DE69529562T2 - Cytotoxische makrolide, deren isolierung aus meeresschwämmen und deren verwendung als antitumormittel - Google Patents
Cytotoxische makrolide, deren isolierung aus meeresschwämmen und deren verwendung als antitumormittelInfo
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Description
- Ein beträchtlicher Umfang an Untersuchungen und Ressourcen ist der Onkologie und Antitumormaßnahmen einschließlich der Chemotherapie gewidmet worden. Obwohl bestimmte Verfahren und chemische Zusammensetzungen entwickelt worden sind, die die Hemmung, das Remittieren oder die Regulierung des Tumorwachstums unterstützen, sind neue Verfahren und chemische Antitumorzusammensetzungen notwendig. Es ist festgestellt worden, dass einige Naturprodukte und Organismen potentielle Quellen für chemische Moleküle mit zweckmäßiger biologischer Wirksamkeit von großer Mannigfaltigkeit sind. Mannes Leben ist die Quelle für die Entdeckung von Verbindungen mit vielfältiger biologischer Wirksamkeit gewesen. Es folgen einige der US-Patente, die für derartige Erfindungen erteilt worden sind: US-Patent Nr. 4548814 für Didemnine mit antiviraler Wirksamkeit, die aus einem Meeresmanteltier isoliert wurden, das US-Patent Nr. 4729996 offenbart Verbindungen mit Antitumoreigenschaften, die aus Meeresschwämmen Teichaxinella morchelia und Ptilocaulis walpersi isoliert wurden, das US-Patent Nr. 4808590 offenbart Verbindungen mit antiviralen Eigenschaften, Antitumoreigenschaften und fungiziden Eigenschaften, die aus dem Meeresschwamm Theonella sp. isoliert wurden, und das US-Patent Nr. 4737510 offenbart Verbindungen mit antiviralen und bakteriziden Eigenschaften, die aus dem karibischen Schwamm Agelas coniferin isoliert wurden. Es ist eindeutig belegt, dass Meeresschwämme eine Quelle für biologische Verbindungen sind und eine Reihe von Veröffentlichungen sind erschienen, die von Meeresschwämmen abgeleitete organische Verbindungen offenbaren, einschließlich Scheuer, P. J. (Hrsg.) Marine Natural Products, Chemical and Biological Perspectives, Academic Press, New York, 1978-1983, Bd. I-V, Faulkner, D. J. (1984) Natural Products Reports 1: 551-598, Natural Products Reports (1986) 3: 1-33, Natural Products Reports (1987) 4: 539-576, J. Am. Chem. Soc. (1985) 107: 4796-4798.
- EP-A-0109811 und EP-A-0530980 offenbaren antibiotische Makrolide, die Bryostatine genannt werden, bei denen es sich ebenfalls um makrocyclische Lactone mit drei Pyrangruppen handelt.
- US-A-4743695 offenbart ein cytotoxisches Makrolid, das als Tedanolid bezeichnet wird, bei dem es sich um ein makrocyclisches Lacton ohne irgendeine Pyrangruppe handelt.
- WO-A-9101982 beschreibt Discodermolid-Derivate, die Immunmodulator- und Antitumorwirksamkeit zeigen. Sie enthalten keine Pyrangruppe.
- Canadian J. Chem. 69(5): 856-860 (Pettit et al., Mai 1999) und JACS 113 (17): 6693-5 (Pettit et al., August 1991) offenbaren antineoplastische Mittel, die als Neristatin(e) bezeichnet werden, bei denen es sich um makrocyclische Lactone mit zwei Pyran- und zwei Tetrahydrofurangruppen handelt.
- Die vorliegende Erfindung basiert auf der Gewinnung eines neuen Makrolids mit der Bezeichnung Lasonolid A aus einem Forcepia-Schwamm. Es ist festgestellt worden, dass Lasonolid A das Tumorzellenwachstum hemmt. Diese Verbindung und deren Derivate und Analoga sind daher bei der Behandlung von Krebs in Tieren und Menschen von Nutzen. Derartige Derivate und Analoga nach der Erfindung weisen die Formeln I, II, III und IV auf.
