DE859169C

DE859169C - Process for the preparation of dihalogenated, substituted pteridines

Info

Publication number: DE859169C
Application number: DEA13087A
Authority: DE
Inventors: Donna Bernice Cosulich; Doris Ruth Seeger
Original assignee: American Cyanamid Co
Current assignee: Wyeth Holdings LLC
Priority date: 1950-03-23
Filing date: 1951-03-23
Publication date: 1953-01-26

Description

Verfahren zur Herstellung von dihalogenierten, substituierten Pteridinen Die vorliegende Erfindung betrifft die Herstellung von dihalogenierten, substituierten Pteridinen.Process for the preparation of dihalogenated, substituted pteridines The present invention relates to the preparation of dihalogenated, substituted Pteridines.

Wieland und Purrmann (vgl. Liebigs Ann. Chem. 54q., 179 [z940]) beschrieben die Umsetzung von 2-Amino-4, 6, 7-trioxypteridin (Leukopterin) . in Essigsäure und Salzsäure mit Chlor. Die Konstitution des Produktes, das sie erhielten, ist noch nicht bestimmt definiert worden. Es wird jedoch angenommen, daB es sich um 2-Imino-5-oxyuramil-7-oxamid gehandelt hat. In ähnlicher Weise haben Wieland und Tartter (vgl. ebenda 543, 287 [z940]) die Umsetzung von 2, 4, 6, 7-Tetraoxypteridin (Desiminoleukopterin) mit Chlor in Methanol beschrieben. Das Hauptprodukt, das sie erhielten, war 5-Methoxyuramil-7-oxalsäuremethylester und eine kleine Menge eines Glykolhalbäthers. ÜberdieshabenScopfundKottler (vgl. Ann. 539, 128 [z939]) gezeigt, daß 2-Amino-4, 6-dioxypteridin (Xanthopterin) durch Natriumchlorat in salzsauren Lösungen bei ioo° C rasch angegriffen wird, wobei über intermediär entstandene Zwischenprodukte hinweg Oxalsäure, Glyoxylsäure, Guanidin und Harnstoff gebildet werden. Es ist auch bekannt, daB bei der Behandlung von 2-Amino-4-oxy-6-pteridincarbonsäure mit Chlorwasser Hydrolyse eintritt und Guanidin erhalten werden kann (vgl. Angier u. a., Science 103, 667 [z946]). Ebenso haben Wh ittle u. a. (vgl. Journ. Amer. Chem. Soc. 69, 1786 [z947]) gezeigt, daB Natriumchlorat mit Pteroylglutaminsäure bei 8o' C unter Spaltung des Moleküls und Bildung von 2-Amino-4-oxypteridin-6-carbonsäure und 4. Amino-3, 5-dichlorbenzoylglutaminsäure reagierten. Der frühere Stand der Technik, wie vorstehend erläutert, läßt erkennen, daß die Einwirkung von Halogenen, wie z. B. von Chlor, auf substituierte Pteridine zahlreiche und verschiedene Produkte erzeugt und den Abbau des Pteridinringes selbst verursacht.Wieland and Purrmann (cf. Liebigs Ann. Chem. 54q., 179 [z940]) the conversion of 2-amino-4, 6, 7-trioxypteridine (leucopterin). in acetic acid and Hydrochloric acid with chlorine. The constitution of the product they got is still not definitely been defined. It is assumed, however, that it is 2-imino-5-oxyuramil-7-oxamide acted. In a similar way, Wieland and Tartter (see ibid. 543, 287 [z940]) the implementation of 2, 4, 6, 7-Tetraoxypteridin (Desiminoleukopterin) with Described chlorine in methanol. The main product they received was methyl 5-methoxyuramil-7-oxalate and a small amount of a glycolic half ether. In addition, Scopf and Kottler (cf. Ann. 539, 128 [z939]) showed that 2-amino-4, 6-dioxypteridin (xanthopterin) by Sodium chlorate in hydrochloric acid solutions is attacked rapidly at 100 ° C, with over intermediate products resulting from oxalic acid, glyoxylic acid, guanidine and urea are formed. It is also known that in the treatment of 2-amino-4-oxy-6-pteridinecarboxylic acid hydrolysis occurs with chlorinated water and guanidine can be obtained (cf. Angier et al., Science 103, 667 [z946]). Likewise, Wh ittle et al. (see Journ. Amer. Chem. Soc. 69, 1786 [z947]) showed that sodium chlorate with pteroylglutamic acid at 8o 'C with cleavage of the molecule and formation of 2-amino-4-oxypteridine-6-carboxylic acid and 4. Amino-3, 5-dichlorobenzoylglutamic acid reacted. The earlier state of the art, As explained above, it can be seen that the action of halogens, such as. B. from chlorine to substituted pteridines produced numerous and different products and causes the breakdown of the pteridine ring itself.

Die erfindungsgemäßen dihalogenierten, substituierten Pteridine sind neue Verbindungen der allgemeinen Formel In dieser Formel bedeuten R1 und R2 Amino-, Hydroxyl-, Alkylamino- oder Dialkylaminoreste, R30C einen Carboxylrest oder ein Aminosäureamid davon, X und Y Wasserstoff oder niedrigmolekulare Alkylreste und Hal Halogen.The dihalogenated, substituted pteridines according to the invention are new compounds of the general formula In this formula, R1 and R2 are amino, hydroxyl, alkylamino or dialkylamino radicals, R30C is a carboxyl radical or an amino acid amide thereof, X and Y are hydrogen or low molecular weight alkyl radicals and Hal is halogen.

