DE2021453A1

DE2021453A1 - N-mustard gas antidotes - also active against ionizing radiation

Info

Publication number: DE2021453A1
Application number: DE19702021453
Authority: DE
Inventors: Alfred Dr Joos
Original assignee: Merck Patent GmbH
Current assignee: Merck Patent GmbH
Priority date: 1970-05-02
Filing date: 1970-05-02
Publication date: 1971-12-02

Abstract

Antidotes to N-mustard gas and its derivs., and agents against ionizing radiation partic. X-rays, contain as active ingredient at least one of the following : 1,3,4-thiadiazole-2,5-dithiol, 1,2,4-triazole-3-thiol, 3,3-dimercapto-2-cyano-acrylamide disodium salt, 3,5-dimercaptoisothiazole-4-carboxamide disodium salt, dipotassium 2-ethoxycarbonyl-2-cyanoethylene-1,1-dithiolate, dipotassium cyanoiminomethanedithiolate, potassium N-(2-thiazoly)-dithiocarbamate, 1,2,4-triazole-5-thiol, sodium N,N-dimethyldithiocarbamate.

Description

Antidote gegen N-Loste und N-Lost-Derivate und Mittel gegen ionisierende Strahlen Es ist bekannt, daß N-Lost (= N,N,N-Tris-(2-chloräthyl)-amin =HND) sowie einige seiner Derivate, insbesondere Alkyl-bis-(2-chloräthyl)-amine wie N,N-bis-(2-chloräthyl)-äthylamin (HNi), N,N-bis-(2-chloräthyl)-methylamin (HN2) oder auch N,N-bis-(2-chloräthyl)-amin (nor NH2) stark giftige Substanzen sind. Antidotes against nitrogen mustards and nitrogen mustard derivatives and agents against ionizing Radiation It is known that nitrogen mustard (= N, N, N-tris (2-chloroethyl) amine = HND) as well some of its derivatives, especially alkyl bis (2-chloroethyl) amines such as N, N-bis (2-chloroethyl) ethylamine (HNi), N, N-bis- (2-chloroethyl) -methylamine (HN2) or N, N-bis- (2-chloroethyl) -amine (nor NH2) are highly toxic substances.

Es wurde bereits über cancerogene, mutagene und teratogene, cancerostatische, immunosuppressive, anticholinergische und antibiotische Wirkungen dieser Substanzen berichtet. Die Wirkung dieser Giftstoffe wird auf eine Alkylierungsreaktion zurückgeführt, die sich auf Verbindungen mit freien Mercapto-, Phosphorsäure-, Amino- oder Carboxylgruppen erstreckt.It has already been reported about cancerogenic, mutagenic and teratogenic, cancerostatic, immunosuppressive, anticholinergic and antibiotic effects of these substances reported. The effect of these toxins is attributed to an alkylation reaction, which refer to compounds with free mercapto, phosphoric acid, amino or carboxyl groups extends.

Als Antidote bei Vergiftungen mit diesen Verbindunge sind bisher Cysteamin, L-Cystein, AET (S-(2-AFinoäthyl) isothiuroniumbromid-hydrobromid), L-Glutathion, Thioharnstoff, BAL (Dimercaprol), DL-Penicillamin, L-Homocysteinthiolacton, Na-Thiosulfat, Serotonin und Serotoninantagonisten, Antihistaminica, Catecholamine sowie einige endokrine Wirkstoffe verwendet worden.So far, cysteamine, L-cysteine, AET (S- (2-AFinoethyl) isothiuronium bromide hydrobromide), L-glutathione, Thiourea, BAL (dimercaprol), DL-penicillamine, L-homocysteine thiolactone, sodium thiosulfate, Serotonin and serotonin antagonists, antihistamines, catecholamines as well as some endocrine agents have been used.

Die prophylaktische und insbesondere die kurative Wirkung dieser Verbindungen ist jedoch noch nicht befriedigend. Die Literatur verzeichnet keinen höheren Dosisreduktionsfaktor als 2 gegenüber N-Methyl-Sost.The prophylactic and especially the curative effect of these compounds however, it is not yet satisfactory. The literature does not show a higher dose reduction factor than 2 versus N-Methyl-Sost.

Es wurde nun gefunden, daß eine Reihe bisher noch nicht als Antidote geprüSter Substanzen mit erheblich besserem Erfolg bei Vergiftungen mit diesen Verbindungen als Antidot eingesetzt werden können. Diese Verbindungen besitzen darüberhinaus eine starke Schutzwirkung gegenüber ionisierenden Strahlen, insbesondere Röntgenstrahlen.It has now been found that a number have not yet been used as antidotes tested substances with considerably better success in poisoning with these compounds can be used as an antidote. These compounds also have a strong protective effect against ionizing rays, especially X-rays.

