EA007530B1 - Antineoplastic combinations - Google Patents

Antineoplastic combinations Download PDF

Info

Publication number
EA007530B1
EA007530B1 EA200301319A EA200301319A EA007530B1 EA 007530 B1 EA007530 B1 EA 007530B1 EA 200301319 A EA200301319 A EA 200301319A EA 200301319 A EA200301319 A EA 200301319A EA 007530 B1 EA007530 B1 EA 007530B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
rapamycin
alkylating agent
derivative
esters
neoplasm
Prior art date
Application number
EA200301319A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
EA200301319A1 (en
Inventor
Гари Дьюкарт
Джеймс Джозеф Мл. Гиббонс
Original Assignee
Уайт
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Уайт filed Critical Уайт
Publication of EA200301319A1 publication Critical patent/EA200301319A1/en
Publication of EA007530B1 publication Critical patent/EA007530B1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/436—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having oxygen as a ring hetero atom, e.g. rapamycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/555—Heterocyclic compounds containing heavy metals, e.g. hemin, hematin, melarsoprol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Abstract

This invention provides the use of a combination of an mTOR inhibitor and an antineoplastic alkylating agent in the treatment of neoplasms, wherein the neoplasm is soft tissue sarcoma or colon cancer.

Description

Изобретение относится к применению комбинаций ингибитора тТОК (например, сложного рапамицинового 42-эфира с 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислотой (СС1-779)) и противоопухолевого алкилирующего агента для лечения новообразований; к применению ингибитора тТОК и противоопухолевого алкилирующего агента для получения лекарственного средства для лечения новообразований; к продукту, включающему ингибитор тТОК и противоопухолевый алкилирующий агент в качестве комбинированного средства для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении новообразования; а также к фармацевтической композиции, включающей ингибитор тТОК, противоопухолевый алкилирующий агент и фармацевтически приемлемый носитель.

Предпосылки изобретения

Рапамицин представляет собой макроциклический триеновый антибиотик, продуцируемый 81гсрЮтуес5 Йудго8сор1си8, который, как установлено, обладает противогрибковой активностью, в частности, против Саий1йа а1Ысаи8, как ίη νίίτο, так и ίη νΐνο [С. Уехша е! а1., ί. АпЦЬюЕ 28, 721 (1975); 8.Ν. 8ейда1 е! а1., 1. АпЦЬюЕ 28, 727 (1975); Н.А. Вакег е! а1., 1. ΑηίίΜοί. 31, 539 (1978); патент США 3929992 и патент США 3993749]. Кроме того, рапамицин, применяемый отдельно (патент США 4885171) либо в комбинации с пицибанилом (рю1Ьаш1) (патент США 4401653), проявляет противоопухолевую активность.

Иммуносупрессорное действие рапамицина описано в РА8ЕВ 3, 3411 (1989). Циклоспорин А и РК506, другие макроциклические молекулы, также оказались эффективными в качестве иммуносупрессорных агентов, которые могут быть использованы для предотвращения отторжения трансплантата [РА8ЕВ 3, 3411 (1989); РА8ЕВ 3, 5256 (1989); Κ.Υ. СаЫе е! а1., Раисе! 1183 (1978); и патент США 5100899]. К. Маг!е1 е! а1. [Саш 1. Р11У5Ю1. РИатта^. 55, 48 [(1977)] описывают эффективность рапамицина на экспериментальной модели аллергического энцефаломиелита, модели рассеянного склероза; модели адъювантного артрита, модели ревматоидного артрита; а также его эффективность по ингибированию образования 1дЕ-подобных антител.

Рапамицин может быть также использован для профилактики или лечения системной красной волчанки [патент США 5078999], воспаления легких [патент США 5080899], инсулинзависимого сахарного диабета [патент США 5321009], поражений кожи, таких как псориаз [патент США 5286730], поражений кишечника [патент США 5286731], пролиферации клеток гладкой мускулатуры и утолщения интимы вследствие повреждения сосудов [патенты США 5288711 и 5516781], лейкемии/лимфомы Т-клеток у взрослых [заявка на европейский патент 525960 А1], глазных воспалений [патент США 5387589], злокачественных карцином [патент США 5206018], панкардита [патент США 5496832] и анемии [патент США 5561138].

Сложный рапамициновый 42-эфир с 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислотой (СС1-779) представляет собой сложный эфир рапамицина, проявляющий существенное ингибирующее действие на рост опухолей на моделях как ίη νίίτο, так и ίη νΐνο. Получение и применение эфиров гидроксикислоты рапамицина, включая СС1-779, описаны в патенте США 5362718.

СС1-779 обладает цитостатическими свойствами, в противоположность цитотоксическим свойствам, и может отсрочить время развития или рецидива опухолей. Считается, что СС1-779 имеет механизм действия, подобный механизму действия сиролимуса (агеНтш). СС1-779 связывается с цитоплазматическим белком РКВР и образует с ним комплекс, ингибирующий фермент, тТОК (мишень рапамицина у млекопитающих, также известная как РКВР12-рапамицин ассоциированный белок [РКАР]). Ингибирование активности киназы тТОК ингибирует различные пути трансдукции сигнала, включая цитокинстимулированную пролиферацию клеток, трансляцию мРНК для нескольких ключевых белков, регулирующих фазу С1 клеточного цикла, и 1Ь-2-индуцированную транскрипцию, ведущую к ингибированию развития клеточного цикла от 01 до 8. Механизм действия СС1-779, приводящий к блоку фазы 01 8, является новым для противоракового лекарственного средства.

Было установлено, что ίη νίίτο СС1-779 ингибирует рост ряда гистологически различных опухолевых клеток. Наиболее чувствительными к СС1-779 заболеваниями являются рак центральной нервной системы (ЦНС), лейкоз (Т-клеток), рак молочной железы, рак предстательной железы и линии меланомы. Соединение останавливает развитие клеток в фазе 01 клеточного цикла.

Исследования голых мышей ίη νΐνο показали, что СС1-779 проявляет активность против опухолевых ксенотрансплантатов человека различных гистологических видов. Особенно чувствительными к СС1-779 оказались глиомы, поскольку соединение проявило активность на ортотопической модели глиомы у голых мышей. СС1-779 заметно подавляет (индуцируемую тромбоцитами) стимуляцию фактора роста клеточной линии глиобластомы человека ίη νίίτο. СС1-779 также ингибирует рост некоторых опухолей поджелудочной железы человека у голых мышей, равно как и одной из двух линий рака молочной железы, исследованных ίη νΐνο.

Описание изобретения

Данное изобретение предусматривает применение комбинаций производного рапамицина и противоопухолевого алкилирующего агента в противоопухолевой комбинаторной химиотерапии. В частности, такие комбинации могут быть использованы для лечения рака мягких тканей или рака ободочной кишки. Данное изобретение также охватывает комбинации производного рапамицина и противоопухолевого алкилирующего агента для использования в противоопухолевой комбинаторной химиотерапии, при этом

- 1 007530 используемое количество производного рапамицина или противоопухолевого алкилирующего агента, или обоих препаратов равно субтерапевтически эффективным дозам.

В соответствии с другим аспектом данное изобретение предусматривает применение комбинаций производного рапамицина и противоопухолевого алкилирующего агента для получения лекарственного средства для лечения новообразований. В соответствии с дальнейшим аспектом данное изобретение охватывает продукт, включающий производное рапамицина и противоопухолевый алкилирующий агент в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения для лечения новообразования у млекопитающего. В соответствии со следующим аспектом данное изобретение охватывает фармацевтическую композицию, включающую производное рапамицина и противоопухолевый алкилирующий агент и фармацевтически приемлемый носитель.

В соответствии с данным изобретением термин «лечение» означает лечение млекопитающего, имеющего опухолевое заболевание, путем введения указанному млекопитающему эффективного количества комбинации производного рапамицина и противоопухолевого алкилирующего агента с целью ингибирования роста опухоли у такого млекопитающего, ликвидации опухоли или достижения паллиативного эффекта у млекопитающего.

В соответствии с данным изобретением термин «введение» относительно введения комбинации означает либо введение непосредственной комбинации, либо введение пропрепарата, производного или аналога одного или обоих компонентов комбинации, обеспечивающее наличие эффективного количества комбинации в организме.

В соответствии с настоящим изобретением термин «рапамицин» означает класс иммуносупрессорных соединений, содержащих основное ядро рапамицина (показано ниже). Рапамицины в соответствии с данным изобретением включают соединения, которые могут быть химически или биологически модифицированы как производные ядра рапамицина, сохраняя при этом иммуносупрессорные свойства. Соответственно, термин «рапамицин» включает сложные эфиры, простые эфиры, оксимы, гидразоны и гидроксиламины рапамицина, а также рапамицины, в которых функциональные группы ядра рапамицина подверглись модификации, например, в результате восстановления или окисления. Термин «рапамицин» также включает фармацевтически приемлемые соли рапамицинов, способные образовывать такие соли благодаря наличию кислотного или основного остатка.

РАПАМИЦИН

Предпочтительно, чтобы сложные и простые эфиры рапамицина включали гидроксильные группы в положении 42 и/или 31 ядра

Вторичное козий антикроличий конъюгат (8ап1а СТи/ Са! антитело: Ι§Θ-ΗΚΡ Й8С-2004)

Способы:

A. Получение клеточных лизатов

Клеточные линии выращивают в оптимальной базальной среде, дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой и пенициллином/трептомицином. С целью исследования фосфорилирования клетки пересевают в 6-луночные планшеты. После полного прикрепления клеток их выращивают на минимальном количестве сыворотки. Обработка ингибиторами шТОК продолжается от 2 до 16 ч. После обработки лекарственным средством клетки промывают один раз, РВ8 (забуференный фосфатом физиологический раствор (ЗФР) без Мд'' и Са++), а затем лизируют в 150-200 мкл буфера для образца ΤΏ8 на лунку. Лизаты подвергают краткому воздействию ультразвука, а затем центрифугированию в течение 15 мин при 14000 об./мин. До использования лизаты хранят при температуре -80°С.

Процедура теста также может включать инкубирование клеток в среде для выращивания в течение ночи после их полного прикрепления. Результаты, получаемые при обоих наборах условий, должны быть одинаковыми для ингибитора тТОК.

B. Вестерн-блот анализ

1) Получают образцы, состоящие из одного белка, помещая 22,5 мкл лизата в одну пробирку, а затем добавляя 2,5 мкл восстанавливающего агента для образца ΝπΡΑΘΕ. Нагревают образцы до 70°С в течение 10 мин. Осуществляют электрофорез, используя гели ΝπΡΑΘΕ и буферы ΝπΡΑΘΕ 8Ώ8.

2) Переносят гель на нитроцеллюлозную мембрану с гибридизационным буфером ΝπΡΑΘΕ. Мем

- 2 007530 брану блокируют в течение часа блокирующим буфером (забуференный Тгь физиологический раствор с 0,1% Т\уееп и 0,5% обезжиренного молока). Промывают мембраны 2х буфером для промывания (забуференный Тгь физиологический раствор с 0,1% Т\уееп).