Erfindungsgemäß werden diese dihalogensubstituierten Pteridine hergestellt durch Umsetzung von Verbindungen der allgemeinen Formel worin R1, R3, R3, X und Y die oben angegebene Bedeutung haben, mit Halogen und Abtrennung des gewünschten dihalogenierten, substituierten Pteridins aus der Reaktionsmischung.According to the invention, these dihalosubstituted pteridines are prepared by reacting compounds of the general formula wherein R1, R3, R3, X and Y have the meaning given above, with halogen and separation of the desired dihalogenated, substituted pteridine from the reaction mixture.

Das erfindungsgemäße Verfahren wird vorzugsweise in einem Lösungsmittel, wie z. B. einer wäßrigen Lösung einer Mineralsäure, durchgeführt, zu der das Halogen als Gas oder in einem geeigneten Lösungsmittel, wie z. B. Essigsäure, gegeben wird. Das Halogen kann auch in situ gebildet werden, wie z. B. durch Verwendung von Wasserstoffperoxyd oder Jodmonochlorid in Gegenwart von Salzsäure.The inventive method is preferably carried out in a solvent, such as B. an aqueous solution of a mineral acid, carried out to which the halogen as a gas or in a suitable solvent, such as. B. acetic acid is given. The halogen can also be generated in situ, e.g. B. by using hydrogen peroxide or iodine monochloride in the presence of hydrochloric acid.

Die substituierten Pteridine, die als Reaktionskomponenten bei dem erfindungsgemäßen Verfahren verwendet werden, sind in der chemischen Literatur beschrieben. Im allgemeinen können sie hergestellt werden durch Umsetzung eines q., 5-Diaminopyrimidins, das in den 2- und 6-Stellungen die gewünschten Substituenten trägt, wie z. B. 2, q., 5-Triamino-6-oxypyrimidin, mit einem Halogenaldehyd oder -keton, wie z. B. Trihalogenaceton, Dihalogenpropionaldehyd, oder Butylchloral, und einer primären oder sekundären Aminobenzoesäure oder einem Aminosäureamid einer solchen Säure, wie z. B. p Aminobenzoylglutaminsäure. Diese allgemeine Methode ist beschrieben im Journ. Amer. Chem. SOC. 70, 19 und 1922 ((1948), ebenda 71, 1753 (19q.9) sowie an anderen Stellen in der chemischen Literatur.The substituted pteridines, which are used as reaction components in the Methods according to the invention are used are described in the chemical literature. In general, they can be prepared by reacting a q., 5-diaminopyrimidine, which carries the desired substituents in the 2- and 6-positions, such as. B. 2, q., 5-triamino-6-oxypyrimidine, with a haloaldehyde or ketone, such as. B. trihaloacetone, Dihalopropionaldehyde, or butylchloral, and a primary or secondary aminobenzoic acid or an amino acid amide of such an acid, such as. B. p aminobenzoylglutamic acid. This general method is described in the Journ. Amer. Chem. SOC. 70, 19 and 1922 ((1948), ibid. 71, 1753 (19q.9) and at other places in the chemical literature.

Das erfindungsgemäße Verfahren wird vorzugsweise in einem Temperaturbereich von -io bis 35 "C durchgeführt. Es Wurde gefunden, daß bessere Ausbeuten bei tieferen Temperaturen des obenerwähnten Bereichs erzielt werden.The process according to the invention is preferably carried out in a temperature range from -io to 35 ° C. It has been found that better yields are achieved at lower temperatures in the above-mentioned range.

Bei der Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens werden vorzugsweise ungefähr 2 Mol Halogen für jedes Mol des benutzten Ausgangsstoffes verwendet. Werden mehr als 2 Mol Halogen verwendet, so kann eine weitere Umsetzung zwischen dem erhaltenen Dihalogenderivat und dem überschüssigen Halogen stattfinden, die zu vollständigem Abbau des Pteridinmoleküls führen kann. Ebenso ergibt die Zugabe von wesentlich weniger als 2 1M1 Halogen ein Gemisch von Endprodukten.When carrying out the method according to the invention, preference is given to about 2 moles of halogen are used for each mole of raw material used. Will more than 2 moles of halogen are used, a further reaction between the obtained Dihalogen derivative and the excess halogen take place, leading to complete Degradation of the pteridine molecule can result. Likewise, the addition of essential results less than 2 1M1 halogen a mixture of end products.

Die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren hergestellten Verbindungen, die in der 9- und oder io-Stellung keine Substituenten besitzen, bilden das Hydrohalogenidsalz der gewünschten Dihalogenverbindung, das beim Fortschreiten der Reaktion ausfällt. Bei den Verbindungen, die Substituenten in der 9- und/oder io-Stellung tragen, fällt jedoch das halogenwasserstoffsaure Salz nicht aus, und die gewünschte Dihalogenverbindung wird durch Neutralisation des Säuresalzes isoliert.The compounds prepared by the process according to the invention, which have no substituents in the 9- or io-position, form the hydrohalide salt the desired dihalo compound which precipitates as the reaction proceeds. In the case of the compounds which have substituents in the 9- and / or io-position, falls however, the hydrohalic acid salt is not sufficient, and the desired dihalo compound is isolated by neutralizing the acid salt.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen besitzen hervorragende Wirksamkeit als Antagonisten gegenüber Pteroylglutaminsäure und sind dementsprechend von sehr großer Bedeutung in der Medizin in experimenteller Beziehung und möglicherweise auch für die Behandlung von Krankheiten.The compounds according to the invention are extremely effective as antagonists to pteroylglutamic acid and are accordingly of very of great importance in medicine in an experimental relationship and possibly also for the treatment of diseases.