Gegenstand der Erfindung sind somit Antidote gegen N-Loste und Derivate sowie Mittel gegen ionisierende Strahlen, die dadurch gekennzeichnet sind, daß sie als wirksamen Bestandteil mindestens eine der folgenden Verbindungen enthalten: a) 1 ,3,4-Thiadiazol-dithiol-(2,5) b) 1 ,2,4-Triazolthiol-(3) c ) 3, 3-Dimercapto-2-cyan-acrylamid, Dinatriumsalz d) 3, 5-Dimercaptoisothiazol-4-carbonsäureamid, Dinatriumsalz e) Dikalium-2-äthoxycarbonyl-2-cyanäthylendithiolat- (1 , 1) f) Dikaliumcyaniminomethandithiolat g) Kalium-N-thiagolyl-(2)-dithiocarbaminat h) 1 ,2,4-Triazolthiol-5 i) Natrium-N,N-dimethyldithiocarbaminat Gegebenenfalls können auch jeweils andere Alkalisalze als die genannten verwendet werden; grundsätzlich kommen neben den Na-Salzen auch die Ammonium- oder Lithiumsalze oder auch Kaliumsalze in Betracht.The invention thus relates to antidotes against nitrogen mustards and derivatives and agents against ionizing rays, which are characterized in that they contain at least one of the following compounds as an active ingredient: a) 1,3,4-Thiadiazol-dithiol- (2,5) b) 1,2,4-Triazolthiol- (3) c) 3,3-Dimercapto-2-cyano-acrylamide, Disodium salt d) 3, 5-dimercaptoisothiazole-4-carboxamide, disodium salt e) dipotassium 2-ethoxycarbonyl-2-cyanoethylene dithiolate (1, 1) f) Dipotassium cyaniminomethanedithiolate g) Potassium N-thiagolyl- (2) -dithiocarbaminate h) 1,2,4-Triazolthiol-5 i) Sodium-N, N-dimethyldithiocarbaminate If appropriate Alkali salts other than those mentioned can also be used in each case; basically In addition to the sodium salts, there are also the ammonium or lithium salts or potassium salts into consideration.

Diese Verbindungen selbst sind bekannt oder können nach literaturbekannten Verfahren hergestellt werden. Sie können grundsätzlich einzeln oder im Gemisch eingesetzt werden.These compounds themselves are known or can be based on those known from the literature Process are produced. In principle, they can be used individually or as a mixture will.

Die erfindungsgemäß wirksamen Verbindungen wurden in chemokinetischen Modellversuchen (Alkylans-Alkylandum-Reaktionen) als Antidote getestet. Grundsätzlich kommen hier Verbindungen in Betracht, die eine freie, nucleophile Thiolgruppe besitzen. Die Nucleophilität der Mercaptoverbindungen beruht hauptsächlich auf der starken Elektronenverschiebbarkeit im Bereich der Valenzelektronenorbitale des Schwefelatoms, auf dem Protolysegrad der SH-Gruppe und einiger weiterer, intramolekularer Induktionseffekte, die die beiden vorgenannten Parameter beeinflussen. Die systematischen Untersuchungen über relative Reale tionsaffinitäten solcher Alkylans/Alkylandum Reaktionen verfolgen das Ziel, Verbindungen mit stärkeren Nucleophilien auf zufinden, als sie zelleigene Substanzen besitzen.The compounds effective according to the invention were used in chemokinetic Model experiments (alkylans-alkylandum reactions) tested as antidotes. Basically Compounds come into consideration here which have a free, nucleophilic thiol group. The nucleophilicity of the mercapto compounds is mainly based on the strong Electron shiftability in the area of the valence electron orbitals of the sulfur atom, on the degree of protolysis of the SH group and some other intramolecular induction effects, which influence the two aforementioned parameters. The systematic investigations follow the relative reaction affinities of such alkylane / alkylandum reactions the aim is to find compounds with stronger nucleophiles than the cell's own Own substances.

Als Alkylans sind neben N,N,N-Tris-(2-chloräthyl)-amin-hydrochlorid auch die Hydrochloride von N,N-bis-(2-chloräthyl)-methylamin und N,N-bis- (2-chloräthyl)-amin eingesetzt worden. Als Bezugssubstanzen wurden auch bisher für solche reaktionskinetischen Untersuchungen eingesetzte organische Mercaptoverbindungen verwendet, insbesondere Cysteamin-hydrochlorid, L-C7steinhydrochlorid und L-Glutathion. N,N,N-Tris-(2-chloräthyl)-amin durchläuft während der Spontansequenz in phosphatgepuffertem wässerigem Milieu bei pH 7,2 bis zum Endprodukt N,N,N-Tris-(2-hydroxyäthyl)-amin 3 Aziridiniumstufen und 3 Ringöffnungsreaktionen. Die Geschwindigkeitskonstanten der Intermediärreaktionen sind vorerst nicht gemessen worden. Allerdings verläuft mit dieser Verbindung unter den eingehaltenen Reaktionsbedingungen die zu bestimmende Gesamtalkylans-Verbrauchs-Kinetik zu schnell, um Kinetiken von Alkylans/Alkylandum Reaktionen mit hinreichender Genauigkeit zu erfassen. Im Vergleich zu dieser Spontanreaktionssequenz verlaufen diejenigen von N,N-bis-(2-chloräthyl)-methylamin und N,N-bis- (2-chloräthyl)-amin viel langsamer. Diese Verbindungen durchlairfen aber beide nur 2 AziridiniumstuSen und zwei Ringöffnungsreaktionen.As alkylans are in addition to N, N, N-tris (2-chloroethyl) amine hydrochloride also the hydrochlorides of N, N-bis- (2-chloroethyl) -methylamine and N, N-bis- (2-chloroethyl) -amine been used. So far, reaction kinetic substances have also been used as reference substances for such Investigations used organic mercapto compounds used, in particular Cysteamine hydrochloride, L-carbon stone hydrochloride and L-glutathione. N, N, N-tris (2-chloroethyl) amine runs through during the spontaneous sequence in a phosphate-buffered aqueous medium pH 7.2 to the end product N, N, N-tris (2-hydroxyethyl) amine 3 aziridinium stages and 3 ring opening reactions. The rate constants of the intermediate reactions have not been measured for the time being. However, with this connection runs under the reaction conditions observed, the total alkylane consumption kinetics to be determined too fast to get kinetics of alkylans / alkylandum reactions with sufficient accuracy capture. Compared to this spontaneous reaction sequence, those proceed of N, N-bis- (2-chloroethyl) -methylamine and N, N-bis- (2-chloroethyl) -amine much more slowly. However, these compounds both go through only two aziridinium stages and two ring-opening reactions.

