8П-Ме1-Ееи-ТЬг-Агд-О1п-Аг§-ТугСОЫН2 I [Су82^-(8-(8-гамма-глутамоиламино-октамоиламино)-октаноил)-Ьу813,О Суз27,С1п34]РР (8Е() ГО Νο: 31).
Н2ЯСН(СООН)СН2СН2СОНН(СН2)7СОА’Н(СН2)7СОЖ
Н2К-А1а-Су8-ГВи4д1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-01у-А8р-Азп-А1а-Еу8-Рго-Сг1и-Сг1п-Ме1-А1а·
О1п-Туг-А1а-А1а-Азр4С^ьДгд-Агд-О-Су5-11е-Азп-Ме1-Ееи-Т11г-Агд-Сг1п-Агд-Тугссжн2 I
- 33 011861 [Су82^-{(А1а-Агд-Агд-Аг§-А1а-А1а-Агд-А1а)з}-Ьу813,В-Су827,С1п34]РР (8Е<2 Ю Νο: 32).
А1а-Аг§-Аг§-Аг§-А1а-А1а-Агд-А1а)зСОНН
Н2Н-А1а-(^у8-Ье1>01и-Рго-Уа1-Туг-Рго-01у-А8р-А8П-А1а-Ьу5-Рго-С1и-(л1п-Ме1-А1а61п-Туг-А1а-А1а-АзрЙ7ещАгд-Агд-П-Су5-11е-Азп-Ме!-Ьеи-Т1и-Агд-О1п-Агд-Тугсоун2 1 [Су«2, К-{№-(21-амино-4,7,10,13,16,19-гексаоксагенэйкозаноил)}гамма-глутамоил1-Ьу813,В-Су827,С1п34]РР (8Εζ) Π) Νο: 33).
Н2Н(СН2СН2О)6СН2СН2СОМН
Н2№А1а-С^у8-ЕегГАЩиЩго-Уа1-Туг-Рго-О1у-А8р-А8п-А1а-Е^8-Рго-О1и-С1п-Ме1:-А1аО1п-Туг-А1а-А1а-А8р-1?еп-Агд-Агд-О-.Су5-11е-А8п-Ме!-Ееи-Т11г-Агд-Ст1п-Агд-Тугсоун2 I
Р*1-(№-гексадеканоил)-гамма-глутамоил-Еу813,СЛп34]РР (8Εζ) ГО Νο: 34)
СН3(СН2)]4СОННСН(СООН)СН2СН2СОМН
Н2Н-А1а-Су8-Ееи-01и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-А8р-А8п-А1а-Ьуз-Рго-Сг1и-С1п-Ме!-Л1аСг1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Ееи-Агд-Агд-О-Су8-11е-А8п-Ме1-Ееи-ТЬг-Агд-С1п-Аг§-Тугссжн2 [п-(та-/\г§-2лг«-2\г§-/\1а-/\1а-2\г§-та)л-1эу81л,^гшл^]гг гмк лэ)
А1а-Аг§-Аг§-Аг§-А1а-А1а-Агд-А1а)3СОНН
Н2М-А1а-Су8-Ьеи-Ст1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-Сг1у-А8р-А8п-А1а-Е^8-Рго-С1и-О1п-Ме1-А1а61п-Туг-А1а-А1а-А8р-Ьеи~Аг£-Аг£-П-Су8-11е-А8П-Ме(-Ьеи-1Ъг-Агд-Сг1п-Аг£-ТугСС)МН2 [Ν-ΡΕ05000-Ε5 813,01η34]ΡΡ (8Е0 ГО Νο: 36)
ΝΗ-ΡΕ05000 ι
Н2№А1а-Рго-Ееи-С1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-С1у-А8р-А8п-А1а-Ьу8-Рго-Сг1и-Сг1п-Ме1-А1аС1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Ееи-Агд-Аг§-Туг-11е-А8п-Ме!-Ееи-ТЬг-Аг§-Ст1п-Агд-Туг-СОНН2 [А1а1,С1и4ф(-(№-гексадеканоил)-гамма-глутамоил-Еу813,Аг§26,Ме30]РУ¥ (8Е(^ II) Νο: 37)
СН3(СН2)14СОМНСН(СООН)СН2СН2СОКН
Н2Н-А1а-Рго-11е-С1и-Рго-С-1и-А1а-Рго-01у-С1и-А8р-А1а-ь1у8-Рго-01и-(3-1и-Ееи-А8п-Аг§Туг-Туг-А1а-8ег-Ееи-Аг§-Агд-Туг-Ееи-А8п-Ме-Уа1-ТЬг-Агд-О1п-Агд-Туг-СОНН2 [А1а1,С;1и4^-(А1а-Аг§-Агд-Аг§-А1а-А1а-Аг§-А1а)з-Еу813,Аг§26,Ме30]Р¥У (8Е(2
Ю Νο: 38)
А1а-Аг§-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а)3СОМН
Н2Н-А1а-Рго-11е-О1и-Рго-61и-А1а-Рго-Сг1у-Сг1и-А8р-А1а-Е^8-Рго-Сг1и-О1и-Ееи-А8п-Лг2;Туг-Туг-А1а-8ег-Ееи-Аг§-Аг§-Туг-Ееи-А8п-№е-Уа1-Т11г-Аг§-Сг1п-Агд-Туг-С(ЖН2 [А1а1,С1и4^-РЕС5000-Еу813,Аг§26,Ме30]РУУ (8Е0 ГО Νο: 39)
ΝΉ-ΡΕΘ5000
Н2Ы-А1а-Рго-Пе-Сг1и-Рго-О1и-А1а-Рго-С1у-Сг1и-А8р-А1а-Е^8-Рго-С1и-(л1и-Ееи-А8п-Аг§Туг-Туг-А1а-8ег-Ееи-Аг§-Аг£-Туг-Ьеи-А8п-Ме-Уа1-Ткг-Агд-С1п-Агд-Туг-СОКН2 ^-РЕС5000-Ьу813,С1п34]РР (8Е0 Π) Νο: 40)
ΝΗ-ΡΕΘ5000
Н2М-А1а-Су8-Ьеи-Сг1и-Рго-Уа1-Туг-Рго-61у-А8р-А8П-А1а-Еу8-Рго-01и-Сг1п-Ме1-А1аС1п-Туг-А1а-А1а-А8р-Ееи-Аг§-Агд-В-Су8-11е-А8П-Ме1-Ееи-ТЬг-Агд-Сг1п-Агд-Тугοονή2
Claims (68)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Применение Υ-рецепторного агониста, селективного в отношении Υ2 и Υ4 рецепторов по сравнению с Υ1 рецептором, для получения композиции для лечения состояний, восприимчивых к активации Υ2 и/или Υ4 рецепторов, причём:(а) указанный агонист является РР-складчатым пептидом или РР-складчатым пептидом-миметиком, который содержит:(ί) С-концевую аминокислотную последовательность Υ-рецепторного распознавания, представленную как Х-Т11г-Агд-Х3-Агд-Туг-С(=О^К.