DK161738B - Fremgangsmaade til indblanding af et laegemiddel i et rygeligt tobaksprodukt - Google Patents
Fremgangsmaade til indblanding af et laegemiddel i et rygeligt tobaksprodukt Download PDFInfo
- Publication number
- DK161738B DK161738B DK179384A DK179384A DK161738B DK 161738 B DK161738 B DK 161738B DK 179384 A DK179384 A DK 179384A DK 179384 A DK179384 A DK 179384A DK 161738 B DK161738 B DK 161738B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- interferon
- cells
- cigarettes
- cigarette
- smoke
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 50
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 235000019505 tobacco product Nutrition 0.000 title claims abstract description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 14
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims abstract description 246
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims abstract description 242
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims abstract description 220
- 235000019504 cigarettes Nutrition 0.000 claims abstract description 83
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 25
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 7
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 6
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 6
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 claims description 6
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims description 6
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims description 6
- 235000019506 cigar Nutrition 0.000 claims description 4
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 claims description 3
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 claims description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 claims description 2
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 claims description 2
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 claims description 2
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 28
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 abstract description 20
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 10
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract description 8
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 abstract description 7
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 abstract description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 47
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 38
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 27
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 18
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 18
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 13
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 13
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 239000002799 interferon inducing agent Substances 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 7
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 6
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 6
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 6
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 5
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 5
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 5
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 5
- 238000011045 prefiltration Methods 0.000 description 5
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 description 4
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 3
- 231100000357 carcinogen Toxicity 0.000 description 3
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 3
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 3
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 3
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- FMMWHPNWAFZXNH-UHFFFAOYSA-N Benz[a]pyrene Chemical compound C1=C2C3=CC=CC=C3C=C(C=C3)C2=C2C3=CC=CC2=C1 FMMWHPNWAFZXNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100148606 Caenorhabditis elegans pst-1 gene Proteins 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 2
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000726306 Irus Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000003413 degradative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 2
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 2
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 2
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150090724 3 gene Proteins 0.000 description 1
- CKTSBUTUHBMZGZ-ULQXZJNLSA-N 4-amino-1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-tritiopyrimidin-2-one Chemical compound O=C1N=C(N)C([3H])=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 CKTSBUTUHBMZGZ-ULQXZJNLSA-N 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 1
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 102000004594 DNA Polymerase I Human genes 0.000 description 1
- 108010017826 DNA Polymerase I Proteins 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 101000599940 Homo sapiens Interferon gamma Proteins 0.000 description 1
- 108010058683 Immobilized Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 108010021757 Polynucleotide 5'-Hydroxyl-Kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000008422 Polynucleotide 5'-hydroxyl-kinase Human genes 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 230000001064 anti-interferon Effects 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000746 body region Anatomy 0.000 description 1
- 125000000837 carbohydrate group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003256 environmental substance Substances 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000012051 hydrophobic carrier Substances 0.000 description 1
- 230000002977 hyperthermial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 210000000088 lip Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000011885 synergistic combination Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000008189 vertebrate development Effects 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONSIBMFFLJKTPT-UHFFFAOYSA-L zinc;2,3,4,5,6-pentachlorobenzenethiolate Chemical group [Zn+2].[S-]C1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl.[S-]C1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl ONSIBMFFLJKTPT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
- A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
- A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
- A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
- A24B15/28—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances
- A24B15/30—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
- A24D—CIGARS; CIGARETTES; TOBACCO SMOKE FILTERS; MOUTHPIECES FOR CIGARS OR CIGARETTES; MANUFACTURE OF TOBACCO SMOKE FILTERS OR MOUTHPIECES
- A24D1/00—Cigars; Cigarettes
- A24D1/18—Selection of materials, other than tobacco, suitable for smoking
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
- A24D—CIGARS; CIGARETTES; TOBACCO SMOKE FILTERS; MOUTHPIECES FOR CIGARS OR CIGARETTES; MANUFACTURE OF TOBACCO SMOKE FILTERS OR MOUTHPIECES
- A24D3/00—Tobacco smoke filters, e.g. filter-tips, filtering inserts; Filters specially adapted for simulated smoking devices; Mouthpieces for cigars or cigarettes
- A24D3/06—Use of materials for tobacco smoke filters
- A24D3/14—Use of materials for tobacco smoke filters of organic materials as additive
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Manufacture Of Tobacco Products (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Description
i
DK 161738 B
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til indblanding af et lægemiddel i et rygeligt tobaksprodukt, som er ejendommeligt ved det i krav l's kendetegnende del anførte.
5 Adskillige patentskrifter omhandler præparering af cigaretter generelt (US patentskrifterne nr. 977.635, 1.974.242, 2.418.
296 og 4.021.364) med vitaminer {US patentskrifterne nr. 2.198.188, 2.890.973, 3.244.180, 3.339.558 og 3.667.478) med elektriske ladninger {US patentskrift nr. 3.240.212), etc.
10 Disse præpareringer hævdes at være gunstige i sig selv eller med henblik på at neutralisere eller reducere giftvirkninger af røg, der inhaleres af rygere, virkninger såsom vækstundertrykkelse, dårligt åndedræt, høfeber, cancer, emphysema og hjertesygdom. Disse patentskrifter tilvejebringer antagelig-15 vis midler til at genoprette reserver af biologiske forbindelser, som reduceres af cigaretrøg eller til modvirkning af de påståede skadevirkninger af cigaretrøg, men de hævder ikke at tilvejebringe en mere effektiv præparering end den, der opnås ved den særskilte administration af medikamentet. I forbindel-20 se med overvejelse af de hidtil opnåede resultater fik jeg den idé, at der kunne opnås signifikant bedre resultater ved at anvende et medikament, som vil virke synergistisk med cigaretrøg. Jeg fremkalder synergien ved at kombinere cigaretter med et naturligt medikament, interferon, hvis aktivitet forøges af 25 betingelserne ved rygning, og som er målrettet mod celler, der er særligt udsatte af røgen. Jeg tilvejebringer yderligere hidtil ukendte fremgangsmåder til stabilisering af interferon, således at dets biologiske aktivitet kan bevares under de sædvanlige forhold ved cigaretfremsti 11ing, lagring og brug.
30
Interferon blev først karakteriseret som et virksomt anti-vi-ralt middel (Isaacs og Lindenmann, Proceedings Royal Society London, Series B. bind 147, side 258-276, 1957) og har siden vist sig at have væksthæmmende (anti-cancer) virkninger (Pau-35 cker et al., Virology, bind 17, side 324-334, 1962) {anmeldt af Taylor-Papadimitriou, i Interferon redigeret af Gresser, bind 2, side 13-46, 1981). Interferon aktiverer også tumorim- 2
DK 161738 B
munsystemet (Trinachieri et al., Journal of Experimental Medicine, bind 147, side 1299-1305, 1978). Jeg sluttede først, at interferon ved passende koncentrationer faktisk kan omdanne visse maligne celler til normale celler ved en proces, der 5 benævnes "differentiering." eller cellemodning (Gillespie og Carter, Texas Reports i Biology and Medicine, in press, 1982). Forsøgsresultater, som er omtalt i Gillespie og Carter (ibid), understøtter mine slutninger, at interferon kan eliminere cancer i dets tidligere stadier, hvis tumorcellerne udsættes for 10 interferonet over et sådant tidsrum, at tumorcellerne ændres til at blive normale via en modning eller normal udviklingsproces. Denne opdagelse indebærer helt klart, at tumorceller vil blive elimineret, når de dannes i det menneskelige legeme, hvis der udtænkes en effektiv metode, hvorved interferonet 15 gentagne gange og effektivt placeres i de områder af legemet, hvor de første små reder af maligne celler bryder frem. Sådanne tumorreder spredes sædvanligvis, hvis de ikke lades ude af kontrol ud over deres lokale grænser, hvilket til sidst fører til en symptomatisk sygdom og død. Jeg har desuden fået 20 bevis for, at personer, der er angrebet af lungecancer, har en defekt i deres immunforsvarssystemer, hvilket tilsyneladende delvis eller helt skyldes utilstrækkelig udbygning af intei— feroner i deres legemssystemer (Strayer, Carter, et al., in press, 1982).
25
Det er således vigtigt at stabilisere interferon med henblik på at kombinere interferon med produkter, hvis uheldige virkninger interferon kan hindre, men hvis fremstilling, lagring og brug er uforligelig med bevarelsen af interferons biolo-30 giske aktivitet. De to processer jeg beskriver til stabiliseringen af interferon er hidtil ukendte og ikke nærliggende.
