DE3421789A1 - Pharmaceutical composition from the thymus and process for its preparation - Google Patents
Pharmaceutical composition from the thymus and process for its preparationInfo
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Abstract
Description
ARZNEIMITTEL AUS DEM THYMUS UND VERFAHREN 3 4 217 8 9 ZU DESSEN HERSTELLUNGTHYMUS MEDICINAL PRODUCTS AND PROCEDURES 3 4 217 8 9 FOR ITS PRODUCTION
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das Gebiet der Medizin, insbesondere auf ein Arzneimittel aus dem Thymus und auf ein Verfahren zu dessen Herstellung und kann zur Wiederherstellung der gestörten Prozesse der Immunogenese, Regenerierung, Hämopoese, Hämokoagulation und zur Normalisierung des Kohlenhydrat-, Fett- und Eiweißstoffwechsels beim Menschen verwendet werden.The present invention relates to the field medicine, in particular a drug from the thymus and a process for its production and can restore the disturbed processes of immunogenesis, regeneration, hemopoiesis, hemocoagulation and to normalize the carbohydrate, fat and protein metabolism used in humans.
Es ist bekannt, daß in den Extrakten aus dem Thymus (Thymusdrüse ) der Menschen und Tiere physiologisch wirksame Stoffe enthalten sind, die das Wachstum und die Entwicklung des Organismus sowie einige immunologische und metabolische Prozesse beeinflussen (Comsa T., Amer. J.Med. Sei. 250, 79, 1965; Goldstein A. et al., J.Immunol. 140, 559, 1970; SU-PS Nr. 459227, US-PS Nr. 4120951).It is known that the extracts from the thymus (thymus gland) of humans and animals are physiologically active Substances are included that stimulate the growth and development of the organism as well as some immunological and affect metabolic processes (Comsa T., Amer. J. Med. May be. 250, 79, 1965; Goldstein A. et al., J. Immunol. 140 559, 1970; SU-PS No. 459227, US-PS No. 4120951).
Nach den Literaturangaben wird der Extrakt aus dem Thymusgewebe von Kälbern (Thymozin) zum therapeutischen Ziel zur Wiederherstellung der Funktion des Immunitätssystems beim Menschen bei einigen onkologischen Erkrankungen und Erkrankungen mit angeborener Insuffizienz des immunologischen Systems verwendet (Goldstein A. et al., Transplant Proc. 7. 1 (suppl. I), 681, 1975» Sakai et al., Cancer 56, 5, 975, 1975).According to the literature, the extract from the thymus tissue of calves (thymozin) is therapeutic Aim to restore the function of the immune system in humans in some oncological diseases and diseases with congenital insufficiency of the immunological system (Goldstein A. et al., Transplant Proc. 7. 1 (suppl. I), 681, 1975 »Sakai et al., Cancer 56, 5, 975, 1975).
Die Einführung von Thymozin den Kranken führte zur Wiederherstellung der gestörten immunologischen Reaktivität des Organismus. Nichtsdestoweniger sind bis heute die therapeutische Effektivität der physiologisch wirksamen Stoffe aus dem Thymusgewebe sowie die Indikationen zu deren Verwendung in der medizinischen Praxis nicht genügend untersucht norden.The introduction of thymozine to the sick led to the restoration of the impaired immunological reactivity of the organism. Nevertheless, to date, the therapeutic effectiveness of the physiologically effective Substances from the thymus tissue and the indications for their use in medical practice have not been sufficiently investigated north.
Heutzutage ist ein Arzneimittel aus dem Thymusgewebe - Thymozin bekannt (Goldstein A. et al. Proo. Nat. Acad. Sei. USA, 69, 7, 1800, 1972), das einen Komplex (gegen 50 Komponenten) der sauren Polypeptide von 1000 bis 14000 Dalton Molekularmasse darstellt (Hooper et al., Ann. N.-Y. Acad. Sei., 249, 125, 1975). Thymozin wird folgenderweise hergestellt (Hooper et al., 1975). Man homogenisiertNowadays a drug from the thymus tissue - thymozine is known (Goldstein A. et al. Proo. Nat. Acad. May be. USA, 69, 7, 1800, 1972), which contains a complex (against 50 components) of the acidic polypeptides from 1000 to Represents 14,000 Dalton molecular mass (Hooper et al., Ann. N.-Y. Acad. Sci., 249, 125, 1975). Thymozin is prepared as follows (Hooper et al., 1975). One homogenizes
Q/. 9 1 7 Q q _ 4 — Q /. 9 1 7 Q q _ 4 -
den Kalberthymus in einer 0,15 molaren NaCl-Lösung, zentrifugiert bei 14000 g, isoliert die Flüssigkeit über dem Niederschlag, erwärmt diese bei einer Temperatur von 80 0C, filtriert den ausgefallenen Niederschlag ab und gibt der zurückgebliebenen Lösung 5 Azetonvoluaiina hinzu. Man trocknet den erhaltenen Niederschlag auf dem Filter, löst dann wieder auf und salzt mit Ammoniumsulfat zuerst bei der 25%igen Sättigung und dann bei der 50%igenthe Kalberthymus in a 0.15 molar NaCl solution, centrifuged at 14,000 g, the liquid above the precipitate isolated, heats it at a temperature of 80 0 C, filtered from the precipitate, and outputs the remaining 5 Azetonvoluaiina solution added. The precipitate obtained is dried on the filter, then redissolved and salted with ammonium sulfate first at 25% saturation and then at 50%
Sättigung aus. Man filtriert das nach der Aussalzung erhaltene Präzipitat, entsalzt auf einer Kolonne mit SeI-fadex G-25 und lyophilisiert. In der gegebenen Reinigungsstufe besitzt der erhaltene Komplex der im Arzneimittel enthaltenen Polypeptide die am deutlichsten ausgeprägte biologische Wirksamkeit -die Fähigkeit, die Zellenimmunität anzuregen (Hooper et al., 1975)·Saturation off. What is obtained after the salting out is filtered off Precipitate, desalted on a column with SeI-fadex G-25 and lyophilized. In the given cleaning level the complex obtained has that in the drug polypeptides contained the most pronounced biological effectiveness - the ability to increase cell immunity to stimulate (Hooper et al., 1975)
Eine weitere Präparatreinigung führt zur Herabsetzung der biologischen Wirksamkeit.A further cleaning of the preparation leads to a reduction biological effectiveness.
