EA001458B1 - Биопрепарат, преимущественно для очистки нефтеналивных ёмкостей, оборудования и водопочвенных экосистем от нефтезагрязнений - Google Patents

Биопрепарат, преимущественно для очистки нефтеналивных ёмкостей, оборудования и водопочвенных экосистем от нефтезагрязнений Download PDF

Info

Publication number
EA001458B1
EA001458B1 EA199900070A EA199900070A EA001458B1 EA 001458 B1 EA001458 B1 EA 001458B1 EA 199900070 A EA199900070 A EA 199900070A EA 199900070 A EA199900070 A EA 199900070A EA 001458 B1 EA001458 B1 EA 001458B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
oil
water
soil
cleaning
biological product
Prior art date
Application number
EA199900070A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199900070A1 (ru
Inventor
Пётр Александрович Кузнецов
Пенкер Бабаевна Авчиева
Original Assignee
Кузнецов, Петр Александрович
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Кузнецов, Петр Александрович filed Critical Кузнецов, Петр Александрович
Publication of EA199900070A1 publication Critical patent/EA199900070A1/ru
Publication of EA001458B1 publication Critical patent/EA001458B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/165—Yeast isolates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
    • B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C02F3/344—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used for digestion of mineral oil
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C2101/00—In situ
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/30—Organic compounds
    • C02F2101/32—Hydrocarbons, e.g. oil
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/72—Candida

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Processing Of Solid Wastes (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии и экологии и касается биопрепарата для очистки воды, почвы и др. объектов от нефтезагрязнений. Процесс очистки ведется с помощью биопрепарата, включающего консорциум дрожжей Candida maltosa штаммов ВКПМ У-2256 и У-2257. Соотношение указанных штаммов в консорциуме может быть любым, предпочтительно 1:1. Биопрепарат может быть применен для очистки от загрязнений, образованных самыми разнообразными углеводородами, содержащимися в нефти и нефтепродуктах, например мазуте, маслах и т.п. Биопрепарат обеспечивает утилизацию нефтезагрязнений при температуре до +41°С и при рН 3,0-9,0, может работать в засоленных экосистемах. Для получения биопрепарата в порошковой форме последняя подвергается осушке. При очистке указанных объектов от нефтезагрязнений используется водная суспензия биопрепарата с азотно-фосфатной добавкой.

