DE4139083A1

DE4139083A1 - Optically active cyanohydrin S-enantiomer enantioselective prepn. for vitamin(s) - by reacting aldehyde or unsymmetric ketone in diluent and S-hydroxy nitrile lyase with cyanide gp. donor, and isolating for alpha-hydroxyacid bioactive agents

Info

Publication number: DE4139083A1
Application number: DE19914139083
Authority: DE
Inventors: Herfried Griengl; Norbert Dr Klempier; Peter Dr Poechlauer
Original assignee: Chemie Linz Deutschland GmbH
Current assignee: Chemie Linz Deutschland GmbH
Priority date: 1991-11-28
Filing date: 1991-11-28
Publication date: 1993-06-03

Abstract

The prepn. comprises reacting an aldehyde or an asymmetric ketone in a diluent in the presence of an S-hydroxy nitrile lyase, with a cyanide gp. donor, and isolating the cyanohydrin from the reaction mixt. S-hydroxy nitrile lyases from Hevebrasiliensis or Sorghum bicolour (are pref. used) in the prepn. of 5-cyanohydrins. The aldehyde is pref. an aliphatic or aromatic aldehyde. The cyanide gp. donor is a cyanohydrotin of formula R1R2C(OH)(CN). R1 and R2 are alkyl gps. It is most esp. acetone, cyanohydrin. The solvent is an aq. solvent, (an aq. buffer soln) with pH 3-5. The prod. is recovered by extn. and chromatography. USE/ADVANTAGE - Useful in prodn. of bioactive agents e.g. pharmaceuticals, vitamins or pyrethroid cpds. The prepn. gives the prods. in high optical purity and the use of hydrogen cyanide or organic solvents is unrequired.

Description

Die Erfindung betrifft ein enzymatisches Verfahren zur enantioselektiven Herstellung optisch aktiver Cyanhydrine aus einem Aldehyd oder unsymmetrischen Keton und einem Cyanidgrup pendonor unter Einwirkung einer Hydroxynitrillyase.The invention relates to an enzymatic process for enantioselective production of optically active cyanohydrins an aldehyde or unsymmetrical ketone and a cyanide group pendonor under the action of a hydroxynitrile lyase.

Cyanhydrine haben etwa für die Synthese von alpha-Hydroxysäu ren, die zur Gewinnung biologisch wirksamer Stoffe, z. B. pharmazeutischer Wirkstoffe, Vitamine oder auch pyrethroider Verbindungen Verwendung finden, Bedeutung.Cyanohydrins are used for the synthesis of alpha-hydroxy acid ren, for the production of biologically active substances, for. B. active pharmaceutical ingredients, vitamins or pyrethroider Find connections, meaning.

Die Herstellung eines Cyanhydrins kann beispielsweise durch Anlagerung einer Cyanidgruppe an den Carbonylkohlenstoff eines Aldehyds oder Ketons erfolgen, wobei bei Einsatz eines Aldehyds oder eines unsymmetrischen Ketons Enantiomerengemische optisch aktiver Cyanhydrine entstehen. Da in einem biologisch wirksamen Enantiomerengemisch im allgemeinen nur eines der beiden Enan tiomere biologisch wirksam ist, hat es nicht an Versuchen ge fehlt, ein Verfahren zu finden, durch das ein gewünschtes Enantiomeres eines optisch aktiven Cyanhydrins in möglichst ho her optischer Reinheit herstellbar ist.The preparation of a cyanohydrin can, for example, by Attachment of a cyanide group to the carbonyl carbon one Aldehydes or ketones take place, with the use of an aldehyde or an asymmetrical ketone mixture of enantiomers optically active cyanohydrins arise. Because in a biologically effective Enantiomer mixture generally only one of the two enanes tiomeric is biologically active, there has been no attempts is lacking to find a method by which a desired Enantiomer of an optically active cyanohydrin in as high as possible her optical purity can be produced.

So ist in Chemistry Letters, The Chemical Society of Japan (1986), 931-934 ein Verfahren zur Cyanhydrinierung eines Alde hyds unter Verwendung eines Cyanidgruppendonors und eines synthetischen Dipeptides als Katalysator geoffenbart. Diese Re aktion verläuft aber nur in geringem Ausmaß enantioselektiv und die optische Reinheit der Produkte ist unbefriedigend.So in Chemistry Letters, The Chemical Society of Japan (1986), 931-934 a method for the cyanohydrination of an alde hyds using a cyanide group donor and one synthetic dipeptides as a catalyst. This re however, the action is only enantioselective and to a small extent the optical purity of the products is unsatisfactory.

