DK168959B1 - Dyrkningsflaskesamling til dyrkning af mikroorganismer - Google Patents

Description

DK 168959 B1.

i

Opfindelsen angår en dyrkningsflaskesamling, son er indrettet til at rumme et flydende næringsmedium i kanbination med et fast medium/ således at en fluidumprøve kan inkuberes i det flydende næringsmedium, og det fordyrkede flydende medium derefter benyttes til at 5 pode det faste medium og til at fortsætte væksten af organismer.

Påvisningen af mikroorganismer i legerasvæsker, især bakterier i blod, kræver, at en prøve af fluidumet benyttes til at pode et flydende næringsmedium. Dernæst benyttes det flydende medium 20 til at pode et fast medium til fortsættelsen af væksten af organismerne og til at gøre dem synlige for det blotte øje som kolonier.

Normale monofasesystemer består af et flydende medium i en 25 dyrkningsflaske eller en lille beholder, og som podes med en prøve af fluidumet og dernæst inkuberes i den ønskede tidsperiode (24-28 timer). Herefter udtages en prøve af flasken og benyttes til at pode et fast næringsmedium (f.eks. agar i en petriskål).

20

Denne fremgangsmåde er arbejdskrævende, undertiden farlig og giver risiko for forurening med mikroorganismer fra omgivelserne. Yderligere forurenes atmosfæren oven over det flydende medium og omkring det faste medium med omgivende luft, når 25 det faste medium podes. Dette er uønsket, når mikroorganismen kræver et anaerobt miljø.

Der er blevet udviklet påvisnings systemer eller detekteringssystemer, i hvilke flydende og faste dyrkningsmedier er kombi-30 neret i samme beholder. Ved sådanne systemer undgås den be sværlig og undertiden farlige overføring af det flydende dyrkningsmedium til det faste dyrkningsmedium. Eksempelvis beskriver U.S. patent nr. 2.992.974 en biologisk undersøgelsesindretning, i hvilken et fast medium er beliggende i den øvre 35 del af en rektangulær dyrkningsflaske, medens et flydende næringsmedium befinder sig i den nederste del af flasken.

DK 168959 B1.

2

Fra U.S. patent nr. 3.589.983 kendes en dyrkningsflaske, som er indrettet til at holde et fast agarnæringsmateriale på et sted langs flaskens aksiale centerlinie. Flasken indeholder også et flydende næringsmiddel, som kan adskilles fra den 5 faste agar ved at anbringe flasken på siden.

De ovenfor beskrevne indretninger, som kombinerer et flydende næringsmiddel med et fast næringsmiddel i en enkelt beholder, har den store ulempe, at dyrkningssamlingen må anbringes på 10 en bestemt måde, inden det faste medium bringes i kontakt med det fordyrkede flydende medium. De ovenfor beskrevne indretninger til adskillelse af det faste og flydende dyrkningsmedium er komplicerede og letter kun adskillelsen af det flydende medium og det faste medium under inkubation, men ikke 15 under transport. Disse konstruktioner er ikke velegnede for samling på fremstillingstidspunktet, fordi kontakt mellem det flydende og faste medium under forsendelse og opbevaring inden brugen bevirker, at bestanddele i det faste medium elue-rer ind i det flydende medium.

20 U.S. patent nr. 4.308.347 beskriver en indretning til detektering af mikroorganismer i en fluidumprøve og omfatter en første beholder, der indeholder et flydende næringsmedium, og en anden beholder, der indeholder et eller flere faste nærings-25 medier. Beholderne er adskilleligt forbundet, således at medier ne kan bringes i berøring med hinanden, når dette ønskes.

Den beskrevne indretning er kompliceret og kræver flere håndteringstrin for at bringe det fordyrkede flydende medium i kontakt med det faste medium.

30

En dyrkningsflaskesamling til detektering af mikroorganismer i legemsvæsker er beskrevet i EP-0.294.040 Al. Denne dyrkningsflaskesamling omfatter en enkelt beholder, der er opdelt i et første nedre rum og et andet øvre rum ved hjælp af en indvendigt i beholderen 35 værende flange. Et legeme er indrettet til at blive indført i det andet øvre rum. Legemethar en nedre rundtgående rand, DK 168959 B1 3 som kan sænkes ned til parret indgreb med flangen. På den nedre rundtgående rand er der anbragt et elastisk materiale.