|К.:. где В1 и В2, независимо, обозначают водород или С1-С6 алкил, X обозначает Уа1, 11е, Ьеи или А1а, а X3 обозначает О1п или Аки, или её консервативно замещённый вариант, в котором ТНг замещён на Н18 или Акп, и/или Туг замещён на Тгр или РНе, и/или Агд замещён на Ьук, и (ίί) Ν-концевую аминокислотную последовательность Υ-рецепторного распознавания, представленную как Н^-Х'-Рго-ХДСШ или Акр)-, где X1 отсутствует или обозначает любой аминокислотный остаток, а X2 обозначает Ьеи или 8ег или консервативные замены Ьеи или 8ег, или (б) указанный агонист содержит:С-концевую аминокислотную последовательность Υ-рецепторного распознавания по определению, данному в (ί), указанную последовательность Υ-рецепторного распознавания, связанную с амфифильным доменом аминокислотной последовательности, содержащим по меньшей мере один альфа-спиральный поворот, прилегающий к Ν-концу указанной гексапептидной последовательности, причём указанный поворот заключён в спиральной конфигурации за счёт ковалентной внутримолекулярной связи, и, необязательно,Ν-концевую последовательность, которая начинается с аминокислотной последовательности Υ-рецепторного распознавания по определению, данному в (ίί).
- 2. Применение по п.1, отличающееся тем, что в С-концевой аминокислотной последовательности Υ-рецепторного распознавания агониста каждый из В1 и В2 обозначает водород.
- 3. Применение по п.1 или 2, отличающееся тем, что в С-концевой аминокислотной последовательности Υ-рецепторного распознавания агониста остаток X обозначает Уа1 или 11е.
- 4. Применение по п.1, отличающееся тем, что агонист содержит С-концевую последовательность Υ-рецепторного распознавания, представленную как -XА-X-Тй^-А^д-X3-А^д-Ту^-С(=О)NВ1В2, где остаток ХА является некислым и неосновным, а последовательность -X-Тй^-А^д-X3-А^д-Ту^-С(=О)NВ1В2 имеет значение по определению в любом из пп.1-3.
- 5. Применение по п.4, отличающееся тем, что в С-концевой последовательности Υ-рецепторного распознавания агониста указанный некислый и неосновной аминокислотный остаток представляет собой Ьеи, Ме!, 11е, Уа1 или А1а.
- 6. Применение по п.1, отличающееся тем, что агонист содержит С-концевой ундекапептид, представленный как -Xс-Ту^-Xв-Аκи-ХА-X-Тй^-А^д-X3-А^д-Ту^-С(=О)NВ1В2, где последовательность имеет значение по определению в п.4 или 5, X'' обозначает Агд или Ьук, а X15 обозначает 11е, Ьеи или Уа1.
- 7. Применение по п.1, отличающееся тем, что агонист содержит С-концевую ундекапептидную последовательность, представленную как -X -Туг^ -Аки^ -Λ^д-Ту^-С(=О)NВ В , где по- следовательность -ХА-X-ТЬ^-А^д-X3-А^д-Ту^-С(=О)NВ1В2 имеет значение по определению в п.4 или 5, X' обозначает Н1к, Акп или О1п, а X5 обозначает 11е, Ьеи или Уа1.
- 8. Применение по любому из пп.1-7, отличающееся тем, что в С-концевой аминокислотной последовательности Υ-рецепторного распознавания X3 обозначает О1п.
- 9. Применение по п.1, отличающееся тем, что агонист содержит С-концевую ундекапептидную последовательность -Агд-Туг-Ьен-Акп-Щеи или Меΐ)-Vа1-ТЬ^-А^д-С1и-А^д-Ту^-С(=0)NΗ2.
- 10. Применение по п.1, отличающееся тем, что агонист содержит С-концевую ундекапептидную последовательность -Н1к-Туг-(11е или ^еи)-Аки-Меΐ-^еи-ТЬ^-А^д-С1и-А^д-Ту^-С(=0)NΗ2.
- 11. Применение по любому из пп.1-10, отличающееся тем, что в Ν-концевой аминокислотной последовательности Υ-рецепторного распознавания остаток X1, в случае его присутствия, обозначает А1а или он отсутствует.
- 12. Применение по любому из пп.1-11, отличающееся тем, что в Ν-концевой аминокислотной последовательности Υ-рецепторного распознавания остаток X2, в случае его присутствия, обозначает Ьеи, 11е или 8ег.
- 13. Применение по любому из пп.1-10, отличающееся тем, что Ν-концевая последовательность представляет собой Н2^Л1а-Рго-Ьеи-С1и- или Н^-Рго-Ьеи-бЫ-.
- 14. Применение по любому из пп.1-13, отличающееся тем, что агонист является агонистом типа (Ь) с Ν-концевой последовательностью Υ-рецепторного распознавания и имеет РР-складчатую структуру, в которой ограничивающая спиральный поворот внутримолекулярная связь тянется от аминокислотного остатка в амфифильном домене до точки связывания на Ν-концевом участке агониста, соответствующем домену полипролина РР-складчатого пептида, который тянется антипараллельно амфифильному домену.- 35 011861
- 15. Применение по п.14, отличающееся тем, что в агонисте ограничивающая спиральный поворот внутримолекулярная связь представляет собой дисульфидную или лактамную связь.
