DK158661B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af benzamido-alkyl-hydroxamsyrederivater. - Google Patents

Description

DK 158661 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte benzamido-alkyl--hydroxamsyre-derivater, der er terapeutisk anvendelige, især som stoffer, der indvirker på CNS. Fremgangsmåden er 5 ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del angivne.

Fra belgisk patentskrift nr. 852.738 kendes 2-(4-aminobenzamido)-acetohydroxamsyre-hydrochlorid, som har kodenummeret CRL 40473 (se eksempel 18 i det belgiske patentskrift). Det har nu overraskende vist sig, at for-10 bindeiser med den nedenfor anførte formel I, som er strukturelt forskellige fra den ovennævnte kendte forbindelse, udviser meget interessante terapeutiske egenskaber, især hvad angår de anti-agressive egenskaber.

Opfindelsen angår således en fremgangsmåde til frem-15 stilling af et hidtil ukendt benzamido-alkyl-hydroxamsyre-derivat, der er valgt blandt

(i) 3-(aminobenzamido)-propionhydroxamsyrer med den almene formel I

20 // CO-NH-CH2-CH2-C S (i)

vr^=J

25 og (ii) deres additionssalte med syrer.

Opfindelsen angår altså fremstilling af o-, m- og p-30 aminobenzamido-propionhydroxamsyre og deres salte, idet de foretrukne forbindelser er 3-(3-aminobenzamido)-propion-hydroxamsyre og dens additionssalte, især hydrochloridet.

Ved additionssalte forstås der her syreadditionssalte fremstillet ved omsætning af en fri base 35 med formlen I med en uorganisk eller organisk syre. Blandt syrer, der er anvendelige til saltdannelse med baserne med formlen I, kan der især nævnes saltsyre, hydrogenbromid-

DK 158661B

2 syre, salpetersyre, svovlsyre, eddikesyre, propionsyre, oxalsyre, fumarsyre, maleinsyre, ravsyre, benzoesyre, kanelsyre, mandelsyre, citronsyre, æblesyre, vinsyre, p-toluensulfon-syre og methansulfonsyre.

5 Forbindelserne med formlen I kan fremstilles

ifølge en kendt metode ved anvendelse af klassiske reaktionsmekanismer. De kan f.eks. fremstilles som beskrevet i eksempel 18 i det ovennævnte belgiske patentskrift. Fremgangsmåden, som ifølge opfindelsen anvendes til fremstilling 10 af en 3-(aminobenzamido)-propionhydroxyamsyre er karakteriseret ved, at en 3-(nitrobenzamido)-propionhydroxam-— syre -med formlen II

15 // \\ (/ 'V— C0-NH-CH„CH -C (II)

02N^\-/ XNH0H

20 underkastes en katalytisk hydrogenering ved hjælp af en katalysator bestående af palladium på .carbon.

Forbindelserne med formlen I og deres additionssalte er terapeutisk anvendelige på CNS, især som sedative midler.

25 Andre fordele og særtræk ved den foreliggende opfin delse vil fremgå af de følgende eksempler.

Fremstilling I

3-(3-aminobenzamido)-propionhydroxamsyre-hydrochlorid.

30 (/ V\_ C0-NH-CH,-CH.-C^ , HC1

\-/ ^NHOH

(kodenummer C KL 40816)

35 H2N

O

DK 158661B

3 a) m-Nitrobenzamidopropionsyre-ethylester

En opløsning af 18,55 g (0,1 mol) m-nitrobenzoyl-chlorid i 100 ml benzen sættes dråbevis under tilbagesvaling til en opløsning af 15,35 g (0,1 mol) aminopropionsyre-5 ethyJestér-hydrochlorid i 100 ml benzen. Tilbagesvalingen opretholdes i ca. 6 timer, hvorefter benzenfasen vaskes med vand, med en fortyndet hydrogencarbonatopløsning, derefter med fortyndet saltsyre og på ny med vand. Der tørres over natriumsulfat og fås efter inddampning 24,4 g 10 (91% af det teoretiske udbytte) m-nitrobenzamido-propion- syre-ethylester i form af en olie med gul-orange farve.

