DK169031B1 - 1,2,3,4-Tetrahydro-3-carbamoyl-2-thioxo/oxo-5-pyrimidencarboxylsyre-derivater og farmaceutiske præparater indeholdende sådanne - Google Patents

Description

i DK 169031 B1

Den foreliggende opfindelse angår 1,2,3,4-tetrahydro-

3-carbamoyl-2-thioxo/oxo-5-pyrimidin-carboxylsyre-derivater, som er ejendommelige ved den almene formel I

5 O *4 0 ti « RR..N-C-N \—C-OR, 1 i 1 3 (i)

H

10 eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, hvori X betyder oxygen eller svovl, R betyder hydrogen eller alkyl, og R^ betyder hydrogen, alkyl, phenylalkyl, -CH2-(CH2)n-Y2 eller -CH2-(CH2)p-Y3 15 eller R og R^ sammen med det nitrogenatom, hvortil de er bundet, betyder piperidinyl, R2 betyder alkyl, R3 betyder hydrogen, alkyl eller -CH2-(CH2)p-Y3, R4 betyder benzoxadiazolyl, phenyl eller phenyl sub-20 stitueret med en, to eller tre nitro- eller trifluormethyl-grupper, Y2 betyder alkoxycarbonyl, Y3 betyder amino eller amino substitueret med alkyl eller phenyl-(CH2)ra-, og m, n og p hver især betyder 0, 1 25 eller 2.

Opfindelsen angår også et farmaceutisk præparat egnet til behandling af coronarsygdomme, hvilket præparat er ejendommeligt ved, at det indeholder en effektiv mængde af en forbindelse med den almene formel I 30

O ?4 O

RR-N-C-N^"\—C-OR, L JL (I>

35 H

DK 169031 B1 2 eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, hvori X betyder oxygen eller svovl, R betyder hydrogen eller alkyl, og betyder hydrogen, alkyl, phenylalkyl, -CH2-(CH2)n-Y2 eller -CH2-(CH2)p-Y3 5 eller R og R^ sammen med det nitrogenatom, hvortil de er bundet, betyder piperidinyl, R2 betyder alkyl, R3 betyder hydrogen, alkyl eller -CH2-(CH2)p-Y3, R4 betyder benzoxadiazolyl, phenyl eller phenyl sub-10 stitueret med en, to eller tre nitro- eller trifluormethyl-grupper, Y2 betyder alkoxycarbonyl, Y3 betyder amino eller amino substitueret med alkyl eller phenyl-(CH2)m-, og m, n og p hver især betyder 0, 1 15 eller 2, samt en farmaceutisk acceptabel bærer for denne.

Udtrykkene alkyl og alkoxy betyder både ligekædede og forgrenede grupper. Grupper med 1 til 8 carbonatomer foretrækkes.

20 Forbindelserne med formlen I og deres farmaceutisk acceptable salte er cardiovaskulære midler. De fungerer som vasodilatorer, der blokerer calciumoptagelsen, og er særlige nyttige som antihypertensive midler. Ved indgivelse af et præparat, der indeholder en af forbindel-25 serne ifølge opfindelsen eller en kombination af flere kan en hypertensiv pattedyrpatients, f.eks. et menneskes, blodtryk således sænkes. En enkelt dosis eller to til fire adskilte daglige doser på grundlag af ca. 0,1 til 100 mg pr. kg legemsvægt pr. dag, fortrinsvis fra ca.

30 1 til ca. 50 mg pr. kg pr. dag er passende til sænkning af blodtryk. Stoffet indgives fortrinsvis oralt, men parenterale indgiveisesveje såsom subcutan, intramus-kulær eller intravenøs kan også anvendes.

Det menes, at forbindelserne ifølge opfindelsen 35 foruden at være nyttige som hypotensive midler også kan være nyttige som antiarrhytmiske midler, antiangina-mid- 0 3 DK 169031 B1 ler, antiiskæmiske midler, antifibrillatoriske midler og antiasthmatiske midler og til begrænsning af myocardial infarkt.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan også udformes 5 til brug som hypotensive midler i kombination med et diuretisk eller et β-adrenergisk middel eller en inhibitor for angiotensinomdannelsesenzymet. Egnede diuretika omfatter thiazid-diuretika såsom hydrochlorthiazid og bendroflumethiazid, egnede β-adrenergiske midler omfatter 10 nadolol, og egnede inhibitorer af angiotensinomdannelsesenzymet omfatter captopril.

Forbindelserne med formlen I kan formuleres til anvendelse ved sænkning af blodtryk i præparater såsom tabletter, kapsler eller eliksirer til oral indgivelse 15 eller i sterile opløsninger eller suspensioner til parenteral indgivelse. Omkring 10 til 500 mg af en forbindelse med formlen I blandes med fysiologisk acceptabelt medium, bærer, strækkemiddel, bindemiddel, konserveringsmiddel, stabilisator, aromastof osv. i en enhedsdosisform som 20 påkrævet i anerkendt farmaceutisk praksis. Mængden af aktivt stof i disse midler eller præparater er sådan, at der opnås en passende dosering inden for det angivne område.

Forbindelserne med formlen I, hvori X betyder 25 svovl, kan fremstilles ved omsætning af en ketoester--forbindelse med formlen II

Lr3

30 R4-CH=C

V* o med et S-(phenylmethyl)isothiourinstof med formlen III 35 DK 169031 B1 4 J-\ /¾ Z3\-/ “2'5Λ

λ XNH

5

eller et salt deraf. I formlen III og i hele beskrivelsen betyder Z3 hydrogen eller methoxy. Reaktionsblandingen opvarmes i nærværelse af natriumacetat, hvilket giver en tautomer blanding af forbindelser med formlerne IV

10 ί4 f4 -I-O-R HN^N-0-O-R, L 3-¾ ^ 3-¾

15 ® ziØ<a2's N

Omsætning af en tautomerblånding med formlen IV med phosgen i nærværelse af en organisk base efterfulgt 20 af omsætning med en amin med formlen V

RR^NH ,

hvori dog hverken R eller R^ betyder hydrogen, giver den 25 tilsvarende forbindelse med formlen VI

R4 0 I 0 RR1N-C-N/X-!Ur3 vO-^" ' hvori hverken R eller R^ betyder hydrogen.

De forbindelser med formlen VI, hvori en eller begge 35 af R og R^ betyder hydrogen, kan fremstilles ved omsætning af en tautomerblanding med formlen IV med et isocyanat

med formlen VII

0 5 DK 169031 B1 R1-N=C=0 5 En forbindelse med formlen VI, hvori Z^ betyder hy drogen, kan omdannes til den tilsvarende forbindelse med formlen I, hvori X betyder svovl, ved behandling med brom-trimethylsilan. En forbindelse med formlen VI, hvori Z3 betyder methoxy, kan omdannes til den tilsvarende forbin-10 delse med formlen I, hvori X betyder svovl, ved behandling med trifluoreddikesyre og ethanthiol.

Forbindelser med formlen IV kan fremstilles i ikke--racemisk form ved omsætning af en forbindelse med formlen IV med phosgen og en ikke-racemisk alkohol (Rx-0H) til 15 en forbindelse med formlen VIII

J Λ_8

Rx-0-C-N jp-C-0-R3 20 zrQ^2-s^l,'X:^'h hvori Rx betyder resten af en chiral alkohol.

Ved behandling af en forbindelse med formlen VIII 25 med bromtrimethylsilan (når betyder hydrogen) eller med trifluoreddikesyre og ethanthiol (når Z^ betyder methoxy) fås den tilsvarende forbindelse med formlen IX

30 z*-ol-X-~ L-r, S H «2 35 De diastereomere af forbindelserne med formlerne VIII og IX kan adskilles ved krystallisation eller chromatografi.

6 DK 169031 B1

O

Behandling af de rensede diastereomere af en forbindelse med formlen IX med natriummethanolat efterfulgt af p-methoxybenzylchlorid giver den tilsvarende forbindelse med formlen IV i ikke-racemisk form, og disse ikke-5 -racemiske forbindelser kan omsættes som beskrevet ovenfor til at give de ikke-racemiske produkter med formlen I, hvori X betyder svovl.

Forbindelserne med formel I, hvori X betyder oxygen, kan fremstilles ved opvarmning af en ketoester med form- 10 len II med O-methylisourinstof /NH2 (CHo-0-<X ) eller et salt deraf i nærværelse af 3 Sjb

15 natriumacetat eller natriumbicarbonat til dannelse af en tautomerblånding af forbindelser med formlerne X

F* Π h g · N -C-0R3 HN -C-OIL· 20 i j) /V\ ch3-o h ^ ch3-o r2 .

Omsætning af en tautomerblånding med formlen X med

25 phosgen i nærværelse af en organisk base efterfulgt af omsætning med en amin med formlen V (R og har deres bredeste betydninger) giver den tilsvarende forbindelse med formlen XI

30 ' f? ?4 0 / '»' \ æ3-° 35 0 7 DK 169031 B1

Alternativt kan de forbindelser med formlen XI/ hvori R betyder hydrogen, fremstilles ved omsætning af en tautomerblanding med formlen X med et isocyanat med formlen VII.

5 En forbindelse med formel XI kan omdannes til den tilsvarende forbindelse med formlen I, hvori X betyder oxygen, ved behandling med saltsyre.

Alternativt kan en tautomerblanding med formlen X omsættes med p-nitrophenylchlorformiat i nærværelse af 10 en organisk base, hvilket giver en forbindelse med formlen XII

o J* { s-”* CH30

Ved behandling af en forbindelse med formlen XII 20 med en syre efterfulgt af omsætning med en amin med formlen V (R og R^ har deres bredeste betydning) fås den tilsvarende forbindelse med formlen I.

Den ikke-racemiske form af en forbindelse med formlen I, hvori X betyder oxygen, kan fremstilles ved, at 25 der fremstilles en blanding af diastereomere former af en forbindelse med formlen XI ved anvendelse af en optisk aktiv amin, f.eks. α-methylbenzylamin. De diastereomere kan adskilles ved anvendelse af gængs teknik såsom chro-matografi og krystallisation. De adskilte diastereomere 30 kan omdannes til den ikke-racemiske form af en forbindelse med formlen X ved behandling med natriummethoxid. Den ikke-racemiske form af en forbindelse med formlen X kan anvendes til fremstilling af den tilsvarende ikke-racemiske form af en forbindelse méd formlen I via den ikke-35 -racemiske form af et mellemprodukt med formlen XI.

0 8 DK 169031 B1

Alternativt kan for de forbindelser med formlen 1/ hvori X betyder oxygen, og R og R^ er afledet af optisk aktive aminer, de diastereomere med formel XI omdannes til forbindelser med formlen I, og de optisk aktive for-5 bindeiser kan adskilles ved chromatografi eller krystallisation.

Alternativt kan den ikke-racemiske form af en forbindelse med formlen I, hvori X betyder oxygen, fremstilles ved, at en ikke-racemisk forbindelse med formlen 10 iv omdannes til den tilsvarende ikke-racemiske forbindelse med formlen VI ved anvendelse af de ovenfor beskrevne metoder. En ikke-racemisk forbindelse med formlen VI kan omsættes med et oxidationsmiddel, f.eks. m-chlor-perbenzoesyre, hvilket giver en ikke-racemisk forbindel-15 se med formel I, hvori X betyder oxygen.

En alternativ fremgangsmåde til fremstilling af den ikke-racemiske form af en forbindelse med formel I, hvori X betyder oxygen, og R og R^ begge betyder hydrogen, omfatter omsætning af den tilsvarende ikke-racemiske forbin-20 delse med formel I, hvori R betyder hydrogen, og R^ betyder 1-phenylethyl, med hydrogenbromid og eddikesyre eller med trifluoreddikesyre.