Som et vigtigt eksempel gennemføres stabiliseringen af interferonprotein med henblik på at kombinere interferon med ind-35 retninger til rygning samlet benævnt "cigaretter". En sådan kombination er synergisti sk. Den er synergistisk på grund af, at virkningen af interferon forøges i de celler, som opvarmes 3
DK 161738 B
af cigaretrøgen, f.eks. den hypotermiske virkning, der er påvist af Heron og Berg (Nature 274:508-510, 1978). I dette arbejde blev det påvist, at en forøgelse af omgivelsernes temperatur med så lidt som 2-3°C kan tjene til at forøge virkningen 5 af lave doser af interferon i forbindelse med hæmning af væksten af lymphomaceller ca. 800%. Endnu senere påviste Delbruck et al., (Biomedicine 33: 239-241, 1980) en 100 gange potentie-ring af interferons evne til at dræbe osteosarcomaceller ved at forøge temperaturen blot 2°C fra 37°C til 39eC. Da udgangs-10 røgen fra en cigaret er 40-50eC (Report of the Surgeon General, Department of Health, Education and Welfare, 1979, side 14:36), vil overfladen af celler i mundhulen, halsen og muligvis lungerne blive mærkbart forøget og vil potentiere virkningen af interferon båret til disse celler. Den er også syner-15 gistisk på grund af, at det hydrofobt stabiliserede interferon går i kombination med røgbestanddele, f.eks. med hydrofobe carcinogener såsom 3,4-benzopyren og partikler, som bærer dette carcinogen, og interferonet bliver følgelig målrettet, specielt mod celler, der påvirkes af røgcarcinogener, potentielle 20 cancerceller. Som påvist af Horoszewic et al., (Science 206:1091-1093, 1979) er den desuden synergistisk på grund af, at interferon fortrinsvis indvirker på tumorceller, f.eks. de, der er forårsaget af forudgående rygning. Synergien forøges endeligt på grund af, at interferon administreres samtidigt og 25 lokalt med cigaretrøgen. Det kan ses, at den af rygeren indtagne interferonmængde hænger direkte sammen med antallet af røgne cigaretter, dvs. udsættelsen for carcinogene stoffer. Rygeren kan desuden ikke glemme at tage dette interferontilskud før rygning, da interferonet er en bestanddel af genstan-30 den, der ryges. Selv om det kan være indlysende, at interferon er et potentielt middel til helbredelse af cancer forårsaget af cigaretrygning, hvadenten det administreres trinvis eller samtidigt, er den synergi, jeg har opdaget mellem interferon og cigaretter ikke indlysende, og egnede midler til at stabi-35 lisere interferon til kombination med cigaretter er ikke nærliggende.
4
DK 161738 B
Luftbårne miljøforurenende stoffer, herunder cigaretrøg, kan forøge risikoen for lungecancer og muligvis andre cancerformer, men den latente periode er lang, og det har hidtil været umuligt at standse eller effektivt udrydde den opstående can-5 cer på et tidligt stadium. Mange humane cancerformer synes at være resultatet af en person med legemlig foruddisponering (enten arvet eller erhvervet) for denne sygdom ved, at de gentagne gange er blevet udsat for en anden påvirkning, som kaldes den miljøudløsende faktor (se anmeldelse i U.S. Department 10 of Research, 1971-1981, 1981). Opfindelsen omfatter en fremgangsmåde, hvorved begge de ovennævnte forhold i forbindelse med udviklingen af lungecancer korrigeres, nemlig: (1) eks ternt fremstillet interferon stilles til rådighed for legemsvævet som erstatning for mulige defekter (hvadenten disse er 15 nedarvede eller erhvervede) i dens fremstilling i selve legemet (retablerer derved legemets immunforsvar mod cancer) og yderligere (2) de cancerfremmende virkninger af skadelige car-cinogene stoffer, som er i hvert tilfælde kan tilsidesætte legemets forsvarssystem, angribes og elimineres til slut af 20 det aflejrede interferons yderligere lokalt rettede virkninger, nemlig via dets tilføjede evne til direkte at omdanne den maligne celle til en normal via en "differentierings"-proces.
Formålet med fremgangsmåden ifølge opfindelsen er at udnytte 25 den regelmæssige cigaretrygning til at lette overførsel til specifikke dele af legemet af dette naturligt forekommende interferonstof med mange gunstige virkninger.
Indføringen af interferon i tobaksprodukter tilvejebringer så-30 ledes et hidtil ukendt middel til at transportere interferon effektivt til angrebne hulheder, lunger og nasal hul rum, og derved lokalt fremkalde de forskellige interferonvirkninger, herunder de forskellige forsvar, der fremkaldes af interferon, og som kollektivt skulle eliminere cancercellerne, efterhånden 35 som de opstår efter en periode med langvarig udsættelse for en række luftbårne miljømæssige forureningsstoffer, herunder muligvis carcinogene stoffer. Anvendelsen af produktet fremstil- 5
DK 161738 B
let ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen skulle derfor reducere forekomsten af forskellige cancerformer, specielt de, som optræder i lungerne, halsen og mundhulen. Anvendelsen af produktet ifølge opfindelsen er også blevet afprøvet med hensyn 5 til at forøge legemets samlede modstandsdygtighed over for andre sygdomme, således som de sygdomme, der stammer fra den kroniske inhalering af fremmed partikel formet stof (som hænger sammen med udviklingen af emfysem og kronisk bronchitis) og inhalering af luftbårne smitsomme humane vira (som hænger sam-10 men med diverse infektionssygdomme såsom lungebetændelse, influenzasyndrom, forkølelser, etc.). Resultaterne af disse in vitro undersøgelser (se eksemplerne) indicerer, at en person, som regelmæssigt anvender det ifølge opfindelsen fremstillede produkt (dvs. ryger cigaretprodukter, der er imprægneret med 15 forskellige typer interferon), skulle resultere i en række gunstige legemsvirkninger, herunder reduceret hyppighed af cancer, reduceret hyppighed af emfysem/kronisk bronchitis såvel som et generelt bedre helbred via en samtidig reduktion af virus- og infektionssygdomme. En reduceret modtagelighed for 20 visse typer af vaskulær- (blodkar) sygdomme, som antages at blive forøget hos storrygere, kan også optræde, da man ved, at interferon antagoniserer visse faktorer, som hjælper med til lukningen (okklusion) af blodkarvægge.
25 For at opnå denne række af gunstige virkninger tilvejebringes en fremgangsmåde til kombinering af alle typer af interferoner og alle typer af interferoninducerende stoffer, (som udløser interferonproduktion i legemet) med cigaretter. Denne fremgangsmåde vil helt klart være gunstig for menneskeheden ved at 30 reducere hyppigheden af cancer og andre frygtede sygdomme, hvis skadelige virkninger kan neutraliseres ved hjælp af interferon, som anbringes gentagne gange i fysisk sammenstilling med de sårbare og/eller tidligt angrebne celler. Fremgangsmåden kan også tilpasses til et helt interval af andre 35 carcinogene stoffer, hvis skadelige virkninger modvirkes af den lokaliserende virkning af høje koncentrationer af interferon ved deres indgangsporte til det humane legeme.
DK 161738 B
6
Humane interferoner i naturen er imidlertid en gruppe af proteiner, og den biologiske virkning af proteiner er ofte labil {nedbrudt) under visse betingelser, (f.eks. varmeændringer, ændringer i surt/alkalisk miljø, turbulens og/eller forskyd-5 ningsvirkninger [hvirvelrotation], etc.)· For at reducere labiliteten af den biologiske aktivitet af interferoner har jeg yderligere indført en ny klasse af interferoner, som er fremstillet af stykker (komponenter eller specielle aminosyre-sekvenser) af enten naturlige eller syntetiske interferoner 10 til tilvejebringelse af molekylstabiliteten med henblik på at opretholde de ønskede biologiske virkninger under meget forskellige betingelser i omgivelserne. Fragmenterne eller stykkerne kan typisk have 10 til 15% af den normale itiole-kyllængde af interferoner, idet de mere eller mindre har 25-45 15 aminosyrer i længden frem for de sædvanlige ca. 162 aminosyrer. Bestemmelsen af disse essentielle aminosyrestykker (eller -sekvenser) ud fra den samlede længde af humane interferoner blev muliggjort ved vores nye analyser (lettet ved hjælp af computer) af områder (eller regioner) af mange for-20 skellige interferoner bevaret under hvirveldyrsudviklingen.
Ud over gunstige fysisk-kemiske egenskaber vil interferonstykkerne eller -sekvenserne også være nyttige ud fra et omkost-ningsmæssigt/effektivitetsmæssigt synspunkt, idet deres ringe størrelse vil muliggøre fremstillingen heraf i stor målestok 25 til en brøkdel af omkostningerne for de hele interferonmolekyler og ved hjælp af en række fremstillingsmetoder, såsom rekombinant DNA-metodologi, fastfasesyntese, etc..