b) m-Nitrobenzamidopropionhydroxamsyre

Der fremstilles en opløsning af natriummethylat 15 med 4,22 g (0,183 gramatom) natrium i 150 ml vandfri methanol og tilsættes i kulden 6,37 g (0,0917 mol) hydroxylamin-hydrochlorid opløst i 120 ml vandfri methanol. Det dannede natriumchlorid fjernes ved filtrering, og til filtratet sættes 24,4 g (0,0917 mol) 20 m-nitrobenzamidopropionsyre-ethylester. Efter henstand natten over ved omgivelsestemperatur inddampes der til tørhed under vakuum, optages med en tilstrækkelig mængde vand til at opløse natriumsaltet og syrnes med koncentreret saltsyre (dj5 = 1,19). Det således fremkomne bundfald fra-26 skilles og vaskes med vand. Der fås efter omkrystallisation i vand 17,1 g (74% af det teoretiske udbytte) m-nitro-benzamidopropionhydroxamsyre.

c) CRL 40816 30 Der foretages en katalytisk hydrogenering under tilbagesva ling i 5 timer, idet der gås ud fra en blanding af 16,45 g (0,065 mol) m-nitrobenzamidopropionhydroxamsyre, 21 ml cyclohexen 2,2 g 10%'s palladium/carbon og 120 ml vandfri ethanol. Palladium/ carbonet frafiltreres, og der inddampes til tørhed under 35 vakuum og optages med ethanol. Hydrochloridet udfældes ved hjælp af hydrogenchlorid i ethanol og frafiltreres, hvorefter

DK 158661 B

O

4 bundfaldet vaskes med en smule ether. Der fås efter omkrystallisation fra en blanding af vand og ethanol i . volumenforholdet 10:90 10,7 g (64% af det teoretiske udbytte) CRL 40816, der har form af et svagt rosa pulver, 5 der er uopløseligt i alkoholer, acetone og ether og letopløseligt i vand. Smp.: 206°C.

Ved at gå frem som ovenfor anført og erstatte m-nitrobenzoylchlorid med o- og p-nitrobenzoylchlorid fås 3-(2-aminobenzamido)- og 3-(4-aminobenzamido)-pro-10 pionhydroxamsyr e.

I det følgende sammenfattes resultaterne af forsøg —----------- gennemført med CRL 40816. Ved disse forsøg er det indgivet intraperitonealt i et volumen på 20 ml/kg til hanmus og i et volumen på 5 mg/kg til hanrotter.

15 1) Giftighed

Den maksimale, ikke-dødelige dosis (DLQ) ved intra-peritoneal indgivelse til hanmus er over 1024 mg/kg.

20 2) Generelle virkninger

Grupper på 10 dyr pr. dosis observeres før og 15 minutter, 30 minutter, 1 time, 2 timer, 3 timer og 24 timer efter intraperitoneal indgivelse af CRL 40816.

Der konstateres, at 25 a) hos mus bevirker en dosis på 512 mg/kg af CRL 40816 (i) en beroligelse med formindsket berøringsreaktion i 3 timer, (ii) en moderat hypotermi (-1,3°C) i 2 timer, og (iii) en nedsat respiration i 3 timer, og 30 b) hos rotter bevirker CRL 40816 fra en dosis på 256 mg/kg (i) en formindsket berøringsreaktion og muskeltonus i 3 timer og (ii) en mydriasis i 3 timer.

35

O

DK 158661B

5

3) Virkning på CNS

a) Interaktion med apomorphin - Hos mus:

En halv time efter indgivelse af CRL 40816 modtager 5 grupper på 6 mus en subcutan injektion af apomorphin i en dosis på 1 eller 16 mg/kg. Der observeres følgende: Ved ringe doser ændrer CRL 40816 ikke den hypotermi, den adfærd med at rejse sig op og den stereotypi, der induceres af apomorphin hos mus. Ved en dosis på 32 mg/kg synes CRL 10 40816 at bevirke en svag antagonisme af den hypotermi, der induceres af den laveste dosis apomorphin, og ved højere dosis (512 mg/kg) konstateres en væsentlig formindskelse af temperaturen efter injektion af CRL 40816.

