DE525493C - Process for the production of extracts containing peroxidase - Google Patents

Process for the production of extracts containing peroxidase

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DE525493C DES84741D DES0084741D DE525493C DE 525493 C DE525493 C DE 525493C DE S84741 D DES84741 D DE S84741D DE S0084741 D DES0084741 D DE S0084741D DE 525493 C DE525493 C DE 525493C
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0065Oxidoreductases (1.) acting on hydrogen peroxide as acceptor (1.11)

Description

Verfahren zur Herstellung von Peroxydase enthaltenden Auszügen Es ist bekannt. .1a13 Keime, Saaten, Knollen. Sekrete und auch andere Pflanzenstoffe I#erinente enthalten. uie imstande sind. den Sauer->toft der Luit oder chemisch gebundenen Sauerstift. so z. B. den Sauerstoff im Wasserstottsuperoxcd. auf andere Körper zu übertragen.Process for the preparation of extracts containing peroxidase Es is known. .1a13 Germs, seeds, tubers. Secretions and also other plant substances I # erinent included. uie are able. the Sauer-> toft the Luit or chemically bound oxygen pen. so z. B. the oxygen in Wasserstottsuperoxcd. to others Body transfer.

Die im @cariittum beschriebenen Verfahren zur Herstellung solcher Fermente eignen sich Jedoch nich; zur fabrikmäßigen Darstellung und haben meist nur wissenschaftlichen Wert. Aus Aiesein Grunde konnte die l'rroxv(lace bisher in der Industrie nicht so zur Geltung i#oninien. wie andere Fernrente. z. B. das I'ei,sin und die Diastase.The processes described in @cariittum for making such Ferments are not suitable, however; for factory representation and mostly have scientific value only. For reasons of its own, the l'rroxv (lace up to now in the industry does not really come into its own. like other long-distance pension. z. B. the I'ei, sin and the diastasis.

Es wur,le Iran gefunden, daß man die I'eroxvdaseh@::i@arate auch in großen Mengen und ohne be#le#-tal.le Kosten herstellen kann, wenn Iran l@er@xv@lasehaltige I'flanzellstofe mit Wasser ver s:°t: t und (las Gemenge mit besonderen c:entisclieti Stoffen der G:irung überl:ißt. hic:,- :ritt von selbst ein, sie braucht nicat furch besondere Gärungserreger eingeleitet #u #.1-erlen.It was found in Iran that the I'eroxvdaseh @ :: i @ arate can also be found in can produce large quantities and without be # le # -tal.le costs if Iran l @ er @ xv @ laser-containing I'lanzellstofe ver s: ° t: t and (read mixture with special c: entisclieti Leaves substances to ferment. hic:, -: rode in by himself, she needs nicat fear special fermentation pathogens initiated #u # .1-erlen.

CheiniscIle @#._tte. die sich zur ßt:igabe tvährend der i:::rung eignen, sind kohlensaure Salze. I-Ivi@r(xv@le oder Oxyde von Alkali-und I.r(lalk:tlünetzllen sowie von Magnrsiuni, Cadiniunl Zink. \la,#nesiuni sowie L'ad-Illttltn und "zink kt@IInen aber auch in 'Metallform, z. B. ,:l_ Paiver oder als Späne u. dgl., beigegeben würden. Insbesondere ist bei der Verwendung der reinen Metalle zu beachten, (laß selbstverständlich nicht solche Metalle in Frage kominen, die mit anderen Metallen verunreinigt s s ind, deren Salze bereits selbst katalytisch wirken können, wie z. B. Eisen, (las durch die bei der Gärung entstehenden Säuren in Eisensalze übergeführt werden würde.CheiniscIle @ # ._ tte. which are suitable for ß: igabe tduring the i ::: tion, are carbonic acid salts. I-Ivi @ r (xv @ le or oxides of alkali and I.r (lalk: tlünetzllen as well as from Magnrsiuni, Cadiniunl Zink. \ la, # nesiuni as well as L'ad-Illttltn and "zink But also in 'metal form, e.g. B.,: l_ Paiver or as chips and the like., Added would. In particular, when using pure metals, it is important to note (let Of course, metals that do not come into question with other metals s are contaminated, the salts of which can already act catalytically, such as z. B. Eisen, (read by the acids formed during fermentation converted into iron salts would be.

Wird dagegen z. B. Zink in Pulverform verwendet, so zeitigen die entstehenden Salze die gleiche Wirkung wie die anderen vorstehend angegebenen Salze und (las Zinkoxyd.If, however, z. B. zinc used in powder form, so produce the resulting Salts have the same effect as the other salts given above and (read Zinc oxide.