Imidlertid anerkender jeg, at fremstillingen og afprøvningen af stabile bioaktive stykker af interferon på utilfredsstillende 30 måde kan forsinke virkeliggørelsen af den foreliggende opfindelse. Jeg opfandt derfor et simpelt og økonomisk middel til stabilisering af naturlig interferon ved begrænsning af antallet af alternative stadier, molekylet kan antage. Jeg gennemførte dette ved at fremkalde svage hydrofobe påvirkninger mellem 35 interferon og et andet stof, sædvanligvis 7
DK 161738 B
et protein.
Jeg kombinerer interferon med tobaksprodukter, her under cigaretter. Jeg beskriver nødvendige og hidtil ukendte midler til stabilisering af interferoner ved anvendelse af 5 "stykker af interferon" og ved at kombinere interferon med visse bærere - for at bevare biologisk aktivitet trods høje temperaturer, nedbrydende kemikalier og langvarig lagring. Noget af det stabiliserede interferon går i forbindelse med røgpartikler og målrettes derved mod afvigende celler og til-10 vejebringer en synergistisk virkning mellem interferon og cigaretrøg, som ikke er mulig ved at indføre interferon særskilt, f.eks. med en forstøver.
Kort beskrivelse af den kendte teknik.
Carter, W.A., 1979, Life Sciences 25: 717-728; Gillespie og 15 Carter, 1982 a,Handbook of Experimental Pharmacology of Interferon, in press; Derynk et. al., 1980, Nature 285: 542-547; Gillespie og Carter, 1982 b, Texas Rep. Biol. Med., in press; Carter, W.A., Handbook of Experimental Pharmacology on Interferon, in press, 1982; Strayer, D.R., Carter, W.A., et. al., 20 1982, Abstracts of 13th International Cancer Congress, in press; Carter, W.A. et. al., 1980. Program Grant Proposal P01CA29545 til National Cancer Institute; Carter, W.A. og Horoszewicz, J.S., 1980, Pharmacology and Therapeutics 8: 359-377; Isaacs og Lindenmann, Proceedings Royal Society Lon-25 don, Series B Volume 147 pp. 258-267 (1957); Paucker et. al., Virology Volume 17 pp. 324-334 (1962); Taylor Papadimitriou, i "Interferon" (Gresser, ed.,), Volume 2 pp. 13-46 (1981), Derynk et. al., Nature, Volume 285 pp. 542-547 (1980); Goeddel et. al., Nature, Volume 290 pp. 20-26 (1980); Shepard et.
30 al., Nature, Volume 294 pp. 563-565 (1981).
8
DK 161738B
Fra US patentskrift nr. 2.890.973 er det kendt at indblande β-pyridincarboxylsyre og adenosintriphosphat i tobaksprodukter. Fra US patentskrifterne 3.339.558 og 3.667.478 er det kendt at ^ iblande stabiliseret vitamin A i et cigaretfilter. Endelig 5 foreslåer Jules Martin Lande (Alien Property Custodian (1939), Jules Martin Lande: Tobacco products and process of making same) at blande forskellige kemiske stoffer, f.eks. lægemidler, i tobak eller tobaksprodukter. I de nævnte skrifter omtales intet om den tidligere nævnte synergi, der opnås ved at 10 kombinere tobaksprodukter med interferon, hvis aktivitet forøges under de betingelser, der hersker ved rygning, og der er således heller ikke nogen anvisninger på exogen tilsætning af interferon, biologisk aktive fragmenter af interferon eller stoffer, som bevirker dannelse af interferon i det humane 15 legeme, i tobaksprodukter.
Forklaring af opfindelsen
Der tilvejebringes fremgangsmåder og midler til frembringelse 20 og rensning af stykker af interferon med biologisk aktivitet og med forøget stabilitet. Det tilvejebringes også fremgangsmåder og midler til at kombinere stykker af interferon eller helt interferon (eller interferon-inducere) med cigaretter på en sådan måde, at der muliggøres levering af forøget inter-25 feronaktivitet til celler, der udsættes for cigaretrøg. Der vil komme en række ønskelige og gunstige resultater herunder: (1) Interferon og cigaretrøg virker synergistisk med hensyn til at tilvejebringe forsvar mod opstående cancerceller, in-30 ficerede indåndingsvira, etc. De biologiske virkninger af interferon, som giver disse ønskede medicinske virkninger, forøges af forøgede temperaturer i tobaksrøg (den hyperter-miske virkning opdaget af Heron og Berg, Nature 274: 508-510, 1978).
35 9
DK 161738 B
(2) En hvilken som helst carcinogen virkning af cigaretrøg kan fjernes på det tidspunkt, røgen kommer ind i de forskellige humane væv, da interferonet, som transporteres sammen med de muligvis skadelige midler (enten flygtigt stof eller partikel- 5 formet stof) til de udsatte humanceller, stimulerer cellerne til at blive normale frem for at fortsætte deres maligne vej.
(3) En hvilken som helst bronchial nedbrydende virkning af fremmed partikelformet stof (elementære carbonpartikler, etc.) 10 vil blive formindsket eller helt fjernet ved opfindelsens påviste evne til at forøge effektiviteten af celler (macropha-ger), som normalt virker i lungerne ved at fjerne, opsluge eller på anden måde nedbryde skadeligt fremmed partikel formet stof i lungemikromiljøet og således hindre dannelsen af sådan-15 ne svækkede og patalogiske sygdomme som kronisk bronchitis, emfysem, etc.
(4) Eventuelle lokaliserede immunologiske defekter i lungen, der kan tilskrives for lave interferonkoncentrationer korrige- 20 res straks ved hjælp af produktet fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, og det antages desuden med rimelighed, at de immune celler (som udgør en del af legemets hele immunsystem), der er forøget i deres evne efter passage gennem lungen og forbigående påvirkning af det aflejrede interferon, 25 derpå kan cirkulere til andre dele af legemet. På denne måde kan interferonet, selv om det tilføres lokalt, have mangedoblede gunstige virkninger, og i sidste instans blive fordelt til forskellige andre dele af legemet (benævnt som en systemisk virkning). Sådanne fordele kunne involvere andre gunstige 30 systemiske virkninger, såsom inaktiveringen af blodpladevækst-faktoren, en komponent i den samlede proces, som lukker arterier og vener ved en patologisk proces.
(5) En hvilken som helst påvirkning med virusmidler i hele det 35 humane åndedrætssystem (næse, mund, svælg, luftrør, lunger.
DK 161738 B
10 etc.) vil blive mødt med kraftigt forøget vævsmodstandsdygtighed på grund af de antivirale virkninger af interferonmolekylerne, der er fordelt i de forskellige legemsområder. Når som helst opfindelsen udøves regelmæssigt, bliver interferonet på 5 åndedrætsvæv, som har mistet deres biologiske aktivitet, regelmæssigt erstattet med friske aktive interferonmolekyler.
Jeg kombinerer interferon med tobaksprodukter, herunder cigaretter. Jeg beskriver nødvendige og hidtil ukendte midler til 10 stabilisering af interferoner ved anvendelse af "stykker af interferon" og ved at kombinere interferon med visse bærere -for at bevare den biologiske aktivitet til trods for høje temperaturer, nedbrydende kemikalier og langvarig lagring. Noget af det stabiliserende interferon går i forbindelse med røg-15 partikler og målrettes derved til afvigende celler, hvilket giver en synergistisk virkning mellem interferon og cigaretrøg, som ikke er mulig ved at indføre interferon særskilt, f.eks. med en forstøver.
20 Jeg har bestemt, at visse store befolkningsgrupper har en større end normal risiko for cancer og andre alvorlige sygdomme, herunder sygdomme, som skyldes en række vira. Disse gruppers risici er større på grund af genetiske (medfødte) defekter, som giver en forøget forudbestemt tilbøjelighed til 25 at få cancer. Disse defekter er særligt udprægede, når sådanne befolkningsgrupper i miljøet udsættes for visse luftbårne car-cinogene stoffer eller vira. Produktet fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen påregner at korrigere disse defekter ved hjælp af interferon og fragmenter deraf og inter-30 feron-inducere, ved at forøge legemets immunforsvarssystem.
Hos personer med forøget risiko (i forhold til den almindelige befolkning) for cancer eller vira, er immunforsvarsceller ofte defekte. Jeg har påvist, at under den normale forbigående passage af sådanne celler gennem lungevævene, er en kort påvirk-35 ning af sådanne defekte celler med interferon (som forud er 11
DK 161738 B
blevet leveret og aflejret ved anvendelse af tobaksprodukter) tilstrækkelige til at korrigere defekt celleaktivitet og retablere den vitale cancerhindrende funktion.
