DEU0002024MA

DEU0002024MA -

Info

Publication number: DEU0002024MA
Authority: DE

Description

BUNDESREPUBLIK DEUTSCHLANDFEDERAL REPUBLIC OF GERMANY

Tag der Anmeldung: 5. Februar 1953 Bekanntgemacht am 5. Juli 1956Registration date: February 5, 1953. Advertised on July 5, 1956

DEUTSCHES PATENTAMTGERMAN PATENT OFFICE

Aus der Patentschrift 936 207 ist ein Verfahren zur Einführung von Sauerstoff in ein Steroidmolekül bekannt, das im wesentlichen darin besteht, daß Steroide der Einwirkung eines oxydierend wirkenden Stammes einer Pilzart der Ordnung Mucorales oder von aus derartigen Pilzen erhältlichen, oxydierend wirkenden Enzymen unterworfen werden und anschließend in bekannter Weise, z. B. durch Extraktion, abgetrennt werden können. Vorzugsweise wird dabei ein ii-Desoxysteroid durch die Einwirkung eines solchen Pilzes der Ordnung Mucorales oder durch daraus erhältliche, oxydierend wirkende Enzyme in ein in ii-Stellung oxydiertes Steroid umgewandelt.From patent specification 936 207 is a method for introducing oxygen into a steroid molecule known, which consists essentially in the fact that steroids the action of an oxidizing agent Stem of a species of fungus of the order Mucorales or of fungi obtainable from such fungi, oxidizing acting enzymes are subjected and then in a known manner, for. B. by extraction, can be separated. A ii-deoxysteroid is thereby preferably produced by the action of such a fungus of the order Mucorales or by oxidizing agents obtainable therefrom Enzymes converted into a steroid which is oxidized in the ii-position.

Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur i, Herstellung von I4a-Oxyprogesteron durch Behandlung von Progesteron mit einer Pilzkultur der Gattung Helicostylum der Familie Thamnidiaceae, besonders mit dem Pilz Helicostylum piriforme, oder der Gattung Mucor der Familie Mucoraceae, z· besonders den Pilzen Mucor griseo cyanus oder Mucor parasiticus, alle von der Ordnung der Mucorales, oder daraus erhältlichen, oxydierend wirkenden Enzymen.The invention relates to a process for the i preparation of I4a-Oxyprogesteron by treatment of progesterone with a fungal culture of the genus Helicostylum the Thamnidiaceae family piriforme particularly with the fungus Helicostylum, or the genus Mucor of the family Mucoraceae, · especially for the fungi Mucor griseo cyanus or Mucor parasiticus, all of the order of the Mucorales, or oxidizing enzymes obtainable therefrom.

609 548/540609 548/540

U 2024 IVb/12 οU 2024 IVb / 12 ο

Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren .herstellbare Verbindung besitzt folgende Formel:According to the process according to the invention Compound has the following formula:

Sie kann in dasbekannte,i4-Pregnen-2i-ol-3, 20-dion-21-acetat (Meyer und" Mitarb., HeIv. Chim. Acta, Bd. 30, 1947, S. 1508) umgewandelt werden, und zwar durch Hydrierung von I4a-Oxyprogesteron (4-Pregnen-1401-01-3, 20-dion) in Gegenwart eines Palladium-Holzkohle-Katalysators zur Herstellung von Pregnan-Ί4α-ο1-3, 20-dion; das letztere wird mit Natriumborhydrid selektiv zu Pregnan-3,14a-diol-20-on reduziert. Durch Bromierung von Pregnan-3, i4«-diol-2O-ori mit Brom in Chloroform wird 2i-Brompregnan-3, I4a-diol-20-on hergestellt, und das letztere kann mit Kaliumacetat in Aceton in das Pregnan-3, 140t. 2i-triol-2o-ön-21-acetat übergeführt werden. Dieses kann leicht mit wasserfreier Oxalsäure zu i4-Pregnen-3, 2i-diol-20-on-21-acetat dehydratisiert werden. Durch anschließende Oxydation mit Chromsäure in Essigsäure erhält man hieraus das bekannte i4-Pregnen-2i-ol-3, 20-dion-"21-acetat. It can be converted into the well-known i4-pregnen-2i-ol-3, 20-dione-21-acetate (Meyer and "Mitarb., HeIv. Chim. Acta, Vol. 30, 1947, p. 1508), namely by hydrogenation of I4a-oxyprogesterone (4-Pregnen-1401-01-3, 20-dione) in the presence of a palladium-charcoal catalyst for the production of Pregnan-Ί4α-ο1-3, 20-dione; the latter is selectively reduced to pregnane-3,14a-diol-20-one with sodium borohydride. By bromination of Pregnan-3, i4 «-diol-2O-ori with Bromine in chloroform becomes 2i-bromopregnan-3, 14a-diol-20-one and the latter can be converted into the Pregnan-3, 140t with potassium acetate in acetone. 2i-triol-2o-ön-21-acetate be transferred. This can easily be converted into i4-pregnen-3, 2i-diol-20-one-21-acetate with anhydrous oxalic acid becoming dehydrated. Subsequent oxidation with chromic acid in acetic acid gives from this the well-known i4-pregnen-2i-ol-3, 20-dione- "21-acetate.

Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren herstellbare Verbindung besitzt lyophobe und mehrere lyophile Gruppen und ist infolgedessen ein wertvolles Mittel zur Veränderung der Oberflächenspannung, das als Emulgator, Emulsionsbrecher, Suspensionsmittel und Emulsionsstabilisator von Nutzen ist. Die Verbindung kann zur Herstellung von Absorptionsgrundlagen verwendet werden, die verbesserte Wasserabsorptions- und Weichmachungseigenschaften haben und in der Pharmazie und Kosmetik allein oder als Träger für bekannte Medikamente von Nutzen sind. Eine geeignete Absorptionsgrundlage kann man herstellen, indem man ein Gemisch aus 85°/₀ farblosem Petroleum, Stearylalkohol und 5% I4a-Oxyprogesteron zusammenschmilzt und das Gemisch unter Rühren abkühlt, bis es erstarrt. ■ Die erhaltene Absorptionsgrundlage kann - leicht mit wäßrigem Material bei Raumtemperatur verrieben oder bei erhöhter Temperatur emulgiert werden und ergibt eine geschmeidige und beständige Wasser-in-Öl-Emulsion. Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren herstellbare Verbindung ist auch selbst pharmakalogisch wirksam und bei der Herstellung von herzwirksamen Hormonen von Nutzen,The compound which can be prepared by the process of the invention has lyophobic and several lyophilic groups and is consequently a valuable means of changing the surface tension, which is useful as an emulsifier, emulsion breaker, suspending agent and emulsion stabilizer. The compound can be used in the manufacture of absorbent bases which have improved water absorption and emollient properties and which are useful in pharmacy and cosmetics alone or as carriers for known medicaments. A suitable absorbent base may be prepared by reacting / ₀ colorless Petroleum, stearyl alcohol and 5% I4a-Oxyprogesteron melting together a mixture of 85 ° and the mixture cools with agitation until it solidifies. The absorption base obtained can be easily rubbed with aqueous material at room temperature or emulsified at elevated temperature and results in a smooth and stable water-in-oil emulsion. The compound which can be produced by the process according to the invention is itself pharmacologically active and useful in the production of cardiac hormones,

Die folgenden Beispiele erläutern das. erfindungsgemäße Verfahren.The following examples illustrate the invention Proceedings.