- worin R&sub1; O oder H:OR ist,
- R&sub2; H, Alkyl, CH&sub2;OR, CHO, COOR' oder COOX ist,
- R H, Acyl, Alkyl oder Phenyl ist,
- R' H, Alkyl oder Phenyl ist und
- X ein Kation ist.
- Eine Verbindung der vorliegenden Erfindung kann auch als biochemische Sonde bei der Bestimmung verschiedener Aspekte von Zellgerüständerungen in Zellen, einschließlich Krebszellen und normalen Zellen, verwendet werden und kann daher als wichtiges Werkzeug bei der Erforschung bestimmter Krankheiten von Pflanzen, Tieren und Menschen von Nutzen sein. Ferner sind Verbindungen der Erfindung als Ausgangsmaterialien oder Zwischenprodukte für die Herstellung von anderen brauchbaren Verbindungen und Zusammensetzungen von Nutzen.
- Eine Verbindung der Erfindung kann hergestellt werden durch ein Verfahren, welches umfasst:
- das Abtrennen der Verbindung aus einem Meeresorganismus ausgewählt aus Acarnus, Forcepia, Hemitedania, Lissodendoryx und Tedania in ein anorganisches Lösungsmittel und
- das Gewinnen der Verbindung durch Chromatographie.
- Die Gewinnung des Naturprodukts, Lasonolid A, erfolgte durch Lösungsmittel-Abtrenntechniken und anschließender Chromatographie. Die Endreinigung der neuen Verbindung kann entweder durch Kristallisation oder unter Verwendung von Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) erreicht werden. Die Struktur von Lasonolid A wurde hauptsächlich auf Basis der ¹H- und ¹³C-NMR-Daten bestimmt und sie ist dargestellt durch Formel I, wenn R&sub1; H:OH und R&sub2; CH&sub2;OH ist.
- Derivate von Lasonolid A können unter Verwendung herkömmlicher Reaktionen und Verfahren hergestellt werden, die den Fachleuten gut bekannt sind. Solche herkömmlichen Reaktionen beinhalten die Methylierung, Acetylierung und das Ansäuern. Z. B. kann Lasonolid A mit herkömmlichen Methylierungsverfahren methyliert werden. Z. B. ergibt ein Methylierungsreagenz, z. B. Dimethylsulfat, umgesetzt mit einer Lösung von Lasonolid A in Methanol die oben gezeigte Struktur, worin R&sub1; = CH&sub3;.
- Ferner können Acetyl (Ac-)Gruppen mit einer herkömmlichen Acetylierungsreaktion an Lasonolid A addiert werden. Die Acetylierung kann an einer Position stattfinden, an der sich eine freie Hydroxylgruppe am Molekül befindet. Z. B. kann die Acetylierung von Lasonolid A mit einem Überschuss von Essigsäureanhydrid und Pyridin (1 : 2) erfolgen, was die Struktur liefert, die oben als Verbindung (I) gezeigt ist, worin R&sub1; und R&sub2; = CH&sub2;COO&supmin;. Diese Struktur kann weiter durch herkömmliche Methylierungsverfahren methyliert werden, wie vorstehend beschrieben, und liefert die vorstehend gezeigte Struktur, worin R&sub1; und R&sub2; = CH&sub2;COOCH&sub3;.
- Eine therapeutische Anwendung der neuen Verbindungen und von Zusammensetzungen, die diese enthalten, kann durch irgendein geeignetes therapeutisches Verfahren und irgendeine geeignete therapeutische Technik bewerkstelligt werden, die den Fachleuten derzeit oder zukünftig bekannt sind. Die therapeutische Dosierung einer Verbindung der Erfindung für den Wirt hängt von der Identität von der Infektion, von der Art des beteiligten Wirts, seines Alters, seines Gewichts, seiner Gesundheit, der Art der begleitenden Behandlung, falls überhaupt, der Häufigkeit der Behandlung und der therapeutischen Dosis ab.
- Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können nach bekannten Verfahren zur Herstellung pharmazeutisch nützlicher Zusammensetzungen formuliert werden. Formulierungen werden ausführlich in einer Reihe von Quellen beschrieben, die den Fachleuten wohlbekannt und ohne weiteres zugänglich sind. Z. B. beschreibt Remington's Pharmaceutical Science von E. W. Martin Formulierungen, die in Verbindung mit der vorliegenden Erfindung verwendet werden können. Im allgemeinen werden die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung derart formuliert, dass eine wirksame Menge der bioaktiven Verbindung(en) mit einem geeigneten Träger kombiniert wird, um die wirksame Verabreichung der Zusammensetzung zu erleichtern.
- Die Beispiele erläutern die Erfindung. Alle Prozentgehalte beziehen sich auf das Gewicht und alle Lösungsmittel-Mischungsanteile auf das Volumen, sofern nicht anders angegeben.
- Der interessierende Schwamm, Forcepia sp. (Ordnung Poecilosclerida, Familie Myxillidae) kann an der Nordküste, Grand Ghut, nördlich vom East Point von Guana Island, Britische Jungferninseln (geographische Breite 18 29,13º N, Länge 64 37,65º W) in einer Tiefe von 63 Fuß (19,2 m) abgesammelt werden. Bei der Topographie der Sammelstelle handelt es sich um glatte Pflastersteine und Sand. Der Schwamm ist rot-orange in der Farbe und kugelförmig. Diese Arten von Forcepia wurden als ?trilabis-Arten identifiziert. Siehe Van Soest, R. W. M. (1984) "Marine sponges from Curacao and other Caribbean localities, Part. III. Poecilosclerida", Stud. Fauna Curacao Caribb. Isl. 66(199):1-167. Der Schwamm wurde folgendermaßen klassifiziert:
- Stamm: Porifera
- Klasse: Demospongiae
- Ordnung: Poecilosclerida
- Familie: Myxillidae
- Gattung: Forcepia
- Art: ?trilabis
- Zur Erlangung der vorliegenden Verbindung, Lasonolid A, wurde der Ausgangsschwamm der vorliegenden Verbindungen, Forcepia ?trilabis, in einem Mischer zerkleinert und mit drei 200 ml Portionen Ethanol extrahiert. Die Extraktionszeiten waren etwa 8, 15 bzw. 8 h. Die Ethanolextrakte wurden vom zerkleinerten Schwamm dekantiert, durch Schwerkraft filtriert, vereint und im Vakuum konzentriert, was einen Ethanol-Rohextrakt lieferte. Dieser Extrakt wurde dann mit Lösungsmittel aufgeteilt zwischen gleichen Volumen von Wasser und Ethylacetat. Der Ethylacetat- Teil wurde im Vakuum konzentriert und weiter mit Lösungsmittel aufgeteilt zwischen Heptan und 10% wässrigem Methanol. Ausreichend Wasser wurde zum wässrigen Teil zugegeben, um den Gesamtwassergehalt auf 40% zu bringen. Die 40% wässrige Methanolfraktion wurde dann mit Methylenchlorid aufgeteilt. Der Methylenchlorid-Teil wurde dann im Vakuum konzentriert und durch Hindurchleiten durch eine Vakuum-Flash-Säule (VFC) gepackt mit einem Umkehrphasen-ODS-Gel unter Verwendung eines Lösungsmittelgradienten von 1 : 1 Methanol/Wasser, 80 : 20 Methanol/Wasser und 100% Methanol weiter gereinigt. Die Fraktion, die mit 80 : 20 Methanol/Wasser erhalten wurde, wurde dann mit HPLC unter Verwendung einer halbpräparativen Normalphasen-Kieselgel-Säule und von 70 : 30 Ethylacetat/Heptan als Elutionslösungsmittel gereinigt. Dies ergab reines Lasonolid A. Eine schematische Darstellung des Trennverfahrens ist in Fig. 1 gezeigt. Analoga und Derivate der vorliegenden Verbindungen können mit im wesentlichen ähnlichen Extraktions- und Reinigungstechniken erhalten werden.