5 På tegningen viser fig. 1 den primære sekvens af HUIFN-/3A, fig. 2 den 3-dimensionel le struktur af den på fig. 1 viste 10 sekvens, fig. 3 eksempler på sekvenser af klonede interferoner, og fig. 4 på skematisk måde en indretning til kombinering af 15 interferonpartikler med cigaretfiltre eller forfiltre til udøvelse af fremgangsmåden ifølge opfindelsen.
Beskrivelse af særlige udføre!sesformer 20 Denne opfindelse anvender den hidtil ukendte praksis med at fjerne eller modificere en del af interferonmolekylet for at frembringe forøget stabilitet samtidig med, at den biologiske aktivitet bevares. Fremgangsmåden ifølge opfindelsen giver en synergistisk kombination ved at kombinere interferon 25 med cigaretter for vedvarende at give et molekylært forsvar og fjernelse af opstående cancerceller i væv, der påvirkes af cigaretrøg. "Cigaretter" anvendes som en betegnelse, der også omfatter cigarer, piber, etc., dvs. alle rygelige emner. Udtrykket "interferon" og "stykker af interferon" vil blive 30 anvendt i flæng som betegnelse for naturlige interferon molekyler såvel som alle varianter med modifikationer af polypeptid- og carbohydratdele, som kan dannes, ikke blot i humane celler, men i ikke-humane celler, herunder bakterier, gær, abeceller, etc. Opfindelsen beskriver desuden et middel 35 til at stabilisere naturligt interferon og dets derivater ved at begrænse antallet af alternative stadier, disse molekyler 12
DK 161738B
kan indtage, f.eks. ved at hæfte interferonet eller derivaterne til en hydrofob bærer.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen vil blive delt i følgende trin: 5 I. Genkendelse af interferon-områder.
II. Fremstilling af stykker af interferon med valgte områder .
III. Stabilisering af interferon med bærere.
10 IV. Kombination af stykker af interferon og hele interferonmolekyler med cigaretter.
V. Kombination af interferon inducer/aktivatorer med cigaretter .
I. Genkendelse af interferonområder.
15 Gener, som koder for interferoner blevet klonet (f.eks. De-rynk, et. al., Nature, Volume 285, pp. 542-547, 1980). Disse gener er blevet ordnet i rækkefølge, Goeddel et. al., Nature, Volume 290 pp. 20-26, 1980; Derynk, et. al., Nature, Volume 285 pp. 542-547, 1980) og den primære struktur af ni af de 20 forskellige interferoner bestemt. Under anvendelse af computerprogrammer har jeg påvist områder, som er nødvendige for visse biologiske egenskaber (Gillespie og Carter, Handbook of Experimental Pharmacology of Interferon, in press.), af interferonsystemet og fremstillet stofferne til immobili-25 sering i cigaretter.
Det essentielle interferon tilskrives 13
DK 161738B
aminosyrerne 25-40 og 115-141 (fig. 1). Da alle interferoner fremkalder både antivirale og antineoplastiske reaktioner, udledes dette områdes stilling på basis af bevarelsen af den primære aminosyresekvens af dette område fra én 5 interferonart til en anden, specielt når bevarelsen ikke kan forklares med bevarelse af mRNA (messenger RNA) eller proteinform. Det biologiske reaktionsområde kan påvirkes af det eksterne miljø (fig. 2 og Gillespie og Carter, 1982) og således lette reaktionen med andre cellulære bestanddele.
10 Streuli et. al., (Proceedings National Academy of Science, U.S.A., Volume 78 pp. 2848-2852, 1981) anførte, at begge ender af interferonmolekylet var nødvendige for at fremkalde biologisk aktivitet i et spektrum af værtsceller.
15 interferonområdet, som blev påvist som værende væsentligt, men ikke nødvendigvis tilstrækkelig til binding til specifikke cellereceptorer, er aminosyrer 115-141 (Gillespie og Carter, 1982). Placeringen af dette område påvises ud fra homologi med et område af B-underenheden af koleratoksin (Lai, Journal 20 Biol. Chem. Volume 252 pp. 7249-7256, 1977) et stof, som konkurrerer med interferon om binding til cellereceptorer.
Mindst to stykker interferon vil være nyttige til at give cigaretter biologisk forsvar. Ét stykke består af det biologiske reaktionsområde selv, enten rent eller bundet til en anden 25 Jel for at lette indføringen i modtagelige celler. Et andet stykke består af det biologiske reaktionsområde stødende op til receptorbindingsommådet. Andre stykker af interferon, herunder det komplette polypeptid og prosthetiske grupper og tilføjelser dertil eller udeladelser deri eller begge dele 30 eller modifikationer deraf, kan også være nyttige.
Opfindelsen kan desuden udøves med et hvilket som helst af de naturligt forekommende eller syntetisk (bakteriel eller gær) fremstillede hele interferonmolekyler, som almindeligvis betegnes som a-(leukocyt-type), j3-(fibroblast-type) eller 14
DK 161738B
γ-(immun-type)-interferoner. Fordelene ved interferonstykkerne omfatter: stabilitet, let overførsel fra cigaret til lunger (på grund af lavere molekylvægt), muligvis bedre vævsindtrængning og lav antigenicitet.
5 II. Fremstilling af stykker af interferon med valgte områder.
Stykker af interferon kan fremstilles på flere forskellige måder. Til belysning er én velegnet fremgangsmåde beskrevet. Andre midler, såsom kemisk modifikation af naturlig interferon eller kemisk modifikation af klonet (syntetisk) hel interferon, 10 interferon-inducere, etc., er også anvendelige ved fremstilling af produktet ifølge opfindelsen.
Klonede interferongener kan skæres specifikke steder med specifikke restriktionsendonucleaser (fig. 3). Det resulterende interferongenfragment, der koder for et stykke af interferon-15 polypeptidet, kan sammensmeltes med en ekspressionsvektor indeholdende RNA-polymerasepromotor, ribosomebindingssted, initieringskodon og andre signaler, der måtte være nødvendige. Denne rekombinant DNA kan indføres i passende værtsceller med henblik på syntese af interferonstykket.
20 Specielt blev 5 μg af genet for human interferon 0, når det var "endevedhæftet" med polyA.dT og klonet i pBR322 inkuberet ved 37°C i 2- timer med 50 enheder EndoR.Pst 1 i 20 mM tris, pH 7,4, 10 mM MgC^, 50 mM (NR^^ SO^ til 100 mg/ml bovinserum-albumin for at spalte interferongenet og efterlade en enkelt-25 strenget ende fra baser 203-206 (fig. 3). DNA’en blev gjort 0,3M i kaliumacetat og udfældet fra ethanol. DNA'en blev opløst i 100 ml 50 mM kaliumphosphat, pH 7,4, 6,7 mM MgC^, 1 mM mercaptoethanol, 35 mM deoxyadenosin og deoxycytidin og 25 enheder af Klenow-fragmentenden af Escherichia coli 30 DNA-polymerase. DNA'en blev gjort 0,3 mM i kaliumacetat og udfældet fra ethanol. Det udfældede materiale blev opløst i 100 ml 30 mM natriumacetat, pH 4,6, 50 mM NaCl, 1 mM ZnSO^, 15
DK 161738 B
5% glycerol og 25 enheder SI nuclease og inkuberet ved 37°C i 1 time. Dette dannede et interferongenfragment med en stump ende lige op til nucleotid 204, den første baseret i kodeord for leucin ved stilling 45 (fig. 1 og 3). Natriumacetat blev 5 tilsat til 0,3M, og DNA'en udfældet fra ethanol.
5 μg af genet for human interferon /3 ("endevedhæftet" med polydA.dT og klonet i pBR322 blev inkuberet ved 37°C i 2 timer med 50 enheder Endo R MboII i 10 mM tris, pH 7,9, 6 mM KCl, 10 mM MgC^f 1 mM dithiothreitol og 100 mg/ml bovinserumalbu-10 min særskilt. DNA'en blev udfældet fra ethanol og behandlet med Sl-nuclease som beskrevet ovenfor. 228 baseparret, stump-endefragment indeholdende nucleotider 401-688 af interferongenet blev renset ved elektroforese gennem en 3% agarose.
En prøve på 0,25 mg af dette fragment blev inkorporeret med 15 5 pg Pst 1 - behandlet, DNA-polymerase - behandlet med SI
nuclease - behandlet DNA.
Udfældet materialet bestående af to DNA-fragmenter blev opløst i 10 ml 10 mM tris, pH 8,0, indeholdende 10 enheder bakteriel alkalisk phosphat og inkuberet ved 37°C i 2 timer. Opløsningen 20 blev derpå fortyndet til 100 ml med 2,3 M natriumacetat, holdt ved 65°C i 30 minutter, ekstraheret én gang med CHCl^ og derpå udfældet fra ethanol. Det udfældede materiale blev opløst i 10 ml 70 mM tris, pH 7,5, 100 mM KCl, 10 mM MgC^f 5 mM dithiothreitol, 300 mM riboadenosintriphosphat og 1 enhed 25 polynucleotidkinase og 10 enheder T4 DNA—ligase og inkuberet ved 37°C i 2 timer.