Description

Изобретение относится к областям биотехнологий, в частности микробиологии и экологии, и касается создания нового биопрепарата на основе консорциума штаммов дрожжей СапФба таНока № ВКПМ У-2256 и СапбИа таИока № ВКПМ У-2257 для очистки почвы, воды, оборудования и других объектов от широкого диапазона нефтепродуктов и непосредственно нефти, а также использования получаемого биопрепарата для эффективной очистки указанных объектов от нефтезагрязнений.
Предшествующий уровень техники
Постоянно возрастающие объемы добычи, транспортировки, переработки и использования нефти приводят к повсеместному загрязнению акватории и почв нефтью и нефтепродуктами. Несмотря на применяемые меры предосторожности на нефтедобывающих и нефтеперерабатывающих предприятиях, линиях трубопроводов, нефтяных танкерах периодически случаются аварии, результатом которых являются чрезвычайно опасные для окружающей среды проливы нефти и выбросы нефтепродуктов. Известно, что в природе существует эффективная система переработки нефтяных загрязнений с помощью утилизирующих углеводороды микроорганизмов. Однако природная микрофлора уже не в состоянии полностью переработать десятки миллионов тонн нефти, ежегодно попадающих в окружающую среду. В результате человечество оказалось перед реальной угрозой экологической катастрофы (см. Ь.В. Вго\\п С11С1шеа1 Епдшеетшд Ргодгекк, 1987, νοΐ.83, № 10, р. 35-40 Ой-бедтабшд тктоотдашктк).
Такие традиционные методы очистки, как механические, химические и физические не обеспечивают требуемого уровня очистки воды и почвы от нефтяных загрязнений. Кроме того, во многих случаях применение этих методов наносит более значительный урон окружающей среде, чем сами нефтяные проливы.
В этой связи в последнее время все чаще применяются биологические методы очистки от нефтезагрязнений, в том числе с использованием нефтеокисляющих микроорганизмов. Анализ развития биотехнологий, относящихся к очистке от нефтезагрязнений водопочвенных экосистем и оборудования, позволяет сделать вывод об экологичности процессов, основанных на биодеструкции нефтепродуктов под воздействием микроорганизмов. В соответствии с известными биотехнологиями воздействие на загрязненную среду может осуществляться с помощью биопрепаратов, включающих микроорганизмы как в виде монокультуры, так и содержащих консорциумы микроорганизмов - совокупность или ассоциацию двух и более организмов. Однако необходимо отметить, что с точки зрения достижения более полного использования функциональных биотехнологических возможностей микроорганизмов - биодест рукторов нефти, применение чистых монокультур микроорганизмов и биопрепаратов на их основе менее предпочтительно, чем применение смесей или ассоциаций микроорганизмов, которые в силу их специфики обладают способностью утилизировать более широкий диапазон неоднородных по составу субстратов (промышленных сточных вод, почвенных загрязнений и т.п.) и обеспечивают деградацию органических соединений за счет комбинированного воздействия несколькими видами микроорганизмов. Тем самым достигается более высокая экологичность биотехнологического обеззараживания и очистки объектов, причем биотехнологическое обеззараживание и очистка объектов ведется, как правило, за меньшее время.
Известные биопрепараты для очистки от нефтезагрязнений, как правило, характеризуются либо относительно низкой эффективностью в силу избирательной способности использованных в биопрепарате монокультур, либо сложностью производства биопрепарата, что связано с процессом адаптации микроорганизмов к совместному существованию при использовании в биопрепарате консорциумов микроорганизмов.
Так, известен штамм микроорганизмов КЬобососсик кр. НХ7, обладающий нефтеокисляющими свойствами, используемый при очистке воды и почвы от нефтезагрязнений. При обработке загрязнений этими бактериями обычно вносится доза 1 г клеточной биомассы на 1 м2 обрабатываемой поверхности или суспензия биопрепарата на основе указанных бактерий, содержащая 1·107-1·108 клеток в 1 мл (1·107-1·108 кл/мл), при этом расход суспензии составляет 1л на 1 м2 (1 л/м2) загрязненной площади.
Однако отмеченный процесс очистки объектов от нефтезагрязнений является недостаточно эффективным, поскольку используется монокультура бактерий, что ограничивает круг очищаемых углеводородов. Кроме того, способ выращивания данной культуры является продолжительным и составляет несколько суток (см. патент ВИ № 2039714, кл. С 02Р 3/34, 1995).
Известен природный штамм Ркеиботопак рийба-36 и его использование для очистки почвы от нефтяных загрязнений (см. патент и8 № 4822490, кл. С 02Р 3/34, 1989). В известном способе очистки бактериальную культуру вносят в нефтяное загрязнение в виде биопрепарата, включающего указанный штамм совместно с минеральным удобрением, содержащим азот в нитратной форме. Количество вносимой культуры составляет не менее 1· 104 кл/мг. При этом расход водной смеси 0,5-1,0 л на 1 м2.
Однако очистка, достигаемая при использовании указанного штамма бактерий, также недостаточно высока. Кроме того, его использование имеет ограниченное применение. Это свя3 зано с тем, что штамм, выращенный на стандартном углеводном субстрате, с трудом приспосабливается к новым условиям, что приводит к необходимости использовать новые субстраты из почвы. Также указанный штамм Ркеиботопак рийба-36 обладает гемолитической и желатиназной активностью, что препятствует развитию процесса самоочищения с помощью микроорганизмов. Кроме того, применение нитратных форм азота при внесении бактериальной культуры в почву приводит к дополнительному загрязнению среды токсичными нитрат-ионами.
Известен консорциум микроорганизмов Вйобососсик кр. Вктас-1500И, Вйобососсик тапк ВКМ ЛС-150Ш, Вйобососсик сгуШгоройк ВКМ ЛС-1502И, Ркеиботопак к1и1хеп ВКМ В1972Ό, Сапб1ба кр. ВКМ-У-2778Э и получаемый с его содержанием биопрепарат для очистки воды и почвы от загрязнения нефтью и нефтепродуктами.
Однако известные консорциум и биопрепарат обладают недостаточной эффективностью в очистке от нефтезагрязнений и, кроме того, характеризуются сложным процессом получения в связи с большим количеством входящих в состав консорциума различных микроорганизмов. Использование биопрепарата с указанным консорциумом для очистки от нефтезагрязнений в промышленных условиях затруднено, так как пять входящих в консорциум штаммов микроорганизмов сильно различаются по своим физиологическим особенностям и имеют различные характеристики роста.
Известен также биопрепарат, полученный на основе указанного консорциума, включающий подготовку раствора жидкой питательной среды, содержащей источники азота, фосфора, микроэлементы и жидкие парафины в качестве источника углерода, а также культивирование, например, в ферментере засевной среды, в качестве которой использован вышеуказанный консорциум микроорганизмов, при температуре 28°С и поддержании рН среды 6,5-7,0. Причем процесс культивирования ведется в аэробных условиях, например при барбатировании среды воздушным потоком. Далее культивируемая биомасса концентрируется методом сепарации и обезвоживается с помощью лиофильной или термовакуумной сушки до влажности 10%. Полученный таким образом биопрепарат содержит 4·1011-4·1012 живых клеток в 1 г и включает как липофильные, так и галофильные микроорганизмы. Этот биопрепарат обладает способностью окислять нефтепродукты как в зоне контакта с водой, так и непосредственно в нефтяной пленке и способен удалять нефтезагрязнения не только в пресной, но и засоленной экосистеме.
