DE820788C - Process for the production of a yeast liver preparation - Google Patents

Process for the production of a yeast liver preparation

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DE820788C
DE820788C DEP43338A DEP0043338A DE820788C DE 820788 C DE820788 C DE 820788C DE P43338 A DEP43338 A DE P43338A DE P0043338 A DEP0043338 A DE P0043338A DE 820788 C DE820788 C DE 820788C
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    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients

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Description

Verfahren zur Herstellung eines Hefe-Leberpräparates Leber als Therapeutikum bei perniziöser Anämie ist bekannt. Es handelt sich hierbei nach neueren Forschungen um einen in der Leber von Tier und Mensch sich bildenden Wirkstoff, dem diese Heilwirkung zuzusprechen ist. Dieser als Hämochrom oder als Antiperniziosaprinzip bezeichnete Wirkstoff bildet sich in der Normalleber von Tier und Mensch aus einem Ferment der Magenschleimhäute (Innenfaktor) und einem durch die Nahrung zuzuführenden Vitamin (Außenfaktor). Bei der echten Perniziosa ist dieser Bildungsmechanismus gestört. In der Leber dieser Kranken entsteht kein Hämochrom, was zur Folge hat, daß das Knochenmark keine neuen Erythrozyten aufbauen kann. Um diese Menschen, die Krankheit wurde bisher nur am Menschen beobachtet, am Leben erhalten zu können, muß ihnen dauernd der bereits fertige und in jeder tierischen Leber vorhandene Wirkstoff zugeführt werden.Process for the production of a yeast liver preparation Liver as a therapeutic agent in pernicious anemia is known. This is according to recent research an active ingredient that forms in the livers of animals and humans to give this healing effect is to be awarded. This was referred to as hemochrome or the anti-pernicious principle Active ingredient is formed in the normal liver of animals and humans from a ferment of the Gastric mucous membranes (inner factor) and a vitamin to be supplied through food (External factor). In true pernicious anemia, this mechanism of formation is disturbed. There is no hemochrome in the liver of these patients, which means that Bone marrow cannot build new erythrocytes. To these people, the disease so far has only been observed in humans, to be able to keep them alive has to be them the already finished active ingredient present in every animal liver is continuously supplied will.

Welche Rolle bei diesem Mechanismus die Folinsäure und das in neuester Zeit genannte Vitamin B 12 spielt, ist noch nicht vollständig geklärt. Sicher ist jedenfalls, daß die Folinsäure nur teilweise die bisherigen Leberpräparate ersetzen kann; speziell gegenüber den im Verlauf der Erkrankung häufig zu beobachtenden Nervenschädigungen (Myelose) ist Folinsäure unwirksam, dagegen können zur Bekämpfung und Heilung dieser Schädigungen mit gutem Erfolg Aneurin und die im Vitamin-B 2-Komplex vorhandenen antianämischen Faktoren verwendet werden. What is the role of folinic acid in this mechanism, and more recently The time called vitamin B 12 plays is not yet fully understood. For sure is in any case, that the folinic acid only partially replace the previous liver preparations can; especially in relation to the nerve damage that can often be observed in the course of the disease (Myelosis), folinic acid is ineffective, but it can fight and cure it Damages with good success aneurine and those present in the vitamin B 2 complex anti-anemic factors can be used.

Aus diesen Forschungsergebnissen bei der Perniziosa ersieht man, daß es zweckmäßig ist, die Erkrankung nicht nur mit dem eigentlichen Perniziosaprinzip anzugehen, sondern gleichzeitig mit den übrigen antianämischen Wirkstoffen. Es besteht die Ansicht, daß die hochgereinigten Leberpräparate für intramuskuläre Injektion, die in weitgehend gereinigter Form das Hämochrom enthalten, nur in schweren Fällen zur Reorganisation des Blutbildes angewandt werden müssen. Die Dauerbehandlung des Patienten dagegen soll am zweckmäßigsten durch ein gutes orales Präparat erfolgen, das neben dem angereicherten Antiperniziosaprinzip auch die sämtlichen B-Vitamine in hoher Konzentration enthält. From these research results in pernicious anemia it can be seen that that it is expedient to treat the disease not only with the actual perniciousness principle but at the same time as the other anti-anemic agents. It exists the view that the highly purified liver preparations for intramuscular injection, which in largely purified form containing the hemochrome, only must be used in severe cases to reorganize the blood count. the Long-term treatment of the patient, on the other hand, should most appropriately take the form of a good oral dose Preparation take place, which in addition to the enriched antiperniziosa principle also all Contains high concentrations of B vitamins.

