DK156576B - 7-(halogen-alkylidenimino)-cephalosporiner eller 6-halogen-iminopenicilliner til anvendelse som mellemprodukt og fremgangsmaade til fremstilling af saadanne forbindelser - Google Patents

Description

1 DK 156576 B

Den foreliggende opfindelse angâr 7-(halogen-alkylidenimino)-cepha-losporiner eller β-halogen-iminopenicilliner til anvendelse som mellemprodukt ved fremstilling af 7P-acylamino-7a-alkoxycephalosporin( eller 6p-acylamino-6a-alkoxypenicilliner med antibiotisk aktivitet. Endvidere angâr opfindelsen en fremgangsmâde til fremstilling af det omhandlede mellemprodukt.

Cephalosporinderivaterne, som fremstilles yed fremgangsmâden ifolge opfindelsen, har en cepham-struktur som angivet i det folgende: -η Λ--a 2

DK 156576 B

som beskrevet i J. Amer. Chem. Soc. 84, 3400 (1^62), hvor de til-svarende umættede forMndelser omtales som "cephems", idet positi-onen af den umættede Mnding er angivet ved et tal, f.eks. 3-cephem.

Penicillanderivaterne er derivater af penicillansyre med formlen:

.x^CH3 δ Y ^CH

J__H« 3 cT \cooh

Mange cephalosporin- og penicillin-derivater med antibiotiske egenskaber er kendt, og den f0rste af disse, som man bar opdaget, har forskellige substituerede acetamidokæder i 7β~ eller 6β-ρο-sitionen og er usubstitueret i 7a- eller βα-positioneme. For nylig bar man dog fundet, at forskellige 7«- eller 6a-alkoxy-deri~ vater af -disse forbindelser ligeledes er værdifulde aniibiotiske stoffer.

Blandt de kendte metoder til indf0ring af en alkoxygruppe i 7-positionen af en cepbem-ring eller i β-stillingen af en penam-ring er en alkoxyalky1ering med t-butyl-hypoehlorit og lithium-alkoxid den simpleste, og den giver de bedste udbytter [R.A. Fire-stone og B.G-. Gbristensen, J. Org. Cbem. 38, 1436 (1973); G.A. Koppel og RJ. Koehler, J. Amer. Chem. Soc. 9_5, 2403 (1973)].

Benne metode bar dog den fordel, at den ikke er anvendelig til cephalosporiner eller penicilliner, som er fslsomme for t-butyl-hypocblorit, dvs. som har et aniondannelsescenter i sidèkæden ved 7- eller 6-stillingen.

Det har vist sig muligt at fremstille visse 7P~acylamino-7a-alkoxycepbalosporin- eller 6p-acylamino-6a-alkoxypenicillin-derivater, som velegnede antibakterielle midler, og hvoraf nogle ogsâ kan anvendes som mellemprodukter ved fremstilling af andre, men mere værdifulde antibakterielle midler.

DK 156576 B

3

De ved fremgangsmâden ifolge opfindelsen fremstillede forbin-delser har den i krav 1 angivne formel. Mellemproduktet kan omdannes til forbindelser med formlen: R1 OR3 \ a ^ C · „ C _ M-I. Fv s*'"' 1· O _i, z O) hvor R·*" repræsenterer et hydrogenatom, et halogenatom, en al-koxycarbonylgruppe med 1-4 carbonatomer i alkyldelen eller en arylgruppe, 2 R repræsenterer et hydrogenatom, et halogenatom, en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, en arylgruppe, alkylthiogruppe med 1-4 carbonatomer, en alkynylthiogruppe med 2-4 carbonatomer, en arylthiogruppe, en cyanoalkylthiogruppe med 1-4 carbonatomer i alkyldelen, en alkylsulfonylgruppe med 1-4 carbonatomer eller en 5- eller 6-leddet heterocyclisk gruppe, 3 R repræsenterer en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, og Z repræsenterer et fragment med formlen: eller [ CH3 —\.

2 R

I 4 R

4 hvor R repræsenterer en carboxylgruppe eller beskyttet carboxyl-gruppe, og A repræsenterer et hydrogenatom, en alkanoyloxygruppe med 1-4 carbonatomer, en carbamoyloxygruppe eller en 5- eller 6-leddet heterocyclisk thiogruppe.

Ved fremgangsmâden ifolge opfindelsen fremstilles en halogenimin med formlen (II)

DK 156576 B

4

1 H

2/1 - i 1 \ w ns i J__N z y1 y 1 2 hvori R , R , Z, Y1 og Y har den i krav 1 angivne betydnmg, ved omsætning af en acylaminoforbindelse med formlen (VI): X. ......... r. . . _ »^ΠΓ”Τ~Τ X 1,0

^ '-—Z

1 2 hvori R , R og Z har den ovenfor definerede betydnmg, og -X repræsenterer en hydroxygruppe eller et halogenatom, med et halogeneringsmiddel.

Mellemproduktets fremstilling er anskueliggjort ved folgende reaktionsskema: j „1 H g

TT H g R V X

V. — /° N. \ C—· C' lr \ C-C —Klï-T-P λ halogène- ’______ [ ] 1 11 X- N Z rin^ ^ - 'i y çf~~

X 0 x—"' 1 Y O

- (VI) .

Eksempler pâ egnede halogeneringsmidler er phosphorpentahalo-genider, f.eks. phophorpentachlorid eller phosphorpentabromid; phosphorhalognider, f.eks. phosphortrichlorid eller phosphor-tribromid; phosphoroxyhalogenider, f.eks. phosphoroxychlorid eller' phosphoroxybromid og thionylhalogenider, f.eks. thio-—......——nylchlor-id-eller—'bhionyIbromid. Blandt disse foretrækkes phos- 5

DK 156576B

phorpentachlorid. Halogeneringsreaktionen udfores hensigts-mæssigt i et vandfrit inert organisk oplosningsmiddel under omroring ved en temperatur pâ -50 °C til 40 °C. Reaktionstiden er ikke kritisk, men reaktionen vil normalt være afsluttet i l0bet af 15 minutter til 5 timer. Egnede inerte organiske oplosningsmidler er chloroform, methylenchlorid, benzen, diethyl-ether, tetrahydrofuran og dioxan. Reaktionen udfares fortrinsvis i nærværelse af en tertiær amin, sâsom quinolin, diethylamin, dimethylanilin, pyridin, triethylamin eller diazabicyclooctan.

Nâr halogeneringsreaktionen er afsluttet, kan reaktionsblanding-en, indeholdende forbindelsen (II), anvendes i den foreliggende form eller kan udvindes og renses pâ i og for sig kendt mâde.

Hvis X i udgangsmaterialet repræsenterer en hydroxygrûppe, vil denne under halogeneringsreaktionen blive erstattet med et halogenatom.

Nogle af acylamino-forbindelserne (VI), der anvendes soin ud-gangsmaterialer ved fremgangsmâden ifolge opfindelsen, er hidtil ukendte og kan fremstilles pâ kendt mâde, f.eks. soin beskrevet i "Cephalosporins and Penicillins", udgivet af E.H. Flynn,

Academie Press, New York og London (1972), side 83. Som eksem-pel kan de omsættes ved omsætning af den tilsvarende amino-forbindelse med et halogenid eller anhydrid af en carboxylsyre med formlen: R\

C-COOH

H^l

X

1 2 hvor R , R og X har den ovennævnte betydning, eller ved omsaet-ning af den tilsvarende amino-forbindelse med selve carboxylsyren i nærværelse af et peptid-koblingsmiddel, f.eks. dicyclohexyl-urinstof.

De omhandlede mellemprodukter har den fordel, at de er generelt anvendelig til fremstilling af cephalosporiner og penicilliner, selv om de har et aniondannende center i sidekæden, og at de kan udfores uden isolation af mellemproduktet under reaktionerne, dvs.

DK 156576 B

6 reaktionen kan udfares i en enkelt reaktor.

Premgangsmâden ifelge opfindelsen skal i det efterf0lgende illustreres nærmere ved hjælp af nogle eksempler, der beskriver mellemproduktets fremstilling og anvendelsen til fremstilling af de antibiotisk aktive slutprodukter.

EKSEMPEI. 1 (A) Me thyl-3-methyl-7 β - ( 1^2^21 -trichlorethylidenimino)-3-cephem-4-carboxylat____________________________ 600 mg phosphorpentachlorid oplzstes i 24 ml chloroform indehol-dende 0,4 ml quinolin. Til den resulterende blanding sattes .derpâ 536 mg methyl-7p-dichloracetamido-3-methyl-3-cephem~4-carboxylat. Reaktionsblandingen omrsrtes i 1 time, og chloroforme t fjernedes derefter ved destination i vakuum. Til remanensen sattes 40 ml tetrahydrofuran, og det dannede bundfald filtreredes fra. Den resulterende tetrahydrofuranoplzsning af methyl-3-methyl-7β-(1',2',2,-trichlorethylidenimino)-3-cephem-4~carboxylat an-vendtes i næste trin uden rensning.

Til isolering af den rene forbindelse blev dog en tetrahydrofuran-oplzsning, fremstillet ne^agtigt som ovenfor beskrevet, hældt i en 10$ oplzsning af dikaliumhydrogenphosphat og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og terret over ' vandfrit magnesiumsulfat, opl0sningsmidiet blev derefter afdam-pet under reduceret tryk ved 20° C, hvilket gav 530 mg methyl-3-methyl-7p-(l * ,2’, 21 -trichlorethylidenimino)-3-cephem-4~carboxylat som en olie.

NMR-spektrum (CD01^) δ ppm = 2,17 (3H, singlet), ‘ ' 3,27 & 3,50 (2H, AB kvartet, J=19 Hz) 3,83 (3H, singlet), 5,10 (1H, dublet, J=5 Hz), 5,55 (1H, dublet, J=5 Hz), . ... -...... 6,42 (1H, singlet).

CEO” " Præparation af methyl-7 β— ( 2 * -chlor-1 ’-methoxyethylidenimino)-22l5êi^2Sr5“5ËÎHyl-3-çephem-4-çarbox.ylat

En methanolonlssnine: af lithiummethoxid dannet af fin mtr Hfh-nm

7 DK 156576 B

og 5 ml methanol sattes ved -70° C til ovennævnte tetrahydrofuran-opl0sning af methyl-3-methyl-7p-(11,2*,2,-trichlorethylidenimino)- 3-cephem-4-earboxylat. Reaktionsblandingen omrertes ved -70° C i 30 minutter og behandledes derefter med 0,5 ml eddikesyre tll dekomponering af overskud af lithiummethoxid. Oplosningen blev derefter hældt i vand og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrak-teme blev vasket med varid og terret over vandfrit natriumsulfat, hvorefter oplesningsmidlet blev afdampet, tll dannelse af 480 rag methyl-7P-( 2 ' -chlor-1 * -methoxyethylidenimino ) -7a-methoxy-3-methyl- 3-cephem-4-carboxylat, smp. 138-139° C.

(C) Methyl-7pchloracetamido-7a-methoxy-3-methyl-3-cephem-4- carbox^lat______________________ 50 mg methyl-7p-(2,-chlor-1,-methoxyetbylidenimino)-7a-meth.oxy- 3-methyl-3-cephem-4-carboxylat, fremstillet som ovenfor angivet, oplestes i 4 ml ter chloroform indeholdende 0,05 ml quinolin og 0,2 ml trimethylchlorsilan. Nitrogengas bobledes ind i denne oplesning i 3 timer, hvorefter oplosningen hældt es i vand og eks-traheredes med chloroform. Ekstrakteme blev vasket med vand og terret over vandfrit natriumsulfat, og derefter inddampedes op-losningen under reduceret tryk til dannelse af 45 mg methyl-7p-chloracetamido-7a-methoxy-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat, smp. 123-125° C.

IR-spektrum (Nujol-Trade Mark)

Vmaxcl =3380, 1790, 1730, 1680.

NMR-spektrum (CECl^) δ ppm = 2,25 (3H, singlet), 3,20 (2H, singlet), 3,53 (3H, singlet), 3,73 (3H, singlet), 4,07 (2H, singlet), 4,98 (1H, singlet), 7,43 (1H, singlet).

EKSEMPEl· 2.

50 mg methyl-7β- ( 2 ’-chlor-1'-methoxyethylidenimino)-7a-methoxy-3-

8 DK 1565-76 B

methyl-3-cephem-4-carboxylat, fremstillet som beskrevet i eksem-pel 1, oplostes i 2 ml tort tetrahydrofuran, indeh.olden.de 0,1 ml quinolin og 0,25 ml bortrifluoridetherat. Reaktionsblandingen blev omrert 1 18 timer ved stuetemperatur og derefter hældt i vand og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og torret over vandfrit natriumsulfat, og oplesningsmid-let blev derpà afdampet i vakuum. Remanensen blev kromatogra-feret pâ silica-gel til dannelse af 18 mg methyl-7P-chloracet-amido-7a-methoxy-3-methyl-3-cephem-4~carboxylat.

EKSEMPEL· 3 (A) p-bromphenaeyl-3-acetoxymethyl-7 β- ( 1 ',2 *,2'-trichlorethyl- idenimino)-3-cephem-4~eàrboxylat ~ 7 _

En oplosning af p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-76-(1',2’,2 *- tri-chlore thylidenimino)-3-cephem-4-carbo2ylat i tetrahydrofuran fremstilledes af 290 mg p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl~7P-dichlor-acetamido-3-cephem-4-carboxylat, 180 mg phosphorpentachlorid og 0,12 ml quinolin ved proceduren beskrevet i eksempel 1.

(B) p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7P-(2’-chlor-1’-methoxy- ethylidenimino)-7g-methoxy~3-cephem-4-carboxylat ____

En methanoloplesning af lithiummethoxid, fremstillet af 21 mg lithium og 2 ml methanol sattes til ovennævnte oplosning- af p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7 β-(1 *,2 *,21-trichlorethyliden-imino)-3-eephem-4-carboxylat i tetrahydrofuran, fremstillet som ovenfor angivet, idet temperaturen holdtes ved -70° C. Reaktionsblandingen omrortes ved -70° C i 30 minutter og béhandledes derefter med 0,15 ml eddikesyre. Oplosningen hældtes i vand og ekstraheredes med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og torret over vandfrit natriumsulfat, hvorefter oplosningen inddampedes under reduceret tryk til dannelse af 240 mg p-brom-phenacyl-3-acetoxymethyl-7p-(21-chlor-11-methoxyethylidenimino)-7cx-methoxy-3-cephem-4-carboxylat.

