Verfahren zur Trennung antirachitisch hochwirksamer Bestrahlungsprodukte
von den antirachitisch unwirksamen Bestrahlungsprodukten des Ergosterins Es ist
bekannt, daß man durch Bestrahlen von Ergosterin mit ultravioletten Strahlen zu
antirachitisch hochwirksamen Präparaten gelangen kann, wenn man dafür Sorge trägt,
daß das gebildete Vitamin durch Überbestrahlung nicht nachträglich wieder zerstört
wird. Wirksamkeit wurde gefunden, daß die Wirksamkeit der so erhältlichen bereits
hochwirksamen Präparate durch Abtrennen antirachitisch umwirksamer Anteile noch
weiter erhöht werden kann. Die Abtrennung der antirachitisch unwirksamen Bestandteile
beruht darauf, daß dieselben durch Behandeln mit Maleinsäureanhydrid oder anderen
Substanzen, die sich in ihrem Additionsvermögen an konjugierte Doppelbindungen,
wie Maleinsäureanhvdrid, verhalten und diesem für das vorliegende Verfahren daher
äquivalent zu betrachten sind, z. B. Citraconsäureanhydrid, im Gegensatz zu dem
antirachitischen Vitamin in Additionsverbindungen übergeführt werden können, die
in gewissen Lösemitteln, beispielsweise Petroläther, unlöslich sind.Process for the separation of highly effective antirachitic radiation products
of the ineffective antirachitic radiation products of ergosterol It is
known to be achieved by irradiating ergosterol with ultraviolet rays
highly effective antirachitic preparations can reach if one takes care,
that the vitamin formed is not subsequently destroyed again by over-irradiation
will. Effectiveness has been found that the effectiveness of the already available
highly effective preparations by separating off anti-rachitic components
can be increased further. The separation of the ineffective antirachitic components
is based on the same by treating with maleic anhydride or others
Substances which, in their ability to add to conjugated double bonds,
such as maleic anhydride, and therefore this for the present process
are to be considered equivalent, z. B. citraconic anhydride, in contrast to that
antirachitic vitamin can be converted into addition compounds that
are insoluble in certain solvents such as petroleum ether.
Zur Durchführung der Abtrennung der unwirksamen Bestandteile verfährt
man in der Weise, daß man auf das in einem organischen Lösemittel gelöste Bestrahlungsprodukt
des Ergosterins beispielsweise einen geringen Uberschuß Maleinsäureanhydrid bei
Zimmertemperatur oder bei mäßig erhöhter Temperatur so lange einwirken läßt, bis
die An-Lagerung beendet ist. Danach verdampft man das Lösemittel, löst den Rückstand
in alkoholischer Kalilauge, erwärmt die Lösung nach Zusatz von Wasser kurze Zeit
und schüttelt wiederholt mit Petroläther aus. Die petrolätherischen Auszüge enthalten
den mit Maleinsäureanhydrid nicht reagierenden Anteil des Bestrahlungsproduktes.
Sie werden in üblicher Weise getrocknet. Der nach dem Abdestillieren des Petroläthers
verbleibende Rückstand erweist sich als antirachitisch höchst wirksam, während die
Maleinsäureanhydridanlagerungsprodukte antirachitisch unwirksam sind. Beispiel i
Eine durch Bestrahlung mit einer Magnesiumfunkenstrecke zu 5o °Jo umgewandelte Lösung
von Ergosterin in Benzol wird unter weitgehendem Ausschluß von Sauerstoff vom Lösemittel
befreit, das unveränderte Ergosterin in an sich bekannter Weise abgeschieden und
der Rückstand mit einem geringen überschuß Maleinsäureanhydrid, beispielsweise r'(,
Mol auf i Mol Bestrahlungsprodukt, in Benzollösung ao Stunden bei Zimmertemperatur
stehengelassen. Nach dieser Zeit sind a0 % des bereits ergosterinfreien Bestrahlungsproduktes
mit dem Maleinsäureanhydrid in Reaktion getreten; nunmehr wird das Benzol im Vakuum
unter peinlichstem Ausschluß von Luftsauerstoff abdestilliert, der Rückstand
in
alkoholischer Kalilauge gelöst, die . Lösung eine Stunde auf 50° erwärmt und nach
Zusatz von Wasser wiederholt mit Petroläther ausgeschüttelt. Die petrolätherischen
Auszüge enthalten den mit Maleinsäureanhydrid nicht reagierenden Anteil des Bestrahlungsproduktes.