Das erfindungsgemäße Verfahren soll durch folgende Beispiele näher erläutert werden, in denen typische dihalogensubstituierte Pteridine aus den entsprechenden substituierten Pteridinen durch direkte Halogenierung hergestellt werden. Wenn nichts anderes angegeben, bedeuten die Teile Gewichtsteile. Beispiel i Eine Lösung von 36 Teilen Brom in 8oo Teilen Eisessig und Zoo Teilen Essigsäureanhydrid wird nach und nach in dem Maße, in dem sie entfärbt wird, einer Aufschlämmung von ioo Teilen Pteroy iglutaminsäure in a5oo Teilen Eisessig bei 7o'(# zugesetzt. Nach i Stunde wird die Mischung langsam gekühlt und filtriert.The method according to the invention is intended to be detailed by the following examples are explained in which typical dihalosubstituted pteridines from the corresponding substituted pteridines can be prepared by direct halogenation. If nothing otherwise stated, the parts are parts by weight. Example i A solution of 36 parts of bromine in 8oo parts of glacial acetic acid and zoo parts of acetic anhydride is used after and to the extent that it is decolorized, a slurry of 100 parts Pteroy iglutamic acid in 500 parts of glacial acetic acid was added at 70 '(#. After 1 hour the mixture is slowly cooled and filtered.