De forbindelser med formlen I, herunder adskilte enantiomere deraf, hvori X betyder svovl, kan alternativt 25 fremstilles ved, at et raethoxyholdigt mellemprodukt med formlen X (racemisk eller ikke-racemisk) omdannes til det tilsvarende thio-mellemprodukt (racemisk eller ikke--racemisk) med formlen IV, og der derefter gås frem som beskrevet ovenfor.

30 I de tilfaside, hvor de ovenfor beskrevne reaktanter indeholder reaktive substituenter, der ikke skal deltage i reaktionen, kan det være nødvendigt først at beskytte disse funktionelle grupper, udføre den ønskede reaktion og derefter fjerne beskyttelsesgruppen.

35 De forbindelser med formlen I, der indeholder en basisk eller sur gruppe, danner syreadditionssalte og DK 169031 B1 0 2 4 krystallisation fra methylenchlorid/isopropylether gav 1,22 g farveløse krystaller med smeltepunkt 153-155°C.

TLC (5% ethylacetat/methylenchlorid) enkelt plet, = 0,26.

5 Analyse beregnet for ci8H22N4°6: C 55,37, H 5,68, N 14,35 Fundet: C 55,33, H 5,66, N 14,31.

10 Eksempel 11 3-[(Dimethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl--4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre_ A) 1,4-Dihydro-2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5- -pyrimidincarboxylsyre-tert.butylester_ 15 En blanding af 6,80 g (23,3 mmol) 2-[(3-nitrophe- nyl)methylen]-3-oxobutansyre-tert.butylester, 5,22 g (30,3 mmol) O-methylisourinstofhydrogensulfat og 5,87 g (69,9 mmol) natriumbicarbonat i 35 ml dimethyl formamid omrørtes ved stuetemperatur natten over under argon.

20 Efter 23 timer ved stuetemperatur opvarmedes blandingen til 60°C (oliebad) i 5,5 timer. Derpå deltes den mellem ethylacetat og 5% natriumbicarbonat. Den organiske fase blev vasket adskillige gange med vand, vasket med mættet natriumchlorid og tørret med kaliumcarbonat. Inddampning 25 gav den rå, i overskriften angivne forbindelse som 9,93 g lysebrun olie.

B) 3-[(Dimethylaraino)carbonyl] -1,2,3,4-tetrahydro-6--methyl-4- (3-nitrophenyl )-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre- 30 -tert.butylester_

En opløsning af 1,30 g (3,05 mmol) 1,4-dihydro- -2-methoxy-6-methyl-4- (3-nitrophenyl) -5-pyrimidincarb- oxylsyre-tert.butylester og 1,27 ml (9,15 mmol) tør tri- ethylamin i 10 ml methylenchldr id i isbad under argon be-35 23 DK 169031 B1 0 delvis. Remanensen deltes mellem chloroform og vand. Den organiske fase blev vasket med mættet natriumchlorid, tørret med magnesiumsulfat og inddampet. Remanensen krystalliseredes fra methylenchlorid/isopropylether. Det 5 faste stof, der fældede ud, omkrystalliseredes, hvilket gav den i overskriften angivne forbindelse som 1,84 g farveløst, elektrostatisk fast stof med smeltepunkt 184--185°C. TLC (5% ethylacetat/methylenchlorid) enkelt plet,

Rf = 0,39.

10 Analyse beregnet for C23H24N4°6: C 61,05, H 5,35, N 12,38 Fundet: C 60,97, H 5,36, N 12,33 15 Eksempel 10 3-[(Ethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl- -4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidin-carboxylsyre-l- -methylethylester_

En opløsning af 2,00 g (6,00 mmol) 1,4-dihydro- 20 -2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarb- oxylsyre-l-methylethylester, jfr. eksempel 2A, og 2,5 ml (18 mmol) triethylamin i 18 ml acetonitril i isbad under argon behandledes ved hjælp af en sprøjte med en 1,3M phos- genopløsning i toluen. Reaktionsblandingen omrørtes ved 25 0°C i 3,0 timer og behandledes derpå med 0,36 ml (9,0 mmol) 70% vandig ethylaminopløsning. Efter omrøring i isbadet i 3,0 timer inddampedes reaktionsblandingen. Remanensen blev optaget i tetrahydrofuran/methanol (24 ml af hver) og behandlet med 4,0 ml 5N saltsyre. Efter omrøring i 30 1 time ved omgivelses temperatur blev reaktionsblandingen delvis inddampet og reaktionen derpå afbrudt med mættet natriumbicarbonat. Den vandige fase blev ekstraheret med ethylacetat og vasket med mættet natriumchlorid.· Flash- -chromatografi (5% ethylacetat i methylenchlorid) og 35 22 DK 169031 B1 0

Eksempel 9 1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-3--[[(phenylmethyl)amino]carbonyl]-5-pyrimidinearboxyl- syre-l-methylethylester_ 5 A) 1,6-Dihydro-2-methoxy-4-methyl-6-(3-nitrophenyl)-1--[[(phenylmethyl) amino]carbonyl]-5-pyrimidincarboxyl- syre-l-methylethylester_

En opløsning af 5,00 g (15,0 mmol) 1,4-dihydro-10 -2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarb- oxylsyre-l-methylethylester, jfr. eksempel 2A, og 6,27 ml (45 mmol) tør triethylamin i 45 ml methylenchlorid i isbad under argon behandledes ved hjælp af en sprøjte med 15,0 ml (18,0 mmol) 1,2M phosgenopløsning i ben-15 zen. Efter 4,0 timers omrøring ved 0°C behandledes reaktionsblandingen med 2,46 ml (22,5 nmol) benzylamin og omrørtes ved omgivelsestemperatur natten over. Reaktionsblandingen behandledes med vand og mættet natriumchlorid. De organiske faser inddampedes og flash-chromatograferedes 20 (3% ethylacetat i methylenchlorid), hvilket gav den i overskriften angivne forbindelse som 6,20 g gult skum.

TLC (5% ethylacetat/raethylenchiorid) stor plet,

Rf = 0,70.

25 B) 1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo- “3-[[(phenylmethyl)amino]carbonyl]-5-pyrimidincarb- oxylsyre-l-methylethylester_

En opløsning af 3,00 g (6,45 mmol) 1,6-dihydro--2-methoxy-4-methyl-6-(3-nitrophenyl)-1-[[(phenylmethyl)-30 amino]carbonyl]-5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethyl- ester i 50 ml tetrahydrofuran og 25 ml methanol behandledes med 6,0 ml IN saltsyre (til pH 1) og omrørtes ved stuetanperatur i 1 time. Reaktionen blev afbrudt med mættet natriumbicarbonat, og reaktionsblandingen inddampedes 35 21 DK 169031 B1 0

Eksempel 8 1,2,3,4-Tetrahydro-6“methyl-3-t[(1-methylethyl)amino]-carbonyl]-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxyl- syre-l-methylethylester_ 5 En opløsning af 2,10 g (6,3 mmol) 1,4-dihydro- -2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyriraidincarb-oxylsyre-l-methylethylester, jfr. eksempel 2A, og 2,64 ml (19 mmol) triethylamin i 19 ml methylenchlorid ved 0°C under argon behandledes ved hjælp af en sprøjte 10 med 6,3 ml (7,6 mmol) 1,2M phosgenopløsning i benzen.

Efter omrøring ved 0°C i 3,5 timer blev reaktionsblandingen behandlet med 0,81 ml (9,5 mmol) isopropylamin og omrørt ved stuetemperatur under argon natten over. Reaktionsblandingen blev derpå fortyndet med methylen-15 chlorid, vasket med vand og mættet natriumchlorid og inddampet. Remanensen blev optaget i tetrahydrofuran/me-thanol (18 ml af hver), behandlet med 10 ml IN saltsyre (til pH 1) og omrørt ved stuetemperatur i 2 timer. Reaktionsblandingen inddampedes derpå delvis og deltes 20 mellem ethylacetat og vand. Den organiske fase blev vasket med mættet natriumbic arbo nat og mættet natriumchlorid, tørret med magnesiumsulfat og inddampet. Remanensen krystalliseredes fra isopropylether/hexaner, hvilket gav 2,16 g (85%) gule krystaller. Dette materiale blev om- ΛΓ krystalliseret fra methylenchlorid/isopropylether, hvilket gav 1,759 g farveløse krystaller med smeltepunkt 145-146°C. TLC (5% ethylacetat/methylenchlorid) enkelt plet,

Rf = 0,49.

Analyse beregnet for C19H2AV 30 C 56,43, H 5,98, N 13,85 Fundet: C 56,18, H 5,89, N 13,45 35 DK 169031 B1 0 20

Eksempel 7 1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-3--(1-piperidinylcarbonyl)-5-pyrimidincarboxylsyre-l-me- thylethylester_ 5 En opløsning af 3#50 g (10,5 mmol) 1,4-dihydro- -2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarboxyl-syre-l-methylethylester, jfr. eksempel 2A, og 4,39 ml (31,5 mmol) triethylamin i 33 ml methylenchlorid ved 0°C under argon behandledes ved hjælp af en sprøjte med 10 10,5 ml (12,6 mmol) 1,2M phosgenopløsning i benzen. Efter omrøring ved 0°C i 3,5 timer behandledes reaktionsblandingen med 1,56 ml (15,7 mmol) piperidin og omrørtes ved stuetemperatur natten over under argon. Reaktionsblandingen blev derpå fortyndet med methylenchlorid, vasket 15 med vand og inddampet. Remanensen flash-chromatograferedes, hvilket gav det ønskede mellemprodukt som 4,94 g gult skum. Dette skum blev optaget i 50 ml tetrahydrofuran og 30 ml methanol og behandlet med 15 ml IN saltsyre (til pH 1).

Efter omrøring ved stuetemperatur i 2,5 timer inddampedes 20 reaktionsblandingen delvis. Remanensen blev fortyndet med ethylacetat, vasket med mættet natriumbicarbonat og mættet natriumchlorid, tørret med magnesiumsulfat og inddampet. Remanensen krystalliseredes fra methylenchlorid/isopropyl-ether, hvilket gav 4,12 g lysegult fast stof. Dette mate-25 riale omkrystalliseredes, hvilket gav den i overskriften angivne forbindelse som 2,75 g farveløse krystaller med smeltepunkt 164-165°C. TLC (15% acetone/methylenchlorid) enkelt plet, r = o,45.

Analyse beregnet for C21 826N4°6! 30 C 58,60, H 6,09, N 13,02 Fundet: C 58,61, H 6,00, N 12,91.

4 35 o 19 DK 169031 B1 B) 3-(Aminoc arbony1 )-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl- 4 --(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l- -methylethylester_

En opløsning af 2,82 g (7,49 mmol) 1-carb-5 amoyl-1,6-dihydro-2-methoxy-4-methyl-6- (3-nitrophenyl)- -5-pyrimidincarboxyl sy re-1-me thyl ethyl ester i 30 ml tetrahydrofuran og 15 ml methanol blev behandlet med 10 ml IN saltsyre (til pH 1) og omrørt ved stuetemperatur i 2,0 timer. Reaktionen blev afbrudt med mættet 10 natriumbicarbonat, og reaktionsblandingen inddampedes delvis. Blandingen blev fortyndet med ethylacetat, vasket med vand og mættet natriumchlorid, tørret med kaliumcarbonat og inddampet. Remanensen krystalliseredes fra ethylacetat, hvilket gav 1,44 g farveløse 15 krystaller. Omkrystallisation fra ethylacetat kunne ikke fjerne urenheden. Omkrystallisation fra acetonitril fjernede urenheden, men udbyttet var ringe (0,58 g). Forbindelsen blev derfor samlet igen og flash-chromatogra-feret ved anvendelse af 15% acetone og methylenchlorid.