Beispiel 1
14 a-Oxyprogesteronexample 1
14 α-oxyprogesterone

Aus 20 g enzymatischem Lactalbuminextrakt, bekannt unter der Handelsbezeichnung »Edamin«, 3 g Maiswasser und 50 g technisch reiner Dextrose, die mit Leitungswasser auf 1 1 verdünnt wurde, wurde ein Nährboden hergestellt und auf einen p_H-Wert zwischen etwa 4,3 und 4,5 eingestellt. 5 1 dieses sterilisierten Nährbodens wurden mit Mucor griseo cyanus geimpft und 24 Stunden bei einer Temperatur von 25° bebrütet, wobei Belüftung und Rührung so vorgenommen wurden, daß nach dem Verfahren von Cooper, Fernstrom und Miller (Ind. Eng. Chem., Bd. 36, 1944, S. 504) die Sauerstoffaufnahme 6,3 bis 7 Millimol Na₂SO₃ je Stunde und Liter betrug. In diesem Nährboden, der eine 24 Stunden alte Kultur von Mucor griseo cyanus enthielt, wurden 5 g Progesteron in 250 ecm Aceton suspendiert. Nach einer unter den gleichen Temperatur- und Belüftungsbedingungen vorgenommenen weiteren Bebrütung von 24 Stunden wurden die Brühe und das Mycel extrahiert. Das Mycel wurde abfiltriert, zweimal mit je einem etwa dem Mycelvolumen entsprechenden Volumen Aceton gewaschen und zweimal mit etwa der gleichen Menge Methylenchlorid extrahiert. Die Lösungsmittel enthaltenden Aceton- und Methylenchloridextrakte wurden zu dem Filtrat der Brühe zugegeben. Das Gemisch aus den Extrakten und dem Filtrat wurde nacheinander zweimal mit je einem halben Volumen Methylenchlorid und zweimal mit je einem viertel Volumen Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten Methylenchloridextrakte wurden zweimal mit je einem zehntel Volumen einer 2°/_oigen wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und dann zweimal mit je einem zehntel Volumen Wasser gewaschen. Nach Trocknen der Methylenchloridextrakte mit etwa 3 bis 5 g wasserfreiem Natriumsulfat je Liter Lösungsmittel und Filtrieren wurde das Lösungsmittel durch Destillation entfernt, und es ergab sich ein kristalliner Rückstand von 4,815 g. Der kristalline Rückstand wurde mit einer Mischung aus Hexanen und Petroläther, bekannt unter dem Handelsnamen »Skellysolve-B-Petroläther«, verrieben. Es blieben 3,322 g unlösliches Material, das mit Äther verrieben wurde. 1,718 g der in Äther unlöslichen Bestandteile wurden i 100 ecm Benzol gelöst und über 85 g TonerdeFrom 20 g enzymatic Lactalbuminextrakt, known under the trade designation "Edamin", 3 g of corn steep liquor and 50 g of technically pure dextrose, which was diluted with tap water to 1 1, a culture medium was prepared, and a _pH value between about 4.3 and 4.5 set. 5 l of this sterilized nutrient medium were inoculated with Mucor griseo cyanus and incubated for 24 hours at a temperature of 25 °, aeration and stirring being carried out in such a way that according to the method of Cooper, Fernstrom and Miller (Ind. Eng. Chem., Vol. 36, 1944, p. 504) the oxygen uptake was 6.3 to 7 millimoles Na ₂ SO ₃ per hour and liter. In this culture medium, which contained a 24 hour old culture of Mucor griseo cyanus, 5 g of progesterone were suspended in 250 ecm of acetone. After a further incubation of 24 hours under the same temperature and ventilation conditions, the broth and the mycelium were extracted. The mycelium was filtered off, washed twice with a volume of acetone each approximately equal to the volume of the mycelium and extracted twice with approximately the same amount of methylene chloride. The acetone and methylene chloride extracts containing solvents were added to the broth filtrate. The mixture of the extracts and the filtrate was successively extracted twice with half a volume of methylene chloride each time and twice with a quarter volume of methylene chloride each time. The combined methylene chloride extracts were then washed twice with one-tenth volume of 2 ° / _o aqueous sodium bicarbonate solution and twice with one-tenth volume of water. After drying the methylene chloride extracts with about 3 to 5 g of anhydrous sodium sulfate per liter of solvent and filtering, the solvent was removed by distillation and a crystalline residue of 4.815 g resulted. The crystalline residue was triturated with a mixture of hexanes and petroleum ether, known under the trade name "Skellysolve-B petroleum ether". 3.322 g of insoluble material remained and was triturated with ether. 1.718 g of the ether-insoluble constituents were dissolved in 100 ecm of benzene and over 85 g of clay

Benzol
desgl.
Benzol
desgl.
Benzol
desgl.
Benzol
desgl.
Ätherbenzene
the same
benzene
the same
benzene
the same
benzene
the same
ether Tabelle ITable I. Feststoff-
eluate
mgSolid
eluate
mg Fraktionfraction '■1
Lösungsmittel'■ 1
solvent I,I
0,4
3,2
1,3
96,0
215,8
143,5I, I
0.4
3.2
1.3
96.0
215.8
143.5 I
2
3
4
5
■6
7
8
9I.
2
3
4th
5
■ 6
7th
8th
9 mit 5% Ätherwith 5% ether mit io% Äther ....with io% ether .... mit 50% Äther ....with 50% ether ...