Aus EP-A-03 26 063 ist bekannt, aliphatische, aromatische oder heteroaromatische Aldehyde oder Ketone mit Blausäure in Gegen wart einer Oxynitrilase umzusetzen, wobei entsprechende R- bzw. S-Cyanhydrine enantioselektiv gebildet werden. Die Handhabung von Blausäure bereitet aber wegen ihres niedrigen Siedepunktes Schwierigkeiten. Außerdem ist Blausäure hochgiftig und wird da her nur sehr ungern in einem technischen Verfahren eingesetzt.From EP-A-03 26 063 it is known to be aliphatic, aromatic or heteroaromatic aldehydes or ketones with hydrocyanic acid in counter were to implement an oxynitrilase, with appropriate R or S-cyanohydrins are formed enantioselectively. The handling of hydrocyanic acid because of its low boiling point Difficulties. In addition, hydrocyanic acid is highly toxic and is there reluctantly used in a technical process.

In J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 6992-6996 ist ein Verfahren zur Herstellung von R-cyanhydrinen durch Umsetzung von aromatischen oder aliphatischen Aldehyden mit Acetoncyanhydrin in Gegenwart einer D-Oxynitrilase beschrieben. Um enantiomerenangereicherte Produkte zu erhalten, muß das Verfahren dabei in Gegenwart eines organischen, mit Wasser nicht mischbaren Lösungsmittels durchgeführt werden, da es in wäßriger Lösung allein zu einer Racemisierung des Produktes kommt.In J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 6992-6996 is a process for Production of R-cyanohydrins by reaction of aromatic or aliphatic aldehydes with acetone cyanohydrin in the presence a D-oxynitrilase. Enantiomerically enriched To obtain products, the process must be in the presence an organic, water-immiscible solvent be carried out as it is alone in an aqueous solution Racemization of the product is coming.

Es wurde nun unerwarteterweise ein enantioselektives Verfahren zur Herstellung des S-Enantiomeren eines optisch aktiven Cyan hydrins gefunden, bei dem die Produkte in hoher optischer Rein heit anfallen und bei dem keine Blausäure und kein organisches Lösungsmittel verwendet werden müssen. S-Cyanhydrine, die von aliphatischen Aldehyden abgeleitet sind, können auf diese Weise erstmals mit Hilfe einer S-Hydroxynitrillyase hergestellt wer den.It has now unexpectedly become an enantioselective process for the preparation of the S enantiomer of an optically active cyan hydrins found in which the products are of high optical purity and no hydrocyanic acid and no organic Solvents must be used. S-cyanohydrins by aliphatic aldehydes can be derived in this way for the first time with the help of an S-hydroxynitrile lyase the.

Gegenstand der Erfindung ist demnach ein enantioselektives Verfahren zur Herstellung des S-Enantiomeren eines optisch ak tiven Cyanhydrins durch Umsetzung eines Aldehydes oder eines unsymmetrischen Ketons mit einem Cyanidgruppendonor, das da durch gekennzeichnet ist, daß der Aldeyhd oder das Keton in ei nem Verdünnungsmittel in Gegenwart einer S-Hydroxynitrillyase mit dem Cyanidgruppendonor umgesetzt wird, worauf das gebildete Cyanhydrin aus der Reaktionsmischung isoliert wird.The invention accordingly relates to an enantioselective Process for the preparation of the S-enantiomer of an optically ak tive cyanohydrin by reacting an aldehyde or one unsymmetrical ketones with a cyanide group donor that is there is characterized in that the Aldeyhd or the ketone in egg diluent in the presence of an S-hydroxynitrile lyase is reacted with the cyanide group donor, whereupon the formed Cyanohydrin is isolated from the reaction mixture.

Als Ausgangsmaterialien im erfindungegemäßen Verfahren werden ein Aldehyd oder ein unsymmetrisches Keton, ein Cyanidgruppen donor, eine Hydroxynitrillyase und ein Verdünnungsmittel einge setzt. As starting materials in the process according to the invention an aldehyde or an unsymmetrical ketone, a cyanide group donor, a hydroxynitrile lyase and a diluent puts.