20 Findeling med ether gav den i overskriften angivne for bindelse som 1,242 g farveløse krystaller med smeltepunkt 206-207°C. TLC (15% acetone/methylenchlorid) enkelt plet, R^ = 0,50. TLC (methanol/methylenchlorid) enkelt plet R^ = 0,38.

25 Analyse beregnet for C16H18N4°6: C 53,04, H 5,01 N 15,46 Fundet: C 52,78, H 4,90, N 15,24.

30 35 o 18 DK 169031 B1

Analyse beregnet for C17H2qN406: C 54,25, H 5,36, N 14,89 Pundet: C 54,40, H 5,23, N 14,72.

5

Eksempel 6 3-(Aminocarbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4-(3--nitrophenyl)-2-oxo-5-pyr imid inc arboxy1syre-1--methylethylester_ 10 A) 1-Carbamoyl-l,6-dihydro-2-methoxy-4-methyl-6--(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarboxylsyre-l-methyl- ethylester_._

En opløsning af 5,00 g (15,0 mmol) 1,4-dihy-15 dro-2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidin- carboxylsyre-l-methylethylester, jfr. eksempel 2A, og 5,88 g (45,0 mmol) triethylamin i 45 ml methylen-chlorid ved 0°C under argon blev ved hjælp af en sprøjte behandlet med 15,0 ml (18,0 mmol) 1,2M phos-20 genopløsning i benzen. Efter omrøring ved 0°C i 3,5 ti mer behandledes reaktionsblandingen med 1,52 ml (22,5 mmol) koncentreret ammoniumhydroxid. Efter 2 timer ved stuetemperatur behandledes- reaktionsblandingen med yderligere 0,5 ml (7,5 mmol) koncentreret ammonium-25 hydroxid og omrørtes ved stuetemperatur natten over.

Reaktionsblandingen blev derpå fortyndet med methylen-chlorid og vasket med vand og mættet natriumchlorid.

Den organiske fase blev inddampet og flash-chromato-graferet, hvilket gav den i overskriften angivne for-30 bindelse som 2,83 g af et sprødt gult skum.

35 17 DK 169031 B1 0

Analyse beregnet for C24H26N4°6: C 61,79, H 5,62, N 12,01 Fundet: C 61,95, H 5,64, N 11,91.

5

Eksempel 5 1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-3-[(methyl amino)carbonyl]--4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l- -methylethylester_ 10 En opløsning af 5,00 g (15,0 mmol) 1,4-di- hydro-2-methoxy-6-methyl-4- (3-nitrophenyl) -5-pyrimidin-carboxylsyre-l-methylester, jfr. eksempel 2A, og 5,9 ml (45 mmol) tør triethylamin i 45 ml destilleret methy-lenchlorid ved 0°C under argon blev behandlet dråbevis 15 gennem sprøjte med 15,0 ml (18,0 mmol) 1,2M phosgen i benzen. Efter omrøring ved 0°C i 3,5 timer behandledes reaktionsblandingen med 1,94 ml (22,5 mmol) 40% vandig methylamin. Efter 0,75 time blev reaktionen afbrudt med 15 ml IN saltsyre (til pH 1), og reaktionsblan-20 dingen blev delvis inddampet. Den resterende blanding blev fortyndet med 50 ml tetrahydrofuran og 25 ml methanol og behandlet med yderligere 15 ml IN saltsyre.

Efter 2 timers omrøring ved stuetemperatur blev reaktionsblandingen delvis inddampet. Derpå ekstraheredes 25 den med ethylacetat. De samlede organiske faser vaskedes med mættet natriumbicarbonat og mættet natriumchlorid og inddampedes. Den organiske remanens blev krystalliseret fra varm ethylacetat/hexaner, hvilket gav 3,47 g hvide krystaller. Dette materiale blev krystalliseret 30 fra methylenchlorid/isopropylether, hvilket gav 3,29 g farveløse krystaller med smeltepunkt 204-205°C. Omkrystallisation fra ethylacetat/hexaner gav 2,588 g farveløse krystaller med smeltepunkt 205-206°C. TLC (5% methanol /methylenchlorid) enkelt plet, R- = 0,45; frem- kaldt med vanillin og varme.

35 o DK 169031 B1 16 oxylsyre-l-methylethylester, jfr. eksempel 2A, og 6/3 ml (45 mmol) tør triethylamin i 10 ml methylenchlo-rid i isbad under argon blev behandlet dråbevis gennem en sprøjte med 9,2 ml (12 mmol) 1,3M phosgenopløsning 5 i benzen. Den resulterende blanding omrørtes i badet i 20 timer. Efter afkøling til 0°C med et frisk isbad blev blandingen behandlet med 1,95 ml (15 mmol) ben-zylmethylamin og omrørt ved stuetemperatur natten over. Blandingen blev derpå fortyndet med methylenchlorid, 10 vasket med vand og mættet natriumchlorid, tørret med kaliumcarbonat og inddampet. Remanensen blev passeret gennem kort kiselgelpude, idet der elueredes med 20% acetone/hexaner. Fraktionerne samledes, inddampedes og findeltes med isopropylether, hvilket gav 4,11 g hvide 15 krystaller med smeltepunkt 145-146°C (bliver blødere ved 140°C).

B) 1,2,3 ,4-Tetrahydro-*6-methyl-3- [ [methyl (phenylmethyl) -amino] carbonyl] -4- (3-nitrophenyl) -2-oxo-5-pyrimidincarb- 20 oxylsyre-1-methylethylester_

En suspension af 1,81 g (3,92 mmol) 1,6-dihydro--1- [ [methyl (phenylmethyl) amino] carbonyl ] -2-methoxy-4--methyl-6- (3-nitrophenyl) -5-pyrimidincarboxylsyre-l--me thyl ethyl es ter i tetrahydrofuran/methanol (40 ml af 25 hver) behandledes med 4,0 ml 5N saltsyre. Den dannede opløsning blev omrørt ved stuetemperatur i 1,5 time, delvis inddampet og delt mellem mættet natriumbicarbo-nat og chloroform. Den organiske fase blev vasket med mættet natriumchlorid, tørret med magnesiumsulfat og 30 inddampet. Remanensen krystalliseredes fra methylen- chlorid/isopropylether, hvilket gav 1,684 g hvide krystaller med smeltepunkt 159-161°C. TLC (7% methanol/-methylenchlorid) enkelt forlænget plet, = 0,54.

35 15 DK 169031 B1 0

De samlede organiske ekstrakter blev tørret med magnesiumsulfat og inddampet i vakuum, hvilket gav 0,6 g i det væsentlige homogent produkt.

5 C) 3-[(Dimethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro-6- -methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-thioxo-5-pyrimidincarb- oxylsyre-ethylester_

En opløsning af 1,26 g (2,46 mmol) 1,6-dihy-dro-2- [ [ (4-methoxyphenyDiethyl] thio] -4-methyl-l-10 -[ (dimethylamino)carbonyl] -6- (3-nitrophenyl)-5-py- rimidincarboxylsyre-ethylester i tørt methylenchlorid under argon ved stuetemperatur blev behandlet med 0,55 ml (0,82 g, 7,18 mmol) trifluoreddikesyre og 0,36 ml (0,30 g, 4,78 mmol) ethanthiol. Reaktionen 15 var afsluttet i løbet af 2 timer. Flygtige bestand dele blev afdampet i vakuum, og remanensen gav efter findeling med varm isopropylether 0,82 g materiale. Opløsning af dette materiale i chloroform og filtrering til fjernelse af nogle mørke, uopløselige 20 dele gav efter afsluttende findeling med isopropyl ether 0,80 g homogent produkt.

Analyse beregnet for ci7H20N4°5S: C 52,03, H 5,14, N 14,28, S 8,17 Fundet: 25 C 52,01, H 5,19, N 14,23, S 7,93.

Eksempel 4 1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-3- [ [methyl(phenylmethyl)-amino]carbonyl]-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidin-30 carboxylsyre-l-methylethylester_ A) 1,6-Dihydro-l- [ [methyl (phenylmethyl) amino] -carbonyl] -2-methoxy-4-methyl-6- (3-nitrophenyl)-5-pyrimi- dincarboxylsyre-l-methylethylester_ 35 En opløsning 3,34 g (10 mmol) l,4-dihydro-2- -methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidinearb- DK 169031 B1 14 0

Eksempel 3 3-[(Dimethylamino)carbonyl]-l,2,3,4-tetrahydro-6-me-thyl-4-(3-nitrophenyl)-2-thioxo-5-pyrimidincarboxyl- syre-ethylester_ 5 A) 1,4-Dihydro-2-[[(4-methoxyphenyl)methyl]thio] - -6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarboxylsyre--ethylester_

En blanding af 13,58 g 2-[(3-nitrophenyl)-10 methylen]-3-oxobutansyre-ethyleSter, 12,0 g S-[(4-methoxyphenyl)methyl]isothiourinstof-hydrochlo-rid og 4,18 g (0,051 mol) natriumacetat i 90 ml dime-thylformamid blev omrørt og opvarmet til 70°C i 4 timer. Efter afkøling tilsattes ether efterfulgt af 15 vask med vand, natriumbicarbonat og saltvand. Den tør rede opløsning blev iriddampet, hvilket gav en olie, der behandledes med isopropylether, hvorved der dannedes 18,8 g flødefarvet, fast stof med smeltepunkt 95-97°C.

20 B) l,6-Dihydro-2-[[(4-methoxyphenyl)methyl]thio]-4- -methyl-1-[(dimethyl amino)carbonyl]-6-(3-nitrophenyl)--5-pyrimidincarboxylsyre-ethylester_

En opløsning af 0,5 g (1,1 mmol) 1,4-dihydro-25 -2-[[(4-methoxyphenyl)methyl]thio]-6-methyl-4-(3-nitro phenyl) -5-pyrimidincarboxylsyre-ethylester i 10 ml tør tetrahydrofuran under argon ved 0-5°C blev behandlet med 1,0 ml (12,6 mmol) pyridin og derpå med 1,16 ml (1,47 mmol) 12,5% phosgen i benzen. Efter 0,5 time 30 ved 0-5°C tilsattes 1 ral 40% vandig dimethylamin (over skud) . Reaktionen var afsluttet inden for 0,5 time.

Blandingen blev fortyndet med ethylacetat og vasket med ; IN saltsyre, vand og mættet saltvand. De vandige vaskevæsker blev tilbageekstraheret med frisk ethylacetat. j 35 0 13 DK 169031 B1 med 9,2 ml (12 ramol) 1,3M phosgenopløsning i benzen i løbet af 3-5 minutter. Efter omrøring ved 0°C i 1,5 timer blev reaktionsblandingen behandlet med 3,3 ml (15 mmol) 40%'s vandig dimethylamin, dækket 5 med et låg og omrørt ved stuetemperatur i ca. 2 1/2 dag.

Reaktionsblandingen blev derpå inddampet og delt mellem ethylacetat og vand. Den organiske fase blev vasket med mættet natriumchlorid, tørret med kaliumcarbonat og inddampet, hvilket gav 4,75 g af den i overskriften 10 angivne forbindelse (rå) som en brun olie.