IR-spektrum (Nujô-varemærke) -

Vma20m_1 - 1780, 1740, 1700.

9

NMR-spektrum (ODClj) δ ppm = 2,08 (3H, singlet)?^ 156576 B

3,37 & 3,58 (2H, AB kvartet, J=19 Hz) 3,47 (3H, singlet), 3,83 (3H, singlet), 4,17 & 4,50 (2H, AB kvartet, J=13 Hz) 5,03 (2H, AB kvartet, J=13 Hz), 5.05 (1H, singlet), 5,43 & 5,57 (2H, AB kvartet, J=16 Hz) 7.4- 8,1 (4H, multiplet).

(C) p-bromphenacyl-3-acetoxymeth.yl--7P-cbloracetamido-7tt-met]ioxy-^-ce^liem-4-carboxylat_______________________________________ 280 mg p-bromph.enacyl-3-acetoxymethyl-7P-(2,--c]lilor--1 '-methoxy-ethylidenimino ) -7a-meth.oxy~3-cepbem-4-carboxylat, fremstillet som ovenfor angivet, oplzstes i 16 ml tort chloroform, indeholdende 0,2 ml quinolin og 0,8 ml trimethylcblorsilan. Reaktionsblan-dingen omrzrtes ved stuetemperatur i 3 timer, medens nitrogen-gas blev indfzrt i oplosningen. Blandingen hældtes derefter i vand og ekstraheredes med chloroform. Ekstrakteme vaskedes med en 10?£ oplosning af natriumdihydrogenpbosphat og med vand og tzrredes over magnesiumsulfat. Oplzsningen inddampedes under reduceret tryk til dannelse af 250 mg p-bromphenacyl-3-acetoxy-methyl-7P-chloracetamido-7a-methoxy-3-cephem-4-carboxylat.

NMR-spektrum (CDOl^) δ ppm = 2,10 (3H, singlet), 3,38 & 3,57 (2H, AB kvartet, J=18 Hz) 3,58 (3H, singlet), 4,13 (2H, singlet), 5.05 & 5,13 (2H, AB kvartet, J=14 Hz) 5,12 (1H, singlet), 5,50 (2H, singlet), 7.5- 8,0 (4H).

EKSEMPEL 4 (A) Benzhvdryl-3-acetoxymethyl-^-( 1 ', 2 ’, 2 ’ -trichlorethyliden- ______________________________

En oplzsning af denne forbindelse i tetrahydrofuran fremstilledes af 549 mg benzhydryl-3-acetoxymethyl-7P-dicbloracetamido-3- 10 cephem-4-carboxylat, 400 mg phosphorpentachlorid Q^o] ^u§io- lin ved proceduren ifzlge eksempel 1.

(B) Benzhydryl-3-aeetoxymethyl-7P-(2’-chlor-1 ’-methoxyethyl-i^Ê2:iSi2:22zZ“i;ïï®Î^25Iz5-çe2iiem-4-carboxylat_____________

En methanoplssning af lithiummethoxid, fremstillet af 40 mg lithium og 4 ml methanol, sattes til oplzsningen af benzhydryl- 3-acetoxymethyl-7P-(1 1,21,21 -trichlorethylidenimino)-3--cephem-4“ carboxylat i tetrahydrofuran, fremstillet som ovenfor angivet, medens temperaturen opretholdtes Ved -70° C. Reaktionshlandingen omrortes ved -70° C i 30 minutter og hehandledes derefter med 0,4 ml eddikesyre. Oplssningen hældtes i vand og ekstraheredes med ethylacetat. De forenede ekstrakter vaskedes med vand og tzrre-des over vandfrit natriumsulfat. Oplssningen inddampedes under reduceret tryk til dannelse af 480 mg benzhydryl-3-acetoxymethyl-7β- ( 2 ' -chlor-1 * -methoxyethylidenimino ) -7a-methoxy-3-cephem-4-carhoxylat.

NMR-spektrum (CBCl^) § ppm = 2,05 (3H, singlet), 3,27 & 3,45 (2H, AB kvartet, J=18 Hz) 3,42 (3H, singlet), 3,77 (3Hj singlet), 4,10 & 4,45 (2H, AB kvartet, J=16 Hz) 4,65 & 4,88 (2H, AB kvartet, J=13 Hz) 4,94 (1H, singlet), 6,85 (1H, singlet), 7,0-7,6 (10H, multiplet).

(C) Benzhydryl-3-acetoxymethyl-7P-chloracetamido-7a-niethoxy- 2z£2£i225zll22ï5222iâ!È__________________________________ 0,1 ml quinolin og 0,5 ml trimethylchlorsilan sattes til en op-lssning af 270 mg benzhydryl-3-aeetoxymethyl-7β-(2,-chlor-1,-methoxyethylidenimino)-7a-methoxy-3~cephem-4-car'boxylat i 12 ml tsrt chloroform. Nitrogengas bohledes ind i denne oplzsning ved stuetemperatur i 1 time. Yderligere 0,5 ml trimethylchlorsilan blev tilsat, og indforingen af nitrogengas fortsattes i yderligere 2 timer. Oplzsningen hældtes derefter i vand og ekstraheredes med chloroform. De forenede ekstrakter vaskedes med vand og terredes over vandfrit natriumsulf at, hvorefter op-lssningen inddampedes. Remanensen kromatograferedes pâ silica-

11 DK 156576 B

gel til dannelse af 230 mg benzhydryl-5-acetoxymethyl-7p-chlor-acetamido-7a-methoxy-3-cephem-4-carbo:5cylat.

NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm = 1,97 (3H, singlet), 3,30 & 3,40 (2H, AB kvartet, J=17 Hz), 4,08 (3H, singlet), 4,87 (2H, singlet), 5,02 & 5,07 (2ÏÏ, AB kvartet, J=14 Hz), 5,04 (1H, singlet), 6,95 (1H, singlet), 7,2-7,6 (10H multiplet).

EKSEMPEL 5

Benzhydry1-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thio:methyl-7p-( î1,2',2*-triGhlorethylidenimino2-3-cep]aem-4-carboxylat

En oplosning af denne forbindelse i tetrahydrofuran fremstilledes af 314 mg benzhydryl-7P-dichloracetamido-3-( 1-methyl-1H-tetrazol- 5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat, 180 mg phosphorpentachlo-rid og 0,13 ml quinolin ved proeeduren beskrevet i eksempel 1.

(B) Benzhydryl-7P-(21 -chlor-11 -methoxyethylidenimino)~7a-methoxy- 3-( 1_-methyl--1H-tetrazpl-5-yj:2ifcHiometIiyl-5-cephem-4-carboxylat

Tetrahydrofuran-oplosningen, fremstillet som ovenfor angivet, afkoledes til -78° G, og en methanoloplesning af lithiummethoxid, dannet af 24 mg lithium og 2 ml methanol, tilsattes. Reaktions-blandingen omrertes ved -78° G i 30 minutter og behandledes der-efter med 0,25 ml eddikesyre. Oplasningen hældtes i vand og eks-traheredes med ethylacetat. De forenede ekstrakter vaskedes med vand og torredes over vandfrit natriumsulfat. Derefter blev op-losningen inddampet under reduceret tryk. Remanensen rensedes ved kromatografi pâ silica-gel til dannelse af 220 mg benzhydryl-7β-( 2 ' -chlor-1 ’ -methoxy-ethylidenimino) -7a-methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat som et pulver.

IR-spektrum (Nujol varemærke) = 1775, 1730, 1650.

12 DK 156576 B

NMR-spektrum (CDOl^) δ ppm = 3,38 (3H, singlet), 3,30 & 3,60 (2H, AB kvartet, J=18 Hz) 3,70 (3H, singlet), 3,73 (3H, singlet), 4,08 & 4,22 (2H, AB kvartet, J=7 Hz), 4,12 & 4,43 (2H, AB kvartet, J=12 Hz) 4,96 (1H, singlet), 6,86 (1H, singlet), 7,15-7,45 (10H, multiplet).

(C ) Benzhydryl-7P-chloracetamido-7a-methoxy-3-( 1 -methyl-1H- _________ 120 mg benzhydryl-7P-(2,-chlor-1'-methoxy-ethylideniminoj^a-methoxy^- ( 1 -methyl-1 H-tetrazol-5.-yl) thiomethyl-3~eephem-4-earb-oxylat oplzstes i 4 ml chloroform indeholdende 0,05 ml quinolin og 0,5 ml trimethylchlorsilan. Reaktionsblandingen omrzrtes ved stuetemperatur (10° C) i 18 timer, hældtes i vand og ekstraheredes med chloroform. De forenede ekstrakter vaskedes med vand og ter-redes over vandfrit natriumsulfat ; oplosningsmidlet afdampedes derefter under reduceret tryk. Remanensen kromatograferedes over silica-gel til dannelse af 80 mg benzhydryl-7P-chloracet-amido-7 a-methoxy-3- ( 1 -me thyl-1 H-tetrazol-5-yl)thiornethy1-3-cephem-4-carhoxylat.

IR-spektrum (Nujol-handelsnavn)

Vma*™”1 = 1770· 1730. 1650.

NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm = 3,47 & 3,57 (2H, AB kvartet, J=18 Hz) 3,52 (3H, singlet), 3,78 (3H, singlet), 4,07 (2H, singlet), 4,27 & 4,42 (2H, AB kvartet, J=12 Hz) 5,01 (1H, singlet), 6,88 (1H, singlet), 7,15-7,50 (10H, multiplet).

___ c DK 156576 B

BKSEMPEL 6 13 (A) 7P-(2'-chlor-1 ’-methoxyetliylideniniino)-7o:-methoxy-3-iaetliyl- 3iÇ®E^sm-4-çarboxylsyre_____________________________ 0,5 ml trime thylchlorsilan og 0,17 ml triethylamin sattes til en opl0sning af 325 mg 7-dichloracetamido-3-methyl-3-cephem-4-carb-oxylsyre i 12 ml chloroform. Reaktionshlandingen omrortes i 18 timer ved 10° C til dannelse af en chloroformoplosning af trime thylsilyl~7~dichloracetamido-3-methyl-3--cephem-4-carboxylat.

Benne opl0sning dryppedes ved 50° C til en blanding af 220 mg phosphorpentachlorid, 0,15 ml quinolin og 15 ml chloroform. Reaktionshlandingen omrortes derefter ved -50° C i 3 timer og fortyndedes med 20 ml tort tetrahydrofuran. Til denne oplosning ved -78° C sattes en methanoloplosning af lithiummethoxid, frem-stillet af 150 mg lithium og 15 ml methanol. Blandingen omrer-tes ved -78° C i 30 minutter og hehandledes derefter med 1,5 ml eddikesyre. Oplosningen hældtes i vand og ekstraheredes med chloroform. De forenede ekstrakter vaskedes med vand og torre-des over vandfrit natriumsulfat; oplosningen inddampedes derefter under reduceret tryk. Remanensen oplestes i en lille mængde chloroform, hvortil der var sat overskud af hexan, til udfældning af den onskede forhindelse. Denne procès hlev gentaget tre gange til dannelse af 240 mg 7P-(2,-chlor-1’-methoxyethylidenimino)-7a--methoxy-3-methyl-3-cephem-4-carhoxylsyre.

NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm = 2,05 (3H, singlet), 3,03 & 3,43 (2H, AB kvartet, J=18 Es 3,40 (3H, singlet), 3,75 (3H, singlet), 4,18 & 4,53 (2H, AB kvartet, J=12 Ez 5,00 (1H, singlet).

(A ' ) 7β-(2’ -chlor-1 * -methoxyethylidenimino ) -7a-methoxy-3-methyl- _____________________________________

325 mg 7-dichloracetamido-3-methyl-3"-cephem-4-carhoxylsyre suspen-deredes i 5 ml tort chloroform indeholdende 0,17 ml triethylamin og 0,085 ml acetylchlorid. Reaktionshlandingen omrortes, medens der afkoledes med isvand i en time til dannelse af &t tilsvarende anhydrid. Den dannede oplosning hlev derefter tilsat ved -22° C

14 DK 156576 B

til en hlanding fremstillet ved tilsætning af 0,18 ml quinolin i en oplasning af 271 mg phosphorpentachlorid i chloroform. Re-aktionshlandingen hlev derefter omr0rt ved -22° C i 3 timer.

Til den dannede oplasning sattes ved -22° C en methanoloplasning af lithiummethoxid, fremstillet af 80 mg lithium og 7 ml methanol. Blandingen omrartes ved -22° C i 10 minutter, hehandledes med 0,8 ml eddikesyre, hældtes i vand og ekstraheredes med chloroform. Ekstrakterne hlev vasket med vand og tarret over vandfrit natriumsulfat; oplasningen hlev derpâ inddampet til dannelse af 300 mg uren 7p-(2'-chlor-1 ,-methoxyethylidenimino)-7a-meth-oxy-3-methyl-3-cephem-4-carhoxylsyre. Benne forhindelse hlev anvendt uden rensning i næste trin af reaktionen» Om ansket kan en ren prave dog fâs ved fremgangsmàden ifalge eksempel 6 (A).

Den ovenfor heskrevne procès hlev gentaget med den ændring, at acetylchlorid hlev erstattet med monochloracetylchlorid, hvorved der opnàedes samme resultater.