Unter Aldehyde sind dabei aliphatische, aromatische oder heteroaromatische Aldehyde zu verstehen. Unsymmetrische Ketone sind aliphatische, aromatische oder heteroaromatische Ketone, bei denen das Carbonylkohlenstoffatom ungleich substituiert ist. Bevorzugt werden Aldehyde, ganz bevorzugt aliphatische oder aromatische Aldehyde umgesetzt. Solche Aldehyde und Ketone sind bekannt oder wie üblich herstellbar.Aldehydes include aliphatic, aromatic or to understand heteroaromatic aldehydes. Unsymmetrical ketones are aliphatic, aromatic or heteroaromatic ketones, in which the carbonyl carbon atom is unequally substituted is. Aldehydes are preferred, most preferably aliphatic or implemented aromatic aldehydes. Such aldehydes and ketones are known or can be produced as usual.

Als Cyanidgruppendonor kommt ein Cyanhydrin der allgemeinen Formel R₁R₂C(OH)(CN), in der R₁ und R₂ unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine unsubstituierte oder mit unter den Reak tionsbedingungen inerten Gruppen substituierte Kohlenwasser stoffgruppe, oder R₁ und R₂ gemeinsam eine Alkylengruppe mit 4 oder 5 C-Atomen bedeuten, wobei R₁ und R₂ nicht gleichzeitig Wasserstoff bedeuten, in Betracht. Die Kohlenwasserstoffgruppen sind aliphatische oder aromatische, bevorzugt aliphatische Gruppen. Bevorzugt bedeuten R₁ und R₂ Alkylgruppen mit 1 bis 6 C-Atomen, ganz bevorzugt ist der Cyanidgruppendonor Acetoncyan hydrin.The cyanide group donor is a cyanohydrin of the general formula R ₁ R ₂ C (OH) (CN) in which R ₁ and R ₂ independently of one another are hydrogen or an unsubstituted or hydrocarbon group substituted with groups which are inert under the reaction conditions, or R ₁ and R ₂ together represent an alkylene group with 4 or 5 carbon atoms, where R ₁ and R ₂ do not simultaneously denote hydrogen. The hydrocarbon groups are aliphatic or aromatic, preferably aliphatic groups. R ₁ and R _{2 are} preferably alkyl groups having 1 to 6 carbon atoms, the cyanide group donor acetone cyanohydrin being very preferred.

Die Herstellung des Cyanidgruppendonors kann nach bekannten Verfahren erfolgen. Cyanhydrine, insbesonders Acetoncyanhydrin, sind auch käuflich zu erwerben.The preparation of the cyanide group donor can be carried out according to known methods Procedure. Cyanohydrins, especially acetone cyanohydrin, are also available for purchase.

Als Hydroxynitrillyase kommen S-Hydroxynitrillyasen, z. B. aus Sorghum bicolor und Hevea brasiliensis in Frage. Als besonders geeignet hat sich die Hydroxynitrillyase aus Hevea brasiliensis herausgestellt. Die Hydroxynitrillyase kann dabei gereinigt oder ungereinigt, als solche oder immobilisiert eingesetzt wer den. Die Bereitstellung und Reinigung der Hydroxynitrillyase kann beispielsweise durch Fällung mit Ammoniumsulfat und an schließender Gelfiltration, etwa gemäß D. Selmar et al., Phy siologia Plantarum 75 (1989), 97-101 erfolgen. As hydroxynitrile lyase come S-hydroxynitrile lyases, e.g. B. from Sorghum bicolor and Hevea brasiliensis in question. As special The hydroxynitrile lyase from Hevea brasiliensis has been suitable exposed. The hydroxynitrile lyase can be purified or uncleaned, used as such or immobilized the. The provision and purification of the hydroxynitrile lyase can, for example, by precipitation with ammonium sulfate and closing gel filtration, for example according to D. Selmar et al., Phy siologia Plantarum 75 (1989), 97-101.