3) Блот/мембрану инкубируют с первичным антителом Р-р70 86К (Т389) (1:1000) в блокирующем буфере в течение ночи при температуре 4°С на вращающейся платформе.

4) Каждый блот промывают 3х в течение 10 мин в буфере для промывания и инкубируют со вторичным антителом (1:2000) в блокирующем буфере в течение 1 ч при комнатной температуре.

5) После связывания вторичного антитела каждый блот промывают 3х в течение 10 мин буфером для промывания и 2х в течение 1 мин забуференным Тгь физиологическим раствором с последующим хемилюминесцентным (ЕСБ) анализом и проявлением на пленках для хемилюминесценции.

В соответствии с настоящим изобретением термин «рапамицин» означает класс иммуносупрессорных соединений, содержащих основное ядро рапамицина (показано ниже). Рапамицины в соответствии с данным изобретением включают соединения, которые могут быть химически или биологически модифицированы как производные ядра рапамицина, сохраняя при этом иммуносупрессорные свойства. Соответственно, термин «рапамицин» включает сложные эфиры, простые эфиры, оксимы, гидразоны и гидроксиламины рапамицина, а также рапамицины, в которых функциональные группы ядра рапамицина подверглись модификации, например, в результате восстановления или окисления. Термин «рапамицин» также включает фармацевтически приемлемые соли рапамицинов, способные образовывать такие соли благодаря наличию кислотного или основного остатка.

РАПАМИЦИН

Предпочтительно, чтобы сложные и простые эфиры рапамицина включали гидроксильные группы в положении 42 и/или 31 ядра рапамицина, сложные и простые эфиры - гидроксильную группу в положении 27 (после химического восстановления кетона 27), а оксимы, гидразоны и гидроксиламины - кетон в положении 42 (после окисления гидроксильной группы 42) и кетон 27 ядра рапамицина.

Предпочтительные простые и сложные эфиры 42 и 31 описаны в следующих патентах, приводимых здесь в качестве ссылки: сложные алкиловые эфиры (патент США 4316885); сложные аминоалкиловые эфиры (патент США 4650803); сложные фторированные эфиры (патент США 5100883); сложные амидные эфиры (патент США 5118677); сложные эфиры карбамата (патент США 5118678); сложные силиловые эфиры (патент США 5120842); сложные аминоэфиры (патент США 5130307); ацетали (патент США 551413); сложные аминодиэфиры (патент США 5162333); сложные эфиры сульфоната и сульфата (патент США 5177203); сложные эфиры (патент США 5221670); сложные алкоксиэфиры (патент США 5233036); сложные эфиры О-арила, -алкила, -алкенила и алкинила (патент США 5258389); сложные эфиры карбоната (патент США 5260300); карбаматы арилкарбонила и алкоксикарбонила (патент США 5262423); карбаматы (патент США 5302584); сложные гидроксиэфиры (патент США 5362718); блокированные сложные эфиры (патент США 5385908); сложные гетероциклические эфиры (патент США 5385909); гемдизамещенные сложные эфиры (патент США 5385910); сложные эфиры аминоалкановой кислоты (патент США 5389639); сложные эфиры фосфорилкарбамата (патент США 5391730); сложные эфиры карбамата (патент США 5411967); сложные эфиры карбамата (патент США 5434260); сложные эфиры амидинокарбамата (патент США 5463048); сложные эфиры карбамата (патент США 5480988); сложные эфиры карбамата (патент США 5480989); сложные эфиры карбамата (патент США 5489680); блокированные сложные эфиры Ν-оксида (патент США 5491231); сложные эфиры биотина (патент США 5504091); сложные эфиры О-алкила (патент США 5665772) и сложные эфиры ПЭГ рапамицина (патент США 5780462). Получение данных сложных и простых эфиров описано в вышеуказанных патентах.

Предпочтительные сложные и простые 27-эфиры рапамицина описаны в патенте США 5256790, приведенном здесь в качестве ссылки. Получение данных сложных и простых эфиров описано в вышеуказанных патентах.

Предпочтительные оксимы, гидразоны и гидроксиламины рапамицина описаны в патентах США 5373014, 5378836, 5023264 и 5563145, приводимых здесь в качестве ссылки. Получение данных оксимов, гидразонов и гидроксиламинов описано в вышеуказанных патентах. Получение 42-оксорапамицина опи

- 3 007530 сано в патенте 5023263, приводимом здесь в качестве ссылки.

Особенно предпочтительные рапамицины включают рапамицин [патент США 3929992], СС1-779 [сложный 42-эфир рапамицина с 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислотой; патент США 5362718] и 42-О-(2-гидрокси)этилрапамицин [патент США 5665772].

При необходимости фармацевтически приемлемые соли рапамицина могут быть получены из органических и неорганических кислот, например, уксусная, пропионовая, молочная, лимонная, винная, янтарная, фумаровая, малеиновая, малоновая, миндальная, яблочная, фталевая, соляная, бромистоводородная, фосфорная, азотная, серная, метансульфоновая, нафталинсульфоновая, бензолсульфоновая, толуолсульфоновая, камфорсульфоновая кислота и подобные известные приемлемые кислоты в случае, когда рапамицин содержит подходящий основный остаток. Соли могут быть также получены из органических и неорганических оснований, таких как соли щелочных металлов (например, натрия, лития или калия), соли щелочно-земельных металлов, соли аммония, соли алкиламмония, содержащие 1-6 атомов углерода, или соли диалкиламмония, содержащие 1-6 атомов углерода в каждой алкилгруппе, а также соли триалкиламмония, содержащие 1-6 атомов углерода в каждой алкилгруппе в случае, если рапамицин содержит подходящий кислотный остаток.

Ингибитор тТОК, который может быть использован в противоопухолевых комбинациях в соответствии с данным изобретением, предпочтительно представляет собой рапамицин, более предпочтительно, ингибитор тТОК представляет собой рапамицин, СС1-779 или 42-О-(2-гидрокси)этилрапамицин.

Согласно приведенному описанию СС1-779 подвергали испытаниям в качестве характерного ингибитора тТОК в ингибиторе тТОК плюс антиметаболические комбинации в соответствии с данным изобретением.

Получение СС1-779 описано в патенте США 5362718, приводимом здесь в качестве ссылки. При использовании СС1-779 в качестве противоопухолевого средства предполагается, что первоначальная доза для внутривенной инъекции составляет приблизительно 0,1-100 мг/м2 при ежедневной схеме введения (ежедневно в течение 5 дней, каждые 2-3 недели), и приблизительно 0,1-1000 мг/м2 при введении один раз в неделю. Предпочтительными способами введения являются пероральный или внутривенный, при этом более предпочтительным является внутривенный путь.

В соответствии с данным изобретением термин «противоопухолевый алкилирующий агент» означает вещество, вступающее во взаимодействие (или реакцию алкилирования) со многими обогащенными электронами атомами в клетках с образованием ковалентных связей. Наиболее важными реакциями относительно их противоопухолевой активности являются реакции с основаниями ДНК. Некоторые алкилирующие агенты являются монофункциональными и взаимодействуют только с одной цепью ДНК. Другие являются бифункциональными и взаимодействуют с атомом на каждой из двух цепей ДНК, образуя «перекрестную связь», ковалентно соединяющую две цепи двойной спирали ДНК. Без репарации такое повреждение препятствует эффективной репликации клетки. Летальность монофункциональных алкилирующих агентов происходит в результате распознавания повреждения ДНК клеткой и ответа клетки на данное повреждение. (СоМп ОМ. АиШитот А1ку1айпд АдспК Ιη Сапсег ΡΓίηοίρΙοδ & Ртасйсе о£ Опсо1оду, 64Ь ЕбШоп, еб. ИеУйа УТ, Не11тап 8, КокепЬетд 8А. Ырршсой ЭДИИатз & ХУПкпъ. РЫ1абе1рЫа 2001, р.363).

Противоопухолевые алкилирующие агенты приблизительно разделены в соответствии с их структурой или реакционноспособным остатком, на несколько категорий, включающих азотистые иприты, такие как мустарген, циклофосфамид, ифосфамид, мелфалан и хлорамбуцил; азидины и эпоксиды, такие как тиотеф, митомицин С, диангидрогалактитол и дибромдульцитол; алкилсульфонаты, такие как бусульфан; нитрозомочевины, такие как бисхлорэтилнитрозомочевины (ВСИИ), циклогексилхлорэтилнитрозомочевина (ССИИ) и метилциклогексилхлорэтилнитрозомочевина (МеССИИ); производные гидразина и триазина, такие как прокарбазин, дакарбазин и темозоломид; а также соединения платины. Соединения платины представляют собой содержащие платину агенты, которые взаимодействуют предпочтительно в положении N7 остатков гуанина и аденина, образуя различные монофункциональные и бифункциональные аддукты. (1ойи8оп 8^, 81еуеп§оп 1Р, О'О\\уег РЕ СйркЮп апб Й8 Апа1одие§. 1п Сапсег Ρπποΐр1е§ & Ртасйсе о£ Опсо1оду, 64Ь Ебйюп, еб. ИеУйа УТ, Не11тап 8, КокепЬетд 8А. Ырршсой ^ййатк & ХУПкпъ. РЫ1абе1рЫа 2001, р. 378). Данные соединения включают цисплатин, карбоплатин, соединения платины 1У и многоядерные платиновые комплексы.

Ниже приведены характерные примеры противоопухолевых алкилирующих агентов в соответствии с данным изобретением.

Меклоретамин доступен коммерчески в виде инъекций (Ми8ТАКСЕИ).

Циклофосфамид доступен коммерчески в виде инъекций (циклофосфамид, лиофилизированный СУТОХАИ или ИЕО8АК), а также в виде таблеток для перорального приема (циклофосфамид или СУТОХАИ).

Ифосфамид доступен коммерчески в виде инъекций (ΙΕΕΧ).

Мелфалан доступен коммерчески в виде инъекций (АЬКЕВАИ), а также в виде таблеток для перорального приема (АЬКЕВАИ).

Хлорамбуцил доступен коммерчески в виде таблеток для перорального приема (ЪЕиКЕКАИ).

- 4 007530

Тиотеф доступен коммерчески в виде инъекций (тиотеф или ТНЮРЬЕХ).

Митомицин доступен коммерчески в виде инъекций (митомицин или МЦТЛМУСШ).

Бусульфан доступен коммерчески в виде инъекций (ΒϋδϋΕΕΕΧ), а также в виде таблеток для перорального приема (ΜΥΕΕΚΑΝ).

Ломустин (^Νϋ) доступен коммерчески в виде капсул для перорального приема (СЕЕМ.’).

Кармустин доступен коммерчески в виде внутричерепного имплантата (ΟΕΙΑΌΕΕ), а также в виде инъекций (В1СЫи).