(B) ZÊ-cîilOÎâSÉÎâSi^RzZizS-êÎëR^ÏZ^I^ÊÎèSiz^-çephem-^-carhoxylsyre 1 ml trimethylchlorsilan sattes til en oplasning af 300 mg 7β-(2'-chlor-1 r-methoxyethylidenimino)-7a-methoxy-3-methyl-3-cephem- 4-carhoxylsyre i 10 ml tort chloroform. Reaktionshlandingen hlev omrârT“i 18 timer ved stuetemperatur. Oplasningen hlev derefter hseldt i vand og ekstraheret med ethylacetat. Den organiske eks-trakt hlev derpâ ekstraheret med en puffer-oplasning af natrium-dihydrogenphosphat og dikaliumhydrogenphosphat (pH = 7,5). De vandige ekstrakter hlev gjort sure med 5N saltsyre til pH = 2 og atter ekstraheret med ethylacetat*.. De forenede ekstrakter. vaskedes med vand, tarredes over vandfrit natriumsulfat, hvor-efter oplasningen inddampedes under reduceret tryk til dannelse af 240 mg 7P-chloracetamidO“7a-methoxy-3-methyl-3-cephem-4*-carh-oxylsyre som pulver.

IR-spektrum (Nuj ol-varemærke)

Vmax0®"1 = 5250, 1765, 1695.

NMR-spektrum (CDCl^) ô ppm = 2,20 (3H, singlet), --------- ... 3,23 (2H, singlet), 3,35 (3H, singlet), 4,13 (2H, singlet),

15 DK 156576 B

NMR-spektrum (forts.) 5,06 (1H, singlet), 7,70 (1H, singlet), 8,62 (1H, singlet).

EKSEMPEL 7 (A) 5-acetoxymethyl-7P-(2,-ciilor-1'-methoxyethylidenimino)-7a-methoxy-^-ceghem-^-çarboxylsyre___________________________ 0,4 ml trimethylehlorsilan og 0,17 ml triethylamin sattes til en oplssning af 583 mg 3-acetoxymethyl-7-dicliloracetamido-3-cepliem- 4-carhoxylsyre i 12 ml chloroform. Reaktionshlandingen omr0rtes ved stuetemperatur i 1,5 timer. hvorved fâs en oplesning af tri-metliylsilyl-3-acetoxymeth.yl-7-dich.loracetamido-3-cep3iem-4-car'b-oxylat.

Denne oplssning sattes ved -50° C til en hlanding, fremstillet af 220 mg phosphorpentachlorid, 0,15 ml quinolin og 15 ml chloro-form. Blandingen omrortes ved -50° i 3 timer og fortyndedes med 20 ml tetrahydrofuran. Til den dannede oplosning sattes ved -78° C en methanoloplssning af lithiummethoxid, fremstillet af 150 mg lithium og 15 ml methanol. Reaktionshlandingen omrar-tes ved -78° C i 30 minutter og hehandledes derefter med 1,5 ml eddikesyre. Oplssningen hlev derefter hældt i vand og ekstra-heret med cnloroform. Ekstrakteme vaskedes med vand og t0rredes over vandfrit natriumsulfat; oplssningen inddampedes derefter. Remanensen oplostes i en lille mængde chloroform, hvorefter det enskede produkt udfældedes ved tilsætning af overskud af hexan. Denne procès gentoges tre gange til dannelse af 320 mg 3-acetoxy-methyl-7 β-(21-chlor-11-methoxyethylidenimino)-7a-me thoxy-3-cephem-4-carhoxylsyre.

NMR-spektrum (CDClj) δ ppm = 2,05 (3H, singlet), 3,2-3,7 (2H).

3,44 (3H, singlet), 3,78 (3H, singlet), 4,13 & 4,46 (2H, AB kvartet, J=13 Hz 4,8-5,2 (2H), 5,02 (1H, singlet).

16 DK 156576 B

(B) 3-acetoxymethyl-7P-chloracetamido-7a-methoxy-3*-cepheiii-4“ ____________________________________________ 1 ml trimethylchlorsilan sattes til en oplosning af 280 mg 3-acetoxymethyl-7P-( 2 * -chlor-11 -methoxy ethylidenimino ) -7 a-methoxy- 3-eephem-4-carhoxylsyre i 10 ml tort chloroform. Reaktionshlan-dlngen omrortes i 18 timer ved stuetemperatur og hældtes derefter i vand og ekstraheredes med ethylacetat. De organisée ekstrak-ter hlev yderligere ekstraheret med en pufferoplosning af natrium-dihydrogenphosphat og dikaliumhydrogenphosphat (pH = 7,5). De vandige ekstrakter hlev gjort sure til pïï = 2 med 5N saltsyre og ekstraheredes derefter med ethylacetat. De forenede ethylacetat-ekstrakter hlev vasket med vand og torret over vandfrit natrium-sulfat. Oplosningen hlev derpâ inddampet under reduceret tryk til danneise af-260 mg 3-acetoxymethyl-7P-çhloracetamido-7a-methoxy-3-cephem-4~carhoxylsyre som pulver.

NMR-spektrum (CDCl^) δ PPm = 2,07 (3H, singlet), 3,38 & 3,58 (2H, AB kvartet, J=18 Hz) 3,62 (3H, singlet), 4,18 (2H, singlet), 5,00 & 5,19 (2H, AB kvartet, J=15 Hz) 5,15 (1H, singlet), —-------— - - 7,70 ( 1H, singlet).

EKSEMPE1 8 (A) 7β-(2'-chlor-1 ,-methoxyethylidenimino)-7o:-methoxy-3-(1- methyl-1H-tetrazpl-5~yl)thiomethyl-3-cephgm-4“Carhoxylsg;re 0,32 ml trimethylchlorsilan og 0,15 ml triethylamin sattes til en oplosning af 374 mg 7-dichloracetamido-3-( 1-methyl-1H-tetra-zol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carhoxylsyre i 10 ml chloroform, og reaktionshlandingen omrortes ved 5-7° C i 1,5 timer til dan-nelse af en oplosning af 7-dichloracetamido-3-(1-methyl-1H-te-trazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4*-carhoxylat.

Denne oplosning sattes til en hlanding af 176 mg phosphorpenta-clîïorid'r 0,12 ml quiholin og 15 ml chloroform ved -50° C. Reaktionshlandingen hlev derpâ omrort ved -50° C i 3 timer og for- -K* j r\r\ -i, --«v, VT __ρΐ,Λ1 1 * 1

i7 DK 156576 B

-78° C. Til denne opl0sning sattes ved -78° C en methanoloplzs-ning af lithiummethoxid, fremstillet af 140 mg lithium og 15 ml methanol. Blandingen omrsrtes ved -78° C i 30 minutter og be-handledes derefter med 1,2 ml eddikesyre. Oplosningen hældtes i vand og ekstraheredes med chloroform. Den dannede chloroform-oplssning vaskedes med vand og terredes over vandfrit natrium-sulfat, hvorefter chloroformet afdampedes til dannelse af en uren remanens. Det vandige lag fra chloroformekstraktionen blev atter ekstraheret med ethylacetat, og ekstrakterne vaskedes med vand og terredes over natriumsulfat; ethylacetatoplosningen fjer-nedes ved destination under reduceret tryk til dannelse af endnu en portion remanens. Disse remanenser blev forenet og op-lost i en lille mængde chloroform, hvortil der var sat overskud af hexan til udfsldning af den znskede forbindelse. Udfældnings-processen blev gentaget tre gange til dannelse af 200 mg ren 7β-( 2 ’ -chlor-11 -methoxyethylidenimino)-7oc-methoxy-3--( 1 -methyl~1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

NM-spektrum (CDClj) δ ppm = 3,38 & 3,56 (2H, AB kvartet, J=19 Hz) 3.46 (3H, singlet), 3,78 (3H, singlet), 3,82 (3H, singlet), 4,20 & 4,55 (2H, AB kvartet, J=12 Hz) 4.47 (2H, singlet), 5,07 (1H, singlet). .

(B) 7P-chloracetamido-7a-iiiethoxy-3- ( 1 -methyl- 1H-tetrazol-5-yl ) - thiomethyl“3“Çephem-4-carboxyls2pe_____________________ 1 ml trimethylchlorsilan sattes til en oplesning af 300 mg 7β~ (2 · -chlor-1 ,-methoxyethylidenimino)-7a-methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5~yl)thiomethyl-3~cephem-4-carboxylsyre i 10 ml chloroform. Reaktionsblandingen omrartes ved stuetemperatur (ca. 10° C) i 18 timer og hældtes derpâ i vand og ekstraheredes med ethylacetat. Den dannede organiske oplosning ekstraheredes med di-natriumhydrogenphosphatoplzsning (pH =8). De vandige ekstrak-ter blev gjort sure til pH = 2 med 5N saltsyre og ekstraheredes igen med ethylacetat. Ethylacetatekstrakteme blev vasket med vand og tzrret over vandfrit natriumsulfat. Oplesningen ind-dampedes til dannelse af 250 mg 7p-chloracetamido-7a-methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4“Carboxylsyre

i8 DK 156576 B

IR-spektrum (KBr) y* cm-1 = 1760, 1680, 1605.

XQ aX

NMR-spektrum (CD^CN + ^O) δ ppm = 5,44 (3H, singlet), 3,28 & 3,60 (2H, AB kvartet, J=18 Hz), 3,87 (3H, singlet), 4,11 (2H, singlet), 4,30 (2H, singlet), 5,01 (1H, singlet).

EKSEMPEL· 9 7-P-^(2 * -chlor-1 ’ “methoxyethylidenimino)-7a-methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5--yl)thiqmethyl--3-cgphem-4-carl3ôxylsyre ^ ^ ;__ 435 mg 7-dichloracetamido-'5-( 1-methyl-1H-tetrazol-5~yl)thiomethyl~ 3-cephem-4-carboxylsyre suspenderedes i 5 ml tort chloroform indeholdende 0,17 ml triethylamin og 0,085 ml acetylchlorid. Reaktionsblandingen blev omrort under afkoling med isvand 1 time, hvorefter den dannede oplosning blev fortyndet med 14 ml chlo-roform og· 0,18 ml quinolin og afkolet til -22° C. 271 mg phos-phorpentachlorid blev derefter tilsat, og blandingen omrortes ved--r-22° i 3 timer, afk0let til -78° og fortyndet med 20 ml tetrahydrofuran. Til den dannede oplosning sattes ved -78° C en methanoloplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 80 mg lithium og 7 ml methanol. Reaktionsblandingen blev omrort ved samme temperatur i 20 minutter og behandlet med 0,8 ml eddikesyre. Oplosningen blev derpà hældt i vand og ekstraheret med chloroform. Chloroformekstrakteme blev vasket med vand og torret over vandfrit natriumsulfat, hvorefter chloroformet afdampedes til dannelse af 370 mg 7P-(2,-chlor-1,-methoxyethylidenimino)-7a~ methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl) thiomethyl-3-cephem-4-carb-oxylsyre soi et urent produkt.

Dette urene produkt anvendtes til fremstilling af 7P-chloraeet-amido-7a-me thoxy-3- ( 1 -me thyl-1 H-1 etrazol-5-yl ) thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre ved proceduren beskrevet i eksempel 8 (B).

En ren prove blev ogsâ opnàet ved oplosning af det urene produkt i en lille mængde chloroform og tilsætning af overskud af hexan til udfældning af forbindelsen.

19 DK 156576 B

EKSEMPEl· 10 7β-(21 -chlor-1 ,~methoxyethylidenimino)-7a-me'thoxy--3-( 1-methyl-1H-tetrazol-S-yl^thiomethyl-J-çejliem-^-cartoxylsyre_____________ 435 mg 7-dichloracetamido-3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre suspenderedes i 5 ml tert chloroform in-deholdende 0,17 ml triethylamin og 0,8 ml monochloracetylchlorid. Reaktionsblandingen omrertes under afkeling pà isvand 1 1 time.

Den i eksempel 9 beskrevne procedure blev gentaget med den ændring, at oplesningen at lithiumoxid i methanol blev tilsat ved -22° C i stedet for ved -78° C til dannelse af 350 mg 7P-(2,-chlor-1’-methoxyethylidenimino)-7a:--methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5~yl)-thiomethyl-3--cephem-4--carboxylsyre soin et urent produkt.

Dette blev anvendt som beskrevet 1 eksempel 8 (B) til fremstil-ling af 7P-chloracetamido-7a-metboxy-3-)1“metbyl-1H-tetrazol- 5-yl)thiomethyl~3-cephem-4-earboxylsyre.

EESEfÆPEL 11 (A) 7β-(2’-chlor-1 ,~metboxyethylidenimino)-7a-methoxy-3-( 1-methyl- lSzÎËiï&52iz5-yl2Îkiometh2;l-3-ûepbem-4-çarboxylsyre________________ 6,6 g 7~dichloracetamido-3-(1-metnyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl~ 3-cephem-4-carboxylsyre suspenderedes i 300 ml vandfrit chloro-form, og suspensionen omdannedes demæst til en homogen oplosning ved tilsætning af 2,5 ml triethylamin. 5,7 ml trimethylchlor-silan blev derefter sat til oplosningen, og blandingen omrzrtes i 30 minutter og henstilledes derefter i 18 timer ved stuetempera-tur. Efter tilsætning af 4,5 ml quinolin afkoledes blandingen til -50° C, og 3,8 g phosphorpentachlorid blev tilsat. Oplesningen blev derpâ omrort i 3,5 timer ved -50° C, hvorefter den blev klar. 100 ml tort tetrabydrofuran blev tilsat til oplesningen, og efter afkeling ved -70° C blev blandingen omrart ved en temperatur mellem -60° C og -70° C i 30 minutter med en methanoloplesning af lithiummethoxid fremstillet af 1,5 g lithium og 120 ml metha-nol. 6,5 ml eddikesyre i 15 ml tetrahydrofuran blev derefter tilsat. Oplesningsmidlet blev derpâ afdestilleret under redu-ceret tryk til dannelse af urent 7β-(2’-chlor-1'-methoxyethyliden-imino ) -7a-methoxy-3-( 1 -methyl-1H-t etrazol-5-yl ) thiomethyl-3-cephem-

M DK 156576B

4-carboxylsyre, som anvendtes direkte i næste trin.