Die Umsetzung erfolgt in einem Verdünnungsmittel. Als besonders vorteilhaft hat sich herausgestellt, daß die Umsetzung in einem wäßrigen Verdünnungsmittel ohne Zusatz organischer Lösungsmit tel, die die Aktivität des Enzyms rasch hemmen, erfolgen kann, wobei es unerwarteterweise zu keiner Racemisierung des Pro duktes kommt. Die erfindungsgemäße Umsetzung kann aber auch in einem organischen Verdünnungsmittel oder in Gegenwart eines or ganischen Lösungsmittels ausgeführt werden. Das organische Lö sungsmittel kann dabei als Colösungsmittel in einem wäßrigen System oder als Lösungsmittel in einem Zweiphasensystem, bei spielsweise in einem Membranreaktor, dienen. Als organische Verdünnungsmittel können aliphatische oder aromatische Kohlen wasserstoffe, die gegebenenfalls halogeniert sind, Alkohole, Ether, Ester verwendet werden. Als organisches Colösungsmittel können mit Wasser mischbare organische Lösungsmittel, etwa Al kohole, als Lösungsmittel in einem Zweiphasensystem mit Wasser nicht mischbare organische Lösungsmittel wie z. B. aliphatische oder aromatische Kohlenwasserstoffe, die gegebenenfalls halogeniert sind, Ether, Ester eingesetzt werden. Bevorzugt erfolgt die Umsetzung nicht in Anwesenheit eines organischen Lösungsmittel sondern in einem wäßrigen Verdünnungsmittel. Als wäßriges Verdünnungsmittel wird Wasser, eine wäßrige Salz- oder eine wäßrige Pufferlösung eingesetzt. Bevorzugt wird eine wäß rige Pufferlösung, ganz bevorzugt eine solche, die Natriumci trat enthält, verwendet. Der pH-Wert soll dabei unter 7, bevor zugt etwa 3 bis 5 betragen.The reaction takes place in a diluent. As special It has been found to be advantageous that the implementation in one aqueous diluent without the addition of organic solvents tel, which can quickly inhibit the activity of the enzyme, unexpectedly, there is no racemization of the Pro product comes. The implementation of the invention can also in an organic diluent or in the presence of an or ganic solvent. The organic Lö can be used as cosolvent in an aqueous System or as a solvent in a two-phase system, at serve, for example, in a membrane reactor. As organic Diluents can be aliphatic or aromatic carbons hydrogen, which are optionally halogenated, alcohols, Ethers, esters can be used. As an organic cosolvent can be mixed with water-miscible organic solvents, such as Al kohole, as a solvent in a two-phase system with water immiscible organic solvents such as e.g. B. aliphatic or aromatic hydrocarbons, optionally are halogenated, ethers, esters are used. Prefers the reaction is not carried out in the presence of an organic Solvent but in an aqueous diluent. As aqueous diluent is water, an aqueous salt or an aqueous buffer solution is used. An aqueous is preferred Rige buffer solution, most preferably one that the sodium Ci stepped contains, used. The pH should be below 7 before trains about 3 to 5.

Pro g Aldehyd oder unsymmetrisches Keton werden etwa 150 bis 300 g Verdünnungsmittel und 500 bis 2000 IU Aktivität Hydroxynitrillyase, bevorzugt etwa 800 bis 1500 IU, zugesetzt. Ein IU (International Unit) drückt dabei die Bildung von einem Mikromol Produkt pro Minute und pro Gramm Enzymrohisolierung aus. Die benötigte Menge der jeweiligen Hydroxynitrillyase ermittelt man am besten in einem Aktivitätstest, etwa gemäß Selmar et al., Analytical Biochemistry 166 (1987), 208-211. Per gram of aldehyde or unsymmetrical ketone, about 150 to 300 g of diluent and 500 to 2000 IU activity Hydroxynitrile lyase, preferably about 800 to 1500 IU, is added. An IU (International Unit) expresses the formation of one Micromole of product per minute and per gram of raw enzyme insulation out. The required amount of the respective hydroxynitrile lyase is best determined in an activity test, for example according to Selmar et al., Analytical Biochemistry 166: 208-211 (1987).

Pro Mol eingesetzte Aldehyd- oder Ketogruppe werden mindestens ein Mol, bevorzugt 1 bis 2 Mole Cyanidgruppendonor zugegeben.Per mole of aldehyde or keto group used are at least one mole, preferably 1 to 2 moles, of cyanide group donor added.

Die Reaktionsmischung wird bei Temperaturen von etwa 0°C bis zur Desaktivierungstemperatur der Hydroxynitrillyase, bevorzugt von 20 bis 30°C geschüttelt oder gerührt.The reaction mixture is at temperatures from about 0 ° C to to the deactivation temperature of the hydroxynitrile lyase, preferred shaken or stirred from 20 to 30 ° C.