- 16. Применение по п.15, отличающееся тем, что ковалентная внутримолекулярная связь в агонисте является дисульфидной связью, образующейся между остатком Б- или Ό-Сук в альфа-спирали и остатком Сук, расположенным в Ν-концевой части агониста, соответствующей домену полипролина ΡΡ-складчатого пептида, который тянется антипараллельно амфифильному домену.
- 17. Применение по любому из пп.1-12, отличающееся тем, что агонист является агонистом типа (Ь), и в агонисте ограничивающая спиральный поворот внутримолекулярная связь представляет собой лактамную связь, образованную между остатками Бук и О1и в указанном спиральном повороте или между остатком Бук или О1и в указанном спиральном повороте и остатком О1и или Бук в С-концевой последовательности Υ-рецепторного распознавания.
- 18. Применение по любому из пп.1-17, отличающееся тем, что агонист содержит как С-концевую, так и Ν-концевую последовательность Υ-рецепторного распознавания, причём С-концевая последовательность по своему Ν-концу связана с аминокислотной последовательностью амфифильного домена, содержащего по меньшей мере один поворот альфа-спирали, прилегающий к Ν-концу указанного эпитопа, причём указанные С- и Ν-концевые аминокислотные последовательности связаны пептидными связями, соответственно, с карбоксильными и аминогруппами аминокислоты формулы ΝΗ2^Η2)^Ο2Η, где η обозначает целое число от 2 до 12.
- 19. Применение по п.18, отличающееся тем, что η обозначает 6, 7, 8, 9 или 10.
- 20. Применение по п.1, отличающееся тем, что агонист выбирают из [011134] РР (8ЕР ГО Νο: 4) [Ν- (Ν'- гексадеканоил)- гамма- глутамоил- Буз13,О1п34]РР (8Е(2 ГО Νο: 34) [Ν- (А1а-Агд- Агд- Агд- А1а- А1а-Агд-А1а)3- Буз18,О1п34]РР (8Ες ГО Νο: 35) [Ν- РЕ05000- Еуз13,О1п34]РР (8Е(^ ГО Νο: 36) [ПеЗ 1,О1пЗ4]РР (8Е(^ ГО Νο: 5) [Уа131,О1п34]РР (8Εζ) ГО Νο: 6) [Беи30,О1и34]РР (8Ες ГО Νο: 7) [Ν1β30,ΟΙη34]ΡΡ (8Ες ГО Νο: 8) [Беи28,О1п34]РР (8Е(} ГО Νο: 9) [Ηίδ26,Ο1η34]ΡΡ (8Ες ГО Νο: 10) [11еЗ,О1п34]РР (8Е0 ГО Νο: 11) [А1а1,О1и4,Атд26,(Ме130 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Ер ГО Νο: 12) ' [ΑΝ1,Ο1ιι4,Ν- (Ν'- гексадеканоил)- гамма- глутамоил- Бу813,Агд26,Ме30]РУУ (8Ες ГО Νο: 37) [А1а1, Ο1ιι4,Ν- (А1а-Агд- Агд- Агд- А1а- А1а-Агд- А1а)3- Еу813,Агд26,Ме30ртУ (8Εζ) ГО Νο: 38) [Α1α1,Ο1ιι4,Ν- РЕС5000- Εу813,Α^д26,N1е30]ΡΥΥ (8Ες ГО Νο: 39) [А1а1,О1и4,Агд26(Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Е(^ ГО Νο: 13) [ΑΝ1,Ο1υ4]ΡΥΥ (8Ες ГО Νο: 14) и [Α1η1,Ο1ιι4]ΝΡΥ (8Ες ГО Νο: 15) [Агд26, (Ме130 или Ν1β30)]ΡΥΥ (8Е(^ ГО Νο: 16) и [Агд26, (Ме130 или Ν1β30)]ΝΡΥ (8Εζ) ГО Νο: 17) [О1и4, (Ме130 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Ες ГО Νο: 18) и [О1и4, (Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Ε0Π)Νο: 19) [Ο1ιι4,Ατ§26]ΡΥΥ (8Еф ГО N0:20) и [Ο1ιι4,Αγ§26]ΝΡΥ (8Е0 Π)Νο: 21) [Суз2,Б- Су827,О1п34]РР (8Е0 Ю Νο: 22) [Суз2,Аос5- 24,Б- Су527,О1п34]РР (8Е0 1Б Νο: 23) [Су82,Еуз13,Б- Суз27,О1п34]РР (8Е(^ 1Б Νο: 30) [Суз2, Ν- (8- (8- гамма- глутамоиламиноэктаноиламино)октаноил)- Буз13, БСуз27,О1п34]РР (8Е0 1Б Νο: 31) [Суз2,А- {(А1а-Агд- Агд- Агд- А1а- А1а-Агд- А1а)3}- Буз13,Б- Суз27,С1п34]РР (8Е01Б Νο:32) [Суз2, Ν-{Ν’- (21- амино- 4,7,10,13,16,19- гексаоксагенэйкозаноил)}- гамма- глутамоилБуз13,Б- Суз27,О1п34]РР (8Е0 1Б Νο: 33) и их консервативно замещённых аналогов.- 36 011861
- 21. Применение по п.1, отличающееся тем, что агонист представляет собой [О1п34]РР (8ЕР ГО Νο: 4), или [А1а1,О1и4,Аг§26,(Ме130 или Ме30)]РУУ (8ЕР ГО Νο: 12), или их аналог с консервативной заменой.
- 22. Применение по любому из пп.1-21, отличающееся тем, что агонист ацилирован по своему \-концу с целью придать резистентность к аминопептидазной активности.
- 23. Применение по п.22, отличающееся тем, что агонист ацилирован по своему Ν-концу, причём углеродная цепь ацилирующей группы содержит 2-24 углеродных атома.