(B) 7P-ehloracetamido-7a-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl- ______________________ _ _______

Det urene produkt, dannet ovenfor, blev suspenderet i 200 ml vand-frit chloroform, og 30 ml trimethylchlorsilan blev tilsat. Blan-dingen omrortes i 18 timer ved stuetemperatur, hvorefter oplos-ningsmidlet destilleredes under reduceret tryk. Remanensen blev ekstraheret med phosphatpuffer (pH = 7,8), og ekstrakteme blev vasket med ethylacetat, indstillet til pH = 2,1 ved tilssetning af fortyndet saltsyre og derefter ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og torret, hvorefter oplos-ningsmldlet blev afdestilleret under reduceret tryk. Remanensen blev oplost 1 en lille mængde ethylacetat, og oplosningen blev sat til hexan. Det producerede bundfald blev opsamlet ved filtrering,-hvorved opnàedes 4,6 g 7P-chloracetamido-7a-methoxy-3--(1-methyl-1H-tetrazol-5~yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

SKSEMPEL· 12 (A) 7β-( 2 ’ -chlor-1 ' -me thoxy e thyli denimino ) -7 oc-methoxy- 3- ( 1-methyl- __ ____________ 8,8 g 7-dichloracetamido-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-*yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre suspenderedes i 400 ml vandfrit chloroform, og en homogen oplosning blev derefter dannet ved tilsætning af 3,3 ml triethylamin. 2,4 ml dichlordimethylsilan tilsattes til oplosningen, og blandingen omrortes i 2 timer ved stuetemperatur. 6 ml quinolin tilsattes, blandingen afkoledes til -50° C, hvorefter 5 g phosphorpentachlorid blev tilsat, og blandingen omrortes ved -50° C i 3,5 timer. Oplosningen blev klar. Tort tetrahydrofuran blev tilsat til oplosningen i en mængde pà 100 ml, og efter afkoling ved -50° C blev blandingen omrert ved en temperatur mellem -60° C og -70° 0 i 30 minutter sammen med en oplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 2,0 g lithium og 150 ml methanol. 8,7 ml eddikesyre i 15 ml tetrahydrofuran blev derpâ tilsat. Oplosningsmidlet blev afdestilleret under reduceret tryk, hvorved opnàedes uren 7p-(2'-chlor-1,-methoxyethylidenimino)-7a-methoxy-3-(1-methy1-1H-tetrazol-5-yl)thiornethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, som anvendtes direkte i næste trin.

21 DK 156576 B

(B) 7P-chloracetamido-7a--methoxy-3-( 1-methyl-lH~tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxyisyre_____________________

Det ovenfor dannede urene produkt blev suspenderet i 270 ml vand-frit chloroform, og 40 ml dichlordimethylsilan blev tilsat. Blandingen omrertes i 18 timer ved stuetemperatur, og oplosnings-midlet blev derefter fradestilleret under reduceret tryk. Re-manensen blev ekstraheret med phosphatpuffer (pïï = 7»8), og eks-trakterne blev vasket med ethylacetat, indstillet pâ pH = 2,1 ved tilsætning af fortyndet saltsyre og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og torret, og oplosningsmidlet blev derefter afdampet under reduceret tryk. Remanensen blev oplost i en lille mængde ethylacetat, og oplosningen blev sat tll hexan, hvorved der udfældedes 6,6 g 7P-chloracetamido-7a-methoxy-3- ( 1 -methyl- 1H-t etrazol-5-yl ) thlomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

EESE3ÆPE1 13 7P-chloracetamido-7a-methoxy-3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thio~ ïSÎ^ïil^-çephem-^-çarboxylsyre_________________________________ 1,32 g 7-dichloracetamido-3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre suspenderedes i 18 ml vandfrit chloroform. 0,85 ml triethj'lamin blev tilsat under isaf.koling til sus-pensionen, og blandingen blev derefter omrort i 5 minutter. Til blandingen sattes dernæst 0,27 ml phosphorpentachlorid, hvoref-ter omroringen fortsattes under isafkoling i 30 minutter.— Efter afkoling af blandingen til -20° C tilsattes 1,42 ml tort quino-lin og 1,26 g phosphorpentachlorid, og blandingen omrortes i 2 . timer ved -20° 0. 18 ml tort tetrahydrofuran blev tilsat til blandingen, som derefter blev afkolet med toris/acetone.

En methanoloplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 315 mg lithium og 25 ml methanol blev sat til blandingen, medens den indre temperatur holdtes under -50° C. Blandingen blev derefter omrort i 1 time, hvorefter 3 ml eddikesyre blev tilsat, og om-roringen fortsattes i yderligere 10 minutter. Oplosningen blev derpâ afdestilleret under reduceret tryk, og remanensen blev op-lost i 30 ml vandfrit chloroformj denne oplosning blev derpâ inddampet til torhed under reduceret tryk.

--. 22 DK 156576 B

Den dannede remanens blev suspenderet i 30 ml vandfrit chlo-roform indeholdende 6 ml trimethylchlorsilan, og blandingen om-r0rtes i 18 timer ved stuetemperatur. Oplesningen blev derefter afdestilleret under reduceret tryk. 100 ml ethylacetat og 50 ml vand blev tilsat til remanensen, og blandingen blev omrort kraftigt. Det udskilte vandige lag blev ekstraberet med 100 ml ethylacetat. De forenede ekstrakter blev genekstraheret med 50 ml af en pufferoplosning (pH = 5, 10$ w/v KHgPO^: 10$ w/v NagHPO^ = 5 ï 1 ). pH-værdien af det vandige lag blev derpâ indstillet til 2,0 ved tilsætning af 10$ saltsyre under afkoling med isvand. Blandingen blev mættet med natriumchlorid og ekstra-heret tre gange med 100 ml ethylacetat. De forenede ekstrakter t0rredes over vandfrit natriumsulfat, og oplesningen afdestille-— redes. 5-ml ether sattes til remanensen, og blandingen blev vasket med 10 ml n-hexan, og opl0sningen blev fjernet ved dekan-tering. Remanensen torredes under reduceret tryk til dannelse af 450 mg 7p-chloracetamido-7a-methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre som et lysegult pulver.

EKSEMPEl· 14 (-A-) p-bromphenac3idL-5-acetoxymethyl-7P-(2,-brom-1 ’-chlor^'-methylthioethylidenimino ) -5-cephem-4-carboxylat___

En tetrahydrofuranopl0sning af denne forbindelse fremstilles af 330 mg p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7p-(2 f-brom-2'-methyl-thioacetamido)-3-cephem-4-carboxylat, 180 mg phosphorpentachlorid og 0,13 ml quinolin ved fremgangsmàden ifolge eksempel 1.

(B) p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7oc-methoxy-7P-( 11 -methoxy-2 t-methylthioethylidenimino)~3-cephem-4-carboxylat_______

En methanoloplosning af lithiummethoxid fremstillet af 35 mg lithium og 3 ml methanol sattes ved -70° C til ovennævnte tetra-hydrofuranoplosning af p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7P-(2'-brom-11 - chlor- 2 * -me thy 1 thi 0 e thy 1 i d en imin 0 ) - 3- c ephem- 4- c arb oxylat. Re-aktionsblandingen omrertes ved -70° C i 30 minutter og behand-ledes derpâ med 0,25 ml eddikesyre. Oplesningen hældtes i vand og ekstraheredes med ethylacetat. Ekstrakterne vaskedes med vand og torredes over vandfrit natriumsulfat; oplesningsmidlet blev derpâ afdampet under reduceret tryk. Remanensen rensedes ved

23 DK 156576 B

3-acetoxymeth.yl-7a-methoxy-7P-( 1 '-methoxy-2 ’-methylthioethyliden-imino)-3-cephem-4-carboxylat.

NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm = 2,05 (3H, singlet), 2,18 (3H, singlet), 3,45 (3H, singlet), 3,3-3,9 (4H to typer AB kvartet), 3,78 (3H, singlet), 5,02 (2H og 1H), 5,45-5,35 (2H, AB kvartet). 7,55-7,90 (4H, multiplet).

(C) p-broiiipIienacyl-3-aceto:xyjiiethyl-7a-methoxy-^-netliylthio- 0,1 ml quinolin og 0,5 ml trimethylchlorsilan sattes til en op-losning af 100 mg p-brompîienacyl-3-acetoxyiiiet]iyl-7«-methoxy-7P-( 1 ' -methoxy-2 ’ -methyltMoethylidenimino)-3-cepîiem-4-carboxylat i 10 ml tort cbloroform. Reaktionsblandingen omrortes i 18 timer ved stuetemperatur. Oplosningen hældtes derpâ i vand og ekstra-heredes med ethylacetat. Ekstrakterne vaskedes med vand og tor-redes over vandfrit natriumsulfat, og oplssningsmidlet afdampe-des til dannelse af 80 mg p-bromplienacyl-3-acetoxymethyl-7a-methoxy-7P~methyltMoethylidenimino-3-cepliem-4-carboxylat.

IR-spektrum (flydende)

Vmax cm_1 = 1780> 174°» 1705· · EKSEMPEL 15 (A) p-bromp2ienacyl-3-acetoxymethyl-7a-metboxy-7P-( 1 '-methoxy-21- _____________

Yed proceduren beskrevet i eksempel 1 fremstilledes en tetrahydro-furanoplosning af p-bromphenacyl-^-acetoxymethyl^-CS’-brom-l’-chlor-2 t-phenylthioethylidenimino)-3-cep]iem-4-carboxylat fra 350 mg p-bromphenacyl-3-acetoxymetliyl-7-(2,-brom-21-phenylthioacet-amido)-3-cephem-4-carboxylat, 180 mg phosphorpentachlorid og 0,13 ml quinolin. En methanoloplosning af lithiummetlioxid, frem-stillet af 24 mg lithium og 2 ml methanol, tilsattes ved -70° C til denne tetrahydrofuranoplosning. Reaktionsblandingen omrsrtes

24 DK 156576 B

derpâ ved -70° C i 30 minutter og behandledes med 0,25 ml eddi-kesyre. Oplzsningen hældtes i vand og ekstraîieredes derefter med ethylacetat. Ekstrakteme vaskedes med vand og tzrredes over vandfrit natriumsulfat; oplzsningsmidlet afdampedes under reduceret tryk til dannelse af 150 mg p-brompîienacyl-3-acetoxy-me thy1-7α-meth.oxy-7 β - ( 1 '-me thoxy-21-pheny11hi o ethy 11denimino) - 3 -cephem-4-carboxylat.

IR-spektrum (flydende)

Vmaxc“'1 = 1770> 1735’ 1700· NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm = 2,05 (3H, singlet), 3,30 &' 3,55 (2H, AB kvartet, J= 18 Hz) , 3.36 (3H, singlet), 3,70 (3H, singlet), 3,80 & 4,12 (2H, AB kvartet, J=13 Hz), 4,90 & 5,07 (2H, AB kvartet, J=14 Hz), 5.00 (1H, singlet), 5,35 & 5,52 (2H, AB kvartet, J=14 Hz), 7.0 - 7,4 (5H), 7,4 - 7,9 (4H).

(B ) p-bromphenacyl-3-ac e t oxyme thyl-7 a-methoxy-7 β-phenylthio-acetamido-3-çepbem-4-carbox^lat_ _______________________ 0,05 ml quinolin og 0,3 mm trimethylchlorsilan sattes til en op-Izsning af 80 mg p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7a-methoxy-7p-( 1 ' -metboxy-2 ’ -phenylthioethylidenimino )-3-cephem-4-carboxylat i 5 ml chloroform. Reaktionsblandingen blev omrzrt ved stuetempe-ratur i 6 timer, medens nitrogengas blev indfzrt i oplasningen. ' Efter udhældning af oplzsningen i vand ekstraîieredes den dannede blanding med chloroform. Ekstrakteme vaskedes med vand og tzr-redes over vandfrit natriumsulfat; oplzsningsmidlet afdampedes under reduceret tryk. Remanensen kromatograferedes pâ silica-gel til dannelse af 55 mg p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl~7a:-methyl-7p-phenylthioacetamido-3-cephem-4-carboxylat.

NMR-spektrum (CBCl^) δ ppm = 2,08. (3H, singlet), 3,27 & 3,40 (2H, AB kvartet, J=18 Hz).

3.37 (3H, singlet), 3,68 (2H, singlet), ( PTT π£Ρ ιήΛ .

25 DK 156576B

5,46 (2H), 7,2.- 7,4 (5H, multiplet), 7,6 - 7,8 (4H, multiplet).

EKSEMPEl· 16 (A) p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7a-methoxy-7p-(11-methoxy-2 *-a-thienylethyliàenimino)-3-ceghem-4~carboxfflat________

Yed proceduren beskrevet i eksempel 1 fremstilledes en tetrahydro-furanoplosning af p-bromphenacyl-3-acetoxymetliyl-7P“(l ' ^'-di-chlor-2 ,-a-thienylethylidenimino)-3--ceph.em-4-carboxylat ud fra 315 mg p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7P-(2,-chlor-2,-a-th.ienyl-acetamiâo)-3-cephem-4-carboxylat, 180 mg phosphorpentachlorid og 0,13 ml quinolin. En methanoloplosning af‘lithiummethoxid fremstil-let af 24 mg lithium og 2 ml methanol tilsattes ved -70° C til denne tetrahydrofuranoplesning. Reaktionsblandingen blev omr0rt ved -70° C i 30 minutter og derefter hehandlet med 0,25 ml eddi-kesyre. Oplosningen blev hældt i vand og ekstraheret med ethyl-acetat. Ekstrakterne hlev vasket med vand og t0rret over vandfrit natriumsulfat, hvorefter oplzsningsmidlet hlev afdampet under reduceret tryk. Remanensen hlev renset ved kromatografi pâ silica-gel til dannelse af 160 mg p-hromphenacyl-3-acetoxymethyl-7cc-methoxy-7p-(11-methoxy-21-a-thienylethylidenimino)-3-cephem- 4-carboxylat.