Dabei wird die Cyanidgruppe vom Cyanidgruppendonor auf das Carbonylkohlenstoffatom des eingesetzten Aldehyds oder Ketons übertragen und es entsteht überwiegend das S-Enantiomere des, dem eingesetzten Aldehyd oder Keton entsprechenden, optisch aktiven Cyanhydrins. Der Fortschritt der Reaktion wird dabei gaschromatographisch verfolgt.The cyanide group is transferred from the cyanide group donor to the Carbonyl carbon atom of the aldehyde or ketone used transferred and the S enantiomer of, corresponding to the aldehyde or ketone used, optically active cyanohydrin. The progress of the reaction will be there followed by gas chromatography.

Nach erfolgter Umsetzung kann das gebildete Cyanhydrin aus der Reaktionsmischung mit Hilfe eines organischen Lösungsmittels, das mit Wasser nicht mischbar ist, etwa aliphatische oder aro matische gegebenenfalls halogenierte Kohlenwasserstoffe, z . B. Pentan, Hexan, Benzol, Toluol, Methylenchlorid, Chloroform, Chlorbenzole, Ether wie etwa Diethylether, Diisopropylether oder Ester, beispielsweise Essigsäureethylester oder Mischungen solcher Lösungsmittel extrahiert werden. Sollte die Reinheit des extrahierten Produktes nicht ausreichend sein, kann eine Reinigungsoperation angeschlossen werden. Die Reinigung kann durch eine bekannte Methode erfolgen und gelingt am besten chromatographisch.After the reaction is complete, the cyanohydrin formed can be removed from the Reaction mixture using an organic solvent, that is immiscible with water, such as aliphatic or aro Matic optionally halogenated hydrocarbons, e.g. B. Pentane, hexane, benzene, toluene, methylene chloride, chloroform, Chlorobenzenes, ethers such as diethyl ether, diisopropyl ether or esters, for example ethyl acetate or mixtures such solvents are extracted. Should the purity of the extracted product may not be sufficient Cleaning operation can be connected. The cleaning can done by a known method and works best chromatographic.

In einer bevorzugten Ausführungsform werden etwa 100 mg Aldehyd in 15 bis 30 g einer wäßrigen Pufferlösung mit einem pH-Wert von etwa 4, die Natriumcitrat enthält, mit 2 Mol Acetoncyanhy drin pro Mol eingesetzter Aldehyd- oder Ketogruppe und 200 IU Aktivität Hydroxynitrillyase aus Hevea brasiliensis bei Raumtemperatur geschüttelt. Der Fortschritt der Reaktion wird gaschromatographisch verfolgt. Nach beendeter Reaktion wird die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid extrahiert, die organi sche Phase getrocknet und abgedampft. Eine weitere Reinigung des Rückstandes kann säulenchromatographisch erfolgen. In a preferred embodiment, about 100 mg of aldehyde in 15 to 30 g of an aqueous buffer solution with a pH of about 4, which contains sodium citrate, with 2 moles of acetone cyanide in it per mole of aldehyde or keto group used and 200 IU Hydroxynitrile lyase activity from Hevea brasiliensis in Shaken at room temperature. The progress of the reaction will followed by gas chromatography. When the reaction has ended, the Reaction mixture extracted with methylene chloride, the organi phase dried and evaporated. Another cleaning the residue can be carried out by column chromatography.

Nach dem erfindungsgemäßen Verfahren werden auf einfache Weise optisch aktive, S-angereicherte Cyanhydrine ohne Blausäure und ohne ein organisches Lösungsmittel verwenden zu müssen, her gestellt. Das Verfahren stellt somit eine Bereicherung der Technik dar.According to the inventive method are simple optically active, S-enriched cyanohydrins without hydrocyanic acid and without having to use an organic solvent posed. The procedure thus enriches the Technology.

example 1

100 mg Capronaldehyd (1 mMol) wurden in 20 ml 0,1 molarem Ci tratpuffer mit einem pH-Wert von 4 gelöst, mit 1 g Enzymrohiso lierung mit einer Aktivität von 100 IU pro Gramm als ge friergetrocknetes Pulver, erhalten gemäß D. Selmar et al., Phy siologica Plantarum 75 (1989), 97 bis 101, und 168 mg Aceton cyanhydrin (2 mMol) versetzt und 2 Stunden bei Raumtemperatur am Schüttler geschüttelt. Die Reaktion wurde gaschromatogra phisch verfolgt. Nach beendeter Reaktion wurde dreimal mit je 25 ml Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel am Rotavapor abgedampft.100 mg of capronaldehyde (1 mmol) were dissolved in 20 ml of 0.1 molar citrate buffer with a pH of 4, with 1 g of enzyme crude with an activity of 100 IU per gram as freeze-dried powder, obtained according to D. Selmar et al., Phy siologica Plantarum 75 (1989), 97 to 101, and 168 mg of acetone cyanohydrin ( 2 mmol) and shaken for 2 hours at room temperature on a shaker. The reaction was followed by gas chromatography. After the reaction had ended, the mixture was extracted three times with 25 ml of methylene chloride each time. The organic phases were combined, dried over sodium sulfate and the solvent was evaporated off on a rotavapor.

