DE2059869A1

DE2059869A1 - Lipase prepn stabilization - with pvp and leucyl-glycyl-glycine

Info

Publication number: DE2059869A1
Application number: DE19702059869
Authority: DE
Inventors: auf Nichtnennung. P Antrag
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1970-12-04
Filing date: 1970-12-04
Publication date: 1972-06-22
Also published as: DE2059869C3; DE2059869B2

Abstract

The stabilised preparations retain their activity after prolonged storage at room temp. and the stability and activity of the preparations can be further enhanced by the addition of ox-bile (fel tauri), and topical preparations (which can be applied locally as slimming creams, since they promote breakdown of deposits of fat) pref. also contain a diffusion-promoting substance, pref. thiomucase or hyaluronidase.

Description

Verfahren zur Stabilisierung von Lipasen, Die Lipasen gehören zu jener Gruppe von Fermenten, die als Esterasen spezifisch die Fette in ihre Bausteine, nämlich Fettsäuren und Glycerin, hydrolisieren. Obwohl sie im Dünndarm zur Spaltung von Fetten sehr wirksam sind, war eine lokale äußere Anwendung, insbesondere unter Verwendung eines geeigneten Diffusionsfaktors, bisher wegen der labilen Eigenschaften des Berments nicht möglich, da eine geeignete Stabilisierung wahrend längerer Zeiträume nicht erreicht werden konnte.Process for stabilizing lipases, The lipases belong to that group of ferments which, as esterases, specifically hydrolyze the fats into their building blocks, namely fatty acids and glycerol. Although they are very effective in breaking down fats in the small intestine, local external application, in particular using a suitable diffusion factor, has not been possible until now because of the unstable properties of the berment, since suitable stabilization could not be achieved over long periods of time.

Eine Aufgabe der Erfindung besteht somit in einem Verfahren zur Stabilisierung von Lipasen, so daB diese wahrend langer Zeit lagerungsbeständig sind und aktiv bleiben. Eine weitere Aufgabe der Erfindung besteht unter Anwendung dieses Verfahrens auf eine ftir den äußerlichen Gebrauch bestimmte Entiettungscreme auf der Basis von Lipasen. Eine weitere Aufgabe der Erfindung besteht in einer zusätzlichen Aktivierung der Lipasen bzw. in einer weiteren Erhöhung der Aktivität und Wirksamkeit der Entfettungsoreme oder -salben.One object of the invention is therefore a method for stabilization of lipases, so that they are stable and active for a long time stay. Another object of the invention is using this method based on a degreasing cream intended for external use of lipases. Another object of the invention is an additional activation the lipases or in a further increase in the activity and effectiveness of the degreasing elements or ointments.

Im Rahmen von ausgedehnten Untersuchungen wurde nun gefunden, daß ein für die Praxis geeigneter Stabilisator für Lipasen aus einem Gemisch von Polyvinylpyrrolidon und Leucylglycylglycin besteht. Weiterhin wurde gefunden, daß Ochsengalle (Fel tauri) die Fermentaktivität der Lipasen bei der Spaltung von Fetten noch wesentlich erhöht.In the course of extensive investigations it has now been found that a stabilizer suitable for practice for lipases made from a mixture of polyvinylpyrrolidone and leucylglycylglycine. It was also found that ox bile (Fel tauri) the fermentation activity of the lipases in the breakdown of fats is still significantly increased.

Das erfindungsgemäße Verfahren zur Stabilisierung von Lipasen besteht somit darin, daß zu den Lipasen Polyvinylpyrrolidon und Leucylglycylglycin zugesetzt wird.The method according to the invention for stabilizing lipases consists thus that polyvinylpyrrolidone and leucylglycylglycine are added to the lipases will.