- 24. Применение по п.22, отличающееся тем, что агонист ацилирован по своему \-концу.
- 25. Применение по любому из пп.1-24, отличающееся тем, что агонист содержит мотив связывания с сывороточным альбумином, или мотив связывания с гликозаминогликаном (ОАО), или мотив, индуцирующий спираль, или является ПЭГилированным.
- 26. Применение по п.25, отличающееся тем, что в агонисте мотив связывания с сывороточным альбумином представляет собой липофильную группу.
- 27. Применение по п.26, отличающееся тем, что в агонисте липофильная группа содержит необязательно замещённую, насыщенную или ненасыщенную, линейную или разветвлённую углеводородную группу, включающую 10-24 углеродных атома.
- 28. Применение по п.25 или 26, отличающееся тем, что в агонисте липофильная группа представляет собой боковую цепь или часть боковой цепи каркаса агониста.
- 29. Применение по п.28, отличающееся тем, что в агонисте боковая цепь, содержащая липофильную группу, связана с остатком в каркасе молекулы простой эфирной, тиоэфирной, амино, сложноэфирной или амидной связью.
- 30. Применение по п.29, отличающееся тем, что в агонисте боковую цепь, содержащую липофильную группу, выбирают из группы, состоящей изСН3(СН2)пСН(СООНЖН- СО(СН2)2СОТ4Н-, где п обозначает целое число от 9 до 15,СН3(СН2),СО- ΝΗΟΗ(ΟΟΟΗ)(ΟΗ2)2ΟΟΝΗ-, где г обозначает целое число от 9 до 15,ΟΗ3(ΟΗ2)500-ΝΉΟΗ((ΟΗ2)2ΟΟΟΗ)ΟΟΝΗ-, где 8 обозначает целое число от 9 до 15,СНз(СН2)П1СОЖ-, где т обозначает целое число от 8 до 18,-ЖСОСН((СН2)2СООН)Ж- СО(СН2)рСНз, где р обозначает целое число от 10 до 16,-ΝΗΟΟ(ΟΗ2)2ΟΗ(ΟΟΟΗ)ΝΗ- СО(СН2)чСНз, где с] обозначает целое число от 10 до 16,СНз(СН2)пСН(СООН)КНСО-, где п обозначает целое число от 9 до 15,ΟΗ3(ΟΗ2)ΡΝΗΟΟ-, где р обозначает целое число от 10 до 18,-ΟΟΝΗΟΗ(ΟΟΟΗ)(ΟΗ2)4ΝΉ- СО(СН2)тСН3, где т обозначает целое число от 8 до 18,-СОЖСН(СООН)(СН2)4Ж- СОСН((СН2)2СООН)КН- СО(СН2)рСН3, где р обозначает целое число от 10 до 16,-ΟΟΝΗΟΗ(ϋΟΟΗ)((7Η2)4ΝΗ- 00(ϋΗ2)2€Η(ε00Η)ΝΗ-00(0Η2)ςϋΗ3, где с] обозначает целое число от 10 до 16, и частично или полностью гидрированнового циклопентанофенантренового скелета.
- 31. Применение по п.28, отличающееся тем, что в агонисте боковая цепь, содержащая липофильную группу, представляет собой С12, С14, С16 или С18 ацильную группу, ацилирующую аминогруппу в боковой цепи каркасного остатка агониста.
- 32. Применение по п.28, отличающееся тем, что в агонисте боковая цепь, содержащая липофильную группу, представляет собой тетрадеканоильную группу, ацилирующую аминогруппу в боковой цепи каркасного остатка агониста.
- 33. Применение по п.1, отличающееся тем, что агонист представляет собой ЬузП-тетрадеканоил [Ьу811,О1п34]РР, [№(Жгексадеканоил)-гамма-глутамоил-Ьу813,О1п34]РР (8ЕР ГО Νο: 34), |ΛΙα1,ΟΙιι4,Ν(Жгексадеканоил)-гамма-глутамоил-Ьу813,Агд26Ме30]РУУ (8ЕР ГО Νο: 37) или [Су82,№(8-(8-гаммаглутамоиламинооктаноиламино)октаноил)-Ьу813,П-Су827,О1п34]РР (8ЕР ГО Νο: 31) или его консервативно замещённый аналог.
- 34. Применение по п.25, отличающееся тем, что в агонисте ОАО-связывающий мотив представляет собой аминокислотную последовательность, которая является боковой цепью или частью боковой цепи- 37 011861 каркаса агониста.
- 35. Применение по п.34, отличающееся тем, что в агонисте САС-связывающий мотив содержит аминокислотную последовательность ХВВХВХ и/или ХВВВХХВХ, где В обозначает основной аминокислотный остаток, а Х обозначает любой аминокислотный остаток.
- 36. Применение по п.34 или 35, отличающееся тем, что в агонисте САС-связывающий мотив является конкатамерным или дендримерным.
- 37. Применение по любому из пп.34-36, отличающееся тем, что САС-связывающий мотив представляет собой А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а, связанный амидной связью, образованной между С-концом конкатамерного мотива САС-связывания и эпсилонаминогруппой остатка Ьук 18 в [Ьук18,С1п34]РР (8Е0 ΙΌ Νο: 24) или Ьук11 в агонисте [А1а1,С1и4,Ьук11,Агд26,(Ме!30 или Ν^^ΥΥ (8ЕС) ΙΌ Νθ: 25).
- 38. Применение по пп.34-36, отличающееся тем, что САС-связывающий мотив представляет собой А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а, связанный амидной связью, образованной между С-концом конкатамерного мотива САС-связывания и эпсилон-аминогруппой остатка Ьук 18 в [Ьук18,С1п34]РР (8Е0 ΙΌ Νο: 24) или Ьук11 в агонисте [А1а1,С1и4,Ьук11,Агд26,(Ме!30 или Ν^^ΥΥ (8ЕС) ΙΌ Νο: 25).
- 39. Применение по п.25, отличающееся тем, что в агонисте САС-связывающий мотив ковалентно связан с С- или Ν-концом агониста либо непосредственно, либо через линкерный радикал.