- Die bioaktive Verbindung, Lasonolid A, ist die cytotoxische Hauptverbindung, die im Organismus vorliegt, und sie kann in reiner Form mit etwa 0,05% Ausbeute bezüglich des Feuchtgewichts des Schwamms isoliert werden. Eine großtechnische Isolierung kann durch RP-18-Vakuum-Flüssigchromatographie des Wasserextrakts (der nach Aufteilen des Methanolextrakts mit Wasser/Ethylacetat erhalten werden kann) gefolgt von RP-18-HPLC an einer präparativen Säule erfolgen. Alles notwendige Material für dieses Verfahren ist für den Fachmann auf dem Gebiet ohne weiteres erhältlich.
- Die Charakterisierung von Lasonolid A wurde durch NMR-Spektralanalyse bestimmt. Die Ergebnisse dieser Daten sind in nachstehender Tabelle 1 gezeigt. Tabelle 1. NMR-Daten für Lasonolid A
- a ¹H-Spektrum aufgenommen mit 500 MHz in CDCl&sub3;, Referenz Rest-CHCl&sub3; (7,26 ppm).
- b ¹³C aufgenommen mit 90 MHz in CDCl&sub3;, Referenz CDCl&sub3; (77,0 ppm).
- c ¹³C-Multiplizitätsbestimmung bestimmt durch DEPT-Versuch.
- d Signal stellt zwei degenerierte Kohlenstoffe dar.
- Lasonolid A wurde bezüglich der Toxizität gegen murine Leukämiezellen P388 und menschliche Lungenkarzinom-Zellen A549 und der Fähigkeit, Signalübertragungswege zu stören, die mit der Aktivierung von Proteinkinase C (PKC) und EL-4-Zelladhäsion verknüpft sind, geprüft.
- A. Aufbewahrung der Zelllinie. Die murinen Leukämiezellen P388 wurden von Dr. J. Mayo, National Cancer Institute, Bethesda, MD, erhalten. Die A549-Zellen und die EL-4.IL-2-Zellen (TIB) wurden von American Type Culture Collection, Rockville, MD, erhalten. Die P388-Zellen wurden in Roswell Park Memorial Institute- Medium 1640 (RPMI-1640), das mit 10% Pferdeserum ergänzt war, aufbewahrt und in Gewebekultur-Kunststoffflaschen kultiviert und in einem Inkubator bei 37ºC in angefeuchteter Luft mit 5% CO&sub2; gehalten. Die A549-Zellen wurden in ähnlicher Weise in RPMI-1640 aufbewahrt, aber mit 10% fetalem Rinderserum ergänzt. Von Antibiotika-freien Mutterkulturen von P388- und A549-Zellen wurden Subkulturen mit 10&sup5; Zellen/ml durch Verdünnungen in frischem Wachstumsmedium in Intervallen von 2 bis 5 Tagen erstellt. Die EL-4-Zellen wurden in ähnlicher Weise aufbewahrt, aber es wurde mit 10% Vol./Vol. Wärme-inaktiviertem fetalem Kalbsserum, 100 E/ml Penicillin, 100 ug/ml Streptomycin, 6 ug/ml L-Glutamin und 5 · 10&supmin;³ M 2-Mercaptoethanol (TCM) (Grand Island Biologicals Co., Grand Island, NY) ergänzt.