Dabei wurden 114 mg, das sind 90 % der Theorie, S- Capronaldehydcyanhydrin mit einer Enantiomerenreinheit ee von 84% erhalten.114 mg, that is 90% of theory, were Capronaldehyde cyanohydrin with an enantiomeric purity ee of 84% received.

Example 2

80 mg Benzaldehyd (0,75 mMol) und 128 mg Acetoncyanhydrin (1,5 mMol) wurden, wie im Beispiel 1 beschrieben, in 15 ml 0,1 mo larem Citratpuffer (pH-Wert = 4) mit 1 g der im Beispiel 1 be schriebenen Enzymrohisolierung umgesetzt.80 mg benzaldehyde (0.75 mmol) and 128 mg acetone cyanohydrin (1.5 mmol) were, as described in Example 1, in 15 ml 0.1 mo larem citrate buffer (pH = 4) with 1 g of the be in Example 1 Written enzyme raw insulation implemented.

Dabei wurden 45 mg, das sind 45% der Theorie S-Benzaldehyd cyanhydrin mit einer Enantiomerenreinheit ee von 94% erhalten.45 mg, that is 45% of theory, were S-benzaldehyde cyanohydrin with an enantiomeric purity ee of 94%.

Die Bestimmung der optischen Reinheit der gebildeten Aldehyd cyanhydrine erfolgte gaschromatographisch auf einer Kapillar säule als Menthylcarbonat gemäß J.W. Westley et al., J. Org. Chem. 33 (1968), 3978-3980.Determination of the optical purity of the aldehyde formed cyanohydrine was carried out by gas chromatography on a capillary column as menthyl carbonate according to J.W. Westley et al., J. Org. Chem. 33 (1968), 3978-3980.

Die Bestimmung der optischen Reinheit der Ketoncyanhydrine er folgte gaschromatographisch auf einer chiralen Trennphase gemäß V. Schurig et al., Ang. Chemie 102 (1990), 969-986.Determining the optical purity of the ketone cyanohydrins followed by gas chromatography on a chiral separation phase according to V. Schurig et al., Ang. Chemie 102 (1990), 969-986.

Claims

1. Enantioselective process for the preparation of the S enantiomer of an optically active cyanohydrin by reacting an aldehyde or an unsymmetrical ketone with a cyanide group donor, characterized in that the aldehyde or the ketone is reacted with the cyanide group donor in a diluent in the presence of an S-hydroxynitrile lyase is, whereupon the cyanohydrin formed is isolated from the reaction mixture.

2. The method according to claim 1, characterized in that a aliphatic, aromatic or heteroaromatic aldehyde is implemented.

3. The method according to claim 2, characterized in that a aliphatic or aromatic aldehyde is implemented.

4. The method according to any one of claims 1 to 3, characterized in that a cyanohydrin of the formula (R ₁ ) (R ₂ ) C (OH) (CN), in which R ₁ and R _{2 are} alkyl groups, is used as the cyanide group donor.

5. The method according to claim 4, characterized in that as Cyanide group donor acetone cyanohydrin is used.

6. The method according to any one of claims 1 to 5, characterized records that as a diluent an aqueous dilution is used.

7. The method according to claim 6, characterized in that the Reaction in an aqueous buffer solution at a pH from 3 to 5 is carried out.

8. The method according to any one of claims 1 to 7, characterized records that as hydroxynitrile lyase an S-hydroxyni Trillyase from Hevea brasiliensis or Sorghum bicolor is used.

9. The method according to any one of claims 1 to 8, characterized records that the cyanohydrin formed from the Reak tion mixture extracted and purified by chromatography becomes.

10. Use of an S-hydroxynitrile lyase from Hevea Brazil sis or sorghum bicolor for the production of S-cyanhydri nen.