Применение получаемого вышеописанным методом биопрепарата заключается в использовании приготовленной на его основе водной суспензии для орошения ею водопочвенной среды или поверхностей оборудования, загрязненных нефтью и/или нефтепродуктами. При этом вначале готовится базовая суспензия биопрепарата, которая представляет собой концентрированный водный раствор биопрепарата с азотно-фосфатной добавкой. Для приготовления этой суспензии используется вода с температурой от +15 до +30°С. Полученный таким образом состав выдерживают в течение 1 2 ч при перемешивании и аэрации, после чего базовая суспензия готова. Для приготовления рабочей суспензии в базовую дополнительно вводится азотно-фосфатная добавка и ведется разбавление ее водой до необходимой концентрации в зависимости от вида очищаемого объекта и степени его загрязнения нефтью и/или нефтепродуктами (см. заявку РСТ/ВИ 94/00103, кл. С 02Р 3/34, 1995).
Раскрытие изобретений
В связи с вышеизложенным задачей изобретения явилось создание новых консорциума микроорганизмов и биопрепарата на его основе, которые обладали бы улучшенными свойствами: наряду с активной работой по биодеградации нефти, в частности непосредственно в нефтяной пленке, и нефтепродуктов обладали бы более коротким циклом развития составляющих микроорганизмов и обеспечивали бы биоразложение широкого диапазона составляющих нефтепродукты углеводородов в условиях повышенных температур и большом диапазоне засоленности очищаемой среды.
Предлагаемый биопрепарат является биодеструктором нефтяных загрязнений. Он включает в себя новый консорциум, в состав которого входят штаммы дрожжей Сапб1ба та Пока ВКПМ У-2256 и ВКПМ У-2257. Штаммы Сапб1ба таНока ВКПМ У-2256 и ВКПМ У-2257 селектированы из аналогов, выделенных из пропитанной нефтью почвы. Они обладают следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками.
Штамм СашПба шаОоха ВКПМ У-2256
Культурально-морфологические признаки.
На сусло-агаре: клетки овальные и коротко овальные. Размеры клеток: 3,0-7,5 х 2,5-6,3 мк, хорошо почкуются. В двухсуточной культуре на солодовом сусле образует островки легкой матовой пленки, белый плотный осадок. Солодовый агар: колонии крупные, диаметр до 0,7 см, белого цвета, блестящие с желтоватым оттенком в средней части колонии. Поверхность колонии гладкая с намечающимся рисунком, край колонии бахромчатый или ровный.
Физиолого-биохимические признаки.
Хорошо сбраживает глюкозу, сахарозу, мальтозу, галактозу, ксилозу; несколько хуже арабинозу; не ассимилирует лактозу. Хорошо ассимилирует аммонийную форму азота, азотнокислый калий не ассимилирует. Растет при +5 - +41°С и рН 3,0-9,0. Оптимум роста при +30 - +34°С и рН 3,8-5,5.
Штамм Сап(|ц1а таИоха ВКПМ У-2257
Культурально-морфологические признаки.
Клетки овальные и округло-овальные, одиночные, а также в виде небольших цепочек (из трех-четырех клеток). Размеры клеток: 3,07,8 х 5,2-3,0 мк. Аскоспоры не образует. Среда сусло-агар: колонии круглые, гладкие, кремовые с гладкой поверхностью и ровным краем. Центр колонии возвышен и слегка наплывает на край. В солодовом сусле, образует пленку, кольца не образует. Осадок - плотный, светлый.
Физиолого-биохимические признаки.
Аэробные свойства. Хорошо сбраживает глюкозу, сахарозу, галактозу, трегалозу; медленно - мальтозу; не сбраживает - лактозу и раффинозу. Ассимилирует глюкозу, сахарозу, мальтозу, галактозу, ксилозу, трегалозу, глицерин, адонит, сорбит, маннит. Не ассимилирует лактозу, раффинозу, рибозу, эритрит, инозит, растворимый крахмал. Хорошо усваивает аммонийную форму азота. Не усваивает азотнокислый калий. Растет при +5 - +41°С и рН 3,0-9,0. Оптимум роста при +30 - +41°С и рН 3,5-5,5. Штаммы хранят при +18 - +20°С на сусло-агаре.
Для получения нового биопрепарата, включающего консорциум штаммов дрожжей Сапб1ба таИока ВКПМ У-2256 и Сапб1ба та11о5а ВКПМ У-2257, указанные штаммы культивируют непрерывным способом (при соотношении, например, 1 : 1 ) в условиях аэрации на природных или искусственных смесях углеводородов, например, нефтяных дистиллятах, при соотношении между изопарафинами и нпарафинами от 0,2:1 до 2:1 в водноминеральной питательной среде, содержащей источники азота, фосфора, калия и магния при +30 - +41°С и рН 3,0-4,0, коэффициенте разбавления среды Д=0,2 ч-1. Время выращивания 5 ч. Для удобства хранения и транспортирования полученную суспензию дрожжей собирают и сгущают путем декантации водной фазы, затем отделяют биомассу сепарацией и сушат до влажности не более 12%. Как видно из вышеприведенного, процесс получения нового биопрепарата является достаточно простым.
Так, например, для получения нового биопрепарата штаммы дрожжей Сапб1ба таИока ВКПМ У-2256 и Сапб1ба таИока ВКПМ У-2257 смешивают. Количественное соотношение между индивидуальными штаммами может быть различным. Однако учитывая, что параметры роста штаммов Сапб1ба таИока ВКПМ У-2256 и Сапб1ба таИока ВКПМ У-2257 почти одинаковы и выращивание их проводится одновременно в одной емкости, предпочтительное соотношение указанных штаммов в консорциуме и биопрепарате на его основе составляет 1 : 1 . Смесь штаммов культивируют, например, в ферментере, в жидкой питательной среде, которая представляет собой водный раствор, включающий следующие минеральные компоненты в составе, приведенном на 1 л получаемой водной суспен зии:
Н3РО4 2,0-3,5 мл
КС1 0,8-1,5 г (или К28О4 1-2 г) Мд8О4 0,5-1,0 г
Ре8О4-7Н2О 0,1-0,2 г
7п8О4-7Н2О 0,015-0,03 г
Мп8О4-7Н2О 0,01-0,02 г азотосодержащую добавку из расчета поддержания азота в пределах 300-800 мг на 1 л получаемой суспензии.
Культивирование указанных штаммов осуществляют на растворе приведенных компонентов при температуре +30 - +41°С. Процесс культивирования ведется при перемешивании и аэрации суспензии с поддержанием рН среды в ферментере на уровне 3,0-4,0. Поддержание заданного уровня рН ведется титрованием среды щелочью или кислотой в зависимости от исходного уровня рН. При этом в качестве тит рующих щелочи и кислоты предпочтительно использовать, соответственно, ЫН4ОН и Н28О4. Процесс культивирования может проводиться как в отъемно-доливном, так и непрерывном режимах, при которых ведется отвод нарощенной биомассы. Отведенная из ферментера био масса подвергается осушке до влажности не более 12% с обеспечением содержания 1-1061· 108 живых клеток в 1 г осушенной биомассы. Процесс осушки ведется предварительно нагретым до +105 - +125°С воздухом.
Полученный таким образом биопрепарат представляет собой порошок светло-желтого цвета и обладает:
- высокой нефтеокисляющей активностью,
- устойчивостью к химическим загрязне ниям,
- устойчивостью к резким колебаниям рН и температуры среды, способностью активно работать в интервале температур от +5 до +41°С и при рН 3,0-9,0,
- адаптированностью к засоленным условиям среды (до 15% ЫаС1),
- отсутствием токсичности и патогенности (подтверждено заключением НИИ Медицины труда РАМН).