- Alle 3 bis 4 Tage wurden die Zellen einer Passage unterworfen. Die Lebensfähigkeit wurde durch Trypanblau-Ausschluß bestimmt und überschritt immer 80%. Für das Adhäsionsassay wurden Zellen innerhalb 15 Passagen aus gefrorenen Mutterkulturen verwendet. Phorbol-12-myristat-13-acetat (PMA) und 4α-Phorbol-12- myristat-13-acetat (4α-PMA) wurden von LC Services Corporation (Woburn, MA) erhalten. Stammlösungen von PMA und 4α-PMA wurden in DMSO hergestellt und vor dem Gebrauch bei -70ºC gelagert.
- B. Verfahren. Zur Bestimmung der proliferationshemmenden Wirkung von Mitteln gegen P388-Zellen wurden 200 ul Kulturen (Gewebekultur-Platten mit 96 Vertiefungen, Nung, Dänemark) mit 1 · 10&sup5; Zellen/ml in Arzneimittel-freiem Medium oder in einem Medium mit dem Rohextrakt bei einer Endverdünnung von 1 : 500 oder einem Zwischenprodukt oder reinen Verbindungen mit 10,0, 1,0, 0,10 und 0,010 ug/ml bereitgestellt. Das für alle Verdünnungen verwendete Lösungsmittel war Ethanol, das von allen Platten im Vakuum entfernt wurde. Nach 48 h Einwirkung wurden die P388-Zellen unter Verwendung von 3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5- diphenyltetrazoliumbromid (MIT) gezählt, wie nachstehend beschrieben.
- Zur Bestimmung der proliferationshemmenden Wirkung von Lasonolid A oder dessen Analoga gegen A549-Zellen wurden Zellen als Monoschichtkulturen in Vertiefungen von Mikrotiterplatten mit einer Endkonzentration von 1,5 · 10&sup5; Zellen/ml Medium 24 h vor Einwirkung der Verbindungen bereitgestellt. Ein Volumen von 100 ul Medium wurde von jeder Kulturvertiefung entfernt und mit einem Volumen von 100 ul Arzneimittel-freiem Medium oder Medium mit dem Rohextrakt bei einer Endverdünnung von 1 : 500 oder einem Zwischenprodukt und reinen Verbindungen mit 10,0, 1,0, 0,10 und 0,010 ug/ml ersetzt. Die Platten wurden 72 h bei 37ºC inkubiert und die Zellen mit MTT gezählt, wie nachstehend beschrieben.
- Zur Quantifizierung der Wirkungen von Lasonolid A oder dessen Analoga auf die Zellproliferation wurden zu jeder Vertiefung 75 ul warmes Wachstumsmedium mit 5 mg/ml MTT zugegeben. Die Kulturen wurden in den Inkubator zurückgestellt und 90 min ungestört gelassen. Zur spektralphotometrisch quantitativen Bildung von reduziertem Formazan wurden die Platten zentrifugiert (900 g, 5 min), Kulturfluide durch Saugen entfernt und 200 ul angesäuertes Isopropanol (2 ml konzentrierte HCl/l Isopropanol) zu jeder Vertiefung gegeben. Das Absorptionsmaß der sich ergebenden Lösungen wurde bei 570 nm mit einem Plattenableser (MR700 Microplate Reader, Dynatech Laboratories, Chantilly, VA) gemessen. Das Absorptionsmaß der Testvertiefungen wurde durch das Absorptionsmaß der Arzneimittel- freien Vertiefungen dividiert und die Konzentration der Verbindung, die zu 50% des Absorptionsmaß von unbehandelten Kulturen führte (IC&sub5;&sub0;), wurde durch lineare Regression von Logit-umgewandelten Daten bestimmt. Eine lineare Beziehung zwischen der P388- und A549-Zellzahl und der Formazanproduktion wurde über den Bereich der in dieser Untersuchung beobachteten Zelldichten festgestellt.
- Zur Bestimmung der Wirkung der betreffenden Verbindung auf EL-4-Zellen, wurden EL-4-Zellen (2,5 · 10&sup5;/Vertiefung) in Mikrotiter-Testplatten mit 96 Vertiefungen mit flachem Boden bei 37ºC mit Schwamm-Metaboliten in dreifachen Konzentrationen in Anwesenheit (Platte Nr. 1) oder Abwesenheit (Platte Nr. 2) von PMA (16 nM Endkonzentration) kultiviert. Die Testverbindungen wurden in TCM in einer solchen Weise verdünnt, dass die Endkonzentration von EtOH 1,25% nicht überschritt. Kontrollen bestanden aus Zellen, die allein inkubiert wurden (negative Kontrolle), und Zellen, die mit PMA inkubiert wurden (positive Kontrolle). Eine zusätzliche Kontrollplatte (Platte Nr. 3) bestand aus EL-4.IL-2-Zellen und identische Verdünnungen von Verbindungen in Abwesenheit von PMA dienten als Cytotoxizitäts-Platte und wurden nicht für die Adhäsion verarbeitet, wie nachstehend beschrieben, sondern zur Überwachung der möglichen cytotoxischen Wirkung von Verbindungen für EL-4.IL-2-Zellen verwendet. Die Inkubationszeit betrug 1 h bei 37ºC. Im Anschluss an die Inkubationsperiode wurden die Platten Nr 1 und Nr. 2 folgendermaßen verarbeitet: der Inhalt jeder Vertiefung wurde durch Abschlagen der Platten auf ein Sammeltablett und Plazieren der umgedrehten Platten auf ein Papierhandtuch entfernt, um die verbleibenden ablaufenden Vertiefungen abtropfen zu lassen und abzutupfen. Zu jeder Vertiefung wurde bei Raumtemperatur ein Volumen von 100 ul TCM zugegeben und die Platten wurden auf eine Drehbühnen- Schüttelvorrichtung (Mini-Orbital Shaker, BELLCO Biotechnology, Vineland, NJ) bei Einstellung 5 für 4 min plaziert. Die Platten wurden um 180º gedreht und weitere 4 min geschüttelt. Die Platten wurden entfernt und ihre Inhalte wiederum wie vorstehend beschrieben entfernt, abgetupft, TCM wurde zu jeder Vertiefung gegeben und die Platten wurden auf die Drehschüttelvorrichtung plaziert. Dieses Verfahren wurde zwei zusätzliche Waschzyklen wiederholt.
- Im Anschluss an die Entfernung des Inhalts der Vertiefungen wurde ein Volumen von 200 ul TCM und 75 ul MTT-Lösung (2 mg/ml in TCM) zu jeder Vertiefung von allen Platten gegeben. Die Platten wurden für zusätzliche 4 h bei 37ºC inkubiert. Im Anschluss an die Inkubation wurde der Inhalt der Platten Nr. 1 und Nr. 2 wiederum durch Abschlagen der Platte in den Ausguss entfernt und die Platten wurden auf Papierhandtüchern abgetupft. Platte Nr. 3 wurde zentrifugiert und in entsprechender Weise abgetupft. Ein Volumen von 200 ul iPrOH wurde dann zu jeder Vertiefung von allen Platten zugegeben, um die sich ergebenden Formazankristalle zu lösen. Die Platten wurden bei 570 nm mit einem Plattenableser (Microplate Autoreader, Modell EL-311, BIO-TEK Instruments, Inc., Winooski, VT) abgelesen. Das Absorptionsmaß jedes Satzes von Vertiefungen in dreifacher Ausfertigung wurde gemittelt und der Standardfehler wurde bestimmt. Die Ergebnisse wurden graphisch durch Aufzeichnen des mittleren Absorptionsmaßes und des Standardfehlers für jede Testvertiefung ausgedrückt. Die Ergebnisse wurden folgendermaßen interpretiert:
- Agonist von PKC (Verursacher von Adhäsion). Die Verbindung verursacht Adhäsion von EL-4.IL-2-Zellen in Abwesenheit von PMA (Platte Nr. 2), wie durch das Absorptionsmaß von MTT belegt, das durch anhaftende Zellen metabolisiert ist, welches größer ist als das der Zellen, die allein inkubiert wurden (negative Kontrolle).
- Antagonist von PKC (Inhibitor der Adhäsion). Die Verbindung verursacht keine Adhäsion von EL-4.IL-2-Zellen in Abwesenheit von PMA (Platte Nr. 2), wie durch das Fehlen des Absorptionsmaßes von MTT belegt. Die Verbindung inhibiert die Adhäsion von EL-4.IL-2-Zellen in Anwesenheit von PMA (Platte Nr. 1), wie durch das Fehlen des Absorptionsmaßes von MTT belegt. Die Verbindung ist nicht cytotoxisch, wie durch Platte Nr. 3 gemessen.
- C. Ergebnisse. Die Ergebnisse von A549, P388 und der EL-4-Adhäsionsassays sind nachstehend in Tabelle 2 gezeigt. Es wurde festgestellt, dass gereinigtes Lasonolid A (Fläschchen Nr. 10319) ein starkes Inhibitorvermögen gegen Maus- Leukämiezellen und einen IC&sub5;&sub0; von kleiner als 0,01 ug/ml aufweist. Es wurde auch festgestellt, dass Lasonolid A einen IC&sub5;&sub0; von 0,04 ug/ml gegen kultivierte Human- Lungenkarzinom-Zellen (A549) aufweist. Die Inhibierung war auch für Lasonolid A unter Verwendung des EL-4-Adhäsionsassays stark. Die gereinigte Verbindung zeigte einen IC&sub5;&sub0; von 0,019 durch EL-4-Adhäsion. Die Verbindung Lasonolid A oder eine davon abgeleitete Zusammensetzung kann zur Inhibierung von Tumoren in Menschen oder in Tieren verwendet werden. Tabelle 2. Bioaktivität Testergebnisse
- Inh. = Inhibierung
- na = nicht anwendbar
- nn = nicht nachweisbar
Claims (10)
1. Verbindung der Formel I
worin R&sub1; O oder H:OR ist,
R&sub2; H, Alkyl, CH&sub2;OR, CHO, COOR' oder COOX ist,
R H, Acyl, Alkyl oder Phenyl ist,
R' H, Alkyl oder Phenyl ist und
X ein Kation ist.
2. Verbindung der Formel II
worin R&sub2; wie in Anspruch 1 definiert ist.
3. Verbindung der Formel III
worin R&sub1; und R&sub2; wie in Anspruch 1 definiert sind.
4. Verbindung der Formel IV
worin R&sub2; wie in Anspruch 1 definiert ist.
5. Verbindung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, worin R&sub1; (falls
vorhanden) H:OH ist und R&sub2; CH&sub2;OH ist.
6. Verbindung nach den Ansprüchen 1 und 5, d. h. Lasonolid A.
7. Pharmazeutische Zusammensetzung zur Hemmung von
Krebszellenwachstum umfassend einen pharmazeutischen Träger und eine Verbindung nach
irgendeinem vorhergehenden Anspruch.
8. Verwendung einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1 bis 6 zur
Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung eines Menschen oder Tieres,
der oder das Krebszellen beherbergt.
9. Verfahren zur Erlangung einer Makrolid-Verbindung nach irgendeinem der
Ansprüche 1 bis 6, welches umfasst:
das Abtrennen der Verbindung aus einem Meeresorganismus
ausgewählt aus Acarnus, Forcepia, Hemitedania, Lissodendoryx und Tedania in
ein anorganisches Lösungsmittel und
Gewinnen der Verbindung durch Chromatographie.
10. Verfahren nach Anspruch 9, worin der Meeresorganismus Forcepia ist.
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