Bei den älteren Verfahren bewirkte man eine Anreicherung sämtlicher antianämischer Wirkstoffe der Leber durch bekannte Extraktionsverfahren mit angesäuertem Wasser oder wässerigem Alkohol. In the older methods, all of them were enriched anti-anemic agents of the liver by known extraction methods with acidified Water or aqueous alcohol.

Weitere Verfahren befaßten sich mit anschließenden Reinigungsverfahren zum Zwecke der Gewinnung eiweißfreier Präparate.Other procedures dealt with subsequent cleaning procedures for the purpose of obtaining protein-free preparations.

Darüber hinaus hatte man auch bereits erkannt, daß die antianämische Wirkung der Leber in wesentlichem Maße dadurch gesteigert werden kann, daß man sie der Einwirkung von physiologischen Aktivstoffen, die im tierischen Magen vorkommen, aussetzt. Ein in der deutschen Patentschrift 66I 739 beschriebenes Verfahren besteht darin, daß man die zerkleinerte Leber, daraus hergestellte Preßsäfte oder Auszüge mit tierischem Magen, Preßsäften oder Extrakten daraus oder mit natürlichem Magensaft behandelt und das Erzeugnis als solches oder als Preßsaft oder Extrakt verarbeitet. Diese Behandlung kann unter gleichzeitiger Verwendung von eiweißspaltenden Fermentern, z. B. Pepsin, Trypsin (Pankreatin) usw., durchgeführt werden. In addition, it was already recognized that the anti-anemic The effect of the liver can be increased to a considerable extent by the fact that it is used the effect of physiological active substances that occur in the animal stomach, suspends. A method described in German patent specification 66I 739 exists in that the minced liver, pressed juices or extracts made from it with animal stomach, pressed juices or extracts therefrom or with natural gastric juice treated and the product processed as such or as pressed juice or extract. This treatment can be carried out with the simultaneous use of protein-splitting fermenters, z. B. pepsin, trypsin (pancreatin), etc., can be performed.

Die vorliegende Erfindung beruht auf der Erkenntnis, daß es äußerst wertvoll ist, wenn mit einem die antiperniziosen Wirkstoffe und Vitamine enthaltenden Produkt gleichzeitig hochwertiges Eiweiß in gut resorbierbarer Form gegeben wird. Um zu einem solch hoch wirksamen Produkt, sowohl zur Behandlung der perniziösen Anämie, als auch anderer Anämien zu kommen, erfolgt gemäß der Erfindung eine Anreicherung der antianämischen Wirkstoffe der Leber und anderer Organe und Gewebe durch gemeinsame Autolyse mit Hefe. The present invention is based on the finding that it is extremely is valuable when using one containing the antipernicious agents and vitamins At the same time, the product is given high-quality protein in an easily absorbable form. In order to have such a highly effective product, both for treating the pernicious Anemia, as well as other anemias, are enriched according to the invention the anti-anemic agents of the liver and other organs and tissues through common Autolysis with yeast.