Den således dannede rekombinant DNA indeholdt et interferongen, der manglede nucleotider 205-400, som vil kode for et interferonpolypeptid, der mangler aminosyrer 46-111.
30 I de efterfølgende eksempler vil dette materiale blive betegnet som "interferonfragmentpolypeptid".
Dette rekombinant interferonfragment kan indføres i mange
DK 161738 B
16 egnede vektorer til ekspression af bakterielle eller pattedyrsceller under anvendelse af sædvanlige teknikker. Interferon eller stykker af interferon kan renses ved hjælp af standardmetoder/ selv om opfindelsen kan udøves med inter-5 feroner, som er under 1% rene, forudsat, at der ikke indgår på andre måder skadelige stoffer. Proteiner i opløsninger, der indeholder interferon bindes f.eks. i Cibachromcblå sepha-rose i fraværelse af ethylen eller propylenglycol. Søjlen 10 vaskes med en række opløsninger, som fjerner de fleste proteiner, bortset fra interferon, og interferonen elueres med opløsninger indeholdende ethylen- eller propylenglycol eller andre egnede elueringsmidler (Carter et. al., Pharmacology and Therapeutics, Volume 8 pp. 359-377, 1980). Om ønsket kan 15 yderligere rensning af Cibachromblåcfraktioner eller andet materiale opnås ved at lede interferonholdige opløsninger over søjlematricer indeholdende anti-interferon-antistoffer under anvendelse af konventionelle betingelser for binding og eluering.
20 Den ovenfor beskrevne rekombinant DNA kan fremstilles ved anvendelse af nogle af eller alle de samme enzymer under andre betingelser eller i andre sekvenser eller under anvendelse af varianter af de ovenfor anførte enzymer eller interferongener. Andre egnede rekombinant DNA'er kan dannes under an-25 vendelse af andre enzymer og andre protokoller. Endelig er anvendelsen af rekombinant DNA til opnåelse af stykker af interferon blot eksempler på midler til dannelse af et stykke af interferon. Andre midler, såsom en fastfasesyntese, proteo-lytisk spaltning af intakt materiale eller genetisk klonet 30 interferon fremstillet i bakterier og gær kan anvendes tilsvarende .
III. Stabilisering af interferon med bærere.
Interferon er, :ligesdm andré proteiner, et forholdsvis labilt kemikalium. Det afhænger af en meget specifik tre-dimensionel 17
DK 161738B
orientering af dets forskellige lineært ordnede aminosyrer med hensyn til opløselighed i vandige opløsninger og med hensyn til biologisk aktivitet (se fig. 1 og 2). Specielt skal områder af interferonmolekylet, som er ansvarlig for binding 5 til celler og for fremkaldelse af komplekse biologiske reaktioner, blive udsat for påvirkning på passende måde og bragt på linie. En imponerende ordnet række af vekslende ikke-funk-tionelle orienteringer er også mulig og kan frit dannes. Disse vekslende stadier fremmes af varme, visse eksterne kemikalier 10 og langvarig lagring.
En løsning på at hindre dannelsen af inaktive alternative stadier er at opbygge interferonmolekyler med et begrænset antal alternative stadier, dvs. stykkerne af interferon, der er beskrevet i del II. En anden opløsning, som opfinderen 15 har fundet, er at begrænse dannelsen af alternative stadier ved immobilisering af interferonen på et bærermolekyle eller en bærerstruktur.
Aktive enzymer findes ofte som en del af komplekse strukturer, bundet til cellemembraner, nucleinsyrer, proteiner, etc., 20 og enzymerne er sædvanligvis mere stabile, når de indgår i et kompleks. For at vurdere gennemførligheden af et sådant forsøg konstruerede jeg forskellige søjlematricer indeholdende forskellige ligander, som kunne være effektive stabilisatorer (se fig. 2, Carter, W.A., og Horoszwiwcz, J.S., 1980, Pharmac. 25 Ther. 8:359-377). Jeg tilsatte søjlen albumin.
Jeg tog et ikke-dialyseret interferonpræparat, 100 ml, indeholdende 11.500 enheder og 0,99 mg protein pr.
ml og overførte det til en søjle ved hjælp af en peristaltisk 2 pumpe med en strømningshastighed på 60 ml pr. cm pr. time.
30 Albuminsøjlen blev bragt i ligevægt med et 0,02 M natriumphos-phat (pH 7,4) indeholdende 0,14 M NaCl. Eluenten fra søjlen blev opdelt ved hjælp af en strømdelende anordning i et forhold på 1:9. 10%-delen af eluenten blev opsamlet i 1 ml af en 1% opløsning af bovinserumalbumin indeholdende 0,02 M na-
DK 161738B
18 triumphosphat og 0,15 M NaCl og anvendt til at bestemme interferonaktiviteten. 90%-delen af eluenten blev anvendt til at måle jaroteinkoncentrationen. Gennembrudsfraktionerne indeholdt ca. 98% af det tilførte protein og under 1% af den tilførte 5 interferonaktivitet. Yderligere eluering af søjlen skete med 50% (volumen/volumen) ethylenglycol og 50% 0,04 M phosphat, (pH 7,4) og 0,30 M NaCl. Resten (86%) af interferonaktiviteten blev udvundet med meget lidt (under 2%) af det oprindelige protein. Nogle af disse forsøg blev for nylig publiceret (Carlo ter, W.A., 1982, Methods in Enzymology 78:576-582, 1981).
Det ovennævnte forsøg viste, at interferon kunne kobles med serumalbumin, hvorimod de fleste andre cellulære proteiner ikke kunne. Forsøg med andre immobiliserede proteiner såsom cytochrom C viste, at interferon generelt er i stand til at 15 blive kombineret med proteiner. Jeg havde forestillet mig, at den kraftige hydrofobe karakter af interferon fremtvang reaktioner med almindeligt sekvestrerede hydrofobe lommer af andre proteiner,og dette forsøg viste, at hypotesen holdt stik. Uafhængigt af mekanismen sporede det ovennævnte forsøg 20 til udviklingen af komplekser med proteiner til stabilisering af interferon.
Den fremgangsmåde, jeg udviklede og ønsker patenteret til dette formål, er som følger: Human interferon kan fremstilles ved hjælp af konventionelle midler fra en hvilken som helst 25 biologisk kilde - fra humane celler, fra rekombinant mikroorganismer, etc.. Efter rensning kan human serumalbumin eller anden proteinholdig bærer tilsættes i overskud, sædvanligvis indtil 3 mg/ml. Opløsningen kan dialyseres mod phos-phatpufret saltvand eller anden passende puffer, hvorpå ma-30 terialet kan frysetørres. I et typisk eksempel blev 1 million enheder af renset interferon frysetørret med 3,46 mg natrium-phosphat. Stabiliteten af et sådant præparat er dokumenteret i eksempel 5.
DK 161738 B
19
Forskellige ændringer af denne fremgangsmåde er acceptabel på dette område, der ændrer sig hurtigt. Andre bærerproteiner end albumin eller cytochrom C er acceptable. Andre bærermolekyler eller -strukturer kan også være acceptable, såsom li-5 pider, små hydrofobe ligander, membranfragmenter eller endog faste partikler. Andre vedhæftningsmidler, såsom ioniske eller kovalente bindinger kan være egnede, når blot resultatet er stabilisering af interferonaktiviteten samtidig med, at den muliggør dens kombination med cigaretter. Andre salte 10 eller puffere eller andre koncentrationer af salt eller puffer (som ikke indeholder salt eller puffer) kan være acceptable. Jeg har ikke udforsket varianter af disse parametre. I nogle tilfælde kan dialyse være unødvendig. Det grundliggende formål med opfindelsen er at tilvejebringe en 15 stabil form af interferon, som kan kombineres med cigaretter, og som vil bevare biologisk styrke.
IV. Kombination af stykker af interferon med cigaretter.
I det følgende afsnit betyder "interferon" hel interferon og "stykker af interferon" som tidligere defineret, og omvendt 20 anvendes udtrykket "stykker af interferon" i dette afsnit også for hele molekyler.
Interferoner af alle kendte humane typer blev fremstillet i opfinderens laboratorier ved hjælp af accepterede standardteknikker (se vedrørende naturlig fibroblast-[/3]-inter-25 feron, Carter og Horoszewicz, Pharmacology and Therapeutics, Volume 8 pp. 359-377, 1980? vedrørende naturlig leukocyt-[oc)-interferon, Mogensen og Cantell, Pharmacology and Therapeutics, Volume I pp. 369-381, 1977, vedrørende naturlig immun— [γ]-interferon, Mizarhi, O'Malley, Carter, et. al., Journal 30 of Biological Chemistry, Volume 23 pp. 7615, 1978).