IR-spektrum (Nujol - Varemærke) y'max om_1 = 1780> 174°> 17°5’ 165°- NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm = 2,10 (3H, singlet), 3,43 (3H, singlet), 3,40 & 3,60 (2H, A3 kvartet, J=18 Hz] 3,77 (3H, singlet), 4,03 & 4,30 (2H, AB kvartet, J=15 Hz! 5,0 - 5,3 (2H og 1H), 5,45 - 5,60 (2H, AB kvartet, J=16 Hz’, 6,9 - 7,4 (3H, multiplet), 7,5 - 7,9 (4H, multiplet).

(B) p-bromphenaeyl~3-acetoxymethyl-7a-methoxy-7p-(2*-a-thienyl-acets/mi dol— 3-nenhfim-Æ~nirr*hnxvlfî t

26 DK 156576 B

oplesning af p-broIIlphenacyl-3-aeetoxymethyl-7α-methoxy-7β-(1,-methoxy-Z’-a-thienylethylidenimino)-3-cephem-4-carboxylat i 10 ml chloroform. Reaktionsblandingen omrertes ved stuetemperatur i 17 timer og hældtes derefter i vand og ekstraheredes med ethyl-acetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og torret over vand-frit natriumsulfat, hvorefter oplzsningsmidlet afdampedes under reduceret tryk til dannelse af 70 mg p-bromphenacyl-3-acetoxy-methyl-7o:-methoxy--7P-( 2’-a-thienylacetamido)-3-cephem-4-carboxylat.

IR-spektrum (Nujol - Yaremærke)

Vmax cm_1 = 187°» 1740’ 17°°» 3330· NMR-spektrum (CD^COCD^) § ppm 2,07 (3H, singlet), ------- 3,40 & 3,50 (2H, AB kvartet, J=18 Hz) 3745.....(2H, singlet), - 3,87 (2ÏÏ singlet), 5,01 (2H), 5.04 (1H, singlet), 5,45 (2H, singlet), 6.5 - 7,5 (3H), 7.5 - 7,9 (4H, A2B2type).

’ EKSEMPEL 17 (A) Methyl-6p-(2‘ -chlor-11 -methoxyethylidenimino ) -6cc-methoxy-penicillanat___ _________

Yed proceduren beskrevet i eksempel 1, fremstilledes en tetra-hydrofuranoplzsning af metbyl-6p~( 1^2^21 -trichlorethylidenimino)-penicillanat ud fra 300 mg methyl-6P-dichloracetamido-penicillanat, 300 mg phosphorpentachlorid og 0,2 ml quinolin, En methanolop-Icsning af lithiummethoxid fremstillet af 40 mg lithium og 3 ml methanol tilsattes ved -70° C til denne tetrahydrofuranoplosning. Reaktionsblandingen omrortes derefter ved -70° C i 30 minutter og behandledes med 0,5 ml eddikesyre. Oplosninqen hældtes i vand og ekstraheredes derpâ med ethylacetat. Ekstrakteme vaskedes med vand og terre de s over vandfrit natriumsulf at ; oplosningsmid-let blev derpâ afdampet under reduceret tryk. Remanensen blev - kromatograferet pâ silica-gel til dannelse af 170 mg methyl-ββ-( 21 -chlor-1r -methoxyethylidenimino) -6a-methoxy-penicillanat.

27 DK 156576 B

IR-spektrum (Nujol - Varemærke)

Vmax cm'1 = 1775, 1745, 1650.

NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm = 1,45 (3H, singlet), 1.52 (3H, singlet), 3,50 (3H, singlet), 3,78 (3H, singlet), 3,82 (3H, singlet), 4.10 & 4,37 (2H, AB kvartet, J=13 Hz), 4,42 (1H, singlet), 5.53 (1H, singlet).

(B) Meth^l-6§-chloracetamido-6a-metho^-penicillanat 0,05 ml quinolin og 0,5 ml trimethylchlorsilan sattes til en op-Izsning af 100 mg methyl-6p-(2'-chlor-1’-methoxyethylidenimino)-ôa-methoxy-penicillanat i 10 ml tort chloroform. Reaktionsblan-dingen blev omrert ved -10° C i 6 timer. Efter tilsœtning af vand ekstraheredes blandingen med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og hældt over vandfrit natriumsulfat; oplzs-ningsmidlet blev derpâ afdampet under reduceret tryk. Remanensen blev kromatograferet pâ silica-gel til dannelse af 45 mg methyl-ôp-cliloracetamido-ôa-metîiozy-penicillanat.

IR-spektrum (Nujol - Varemærke) Ÿmax om_1 = 33,40, 1780, 1755, 1695- NMR-spektrum (ODGl^) δ ppm = 1,44 (3H, singlet), 1.53 (3H, singlet), 3,52 (3H, singlet), 3,77 (3H, singlet), 4.10 (2H, singlet), 4,47 (1H, singlet), 5,57 (1H, singlet), 7,67 (1H, bred singlet).

DK 156576 B

28 EKSEMEEI. 18 (A) 7β- (2 * -cyanomethylthio-1 * -methoxyethylidenimino )-7 a:—methoxy- 3- ( 1 -methyl-1 H-tetrazol-5-yl ) thiomethyl-3-cephem-4-carboxyl-sjrre___________________ 6 g 7-(2,-cyanomethylthio-2i-chloracetamido)-3-(l-methyl-1H-te-trazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, 2,18 ml triethyl-amino og 4,8 ml trimethylchlorsilan sattes til 180 ml vandfrit chloroform. Blandingen omrertes i 30 minutter og henstilledes derefter ved stuetemperatur. Efter tilsætning af 3,78 ml quino-lin afksledes ‘blandingen til -50° C og omrsrtes derefter ved den-ne temperatur i 3»5 timer med 3>42 g phosphorpentachlorid. 60 ml tert tetrahydrofuran blev tilsat, og den klare oplssning blev derpâ afk0let til -78° C og omrertes ved derme temperatur i 25 minutter med en methanolopl0sning af lithiummethoxid, fremstillet af 1,2 g lithium og 96 ml methanol. 5 ml eddikesyre i 15 ml tetrahydrofuran blev derefter tilsat reaktionsblandingen. Benne henstilledes derefter under omrzring, indtil temperaturen Yar steget til stuetemperatur. Oplesningsmidlet afdestilleredes under reduceret tryk til opnâelse af uren 7P-(2,-cyanomethylthio-1 ,-methozyethylidenimino)-7o:-methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre. Bette stof blev anvendt som udgangsmateriale i næste trin uden rensning.

Til illustrering af rensningsproceduren hlev ovennævnte procès dog gentaget, og produktet hlev renset pâ felgende mâdeî vand sattes til det urene produkt, og blandingen ekstraheredes med ethyl-acetat; ekstrakteme blev vasket med vand og t0rret, og oplss-ningsmidlet blev afdampet under reduceret tryk; remanensen blev derefter oplest i en lille mængde ethylacetat og udfældet med hexan, hvorved opnàedes 4,2 g af det 0nskede produkt i ren til-stand.

(B) 7p-cyanomethylthioacetamido-7cc-methoxy-3-( 1-methyï-1H-tetra-zoil5-2ilî£i£m®î]iZïl5“cephem-4-çarbox£ls£:re________________

Bet urene produkt, som dannedes ovenfor, blev suspenderet i 168 ml tert chloroform, og 25,2 ml trimethylchlorsilan blev sat til suspensionen. Blandingen omr0rtes i 18 timer ved stuetemperatur, og derpâ blev oplssningsmidlet afdampet under reduceret tryk. Vand sattes til remanensen, og blandingen ekstraheredes med ethyl-

29 DK 156576 B

acetat. Ekstrakteme blev genekstraheret med phosphatpuffer (pH = 7,8). Ekstrakterne blev indstillet pâ pH = 2,1 med fortyndet saltsyre og derefter ekstraheret med ethylacetat. De sâledes dannede ekstrakter vaskedes med vand og torredes, og oplesnings-mldlet blev afdampet under reduceret tryk. Remanensen blev op~ l0st i en 1111e mængde ethylacetat og derefter udfældet med hexan til dannelse af 3,6 g 7P-cyanomethylthioacetamido-7a-methoxy-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5“yl)thiomethyl-3-cephem-4--carboxylsyre.

. NMR-spektrum (CD^COCD^) δ ppm = 3,50 (3H, singlet), 3,60 (2H, singlet), 3,5 - 3,7 (2H, kvartet), 3,70 (2H, singlet), 3,98 (3H, singlet), 4,3 - 4,6 (2H, kvartet), 5,10 (1H, singlet).

EKSEMPEL 19 3-aeetoxymethyl-7β-cyanomethyltb.ioacetamido-7α-meth.oxy-3-cephem-

Ted proceduren ifolge eksempel 18 (A) med den ændring, at 7~(2r — cyanomethyltliio-2 ’ -chloraeetamido ) -3- ( 1 -methyl-1 H-tetrazol-5-yl ) -thlomethyl-3"'Cephem-4-carboxylsyre erstattedes med 5,3 g 3-acet-oxymethyl-7-( 21 -cyanomethylthio-21 -chloracetamido) -3-cephem-4~ carboxylsyre til dannelse af uren 3-acetoxymethyl-7p-(2,-cyano-methylthio-11 -methoxy-ethylidenimino)-7a-methoxy-3-cephem-4-carb- · oxylsyre. Dette urene produkt behandledes som beskrevet i eksempel 18 (B), til dannelse af 3,2 g 3-acetoxymethyl-7,S-cyano-methylthioacetamido-7«-methoxy-3-cephem-4-carboxylsyre.

NMR-spektrum (CD^COCB^) δ PP® = 2j°7 (3H, singlet), ca. 3,5 (2H), 3,50 (3H, singlet), 3,58 (2H, singlet), 3,73 (2H, singlet), 4,83 & 5,07 (2H, AB kvartet, J=13 Hz]

30 DK 156576 B

EESEMPE1 20 (A) 70-(2 '-methansulphonyl-l ’ -methoxyethylidenimino)-7cc-methoxy- 5-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-5-cephem-4-carboxyl-syre 562 mg 7-(2,-brom-2,-methansulphonylacetamido)-5-0-metîiyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-5-cephem-4-carboxylsyre, 0,17 ml triethyl-amin og 0,58 ml trimethylchlorsilan sattes til 12 ml vandfrit chloroform. Blandingen omrortes i 50 minutter og henstilledes derefter ved stuetemperatur 1 18 timer. Efter tilsætning af 0,6 ml quinolin afkoledes "blandingen til -50° C, og der omrortes ved denne temperatur med 450 mg phosphorpentachlorid i 5,5 timer.

20 ml tort tetrahydrofuran blev tilsat til "blandingen. Blandingen afkoledes til -78° C og omrortes ved denne temperatur i 50 minutter med en methanoloplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 110 mg lithium og 10 ml methanol. 1 ml eddikesyre "blev derefter tilsat, og efter tilsætning af vand "blev "blandingen ekstraheret med chloroform, vasket med vand og torret. Oplosningsmid-let blev derpâ afdampet til dannelse af 670 mg urent 7β-(2*-methansulphonyl-11 -me thoxy e thyli denimino ) -7 α-me thoxy-5- ( 1 -methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-5-cephem-4~carboxylsyre. Denne "blev anvendt som udgangsmateriale i næste trin uden rensning. Om nodvendigt kan det urene produkt renses ved omkrystallisation af en blanding af ethylacetat og hexan.

Ved at falge ovennævnte procedure, men ved erstatning af 7—(2* — . "brom-2’-methansulphonylacetamido)-5-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)~ thiomethyl-5-cephem-4-carboxylsyre med 7-(2’-chlor-2,-methan-sulphonylac etami do)-5-(1-me thy1-1 H-1 e tr az ο1-5-y1)thiomethyl- 5-cephem-4-carboxylsyre fâs samme produkt.

(B) 7 β-methansulphonylacetamido-7 α-methoxy-5-(1-methyl-1H-te- trazol-5-yl)thiomethyl-5-cephem-4-ear"boxylsyre___________

Det ovennævnte urene produkt hlev oplost i 15 ml vandfrit chloroform, og oplosningen omrortes i 1 ml trimethylchlorsilan i 18 timer ved stuetemperatur. Oplosningsmidlet hlev afdestilleret under reduceret tryk, og efter tilsætning af vand hlev blandingen ekstraheret med ethylacetat. Ethylacetatekstrakterne hlev igen ekstraheret med en phosphatpuffer (pH = 7,8), og derefter hlev pH-værdien af ekstrakteme indstillet pâ 2,1 ved tilsætning af

31 DK 156S76B

fortyndet saltsyre. Den dannede vandige oplesning blev ekstra-heret med ethylacetat. Ekstrakterne blev vasket med vand og terret, hvorefter opl0sningsmidlet afdampedes under reduceret tryk. Remanensen blev oplzst i en lille mængde ethylacetat, hvor-fra den blev genudfældet ved tilsætning af hexan. Denne udfæld-ningsprocedure blev gentaget flere gange til dannelse af 320 mg 7p-methansulfonylacetamido-7a~methoxy-3'-( 1-methyl-1H-tetrazol- 5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

NMR-spektrum (CDjGOODj) δ ppm = 3,07 (3H, singlet), 3,45 (3H, singlet), 3,62 (2H, kvartet), 3,92 (3H, singlet), 4,18 (2H, singlet), 4,35 (2H, kvartet), 5,06 (1H, singlet), 8,60 (1H, singlet).

EKSEMPEL· 21 7P“ethansulphonylacetamido-7ct;-methoxy-3-( 1-methyl-IH-tetrazol- _______________________

Proceduren beskrevet i eksempel 20 (a) gentoges, idet 7—(2* — brom-methansulphonylacetamido )-3-( 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre erstattedes med 0,58 g 7-(2’-brom-2’-ethansulphonylacetamido)-3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl) -thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre; urent 7β-(21-ethansulphonyl-1 ' -methoxyethylidenimino ) -7a-methoxy-3- ( 1 -methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre dannedes og anvendtes direkte soin udgangsmateriale i næste trin. Dette urene produkt behandledes demæst som beskrevet i eksempel 20 (B) til dannelse af 0,28 g 7p-ethansulphonylacetamido-7-methoxy-3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3~cephem-4-carboxylsyre.

32

EKSBMPEL 22 156576 B

(A) Methyl-7p-(2 ’ -cyanomethylthio-1 ’ -methoxyethylidenimino)- ________________________

Til 10 ml vandfrit chloroform sattes i rækkefolge 220 mg phos-phorpentaclilorid og 0,17 ml quinolin. 270 mg methyl-7-(2*-brom-2,-cyanomethylthioacetamido)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat sattes til blandingen. Blandingen omrertes derefter ved stuetem-peratur i 40 minutter, hvorefter oplosningsmidlet afdampedes.

50 ml tort tetrahydrofuran blev sat til remanensen. Blandingen filtreredes, og filtratet blev afkolet til -78° C. Bet afko-lede filtrat blev omrort ved -78° 0 i 20 minutter med en methanol-• oplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 50 mg lithium og 5 ml methanol. 2 ml vand indeholdende 0,5 ml eddikesyre blev derefter sat til reaktionsblandingen til afslutning af reaktionen. Efter tilsætning af mættet vandig natriumchloridoplosning blev blandingen ekstraberet med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med vand og torret, og oplosningsmidlet blev afdampet under redu-ceret tryk til dannelse af 190 mg methyl-7P-(2'-cyanomethyltliio-11 -methoxyethylidenimino ) -7oc-methoxy-3-methyl-3-cephem-4-carboxy-lat.

NMR-spektrum (CBOl^) δ ppm = 2,15 (3H, singlet), 2,95 & 5,20 (2ïï, AB kvartet), 3,38 (3H, singlet), 3,69 (3H, singlet), 3,74 (3H, singlet), 3,5 - 3,8 (4H), 4,93 (1H, singlet).

(B) Methyl-7P-cyanomethylthioacetamido-7a-methoxy~3-methyl-3- cephem-4-carboxylat_______________________________ _ 350 mg metbyl-7β- ( 2 * -cyanome thylthio·^ 11 -methoxyethylidenimino ) -7a-methoxy-3-methyl-3-cephem-4-earboxylat, efterfulgt af 0,1 ml quinolin og 1,0 ml trimethylchlorsilan sattes til 10 ml vandfrit chloroform. Blandingen henstilledes i 18 timer ved stuetemperatur, hvorefter oplosningsmidlet afdampedes under reduceret tryk. Efter tilsætning af vand ekstraheredes remanensen med ethylacetat. Ekstrakten blev vasket med vand og torret, og oplosningsmidlet blev afdampet. Remanensen blev renset ved kromatografi pâ silica-

33 DK 156576 B

gel til dannelse af 280 mg methyl-7p-cyanomethylthioacetamido-7a-methoxy~3-methyl-3-cephem-4-carboxylat.

NMR-spektrum (CDCl^) $ ppm = 2,15 (3H, singlet), 3,25 (2H), 3,48 (2H, singlet), 3,54 (5H, singlet), 3,82 (3H, singlet), 5,06 (1H, singlet), 7,87 (1H, singlet).

BKSEMPEI. 25 (A) Methyl-7P-(2*-methansulphonyl-1 '-methoxyethylidenimino)-l®“5ËÎ-2ï£l5-meth^l-3-ee2hem=4-carbox2lat 3,10 mg phosphorpentachlorld efterfulgt af 0,23 ml quinolin sat-tes til 10 ml vandfrit chloroform. 350 mg metbyl-7“(2,-brom-2I-metbansulphonylacetamido)-3-methyl-3-cepliem-4-carboxylat sattes til blandingen. Blandingen omrzrtes ved stuetemperatur i 50 mi~ irutter og inddampedes derefter til torhed, Til remanensen blev sat 50 ml tzrt tetrahydrofuran, og blandingen blev filtreret. Eiltratet afkzledes til -78° C og omrortes derefter ved denne temperatur i 20 minutter med en oplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 50 mg lithium og 10 ml methanol. Reaktionen blev afbrudt ved tilsætning af 2 ml vand indeholdende 0,4 ml eddike-syre. Denne blanding blev derpâ hældt i vand, mættet med natrium-chlorid, og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakterne vaskedes med vand og tsrredes, og oplosningsmidlet blev afdampet under reduceret tryk til dannelse af 320 mg 7β-( 2 ' -methansulphonyl-1 ’ -methoxyethylidenimino ) -2a-inethoxy-3-methyl-3-cephem-4-carb-oxylat. Produktet kan renses ved silica-gel-kromatografi.

NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm = 2,04 (3H, singlet), 3,06 (3H, singlet), 2,9 - 3,5 (2H), 3,44 (3H, singlet), 3,78 (6H, singlet), 4,20 & 4,65 (2H, AB kvartet, J=14 Hz) 4,97 (1H, singlet).

34 DK 156576 B

(B) Methyl-7P-methansulphonylacetamido-7a-methoxy-3-methyl-3- cephem-4-cartoxylat______________________________________ 300 mg methyl-7β- ( 21 -methansulphonyl-1 ' -methoxy-ethylidenind.no ) -7a-methoxy-3-methyl-3-cephem~4-carboxylat, 0,1 ml quinolin og 1 ml trimethylchlorsilan sattes i rækkefolge til 10 ml chloroform. Blandingen henstilledes i 18 timer ved stuetemperatur, hvorefter oplasningsmidlet afdampedes. Efter tilsætning af vand ekstrahe-redes remanesen med ethylacetat. Ekstrakteme hlev vasket med vand og terret, og oplosningsmidlet blev afdampet under reduce-ret tryk. Remanensen blev renset ved kromatografi pâ silica-gel til dannelse af 240 mg methyl-7β-methan-sulphonylacetamido-7oc-methoxy-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat.

NMR-spektrum (CBCl^) δ ppm = 2,07 (3H, singlet), 3,08 (3H, singlet), 3,19 (2H), 3,49 (3H, singlet), 3,76 (3H, singlet), 4,07 (2H, singlet), 4,97 (1H, singlet), 8,33 (1H, singlet),

EgSEMPEB 24 (A) 7α-methoxy-7β-(1,-methoxy-2,-α-thienylethylidenimino)-3-(l-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiornethyl-3-cephem-4-carboxyl-syre________________ _ ____________________________ 486 mg 7-(2'-chloré'-a-thienylacetamido)-3-(1-methyl-1H-tetrazol- 5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, 0,17 ml triethylamin og 0,4 ml trimethylchlorsilan sattes i rækkefolge til 12 ml chloroform. Blandingen omrortes ved stuetemperatur i 1 time, hvorefter 16 ml tort chloroform og 0,3 ml quinolin blev tilsat. Reaktions-blandingen blev derpâ afkolet til -60° C og omrort ved -50° C i 3,5 timer med 250 mg phosphorpentachlorid. Efter tilsætning af 20 mm tort tetrahydrofuran afkoledes blandingen til -78° C, og en methanoloplesning af lithiummethoxid, fremstillet af 100 mg lithium og 10 ml methanol, blev tilsat. Ben dannede blanding omrartes ved -78° C i 30 minutter, og derefter afsluttedes reaktio-nen ved tilsætning af 1,0 ml eddikesyre. Der tilsattes vand, og

35 DK 156576 B

blandingen ekstraheredes derefter med ethylacetat. Ekstrakterne blev vasket med vand, torret og inddampet til tsrhed under redu-ceret tryk til dannelse af 520 mg urent 7a-methoxy-7P-( 1 ’-methoxy-2 *-α-thienylmethylidenimino)-3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)-thio-methyl-3-cephem-4-carboxylsyre. Det urene produkt oplsstes i et lille rumfang chloroform, hvorefter det genudfældedes med hexan til dannelse af et rent produkt.

(B) 7a-metboxy-3-( 1-metbyl-1H-tetrazol-5-yl)thiometh.yl-7P-(a-tMenylacetamido)-37cepIiem-4-carbqxylsyre_________ _____ 0,5 g 7a-methoxy-7P-(11-methoxy-2’-a-thienylethylidenimino)-3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, 0,12 ml quinolin og 1,0 ml trimethylchlorsilan sattes i rækkefsl-ge til 10 ml chloroform. Blandingen omrærtes i 18 timer ved stue-temperatur og hældtes derefter i vand og ekstraheredes med ehlo-roform. Ekstrakterne genekstraheredes med en phosphatpuffer (pïï = 7,5), og det vandige lag blev indstillet til pH = 2 med 5N saltsyre. Det vandige lag blev derpâ ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakterne blev vasket’ med vand og tsrret, og oplssningsmidlet . afdampedes under reduceret tryk til dannelse af 0,4 g 7a-m.ethoxy- 3-(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiornethyl-7 β-(α-thienylacetamido)- 3-eephem-4~carboxylsyre.

NM-spektrum (CD^COCD^) δ ppm = 3,42 (3H, singlet), 3,53 & 3,76 (2H, AB dublet, J=18 Hz), 3,92 (2H, singlet), 3,96 (3H, singlet), 4,28 & 4,50 (2H, AB dublet, J=14 Hz)., 5,04 (1H, singlet), 6,8 - 7,1 (2H, multiplet), 8,27 (1H, bred singlet).

EKSEMPEL· 25 (A) Benzhydryl-3-acetoxymethyl-7p-(2',2'-dichlor-1’-methoxy-ethylidenimno)-7a-methoxy-3-cephem-4-carbqxylat______ 0,13 ml quinolin efterfulgt af 291 mg benzhydryl-3-acetoxymethyl- 7-trichloracetamido-3-cephem-4-carboxylat sattes under isafksling

36 DK 156 57 6 B

til en oplosning af 180 mg phosphorpentachlorid i 8 ml vandfrit chloroform. Blandingen omrortes under isafkeling i 1 time, og oplosningsmidlet afdestilleredes derefter under reduceret tryk. Til remanensen sattes 20 ml vandfrit tetraïiydrofuran, og kry-stallinsk stof frafiltreredes, filtratet omrortes i 20 minutter ved -78° C med en methanoloplosning af lithiummetlioxid, fremstil-* let af 24 mg lithium og 2 ml methanol, og derpâ tilsattes 0,25 ml eddikesyre. E.eaktions'blandingen hældtes i vand, ekstraheredes med etîiylacetat, vaskedes med vand og torredes. Derefter afdam-pedes oplzsningsmidlet, og remanensen rensedes ved kromatografi over silica-gel til dannelse af 50 mg TDenzliydryl-3-acetoxymetîiyl-7β-( 2 '2 ' -dichlor-1 * -methoxyethylidenimino )-7a-methoxy-3-cephem- 4-carboxylat, IR-spektrum (flydende)

VmaX cm“1 = 1770, 1730, 1650.

NMR-spektrum (ODCl^) δ ppm = 1,88 (3H, singlet), 3,35 (3H, singlet), 3,2 - 3,5 (2H), 3,80 (3H, singlet), 4.6 - 4,9 (2H +1H), 6.7 - 6,9 (1H + 1H), 7,1 - 7,5 (10H) .

Massespektrum (m/c) = 596, 594, 592. · (B) Benzîiydryl-3-acetoxymeth.yl-7p-dichloracetamido-7a-metiioxy~ 3-cepîiem-4-car'boxylat 0,1 ml quinolin og 0,5 ml trimethylchlorsilan sattes til en op-Izsning af 100 mg ‘benzliydryl-3-acetoxymetliyl-7p-(2,,2,-dichlor~ 1'-methoxyethylidenimino)-7a-metîioxy-3-cephem-4-carboxylat i 5 ml vandfrit chloroform. Blandingen omrortes ved stuetemperatur i 5 timer, og derpâ tilsattes vand. Blandingen ekstraheredes med chloroform, vaskedes med vand og torredes, og oplosningsmidlet afdampedes til torhed under reduceret tryk t.il dannelse af 60 mg af det onskede produkt.

EKSEMPEl· 26 DK 156576B

37 (A) Methyl-3-methyl-7P-(1 ’ ,2', 21-trichlorethylideniminoJ^-^êEk^zîzHêïkRSZlËÎ_____ _ _ 360 mg phosphorpentachlorid oplostes i 24 ml chloroform, hvor-efter 0,24 ml quinolin'og 340 mg 7p-dichloracetamido-3-met]iyl-3-cephem-4-carboxylat tilsattes ved stuetemperatur. Reaktionsblan-dingen omr0rtes ved stuetemperatur î 1 time, og derefter afdampe-des oplosningsmidlet under reduceret tryk. Œil remanensen sattes 40 ml vandfrit tetrahydrofuran, og bundfaldet frafiltreredes.

Den dannede oplesning, indeholdende methyl-3-methyl-^-(1,,2,>2,“ triehlorethylidenimino)-3-cephem-4-carboxylat anvendtes i næste trin af reaktionen uden rensning.

For at bestemme egenskaberne for denne forbindelse gentoges oven-nævnte procedure, og forbindelsen blev derpâ isoleret pà fol-gende mâde: tetrahydrofuranoplosningen blev hældt i 10$ oplos- ning af dikaliumhydrogenphosphat og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakterne vaskedes med vand og torredes over vandfrit natri-umsulfat; oplosningsmidlet blev derefter afdampet ved 20° C under reduceret tryk til dannelse af 320 mg methyl-3-methyl-7P-(1^2^21 -trichlorethylidenimino)-3-cephem-4-carboxylat som en olie.

NMR-spektrum (CDCl^) § ppm = 2,17 (3H, singlet), 3,26 & 3,50 (2ÏÏ, AB kvartet, J=19 Hz) 3,83 (3H, singlet), 5,10 (1H, dublet, J~5 Hz), 5,55 (1H, dublet, J=5 Hz), 6,42 (1H, singlet).

(B) Methyl-7β-chloracetamido-7cc-methoxy-3-methyl-3“Cephem-4-carboxylat____________ ________ ________ ________

Det urene produkt, som dannedes ovenfor, oplostes i 30 ml tetrahydrofuran, og efter afkoling til -70° C omrortes denne oplosning ved samme temperatur i 20 minutter med en methanoloplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 15 mg lithium og 1 ml methanol.

0,1 ml eddikesyre blev derefter sat til reaktionsblandingen, op-losningen blev hældt i vand og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakterne blev vasket med vand og torret over vandfrit natrium- 38 sulfat; oplosningsmidlet blev afdampet under reducei'e^é^Z.^ ® Remanensen blev renset ved kromatografi pâ silica-gel til dannel-se af 80 mg methyl-7p-chloracetamido-7a-methoxy-3-methyl-3-cephem- 4-carboxylat, smp.: 123 - 125° C.

IR-spektrum (Nujol - Varemærke)

Vmax cm”1 = 3380> 1790 ’ 1730 > 1680· NMR-spektrum (CDCl^) δ ppm. = 2,25 (3H, singlet), 3,20 (2H, singlet), 3,53 (3H, singlet), 3,73 (3H, singlet), 4,07 (2H, singlet), 4,98 (1ÏÏ, singlet), 7,43 (1H, singlet).

EKSEMPEl· 27 2- (7p-chloracetamido-7a-metlioxy-3-iiiethyl~3-cepliem-4-carbonyl)- triazolo[^^^-alpy^iào-^-on___________________

En oplesning af 2-[ 3-methyl-7- (1^2^21 -trichlorethylidenimino)- 3- cephem-4*-carbonyl]triazolo[4,3-a]pyrido-3-on i 25 ml tetrahydro-furan fremstilledes af 221 mg 2-(7-dich.loracetamido-3-metîiyl~3-ceph.em-4-carbonyl)triazolo[4,3-a]pyrido-3~on, 120 mg phosphor-pentachlorid, 0,8 ml quinolin og 10 ml chloroform ved proceduren beskrevet i eksempel 26 (a) . ïil denne oplesning blev der ved -78° C sat en methanoloplesning af lithiummethoxid, fremstillet af 11 mg lithium og 1 ml methanol. Blandingen omrertes ved -78° C i10 minutter og behandledes derefter med 0,1 ml eddikesyre.

Den dannede oplesning blev hældt i en mættet oplesning af natrium-chlorid og derefter ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og terret over vandfrit natriumsulfat ; oplesningsmidlet blev derpâ afdampet under reduceret tryk. Remanensen kromatograferedes pâ silica-gel til dannelse af 50 mg 2-(7p-chloracetamido-7a-methoxy-3-methyl-3-Gepliem-4-carbonyl)-triazolo[4,3-a]pyrido-3-on.

NMR-spektrum (CD COCD ) δ PPm = 2,0 (3H, singlet),

39 DK 156576 B

3,42 (3H, singlet), 3,77 (2H, singlet), 5,20 (1H, singlet), 6,4 ~ 6,7 (1H, multiplet), 7.0 - 7,4 (2H, multiplet), 7,6 - 7,8 (1H, multiplet).

EKSEMPEL 28 (A) Benzhydryl-7a-methoxy~3Hïïethyl-7P-phenylketenimino-3-cephe:ni- ________________________________________________

En oplzsning af lDenzhydryl-7p-(2,-brom-1,-chlor-2,-p]ienylethyliden-imino)-3-methyl~3-cepîiem-4-carl)oxylat i tetrahydrofuran fremstil-ledes af 1,7 g benzhydryl-7P(2’ j^brom-Z1-p]lenylacetamido)-3-methyl-.

3-cepllem-4~caΓ^^oxylat, 0,81 g phosphorpentachlorid og 0,6 ml quinolin, ved proceduren beskrevet i eksempel 26 (A). ïil denne oplzsning sattes ved en temperatur pâ -70° C en oplzsning af li-thiummethoxid i methanol, fremstillet af 1’60 mg lithium og 15 ml methanol. Ben dannede blanding omrortes ved -70° C i 30 minutter, afk0ledes med 1,4 ml eddikesyre, hældtes i vand og ekstraheredes derpâ med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og tzr-ret over natriumsulfat. Oplosningsmidlet blev afdampet under redneeret tryk, og remanensen blev renset ved kromatografi pâ silica-gel til dannelse af 0,9 g benzhydryl-7a-methoxy-3-methyl“ 7p-phenylketenimino-3-cephem-4-carboxylat.

IR-spektrum (Nujol - Varemærke)

Vmaxcm”1 = 2000, 1780, 1730.

NMR-spektrum (CDClj) δ ppm = 2,20 (3H, singlet), 2,93 & 3,13 (2H, AB kvartet), 3,70 (3H·,· singlet), 5.00 (1H, singlet), 5,22 (1H, singlet), 6,87 (1H, singlet), 7.0 - 7,6 (15H, multiplet).

40

DK 156576 B

(B) 7a-methoxy-3-methyl-7P-phenylacetamido-3-cephem--4-carboxyl- syre_________________________________ 0,2 ml trifluoreddikesyre sattes til ovennævnte oplzsning af 50 mg benzhydryl-7a-methoxy-3-methyl-7P-phenylketenimino-3-cepheiii~ 4-carboxylat 1 1 ml chloroform. Oplesningen omrertes ved stue-temperatur i 1 time, og derpâ afdampedes oplesningsmidlet under reduceret tryk. Remanensen blev oplest i ethylacetat og ekstra-heret med en 10$ vandig oplosning af dikaliumhydrogenphosphat.

De vandige ekstrakter blev gjort sure med fortyndet saltsyre til en pH-værdi pâ 2,2 og derefter ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og tzrret over natriumsulfat; oplesningsmidlet blev derefter afdampet til dannelse af 27 mg • 7 a-methoxy-3~methyl-7p-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxylsyre.

IR-spektrum (Nujol - Varemærke)

Vmax cm-1 = 5250’ 177°» 1700· NMR-spektrum (CBCl^) § ppm = 2,20 (3H, singlet), 3,17 (2H, singlet), 5,38 (5H, singlet), 3,63 (2H, singlet), 4,95 (1H, singlet), 6,92 (1H, singlet), 7,22 (5H, singlet).

BKSEMPEL 29

Benzhydryl-7a-methoxy-3-inethyl-7P-phenylketenimino-3-cephem- 4-carboxylat________________________________________________

Ved proceduren beskrevet i eksempel 26 (A) fremstilledes benz-hydryl-7P-(1’,2 *-dichlor-2 *-phenylethylidenimino)-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat af 1,06 g benzhydryl-7p-(2,-chlor-2,-phenyl-acetamido)-3“methyl-3-eephem-4-carboxylat, 0,54 g phosphorpenta-chlorid og 0,4 ml quinolin og oplzstes i 40 ml tetrahydrofuran. Til denne oplosning sattes ved en temperatur. pâ -70° C en oples-ning af lithiummethoxid i methanol, fremstillet af 100 mg lithium og 10 ml methanol. Reaktionsblandingen blev omrort ved -70° C i 30 minutter, behandlet med 1 ml eddikesyre, hældt i vand og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand os· tzrret over vandfrit natriumsulfat. os onlasninsrsmidlet blev

« DK 156576 B

derefter inddampet. Remanensen blev kromatograferet pâ silica-gel til dannelse af 0,7 g benzhydryl-7a-methoxy-3-methyl-7p-phenylketenimino-3-eephem-4-carbo;xylat.

Ved proceduren beskrevet i eksempel 28 (B) omdannedes dette til 7a-methoxy-3-methyl-7p'-pbenylacetamido-3-cephein-4-carboxylsyre.

EKSEMPEL 30

Benzhydryl-7a~methoxy-3-methyl-7p-phenylketenimino-3-cephem-4- carboxylat____________-_____ _ ________________

Benzhydryl-7p-( 1 ’, 2 ’ -dicblor-2 ' -phenylethylidenimino)-3-methyl- 3- cephem-4-carboxylat fremstilledes af 257 mg benzhydryl-7p- (2 ,-hydroxy-2 ’_phenylacetamido)-3-niethyl-3-cephein-4-carboxylat, 360 mg phosphorpentachlorid og 0,26 ml quinolin ved proceduren beskrevet i eksempel 26 (A) og behandledes som beskrevet i eksempel 29 til dannelse af 120 mg benzhydryl-7oc-methoxy-3-methyl-7P-phenylketenimino-3-cephem-4-carboxylat.

Ved proceduren beskrevet i eksempel 28 (B) blev dette omdannet til benzhydryl-7a-methoxy-3-methyl-7P-phenylacetamido-3-cephem- 4- carboxylsyre.

EKSEMPEL 31 (A) p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7cc-methoxy-7p-phenylketen-'imino-^-ûeghem-i-carboxjlat______________________________

Ved proceduren beskrevet i eksempel 26 (A) fremstilledes p-brom-phenacyl-3-acetoxymethyl-7P-( 11,21 -dichlor—2 * -phenylethyliden-imino)-3-cephem-4--carboxylat af 0,62 g p-bromphenacyl-3-acetoxy-methyl-7p-(2 ’ -chlor-2 ’ -phenylacetamido)-3-cephem-4-carboxylat, 0,3 g phosphorpentaehlorid og 0,2 ml quinolin. Eorbindelsen blev derefter oplost i 40 ml tetrahydrofuran. Til denne oplosning sattes ved en temperatur pâ -70° C en oplosning af lithiummethoxid i methanol, fremstillet af 40 mg lithium og 3 ml methanol. Re-aktionsblandingen omrortes ved -70° C i 30 minutter og behandledes derefter med 0,5 ml eddikesyre. Oplosningen iblev derpâ hældt

42 DK 156576 B

1 vand og ekstraheret med ethylacetat. Ekstrakterne vaskedes med vand og torredes over vandfrit natriumsulfat; oplzsnings-midlet blev derpâ afdampet under reduceret tryk. Remanensen blev renset ved kromatografi pâ silica-gel til dannelse af 0,3 g p-bromphenacyl-3-acetoxymeth.yl-7a-metlioxy-7p-pHenylketenimino- 3-ceph.em-4-carboxylat.

IR-spektrum (flydende)

Vmax cm”1 = 2000» 178°» 174°» 1700· NMR-spektrum (CDGl^) δ ppm = 2,00 (3H, singlet), 3,22 & 3,40 (2H. AB kvartet, =15 Hz) 3,60 (3H, singlet), 4,97 (1H, singlet), 4,90 & 5,18 (2H, AB kvartet, J=16 Hz) 5,18 (1H, singlet), 5.40 (2H, singlet), 7,0-7,4 (5H), 7,4-7,9 (4H).

(B) p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7a-iaetîioxy-7P-pHenylacet-S2i^2z2i£6EHem-4-carboxylat____________________________ 2 ml trifluoreddikesyre sattes til en oplzsning af 500 mg af ovennsevnte p--brompIienacyl-3-aeetoxymet]iyl-7a:-met]ioxy-7P~pIienyl-ketenimino-3-cephem-4-carboxylat i 10 ml chloroform. Oplzsningen omrzrtes ved stuetemperatur i 2 tinter og inddampedes derefter til tzrhed under reduceret tryk. Remanensen oplzstes i ethylacetat, vaskedes med en 10$ dikaliumhydrogenphosphatoplzsning og vand, og der tzrredes over natriumsulfat; oplzsningsmidlet blev derpâ afdampet til dannelse af 470 mg p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7a-methoxy-7p-phenylacetamido-3-cephem-4-carboxylat.

NMR-spektrum (CBCl^) δ PP& = 2,07 (3H, singlet), 3,35 & 3,55 (2H, AB kvartet, J=17 Hz] 3.40 (3H, singlet), 3,67 (2H, singlet), 5,03 (2H, AB kvartet, J=13 Hz), 5,07 (1H, singlet), 5.40 (2H, singlet), •7 f ΚΐΛ 43

EKSEMPEL· 32 DK 156576 B

p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7a-methoxy-7P*-phenylacetamicio--3-cephem-4-çarboxylat_______

En oplesning af 100 mg p-bromphenacyl-3-acetoxymethyl-7a-methoxy-7P-phenylketenimino-3-cephem-4-carboxylat i tetrahydrofuran [fremstillet som beskrevet i eksempel 31 (A)] indstilledes pâ pH = 3,0 ved tilsætning af fortyndet saltsyre. Reaktionsblandin-gen blev derefter omrzrt ved 10° C i 18 timer, hvorefter den hæld-tes i vand og ekstraheredes med ethylacetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og terret over vandfrit natriumsulfat; oples-ningsmidlet blev derpâ afdampet under reduceret tryk. Remanen-sen blev kromatograferet pâ silica-gel til dannelse af 20 mg p-broinphenacyl-3-acetoxymethyl-7a--methoxy~7P~pheny.lacetamido-3-cephem-4-carboxylat.

EKSEMPEL· 33 (A) Benzîiydryl-7a-methûxy-3-meth.yl-7P-nietliylketenimino-3-cepbem- 4-çarboxylat _______ __ __ _ _

Ved proceduren beskrevet i eksempel 26 (a) fremstilledes benzhydryl-7p-(2,-brom-1 ,-cîilo3?propylidenimino)-3-metliyl-3-cephem-4-carboxy-lat af 515 mg benzhydryl-7P-(2,-brompropionamido)-3-methyl-3-cephem-4-’Carboxylat, 270 mg phosphorpentachlorid og 0,2 ml quino-lin og oplestes derefter i 40 ml tetrabydrofuran. Til derme oplesning sattes ved en temperatur pâ -70° C en methanoloplesning af lithiummethoxid, fremstillet af 50 mg lithium og 4 ml methanol. Reaktionsblandingen omrertes ved -70° C i 30 minutter, og 0,4 ml eddikesyre blev derefter tilsat. Oplesningen hældtes derpâ i vand og ekstraheredes med ethylacetat. Ekstrakteme vaskedes med vand og terredes over vandfrit natriumsulfat; oplesningsmidlet blev derefter afdampet under reduceret tryk til dannelse af 480 mg urent benzhydryl-7£-me^hoxy-3-methyl-7P~methylketenimino-3~ cephem-4--carboxylat.

IR-spektrum (flydende)

Vmax cm~1 = 2020’ 177°» 171°- 44 ui\ i ju j / u u (B) Benzhydryl-7a-niethoxy-3-methyl-7P-propionamido-3-cephem-4- carboxylat______________________________ _

Det ovennevnte benzhydryl^c^methoxy^-Œethyl-^p-methylketenimino-3-cephem-4-carboxylat oplestes i 20 ml chloroform indeholdende 1 ml trifluoreddikesyre. Oplzsningen omrsrtes 1 20 timer ved stue-temperatur, og oplzsningsmidlet blev derefter afdampet under reduceret tryk. Remanensen blev oplzst 1 ethylacetat, og den dannede oplzsning vaskedes med vand og terredes over vandfrit natriumsulfat. Til denne ethylacetatoplesning sattes overskud af diphenyldiazomethan, og blandingen opretholdes ved stuetempe-ratur i 18 tlmer. Oplzsningsmidlet blev derefter afdampet under reduceret tryk, og remanensen blev vasket med n-hexan og kromato-graferedes pâ silica-gel til dannelse af 90 mg rent benzhydryl-7a-methoxy-3-methyl-7p-propionamido-3-cephem-4-carboxylat, som en olie.

IR-spektrum (flydende)

Vmax cm~1 = 3330’ 1780» m3’ 169°* NMR-spektrum (CBCl^) δ ppm = 1,15 (3H, triplet, J=6 Hz), 2,10 (3H, singlet), 2,30 (2H, kvartet, J=6 Hz), 3,13 (2H, singlet), 3,43 (3H, singlet), 4,97 (1H, singlet), 6,65 (1H, bred singlet), 6,82 (1H, singlet), 7,1 - 7,6 (10H, multiplet).

EESEMPEL 34 7ed proceduren beskrevet i eksempel 26 (a) fremstilledes metiiyl-7β-( 2 * -brom-1 ’ -chloretliylidenimino)-3-methyl-3-cepliem-4-carboxylat af 1,34 g metîiyl-7p-bromacetamido-3-methyl-3-cepbem-4-carboxylat, 1,5 g phosphorpentaehlorid og 1 ml quinolin. Eorbindelsen blev derefter oplzst i 80 ml tetrahydrofuran, og en methanoloplzsning af lithiummethoxid (fremstillet af 100 mg lithium og 20 ml metha-nol) tilsattes ved -70° C. Reaktionsblandingen blev omrort ved

45 DK 156576 B

-70° C i 30 minutter, og âerefter tilsattes 2,5 ml trifluoreddike-syre, og omrcringen fortsattes ved stuetemperatur i 10 minutter. Blandingen blev derefter hældt i vand og ekstraheret med ethyl-acetat. Ekstrakterne vaskedes med 10# dikaliumhydrogenphosphat-oplcsning og vand og t0rredes over vandfrit natriumsulfat. Op-l0sningsmidlet blev afdampet under reduceret tryk, og remanen-sen blev kromatograferet pâ silica-gel til dannelse af 250 mg methyl-7P-acetamido-7a-methoxy-3-methyl-3-cephem-4--carboxylat.

IR-spektrum (flydende)

Vmax cm"1 = 5220’ 177°’ 1730’ 1690· NMR-spektrum (CDCl^) § ppm = 2,13 (6H, singlet), 3,20 & 3,37 (2H, AB kvartet, J=17 ï 3,55 (3H, singlet), 5,83 (3H, singlet), 5,07 (1H, singlet), 7,52 (1H, singlet).

EKSEMPEB 35 3-acetoxymethyl-7d-methoxy-7P-* ( α-thienylacetamido )-3-cephem-4-_______________________________________

Yed proceduren beskrevet i eksempel 26 (a) fremstilledes benzhy-dryl-3-acetoxymethyl-7P-(1 ', 2 * -dichlor-21 -a-thienylethyliden-imino)-3-cephem-4-*carboxylat af 597 mg benzhydryl-3-acetoxy-methyl~7P-(ch.lor-a-tMenylacetamido)-3-cephem-4-car‘boxylat, 360 mg phosphorpentachlorid og 0,24 ml quinolin. Til den dannede oplcsning sattes ved en temperatur pâ -70° C en methanoloplcsning af lithiummethoxid, fremstillet af 12 mg lithium og 2 ml methanol Blandingen omrzrtes ved -70° C i 40 minutter, hvorefter 5 ml tri-fluor eddikesyre tilsattes. Omrcringen fortsattes ved stuetemperatur i 40 minutter, og oplesningsmidlet blev derpâ afdampet under reduceret tryk. Remanensen oplcstes i ethylacetat og ekstra-heredes med pH = 7,5 puffer (en vandig oplosnîng af dinatrium-hydrogenphosphat + kaliumhydrogenphosphat). 3)e vandige ekstrak- ter fremstilledes pâ pH =2,0 med fortyndet saltsyre og ekstra-heredes derefter med ethylacetat. De forenede ekstrakter vaskede, med vand og terredes over vandfrit magnesiumsulfat, og oplcsnings- 46

DK 156576 B

midlet blev derefter afdampet til dannelse af 85 g 3-acetoxy-methyl-7a-methoxy-7 β- ( α-thienylacetamido )-3-cephem-4-carboxyl~ syre.

NMR-spektrum (CD^SOCD^ + D20) δ ppm = 2,01 (3H, singlet), 3,20 (1H, dublet, J=18 Hz), 3,33 (1H, dublet, J=18 Hz), 3,40 (3H, singlet), 3,85 ( H, singlet), 4,88 (2H, nærmest singlet), 5,04 (1H, singlet), 6,90 - 7,45 (3H, multiplet).

EKSEMPBL 36 3-carbamoyloxymethyl-7a-met]ioxy-7P-(a-thienylacetamido)-3-cephem- ___________________________________________________

Ved proeeduren beskrevet i eksempel 26 (A) fremstilledes benzhydryl-3-carbamoÿloxymethy 1-7-( 11,21 -àichlor-21 -a-thienylethylidenimino)- 3- cephem-4-carboxylat af 597 mg benzhydryl-3-carbamoyloxymethyl-7β-( chlor-a-thienylacetamido)-3-cephem-4-carboxylat, 220 mg phos-phorpentachlorid og 0,15 ml quinolin, og produktet oplostes i 40 ml tetrahydrofuran. Til denne oplosning sattes ved en temperatur pâ -70° C en methanoloplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 12 mg lithium og 4 ml methanol. Heaktionsblandingen omrortes ved -70° C i 30 minutter. Efter tilsætning af 5 ml trifluoreddikesyre omrortes oplzsningen ved stuetemperatur i 40 minutter. Oplesnings-midlet blev derefter afdampet under reduceret tryk, og remanensen blev ekstraheret med ethylacetat. Den dannede oplosning geneks-traheredes med en puffer ved pH = 7,5 (vandig oplosning af di-natriumhydrogenphosphat + kaliumdihydrogenphosphat). De vandige ekatrakter blev gjort sure til pH = 2,0 med fortyndet saltsyre og derefter ekstraheret med ethylacetat. De forenede ekstrakter blev vasket med vand, torret over vandfrit magnesiumsulfat; op-losningsmidlet blev derefter afdampet til dannelse af 60 mg 3-carbamoyloxymethyl-7a-methoxy-7B- ( α-thienylaeetamido )-3-cephem- 4- carboxylsyre *

47 DK 156576 B

IR-spektrum (Nujol - Varemærke)

Vmax om" = 3420> 5530, 3250, 1783, 1715, 1680, 1665.

NMR-spektrum (CD^CN) δ ppm = 3,53 (3H, singlet), 3,38 (1H, dublet, J=18Hz), 3,60 (1H, dublet, J=18Hz), 3,90 (2H, singlet), 4,88 (2H, singlet), 5,07 (1H, singlet), 6,95 - 7,40 (3H, multiplet).

EKSEMPEIi 57 (A) Meth^l-ôa-methox^-ôg-phen^lketenimino-^enicillanat

Ved proceduren beskrevet i eksempel 26 (A) fremstilledes methyl-

6-(1 ’ ,2,-dichlor-2,-pîienyletliylideniinino)-penîeillanat af 300 mg methyl-6-(2,-chlor-2,-phenylacetamido)-penicillanat, 300 mg phosphorpentachlorid og 0,2 ml quinolin. Produktet oplestes i 80 ml tetrahydrofuran. Til denne oplesning sattes ved en tempe-ratur pâ -70° C en methanoloplosning af litiiiummethoxid, fremstil-let af 40 mg lithium og 3 ml methanol. Reaktionsblandingen blev omrort ved -70° C i 30 minutter og derefter behandlet med 0,5 ml eddikesyre. Den dannede oplosning blev hældt i vand og ekstra-heret med ethylaeetat. Ekstrakteme blev vasket med vand og tor-ret over vandfrit natriumsulfat ; oplesningsmidlet blev derefter ~ afdampet under reduceret tryk. Remanensen blev renset ved kro-matografi pâ silica-gel til dannelse af 180 mg methyl-6a-methoxy-6p-phenylketenimino-penicillanat, smp. 80° CL

IR-spektrum (Nujol - Varemærke)

VmQVcffi"1' = 2000, 1765, 1740.

Ilia, JL

NMR-spektrum (CDCl^) δ PPm = 1,43 (3H, singlet), 1,47 (3H, singlet), . - „ 3,65 (3H, singlet), 4,38 (1H, singlet), 5,17 (1H, singlet), c; tΪΛ ( 1TT «îriicrl fa-h ^ .

48 DK 156576B

(B) Methyl-6a-methoxy-6p-phenylacetamido-penicillanat

En oplosning af 100 mg 6a-methoxy-6p-phenylketenimino-penicilla~ nat fremstillet som ovenfor angivet i tetrahydrofuran indstille-des pâ pH î 4,0 med fortyndet saltsyre. Reaktionsblandingen om-rortes derefter i 12 timer ved stuetemperatur. Ben dannede op-l0sning blev hældt i vand og ekstraheret med ethylacetat. Eks-trakterne vaskedes med vand og t0rredes over vandfrit natrium-suif at; oplosningsmidlet blev derpâ afdampet under reduceret tryk. Remanensen kromatograferedes pâ silica-gel til dannelse af 20 mg me thy1-6 α-methoxy- 6 β-phenyla e e tami do-p enicillanat.

IR-spektrum (Ntqol - Varemærke)

Vmax cm^ = 333°» 178°» 1730> 1695» 167°* NMR-spektrum (CBCl^) δ PP® = 1,35 (6H, singlet), 3,36 (3H, singlet)', 3,61 (2H, singlet), 3,72 (3H, singlet), 4,34 (1H, singlet), 5,52 (1H, singlet), 7,25 (5H, singlet).

EKSEMPEl· 38 (A) Methyl-7P-diph.enylketenimino-7cc-metlioxy-3-nietbyl-3--cephem- ______________________________________________ 720 mg phosphorpentachlorid oplostes i 32 ml vandfrit chloro-form, og derpâ tilsattes 0,52 ml quinolin. Til denne blanding sattes under afkoling med is 480 mg methyl-7-( 2 * -hydroxy-21,21 -diphenyl-acetamido )-3-methyl-3-cephem-4-carboxylat. Reaktions-blandingen omrortes under afkoling med is i 40 minutter, hvoref-ter oplosningsmidlet blev afdestilleret under reduceret tryk.

Til remanensen sattes 40 ml vandfrit tetrahydrofuran, og det dannede krystallinske stof blev frafiltreret. Efter afkoling til -78° C omrsrtes filtratet ved en temperatur pâ -70 - -78° C i 20 minutter med en methanoloplosning af lithiummethoxid, fremstillet af 48 mg lithium og 6 ml methanol. 0,5 ml eddikesyre tilsattes, og reaktionsblandingen hældtes i vand og ekstraheredes med ethylacetat. Ekstrakteme vaskedes med vand og torredes, og oplosningf

49 DK 156576 B

midlet blev derefter afdampet. Remanensen blev renset ved kroma-tografi pâ silica-gel til dannelse af 65 mg methyl-7P-diphenyl~ ketenimino-7a-metho:xy-3-methyl-3--'Cephem-4-carbo:xylat.

XR-spektrum (flydende) ^max om_1 = 1997 > 1775< 1730· NMR-spektrum (CBCl^) δ PP® = 2,16 (3H, singlet), 2,80 (2H, singlet), 3,56 (3H, singlet), 3,82 (3Π, singlet), 4,92 (1H, singlet), 7,2 - 7,5 (10H).

(B) Methyl-7P-dipîienylacetamido-7a-methoxy-3--methyl-3-cepliein- __ - _ ___ ____________ _ __ 85 mg methyl-7β-diphenylketenimino-7a-metb.oxy-3~methyl-3-cephem-4-carboxylat, fremstillet som beskrevet ovenfor, oplsstes i 3 ml chloroform, og 0,3 ml trifluoreddikesyre blev tilsat. Blandingen omrsrtes ved stuetemperatur i 30 minutter, og opl0sningsmidlet blev derefter afdestilleret under reduceret tryk. Ber tilsattes vand til remanensen, og blandingen ekstraheredes derefter med ethylacetat, vaskedes med vand og tsrredes til dannelse af 83 mg methyl-7P-diph.enylacetamido-7a-methoxy-3-meth.yl-3-cepbem-4-carboxylat.

IR-spektrum (Nujol - varemærke)

Vmax om"1 = 3350, 1785, 1730, 1690.

Claims (4)

1. 2. Fremgangsmâde til fremstilling af den i krav 1 definerede forbindelse II, kendetegnet ved, at en acylamino-for-bindelse med formlen:
2. 1 H C - C - NPI —f----^ \ 2/1 I) \ (VI) τι' x o \ /Γ 4 O 1 2 hvori R , R og Z har den ovenfor angivne betydmng, og X repræsenterer en hydroxygruppe eller et ha.logenatom, omsættes med et halogeneringsmiddel.
3. 3. Fremgangsmâde ifolge krav 2, kendetegnet ved, at omsaetningen med halogeneringsmidlet sker i nærværelse af en tertiær amin, fortrinsvis quinolin, pyridin, diethylanilin eller dimethylanilin.
4. 4. Fremgangsmâde ifolge ethvert af kravene 2-3, kendetegnet ved, at halogeneringsmidlet er phosphorpentachlorid.