(mit Salzsäure gewaschen und durch Erhitzen auf 120° aktiviert) chromatographiert. Lösungsmittel zur Entwicklung der Säule wurden in, Portionen von 170 ecm in der Reihenfolge der Tabelle I zugegeben.(Washed with hydrochloric acid and heated to 120 ° activated) chromatographed. Solvents for developing the column were in, portions of 170 ecm added in the order of Table I.

S48ß40S48ß40

U 2024 IVb/12 οU 2024 IVb / 12 ο

IO
II
12IO
II
12th

13
1413th
14th

15
i615th
i6

17
Ί817th
Ί8

*9* 9

2020th

21 2221 22nd

23
24
•2523
24
• 25

Äther ether

Äther mit 5% ChloroformEther with 5% chloroform

desgl the same

Äther mit io°/₀ ChloroformEther with io ° / ₀ chloroform

desgl the same

Äther mit 50°/₀ ChloroformEther with 50 ° / ₀ chloroform

desgl. the same

desgl the same

Chloroform chloroform

desgl the same

Chloroform mit 5% AcetonChloroform with 5% acetone

Aceton acetone

Methanol Methanol

104,4 66,9104.4 66.9

I8,5 8,1I8.5 8.1

2,42.4

11,611.6

13,213.2

9-49-4

39-039-0

474.4 81,6474.4 81.6

40,5 24,1 22,7 65,240.5 24.1 22.7 65.2

Fraktion 22 wurde aus Aceton umkristallisiert und ' ergab 20 mg eines bei 230 bis 238⁰ schmelzenden Produkts. Infrarot- und Ultraviolettspektren zeigten das Vorhandensein einer Hydroxylgruppe und normale Ketokonfiguration (keine Konjugation).Fraction 22 was recrystallized from acetone and 'yielded 20 mg of a at 230-238 ⁰ melting product. Infrared and ultraviolet spectra showed the presence of a hydroxyl group and normal keto configuration (no conjugation).

Die Fraktion 19 und 20 wurden vereinigt und aus Aceton umkristallisiert. Man erhielt 382,5 mg ^a-Oxyprogesteron, das bei 180 bis 187° schmolz. Die Struktur wurde durch Infrarotspektren bestätigt. Die optische Drehung betrug [a]|* = + 200⁰ (0,4857 in Chloroform).Fractions 19 and 20 were combined and recrystallized from acetone. 382.5 mg of α-oxyprogesterone were obtained, which melted at 180 to 187 °. The structure was confirmed by infrared spectra. The optical rotation was [a] | * = + 200 ⁰ (0.4857 in chloroform).

. Analyse für C₂₁H₃₀ O₃:. Analysis for C ₂₁ H ₃₀ O ₃ :

Berechnet: C = 76,40%, H = 9,15%; gefunden: C = 76,50%, H = 9,31%.Calculated: C = 76.40%, H = 9.15%; found: C = 76.50%, H = 9.31%.