- 40. Применение по п.39, отличающееся тем, что в агонисте САС-связывающий мотив ковалентно связан либо непосредственно, либо через линкерный радикал с Ν-концом агониста.
- 41. Применение по п.39 или 40, отличающееся тем, что в агонисте САС-связывающий мотив содержит аминокислотную последовательность ХВВХВХ и/или ХВВВХХВХ, где В обозначает основной аминокислотный остаток, а Х обозначает любой аминокислотный остаток.
- 42. Применение по п.39 или 40, отличающееся тем, что в агонисте САС-связывающий мотив содержит аминокислотную последовательность [ХВВВХХВХ]п, где п обозначает число от 1 до 5, В обозначает основной аминокислотный остаток, а Х обозначает любой аминокислотный остаток.
- 43. Применение по п.39, отличающееся тем, что пептид представляет собой А1а-Агд-Агд-Агд-А1аА1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-А1а-Агд-Агд-Агд-А1а-А1а-Агд-А1а-[С1п34]РР (8ЕО ΙΌ Νο: 26), [А1а1,С1и4,N-(А1а-А^д-А^д-А^д-А1а-А1а-А^д-А1а)з-^ук13,А^д26,N1е30]ΡУУ (8 ЕС) ΙΌ Νο: 38) или [Сук2,N-{(А1а-А^д-А^д-А^д-А1а-А1а-А^д-А1а)з}-^ук13,^-Сук27,С1п34]ΡΡ (8ЕС) ΙΌ Νο: 32).
- 44. Применение по п.25, отличающееся тем, что в агонисте ПЭГ (РЕС) обозначает полиэтиленгликоль или полиэтиленоксид с молекулярной массой не более 20 кДа.
- 45. Применение по п.25, отличающееся тем, что агонист представляет собой [Ьук11,С1п34]РР, ПЭГилированный по остатку Ьук11, или [А1а1,С1и4,Ьук18,Агд26,(Ме!30 или N1е30)]ΡУУ, ПЭГилированный по остатку Ьук18, или [А1а1,С1и4,N-ΡЕС5000-^ук13,А^д26,N1е30]ΡΥΥ (8ЕС) ΙΌ Νο: 39), или ^82,Ν-{Ν'(21-амино-4,7,10,13,16,19-гексаоксагенэйкозаноил)}-гамма-глутамоил-Ьук13,П-Сук27,С1п34]РР (8ЕО ΙΌ Νο: 33).
- 46. Применение по п.25, отличающееся тем, что в агонисте пептид, индуцирующий спираль, ковалентно связан либо непосредственно, либо через линкерный радикал с С- или Ν-концом агониста.
- 47. Применение по п.25, отличающееся тем, что в агонисте пептид, индуцирующий спираль, ковалентно связан либо непосредственно, либо через линкерный радикал с Ν-концом агониста.
- 48. Применение по п.46 или 47, отличающееся тем, что пептид, индуцирующий спираль, содержит 4-20 аминокислотных остатков, выбранных из группы, состоящей из А1а, Ьеи, 8ег, ТЬг, Туг, Акп, С1п, Акр, С1и, Ьук, Агд, Н1к, Ме!, Огп, и аминокислотных остатков формулы -НН-С(К1)(К2)-СО-, где К1 обозначает необязательно замещённый С1-С6алкил, фенил или фенилметил или К1 и К2 вместе с атомом С, с которым они связаны, образуют циклопентильное, циклогексильное или циклогептильное кольцо.
- 49. Применение по п.46 или 47, отличающееся тем, что пептид, индуцирующий спираль, содержит 4, 5 или 6 остатков Ьук.
- 50. Применение по п.46 или 47, отличающееся тем, что агонист представляет собой Ьук-Ьук-ЬукЬук-Ьук-Ьук-Ьук-[С1п34]-РР.
- 51. Применение по любому из пп.26-35, 42 или 43, отличающееся тем, что в агонисте мотив связывания сывороточного альбумина, или САС-связывающий мотив, или ПЭГ радикал является боковой цепью или образует часть боковой цепи каркасного углерода, соответствующего любому из нижеприведённых положений ΡУУ или РР: 1, 3, 6, 7, 10, 11, 12, 13, 15, 16, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 30 и 32 или соответствующего любому из нижеприведённых положений №Υ: 1, 3, 6, 7, 10, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 21, 22, 23, 25, 26, 28, 29, 30 и 32.
- 52. Применение по п.51, отличающееся тем, что агонист является агонистом типа (с), а мотив связывания сывороточного альбумина, или САС-связывающий мотив, или ПЭГ радикал является боковой цепью или образует часть боковой цепи каркасного углеродного атома, соответствующего любому из приведённых ниже положений ΡΥΥ, №Υ или РР: 2, 5, 8, 9, 13, 14, 20 и 24.
- 53. Применение по п.51, отличающееся тем, что агонист имеет значение по определению в п.12, а мотив связывания сывороточного альбумина, или САС-связывающий мотив, или ПЭГ радикал является- 38 011861 боковой цепью или образует часть боковой цепи каркасного линкерного радикала -(СН2)П-.