In diesem Beispiel ist i Mol Brom für jedes Mol Pteroylglutaminsäure verwendet worden. Es wurde eine Mischung erhalten, die schwieriger zu reinigen war als bei Versuchen, bei denen 2 Mol Brom für jedes Mol des Ausgangsstoffes verwendet wurden. Beispiel a Eine Lösung von 88,2g Pteroylglutaminsäure in 882 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 882 ccm Wasser verdünnt und auf o°C abgekühlt. Man hitet Chlorgas ein, bis 32 g absorbiert worden sind. Nach halbstündigem Kühlen wird die dicke Aufschlämmung filtriert und mit 5oo ccm verdünnter Salzsäure gewaschen. Der Filterkuchen wird in i 1 konzentrierter Salzsäure gelöst, mit Aktivkohle behandelt und filtriert. Das Filtrat wird mit 11 Wasser verdünnt und die Mischung gekühlt. Der Niederschlag wird durch Filtrieren abgetrennt und mit verdünnter Salzsäure gewaschen. Der Filterkuchen wird in 11 Wasser aufgeschlämmt und Ammoniumhydroxyd zwecks Lösung zugesetzt. Die Lösung wird filtriert und langsam unter Rühren zu 61 Aceton zugegeben. Das ausgefallene An lmoniumsalz wird abfiltriert und mit Aceton gewaschen. Nach dem Trocknen werden 619 3', 5'-Dichlorpteroylglutaminsäure erhalten. Beispiel 3 Eine Lösung von 4,4.9 Pteroylglutaminsäure in 44 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 2o ccm Wasser verdünnt und die erhaltene Lösung auf o0 C abgekühlt. Dann werden 1,4 g Chlor, irl 24 ccm Eisessig gelöst, - zugegeben. Nach 5 Minuten langem Stehen wird die Lösung mit 50 ccm Wasser verdünnt, und die 3', 5'-Dichlorpteroylglutaminsäure, wie in dem Beispiel e angegeben, isoliert und gereinigt. Beispiel q. Eine Lösung von 5,7 g Pteroyl-a-glutamylglutamÜnsäure (Diopterin) in 57 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 57 ccm Wasser verdünnt, auf o' C abgekühlt und mit 1,6 bis 1,7 g Chlor behandelt. Die Mischung wird über Nacht gekühlt. Der Niederschlag, der durch Filtrieren isoliert wird, wird in 250 ccm konzentrierter Salzsäure gelöst. Nachdem die Lösung mit Aktivkohle behandelt und filtriert worden ist, verdünnt man das Filtrat mit 5oo bis 6oo ccm Wasser. Nach dem Kühlen über Nacht wird der Niederschlag abfiltriert, mit verdünnter Salzsäure gewaschen und in Wasser mit Ammoniumhydroxyd gelöst. Das Volumen beträgt 128 ccm und wird langsam in 128o ccm Aceton einfließen gelassen. Das Ammoniumsalz der 3', 5'-Dichlorpteroyl-a-glutamylglutaminsäure wird filtriert, mit Aceton gewaschen und getrocknet. Es wird eine Ausbeute von 7,8 g erhalten. Beispiel 5 Eine Lösung von 6,86 g Pteroyl-y-glutamyl-y-glutamylglutaminsäure (Teropterin) in 73,1 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 73,1 ccm Wasser verdünnt und auf o' C abgekühlt. 1,7 g Chlor werden dann eingeleitet. Die Mischung wird eine weitere l,@z Stunde gekühlt, dann filtriert und mit kalter verdünnter Salzsäure gewaschen. Der Filterkuchen wird in wenig Wasser mit Ammoniumhydroxyd in Lösung gebracht. Das Volumen beträgt 92 ccm und wird langsam zu 6oo ccm Aceton zugesetzt. Das klebrige Gummi wird durch Dekantieren und Verreiben mit Alkohol von Aceton befreit. Das Ammoniumsalzder 3', 5'-Dichlorpteroyl-y-glutamyl-y-glutamylglutaminsäure wird durch Filtrieren isoliert, mit Alkohol gewaschen und getrocknet; das Gewicht beträgt 5,2 g. Beispiel 6 Eine Lösung von 4,49 Pteroylglutaminsäure in q.4 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 33 ccm Wasser verdünnt. Nachdem auf 30°C erwärmt wurde, gibt man 3,25 g jodmonochlorid zu. Nach dem Kühlen über Nacht wird der schwere Niederschlag filtriert, mit verdünnter Salzsäure gewaschen und in 30 ccm konzentrierter Salzsäure gelöst. Die Lösung wird mit 3o ccm Wasser verdünnt und die Mischung gekühlt und filtriert. Der Filterkuchen wird mit verdünnter Salzsäure gewaschen und in 25o ccm Wasser aufgeschlämmt. Zur Aufschlämmung wird Natriumhydroxyd bis zu einem pH-Wert von i bis 2 zugegeben. Die Flüssigkeit wird abfiltriert und der Filterkuchen mit Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen werden 3,2 g 3', 5'-Dijodpteroylglutaminsäure erhalten. Beispiel 7 Eine Lösung von 44J9 Pteroylglutaminsäure in 441 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 441 ccm Wasser verdünnt und auf o°C abgekühlt. Bromgas wird eingeleitet, bis 33,9g absorbiert worden sind. Nach dem Kühlen, etwa 2o Minuten lang, wird der Niederschlag abfiltriert und mit kalter, verdünnter Salzsäure gewaschen. Der Filterkuchen wird in 5oo ccm konzentrierter Salzsäure gelöst, mit Aktivkohle behandelt und filtriert. Das Filtrat wird mit 5oo ccm Wasser verdünnt und die Mischung gekühlt. Der Niederschlag wird durch Filtrieren abgetrennt, mit kalter, verdünnter Salzsäure gewaschen und in 1250 ccm Wasser aufgeschlämmt. Die Aufschlämmung wird durch Zusatz von Ammoniumhydroxyd in Lösung gebracht. Die Lösung wird langsam und unter Rühren zu 6875 ccm Aceton zugegeben. Das ausgefallene Ammoniumsalz der 3', 5'-Dibrompteroylglutaminsäure wird abfiltriert, mit Aceton gewaschen und getrocknet. Es werden 459 Produkt erhalten. Beispiel 8 Eine Lösung von 22 g q. -4minopteroylglutaminsäure in 300 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 300 ccm Wasser verdünnt. Nach dem Abkühlen auf o° C leitet man 7,7 g Chlorgas ein. Die Mischung wird etwas länger gekühlt, filtriert und mit Zoo ccrn kalter, verdünnter Salzsäure gewaschen; die Lösung wird mit Aktivkohle behandelt und filtriert. Das Filtrat wird mit Wasser verdünnt, die Mischung wird gekühlt und filtriert. Der Filterkuchen wird mit verdünnter Salzsäure gewaschen und dann in 5oo ccm Wasser mit Ammoniumhydroxyd gelöst. Nachdem auf 7o''C erhitzt wurde, wird die dicke Masse 'in 245o ccm Aceton gegossen und gerührt. Nach d.