Et lukkeorgan er indrettet til at bevirke, at legemet bevæges nedad og presser det elastiske materiale mod flangen til af-5 lukning af beholderen og til aftætning af de to rum i forhold til hinanden. Det første nedre rum indeholder et flydende næringsmedium, og det andet øvre rum indeholder et eller flere faste medier. Gennem legemet er der en fluidumkanal, hvorved en prøve kan føres ind gennem en åbning i lukkeorganet og 10 ind i det flydende medium i det nedre rum. Efter at prøven er blevet inkuberet i det flydende medium i den ønskede tidsperiode, bevæges lukkeorganet til den anden stilling, som tilvejebringer et åbent rum oven over den indre flange, og gennem hvilket det fordyrkede flydende medium kan bringes 15 i kontakt med det faste medium, når beholderen vendes. Denne dyrkningsflaskesamling er en stor forbedring af tidligere indretninger, men der er mulighed for, at en person ved løsnelse af lukket for at bevæge legemet aksialt kan dreje lukket for langt og derved gøre det muligt for fluidum at lække ud af 20 beholderen, når samlingen vendes på hovedet.

Foreliggende opfindelse angår en ny ventilsamling til brug i en dyrkningsflaskesamling af den type, der er beskrevet i ovennævnte ansøgning. Ventilsamlingen omfatter en flange, et legeme 25 og et samvirkende middel. Legemet har en langstrakt del med en øvre og en nedre ende og en gennemgående passage. Et skørt strækker sig ud fra den langstrakte dels nedre ende. Det har en rundtgående rand, som er i indgreb med flangen til dannelse af en tætning. Skørtet kan bøjes som en reaktion på en nedadret-30 tet kraft på den langstrakte del. Det samvirkende middel skaber et mellemrum mellem skørtet og flangen, når skørtet bøjer ud som reaktion på en nedadrettet kraft på den langstrakte del. Det således dannede mellemrum er en fluidumpassage.

35 Det samvirkende middel kan hensigtsmæssigt være et eller flere fremspring, der strækker sig ud fra skørtets nedre overflade, og som kommer i indgreb med flangen, når skørtet bøjer ud DK 168959 B1 4 som reaktion på en nedadrettet kraft på den langstrakte del. Alternativt kan det samvirkende middel være et eller flere fremspring, der strækker sig ud fra flangen, og som er i indgreb med skørtets nedre overflade, når skørtet bøjer ud som 5 reaktion på en nedadrettet kraft på den langstrakte del.

Den langstrakte del og skørtet kan være tildannet ud i ét, eller de kan være tildannet separat og sammenføjet ved den langstrakte dels nedre ende. Når de er tildannet ud i ét, 10 har skørtet fortrinsvis en fleksibel sektion, der har et tvær snit, der er mindre end tværsnittet af resten af skørtet.

Dyrkningsflaskesamlingen ifølge opfindelsen omfatter en beholder med et nedre rum og et øvre rum. De to rum er adskilt 15 fra hinanden ved hjælp af en flange indvendigt i beholderen.

Det i beholderen værende legeme har en langstrakt.del med en øvre og en nedre ende og en gennemgående passage. Legemet har også et skørt, der strækker sig ud fra den langstrakte del. Skørtet har en rundtgående rand, der er indrettet til 20 at komme i indgreb med flangen til dannelse af en tætning.

Skørtet kan bøjes som reaktion på en nedadrettet kraft på den langstrakte del. Samlingen indbefatter yderligere et samvirkende middel, der er indrettet til at danne et mellemrum mellem skørtet og flangen ved udbøjning af skørtet. Det således 25 dannede mellemrum er en fluidumpassage. Endvidere er der til vejebragt et. lukke til aftætning af beholderen i forhold til et omgivende miljø. Et middel til overføring af en udvendig på beholderen påført kraft nedad på den langstrakte del gør det muligt for brugeren at pode et fast medium i det øvre 30 rum med væske indeholdt i det nedre rum uden at åbne behol deren.