- Hos rotter: 15 Grupper på 6 rotter modtager CRL 40816 en halv time før subcutan injektion af apomorphin i en dosis på 0,5 mg/kg. Det observeres, at CRL 40816 ikke ændrer den stereotype opførsel, som fremkaldes af apomorphin hos rotter.

20 b) Interaktion med amphetamin

En halv time efter indgivelsen af CRL 40816 modtager grupper på 6 rotter en intraperitoneal injektion på 2 mg/kg amphetamin. Det observeres, at ved en høj dosis (256 mg/kg) bevirker CRL 40816 en moderat for-25 mindskelse af intensiteten af den amphetaminfremkaldte stereotypi.

c) Interaktion med reserpin

Fire timer efter intraperitoneal injektion af 2,5 mg/kg reserpin modtager grupper på 6 mus CRL 40816.

30 Det observeres, at CRL 40816 ikke ændrer den reserpin- fremkaldte hypotermi eller ptosis.

d) Interaktion med oxotremorin

Grupper på 6 mus modtager en intraperitoneal injektion på 0,5 mg/kg oxotremorin en halv time efter ind-35 giveisen af CRL 40816.

DK 158661 8 6 - Virkning på temperaturen:

Ved en dosis på 32 mg/kg synes CRL 40816 at modvirke den temperatursænkende virkning af oxotremorin moderat og forsinket. Ved en høj dosis (512 mg/kg) udøver 5 CRL 40816 derimod en temperatursænkende virkning og forøger det oxotremorinfremkaldte temperaturfaid.

- Virkning på skælven: CRL 40816 har ingen virkning på den oxotremorinfremkaldte skælven.

10 ~ Virkning på de perifere cholinerge symptomer:

Tegnene på perifer cholinerg stimulering (spyt- -------flåd, tåreflåd, defalcation), der viser sig efter injektion af oxotremorin, ændres ikke af CRL 40816.

e) Virkning ved forsøget med fire plader, træk og elektrochok 15 Grupper på 10 mus iagttages en halv time efter indgivelse af CRL 40816.

_ Det observeres, at CRL 40816 ikke medfører en forøgelse af antallet af "straffede passager" (ved forsøget. "straffes" musene med elektriske stød, når de som del af 20 deres normale adfærd passerer fra én plade til en anden).

Det fremkalder ikke større manglende bevægelsesevne og ændrer -__ ikke de krampefremkaldende og letale virkninger af elektro chok.

f) Virkning på spontan bevægelighed 25 En halv time efter at have modtaget CRL 40816 anbringes musene (6 pr. dosis, 12 kontroldyr) i en aktivitetsmåler, og deres mobilitet registreres i 3 0 minutter.

Det konstateres, at CRL 40816 ved en høj dosis 30 ;(512 mg/kg) medfører en moderat nedsættelse af mobiliteten.

g) Virkning på aggressiviteten mellem grupper (sammenligningsforsøg)_

Efter at have opholdt sig i 3 uger på begge sider af en uigennemsigtig skillevæg, der deler deres bur 35

O

DK 158661B

7 på midten, modtager grupper på 3 hanmus (hver mus vejer ca. 20 g) forbindelserne, der skal afprøves, (CRL 40816 og CRL 40473) ad intraperiotoneal vej i en opløsning i destilleret vand, idet der anvendes 3 bure pr. 'forbindelse 5 og pr. dosis og 6 bure til kontroldyrene, der kun modtager destilleret vand intraperitonealt. En halv time ;senere forenes de to grupper fra det samme bur, og der noteres antallet af slagsmål, som finder sted i løbet af 10 minutter. Resultaterne er anført i den følgende 10 tabel 1 og viser, at CRL 40816 (i) bevirker en kraftig formindskelse af antallet af slagsmål ved en dosis på 128 mg/kg, (ii) bevirker en fuldstændig undertrykkelse af slagsmål ved en dosis på 512 mg/kg, og 15 (iii) har en gunstig antiaggressiv virkning, der ligger klart over virkningen af CRL 40473 ifølge eksempel 18 i det ovennævnte belgiske patentskrift.