--m Kühlen üb`r Nacht wird das Ammoniumsalz filtriert, mit Aceton gewaschen und getrocknet und ergibt 17#4 g 3', 5'-Dichlor-4-aminopteroy lglutaminsäure. Beispiel 9 Eine Lösung von 4,49 4-Aminopteroylglutaminsäure in 44 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 44 ccm Wasser verdünnt und auf o' C gekühlt. Dann werden 3,59 Bromdampf eingeleitet. Nach dem Filtrieren und Waschen mit verdünnter Salzsäure wird der Filterkuchen in 11 Wasser aufgeschlämmt und durch Zusatz von Natriumhydroxyd in Lösung gebracht. Die Lösung wird mit Salzsäure auf einen pH-Wert von 2 bis 3 eingestellt, und der Niederschlag wird abfiltriert. Der Filterkuchen wird erneut in 11 Wasser aufgeschlämmt und durch Zusatz von Magnesiumoxyd bei 6o' C aufgelöst. Nach der Zugabe von Aktivkohle und dem Klären wird das Filtrat abgekühlt; das ausgefallene Magnesiumsalz wird abfiltriert und aus 11 siedendem Wasser umkristallisiert. Nach dem Abkühlen wird das Magnesiumsalz abfiltriert, mit Wasser und Aceton gewaschen und getrocknet. Das Magnesiumsalz der 3', 5'-Dibrom-4-aminopteroylglutaminsäure hat ein Gewicht von 2-19-9- Beispiel io Eine Lösung von 4,12 Teilen 4-Aminopteroylaminomalonsäurewird durch Erhitzen auf 5o= C mit i 5oo Volumina 6 n-Salzsäure und Abfiltrieren der kleinen Menge an nicht gelöstem festem Stoff hergestellt. Das Filtrat wird auf o bis 2,C abgekühlt; dann wird langsam Chlor in die Lösung eingeleitet, bis etwa 1,4 Teile absorbiert worden sind. Die Lösung läßt man ?o Minuten b°i o bis 5'C stehen. Dann wird 5o°!oiges Natriumhydroxyd langsam zugegeben, bis die Lösung einen pH-N,#'ert von 2 bis 2,5 aufweist, wobei man durch Außenkühlung dafür sorgt, daß die Temperatur unterhalb 3o°C gehalten wird. Der hellbraune, amorphe feste Körper wird bei 15° C abfiltriert und mit kalter 6n-Salzsäure gut ausgewaschen. Der nasse Filterkuchen wird gereinigt durch Auflösen in kalter, konzentrierter (36°/oiger) Salzsäure und Verdünnen dieser Lösung mit 2 Volumina heißem Wasser; schließlich wird das Material als tiefgelbes Ammoniumsalz durch Zusatz von Aceton zu der wäßrigen Lösung des Salzes isoliert; die Ausbeute beträgt 1,59 Teile an 3', 5'-Dichlor-4-aminopteroylaminomaloDsäure. Beispiel ii Eine Probe von 4,24 Teilen 4-Aminopteroyl-dl-isoleucin wird in 63 Volumina konzentrierter (36°/Qiger) Salzsäure gelöst; dann werden 42 Volumina Wasser zugesetzt und die Temperatur auf 5°C erniedrigt. Zu dieser Lösung werden bei o bis 5°C langsam 1,4 Teile Chlor zugegeben, was die Abscheidung einer kleineren Menge eines hellgelben festen Stoffes zur Folge hat. Diese Aufschlämmung läßt man 2o Minuten bei o bis 5°C stehen; während dieser Zeit scheidet sich eine größere Menge an hellgelbem, festen Stoff ab. Schließlich werden 2i Teile Wasser zugegeben, was die Bildung eines schweren, gelatinösen Niederschlags verursacht. Nach halbstündigem Stehen bei o bis 5'C wird der feste Stoff abfiltriert und mit 5o Volumina 5 n-Salzsäure gewaschen.In this example, one mole of bromine has been used for each mole of pteroylglutamic acid. A mixture was obtained which was more difficult to purify than experiments using 2 moles of bromine for each mole of starting material. Example a A solution of 88.2 g of pteroylglutamic acid in 882 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 882 cc of water and cooled to 0 ° C. Chlorine gas is added until 32 g has been absorbed. After cooling for half an hour, the thick slurry is filtered and washed with 500 cc of dilute hydrochloric acid. The filter cake is dissolved in 1 liter of concentrated hydrochloric acid, treated with activated charcoal and filtered. The filtrate is diluted with 1 liter of water and the mixture is cooled. The precipitate is separated off by filtration and washed with dilute hydrochloric acid. The filter cake is slurried in 1 liter of water and ammonium hydroxide is added to dissolve it. The solution is filtered and slowly added to acetone with stirring. The precipitated ammonium salt is filtered off and washed with acetone. After drying, 61 9 3 '5'-Dichlorpteroylglutaminsäure obtained. EXAMPLE 3 A solution of 4,4.9 pteroylglutamic acid in 44 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 20 cc of water and the resulting solution is cooled to 00C. Then 1.4 g of chlorine, dissolved around 24 ccm of glacial acetic acid, are added. After standing for 5 minutes, the solution is diluted with 50 cc of water, and the 3 ', 5'-dichloropteroylglutamic acid, as indicated in example e, is isolated and purified. Example q. A solution of 5.7 g of pteroyl-a-glutamylglutamic acid (Diopterin) in 57 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 57 cc of water, cooled to o'C and treated with 1.6 to 1.7 g of chlorine. The mixture is refrigerated overnight. The precipitate, which is isolated by filtration, is dissolved in 250 cc of concentrated hydrochloric acid. After the solution has been treated with activated charcoal and filtered, the filtrate is diluted with 500 to 600 cc of water. After cooling overnight, the precipitate is filtered off, washed with dilute hydrochloric acid and dissolved in water with ammonium hydroxide. The volume is 128 cc and is slowly poured into 128o cc of acetone. The ammonium salt of 3 ', 5'-dichloropteroyl-a-glutamylglutamic acid is filtered, washed with acetone and dried. A yield of 7.8 g is obtained. Example 5 A solution of 6.86 g of pteroyl-γ-glutamyl-γ-glutamylglutamic acid (teropterin) in 73.1 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 73.1 cc of water and cooled to o'C. 1.7 g of chlorine are then passed in. The