Ved en særlig foretrukken udførelsesform er midlet til at overføre kraften nedad en fleksibel gennembrydelig skillevæg, 33 der er anbragt over for passagen gennem den langstrakte del.

Ved denne udførelsesform kan et flydende medium i det nedre rum podes med en prøve ved at sprøjte prøven ind gennem skille DK 168959 B1 5 væggen. Dyrkningsflaskesamlingen kan således være forsynet med .et flydende medium i det nedre rum og et eller flere faste medier i det øvre rum. Atmosfæren, der omgiver medierne, kan være specielt indrettet til at fremme væksten i medierne.

5

Ved den mest foretrukne udførelsesform bærer en holder en eller flere bakker, der indeholder faste medier. Holderen med dens bakker, den fleksible gennembrydelige skillevæg og lukket er indbyrdes forbundet til dannelse af en undersamling. 10 Med denne konstruktion kan det faste medium fjernes fra dyrk ningsflaskesamlingen ved at løsne lukket og fjerne undersamlingen. Denne foretrukne udførelsesform, der indeholder dyrkningsmedierne, kan forsendes og opbevares med det flydende og faste medium aftætnet i forhold til hinanden. Hele frem-15 gangsmåden ved dyrkning af en prøve i flydende medium efter fulgt af podning og dyrkning af det faste medium .kan gennemføres uden at åbne beholderen. Såfremt sekundær dyrkning af kolonier, der vokser på faste medier, er ønskeligt, kan de faste medier let fjernes fra dyrkningsflaskesamlingen.

20

Opfindelsen forklares nærmere nedenfor under henvisning til tegningen, hvor fig. 1 viser set i perspektiv et sprængbillede af ventilen 25 ifølge foreliggende opfindelse og en holder for fast medium, fig. 2 et længdesnit gennem en dyrkningsflaskesamling ifølge opfindelsen, idet ventilen befinder sig i dens aftætnende stilling, 30 fig. 3 et delsnit gennem dyrkningsflaskesamlingen med ventilen i dens åbne stilling, fig. 4 en alternativ udførelsesform for ventilsamlingen, idet 35 ventilen befinder sig i dens lukkede stilling, og fig. 5 den i fig. 4 viste udførelsesform, idet ventilen befinder sig i dens åbne stilling.

DK 168959 B1 6

Dyrkningsflaskesamlingen ifølge opfindelsen omfatter en beholder 111, som er opdelt i et nedre rum 113 og et øvre rum 115 ved hjælp af en flange 117. Flangen 117 kan være tildannet ud i ét med flasken, eller den kan være tildannet adskilt 5 fra beholderen. Når flangen 117 er tildannet separat, har den et ydre med en form svarende til formen af beholderens indre (f.eks. cylindrisk) og en ydre dimension (f.eks. diameter.) der er lidt større end beholderens indre dimension. Ved denne opbygning kan flangen anbringes i beholderen ved sammenpres-ning. Når beholderen og flangen er tildannet separat, er beholderen fortrinsvis fremstillet af glas, medens flangen fortrinsvis er fremstillet af et støbeligt materiale, såsom polyethylen eller polypropylen.

I5 Den foretrukne ventilsamling omfatter en flange 117 og et legeme 119. Legemet 119 er fortrinsvis fremstillet af et støbeligt plast, såsom polyethylen, og har en langstrakt del 120 og et skørt 121, der strækker sig ud fra den langstrakte del 120. Som vist i fig. 2 og 4 er skørtet 121 i indgreb med flangen 117 til dannelse af en fluidumtæt tætning. Skørtet 121 er konstrueret til at være fleksibelt som reaktion på et nedadgående tryk på den langstrakte del 120. Den langstrakte del 120 og skørtet 121 er fortrinsvis tildannet ud i ét, og skørtet har en fleksibel sektion 125 med et tværsnit, der 2 5 er tyndere end tværsnittet af resten af skørtet 121.