- 54. Υ-рецепторный агонист, селективный к Υ2 и Υ4 рецепторам по сравнению с Υ1 рецептором, выбранный из [Ν- (Ν'- гексадеканоил)- гамма- глутамоил- Ьуз13,О1п34]РР (8Е<2 ГО Νο: 34) [Ν- (А1а-Аг§- Аг£- Агё- А1а- А1а-Аг§-А1а)3- Ьу518,О1п34]РР (8Е<2 ГО Νο: 35) [Ν- РЕС5000- Ьу813,О1п34]РР (8Ες ГО Νο: 36) [Уа131,О1п34]РР (8Е<2 ГО Νο: 6) [Ьеи30,О1п34]РР (8Е(2 ГО Νο: 7) [Ν1ε30,Ο1η34]ΡΡ (8Е(} ГО Νο: 8) [Ьеи28,О1п34]РР (8ЕО ГО Νο: 9) [Ηίδ26,σΐη34]ΡΡ (8Е<2 ГО Νο: 10) [11еЗ,С1п34]РР (8Е(2 ГО Νο: 11) [А1а1,61и4,Аг§26,(Ме130 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Е0 ГО Νο: 12) [А1а1,61и4Д4- (Ν'- гексадеканоил)- гамма- глутамоил- Ьуб13,Аг§26,Ме30]РУУ (8Ε(2ΓΟΝο:37) [А1а1, Ο1ιι4,Ν- (А1а-Аг§- Аг§- Аг§- А1а- А1а-Аг§- А1а)3- Ьу813,Аг£26,Ме30]РУУ (8Ер ГО Νο: 38) [А1а1,01и4,Ν- РЕС5000- Ьу813,Аг§26,Ме30]РУУ (8Εζ) ГО Νο: 39) [А1а1,61и4,Агё26(Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Е(2 ГО Νο: 13) [А1а1,О1и4]РУУ (8Е(} ГО Νο: 14) и [Α1α1,Ο1υ4]ΝΡΥ (8Е(2 ГО Νο: 15) [Агё26, (Μεί30 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Е(} ГО Νο: 16) и [Аг§26, (Ме130 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Е(2 ГО Νο: 17) [О1и4, (Ме(30 или Ν1ε30)]ΡΥΥ (8Е0 ГО Νο: 18) и [С1и4, (Μεί30 или Ν1ε30)]ΝΡΥ (8Е(2 ГО Νο: 19) [О1и4,Аг§26]РУУ (8Е0 ГО Νο:20) и [Ο1ιι4,Αγ§26]ΝΡΥ (8ΕΩ ГО Νο:21) [Су82ГО- Су827,О1п34]РР (8Е(} ГО Νο:22) [Суз2,Аос5- 24,ϋ- Суз27,О1п34]РР (8Е0 ГО Νο: 23) [Су82,Ьуз13,О- Су$27,О1п34]РР (8Е(2 ГО Νο: 30) [Су$2, Ν- (8- (8- гамма- глутамоиламинооктаноиламино)октаноил)- Ьуз 13, ЭСу827,61п34]РР (8Е(2 ГО Νο: 31) [Су82,И- {(А1а-Аг§- Аг§- Аг§- А1а- А1а-Аг§- А1а)3}- Ьуз 13,ϋ- Суз27,О1п34]РР (8Εζ) ГО Νο: 32) [Суз2, Ν-{Ν’- (21- амино- 4,7,10,13,16,19- гексаоксагенэйкозаноил)}- гамма- глутамоилЬу813Ю- Су827,О1п34]РР (8Е0ГО Νο:33) и их консервативно замещённых аналогов.
- 55. Υ-рецепторный агонист, селективный к Υ2 и Υ4 рецепторам по сравнению с Υ1 рецептором, представляющий собой [А1а1,С1и4,Аг§26,(Ме130 или Ν^30)]ΡΥΥ или его аналог с консервативной заменой.
- 56. Способ лечения состояний, восприимчивых к активации Υ2 и/или Υ4 рецепторов, заключающийся во введении нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества Υ2 и Υ4 селективного рецепторного агониста по любому из пп.54 или 55.
- 57. Применение по любому из пп.1-53, отличающееся тем, что состояние, лечение которого проводится, является состоянием, для которого показаны регуляция потребления энергии или энергетического метаболизма, контроль интестинальной секреции, снижение моторики желудочно-кишечного тракта или индукция ангиогенеза.
- 58. Применение по п.57, отличающееся тем, что состояние, лечение которого проводится, является состоянием, для которого показана индукция ангиогенеза, и тем, что Υ2 и Υ4 селективный рецепторный агонист содержит САС-связывающий мотив.
- 59. Применение по п.57, отличающееся тем, что состояние, лечение которого проводится, является состоянием, для которого показана индукция ангиогенеза, и тем, что Υ2 и Υ4 селективный рецепторный агонист содержит мотив связывания с сывороткой.- 39 011861
- 60. Применение по п.57, отличающееся тем, что состояние, лечение которого проводится, является состоянием, для которого показана индукция ангиогенеза, и тем, что Υ2 селективный рецепторный агонист является ПЭГилированным.
- 61. Применение по любому из пп.57-60, отличающееся тем, что лечение проводят с целью замедления опорожнения желудка.
- 62. Применение по п.57, отличающееся тем, что состояние, лечение которого проводится, представляет собой ожирение или избыточный вес, состояние, при котором ожирение или избыточный вес рассматривается как способствующий фактор.
- 63. Применение по п.62, отличающееся тем, что состояние, лечение которого проводится, представляет собой булимию, нейрогенную булимию, синдром X (метаболический синдром), диабет, сахарный диабет типа 2 или инсулиннезависимый сахарный диабет (ΝΙΌΌΜ), гипергликемию, устойчивость к инсулину, нарушенную толерантность к глюкозе, сердечно-сосудистое заболевание, гипертензию, атеросклероз, заболевание коронарных артерий, инфаркт миокарда, заболевание периферических сосудов, удар, тромбоэмболическое заболевание, гиперхолистеринемию, гиперлипидемию, болезнь желчного пузыря, остеоартрит, остановку дыхания во сне, репродуктивные нарушения, такие как синдром поликистоза яичников, или рак молочной железы, простаты или толстой кишки.
- 64. Применение по п.62 или 63, отличающееся тем, что агонист вводят пациенту натощак.
- 65. Применение по п.57, отличающееся тем, что состояние, лечение которого проводится, представляет собой диарею или кишечную гиперсекрецию.
- 66. Применение по любому из пп.56-65, отличающееся тем, что агонист вводят пациенту парентерально, включая подкожное, внутримышечное, внутривенное, назальное, трансдермальное или трансбуккальное введение.
- 67. Фармацевтическая композиция, содержащая один или более Υ2 и Υ4 селективных рецепторных агонистов по определению в любом из пп.54 или 55 вместе с фармацевтически приемлемым эксципиентом.
- 68. Косметическая композиция, содержащая один или более Υ2 и Υ4 селективных агонистов по п.54 или 55 вместе с косметически приемлемым эксципиентом.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DKPA200400436 | 2004-03-17 | ||
US55893204P | 2004-04-01 | 2004-04-01 | |
US58596404P | 2004-07-06 | 2004-07-06 | |
GB0503111A GB0503111D0 (en) | 2005-02-14 | 2005-02-14 | Receptor agonists and their use |
PCT/EP2005/002982 WO2005089790A2 (en) | 2004-03-17 | 2005-03-17 | Y2/y4 selective receptor agonists for therapeutic interventions |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA200601722A1 EA200601722A1 (ru) | 2007-04-27 |
EA011861B1 true EA011861B1 (ru) | 2009-06-30 |
Family
ID=49582878
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA200601722A EA011861B1 (ru) | 2004-03-17 | 2005-03-17 | Селективные агонисты рецепторов y2/y4 для терапевтического воздействия |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20080261871A1 (ru) |
EP (1) | EP1786458A2 (ru) |
JP (1) | JP2007531714A (ru) |
AU (1) | AU2005224027B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0508861A (ru) |
CA (1) | CA2560166A1 (ru) |
EA (1) | EA011861B1 (ru) |
GB (1) | GB2427550B (ru) |
IL (1) | IL177682A0 (ru) |
MX (1) | MXPA06010346A (ru) |
WO (1) | WO2005089790A2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2726777C2 (ru) * | 2015-06-12 | 2020-07-15 | Ново Нордиск А/С | Селективные соединения пептида yy и их применения |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100425282C (zh) * | 2004-03-17 | 2008-10-15 | 7Tm制药联合股份有限公司 | 用于治疗性干预的y2/y4选择性受体激动剂 |
EP1934254A1 (en) | 2005-09-21 | 2008-06-25 | 7TM Pharma A/S | Y4 selective receptor agonists for therapeutic interventions |
JP2009508886A (ja) | 2005-09-21 | 2009-03-05 | 7ティーエム ファーマ エイ/エス | 治療的介入のためのy2選択性レセプターアゴニスト |
GB0708226D0 (en) * | 2007-04-27 | 2007-06-06 | 7Tm Pharma As | Y-receptor agonists |
EP2322620A3 (en) | 2007-07-09 | 2011-08-31 | Imperial Innovations Ltd. | Analogs of human pancreatic polypeptide and their effects on feeding behaviour |
EP2342222B1 (en) | 2008-09-22 | 2018-03-21 | Aileron Therapeutics, Inc. | Peptidomimetic macrocycles |
EP2352507A4 (en) * | 2008-11-24 | 2012-04-25 | Aileron Therapeutics Inc | PEPTIDOMIMETIC MACROCYCLES WITH IMPROVED PROPERTIES |
GB201001333D0 (en) | 2010-01-27 | 2010-03-17 | Imp Innovations Ltd | Novel compounds and their effects on feeding behaviour |
JP5902194B2 (ja) | 2010-12-16 | 2016-04-13 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | Glp−1アゴニストとn−(8−(2−ヒドロキシベンゾイル)アミノ)カプリル酸の塩とを含む固形組成物 |
GB201101459D0 (en) | 2011-01-27 | 2011-03-16 | Imp Innovations Ltd | Novel compounds and thier effects on fedding behaviour |
HRP20231060T1 (hr) | 2012-03-22 | 2023-12-22 | Novo Nordisk A/S | Pripravci peptida glp-1 i njihova priprava |
SI3068421T1 (sl) | 2013-11-15 | 2019-08-30 | Novo Nordisk A/S | Selektivne spojine PYY in njihova uporaba |
US10583172B2 (en) | 2013-11-15 | 2020-03-10 | Novo Nordisk A/S | HPYY(1-36) having a beta-homoarginine substitution at position 35 |
EP4299118A3 (en) | 2018-02-02 | 2024-04-10 | Novo Nordisk A/S | Solid compositions comprising a glp-1 agonist, a salt of n-(8-(2-hydroxybenzoyl)amino)caprylic acid and a lubricant |
GB202213305D0 (en) * | 2022-09-12 | 2022-10-26 | Univ Ulster | Compositions for use in the treatment of diabetes or obesity |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002047712A2 (en) * | 2000-12-14 | 2002-06-20 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Peptide yy and peptide yy agonists for treatment of metabolic disorders |
US6458381B1 (en) * | 1996-02-13 | 2002-10-01 | Andrej Sourovoi | Lipids and their use, for example, in liposomes |
WO2005053726A1 (en) * | 2003-11-25 | 2005-06-16 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Selective neuropeptide y2 receptor agonists |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NZ265452A (en) * | 1993-03-29 | 1997-09-22 | Univ Cincinnati | Analogues of peptide yy, dimers and pharmaceutical compositions |
US5830434A (en) * | 1997-02-26 | 1998-11-03 | Medical University Of South Carolina Foundation For Research Development | Methods of treating non-insulin dependent diabetes mellitus with pancreatic polypeptide |
US6588708B2 (en) * | 2001-01-29 | 2003-07-08 | The Boeing Company | Spacecraft methods and structures for acquiring and determining power-safe attitudes |
WO2003105763A2 (en) | 2002-06-14 | 2003-12-24 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Prevention and/or treatment of inflammatory bowel disease using pyy or agonists thereof |
US7229966B2 (en) * | 2002-12-17 | 2007-06-12 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of Y2 receptor-binding peptides and methods for treating and preventing obesity |
EP2057996A3 (en) * | 2004-03-17 | 2009-11-04 | 7TM Pharma A/S | Y4 selective receptor agonists for therapeutic intervention |
CN100425282C (zh) * | 2004-03-17 | 2008-10-15 | 7Tm制药联合股份有限公司 | 用于治疗性干预的y2/y4选择性受体激动剂 |
JP2009508886A (ja) * | 2005-09-21 | 2009-03-05 | 7ティーエム ファーマ エイ/エス | 治療的介入のためのy2選択性レセプターアゴニスト |
EP1934254A1 (en) * | 2005-09-21 | 2008-06-25 | 7TM Pharma A/S | Y4 selective receptor agonists for therapeutic interventions |
-
2005
- 2005-03-17 JP JP2007503302A patent/JP2007531714A/ja active Pending
- 2005-03-17 CA CA002560166A patent/CA2560166A1/en not_active Abandoned
- 2005-03-17 WO PCT/EP2005/002982 patent/WO2005089790A2/en active Application Filing
- 2005-03-17 EA EA200601722A patent/EA011861B1/ru unknown
- 2005-03-17 BR BRPI0508861-5A patent/BRPI0508861A/pt not_active IP Right Cessation
- 2005-03-17 MX MXPA06010346A patent/MXPA06010346A/es not_active Application Discontinuation
- 2005-03-17 US US10/592,688 patent/US20080261871A1/en not_active Abandoned
- 2005-03-17 AU AU2005224027A patent/AU2005224027B2/en not_active Ceased
- 2005-03-17 GB GB0618812A patent/GB2427550B/en not_active Expired - Fee Related
- 2005-03-17 EP EP05716257A patent/EP1786458A2/en not_active Withdrawn
-
2006
- 2006-08-24 IL IL177682A patent/IL177682A0/en unknown
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6458381B1 (en) * | 1996-02-13 | 2002-10-01 | Andrej Sourovoi | Lipids and their use, for example, in liposomes |
WO2002047712A2 (en) * | 2000-12-14 | 2002-06-20 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Peptide yy and peptide yy agonists for treatment of metabolic disorders |
WO2005053726A1 (en) * | 2003-11-25 | 2005-06-16 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Selective neuropeptide y2 receptor agonists |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
CABRELE CHIARA ET AL.: "Y-receptor affinity modulation by the design of pancreatic polypeptide/neuropeptide Y chimera led to Y5-receptor ligands with picomolar affinity" PEPTIDES (NEW YORK), vol. 22, no. 3, March 2001 (2001-03), pages 365-378, XP002339076, ISSN: 0196-9781, abstract, page 365, left-hand column, paragraph 1 - page 366, right-hand column, paragraph 1; tables 1, 2, page 368, right-hand column, last paragraph - page 377, right-hand column, last paragraph; figure 1 * |
FUHLENDORFF J. ET AL.: "THE ANTIPARALLEL PANCREATIC POLYPEPTIDE FOLD IN THE BINDING OF NEUROPEPTIDE Y TO Y-1 AND Y-2 RECEPTORS" JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 265, no. 20, 1990, pages 11706-11712, XP002339077, ISSN: 0021-9258, abstract, page 11708, left-hand column, paragraph 1 - page 11711, right-hand column, paragraph 2; figures 1-7 * |
JORGENSEN J.C. ET AL.: "STRUCTURE-FUNCTION STUDIES ON NEUROPEPTIDE Y AND PANCREATIC POLYPEPTIDE EVIDENCE FOR TWO PP-FOLD RECEPTORS IN VAS DEFERENS" EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACOLOGY, vol. 186, no. 1, 1990, pages 105-114, XP002339197, ISSN: 0014-2999, abstract, page 108, left-hand column, last paragraph - page 112, right-hand column, last paragraph; figure 1 * |
PARKER ERIC M. ET AL.: "GR231118 (1229U91) and other analogues of the C-terminus of neuropeptide Y are potent neuropeptide Y Y1 receptor antagonists and neuropeptide Y Y4 receptor agonists" EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACOLOGY, vol. 349, no. 1, 15 May 1998 (1998-05-15), pages 97-105, XP002339078, ISSN: 0014-2999, abstract, page 102, left-hand column, paragraph 2 - page 104, right-hand column, paragraph 1 * |
ROSSI M. ET AL.: "Central nervous system neuropeptides involved in obesity" HANDBOOK OF EXPERIMENTAL PHARMACOLOGY, SPRINGER VERLAG, BERLIN, vol. 149, 2000, pages 313-341, XP001154661, ISSN: 0171-2004, abstract, page 314, paragraph 1 - page 317, paragraph 2; figure 1 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2726777C2 (ru) * | 2015-06-12 | 2020-07-15 | Ново Нордиск А/С | Селективные соединения пептида yy и их применения |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1786458A2 (en) | 2007-05-23 |
MXPA06010346A (es) | 2007-04-23 |
US20080261871A1 (en) | 2008-10-23 |
AU2005224027B2 (en) | 2011-05-26 |
JP2007531714A (ja) | 2007-11-08 |
IL177682A0 (en) | 2006-12-31 |
GB0618812D0 (en) | 2006-11-08 |
GB2427550A (en) | 2007-01-03 |
GB2427550B (en) | 2007-05-30 |
BRPI0508861A (pt) | 2007-08-28 |
AU2005224027A1 (en) | 2005-09-29 |
CA2560166A1 (en) | 2005-09-29 |
WO2005089790A2 (en) | 2005-09-29 |
WO2005089790A3 (en) | 2005-12-01 |
EA200601722A1 (ru) | 2007-04-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EA011861B1 (ru) | Селективные агонисты рецепторов y2/y4 для терапевтического воздействия | |
EA012071B1 (ru) | Селективные агонисты рецептора y4 для терапевтического воздействия | |
US7851590B2 (en) | Y2 selective receptor agonists for therapeutic interventions | |
EA011860B1 (ru) | Селективные агонисты рецептора y2 для терапевтического воздействия | |
US8022035B2 (en) | Y4 selective receptor agonists for therapeutic interventions | |
CN100425282C (zh) | 用于治疗性干预的y2/y4选择性受体激动剂 | |
JP2007531713A6 (ja) | 治療的介入のためのy2選択性レセプターアゴニスト | |
US20100160226A1 (en) | Y-receptor agonists | |
AU2020206388B2 (en) | Novel polypeptide and therapeutic uses thereof | |
ES2371148T3 (es) | Pp2-36, agonista del receptor de selección y4 para intervenciones terapéuticas. | |
KR20080063342A (ko) | 치료 중재용 와이포 선택적 수용체 아고니스트 |