mixture is cooled for a further 1.5 hours, then filtered and washed with cold, dilute hydrochloric acid. The filter cake is dissolved in a little water with ammonium hydroxide. The volume is 92 cc and is slowly added to 600 cc of acetone. The sticky gum is freed from acetone by decanting and triturating with alcohol. The ammonium salt of 3 ', 5'-dichloropteroyl-γ-glutamyl-γ-glutamylglutamic acid is isolated by filtration, washed with alcohol and dried; the weight is 5.2 g. Example 6 A solution of 4.49 pteroylglutamic acid in 4 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 33 cc of water. After heating to 30 ° C., 3.25 g of iodine monochloride are added. After cooling overnight, the heavy precipitate is filtered off, washed with dilute hydrochloric acid and dissolved in 30 cc of concentrated hydrochloric acid. The solution is diluted with 30 cc of water and the mixture is cooled and filtered. The filter cake is washed with dilute hydrochloric acid and suspended in 25o ccm of water. Sodium hydroxide is added to the slurry to a pH of 1-2. The liquid is filtered off and the filter cake is washed with water. After drying, 3.2 g of 3 ', 5'-diiodopteroylglutamic acid are obtained. Example 7 A solution of 44J9 pteroylglutamic acid in 441 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 441 cc of water and cooled to 0.degree. Bromine gas is introduced until 33.9g has been absorbed. After cooling, for about 20 minutes, the precipitate is filtered off and washed with cold, dilute hydrochloric acid. The filter cake is dissolved in 500 cc of concentrated hydrochloric acid, treated with activated charcoal and filtered. The filtrate is diluted with 500 cc of water and the mixture is cooled. The precipitate is separated off by filtration, washed with cold, dilute hydrochloric acid and suspended in 1250 cc of water. The slurry is brought into solution by adding ammonium hydroxide. The solution is added slowly and with stirring to 6875 cc of acetone. The precipitated ammonium salt of 3 ', 5'-dibrompteroylglutamic acid is filtered off, washed with acetone and dried. 459 products are obtained. Example 8 A solution of 22 g q. -4minopteroylglutamic acid in 300 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 300 cc of water. After cooling to 0 ° C., 7.7 g of chlorine gas are introduced. The mixture is cooled a little longer, filtered, and washed with cold, dilute hydrochloric acid; the solution is treated with activated charcoal and filtered. The filtrate is diluted with water, the mixture is cooled and filtered. The filter cake is washed with dilute hydrochloric acid and then dissolved in 500 cc of water with ammonium hydroxide. After heating to 70 ° C, the thick mass is poured into 245 ° cc of acetone and stirred. After cooling overnight, the ammonium salt is filtered, washed with acetone and dried and yields 17 # 4 g of 3 ', 5'-dichloro-4-aminopteroylglutamic acid. Example 9 A solution of 4.49 4-aminopteroylglutamic acid in 44 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 44 cc of water and cooled to o'C. Then 3.59 bromine vapor are introduced. After filtering and washing with dilute hydrochloric acid, the filter cake is slurried in 1 liter of water and dissolved by adding sodium hydroxide. The solution is adjusted to pH 2 to 3 with hydrochloric acid and the precipitate is filtered off. The filter cake is slurried again in water and dissolved at 60 ° C. by adding magnesium oxide. After the addition of activated charcoal and clarification, the filtrate is cooled; the precipitated magnesium salt is filtered off and recrystallized from 11 boiling water. After cooling, the magnesium salt is filtered off, washed with water and acetone and dried. The magnesium salt of 3 ', 5'-dibromo-4-aminopteroylglutamic acid has a weight of 2-19-9- Example 10 A solution of 4.12 parts of 4-aminopteroylaminomalonic acid is prepared by heating to 50 = C with 1500 volumes of 6N hydrochloric acid and filtering off the small amount of undissolved solid. The filtrate is cooled to 0 to 2 ° C .; chlorine is then slowly bubbled into the solution until about 1.4 parts have been absorbed. The solution is allowed to stand for 0 minutes at between 0 and 5 ° C. Then 50% sodium hydroxide is slowly added until the solution has a pH of 2 to 2.5, external cooling being used to ensure that the temperature is kept below 30 ° C. The light brown, amorphous solid body is filtered off at 15 ° C and washed well with cold 6N hydrochloric acid. The wet filter cake is cleaned by dissolving it in cold, concentrated (36%) hydrochloric acid and diluting this solution with 2 volumes of hot water; Finally, the material is isolated as a deep yellow ammonium salt by adding acetone to the aqueous solution of the salt; the yield is 1.59 parts of 3 ', 5'-dichloro-4-aminopteroylaminomaloadic acid. Example ii A sample of 4.24 parts of 4-aminopteroyl-dl-isoleucine is dissolved in 63 volumes of concentrated (36 ° / qiger) hydrochloric acid; then 42 volumes of water are added and the temperature is lowered to 5 ° C. 1.4 parts of chlorine are slowly added to this solution at 0 to 5 ° C., which results in the deposition of a smaller amount of a light yellow solid substance. This slurry is allowed to stand at 0 to 5 ° C. for 20 minutes; During this time, a large amount of light yellow, solid material separates out. Finally, 2i parts of water are added which causes the formation of a heavy, gelatinous precipitate. After standing for half an hour at 0 to 5 ° C., the solid substance is filtered off and washed with 50 volumes of 5N hydrochloric acid.