Die NBP-Reaktion (NBP - (p-Nitrobenzyl)pyridin) auf Alkylantien wurde nach der Methode von Friedman et al., Analytical Chemistry, Band 33, Seiten 906 - 910, (1961) durchgeführt. Das NBP Reagenz wird in der Siedehitze bei pH 4,6 während 20 Minuten zur quartären Pyridinium-Verbindung umgesetzt, die nach dem Abkühlen unter Alkalisierung durch Protonenverlust in eine stark blauviolett gefärbte Hybridform übergeht. Diese wird in Äthylacetat aufgenommen und bei 546 nm photometriert.The NBP response (NBP - (p-nitrobenzyl) pyridine) to alkylating agents was according to the method of Friedman et al., Analytical Chemistry, Volume 33, pages 906 - 910, (1961). The NBP reagent is boiling at pH 4.6 while 20 minutes to the quaternary pyridinium compound, which after cooling with alkalization by loss of protons in a strongly blue-violet colored hybrid form transforms. This is taken up in ethyl acetate and photometry at 546 nm.

Die untersuchten Alkylantien wurden als 10-2 M-Lösungen in 0,2M Phosphatpuffer vom pH 7,2 bei 0°C gelöst. Es wurden jeweils Aliquote zur Analyse der Nullwerte entnommen, auf 250C erwärmt und bei dieser Temperatur gehalten. Zur Analyse der Zeitwerte wurden ebenfalls Aliquote entnommen und auf OOC abgekühlt.The alkylating agents tested were given as 10-2 M solutions in 0.2M phosphate buffer dissolved from pH 7.2 at 0 ° C. In each case, aliquots were used to analyze the zero values removed, heated to 250C and kept at this temperature. To analyze the Time values were also taken from aliquots and cooled to OOC.

Alle bei dieser Temperatur aufbewahrten Aliquote wurden zum Schluß des Kinetikansatzes gemeinsam mit dem Reaktionsgemisch der NBP-Reaktion analysiert. Ein Ansatz ohne Alkylandum-Zugabe lief jeweils mit. Aus der Anfangskonzentration an Gesamtalkylans und der Gesamtalkylanskonzentration zu den Entnahme zeiten läßt' sich die Verbrauchskinetik in bekannter Weise berechnen.All aliquots stored at this temperature became final of the kinetic approach analyzed together with the reaction mixture of the NBP reaction. A batch without the addition of Alkylandum ran in each case. From the initial concentration of total alkylane and the total alkylane concentration at the time of withdrawal ' the consumption kinetics can be calculated in a known manner.

Aus der folgenden Tabelle I geht die Affinität K der getesteten Verbindungen zum Alkylans hervor. L-Cystein wurde als Bezugssubstanz gewählt.The following Table I shows the affinity K of the compounds tested to the alkylane. L-cysteine was chosen as the reference substance.

TABELLE I Verbindung $ (x 10-3 sec-1) L-Glutathion 35 L-Cystein-hydrochlorid 34 1 ,3,4-Thiadiazol-dithiol-(2,5 67 1,2,4-Triazolthiol-(3) 65 3,3-Dimercapto-2-cyan-acrylamid, Dinatriumsalz 50 3,5-Dimercaptoisothiazol-(4)-carbonsäureamid, Dinatriumsalz 89 1 ,2,4-Triazolthiol- 5 52 Kalium-N-thiazolyl- 2 -dithiocarbaminat 94 DikaliwncyaYliminomethandithiolat 114 Dikalium-2-äthoxycarbonyl-2-cyanäthylendithiolat- (1,1) 126 Natrium-N,N-dimethyldithiocarbaminat 45 Aufgrund der in diesen kinetischen Tests getroffenen Auswahl wurden die so ermittelten Substanzen toxikologisch und auf ihre Antidot-Wirkung in vivo untersucht. Zusätzlich wurden in diese Untersuchungen noch Verbindungen einbezogen, die im chemo--kinetischen Test nicht geprüft werden konnten, da sie keine freie nucleophile SH-Gruppe besitzen. Als diese zusätzlichen Substanzen wurden solche ausgewählt, bei denen durch intrazelluläre Reduktion aus einer S-S-Gruppe diese freien nucleophilen SH-Gruppen entstehen.TABLE I Compound $ (x 10-3 sec-1) L-glutathione 35 L-cysteine hydrochloride 34 1,3,4-thiadiazol-dithiol- (2,5 67 1,2,4-triazolthiol- (3) 65 3,3-dimercapto-2-cyano-acrylamide, Disodium salt 50 3,5-dimercaptoisothiazole- (4) -carboxamide, disodium salt 89 1,2,4-Triazolthiol-5 52 Potassium-N-thiazolyl-2-dithiocarbaminate 94 DipaliwncyaYliminomethanedithiolate 114 Dipotassium 2-ethoxycarbonyl-2-cyanoethylene dithiolate (1,1) 126 Sodium N, N-dimethyldithiocarbaminate 45 Based on the choices made in these kinetic tests the substances determined in this way were toxicologically and for their antidote effect studied in vivo. In addition, connections were made in these investigations included, which could not be tested in the chemo-kinetic test because they do not have a free nucleophilic SH group. When these additional substances became those selected where by intracellular reduction from an S-S group these free nucleophilic SH groups arise.