Es genügen dabei bereits sehr geringe Mengen des aus Polyvinylpyrrolidon und Leucylglycylglycin bestehenden Stabilisators. Bevorzugt wird ein Gewichtsverhältnis von Lipase zu Polyvinylpyrrolidon und Leucylglycylglycin von 8:1 bis 12:1 angewandt. Das Gewichtsverhältnis von Polyvinylpyrrolidon zu Leucylglycylglycin im Stabilisator kann innerhalb weiter Grenzen variieren, liegt jedoch günstigerweise im Bereich von 250 bis 1000, bevorzugt etwa 500 i. Einheiten Lipase auf 5 bis 15, bevorzugt etwa 10 Gewichtsteile Polyvinylpyrrolidon und etwa 0,75 bis 1,25, bevorzugt etwa 1 Teil Leucylglycylglycin.Even very small amounts of the polyvinylpyrrolidone are sufficient and leucylglycylglycine existing stabilizer. A weight ratio is preferred from lipase to polyvinylpyrrolidone and leucylglycylglycine from 8: 1 to 12: 1 applied. The weight ratio of polyvinylpyrrolidone to leucylglycylglycine in the stabilizer can vary within wide limits, but is favorably in the range from 250 to 1000, preferably about 500 i. Units of lipase to 5 to 15, preferred about 10 parts by weight of polyvinylpyrrolidone and about 0.75 to 1.25, preferably about 1 part leucylglycylglycine.

Es wurde weiterhin festgestellt, daß sowohl die Stabilität als auch die Aktivität dieses durch den aus Polyvinylpyrrolidon und Leucylglycylglycin bestehenden Stabilisator stabilisierten Lipasepräparats noch erhöht werden kann, wenn Ochsengalie (Pel tauri) hierzu zugesetzt wird. Das Verhältnis von Fel tauri zu dem Lipaseferment kann dabei innerhalb relativ weiter Grenzen variieren, jedoch erwies sich allgemein ein Verhältnis von 500 Einheiten Ferment zu etwa 0,1 bis 0,3, insbesondere etwa 0,2 g Fel tauri als besonders günstig.It was further found that both the stability and the activity of this through that consisting of polyvinylpyrrolidone and leucylglycylglycine Stabilizer stabilized lipase preparation can still be increased if ox gall (Pel tauri) is added to this. The ratio of Fel tauri to the lipase ferment can vary within relatively wide limits, but it turned out to be general a ratio of 500 units of ferment to about 0.1 to 0.3, especially about 0.2 g of Fel tauri as particularly cheap.

Als Lipasegrundmaterialien können Lipasen von beliebigen Herkünften verwendet werden; im Hinblick auf die Entfettungswirkung erwiesen sich Lipasefermente aus Pankreas, Magensaft oder Ricinus als besonders wirksam.Lipases from any origins can be used as lipase base materials be used; With regard to the degreasing effect, lipase ferments were found from pancreas, gastric juice or castor are particularly effective.

Die erfindungsgemäßen Entfettungscremen enthalten neben einer üblichen Salbengrundlage als wesentliche Bestandteile Lipase, Polyvinylpyrrolidon und Leucylglycylglycin. Vorteilhafterweise enthalten sie auch Ochsengalle (Fel tauri).The degreasing creams according to the invention contain in addition to a conventional one Ointment base as essential components lipase, polyvinylpyrrolidone and leucylglycylglycine. Advantageously, they also contain ox bile (Fel tauri).

Es wurde weiterhin festgestellt, daß durch Zusätze von Diffusionsfaktoren, wie z.B. Thiomucase oder Hyaluronidase, eine weitere Erhöhung der Wirksamkeit, vermutlich aufgrund der weiteren Erleichterung des Eindringens der aktiven Stoffe bei äußerlicher Anwendung zum Zwecke der Entfettung erreicht wird.It was also found that by adding diffusion factors, such as thiomucase or hyaluronidase, a further increase in effectiveness, presumably due to the further facilitation of the penetration of the active substances with external Application for the purpose of degreasing is achieved.

Die oben angegebenen Verhältnisse der Mengen der Einzelbestandteile treffen auch für die erfindungsgemäßen Entfettungscremen zu. Der Diifusionsfaktor, s.B. Thiomucase oder Hyaluronidase wird günstigerweise in einer Menge von etwa 1 bis 2 %, bezogen auf die fertige Entfettungscreme, eingesetzt.The proportions of the quantities of the individual components given above also apply to the degreasing creams according to the invention. The diffusion factor, s.B. Thiomucase or hyaluronidase is conveniently used in an amount of about 1 up to 2%, based on the finished degreasing cream, used.