Ob die Salze infolge ihrer Pufferwirkung die Peroxydasebildung oder die Gärung beeinflussen, kann nicht angegeben werden und ist für (len Darstellungsvorgang auch gleichgültig. Es ist aber leicht festzustellen. (1a13 bei Zusatz der genannten Stoff(: die Perowdasebildung beschleunigt und die Ausbeute vermehrt wird.Whether the salts, as a result of their buffering effect, the formation of peroxidase or affect fermentation, cannot be specified and is for (len representation process also indifferent. But it is easy to determine. (1a13 with the addition of the above Substance (: the perowdase formation is accelerated and the yield is increased.

Es ist hierbei keinesfalls nötig, (laß durch die angeführten Zusätze etwa die sich entwickelnden Gärungss:inren netitr<ilisiert werden. Diese können vielmehr in reichlichem Maße vorherrschen, so (laß die Auszüge deutlich stark saure Reaktion zeigen.It is by no means necessary here, (leave through the additions mentioned for example, the fermentation process that develops: inren are nitrated. these can rather, predominate in abundance, so (leave the extracts clearly strongly acidic Show reaction.

Dieses ist uni so überraschender, als von wissenschaftlichen I.,orschern die llerstellung von sauren Auszügen dazu 1)cnutzt wurde, die 1'eroxydase an den 1'flanzcnlcilrl>ei-n (Eiweiß usw. ) frstzullalten, also zli fixieren, 11111 Zunächst die Zuckerstoffe und die löslichen I#.i- Weißstoffe. Salze ti. dgl. vermittels Diffusion lierauszulÖBen. *- ISäß 'insbesondere die durch Gärung entstehende Azidität nicht nachteilig wirkt, war keineswegs zu erwarten.This is uni more surprising than from scientific research the production of acidic extracts was used for 1), the 1'eroxidase on the 1'flanzcnlcilrl> ei-n (egg white, etc.) to firstly, thus fix zli, 11111 First of all the sugars and the soluble I # .i- White fabrics. Salts ti. like release by means of diffusion. * - In particular, that produced by fermentation Acidity does not have a detrimental effect was by no means to be expected.

ach vorliegendem Verfahren wird außerdem der Zucker sogleich durch die Gärung beseitigt. Soweit die Eiweißkörper nicht schon durch den Gärungsprozeß oder durch die entstehenden Salzverbindungen (z. B. durch Zinksalze bei Anwendung von Zinkolvd) niedergeschlagen werden, können sie dann nach Unterbrechung der Gärung durch Salze, Alkohol,. Chloroform oder auf andere bekannte «'eise bequem beseitigt werden.After the present process, the sugar is also instantly through the fermentation eliminated. So much for the protein bodies not already through the fermentation process or through the resulting salt compounds (e.g. through zinc salts when used of zincolvd), they can then after the fermentation has stopped by salts, alcohol ,. Chloroform or other known methods are conveniently eliminated will.

Als besonderer Fortschritt kann die Feststellung gelten, daß die nach vorliegendem Verfahren hergestellten Peroxydasepräparate nach Zusatz eines Konservierungsmittels (z. B. Alkohol, Berzoesiiure, Benzoesäureester u. <lgl.) ihre spezifische Wirkung jahrelang behalten.The finding that the after Peroxidase preparations produced according to the present process after the addition of a preservative (e.g. alcohol, berzoic acid, benzoic acid ester, etc.) their specific action keep for years.

Die nach vorliegendem Verfahren leergestellten Perotydasepräparate zeigen alle Eigenschaften der zur Gruppe der Desinolasen gehörigen Peroxvdaseenzvnie. Ihre @jTirkung wird als dehydrierend bzw. Sauerstöff übertragend auf in der Wissenschaft bekannte bestimmte chemische Verbindungen und Naturprodukte bezeichnet.The perotydase preparations emptied according to the present process show all properties of the peroxvdaseenzvnie belonging to the group of desinolases. Their @jTirkung is called dehydrating or oxygen transferring to science known certain chemical compounds and natural products.

Solche chemischen Verbindungen sind z. B. Phenole, Kresole, Polyphenole, Phenylendiamine und viele andere. Zu den in Betracht kommenden -Naturstoffen zählen z. B. Guajakharz, Hcdrojuglon, Flavone usw.Such chemical compounds are e.g. B. phenols, cresols, polyphenols, Phenylenediamines and many others. The natural substances that can be considered include z. B. guaiac resin, hydrojuglone, flavones, etc.