Die toxikologisohen Untersuchungen erfolgten an Mäusen. Es standen EMRI/Han Mäuse mit 23 - 26 g Körpergewicht zur Verfügung. Ermittelt wurde in an sich bekannter Weise die LD50, die LD5, die untere Grenze der LD5 und die therapeutische Dosis.The toxicological studies were carried out on mice. It stood EMRI / Han mice with a body weight of 23 - 26 g are available. Was determined in on As is known, the LD50, the LD5, the lower limit of the LD5 and the therapeutic Dose.

An Kollektiven von 8 - 10 Tieren wurden logarithmisch steigende Dosen der Testsubstanzen einmalig verabreicht, so daß die zu erwartenden Mortalitäten zwischen 10 und 90 % mit Intervallen von je 20 lagen. Die Tiere wurden über jeweils 30 Tage beobachtet. Die Dosiswirkungsrelation wurde graphisch in üblicher Weise nach Litchfield-Wilc oxon ermittelt.Logarithmically increasing doses were applied to collectives of 8-10 animals of the test substances administered once, so that the expected mortalities ranged between 10 and 90% with intervals of 20 each. The animals were over each Observed for 30 days. The dose-response relationship was graphed in the usual manner determined according to Litchfield-Wilc oxon.

Die Testsubstanzen wurden in Lösung injiziert (1 ml Tuberkulin Spritzen). Wegen der teilweisen Instabilität und der stark unterschiedlichen Lösungseigenschaften der untersuchten Verbindungen wurden die Injektionslösungen auf verschiedene Weise hergestellt.The test substances were injected in solution (1 ml tuberculin syringes). Because of the partial instability and the very different solution properties of the compounds investigated, the injection solutions were made in various ways manufactured.

N,N-bis-(2-chloräthyl)-methylamin wurde in 0,2 M Phosphatpuffer vom pH 7,2 bei 00" gelöst und aus eiskalter Lösung injiziert.N, N-bis (2-chloroethyl) methylamine was in 0.2 M phosphate buffer from pH 7.2 dissolved at 00 "and injected from an ice-cold solution.

L-Cystein wurde durch Zusatz von 2 n NaOH zur wässrigen Suspension in Lösung gebracht, mit 6 n 1101 auf pH 7,2 zurückgestellt und dann mit Phosphatpuffer auf das berechnete Volumen aufgefüllt. Eatsprachend wurden auch die Lösungen von L-Glutathion, 3, 5-Dimercapto-isothiazol-4-carbonsäureamid, S-(2-aminoäthyl)-isothiouroniumdibromid und 1,3, 4-Thiadiazoldithiol-(2,5) hergestellt.L-cysteine was made by adding 2N NaOH to the aqueous suspension brought into solution, reset to pH 7.2 with 6N 1101 and then with phosphate buffer topped up to the calculated volume. The solutions from L-glutathione, 3, 5-Dimercapto-isothiazole-4-carboxamide, S- (2-aminoethyl) -isothiouronium dibromide and 1,3,4-thiadiazoldithiol- (2,5).

Die übrigen Substanzen wurden zunächst in eben ausreichenden Mengen Dimethylsulfpxid gelöst, dann mit Wasser verdünnt und mit NaOH auf pH 7,2 eingestellt. Mit dem genannten Phosphatpuffer vom pH 7,2 wurde dann auf das gewünschte Volumen eingestellt. Die Konzentrationen wurden so berechnet, daß 0,2 ml der Lösungen zu injizieren waren.The remaining substances were initially in just sufficient quantities Dissolved dimethyl sulfoxide, then diluted with water and adjusted to pH 7.2 with NaOH. The above-mentioned phosphate buffer of pH 7.2 was then used to adjust to the desired volume set. The concentrations were calculated to add 0.2 ml of the solutions inject were.

