DK176668B1 - Streptococcus phocae vaccine - Google Patents
Streptococcus phocae vaccine Download PDFInfo
- Publication number
- DK176668B1 DK176668B1 DK200600871A DKPA200600871A DK176668B1 DK 176668 B1 DK176668 B1 DK 176668B1 DK 200600871 A DK200600871 A DK 200600871A DK PA200600871 A DKPA200600871 A DK PA200600871A DK 176668 B1 DK176668 B1 DK 176668B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- vaccine
- fish
- bacteria
- phocae
- use according
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 75
- 241000252846 Streptococcus phocae Species 0.000 title claims abstract description 59
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims abstract description 53
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 38
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 claims description 49
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 18
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 18
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 16
- 241000277263 Salmo Species 0.000 claims description 13
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 claims description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 10
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 claims description 10
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 8
- 241000607525 Aeromonas salmonicida Species 0.000 claims description 6
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 claims description 6
- 241000544286 Vibrio anguillarum Species 0.000 claims description 5
- 241000122170 Aliivibrio salmonicida Species 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 241000589565 Flavobacterium Species 0.000 claims description 3
- 241000546112 Infectious salmon anemia virus Species 0.000 claims description 3
- 241001148129 Yersinia ruckeri Species 0.000 claims description 3
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 claims description 2
- 241001517016 Photobacterium damselae Species 0.000 claims description 2
- 241000607598 Vibrio Species 0.000 claims description 2
- 241001135139 Vibrio ordalii Species 0.000 claims description 2
- 241000607471 Edwardsiella tarda Species 0.000 claims 1
- 241000604754 Flexibacter Species 0.000 claims 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 claims 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 14
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 13
- 241000283216 Phocidae Species 0.000 description 9
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 9
- 241000277331 Salmonidae Species 0.000 description 8
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 7
- 241000269779 Lates calcarifer Species 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 5
- -1 microalginates Substances 0.000 description 5
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 5
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 4
- 208000009663 Acute Necrotizing Pancreatitis Diseases 0.000 description 3
- 241000723298 Dicentrarchus labrax Species 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010058096 Pancreatic necrosis Diseases 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000193985 Streptococcus agalactiae Species 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 206010017553 Furuncle Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001600139 Moritella viscosa Species 0.000 description 2
- 241000192126 Piscirickettsia salmonis Species 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- 241000194056 Streptococcus iniae Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000003653 coastal water Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 208000003512 furunculosis Diseases 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011392 neighbor-joining method Methods 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUCIJNAGGSZNQT-JHSLDZJXSA-N (R)-amygdalin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H](C#N)C=2C=CC=CC=2)O1 XUCIJNAGGSZNQT-JHSLDZJXSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000117 Abnormal behaviour Diseases 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000238582 Artemia Species 0.000 description 1
- 241000238569 Artemia sp. Species 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000712083 Canine morbillivirus Species 0.000 description 1
- 241000206600 Carnobacterium maltaromaticum Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000607473 Edwardsiella <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 102000013382 Gelatinases Human genes 0.000 description 1
- 108010026132 Gelatinases Proteins 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 241000283125 Halichoerus Species 0.000 description 1
- 241000283118 Halichoerus grypus Species 0.000 description 1
- 241000194040 Lactococcus garvieae Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001503642 Nocardia seriolae Species 0.000 description 1
- 241000277338 Oncorhynchus kisutch Species 0.000 description 1
- 241000277275 Oncorhynchus mykiss Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241000283140 Phoca Species 0.000 description 1
- 241000283150 Phoca vitulina Species 0.000 description 1
- 241000700141 Rotifera Species 0.000 description 1
- 241000277289 Salmo salar Species 0.000 description 1
- 206010040860 Skin haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000194042 Streptococcus dysgalactiae Species 0.000 description 1
- 241000194048 Streptococcus equi Species 0.000 description 1
- 241000194022 Streptococcus sp. Species 0.000 description 1
- 241001542930 Tenacibaculum maritimum Species 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 206010047400 Vibrio infections Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229910000318 alkali metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229940089837 amygdalin Drugs 0.000 description 1
- YZLOSXFCSIDECK-UHFFFAOYSA-N amygdalin Natural products OCC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC(C#N)c3ccccc3 YZLOSXFCSIDECK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000009306 commercial farming Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000002498 deadly effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- YGHHWSRCTPQFFC-UHFFFAOYSA-N eucalyptosin A Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(OC(C#N)C=2C=CC=CC=2)OC(CO)C(O)C1O YGHHWSRCTPQFFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 229940013317 fish oils Drugs 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000006481 glucose medium Substances 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N melezitose Chemical compound O([C@@]1(O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)CO)CO)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 238000006395 oxidase reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000011076 safety test Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N squalane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-AAJYLUCBSA-N squalene Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C=C(/C)CC\C=C(/C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-AAJYLUCBSA-N 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 238000004381 surface treatment Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 1
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 1
- 125000002640 tocopherol group Chemical class 0.000 description 1
- 235000019149 tocopherols Nutrition 0.000 description 1
- 229940124856 vaccine component Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
- A61K39/092—Streptococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
DK 176668 B1
Titel: Streptococcus phocae vaccine
Den foreliggende opfindelse angår anvendelse af Streptococcus phocae bakterier til fremstilling af en vaccine, fremgangsmåder til fremstilling af sådanne vac-5 ciner, Streptococcus phocae bakterier til anvendelse i en vaccine.