Som vist i fig. 1-3 strækker et antal fremspring 122 sig nedad fra skørtet 121. Disse fremspring 122 er samvirkende midler til at skabe et mellemrum 126 mellem skørtet 121 og flangen 3 0 117, når skørtet 121 bøjer ud som reaktion på en nedadgående kraft på den langstrakte del 120. Ved den foretrukne konstruktion bevirker en tilstrækkelig nedadrettet kraft på den langstrakte del 120, modvirket af en opadrettet modstandskraft, når skørtet 121 kommer i indgreb med flangen 117, at skørtet 3 5 121 drejer om den fleksible sektion 125 og vendes til den i fig. 3 og 5 viste stilling. Når skørtet 121 bøjer som reaktion på den nedadrettede kraft på den langstrakte del 120, DK 168959 B1 7 kommer fremspringene 122 i indgreb med flangen 117 til dannelse af et mellemrum mellem skørtet 121 og flangen 117. Når dyrkningsflaskesamlingen vendes på hovedet, strømmer fluidum i det nedre rum ind i det øvre rum og poder fast medium inde-5 holdt i dette rum.

En alternativ udformning for ventilsamlingen er vist i fig.

4-5. Ved denne udformning har flangen 117 fremspring 122, der tjener som samvirkende midler til at danne et mellemrum 10 126 mellem skørtet 121 og flangen 117, når flangen bøjer ud som reaktion på en nedadrettet kraft på den langstrakte del 120.

Dyrkningsflaskesamlingen indbefatter endvidere et lukke 127 15 og en fleksibel gennembrydelig skillevæg 128. Lukket 127 er fortrinsvis fremstillet af et støbeligt plast eller metal og har på dens indre overflade gevind 129, som svarer til gevind 130 på beholderens 111 ydre overflade. Skillevæggen 128 er forbundet med lukket 127. Lukket og skillevæggen tjener 20 til aftætning af hele beholderen fra de ydre omgivelser.

Skillevæggen dækker den øvre ende af den langstrakte del.

På grund af at skillevæggen er fleksibel, vil en på skillevæggen påført kraft blive overført til den langstrakte del, såle-25 des at ventilsamlingen kan aktiveres uden at åbne beholderen.

En fastmedieholder 131 har en eller flere bakker til at bære faste medier. Bakkerne kan være tildannet ud i ét med holderen-eller tilvejebragt separat. Som vist i fig. 1-3 er holderen 30 131 forbundet med skillevæggen 128. Holderen har et T-formet fremspring 134, som er parret med et spor 135 på undersiden af skillevæggen. Den af tre dele bestående undersamling omfattende holderen, skillevæggen og lukket kan fjernes fra dyrkningsflaskesamlingen som en enhed. Denne undersamling tilveje-35 bringer en hensigtsmæssig og sikker måde til håndtering af de faste medier, når sekundær dyrkning af kolonier på de faste medier er ønsket.

8 DK 168959 B1

En passage 123 strækker sig gennem det langstrakte legeme 120. Når skillevæggen, der dækker den øvre ende af det langstrakte legeme, er fremstillet af et selvklæbende gennembrydeligt materiale, kan en fluidumprøve sprøjtes ind i beholderens 5 nedre rum gennem skillevæggen og passagen.

Den sidste del hørende til den foretrukne udførelsesform er et støvlåg 133, som beskytter skillevæggen mod omgivelserne under forsendelse og opbevaring. Støvlåget 133 kan fjernes, 10 når prøven sprøjtes ind i beholderen. Støvlåget kan fjernes eller forblive på plads, når ventilen aktiveres.

Dyrkningsflaskesamlingen er velegnet til at blive forfyldt med flydende og fast medium på fremstillingstidspunktet. Det 15 flydende og faste medium kan vælges efter kundens ønske til den påtænkte brug.· Samlingen kan således fyldes med flydende medium, som vil fremme væksten af et bredt spektrum af mikroorganismer, og de faste medier kan indeholde selektivmidler, således at kun mikroorganismer af en enkelt slægt eller art 20 vil vokse. Yderligere kan der, når holderen 132 har flere bakker 133, benyttes flere faste medier.

Ved foreliggende opfindelse er der tilvejebragt en meget enkel indretning til transport af en på forhånd med både flydende 25 og fast mediefyldt beholder og til dyrkning af en prøve i det flydende medium efterfulgt af podning af det faste medium med det fordyrkede flydende medium. Dyrkningsflaskesamlingen ifølge opfindelsen tillader transport af det flydende medium og det faste medium i separate forseglede rum og tilveje-30 bringer midler til let at bringe det fordyrkede flydende me dium i berøring med det faste medium, når dette ønskes.