Возможно получение и применение биопрепарата в жидкой форме. При этом к нарощенной биомассе следует добавлять консервирующие и стабилизирующие компоненты, обеспечивающие длительное хранение биопрепарата перед его использованием. Полученный биопрепарат может работать как на поверхности нефтяной пленки, так и непосредственно в толще нефтяного слоя. Он может применяться для очистки почвы от нефтяных загрязнений, как путем распыления, так и закачки в подпочвенный слой. При проникновении нефти в почву на глубину до 20 мм, расход препарата составляет 0,2-0,3 г/м2. Как показали испытания, проведенные НИИ Медицины труда РАМН, в течение 1 0 суток, после внесения биопрепарата в загрязненную почву, содержание нефти в ней уменьшилось на 30%, а при применении его для очистки поверхности воды нефтяная пленка на ней исчезла на 90%, что подтверждено лабораторными испытаниями.
Пример 1.
Для испытания полученного биопрепарата по методике НИИ Медицины труда РАМН использовалась подзолистая почва, освобожденная от посторонних включений. Нагрузка нефтью составляла 40 г/кг. В лотки 0,033 м2, высотой 10 см вносили по 8 кг почвы, обработанной профильтрованной хозяйственно-фекальной сточной водой из расчета 2 мг/кг. Использовалось 4 лотка: № 1 - почва без нефти и препарата, № 2 - почва с препаратом, но без нефти, № 3 почва с нефтью, но без препарата, № 4 - почва с нефтью и препаратом. Загрязнение почвы нефтью осуществлялось за 5 суток до внесения в нее препарата. Препарат вводился в почву в виде суспензии. При этом вначале готовилась базовая суспензия. Для чего в емкость объемом 1 00 мл вносили 1 г полученного в виде сухого порошка биопрепарата, 250 мг диаммофоса (азотно-фосфатного удобрения) и 50 мл теплой воды с температурой +15-+30°С. Указанные компоненты тщательно перемешивали. После чего доводили объем полученной суспензии до 1 00 мл, добавляя в нее воду. Полученную суспензию тщательно перемешивали и аэрировали в течение 1 2 ч. Непосредственно перед обработкой почвы в приготовленную базовую суспензию дополнительно вносили 3 г диаммофоса, после чего разводили ее водой в соотношении 1 :1 00 и перемешивали. Полученным рабочим составом обрабатывали лотки № 2 и № 4 с почвой. Обработка велась из расчета 10 л рабочего состава на 1 м2 поверхности (при комнатной температуре). Наблюдение вели в течение 20 дней, после чего определяли содержание нефти в почве весовым методом с экстракцией ее из почвы хлороформом и последующим хроматографическим выделением. Санитарнохимические показатели: азот аммония, нитриты, нитраты, фосфаты, перманганатная окисляемость, растворенный кислород, БПК, водородный показатель - определялись общепринятыми методами (см. Новиков Ю.В. и др. Методы исследования качества воды в водоемах, М., Медизд., 1990). Результаты исследований по деградации нефти в почве сведены в табл. 1 . Как видно из табл. 1 , в лотке № 3 с почвой, загрязненной нефтью, за счет естественных процессов самоочищения содержание нефтепродуктов, растворимых в хлороформе, снизилось за 1 0 суток с 38,6 г/кг до 37,2 г/кг, т.е. на 2,9%. В лотке № 4, где загрязненная нефтью почва обрабатывалась приготовленным составом, за 1 0 суток содержание нефти, экстрагируемой в хлороформе, уменьшилось с 40,8 г/кг до 28,2 г/кг, т.е. на 30,8%. Концентрация азота аммонийного во всех четырех лотках снижалась к десятому дню, но максимальная интенсивность процесса зарегистрирована в лотках № 2 и № 4, т.е. там, куда вводился препарат. В эти же сроки наблюдался процесс нитрафикации. Максимальное увеличение содержания нитратов также имело место в лотках № 2 и № 4, куда был введен препарат. Что касается процесса фосфорилирования, то наиболее активно он протекал в лотке № 4 (снижение фосфора относительно фона - 6,7%, в то время как в других лотках указанный показатель колебался в пределах 22-49%). Обработка загрязненной нефтью почвы препаратом положительно отразилась на сапрофитной микрофлоре. Так, общее микробное число (ОМЧ) при +22 и +37°С в почве лотка № 4 было выше контрольного уровня (лоток № 1 ), в то время как в лотке, где почва с нефтью не подвергалась воздействию препарата, эти показатели были на порядок ниже, чем в контрольном лотке № 1 на всем протяжении эксперимента. Отсутствие токсического действия предлагаемого препарата подтверждается и результатами дегидрогеназного теста (см. табл. 1 ).
Пример 2.
При оценке эффективности очистки воды в качестве экспериментальных моделей использовались 1 0 литровые стеклянные емкости, заполненные речной водой из реки Яуза. Опыты проводились на 4 моделях: № 1 - речная вода без нефти и препарата, № 2 - речная вода без нефти с препаратом, № 3 - речная вода с нефтью без препарата, № 4 - речная вода с нефтью и препаратом. Водная поверхность в каждой емкости составляла 201 см2. Нагрузка нефтепродуктов на водоемы создавалась из расчета 5 г/л. Для оценки деградации нефтяной пленки использовались малые водоемы емкостью 1 0 л, в которые вносилось 5 г нефти на 1 л речной воды. Обработка препаратом осуществлялась через двое суток после внесения в модели нефти. При обработке моделей № 2 и № 4 использовали рабочий состав. Для приготовления рабочего состава базовая суспензия препарата, приготовленная в соответствии с примером 1 , была разбавлена в 1 0 раз. Доза рабочего состава при обработке 1 м2 поверхности составляла 1 л. Титр микроорганизмов в рабочем составе составлял 1Т08 кл/г. Наблюдение за качеством воды в экспериментальных моделях выявили высокую эффективность консорциума при очистке от нефти. Так, к десятому дню нефтяная пленка в модели № 4 (вода с нефтью и препаратом) исчезла на 90% относительно исходной величины, в то время как в модели № 3 (вода с нефтью без препарата) нефтяная пленка уменьшилась не более, чем на 1 0%. Уровень пленочных нефтепродуктов, растворенных в хлороформе, за рассматриваемый период снизился с 4,8 до 1,7 г. Данные проведенных наблюдений и анализов сведены в табл. 2. Концентрация нефтепродуктов в водном слое, растворенном в гексане, в модели № 4 снизи лась с 7 до 5 мг/л. В то же время в воде модели № 3 (вода с нефтью без препарата) содержание пленочной нефти снизилось с 4,9 до 4,5 г, при этом в водном слое зафиксировано увеличение содержания нефти с 6 до 6,7 мг/л. Процессы нитрафикации и фосфорилирования замедляются только в модели № 3, где снижение загрязнения нефтью на протяжении срока эксперимента незначительно. Снижение перманганатной окисляемости (ПО), а также содержания растворенного кислорода (см. табл. 2) свидетельствует о протекании деструктивных процессов нефти под действием внесенного препарата. Низкое содержание кислорода в водоемах моделей № 2 и № 4 и уровень БПК коррелирует с количеством сапрофитной микрофлоры. Таким образом, данные табл. 2 отражают выраженную деструкцию нефти в присутствии консорциума.
Аналогично вышеизложенному примеру 2 проводились эксперименты по очистке водной среды с повышенным солесодержанием. Параметры процесса: температура очищаемой среды +32°С, рН 5,0. Начальная величина содержания углеводородов в среде 50 г/л. Результаты биодеградации углеводородов нефти под воздействием предлагаемого препарата в засоленных средах приведены в табл. 3.
Как показали проведенные эксперименты, предлагаемый биопрепарат обеспечивает эффективную биодеградацию нефтезагрязнений в почве и воде. По данным гигиенической экспертизы НИИ Медицины труда РАМН ограничений для опытно-промышленного применения предлагаемого биопрепарата не выявлено.
Таблица 1
Результаты экспериментальных исследований на почвенных моделях
Дата Время внесения /сутки/ Лоток /почва/
№ 1 № 2 № 3 № 4
нефти препарата без нефти и препарата без нефти с препаратом с нефтью без препарата с нефтью и препаратом