En hidtil ukendt sygdom er for nylig fundet i laks, specifikt i atlanterhavslaks (Salmo salar) fra chilenske kystfarvande. Sygdommen er karakteriseret ved hudblødninger, som punktformede blodudtrædninger tæt ved gattet og på beg-10 ge sider af fisken, bylder og læsioner, der påvirker musklerne, indre blødninger og kongestion. Udbruddene er akutte, og det første sygdomstegn under udbrud er ofte en forøget mortalitet, der derefter kan relateres til de ovenfor nævnte symptomer. Udbrud finder oftest sted mellem midt i december og midt i april, og mortaliteten forøges, når vandtemperaturen overstiger 13,5°C. Hvis et udbrud 15 starter i sommertiden, kan den gerne udstrække sig indtil efteråret, når vandtemperaturerne falder til under 11°C. Der er ikke nogen sammenhæng mellem vandets salinitet og udbruddene. Der er ikke nogen aldersafhængig modtagelighed, og fisk fra efter unglaksstadiet til fisk på stadiet lige før fangst kan påvirkes. I december ses en mortalitet på ca. 4%, 8% i februar og 10-15% i marts.
20 Sygdommen er indtil nu kun fundet i atlanterhavslaks og ikke (endnu) i andre laksefisk (salmonider), såsom Coho-laks eller regnbueørred. Årsagen til sygdommen er dog hidtil ukendt.
Det har nu overraskende vist sig, at årsagen til denne hidtil ukendte sygdom er 25 en bakterie af arten Streptococcus phocae. Denne bakterie blev fundet for første gang omkring 1994, hvor den blev identificeret som en af de endelige årsager til død i sæler, der lider af phocin-hundesyge-virus. Populationen af sæler, der var hårdest ramt af virusset, omfatter hovedsageligt spættede sæler (Phoca vitulina) og gråsæler (Haliochoerus grypus). Bakterien, der ofte blev isoleret fra 30 syge sæler, blev givet navnet Steptococcus phocae, og den er blevet omfattende karakteriseret af Ida Skaar et al., (Int. J. of System. Bacteriol. 44: 646-650 (1994)). Den såkaldte type stamme af bakterien kan skaffes fra National Collection of Type Cultures (NCTC), PHLS Central Public Health Laboratory, 61 Co- 2 DK 176668 B1 lindale Avenue, London NW9 5HT, United Kingdom under deponeringsnummer NCTC 12719, og fra Culture Collection of the University of Goteborg, Department of Clinical Bacteriology, Mikrobiologen, Guldhedsgatan 10, SE-413 46, Goteborg, Sverige under deponeringsnummer CCUG 35103.
5
Sygdommen er fundet i sæler fra mange fjerntliggende steder, fra nordøsteuropæiske lande, såsom England, Skotland, Holland, Norge, Tyskland, Danmark og Sverige til sydafrikanske farvande og i kystfarvande i dele af Sydamerika, f.eks. Chile.
10
Det var overraskende, at denne bakterie, som helt klart er et mammalt patogen, kunne isoleres fra syge fisk. Dette er aldrig tidligere set eller beskrevet, ikke i Afrika, eller i Sydamerika eller nordøsteuropæiske lande eller en hvilken som helst anden del af verden. Sygdommen i fisk er indtil videre kun rapporteret fra 15 Chile, og ikke fra Nordøsteuropa, på trods af det faktum, at der er et omfattende kommercielt opdræt af laks i det nordøstlige Europa. Sandsynligvis er det kun et spørgsmål om tid, før sygdommen begynder at påvirke laksefisk i andre dele af verden.
20 Det har endnu mere overraskende vist sig, at denne bakterie ser ud til at være et primært patogen i fisk, dvs., den er i stand til at forårsage sygdom i raske fisk.
Til slut har det vist sig, at denne bakterie kan danne basis for en vaccine til bekæmpelse af Streptococcus phocae infektion.
25
En udførelsesform af den foreliggende opfindelse angår derfor anvendelse af Streptococcus phocae bakterier til fremstilling af en vaccine til bekæmpelse af Streptococcus phocae infektion i fisk.
30 Siden det nu overraskende har vist sig, at Streptococcus phocae er i stand til at skifte fra pattedyrearter til fiskearter, er det højst sandsynligt kun et spørgsmål om tid, før bakterien inficerer andre fiskearter, hvor den første art er i gruppen af laksefisk. I en foretrukken udførelsesform er Streptococcus phocae derfor an 3 DK 176668 B1 vendt til fremstilling af en vaccine til bekæmpelse af Streptococcus phocae infektion i laksefisk.
Idet de mest akutte problemer i øjeblikket ses i atlanterhavslaks, er anvendelse 5 af Streptococcus phocae bakterierne til fremstilling af en vaccine til bekæmpelse af Streptococcus phocae infektion i atlanterhavslaks en mere foretrukken udførelsesform.
Vaccinen kan omfatte bakterier af arten Streptococcus phocae som en bakterin 10 og/eller i en levende attenueret form. En levende attenueret bakterie er en bakterie, der er mindre sygdomsfremkaldende (patogen) end dennes vildtypemod-part, mens den dog inducerer et tilsvarende immunrespons. Attenuerede stammer kan opnås ved anvendelse af klassiske teknikker, såsom kemisk mutage-nese, UV-bestråling og deslige, og ved stedsspecifik mutagenese. En bakterin 15 defineres her som bakterier af arten Streptococcus phocae i en inaktiveret form. Fagmanden vil notere sig, at fremgangsmåden, der anvendes til inaktivering, ikke er relevant for aktiviteten af bakterinet. Klassiske fremgangsmåder til inaktivering, såsom UV-bestråling, gamma-bestråling, behandling med formalin, binært ethylenimin, thimerosal og deslige, er velkendte for fagmanden, og er alle 20 anvendelige. Inaktivering af bakterier ved hjælp af fysisk stress, ved anvendelse af f.eks. en fransk presse, tilvejebringer et på lignende vis egnet udgangsmateriale til fremstilling af en vaccine ifølge opfindelsen. Et bakterin behøves således ikke nødvendigvis være i form af inaktiverede hele celler; cellerne kan være sprængte.
25
Bakteriner har den fordel i forhold til levende attenuerede bakterier, at de er yderst sikre. Derfor angår opfindelsen i en foretrukken udførelsesform anvendelse af inaktiverede Streptococcus phocae bakterier.