35

Claims (10)

1. Ventilsamling, kendetegnet ved, at den omfatter 5 et ventilsæde, et legeme, som omfatter en langstrakt del med en øvre og en nedre ende og en passage herigennem, og et skørt, som er drejeligt forbundet med den nedre ende af den langstrakte del og har en rundtgående rand, der er indrettet til at komme i indgreb med ventilsædet til dannelse af en tætning, og hvorhos 10 den langstrakte del er anbragt på oversiden af skørtet, og ventilsædet er beliggende på undersiden af skørtet, og skørtets rundtgående rand kan drejes som reaktion på en nedadrettet kraft på den langstrakte del, og hvilken samling yderligere omfatter samvirkende støttemidler, der er indrettet til at 15 skabe et mellemrum mellem skørtet og ventilsædet ved drejning af skørtets rundtgående rand med henblik på dannelsen af en fluidumpassage.

2. Dyrkningsflaskesamling, kendetegnet ved, at den 20 omfatter en beholder, som har et nedre rum og et øvre rum, et indvendigt i beholderen mellem det nedre rum og det øvre rum anbragt ventilsæde, et legeme, som omfatter en lang strakt del med en nedre og en øvre ende og en passage herigennem, og et skørt, der strækker sig ud fra den langstrakte dels 25 nedre ende og har en rundtgående rand, som er indrettet til at komme i indgreb med ventilsædet til dannelse af en tætning, og som er drejelig som reaktion på en nedadrettet kraft på den langstrakte del, hvilken samling yderligere omfatter samvirkende midler, der er indrettet til at danne et mellemrum 20 mellem skørtet og ventilsædet ved drejning af skørtets rundtgå ende rand med henblik på dannelse af en fluidumpassage, et lukke, der er indrettet til at aftætne beholderen i forhold til det omgivende miljø, og som indbefatter et middel, som er indrettet til at føre en udvendig på beholderen påført 35 kraft nedad til den langstrakte del, og som er tilgængelig uden at åbne beholderen. DK 168959 B1 10

3. Samling ifølge krav 1 eller 2, kendetegn'et ved, at det samvirkende middel er mindst ét fremspring, der strækker sig ud fra skørtets nedre overflade til at komme i indgreb med ventilsædet, når der udøves en nedadrettet kraft på den 5 langstrakte del.

4. Samlig ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at det samvirkende middel er mindst ét fremspring, der strækker sig ud fra ventilsædet til at komme i indgreb med skørtet, 10 når der udøves en nedadrettet kraft på den langstrakte del.

5. Samling ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at det samvirkende middel er et antal fremspring, der strækker sig ud fra skørtets nedre overflade til at komme i indgreb 15 med ventilsædet, når der udøves en nedadrettet kraft på den langstrakte del.

6. Samling ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at den langstrakte del og skørtet er tildannet ud i ét, og 20 skørtet har en fleksibel sektion med tyndere tværsnit end tværsnittet af resten af skørtet.

7. Samling ifølge krav 6, kendetegnet ved, at midlet til overføring af den nedadrettede kraft er en fleksibel 25 gennembrydelig skillevæg, der er anbragt således hen over passagen, at en prøve kan podes ind i det nedre rum gennem skillevæggen og passagen uden at åbne beholderen.

8. Samling ifølge krav 2, kendetegnet ved, at den 30 yderligere omfatter et flydende dyrkningsmedium i det nedre rum og en holder, der har mindst én bakke indeholdende et fast medium i det'øvre rum.

9. Samling ifølge krav 2, kendetegnet ved, at den 35 yderligere omfatter et flydende dyrkningsmedium i det nedre rum og en holder, der indeholder et antal bakker, idet hver bakke holder et fast medium i det øvre rum. DK 168959 B1 11

10. Samling ifølge krav 9, kendetegnet ved, at holderen, midlet til at overføre det nedadrettede tryk og lukket er således indbyrdes forbundet, at de kan fjernes fra samlingen som en enkelt enhed. 5