C) 3-[(Dimethylamino)carbonyl]-l,2,3,4-tetrahydro-6--methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidinearboxy1- syre-l-methylethylester_ 15 En opløsning af 2,27 g rå 1-[(dimethylamino)- carbonyl]-1,6-dihydro-2-methoxy-4-methyl-6-(3-nitrophenyl )-5-pyr imid incarboxylsyre-1-methylethylester i tetrahydrofuran/methanol (20 ml af hver) blev behandlet med 3,0 ml 5N saltsyre (til pH 1) og omrørt ved 20 stuetemperatur i 1,0 time. Reaktionsblandingen blev der på inddampet og delt mellem ethylacetat og vand. Den organiske fase blev vasket med mættet natriumchlorid, tørret med magnesiumsulat og inddampet. Remanensen krystalliseredes fra methylenchlorid/isopropylether, 25 hvilket gav 1,55 g af den i overskriften angivne for bindelse som farveløse krystaller med smeltepunkt 165-166°C.

Analyse beregnet for C]_gH22^4^6: C 55,38, H 5,68, N 14,35 30 Fundet: C 55,44, H 5,70, N 14,27.

35 0 DK 169031 B1 12 i overskriften angivne forbindelse med smeltepunkt 244-246°C.

Analyse beregnet for Clg H18N4°5S: C 50,79, H 4,79, N 14,81, S 8,47 5 Fundet: C 50,82, H 4,86, N 14,54, S 8,54.

Eksempel 2 3-[(Dimethyl amino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-10 -4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidin-carboxylsyre- -1-methylethylester_ A) 1,4-D ihydro-2-methoxy-6-methyl-4-(3-ni trophenyl)-5- -pyr imid incarboxylsyre-1-methy1ethyles ter_ 15 En reaktionsblanding, der indeholdt 10,0 g (36,0 mraol) 2-[(3-nitrophenyl)methylen]-3-oxobutansyre--1-methylethylester, 8,40 g (108 mmol) natriumbicarbonat og 8,06 g (46,8 mmol) O-methylisourinstof-hydrogen-sulfat i 54 ml dimethylformamid blev opvarmet til 60°C 20 under argon i ca. 2 1/2 dag. Reaktionsblandingen blev fortyndet med vand og ekstraheret med ethylacetat. Den organiske fase blev vasket med vand (seks gange) og mættet natriumchlorid, tørret med kaliumcarbonat og inddampet. Remanensen blev passeret gennem en kort kiselgel-25 pude og krystalliseret fra isopropylether/hexaner, hvil ket gav 8,04 g af den i overskriften angivne forbindelse som gule krystaller.

B) 1-[(Dimethylamino)carbonyl]-1,6-dihydro-2-methoxy- 30 -4-methyl-6-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarboxylsyre-l- -methylethylester_

En opløsning af 3,34 g (10,0 mmol) 1,4-dihydro--2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarb-oxylsyre-1-methylethylester og 6,3 ml (45 mmol) de-35 stilleret triethylamin i 10 ml methylenchlorid i isbad under argon blev behandlet dråbevis gennem en sprøjte o 11 DK 169031 B1 C) I-[(Ethylamino)carbonyl]-l,6-dihydro-2-[[(4-meth-oxyphenyl) methyl]thio]-4-methyl-6-(3-nitropheny1)-5- -pyrimidincarboxylsyre-methylester_

En opløsning af 1,5 g (3,5 mmol) 1,4-dihydro-5 -2-[[(4-methoxyphenyl)methyl]thio]-6-methyl-4-(3-nitro- phenyl)-5-pyrimidincarboxylsyre-methylester i acetone under argon ved stuetempetur behandledes med 0,5 ml (0,45 g, 6,3 mmol) ethylisocyanat og 50 mg (0,36 mmol) pulveriseret kal iumc ar bonat. Undersøgelse af reak-10 tionsblandingen ved anvendelse af TLC (methylenchlorid/-methanol, 95:5) viste en ny plet ved højere R^, der ikke tiltog efter 1 til 2 timer.Flygtige bestanddele blev afdampet i vakuum, og remanensen fordeltes mellem ethylacetat og vand. Den organiske del vaskedes med 15 vand, IN saltsyre, vand og mættet saltvand. De vandige fraktioner blev tilbageekstraheret med frisk ethylacetat.

De samlede organiske fraktioner blev tørret med magnesiumsulfat og inddampet i vakuum, hvilket gav 1,6 g råprodukt .

20 Flash-chromatografi på 250 ml kiselgel og elu- ering med methylenchlorid/hexaner (2:1 til 3:1) efterfulgt af methylenchlorid/methanol (99,5:0,5) gav 0,94 g af den i overskriften angivne forbindelse.

25 D) 3-[(Ethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl--4- (3-nitrophenyl) -2-thioxo-5-pyrimidincarboxylsyre--methy lester_ 0,94 g (1,89 mmol) l-[(ethylamino)carbonyl]- -1,6-dihydro-2- [ [ (4-methoxyphenyl)methyl] thio] -4-me-30 thyl-6- (3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarboxylsyre-methyl- ester i 10 ml tørt methylenchlorid under argon ved stuetemperatur behandledes med 0,5 ml (0,74 g, 6,5 mmol) trifluoreddikesyre og 0,35 ml (0,29 g, 4,67 mmol) ethan- thdiol, og blandingen fik lov til at omrøre natten over.

Flygtige bestanddele fjernedes i vakuum, og remanensen gav efter findeling med isopropylether 0,59 g af den 35 10 o DK 169031 B1 med vandfri ether· Det faste stof filtreredes fra og vaskedes med vandfri ether, hvilket gav 10,92 g 2-(4-methoxybenzyl)-2-thio-isourinstof-hydrochlorid med smeltepunkt 161-163,5°C.

5 Analyse beregnet for CgH^^OS-HCl: C 46,45, H 5,63, N 12,04, S 13,78, Cl 15,23 Fundet: C 46,48, H 5,64, N 12,25, S 13,74, Cl 15,31.

10 B) 1,4-Dihydro-2-[[ (4-methoxyphenyl) methyl ] thio] — 6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarboxylsyre-me- thylester_

En opløsning af 5,0 g (0,02 mol) methyl-2--[(3-nitrophenyl)methylen]-3-oxobutyrat i 20 ml dime-15 thylformamid under argon ved stuetemperatur blev be handlet med 4,65 g (0,02 mol) S-(4-methoxybenzyl)-thioisourinstof-hydrochlorid og 1,64 g (0,02 mol) natriumacetat. Blandingen opvarmedes derpå til 65 - 5°C i 3 timer. Efter afkøling tilsattes ethylacetat, og 20 en ringe mængde faststof filtreredes fra. Filtratet vaskedes med vand (to gange), vandigt natriumbicar-bonat og mættet saltvand. De vandige vaskevæsker blev ekstraheret med frisk ethylacetat. De kombinerede filtrater og vaskevæsker blev tørret med magnesiumsulfat 25 og inddampet i vakuum, hvilket gav 9 g råprodukt. Krystallisation fra acetone/isopropylether gav 6,8 g . produkt med smeltepunkt 125-127,5°C. TLC, kiselgel, ethylacetat/hexan (1:1), = 0,48.

Analyse beregnet for C2iH21N3°5S: 30 C 59,00, H 4,95, N 9,83, S 7,50 Fundet: C 58,86, H 4,82, N 9,51, S 7,25.

35 9 DK 169031 B1 salte med baser med forskellige uorganiske og organiske syrer og baser. De farmaceutisk acceptable salte foretrækkes, selv om andre salte kan være nyttige ved isolering eller rensning af produktet. Sådanne farmaceutisk accep-5 table syreadditionssalte omfatter dem, der dannes med saltsyre, methansulfonsyre, toluensulfonsyre, svovlsyre, eddikesyre, maleinsyre osv. Farmaceutisk acceptable basiske salte omfatter alkalimetalsalte, f.eks. natrium, kalium og lithium, og jordalkalimetalsalte, f.eks. cal-10 cium og magnesium. Saltene kan fås ved omsætning af produktet med en ækvivalent mængde af syren i et medium, hvori saltet udfældes.

De forbindelser ifølge opfindelsen foretrækkes, hvori 15 R2 betyder methyl, R3 betyder alkyl, især isopropyl, R4 betyder 3-nitrophenyl, og R og R^ betyder begge hydrogen, eller R betyder hydrogen, og R^ betyder (S)-l-phenylethyl.

20 De følgende eksempler illustrerer særlige udførelses- former for opfindelsen.

Eksempel 1 3- [(Ethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl- 25 -4-(3-nitrophenyl)-2-thioxo-5-pyrimidincarboxylsyre- -me thyl es ter_____ A) S- (4-Methoxybenzyl)isothiourinstof-hydrochlorid

En suspension af 38 g (50,0 mmol) thiourinstof i 40 ml tør tetrahydrofuran blev afkølet til 0°C under 30 argon og behandlet dråbevis med 8,0 g (50,0 mmol) 4- methoxybenzylchlorid. Efter afslutning af tilsætningen fjernedes kølebadet, og reaktionsblandingen fik lov til at omrøre ved stuetemperatur i 2 timer. Den blev derpå opvarmet til 60-65°C i 4 timer, hvorpå der dannedes et 35 farveløst, voluminøst bundfald. Reaktionsblandingen fik lov til at afkøle til stuetemperatur og fortyndedes 25 DK 169031 B1

O

handledes ved hjælp af en sprøjte med 3,05 ml (3,66 mmol) 1,2M phosgenopløsning i benzen. Efter omrøring natten over blev reaktionsblandingen afkølet til 0°C og behandlet med 0,40 ml (4,57 mmol) 40% vandig dimethylamin.

5 Derpå fjernedes badet, og reaktionsblandingen omrørtes ved stuetemperatur i 3,0 timer. Reaktionsblandingen blev fortyndet med methylenchlorid, vasket med vand og mættet na-triumchlorid og inddampet. Flash-chromatografi (3% ethyl-acetat/methylenchlorid) gav det ønskede mellemprodukt som 10 0,50 g gult skum. Denne forbindelse blev optaget i tetra- hydrofuran/methanol (6,0 ml af hver) og behandlet med 2,0 ml IN saltsyre (til pH 1). Reaktionsblandingen omrørtes ved omgivelsestemperatur i 2,0 timer og inddampedes. Remanensen blev optaget i ethylacetat, vasket med mættet na-15 triumbicarbonat og mættet natriumchlorid, tørret med mag nesiumsulfat og inddampet. Remanensen blev krystalliseret fra isopropylether/methylenchlorid, hvilket gav den i overskriften angivne forbindelse som 265 mg farveløse krystaller med smeltepunkt 187-188°C.

20 C) 3- [ (Dimethylamino)carbonyl] -1,2,3 ,4-tetrahydro-6-me-thyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre

En opløsning af 230 mg (0,59 mmol) 3-[(dimethylamino) carbonyl] -l,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitro-25 phenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-tert.butylester i 4,0 ml chloroform behandledes med 1,2 ml trifluoreddike-syre ved omgivelsestemperatur under argon. Efter 2,5 timers omrøring inddampedes reaktionsblandingen, inddampedes sammen med toluen og krystalliseredes fra ethanol/-30 ether, hvilket gav den i overskriften angivne forbindelse som 134 mg farveløse krystaller med smeltepunkt 193-195°C. TLC (5% methanol/methylenchlorid) enkelt plet, Rf = 0,21.