Die folgende Tabelle II gibt die erhaltenen Toxizitätswerte an: TABELLE II Nr. Substanz LD50 LD5 untere Gren- Therapeuze der L15 tische Dosis 1 N,N-Bis-(2-chloräthyl)methyl- 2,95 2,3 -amin-HCl 2 Cystamindihydro- 405 363 224 203 chlorid 3 Cysteaminhydro- 483 396 263 238 chlorid 4 L-Cysteinhydrochlorid 2399 1393 631 570 5 S-(2-Aminoäthyl)-isothioronium 529 458 316 286 dibromid 6 ;3, 4-Thiadiazoldithiol-(2,5) t387 887 519 470 7 1,2,4-Triazolthiol-(3) 1400 851 550 500 8 3,3-Dimercapto-2-cyanacrylamid- 796 532 247 300 Di-Na-Salz 9 3,5-Dimercapto- 1384 1227 733 680 isothiazol-4-carbonsäureamid, Di-Na-Salz Zur Bestimmung von Dot-Antidot-Effekten existieren 2 literaturbekannte Methoden. Die eine beruht darauf, daß etwa die LD100 des Dots und eine feste Dosis des Antidot eingesetzt wird und daß die Überlebensrate gegenüber dem Kontrollversuch ohne Antidot ermittelt wird. Die zweite Methode beruht auf der-Aktivitätsbestimmung durch Vergleich zweier Dosis-Wirkungs-Kurven. Der dabei erhaltene Dosisreduktionsfaktor (DRF) wird auch für quantitative Angaben der chemischen Strahlenschutzwirkung verwendet.The following Table II gives the toxicity values obtained: TABLE II No. Substance LD50 LD5 lower limit Therapeuze of the L15 table dose 1 N, N-bis- (2-chloroethyl) methyl- 2.95 2,3 -amine-HCl 2 cystamine dihydro- 405 363 224 203 chloride 3 cysteamine hydro- 483 396 263 238 chloride 4 L-cysteine hydrochloride 2399 1393 631 570 5 S- (2-aminoethyl) -isothioronium 529 458 316 286 dibromide 6; 3, 4-thiadiazole dithiol- (2.5) t 387 887 519 470 7 1,2,4-triazole thiol- (3) 1400 851 550 500 8 3,3-Dimercapto-2-cyanoacrylamide 796 532 247 300 Di-Na salt 9 3,5-Dimercapto-1384 1227 733 680 isothiazole-4-carboxamide, di-Na salt To the There are 2 methods known from the literature for determining dot-antidote effects. the one is based on having roughly the LD100 of the dot and a fixed dose of the antidote is used and that the survival rate compared to the control experiment without antidote is determined. The second method is based on the activity determination by comparison two dose-response curves. The dose reduction factor (DRF) obtained thereby becomes also used for quantitative information on the chemical radiation protection effect.

Aus der nachfolgenden Tabelle III gehen die Überlebensraten bei Dot-Antidot-Versuchen hervor. Es ist jeweils die Anzahl der nach 30 Tagen aus Kollektiven von je 12 Tieren noch lebenden Tiere angegeben. Als Dot wurde N,N-bis-(2-chlorähyl)-methylamin verwendet, und zwar in steigenden Mengen.Die Menge des Antidots dagegen war konstant. Aus der Tabelle III geht die Überlegenheit der erfindungsgemäßen Antidote 6 - 9 gegenüber den Vergleichssubstanzen 1 - 5 hervor. Es wurden jeweils die maximal tolerierbaren Dosen eingesetzt.The survival rates in dot-antidote experiments are shown in Table III below emerged. It is the number of collectives of 12 animals each after 30 days animals still alive. N, N-bis- (2-chlorohyl) -methylamine was used as a dot, in increasing amounts, while the amount of antidote was constant. From the Table III shows the superiority of the antidotes 6 to 9 according to the invention the comparison substances 1 - 5. In each case, the maximum tolerable Cans used.

TABELLE III: Überlebensraten bei Dot-Antidot-Versuchen Verabreichte Mwengen an N,N-Bis-(2-chloräthyl)-methylamin in mg/kg Nr. Antidot mg/kg 2,95 3,9 5,2 6,5 7,8 9,1 F=1 F=1,3 F=1,8 F=2,2 F=2,6 F=3,1 1 L-Glutathicn 1000 - 12 0 0 0 0 2 Cysteaminhydrochlorid 238 - 7 3 1 2 0 3 Cystamindihydrochlorid 203 - 8 2 0 0 0 4 L-Cysteinhydrochlorid 570 - 11 11 6 1 1 5 S-(2-Aminoäthyl) -isothiuroniumdi - 286 - 11 8 6 0 0 bromid 6 1,3,4-Thiadiazoldithiol-(2,5) 470 12 12 10 9 6 6 7 1,2,4-Triazolthiol-(3) 500 12 12 12 12 12 11 8 3,3-Dimercapto-2-cyanacrylamid, 300 12 12 10 11 6 6 Di-Na-Salz 9 3,5-Dimercaptoisothiazol-4-car- 680 12 12 12 11 12 11 bonsäureamid Bei der Bestimmung des Dosisreduktionsfaktors wurde von der Annahme ausgegangen, daß ebenso wie in vitrotauch in vivo eine stöcheometrisch verlaufende nucleophile Substitutionsreaktion zwischen Alkylans und Alkylandum stattfindet. Die folgende Tabelle IV enthält die sich aus den Quotienten der LD50 Werte ergebenden Dosisreduktionsfaktoren und deren Vertrauensgrenzen bei konstanten molaren Dot-Antidot-Reaktionen innerhalb der einzelnen Versuchsreihen. Die Tabelle zeigt, daß die erfindungsgemäßen Antidote höhere Dosisreduktionsfaktoren aufweisen als z. B. die Vergleichssubstanzen Oysteaminhydrochiorid und L-Cystein-hydrochlorid.TABLE III: Survival Rates in Dot Antidote Trials Administered Amounts of N, N-bis (2-chloroethyl) methylamine in mg / kg No. Antidote mg / kg 2.95 3.9 5.2 6.5 7.8 9.1 F = 1 F = 1.3 F = 1.8 F = 2.2 F = 2.6 F = 3.1 1 L-Glutathicn 1000 - 12 0 0 0 0 2 cysteamine hydrochloride 238 - 7 3 1 2 0 3 cystamine dihydrochloride 203 - 8 2 0 0 0 4 L-cysteine hydrochloride 570 - 11 11 6 1 1 5 S- (2-aminoethyl) -isothiuronium di - 286 - 11 8 6 0 0 bromide 6 1,3,4-thiadiazole dithiol (2.5) 470 12 12 10 9 6 6 7 1,2,4-triazole thiol (3) 500 12 12 12 12 12 11 8 3,3-dimercapto-2-cyanoacrylamide, 300 12 12 10 11 6 6 di-Na salt 9 3,5-dimercaptoisothiazole-4-car-680 12 12 12 11 12 11 acid amide at the determination of the dose reduction factor was based on the assumption that as well as in vitro a stoichiometric nucleophilic substitution reaction in vivo takes place between Alkylans and Alkylandum. The following Table IV contains the dose reduction factors resulting from the quotients of the LD50 values and their Confidence limits for constant molar dot-antidote reactions within the individual Test series. The table shows that the antidotes according to the invention have higher dose reduction factors have as z. B. the comparison substances oysteamine hydrochloride and L-cysteine hydrochloride.