*° Beispiel 2* ° Example 2

14 a-Oxyprogesteron14 α-oxyprogesterone

Aus 20 g enzymatischem Lactalbuminextrakt, bekannt unter der Handelsbezeichnung »Edamin«·, 3 g Maiswasser und 50 g technisch reiner Dextrose, die mit Leitungswasser auf 11 verdünnt wurde, wurde ein Nährboden hergestellt und auf einen p_H-Wert zwischen 4,3 und 4,5 eingestellt. 12 1 dieses sterilisierten Nährbodens wurden mit Helicostylum piriforme geimpft und 24 Stunden bei einer Temperatur von 28⁰ bebrütet, wobei Belüftung und Rührung so vorgenommen wurden, daß nach dem Verfahren von Cooper, Fernstrom und Miller (Ind. Eng. Chim., Bd. 36, 1944, S. 504) die Sauerstoffaufnahme 6,3 bis 7 Millimol Na₂SO₃ je Stunde und Liter betrug. In diesem Nährboden, der eine 24 Stunden alte Kultur von Helicostylum piriforme enthielt, wurden 6 g Progesteron in 275 ecm Aceton suspendiert. Nach einer unter den gleichen Temperatur- und Belüftungsbedingungen vorgenommenen weiteren Bebrütung von 27 Stunden wurden die Brühe und das Mycel gemäß dem im Beispiel 1 beschriebenen Verfahren extrahiert. Es wurde ein kristalliner Rückstand von 8,313 g gewonnen, der in 600 ecm Benzol mit 10% Äther gelöst und über 300 g Tonerde (mit Salzsäure gewaschen und durch Erhitzung bei 120⁰ aktiviert) chromatographiert wurde. Lösungsmittel zur Entwicklung der Säule wurden in Portionen von 600 ecm in der Reihenfolge der Tabelle II zugegeben.From 20 g enzymatic Lactalbuminextrakt, known under the trade designation "Edamin« ·, 3 g of corn steep liquor and 50 g of technically pure dextrose, which was diluted with tap water to 11, a culture medium was prepared, and a _pH value from 4.3 to 4 , 5 set. 12 1 of this sterilized culture medium was inoculated piriforme with Helicostylum and incubated for 24 hours at a temperature of 28 ^0, with aeration and stirring were carried out such that by the method of Cooper, Fernstrom and Miller (Ind. Eng. Chim., Vol. 36 , 1944, p. 504) the oxygen uptake was 6.3 to 7 millimoles Na ₂ SO ₃ per hour and liter. In this culture medium, which contained a 24 hour old culture of Helicostylum piriforme, 6 g of progesterone were suspended in 275 ecm of acetone. After a further incubation of 27 hours under the same temperature and ventilation conditions, the broth and the mycelium were extracted according to the procedure described in Example 1. This gave a crystalline residue of 8.313 g which was dissolved in 600 cc of benzene with 10% ether and (washed with hydrochloric acid, and by heating at 120 ⁰ enabled) on 300 g of alumina was chromatographed. Solvent for developing the column was added in 600 ecm portions in the order of Table II.

Die Fraktionen 12 bis 14 einschließlich, mit einem Gesamtgewicht von 1,296 g, wurden aus 15 ecm Äthylaeetat umkristallisiert und ergaben 0,680 g Kristalle mit einem Schmelzpunkt von 140 bis 148 °. Wiederholtes Umkristallisieren aus Methanol ergab 165 mg I4a-Oxyprogesteron mit einem Schmelzpunkt von bis 199° und einer optischen Drehung [a]f? = + 215⁰ (0,693 in Chloroform).Fractions 12 to 14 inclusive, with a total weight of 1.296 g, were recrystallized from 15 ecm of ethyl acetate and gave 0.680 g of crystals with a melting point of 140 to 148 °. Repeated recrystallization from methanol gave 165 mg of I4a-oxyprogesterone with a melting point of up to 199 ° and an optical rotation [a] f? = + 215 ⁰ (0.693 in chloroform).

Analyse für C₂₁H₃₀ O₃:
Berechnet: 0 = 76,40%, H = 9,15%; gefunden: C = 76,39%, H = 9,36%.Analysis for C ₂₁ H ₃₀ O ₃ :
Calculated: 0 = 76.40%, H = 9.15%; found: C = 76.39%, H = 9.36%.

Table!!

Fraktionfraction

9
IO
II
12
13
14
15
169
IO
II
12th
13th
14th
15th
16

^J7 ^J 7

l8l8

I₉.I ₉ .

2020th

2121

2222nd

2323

2424

2525th

2626th

Lösungsmittelsolvent

Benzol mit 10% Äther ....Benzene with 10% ether ...

desgl ..........also ..........

Äther ether

. desgl . the same

Äther mit 5 % Chloroform ..Ether with 5% chloroform ..

desgl the same

desgl j ...so j ...

Äther mit 10% ChloroformEther with 10% chloroform

desgl the same

desgl. .. the same ...