Interferonmolekyler skal sættes til cigaretter på en måde, som bevarer interferons biologiske aktivitet og tillader overførsel af interferon gennem mundhulen og ind i lungerne ved
DK 161738 B
20 hjælp af inhaleret cigaretrøg. Enkelthederne vedrørende kombinationsprocessen skal maksimere chancen for gunstig biologisk virkning, f.eks. anti-tumor-, immunologisk- og antiviral virkning i læberne, mundhulen og lungerne.
5 Adskillige fremgangsmåder til kombinering af stykker af interferon med cigaretter opfylder disse kriterier. Et typisk eksempel er angivet i det følgende, men skal på ingen måde betragtes som værende den eneste egnede form for processen.
Stykker af interferon og hele molekyler er blevet fremstil-10 let som eksemplificeret i afsnit II og afsnit III i den foreliggende beskrivelse eller på anden måde og lyofiliseret til et fint, tørt pulver under anvendelse af konventionelle fremgangsmåder og konventionelt udstyr. Interferon med en renhed på 0,01-100% er velegnet. Almindeligvis er en blanding af 15 1 del interferon og 99 dele human albumin, fraktion V, blevet lyofiliseret sammen til dannelse af partikler af passende masse og konsistens uden uønskede biologiske virkninger. Andre blandinger er mulige og anses for at være ækvivalente, herunder kombinationen af interferon med bærere, ligesom partikler 20 af cellulose og sædvanlige salte etc., når blot de ovennævnte træk (konsistens, styrke og mangel på bivirkninger) stemmer overens med slutproduktets mål. Det interferonholdige pulver kan blæses ind i filterenden af en forud fremstillet cigaret under anvendelse af luftstød af kort varighed, som skubber 25 en forudbestemt mængde interferonpulver et stykke, som ikke væsentligt overstiger afstanden til filteret plus længden af filteret selv (fig. 4). Interferonpartikler bliver løst blandet med og indlejret i filtre af celluloseacetat, et stof, som ikke ellers vil tilbageholde partiklerne gennem stærke 30 bindinger. Fremgangsmåden er ikke begrænset til cigaretter med filtre af celluloseacetat, men er imidlertid direkte velegnet til alle filtre, som ikke kemisk vil fastholde interferon på permanent måde og kan modificeres ved tilsætningen af et celluloseacetat eller noget andet forfilter for at in- 21
DK 161738B
kludere cigaretter, som indeholder en anden filtertype. Fremgangsmåden kan tilpasses til filterfri cigaretter, cigarer, piber og andre rygeanordninger ved, at der i anordningens røgstrøm anbringes en matrix f.eks. af cellulose eller cellu-5 1oseacetat, blandet med interferonpartikler. Ved at ryge sker en ændring af luftstrømmen, der anvendes til at kombinere stykkerne af interferon med cigaretten, og interferonpartiklerne vil blive trukket ind i røgen og bære interferon til celler, der udsættes for cigaretrøgen.
ig Et eksempel på en anordning til kombinering af interferonpartikler med cigaretfiltre eller forfiltre er vist i fig. 4.
Et luftstød leveres af en konventionel luftkilde - kompressor, motor med ventilator, membranpumpe, etc.. Luften drives langs et rør og strømmer forbi en interferonleveringsanord-3 5 ning, f.eks. et kammer, som agiteres eller på anden måde håndteres eller er konstrueret til at opretholde en jævn densitet af luftbårne interferonpartikler, og som afgiver et kendt volumen af dets indhold ind i røret. En stempelanordning er afbildet i fig. 4, men en hvilken som helst anordning er vel-2Q egnet, når blot den kan levere passende mængder af interferonpartikler til røret. Et forudbestemt volumen af de luftbårne partikler indføres i røret umiddelbart før luftstødet dannes. Under luftstødet føres interferonpartiklerne et bestemt stykke ind i cigaretten, som blev fremstillet ved hjælp af sædvan-25 lige fremgangsmåder. Luftstødet afsluttes, og interferonpartiklerne afsættes på filtermaterialet. Røret føres derpå til den næste cigaret (eller cigaretterne bevæges), og processen gentages. Den ovennævnte teknik er kun blevet beskrevet i enkeltheder som et eksempel. Der er andre mulige midler til 30 at kombinere interferonpartikler fremstillet ved lyofilisering med filtre, herunder aflejring af interferonpartikler på filtre ved hjælp af tyngdekraften, sprøjtning, pudring eller andre midler, som forårsager partikelbevægelse eller ved elektrisk tiltrækning, magnetisk tiltrækning eller andre belæg-35 nings- eller påføringsprocesser. Disse og andre alternative metoder falder inden for den foreliggende opfindelses omfang.
22
DK 161738 B
Desuden kan interferonpartikler kombineres med filtre på et hvilket som helst stadium af filterfabrikationen forudsat, at der ikke anvendes noget efterfølgende trin, som involverer opvarmning af filterkernen til en temperatur over 850°C (den 5 temperatur, som kræves til nedbrydning af peptidbindingen). Interferon kan kombineres med tobak i stedet for at blive kombineret med filteret eller kan blive kombineret med et forfilter, som derpå fastgøres til cigaretten. Interferon kan aflejres som en flydende opløsning eller halvfast stof eller 10 kolloid, etc. på et filtermateriale, tobak eller et forfilter med lignende resultater, selv om effektiviteten af fortrængningen er langt mindre. Alle disse modifikationer og yderligere tilpasninger på dette foranderlige område anses for at være en del af opfindelsen. Opfindelsen opfylder prin-15 cipielt kriterierne for immobilisering af interferon eller stykker af interferon eller i rygeanordninger på en sådan måde, at der tillades indeslutning i den af rygeanordningen dannede røg af interferonmolekyler eller interferonholdige partikler af komplekser af interferon med andre stoffer, som 20 kan være, men ikke behøver at være partikelformede, i biologisk aktiv form.
Det er helt klart på basis af den ovennævnte beskrivelse, at stykker af interferon med biologisk aktivitet og forøget stabilitet kan dannes, isoleres og inkluderes i cigaretter.
25 Den omhandlede fremgangsmåde tilvejebringer således et hidtil ukendt middel til modvirkning af en potentiel skadelig virkning af cigaretrygning og tilvejebringer en generelt beskyttende virkning af det humane åndedrætssystem mod almindelig forkølelse, vira, etc.. Anvendelsen af et stykke inter-30 feron, der mangler adskillige aminosyrer, er blot et eksempel på kombinering af det naturlige anticancermiddel, interferon, med cigaretter. Andre modifikationer af interferon er mulige, herunder tilsætning af aminosyrer, ændring af eksisterende aminosyrer og ændring af de forskellige sukkerprosthetiske 35 grupper ved fjernelse, tilsætning eller modifikation.
23
DK 161738 B
I overensstemmelse med den foreliggende opfindelse tilvejebringes fremgangsmåder til opbygning af stykker af interferon med ønskede egenskaber, kraftig biologisk virkning, forøget stabilitet, evnen til at kunne blive inkluderet i en cigaret 5 og blive frigivet i røgen. Dette bevirker, at en potentiel skadelig virkning af rygning kan undgås og faktisk ændres til at forøge rygerens almene helbred.
V. Kombination af interferon/induceraktivatorer med cigaretter.
Syntetiske kemikalier, som stimulerer legemets egne interferon-10 reserver benævnes almindeligvis som interferoninducere eller interferoninducer/aktivatorer (se anmeldelse i "Selective Inhibitors of Viral Functions", redigeret af W.A. Carter, Chemical Rubber Company, 1973). Sådanne inducere er sammensat af diverse klasser af kemiske forbindelser inklusive dobbelt-15 strenget RNA (ribonucleinsyre) eller forskellige lavmolekylære kemikalier såsom polyanioner, pyrancopolymere, og lymfokiner (se også "Interferon", redigeret af I. Gresser, 1981). Den pågældende opfindelse kan udøves med en hvilken som helst af de ovennævnte grupper af diverse kemikalier og/eller biokemiske 20 stoffer, forudsat at de overensstemmende fjernes fra cigaretten og fortsætter med at påvirke aflejringen i åndedrætsområderne og forblive fri for uønskede bivirkninger.