Das nach dem genannten Verfahren erhaltene Thymozin besitzt einen Komplex der sauren Polypeptide mit einem isoelektrischen Punkt von 3,5 bis 6,7 and der Molekularmasse von 1000 bis 14000 Dalton unter bedeutendem Vorherrschen der Asparagin- und Glutaminsäure, die insgesamt 50 Masse%, bezogen auf die Thymozinmasse, betragen.The thymocin obtained by the process mentioned has a complex of the acidic polypeptides with an isoelectric one Point from 3.5 to 6.7 on the molecular mass from 1000 to 14000 Dalton with a significant predominance of aspartic and glutamic acid, which in total 50% by mass, based on the thymozine mass.
Bs muß gesagt werden, daß das Herstellungsverfahren von Thymozin kompliziert, mehrstufig (10 Stufen) ist. Die Verwendung dieses Verfahrens unter großtechnischen Bedingungen ist mit bestimmten Schwierigkeiten verbunden (solche Vorgänge, wie Ultrazentrifugieren, Verwendung von Sefadexen). Das Verfahren sichert keine genügend hohe Ausbeute an Arzneimittel Thymozin. Bei einer Reihe von Kranken ruft Thymozin Nebeneffekte und allergische Reaktionen hervor. Die therapeutische Effektivität von Thymozin und die Möglichkeit, dieses in der medizinischen Praxis zu verwenden, sind nicht vollständig untersucht worden.It must be said that the manufacturing process of thymozine is complicated, multi-stage (10 stages). the Use of this process under industrial conditions is associated with certain difficulties (operations such as ultracentrifugation, use of Sefadexen). The process does not ensure a sufficiently high yield of the drug thymozin. With a number of sick people Thymozin causes side effects and allergic reactions. The therapeutic effectiveness of thymozin and the possibility of this in medical practice too use have not been fully investigated.
yj Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, solch ein yj The invention is based on the object of such a
Arzneimittel aus dem Thymusgewebe, das Polypeptide alkalischer Natur enthält, durch die Auswahl entsprechender technologischer Herstellungsvorgänge zu entwickeln, dasMedicinal products obtained from the thymic tissue containing polypeptides of an alkaline nature, by selecting the appropriate ones technological manufacturing processes to develop the
ein breiteres pharmakologisehes Wirkungsspektrum unter Ausbleiben der Nebeneffekte und allergischen Reaktionen bei dessen Anwendung besitzt.a broader range of pharmacological effects The absence of side effects and allergic reactions when using it.
Die Aufgabe wird dadurch gelöst, daß ein das PoIypeptide mit dem isoelektrischen Punkt von 3,5 bis 6,7 enthaltende Arzneimittel aus dem Thymus, vorgeschlagen wird, das erfindungsgemäß Polypeptide von 600 bis 6000 DaIton Molekularmasse enthält, von denen 10 bis 20 Masse% einen isoelektrischen Punkt von 7 bis 9 und eine Molekularmasse von 2000 bis 4000 Dalton haben.The object is achieved in that a polypeptide with the isoelectric point of 3.5 to 6.7 containing drugs from the thymus is, the polypeptides according to the invention from 600 to 6000 DaIton contains molecular mass, of which 10 to 20% by mass an isoelectric point of 7 to 9 and a molecular mass from 2000 to 4000 Daltons.
Die Verwendung des erfindungsgemäßen Arzneimittels aus dem Thymus in der medizinischen Praxis gestattet, die herabgesetzte immunologische Reaktivität des Organismus anzuregen ,die Aktivität der Reparationsprozesse und der Hämopoese zu fördern sowie der Entwicklung der Infektions- und Destruktionsprozesse im Organismus vorzubeugen, was ermöglicht, eine Reihe der Ecke anklingen effektiver zu kurieren oder deren Entwicklung beim Menschen vorzubeugen. Die Verwendung des Arzneimittels aus eiern Thymus unter stationären Bedingungen gestattet, die Behandlungsdauer der Kranken mit chronischen Erkrankungen und gestörten Regenerierungsprozessen wesentlich herabzusetzen, was bei der Verwendung der Erfindung in der Medizin ausschlaggebend sein kann· Zum Unterschied von den bekannten Präparaten aus dem Thymus regt das erfindungsgemäße Arzneimittel aus dem Thymus dank dem Vorliegen von Polypeptiden alkalischer Natur darin die Prozesse der Regenerierung der verletzten Gewebe an, was sich in der Verminderung der Dauer derThe use of the medicament according to the invention from the thymus permitted in medical practice, the reduced immunological reactivity of the organism to stimulate the activity of the reparations processes and promote hemopoiesis and prevent the development of infection and destruction processes in the organism, which allows to echo a number of the corner more effectively to cure or their development in humans to prevent. The use of the drug from eggs thymus under inpatient conditions is permitted To significantly reduce the duration of treatment for patients with chronic diseases and impaired regeneration processes, what can be decisive when using the invention in medicine In contrast to the known preparations from the thymus, the medicament according to the invention stimulates from the Thymus thanks to the presence of polypeptides of an alkaline nature in it the processes of regeneration of the injured Tissue, which translates into reducing the duration of the
JO Wunden- und Geschwüreheilung äußert. Das Arzneimittel regt auch die Blutbildungsprozesse an, was sich in der Erhöhung der Menge von Leukozyten, Thrombozyten und Erythrozyten im Falle deren erniedrigten Gehalts im peripheren Blut äußert. Das erf indungsgemäße Arzneimittel aus dem Thymus ruft keine Nebenerscheinungen und allergischen Reaktionen hervor, während es nach den Literatur angaben bekannt ist, daß die Verwendung von Thymozin bei 20 bis 30% der Kranken von allergischen Reaktionen begleitet wird.JO expresses wound and ulcer healing. The medicine stimulates also the blood formation processes, which translates into the increase the amount of leukocytes, thrombocytes and erythrocytes in the case of their decreased content in the peripheral blood. The medicament according to the invention from the thymus does not cause side effects and allergic reactions, while it is known according to the literature, that the use of thymozine in 20 to 30% of the sick is accompanied by allergic reactions.
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Es wird auch ein Verfahren zur Herstellung des Arzneimittels aus dem Thymus vorgeschlagen, das die Homogenisierung des Thymusgewebes, die Trennung des erhaltenen Homogenats in den Niederschlag und in die Flüssigkeit über dem Niederschlag, deren Behandlung mit einem organischen Lösungsmittel mit darauffolgender Isolierung des Endproduktes vorsieht, in welchem erfindungsgemäß das Homogenat des Thymusgewebes vor der Trennung mit einer 1 - 10%igen wäßrigen Essigsäurelösung in Gegenwart von Zinkchlorid mindestens während 24 Stunden extrahiert wird.There will also be a method of making the drug Proposed from the thymus that the homogenization of the thymus tissue, the separation of the obtained Homogenate in the precipitate and in the liquid above the precipitate, treating them with an organic Provides solvent with subsequent isolation of the end product, in which according to the invention the Homogenate the thymus tissue before separation with a 1-10% aqueous acetic acid solution in the presence of Zinc chloride is extracted for at least 24 hours.
Das erfindungsganäße Verfahren ist durch eine einfache Technologie gekennzeichnet und unter Industriebedingungen leicht reproduzierbar. Das Verfahren gestattet, Proteine hoher Molekularmasse und andere hochmolekulare Verbindungen zu hydrolisieren, das Arzneimittel aus dem Thymus mit einer hohen Ausbeute und von einem hohen Heinheitsgrad zu erhalten, das bei der Einführung in den Organismus keine Nebenerscheinungen und keine allergischen Reaktionen hervorruft· Die Verwendung einer langwierigen Extraktion mit Essigsäure in Gegenwart katalytischer Mengen von Zinkchlorid trägt zum Entzug der Polypeptide von alkalischer Natur bei, deren Vorliegen im Arzneimittel die Erweiterung seines pharmakologischen Wirkungsspektrums bewirkt. Es ist zweckmäßig, zur maximalem Isolierung der Polypeptide mit dem isoelektrischen Punkt von 7 bis 9 und einer Molekülarmasse von 2000 bis 4000 DaIton, welche die höchste biologische Wirksamkeit besitzen, die Extraktion innerhalb von 48 bis 72 Stunden bei einem pH-Wert von 2,5 bis 4 und einer Temperatur von 5 bis 150C in Gegenwart von Zinkchlorid durchzuführen, das in einer Menge von 0,2 bis 2 g pro I 1 Essigsäure genommen wird.The inventive method is characterized by a simple technology and easily reproducible under industrial conditions. The method allows to hydrolyze proteins of high molecular mass and other high molecular compounds, to obtain the drug from the thymus with a high yield and of a high degree of unity, which when introduced into the body does not cause side effects and allergic reactions Extraction with acetic acid in the presence of catalytic amounts of zinc chloride contributes to the withdrawal of the polypeptides of an alkaline nature, the presence of which in the drug causes the expansion of its pharmacological spectrum of action. For maximum isolation of the polypeptides with the isoelectric point of 7 to 9 and a molecular weight of 2000 to 4000 DaIton, which have the highest biological effectiveness, the extraction within 48 to 72 hours at a pH of 2.5 to 4 and a temperature of 5 to 15 0 C in the presence of zinc chloride, which is taken in an amount of 0.2 to 2 g per liter of acetic acid.
Um die biologisch wirksamen Stoffe - Polypeptide alkalischer Natur vollständiger zu isolieren und die Rohstoffkonservierung zu bewirken, wird das Thymusgewebe vor der Homogenisierung vorzugsweise bei einer Temperatur von -3O0C bis -5O0C mindestens während 100 Stunden stehengelassen. In order to isolate the biologically active substances - polypeptides of an alkaline nature more completely and to effect the preservation of raw materials, the thymus tissue is preferably left to stand at a temperature of -3O 0 C to -5O 0 C for at least 100 hours before homogenization.
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Wir untersuchten die Eigenschaften dea Arzneimittels aus dem Thymus nach der Methode der Ionenaustauschchromatografie auf dem Karboxylkat ionenaustauscher "Biokarb" in der H+-Form (N.N.Xusnecova und andere, Hochmolekulare Verbindungen, 18a, 2, 555» 1976), der Gel-Filtration (Fish et al.,We investigated the properties of the drug from the thymus using the method of ion exchange chromatography on the carboxylate ion exchanger "Biokarb" in the H + form (NNXusnecova and others, high molecular weight compounds, 18a, 2, 555 »1976), gel filtration (Fish et al.,
J. Biol. Chem, 244, 4989, 1969), der zonalen Papierelektrophorese und der Elektrophorese im Polyacryl amid gel (nach üblichen Methoden) und der Aminosäurenanalyse (nach der Methode von Stein und Mur, J. Biol. Chem., 176, JO?, 1948). Mit Hilfe der Methode der Ionenaustauschohromatografie wurde festgestellt, daß die isolierten Stoffe 5 Fraktionen in einem bestimmten Prozent verhältnis enthalten, die sich durch elektrochemische Eigenschaften unterscheiden.J. Biol. Chem, 244, 4989, 1969), zonal paper electrophoresis and electrophoresis in polyacrylamide gel (using conventional methods) and amino acid analysis (using the Method by Stein and Mur, J. Biol. Chem., 176, JO ?, 1948). With the help of the ion exchange chromatography method it was found that the isolated substances contain 5 fractions in a certain percentage ratio, which are differ by their electrochemical properties.
Nachstehend wird Tabelle 1 angeführt, in der physikai is ch-chem is ehe Charakteristiken der Fraktionen dargestellt werden, welche im erfindungsgemäßen Arzneimittel aus dem Thymus enthalten sind.Table 1 is given below, in the physikai is ch-chem is ehe characteristics of the fractions are shown which are contained in the medicament according to the invention from the thymus.
Komponente Gehalt, Molekular» isoelektrischerComponent content, molecular »isoelectric
Masae% masse, Punkt, Einh. desMasae% mass, point, unit of
DaIton pH-WertesDaIton pH value
Fraktion I 40-70 600-1000 3,5-5,0Fraction I 40-70 600-1000 3.5-5.0
Fraktion II 20-40 5000-6000 5,5-6,7Fraction II 20-40 5000-6000 5.5-6.7
Fraktion III 10-20 2000-4000 7,0-9,0Fraction III 10-20 2000-4000 7.0-9.0
Die Fraktionen I, II, III bestehen aus einer Reihe von Komponenten, die nach der Methode der zonalen Elektrophorese an den Tag gelegt werden. Die Molekül ar masse jBder Fraktion wurde mit Hilfe der Gel-Filtration auf Sefadex G-25 bestimmt.Fractions I, II, III consist of a number of components exposed by the method of zonal electrophoresis. The molecular weight of each Fraction was collected using gel filtration on Sefadex G-25 determined.
Zur Festlegung des Aminosäurenbestands der Peptide der obengenannten Fraktionen wurde der automatische Aminosäurenanalysator "LKB-^lO" (Schweden) nach der Methode von Spackman D.H. et al. Anal. Chem., 1958, 30, 1190-1206 angewandt.To determine the amino acid content of the peptides of the above fractions became the automatic amino acid analyzer "LKB- ^ lO" (Sweden) according to the method by Spackman D.H. et al. Anal. Chem., 1958, 30, 1190-1206 applied.
Nachstehend wird in Tabelle 2 der AminosäurenbestandTable 2 below shows the amino acid inventory
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des erfindungsgemäßen Arzneimittels aus dem Thymus angeführt. of the medicament according to the invention from the thymus.
Aminosäureamino acid
Aminosäurengehalt im erfindungsgemäßen Arzneimittel, Mol.%Amino acid content in the invention Drug, mole%
Gehalt in Fraktionen, Mol% Content in fractions , mol%
Prak- Fr ak- Fraktion tion tion I II IIIPrak- Fr ak- parliamentary group tion tion I II III
6,3 6,3 6,5 8,66.3 6.3 6.5 8.6
10,8 10,4 12,6 2,6 5,210.8 10.4 12.6 2.6 5.2
Spuren 2,3 6,2 1,2 1,7 2,9 8,5 7,a Lanes 2.3 6.2 1.2 1.7 2.9 8.5 7, a
Spurentraces
0,60.6
6,46.4
7,57.5
14,114.1
13,213.2
11,711.7
8,78.7
1,01.0
6,56.5
5,85.8
2,42.4
3,3 2,23.3 2.2
7,17.1
4,64.6
4,24.2
5,85.8
10,410.4
6,26.2
9,59.5
10,110.1
18,618.6
0,90.9
3,93.9
1,3 3,2 0,8 0,9 0,5 21,61.3 3.2 0.8 0.9 0.5 21.6
2,12.1
Spuren SpurenTraces traces
Die biologische Wirksamkeit und ein breites pharmakologisches Wirkungsspektrum des erfindungsgemäßen Arzneimittels aus dem Thymus von 600 bis 6000 Dal ton Molekularmasse sind auf das Vorliegen von 10 bis 20 Masse % Polypeptide mit einem isoelektrischen Punkt von 7 bis 9 und einer Molekülarmasse von 2000 bis 4000 Dal ton zurückzuführen, die durch den Gehalt an Hauptaminosäurenreste, beispielsweise Lysin,gekennzeichnet werden. Den physikalisch-chemischen Eigenschaften und demThe biological effectiveness and a broad spectrum of pharmacological activity of the medicament according to the invention from the thymus of 600 to 6000 Dal ton molecular mass are due to the presence of 10 to 20 % by mass of polypeptides with an isoelectric point of 7 to 9 and a molecular arm mass of 2000 to 4000 Dal ton , which are characterized by the content of main amino acid residues, for example lysine. The physico-chemical properties and the
3 1 τ ι non 3 1 τ ι non
Aminosäurenbestand nach unterscheidet sich das Arzneimittel aus dem Thymus wesentlich von Thymozin, das aus einem Komplex der sauren Polypeptide (der isoelektrische Punkt von 3,5 bis 6,7) von 1000 bis 14000 Dalton Molekülarmasse unter bedeutendem Vorherrschen der Asparagin- und Glutaminsäure besteht, die insgesamt gegen 50 Masse% des Präparats betragen. (Hooper et al., Ann. N.-Y. Acad. Sei., 249, 125, 1975).The drug differs according to the amino acid content from the thymus essentially from thymocin, which is made up of a complex of acidic polypeptides (the isoelectric point from 3.5 to 6.7) from 1000 to 14000 Dalton molecular arm mass with a significant predominance of aspartic and glutamic acid, which in total against 50% by mass of the Preparation amount. (Hooper et al., Ann. N.-Y. Acad. Sci., 249, 125, 1975).
Das erfindungsgemäße Arzneimittel aus dem Thymus wird folgenderweise hergestellt.The thymus drug according to the present invention is produced as follows.
Das Thymusgewebe wird von Gefäßen, Blutkuchen, vom Fettzellgewebe gereinigt, mit Wasser gewaschen und der Homogenisierung unterzogen.The thymus tissue is cleaned of vessels, blood cakes, fat cell tissue, washed with water and the Subjected to homogenization.
Um den Rohstoff zu konservieren und die Ausbeute an biologisch wirksamen Stoffen, Polypeptiden mit isoelektrischen Punkten von 3,5 bis 6,7 und von 7 bis 9 zu erhöhen, empfiehlt es sich, das Thymusgewebe vor der Homogenisierung bei einer Temperatur von -500C bis -300C stehenzulassen oder dieses mit einem organischen Lösungsmittel wie Aceton, Chloroform, Äthylalkohol bei einer Temperatur von -200C bis -I0C zu behandeln.In order to preserve the raw materials and to increase the yield of biologically active substances, polypeptides having isoelectric points from 3.5 to 6.7 and from 7 to 9, it is recommended that the thymic tissue prior to homogenization at a temperature of -50 0 C. to -30 0 C or to treat this with an organic solvent such as acetone, chloroform, ethyl alcohol at a temperature of -20 0 C to -I 0 C.
Das Homogenat des Thymiisgewebes wird der Extraktion mit einer 1 - 10%igen wäßrigen Essigsäurelösung in Gegenwart von Zinkchlorid mindestens während 24 Stunden unterzogen. Die Durchführung der Extraktion unter solchen Bedingungen trägt zur vollständigsten Isolierung der Polypeptide von 2000 bis 4000 Dalton Molekül ar masse mit einem isoelektrischen Punkt von 7 bis 9 bei und sichert die Entfernung der Proteine und der hochmolekularen Verbindüngen, die allergische Reaktionen bei der Einführung des Arzneimittels aus dem Thymus den Kranken hervorrufen. Die optimale Verhältnisse der Extrakt ions durchführung ist ein pH-Wert von 2,5 bis 4., eine Temperatur von 5 bis 150C und eine Dauer von 48 bis 72 Stunden bei einem Gehalt an Zinkchlorid von 0,2 bis 2 g pro I 1 Essigsäure.The homogenate of the thymic tissue is subjected to extraction with a 1-10% strength aqueous acetic acid solution in the presence of zinc chloride for at least 24 hours. Carrying out the extraction under such conditions contributes to the most complete isolation of polypeptides from 2000 to 4000 Dalton molecular mass with an isoelectric point of 7 to 9 and ensures the removal of proteins and high molecular compounds, allergic reactions when the drug is introduced the thymus evoke the sick. The optimum conditions for the extraction process are a pH of 2.5 to 4, a temperature of 5 to 15 ° C. and a duration of 48 to 72 hours with a zinc chloride content of 0.2 to 2 g per liter 1 acetic acid.
Nach der Beendigung der Extraktion wird das erhaltene Substrat in den niederschlag und in die Flüssigkeit über dem Niederschlag getrennt, die mit einem organischenAfter completion of the extraction, the substrate obtained is precipitated and transferred into the liquid the precipitate separated with an organic
Lösungsmittel wie Aceton, Chloroform, Äthylalkohol mit darauffolgender Isolierung des sich gebildeten Niederschlags behandelt wird. Der Niederschlag wird zum FuIver getrocknet, das biologisch wirksame Stoffe, Polypeptide, enthält.Solvents such as acetone, chloroform, ethyl alcohol with subsequent isolation of the precipitate formed is treated. Precipitation becomes fuel dried, which contains biologically active substances, polypeptides.
Das Pulver wird in Essigsäure gelöst, die Lösung wird durch nitration sterilisiert und in sterile Flaschen je zu I ml abgefüllt, dann lyophilisiert und mit sterilen Gummipfropfen verschlossen. Eine Flasche enthält IO mg der aus dem Thymus isolierten Stoffe.The powder is dissolved in acetic acid, the solution is sterilized by nitration and made sterile Bottles each filled to 1 ml, then lyophilized and sealed with sterile rubber stoppers. Contains a bottle 10 mg of the substances isolated from the thymus.
Das erhaltene Arzneimittel aus dem Thymus enthält biologisch wirksame Stoffe, Polypeptide von 600 bis 6000 Dalton Molekülarmasse, bei deren folgendem Verhältnis (Masse%):The drug obtained from the thymus contains biologically active substances, polypeptides from 600 to 6000 Dalton molecular arm mass, at the following ratio (Dimensions%):
Polypeptide mit einem isoelektrischen PunktPolypeptides with an isoelectric point
von 5»5 bis 6,7 9O-8Ofrom 5 »5 to 6.7 9O-8O
Polypeptide mit einem isoelektrischen PunktPolypeptides with an isoelectric point
von 7 bis 9 10-20from 7 to 9 10-20
Das Arzneimittel aus dem Thymus stellt ein amorphes weisses Pulver oder ein weisses Pulver mit gelblicher Schattierung dar, ist in 5%iger Essigsäurelösung, in Wasser löslich, ist im Alkohol praktisch unlöslich, enthält kein Protein· der pH-Wert der I^igen wässrigen Lösung beträgt 5 bis 5,8. Das Arzneimittel aus dem Thymus wird an trockener, lichtgeschützter Stelle bei einer Temperatur von höchstens +200O innerhalb von 2 Jahren aufbewahrt·The medicinal product from the thymus is an amorphous white powder or a white powder with a yellowish shade, is soluble in 5% acetic acid solution, in water, is practically insoluble in alcohol, contains no protein, the pH of the aqueous solution is 5 to 5.8. The medicinal product from the thymus is stored in a dry, light-protected place at a temperature of no more than +20 0 O for 2 years.
Das Arzneimittel aus dem Thymus wird intramuskulär eingeführt. Der Flascheninhalt wird vor der Injektion in 1 bis 2 ml physiologischer Lösung oder Novokainlösung aufgelöst. Die Behandlungskur mit dem Arzneimittel aus dem !Hhymus beträgt 5> bis 20 Tage zu IO bis 30 mg täglich. Es wurden breite klinische Untersuchungen des erfindungsgemässen Arzneimittels aus dem Thymus bei einer Reihe menschlicher Erkrankungen . unternommen, die gezeigt haben, dass es ein breiteres pharmakologisches Wirkungsspektrum besitzt, als das nach den Literaturangaben bekannte Präparat aus dem Thymus, ohne Nebenerscheinungen und allergische Reaktionen hervorzurufen.The medicine from the thymus is introduced intramuscularly. The contents of the bottle are in Dissolve 1 to 2 ml of physiological solution or novocaine solution. The treatment regimen with the medicine from the ! Hhymus is 5> to 20 days to IO to 30 mg daily. There have been broad clinical studies of the drug of the present invention from the thymus in a Series of human diseases. undertaken that have shown that there is a broader pharmacological Has spectrum of activity than that according to the literature well-known preparation from the thymus, without causing side effects and allergic reactions.
Das erfindungsgemäße Arzneimittel aus dem Thymus wird empfohlen zur Behandlung von akuten und chronischen ei-The medicament according to the invention from the thymus is recommended for the treatment of acute and chronic egg
-ii_ 3 4 2 1 7 8 G-ii_ 3 4 2 1 7 8 G
trigen Ent ζ ündungs erkrankungen der Knochen und der Weich" gewebe, von der chronischen posttraumatischen und hä'matogenen Osteomyelitis, von Knochenbrüchen, von Brandwunden, von trophischen Geschwüren, Wundliegen, Strahlennekrο-se der Gewebe, von Atherosklerosis obliterans, von chronischen Pneumonien, von peptischen Geschwüren· von den Zuständen, die mit der Hypofunktion des Thymus, mit der Immunitäts- und Blutbildungshemmung nach der durchgeführten Strahlentherapie oder Chemotherapie bei onkologischen Kranken verbunden sind. Es wird empfohlen, das Arzneimittel aus dem Thymus zwecks Prophylaxe der Infektionskomplikationen, Hemmung der Immunität, Blutbildung,trigen inflammatory diseases of the bones and the soft " tissue, from chronic post-traumatic and hematogenous osteomyelitis, from broken bones, from burns, of trophic ulcers, bedsores, radiation necrosis the tissues, from atherosclerosis obliterans, from chronic Pneumonias, from peptic ulcers · from the conditions associated with the hypofunction of the thymus, with the Inhibition of immunity and blood formation after the performed Radiation therapy or chemotherapy in oncological sufferers are linked. It is recommended that the medicine from the thymus for the purpose of prophylaxis of infection complications, inhibition of immunity, blood formation,
Regenerationsprozesse in der posttraumatischen und postoperativen Periode, während der Durchführung der Strahlentherapie oder Chemotherapie, beim Gebrauch massiver Antibiotikadosen zu verwenden. Es empfiehlt sich, das Arzneimittel bei Unverträglichkeit der antibakteriellen Therapie oder beim Ausbleiben des Effekts sowie als Normalisierungsmittel bei funktionellen Störungen des Kohlenhydrat-, Fett- und EiweiJBstoffwechsels im Organismus zu verwenden.Regeneration processes in the post-traumatic and post-operative period, during the implementation of the Radiotherapy or chemotherapy, when using massive doses of antibiotics to use. It is recommended that the Medicines if the antibacterial therapy is intolerant or if the effect does not exist as well as a normalizing agent for functional disorders of the carbohydrate, fat and protein metabolism in the organism to use.
Bei der Herstellung des erfindungsgeinässen Arzneimittels aus dem Thymus wird von uns eine einfache, billige Technologie benutzt, die unter grosstechnischen Bedingungen leicht reproduzierbar ist und gestattet, ein Präparat von hoher Qualität, in einer hohen Ausbeute zu erhalten, die die Ausbeute, beispielsweise von Thymozin um das 5-fache übersteigt.In the production of the medicament according to the invention We use a simple, inexpensive technology from the thymus that works under industrial-scale conditions is easily reproducible and allows a preparation of high quality to be obtained in a high yield, which exceeds the yield, for example of thymozine, by 5 times.
Unten werden konkrete Beispiele zur Herstellung des erfindungsgema'ssen Arzneimittels aus dem Thymus angeführt. Beispiel 1.Specific examples for the production of the medicament according to the invention from the thymus are given below. Example 1.
5OO g Thymusgewebe, das von Gefässen, Blutkuchen, IFettzellgewebe gereinigt wurde, werden mit Wasser, Aceton gewaschen und dann in Aceton, das in einem Gewichtsverhältnis zum Thymusgewebe von 4:1 genommen wird, bei einer Temperatur von t-1°C innerhalb von 24 Stunden stehengelassen und danach der Homogenisierung unterzogen. Das erhaltene Homogenat des Thymusgewebes wird in eine 3%ige wässrige500 g of thymus tissue that has been cleaned of vessels, blood cakes, I adipose cell tissue is washed with water, acetone and then in acetone, which is taken in a weight ratio to the thymus tissue of 4: 1, at a temperature of t -1 ° C within 24 Left to stand for hours and then subjected to homogenization. The homogenate of the thymus tissue obtained is poured into a 3% aqueous
_ 12 __ 12 _
Essigsäurelösung bei deren Gewichtsverhältis von 1 bzw. zu 6 eingebracht. Die Extraktion wird bei einem pH-Wert von 3»2, einer Temperatur von 1O0C während 72 Stunden in Gegenwart von Zinkchlorid durchgeführt, das in einer Menge von 1 g pro I 1 der genannten Essigsäure genommen wird.Acetic acid solution was introduced at its weight ratio of 1 or 6. The extraction is carried out at a pH of 3 »2, a temperature of 1O 0 C for 72 hours in the presence of zinc chloride g in an amount of 1 per 1 I of the said acetic acid is taken.
Nach der Beendigung der Extraktion wird das Substrat bei 3000 U/min während 20 min zentrifugiert, die Flüssigkeit über dem Niederschlag wird isoliert und dazu wird A eton bei deren Gewichts verhältnis von 1 bzw. zu 5 zugegossen.After the extraction is complete, the substrate is centrifuged at 3000 rpm for 20 minutes, the liquid It is isolated over the precipitate and acetone is poured in at its weight ratio of 1 or 5.
Der sich bildende Niederschlag wird abfiltriert, mit Azeton gewaschenund auf dem Filter getrocknet. Man erhält 5 S weißes Pulver, das biologisch wirksame Stoffe, Polypeptide von 600 bis 6000 DaIton Molekularmasse bei deren folgendem Verhältnis (Massel) enthält:The precipitate that forms is filtered off, washed with acetone and dried on the filter. 5 S are obtained white powder, the biologically active substances, polypeptides from 600 to 6000 DaIton molecular mass with their following Ratio (pig) contains:
Polypeptide mit einem isoelektrischen PunktPolypeptides with an isoelectric point
von 3,5 bis 6,7 80from 3.5 to 6.7 80
Polypeptide mit einem isoelektrischen Punk*Polypeptides with an isoelectric point *
von 7 bis 9 20.from 7 to 9 20.
Das erhaltene Arzneimittel aus dem Thymus stellt ein weißes Pulver dar, das in 5%igez Essigsäure, in Wasser löslich ist; der pH-Wert der l%igen wäßrigen Lösung beträgt 5,5.The drug obtained from the thymus is a white powder, dissolved in 5% acetic acid, in water is soluble; the pH of the 1% aqueous solution is 5.5.
Zur Herstellung der Arzneiform des Arzneimittels aus dem Thymus wird das erhaltene Pulver in 5OO ml l%iger Essigsäure gelöst. Die Präparatlösung wird durch Filtration sterilisiert und in sterile Flaschen je zu 1 ml abgefüllt, dann lyophilisiert und mit Gummipfropfen verschlossen. Im Ergebnis enthält eine Flasche 10 mg Stoffe, die aus dem Thymusgewebe isoliert worden sind. Beispiel 2.To produce the dosage form of the drug from the thymus, the powder obtained is in 500 ml 1% acetic acid dissolved. The preparation solution is sterilized by filtration and placed in sterile bottles each 1 ml filled, then lyophilized and sealed with rubber stoppers locked. As a result, a bottle contains 10 mg of substances that have been isolated from the thymus tissue. Example 2.
50Og Thymusgewebe, das von Gefäßen, Blutkuchen, Fettzellgewebe gereinigt wurde, werden mit Wasser, Chloroform gewaschen und dann in Chloroform, das in einem Gewichtsverhältnis zum Thymusgewebe von 8:1 genommen wird, bei einer Temperatur von -1O0C innerhalb von 48 Stunden stehengelassen und danach der Homogenisierung unterzogen. Das erhaltene Homogenat des Thymusgewebes wird in eine l%ige wäßrige Essigsäurelösung bei einem Gewichtsverhältnis von50Og thymic tissue, the blood cake, fat tissue was cleaned of vessels are washed with water, chloroform and then washed in chloroform in a weight ratio to thymic tissue from 8: allowed to stand is made 1 at a temperature of -1O 0 C within 48 hours and then subjected to homogenization. The obtained homogenate of the thymus tissue is dissolved in a 1% aqueous acetic acid solution at a weight ratio of
1 bzw. zu lO eingebracht. Die Extraktion wird bei einem pH-Wert von 4, einer Temperatur von 15°C während 48 Stunden in Gegenwart von Zinkchlorid durchgeführt, das in einer Menge von 2 g pro I 1 der genannten Essigsäure genommen wird. Nach der Beendigung der Extraktion wird das Substrat während 24 Stunden filtriert, die Flüssigkeit über dem Niederschlag wird isoliert und dazu wird Chloroform bei deren Gewichtsverhältnis von 1 bzw. zu 8 zugegossen. Der sich bildende Niederschlag wird abfiltriert, mit Chloroform, gewaschen und auf dem Filter getrocknet. Man erhält 3 g weißes Pulver, das biologisch wirksame Stoffe, Polypeptide von 600 bis 6000 Dalton Molekularmasse bei deren folgendem Verhältnis (Masse%) enthält: Polypeptide mit einem isoelektrischen Punkt von 3,5 bis 6,7 3D 1 or introduced to lO. The extraction is carried out at a pH of 4 and a temperature of 15 ° C. for 48 hours in the presence of zinc chloride, which is taken in an amount of 2 g per liter of the acetic acid mentioned. After the end of the extraction, the substrate is filtered for 24 hours, the liquid above the precipitate is isolated and chloroform is poured in at its weight ratio of 1 or 8. The precipitate which forms is filtered off, washed with chloroform and dried on the filter. 3 g of white powder are obtained which contain biologically active substances, polypeptides with a molecular weight of 600 to 6000 Dalton at the following ratio (% by weight): polypeptides with an isoelectric point of 3.5 to 6.7 3D
Polypeptide mit einem isoelektrischen Punkt von 7 bis 9 10.Polypeptides with an isoelectric point of 7 to 9 10.
Das erhaltene Arzneimittel aus dem Thymus stellt ein weißes Pulver dar, das in 5%iger Essigsäure, in Wasaer löslich ist; der pH-Wert der l%igen wäßrigen Lösung beträgt 5,8.The drug obtained from the thymus is a white powder that is dissolved in 5% acetic acid in water is soluble; the pH of the 1% aqueous solution is 5.8.
Zur Herstellung der Arzneiform des Arzneimittels aus dem Thymus wird das erhaltene Pulver in 300 ml ^%lger Essigsäure gelöst. Die Präparatlösung wird durch Filtration sterilisiert und in sterile Flaschen je zu 1 ml abgefüllt, dann lyophilisiert und mit Gummipfropfen verschlossen. Im Ergebnis enthält eine Flasche 10 mg Stoffe, die aus dem Thymusgewebe isoliert worden sind.To produce the drug form of the drug from the thymus, the powder obtained is dissolved in 300 ml ^% acetic acid. The preparation solution is sterilized by filtration and filled into sterile bottles of 1 ml each, then lyophilized and closed with rubber stoppers. As a result, a bottle contains 10 mg of substances that have been isolated from the thymus tissue.
Beispiel 3.
500 g Thymusgewebe, das von Gefäßen, Blutkuchen, Fettzellgewebe gereinigt wurde, werden mit Wasser gewaschen
und der Homogenisierung unterzogen. Das erhaltene Homogenat des Thymusgewebes wird in eine 10%ige wäßrige Essigsäurelösung
bei einem Gewichtsverhältnis von 1 bzw. zu 4 eingebracht. Die Extraktion wird bei einem pH-Wert von
2,5, einer Temperatur von 5°C innerhalb von 24 Stunden in Gegenwart von Zinkchlorid durchgeführt, das in einer Menge
von 0,2 g zu I 1 der genannten Essigsäure genommen wird.Example 3.
500 g of thymus tissue that has been cleaned of vessels, blood cakes and fat cell tissue is washed with water and subjected to homogenization. The homogenate of the thymus tissue obtained is introduced into a 10% strength aqueous acetic acid solution at a weight ratio of 1 or 4. The extraction is carried out at a pH of 2.5 and a temperature of 5 ° C. within 24 hours in the presence of zinc chloride, which is taken in an amount of 0.2 g to I 1 of the acetic acid mentioned.
Nach der Beendigung der Extraktion wird das Substrat bei 5000 U/min während 10 min zentrifugiert, die Flüssigkeit über dem BTiederschlag wird isoliert und dazu wird Äthylalkohol bei deren Gewichtsverhältnis von 1 bzw. zu 10 zugegossen. Der sich bildende Niederschlag wird abfiltriert, mit Äthylalkohol gewaschen, auf dem Filter getrocknet. Man erhält 4 g weißes Pulver, das biologisch wirksame Stoffe, Polypeptide von 600 bis 6000 Dalton Molekülarmasse bei deren folgendem Verhältnis (Masse%)enthält:When the extraction is complete, the substrate is centrifuged at 5000 rpm for 10 minutes, the liquid above the precipitate is isolated and for this purpose ethyl alcohol is poured in at its weight ratio of 1 or 10. The precipitate that forms is filtered off, washed with ethyl alcohol and dried on the filter. This gives 4 g of white powder, which contains biologically active substances, polypeptides with a molecular weight of 600 to 6000 Dalton at the following ratio (mass e%) :
Polypeptide mit einem isoelektrischen PunktPolypeptides with an isoelectric point
von 3,5 bis 6,7 87from 3.5 to 6.7 87
Polypeptide mit einem isoelektrischen Punkt von 7 bis 9 IJ.Polypeptides with an isoelectric point from 7 to 9 years
Das erhaltene Arzneimittel aus dem Thymus stellt ein weißes Pulver dar, das in-5%iger Essigsäure löslich ist; der pH-Wert der l%igen wäßrigen Lösung beträgt 5»3·The drug obtained from the thymus ceases represents white powder soluble in -5% acetic acid; the pH of the 1% aqueous solution is 5 »3 ·
Zur Herstellung der Arzneiform des Arzneimittels aus dem Thymus wird das erhaltene Pulver in 400 ml 3%iger Essigsäure gelöst. Die Präparatlösung wird durch Filtration sterilisiert und in sterile Flaschen je zu I ml abgefüllt, dann lyophilisiert und mit Gummipfropfen verschlossen. Im Ergebnis enthält eine Flasche 10 mg Stoffe, die aus dem Thymusgewebe isoliert worden sind. Beispiel 4.To produce the drug form of the drug from the thymus, the powder obtained is in 400 ml of 3% strength Acetic acid dissolved. The preparation solution is sterilized by filtration and filled into sterile bottles of 1 ml each, then lyophilized and sealed with rubber stoppers. As a result, a bottle contains 10 mg of substances which have been isolated from the thymus tissue. Example 4.
500 g Thymusgewebe, das von Gefäßen, Blutkuchen, FettZellgewebe gereinigt wurde, werden mit Wasser gewaschen, bei einer Temperatur von -300C während 200 Stunden stehengelassen land danach der ' Homogenisierung unterzogen. Das erhaltene Homogenat des Thymusgewebes wird in eine 5%ige wä&r.500 g thymic tissue, the blood cake, fat tissue was cleaned of vessels are washed with water, allowed to stand at a temperature of -30 0 C for 200 hours after which the 'homogenisation country subjected. The homogenate of the thymus tissue obtained is poured into a 5% aqueous solution.
rige Essigsäurelösung bei einem Gewichtsverhältnis von 1 bzw. zu 5 eingebracht. Die Extraktion wird bei einem pH-Wert von 4, einer Temperatur von 120C innerhalb von 56 Stunden in Gegenwart von Zinkohlorid durchgeführt, das in einer Menge von 0,5 g pro I 1 der genannten Essigsäure genommen wird. Nach der Beendigung der Extraktion wird das Substrat bei 4000 U/min während 20 min zentrifugiert, die Flüssigkeit über dem Niederschlag wird isoliert und dazu wird Aceton bei deren Gewichtsverhältnis von 1 bzw.rige acetic acid solution introduced at a weight ratio of 1 or 5. The extraction is carried out at a pH of 4, a temperature of 12 0 C within 56 hours in the presence of Zinkohlorid that g in an amount of 0.5 per 1 I of the said acetic acid is taken. After the extraction is complete, the substrate is centrifuged at 4000 rpm for 20 minutes, the liquid above the precipitate is isolated and acetone is added at its weight ratio of 1 or 1.
zu 6 zugegossen. Der sich bildende Niederschlag wird durch Zentrifugieren isoliert, mit Aceton gewaschen und auf dem Filter getrocknet. Man erhält 5»5 g weißes Pulver, das biologisch wirksame Stoffe, Polypeptide von 600 bis 6000 Dalton Molekularmasse bei folgendem Verhältnis (Masf·· BQ%) enthält:poured in to 6. The precipitate which forms is isolated by centrifugation, washed with acetone and dried on the filter. 5 »5 g of white powder are obtained, which contain biologically active substances, polypeptides with a molecular mass of 600 to 6000 Dalton at the following ratio (mass ·· BQ%):
Polypeptide mit einem isoelektrischen Punkt von 3,5 bis 6,7 82Polypeptides with an isoelectric point from 3.5 to 6.7 82
Polypeptide mit einem isoelektrisohen PunktPolypeptides with an isoelectric point
von 7 bis 9 ia from 7 to 9 ia
Das erhaltene Arzneimittel aus dem Thymus stellt ein weißes Pulver mit gelblicher Schattierung dar, das in 5%iger Essigsäure löslich ist; der pH-Wert der i%igen wäßrigen Lösung beträgt 5,2.The drug obtained from the thymus is a white powder with a yellowish shade, which in 5% acetic acid is soluble; the pH of the i% aqueous solution is 5.2.
Zur Herstellung der Arzneiform des Arzneimittels ausFor the production of the dosage form of the drug
dem Thymus wird das erhaltene Pulver in 550 ml 4%igerThe powder obtained is added to the thymus in 550 ml of 4% strength
Essigsäure gelöst. Die Präparatlösung wird durch PiItration sterilisiert und in sterile Flaschen je zu I ml abgefüllt, dann lyophilisiert und mit Gummipfropfen verschlossen. Im Ergebnis enthält eine Flasche 10 mg Stoffe, die aus dem Thymusgewebe isoliert worden sind. Beispiel 5.Acetic acid dissolved. The preparation solution is purified by filtration sterilized and filled into sterile bottles of 1 ml each, then lyophilized and sealed with rubber stoppers. As a result, a bottle contains 10 mg of substances which have been isolated from the thymus tissue. Example 5.
500 g Thymusgewebe, das von Gefäßen, Blutkuchen, Fettzellgetiebe gereinigt wurde, werden mit Wasser gewascher bei einer Temperatur von -500C während 100 Stunden stehenge lassen und danach der Homogenisierung unterzogen. Des erhaltene Homogenat des Thymusgewebes wird in eine 2%ige wäßrige Essigsäurelösung bei deren Gewichtsverhältnis von 1 bzw. zu 7 eingebracht. Die Extraktion wird bei einem pH-Wert von 3,0 einer Temperatur von 80C während 60 Stunden in Gegenwart von Zinkchlorid durchgeführt, das in eine] Menge von 1,5 g pro I 1 der genannten Essigsäure genommen wird. Nach Beendigung der Extraktion wird das Substrat500 g thymic tissue, the blood cake, Fettzellgetiebe was purified vessels are let stand close gewascher with water at a temperature of -50 0 C for 100 hours and then subjected to homogenization. The homogenate of the thymus tissue obtained is introduced into a 2% strength aqueous acetic acid solution at a weight ratio of 1 or 7. The extraction is carried out at a pH of 3.0 and a temperature of 8 ° C. for 60 hours in the presence of zinc chloride, which is taken in an amount of 1.5 g per l of the acetic acid mentioned. After the extraction is complete, the substrate becomes
bei 6000 U/min während 10 min zentrifugiert, die Flüssigkeit über dem Niederschlag wird isoliert und dazu wird Äthylalkohol bei einem Gewichtsverhältnis von 1 bzw. zu 10 zugegossen. Der sich bildende Niederschlag wird abfiltriert, mit Äthylalkohol gewaschen, auf dem Filtercentrifuged at 6000 rpm for 10 min, the liquid is isolated over the precipitate and this is ethyl alcohol at a weight ratio of 1 or to 10 poured in. The precipitate that forms is filtered off, washed with ethyl alcohol on the filter
getrocknet. Man erhält 5,6 g weißes Pulver, das biologisch
wirksame Stoffe, Polypeptide von 600 bis 6000 Dalton Molekularmasse bei folgendem Verhältnis (Masse%)
enthält:
Polypeptide mit einem isoelektrischen Punktdried. 5.6 g of white powder are obtained which contain biologically active substances, polypeptides with a molecular mass of 600 to 6000 Dalton at the following ratio (% by mass):
Polypeptides with an isoelectric point
von 5i5 bis 6,7 80from 5i5 to 6.7 80
Polypeptide mit einem isoelektrischen PunktPolypeptides with an isoelectric point
von 7 bis 9 20.from 7 to 9 20.
Das erhaltene weiße Pulver ist in 5%iger Essigsäure, in Wasser löslich; der pH-Wert der l%igen wäßrigen Lösung beträgt 5f4.The white powder obtained is in 5% acetic acid, soluble in water; the pH of the 1% aqueous solution is 5f4.
Zur Herstellung der Arzneiform des Arzneimittels aus dem Thymus wird das erhaltene Pulver in 570 ml 2%iger Essigsäure gelöst. Die Präparatlösung wird durch Filtration sterilisiert und in sterile Flaschen je zu I ml abgefüllt, darm lyophilisiert und mit Gummipfropfen verschlossen. Im Ergebnis enthält eine Flasche 10mg Stoffe, die aus dem Thymusgewebe isoliert worden sind.To produce the dosage form of the drug from the thymus, the powder obtained is in 570 ml 2% acetic acid dissolved. The preparation solution is sterilized by filtration and placed in sterile bottles each I ml filled, intestinal lyophilized and with rubber stoppers locked. As a result, a bottle contains 10 mg of substances that have been isolated from the thymus tissue.
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