Die Hefe enthält verschiedene antianämische Faktoren neben Vitaminkomplexen und hochwertigem Eiweiß, das bei der gemeinsamen Autolyse mit Leber usw. in Aminosäuren gespalten und in sehr gut resorbierbare Form gebracht wird und zusammen mit den übrigen Faktoren der Hefe das spezielle antiperniziöse Prinzip der Leber unterstützt. Mit den Aminosäuren können die Blutelemente aus Eiweiß bzw. Aminosäuren durch das Knochenmark aufgebaut werden. The yeast contains various anti-anemic factors in addition to vitamin complexes and high quality protein, which is converted into amino acids during joint autolysis with liver etc. split and brought into a very easily absorbable form and together with the other factors of the yeast support the special antipernicious principle of the liver. With the amino acids, the blood elements from protein or amino acids can through the Bone marrow are built up.

Der Verfahren kann folgendermaßen durchgeführt werden. Frische, d. h. lebende Hefe beliebiger Herkunft, so z. B. Torulawuchshefe, Bäckereihefe, Bierhefe usw., und Leber oder andere Organe oder Gewebe werden in geeignetem Verhältnis, z. B. 2 : 1, gemeinsam unter Zusatz von zellabtötenden Mitteln, wie z. B. Toluol oder Essigester, bei 35 bis 390 C autolysiert. Die Autolyse ersetzt dabei die technisch nur unbefriedigend durchführbare künstliche Verdauung mit Magensaft oder Magenschleimhaut. Die Autolyse darf nicht zu lange fortgesetzt werden, damit nicht zuviel Eiweiß zu Aminosäuren abgebaut wird. Die Aminosäuren sind zwar durchaus erwünscht, sie erniedrigen jedoch andererseits im Endprodukt, gewissermaßen durch Verdünnung die Konzentration der wirksamen antianämischen Faktoren. The procedure can be carried out as follows. Freshness, d. H. live yeast of any origin, e.g. B. Torula growing yeast, bakery yeast, brewer's yeast etc., and liver or other organs or tissues are in appropriate proportion, z. B. 2: 1, together with the addition of cell-killing agents such. B. toluene or ethyl acetate, autolyzed at 35 to 390 C. Autolysis replaces the technical one only unsatisfactorily practicable artificial digestion with gastric juice or gastric mucosa. The autolysis must not be continued for too long to avoid too much protein Amino acids is broken down. The amino acids are certainly desirable, they lower them however, on the other hand, in the end product, as it were through dilution, the concentration the effective anti-anemic factors.

Nach beendigter Autolyse wird der verflüssigte Ansatz bei einem für die Extraktion optimalen pn, z. B. 3 bis 6, mit geeigneten Extraktionsmitteln, z. B. Alkoholen, wie Äthanol oder Methanol, auf etwa 65 bis 85 O/o Alkohol gebracht und der Extrakt vom unlöslichen Rückstand, z. B. durch Filtrierpressen, Zentrifugen o. dgl., abgetrennt. Unlöslich bleiben unverdauliches Eiweiß, Peptide und höhere Kohlehydrate, welche gegebenenfalls für andere Verwendungszwecke weiter verarbeitet werden können. In der Lösung sind nach entsprechendem Auswaschen des Rückstandes, beispielsweise mit 70 0/obigem Alkohol, praktisch quantitativ sämtliche antianämischen Wirkstoffe aus der Leber und Hefe enthalten. Außerdem enthält die Extrakttrockensubstanz etwa 50 O/o des Ausgangseiweißes in Form von Aminosäuren und niedrigen Peptiden. After the autolysis is complete, the liquefied batch is at a for the extraction optimal pn, z. B. 3 to 6, with suitable extractants, e.g. B. alcohols, such as ethanol or methanol, brought to about 65 to 85 O / o alcohol and the extract from the insoluble residue, e.g. B. by filter presses, centrifuges or the like, separated. Indigestible protein, peptides and higher remain insoluble Carbohydrates, which may be further processed for other purposes can be. After the residue has been washed out accordingly, the solution contains for example with 70% of the above alcohol, practically quantitatively all anti-anemic Contains active ingredients from the liver and yeast. In addition, the extract contains dry matter about 50% of the starting protein in the form of amino acids and lower peptides.