For at påvise deres effektivitet blev to inducere, poly I.C og*Ampiigen* (varemærke, der verserer for en inducer bestående 25 af umage RNA-spiraler) blev aflejret i lyofiliseret form på cigaretfiltre ved at fordele pulveret let over cigarettens filterende. Det i fig. 4 viste anordningseksemplar kan også anvendes med inducerpartikler til at fremstille en hvilken som helst kombination af inducerpartikler og interferonpar-30 tikler. Kombinationen af de to stoffer, i forskellige undersøgelser gennemført uden for legemet, resulterede sædvanligvis 24
DK 161738 B
i mere udprægede eller synergistiske, gunstige biologiske virkninger.
Eksempler.
Eksemplernes baggrund.
5 Den humane lunge og omgivende væv er et komplekst organ, der er sammensat af mange forskellige celletyper, som reagerer på angreb af eksterne miljøstoffer under den nødvendige proces med bytning af gasser (oxygen modtages, og carbondioxid afgives). For at vurdere de gunstige resultater af opfindel-10 sen har jeg valgt at undersøge komponenterne af åndedrætsforsvarssystemet uden for legemet ved anvendelsen af forskellige levende humane celler, som holdes uden for legemet i små vævskulturkar, petriskåle eller rør. I sådanne skåle eller andre anordninger til human cellevækst, kan røg blæses på 15 de levende celler på en måde, som simulerer nogle af de påvirkningstyper, som vil optræde i det humane legeme.
Eksempel 1.
En frivillig person indåndede fra hver af en gruppe filter-(celluloseacetat) cigaretter, hvorpå der forud i lyofiliseret 20 form var blevet aflejret svarende til 100.000 Internationale referenceenheder (IRU) af enten naturlig fibroblast (0) interferon (cigaret A), eller 100.000 internationale referenceenheder naturlig 0-interferonfragmentpeptid som beskrevet i afsnit II (cigaret B) eller 10 mikrogram af den umage RNA 25 interferoninducer (se Carter, et. al., Journal of Molecular Biology, Volume 70 pp. 567, 1972) (cigaret C). Umiddelbart efter indånding af røgen, som havde passeret gennem de med de lyofiliserede interferonkomponenter imprægnerede filtre, sendte den frivillige forsøgsperson røgen gennem munden og 30 næsen direkte på en åben petriskål, der indeholdt normale levende humane fibroblastceller, som var blevet holdt i me- 25
DK 161738 B
dium RPMI 1640 suppleret med serum. Petriskålene blev derpå sendt tilbage til et carbondioxid (5%) og flydende mediummiljø i yderligere 12 timer, som giver interferoneffekten tid til at finde sted, hvorefter interferonantiviralaktiviteten 5 i fibroblastcellerne blev bestemt ved hjælp af en standardprøve med hæmning af virusinduceret cytopatisk virkning, se Armstrong, J.A., Applied Microbiology, Volume 21 pp. 723-725, 1971. Vesikulær stomatitis-virus var den provokerende virus.
I alle skålene, som havde modtaget røg, som først passerede 10 gennem det interferonimprægnerede filter og derpå gennem den frivillige rygers mundhule, var der tydelige tegn på en antiviral tilstand i de her£værende fibroblastceller. I et lignende forsøg, hvor der blev anvendt en "kontrol"-cigaret, uden et interferonbehandlet filter, kunne der ikke påvises anti-15 virale virkninger, hvilket indicerer, at cigaretrøg per se ikke giver nogen beskyttelse af humane væv mod de provokerende vira.
Eksempel 2.
En frivillig forsøgsperson gentog den ovenfor beskrevne frem-20 gangsmåde med identisk fremstillede cigaretter A, B, C og D bestående af 100.000 IRU'er af naturlig human immuninterferon (γ), fremstillet som tidligere beskrevet (Mizrahi et. al., ibid, 1978). γ-interferonen indeholdt 100.000 IRU'er pr. mg protein og havde derved en bestemt renhed på ca. 1%.
25 I dette tilfælde blev røgen overført direkte i rør indeholdende human immunnaturlige dræbe- (NK) celler, som var blevet isoleret ved hjælp af standardteknikker indbefattende anvendelsen af Ficoll-Hypaque-gradienter under anvendelse af celler fra blod af sunde mennesker (se Zarling, Carter, et. al., 30 Journal of Immunology, Volume 123 pp. 63-70, 1979 og ibid,
Volume 124 pp. 1852-1857, 1981). Petriskålene blev derpå igen inkuberet i 8 timer, hvorefter NK-cellerne blev isoleret igen ved hjælp af standardmetoder og undersøgt for evnen til at
DK 161738B
26 dræbe de humane tumormålceller K562 (ovennævnte referencer, se også Marx, Science, Volume 210 pp. 624-626, 1981). NK-cel-lerne fik samstemmende deres udryddelsesevne forøget ca. 30-100% på grund af påvirkning af røg fraccfgaretter A, B, C 5 og D. Røg fra "kqntrol"-cigaretter havde ikke nogen forøgende virkning, hvilket viser, at virkningen ikke var en specifik virkning, men nærmere stammede fra de interferonholdige komponenter og interferoninducerende stoffer, som med dette formål var sat til cigaretterne.
10 Eksempel 3.
En frivillig forsøgsperson gentog det ovennævnte forsøg, idet der nu blev anvendt forskellige målceller og et forøget panel af behandlede cigaretter. I dette tilfælde bestod målcellerne af humane macrophager (defineret ved deres vedhæftning til 15 plastpetriskålen) afledt af celler, der cirkulerer i normale personers blod (Zarling, ibid; se også Schultz og Chirigos, Cancer Research, Volume 38 pp. 1003-1007, 1978). I dette tilfælde blev. NK-cellerne,. sonmdfkkedklæber til overflader, først kasseret, og macrophagerne, som var tilbage, kunne holdes 20 levende i medium RPMI 1640 suppleret med føtal bovinserum.
Det udvidede panel af interferoncigaretter bestod af de ovennævnte (cigaretter A, B, C og D) og E, som indeholdt 100.000 IRU lyofiliseret syntetisk (bakterielt fremstillet) human leukocytinterferon, betegnet klon A^ (se også Goeddel, D.V., 25 et. al., Nature, Volume 290 pp. 20-26, 1981). Macrophagaktiva-tor blev målt ved hjælp af forøgelsen af jernpartikler 12 timer efter påvirkningen med røg. I mellemtiden blev cellerne holdt i et fugtigt, 5% CC^-kammer ved 37°C. Som i eksemplerne 1 og 2 blev alle humane macrophagpræparater, der blev udsat 30 for interferonholdige cigaretter, ensartet aktiveret, hvorimod røg fra "kontrol"-cigaretter ikke udviste nogen virkning.
27
DK 161738 B
Eksempel 4.
En frivillig forsøgsperson gentog forsøg 3 (cigaretter A, B, C, D og E) under anvendelse af en ny målvævskulturkiIde inde-5 holdende de humane tumor HL60-celler. HL60-cellerne er meget maligne leukæmiske tumorceller, hvilket antydes af deres primitive cellulære opbygning. Når imidlertid cellerne direkte udsættes for interferon, undergår en procentdel af cellerne morfologiske ændringer, som indicerer modning og tilbagegang 10 til normalt celleudseende og normal cellefunktion (Carter et al., 1980, Program Grant Proposal P01CA29545, National Cancer Institute, USA, og de heri anførte referencer). Efter påvirkning af de forskellige røgstrømme blev petriskålene, som indeholdt HL60-celler holdt i et fugtet 5% COg-kammer ved 37°C i 15 medium MEM. Hver 48. time i de næste 5-10 dage blev cellerne gentagne gange udsat , for den interferonholdige røg og derpå igen inkuberet i C02~kamrene. Idet man starter omkring den 7. dag efter forsøgets begyndelse og fortsætter over den 14. dag, udviste de interferonbehandlede HL60-kulturer (udsat for røg, 20 der først trækkes gennem filtre af interferon i cigaretter A -E) voksende tegn på fuld udvikling og normal udvikling i sammenligning med kontrolkulturerne. Tegn på fuld udvikling og tilbagevenden til det normale omfattede: Den progressive segmentation af cellekerner, gradvis forsvinden af nucleoli og 25 reduktion af kernestørrelse, tegn på cytoplasmiske granuleringer og tegn på differentiering til fuldt udviklet polymor-nuclear leukocyt, således som de, der typisk blev påvist i normalt humant perifert blod.
30 Eksempel 5.
Interferon, fremstillet med eller uden albumin, som beskrevet i afsnit III, og frysetørret, blev rehydratiseret i 1 ml destilleret vand og derpå lagret ved forskellige temperaturer i 35 polypropylenbeholdere. Med mellemrum blev der udtaget prøver, og den antivirale aktivitet af interferon blev målt. Resultaterne er angivet i den efterfølgende tabel 1:
Claims (7)
1. Fremgangsmåde til indblanding af et lægemiddel i et rygeligt tobaksprodukt, kendetegnet ved, at man eksogent tilsætter interferon, biologisk aktive fragmenter deraf 30 eller et stof, som bevirker dannelse af interferon i det humane legeme, til produktet.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at interferonet stabiliseres. 35
3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at stabiliseringen er resultatet af binding af interferonet til en bærer. DK 161738 B
4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at bæreren er en serumalbumin eller cytochrom C.