Прокарбазин доступен коммерчески в виде капсул для перорального приема (ΜΑΤϋΕΑΝΕ). Темозоломид доступен коммерчески в виде капсул для перорального приема (ΤΕΜΟΌΑΚ). Цисплатин доступен коммерчески в виде инъекций (цисплатин, ΡΕΑΤΙΝΟΕ или ΡΕΑΤΙΝΟΕ-ΑΡ). Карбоплатин доступен коммерчески в виде инъекций (ΡΑΚΑ.ΡΕΑΤΙΝ).

Следующая таблица вкратце суммирует некоторые из рекомендуемых дозировок вышеперечисленных противоопухолевых алкилирующих агентов.

Таблица 1. Рекомендуемые дозировки противоопухолевых алкилирующих средств

Лекарственный Препарат Дозировка Схема введения Мустарген 0,4 мг/кг Каждый курс проводят в виде разовой дозы либо в виде разделенных доз, составляющих 0,1 - 0,2 мг/кг/день. Циклофосфамид 40-50 мг/кг в/в 10-15 мг/кг в/в 3-5 мг/кг в/в 1-5 мг/кг перорально В виде разделенных доз в течение 2-5 дней Каждые 7-10 дней Два раза в неделю Ежедневно Ифосфамид 1,2 г /м2 в/в Ежедневно в течение 5 дней подряд; повторяют каждые 3 недели либо после устранения гематологической токсичности.

- 5 007530

Мелфалан 6 мг Ежедневно в течение 2-3 недель с перорально последующим перерывом 4 недели, затем поддерживающая доза 2 мг в день. 10 мг Ежедневно в течение 7-10 дней с перорально последующей ежедневной поддерживающей дозой 2 мг после восстановления количества белых кровяных телец. 0,15 мг/кг Ежедневно в течение 7 , дней с перорально последующим перерывом по меньшей мере в 14 дней, затем поддерживающая ежедневная доза 0,005 мг/кг. 16 мг/м2 Разовое введение в течение 15-20 в/в минут каждые 2 недели 4 доз с последующим перерывом, затем введение с 4-недельными интервалами для поддержания. Хлорамбуцил 0,1-0,2 Ежедневно в течение 3-6 недель мг/кг перорально Тиотеф 0,3-0,4 Каждые 1-4 недели мг/кг в/в Митомицин 20 мг/м2 Каждые 6-8 недель в/в Бусульфан 1,8 мг/м2 Ежедневно перорально Ломустин 130 мг/м2 Каждые 6 недель перорально Кармустин 150-200 Каждые 6 недель мг/м2 в/в

- 6 007530

Прокарбазин 2-4 мг/кг перорально 1-2 мг/кг перорально Ежедневно в течение первой недели, затем 4-6 мг/кг до получения максимального ответа Поддержание Темозоломид 150 мг/м2 перорально Один раз в день в течение 5 дней на 28-дневной цикл лечения Цисплатин 20 мг/м2 в/в Ежедневно в течение 5 дней на цикл 75-100 мг/м2 в/в Один раз на каждый 4-недельный цикл Карбоплатин 360 мг/м2 в/в Один раз на каждый 4-недельный цикл

Предпочтительные комбинации в соответствии с данным изобретением тТОК ингибитора плюс противоопухолевый алкилирующий агент включают СС1-779 плюс цисплатин; СС1-779 плюс циклофосфамид; СС1-779 плюс карбоплатин; и СС1-779 плюс ИСХИ.

Противоопухолевую активность комбинаций тТОК ингибитора плюс противоопухолевый алкилирующий агент подтверждают, применяя СС1-799 в качестве характерного ингибитора тТОК в стандартных фармакологических методиках тестов ΐη νΐίτο и ίπ νΐνο, применяя комбинации СС1-779 плюс цисплатин; СС1-779 плюс циклофосфамид; и СС1-779 плюс 1)СМ.’ в качестве характерных комбинаций в соответствии с данным изобретением. Ниже вкратце описаны применяемая методика и полученные результаты.

Для комбинаторных исследований ίη νΐίτο с СС1-779 и алкилирующими агентами используют линии рабдомиосаркомы человека К1130 и КЬ1, а также линию глиобластомы человека 8Ι-0ΒΜ2. Для исследований ίη νΐνο используют линию нейробластомы человека (ΝΒ1643) и линию ободочной кишки человека 0С3.

Для каждого представляющего интерес лекарственного средства определяют кривые ответа на дозы. Клеточные линии К1130, КЫ и 81-02 помещают в шестилуночные агглютинационные планшеты в количестве 6х103, 5х103 и 2,5х104 клеток/лунка, соответственно.

После 24-часового инкубирования лекарственные средства добавляют в 10%РВ8+КРМ1 1640 для К1130 и К111 или 15%ΡΒ8+ΌΜΕ для 81-02. После семидневного пребывания в содержащей лекарственное средство среде ядра высвобождают, обрабатывая клетки вначале гипотоническим раствором, а затем детергентом. После этого ядра подсчитывают с помощью счетчика ΟουίΙβΓ. Результаты экспериментов изображают в виде графика и для каждого лекарственного средства экстраполяцией определяют 1С50 (концентрация лекарственного средства, обеспечивающая 50% ингибирование роста). Из-за того, что значения 1С50 от эксперимента к эксперименту слегка варьируются, при исследовании взаимодействия используют две величины, заключающие в скобки 1С50 каждого лекарственного средства. Точка максимального взаимодействия между двумя лекарственными средствами достигается при их наличии в соотношении 1:1 в том случае, если изобола имеет стандартную форму. Поэтому каждую из трех приблизительных концентраций 1С50 СС1-779 смешивают в соотношении 1:1 с каждым из трех приблизительных 1С50 цисплатина, В(.'ХВ и мелфанана. Таким образом, в каждом эксперименте получают по девять 1:1 комбинаций лекарственных средств плюс три концентрации для СС1-779 и другого лекарственного средства. Данный протокол обычно обеспечивает по меньшей мере одну комбинацию для каждого лекарственного средства, имеющего величину 1С50. Затем используют 1:1 комбинацию концентраций 1С50 для СС1-779 и каждого лекарственного средства для химиотерапии с целью определения аддитивности, синергизма или антагонизма, применяя формулу ВегепЬаит: х/Х50+у/У50, = 1,<1, > 1. В том случае, если три концентрации испытываемого отдельно СС1-779 не дают 1С, подходящий к любому из трех 1С другого испытываемого отдельно соединения, то проверке подвергают все 1:1 комбинации, чтобы удостовериться в том, попадают ли их значения 1С между нужными значениями 1С испытываемых отдельно лекарственных средств. В положительном случае эффект считают аддитивным.

Результаты проведения стандартной фармакологической процедуры ίη νΐίτο при испытании против опухолевой линии К1130 показывают, что комбинация СС1-779 плюс цисплатин является синергической; данная комбинация является более чем аддитивной, но не достигает уровня математического синергизма против опухолевой клеточной линии КЫ, а является аддитивной против опухолевой клеточной линии 81-02. Комбинация СС1-779 плюс ΒΓΝΕ является синергической против опухолевой клеточной линии

- 7 007530

81-02 и более чем аддитивной, но не достигает уровня математического синергизма против клеточной линии РЬ30 и аддитивности против клеточной линии РЬ1. Комбинация СС1-779 плюс мелфанан является аддитивной против каждой из клеточных линий.

Самок мышей СВА/Са1 (Таеккои ЬаЬога1опе8, Ваг НагЬог, МЕ) в возрасте 4 недель лишают иммунитета в результате тимоэктомии, а через 3 недели их тела полностью подвергают облучению (1200 сОу), применяя источник 137Ск. В течение 6-8 ч облучения мышам вводят 3х106 ядросодержащих клеток костного мозга. Части опухолей размером приблизительно 3 мм3 имплантируют в область дорсального бокового пространства мышей, инициируя рост опухолей. Перед началом лечения мышей с опухолями случайным образом делят на группы по семь особей. Когда опухоли достигают приблизительно 0,20-1 см в диаметре, каждая мышь получает лекарственное средство. Размеры опухолей определяют каждые 7 дней с помощью цифрового циркуля Уегшет, соединенного с компьютером. Объемы опухолей подсчитывают, предполагая, что они имеют сферическую форму, по формуле [(π/6) х 63], где 6 означает средний диаметр. СС1-779 вводят по схеме в течение 5 дней подряд в течение 2 недель, повторяя данный цикл каждые 21 день 3 раза. Таким образом, СС1-779 вводят в дни 1-5, 8-12 (цикл 1); 21-25, 28-32 (цикл 2); и 4246, 49-53 (цикл 3). Схема введения другого химиотерапевтического лекарственного средства в каждом исследовании следующая:

циклофосфамид в 1-й и 8-й день каждые 21 день в течение 3 циклов.

Комбинация СС1-779 и циклофосфамида оценивают на примере рабдосаркомы человека (Р1118). применяя вышеописанную методику теста ксенотрансплантата мыши. При использовании данной методики теста активность СС1-779 с циклофосфамидом (44 мг/кг) является аддитивной. Комбинирование субоптимальных доз СС1-779 плюс циклофосфамид оказывает такое же действие, как и оптимальная доза циклофосфамида.

Исходя из результатов проведения вышеописанных фармакологических испытаний, комбинации ингибитора тТОВ плюс противоопухолевый алкилирующий агент могут быть использованы в противоопухолевой терапии. В частности, такие комбинации могут быть использованы для лечения карциномы почек, саркомы мягких тканей, рака молочной железы, нейроэндокринной опухоли легкого, рака шейки матки, рака матки, рака головы и шеи, глиомы, рака больших клеток легких, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы, лимфомы, меланомы, рака малых клеток легких, рака яичников, рака ободочной кишки, рака пищевода, рака желудка, лейкоза, колоректального рака и первичного рака неизвестного происхождения. Поскольку указанные комбинации содержат по меньшей мере два активных противоопухолевых агента, применение таких комбинаций также обеспечивает применение комбинаций каждого из агентов, в которых один или оба агента применяют в субтерапевтически эффективных дозах, тем самым снижая токсичность каждого отдельного химиотерапевтического средства.

При осуществлении химиотерапии в качестве составных частей химиотерапевтического «коктейля» обычно используют разнообразные агенты, оказывающие различные виды действия. Предполагается, что комбинации в соответствии с данным изобретением будут использоваться как часть коктейля для химиотерапии, который может содержать один или более дополнительных противоопухолевых агентов в зависимости от природы подвергаемой лечению неоплазии. Например, данное изобретение также охватывает применение комбинации ингибитор шТОР/алкилирующий агент вместе с другими химиотерапевтическими агентами, такими как антиметаболиты (т.е. 5-фтороурацил, флоксурадин, тиогуанин, цитарабин, флударабин, 6-меркаптопурин, метотрексат, гемцитабин, капецитабин, пентостатин, триметрексат или кладрибин); гормональные агенты (т.е. эстрамустин, тамоксифен, торемифен, анастрозол или летрозол); антибиотики (т.е. пликамицин, блеомицин, митоксантон, идарубицин, дактиномицин, митомицин или даунорубицин); иммуномодуляторы (т.е. интерфероны, 1Ь-2 или ВСО); антимитотические агенты (т.е. винбластин, винкристин, тенипозид или винорелбин); ингибиторы топоизомеразы (т.е. топотекан, иринотекан, этопозид или доксорубицин); а также другие агенты (т.е. гидроксимочевина, трастузумаб, алтретамин, ретуксимаб, паклитаксел, доцетаксел, Ь-аспарагиназа или озогамицин гемтузумаба).