30 Vacciner, som er beskrevet og fremstillet ifølge opfindelsen, kan fremstilles ud fra en udgangskultur ved hjælp af teknikker, der er velkendte for fagmanden. Vacciner omfatter basalt set en effektiv mængde bakterier til anvendelse ifølge 4 DK 176668 B1 opfindelsen og en farmaceutisk acceptabel bærer. I eksempelafsnittet gives eksempler på fremstillingen ifølge opfindelsen af en vaccine.
Benævnelsen "effektiv" som anvendt heri defineres som en mængde, der er til-5 strækkelig til at inducere et immunrespons i den målsatte fisk, der resulterer i et sygdomsniveau, der er mindst det samme som 50% af sygdomsniveauet, der ses i fisk under samme forhold, men inficeret med vildtype Streptococcus pho-cae.
10 Generelt kan vacciner fremstillet ifølge opfindelsen, der er baseret på bakteri-ner, indgives i en dosering på 103 til 1010, fortrinsvis 106 til 109, mere fortrinsvis mellem 108 og 109 bakterier. En dosis, der overstiger 101° bakterier, vil på trods af, at denne er immunologisk egnet, være mindre attraktiv af økonomiske grunde. Vacciner fremstillet ifølge opfindelsen, der er baseret på levende attenuere- 15 de bakterier, kan gives i lavere doser, grundet det faktum, at bakterien vil fortsætte med at formere sig en vis tid efter administration. Vacciner fremstillet ifølge opfindelsen, der er baseret på levende attenuerede bakterier kan generelt gives i en dosis på 102 til 108, fortrinsvis 103 til 105 bakterier.
20 Eksempler på farmaceutisk acceptable bærere, der er særligt egnede i en vaccine, er sterilt vand, saltopløsninger, vandige buffere, såsom PBS og lignende. Yderligere kan en vaccine omfatte andre tilsætningsstoffer, såsom adjuvanser, stabiliseringsmidler, antioxidanter og andre som beskrevet nedenfor.
25 Vacciner, der fremstilles som beskrevet i den foreliggende opfindelse kan i en foretrukken fremstilling også indeholde et immunstimulerende middel, en såkaldt adjuvans. Adjuvanser omfatter generelt midler, der fremmer (booster) værtens immunforsvar på en ikke-specifik måde. En række forskellige adjuvanser er velkendte. Eksempler på adjuvanser, der hyppigt anvendes i fiske- og skald- 30 dyrsopdræt er muramyldipeptider, lipopolysaccharider, forskellige glucaner og glycaner og Carbopol®. Et omfattende overblik over adjuvanser, der er egnede til fiske- og skalddyrsvacciner, gives i oversigtsartiklen af Jan Raa (Reviews in Fisheries Science 4(3): 229-288 (1996)).
5 DK 176668 B1
Vaccinen kan også omfatte en såkaldt "vehikel". En vehikel er en forbindelse, til hvilken bakterien klæber, uden dog at være covalent bundet hertil. Sådanne vehikler er f.eks. bio-mikrokapsler, mikroalginater, liposomer og makrosoler, som alle er velkendte for fagmanden. En speciel form af sådanne vehikler, i 5 hvilke antigenet er delvist indlejret i vehiklen, er det såkaldte ISCOM (europæiske patenter EP 109.942, EP 180.564, EP 242.380).
Derudover kan vaccinerne omfatte en eller flere egnede overfladeaktive forbindelser eller emulgeringsmidler, f.eks. Span eller Tween.
10
Olieadjuvanser, der er egnede til anvendelse i vand-i-olie-emulsioner er f.eks. mineralolier eller metaboliserbare olier. Mineralolier er f.eks. Bayol®, Marcol®og Drakeol®. Metaboliserbare olier er f.eks. vegetabilske olier, såsom jordnødde-olie eller sojabønneolie, animalske olier, såsom fiskeolierne squalan og squalen 15 og tocopheroler og disses derivater. Egnede adjuvanser er f.eks. vand/olie-emulsioner, olie/vand-emulsioner og vand/olie/vand-dobbeltemulsioner.
Særligt egnede olie/vand-emulsioner er f.eks. opnået startende fra 5-50 vægt% vandfase og 95-50 vægt% olieadjuvanser, mere foretrukket 20-50 vægt% vand-20 fase og 80-50 vægt% olieadjuvanser.
Mængden af tilsat adjuvans afhænger af adjuvansens egenskaber, og information angående sådanne mængder vil blive tilvejebragt af fremstilleren.
25 Ofte blandes vaccinen med stabiliseringsmidler, f.eks. for at beskytte nedbrydningsfølsomme proteiner fra at blive nedbrudt, for at forlænge vaccinens holdbarhed eller for at forbedre frysetørringseffektivitet. Anvendelige stabiliseringsmidler er f.eks. SPGA (Bovarnik et al; J. Bacteriology 59: 509 (1950)), carbohydrates f.eks. sorbitol, mannitol, trehalose, stivelse, sucrose, dextran eller glu-30 cose, proteiner, såsom albumin eller casein eller nedbrydningsprodukter deraf og buffere, såsom alkalimetalphosphater.
Fortrinsvis fremstilles de beskrevne vacciner i en frysetørret form.
DK 176668 B1 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!l^-
Deaidovef kan vaccinerne suspenderes i: et fysiologisk acceptabelt forlyn-dtngamiddei Det er naturligvis således, at andre måder* hvorpå man adjuverer proteiner, tilsætter vehlkefforbindetser eller fodyndlngsmldier emulgaringsmkl-ler eller stablllseringsmldle? til proteiner også falder Inden lo- den foreliggende 5 opfindelses udferelsesformer.