TABELLE IV Dosisreduktionsfaktoren (DRF) bei konstanten molaren Dot-Antidot-Realtionen.TABLE IV Dose Reduction Factors (DRF) at constant molar dot-antidote realtions.

Nr. Antidot Molares Verhältnis DRF Vertrauens-Dot: Antidot grenzen 1 Cysteaminhydrochlorid 1 : 58 1,3 1,6/1,1 2 L-Cysteinhydrochlorid 1 : 116 1,7 2,1/1,4 3 S-(2-Aminoäthyl)-isothiouroniumdibromid 1 : 28 1,8 2,2/1,45 4 1,3,4-Thiadiazoldithiol-(2,5) 1 : 60 1,8 2,3/1,4 5 1,2,4-Triazolthiol-(3) 1 : 73 3,5 4,25/2,8 6 3,3-Dimercapto-2-cyanacrylamid, Di-Na-Salz 1 : 30 2,1 2,7/1,6 7 3,5-Dimercaptoisothiazol-4-Carbonsäureamid, 1 : 46 2,8 3,6/2,2 Di-Na-Salz Werden in den einzelnen Versuchsgruppen konstante Antidot-Dosen bei steigenden Dot-Dosierungen verabreicht, dann erhält man bei gleicher Auswertung die in Tabelle V angegebenen Dosiereduktionsfaktoren. Die den Berechnungen zugrundeliegenden Regressionsgeraden gehorchen dem Parallelitätskriterium von Litchfield und Wilcoxon.No. Antidote molar ratio DRF trust dot: limit antidote 1 cysteamine hydrochloride 1: 58 1.3 1.6 / 1.1 2 L-cysteine hydrochloride 1: 116 1.7 2.1 / 1.4 3 S- (2-aminoethyl) -isothiouronium dibromide 1: 28 1.8 2.2 / 1.45 4 1,3,4-thiadiazole dithiol (2.5) 1: 60 1.8 2.3 / 1.4 5 1,2,4-triazolthiol- (3) 1: 73 3.5 4.25 / 2.8 6 3,3-dimercapto-2-cyanoacrylamide, Di-Na salt 1: 30 2.1 2.7 / 1.6 7 3,5-dimercaptoisothiazole-4-carboxamide, 1: 46 2.8 3.6 / 2.2 di-Na salt Will be in the individual test groups constant antidote doses administered with increasing dot doses, then received the dosage reduction factors given in Table V are used with the same evaluation. The regression lines on which the calculations are based obey the parallelism criterion by Litchfield and Wilcoxon.

TABELLE V Dosiereduktionsfaktoren (DRF) bei konstanter Antidot-und steigender Dot-Dosierung.TABLE V Dose Reduction Factors (DRF) at constant antidote and increasing dot dosage.

Nr. Antidot Therapeutische Dosis DRF 1 Cystamindihydrochlorid 203 1,4 2 L-Cysteinhydrochlorid 570 2,35 3 Cysteaminhydrochlorid 238 1,4 4 S-(2-Aminoäthyl)-isothiuroniumdibromid 286 1,95 5 1,3,4-Thiadiazoldithiol 470 2,8 -(2,5) 6 1,2,4-Triazolthiol-(3) 500 4,2 7 3,3-Dimercapto-2-cyan- 300 2,8 acrylamid, Di-Na-Salz 8 3,5-Dimercaptoisothiazol-4-carbonsäureamid, 680 3,6 Di-Na-Salz Aus diesen Werten ergibt sich eindeutig die Uberlegenheit der Verbindungen 5 - 8, denn der Dosis-Réduktionsfaktor (DRF) ist das entscheidende Kriterium für die Antidot-Wirkung. Bekanntermaßen bestehen ausgesprochene Parallelen zwischen Strahlenschutz und dem Schutz gegenüber Stickstofflostverbindungen, die sich auch hier wieder erweisen.Die Strahlenschutzwirkung gegen ionisierende Strahlen, insbesondere Röntgenstrahlen, wird im Tierversuch an Ratten und Mäusen getestet. Die Versuchsmethodik ist z. B. in Acta Chemica Scandinavica, 3and 12, Seiten 1873 - 1886 (1958) beschrieben.No. Antidote Therapeutic dose DRF 1 cystamine dihydrochloride 203 1.4 2 L-cysteine hydrochloride 570 2.35 3 cysteamine hydrochloride 238 1.4 4 S- (2-aminoethyl) -isothiuronium dibromide 286 1.95 5 1,3,4-thiadiazole dithiol 470 2.8 - (2.5) 6 1,2,4-triazole thiol- (3) 500 4.2 7 3,3-Dimercapto-2-cyano- 300 2.8 acrylamide, di-Na salt 8 3,5-Dimercaptoisothiazole-4-carboxamide, 680 3.6 Di-Na-Salt These values clearly show the superiority of the Compounds 5 - 8, because the dose reduction factor (DRF) is the crucial one Criterion for the antidote effect. It is known that there are pronounced Parallels between radiation protection and protection against nitrogen mustard compounds, which also prove themselves here. The radiation protection against ionizing Radiation, especially X-rays, is used in animal experiments on rats and mice tested. The experimental method is e.g. B. in Acta Chemica Scandinavica, 3and 12, Pages 1873-1886 (1958).

