DE2166086C3 - Selective media for the detection of Pseudomonas aeruginosa - Google Patents
Selective media for the detection of Pseudomonas aeruginosaInfo
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Description
Die Erfindung betrifft selektive Nährmedien, die zum Nachweis von Pseudomonas aeruginosa dienen.The invention relates to selective nutrient media which are used to detect Pseudomonas aeruginosa.
Pseudomonas aeruginosa ist ein sehr verbreiteter, fakultativ pathogener Keim, dessen Bedeutung als Krankheitserreger bei Mensch und Tier in den letzten Jahrzehnten ständig zugenommen hat. Wegen seiner Unempfindlichkeit gegen viele Desinfektionsmittel, Antibiotika und ultraviolettes Licht kommt das Bakterium auch als !Contaminant in nichtsterilen Arzneimitteln vor, selbst solchen, die Antibiotika enthalten. Insbesondere Topica sollen aber u. a. frei sein von Pseudomonas aeruginosa.Pseudomonas aeruginosa is a very common, facultative pathogenic germ, its importance as Pathogens in humans and animals has increased steadily over the past few decades. Because of his Insensitivity to many disinfectants, antibiotics and ultraviolet light comes from the bacterium also as a! Contaminant in non-sterile drugs, even those that contain antibiotics. Topica in particular should, however, include be free from Pseudomonas aeruginosa.
Die Gesamtzahl der Keime in nichtsterilen pharmazeutischen Präparaten ist verhältnismäßig gering. Wenn außerdem unter den Keimen Pseudomonas aeruginosa in der Minderzahl ist, kann dieses Bakterium mit den üblichen diagnostischen Mitteln häufig nicht nachgewiesen werden. Wegen seiner obenerwähnten Bedeutung ist es indessen sehr wichtig, einen sicheren Nachweis führen zu können.The total number of germs in non-sterile pharmaceutical Preparations is relatively small. If, in addition, among the germs of Pseudomonas aeruginosa is in the minority, this bacterium can often with the usual diagnostic means cannot be proven. However, because of its importance mentioned above, it is very important to have a to be able to provide reliable evidence.
Zur Lösung dieser Aufgabe wird ein selektives Medium für den Nachweis benötigt.To solve this problem, a selective medium is required for the detection.
Es wurden nun selektive Medien gefunden, die sich für den Nachweis von Pseudomonas aeruginosa eignen. Selective media have now been found which are suitable for the detection of Pseudomonas aeruginosa.
Für diese Medien ist kennzeichnend, daß sie neben üblichen, für die Bakterienentwicklung nötigen bzw. vorteilhaften Substanzen gewisse Mengen n-Cocos-/J-propionsäure enthalten. Die Nachweismedien enthalten vorzugsweise außerdem geringe Mengen hydratisiertes Cadmiumsulfat.It is characteristic of these media that, in addition to the usual ones that are necessary or necessary for the development of bacteria, they beneficial substances certain amounts of n-coconut / I-propionic acid contain. The detection media also preferably contain minor amounts of hydrated Cadmium sulfate.
Gegenstand der Erfindung sind somit selektive Nährmedien zum Nachweis von Pseudomonas aeruginosa, die dadurch gekennzeichnet sind, daß sie neben üblichen Nährmedienbestandteilen pro Liter Wasser 1 bis 3 g n-Cocos-ß-propionsäure enthalten. In einer bevorzugten Ausführungsform wird den Nährmedien zusätzlich 0,05 bis 0,3 g hydratisiertes Cadmiumsulfat zugesetzt.The invention thus relates to selective nutrient media for the detection of Pseudomonas aeruginosa, which are characterized in that they contain conventional nutrient media components per liter of water Contains 1 to 3 g of n-coconut ß-propionic acid. In a preferred embodiment, the nutrient media an additional 0.05 to 0.3 g of hydrated cadmium sulfate was added.
Die erfindungsgemäßen Nachweismedien sind feste Nährböden. Sie enthalten als übliche Nährmedienbestandteile z. B. a) Pepton, D,L-Alanin, Natriumeitrat, Kaliumsulfat. Kaliumchlorid, Magnesiumsulfat, Agar, Wasser oder b) Pepton, Glycerin, Natriumchlorid, Dikaliumhydrogenphosphat, Kaliumnitrat, Calciumnitrat, Magnesiumsulfat, Agar, Wasser. Der Gehalt an den charakteristischen Bestandteilen n-Cocos-0-propionsäure beträgt vorzugsweise 1,5 bis 2,5 g, der an Cadmiumsulfat (hydratisiert) vorzugsweise 0,1 bis 0,25 g pro Liter Wasser. Der Cadmiumsulfat-Zusatz ist bei Nährmedien des Typs a) zweckmäßig geringer als bei Nährmedien des Typs b). Das pH wird mit Alkalilauge auf einen Wert zwischen etwa 6,6 bis 7,6, vorzugsweise 7,2 eingestellt.The detection media of the invention are solid Culture media. They contain the usual nutrient media components such. B. a) Peptone, D, L-alanine, sodium citrate, Potassium sulfate. Potassium chloride, magnesium sulfate, agar, water or b) peptone, glycerine, sodium chloride, dipotassium hydrogen phosphate, Potassium nitrate, calcium nitrate, magnesium sulfate, agar, water. The content of the characteristic components n-coconut-0-propionic acid is preferably 1.5 to 2.5 g, that of cadmium sulfate (hydrated) is preferably 0.1 to 0.25 g per liter of water. The addition of cadmium sulfate is expediently lower in nutrient media of type a) than with culture media of type b). The pH is adjusted to a value between about 6.6 to 7.6 with alkali preferably set to 7.2.
Nachstehend sind zwei typische Zusammensetzungen erfindungsgemäßer Nachweismedien angegeben.Two typical compositions of detection media according to the invention are given below.
Die genannten Bestandteile werden in üblicher Weise zu Nährböden verarbeitet, abgefüllt und 15 Minuten bei 121° C im Autoklav sterilisiert.The components mentioned are processed into nutrient media in the usual way, bottled and 15 Sterilized in an autoclave at 121 ° C for minutes.
Für den qualitativen Nachweis von Pseudomonas aeruginosa wird eine kleine Menge der zu untersuchenden Probe, gegebenenfalls nach Suspendierung in Phosphat-Pufferlösung vom pH-Wert 7,0, auf die erfindungsgemäßen Nachweismedien ausgestrichen und 1-3 Tage bei etwa 35 bis 39° C bebrütet. Zum quantitativen Nachweis des Keims bedient man sich des Plattengußverfahrens.For the qualitative detection of Pseudomonas aeruginosa, a small amount of the to be examined Sample, optionally after suspension in phosphate buffer solution of pH 7.0, to the Detection media according to the invention streaked out and incubated for 1-3 days at about 35 to 39 ° C. To the Quantitative detection of the germ is used using the cast plate method.
eher Weise. Dabei dienen vorzugsweise Nährböden des Typs (a), die insbesondere auf Grund ihres Gehalts an D,L-Alanin die Pyocyaninbildung fördern, zum Nachweis pyocyaninbildender Stämme. Nährböden des Typs (b) fördern, insbesondere auf Grund ihres Gehalts an Glycerin und Phosphat, die Bildung fluoreszierender Substanzen und werden daher vor allem zum Nachweis entsprechender Stämme benutzt. Zur Identifizierung solcher Stämme, die weder zur einen noch zur anderen vorerwähnten Gruppe gehören, werden die üblichen biochemischen Tests ausgeführt. Gegebenenfalls wird bei geringer Keimzahl in der Probe dem Nachweisverfahren eine Anreicherungsstufe vorgeschaltet, wie sie in der deutschen Patentschrift 2 151 413 beschrieben ist. Die dabei erhaltene Bakterienkultur wird dann mit Hilfe der erfindungsgemäßen Medien einem Nachweisverfahren unterworfen. rather wise. In this context, nutrient media of type (a) are preferably used, in particular because of their content promote pyocyanin formation on D, L-alanine, for the detection of pyocyanin-forming strains. Culture media of type (b) promote the formation, in particular because of their glycerol and phosphate content fluorescent substances and are therefore mainly used for the detection of corresponding strains. To identify those strains that do not belong to either of the aforementioned groups, the usual biochemical tests are carried out. If necessary, if the number of germs is low in the Sample is preceded by an enrichment stage, as in the German patent specification 2 151 413 is described. The bacterial culture obtained is then with the help of the invention Media subjected to a verification procedure.
Claims (3)
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Publications (3)
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| DE2166086A1 DE2166086A1 (en) | 1973-04-19 |
| DE2166086B2 DE2166086B2 (en) | 1977-07-07 |
| DE2166086C3 true DE2166086C3 (en) | 1978-02-16 |
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