Äther mit 50% ChloroformEther with 50% chloroform

desgl. the same

desgl the same

Chloroform chloroform

desgl the same

desgl. . the same.

Chloroform mit 5% AcetonChloroform with 5% acetone

desgl. , the same.,

Chloroform mit 10% AcetonChloroform with 10% acetone

desgl. the same

Chloroform mit 50% AcetonChloroform with 50% acetone

desgl the same

Aceton acetone

desgl the same

Methanol Methanol

desgl the same

unlöslicher Rückstand ....;.insoluble residue ....;.

Feststofi-Solids

eluateeluate

mgmg

95,695.6

121,9121.9

3,83.8

3,43.4

4,84.8

■ 9,0■ 9.0

9,09.0

16,516.5

18,018.0

10,010.0

19,019.0

115. ο115. ο

175,6175.6

978,5978.5

1432,01432.0

461,0461.0

679,0679.0

260,0260.0

245,o245, o

118,0118.0

246,0246.0

' i35,o'i35, o

187,5187.5

65,565.5

299,0299.0

21,5 930,721.5 930.7

Beispiel 3 14 a-OxyprogesteronExample 3 14 α-Oxyprogesterone

Aus 20 g enzymatischem Lactalbuminextrakt, bekannt unter dem Handelsnamen »Edamin«, 3 g Maiswasser und 50 g technisch reiner Dextrose, die mitFrom 20 g of enzymatic lactalbumin extract, known under the trade name "Edamin", 3 g of corn water and 50 g of technically pure dextrose, which with

609 548/540609 548/540

U 2024 IVb/12 οU 2024 IVb / 12 ο

Leitungswasser auf 11 verdünnt wurde, wurde ein Nährboden hergestellt und auf einen p_H-Wert von 4,3 bis 4,5 eingestellt. 12 1 dieses sterilisierten Nährbodens wurden mit Mucor parasiticus geimpft und 24 Stunden bei einer Temperatur von 28⁰ bebrütet, wobei Belüftung und Rührung so vorgenommen wurden, daß nach dem Verfahren von Cooper, Fernstrom und Miller (Ind. Eng. Chim., Bd. 36, 1944, S. 504) die Sauerstoffaufnahme 6,3 bis 7 Millimol Na₂SO₃ je Stunde und Liter betrug. In diesem Nährboden, der eine 24 Stunden alte Kultur von Mucor parasiticus enthielt, wurden 3 g Progesteron in 150 ecm Aceton suspendiert. Nach einer unter den gleichen Temperatur- und Belüftungsbedingungen vorgenommenen weiteren Bebrütung von 48 Stunden wurden die Brühe und das Mycel gemäß dem im Beispiel 1 beschriebenen Verfahren extrahiert. Es wurde ein öliger Rückstand von 4,667 g gewonnen, der teilweise kristallisierte, wenn er mit 30 ecm Äther verrieben wurde; des verriebene Produkt wurde in 150 ecm Benzol gelöst und über 220 g Tonerde (mit Salzsäure gewaschen und durch Erhitzung bei 120⁰ aktiviert) chromatographiert. Lösungsmittel zur Entwicklung der Säule wurden in Portionen von 200 ecm in der Reihenfolge der Tabelle III zugegeben.Tap water was diluted to 11, a culture medium was prepared and adjusted to a _pH value from 4.3 to 4.5. 12 1 of this sterilized culture medium were incubated with Mucor parasiticus vaccinated and 24 hours at a temperature of 28 ^0, with aeration and stirring were carried out such that by the method of Cooper, Fernstrom and Miller (Ind. Eng. Chim., Vol. 36 , 1944, p. 504) the oxygen uptake was 6.3 to 7 millimoles Na ₂ SO ₃ per hour and liter. In this culture medium, which contained a 24-hour-old culture of Mucor parasiticus, 3 g of progesterone were suspended in 150 ecm of acetone. After a further incubation of 48 hours under the same temperature and ventilation conditions, the broth and the mycelium were extracted according to the procedure described in Example 1. An oily residue of 4.667 g was obtained, which partially crystallized when it was triturated with 30 ecm of ether; the triturated product was dissolved in 150 cc of benzene and (washed with hydrochloric acid, and by heating at 120 ⁰ enabled) on 220 g of alumina gel. Solvent for developing the column was added in 200 ecm portions in the order of Table III.