Sie werden in bekannter Weise getrocknet und eingedampft. Der Rückstand. wird zweckmäßig
in einem Pflanzenöl gelöst, in dem das antirachitische Vitamin erfahrungsgemäß am
besten gegen Luftoxydation geschützt ist.The inactive constituents are separated off by allowing, for example, a small excess of maleic anhydride to act on the ergosterol irradiation product dissolved in an organic solvent at room temperature or at a moderately elevated temperature until the on-storage has ended. The solvent is then evaporated, the residue is dissolved in alcoholic potassium hydroxide solution, the solution is heated for a short time after adding water and shaken out repeatedly with petroleum ether. The petroleum ether extracts contain the portion of the irradiation product that does not react with maleic anhydride. They are dried in the usual way. The residue remaining after the petroleum ether has been distilled off proves to be highly effective in terms of antirachitism, while the maleic anhydride addition products are ineffective in terms of antirachitism. Example i A solution of ergosterol in benzene converted to 50 ° Jo by irradiation with a magnesium spark gap is freed from the solvent while largely excluding oxygen, the unchanged ergosterol is separated in a known manner and the residue is treated with a small excess of maleic anhydride, for example r '( After this time a0 % of the already ergosterol-free irradiation product has reacted with the maleic anhydride; now the benzene is distilled off in vacuo with the most painful exclusion of atmospheric oxygen, the residue in alcoholic potassium hydroxide solution dissolved, the solution heated to 50 ° for one hour and, after adding water, repeatedly shaken out with petroleum ether.The petroleum ether extracts contain the portion of the irradiation product that does not react with maleic anhydride evaporated. The residue. is expediently dissolved in a vegetable oil in which the antirachitic vitamin is best protected against air oxidation according to experience.
Während die mit dem Maleinsäureanhydrid in Additionsverbindungen übergeführten
Anteile des Bestrahlungsproduktes antirachitisch unwirksam sind, erweisen sich die
mit dem Maleinsäureanhydrid nicht in Reaktion getretenen Anteile als antirachitisch
höchst wirksam. Sie zeigen ein charakteristisches Absorptionsspektrum mit einem
Maximum bei 265,uy. Im Gegensatz zu den üblichen Ergosterinbestrahlungsprodukten,
die beim Erhitzen auf loo° und darüber ihr Absorptionsspektrum verändern, bleibt
bei den mit Maleinsäureanhydrid nicht reagierenden Anteilen auch bei längerem Erhitzen
das Spektrum mit dem ausgesprochenen Absorptionsmaximum bei 265 ,u,u unverändert
erhalten. Beispiele Eine ätherische Lösung von Ergosterin wird in an sich bekannter
Weise in einer Quarzwalze unter vollkommenem Ausschluß von Luftsauerstoff mit Magnesiumfunkenlicht
bestrahlt. In den Strahlengang wird ein Filter, z. B. bestehend aus einer o,oo5°%oigen
Lösung von Diphenyl oder aus einer etwa 5°1oigen Benzol- oder Xylollösung in Benzin
in dünner Schicht, eingeschaltet. Wenn etwa 45°/o des eingesetzten Ergosterins umgewandelt
sind, wird das Bestrahlungsgut in an sich bekannter Weise vom unveränderten Ergosterin
befreit und das dabei anfallende Produkt in Äther-Petroläther-Lösung mit der gleichen
Gewichtsmenge Citraconsäureanhydridunter Ausschluß von Luft -etwa io Tage lang bei
2o bis 25° stehengelass.en. Man läßt das Citraconsäureanhydrid zweckmäßig so lange
auf das Bestrahlungsgut einwirken, bis eine Probe des mit Citraconsäureanhydrid
nicht reagierenden Anteils des Bestrahlungsgutes ein optisches Drehvermögen von
etwa -f- 50° in einer Lösung von Normalbenzin aufweist. Das Lösungsmittel wird dann
vertrieben und durch Methylalkohol ersetzt. Man fügt dann die i1/2fache Menge der
berechneten Menge Kalilauge hinzu und läßt etwa 12 Stunden stehen. Nach Zusatz der
gleichen Menge Wasser wird dann mit Äther und Petroläther ausgeschüttelt. Der Extrakt
wird mit Wasser gewaschen und das Lösungsmittel verdampft. Alle Arbeitsvorgänge
werden unter weitgehendstem Ausschluß von Luftsauerstoff durchgeführt. Aus dem erhaltenen
Rückstand gewinnt man durch Behandlung mit Methylalkohol oder Aceton Kristalle des
antirachitisch wirkenden Umwandlungsproduktes des Ergosterins, die nach wiederholtem
Umkristallisieren aus den genannten Lösemitteln bei 12,4 bis 125° schmelzen. Das
spezifische Drehungsvermögen der so gewonnenen Kristalle ist für [a]" -f-
72,6° in Petroläther, -E- r86,2° in Aceton (o,8 °/o), [a] q, -1- 168,
x° in- Aceton (o,8 °/0). Die Analyse entspricht der Formel C2,H420. Die Lösung des
neuen kristallisierten Stoffes zeigt das bereits in Beispiel i gekennzeichnete Absorptionsspektrum.While the proportions of the irradiation product converted into addition compounds with the maleic anhydride are antirachitic ineffective, the proportions which have not reacted with the maleic anhydride prove to be highly antirachitic. They show a characteristic absorption spectrum with a maximum at 265 uy. In contrast to the usual ergosterol irradiation products, which change their absorption spectrum when heated to 100 ° and above, the spectrum with the pronounced absorption maximum at 265, u, u remains unchanged for the components that do not react with maleic anhydride even after prolonged heating. EXAMPLES An ethereal solution of ergosterol is irradiated with magnesium sparks in a manner known per se in a quartz roller with complete exclusion of atmospheric oxygen. A filter, e.g. B. consisting of an o, oo5 °% solution of diphenyl or from an approximately 5 ° 1oigen benzene or xylene solution in gasoline in a thin layer, switched on. When about 45% of the ergosterol used has been converted, the irradiated material is freed from unchanged ergosterol in a manner known per se and the resulting product in ether-petroleum ether solution with the same weight of citraconic anhydride in the absence of air - for about 10 days at 2o Left up to 25 °. The citraconic anhydride is expediently allowed to act on the material to be irradiated until a sample of the portion of the material to be irradiated that does not react with citraconic anhydride has an optical rotation of about -f- 50 ° in a solution of normal gasoline. The solvent is then driven off and replaced with methyl alcohol. Then add half the amount of the calculated amount of potassium hydroxide solution and leave to stand for about 12 hours. After adding the same amount of water, it is shaken out with ether and petroleum ether. The extract is washed with water and the solvent is evaporated. All operations are carried out with the greatest possible exclusion of atmospheric oxygen. By treating the residue obtained with methyl alcohol or acetone, crystals of the antirachitic conversion product of ergosterol are obtained, which, after repeated recrystallization from the solvents mentioned, melt at 12.4 to 125 °. The specific rotatability of the crystals obtained in this way is for [a] "-f- 72.6 ° in petroleum ether, -E- r86.2 ° in acetone (0.8%), [a] q, -1-168 , x ° in acetone (0.8 ° / 0). The analysis corresponds to the formula C2, H420. The solution of the new crystallized substance shows the absorption spectrum already identified in Example i.
An Stelle der obengenannten Filter lassen sich z. B. auch Uviolglas
in Verbindung mit der Quarzquecksilberdampflampe oder ähnlich wirkende Vorrichtungen
verwenden.Instead of the above filters, z. B. also uviol glass
in connection with the quartz mercury vapor lamp or similarly acting devices
use.