Rem administrationsveje, der alle er velkendte far fagmanden, kan anvendes. Vaccinerne administreres som beskrevet fortrinsvis til fiskene via en injektion, såsom f.eks, intraperitoneal Injektion, immersion, spraying, dypning eller per 10 oralt. Det skal dog huskes, at admlinistrationeruiten også kan afhænge af vacd-netypen· hvis vacclnon omfatter le vende atteoueiede 8tmp^ococcus phoeae bakterier, kunne denne let administreres ved dypning, på grund af letheden ad danne edminlstrationsvej. Hvis på don anden side vaccinen omfatter Strepfø·' coccus phocae bakterier I form af et bskterin, eller mere generelt, hvis vaccinen 15 kan forbedres véd blanding med m ad] uvans, ville den forstukne admplstratk onsvej være den intrapehtoneale mte. Sef fra et immunologisk standpunkt er in-Irapontonøal vaccination langl den møst effekhve rutø I il voces natren s fisk. særligt for bakieriner. specielt Idet det også tillader indarbejdelse af adjuvanser, 20 Admilnistrationsprofokolien kan optimeres i overensstemmelse med standard-vaccimtlonsydførelse.. El nyhgt overblik over fiskevaccinahoner. skrevet af Sowdan ét al,, {Fisheries Research Service Manhø laboratory, Aberdeen, Skotland) or tilgængeligt fra 25 Alderen på den fisk. der skal vaccineres, er ikke krlfisk. selv om man klart ville ønske at vaccinere Imod Streptococcus phoce© infektion på et bdligt stadium.
For mange iaksefiskevaccinef er det således, at do administreres, når fisken endnu ikke er i ungiaksostadiei {presmolt stago) og har an vægt på mallam 15 og 35 g. Dette er ligeledes et særdeles egnet tidspunkt til vaccination imod .30 Streptococcus, phocae.
Til oral administration ar vaccinen fortrinsvis blandet med en egnet bærer til oral administration, laks. cellulose, føde eller en metabollserhar substans, såsom o~ 7 DK 176668 B1 cellulose eller forskellige olier af vegetabilsk eller animalsk oprindelse. En anden effektiv metode er administration af vaccinen til høje koncentrationer af levende foderorganismer, efterfulgt af fodring af fiskene med disse levende foderorganismer. Særligt foretrukne foderbærere til oral indgivelse af vaccinen 5 ifølge opfindelsen er levende foderorganismer, som er i stand til at indkapsle vaccinen. Egnede levende foderorganismer inkluderer plankton-lignende ikke-selektive filtreringsernærende organismer, fortrinsvis medlemmer af Rotifera, Artemia og lignende. Særligt foretrukket er saltvandsrejen Artemia sp.
10 Det ville være fordelagtigt, sammen med Streptococcus phocae bakterier, at anvende yderligere en eller flere andre fiskepatogene bakterier eller vira, eller antigener af sådanne bakterier eller vira til fremstilling af en vaccine, som derefter kunne være en kombinationsvaccine.
15 Eksempler på almindeligt kendte kommercielle vigtige fiskepatogener er Vibrio-arter, såsom Vibrio ordalii, Vibrio anguillarum serotype 01 og Vibrio anguilla-rum serotype 02, Aeromonas salmonicida, Flavobacterium columnarae, Tena-cibaculum maritimum, Edwardsiella-arter såsom Edwardsiella ictaluri og Ed-wardsiella tarda, Photobacterium damselae underart piscidida, Flavobacterium 20 psychrophilum, Piscirickettsia salmonis, Moritella viscosa (tidligere kendt som Vibrio viscosus), Yersinia ruckeri, Vibrio salmonicida, Infectious Pancreatic Necrotic Disease virus (IPNV), Infectious Salmon Anaemia virus (ISAV) og Salmon Pancreatic Disease virus (SPDV).
25 Fordelen ved sådanne kombinationsvacciner er, at de ikke blot tilvejebringer beskyttelse imod Streptococcus phocae, men også imod andre sygdomme.
Derfor anvendes Streptococcus phocae bakterierne i en foretrukken udførelsesform sammen med en eller flere andre fiskepatogene bakterier eller vira, eller antigener af sådanne bakterier eller vira til fremstilling af en vaccine.
30 I en mere foretrukken udførelsesform er de fiskepatogene bakterier eller vira eller antigener af sådanne bakterier eller vira valgt fra gruppen af velkendte kommercielt vigtige fiskepatogener, som beskrevet kort ovenfor.
8 DK 176668 B1
Blot som eksempel ville en kombinationsvaccine, der omfatter (ud over Streptococcus phocae) Aeromonas salmonicida-bakterier eller antigene underenheder deraf og Infectious Pancreatic Necrotic Disease virus (IPNV) som et viralt antigen, beskytte mod bylder (furunculosis), bugspytkirtelnekrose og Streptococcus 5 phocae infektion på samme tid. Andre vigtige virale antigener, som ville være egnede komponenter af en sådan kombinationsvaccine er Infectious Salmon Anaemia virus (ISAV) og Salmon Pancreatic Disease virus (SPDV) eller antigene underenheder af disse vira.
10 Det virale antigen kan være hele vira eller blot underenheder af virus, såsom f.eks. VP2-proteinet fra IPN-virus. I dette tilfælde siges det virale antigen at være afledt fra den hele virus.
Et eksempel på en særlig egnet kombinationsvaccine er en vaccine, der ud 15 over Streptococcus phocae omfatter Vibrio salmonicida og Aeromonas salmo-nicida sammen med IPN-VP2. En sådan vaccine tilvejebringer beskyttelse imod vibriosis, infektiøs bugspytkirtelnekrose, furunculosis og Streptococcus phocae infektion.
20 For så vidt angår Chile, hvor de tre mest almindelige sygdomme, næst efter Streptococcus phocae i laksefisk er a-typisk furuncolosis, Piscirickettsia salmo-nis (SRS) og infektiøs bugspytkirtelnekrose, ville en foretrukken vaccine omfatte en Aeromonas salmonicida-komponent, en anti-Rickettsia-komponent og IPN-VP2 som viralt antigen, ud over Streptococcus phocae vaccinekomponenten.