Die genannten Verbindungen können erfindungsgemäß im Gemisch mit festen, flüssigen und/oder halbflüssigen Arzneimittelträgern als Arzneimittel in der Human- oder Veterinärmedizin verwendet werden. Als Trägersubstanzen kommen solche organischen oder anorganischen Stoffe in Frage, die für die parenterale,.According to the invention, the compounds mentioned can be mixed with solid, liquid and / or semi-liquid drug carriers as drugs in human or veterinary medicine. The carrier substances used are organic or inorganic substances in question, which for parenteral ,.

enterale oder topikale Applikation geeignet sind und die mit den Verbindungen nicht in Reaktion treten, wie beispielsweise Wasser, pflanzliche Öle, Benzylalkohole, Polyäthylenglykole, Gelatine, Lactose, Stärke, Magnesiumstearat, Talk, Vaseline, Cholesterin. Zur parenteralen Applikation dienen insbesondere Lösungen, vorzugsweise wässrige oder ölige Lösungen, sowie Suspensionen oder Emulsionen. Für die.enterale Applikation eignen sich Tabletten, Dragees, Sirupe, Säfte, Kapseln oder Suppositorien, für die topikale Anwendung Salben, Gele, Cremes, Sprays oder Puder. Die angegebenen Zubereitungen können gegebenenfalls sterilisiert oder mit Hilfsstoffen wie Gleit-,, Eonservierungs-, Stabilisierungs- oder Netzmitteln, Emulgatoren, Salzen zur Beeinflussung des osmotischen Druckes, Puffersubstanzen, Farb-, Geschmacks- undXoder Aromastoffen versetzt werden. Die Substanzen werden vorzugsweise in einer Dosierung von 0,5 bis 5 g pro Dosierungseinheit verabreicht.enteral or topical application are suitable and those with the compounds do not react, such as water, vegetable oils, benzyl alcohols, Polyethylene glycols, gelatine, lactose, starch, magnesium stearate, talc, petroleum jelly, Cholesterol. Solutions, preferably, are used in particular for parenteral administration aqueous or oily solutions, as well as suspensions or emulsions. For the .enteral Suitable for application are tablets, coated tablets, syrups, juices, capsules or suppositories, for topical application ointments, gels, creams, sprays or powders. The specified Preparations can optionally be sterilized or with auxiliaries such as lubricants ,, Preservatives, stabilizers or wetting agents, emulsifiers, salts for influencing osmotic pressure, buffer substances, coloring, flavoring and flavoring substances be moved. The substances are preferably used in a dosage of 0.5 to 5 g administered per dosage unit.

Die Antidote werden insbesondere bei akuten Vergiftungen vorzugsweise als Injektionslösung verabreicht. Die Injektion kann i. v., i. m. oder auch i. p. erfolgen. In der Regel werden pro Dosierungseinheit 0,5 bis 4 g der Antidote eingesetzt; das Volumen der Dosierungseinheit liegt im allgemeinen zwischen 1 und 15 ml, vorzugsweise bei etwa 10 ml. In der Regel sind wässerige Zubereitungen bevorzugt. Es ist natürlich auch möglich, die Antidote in Ampullen mit lyophilisiertem Inhalt zur Verfügung zu stellen, wobei zweckmäßig eine zweite Ampulle mit dem geeigneten Lösungsmittel beigepackt wird.The antidotes are particularly preferred in acute poisoning administered as a solution for injection. The injection can i. v., i. m. or i. p. take place. As a rule, 0.5 to 4 g of the antidotes are used per dosage unit; the volume of the dosage unit is generally between 1 and 15 ml, preferably at about 10 ml. As a rule, aqueous preparations are preferred. It is natural it is also possible to have the antidotes available in ampoules with lyophilized content to provide, where appropriate a second ampoule with the appropriate solvent is enclosed.

Auch bei einer Anwendung als Mittel gegen Strahlenschutz kommt parenterale, orale oder topische Applikation in Frage. Bei einer prophylaktischen Behandlung kann die Dosis unter Umständen wesentlich niedriger gewählt werden als bei kurativer Anwendung.Even when used as a means against radiation protection, parenteral, oral or topical application in question. With prophylactic treatment the dose can possibly be chosen significantly lower than with curative Use.

Beispiel 1 Eine Lösung von 160 g 1,3,4-Thiadiazol-dithiol(2,5) in 950 ml 0,2 M Phosphatpuffer vom pH, 7,2 wird durch Zugabe von 1 n NaOH auf pH 7,2 eingestellt. Mit destilliertem Wasser wird auf 1 1 aufgefüllt. Mit dieser Lösung werden 100 Ampullen zu je 10 ml gefüllt und in üblicher Weise sterilisiert.Example 1 A solution of 160 g of 1,3,4-thiadiazol-dithiol (2.5) in 950 ml of 0.2 M phosphate buffer of pH 7.2 is adjusted to pH 7.2 by adding 1N NaOH set. Make up to 1 liter with distilled water. With this solution 100 ampoules are filled with 10 ml each and sterilized in the usual way.