Азот аммония, мг/л
10.11.96 5 1 34,7 339 14,4 800
20.11.96 15 10 12,2 19,65 6,21 58,5
Азот нитритов, мг/л
10.11.96 5 1 1,58 1,65 0,69 1,6
20.11.96 15 10 0,88 0,98 0,58 0,3
Азот нитратов, мг/л
10.11.96 5 1 0,4 0 0 0
20.11.96 15 10 6,5 209,6 2,76 198
Фосфор, мг/л
10.11.96 5 1 0,75 1,92 0,92 4,32
20.11.96 15 10 0,38 1,32 0,72 1,4
% сниж. 49 31 21 67
Снижение нефтепродуктов, растворимых в хлороформе, г/кг
10.11.96 5 1 38,6 40,8
20.11.96 15 10 37,2 28,2
% сниж. 2,9 30,8
ОМЧ при 28°С, кл/г
10.11.96 5 1 2,4-105 3,8-106 1,5-104 1,7-104
20.11.96 15 10 3,2-105 1,6-106 1,6-104 1,1-104
ОМЧ при 37°С, кл/г
10.11.96 5 1 3,4-105 2,5-106 1,5-104 2,3- 104
20.11.96 15 10 4,0-105 1,4-106 1,6-104 8,9-104
Дегидрогеназная активность Εηΐ. сой , в мин (водная вытяжка)
10.11.96 5 1 48-58 54-60 98-106 100-109
20.11.96 15 10 54-66 56-62 100-110 64-68
Таблица 2
Результаты экспериментальных исследований на водных моделях
Дата Время внесения /сутки/ Модели
№ 1 № 2 № 3 № 4
нефти препарата Контроль: вода без нефти и препарата вода с препаратом без нефти вода с нефтью без препарата вода с нефтью и препаратом
Растворенный кислород, мг/л
15.11.96 3 1 7,6 2,9 3,2 1,4
20.11.96 8 5 7,4 1,4 3,4 0,98
25.11.96 13 10 7,4 0,98 3,2 1,2
30.11.96 18 15 7,2 1,6 4,6 2,3
02.12.96 21 18 7,4 2,7 4,8 4,1
Пятисуточное биохимическое потребление кислорода ( БПК, мг/л)
25.11.96 13 10 1,8 10,3 2,1 11,1
Перманганатная окисляемость (ПО, мг/л)
15.11.96 3 1 14,2 14,8 20,2 22,1
20.11.96 8 5 н/о н/о н/о н/о
25.11.96 13 10 12,6 14,0 18,6 10,6
30.11.96 18 15 11,2 13,1 12,4 11,0
Азот аммония, мг/л
15.11.96 3 1 0,22 Более 8 0,26 более 8
20.11.96 8 5 0,02 3,4 0,04 3,8
25.11.96 13 10 0,1 3,0 0,08 1,0
30.11.96 18 15 0,04 2,0 0,04 0,6
02.12.96 21 18 0,001 0,8 0,001 0,4
Азот нитритов, мг/л
15.11.96 3 1 0,004 0,06 0,004 0,06
20.11.96 8 5 0,15 0,1 0,06 0,01
25.11.96 13 10 0,003 0,004 0,001 0,04
30.11.96 18 15 0,004 0,004 0,003 0,1
02.12.96 21 18 менее 0,001 менее 0,001 менее 0,001 менее 0,001
Азот нитратов, мг/л
30.11.96 18 15 0,4 0,38 0,6 0,4
02.12.96 21 18 0,8 4,0 0,98 6,8
Фосфаты, мг/л
15.11.96 3 1 0,04 0,56 0,028 0,54
25.11.96 13 10 0,01 0,66 0,016 0,2
Величина водородного показателя, рН
15.11.96 3 1 7,7 7,5 7,3 7,5
25.11.96 13 10 7,8 7,7 7,4 7,4
30.11.96 18 15 7,8 7,4 7,4 7,7
Содержание нефтепродуктов в пленке (малые водоемы), г, (хлороформный экстракт)
15.11.96 3 1 4,9 4,8
25.11.96 13 10 4,5 1,7
% снижения 3,2 61
Содержание нефтепродуктов в водной фазе, мг/л (растворенные в гексане)
15.11.96 3 1 6,2 7,0
25.11.96 13 10 6,7 5,0
% снижения Увеличение 8 29
ОМЧ при 1 = 37°С
15.11.96 3 1 3,7-102 1,2-102 1,7-102 5,5-102
25.11.96 8 5 6,0-102 0 6,0-102 3,0-102
Дегидрогеназная активность Εηΐ. сой, в мин
15.11.96 3 1 40-42 48-50 58-64 56-60
25.11.96 8 5 46-48 40-46 49-58 48-54
Таблица 3
Биодеградация углеводородов предлагаемым биопрепаратом при различной степени засоленности среды
Концентрация №1С1. г/л Концентрация углеводородов, %
Продолжительность культивирования в сутках
1 2 3 4 5 6
10,0 3,5 1,3 0,5 0,1 - -
20,0 3,5 1,8 0,8 0,5 0,1 0,05
30,0 3,8 1,7 0,9 0,6 0,2 0,1
50,0 3,8 1,6 0,9 0,5 0,3 0,05
100,0 4,0 3,2 2,6 1,5 0,7 0,03
120,0 4,0 3,5 2,3 1,7 0,7 0,3
150,0 4,2 3,1 2,0 1,4 0,8 0,4
Промышленная применимость
Настоящее изобретение может быть эффективно использовано в промышленном масштабе для очистки от загрязнений нефтью и нефтепродуктами практически любых, в том числе и засоленных, почвенных и водных экосистем, а также оборудования нефтедобывающих и нефтеперерабатывающих предприятий. Изложенное подтверждается проведенными экспериментами.
Применение полученного биопрепарата для очистки водо-почвенных экосистем и оборудования от нефтезагрязнений ведется следующим образом.
Вначале готовится базовая суспензия биопрепарата, для чего к 50 л воды с температурой +15 - +30°С добавляют 1 кг биопрепарата и 0,25 кг диаммофоса (или эквивалентное количество другой азотно-фосфатной добавки) и тщательно перемешивают, после чего доводят объем суспензии до 1 00 л, добавляя в нее воду. Полученную смесь необходимо аэрировать при перемешивании в течение 1 2 ч, после чего в нее необходимо ввести дополнительно около 3 кг диаммофоса (или эквивалентное количество другой азотно-фосфатной добавки). В качестве иных азотно-фосфатных добавок возможно использование азотосодержащих солей (таких как: аммофос, натриевая селитра, мочевина, хлористый аммоний, водный раствор аммиака) и фосфоросодержащих солей (таких как: фосфорные соли щелочных металлов или жирных кислот, например пальмитиновой или стеариновой). Наиболее предпочтительным источником азота и фосфора является смесь диаммоний фосфата ((ΝΗ4)2ΗΡΟ4) и аммиачной селитры (ΝΗ4ΝΟ3) в соотношении соответственно (0,5-1,5):(10-20). Полученную таким образом базовую суспензию при обработке ею загрязненной почвы, воды, оборудования разводят водой в соотношениях, соответственно, 1 :1 00, 1 : 1 0, 1 :1 0. Полученная в результате тщательного перемешивания рабочая суспензия наносится на очищаемый объект, преимущественно методом дождевания.
Для очистки внутренних поверхностей оборудования, загрязненного нефтепродуктами, (например, емкостей) применяется рабочий состав, представляющий собой разбавленную в 1 0 раз базовую суспензию препарата, приготовленную в соответствии с примером 1. Очищаемую емкость заполняют рабочим составом до уровня или выше уровня загрязнения стенок емкости. Процесс очистки желательно вести совместно с другими общепринятыми мероприятиями по очистке емкостей, например, совместно с механической очисткой. В процессе очистки необходимо производить перемешивание рабочего состава и его аэрирование, что активизирует действие предлагаемого консорциума. При этом очистку указанных поверхностей желательно осуществлять при рН=4,5-7,0 и температурах +25 - +32°С.
Пример 3.
Проведенные на предприятии Воронежнефтепродукт промышленные испытания показали, что использование нового биопрепарата дает устойчивую положительную динамику в снижении степени загрязнения нефтепродуктами очищаемой среды. Испытания проводились на загрязненной нефтепродуктами водной акватории с поверхностью 2000 м2 и на шламонакопителе с загрязненной площадью 1500 м2. Приготовление базовой и рабочей суспензий проводилось в соответствии с методиками по примерам № 1 и № 2. Предварительно проводилось определение степени загрязнения очищаемых объектов. В зависимости от вида очищаемого объекта, площади загрязненной поверхности и исходной степени загрязнения использовалось различное количество рабочей суспензии. Выбор количества рабочей суспензии проводился из расчета 1 -3 кг биопрепарата на 1 т чистой нефти. В процессе испытаний проводился отбор проб, результаты анализа которых сведены в табл. 4 и проиллюстрированы приведенными графиками. На фиг. 1 проиллюстрирована динамика очистки шламонакопителя, а на фиг. 2 динамика очистки акватории. Анализ проб проводился хроматографическим методом.
Таблица 4
Наименование очищаемого объекта Исходная степень загрязнения, г/л Степень загрязнения в г/л по анализу проб
Акватория 0,031 0,0056 0,004
Шламонакопитель 681,1 341,6 183,6
Примечание к табл. 4. Проба для определения исходной степени загрязнения объекта проводилась 02.07.97 г. В этот же день осуществлялась обработка загрязненного объекта биопрепаратом. Последующие отборы проб проводились соответственно 29.08.97 г. и 30.10.97 г.