Selbstverständlich scheiden im Hinblick auf die beabsichtigte Entfettungswirkung der Cremen oder Salben als Grundlagen die üblicherweise eingesetzten Öle und Fette aus.It goes without saying that they differ in terms of the intended degreasing effect of creams or ointments as a basis, the oils and fats commonly used the end.

Als Grundlagen kommen somit Stearin, Wachse, Fettalkohole, Sorbitol, Alginate, Pectine, xylose, Tragant, Agar, Gelatine, Paraffin, Vaseline und insbesondere Polyäthylenoxyde, wie sie üblicherweise angewandt werden, in Betracht Als Diffusionsfaktoren, d.h. diffudionsfördernde Substanzen, kommen die üblicherweise sngewandten zum Einsatz, für die Thiomucase oder Hyaluronidase lediglich Beispiele darstellen.The basics are stearin, waxes, fatty alcohols, sorbitol, Alginates, pectins, xylose, tragacanth, agar, gelatin, paraffin, petroleum jelly and in particular Polyethylene oxides, as they are commonly used, into consideration as Diffusion factors, i.e. substances that promote diffusion, usually come used, for thiomucase or hyaluronidase only examples represent.

Selbstverständlich können die Entfettungscremen oder Entfettungssalben noch die üblicherweise angewandten Zusätze enthalten, beispielsweise Emulgatoren, Aromastoffe, Wasser, Farbstoffe und dergl.Of course, the degreasing creams or degreasing ointments can be used nor contain the additives usually used, for example emulsifiers, Flavorings, water, colorings and the like.

Es wurde festgestellt, daß bei Verwendung des aus Polyvinylpyrrolidon und Leuoylglycylglycin bestehenden Stabilisators sich die Lipasen auch bei Anwesenheit der weiteren zusätzlichen Bestandteile während sehr langer Zeiträume als stabil bei normalen Umgebungstemperaturen erweisen; ohne diese Stabilisierung inaktiviert stich die Lipase innerhalb kurzer Zeit, so daß ihre Eigenschaft, die Fette zu spalten, verlorengeht.It has been found that when using the polyvinylpyrrolidone and leuoylglycylglycine existing stabilizer, the lipases are also present in the presence of the other additional components as stable for very long periods of time prove at normal ambient temperatures; inactivated without this stabilization the lipase stings within a short time, so that its ability to break down fats, get lost.

Bei der praktischen Anwendung der erfindungsgemäßen Entfettungscremen wurde weiterhin noch festgestellt, daß eine weitere Steigerung zum Abbau der Fettpolster im menschlichen Körper bei äußerlicher Anwendung der Dremen oder Salben erreicht werden kann, wenn nach Auftragung und Einreibung der Salben oder Cremen die Körperstelle erhitzt wird.In the practical application of the degreasing creams according to the invention it was also found that a further increase in the breakdown of fat deposits achieved in the human body with external application of the dremen or ointments after applying and rubbing in the ointments or creams on the body part is heated.

Als besonders vorteilhaft erwies sich dabei ein Erhitzen dadurch eine Art Heizkissen mit geschlossenen Hohlräumen, durch die durch Luftabsaugen ein Unterdruck auf der Körperoberfläche erzeugt wird. Dadurch wird einerseits die Transpiration gefördert und die durch die Lipasewirkung gebildete Flüssigkeit, die auch die Spaltungeprodukte der Fette enthält, abgesaugt.Heating by means of a proved to be particularly advantageous Type of heating pad with closed cavities through which a vacuum is created by suction of air is generated on the body surface. This on the one hand the transpiration promoted and the liquid formed by the lipase action, which is also the cleavage products which contains fats, sucked off.

Die folgenden Beispiele dienen zur weiteren Erläuterung der Erfindung, ohne sie zu begrenzen.The following examples serve to further illustrate the invention, without limiting them.

Beispiel 1 Entiettungacreme Aus den wesentlichen Bestandteilen von etwa 500 I.E. Example 1 Degreasing cream Made from the essential ingredients of about 500 I.U.