35 DK 169031 Bl 0 26

Analyse beregnet for C1SB16N4°S·· C 51,72, H 4,63, N 16,08 Fundet: C 51,41, H 4,57, N 15,73 5 f

Eksempel 12 3- (Aminocarbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4--(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyreethylester A) l,4-Dihydro-2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)- 10 -5-pyrimidincarboxylsyre-éthylester_

En blanding af 16,46 g (62,6 mmol) 2-[(3-nitro-phenyl)methylen]-3-oxobutansyre-ethylester, 14,00 g (81,4 mmol) O-methylisourinstofhydrogensulfat og 15,8 g (18,8 mmol) natriumbicarbonat i 9,4 ml dimethylformamid 15 blev opvarmet til 70°C (oliebad) under argon natten over.

Den afkølede reaktionsblanding blev fortyndet· med vand og ekstraheret med ethylacetat. Den organiske fase blev vasket adskillige gange med vand, vasket med mættet na-triumchlorid, tørret med kaliumcarbonat og inddampet.

20 Remanensen blev passeret gennem en kiselgelpude, kry stalliseret fra isopropylether/hexaner og derpå findelt med 50 ml 60% isopropylether/hexaner, hvilket gav 12,32 g 1,4-dihydro-2-methoxy-6-methyl-4- (3-nitrophenyl)-5-py-rimidincarboxylsyre-ethylester som lysegule krystaller 25 med smeltepunkt 101-103°C.

B) 3- (Aminocarbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4- (3--nitrophenyl) -2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-ethylester

En opløsning af 19,8 mmol (anslået) 1,4-dihydro- 30 -2-methoxy-6-methyl-4- (3-nitrophenyl) -5-pyrimidincarb- oxylsyre-ethylester og 11,1 ml (80 mmol] tør triethyl- amin i 40 ml acetonitril i isbad under argon behandledes med 20 ml (24 mmol) 1,2M phosgenopløsning i toluen ved hjælp af en sprøjte. Efter omrøring ved 0°C i 2,0 timer 35 DK 169031 B1 27

O

behandledes reaktionsblandingen med 46 ml (32 mmol) 0,7M ammoniakopløsning i tetrahydrofuran og omrørtes ved 0°C i 1,3 timer. Nitrogen bobledes gennem reaktionsblandingen, og den inddampedes delvis. Remanensen 5 blev fortyndet med 100 ml tetrahydrofuran og 50 ml methanol og behandlet med 40 ml IN saltsyre (til pH 1). Efter 1,0 times omrøring blev reaktionen afbrudt med mættet natriumbicarbonat. De organiske ekstrakter blev vasket med mættet natriumchlorid, tørret med magnesium-10 sulfat og inddampet. Remanensen blev krystalliseret fra methylenchlorid/isopropylether, hvilket gav 2,7 g gule krystaller. Dette faste stof findeltes grundigt med ace-tonitril, hvilket gav 2,254 g af den i overskriften angivne forbindelse som farveløse krystaller med smelte-15 punkt 213-215°C. TLC (40% acetone/hexan) enkelt plet,

Rf = 0,42.

Analyse beregnet for ci5Hi6N4°6: C 51,72, H 4,63, N 16,08 Fundet: 20 C 51,78, H 4,67, N 15,95 Eksempel 13 3-(Aminocarbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-2-oxo--4-[2-(trif1uormethyl) phenyl]-5-pyrimidincarboxylsyre- 25 -ethylester_ A) 1,4-Dihydro-2-methoxy-6-methyl-4-[(2-trifluormethyl)- phenyl]-5-pyrimidincarboxylsyre-ethylester_

En opløsning af 2,86 g (10,0 mmol) 2-[[2-(tri-fluormethyl)phenyl]-methylen]-3-oxobutansyre-ethylester 30 i 10 ml tørt dimethylformamid under argon blev behandlet med 2,10 g (12,2 mmol) O-methylisourinstofhydrogensulfat og 2,0 g (12,2 mmol) natriumacetat. Den dannede suspension fik lov til at omrøre ved stuetemperatur natten over og opvarmedes derpå til 55°C i 6 timer. Reaktions-35 blandingen fortyndedes med ethylacetat og filtreredes, 0 28 DK 169031 B1 og filtratet vaskedes med vand, natriumbicarbonat og saltvand. Efter tørring med vandfrit magnesiumsulfat blev opløsningsmidlet afdampet, hvilket gav et gult skum. Det blev renset ved flash-chromatografi (5% ethylacetat i me-5 thylenchlorid), hvilket gav 2,17 g af den i overskriften angivne forbindelse som en farveløs tyk olie, der blev fast ved henstand. Denne forbindelse anvendtes i den følgende reaktion uden yderligere rensning.

10 B) 3-(Aminocarbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-2-oxo- -4-[2-(trifluormethyl)phenyl]-5-pyrimidincarboxylsyre- -ethylester_

En opløsning af 2,85 g (8,63 mmol) 1,4-dihydro--2-methoxy-6-methyl-4-[(2-trifluormethyl)phenyl]-5-py-15 rimidincarboxylsyre-ethylester og 4,81 ml (34,5 mmol) tør triethylamin i 20 ml acetonitril ved 0°C under argon behandledes med 8,6 ml (10,3 mmol) 1,2M phosgenopløsning i toluen ved hjælp af en sprøjte. Efter omrøring ved 0°C i 2,0 timer blev reaktionsblandingen behandlet med 19,7 ml 20 (13,8 mmol) 0,7M ammoniakopløsning i tetrahydrofuran og omrørt ved 0°C i 1,5 timer. Nitrogen bobledes gennem reaktionsblandingen, og den inddampedes delvis. Remanensen blev fortyndet med 40 ml tetrahydrofuran og 20 ml methanol og behandlet med 20 ml IN saltsyre (til pH 1). Efter 25 1,5 timers omrøring blev reaktionen afbrudt med mættet natriumbicarbonat, og reaktionsblandingen delvis, inddampet. Den vandige fase ekstraheredes med ethylacetat.

De samlede organiske faser blev vasket med mættet na-triumchlorid og inddampet. Det rå produkt blev flash-chro-30 matograferet (5-15% acetone/methylenchlorid) og findelt to gange med ether, hvilket gav 790 mg af den i overskriften angivne forbindelse som farveløse krystaller. Krystallerne skrumpede ind i området 105-115°C og smeltedes derpå langsomt ved 155-160°C. TLC (3% acetone/ether) 35 0 DK 169031 B1 29 enkelt plet, Rf = 0,61.

Analyse beregnet for C, ,Η. . : 16 16 3 3 4 C 51,75, K 4,34, N 11,32, F 15,35 Fundet: 5 C 52,05, H 4,50, N 10,99, F 15,64.

Eksempel 14 [3(S)]-1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2--oxo-3- [ [ (1-phenylethyl) amino] carbonyl] -5-pyrimidin- 10 carboxylsyre-l-methylethylester, isomere A og B_

En opløsning af 2,0 g (6,0 mmol) 1,4-dihydro-2--methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarboxylsyre--1-methylethylester, jfr. eksempel 2A, i 10 ml methylen-chlorid og 4,2 ml triethylamin fik lov til at afkøle til 15 0°C under argon og behandledes dråbevis med 6 ml 1,3M

phosgenopløsning i toluen. Et farveløst tykt bundfald dannedes . Reaktionsblandingen fik lov til at omrøre ved 0°C i 30 minutter og blev derpå behandlet dråbevis med 800 mg (6,6 mmol) (S)-(-)-α-methylbenzylamin. Isbadet fjernedes, 20 og reaktionsblandingen fik lov til at omrøre ved stuetemperatur i 3 timer. Opløsningsmidlet fjernedes, og remanensen opløstes i 10 ml methanol/tetrahydrofuran (1:1--blanding). Den dannede opløsning behandledes med 2 ml 2N saltsyre og fik lov til at omrøre ved stuetemperatur 25 il time. Opløsningsmidlet fjernedes, og remanensen ek-straheredes med methylenchlorid. De samlede ekstrakter vaskedes med vand, natriumbicarbonat og saltvand. Efter tørring med vandfrit magnesiumsulfat afdampedes opløsningsmidlet, og remanensen blev passeret gennem en kort 30 kiselgelsøjle (ethylacetat/methylenchlorid:5/95). Produktet krystalliseredes fra methylenchlorid/isopropyl-ether, hvilket gav 619 mg farveløst fast stof (isomer B). Omkrystallisation fra det samme opløsningsmiddelsystem gav den analytisk rene isomer B med smeltepunkt 197,5-35 -198,5°C, [a]D = +139° (1% chloroform). Moderluden fra den første krystallisation blev inddampet og remanensen krystalliseredes igen fra methylenchlorid/isopropylether, hvilket gav 301 mg blanding af de isomere A og B. Den 0 30 DK 169031 B1 resulterende moderlud blev koncentreret og krystalliseret fra ether/hexaner, hvilket gav 501 mg ren isomer A med smeltepunkt 94-97°c, [a]D = “232° (1%, chloroform).

Analyse beregnet for C24H,,gN40g: 5 C 61,79, H 5,62, N 12,01 Fundet (isomer A): C 61,94, H 5,54, N 11,97 Fundet (isomer B): C 61,90, H 5,57, N 11,99 10

Eksempel 15 [3 (R) ] -1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2--oxo-3- [ [ (1-phenylethyl) amino] carbonyl] -5-pyrimidin- carboxylsyre-l-methylethylester, isomere A og B_ 15 En opløsning af 2,0 g (6,0 mmol) 1,4-dihydro- -2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidin-carboxylsyre-l-methylethylester, jfr. eksempel 2A, i 10 ml methylenchlorid og 4,2 ml triethylamin fik lov til at afkøle til 0°C under argon og blev behandlet 20 dråbevis med 6 ml 1,3M phosgenopløsning i toluen. Et farveløst, tykt bundfald dannedes. Reaktionsblandingen fik lov til at omrøre ved 0°C i 30 minutter og blev derpå behandlet dråbevis med 800 mg (6,6 mmol) (R)-(+)-a--methylbenzylamin. Isbadet fjernedes, og reaktionsbian-25 dingen fik lov til at omrøre ved stuetemperatur i 3 ti mer. Opløsningsmidlet afdampedes, og remanensen opløstes i 10 ml methanol/tetrahydrofuran (1:1 blanding). Den resulterende opløsning behandledes med 2 ml 2N saltsyre, og fik lov til at omrøre ved stuetemperatur i 1 time.

30 Opløsningsmidlet fjernedes, og remanensen ekstraheredes med methylenchlorid. De samlede ekstrakter blev vasket med vand, natriumbicarbonat og saltvand. Efter tørring med vandfrit magnesiumsulfat afdampedes opløsningsmidlet, og remanensen blev passeret gennem en kort kiselgelsøjle 35 31 DK 169031 B1 0 (ethylacetat/methylenchlorid 5:95). Produktet krystalliseredes fra methylenchlorid/isopropylether, hvilket gav 530 mg farveløst fast stof (isomer B). Omkrystallisation fra samme opløsningsmiddelsystem gav 380 mg af den ana-5 lytisk rene isomere B med smeltepunkt 187-188°C, [α]^ = -125° (1%, chloroform). Moderluden fra den første krystallisation inddampedes, og remanensen krystalliseredes igen fra methylenchlorid/isopropylether, hvilket gav 380 mg af en blanding af de isomere A og B. Den resul-10 terende moderlud blev inddampet og krystalliseret fra

isopropylether/hexaner, hvilket gav 325 mg isomer A

med smeltepunkt 145-149°C, [a)D = +236° (1%, chloroform).