Table III

ι
2
3
4
5
6ι
2
3
4th
5
6th

7
87th
8th

9
109
10

II
12
13
14
15II
12th
13th
14th
15th

1818th

Benzol benzene

desgl the same

Benzol mit 5 % Äther Benzene with 5% ether

desgl the same

Benzol mit 20 % ÄtherBenzene with 20% ether

desgl the same

Benzol mit 50% ÄtherBenzene with 50% ether

desgl the same

Äther ether

. desgl . the same

Äther mit 5% Chloroform .Ether with 5% chloroform.

desgl the same

Äther mit 10% ChloroformEther with 10% chloroform

desgl the same

Äther mit 20% ChloroformEther with 20% chloroform

desgl the same

Äther mit 50% ChloroformEther with 50% chloroform

desgl the same

73,o 26,5 28,073, o 26.5 28.0

21,5 35,o21.5 35, o

27,5 17,027.5 17.0

6,5 4,5 5,o 7,5 9,5 1839,06.5 4.5 5, o 7.5 9.5 1839.0

605,5 356,o605.5 356, o

336,5 33i,o 269,5 !9336.5 33i, o 269.5! 9

2020th

. 21. 21

2222nd

23 2423 24

25
2625th
26th

27 2827 28

29
3029
30th

Äther ether

Chloroform chloroform

desgl. the same

Chloroform mit 5% AcetonChloroform with 5% acetone

desgl the same

Chloroform mit 10% AcetonChloroform with 10% acetone

desgl the same

Chloroform mit 50% AcetonChloroform with 50% acetone

desgl the same

Aceton acetone

Methanol Methanol

94,o 68,0 22,094, o 68.0 22.0

15,0] verei-18,0/ nigt 8,0 12,5 9,0 26,5 29,5 62,0 77,o15.0] verei-18.0 / nigt 8.0 12.5 9.0 26.5 29.5 62.0 77, o

Fraktion 13 wurde in 20 ecm Aceton gelöst und von einer unlöslichen Suspension durch Filtrieren getrennt. Die klare Lösung wurde eingeengt und tropfenweise mit Äther verdünnt. 585,5 mg Kristalle mit einem Schmelzpunkt von 182 bis 194⁰ wurden erhalten. mg dieses Produktes wurden bei 165° und einem Druck von 0,05 mm sublimiert. Das Sublimat wurde aus 3 ecm Aceton und Hexan umkristallisiert und ergab I4a-Oxyprogesteron mit einem Schmelzpunkt von 195 bis 200,5° ^und einer optischen Drehung [a]f? = + i88° (1,036 in Chloroform).Fraction 13 was dissolved in 20 ecm acetone and separated from an insoluble suspension by filtration. The clear solution was concentrated and diluted dropwise with ether. 585.5 mg of crystals having a melting point 182-194 ⁰ were obtained. mg of this product were sublimed at 165 ° and a pressure of 0.05 mm. The sublimate was recrystallized from 3 ecm acetone and hexane and gave 14a-oxyprogesterone with a melting point of 195 to 200.5 ° ^and an optical rotation [a] f? = + 188 ° (1.036 in chloroform).

Analyse für C₂₁H₃₀O₃: ·>Analysis for C ₂₁ H ₃₀ O ₃ : ·>

Berechnet: C = 76,40%, H = 9,15%; gefunden: C = 77,02%, H = 9,55%.Calculated: C = 76.40%, H = 9.15%; found: C = 77.02%, H = 9.55%.

Claims

Claims: ^a °

I. Process for the preparation of I4a-oxyprogesterone by treating steroids with an oxidizing strain of a type of fungus of the order Mucorales or with oxidizing enzymes obtainable from such fungi and optionally separating the oxidized steroids in a known manner, e.g. B. by Extraction, according to patent 936 207, characterized in that that you can get progesterone with a culture of a fungus of the genus Mucor or Helicostylum oxidized.

2. The method according to claim 1, characterized in that that Mucor griseo cyanus, Mucor parasiticus or Helicostylum piriforme are oxidizing Used mushroom.