Die vereinigten Alkoholextrakte werden auf eine möglichst hohe Konzentrationsstufe, z. B. im Vakuumverdampfer, eingeengt. Dabei destilliert der Alkohol über und kann nahezu restlos wiedergewonnen werden. Der eingedickte Extrakt wird in geeigneter Weise, z. B. in einem Zerstäubungstrockner, zu einem hygroskopischen Pulver getrocknet, das in eine geeignete Form, z.B. in Tabletten, gepreßt und dragiert wird. The combined alcohol extracts are reduced to the highest possible concentration level, z. B. in a vacuum evaporator, concentrated. The alcohol distills over and can can be recovered almost completely. The thickened extract is more suitable Way, e.g. B. in an atomization dryer, dried to a hygroscopic powder, which is pressed and coated in a suitable form, e.g. in tablets.

Ausführungsbeispiel I 10 kg gemahlene Leber und 20 kg Frischhefe werden unter Zusatz von 0,I5 kg eines Desinfiziens, z. B. Toluol, Essigester u. ä., mit oder ohne Zugabe von Wasser, 2 Tage bei 370 autolysiert. Exemplary embodiment I 10 kg of ground liver and 20 kg of fresh yeast are with the addition of 0.15 kg of a disinfectant, z. B. toluene, ethyl acetate u. Ä., with or without addition of water, autolyzed at 370 for 2 days.

Nach beendeter Autolyse werden 501 Methanol oder Athanol zugegeben; nach kurzem Stehen wird der alkoholische Extrakt durch Filtration oder Zentrifugieren gewonnen. Der Rückstand wird nochmals mit 700/obigem Alkohol (Methanol oder Äthanol) extrahiert. Das p, der Extrakte soll zwischen 5 und 5,5 liegen. Dieser Wert wird meist praktisch durch die Autolyse erreicht, kann, wenn notwendig, jedoch auch durch Zugabe von Mineral- oder organischen Säuren eingestellt werden. Der Extrakt einschließlich Waschextrakt wird in einem Vakuumverdampfer auf etwa 60 °/o Trockensubstanz eingedampft. Der anfallende Dickextrakt wird in einem Zerstäubertrockner zu einem hellbraunen, hygroskopischen Pulver getrocknet. After the autolysis has ended, 50 liters of methanol or ethanol are added; After standing for a short time, the alcoholic extract is filtered or centrifuged won. The residue is again with 700 / above alcohol (methanol or ethanol) extracted. The p, of the extracts should be between 5 and 5.5. This value will usually achieved practically by autolysis, but can, if necessary, also by The addition of mineral or organic acids can be adjusted. The extract including Wash extract is evaporated to about 60% dry matter in a vacuum evaporator. The resulting thick extract is turned into a light brown, dried hygroscopic powder.

Ausbeute: 3,9 kg Fertigprodukt (Trockensubstanz) = 55,30/0 der Ausgangstrockensubstanz. Yield: 3.9 kg of finished product (dry matter) = 55.30 / 0 of the starting dry matter.

Analyse des Fertigproduktes: Ges. N: I0,820/o; Amino-N: 6,I2 °/o; Asche: 9,45 0/0. Analysis of the finished product: Total N: 10.820 / o; Amino-N: 6, 12%; Ash: 9.45 0/0.

Ein derartiger Hefe-Leber-Extrakt besteht zu etwa go O/o aus Aminosäuren. Das Verhältnis von Gesamtstickstoff zu Aminostickstoff liegt bei 50 bis 600/0, woraus hervorgeht, daß höher molekulare Peptide neben den Aminosäuren kaum vorhanden sind. Das Gemisch eignet sich daher u. a. auch besonders zur Verwendung als orales Aminosäurepräparat. Die Vereinigung der antiperniziösen Wirkstoffe mit den Aminosäuren ergibt eine physiologische Wirkung, die besonders als Aufbaupräparat (Tonikum) geeignet erscheint. Durch Zugabe anderer Aminosäuren oder sonstiger medizinischer Stoffe können weitere therapeutische Wirkungen erzielt werden. Such a yeast-liver extract consists of about 100% amino acids. The ratio of total nitrogen to amino nitrogen is 50 to 600/0, from which it can be seen that peptides of higher molecular weight are hardly present in addition to the amino acids. The mixture is therefore suitable, inter alia. also especially for use as an oral amino acid preparation. The association of the anti-pernicious Active ingredients with the amino acids results in a physiological effect, which is particularly suitable as a build-up preparation (tonic) appears. By adding other amino acids or other medicinal substances further therapeutic effects can be achieved.