Lipase, 10 Gewichtsteilen Polyvinylpyrrolidon und 1 Gewichteteil Leucylaglycylglycin, sowie Wasser, Emulgator und Salbengrundlage wurde eine Entfettungsoreme bergestellt.Lipase, 10 parts by weight of polyvinylpyrrolidone and 1 part by weight of leucylaglycylglycine, as well as water, emulsifier and ointment base, a degreasing requirement was provided.

Zum Vergleich wurde entsprechend dem vorstehenden Ansatz eine Creme hergestellt, bei der jedoch Polyvinylpyrrolidon und Leucylglycylglycin weggelassen wurden.For comparison, a cream was used in accordance with the above approach produced, but omitted polyvinylpyrrolidone and leucylglycylglycine became.

Bei einer üblichen Standarduntersuchung auf Lipassaktivität zeigte es sich, daß die erfindungsgemäße Creme ihre Wirkung noch nach 24 Monaten praktisch unverändert aufwies, während die ohne Stabilisator hergestellte Vergleichscreme nach 2 bis 3 Wochen die Lipaseaktivität praktisch vollständig verloren hatte.Showed in a standard routine test for lipass activity it turns out that the cream according to the invention is still practically effective after 24 months unchanged, while the comparison cream produced without a stabilizer after 2 to 3 weeks had almost completely lost the lipase activity.

Beispiel 2 Entfettungscreme Es wurds entsprechend Beispiel 1 gsarbeitet, jedoch zusätzlich 0,25 g Pel tauri zugesetzt. Example 2 Degreasing Cream It was worked according to Example 1, but an additional 0.25 g of Pel tauri was added.

Auch diese Creme erwies sich nach 24 Monaten als praktisch unverändert.This cream also proved to be practically unchanged after 24 months.

Beispiel 3 Es wurde entsprechend Beispiel 2 gearbeitet, jedoch 2 , Thiomucase zugesetzt. Example 3 The procedure was as in Example 2, but 2 , Thiomucase added.

Bei weiteren Versuchen entsprechend Beispiel 2 wurden 1,8 % Hysluronidase anstelle der Thomucase zugesetzt.In further experiments according to Example 2, 1.8% were hysluronidase added instead of the Thomucase.

Auch diese Cremen erwiesen sich nach 24 Monaten als unverändert aktiv.These creams also proved to be unchanged in activity after 24 months.

Beispiel 4 Entsprechend der folgenden Rezeptur mit den wesentlichen Bestandteilen aus 500 I.E. Lipase, 10 Gewichtsteilen Polyvinylpyrrolidon und 1,1 Gewichtsteilen Leucylglycylglycin sowie einer üblichen Salbengrundlage Fel tauri und einem üblichen Aromastoff wurde eine Entfettungssalbe hergestellt. Example 4 According to the following recipe with the essentials Ingredients from 500 I.U. lipase, 10 parts by weight polyvinylpyrrolidone and 1.1 Parts by weight of leucylglycylglycine and a customary ointment base Fel tauri and a common flavoring agent, a degreasing ointment was prepared.

Diese Salbe erwies sich auch nach 24 Monaten als praktisch unverändert.This ointment turned out to be practically unchanged even after 24 months.

Claims

P a t e n t a n s p r ü c h e

1. A method for stabilizing lipases, characterized in that that to the lipase preparation polyvinylpyrrolidone and leucylglycylglycine as stabilizers is added.

2. The method according to claim 1, characterized in that sin weight ratio from lipase to polyvinylpyrrolidone and leuoylglycylglycine from 8: 1 to 12: 1 applied will.

3. The method according to claim 1 or 2, characterized in that in addition Ox bile (Fel tauri) is added.

4. The method according to claim 3, d a d u r c h g e k e n n z e i c h n e t that the ox bile (Fel tauri) in an amount of 0.1 to 0.3%, in particular about 0.2%, based on the weight of the lipase, is used.

5. The method according to claim 1 to 4, characterized in that a diffusion factor such as thiomucase or hyaluronidase, preferably in an amount of 1 to 2 ,, bosogen on iertige substance is added. ############ ################ #### net by a content of lipase and one Polyvinylpyrrolidone and Leulylglycylglycine as gate. 7. degreasing cream or ointment according to claim 6, marked ne by a weight ratio of lipase to polyvinyl ########## ### ################# ### ### ### ####