Die nach vorliegendem Verfahren hergestellten Peroxvdasepräparate -weisen hohe Purpurogallinzahlen und Perotvdaseeinheiten auf, die um so mehr überraschen, als einfache Auszüge nach den bisherigen 'Methoden verhältnismäßig geringe Perox_vdaseeinheiten enthalten, die auf teure und umständliche Art konzentriert -werden müssen. z. B. durch Adsorption und nachfolgende Elution.The peroxide preparations produced according to the present process - have high purpurogallin numbers and perotvdase units, which are all the more surprising, as simple extracts according to the previous' methods, relatively low perox_vdase units that have to be concentrated in an expensive and cumbersome way. z. B. by adsorption and subsequent elution.

Es lassen sich aber nach vorliegendem Verfahren Auszüge herstellen, die in 11,- der dargestellten Perotvdaseflüssigkeit durchschnitt-Mich etwa 3 5oo Perowdaseeinheiten enthalten, was den Gesamteinheiten von etwa 17,5 kg Meerrettich oder ztwa ; o 1,g weißen Rüben entspricht, Auf die Purpurogallinzalil berechnet ergibt sich daraus für i g des Auszuges eine Purpurogallinzahl von 3,5. _ Als Ausgangsstoffe kommen in Betracht: Samenkeime, z. B. Keime von Roggen, Weizen. Reis, Mais, Gerste usw.; ferner perotydaselialtige Pflanzenteile. wie Kleien (z. B. Roggenkleie u. dgl.). Beispiele: i. i kg Samenkeime des Weizens, 5 kg Wasser, ioo g \ atriunibicarbonat -werden gemischt, einige Tage der Gärung überlassen und sodann durch ein Tuch gegossen. Die Flüssigkeit kann nach Belieben noch weiter gereinigt und dann durch Zusatz von etwa io w. H. Alkohol haltbar gemacht werden.However, according to the present method, extracts can be produced which in 11, - the perotvdase liquid shown contain about 3500 perowdase units, which corresponds to the total units of about 17.5 kg of horseradish or about; o 1, g corresponds to white beets. Calculated on the purpurogallin number, this results in a purpurogallin number of 3.5 for ig of the extract. _ The following starting materials can be considered: seed germs, e.g. B. Germs of rye, wheat. Rice, corn, barley, etc .; also perotydaselial parts of the plant. such as bran (e.g. rye bran, etc.). Examples: i. 1 kg of wheat germs, 5 kg of water, 100 g of bicarbonate are mixed, left to ferment for a few days, and then poured through a cloth. The liquid can be further purified at will and then made durable by adding about 10% alcohol.

z. I kg peroxydaselialtige Roggenkleie, 6 kg Wasser, -ioo g Zinkoxyd.z. I kg of peroxydaselial rye bran, 6 kg of water, -ioo g of zinc oxide.

3. i kg Roggenkleie, 3 kg Wasser, ioo g Zinkstaub (lfagnesiunispiine oder Cadniiumpulverj -werden wie unter i angegeben behandelt.3. 1 kg of rye bran, 3 kg of water, 100 g of zinc dust (lfagnesiunispiine or Cadniiumpulverj -are treated as indicated under i.

Claims (1)

PATENTANSPRÜCHE: i. Verfahren zur Herstellung von Peroxl-dase enthaltenden Auszügen, dadurch gekennzeichnet. <Maß man peroxydaselialtige Pflanzenstoffe in Gegenwart von Oxyden, H_vdroiv den, Carbonaten der Alkali- und Erdalkalimetalle, des Zinks. Cadmiums oder von Zink-, -Magnesium-oder Cadiniummetall der Gärung unterwirft und dann die Flüssigkeit von den festen Stoffen befreit. Verfahren nach Anspruch i, dadurch gekennzeichnet, daß inan aus den durch die Gärung erhaltenen perotydasehaltigen Flüssigkeiten die Eiweißstoffe ausscheidet und nach deren Abtrennung die Flüssigkeit mit geeigneten Konservierungsmitteln, so z. B. mit Alkohol, versetzt.PATENT CLAIMS: i. Process for the production of peroxide containing Extracts, characterized. <Measure one peroxidaselialtige plant substances in the presence of oxides, H_vdroiv den, carbonates of alkali and alkaline earth metals, of zinc. Cadmium or zinc, magnesium or cadinium metal subjected to fermentation and then the solids are removed from the liquid. Method according to claim i, characterized in that inan from the perotydase-containing obtained by fermentation Liquids that excrete proteins and after their separation the liquid with suitable preservatives, such. B. with alcohol.
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