Dieses Material wird, wie in Beispiel io oben beschrieben, gereinigt; es wird eine Ausbeute von 6,3 Teilen an hellgelbem Ammoniumsalz des 3', 5'-Dichlor-4-aminopteroyl-dl-isoleucins erhalten. Beispiel 12 Eine Probe von 4,io Teilen 4-Aminopteroyl-dlvalin wird in einer Lösung von 168 Volumina konzentrierter (36°/oiger) Salzsäure und 21 Volumina Wasser bei 3o°C gelöst. Die Temperatur wird auf o bis 5°C erniedrigt, dann werden 44 Teile Chlor langsam zugegeben; diese Zugabe hat die Abscheidung einer kleinen Menge an gelbem festem Stoff zur Folge. Man läßt die Reaktionsmischung 2o Minuten lang bei o bis 5'C stehen und gibt dann 147 Volumina Wasser dazu, wodurch mehr gelbe feste Substanz ausfällt. Nach 30 Minuten langem Stehen bei o bis 5'C wird der feste Stoff abfiltriert und mit 5o Volumina 5n-Salzsäure gewaschen.This material is purified as described in Example 10 above; a yield of 6.3 parts of the light yellow ammonium salt of 3 ', 5'-dichloro-4-aminopteroyl-dl-isoleucine is obtained. Example 12 A sample of 4.0 parts of 4-aminopteroyl-dlvaline is dissolved in a solution of 168 volumes of concentrated (36%) hydrochloric acid and 21 volumes of water at 30 ° C. The temperature is lowered to 0 to 5 ° C, then 44 parts of chlorine are slowly added; this addition results in the deposition of a small amount of yellow solid. The reaction mixture is left to stand for 20 minutes at 0 to 5 ° C. and 147 volumes of water are then added, as a result of which more yellow solid substance precipitates. After standing at 0 to 5 ° C for 30 minutes, the solid substance is filtered off and washed with 50 volumes of 5N hydrochloric acid.