25
En ellers stærkt foretrukken kombinationsvaccine er en vaccine, der omfatter i det mindste to, men fortrinsvis flere af følgende komponenter: Vibrio anguilla-rum serotype 01, Vibrio anguillarum serotype 02, Aeromonas salmonicida, Mo-ritella viscosa, Yersinia ruckeri, Vibrio salmonicida og IPNV-VP2, ud over Strep-30 tococcus phocae komponenten.
En anden udførelsesform ifølge den foreliggende opfindelse angår Streptococcus phocae bakterier til anvendelse i en vaccine.
9 DK 176668 B1
Endnu en udførelsesform af den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af vacciner til bekæmpelse af Streptococcus phocae infektion i fisk. Sådanne fremgangsmåder omfatter blanding af Streptococcus phocae bakterier i en levende attenueret eller inaktiveret form og en farmaceutisk ac-5 ceptabel bærer.
En foretrukken form af disse udførelsesformer angår en fremgangsmåde, der yderligere omfatter blanding af en adjuvans.
10 Følgende eksempler illustrerer opfindelsen nærmere.
EKSEMPLER
Eksempel 1 15
Bestemmelse af "relationsafstand" af 77 streptokokarter og andre grampositive arter isoleret fra fisk og sæler på basis af deres biokemiske beslægtethed.
Blandt de testede stammer er Streptococcus phocae isolater, der var isoleret fra syge laksefisk i Chile.
20
Chilenske Streptococcus sp.-stammer INS/AS-kode AS 968 25 INS 248 AS 972 AS 973 AS 970
Stamme isoleret fra INS/AS-kode februar 2001 atlanterhavslaks, 1500 g AS 960 marts 2002 atlanterhavslaks, 2000 g AS 958 10 DK 176668 B1 marts 2003 atlanterhavslaks, 1500 g AS 959
Disse stammer var isoleret fra forskellige opdræt. Stammerne var isoleret fra forårs- og sommerudbrud i atlanterhavslaks, der blev opdrættet i estuarine eller marine farvande, resulterende i høj mortalitet.
5
Typestammer opnået fra stammesamlinger
Stamme Beskrivelse INS/AS-kode CCUG 35103 typestamme AS 969 CCUG 35104 referencestamme AS 971 CCUG 35105 referencestamme AS 980
Stammer isoleret fra sæler, der lider af lungebetændelse, var fra Ida Skaar Nor-10 ge (18. august 2003) beskrevet i: Skaar et al., 1994 (se ovenfor):
Stamme Beskrivelse INS kode 7908 P2 AS 974 8026 L2 AS 975 8056 P2 AS 976 8059 P2 AS 977 8205 H2 AS 978 8252 AS 979
Identifikation 15 Alle stammer (Chile-stammerne, S. phocae type- og referencestammer og yderligere ikke-deponerede stammer fra Norge) blev identificeret i 46 phenotypiske og morfologiske tests (gram-reaktion, katalase-reaktion, oxidase-reaktion, hæ-molyse, vækst på 40% galdesalte, gelatinase-produktion, API (API 20 Strep test kit BioMerieux), oxidation/fermentationstest (vand & vand/olie olie), Kligler tri-20 sukkerreaktioner (laktose, glucose, gasproduktion, H2S-produktion), fermentation af amygdalin, galactose, glycerol, maltose, melibiose, melizitose, sucrose, 11 DK 176668 B1 nitrat, vækst ved pH 9,6 i 6,5% salt, 3% salt tolerance, indolproduktion og motili-tet).
Identifikationsprofilerne blev indarbejdet i en eksisterende datamatrix indehol-5 dende gram-positive bakterielle fiskepatogener (Streptococcus agalactiae, S. difficile, S. iniae, Carnobacterium piscicola, Vagocossus salmoninarum, Nocar-dia seriolae og Lactococcus garvieae), såvel som referencestammer af S. mu-tans, S. zooepidermicus og S. equi, og ensartetheder blev databehandlet ved anvendelse af UPGMA-analyse. Resultaterne af denne analyse af phylogene-10 tisk træ er vist i dendrogrammet i figur 1. Alle stammer i rækken mellem og inkluderende INS 248 og AS 958 tilhører den samme gruppe, dvs. de hører til S. phocae arten.
Baseret på fænotypiske og morfologiske tests er det ikke muligt at skelne mel-15 lem stammer isoleret fra Chile og stammer, der originalt er isoleret fra sæler med lungebetændelse i Norge.
Konklusion: bakteriestammerne isoleret fra atlanterhavslaks i Chile blev identificeret som den forårsagende årsag til Streptococ-sygdomme på basis af deres 20 biokemiske slægtskab som Streptococcus phocae.
Eksempel 2.
Bestemmelse af phylogenetisk afstand mellem S. phocae stammer og andre 25 streptokokstammer på basis af deres 16S rRNA-sekvensanalyse. En 16S rRNA-sekvensanalyse er udført på Streptococcus phocae typereference-stammen NCTC 12719 og to Streptococcus phocae isolater (AS 972 og AS 973), der var isoleret fra syge laksefisk i Chile. En sammenligning mellem S. phocae typestammen, de to chilenske isolater og flere medlemmer af andre 30 streptokokarter: S. dysgalactiae, S. iniae og S. agalactiae blev foretaget.
16S rRNA-sekvenser blev bestemt som beskrevet af Kuhnert et al., (Int. J. Syst. Bacteriol., 46; 1174-1176 (1996)). For begge stammer blev der opnået en se- 12 DK 176668 B1 kvens på ca. 1410 nucleotider. Disse sekvenser blev sammenlignet med tilgængelige nucleotidsekvensdatabaser ved anvendelse af BlastN software. De højst scorende sekvenser blev fremstillet ved anvendelse af Clustal X i Vector NTI-softwarepakken (Informax Inc.) med følgende indstillinger: en gap opening 5 penalty på 15 og en gap extension penalty på 6,66, begge med parvise og multiple sammenstillinger. Til opbyggelse af træet blev nabosammenlægningsfremgangsmåden (Neighbor-Joining method) af Saitou, N. og Nei, M. anvendt. (The neighbor-joining method: a new method for reconstructing phylogenetic trees.