Ausführungsbeispiel 2 Als Beleg für die erfindungsgemäße Behauptung, daß eine gemeinsame Autolyse von tierischen Organen mit frischer Hefe eine Verbesserung der Aminosäurebildung darstellt, wurde folgender Versuch durchgeführt: Ansatz I: 2 kg gemahlene Frischleber wurden mit 2 1 Wasser und I50 ccm Toluol versetzt und bei 200 mehrere Tage der Autolyse überlassen. Embodiment 2 As evidence for the claim according to the invention, that a joint autolysis of animal organs with fresh yeast an improvement represents the amino acid formation, the following experiment was carried out: Approach I: 2 kg of ground fresh liver were mixed with 2 l of water and 150 ccm of toluene and at 200 left to autolysis for several days.

Ansatz 2: 2 kg abgepreßte Frischhefe (Backhefe) wurden mit 2 1 Wasser und I50 ccm Toluol versetzt und bei 200 mehrere Tage der Autolyse überlassen. Approach 2: 2 kg of squeezed fresh yeast (baker's yeast) were mixed with 2 l of water and 150 cc of toluene were added and left to autolysis at 200 for several days.

Ansatz 3: Die in Ansatz I und 2 angegebenen Mengen an Leber, Hefe, Wasser und Toluol wurden zusammen unter den gleichen Bedingungen wie bei Ansatz I und 2 der Autolyse überlassen. Approach 3: The amounts of liver, yeast, Water and toluene were used together under the same conditions as in approach Leave I and 2 to autolysis.

Von jedem Ansatz wurden täglich Proben entnommen und in einem 50 Volumprozent Alkohol enthaltenden Extrakt aus diesen Proben der Gehalt an Aminostickstoff (nach Pop e u. 5 t e ve n s, Biochem. Journal 33, 1070 [I9391 bestimmt. Samples were taken daily from each batch and stored in a 50 Extract containing alcohol by volume from these samples shows the amino nitrogen content (determined according to Pop e and 5 t e ve n s, Biochem. Journal 33, 1070 [19391.

Außerdem wurde der Gehalt an Ammoniakstickstoff im gleichen Extrakt ermittelt. Also, the ammonia nitrogen content was found in the same extract determined.

Die Ergebnisse der Aminostickstoffbestimmungen sind in der folgenden Tabelle wiedergegeben. Ansatz 3 Mehrausbeute Versuchsdauer Amino-N-Gehalt in o/o Theoretische an Amino-N in 0/0 in Stunden Ausbeute al der aus I Ansatz 2 Ansatz 3 aus Ansatz I und 2 theoretischen Ausbeute Ansatz I Ansatz 2 Ansatz 3 Ansatz 1 und 2 2 2 3 4 8 23 0,I208 o,og65 0,1536 o,Io86 4I,4 47 0,I542 0,I320 0,243 0,I43I 70,0 68 0,I780 0,I540 0,3230 o,I660 94,8 I40 0,2364 0,572 0,670 0,4042 66,o Wie man sieht, übertrifft die Ausbeute an Aminostickstoff im Ansatz 3 an allen Tagen bei weitem die Durchschnittsausbeute aus Ansatz I und 2 (Spalte 4), die entsprechend den Versuchsbedingungen zu erwarten gewesen wäre, wenn bei der gemeinsamen Autolyse von Hefe und Leber lediglich eine Addition der enzymatischen Abbaureaktionen eingetreten wäre.The results of the amino nitrogen determinations are given in the table below. Approach 3 Increased yield Duration of experiment Amino-N content in o / o Theoretical amount of amino-N in 0/0 in hours yield al the from I approach 2 approach 3 from approach I and 2 theoretical yield Approach I Approach 2 Approach 3 Approach 1 and 2 2 2 3 4 8 23 0, I208 o, og65 0.1536 o, Io86 4I, 4 47 0, I542 0, I320 0.243 0, I43I 70.0 68 0, I780 0, I540 0.3230 o, I660 94.8 I40 0.2364 0.572 0.670 0.4042 66, o As can be seen, the yield of amino nitrogen in batch 3 on all days by far exceeds the average yield from batches I and 2 (column 4), which would have been expected according to the test conditions if only one addition was made during the joint autolysis of yeast and liver the enzymatic degradation reactions would have occurred.

Ferner konnte lediglich bei dem reinen Leberansatze eine deutliche Ahmoniakbildung festgestellt werden, und zwar nach 23 Stunden 0,0280/0, nach 47 Stunden o,oI8 o/o und nach I40 Stunden o,oI8 o/o. Bei Ansatz 2 konnte nur eine spurenweise Ammoniakbildung beobachtet werden, während bei Ansatz 3 eine Bildung von Ammoniak nicht mehr nachweisbar war. Dies beweist, daß die im Sinne der Erfindung unerwünschte Bildung von Ammoniak durch Amidasen infolge der gemeinsamen Autolyse von Hefe und Leber unterdrückt wird. Furthermore, only in the case of the pure liver attachments could there be a significant Ahmonia formation can be determined, namely after 23 hours 0.0280 / 0, after 47 Hours o, oI8 o / o and after 140 hours o, oI8 o / o. With approach 2 only one could trace Ammonia formation can be observed, while in batch 3 a formation of ammonia was no longer detectable. This proves that the undesirable in the context of the invention Formation of ammonia by amidases as a result of the joint autolysis of yeast and Liver is suppressed.

Claims (2)

PATENTANSPRÜCHE I. Verfahren zur Herstellung yon Präparaten aus tierischer Leber oder anderen Organen oder Geweben mit gesteigerter anitanämischer Wirkung, dadurch gekennzeichnet, daß die zerkleinerten Organe, daraus hergestellte Preßsäfte o. dgl. mit Hefe einer gemeinsamen Autolyse unterworfen und die Erzeugnisse als solche oder als Preßsäfte bzw. Extrakte oder nach einer Trocknung zu Tabletten verarbeitet werden. PATENT CLAIMS I. Process for the production of preparations from animal Liver or other organs or tissues with increased anti-anemic effects, characterized in that the comminuted organs, pressed juices produced therefrom O. The like. Subjected to a joint autolysis with yeast and the products as such or processed as pressed juices or extracts or after drying to tablets will. 2. Verfahren nach Anspruch I, dadurch gekennzeichnet, daß die Leber usw. und Hefe in geeigneten Verhältnissen mit zellabtötenden Mitteln, z. B. Toluol, Essigester o. dgl., bei geeigneter Temperatur autolysiert und nach zersetzen mit organischen Lösungsmitteln, z. B: Alkohol, der vom unlöslichen Rückstand abgetrennte Extrakt, vornehmlich zusammen mit den nochmals behandelten Rückständen, eingeengt und zu den gewünschten Präparaten verarbeitet wird. 2. The method according to claim I, characterized in that the liver etc. and yeast in suitable proportions with cell killers, e.g. B. toluene, Ethyl acetate or the like, autolyzed at a suitable temperature and, after decomposition, with organic solvents, e.g. B: alcohol separated from the insoluble residue Extract, mainly together with the re-treated residues, concentrated and processed into the desired preparations.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE932147C (en) * 1952-11-04 1955-08-25 Boehringer & Soehne Gmbh Process for obtaining highly effective adrenal extracts
DE973635C (en) * 1952-11-04 1960-04-21 Benckiser Gmbh Joh A Process for the digestion of difficultly autolysable microorganisms

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