Tabel I

20 Forbindelse Dosis (mg/kg) Antal slagsmål Formindskelse af an- pr. mus tallet af slagsmål _i forhold til kontrol kontrol - 3,13 0% CRL 40816 128 1,44 54% CRL 40816 512 0 100% 25 CRL 40473 128 2,25 28% CRL 40473 512 1,82 41% h) Virkning over for nogle på forskellig måde forstyrrede adfærdsformer_ 30 -Nedsat mobilitet på grund af tilvænning til omgivelserne:

Efter 18 timers ophold i aktivitetsmålerne modtager musene (6 pr. dosis, 12 kontroldyr) CRL 40816. De anbringes derefter straks igen i deres respektive rum, 35 og en halv time senere registreres deres mobilitet i 30 minutter.

O

8

DK 158661B

Det observeres, at CRL 40816 i det store og hele ikke fremkalder en genoptagelse af aktivitet hos mus·, der er vænnet til deres omgivelser.

- Nedsat mobilitet på grund af hypoxisk aggression: 5 En halv time efter at have modtaget CRL 40816 underkastes musene (10 pr. dosis, 20 kontroldyr) en akut undertryks-anoxi (en sænkning på 600 mm Hg, ca.

4 8 x 10 Pa, i 90 sekunder og fjernelse af undertrykket i løbet af 45 sekunder), hvorefter de anbringes i en 10 aktivitetsmåler, hvor deres mobilitet registreres i 10 minutter.

Det observeres, at CRL 40816 ikke medfører nogen forbedret genvinding af mobiliteten hos musene, hvis mobilitet er blevet nedsat efter et kort ophold i et rum 15 med formindsket tryk.

- Asphyxisk anoxi:

En halv time efter indgivelsen af CRL 40816 modtager grupper på 10 mus en intraperitoneal injektion af 32 mg/kg gallamin-triiodethylat.

20 Det observeres, at ved den højeste anvendte dosis (512 mg/kg) forsinker CRL 40816 fremkomsten af kramper og døden, som følger en asphyxisk anoxi fremkaldt af et curare-virkende middel som gallamin-triiodethylat.

Sammenfattende fremgår det af forsøgene på CNS, 25 at CRL 40 816 udviser sedative egenskaber ved høje doser, nemlig nedsat reaktion, nedsat mobilitet og hypotermi, som forklarer dels modstandskraften mod anoxi og dels formindskelsen af aggressiviteten og den amphetaminfrem-kaldte stereotypi. Desuden viser resultaterne, som 30 observeres ved 32 mg/kg (den delvise antagonisme mod hypotermi fremkaldt af oxotremorin eller af en ringe dosis apomorphin, den moderate forøgelse af antallet af "straffede passager" ved prøven med fire plader og den svage forbedring af mobilitetsgenvindingen efter under-35 tryks-hypoxi), forskellen mellem CRL 40816 og de tidligere beskrevne produkter.

DK 158661B

O

9

Klinisk viser CRL 40816 sig.hos mennesker at være et udmærket antidepressivt middel i form af tabletter eller kapsler, som hver indeholder 200 mg a:ktiv bestanddel, når der indgives 2 tabletter eller kapsler pr. dag.

5 10 15 20 25 30 35

Claims (2)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 3--(aminobenzamido)-propionhydroxamsyrer med den almene formel 5 co-nh-ch9-ch9-c^ (i) / XNH0H og deres additionssalte med syrer, kendetegnet ved, at en 3-(nitrobenzamido)-propionhydroxamsyre med formlen II 15 /~V ^ f X>—CO-HH-CH2-CH2-C (II) o2h 20 underkastes en katalytisk hydrogenering ved hjælp af en katalysator bestående af palladium på carbon.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af 3-(3-aminobenzamido)-propionhydroxamsyre, kendeteg-25 net ved, at 3-(3-nitrobenzamido)-propionhydroxamsyre underkastes katalytisk hydrogenering ved hjælp af en katalysator bestående af palladium på carbon. 30 35