Claims (2)

1. Биопрепарат преимущественно для очистки нефтеналивных емкостей, оборудования и водопочвенных экосистем от нефтезагрязнений, включающий активный биокомпонент и минеральную добавку, отличающийся тем, что в качестве биокомпонента он содержит консорциум штаммов дрожжей СапТИа таНоза № ВКПМ У-
Фиг. 1. Динамика очистки шламонакопителя
2256 и СапТИа таНоза № ВКПМ У-2257, причём количество живых клеток консорциума в биопрепарате составляет 1 106 - 1 108 на 1 г преперата.
2. Биопрепарат по п. 1 , отличающийся тем, что соотношение указанных штаммов составляет 1:1.
Фиг. 2. Динамика очистки акватории
EA199900070A 1997-06-05 1998-02-02 Биопрепарат, преимущественно для очистки нефтеналивных ёмкостей, оборудования и водопочвенных экосистем от нефтезагрязнений EA001458B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU97109191A RU2114174C1 (ru) 1997-06-05 1997-06-05 Консорциум дрожжей candida maltosa для биодеградации нефтезагрязнений
PCT/RU1998/000029 WO1998055409A1 (fr) 1997-06-05 1998-02-02 Consortium de levures candida maltosa assurant la biodegradation de contaminants petroliers, preparation biologique a base dudit consortium et procede de sa fabrication et de son utilisation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199900070A1 EA199900070A1 (ru) 1999-12-29
EA001458B1 true EA001458B1 (ru) 2001-04-23