Mol. Biol. Evol. 4, 406-425 (1987)). Positioner med huller (gaps) blev eksklude-10 ret fra analysen.
Det phylogenetiske træ, vist i fig. 2, indikerer slægtskabet mellem de forskellige streptokokstammer.
15 Konklusion: det ses hurtigt og tydeligt af fig. 2, at de chilenske isolater AS 972 og AS 973 er på samme gren som S. phocae typestammen. Dette er fuldt i overensstemmelse med udfaldet og konklusionerne af det phylogenetiske træ i fig. 1, som repræsenterer det biokemiske slægtskab mellem de forskellige S. phocae isolater fra sæler og fisk.
20
Eksempel 3
Sikkerhedsforsøg og seroomdannelse i asiatisk havaborre (Lates calcari-fer).
25
Det blev besluttet først at teste sikkerheden og seroomdannelsen af S. phocae vacciner i en fiskeart, der ikke er modtagelig over S. phocae.
Vaccinefremstilling: 30
En råvaccine blev fremstillet ved at dyrke stammen AS 972 i 22,5 timer i SGM 5 x glucosemedie på en orbital-omryster (129 rpm) ved 32°C. Efter inkubation var det opnåede totaltællingstal 2,9 x 109 celler/ml. Kulturen blev inaktiveret med 13 DK 176668 B1 0,5% formalin og derefter koncentreret ved centrifugering til en slutkoncentrati-on på 1,5 x 1010 celler/ml. Bakterieceller blev resuspenderet i kultursupernatan-ten.
5 Vaccinerinq: I alt 56 fisk (asiatisk havaborre) blev injiceret intraperitonealt (IP) med 0,1 ml af den ovenfor nævnte vaccine, hvorimod 55 fisk blev injiceret med PBS. Den sidstnævnte gruppe var en kontrolgruppe. Gennemsnitsvægten af de vaccine-10 rede og kontrolfiskene ved eksperimentets start var henholdsvis 19,7 og 20,1 g.
Umiddelbart efter vaccinationen observeredes ingen mortalitet. Vaccinerede og kontrolfisk blev holdt i den samme tank, adskilt ved hjælp af vertikale adskillelsesnet placeret i tankens midte.
15
Sikkerhedsevaluering:
Fiskene blev overvåget i i alt 21 dage efter vaccinationen. Hverken i kontrolgruppen eller i den vaccinerede gruppe observeredes mortalitet i denne perio-20 de. Fiskenes gennemsnitsvægt ved slutningen af observationsperioden var for vaccinerede og kontrolfisk henholdsvis 25,7 og 25,0 g. Det kan konkluderes, at den fremstillede vaccine var sikker for asiatisk havaborre.
Patogenicitetsevaluering: 25
En belastningsmodel blev evalueret ved IP-injektion af levende Streptococcus phocae stammer AS 972/AS 960 (5 x 104, 5 x 106 og 5 x 107 CFU/fisk).
Der observeredes ingen mortalitet med nogen af de bakterielle koncentratio-30 ner/stammer, der blev undersøgt: det viste sig, at havaborre ikke er følsom over for S. phocae infektion. Effektiviteten af vaccinerne kunne derfor ikke evalueres i asiatisk havaborre.
14 DK 176668 B1
Seroomdannelse:
Som det følger direkte af tabellen i fig. 3, er den opnåede seroomdannelse tre uger efter den første vaccination med en vand-baseret vaccine allerede omkring 5 80% af seroomdannelsen, der ses tre uger efter belastning med levende Strep tococcus phocae. Genvaccination (booster vaccination), tre uger efter den første vaccinering, med en vandbaseret vaccine gav det samme titer som efter første belastning. Genvaccination tre uger efter første vaccination med en vand/olie-emulsionsbaseret vaccine gav et lidt lavere titer end den første vacci-10 nation derimod efter belastning. Dette er en normal effekt, der ses generelt med vand/olie-emulsionsbaserede vacciner; effekten af genvaccinering vil blive observeret efter en længere tidsperiode sammenlignet med vandbaserede vacciner.
15 Seroomdannelse blev bestemt som følger:
Streptococcus phocae blev overfladebelagt natten over på NUNC Maxisorb ved 107 bakterier/brønd. ELISA blev udviklet ved anvendelse af monoklonale antistoffer fra mus rettet imod den lette kæde af europæisk havaborre IgM (der er 20 kryds-reaktiv med asiatisk havaborre IgM), efterfulgt af inkubation med peroxi-dasekonjugeret gede-anti-mus-antistoffer. Titere udtrykkes som OD^o-målinger.
Konklusion: selv en enkelt vaccination er allerede i stand til at inducere anti-stof-titer, der er tæt på dem, der findes i belastede fisk, hvorimod en genvacci-25 nation giver et antistof-titer, der er det samme som dem, der findes i belastede fisk.
Eksempel 4 30 Sikkerhedsforsøg og seroomdannelse i atlanterhavslaks.
Vaccinefremstilling: 15 DK 176668 B1
Vacciner blev fremstillet som beskrevet i eksempel 3.
Vaccination: 5 I alt 250 fisk (atlanterhavslaks) blev injiceret intraperitonealt (IP) med 0,1 ml af ovenfor nævnte vaccine, hvorimod 130 fisk blev injiceret med PBS. Sidstnævnte gruppe var en kontrolgruppe. Gennemsnitsvægten af de vaccinerede og kontrolfiskene var ved forsøgets start 28 g.
10 Umiddelbart efter vaccinationen observeredes ingen mortalitet. Vaccinerede og kontrolfisk blev afmærket ved hjælp af Panjet-afmærkning og holdt i den samme tank.
Sikkerhedsevaluering: 15
Fiskene blev observeret i totalt 42 dage efter vaccinationen. Der observeredes ingen mortalitet, hverken hos kontrolgruppen eller den vaccinerede gruppe under denne periode. Der blev heller ikke observeret nogen abnormal adfærd. Det kan konkluderes, at vaccinen er sikker for atlanterhavslaks.
20
Belastningen vil udføres med 1,5 x 109 CFU levende Streptococcus pho-cae/fisk.
Seroomdannelse: 25
Formalininaktiverede Streptococcus phocae stamme INS 972 bakterier blev fortyndet i overfladebehandlingsbuffer til 107 bakterier/ml. Efterfølgende blev 0,1 ml tilsat individuelle brønde på 96 brønds NUNC Maxisorb-plader, inkuberet natten over ved 2-8°C og vasket tre gange. Brøndene blev derefter inkuberet 30 med serielle fortyndinger af lakseserum. Efterfølgende blev de bundne antistoffer kvantificeret ved anvendelse af kanin-antilaks, HR-peroxidase-konjugeret gede-anti-kanin-lgG og peroxidasesubstrat. Titer udtrykkes som OD492-målin-ger.
16 DK 176668 B1
Som det ses direkte fra figur 4, giver vaccination med en vand-baseret vaccine et relativt forøget titer på 500% efter seks uger, hvorimod en vand/olie-emulsionsbaseret vaccine giver en relativ forøgelse i titer på 200%.
5
Konklusion: en enkelt vaccination med en vandbaseret vaccine var i stand til at forøge antistofniveauerne med ca. 500% sammenlignet med den saltopløsning-injicerede kontrolgruppe, 6 uger efter vaccination. Når en vand/olie-emulsions-baseret vaccine anvendes i samme vaccinationsregime, observeres 10 en forsinket igangsættelse, der resulterer i en forøgelse af antistofniveauer med ca. 200% sammenlignet med den saltopløsninginjicerede kontrolgruppe.
Figurtekster: 15 Figur 1: phylogenetisk træ af 77 arter af streptokokker og andre gram-positive arter isoleret fra fisk og sæler på basis af deres biokemiske beslægtethed.
Figur 2: phylogenetisk træ af S. phocae stammer (referencestammen NCTC 12719 og to chilenske Streptococcus phocae isolater fra fisk) og andre strepto-20 kokstammer på basis af 16S rRNA-sekvensanalyse.
Figur 3: ELISA-bestemmelse af vaccination/belastning af S. phocae i havaborre.
25 Figur 4: ELISA-bestemmelse af vaccination/belastning af S. phocae i atlanter-havslaks.
Claims (10)
1. Anvendelse af bakterier af arten Streptococcus phocae til fremstilling af en vaccine til bekæmpelse af Streptococcus phocae infektion i fisk. 5
2. Anvendelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at fisken hører til laksefiske-familien.
3. Anvendelse ifølge krav 2, kendetegnet ved, at fiskene er atlanterhavslaks. 10
4. Anvendelse ifølge krav 1-3, kendetegnet ved, at bakterierne af arten Streptococcus phocae er i en inaktiveret form.
5. Anvendelse ifølge krav 1-4, kendetegnet ved, at en yderligere fiske-15 patogen mikroorganisme eller et virus eller antigen deraf anvendes til fremstillingen af vaccinen.
6. Anvendelse ifølge krav 5, kendetegnet ved, at nævnte yderligere fiskepatogene mikroorganisme eller virus er valgt fra gruppen Vibrio ordalii, Vibrio 20 anguillarum serotype 01, Vibrio anguillarum serotype 02, Aeromonas salmoni-cida, Flavobacterium columnarae, Flexibacter maritimum, Edwardsielle ictaluri, Edwardsiella tarda, Photobacterium damselae underart salmonis, Yersinia ruckeri, Vibrio salmonicida, Infectious Pancreatic Necrotic Disease virus, Infectious Salmon Anaemia virus og Salmon Pancreatic Disease virus. 25
7. Anvendelse ifølge krav 1-6, kendetegnet ved, at der yderligere anvendes en adjuvans til fremstillingen af vaccinen.
8. Anvendelse ifølge krav 1-7, kendetegnet ved, at nævnte vaccine er i en 30 frysetørret form.
9. Bakterier af arten Streptococcus phocae til anvendelse i en vaccine. 18 DK 176668 B1
10. Fremgangsmåde til fremstilling af en vaccine til at bekæmpe Streptococcus phocae infektion, hvor nævnte fremgangsmåde omfatter blanding af Streptococcus phocae bakterier i en levende attenueret eller inaktiveret form og en farmaceutisk acceptabel bærer. 5
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP03104529 | 2003-12-03 | ||
| EP03104529 | 2003-12-03 | ||
| EP2004053201 | 2004-12-01 | ||
| PCT/EP2004/053201 WO2005053716A1 (en) | 2003-12-03 | 2004-12-01 | Streptococcus phocae vaccine |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK200600871A DK200600871A (da) | 2006-06-29 |
| DK176668B1 true DK176668B1 (da) | 2009-02-09 |
Family
ID=34639326
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK200600871A DK176668B1 (da) | 2003-12-03 | 2006-06-29 | Streptococcus phocae vaccine |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20070128215A1 (da) |
| EP (1) | EP1706142B1 (da) |
| JP (1) | JP4695602B2 (da) |
| AT (1) | ATE359815T1 (da) |
| AU (1) | AU2004294732B2 (da) |
| CA (1) | CA2545470C (da) |
| DE (1) | DE602004006026D1 (da) |
| DK (1) | DK176668B1 (da) |
| NO (1) | NO20062469L (da) |
| WO (1) | WO2005053716A1 (da) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5567244B2 (ja) * | 2006-06-06 | 2014-08-06 | 共立製薬株式会社 | 魚類ストレプトコッカス・ディスガラクティエを抗原とする不活化ワクチン |
| CL2008003262A1 (es) * | 2007-11-02 | 2009-06-26 | Intervet Int Bv | Vacuna que comprende lactococcus garviae, pasteurella piscicida, vibrio anguillarum y nocardia seriolae; y uso de dichas bacterias para combatir infecciones de nocardia en peces. |
| CN101461941B (zh) * | 2007-12-20 | 2012-07-04 | 施怀哲维克有限公司 | 疫苗及其制备方法 |
| TW200936759A (en) * | 2007-12-21 | 2009-09-01 | Intervet Int Bv | Fish vaccine |
| CN116603058A (zh) * | 2015-03-26 | 2023-08-18 | Gpn疫苗有限公司 | 链球菌疫苗 |
| CN111304131B (zh) * | 2020-03-17 | 2021-07-16 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 致病性美人鱼发光杆菌美人鱼亚种菌株及应用 |
| CN113476596B (zh) * | 2021-07-14 | 2023-06-02 | 青岛农业大学 | 杀鲑气单胞菌和迟缓爱德华氏菌二联疫苗及其应用 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6379677B1 (en) * | 2000-02-25 | 2002-04-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Agriculture | Streptococcus iniae vaccine |
| US6518252B2 (en) * | 2000-09-20 | 2003-02-11 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Method of treating aquatic animals with an antimicrobial agent and chelating agent |
-
2004
- 2004-12-01 WO PCT/EP2004/053201 patent/WO2005053716A1/en active IP Right Grant
- 2004-12-01 CA CA2545470A patent/CA2545470C/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-12-01 JP JP2006541941A patent/JP4695602B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2004-12-01 AU AU2004294732A patent/AU2004294732B2/en not_active Ceased
- 2004-12-01 DE DE602004006026T patent/DE602004006026D1/de active Active
- 2004-12-01 US US10/580,574 patent/US20070128215A1/en not_active Abandoned
- 2004-12-01 AT AT04804631T patent/ATE359815T1/de not_active IP Right Cessation
- 2004-12-01 EP EP04804631A patent/EP1706142B1/en not_active Not-in-force
-
2006
- 2006-05-30 NO NO20062469A patent/NO20062469L/no not_active Application Discontinuation
- 2006-06-29 DK DK200600871A patent/DK176668B1/da not_active IP Right Cessation
-
2009
- 2009-01-16 US US12/355,273 patent/US7939088B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4695602B2 (ja) | 2011-06-08 |
| DE602004006026D1 (de) | 2007-05-31 |
| AU2004294732A1 (en) | 2005-06-16 |
| EP1706142A1 (en) | 2006-10-04 |
| ATE359815T1 (de) | 2007-05-15 |
| EP1706142B1 (en) | 2007-04-18 |
| AU2004294732B2 (en) | 2009-10-08 |
| US20070128215A1 (en) | 2007-06-07 |
| US7939088B2 (en) | 2011-05-10 |
| WO2005053716A1 (en) | 2005-06-16 |
| CA2545470A1 (en) | 2005-06-16 |
| NO20062469L (no) | 2006-06-30 |
| DK200600871A (da) | 2006-06-29 |
| US20090130142A1 (en) | 2009-05-21 |
| JP2007513124A (ja) | 2007-05-24 |
| CA2545470C (en) | 2011-09-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Toranzo et al. | Present and future of aquaculture vaccines against fish bacterial diseases | |
| DK176668B1 (da) | Streptococcus phocae vaccine | |
| Dalsgaard | Virulence mechanisms in Cytophaga psychrophila and other Cytophaga-like bacteria pathogenic for fish | |
| EP2271663B1 (en) | Novel avian astrovirus | |
| Woodbury | A review of the possible mechanisms for the persistence of foot-and-mouth disease virus | |
| FROST et al. | Vaccination of Atlantic salmon with recombinant VP2 of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV), added to a multivalent vaccine, suppresses viral replication following IPNV challenge | |
| Wahli et al. | Flavobacteria, a never ending threat for fish: a review | |
| WO2001038497A1 (fr) | Pneumovirus du canard et vaccins correspondants | |
| Toranzo et al. | Vibriosis: Vibrio anguillarum, V. ordalii and Aliivibrio salmonicida. | |
| Austin et al. | Characteristics of the pathogens: Gram-negative bacteria | |
| US20110171253A1 (en) | Novel astrovirus | |
| WO2007138036A1 (en) | Vaccine against rickettsia-like organisms | |
| EP2912198B1 (en) | Immunogenic composition against aeromonas hydrophila | |
| Cox | Salmonella enteritidis: the egg and I | |
| Diab et al. | Cross-protection of Listonella anguillarum and Vibrio alginolyticus FKC bacterins to control vibriosis in European sea bass (Dicentrarchus labrax) | |
| JP2011506577A (ja) | 魚類ワクチン | |
| US8637049B2 (en) | Attenuated live vaccines for aquatic animals | |
| TW200843789A (en) | Vaccine against fish-pathogenic bacteria | |
| KR20010098698A (ko) | 어류용의 이리도바이러스 감염증, 연쇄구균 감염증, 및이들의 합병증에 대한 혼합 불활성화 백신 | |
| JP7021283B2 (ja) | 魚類の連鎖球菌病予防用新規血清型ワクチン | |
| EP4424815A1 (en) | Immunogenic composition for the prevention of marine tenacibaculosis caused by tenacibaculum maritimum and tenacibaculum soleae in fish, production method and use | |
| Wakabayashi et al. | Diseases caused by bacterial pathogens in inland water | |
| Rodgers | Epidemiological studies of the bacterial fish pathogen Yersinia ruckeri | |
| Kuzyk | Development of an efficacious recombinant vaccine for the obligate intracellular salmonid pathogen Piscirickettsia salmonis | |
| Atterbury | Bacteriophage control of campylobacters in retail poultry |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |
Ref document number: DK |