Analyse beregnet for C24H26N4°6: C 61,79, H 5,62, N 12,02 15 Fundet (isomer A): C 61,84, H 5,53, N 12,00 Fundet (isomer B): C 61,90, H 5,57, N 11,99 20 Eksempel 16 3-(Arainocarbonyl)-4-(2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)-1,2,3,4--tetrahydro-6-methyl-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l- -methylethylester_ A) 4-(2,1,3-Benzoxadiazol-4-yl)-1,4-dihydro-2-methoxy-25 -6-methyl-5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester

En blanding af 2,04 g (7,43 mmol) 2-[(2,1,3-benz-oxadiazol-4-yl)-methylen]-3-oxobutansyre-l-methylethylester, 1,87 g (22,3 mmol) natriumbicarbonat og 1,66 g (9,66 mmol) O-methylisourinstofhydrogensulfat i 7,5 ml dimethylform-30 amid opvarmedes ved 65°C (oliebad) natten over under ar gon. Reaktionsblandingen blev derpå fortyndet med ethyl-acetat, vasket adskillige gange med vand, vasket med mættet natriumchlorid, tørret med kaliumcarbonat og inddampet. Remanensen blev flash-chromatograferet på 400 ml Merck-35 -kiselgel ved eluering med 10% ethylacetat/methylenchlorid, 0 32 DK 169031 B1 hvilket gav 0,60 g (24%) 4-(2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)--1,4-dihydro-2-methoxy-6-methyl-5-pyrimidincarboxylsyre--1-methylethylester som et mørkt fast stof. TLC (10% ethylacetat/methylenchlorid) enkelt plet, = 0,17.

5 B) 4- (2 ,l,3-Benzoxadiazol-4-yl) -1,2,3 ,4-tetrahydro-6--methyl-3,5-pyrimidindicarboxylsyre-5- (1-methyl ethyl) - -3-(4-nitrophenyl)ester_

En opløsning af 0,60 g (1,82 mmol) 4-(2,1,3-10 -benzoxadiazol-4-yl) -l,4-dihydro-2-methoxy-6-methyl- -5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester og 0,88 ml (10,9 mmol) pyridin i 10 ml methylenchlorid i et isbad under argon blev behandlet dråbevis gennem tildrypningstragt med en opløsning af 403 mg (2,00 mmol) 15 4-nitrophenylchlorformiat i 10 ml methylenchlorid.

Reaktionsblandingen omrørtes derpå ved 0°C i 1 time og inddampedes. Remanensen blev optaget i 20 ml tetrahy-drofuran og 10 ml methanol og behandlet med 2 ml 3N saltsyre (til pH 1) . Efter omrøring ved omgivelses temper atur 20 i 45 minutter blev reaktionsblandingen inddarapet til næsten tørhed og afkølet i et isbad, og reaktionen blev afbrudt med mættet natriumbicårbonat. Denne blanding ekstraheredes med ethylacetat. Den organiske fase blev vasket med mættet natriumchlorid, tørret med kaliumcar-25 bonat og inddampet, hvilket gav 0,63 g (74%) 4-(2,1,3- -benzoxadiazol-4-yl )-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-3,5--pyrimidindicarboxylsyre-5-(l-methylethyl) -3- (4-nitro-phenyl)ester som et brunt fast stof. TLC (40% acetone/- hexaner) stor plet, R^ = 0,33.

30 35 33 DK 169031 B1 0 C) 3-(Aminocarbonyl)-4-(2,l,3-benzoxadiazol-4-yl)--1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-2-oxo-5-pyrimidin- carboxylsyre-l-methylethylester_

En opløsning af 0,63 g (1,35 mmol) 4-(2,1,3-5 -benzoxadiazol-4-yl)-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-2- -oxo-3,5-pyrimidindicarboxylsyre-5- (1-methyl ethy])--3-(4-nitrophenyl)-ester i 14 ml destilleret tetra-hydrofuran i et isbad under argon blev behandlet med 2,5 ml (1,75 mmol) 0,7M ammoniakopløsning i tetrahy-10 drofuran og omrørt ved 0°C i 1 time. Reaktionsblan dingen blev derpå inddampet og flash-chromatograferet på 150 ml Merck-kiselgel ved eluering med 40% ethyl-acetat/hexaner, hvilket gav 109 mg gult skum. Krystallisation fra isopropylether/methylenchlorid gav 141 mg 15 (37%) 3-(aminocarbonyl)-4-(2,l,3-benzoxadiazol-4-yl)- -1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-2-oxo-5-pyrimidincarboxyl-syre-1-methylethylester som fritflydende, gult fast stof med smeltepunkt 207-208°C. TLC (4% methanol/me-thylenchlorid) enkelt plet, R^ = 0,27.

20

Eksempel 17 1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-3-[[(1-methylethyl)amino]— carbony iJ-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxyl-syre- (S) -l-methyl-2- [methyl (phenylmethyl) amino] ethyl- 25 ester-hydrochlorid_ A) 1,4-Dihydro-2-methoxy-6-methy1-4- (3-nitrophenyl) --5-pyrimidincarboxylsyre-(S)-l-methyl-2-[methyl-(phe- nylmethyl)amino]ethylester_

En blanding af 7,4 g (18,8 mmol) 2-[(5-nitro-30 phenyl)methylen]-3-oxobutansyre-(S)-l-methyl-2-[me thyl (phenylmethyl) amino] ethyles ter , 3,88 g (22,5 mmol) O-methylisourinstofhydrogensulfat og 7,89 g (94 mmol) natriumbicarbonat i 19 ml dimethylformamid under argon blev opvarmet til 65°C (olieb'ad) natten over. Blandingen 35 0 34 DK 169031 B1 blev derpå delt mellem ether og vand. Den organiske fase blev vasket adskillige gange med vand, derpå vasket med mættet natriumchlorid, tørret med kaliumcarbonat og inddampet. Den tykke røde remanens blev flash-chromatogra-5 feret på Merck-kiselgel ved eluering med 5-20% acetone/- methylenchlorid, hvilket gav 3,77 g (44%) 1,4-dihydro--2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarb-oxylsyre-(S)-l-methyl-2-[methyl(phenylmethyl) amino]-ethylester som en tyk, mørk olie. TLC (20% acetone/-10 methylenchlorid) to pletter, = 0,34 og 0,47.

B) 3,4-Dihydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-3,5--pyrimidindicarboxylsyre-5[(S)-l-methyl-2-[methyl- (phenylme thyl) amino]ethyl-3-(4-nitrophenyl)ester_ 15 En opløsning af 2,20 g (4,87 mmol) 1,4-di- hydro-2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimi-dincarboxy1syre-(S)-l-methyl-2-[methyl(phenylmethyl)-amino]ethylester og 2,36 ml (29,2 mmol) pyridin i 20 ml methyl enchlor id i isbad under argon behandledes 20 dråbevis ved hjælp af tildrypningstragt med en opløs ning af 1,08 g (5,36 mmol) 4-nitrophenylchlorformiat i 20 ml methylenchlorid. Reaktionsblandingen omrørtes derpå i isbadet i 15 minutter og inddampedes. Remanensen blev inddampet sammen med toluen til fjernelse 25 af pyridin. Remanensen blev derpå optaget i 50 ml te- trahydrofuran og 25 ml methanol og behandlet med 5,0 ml 3N saltsyre (til pH 1). Efter omrøring ved omgivelsestemperatur i 1,5 timer blev reaktionen afbrudt ved ud-hældning i kold (isbad), mættet natriumbicarbonat.

ΟΛ

Efter inddampning til næsten tørhed blev Blandingen ekstraheret med ethylacetat. Den samlede organiske fase blev vasket med mættet natriumchlorid, tørret med ka-lumcarbonat og inddampet, hvilket gav 2,38 g (83%) 35 35 DK 169031 B1 0 3,4-dihydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-3,5-py-rimidindicarboxylsyre-5[(S)-l-methyl-2-[methyl(phe-nylmethyl)amino]ethyl]-3-(4-nitrophenyl)ester som et brunt fast stof. TLC (10% acetone/methylenchlorid) 5 to store pletter, = 0,25 og 0,39.

C) l,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-3-[[(1-methylethyl)-amino]carbonyl]-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidin-carboxylsyre-(S)-l-methyl-2-[methyl(phenylmethyl)- 10 amino]ethylester-hydrochlorid_

En blanding af 2,38 g (4,04 mmol) 3,4-di-hydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-OXO-3,5-pyrimidindi-carboxylsyre-5[(S)-l-methyl-2-[methyl(phenylmethyl)-amino]ethyl]-3-(4-nitrophenyl)ester og 0,34 ml (4,04 15 mmol) isopropylamin i 8 ml acetonitril omrørtes ved omgivelsestemperatur natten over under argon. Reaktionsblandingen blev fortyndet med ethylacetat, vasket med mættet natriumbicarbonat (tre gang^ og mættet na-triumchlorid, tørret med kaliumcarbonat og inddampet.

20 Flash-chromatografi på 300 ml Merck-kiselgel ved elu- ering med 5% acetone/methylenchlorid gav 0,84 g gult skum. Skummet blev optaget i éther og behandlet med etherisk hydrogenchloridopløsning, hvilket gav 672 mg (30%) 1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-3-[[(1-methylethyl)-25 amino]carbonyl]-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidin- carboxylsyre-(S)-l-methyl-2-[methyl(phenylmethyl)-amino]ethylester-hydrochlorid som elektrostatiske, gule krystaller med smeltepunkt 110-130°C (dekomponering).

TLC (10% acetone/methylenchlorid) to pletter, 30 Rf = 0,38 og 0,46.

35 0 36 DK 169031 B1

Eksempel 19 1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-3-[[[2-[methyl(phenylme-thyl) amino]ethyl]amino]carbonyl] -4-(3-nitrophenyl) --2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester 5 En opløsning af 2,00 g (6,0 mmol) 1,4-dihy- dro-2-methoxy-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidin-carboxylsyre-l-methylethylester, jfr. eksempel 2A, og 1,25 ml (9,0 mmol) triethylamin i 18 ml acetonitril i isbad under argon blev ved hjælp af en GT-sprøjte be-10 handlet med 6,0 ml (7,8 mmol). 1,3M phosgenopløsning i toluen. Efter omrøring ved 0°C i 3,0 timer behandledes reaktionsblandingen med en opløsning af 1,25 ml (9,0 mmol) triethylamin og 1,523 g (9,0 mmol) N-benzyl-N--methylaminoethyl-amin i 12 ml tør tetrahydrofuran under 15 argon ved hjælp af en sprøjte. Reaktionsblandingen blev omrørt ved 0°C i 1,5 time, fortyndet med 24 ml tetrahydrofuran og 24 ml methanol og behandlet med 30 ml IN saltsyre (til pH 1). Reaktionsblandingen blev derpå omrørt ved stuetemperatur i 2,0 timer, og reaktionen blev 20 afbrudt med mættet natriumbicarbonat. Den resulterende blanding inddampedes delvis og ekstraheredes med ethylace-tat. De samlede organiske faser blev vasket med mættet na-triumchlorid, tørret med magnesiumsulfat og inddampet, hvilket gav 3,12 g gult skum. Dette materiale blev flash-25 -chromatograferet (2% methanol/methylenchlorid) og krystalliseret fra ether/isopropylether, hvilket gav 1,64 g (54%) farveløst fast stof med smeltepunkt 133-135°C.

TLC (2% methanol/methylenchlorid) enkelt plet, R^ = 0,17.

Analyse beregnet for C26H3iN5°6: 30 C 61,28, H 6,13, N 13,74 Fundet: C 61,33, H 6,19, N 13,49.