В соответствии с данным изобретением комбинация может быть введена одновременно или по частям, при этом во время курса химиотерапии ингибитор тТОВ вводят в другое время, чем алкилирующий агент. Такой промежуток между введением двух агентов может составлять несколько минут, часов, дней, недель или более. Поэтому термин «комбинация» не обязательно означает одновременное введение или введение в составе единой дозы, а означает введение каждого компонента на протяжении желательного периода лечения. Агенты также могут быть введены различными способами. Например, что касается комбинации «ингибитор тТОВ плюс алкилирующий агент», предполагается, что ингибитор тТОВ вводят пероральным или парентеральным способом, при этом предпочтительным является парентеральное введение, в то время как алкилирующий агент может быть введен парентеральным, пероральным или другими приемлемыми способами. Такие комбинации могут быть введены ежедневно, еженедельно или ежемесячно. Как характерно для химиотерапевтических схем, курс химиотерапии может быть повторен через несколько недель и может следовать за такой же временной схемой введения двух агентов или может быть модифицирован в зависимости от реакции пациента.

Как это обычно происходит при химиотерапии, схемы введения лекарственных средств тщательно контролируются лечащим врачом с учетом многих факторов, включая тяжесть заболевания, реакцию на

- 8 007530 заболевание, общую токсичность, связанную с лечением, возраст, здоровье пациента и другие сопутствующие нарушения или курсы лечения.

Исходя из результатов, обеспечиваемых применением комбинаций СС1-779 плюс алкилирующий агент, предполагается, что начальная доза для внутривенной инъекции ингибитора тТОК составляет приблизительно 0,1-100 мг/м2, при этом предпочтительная доза составляет приблизительно 2,5-70 мг/м2. Предпочтительным также является внутривенное введение ингибитора тТОК, обычно в течение 30 мин и приблизительно один раз в неделю. Первоначальные дозы такого компонента, как алкилирующий агент, зависят от применяемого компонента и вначале основаны на опыте работы врача с выбранными агентами. Через один или более циклов лечения дозы могут быть повышены или понижены в зависимости от получаемых результатов и наблюдаемых побочных эффектов.

Коммерчески доступные алкилирующие агенты могут иметь известные лекарственные формы, при этом дозы могут быть разделены в зависимости от необходимости. Альтернативно, такие агенты или алкилирующие агенты, недоступные коммерчески, могут быть получены в соответствии с обычной фармацевтической практикой. Составы для перорального введения, содержащие активные соединения в соответствии с данным изобретением, могут включать любые обычно используемые пероральные формы, включая таблетки, капсулы, трансбуккальные формы, пастилки, лепешки и жидкости, суспензии или растворы для перорального использования. Капсулы могут содержать смеси активного соединения (активных соединений) с инертными наполнителями и/или разбавителями, такими как фармацевтически приемлемые крахмалы (к примеру, кукурузный, картофельный крахмал или крахмал тапиока), сахара, искусственные подсластители, измельченные в порошок целлюлозы, такие как кристаллическая и микрокристаллическая целлюлозы, различные виды муки, желатины, смолы и т. д. Применимые составы таблеток могут быть получены путем обычного прессования, мокрого или сухого гранулирования и включать фармацевтически приемлемые разбавители, связующие агенты, смазывающие агенты, расщепляющие агенты, модификаторы поверхности (включая поверхностно-активные вещества), суспендирующие или стабилизирующие агенты, включая, но не ограничиваясь ими, стеарат магния, стеариновую кислоту, тальк, лаурилсульфат натрия, микрокристаллическую целлюлозу, кальций карбоксиметилцеллюлозы, поливинилпирролидон, желатин, альгиновую кислоту, смолу акации, ксантановую смолу, цитрат натрия, сложные силикаты, карбонат кальция, глицин, декстрин, сахарозу, сорбит, дифосфат кальция, сульфат кальция, лактозу, каолин, маннит, хлорид натрия, тальк, сухие крахмалы и порошковый сахар. Предпочтительные модификаторы поверхности включают неионные и анионные модифицирующие поверхность агенты. Характерные примеры модификаторов поверхности включают, но не ограничиваются ими, полоксамер 188, хлорид бензалкония, стеарат кальция, цетостериловый спирт, цетомакроголэмульгирующий воск, сложные эфиры сорбита, коллоидный диоксид кремния, фосфаты, додецилсульфат натрия, силикат магния алюминия и триэтаноламин. Составы для перорального введения могут включать известные пролонгированные или высвобождающие через определенное время составы с целью изменения абсорбции активного соединения (активных соединений). Составы для перорального использования также могут быть предназначены для введения активного ингредиента в воде или фруктовом соке, содержащем соответствующие необходимые солюбилизаторы или эмульгаторы.

В некоторых случаях может возникнуть необходимость введения соединений непосредственно в дыхательные пути в виде аэрозоля.

Соединения также могут быть введены парентеральным или интраперитонеальным способом. Растворы или суспензии таких активных соединений в виде свободного основания или фармакологически приемлемой соли могут быть получены в воде, соответствующим образом смешанной с поверхностноактивным веществом, таким как гидроксипропилцеллюлоза. Дисперсии также могут быть получены в глицерине, жидких полиэтиленгликолях и их смесях в маслах. При обычных условиях хранения и использования данные препараты содержат консервант, предотвращающий рост микроорганизмов.

Фармацевтические формы, подходящие для инъекций, включают стерильные водные растворы или дисперсии и стерильные порошки для незапланированного получения стерильных растворов или дисперсий для инъекций. В любом случае форма должна быть стерильной и жидкой до такой степени, чтобы обеспечить ее легкое набирание в шприц. Она должна быть стойкой в условиях производства и хранения и должна быть ограждена от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибки. Носителем может служить растворитель или дисперсионная среда, содержащая, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль), их подходящие смеси и растительные масла.

В данном описании под трансдермальным введением подразумеваются все виды введения через поверхность организма и внутренние выстилки проходов тела, включая эпителиальные и слизистые ткани. Такое введение может быть осуществлено с применением данных соединений или их фармацевтически приемлемых солей в виде лосьонов, кремов, пены, накладок, суспензий, растворов и суппозиториев (ректальных и вагинальных).

Трансдермальное введение может быть осуществлено путем применения трансдермальной накладки, содержащей активное соединение и носитель, который инертен к активному соединению, нетоксичен для кожи и обеспечивает доставку агента для системного всасывания в ток крови через кожу. Носитель

- 9 007530 может иметь различные формы, такие как кремы и мази, пасты, гели и окклюзионные устройства. Кремы и мази могут представлять собой вязкие, жидкие или полутвердые эмульсии типа «масло-в-воде» или «вода-в-масле». Также подходят пасты из абсорбирующих порошков, диспергированных в вазелине или гидрофильном вазелине, содержащем активный ингредиент. Для высвобождения активного ингредиента в ток крови могут быть использованы различные окклюзионные устройства, такие как полупроницаемая мембрана, закрывающая емкость, содержащая активный ингредиент с носителем или без него, или матрица, содержащая активный ингредиент. Другие окклюзионные устройства описаны в литературе.

Составы для суппозиториев могут быть изготовлены из традиционных материалов, включая масло какао, с добавлением различных видов воска или без них с целью изменения температуры плавления суппозитория, а также глицерин. Могут быть также использованы водорастворимые основы для суппозиториев, такие как полиэтиленгликоли с различным молекулярным весом.

The invention relates to the use of combinations of a TTTOK inhibitor (for example, a rapamycin 42-ester with 3-hydroxy-2- (hydroxymethyl) -2-methylpropionic acid (CC1-779)) and an antitumor alkylating agent for the treatment of neoplasms; to the use of a TCTA inhibitor and an anticancer alkylating agent for the preparation of a medicament for the treatment of neoplasms; a product comprising a TTOK inhibitor and an anticancer alkylating agent as a combined agent for simultaneous, separate or sequential use in the treatment of a neoplasm; as well as a pharmaceutical composition comprising a TCTA inhibitor, an antitumor alkylating agent, and a pharmaceutically acceptable carrier.

Background of the invention

Rapamycin is a macrocyclic triene antibiotic produced by 81grsrUtus5 Yudgo8sor1si8, which, as established, has antifungal activity, in particular, against Sauli1aSsai8, both ίη νίίτο and ίη ννο [S. Uehsha e! A1., ί. Aptsue 28, 721 (1975); 8.Ν. 8eyda1 e! A1., 1. APCLE 28, 727 (1975); ON. Vakeg e! a1., 1. ΑηίίΜοί. 31, 539 (1978); U.S. Patent 3,929,992 and U.S. Patent 3,837,349. In addition, rapamycin, used alone (US Patent 4,885,171) or in combination with picibanil (Ryuber 1) (US Patent 4,401,653), exhibits antitumor activity.

The immunosuppressive effect of rapamycin is described in RA8EV 3, 3411 (1989). Cyclosporin A and PK506, other macrocyclic molecules, have also been found to be effective as immunosuppressive agents that can be used to prevent graft rejection [PA8EV 3, 3411 (1989); RA8EV 3, 5256 (1989); Κ.Υ. Sure! A1., Raisa! 1183 (1978); and US Patent 5,100,899]. K. Mag! E1 e! a1. [Sash 1. R11U5Y1. RIATT ^. 55, 48 [(1977)] describe the effectiveness of rapamycin on an experimental model of allergic encephalomyelitis, a model of multiple sclerosis; adjuvant arthritis models, rheumatoid arthritis models; as well as its effectiveness in inhibiting the formation of 1DE-like antibodies.

Rapamycin can also be used for the prevention or treatment of systemic lupus erythematosus [US patent 5,078,999], pneumonia [US patent 5,080,899], insulin-dependent diabetes mellitus [US patent 532,109], skin lesions such as psoriasis [US patent 5,286,730], intestinal lesions [ US Patent 5,286,731], smooth muscle cell proliferation and intimal thickening due to vascular damage [US Patents 5,288,711 and 5,516,781], T-cell leukemia / lymphoma in adults [European Patent Application 525960 A1], ocular inflammation [US Patent 5387589], malignant carcinomas [US Patent 5,206,018], Pancarditis [US Patent 5,496,832] and anemia [US Patent 5,561,138].

Rapamycin 42-ester with 3-hydroxy-2- (hydroxymethyl) -2-methylpropionic acid (CC1-779) is a rapamycin ester, which has a significant inhibitory effect on the growth of tumors in both ίη νίίτο and η νΐνο models. The preparation and use of rapamycin hydroxy acid esters, including CC1-779, is described in US Pat. No. 5,362,718.