Family

ID=20193678

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199900070A EA001458B1 (ru) 1997-06-05 1998-02-02 Биопрепарат, преимущественно для очистки нефтеналивных ёмкостей, оборудования и водопочвенных экосистем от нефтезагрязнений

Country Status (6)

Country Link
US (1) US6444204B1 (ru)
AU (1) AU6126698A (ru)
CA (1) CA2263088A1 (ru)
EA (1) EA001458B1 (ru)
RU (1) RU2114174C1 (ru)
WO (1) WO1998055409A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2543897C1 (ru) * 2014-02-12 2015-03-10 Открытое акционерное общество "Газпром" Способ биологического обезвреживания жидких углеводородсодержащих отходов

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9079786B2 (en) * 2006-06-20 2015-07-14 Johannes van Leeuwen Purification of thin stillage from dry-grind corn milling with fungi
US8481295B2 (en) * 2007-06-20 2013-07-09 Johannes van Leeuwen Fungi cultivation on alcohol fermentation stillage for useful products and energy savings
CN102765815A (zh) * 2012-07-05 2012-11-07 昆明豪原特自控有限公司 一种生物分解剂及其制备方法
ES2525893B1 (es) * 2014-09-26 2015-11-24 Estefanía HINAREJOS ESTEVE Regenerador orgánico y biológico para disminuir el potencial infeccioso de un suelo, procedimiento de obtención del mismo y uso

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4136024A (en) * 1975-02-17 1979-01-23 Karl Bisa Aerosol dispersion of microorganisms to eliminate oil slicks
RU2007372C1 (ru) * 1992-04-15 1994-02-15 Марьям Бекжановна Биттеева Способ очистки воды и почвы от загрязнений нефтью и нефтепродуктами
RU2014286C1 (ru) * 1990-05-24 1994-06-15 Государственный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ Способ очистки воды и почвы от нефтепродуктов
RU2023686C1 (ru) * 1992-04-13 1994-11-30 Научно-производственное объединение "Биотехинвест" Консорциум микроорганизмов rhodococcus sp., rhodococcus maris, rhodococcus erythropolis, pseudomonas stutzeri, candida sp., используемый для очистки почвенных и солоноватоводных экосистем от загрязнения нефтепродуктами
WO1995006715A1 (fr) * 1993-09-01 1995-03-09 Ceca S.A. Procede de rehabilitation de sols contamines par hydrocarbures et autres substances biodegradables
WO1995031408A1 (fr) * 1994-05-11 1995-11-23 Aktsionernoe Obschestvo Zakrytogo Tipa 'biotekhinvest' Preparation biologique et procede d'extraction de contaminants a base de produit de petrole brut et de petrole se trouvant dans de l'eau et de la terre
US5494580A (en) * 1993-09-30 1996-02-27 Baltic General Investment Corporation Method of decontamination of a hydrocarbon-polluted environment by the use of bacterial compositions
RU2076150C1 (ru) * 1993-02-15 1997-03-27 Борис Герасимович Мурзаков Штамм бактерий acinetobacter species (bicoccum), используемый для очистки почвы и воды от нефтепродуктов, штамм бактерий arthrobacter species, используемый для очистки почвы и воды от нефтепродуктов, штамм бактерий rhodococcus species, используемый для очистки почвы и воды от нефтепродуктов, способ биологической очистки от нефтяных загрязнений (варианты)