Dieses Material wird gereinigt, wie in dem Beispiel io oben angegeben; es wurde eine Ausbeute von 13,8 Teilen an Ammoniumsalz des 3', 5'-Dichlor-4-aminopteroyl-dl-valin erhalten. Beispiel 13 Eine Lösung von 4,9 g 9, io-Dimethylpteroylglutaminsäure in q.¢ ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 44 ccm Wasser verdünnt und auf o°C abgekühlt; dann werden 1,4 g Chlor eingeleitet. Nachdem man die Lösung eine 1/2 Stunde lang in der Kälte stehenließ, verdünnt man sie mit Wasser, um nach dem Filtrieren; Auswaschen und Trocknen 2.5,q 3',5'-Dichlor-9,io-dimethylpteroylglutamins;,iure zu erhalten. Beispiel 14 Eine Lösung von 4,59 9-Methylpt2roylglutaminsäure in 44 ccm konzentrierter Salzsäure wird mit 44 ccm Wasser verdünnt und auf o' C abgekühlt. Dann leitet man a g Chlor ein. Zu der erhaltenen Lösung wird bei o' C Natriumhydroxyd bis zu einem PH-Wert von etwa 3 zugegeben. Der Niederschlag von 3', 5'-Dichlor-9-methylpteroylglutaminsäure wird durch Filtrieren isoliert und wiegt nach dem ZVaschen und Trocknen 4,0 g. Beispiel 15 Eine Lösung von 4,9 g a,-Amino-9, io-dimethylpteroylglutaminsäure in 44 ccm konzentrierter Sälzsäure wird mit qq. ccm Wasser verdünnt und auf o° C abgekühlt. Dann leitet man 1,4 g Chlor ein. Nach io bis 15 Minuten langem Stehen in der Kälte wird die Lösung mit Wasser verdünnt und auf einen pH-'Vert von etwa 3 bis q. mit Natriumhydroxyd neutralisiert. Der Niederschlag, 3', 5'-Dichlor-4-amino-9, io-dimethylpteroylglutaminsäure, wiegt nach dem Filtrieren, Waschen und Trocknen 3,2 g. Beispiel 16 Eine Lösung .von 5 g 4.-Amino-NI°-methyIpt2roylglutaminsäure in qq. ccm konzentrierter Salzsäure wird mit qq. ccm Wasser verdünnt und auf o° C abgekühlt. Dann leitet man 1,4 g Chlor ein. Nach 1o bis 2o Minuten langem Stehen werden 88 ccm Wasser zugegeb°n. Zu der gekühlten Lösung wird Natriumhydroxyd bis zu einem pH-Wert von 3 bis q. zugesetzt. Der gummiartige feste Körper wird weitere il/.Stunden gekühlt, filtriert, mit Wasser gewaschen und in Zoo ccm Essigsäure gelöst. Die Lösung wird mit Aktivkohle behandelt, geklärt, mit 400 ccm Wasser verdünnt und gekühlt. Der Niederschlag von 3', 5'-Dichlor 4-amino-l@'1°-methylpteroylglutaminsäure wird abfiltri°rt, mit Wasser und Aceton gewaschen; er wiegt nach dem Trocknen 2,1 g. Beispiel 17 Eine Lösung von q.,9 g Nl°-methylpteroylglutaminsäure in 44 ccm konzentrierter - Salzsäure wird mit 44 ccm Wasser verdünnt und auf o bis 5° C abgekühlt. Etwa 1,¢ g Chlor werden eingeleitet und die Lösung 15 bis 2o Minuten stehengelassen. Sie wird dann mit 88 ccm Wasser verdünnt und mit Natriumhydroxyd bis zu einem pH-Wert von etwa 2 bis 3 versetzt. Der sich abscheidende gummiartige Stoff verfestigt sich nach und nach beim Kühlen während i Stunde. Das Material wird filtriert, mit Wasser gewaschen und in 230 ccm siedender Essigsäure gelöst. Die Lösung wird mit Aktivkohle behandelt und geklärt. Das Filtrat wird mit Soo ccm heißem Wasser versetzt. Nach dem Kühlen über Nacht wird der Niederschlag, 3', 5'-Dichlor-.11°-methylpteroylglutaminsäure, abfiltriert, mit Wasser gewaschen; er wiegt nach dem Trocknen 3,6 g. Beispiel 18 Eine Lösung von 1,76 g 2-Dimethylamino-q.-aminopteroylglutaminsäure in 25 bis 3o ccm konzentrierter Salzsäure und 22 bis 25 ccm 5n-Salzsäure wird auf o° C abgekühlt. Dann werden o,6 g Chlorgas eingeleitet. Nach io bis 15 Minuten langem Stehen in der Kälte setzt man 50 ccm Wasser zu und kühlt weiter. Der gelbe feste Stoff wird abfiltriert und in warmem Wasser gelöst. Die Lösung wird mit Natriumhydroxyd bis zu einem PH-Wert von 3 bis q: versetzt. Die Mischung wird gekühlt und filtriert; der Niederschlag, 3', 5'- Dichlor-2-dimethylamino-q.-aminopteroylglutaminsäure, wiegt nach dem Trocknen 1,24 g. This material is cleaned as indicated in Example 10 above; a yield of 13.8 parts of the ammonium salt of 3 ', 5'-dichloro-4-aminopteroyl-dl-valine was obtained. EXAMPLE 13 A solution of 4.9 g of 9, io-dimethylpteroylglutamic acid in q. ¢ cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 44 cc of water and cooled to 0 ° C; then 1.4 g of chlorine are passed in. After the solution has stood in the cold for 1/2 hour, it is diluted with water, after filtering; Washing and drying 2.5, q 3 ', 5'-dichloro-9, io-dimethylpteroylglutamine; to obtain iure. EXAMPLE 14 A solution of 4,59 cc of 9-methylptroylglutamic acid in 44 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 44 cc of water and cooled to o'C. Then ag chlorine is passed in. Sodium hydroxide is added to the resulting solution at o'C to a pH of about 3. The precipitate of 3 ', 5'-dichloro-9-methylpteroylglutamic acid is isolated by filtration and weighs 4.0 g after washing and drying. Example 15 A solution of 4.9 ga, -amino-9, io-dimethylpteroylglutamic acid in 44 ccm of concentrated hydrochloric acid is treated with qq. ccm of water and cooled to 0 ° C. 1.4 g of chlorine are then passed in. After standing in the cold for 10 to 15 minutes, the solution is diluted with water and brought to a pH of about 3 to 3. neutralized with sodium hydroxide. The precipitate, 3 ', 5'-dichloro-4-amino-9, io-dimethylpteroylglutamic acid, weighs 3.2 g after filtering, washing and drying. Example 16 A solution of 5 g of 4.-Amino-NI ° -methyIpt2roylglutamic acid in qq. ccm of concentrated hydrochloric acid is mixed with qq. ccm of water and cooled to 0 ° C. 1.4 g of chlorine are then passed in. After standing for 10 to 20 minutes, 88 cc of water are added. Sodium hydroxide is added to the cooled solution up to a pH of 3 to q. added. The rubbery solid body is cooled for a further half an hour, filtered, washed with water and dissolved in acetic acid. The solution is treated with activated charcoal, clarified, diluted with 400 ccm of water and cooled. The precipitate of 3 ', 5'-dichloro 4-amino-l @' 1 ° -methylpteroylglutamic acid is filtered off, washed with water and acetone; it weighs 2.1 g after drying. EXAMPLE 17 A solution of 9 g of Nl ° -methylpteroylglutamic acid in 44 cc of concentrated hydrochloric acid is diluted with 44 cc of water and cooled to 0 to 5 ° C. About 1. [g of chlorine] are passed in and the solution is left to stand for 15 to 20 minutes. It is then diluted with 88 cc of water and sodium hydroxide is added to a pH of about 2 to 3. The rubbery substance which separates out gradually solidifies on cooling for one hour. The material is filtered, washed with water and dissolved in 230 cc of boiling acetic acid. The solution is treated with activated charcoal and clarified. Soo cc of hot water is added to the filtrate. After cooling overnight, the precipitate, 3 ', 5'-dichloro-.11 ° -methylpteroylglutamic acid, is filtered off and washed with water; it weighs 3.6 g after drying. Example 18 A solution of 1.76 g of 2-dimethylamino-q.-aminopteroylglutamic acid in 25 to 30 cc of concentrated hydrochloric acid and 22 to 25 cc of 5N hydrochloric acid is cooled to 0 ° C. Then 0.6 g of chlorine gas are introduced. After standing in the cold for 10 to 15 minutes, add 50 cc of water and continue cooling. The yellow solid is filtered off and dissolved in warm water. Sodium hydroxide is added to the solution up to a pH of 3 to q :. The mixture is cooled and filtered; the precipitate, 3 ', 5'-dichloro-2-dimethylamino-q.-aminopteroylglutamic acid, weighs 1.24 g after drying.

Claims

PATENT CLAIMS: i. Process for the preparation of dihalogenated, substituted pteridines of the general formula wherein R1 and R2 are amino, hydroxyl, alkylamino or dialkylamino radicals, R30C is a carboxyl radical or an amino acid amide thereof, X and Y are hydrogen or low molecular weight alkyl radicals and Hal is halogen, characterized in that a substituted pteridine of the formula Reacts with a halogen, preferably 1 mole of pteridine is reacted with about 2 moles of halogen and a temperature of -io to 35 ° C is applied, and separates the dihalogenated, substituted pteridine from the reaction mixture.

2. The method according to claim i, characterized in that the reaction is carried out in the presence of a solvent, preferably an aqueous acidic solvent.

3. Procedure according to Claims i and 2, characterized in that the halogen is formed in situ lets, e.g. B. by using H ,, 02 or JCl in the presence of hydrochloric acid.