35 DK 169031 B1_ 37 0

Eksempel 20 (—)—3—[(Dimethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro-6--methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxyl- syre-l-methylethylester_ 5 A) 3,4-Dihydro-2-[[(4-methoxyphenyl)methyl]thio]-6- -methyl-4-(3-nitrophenyl)-3,5-pyrimidind icarboxylsyr e--5-(1-methylethyl)ester-3-[1-[1,1-dimethylethoxy)-carbonyl]-5(S)-(methoxycarbonyl)-3(R)-pyrrolidinyl]- ester__ 10 Til en opløsning af 10/01 g (22,0 mmol) 1,4-dihy- dro-2-[[(4-methoxyphenyl)methyl]thiol]-6-methyl-4-(3-nitrophenyl) -5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester i 44 ml ren pyridin ved stuetemperatur under nitrogen sattes 22 ml (1,3 ækvivalent) 1,3M phosgen i toluen. Reaktionsbian-15 dingen omrørtes i 2 timer, og derpå tildryppedes en opløsning af 8,6 g (35,2 mmol) l-[(1,1-dimethylethoxy)-carbonyl]-4-(trans-hydroxy)-L-prolin-methylester i 20 ml ren pyridin. Efter 24 timers omrøring ved stuetemperatur viste TLC (ethylacetat/hexaner 1:2), at reak-20 tionen var ufuldstændig. Der tilsattes yderligere 5,4 g (22 mmol) 1-[ (1,1-dimethylethoxy)-carbonyl]-4-(trans--hydroxy)-L-prolin-methylester som opløsning i 15 ml pyridin, og reaktionen fortsatte i yderligere 24 timer. Reaktionsblandingen blev oparbejdet ved fortynding med 25 100 ml ethylacetat, og det organiske lag blev vasket med 2 x 50 ml mættet natriumbicarbonatopløsning, 2 x 50 ml natriumdihydrogenphosphat og 2 x 50 ml vand, tørret med magnesiumsulfat, filtreret og inddampet i vakuum, hvilket gav et skum. Plash-chromatografi på 30 1000 g silica (ethylacetat/hexaner 1:2) gav 9,3 g (58%) produkt som gult skum.

B) 1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2--thioxo-3,5-pyrimidincarboxylsyre-5-(1-methylethyl)-35 ester-3-[5(S) -methoxycarbonyl)-3(R)-pyrrolidinyl]ester 9,3 g (12,8 mmol) 3,4-dihydro-2-[[(4-methoxyphenyl) methyl] -thio]-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)- 0 DK 169031 B1 38

-3,5-pyrimidin-dicarboxylsyre-5- (l-methylethyl) ester--3- [1- [1,1-dime thyl ethoxy) carbonyl] -5 (S) (methoxy-carbonyl)-3(R)-pyrrolidinylester opløst i 11 ml me-thylenchlorid sattes dråbevis til en blanding af 5 26 ml trifluoreddikesyre og 2,6 ml anisol ved 0°C

under nitrogen. Blandingen omrørtes ved 0°C i 90 minutter, og trif luoreddikesyren af dampedes i vakuum.

Den gule remanens opløstes i 100 ml methylenchlorid, og det organiske lag blev vasket med 50 ml vand og 10 2 x 50 ml mættet natriumbicarbonat, tørret med magne siumsulfat, filtreret og inddampet i vakuum, hvilket gav en olie. Olien blev opløst i ethylacetat/hexaner/-methanol (80:20:1), afkølet til -78°C og behandlet med 1 ækvivalent etherisk saltsyre. Det bleggule faste stof 15 blev opsamlet ved filtrering og tørret under vakuum, hvilket gav 6,0 g (86%) af en blanding af de diastereo-mere. Den frie base i den ovennævnte blanding blev frigjort øjeblikkeligt forud for chromatografisk adskillelse ved, at en methylenchloridopløsning blev behandlet med 20 natriumhydroxid, og det organiske lag absorberedes på celite. Flash-chromatografi på 1000 g silica ved anvendelse af ethylacetat/hexaner/methanol (60:40:1), efterfulgt af samme opløsningsmiddelblanding i forholdet 80:20:1 førte til adskillelse i de to isomere A og B.

25 Alle søjlefraktioner blev syrnet med etherisk saltsyre, da de opsamledes. 2,01 g (57%) isomer A. 2,04 g (58%) isomer B.

C) (-)-1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-30 -2-thioxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester To ækvivalenter natriummethanolat i methanol sattes til en opløsning af 2,01 g (3,7 mmol) isomer A af 1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2--thioxo-3 ,5-pyrimidindicarboxylsyre-5- (l-methylethyl) -35 ester-3-[(S) -5-methoxycarbonyl)-3-pyrrolidinyl]ester i 4 ml methanol. Reaktionsblandingen fik lov til at om- DK 169031 Bl.

39 0 røre ved stuetemperatur. Efter 16 timer blev pH indstillet på 2 med etherisk saltsyre, og blandingen afkøledes til -78°C. Det dannede faste stof blev opsamlet ved filtrering. Yderligere tre portioner blev op-5 samlet fra moderludene, der samlet gav 1,0 g (79%).

[a]D = -90,1° (c = 1,DMSO).

D) (-).-1,4-Dihydro-2- [ [ (4-methoxyphenyl)methyl] thio]--6-methyl-4-(3-nitropheny1)-5-pyr imidincarboxy1syre- 10 -1-methylethylester_ 884 mg (2,6 mmol) (-)-1,2,3,4-Tetrahydro-6--methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-thioxo-5-pyrimidincarboxyl-syre-l-methylethylester blev opløst i tør tetrahydro-furan og afkølet til 0°C. Der tildryppedes 393^ul 15 (1,1 ækvivalent, 2,9 mmol) 4-methoxybenzylchlorid.

Efter afsluttet tilsætning fjernedes badet, og reaktionsblandingen omrørtes ved stuetemperatur i 2 timer. Blandingen opvarmedes derpå til 65°C i 16 timer. TLC (acetone/hexan 35:65) viste ufuldstændig omsætning, 20 og derfor tilsattes yderligere 393^ul (1,1 ækvivalent, 2,9 mmol 4-methoxybenzylchlorid til blandingen. Efter 7 timer ved 65°C fik blandingen lov til at afkøle til stuetemperatur og blev fortyndet med ether. Da blandingen afkølede til 0°C, dannedes et hvidt, fast stof.

25 Det faste stof blev opsamlet ved vakuumfiltrering, vasket med ether og tørret, hvilket gav 636 mg (49%) l,4-dihydro-2-[[(4-methoxyphenyl)methyl] thio]-6--methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimidincarboxylsyre-l--methylethylester-hydrochlorid.

30 E) (-)-3,4-Dihydro-3-[(dimethylamino)carbonyl]-2--[[(4-methoxyphenyl) methyl]thio]-6-methyl-4-(3-ni-trophenyl)-5-pyrimid incarboxylsyre-1-methylethyles ter

Den frie base af l,4-dihydro-2-[[(4-methoxy-35 phenyl)methyl]thio]-6-methyl-4-(3-nitrophenyl) -5 - -pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester-hydrochlo- 0 40 DK 169031 B1.

rid fremstilledes ved vaskning af en methylenchlorid-opløsning med natriumbicarbonat. Det organiske lag blev· tørret, filtreret og reduceret i vakuum, hvilket gav et grønt skum. Skummet (754 mg, 1,66 mmol) opløstes i 5 8,3 ml tørt methylenchlorid, og der tilsattes 1,2 ml (5 ækvivalenter, 8,3 mmol) triethylamin. 2,0 ml (1,6 ækvivalenter, 2,66 mmol) 1,3M phosgen i toluen til-* dryppedes til blandingen ved 0°C. Efter afsluttet tilsætning fjernedes badet, og blandingen omrørtes ved 10 stuetemperatur. Efter 30 minutter tilsattes dimethyl-amin (overskud 1,66 ml), og blandingen omrørtes i 30 minutter. Reaktionsblandingen blev fortyndet med 50 ml ethylacetat og vasket to gange med IN saltsyre og to gange med mættet natriumbicarbonat. Det organiske lag 15 blev tørret med magnesiumsulfat, filtreret og reduceret i vakuum, hvilket gav 586 mg olie. Flash-chromatografi på 40 g silica (ethylacetat/hexaner i 1:2) gav 335 mg (41%) rent produkt som olie.

20 F) (-)-3-[(Dimethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro--6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxyl- syre-l-methylethylester_ 349 mg (3 ækvivalenter, 2,0 mmol)' 3-chlorper-oxybenzoesyre sattes til en opløsning af (-)-3,4-di-25 hydro-3-[(dimethylamino)carbonyl]-2-[[(4-methoxyphe-nyl)methyl]thio]-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-pyrimi-dincarboxylsyre-l-methylethylester i 6,7 ml tørt methyl enchlor id ved 0°C under nitrogenatmosfære. Reaktionsblandingen omrørtes natten over ved stuetempera-30 tur, og der dannedes et bundfald. Blandingen blev fortyndet med 15 ml ethylacetat og vasket to gange med IN saltsyre, to gange med IN natriumhydroxid og med vand. De samlede organiske faser blev tørret med magnesiumsulfat, filtreret og reduceret i vakuum, hvilket 35 gav 390 mg olie. Flash-chromatografi på 39 g kiselgel (ethylacetat/hexaner 2:1) gav produktet som en olie.

0 DK 169031 B1.

41

Olien fik lov at stå under ether i en periode på 48 timer og blev derpå findelt til at give 144 mg (55%) af et hvidt, krystallinsk fast stof med smeltepunkt 152-153°C. [<x]D = -128,6° (c = 1,2, chloroform).

5 Analyse beregnet for C18H22N4°6: C 55,38, H 5,68, N 14,35 Fundet: C 55,41, H 5,68, N 14,17 10

Eksempel 21 (+)-3-[(Dimethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro-6--methyl-4- (3-nitrophenyl) -2-oxo-5-pyrimidincarboxyl- syre-l-methylethylester_ 15 A) (+)-1,2,3,4-Tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)--2-thioxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester 1,6 ml (7,5 mmol, 2 ækvivalenter) natrium-methanolat i methanol sattes til en opløsning af 2,04 g (3,7 mmol) isomer B (beskrevet i eksempel 20, 20 trin B) af l,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4-(3-nitrophe- nyl) -2-thioxo-3,5—pyrimidindicarboxylsyre-5- (1-methyl-ethyl) es ter-3- [ (S) -5-methoxycarbonyl) -3-pyrrolidinyl ] -ester i 18 ml methanol. Reaktionsblandingen fik lov til at omrøre ved stuetemperatur. Efter 16 timer indstille-25 des pH på 2 med etherisk saltsyre, og blandingen blev afkølet til 0°C i 6 timer. Det dannede faste stof blev opsamlet ved filtrering. Tre yderligere portioner blev opsamlet fra moderludene, der kombineret gav 1,12 g (89%). [,a]D = +85° (c = 0,5, dimethylsulfoxid) .

30 B) (+)-1,4-Dihydro-2-[[, (4-methoxyphenyl)methyl] thio]--6-methyl-4- (3-nitrophenyl) -5-pyrimidincarboxylsyre- -1-methylethylester_ 884 mg (2,6 mmol) (+)-1,2,3,4-tetrahydro-6-35 -methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-thioxo-5-pyrimidincarb-oxylsyre-l-methylethylester blev opløst i tør tetra- DK 169031 Bl.