CC1-779 has cytostatic properties, as opposed to cytotoxic properties, and can delay the time of development or recurrence of tumors. It is believed that CC1-779 has a mechanism of action similar to that of sirolimus (agent). CC1-779 binds to the cytoplasmic protein RKVR and forms with it a complex that inhibits the enzyme, TTTOK (mammalian target of rapamycin, also known as PKBP12-rapamycin associated protein [РКАР]). Inhibition of TTK kinase activity inhibits various signal transduction pathways, including cytokine-stimulated cell proliferation, translation of mRNA for several key proteins regulating the C1 phase of the cell cycle, and lb-2-induced transcription leading to inhibition of the development of the cell cycle from 01 to 8. Mechanism of action of CC1 -779, resulting in a phase 01 8 block, is new to an anticancer drug.

It was found that ίη νίίτο CC1-779 inhibits the growth of a number of histologically distinct tumor cells. The most sensitive diseases to CC1-779 are central nervous system (CNS), leukemia (T-cells), breast cancer, prostate cancer and melanoma lines. The compound stops the development of cells in phase 01 of the cell cycle.

Studies of nude mice ίη νΐνο showed that CC1-779 is active against human tumor xenografts of various histological types. Gliomas were particularly sensitive to CC1-779, since the compound was active on an orthotopic glioma model in nude mice. CC1-779 markedly suppresses (platelet-induced) stimulation of the growth factor of the human glioblastoma cell line ίη νίίτο. CC1-779 also inhibits the growth of some human pancreatic tumors in nude mice, as well as one of two breast cancer lines studied by ίη νΐνο.

Description of the invention

This invention provides for the use of combinations of a rapamycin derivative and an anticancer alkylating agent in antitumor combinatorial chemotherapy. In particular, such combinations can be used to treat cancer of soft tissue or cancer of the colon. This invention also encompasses the combination of a rapamycin derivative and an anticancer alkylating agent for use in antitumor combinatorial chemotherapy, wherein

- 1 007530, the amount of rapamycin derivative or anticancer alkylating agent used, or of both drugs, is equal to subtherapeutically effective doses.

In accordance with another aspect, the present invention provides for the use of combinations of a rapamycin derivative and an anticancer alkylating agent for the preparation of a medicament for treating neoplasms. In accordance with a further aspect, this invention encompasses a product comprising a rapamycin derivative and an anticancer alkylating agent as a combined preparation for simultaneous, separate or sequential use for treating a neoplasm in a mammal. In accordance with the following aspect, this invention encompasses a pharmaceutical composition comprising a rapamycin derivative and an anticancer alkylating agent and a pharmaceutically acceptable carrier.

In accordance with the present invention, the term “treatment” means treating a mammal having a tumor disease by administering to said mammal an effective amount of a combination of a rapamycin derivative and an antitumor alkylating agent to inhibit tumor growth in such a mammal, eradicate the tumor or achieve a palliative effect in the mammal.

In accordance with the present invention, the term “administration” with respect to the administration of a combination means either the administration of a direct combination, or the administration of a prodrug, derivative or analog of one or both components of the combination, ensuring the presence of an effective amount of the combination in the body.

In accordance with the present invention, the term "rapamycin" means the class of immunosuppressive compounds containing the main core of rapamycin (shown below). Rapamycin in accordance with this invention include compounds that can be chemically or biologically modified as derivatives of the core of rapamycin, while maintaining immunosuppressive properties. Accordingly, the term “rapamycin” includes esters, ethers, oximes, hydrazones, and rapamycin hydroxylamines, as well as rapamycins, in which the functional groups of the rapamycin core are modified, for example, by reduction or oxidation. The term "rapamycin" also includes pharmaceutically acceptable salts of rapamycins capable of forming such salts due to the presence of an acidic or basic residue.

Rapamycine

Preferably, the esters and ethers of rapamycin include hydroxyl groups at position 42 and / or 31 cores.

Secondary goat anti-rabbit conjugate (Antibody STi / Ca! Antibody: Ι§Θ-ΗΚΡ Й8С-2004)

Ways:

A. Obtaining cell lysates

Cell lines are grown in optimal basal medium supplemented with 10% fetal bovine serum and penicillin / treptomycin. For the purpose of phosphorylation studies, cells are subcultured into 6-well plates. After complete attachment of cells, they are grown on a minimal amount of serum. The treatment with STOC inhibitors lasts from 2 to 16 hours. After treatment with the drug, the cells are washed once, PB8 (phosphate buffered saline (PBS) without MD ″ and Ca ++ ), and then lysed in 150–200 μl of sample buffer ΤΏ8 per well. The lysates are briefly exposed to ultrasound and then centrifuged for 15 minutes at 14,000 rpm. Before use, lysates are stored at -80 ° C.

The test procedure may also include incubating cells in growth medium overnight after their full attachment. The results obtained with both sets of conditions should be the same for the TCTA inhibitor.

B. Western blot analysis

1) Samples consisting of one protein are obtained by placing 22.5 μl of lysate in one tube and then adding 2.5 μl of reducing agent for the sample “π”. Heat samples to 70 ° C for 10 minutes. Carry out electrophoresis using gels ΝπΡΑΘΕ and buffers ΝπΡΑΘΕ 8Ώ8.

2) Transfer the gel to a nitrocellulose membrane with ΝπΡΑΘΕ hybridization buffer. Meme

- 2,007530 brane is blocked for one hour with blocking buffer (buffered saline with 0.1% of T / h and 0.5% of skimmed milk). Wash the membranes with 2x rinsing buffer (buffered saline with 0.1% of T / h).

3) The blot / membrane is incubated with primary P-p70 86K (T389) antibody (1: 1000) in blocking buffer overnight at 4 ° C on a rotating platform.

4) Each blot is washed 3x for 10 minutes in wash buffer and incubated with a secondary antibody (1: 2000) in blocking buffer for 1 hour at room temperature.

5) After binding of the secondary antibody, each blot is washed 3x for 10 min with buffer for washing and 2x for 1 min with buffered Tg saline followed by chemiluminescent (ESC) analysis and development on films for chemiluminescence.

In accordance with the present invention, the term "rapamycin" means the class of immunosuppressive compounds containing the main core of rapamycin (shown below). Rapamycin in accordance with this invention include compounds that can be chemically or biologically modified as derivatives of the core of rapamycin, while maintaining immunosuppressive properties. Accordingly, the term “rapamycin” includes esters, ethers, oximes, hydrazones, and rapamycin hydroxylamines, as well as rapamycins, in which the functional groups of the rapamycin core are modified, for example, by reduction or oxidation. The term "rapamycin" also includes pharmaceutically acceptable salts of rapamycins capable of forming such salts due to the presence of an acidic or basic residue.

Rapamycine

Preferably, the rapamycin esters and ethers include hydroxyl groups at position 42 and / or 31 rapamycin cores, esters and ethers - a hydroxyl group at position 27 (after chemical reduction of the ketone 27), and oximes, hydrazones and hydroxylamines - the ketone at position 42 (after oxidation of the hydroxyl group 42) and ketone 27 of the rapamycin nucleus.

Preferred ethers and esters 42 and 31 are described in the following patents cited here as references: alkyl esters (US patent 4,316,885); aminoalkyl esters (US Pat. No. 4,650,803); fluorinated esters (US Patent 5,100,883); amide esters (US Patent 5,118,677); carbamate esters (US Patent 5,118,678); silyl esters (US Patent 5,120,842); amino esters (US Patent 5,130,307); acetals (US Pat. No. 5,51413); amino esters (US Patent 5,162,333); sulfonate and sulfate esters (US Patent 5,177,203); esters (US Patent 5,221,670); alkoxy esters (US Patent 5,233,036); O-aryl, -alkyl, -alkenyl and alkynyl esters (US Patent 5,258,389); carbonate esters (US Patent 5,260,300); arylcarbonyl and alkoxycarbonyl carbamates (US Patent 5,262,423); carbamates (US patent 5302584); hydroxyesters (US Patent 5,362,718); blocked esters (US Patent 5,385,908); heterocyclic esters (US Patent 5,385,909); hemdisubstituted esters (US Patent 5,385,910); aminoalkanoic acid esters (US Patent 5,389,639); phosphoryl carbamate esters (US Patent No. 5,391,730); carbamate esters (US Patent 5,411,967); carbamate esters (US Patent 5,434,260); amidinocarbamate esters (US Patent 5,463,048); carbamate esters (US Patent 5,480,988); carbamate esters (US Patent 5,480,989); carbamate esters (US Patent 5,489,680); Ν-oxide esters blocked (US Patent 5,491,231); biotin esters (US Patent 5,504,091); O-alkyl esters (US Patent 5,665,772) and PEG rapamycin esters (US Patent 5,780,462). Data acquisition of esters and ethers is described in the above patents.

Preferred rapamycin 27 esters and ethers are described in US Pat. No. 5,256,790, incorporated herein by reference. Data acquisition of esters and ethers is described in the above patents.

Preferred oximes, hydrazones, and hydroxylamines of rapamycin are described in US Pat. Nos. 5,373,014, 5,378,836, 5,023,264, and 5,563,145, incorporated herein by reference. Obtaining data of oximes, hydrazones and hydroxylamines is described in the above patents. Getting 42-oxorapamycin opi

- 3 007530 sano in patent 5023263, cited here as a reference.

Particularly preferred rapamycins include rapamycin [US Patent 3,999,992], CC1-779 [rapamycin 42-ester with 3-hydroxy-2- (hydroxymethyl) -2-methylpropionic acid; US Patent 5,362,718] and 42-O- (2-hydroxy) ethyl rapamycin [US Patent 5,665,772].

If necessary, pharmaceutically acceptable salts of rapamycin can be obtained from organic and inorganic acids, for example, acetic, propionic, lactic, citric, tartaric, succinic, fumaric, maleic, malonic, almond, malic, phthalic, hydrochloric, hydrobromic, phosphoric, nitric, sulfuric , methanesulfonic, naphthalenesulfonic, benzenesulfonic, toluenesulfonic, camphorsulfonic acid and similar known acceptable acids in the case where rapamycin contains a suitable basic residue. Salts can also be obtained from organic and inorganic bases, such as alkali metal salts (eg, sodium, lithium or potassium), alkaline earth metal salts, ammonium salts, alkylammonium salts containing 1-6 carbon atoms, or dialkyl ammonium salts containing 1-6 carbon atoms in each alkyl group, as well as trialkyl ammonium salts containing 1-6 carbon atoms in each alkyl group in case rapamycin contains a suitable acid residue.

The TTRAK inhibitor that can be used in the antitumor combinations in accordance with the present invention is preferably rapamycin, more preferably, the inhibitor of TTTOK is rapamycin, CC1-779 or 42-O- (2-hydroxy) ethyl rapamycin.

According to the description given, CC1-779 was tested as a characteristic inhibitor of TTTOK in the inhibitor of TTRA plus antimetabolic combinations in accordance with this invention.