5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, 5 at produktet er en cigaret, en cigar eller pibetobak.
6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der til produktet sættes et stof, som bevirker dannelsen af interferon i det humane legeme, og som er valgt fra gruppen 10 bestående af dobbeltstrenget RNA, pyrancopolymerer, polyanio-ner og lymfokiner.
7. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendetegnet ved, at produktet er en cigaret, en cigar eller pibetobak. 15 20 25 30 35
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US38644782 | 1982-08-05 | ||
| US06/386,447 US4498485A (en) | 1982-08-05 | 1982-08-05 | Interferon and interferon inducers combined with tobacco products |
| US8301199 | 1983-08-04 | ||
| PCT/US1983/001199 WO1984000477A1 (en) | 1982-08-05 | 1983-08-04 | Interferon and interferon inducers combined with tobacco products |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK179384A DK179384A (da) | 1984-04-05 |
| DK179384D0 DK179384D0 (da) | 1984-04-05 |
| DK161738B true DK161738B (da) | 1991-08-12 |
| DK161738C DK161738C (da) | 1992-02-24 |
Family
ID=23525614
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK179384A DK161738C (da) | 1982-08-05 | 1984-04-05 | Fremgangsmaade til indblanding af et laegemiddel i et rygeligt tobaksprodukt |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4498485A (da) |
| EP (1) | EP0116085B1 (da) |
| JP (1) | JPS59501496A (da) |
| AT (1) | ATE28393T1 (da) |
| AU (1) | AU561750B2 (da) |
| DE (1) | DE3372568D1 (da) |
| DK (1) | DK161738C (da) |
| FI (1) | FI76246C (da) |
| IT (1) | IT1168956B (da) |
| NO (1) | NO841230L (da) |
| WO (1) | WO1984000477A1 (da) |
| ZA (1) | ZA835726B (da) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5394869A (en) * | 1990-11-23 | 1995-03-07 | Covarrubias; Jesus | Method of inhibiting bronchospasms using taurine in an air filter |
| FR2696080B1 (fr) * | 1992-09-30 | 1994-12-23 | Jesus Covarrubias | Filtre à cigarette pour l'administration de taurine par inhalation. |
| GB2332359B (en) * | 1997-12-22 | 2001-10-24 | Richard Graham Kendall | Administration of a vitamin preparation to smokers via the filter tip of a cigarette |
| FR2798302B1 (fr) * | 1999-09-13 | 2001-12-21 | Frederic Maillard | Filtre compose d'heterocycles azotes tels que l'adn destine notamment a la filtration de fumee de tabac, cigarette comportant un tel filtre |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2890973A (en) * | 1954-03-03 | 1959-06-16 | Fachini Giuseppe | Treating tobacco and cigarette paper |
| US3339558A (en) * | 1966-10-28 | 1967-09-05 | Haskett Barry F | Smoking article and filter therefor containing vitamin a |
| US3667478A (en) * | 1969-07-17 | 1972-06-06 | Nelson J Waterbury | Filter cigarette incorporating vitamin a |
| EP0003064A3 (en) * | 1977-12-07 | 1979-08-08 | Rabam Limited | Method for introducing analogs of vitamin a into the respiratory tract of a cigarette smoker |
| JPS5579319A (en) * | 1978-12-07 | 1980-06-14 | Shiyaaman Baaton | Method of introducing vitamine a analogue to respiratory tract of smoker |
-
1982
- 1982-08-05 US US06/386,447 patent/US4498485A/en not_active Expired - Lifetime
-
1983
- 1983-08-04 EP EP83902734A patent/EP0116085B1/en not_active Expired
- 1983-08-04 AU AU18858/83A patent/AU561750B2/en not_active Ceased
- 1983-08-04 AT AT83902734T patent/ATE28393T1/de not_active IP Right Cessation
- 1983-08-04 DE DE8383902734T patent/DE3372568D1/de not_active Expired
- 1983-08-04 WO PCT/US1983/001199 patent/WO1984000477A1/en active IP Right Grant
- 1983-08-04 ZA ZA835726A patent/ZA835726B/xx unknown
- 1983-08-04 JP JP83502817A patent/JPS59501496A/ja active Granted
- 1983-08-05 IT IT22461/83A patent/IT1168956B/it active
-
1984
- 1984-03-28 NO NO841230A patent/NO841230L/no unknown
- 1984-04-02 FI FI841308A patent/FI76246C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-04-05 DK DK179384A patent/DK161738C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO841230L (no) | 1984-03-28 |
| FI76246C (fi) | 1988-10-10 |
| FI76246B (fi) | 1988-06-30 |
| IT8322461A0 (it) | 1983-08-05 |
| WO1984000477A1 (en) | 1984-02-16 |
| AU1885883A (en) | 1984-02-23 |
| DK161738C (da) | 1992-02-24 |
| DK179384A (da) | 1984-04-05 |
| JPS59501496A (ja) | 1984-08-23 |
| JPH0543347B2 (da) | 1993-07-01 |
| ATE28393T1 (de) | 1987-08-15 |
| FI841308A (fi) | 1984-04-02 |
| US4498485A (en) | 1985-02-12 |
| AU561750B2 (en) | 1987-05-14 |
| IT1168956B (it) | 1987-05-20 |
| DE3372568D1 (en) | 1987-08-27 |
| EP0116085A1 (en) | 1984-08-22 |
| DK179384D0 (da) | 1984-04-05 |
| ZA835726B (en) | 1984-12-24 |
| FI841308A0 (fi) | 1984-04-02 |
| EP0116085A4 (en) | 1984-11-16 |
| EP0116085B1 (en) | 1987-07-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100392984B1 (ko) | 유전자치료를위한단구-마크로파아지세포계로부터의재조합세포 | |
| US8309531B2 (en) | Administration of interferon for prophylaxis against or treatment of pathogenic infection | |
| JP6894652B1 (ja) | 組織修復剤、組織修復剤の使用方法およびスクリーニング方法 | |
| Shellito et al. | Effect of alcohol consumption on host release of interleukin‐17 during pulmonary infection with Klebsiella pneumoniae | |
| BRPI0716948B1 (pt) | Polinucleotídeo isolado, vetor recombinante, proteína, proteína de fusão, e, composição | |
| CN107206053B (zh) | 用于治疗血细胞减少症或减少血细胞减少症的持续时间的佛波醇酯组合物和方法 | |
| DK161738B (da) | Fremgangsmaade til indblanding af et laegemiddel i et rygeligt tobaksprodukt | |
| JP2012025765A (ja) | 造血におけるｉｌ−１２の使用 | |
| JP2023519888A (ja) | コロナウイルス感染症およびレトロウイルス感染症ならびにｃ型肝炎を処置するための薬物 | |
| WO1996041644A1 (fr) | Medicament a administration par voie orale, contre la polyarthrite rhumatoide et aliment actif | |
| CN105496972A (zh) | 一种鸡干扰素冻干剂的制备方法 | |
| WO2005077399A1 (ja) | 慢性閉塞性肺疾患の予防ないし治療剤 | |
| US20240166707A1 (en) | Expression constructs and uses thereof | |
| Price | The current prospects for neutrophil transfusions for the treatment of granulocytopenic infected patients | |
| NO173144B (no) | Fremgangsmaate til fremstilling av interferongamma | |
| US5780012A (en) | Method for reducing lung afflictions by inhalation of cytokine solutions | |
| RU2526799C2 (ru) | Фармацевтическая композиция и способ получения противовирусных фракций (антивирус-с) | |
| JP2005531604A5 (da) | ||
| RU2380405C2 (ru) | Способ получения рекомбинантного альфа 16-интерферона человека и фармацевтическая композиция для лечения вирусных заболеваний на основе рекомбинантного альфа 16-интерферона человека | |
| Purbomartono et al. | Non Specific Immune Potentiating Evaluation of Brown Seaweed of Padina sp. in Catfish and Pangasius | |
| WO2016057345A1 (en) | Treating viral hemorrhagic fever with nk-92 cells | |
| RU2162337C1 (ru) | Противовирусное средство - капли в нос | |
| Ulfa et al. | Leucocytes profile after supplementation of nanoencapsulation Zanthoxylum acanthopodium in quails post induction by dexamethasone immunisupresant. | |
| KR20230024280A (ko) | 바이러스 감염을 치료하기 위한 조성물 및 방법(compositions and methods for treating viral infections) | |
| AU2021258734A1 (en) | Recombinant interferon |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |
Country of ref document: DK |