Beispiel 2 Analog Beispiel 1 werden Ampullen hergestellt, die in je 10 ml Lösung folgende Wirkstoffe enthalten: a) 1,2,4-Triazolthiol-(3) 1600 mg b) 3, 3-Dimercapto-2-cyanacrylamid, Di-Na-Salz 1000 mg c) 3,5-Dimercapto-isothiazol-4-carbonsäureamid, Di-Na-Salz 1500 mg e) Dikalium-2-äthoxycarbonyl-2-cyanäthylendi- 1600 mg thiolat-(1,1) f) Dikaliumcyaniminomethan- 1600 mg dithiolat g) Kalium-N-thiazolyl-(2)- 1600 mg dithiocarbaminat h) 1,2,4-Triazolthiol-5 1600 mg i) Natrium-NwN-dimethyldi- 1800 mg thi oc arbaminat Beispiel 3 Folgende Bestandteile werden in an sich üblicher Weise zu einer Creme verarbeitet: 3,3-Dimercapto-2-cyan-acrylamid, Di-Na-Sals 5 ffi Cetylalkohol 10,0 % Paraffin, dickflüssig 3,0 % Glycerinmonostearat 2,0 % Propylenglykolmonostearat 2,0 % Glycerin 2,0 % feinstteilige Kieselsäure' 0,1 % Vaseline 30,0 % Polyoxyäthylensorbitanmonopalmitat 10,0 % y-Hydroxybensoesäurepropylester 0,1 % Propylenglykol 3,0 % Wasser ad 100 % In analoger Weise können auch die übrigen Wirksubstanzen zu Cremes verarbeitet werden.Example 2 Analogously to Example 1, ampoules are produced, each in 10 ml solution contain the following active ingredients: a) 1,2,4-triazolthiol- (3) 1600 mg b) 3,3-Dimercapto-2-cyanoacrylamide, di-Na salt 1000 mg c) 3,5-Dimercapto-isothiazole-4-carboxamide, Di-Na salt 1500 mg e) Dipotassium-2-ethoxycarbonyl-2-cyanoethylenedi- 1600 mg thiolate- (1.1) f) Dipotassium cyaniminomethane 1600 mg dithiolate g) Potassium-N-thiazolyl- (2) - 1600 mg dithiocarbaminate h) 1,2,4-triazolthiol-5 1600 mg i) sodium-NwN-dimethyldi-1800 mg thioc arbaminate Example 3 The following ingredients are more common per se Processed into a cream: 3,3-Dimercapto-2-cyano-acrylamide, Di-Na-Sals 5 ffi cetyl alcohol 10.0% paraffin, viscous 3.0% glycerine monostearate 2.0% Propylene glycol monostearate 2.0% glycerine 2.0% finely divided silica 0.1% petrolatum 30.0% polyoxyethylene sorbitan monopalmitate 10.0% propyl y-hydroxybenoate 0.1% propylene glycol 3.0% water ad 100 % The other active ingredients can also be processed into creams in the same way will.

Beispiel 4 Große Hartgelatine-Kapseln werden mit einer Mischung folgender Bestandteile gefüllt: 1,2,4-Triazolthiol-(3) 1 g Talk 0,5g Magnesiumstearat 0,05 g Beispiel 5 180 g 3, 5-Dimercapto-isothiazol-4-carbonsäureamid-Di-Na-Salz werden mit 50 g Kartoffelstärke gemischt. Die Mischung wird mit 7 g Glycerin und 30 g Äthylalkohol (90 %) durchfeuchtet.Example 4 Large hard gelatin capsules are made with a mixture of the following Ingredients filled: 1,2,4-triazolthiol- (3) 1 g talc 0.5 g magnesium stearate 0.05 g Example 5 180 g of 3,5-dimercapto-isothiazole-4-carboxamide di-Na salt become mixed with 50 g potato starch. The mixture is made with 7 g of glycerin and 30 g of ethyl alcohol (90%) soaked.

Die Masse wird mit Hilfe von 70 g wässerigem Gelatineschleim granuliert und nach dem Zumischen von 15 g Talk und 0,25 g Magnesiumstearat so zu Tabletten gepreßt, daß jeder Tablettenkern 1,8 g des Wirkstoffs enthält.The mass is granulated with the aid of 70 g of aqueous gelatin slime and after mixing 15 g of talc and 0.25 g of magnesium stearate so into tablets pressed so that each tablet core contains 1.8 g of the active ingredient.

Claims

Claims to fatigue

1. Antidote against nitrogen mustards and derivatives and agents against ionizing Rays, characterized in that they are considered to be the seed constituent at least contain one of the following compounds: 1,3,4-thiadiazol-dithiol- (2,5) 1,2,4-triazolthiol- (3) 3,3-Dimercapto-2-cyano-acrylamide, disodium salt 3,5-Dimercaptoisothiazole-4-carboxamide, Disodium salt dipotassium-2-ethoxy carbonyl-2-cyanoethylene dithiolate- (1,1) dipotassium cyaniminomethanedithiolae Potassium N-thiazolyl- (2) -dithiocarbaminate 1,2,4-triazolthiol-5 Sodium-N, N-dimethyldithiocarbaminate

2. antidote and agent according to claim 1, characterized in that it is effective Ingredient 1,2,4-triazolthiol - '(3) contains.

3. Antidotes and agents according to Claims 1 and 2, characterized in that that they are in the form of pharmaceutical preparations suitable for injection.

4. Antidotes and agents according to claims 1 - 3, characterized in that that the active ingredients in an amount of 0.5 to 5 g per unit dosage are included.