The preparation of CC1-779 is described in US Pat. No. 5,362,718, hereby incorporated by reference. When using CC1-779 as an antitumor agent, it is assumed that the initial dose for intravenous injection is approximately 0.1-100 mg / m 2 with a daily regimen of administration (daily for 5 days, every 2-3 weeks), and approximately 0, 1-1000 mg / m 2 once a week. The preferred routes of administration are oral or intravenous, with the intravenous route being more preferred.

In accordance with this invention, the term "antitumor alkylating agent" means a substance reacting (or an alkylation reaction) with many atoms enriched with electrons in cells to form covalent bonds. The most important reactions regarding their antitumor activity are reactions with DNA bases. Some alkylating agents are monofunctional and interact with only one strand of DNA. Others are bifunctional and interact with an atom on each of two DNA strands, forming a “cross-linking” covalently connecting two strands of the DNA double helix. Without repair, such damage prevents efficient cell replication. Mortality of monofunctional alkylating agents occurs as a result of recognition of DNA damage by the cell and the cell's response to this damage. (CoMp OM. Ai Shitot A1kuipd Unspeed η Sapseg зΓίηοίρΙοΙ & Rtasse o £ Opsoloda, 6 4b EbShop, eb.

Antitumor alkylating agents are roughly divided according to their structure or reactive residue into several categories, including nitrogen mustards, such as mustargene, cyclophosphamide, ifosfamide, melphalan, and chlorambucil; azidines and epoxides, such as tiotef, mitomycin C, dianhydrogalactitol and dibromdulcitol; alkyl sulfonates, such as busulfan; nitrosoureas such as bischloroethyl nitrosourea (VSII), cyclohexyl chloroethyl nitrosourea (SSII), and methylcyclohexyl chloroethyl nitrosourea (MeSSII); hydrazine and triazine derivatives, such as procarbazine, dacarbazine and temozolomide; as well as platinum compounds. Platinum compounds are platinum-containing agents that interact, preferably at the N7 position, of guanine and adenine residues, forming various monofunctional and bifunctional adducts. (1st 8th, 81th, 1P, O'Oréere RE SyrkUptobn 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 ... Yyatk & HUPkp. RY1abErYa 2001, p. 378). These compounds include cisplatin, carboplatin, platinum IV compounds and multi-core platinum complexes.

Below are typical examples of anticancer alkylating agents in accordance with this invention.

Mekloretamin is commercially available as an injection (Mi8TAXEEI).

Cyclophosphamide is commercially available as an injection (cyclophosphamide, lyophilized SUTOHAI or IEO8AK), as well as oral tablets (cyclophosphamide or SUTOHAI).

Ifosfamide is commercially available as an injection (ΙΕΕΧ).

Melphalan is commercially available in the form of injections (AQUEVAI), as well as in the form of tablets for oral administration (AQUEVAI).

Chlorambucil is commercially available in oral tablet form (EJECECAI).

- 4 007530

Tiotef is commercially available in the form of injections (tiotef or TINHIREH).

Mitomycin is commercially available as an injection (Mitomycin or ICTLMUSSH).

Busulfan is available commercially in the form of injections (Βϋδ пер), as well as in the form of tablets for oral administration (ΜΥΕΕΚΑΝ).

Lomustine (^ Νϋ) is commercially available in the form of capsules for oral administration (CEEM. ').

Carmustine is commercially available as an intracranial implant (ΟΕΙΑΌΕΕ), as well as an injection (B1CYi).

Procarbazine is commercially available in oral capsules (ΜΑΤϋΕΑΝΕ). Temozolomide is commercially available in the form of capsules for oral administration (ΤΕΜΟΌΑΚ). Cisplatin is commercially available as an injection (cisplatin, ΡΕΑΤΙΝΟΕ or ΡΕΑΤΙΝΟΕ-ΑΡ). Carboplatin is commercially available as an injection (ΡΑΚΑ.ΡΕΑΤΙΝ).

The following table briefly summarizes some of the recommended dosages of the above listed anticancer alkylating agents.

Table 1. Recommended dosages of anticancer alkylating agents

Medicinal Drug Dosage Introduction scheme Mustargen 0.4 mg / kg Each course is carried out in the form of a single dose or in the form of divided doses of 0.1-0.2 mg / kg / day. Cyclophosphamide 40-50 mg / kg in / in 10-15 mg / kg in / in 3-5 mg / kg in / in 1-5 mg / kg orally In divided doses for 2-5 days Every 7-10 days Twice a week Daily Ifosfamide 1.2 g / m 2 in / in Daily for 5 consecutive days; repeat every 3 weeks or after the removal of hematological toxicity.

- 5 007530

Melphalan 6 mg Daily for 2-3 weeks with orally subsequent break 4 weeks, then maintenance dose 2 mg per day. 10 mg Daily for 7-10 days since orally follow daily maintenance dose of 2 mg after recovery amount whites blood cells. 0.15 mg / kg Daily for 7, days since orally subsequent break on lesser at least 14 days then supportive daily dose 0.005 mg / kg. 16 mg / m 2 Single introduction within 15-20 in / in minutes every 2 weeks 4 doses with subsequent break, then introduction with 4 weeks intervals to maintain. Chlorambucil 0.1-0.2 Daily for 3-6 weeks mg / kg orally Tiotef 0.3-0.4 Every 1-4 weeks mg / kg i.v. Mitomycin 20 mg / m 2 Every 6-8 weeks in / in Busulfan 1.8 mg / m 2 Daily orally Lomustine 130 mg / m 2 Every 6 weeks orally Carmustin 150-200 Every 6 weeks mg / m 2 i.v.

- 6 007530

Procarbazine 2–4 mg / kg orally 1–2 mg / kg orally Daily for the first week, then 4–6 mg / kg until a maximum response is obtained Temozolomide 150 mg / m 2 orally Once a day for 5 days for a 28-day treatment cycle Cisplatin 20 mg / m 2 i.v. Daily for 5 days per cycle 75-100 mg / m 2 i.v. Once for every 4 week cycle Carboplatin 360 mg / m 2 i.v. Once for every 4 week cycle

Preferred combinations in accordance with this invention of a TTOK inhibitor plus an anticancer alkylating agent include CC1-779 plus cisplatin; CC1-779 plus cyclophosphamide; CC1-779 plus carboplatin; and CC1-779 plus ISHI.

The antitumor activity of the combination of TTKT inhibitor plus the anticancer alkylating agent is confirmed using CC1-799 as a characteristic inhibitor of TTTOK in standard pharmacological test procedures η νΐίτο and ίπ νΐνο, using combinations of CC1-779 plus cisplatin; CC1-779 plus cyclophosphamide; and CC1-779 plus 1) CM. ' as characteristic combinations in accordance with this invention. The following briefly describes the method used and the results obtained.

For combinatorial studies of ίη νΐίτο with CC1-779 and alkylating agents, human rhabdomyosarcoma lines K1130 and КЬ1, as well as the human glioblastoma line 8-0Ι2, are used. For studies of ίη νΐνο, the human neuroblastoma line (ΝΒ1643) and the human colon line 0С3 are used.

For each drug of interest, dose response curves are determined. Cell lines K1130, KY and 81-02 are placed in six-well agglutination plates in the amount of 6x10 3 , 5x10 3 and 2.5x10 4 cells / well, respectively.

After a 24-hour incubation, the drugs are added in 10% PB8 + KPM1 1640 for K1130 and K111 or 15% ΡΒ8 + ΌΜΕ for 81-02. After a seven-day stay in the drug-containing medium, the nuclei are released, treating the cells first with a hypotonic solution and then with a detergent. After this, the cores are counted using a ΟουίΙβΓ counter. The results of the experiments are depicted as a graph, and for each drug, extrapolation determines 1C 50 (concentration of the drug, providing 50% growth inhibition). Due to the fact that the values of 1C 50 vary slightly from experiment to experiment, two values are used in the interaction study, which are enclosed in brackets 1C 50 of each drug. The point of maximum interaction between the two drugs is achieved when they are present in a 1: 1 ratio in the event that the isobol has a standard form. Therefore, each of the three approximate concentrations of 1C 50 CC1-779 is mixed in a 1: 1 ratio with each of the three approximate 1C 50 cisplatin B (. 'XB and melfanana. Thus, in each experiment, nine 1: 1 drug combinations are obtained plus three concentrations for CC1-779 and another drug This protocol usually provides at least one combination for each drug having a value of 1C 50. Then use 1: 1 combination of concentrations of 1C 50 for CC1-779 and each drug for chi myotherapy in order to determine additivity, synergism or antagonism, using the formula VegepBait: x / x 50 + y / y 50 , = 1, <1,> 1. In the event that the three concentrations tested separately CC1-779 do not give 1C, suitable to any of the three 1C of another compound tested separately, then all 1: 1 combinations are tested to ascertain whether their values of 1C fall between the desired values of 1C of the tested drugs separately. In the positive case, the effect is considered additive.

The results of the standard pharmacological procedure ίη νΐίτο when tested against the tumor line K1130 show that the combination of CC1-779 plus cisplatin is synergistic; This combination is more than additive, but does not reach the level of mathematical synergism against the tumor cell line KA, and is additive against the tumor cell line 81-02. The combination of CC1-779 plus ΒΓΝΕ is synergistic against a tumor cell line

- 7 007530

81-02 and more than additive, but does not reach the level of mathematical synergism against the Pb30 cell line and additivity against the Pb1 cell line. The combination of CC1-779 plus melfanan is additive against each of the cell lines.

Female CBA / Ca1 mice (Taekkoi Logogopop8, Vag Nagog, ME) at the age of 4 weeks are deprived of immunity as a result of thymectomy, and after 3 weeks their body is completely irradiated (1200 SEy) using a source of 137 Sk. Within 6-8 hours of irradiation, mice are injected with 3x10 6 nucleated bone marrow cells. Parts of tumors measuring approximately 3 mm 3 are implanted into the dorsal lateral space of mice, initiating the growth of tumors. Before treatment, mice with tumors are randomly divided into groups of seven individuals. When tumors reach approximately 0.20-1 cm in diameter, each mouse receives the drug. The size of the tumors is determined every 7 days using a digital compass tug connected to a computer. Tumor volumes are calculated assuming that they are spherical in shape, according to the formula [(π / 6) x 6 3 ], where 6 means average diameter. CC1-779 is administered according to a regimen for 5 days in a row for 2 weeks, repeating this cycle every 21 days 3 times. Thus, CC1-779 is administered on days 1-5, 8-12 (cycle 1); 21-25, 28-32 (cycle 2); and 4246, 49-53 (cycle 3). The scheme for the introduction of another chemotherapeutic drug in each study is as follows:

cyclophosphamide on the 1st and 8th day every 21 days for 3 cycles.

The combination of CC1-779 and cyclophosphamide is evaluated using human rhabdosarcoma (Р1118) as an example. using the above mouse xenograft test procedure. When using this test procedure, the activity of CC1-779 with cyclophosphamide (44 mg / kg) is additive. Combining suboptimal doses of CC1-779 plus cyclophosphamide has the same effect as the optimal dose of cyclophosphamide.

Based on the results of the above pharmacological tests, combinations of the inhibitor tTOV plus an antitumor alkylating agent can be used in antitumor therapy. In particular, such combinations can be used to treat kidney carcinoma, soft tissue sarcoma, breast cancer, neuroendocrine lung tumor, cervical cancer, uterine cancer, head and neck cancer, glioma, large cell lung cancer, prostate cancer, pancreatic cancer glands, lymphomas, melanomas, cancer of small lung cells, ovarian cancer, colon cancer, esophagus cancer, stomach cancer, leukemia, colorectal cancer and primary cancer of unknown origin. Since these combinations contain at least two active anticancer agents, the use of such combinations also provides for the use of combinations of each of the agents in which one or both agents are used in subtherapeutically effective doses, thereby reducing the toxicity of each individual chemotherapeutic agent.

When chemotherapy is used, a variety of agents are usually used as components of a chemotherapeutic cocktail, providing various types of action. It is contemplated that the combinations according to this invention will be used as part of a chemotherapy cocktail, which may contain one or more additional antitumor agents depending on the nature of the neoplasia being treated. For example, this invention also encompasses the use of a ТОTOR inhibitor / alkylating agent combination with other chemotherapeutic agents such as antimetabolites (i.e., 5-fluorouracil, floxuradine, thioguanine, cytarabine, fludarabine, 6-mercaptopurine, methotrexate, gemcitabine, capecitabine, pentatostin trimetrexate or cladribine); hormonal agents (eg, estramustine, tamoxifen, toremifene, anastrozole, or letrozole); antibiotics (i.e., plicamycin, bleomycin, mitoxantone, idarubicin, dactinomycin, mitomycin or daunorubicin); immunomodulators (i.e., interferons, lb-2 or bso); antimitotic agents (i.e., vinblastine, vincristine, teniposide, or vinorelbine); topoisomerase inhibitors (i.e., topotecan, irinotecan, etoposide, or doxorubicin); as well as other agents (i.e., hydroxyurea, trastuzumab, altretamine, reteximab, paclitaxel, docetaxel, L-asparaginase or gemtuzumab ozogamicin).

In accordance with this invention, the combination can be administered simultaneously or in parts, while during the course of chemotherapy the inhibitor tTOV is administered at a different time than the alkylating agent. Such a gap between the introduction of two agents may be several minutes, hours, days, weeks or more. Therefore, the term "combination" does not necessarily mean the simultaneous administration or administration as part of a single dose, but the administration of each component during the desired treatment period. Agents can also be introduced in various ways. For example, with regard to the combination "inhibitor of tTOV plus an alkylating agent", it is assumed that the inhibitor of tTOV is administered orally or parenterally, with parenteral administration being preferred, while the alkylating agent can be administered by parenteral, oral or other acceptable means. Such combinations can be entered daily, weekly or monthly. As is characteristic of chemotherapeutic regimens, a course of chemotherapy can be repeated in a few weeks and can follow the same temporary pattern of administration of two agents or can be modified depending on the response of the patient.

As it usually happens during chemotherapy, the drug administration patterns are carefully monitored by the attending physician, taking into account many factors, including the severity of the disease, the response to

- 8 007530 disease, general toxicity associated with treatment, age, patient health, and other related disorders or treatments.

Based on the results provided by the use of combinations of CC1-779 plus an alkylating agent, it is assumed that the initial dose for intravenous injection of a TCTA inhibitor is approximately 0.1-100 mg / m 2 , with a preferred dose of approximately 2.5-70 mg / m 2 Intravenous administration of a TCA inhibitor is also preferred, usually for 30 minutes and approximately once a week. The initial doses of a component such as an alkylating agent depend on the component used and are initially based on the experience of the doctor with the selected agents. Through one or more cycles of treatment, doses may be increased or decreased, depending on the results obtained and the observed side effects.

Commercially available alkylating agents may have known dosage forms, with the doses may be divided depending on the need. Alternatively, such agents or alkylating agents that are not commercially available can be prepared in accordance with conventional pharmaceutical practice. Compositions for oral administration containing the active compounds in accordance with this invention may include any commonly used oral forms, including tablets, capsules, buccal forms, lozenges, pellets and liquids, suspensions or solutions for oral use. Capsules may contain mixtures of the active compound (s) with inert fillers and / or diluents, such as pharmaceutically acceptable starches (for example, corn, potato starch or tapioca starch), sugars, artificial sweeteners, powdered cellulose, such as crystalline and microcrystalline cellulose, various types of flour, gelatins, resins, etc. Applicable tablet formulations can be obtained by conventional pressing, wet or dry granulation and include a pharmacist Scientifically acceptable diluents, binders, lubricants, disintegrating agents, surface modifiers (including surfactants), suspending or stabilizing agents, including, but not limited to, magnesium stearate, stearic acid, talc, sodium lauryl sulfate, microcrystalline cellulose, calcium carboxymethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, gelatin, alginic acid, acacia, xanthan gum, sodium citrate, complex silicates, calcium carbonate, glycine, dextrin, sucrose, sorbitol, diphosphate t, calcium sulfate, lactose, kaolin, mannitol, sodium chloride, talc, dry starches and powdered sugar. Preferred surface modifiers include non-ionic and anionic surface modifying agents. Representative examples of surface modifiers include, but are not limited to, poloxamer 188, benzalkonium chloride, calcium stearate, cetosteryl alcohol, cetomacrogollemulsifying wax, sorbitol esters, colloidal silicon dioxide, phosphates, sodium dodecyl sulfate, magnesium aluminum silicate, and triethanolamine. Compositions for oral administration may include known prolonged or release over a certain time compositions with the aim of changing the absorption of the active compound (active compounds). Formulations for oral use may also be intended to administer the active ingredient in water or fruit juice containing the appropriate solubilizers or emulsifiers.

In some cases, it may be necessary to introduce the compounds directly into the respiratory tract in the form of an aerosol.

The compounds may also be administered parenterally or intraperitoneally. Solutions or suspensions of such active compounds in the form of a free base or a pharmacologically acceptable salt can be obtained in water suitably mixed with a surfactant such as hydroxypropylcellulose. Dispersions can also be prepared in glycerol, liquid polyethylene glycols, and their mixtures in oils. Under normal conditions of storage and use, these preparations contain a preservative that prevents the growth of microorganisms.

Pharmaceutical forms suitable for injection include sterile aqueous solutions or dispersions and sterile powders for unplanned production of sterile solutions or dispersions for injection. In any case, the form must be sterile and fluid to such an extent that it is easy to draw into the syringe. It must be resistant to production and storage conditions and must be protected from the contaminating action of microorganisms, such as bacteria and fungi. The carrier may be a solvent or dispersion medium containing, for example, water, ethanol, polyol (for example, glycerin, propylene glycol and liquid polyethylene glycol), suitable mixtures thereof, and vegetable oils.

In this description, transdermal administration means all forms of administration through the surface of the body and the inner lining of the body aisles, including epithelial and mucous tissues. Such an introduction can be carried out using these compounds or their pharmaceutically acceptable salts in the form of lotions, creams, foams, patches, suspensions, solutions and suppositories (rectal and vaginal).

Transdermal administration can be carried out by applying a transdermal patch containing the active compound and carrier, which is inert to the active compound, is non-toxic to the skin and ensures delivery of an agent for systemic absorption into the blood flow through the skin. Carrier

- 9 007530 may take various forms, such as creams and ointments, pastes, gels and occlusive devices. Creams and ointments can be viscous, liquid or semi-solid emulsions of the type “oil-in-water” or “water-in-oil”. Pastes from absorbent powders dispersed in petrolatum or hydrophilic petrolatum containing the active ingredient are also suitable. To release the active ingredient into the blood stream, various occlusive devices can be used, such as a semi-permeable membrane covering the container containing the active ingredient with or without a carrier, or a matrix containing the active ingredient. Other occlusive devices are described in the literature.

Suppository formulations can be made from traditional materials, including cocoa butter, with or without adding various types of wax to change the melting point of the suppository, as well as glycerin. Water-soluble suppository bases, such as polyethylene glycols with different molecular weights, may also be used.

Claims (12)

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯCLAIM 1. Способ лечения новообразования у нуждающегося в этом млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества комбинации, включающей производное рапамицина и противоопухолевый алкилирующий агент, при этом новообразованием является саркома мягких тканей или рак ободочной кишки.1. A method of treating a neoplasm in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal an effective amount of a combination comprising a rapamycin derivative and an anti-tumor alkylating agent, wherein the neoplasm is soft tissue sarcoma or colon cancer. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что производным рапамицина является сложный 42-эфир рапамицина 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислоты (СС1-779).2. The method according to claim 1, characterized in that the rapamycin derivative is 3-hydroxy-2- (hydroxymethyl) -2-methylpropionic acid rapamycin 42-ester (CC1-779). 3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что противоопухолевый алкилирующий агент выбран из группы, состоящей из циклофосфамида, кармустина и цисплатина.3. The method according to claim 1 or 2, characterized in that the antitumor alkylating agent is selected from the group consisting of cyclophosphamide, carmustine and cisplatin. 4. Способ лечения опухоли у нуждающегося в этом млекопитающего, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества комбинации, включающей производное рапамицина и противоопухолевый алкилирующий агент, при этом производное рапамицина, или алкилирующий агент или оба соединения вводят в субтерапевтически эффективных количествах.4. A method of treating a tumor in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal an effective amount of a combination comprising a rapamycin derivative and an anti-tumor alkylating agent, wherein the rapamycin derivative or alkylating agent or both compounds are administered in subtherapeutically effective amounts. 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что производным рапамицина является сложный 42-эфир рапамицина 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислоты (СС1-779).5. The method according to claim 4, characterized in that the rapamycin derivative is rapamycin 42-ester of 3-hydroxy-2- (hydroxymethyl) -2-methylpropionic acid (CC1-779). 6. Способ по пп.1, 3 или 4, отличающийся тем, что производным рапамицина является 42-0-(2гидрокси)этилрапамицин.6. The method according to claims 1, 3 or 4, characterized in that the derivative of rapamycin is 42-0- (2hydroxy) ethyl rapamycin. 7. Применение производного рапамицина и противоопухолевого алкилирующего агента для получения лекарственного средства для лечения новообразования, при этом новообразованием является саркома мягких тканей или рак ободочной кишки.7. The use of a derivative of rapamycin and an anti-tumor alkylating agent for the manufacture of a medicament for the treatment of a neoplasm, wherein the neoplasm is soft tissue sarcoma or colon cancer. 8. Применение по п.7, отличающееся тем, что производным рапамицина является сложный 42-эфир рапамицина 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислоты (СС1-779).8. The use according to claim 7, characterized in that the rapamycin derivative is 3-hydroxy-2- (hydroxymethyl) -2-methylpropionic acid rapamycin 42-ester (CC1-779). 9. Применение по п.7 или 8, отличающееся тем, что противоопухолевый алкилирующий агент выбран из группы, включающей циклофосфамид, кармустин и цисплатин.9. The use according to claim 7 or 8, characterized in that the antitumor alkylating agent is selected from the group comprising cyclophosphamide, carmustine and cisplatin. 10. Применение по любому из пп.7-9, отличающееся тем, что производное рапамицина, или алкилирующий агент или оба соединения вводят в субтерапевтически эффективном количестве.10. The use according to any one of claims 7 to 9, characterized in that the rapamycin derivative or alkylating agent or both compounds are administered in a subtherapeutically effective amount. 11. Продукт, включающий производное рапамицина и противоопухолевый алкилирующий агент, выбранный из циклофосфамида и кармустина в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного использования для лечения новообразования у млекопитающего, при этом новообразованием является саркома мягких тканей или рак ободочной кишки.11. A product comprising a rapamycin derivative and an antitumor alkylating agent selected from cyclophosphamide and carmustine as a combined preparation for simultaneous, separate or sequential use for the treatment of a neoplasm in a mammal, the neoplasm being soft tissue sarcoma or colon cancer. 12. Продукт по п.11, отличающийся тем, что производным рапамицина является сложный 42-эфир рапамицина 3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропионовой кислоты.12. The product according to claim 11, characterized in that the rapamycin derivative is 3-hydroxy-2- (hydroxymethyl) -2-methylpropionic acid rapamycin ester 42-ester.
EA200301319A 2001-06-01 2002-05-29 Antineoplastic combinations EA007530B1 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US29523601P 2001-06-01 2001-06-01
US29519001P 2001-06-01 2001-06-01
PCT/US2002/016737 WO2002098416A2 (en) 2001-06-01 2002-05-29 Antineoplastic combinations

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200301319A1 EA200301319A1 (en) 2004-04-29
EA007530B1 true EA007530B1 (en) 2006-10-27

Family

ID=26968972

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200301319A EA007530B1 (en) 2001-06-01 2002-05-29 Antineoplastic combinations

Country Status (17)

Country Link
EP (1) EP1392286A2 (en)
JP (1) JP2004532883A (en)
KR (1) KR100875611B1 (en)
CN (1) CN100496485C (en)
AU (2) AU2002259309B2 (en)
BR (1) BR0210101A (en)
CA (1) CA2447732A1 (en)
CO (1) CO5540294A2 (en)
EA (1) EA007530B1 (en)
HU (1) HUP0400006A2 (en)
IL (1) IL158800A0 (en)
MX (1) MXPA03010907A (en)
NO (1) NO20035317L (en)
NZ (1) NZ529877A (en)
PL (1) PL367267A1 (en)
SG (1) SG153647A1 (en)
WO (1) WO2002098416A2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2678448C2 (en) * 2007-03-07 2019-01-29 АБРАКСИС БАЙОСАЙЕНС, ЭлЭлСи. Nanoparticle, containing rapamycin and albumin as anticancer agent

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT3351246T (en) 2001-02-19 2019-06-07 Novartis Pharma Ag Rapamycin derivative for the treatment of a solid tumor associated with deregulated angiogenesis
UA83484C2 (en) * 2003-03-05 2008-07-25 Уайт Method for treating breast cancer using combination of rapamycin derivative and aromatase inhibitor, pharmaceutical composition
AR046194A1 (en) 2003-11-04 2005-11-30 Mayo Foundation TREATMENT METHOD OF MANTO CELL LYMPHOMA
DE602006021142D1 (en) 2005-02-03 2011-05-19 Gen Hospital Corp METHOD FOR THE TREATMENT OF GEFITINIB-RESISTANT CANCER
CN103110948A (en) 2005-11-04 2013-05-22 惠氏公司 Antineoplastic combinations with mTOR inhibitor,herceptin, and/or HKI-272
CA2629245C (en) 2005-11-21 2016-07-12 Novartis Ag Neuroendocrine tumor treatment
GB0523658D0 (en) * 2005-11-21 2005-12-28 Novartis Ag Organic compounds
US20090023768A1 (en) * 2006-02-24 2009-01-22 Novartis Ag Rapamycin derivatives for treating neuroblastoma
CN101415409B (en) 2006-04-05 2012-12-05 诺瓦提斯公司 Combinations of therapeutic agents for treating cancer
US8022216B2 (en) 2007-10-17 2011-09-20 Wyeth Llc Maleate salts of (E)-N-{4-[3-chloro-4-(2-pyridinylmethoxy)anilino]-3-cyano-7-ethoxy-6-quinolinyl}-4-(dimethylamino)-2-butenamide and crystalline forms thereof
DK2656844T3 (en) 2008-06-17 2015-03-02 Wyeth Llc ANTINEOPLASTIC COMBINATIONS CONTAINING HKI-272 AND VINORELBINE
CN105963313A (en) 2008-08-04 2016-09-28 惠氏有限责任公司 Antineoplastic combinations of 4-anilino-3-cyanoquinolines and capecitabine
AU2010234968B2 (en) 2009-04-06 2015-05-14 Wyeth Llc Treatment regimen utilizing neratinib for breast cancer
CN103721189A (en) * 2013-12-27 2014-04-16 刘玉含 Meningeoma nursing medicine and preparation method thereof
CN105168204A (en) * 2015-09-06 2015-12-23 江志鑫 Pharmaceutical composition containing mitomycin and capable of resisting colon cancer

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4401653A (en) * 1981-03-09 1983-08-30 Ayerst, Mckenna & Harrison Inc. Combination of rapamycin and picibanil for the treatment of tumors
US5066493A (en) * 1978-11-03 1991-11-19 American Home Products Corporation Rapamycin in treatment of tumors
EP0525960A1 (en) * 1991-06-18 1993-02-03 American Home Products Corporation Use of rapamycin for the treatment of adult T-cell leukemia/lymphoma
WO2002040000A2 (en) * 2000-11-15 2002-05-23 Wyeth Use of cci-779 as an antineoplastic agent
WO2002066019A2 (en) * 2001-02-19 2002-08-29 Novartis Ag Cancer treatment

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5066493A (en) * 1978-11-03 1991-11-19 American Home Products Corporation Rapamycin in treatment of tumors
US4401653A (en) * 1981-03-09 1983-08-30 Ayerst, Mckenna & Harrison Inc. Combination of rapamycin and picibanil for the treatment of tumors
EP0525960A1 (en) * 1991-06-18 1993-02-03 American Home Products Corporation Use of rapamycin for the treatment of adult T-cell leukemia/lymphoma
WO2002040000A2 (en) * 2000-11-15 2002-05-23 Wyeth Use of cci-779 as an antineoplastic agent
WO2002066019A2 (en) * 2001-02-19 2002-08-29 Novartis Ag Cancer treatment

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BONI J. ET AL.: "PHARMACOKINETICS OF ESCALATING DOSES OF CCI-779 IN COMBINATION WITH 5-FLUOROURACIL AND LEUCOVORIN IN PATIENTS WITH ADVANCED SOLID TUMORS", EUROPEAN JOURNAL OF CANCER, PERGAMON PRESS, OXFORD, GB, VOL. 37, NR. SUPPL 6, PAGE(S) S68, XP001084492, ISSN: 0959-8049, abstract *
GEOERGER B. ET AL.: "ANTITUMOR ACTIVITY OF THE RAPAMYCIN ANALOG CCI-779 IN HUMAN PRIMITIVE NEUROECTODERMAL TUMOR/MEDULLOBLASTOMA MODELS AS SINGLE AGENT AND IN COMBINATION CHEMOTHERAPY" CANCER RESEARCH, AMERICAN ASSOCIATION FOR CANCER RESEARCH, BALTIMORE, MD, US, vol. 4, no. 61, 15 February 2001 (2001-02-15), pages 1527-1532, XP001079526, ISSN: 0008-5472, page 1528, right-hand column, line 30-45, discussion, page 1529, right-hand column, line 15-22; figures 1,6; table 1 *
SHI Y. ET AL.: "Rapamycin enhances apoptosis and increases sensitivity to cisplatin in vitro." CANCER RESEARCH, (1995 MAY 1) 55 (9) 1982-8, vol. 55, no. 9,-1995 pages 1982-8, XP002040888, page 1982, right-hand column, line 31-40, discussion, page 1985, left-hand column, line 30-page 1987, left-hand column, line 19; figure 7 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2678448C2 (en) * 2007-03-07 2019-01-29 АБРАКСИС БАЙОСАЙЕНС, ЭлЭлСи. Nanoparticle, containing rapamycin and albumin as anticancer agent

Also Published As

Publication number Publication date
MXPA03010907A (en) 2004-02-17
BR0210101A (en) 2004-06-08
WO2002098416A3 (en) 2003-03-13
NO20035317D0 (en) 2003-11-28
NO20035317L (en) 2003-12-22
CN1646120A (en) 2005-07-27
CO5540294A2 (en) 2005-07-29
AU2008202690A1 (en) 2008-07-10
HUP0400006A2 (en) 2004-04-28
IL158800A0 (en) 2004-05-12
AU2002259309B2 (en) 2008-05-01
CN100496485C (en) 2009-06-10
JP2004532883A (en) 2004-10-28
CA2447732A1 (en) 2002-12-12
KR20040025923A (en) 2004-03-26
WO2002098416A2 (en) 2002-12-12
SG153647A1 (en) 2009-07-29
EP1392286A2 (en) 2004-03-03
EA200301319A1 (en) 2004-04-29
PL367267A1 (en) 2005-02-21
KR100875611B1 (en) 2008-12-24
NZ529877A (en) 2006-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2767664C2 (en) Combination therapy with anticancer alkaloid
UA78706C2 (en) Combination of rapamycin derivative and antitumor alkylating agent and method for treating soft tissue sarcoma and colonic cancer
KR100862178B1 (en) Antineoplastic combinations such as rapamycin together with gemcitabine or fluorouracil
US20060030547A1 (en) Antineoplastic combinations
TWI286074B (en) Pharmaceutical composition containing CCI-779 as an antineoplastic agent
JP5709354B2 (en) Treatment of cancer patients with mTOR inhibitors
RU2429838C2 (en) Combined chemotherapy
AU2008202690A1 (en) Antineoplastic combination
EA006226B1 (en) Antineoplastic combinations
UA78509C2 (en) Method for treating neoplasms and antitumor combination containing 42-membered ester of rapamicine with 3-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-2-methylpropionic acid (cci-779) and gemsitabine or fluorouracil
TW200803842A (en) Antineoplastic combinations of temsirolimus and sunitinib malate
US20050187184A1 (en) Antineoplastic combinations
AU2002259309A1 (en) Antineoplastic combinations
US20080207644A1 (en) Therapeutic materials and methods
CA2672716C (en) Novel therapeutic use for treating leukaemia
EP4284378A1 (en) Ptentreating cancer in patient with pten inactivating mutation

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU