DK157601B - Therapeutic platinum or palladium preparation, and process for preparing it - Google Patents
Therapeutic platinum or palladium preparation, and process for preparing it Download PDFInfo
- Publication number
- DK157601B DK157601B DK550483A DK550483A DK157601B DK 157601 B DK157601 B DK 157601B DK 550483 A DK550483 A DK 550483A DK 550483 A DK550483 A DK 550483A DK 157601 B DK157601 B DK 157601B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- anionic
- platinum
- composition according
- poly
- cis
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
iin
DK 157601 BDK 157601 B
Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte præparater indeholdende platin eller palladium, hvilke præparater er nyttige til bekæmpelse af cancercelle- og trypanosomal-infektion i pattedyr.The present invention relates to novel compositions containing platinum or palladium which are useful for controlling cancer cell and trypanosomal infection in mammals.
5 Forbindelsen cis-dichlordiamin-platin(11) (cisplatin) er blevet velkendt ved behandling af forskellige cancere i pattedyr, men den er toxisk og kan derfor kun anvendes i lav dosis. Det ville være ønskeligt at tilvejebringe et effektivt produkt, som kunne tolereres i pattedyrsle-10 gemet i større doser, og som ville udvise en længere halveringstid. Det ville også være ønskeligt at tilvejebringe et effektivt præparat, med forbedret opløselighed i vand og serum i sammenligning med cisplatin.5 The compound cis-dichlorodiamine-platinum (11) (cisplatin) has been well known in the treatment of various cancers in mammals, but it is toxic and can therefore only be used in a low dose. It would be desirable to provide an effective product which could be tolerated in the mammalian body at larger doses and which would have a longer half-life. It would also be desirable to provide an effective composition, with improved solubility in water and serum as compared to cisplatin.
I GB patentskrift nr. 1 541 436 er det blevet foreslået 15 at binde visse nærmere angivne organiske cytotoxiske lægemidler med frie amino- eller carboxylgrupper med en peptidbinding eller en anden covalent binding til polymere bærere, der har en molekylvægt på 5.000 til 500.000 og er i stand til at binde til immunglobulin, 20 så at det cytotoxiske lægemiddel spaltes enzymatisk på målcelleoverfladen.GB Patent No. 1,541,436 has been proposed to bind certain specified organic cytotoxic drugs with free amino or carboxyl groups having a peptide bond or other covalent bond to polymeric carriers having a molecular weight of 5,000 to 500,000 and being present in capable of binding to immunoglobulin, so that the cytotoxic drug is enzymatically cleaved on the target cell surface.
Det er endvidere af C.R. Morris og G.R. Gale i "Chem.It is furthermore by C.R. Morris and G.R. Gale in Chem.
Biol. Interactions", 1973, side 305-315, blevet foreslået, at forbindelserne cis-dichlor(dipyridin ) platin (11) 25 og cis-Pt(II) kan associere sig med elektronrige områder af nucleinsyren og proteiner og også med legemssamlingen af frie nucleotider og aminosyrer, men ingen sådanne præparater er blevet isoleret eller specifikt identificeret.Biol. Interactions ", 1973, pages 305-315, have suggested that the compounds cis-dichloro (dipyridine) platinum (11) 25 and cis-Pt (II) may associate with electron-rich regions of the nucleic acid and proteins and also with the body assembly of free nucleotides and amino acids, but no such preparations have been isolated or specifically identified.
Den foreliggende opfindelse angår en hidtil ukendt gruppe 30 platin- og palladiumpræparater, som udviser sådanne fordele og/eller er effektive over for trypanosomal-in-fektioner.The present invention relates to a novel group of 30 platinum and palladium compositions which exhibit such advantages and / or are effective against trypanosomal infections.
DK 157601 BDK 157601 B
22
De hidtil ukendte præparater er ejendommelige ved, at de omfatter vandopløselige anioniske organiske makro-molekyler, nemlig anioniske polysaccharider, anioniske pol'yaminosyrer eller enzymer med anioniske funktionelle 5 grupper (f.eks. enzymer med .anioniske sidekæder), med en molekylvægt på 5.000 til 60.000, kombineret med en del med kvadratisk plan koordination omkring metalatomet M, med formlen cis-[MLL1]++, hvor M er divalent platin eller divalent palladium, og L og L' er ammoniak eller 10 mono- eller difunktionelle primære aminer, således at i det mindste en del af valenskravene, for de anioniske funktionelle grupper i de anioniske makromolekyler opfyldes .The novel compositions are characterized in that they comprise water-soluble anionic organic macro-molecules, namely, anionic polysaccharides, anionic polyamino acids or enzymes with anionic functional groups (e.g., enzymes with anionic side chains), having a molecular weight of 5,000. to 60,000, combined with a quadratic plane coordination portion around the metal atom M, of the formula cis- [MLL1] ++, where M is divalent platinum or divalent palladium, and L and L 'are ammonia or 10 mono- or difunctional primary amines, so that at least part of the valence requirements for the anionic functional groups of the anionic macromolecules are met.
Præp.ax.aterne er ikke specifikke forbindelser med let 15 bestemmelige strukturer, men snarere blandinger af beslæg tede polymere materialer, i hvilke et flertal af de kvadratiske plane platin- eller palladium-koordinerings-dele er enten båret på et' ariionisk makromolekyle eller tjener som en bro eller som broer mellem to anioniske 20 makromolekyler. Hvor der kommer flere broer, kan flere end to makromolekyler være knyttet sammen. I det almindelige tilfælde vil præparaterne indeholde mindst 2 vægt-% platin eller palladium bundet til makromolekylet (baseret på vægten af metal plus makromolekyle).The preparations are not specific compounds with readily determinable structures, but rather mixtures of related polymeric materials in which a majority of the square planar platinum or palladium coordination moieties are either supported on an aryl ionic macromolecule or serve. as a bridge or as bridges between two anionic 20 macromolecules. Where multiple bridges occur, more than two macromolecules may be linked together. In the ordinary case, the compositions will contain at least 2% by weight of platinum or palladium attached to the macromolecule (based on the weight of metal plus macromolecule).
25 Ved et vandopløseligt organisk makromolekyle menes et sådant, som udviser opløselighed i vand, når det kombineres med kationer, såsom H+, NH^+, alkalimetaller, calcium og magnesium.By a water-soluble organic macromolecule is meant one which exhibits solubility in water when combined with cations such as H +, NH2 +, alkali metals, calcium and magnesium.
Eksempler på anioniske makromolekylære materialer, som 30 har en tilstrækkelig lav toxicitet, og som kan anvendes som baser for præparaterne ifølge opfindelsen, omfatter (men er ikke begrænset til) poly-L-glutaminsyre (PGA), carboxymethylcellulose, ferritin, chondroitinsulfat, 3 DK 1:-7001 b poly-L-asparaginsyre, dextransulfat, polyfdivinylether-co-maleinsyreanhydrid], poly[acrylsyre-co-maleinsyrean-hydr.id], polyacrylsyre, serumalbumin og desulfateret heparin.Examples of anionic macromolecular materials which have a sufficiently low toxicity and which can be used as bases for the compositions of the invention include (but are not limited to) poly-L-glutamic acid (PGA), carboxymethyl cellulose, ferritin, chondroitin sulfate, 3 DK 1: -7001 b poly-L-aspartic acid, dextran sulfate, polyphdivinyl ether-co-maleic anhydride], poly [acrylic acid-co-maleic anhydride], polyacrylic acid, serum albumin and desulfated heparin.
5 Ammoniak eller substituerede ammoniumgrupper L og L' i den koordinerede platin- eller palladiumdel kan være identiske eller være to primære aminfunkt.ionelle grupper til stede på et enkelt molekyle. Repræsentative primære aminer, som kan anvendes i præparater ifølge opfindelsen, 10 omfatter isoamylamin, pentylamin, cyclohexylamin, 1,2-diaminocyclohexan og ethylendiamin.5 Ammonia or substituted ammonium groups L and L 'in the coordinated platinum or palladium moiety may be identical or be two primary amine functional ion groups present on a single molecule. Representative primary amines which can be used in compositions of the invention include isoamylamine, pentylamine, cyclohexylamine, 1,2-diaminocyclohexane and ethylenediamine.
De hidtil ukendte præparater kan fremstilles ved at omsætte en vandig opløsning af det anioniske makromole-kyle, som kan være på saltform, f.eks. natriumsaltform, 15 med en vandig opløsning af en amineret cis-platin- eller cis-palladiumforbindelse på nitratform med indhold af vand, MLL1(H2O)2(N0^)2, dvs. på saltform med krystalvand. Platin- eller palladiumforbindelsen kan fremstilles ved den metode, der er angivet af Lippert, Lock, Rosen-20 berg og Zvagulis, Inorganic Chemistry, bind 16, nr.The novel compositions may be prepared by reacting an aqueous solution of the anionic macromolecule which may be in salt form, e.g. sodium salt form, with an aqueous solution of an amine cis-platinum or cis-palladium compound in nitrate form containing water, MLL1 (H2O) 2 (NO0) 2, i.e. in salt form with crystal water. The platinum or palladium compound can be prepared by the method of Lippert, Lock, Rosen-20 berg and Zvagulis, Inorganic Chemistry, Vol. 16, no.
6, 1977, pp. 1525-1529. Reaktionsblandingen omrøres i et betragteligt tidsrum, f.eks. 16 timer eller mere, og produktet renses ved dialyse eller filtrering, afhængigt af hvor vidt produktet er opløseligt i reaktions-25 mediet eller ikke.6, 1977, pp. 1525-1529. The reaction mixture is stirred for a considerable period of time, e.g. 16 hours or more and the product is purified by dialysis or filtration, depending on whether or not the product is soluble in the reaction medium.
Opfindelsen angår også en fremgangsmåde til fremstilling af et præparat ifølge opfindelsen, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at man i vandig opløsning omsætter de anioniske makromolekyler med forbindelsen cis-MLL'-30 (H20)2(N03)2.The invention also relates to a process for the preparation of a composition according to the invention, characterized in that in an aqueous solution the anionic macromolecules are reacted with the compound cis-MLL'-30 (H2 O) 2 (NO3) 2.
Under anvendelse af en naturlig eller syntetisk makro-molekylær enhed, der er vandopløselig, som basis er det muligt at producere både vandopløselige og vanduoplø-selige platin- eller palladiumholdige præparater. Som 4Using a natural or synthetic macro-molecular moiety that is water-soluble as a base, it is possible to produce both water-soluble and water-insoluble platinum or palladium-containing preparations. Som 4
DK 1 b 76 01 BDK 1 b 76 01 B
en generel regel kan det siges, at hvis mere end ca.a general rule it can be said that if more than approx.
80% af de frie anioniske funktionelle grupper (f.eks. carboxylsyregrupper) på makromolekylet er kompleksdannede med [cis-MLL']++-delen, vil det resulterende præparat 5 ifølge opfindelsen være uopløseligt i vand eller sera på grund af både de lavere solubiliseringsegenskaber for [cis-MLL']++-delen sammenlignet med f.eks. natriumionen, og også den kendsgerning, at ved denne høje koncentration, af kostbart metal er forekomsten af tværbinding 10 af makromolekyler til dannelse af endnu større makro- molekyler høj i sig selv. Der er imidlertid en række undtagelser til denne regel om en øvre grænse på 80% ko-mp-leksdarmelse for vand- eller sera-opløselighed.80% of the free anionic functional groups (e.g. carboxylic acid groups) on the macromolecule are complexed with the [cis-MLL '] ++ moiety, the resultant composition 5 of the invention will be insoluble in water or sera due to both the lower solubilization properties of the [cis-MLL '] ++ part compared to e.g. the sodium ion, and also the fact that at this high concentration of precious metal, the presence of cross-linking 10 of macromolecules to form even larger macromolecules is high in itself. However, there are a number of exceptions to this rule on an upper limit of 80% co-MP laxity for water or sera solubility.
For det første kan et makromolekyle med meget høj molvægt 15 kun tolerere, at højst f.eks. 50 - 60% af dets anioniske funktionelle enheder er kompleksbundet til tilvejebringelse af et slutprodukt, som er vand- eller plasmaopløseligt. For det andet, hvis de primære aminer er RNH^ eller NH^R'NH^ i [cis-MLL']++-delen er således, at R-20 eller R'-gruppen er væsentligt hydrophob, vil makro- molekylet med anionisk funktionalitet tolerere mindre kompleksbinding med en sådan [cis-MLL']++-del under bibeholdelse af vandopløselighed for slutproduktet, end det ville tolereres, hvor L og L' er NH^ eller grupper 25 af NH2CH2CH2NH2.First, a very high molecular weight macromolecule 15 can only tolerate that at most e.g. 50-60% of its anionic functional units are complexed to provide a final product which is water or plasma soluble. Second, if the primary amines are RNH 1 or NH 2 R'NH 2 in the [cis-MLL '] ++ moiety is such that the R-20 or R' group is substantially hydrophobic, the macro molecule with anionic functionality tolerates less complex bonding with such a [cis-MLL '] ++ moiety while maintaining water solubility for the final product than would be tolerated where L and L' are NH 2 or groups 25 of NH 2 CH 2 CH 2 NH 2.
Præparaterne ifølge opfindelsen er således efter deres egenskaber opdelt i vandopløselige og vanduopløselige præparater. Virkningerne af disse præparattyper afviger væsentligt, når præparaterne anvendes som lægemidler 30 til behandling af cancere eller tumorer. De vandopløse lige typer tilpasses til indsprøjtning i pattedyrs le-gemsvæsker, f.eks. blod, og da de er opløselige i plasmaet, føres de gennem pattedyrslegemet, hvor væsken strømmer, uden en biofunktionel barierre mod præparatet.Thus, the compositions of the invention are divided according to their properties into water-soluble and water-insoluble compositions. The effects of these types of preparations differ substantially when the preparations are used as drugs for the treatment of cancers or tumors. The water-soluble straight types are adapted for injection into mammalian body fluids, e.g. blood, and as they are soluble in the plasma, they pass through the mammalian body where the fluid flows, without a biofunctional barrier to the preparation.
35 Vandopløselighed er også fordelagtig for behandlingen af trypanosomale infektioner. Vanduopløselige præparaterWater solubility is also advantageous for the treatment of trypanosomal infections. Water-insoluble preparations
5 DK 167601B5 DK 167601B
ifølge opfindelsen er på den anden side let tilpasselige til indføring i tumorvæv. Sådanne indførte eller implanterede lægemiddelpræparater kan ventes at frigive forholdsvis høje koncentrationer af terapeutisk effekti-5 ve stoffer ved hydrolyse, ved minimal opløselighed, ved enzymatisk angreb eller ved en kombination af disse tre måder i et meget lokalt volumen, hvorved cancermassen angribes direkte.on the other hand, according to the invention are readily adaptable for introduction into tumor tissue. Such introduced or implanted drug preparations can be expected to release relatively high concentrations of therapeutically effective substances by hydrolysis, by minimal solubility, by enzymatic attack or by a combination of these three ways in a very local volume, directly attacking the cancer mass.
Nogle eksempler vil blive givet i det følgende, hvor 10 følgende forkortelser anvendes: DACH = 1,2-diaminocyclohexan PGA = polyglutaminsyre en = ethylendiamin.Some examples will be given below using the following abbreviations: DACH = 1,2-diaminocyclohexane PGA = polyglutamic acid one = ethylenediamine.
Den anvendte 1,2-diaminocyclohexan i præparaterne blev 15 opnået fra Aldrich Chemical Co., som en 85?o's teknisk kvalitet og omfattede en blanding af cis- og transisome-re, hvor den transisomere indeholdt både plus- og minusoptiske enantiomere.The 1,2-diaminocyclohexane used in the compositions was obtained from Aldrich Chemical Co., as an 85 ° technical grade, and included a mixture of cis and trans isomers where the transisomer contained both plus and minusoptic enantiomers.
EKSEMPEL 1 20 A. Fremstilling af cis-Pt[ (DACH) (HnO)J (NO-,) „ I en 250 ml rundbundet kolbe blev der indført 16,4 g (0,0431 mol) ren cis-Pt(DACH)(Cl)^· En sølvnitratopløsning blev fremstillet ved opløsning af 14,3 g (0,0844 mol) AgNO^ i 100 ml destilleret vand. Opløsningen blev 25 derpå sat til kolben, og der blev omrørt mørkt ved 60 °C i 30 minutter. Suspensionen blev derpå afkølet til stuetemperatur under omrøring i yderligere 16 timer.EXAMPLE 1 20 A. Preparation of cis-Pt [(DACH) (HnO) J (NO-)] In a 250 ml round-bottom flask 16.4 g (0.0431 mol) of pure cis-Pt (DACH) was introduced. (Cl) + · A silver nitrate solution was prepared by dissolving 14.3 g (0.0844 mol) of AgNO4 in 100 ml of distilled water. The solution was then added to the flask and stirred dark at 60 ° C for 30 minutes. The suspension was then cooled to room temperature with stirring for an additional 16 hours.
Dernæst blev reaktionsblandingen filtreret, hvilket resulterede i en klar bleggul vandig opløsning indehol-30 dende Pt[(DACH)(h^O)^](NO^)2~opløsning. Andre nitrato-Next, the reaction mixture was filtered, resulting in a clear pale yellow aqueous solution containing Pt [(DACH) (h 2 O) 2] (NO 2) 2 ~ solution. Other nitrates
DK 157601 BDK 157601 B
6 platin(II)— og palladium(II)-opløsninger som beskrevet i det følgende blev fremstillet på lignende måde.6 platinum (II) and palladium (II) solutions as described below were prepared in a similar manner.
B. Fremstilling af cis-Pt(DACH) kompleksbundet med dextransulfat_ 5 I en 50 ml rundbundet kolbe blev 0,5 g dextransulfat- natriumsalt (middelmolvægt 5000) opløst i 20 ml destilleret vand. Dernæst blev 2,0 ml af en 0,2615 M R-tLCDACB.M^O^] (NO^)^ vandig opløsning fremstillet som under trin (A) i det foregående blev langsomt ved 10 hjælp af en sprøjte sat til den polymere opløsning.B. Preparation of cis-Pt (DACH) complexed with dextran sulphate In a 50 ml round bottom flask, 0.5 g of dextran sulphate sodium salt (medium molecular weight 5000) was dissolved in 20 ml of distilled water. Next, 2.0 ml of a 0.2615 M R-tLCDACB.M 2 O 2] (NO 2) 2 aqueous solution was prepared as in step (A) above, slowly added to the polymer by a syringe. resolution.
Reaktionsblandingen blev omrørt i 16 timer.The reaction mixture was stirred for 16 hours.
Prøven blev derpå renset ved dialyse over en 6 timers periode (dialyserør med en molvægtsafskæring på 5.000 -6.000). Analyse af den rensede prøve gav et 0,19 vægt-ft's 15 indhold af platin i opløsning. Dialyseproduktet blev anvendt ved afprøvningen som beskrevet under tabel I.The sample was then purified by dialysis over a 6 hour period (dialysis tube with a molecular weight cutoff of 5,000 -6,000). Analysis of the purified sample gave a 0.19 wt-ft of platinum content in solution. The dialysis product was used for the test as described in Table I.
En portion af dialyseproduktet blev lyophiliseret til fremstilling af et fnugget krystallinsk udseende gyldent fast stof. Lyophilisering blev udført over en uge ved 20 -60 °C med et vakuum på 10 mikron. Det faste produkt kunne rekonstitueres i destilleret vand.A portion of the dialysis product was lyophilized to produce a chunky crystalline golden solid appearance. Lyophilization was performed over a week at 20 -60 ° C with a vacuum of 10 microns. The solid product could be reconstituted in distilled water.
EKSEMPEL 2EXAMPLE 2
Fremstilling af cis-Pd(DACH) kompieksbundet med PGAPreparation of cis-Pd (DACH) complex bound with PGA
I en 50 ml rundbundet kolbe blev 1,0 g (0,0066 mol med 25 hensyn til polymere enheder) af poly-L-glutaminsyre-na- triumsalt opløst i 20 ml destilleret vand. Under omrøring blev 14,0 ml af en 0,1447 M cis-Pd[ (DACH) (F^O^] (NO^^ vandig opløsning langsomt gennem en skilletragt sat til den polymere opløsning. Reaktionsblandingen blev 30 omrørt i 16 timer.In a 50 ml round bottom flask, 1.0 g (0.0066 mol of 25 polymeric units) of poly-L-glutamic acid sodium salt was dissolved in 20 ml of distilled water. With stirring, 14.0 ml of a 0.1447 M cis-Pd [(DACH) (F₂O ^] (NO₂) aqueous solution was slowly added to the polymer solution through a separatory funnel. The reaction mixture was stirred for 16 hours.
DK 157601 BDK 157601 B
77
Prøven blev derpå renset ved dialyse i 16 timer (dialyserør med en molekylvægtsafskæring på 6.000). Analyse af den rensede prøve gav et 0,22 vægt-?0's indhold af palladium i opløsning.The sample was then purified by dialysis for 16 hours (dialysis tube with a molecular weight cut-off of 6,000). Analysis of the purified sample yielded a 0.22% by weight of palladium in solution.
5 EKSEMPEL 3EXAMPLE 3
Fremstilling af cis-Pt(DACH) kompleksbundet med PGAPreparation of cis-Pt (DACH) complexed with PGA
I en 50 ml rundbundet kolbe blev 0,5 g (0,0033 mol baseret på polymerenheder) poly-L-glutaminsyre-natriumsalt (middelmolvægt 60.000) opløst i 20 ml destilleret vand.In a 50 ml round bottom flask, 0.5 g (0.0033 mol based on polymer units) of poly-L-glutamic acid sodium salt (mean molecular weight 60,000) was dissolved in 20 ml of distilled water.
10 Under omrøring blev 2,0 ml af en 0,2516 MWith stirring, 2.0 ml of a 0.2516 M
cis-Pt[ (DACH) (h^O^l ( NO ) 2 vandig opløsning langsomt ved hjælp af en sprøjte sat til den polymere opløsning. Reaktionsblandingen blev omrørt i 16 timer.cis-Pt [(DACH) (h ^ O ^ l (NO) 2 aqueous solution slowly by means of a syringe added to the polymer solution. The reaction mixture was stirred for 16 hours.
Prøven blev derpå renset ved dialyse i 6 timer (dialyse-15 rør med en molvægtsafskæring på 6000). Analyse af den rensede prøve gav et 0,24 vægt-?i's indhold af platin i opløsning. En del af dialyseproduktet blev lyophilise-ret som i eksempel 1, trin (B) til fremstilling af et fnugget, krystallinsk udseende lyst gyldent fast stof.The sample was then purified by dialysis for 6 hours (dialysis tube with a molecular weight cut-off of 6000). Analysis of the purified sample yielded a 0.24% by weight of platinum in solution. Part of the dialysis product was lyophilized as in Example 1, step (B) to produce a fluffy crystalline appearance of light golden solid.
20 Genopløsning af det faste stof i destilleret vand blev foretaget.Dissolve the solid in distilled water.
EKSEMPEL 4EXAMPLE 4
Fremstilling af cis-Pt(NH^)^ kompleksbundet med PGAPreparation of cis-Pt (NH ^) kompleks complexed with PGA
I en 50 ml rundbundet kolbe blev 1,0 g (0,0066 mol base-25 ret på polymerenheder) poly-L-glutaminsyre-natriumsalt (middelmolvægt 60000) opløst i 30 ml destilleret vand.In a 50 ml round bottom flask, 1.0 g (0.0066 mol based on polymer units) of poly-L-glutamic acid sodium salt (medium molecular weight 60000) was dissolved in 30 ml of distilled water.
Dernæst blev 7,8 ml af en 0,2537 MNext, 7.8 ml of a 0.2537 M
cis-Pt[ NH-j )2 (H2O) 2] (N0^ ) 2 vandig opløsning langsomt ved hjælp af en sprøjte sat til den polymere opløsning.cis-Pt [NH-j) 2 (H 2 O) 2] (NO 2) 2 aqueous solution slowly using a syringe added to the polymer solution.
DK 157601 BDK 157601 B
88
Reaktionsblandingen blev omrørt i 16 timer.The reaction mixture was stirred for 16 hours.
Prøven blev derpå renset ved dialyse i 60 timer (dialyse-rør-med en molvægtsafskæring på 5.000 - 6.000). Analyse af den rensede prøve gav et 0,61 vægt-%'s indhold af 5 platin i opløsning (24,2% af de frie carboxylsyresidekæder på PGA var således kompleksbundet til platin).The sample was then purified by dialysis for 60 hours (dialysis tube with a molecular weight cutoff of 5,000 - 6,000). Analysis of the purified sample gave a 0.61% by weight content of 5 platinum in solution (24.2% of the free carboxylic acid side chains on the PGA were thus complexed to platinum).
EKSEMPEL 5EXAMPLE 5
Cis-Pt(DACH) kompleksbundet med chondroitinsulfat I en 250 ml rundbundet kolbe blev 2,0 g chondroitinsul-10 fat-natriumsalt opløst i 80 ml destilleret vand. Under omrøring.blev 8,0. ml 0,3405 M cis-Pt[ (DACH) (H20) 2] (N03)2 vandig opløsning langsomt sat til den polymere opløsning. Reaktionsblandingen blev omrørt i 16 timer. Natten over blev reaktionsproduktet delvis til en gel.Cis-Pt (DACH) complexed with chondroitin sulfate In a 250 ml round bottom flask, 2.0 g of chondroitin sulfate sodium salt was dissolved in 80 ml of distilled water. With stirring, remained 8.0. ml 0.3405 M cis-Pt [(DACH) (H 2 O) 2] (NO 3) 2 aqueous solution slowly added to the polymeric solution. The reaction mixture was stirred for 16 hours. Overnight, the reaction product partially became a gel.
15 Prøven blev derpå renset ved dialyse i 6 timer (dialy serør med en molvægtsafskæring på 6000 - 8000). Analyse af den rensede prøve viste et 0,455 vægt-%'s indhold af platin "i~ opløsning.The sample was then purified by dialysis for 6 hours (dialysis tube with a molecular weight cut-off of 6000 - 8000). Analysis of the purified sample showed a 0.455 wt% platinum content in solution.
EKSEMPEL 6 20 Fremstilling af cis-PtiNH^)^ kompleksbundet med bovin- serumalbumin_ I en 50 ml rundbundet kolbe blev 1,0 g bovinserumalbumin (fremstillet under anvendelse af metode IV af Cohn, E.G. et al., J. Am. Chem. Soc., 1947 69_ (1953)) opløst 25 i 25 ml destilleret vand. Dernæst blev 7,8 ml 0,2537 M cis-Ptt (NHj^Ct^O^] (^0^2 vandig opløsning langsomt ved hjælp af en sprøjte sat til opløsningen af serumalbumin. Reaktionsblandingen blev omrørt i 16 timer.EXAMPLE 6 Preparation of cis-PtiNH 3) complexed with bovine serum albumin In a 50 ml round-bottom flask, 1.0 g of bovine serum albumin (prepared using Method IV by Cohn, EG et al., J. Am. Chem. Soc. ., 1947 69 (1953)) dissolved in 25 ml of distilled water. Next, 7.8 ml of 0.2537 M cis-Ptt (NH 2 ^ Ct ^ O ^) (^ 0 ^ 2 aqueous solution was slowly added by means of a syringe to the solution of serum albumin. The reaction mixture was stirred for 16 hours.
DK 157601BDK 157601B
99
Prøven blev derpå renset ved dialyse i 6 timer (dialyse-rør med en molvægtsafskæring på 6.000). Analyse af den rensede prøve viste et 0,51 vægt-ft's indhold af platin i opløsning.The sample was then purified by dialysis for 6 hours (dialysis tube with a molecular weight cut-off of 6,000). Analysis of the purified sample showed a 0.51 wt-ft of platinum in solution.
5 EKSEMPEL 7EXAMPLE 7
In vivo forsøg over for trypanosomerIn vivo experiments against trypanosomes
In vitro forsøg over for T. Brucei indikerede, at præparaterne cis-Pt(DACH) kompleksbundet med (PGA) og cis-Pt(NH^)2 kompleksbundet med (PGA) var øjeblikkeligt 10 effektive i lave doseringer. Følgelig blev der udført in vivo afprøvning på mus.In vitro experiments against T. Brucei indicated that the cis-Pt (DACH) complexed with (PGA) and cis-Pt (NH4) 2 complexed with (PGA) preparations were immediately effective at low doses. Accordingly, in vivo testing was performed on mice.
De mus, der blev valgt, var NCS hanmus med en vægt på 20 - 25 g. Fem dyr blev anvendt for hver doseringsmængde. Hver mus blev interperitonealt injiceret med en 15 væske indeholdende 50.000 Trypanosoma Conglolense. Ved denne dosis døde kontroldyr, der ikke blev givet nogen anti-trypanosomal behandling, på 5 - 8 dage. En dag efter injektionen af trypanosomer blev platinlægemidlet ifølge opfindelsen administreret. I ét forsøg med 15 20 mg Pt/kg gav cis-Pt(DACH) kompleksbundet med (PGA) en helbredelsesgrad på 20?ί, og i et andet forsøg med 6,25 mg Pt/kg gav samme forbindelse en helbredelsesgrad på 40¾ målt som overlevelse af dyrene i 60 dage. Andre forsøg med cis-Pt(NHj)2 kompleksbundet med (PGA) under 25 anvendelse af 4 dyr pr. dosis gav en helbredelsesgrad på 75¾ ved en dosis på 20 mg Pt/kg og en helbredelsesgrad på 50¾ ved 15 mg Pt/kg. Mus (4 dyr pr. dosisniveau) behandlet med enten 10 mg Pt/kg eller 20 mg Pt/kg cis-Pt(NH^)2 kompleksbundet med (PGA) udviste på dag 30 nr. 1, 3 og 6 helbredelsesgrader på 100¾. Efter 60 dages forløb blev blod fra overlevende dyr administreret til andre uinficerede dyr, og der skete ingen infektion.The mice selected were NCS male mice weighing 20 - 25 g. Five animals were used for each dosing amount. Each mouse was injected interperitoneally with a fluid containing 50,000 Trypanosoma Conglolense. At this dose, control animals, without any anti-trypanosomal treatment, died in 5 - 8 days. One day after the injection of trypanosomes, the platinum drug of the invention was administered. In one experiment with 15 20 mg Pt / kg, cis-Pt (DACH) complexed with (PGA) gave a cure rate of 20 µg, and in another experiment with 6.25 mg Pt / kg the same compound gave a cure rate of 40 ° measured such as survival of the animals for 60 days. Other experiments with cis-Pt (NH 2) 2 complexed with (PGA) using 4 animals per day. the dose gave a cure rate of 75¾ at a dose of 20 mg Pt / kg and a cure rate of 50¾ at 15 mg Pt / kg. Mice (4 animals per dose level) treated with either 10 mg Pt / kg or 20 mg Pt / kg cis-Pt (NH 2) 2 complexed with (PGA) exhibited at day 30 Nos. 1, 3 and 6 cures of 100¾. After 60 days, blood from surviving animals was administered to other uninfected animals and no infection occurred.
Ved afprøvningen var cisplatin ueffektiv i alle doser.In the test, cisplatin was ineffective at all doses.
DK 157601 BDK 157601 B
10 EKSEMPEL 8EXAMPLE 8
Forskellige vand- og plasmaopløselige forbindelser ifølge opfindelsen blev screenet for anticancer-aktivitet i mus under anvendelse af ascites P388 leukæmiceller.Various water and plasma soluble compounds of the invention were screened for anticancer activity in mice using ascites P388 leukemia cells.
5 Musene var CDF1, hunkøn, med en vægt på ca. 20 g. IThe mice were CDF1, female, weighing approx. 20 g
hvert forsøgsdyr blev inplanteret ca. 4,8 x 10^ celler interperitonealt. Prøvelægemidlerne blev administreret interperitonealt 1 dag efter infektion. Resultaterne er vist i den efterfølgende tabel I. I tabel I betyder 10 søjlen med overskriften "Log^g ændring i tumorbyrde ved afslutning Rx" den logaritmiske nettoændring i levedygtig tumorcellepopulation ved afslutningen af proceduren sammenlignet med starten og danner et passende mål for størrelsesordenen af cellepopulationens ændring 15 på grund af behandling. En "-6 log ændring" betyder en reduktion på 99,9999%.each test animal was implanted approx. 4.8 x 10 5 cells interperitoneally. The test drugs were administered interperitoneally 1 day after infection. The results are shown in the following Table I. In Table I, the column entitled "Logg change in tumor burden at end Rx" means the logarithmic net change in viable tumor cell population at the end of the procedure as compared to the onset, forming an appropriate measure of the size of the cell population. amendment 15 due to treatment. A "-6 log change" means a 99.9999% reduction.
De opnåede resultater som beskrevet synes at vise, at forbindelser fremstillet i overensstemmelse med opfindelsen i mange tilfælde er mere tolerable i forsøg i patte-20 dyrskroppe end standardpræparatet cisplatin. Det blev iagttaget, at sammensætningen af cis-PtCcyclohexylamin^ med ferritin fremstillet på en måde svarende til den i eksempel 6 beskrevne procedure var yderst toxisk i mus ved administrering som beskrevet i det foregående.The results obtained as described appear to show that in many cases, compounds prepared in accordance with the invention are more tolerable in mammalian animal experiments than the standard cisplatin preparation. It was observed that the composition of cis-PtCcyclohexylamine with ferritin prepared in a manner similar to the procedure described in Example 6 was highly toxic in mice by administration as described above.
25 Den terapeutiske værdi af visse af de vandopløselige lægemidler ved trypanosomalbehandling er høj. Det ses, at de forøgede opløselighedsegenskaber for forbindelserne er en stor fordel. Opløselighedsgraden og biologiske parametre kan kontrolleres ved at variere den totale 30 koncentration af amineret platin eller palladium kompleks dannet til de anioniske makromolekyler.The therapeutic value of some of the water-soluble drugs in trypanosomal treatment is high. It is seen that the increased solubility properties of the compounds are a great advantage. The degree of solubility and biological parameters can be controlled by varying the total concentration of aminated platinum or palladium complex formed for the anionic macromolecules.
DK 157601BDK 157601B
1111
TABEL ITABLE I
Middelværdi Log1Q ændring i Antal Dosis mg Døds- tumorbyrde ved _Behandling_. dyr ; PI.Ag_dag... % IL5 f 5 U nln^ ''Mean Log1Q change in Number of Dose mg Death Tumor burden by _Treatment_. animals ; PI.Ag_day ...% IL5 f 5 U nln ^ ''
Negativ kontrol (ingen 20 — 10 behandling) , y ( 3 96 16 +60 -4,1 c/s-Pt(DACH)(PGA) kompleks < 3 ^ ^ ^ (3 12 14 +40 -2,7 { 3 96 14 +40 -2,7 3 48 11 +10 -0,7 3 24 11 +10 -0,7 3 12 11 +10 -0,7 { 3 96 -— 13 +30- -2,1 3 48 12 + 20 -1,4 3 24 11 +10 -0,7 3 12 11 +10 -0,7 i 3 96 Toxisk — c/s-Pd(en) (PGA) kompleks j ^ 48 Toxisk ^ i 3 12 10 0 — f 3 96 ToxiskNegative control (no 20 - 10 treatment), γ (3 96 16 + 60 -4.1 c / s-Pt (DACH) (PGA) complex <3 ^^ (3 12 14 + 40 -2.7 {3 96 14 +40 -2.7 3 48 11 +10 -0.7 3 24 11 +10 -0.7 3 12 11 +10 -0.7 {3 96 -— 13 + 30- -2.1 3 48 12 + 20 -1.4 3 24 11 +10 -0.7 3 12 11 +10 -0.7 i 3 96 Toxic - c / s-Pd (en) (PGA) complex j ^ 48 Toxic ^ i 3 12 10 0 - f 3 96 Toxic
c/s-Pd(NH3)2 (PGA) kompleks <(3 ^ Jjj +4jJc / s-Pd (NH 3) 2 (PGA) complex <(3 ^ Yy + 4yJ)
( 3 12 9 -10 +0,7 {3 96 Toxisk 3 S Toxisk _0? 3 12 10 0 0 • r, „ ! . . C 3 6 22 +100 -6,7 as-Pt(DACH) (dextran- ) 3 3 20 +81 -6^2 sul fat) kompleks \ 3 1>5 18 +63 -4,5(3 12 9 -10 +0.7 {3 96 Toxic 3 S Toxic _0? 3 12 10 0 0 • r, „!. C 3 6 22 +100 -6.7 as-Pt (DACH) (dextran- ) 3 3 20 +81 -6 ^ 2 sul fat) complex \ 3 1> 5 18 +63 -4.5
Negativ kontrol (ingen behandling) ( 20 — 11 (10 56 Toxisk j 10 38 17 + 54 -4,5 c/s-Pt(NH3)2 (PGA) kompleks { 10 25 16,5 +50 —4,2 j 10 17 14 +27 -2,3 l10 11 13 + 18 _ -1,5 ( 10 5,2Negative control (no treatment) (20 - 11 (10 56 Toxic j 10 38 17 + 54 -4.5 c / s-Pt (NH 3) 2 (PGA) complex {10 25 16.5 + 50 - 4.2 j 10 17 14 +27 -2.3 l10 11 13 + 18 _ -1.5 {10 5.2
Positiv kontrol ^ 10 3,5 18,5 +68 -5,7 (cisplatin) 10 2>3 16>5 +5° -4»2Positive Control ^ 10 3.5 18.5 +68 -5.7 (cisplatin) 10 2> 3 16> 5 + 5 ° -4 »2
Negativ kontrol (ingen ^ 20 ~ 11 behandling)Negative control (no ^ 20 ~ 11 treatment)
Note: Hver prøverække er adskilt med en linie.Note: Each sample row is separated by a line.
%ILS = Forøgelse af levetid ("increase in life span").% ILS = increase in life span.
DK 157601BDK 157601B
uu
De efterfølgende eksempler vedrører de vand-uopløselige præparater ifølge opfindelsen.The following examples relate to the water-insoluble compositions of the invention.
EKSEMPEL 9 1 g natriumsalt af poly-L-glutaminsyre blev opløst i 5 20 ml destilleret vand i en rundbundet kolbe udstyret med en magnetisk omrører. Til denne kolbe blev der derpå langsomt sat 10,5 ml af en vandig opløsning af cis-Pt(NH3)2(N0^)2.2H20 indeholdende 0,495 g/ml platin under omrøring. Der udfældede langsomt et produkt fra 10 den omrørte opløsning, men det genopløstes efter tilsætning af 10 ml destilleret vand. Yderligere 2,1 ml af platinopløsningen blev tilsat til tilvejebringelse af et udfældet produkt af tværbunden natur. Efter filtrering, vask og tørring indeholdt det således fremstil-15 lede præparat 33,68¾ platin, hvoraf beregnes, at 86,0¾ af carboxylsyregrupperne på sidekæderne i poly-L-glut-aminsyren er kompleksbundet med cis-[Pt(NH^)2l++-delen.EXAMPLE 9 1 g of sodium salt of poly-L-glutamic acid was dissolved in 5 20 ml of distilled water in a round bottom flask equipped with a magnetic stirrer. To this flask was then slowly added 10.5 ml of an aqueous solution of cis-Pt (NH 3) 2 (NO 2) 2.2 H 2 O containing 0.495 g / ml platinum with stirring. A product from the stirred solution slowly precipitated, but it was redissolved after the addition of 10 ml of distilled water. An additional 2.1 ml of the platinum solution was added to provide a precipitated product of a crosslinked nature. After filtration, washing and drying, the preparation thus prepared contained 33.68¾ platinum, calculated that 86.0¾ of the carboxylic acid groups on the side chains of the poly-L-glutamic acid are complexed with cis- [Pt (NH -part.
EKSEMPEL 10 I en præparation svarende til den i eksempel 9 beskrevne 20 blev 0,5 g af natriumsaltet af poly-L-glutaminsyre omsat med 0,312 g platin i form af cis-PtCNH-j^CNOj^^t^O-forbindelsen til opnåelse af et produkt indeholdende 38,55¾ platin. Dette svarer til en reaktion af 95,1¾ af carboxylsyreenhederne på poly-L-glytaminsyren med 25 cis-[Pt(NHj)2]++-delen.EXAMPLE 10 In a preparation similar to that described in Example 9, 0.5 g of the sodium salt of poly-L-glutamic acid was reacted with 0.312 g of platinum in the form of the cis-PtCNH-CN of a product containing 38.55¾ platinum. This corresponds to a reaction of 95.1¾ of the carboxylic acid units to the poly-L-glytamic acid with the 25 cis- [Pt (NH₂) 2] ++ moiety.
EKSEMPEL 11 0,857 g natriumcarboxymethylcellulose blev opløst i en blanding af 60 ml vand og 20 ml dimethylformamid. Beholderen blev dækket med aluminiumfolie, og 9,6 ml 30 af en vandig opløsning af cis-Pt ( NH^ (NO^^ · 21^0 blevExample 11 0.857 g of sodium carboxymethyl cellulose was dissolved in a mixture of 60 ml of water and 20 ml of dimethylformamide. The vessel was covered with aluminum foil and 9.6 ml of an aqueous solution of cis-Pt (NH
DK 157601BDK 157601B
13 tilsat under omrøring. Efter 1 times forløb begyndte der at udfælde et produkt. Derefter blev produktet samlet, vakuumfiltreret, vasket med vand og acetone og tørret under vakuum. Det således producerede produkt viste 5 ved analyse 24,8¾ platin, hvilket svarer til omsætning af 88,2¾ af de frie carboxylsyregrupper i carboxycellulo-sekomplekset med cis-[Pt(NH^)++-delen.13 added with stirring. After 1 hour, a product began to precipitate. Then the product was collected, vacuum filtered, washed with water and acetone and dried under vacuum. The product thus produced showed by analysis 24.8 24 platinum, which corresponds to the reaction of 88.2 88 of the free carboxylic acid groups in the carboxycellulose complex with the cis- [Pt (NH NH) ++ moiety.
EKSEMPEL 12EXAMPLE 12
Præparatet som fremstillet i eksempel 9 blev afprøvet 10 for aktivitet over for ascites P388 leukæmi i CDF1 hun mus. Ued en ikke-toxisk dosis på 30 mg/kg af musens vægt, administreret interperitonealt som en enkelt dosis dagen efter implantering af 10^ tumorceller gav præparatet ifølge eksempel 9 en 36¾1s forøgelse i levetiden 15 og en ca. -3,0 log^g ændring i tumorbyrde ved afslutning af forsøget. Toxicitetsdata for præparatet ifølge eksempel 9 afledt fra ikke-tumorbærende CDF1 hunmus indikerede LD^q, LD^g og LD^g på 68, 99 og 141 mg platin/kg mus henholdsvis.The preparation as prepared in Example 9 was tested 10 for activity against ascites P388 leukemia in CDF1 female mice. At a non-toxic dose of 30 mg / kg of mouse weight, administered interperitoneally as a single dose the day after implantation of 10 6 tumor cells, the preparation of Example 9 gave a 36¾1 increase in lifespan 15 and a ca. -3.0 log ^ g change in tumor burden at end of trial. Toxicity data for the preparation of Example 9 derived from non-tumor bearing CDF1 female mice indicated LD ^ q, LD ^ g and LD ^ g of 68, 99 and 141 mg of platinum / kg mice, respectively.
Claims (10)
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US54087183 | 1983-10-14 | ||
US06/540,871 US4584392A (en) | 1982-11-10 | 1983-10-14 | Platinum and palladium complexes |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK550483D0 DK550483D0 (en) | 1983-12-01 |
DK550483A DK550483A (en) | 1985-04-15 |
DK157601B true DK157601B (en) | 1990-01-29 |
DK157601C DK157601C (en) | 1990-06-18 |
Family
ID=24157276
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK550483A DK157601C (en) | 1983-10-14 | 1983-12-01 | THERAPEUTIC PLATINUM OR PALLADIUM PREPARATION AND METHOD OF PRODUCING THEREOF |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DK (1) | DK157601C (en) |
-
1983
- 1983-12-01 DK DK550483A patent/DK157601C/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DK550483D0 (en) | 1983-12-01 |
DK550483A (en) | 1985-04-15 |
DK157601C (en) | 1990-06-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0111388B1 (en) | Therapeutic compounds of platinum and palladium and their preparation | |
Santos-Silva et al. | Towards improved therapeutic CORMs: understanding the reactivity of CORM-3 with proteins | |
CA2556192A1 (en) | O,o'-amidomalonate and n,o-amidomalonate platinum complexes | |
JP5025062B2 (en) | N, O-amidmalonate platinum complex | |
US4673754A (en) | Platinum and palladium complexes | |
TWI404527B (en) | Metal-polysaccharide conjugates: compositions and synthesis | |
CZ286404B6 (en) | Platinum complex compounds, process of their preparation and pharmaceutical preparation containing thereof | |
DK157601B (en) | Therapeutic platinum or palladium preparation, and process for preparing it | |
KR100314720B1 (en) | Platinum complex conjugated to cyclotriphosphazene, prepration thereof, and anticancer agent comprising the same | |
HRP20000792A2 (en) | Platinum complex, its preparation and therapeutic application | |
Sibikina et al. | Polysaccharide complexes with metal cations: structure and application (a review). | |
CN105254780B (en) | A kind of bionical derivative of cation type chitosan and its application | |
JPS59116221A (en) | Platinum or palladium complex | |
EP0481013B1 (en) | A composition for removing or inactivating harmful components in blood or other extracellular body fluids | |
IE910512A1 (en) | Improvements in chemical compounds | |
Puzyrkov et al. | Polymer-analogous transformations of poly (N-vinylpyrrolidone) to produce new complexing macromolecular systems | |
WO2018151258A1 (en) | Drug delivery carrier and drug delivery system | |
JPH02108694A (en) | Platinum (ii) diamine complex | |
Minzanova et al. | Scientific grounds and process aspects for the production of polygalacturonate with Ca 2+ and Fe 2+ ions | |
JPH03170435A (en) | High-molecular electrolytic complex for treating and preventing virus-caused diseases | |
RU2033998C1 (en) | Complex compound of cis-diamminoplatinum (ii) with copolymer of maleic acid sodium salt and furan showing immunostimulating and antimalignant activities at broad range of therapeutic doses and low nephrotoxicity | |
RU2660560C1 (en) | Process for producing copper-containing arabinogalactan sulfate derivatives | |
RU2578311C2 (en) | Water-soluble cellulose composition and method for obtaining thereof | |
CS276046B6 (en) | Derivatives of polyanhydroglucuronic acid and process for preparing thereof | |
Han et al. | Synthesis and Antitumor Activity of Polyanion-Pt-Complexes Containing Alicyclic Amines as Ligands |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PBP | Patent lapsed |