42 o hydrofuran og afkølet til 0°C. Der tildryppedes 393^,ul (1,1 ækvivalent, 2,9 mmol) 4-methoxybenzyl-chlorid. Efter afsluttet tilsætning fjernedes badet, og reaktionsblandingen omrørtes ved stuetemperatur 5 i 2 timer. Blandingen opvarmedes derpå til 65°C i 16 timer. TLC (acetone/hexan 35:65) viste ufuldstændig omsætning, hvorfor yderligere 176^ul (0,5 ækvivalent, 1,3 mmol) 4-methoxybenzylchlorid sattes til blandingen. Efter 7 timer ved 65°C fik blandingen lov til 10 at afkøle til stuetemperatur og blev fortyndet med ether. Da blandingen blev afkølet til 0°C dannedes et hvidt, fast stof. Det faste stof blev opsamlet ved vakuumfiltrering, vasket med ether og tørret, hvilket gav 493 mg (38%) (+)-1,4-dihydro-2-[[(4-15 -me thoxy phenyl) methyl] thio]-6-methyl-4- (3-nitrophe- nyl) -5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester-hydro-chlorid.

C) (+)-3,4-Dihydro-3-[(dimethyl amino)carbonyl]-2-20 - [ [ (4-methoxyphenyl)methyl] thio]-6-methyl-4- (3- -nitrophenyl) -5-pyrimidincarboxylsyre-l-methyl ethyl - ester_

Den frie base af (+)-1,4-dihydro-2-[[(4-meth-oxyphenyl)methyl]thio]-6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-5-25 -pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester-hydrochlo-rid blev fremstillet ved vaskning af en methylenchlo-ridopløsning med natriumbicarbonat. Det organiske lag blev tørret, filtreret og reduceret i vakuum, hvilket gav et grønt skum. Skummet (431 mg, 0,95 mmol) opløstes 30 i 4,8 ml tørt methylenchlorid, og der tilsattes 4,75 mmol (5 ækvivalenter) triethylamin. Der tildryppedes 662^ul (1,6 ækvivalent, 1,5 mmol) 1,3M phosgen i toluen til blandingen ved 0°C. Efter afsluttet tilsætning fjernedes badet, og blandingen omrørtes ved stuetemperatur.

35 Efter 30 minutter tilsattes dimethylamin (overskud, 0,95 ml), og blandingen omrørtes i 30 minutter. Reak- DK 169031 B1- 43 0 tionsblandingen blev fortyndet med 50 ml ethylacetat og vasket to gange med IN saltsyre og to gange med mættet natriumbicarbonat. Det organiske lag blev tørret med magnesiumsulfat/ filtreret og reduceret i vakuum, hvilket 5 gav en olie. Flash-chromatografi på 40 g silica (ethyl-acetat/hexan 1:2) gav 431 mg (86%) rent produkt som olie.

D) (+)-3-[(Dimethylamino)carbonyl]-1,2,3,4-tetrahydro--6-methyl-4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidinearboxyl- 10 syre-l-methylethylester_ 424 mg (3 ækvivalenter, 2,5 mmol) 3-chlorper-oxybenzoesyre sattes til en opløsning af (+)-3,4-di-hydro-3- [ (dimethylamino) carbonyl] -2- [ [ (4-methoxyphenyl)-methyl] thio] -6-methyl-4- (3-nitrophenyl) -5-pyrimidin-15 carboxylsyre-l-methylethylester i 8,2 ml tørt methylen- chlorid ved 0°C under nitrogenatmosfære. Reaktionsblandingen omrørtes natten over ved stuetemperatur, og der dannedes et bundfald. Blandingen blev fortyndet med 15 ml ethylacetat og vasket to gange med IN saltsyre, 20 to gange med IN natriumhydroxid og med vand. Det samlede organiske faser blev tørret med magnesiumsulfat, filtreret og reduceret i vakuum, hvilket gav 390 mg olie.

Flash-chromatografi på 39 g kiselgel (ethyl-25 acetat/hexaner 2:1) gav 433 mg af produktet som en olie.

Olien fik lov til at stå under ether i et tidsrum på 48 timer og blev derefter findelt, hvilket gav 254 mg (67%) hvidt, krystallinsk fast stof med smeltepunkt 153-155°C. [a]D = +112,5° (c = 1,1, chloroform).

30 Analyse beregnet for C^g H22N4°6: C 55,38, H 5,68, N 14,35 Fundet: C 55,32, H 5,76, N 14,00.

35 0 DK 169031 Bl.

44

Eksempel 22 3-(Aminocarbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4-(3--nitrophenyl) -2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l-me- thylethylester-(+)-isomer_ 5 Opløsningen af 1,7 g (3,65 mmol) [3(S)]- -1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4- (3-nitrophenyl)-2-oxo--3-[ [ (1-phenylethyl)amino]carbonyl]-5-pyrimidincarb-oxylsyre-l-methylethylester, isomer B, jfr. eksempel 14, i 10 ml trifluoreddikesyre blev opvarmet til 75°C i 10 4 timer. Reaktionsblandingen fik lov til at afkøle til stuetemperatur, og opløsningsmidlet af dampedes. Remanensen opløstes i ethylacetat og blev vasket med vand, natriumbicarbonat og saltvand. Den blev tørret med magnesiumsulfat og inddampet, hvilket gav et gult skum.

15 Krystallisation fra isopropylether/ether gav 1,12 g farveløst fast stof. Omkrystallisation fra isopropyl-ether/methylenchlorid gav 870 mg analyseren· 3-(amino-carbonyl) -1,2,3 ,4-tetrahydro-6-methyl-4- (3-nitrophenyl ) -2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l-methylethylester-20 (+)-isomer med smeltepunkt 160-161°C, [a]D = +153° (1% i methanol).

Analyse beregnet for c^gHi3N4°g: C 53,03, H 5,01, N 15,47 Fundet: 25 C 53,06, H 5,01, N 15,47.

Eksempel 23 3- (Aminocarbonyl) -1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4- - (3-nitrophenyl) -2-oxo-5-pyr imidincarboxylsyre-1-30 -methylethylester- (-) -isomer_

Opløsningen af 60 mg (0,13 mmol) [3(S)]~ -1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl-4- (3-nitrophenyl) -2-oxo--3- [ ((1-phenylethyl) amino] carbonyl] -5-pyrimidincarb- oxylsyre-l-methylethylester, isomer A, jfr. eksempel

35 O

14, i 10 ml trifluoreddikesyre blev opvarmet til 75 C

i 4 timer. Reaktionsblandingen fik lov til at afkøle t DK 169031 B1.

45 til stuetemperatur, og opløsningsmidlet blev afdampet. Remanensen opløstes i ethylacetat og vaskedes med vand, natriumbicarbonat og saltvand. Den blev tørret med magnesiumsulfat og inddampet, hvilket gav et gult skum.

5 Krystallisation for isopropylether/methylenchlorid gav 27 mg 3-(aminocarbonyl)-l,2,3,4-tetrahydro-6-methyl--4-(3-nitrophenyl)-2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l--methylethylester-(-)-isomer med smeltepunkt 160--161°C, [α3β = 149° (1% i methanol).

10 Analyse beregnet for C^H^gN^Og: C 53,03, H 5,01, N 15,47 Fundet: C 53,20, H 5,12, N 15,11.

15 Den antihypertensive virkning af forbindelserne ifølge opfindelsen er påvist ved følgende forsøg:

De testede forbindelser indgives oralt til grupper på fem spontant hypertensive rotter, som er ved bevidsthed. Denne test forudsiger antihypertensiv virkning hos mennesker.

20 Direkte gennemsnitligt arterieblodtryk måles i 24 timer efter indgivelsen. Som resultater er anført den største nedsættelse af blodtrykket, som observeres for gruppen af rotter i fire på hinanden følgende observationsperioder på 6 timer.

25 Resultaterne fremgår af den følgende tabel.

Eksempel SHR, % nedsættelse af BP (ved 135 μιηοΐ/kg) maximal effekt 30 1 14,3 2 46,3 3 18,0 4 28,6 5 42,7 35 6 46,4 7 15,3* 8 39,8* 46 DK 169031 B1- 9 7,2 10 17,8* 11 ikke testet 12 16,4 5 13 25,1 14 17,1 15 17,2 16 36,5* 17 11,6* 10 19 29,5* 20 42,4* 21 11,4* 22 49,6* 23 8,2* 15 SHR = spontant hypertensiv rotte, BP = gennemsnitligt arterieblodtryk, en stjerne viser, at forbindelsen er testet ved 45 Mmol/kg i stedet for 135 μιηοΐ/kg.

20 25 30 35

Claims (12)

10. H eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, hvori X betyder oxygen eller svovl, R betyder hydrogen eller alkyl, og R^ betyder hydro-15 gen, alkyl, phenylalkyl, -CH2-(CH2)n-Y2 eller -CH2-(CH2)p-Y3 eller R og R^ sammen med det nitrogenatom, hvortil de er bundet, betyder piperidinyl, R2 betyder alkyl, R3 betyder hydrogen, alkyl eller -CH2-(CH2)p-Y3,

20 R4 betyder benzoxadiazolyl, phenyl eller phenyl sub stitueret med en, to eller tre nitro- eller trifluormethyl-grupper, Y2 betyder alkoxycarbonyl, Y3 betyder amino eller amino substitueret med alkyl 25 eller phenyl-(CH2)m-, og m, n og p hver især betyder 0, 1 eller 2.

2. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at X betyder oxygen.

3. Forbindelse ifølge krav 1,kendetegnet 30 ved, at X betyder svovl, og fortrinsvis, R2 betyder methyl, R3 betyder ethyl, og R4 betyder 3-nitrophenyl.

4. Forbindelse ifølge krav 2, kendetegnet ved, at R3 betyder alkyl.

5. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet 35 ved, at R4 betyder 3-nitrophenyl eller 2,1,3-benzoxadiazol- -4-yl. DK 169031 B1.

6. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at betyder alkyl eller phenylalkyl, fortrinsvis en forbindelse, hvori 5. og R^ begge betyder alkyl.

7. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R og sammen med det nitrogenatom, hvortil de er bundet, betyder 1-piperidinyl.

8. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet 10 ved, at den er 3-(aminocarbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-6-methyl--4-(3-nitrophenyl) -2-oxo-5-pyrimidincarboxylsyre-l-methyl-ethylester, fortrinsvis i den ikke-racemiske form med negativ optisk drejning.

9. Farmaceutisk præparat egnet til behandling af 15 coronarsygdomme, kendetegnet ved, at det indeholder en effektiv mængde af en forbindelse med den almene formel

20 S

20 RiLN-C-N Π-C-OR. Γ'« r2 X Η Δ 25 eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf, hvori X betyder oxygen eller svovl, R betyder hydrogen eller alkyl, og Rx betyder hydrogen, alkyl, phenylalkyl, -CH2-(CH2)n-Y2 eller -CH2-(CH2)p-Y3 eller R og R-l sammen med det nitrogenatom, hvortil de er 30 bundet, betyder piperidinyl, R2 betyder alkyl, R2 betyder hydrogen, alkyl eller -CH2-(CH2)p-Y3, R4 betyder benzoxadiazolyl, phenyl eller phenyl substitueret med en, to eller tre nitro- eller trifluormethyl- 35 grupper, Y2 betyder alkoxycarbonyl, T DK 169031 Β1. Υ3 betyder amino eller amino substitueret med alkyl eller phenyl-(CH2)m-·, og m, n og p hver især betyder 0, 1 eller 2, samt en farmaceutisk acceptabel bærer for denne. 5 10 15 20 25 30 35