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3870599A (en) * 1970-06-03 1975-03-11 Bioteknika International Microbial degradation of petroleum
DD278355A1 (de) * 1988-12-22 1990-05-02 Petrolchemisches Kombinat Verfahren zur gewinnung von hefebiomasse

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4136024A (en) * 1975-02-17 1979-01-23 Karl Bisa Aerosol dispersion of microorganisms to eliminate oil slicks
RU2014286C1 (ru) * 1990-05-24 1994-06-15 Государственный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ Способ очистки воды и почвы от нефтепродуктов
RU2023686C1 (ru) * 1992-04-13 1994-11-30 Научно-производственное объединение "Биотехинвест" Консорциум микроорганизмов rhodococcus sp., rhodococcus maris, rhodococcus erythropolis, pseudomonas stutzeri, candida sp., используемый для очистки почвенных и солоноватоводных экосистем от загрязнения нефтепродуктами
RU2007372C1 (ru) * 1992-04-15 1994-02-15 Марьям Бекжановна Биттеева Способ очистки воды и почвы от загрязнений нефтью и нефтепродуктами
RU2076150C1 (ru) * 1993-02-15 1997-03-27 Борис Герасимович Мурзаков Штамм бактерий acinetobacter species (bicoccum), используемый для очистки почвы и воды от нефтепродуктов, штамм бактерий arthrobacter species, используемый для очистки почвы и воды от нефтепродуктов, штамм бактерий rhodococcus species, используемый для очистки почвы и воды от нефтепродуктов, способ биологической очистки от нефтяных загрязнений (варианты)
WO1995006715A1 (fr) * 1993-09-01 1995-03-09 Ceca S.A. Procede de rehabilitation de sols contamines par hydrocarbures et autres substances biodegradables
US5494580A (en) * 1993-09-30 1996-02-27 Baltic General Investment Corporation Method of decontamination of a hydrocarbon-polluted environment by the use of bacterial compositions
WO1995031408A1 (fr) * 1994-05-11 1995-11-23 Aktsionernoe Obschestvo Zakrytogo Tipa 'biotekhinvest' Preparation biologique et procede d'extraction de contaminants a base de produit de petrole brut et de petrole se trouvant dans de l'eau et de la terre

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
E.I. Kvasnikoo et al., "Mikroorganizmy - destruktory nefte v vodnykh basseinakh", Kiev, "Naukova dumka", 1981, pages 77-83. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2543897C1 (ru) * 2014-02-12 2015-03-10 Открытое акционерное общество "Газпром" Способ биологического обезвреживания жидких углеводородсодержащих отходов

Also Published As

Publication number Publication date
WO1998055409A1 (fr) 1998-12-10
RU2114174C1 (ru) 1998-06-27
EA199900070A1 (ru) 1999-12-29
AU6126698A (en) 1998-12-21
CA2263088A1 (en) 1998-12-10
US6444204B1 (en) 2002-09-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Atkinson et al. Biodegradability and microbial activities during composting of poultry litter
US4401762A (en) Process of culturing microorganisms using a microemulsion
JPH0436758B2 (ru)
RU2337069C1 (ru) Препарат для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов
CN109536405A (zh) 一种复合微生物制剂
WO2020009097A1 (ja) 石油関連物質により汚染された環境の除染方法および使用する資材
US5496723A (en) Strains of Acinetobacter species (bicoccum), Arthrobacter species, and Rhodococcus species, and a method for biological purification from oil spills and pollutions, using said strains
Ugochukwu et al. Lipase activities of microbial isolates from soil contaminated with crude oil after bioremediation
US5158595A (en) Soil bioremediation enzymatic composition
CN111440747B (zh) 用于污水处理的复合微生物菌剂及微生态制剂与应用
EA001458B1 (ru) Биопрепарат, преимущественно для очистки нефтеналивных ёмкостей, оборудования и водопочвенных экосистем от нефтезагрязнений
KR102099124B1 (ko) 저질개선제 및 이를 이용한 저질개선 방법
US5160488A (en) Bioremediation yeast and surfactant composition
US5160525A (en) Bioremediation enzymatic composition
CN114410509B (zh) 产气肠杆菌联用产气克雷伯氏菌的菌剂、组合物及应用
RU2365438C2 (ru) Биопрепарат для очистки почвы и воды от нефти и нефтепродуктов
RU2299101C1 (ru) Биопрепарат для очистки почвы от нефти и нефтепродуктов
RU2502569C1 (ru) Способ очистки почвы от углеводородных загрязнений
RU2322312C1 (ru) Способ восстановления почв и грунтов, загрязненных нефтью и нефтепродуктами
Williams et al. Bioremediation Potential of Aspergillus clavatus and Pichia spp. on Oil Spill Dispersant Polluted Marshland
JPS6111590B2 (ru)
RU2312719C1 (ru) Консорциум штаммов углеводородокисляющих бактерий pseudomonas aeruginosa нд к3-1 и pseudomonas fluorescens нд к3-2 в качестве деструктора нефтепродуктов и способ очистки нефтезагрязненных подземных вод
RU2039714C1 (ru) Способ очистки воды и почвы от нефтяных загрязнений
RU2270808C2 (ru) Биологически активная композиция для очистки поверхностных вод, почв и грунтов от нефтяных загрязнений
RU2455240C1 (ru) Биопрепарат для очистки воды от загрязнений углеводородами

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU