DE19848623A1 - Preiswerte Immobilisierungsmatrizen aus natürlichen Materialien - Google Patents
Preiswerte Immobilisierungsmatrizen aus natürlichen MaterialienInfo
- Publication number
- DE19848623A1 DE19848623A1 DE19848623A DE19848623A DE19848623A1 DE 19848623 A1 DE19848623 A1 DE 19848623A1 DE 19848623 A DE19848623 A DE 19848623A DE 19848623 A DE19848623 A DE 19848623A DE 19848623 A1 DE19848623 A1 DE 19848623A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- reactor
- bioreactor according
- bioreactor
- lignocellulosic material
- lactic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 23
- 239000012978 lignocellulosic material Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 title claims description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims abstract description 3
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 44
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 26
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 22
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 22
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 claims description 17
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 14
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 claims description 14
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 claims description 14
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 13
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 13
- YMDNODNLFSHHCV-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n,n-diethylethanamine Chemical compound CCN(CC)CCCl YMDNODNLFSHHCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims description 6
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 235000019987 cider Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000014101 wine Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000004941 influx Effects 0.000 claims description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims description 2
- 235000015040 sparkling wine Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims 1
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 18
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 239000011257 shell material Substances 0.000 description 9
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N Diacetyl Chemical group CC(=O)C(C)=O QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 5
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 5
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 5
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 5
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 3
- 241000183024 Populus tremula Species 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N [CH2]CN(CC)CC Chemical group [CH2]CN(CC)CC MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000005422 blasting Methods 0.000 description 2
- 150000001728 carbonyl compounds Chemical class 0.000 description 2
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 2
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005610 lignin Polymers 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000006855 networking Effects 0.000 description 2
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 2
- 239000010420 shell particle Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- QDWYBBAEFXJZLZ-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n,n-diethylpropan-2-amine Chemical compound CCN(CC)C(C)(C)Cl QDWYBBAEFXJZLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VKPPFDPXZWFDFA-UHFFFAOYSA-N 2-chloroethanamine Chemical compound NCCCl VKPPFDPXZWFDFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193798 Aerococcus Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 241000609240 Ambelania acida Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 108010062877 Bacteriocins Proteins 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 241000206594 Carnobacterium Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000186811 Erysipelothrix Species 0.000 description 1
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical compound CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000193789 Gemella Species 0.000 description 1
- 241000720942 Globicatella Species 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002488 Hemicellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000186713 Lactobacillus amylovorus Species 0.000 description 1
- 240000001929 Lactobacillus brevis Species 0.000 description 1
- 235000013957 Lactobacillus brevis Nutrition 0.000 description 1
- 241000186679 Lactobacillus buchneri Species 0.000 description 1
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 1
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 1
- 240000002605 Lactobacillus helveticus Species 0.000 description 1
- 235000013967 Lactobacillus helveticus Nutrition 0.000 description 1
- 241001134654 Lactobacillus leichmannii Species 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 1
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 1
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 108010053775 Nisin Proteins 0.000 description 1
- NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N Nisin Chemical compound N1C(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@@H]([C@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)[C@H](N)[C@H](C)CC)CSC[C@@H]1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(NCC(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CS[C@@H]2C)C(=O)N[C@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(N[C@H](C)C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@@H](C(N[C@H](CC=4NC=NC=4)C(=O)N[C@H](CS[C@@H]3C)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N[C@H]([C@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=3NC=NC=3)C(=O)N[C@H](C(C)C)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(O)=O)=O)CS[C@@H]2C)=O)=O)CS[C@@H]1C NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N 0.000 description 1
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 240000005384 Rhizopus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000013752 Rhizopus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 description 1
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 1
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 241000207194 Vagococcus Species 0.000 description 1
- 241000588902 Zymomonas mobilis Species 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000010905 bagasse Substances 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- QXJJQWWVWRCVQT-UHFFFAOYSA-K calcium;sodium;phosphate Chemical compound [Na+].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O QXJJQWWVWRCVQT-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003763 carbonization Methods 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003822 epoxy resin Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 230000009969 flowable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009920 food preservation Methods 0.000 description 1
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N haloperidol Chemical compound C1CC(O)(C=2C=CC(Cl)=CC=2)CCN1CCCC(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N hexanal Chemical class CCCCCC=O JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 1
- 229940054346 lactobacillus helveticus Drugs 0.000 description 1
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 1
- 235000015122 lemonade Nutrition 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000004309 nisin Substances 0.000 description 1
- 235000010297 nisin Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N pentanal Chemical class CCCCC=O HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 238000006068 polycondensation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000647 polyepoxide Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036632 reaction speed Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000012748 slip agent Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/56—Lactic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Preparation or treatment thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C11/00—Fermentation processes for beer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12C—BEER; PREPARATION OF BEER BY FERMENTATION; PREPARATION OF MALT FOR MAKING BEER; PREPARATION OF HOPS FOR MAKING BEER
- C12C12/00—Processes specially adapted for making special kinds of beer
- C12C12/04—Beer with low alcohol content
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12G—WINE; PREPARATION THEREOF; ALCOHOLIC BEVERAGES; PREPARATION OF ALCOHOLIC BEVERAGES NOT PROVIDED FOR IN SUBCLASSES C12C OR C12H
- C12G1/00—Preparation of wine or sparkling wine
- C12G1/02—Preparation of must from grapes; Must treatment and fermentation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
- C12M25/16—Particles; Beads; Granular material; Encapsulation
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Die Erfindung betrifft eine Bioreaktor mit immobilisierten Mikroorganismen und die Verwendung dieses Bioreaktors. Insbesondere betrifft sie einen Bioreaktor mit Mikroorganismen, die auf Teilchen immobilisiert sind, die aus einem natürlichen Lignocellulosematerial zusammengesetzt sind. Dieses Material ist derivatisiert, wodurch es Anionenaustauscheigenschaften aufweist. Bevorzugte Lignocellulosematerialien sind Kokosnussschalen und Holz. Die Derivatisierung wird vorzugsweise unter Verwendung von Diethylaminoethylchlorid durchgeführt. Der Bioreaktor ist geeignet zur Herstellung von Produkten, die aus dem Metabolismus von Milchsäurebakterien stammen, und/oder zur Modifizierung der Zusammensetzung des Zustroms, zur Erzeugung von alkoholischen Getränken und im wesentlichen alkoholfreiem Bier.
Description
Die vorliegende Erfindung betrifft einen Bioreaktor mit
immobilisierten Mikroorganismen und die Verwendung
desselben.
Fermentationsverfahren werden seit langer Zeit mit Hilfe
von freiwachsenden mikrobiellen Kulturen durchgeführt. Es
wurde erkannt, dass im allgemeinen die Verwendung von
immobilisierten Mikroorganismen vorteilhaft ist.
Immobilisierte Mikroorganismen ermöglichen kontinuierliche
Verfahren und eine hohe Konzentration an Mikroorganismen,
so dass im Vergleich zu freiwachsenden Mikroorganismen
höhere Reaktionsgeschwindigkeiten erreicht werden und
daher Anlagen mit kleineren Dimensionen möglich sind, oder
die Dauer der Verfahren deutlich verkürzt werden kann.
In der Vergangenheit wurde die Immobilisierung von
Mikroorganismen durch verschiedene Einfang- oder
Einkapselungstechniken bewirkt. Beispielsweise werden
Agar, Gelatine oder Alginat dazu verwendet, die
Mikroorganismen in einen Gelierungsprozess zu involvieren.
Zur Erzielung des Einfangens der Mikroorganismen mittels
Lösungsmittelausfällung werden Celluloseacetat oder
Polystyrol verwendet. Weiterhin werden Epoxyharze und
Polyurethan oder Polyacrylamid zum Einfangen durch
Polykondensation oder Polymerisation verwendet. Die
physikalischen Eigenschaften der oben genannten
Trägermaterialien resultieren jedoch in erheblichen
Schwierigkeiten bei ihrer Herstellung und Anwendung in
industrieller Grössenordnung. Häufig müssen sie vor Ort
direkt vor ihrer Verwendung hergestellt werden und können
nicht unabhängig vorab hergestellt und gelagert werden.
Sie sind üblicherweise weich und zerbrechlich, wodurch
Probleme hervorgerufen werden, z. B. übermässiger
Druckverlust, wodurch ihre Verwendung in der Praxis in
grossen Einheiten oder mit grossen Flussgeschwindigkeiten
verhindert wird.
In DE-A1-42 39 612 ist ein Bioreaktor mit einem
verbesserten Träger offenbart, wobei gekörnte
Diethylaminoethyl (DEAE)-modifizierte Cellulose besonders
bevorzugt ist. EP-A-424 794 offenbart die Immobilisierung
von Hefezellen unter Verwendung dieses Trägers. Zwar zeigt
dieser Träger eine exzellente Güte, jedoch sind die mit
seiner Herstellung verbundenen Kosten hoch. Andere, aus
Glaskugeln hergestellte Träger sind in DE-41 11 879 und
DE-41 37 474 beschrieben.
Es ist daher ein erfindungsgemässes Ziel, einen Bioreaktor
mit auf einem Träger immobilisierten Mikroorganismen
bereit zustellen, der die notwendigen mechanischen
Eigenschaften zur Anwendung in industrieller
Grössenordnung besitzt, dessen Verwendung jedoch im
Vergleich zu den Bioreaktoren aus dem Stand der Technik
aufgrund wirtschaftlicher Gründe bevorzugt ist.
Das obige Ziel wird durch einen Bioreaktor mit
Mikroorganismen erreicht, der dadurch gekennzeichnet ist,
dass die Mikroorganismen auf Teilchen immobilisiert sind,
die aus einem natürlichen Lignocellulosematerial
zusammengesetzt sind, das so derivatisiert ist, dass es
anionenaustauschende Eigenschaften erhält.
Die erfindungsgemäss zu verwendenden Mikroorganismen sind
nicht beschränkt und umfassen Bakterien und Pilzzellen.
Aufgrund ihrer industriellen Bedeutung sind
Milchsäurebakterien und Hefezellen von besonderem
Interesse. Der Begriff "Milchsäurebakterien" wie er hierin
verwendet wird, umfasst die Genera Aerococcus,
Carnobacterium, Enterococcus, Erysipelothrix, Gemella,
Globicatella, Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc,
Pediococcus, Streptococcus, Tetragenococcus und
Vagococcus. Diese Genera sind im allgemeinen dadurch
gekennzeichnet, dass die zu ihnen gehörigen Bakterien die
Fähigkeit besitzen, Milchsäure oder andere spezifische
Produkte zu erzeugen, oder sie diese Eigenschaften
ursprünglich in ihrer Wildtypform besessen haben.
Homofermentive Bakterien, wie Lactobacillus delbrückii,
Lactobacillus bulgaricus oder Lactobacillus leichmanii,
können zur Herstellung von Milchsäure in grossem Massstab
verwendet werden. Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus
plantarum und Lactobacillus helveticus können zur
Ansäuerung von Bier mit Milchsäure verwendet werden.
Heterofermentative Bakterien, wie Lactobacillus brevis,
Lactobacillus buchneri oder Lactobacillus mesenteroides
werden zur Herstellung von Nahrungsmitteln verwendet, die
Milchsäure enthalten.
Der Begriff "Hefezellen", wie er erfindungsgemäss
verwendet wird, umfasst beliebige Hefetypen,
beispielsweise den Genus Candida. Der derzeit wichtigste
sind Bäckerhefe, Bierhefe, Weinhefe und
Schnapsbrennerhefe, der alle zur Spezies Saccharomyces
cerevisae gehören.
Neben Hefen können erfindungsgemäss andere Pilztypen
(Schimmel) verwendet werden, wie beispielsweise
Aspergillus niger oder Rhizopus oryzae. Zur Herstellung
von Alkohol ist ein bevorzugt verwendbarer Mikroorganismus
das Bakterium Zymomonas mobilis.
Der Begriff "natürliches Lignocellulosematerial" umfasst
Materialien natürlichen Ursprungs, die hauptsächlich aus
Lignin, Cellulose und Hemicellulosen zusammengesetzt sind.
Das am weitesten verbreitete Material dieser Art ist Holz,
das beispielsweise in Form von Holzschnitzeln oder
Sägemehl verwendet werden kann. Andere verwendbare
Lignocellulosematerialen schliessen Materialien ein, die
von Graspflanzen abgeleitet sind, wie beispielsweise
Zuckerrohr (Bagasse) und Bambus.
Erfindungsgemäss besonders geeignet sind gemahlene
Nussschalen, wie beispielsweise Kokosnussschalen. Jährlich
werden in den tropischen Gebieten der Welt Millionen
Tonnen Schalenabfälle erzeugt, wobei Kokosnüsse am meisten
verbreitet sind. Die Abfälle sind extensiv als Füllstoffe
in Kunststoffen, als Antirutschmittel in Deckanstrichen
oder als Strahlsand zum Weichstrahlen von Metallen
verwendet. Das Schalenmaterial ist hart und sehr
widerstandsfähig und behält seine Einheitlichkeit auch in
rauhen Behandlungen, wie der Carbonisierung bei der
Herstellung mechanischer Aktivkohle, einer der am
weitesten fortgeschrittenen Verwendungen von
Nussschalenabfällen.
Im Vergleich zu gekörnter DEAE-modifizierter Cellulose
zeigen Kokosnussschalen beispielsweise bezüglich der
Kanalbildung und Kompaktierung des Trägerbettes sogar
bessere mechanische Eigenschaften. Die
Kokosnussschalenteilchen sind freier fliessend, dichter,
weniger zerbrechlich, weniger kompressibel und leichter zu
benetzen und zu trocknen. Kokosnussschalenteilchen sind im
wesentlichen nicht porös, was bedeutet, dass aufgrund
fehlender interner Diffusion die Regenerierung und das
Waschen des Trägers schnell vonstatten gehen.
Erfindungsgemäss haben bevorzugt Lignocellulosematerialien
eine Kompressibilität von weniger als 20%, weiter
bevorzugt weniger als 10%.
In dem erfindungsgemäss Bioreaktor liegt das
Lignocellulosematerial in Form von Teilchen vor. Die Form
der Teilchen ist nicht kritisch und hängt von dem
verwendeten spezifischen Material ab. Teilchen mit
regelmässiger Form sind jedoch bevorzugt. Je härter das
Material ist, desto kleinere Teilchen können verwendet
werden, ohne dass es zu exzessiven Druckverlusten in dem
Bioreaktor kommt.
Erfindungsgemäss wird das Lignocellulosematerial vor der
Immobilisierung der Mikroorganismen kationisiert, d. h. das
Material wird so derivatisiert, dass es
Anionenaustauschereigenschaften bekommt.
Das Lignocellulosematerial wird durch Umsetzung mit einer
Verbindung derivatisiert, die in der rage ist, eine
kovalente Bindung mit den in dem Lignocellulosematerial
vorhandenen Hydroxylgruppen einzugehen. Im Prinzip kann
erfindungsgemäss ein beliebiges bekanntes Verfahren zur
Herstellung der Ionenaustauschercellulose angewandt
werden. Es bestehen zahlreiche Möglichkeiten, eine
Cellulose oder Ligninhydroxylgruppe durch eine
ionisierbare Amingruppe, insbesondere tertiäre oder
quaternäre Aminogruppen, zu substituieren. Aus
Sicherheits- und anderen technischen Gründen ist es in
biologischen Ionenaustauscheranwendungen die allgemeine
Praxis, zu diesem Zweck mit tertiären Aminen zu arbeiten.
Beispiele für die erfindungsgemäss zu verwendenden
Reagenzien schliessen Chloralkylamine, wie beispielsweise
zu verwendenden Reagenzien schliessen Chloralkylamine, wie
beispielsweise Diethylaminoethylchlorid,
Diethylaminoisopropylchlorid und Aminoethylchlorid, ein.
Das bevorzugte Reagenz ist Diethylaminoethylchlorid, das
kommerziell in grossen Mengen erhältlich ist. Ferner
können auch die entsprechenden Epoxide verwendet werden.
Die Menge des Derivatisierungsmittels hängt von dem
verwendeten Lignocellulosematerial ab. Da im
Derivatisierungsschritt starke Beizmittel verwendet
werden, neigen einige Lignocellulosematerialien, wie
beispielsweise Kokosnussschalen, dazu, sich teilweise
aufzulösen, was nicht bevorzugt ist. Es wurde
herausgefunden, dass es zur Verhinderung des
Löslichwerdens nützlich ist, das Lignocellulosematerial
vor der Derivatisierung einer Vernetzungsreaktion zu
unterziehen. Diese Vernetzungsreaktion kann unter
Verwendung von Formaldehyd oder Dialdehyden, wie
beispielsweise Glutaraldehyd, durchgeführt werden. Wenn
Formaldehyd verwendet wird, kann dessen Wirksamkeit durch
Zugabe von Harnstoff zu der Lösung weiter verbessert
werden. Neben der Verstärkung der Vernetzung bindet
Harnstoff auch zurückbleibendes Formaldehyd, das schädlich
ist, und bei der Herstellung Umwelt- und
Gesundheitsgefährdungen hervorrufen kann.
Die Ladekapazität, d. h. die Anzahl an Zellen pro Gramm des
trockenen Trägers, hängt von dem Typ des verwendeten
Mikroorganismus, dem Typ des verwendeten
Lignocellulosematerials, der Teilchengrösse und dem
angewandten Vernetzungs- und/oder
Derivatisierungsverfahren ab.
Gemäss einer erfindungsgemäss bevorzugten Ausführungsform
umfasst der Bioreaktor eine Vorrichtung, die den Kontakt
des beladenen Trägers mit einem umzusetzenden Fluidum
erlaubt. Vorteilhafterweise ist diese Vorrichtung
ausgewählt aus einem gerührten Tankreaktor, einem
Korbreaktor, einem Fliessbettreaktor, einem
Festbettreaktor und einem Filterreaktor. Der Bioreaktor
kann auch eine Vorrichtung darstellen, die eine Säule oder
eine Mehrzahl von Säulen ist.
Eine weiter bevorzugte Ausführungsform des Bioreaktors
umfasst ferner zusätzlich zu der Vorrichtung einen
Behälter zur Hydratisierung des trockenen Trägermaterials
vor den Pumpen in dem Bioreaktor, einen Behälter mit
Sterilisierungsflüssigkeit zur Sterilisierung des Trägers
in dem Bioreaktor, einen Behälter mit
Neutralisierungsflüssigkeit zur Neutralisierung des
Trägers nach der Sterilisierung, einen Behälter mit einer
Mikroorganismensuspension zum Einpumpen in den Bioreaktor
und zur Fixierung auf der Oberfläche des Trägers, einen
Behälter mit dem zu behandelnden Substrat, wahlweise einen
Nachbehandlungsbehälter, in dem der Ausfluss aus dem
Bioreaktor nachbehandelt wird, und einen Behälter zur
Lagerung des Produkts.
Der Bioreaktor kann ferner eine Druckablassvorrichtung und
Mittel zur Abtrennung von Kohlendioxid und/oder ungelösten
Gasen einschliessen oder daran angeschlossen sein.
Im rahmen der vorliegenden Erfindung kann der Bioreaktor
zur Herstellung von Produkten verwendet werden, die aus
dem Metabolismus der Mikroorganismen resultieren, sowie
zur Modifizierung der Zusammensetzung des Zustroms.
Gemäss einer besonders Ausführungsform wird der Bioreaktor
zur Herstellung von Milchsäure angewandt. Bevorzugte
Anwendungen sind die Erzeugung von Milchsäure in einem
Zustrom, der aus einem Nahrungsmittel oder einem
Futtermittelprodukt besteht.
Durch die Auswahl spezifischer Milchsäurebakterien kann
der erfindungsgemässe Bioreaktor zur Herstellung weiterer
Verbindungen zusätzlich zu oder als Alternative zu
Milchsäure verwendet werden. Hierzu ist die Herstellung
von Bacteriocinen, wie beispielsweise Nisin, das zur
Nahrungsmittelkonservierung nützlich ist, genannt werden.
Es ist ferner möglich, bestimmte Geschmacksverbindungen
herzustellen, wie beispielsweise Diacetyl, Ethanol,
Propanol, Isobutanol, Pentanale und Hexanale. Der
erfindungsgemässe Bioreaktor kann darüber hinaus zur
Herstellung extrazellulärer Enzyme, wie beispielsweise
Lipase, oder von Polymeren, wie beispielsweise Dextran
oder anderen organischen Säuren, zusätzlich zu Milchsäure
verwendet werden. Ferner ist es ebenso möglich, durch
Verwendung bestimmter zellgebundener Ureaseenzyme
Harnstoff aus dem Zustrom in den Reaktor zu entfernen.
Eine weiter bevorzugte Anwendung des Bioreaktors liegt in
der Herstellung von Milchsäure in fliessfähigen und
pumpbaren Nahrungsmittelprodukten, wie beispielsweise
Milch oder Fruchtsäften.
Ebenso kann der erfindungsgemässe Bioreaktor
vorteilhafterweise zur Ansäuerung von Getränken, wie
beispielsweise Säften, Limonaden, Bier und Wein, verwendet
werden. Darüber hinaus kann der erfindungsgemässe
Bioreaktor auch vorteilhaft zur Ansäuerung der Würze bei
der Herstellung von alkoholfreiem Bier verwendet werden.
Gemäss einer weiteren besonderen Ausführungsform wird der
Bioreaktor zur Herstellung von Brauereiprodukten oder
anderen alkoholischen Getränken angewandt. Eine bevorzugte
Anwendung ist die kontinuierliche Primärfermentation von
Bier oder anderen alkoholischen Getränken, wie
beispielsweise Apfelwein (Cider), Wein oder Schaumwein mit
Hefezellen, die auf dem Lignocellulosematerial
immobilisiert sind.
Eine weitere bevorzugte Anwendung ist die kontinuierliche
Sekundärfermentation oder Reifung von fermentiertem Bier.
Eine weiter bevorzugte Anwendung ist die Herstellung von
Bier mit geringem Alkoholgehalt oder im wesentlichen
alkoholfreiem Bier, das die mehr oder weniger strengen
Bestimmungen, was als "alkoholfreies Bier" bezeichnet
werden darf, in verschiedenen Ländern erfüllt.
Die Derivatisierung wurde in einem 500 l-Reaktor
durchgeführt, der mit einem Propellerrührer und einem
Heiz- und Kühlmantel ausgestattet war. 150 l Wasser und
20 kg Espenschnitzel mit einem Feuchtigkeitsgehalt von 5%
und einem Teilchendurchmesser von 2 bis 5 mm wurden in den
Reaktor eingeführt. Die Temperatur des Reaktors wurde auf
85°C angehoben und dessen Inhaltsstoffe wurden bei dieser
Temperatur für 150 Minuten gerührt. Während dieser Zeit
wurden die schwimmenden Holzschnitzel gut durchnässt und
die eingefangene Luft wurde abgegeben.
Die Reaktorinhaltsstoffe wurden auf eine Temperatur von
40°C abgekühlt, wonach 4,8 kg einer 50%-igen
Natriumhydroxidlösung hinzugegeben wurden. 7,6 kg einer
50%-igen Lösung des Hydrochlorids von
Diethylaminoethylchlorid (DEC) wurden unter Rühren mit
einer Geschwindigkeit von 150 ml/min. in den Reaktor
gepumpt.
Nach Zugabe des DEC wurde der Reaktor für weitere 30
Minuten gerührt und anschliessend wurde der pH-Wert der
Reaktorinhaltsstoffe zu pH 11,2 bestimmt. Das verbliebene
Beizmittel wurde durch Zugabe von 500 ml konzentrierter
Schwefelsäure neutralisiert. Der pH-Wert stellte sich auf
einen Wert von 6,1 ein. Der neutralisierte Ansatz wurde
viermal mit Wasser durch Dekantieren gewaschen. Das
Volumen jedes Dekantierschrittes wurde von 500 auf 150 l
verringert.
Nach den Dekantierungen wurde der Reaktor mit Wasser auf
500 l aufgefüllt und auf eine Temperatur von 92°C erhitzt.
Der Ansatz wurde für 16 Stunden gerührt, wobei die
Temperatur auf 74°C absank. Letztendlich wurde der Ansatz
durch erneutes vierfaches Dekantieren mit Wasser wie oben
beschrieben gewaschen. Beim Entleeren des Reaktors wurde
ein Schüttvolumen von 120 l kationisierten Espenschnitzeln
gewonnen.
Die Derivatisierung wurde in dem gleichen 500 l-Reaktor
durchgeführt, der in Beispiel 1 verwendet wurde. 150 l
Wasser und 75 kg Kokosnussschalengranulat mit einem
Teilchendurchmesser von 0,5 bis 1 mm wurden in den Reaktor
eingeführt. Die Temperatur des Reaktors wurde auf 40°C
angehoben und es wurde 1 kg trockenes Magnesiumsulfat
zugegeben. Der pH-Wert in dem Reaktor wurde durch Zugabe
konzentrierter Schwefelsäure auf einen Wert von 2,7
abgesenkt. Innerhalb von 10 Minuten wurden 10 l einer
37 -%-igen Formaldehydlösung hinzugegeben, und
anschliessend wurden die Reaktorinhaltsstoffe für 130
Minuten gerührt. Dann wurden 4,0 kg Harnstoff zugegeben
und das Rühren wurde für weitere 30 Minuten fortgeführt.
13 kg einer 50%-igen Natriumhydroxidlösung wurden in den
Reaktor zugegeben. Dann wurden 20,5 kg einer 50%-igen
Lösung des Hydrochlorids von Diethylaminoethylchlorid
(DEC) unter Rühren mit einer Geschwindigkeit von
150 ml/min. in den Reaktor gepumpt.
Nach der Zugabe des DEC wurde der Reaktor für weitere 30
Minuten gerührt und dann wurde das verbliebene Beizmittel
durch Zugabe von 500 ml konzentrierter Schwefelsäure
neutralisiert. Der pH-Wert stellte sich auf einen Wert von
5,2 ein. Der neutralisierte Ansatz wurde viermal mit
Wasser durch Dekantieren gewaschen. Das Volumen jedes
Dekantierschrittes wurde von 500 auf 150 l verringert.
Nach den Dekantierungen wurde der Reaktor mit Wasser auf
500 l aufgefüllt und auf eine Temperatur von 85°C erhitzt.
Der Ansatz wurde für 16 Stunden gerührt, wobei die
Temperatur auf 66°C absank. Letztendlich wurde der Ansatz
durch erneutes vierfaches Dekantieren mit Wasser wie oben
beschrieben gewaschen. Beim Entleeren des Reaktors wurde
ein Schüttvolumen von 140 l kationisiertem
Kokosnussschalengranulat gewonnen.
Ein Schüttvolumen von 110 l kationisierten
Espenschnitzeln, die gemäss Beispiel 1 hergestellt wurden,
wurden in einen Säulenreaktor mit einem Innendurchmesser
von 40 cm und einer Höhe von 120 cm eingeführt. In einem
Tank mit einem Gesamtvolumen von 150 l wurden 120 l einer
4%-igen Natriumhydroxidlösung hergestellt. Die
Tanktemperatur wurde auf 85°C eingestellt und die Lösung
wurde mit einer Flussgeschwindigkeit von 200 l/std. aus
dem Tank aufwärts durch den Reaktor gepumpt, wobei der
Ausfluss in den Tank zurücklief.
Nach 18-stündiger Zirkulation wurde der Tank abgelassen,
gespült und mit heissem Betriebswasser gefüllt. Der
Ausfluss aus dem Reaktor wurde in den Abfluss umgeleitet
und heisses Wasser wurde mit einer Flussgeschwindigkeit
von 400 l/std. hindurchgepumpt, bis der pH-Wert des
Reaktorausflusses unter einen pH-Wert von 10 fiel. In dem
Tank wurde eine Lösung von 1 kg Zitronensäure in 120 l
kaltem Betriebswasser hergestellt. Der Ausfluss aus dem
Reaktor wurde in den Tank zurückgeführt und die saure
Lösung wurde für 2 Stunden mit einer Flussgeschwindigkeit
von 400 l/std. durch den Reaktor zirkuliert. Der Tank
wurde abgelassen, gespült und mit kaltem Wasser gefüllt.
Der Ausfluss aus dem Reaktor wurde in den Abfluss
umgeleitet und kaltes Wasser wurde für weitere 2 Stunden
durch den Reaktor gepumpt.
In dem Tank wurde durch Verdünnung von Bierhefe, die nach
der Primärfermentation aus Bierfermentationstanks gewonnen
wurde, auf ein Volumen von 120 l eine Hefeaufschlämmung
hergestellt, die etwa 4 × 108 Zellen/ml enthielt. Die
Hefeaufschlämmung wurde in Abwärtsrichtung mit einer
Flussgeschwindigkeit von 400 l/std. durch den Reaktor
gepumpt, wobei der Ausfluss in den Tank zurücklief. Nach 1
Stunde wurde die Zirkulation unterbrochen und der Tank
abgelassen, gespült und es wurden erneut 120 l einer
4%-igen Natriumhydroxidlösung in dem Tank hergestellt.
Die Tanktemperatur wurde auf 85°C eingestellt und die
Lösung wurde unter Umgehung des Reaktors durch die
Leitungen zirkuliert. Nach 2 Stunden wurde die Zirkulation
beendet. Der Tank wurde abgelassen, gespült und mit kaltem
Wasser gefüllt, das für 1 Stunde durch die Leitungen
gepumpt wurde.
Jungbier aus der Primärfermentierung wurde kontinuierlich
über eine Scheibenstapelzentrifuge zur Entfernung der Hefe
daraus entnommen und in Abwärtsrichtung mit einer
Flussgeschwindigkeit von 55 l/std. durch den Reaktor
gepumpt. Der Durchlauf wurde für 12 Tage fortgesetzt,
während derer sowohl am Einlass als auch am Auslass
täglich Proben entnommen wurden. Der sichtbare Extrakt und
die Konzentration an Diacetyl und Carbonylen wurden durch
Analysen der Proben verfolgt. Die Abnahme des sichtbaren
Extrakts betrug 0,18 Einheiten auf der Plato-Skala, die
Abnahme der Konzentration an Diacetyl betrug 0,005 mg/l
und die Abnahme der Konzentration an Carbonylverbindungen
betrug 21 µg/l im Durchschnitt.
Am Ende des Experiments wurde eine Probe von 30 l zur
Verkostung und für Endanalysen abgenommen, wonach der
Reaktor entleert und von dem Träger zum Zweck der
Hefezählung eine Probe entnommen wurde. Die
durchschnittliche Hefemenge in dem Trägerbett betrug 250
Millionen Zellen/ml. Nach Angaben des Verkostungsgremiums
war der Geschmack der Endprobe gut und mit dem des
Handelsprodukts vergleichbar.
Das Sekundärfermentationsexperiment wurde in der gleichen
Vorrichtung und nach der gleichen Vorgehensweise wie in
Beispiel 3 durchgeführt. Ein Schüttvolumen von 110 l
kationisiertem Kokosnussschalengranulat, das gemäss
Beispiel 2 hergestellt wurde, wurden in einen
Säulenreaktor mit einem Innendurchmesser von 40 cm und
einer Höhe von 120 cm eingeführt. In einem Tank mit einem
Gesamtvolumen von 150 l wurden 120 l einer 4%-igen
Natriumhydroxidlösung hergestellt. Die Tanktemperatur
wurde auf 65°C eingestellt und die Lösung wurde mit einer
Flussgeschwindigkeit von 200 l/std. aus dem Tank aufwärts
durch den Reaktor gepumpt, wobei der Ausfluss in den Tank
zurücklief.
Nach 18-stündiger Zirkulation wurde der Tank abgelassen,
gespült und mit heissem Betriebswasser gefüllt. Der
Ausfluss aus dem Reaktor wurde in den Abfluss umgeleitet
und heisses Wasser wurde mit einer Flussgeschwindigkeit
von 400 l/std. hindurchgepumpt, bis der pH-Wert des
Reaktorausflusses unter einen pH-Wert von 10 fiel. In dem
Tank wurde eine Lösung von 1 kg Zitronensäure in 120 l
kaltem Betriebswasser hergestellt. Der Ausfluss aus dem
Reaktor wurde in den Tank zurückgeführt und die saure
Lösung wurde für 2 Stunden mit einer Flussgeschwindigkeit
von 400 l/std. durch den Reaktor zirkuliert. Der Tank
wurde abgelassen, gespült und mit kaltem Wasser gefüllt.
Der Ausfluss aus dem Reaktor wurde in den Abfluss
umgeleitet und kaltes Wasser wurde für weitere 2 Stunden
durch den Reaktor gepumpt.
In dem Tank wurde durch Verdünnung von Bierhefe, die nach
der Primärfermentation aus Bierfermentationstanks gewonnen
wurde, auf ein Volumen von 120 l eine Hefeaufschlämmung
hergestellt, die etwa 4 × 108 Zellen/ml enthielt. Die
Hefeaufschlämmung wurde in Abwärtsrichtung mit einer
Flussgeschwindigkeit von 400 l/std. durch den Reaktor
gepumpt, wobei der Ausfluss in den Tank zurücklief. Nach 1
Stunde wurde die Zirkulation unterbrochen und der Tank
abgelassen, gespült und es wurden erneut 120 l einer
4%-igen Natriumhydroxidlösung in dem Tank hergestellt.
Die Tanktemperatur wurde auf 85°C eingestellt und die
Lösung wurde unter Umgehung des Reaktors durch die
Leitungen zirkuliert. Nach 2 Stunden wurde die Zirkulation
beendet. Der Tank wurde abgelassen, gespült und mit kaltem
Wasser gefüllt, das für 1 Stunde durch die Leitungen
gepumpt wurde.
Jungbier aus der Primärfermentierung wurde kontinuierlich
über eine Scheibenstapelzentrifuge zur Entfernung der Hefe
daraus entnommen und in Abwärtsrichtung mit einer
Flussgeschwindigkeit von 55 l/std. durch den Reaktor
gepumpt. Der Durchlauf wurde für 20 Tage fortgesetzt,
während derer sowohl am Einlass als auch am Auslass
täglich Proben entnommen wurden. Der sichtbare Extrakt und
die Konzentrationen von Diacetyl und Carbonylen wurden
durch Analysen der Proben verfolgt. Die Abnahme des
sichtbaren Extrakts betrug 0,09 Einheiten auf der Plato-
Skala, die Abnahme der Konzentration an Diacetyl betrug
0,01 mg/l und die Abnahme der Konzentration an
Carbonylverbindungen betrug 51 µg/l im Durchschnitt.
Am Ende des Experiments wurde eine Probe von 30 l zur
Verkostung und für Endanalysen abgenommen, wonach der
Reaktor entleert und von dem Träger zum Zweck der
Hefezählung eine Probe entnommen wurde. Die
durchschnittliche Hefemenge in dem Trägerbett betrug 360
Millionen Zellen/ml. Nach Angaben des Verkostungsgremiums
war der Geschmack der Endprobe gut und mit dem des
Handelsprodukts vergleichbar.
Zu einem Schüttvolumen von 6 l kationisiertem
Kokosnussschalengranulat in Wasser, das gemäss Beispiel 2
hergestellt wurde, wurde zur Reinigung Ethanol auf eine
Ethanolkonzentration von 70% zugegeben. Die
Trägeraufschlämmung wurde in einen dampfsterilisierten
ummantelten Säulenreaktor mit einem Innendurchmesser von
160 mm und einem Gesamtvolumen von 8 l gegossen. Die
Ethanlösung wurde ersetzt, indem zunächst 20 l steriles
Wasser in den Reaktor gepumpt, und dann 15 l steriles
Wasser 3 Stunden lang zur Extraktion des rückständigen
Ethanols zirkuliert wurden. In einem 12 l-Fermenter wurde
durch Auflösen von 640 g kristalliner Glucose, 320 g
Hefeextrakt, 0,16 g Magnesiumsulfat und 0,16 g
Mangansulfat in Wasser und Verdünnen auf 8 l ein
Wachstumsmedium hergestellt. Der Fermenter und dessen
Inhaltsstoffe wurden bei einer Temperatur von 121°C
sterilisiert.
Ein Impfstoff aus Lactococcus lactis-Bakterien wurde für
40 Stunden bei einer Temperatur von 40°C auf M17-Medium
kultiviert. 400 ml der so hergestellten Bakterienkultur,
die etwa 109 Zellen/ml enthielt, wurde zu dem das
Wachstumsmedium enthaltenden Fermenter hinzugegeben. Das
beimpfte Wachstumsmedium wurde in Aufwärtsrichtung mit
einer Flussgeschwindigkeit von 1 l/min. durch den Reaktor
gepumpt. Der Ausfluss aus dem Reaktor wurde in den Abfluss
geleitet, bis ein Wechsel von Wasser zu Wachstumsmedium
auftrat. Der Ausfluss wurde dann in den Fermenter
zurückgeleitet und die Zirkulation wurde bei einer
Temperatur von 40°C in sowohl dem Reaktor als auch dem
Fermenter fortgeführt, wodurch die Bakterien immobilisiert
wurden. Nach 1 Stunde wurde die Flussrichtung in dem
Reaktor auf Abwärtsfluss umgestellt, wodurch ein fest
gepacktes Bett hergestellt wurde.
4 Stunden nach Inokulierung des Fermenters wurde die
Temperatur auf 50°C erhöht, wodurch das Wachstum auf nur
den Reaktor beschränkt wurde. Die während der Zirkulation
gebildete Milchsäure wurde kontinuierlich durch Zugabe
einer 16%-igen Natriumhydroxidlösung, wodurch der pH-Wert
in dem Fermenter auf pH 6,5 gehalten wurde, neutralisiert.
Das Wachstum der Bakterien wurde durch Messung des
Verbrauchs an Natriumhydroxid verfolgt. Nach 4-stündiger
Zirkulation trat ein steiler Anstieg des Verbrauchs auf,
der anzeigte, dass die Bakterien in eine exponentielle
Wachstumsphase eingetreten waren. Die Zirkulation wurde
beendet und das Wachstumsmedium in dem Reaktor wurde durch
aufwärtiges Einpumpen von sterilem Wasser ersetzt.
In einem 12 l-Fermenter wurde durch Auflösen von 960 g
reiner kristalliner Glucose in Wasser und Verdünnung auf
8 l ein Herstellungsmedium hergestellt. Der Fermenter und
seine Inhaltsstoffe wurden bei einer Temperatur von 121°C
sterilisiert. Das sterilisierte Medium wurde in
Aufwärtsrichtung durch den Reaktor mit einer
Flussgeschwindigkeit von 1 l/min. in den Abfluss gepumpt,
bis der Ausfluss aus dem Reaktor von Wasser auf
Produktionsmedium umschlug. Die Fliessrichtung in dem
Reaktor wurde auf Abwärtsfluss umgestellt und der Ausfluss
wurde in den Fermenter zurückgeführt. Die Lösung wurde bei
einer Fliessgeschwindigkeit von 1 l/std. bei einer
Temperatur von 40°C in sowohl dem Reaktor als auch dem
Fermenter zirkuliert. Die gebildete Milchsäure wurde
kontinuierlich durch Zugabe einer 16%-igen
Natriumhydroxidlösung, wodurch der pH-Wert in dem
Fermenter auf 6,5 gehalten wurde, neutralisiert.
Die Bildung von Milchsäure wurde durch Messung des
Verbrauchs an Natriumhydroxid beobachtet. Zu Beginn war
die Produktivität an Milchsäure 3,5 g/l/std. Nach 72
Stunden war die Produktivität auf unter 1 g/l/std.
abgefallen und die Zirkulation wurde unterbrochen. Das
Produkt in dem Reaktor wurde durch Einpumpen von Wasser in
Aufwärtsflussrichtung und Auffangen des Reaktorausflusses
entnommen und mit den Inhaltsstoffen des Fermenters
vereinigt.
Claims (15)
1. Bioreaktor mit Mikroorganismen, dadurch
gekennzeichnet, dass die Mikroorganismen auf Teilchen
immobilisiert sind, die aus einem natürlichen
Lignocellulosematerial, das so derivatisiert ist,
dass es Anionenaustauscheigenschaften aufweist,
zusammengesetzt sind.
2. Bioreaktor gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
dass die Mikroorganismen Milchsäurebakterien sind.
3. Bioreaktor gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
dass die Mikroorganismen Hefezellen sind.
4. Bioreaktor gemäss einem oder mehreren der
vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet,
dass das natürliche Lignocellulosematerial
Kokosnussschalen sind.
5. Bioreaktor gemäss einem oder mehreren der
vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet,
dass das natürliche Lignocellulosematerial Holz ist.
6. Bioreaktor gemäss einem oder mehreren der
vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet,
dass das natürliche Lignocellulosematerial mit
Diethylaminoethylchlorid derivatisiert ist.
7. Verwendung eines Bioreaktors gemäss einem oder
mehreren der Ansprüche 2 und 4 bis 6 zur Herstellung
von Produkten, die aus dem Metabolismus von
Milchsäurebakterien stammen, und/oder zur
Modifizierung der Zusammensetzung des Zustroms.
8. Verwendung eines Bioreaktors gemäss Anspruch 7 zur
Herstellung von Milchsäure.
9. Verwendung eines Bioreaktors gemäss Anspruch 7 zur
Herstellung von Milchsäure in dem Zustrom, der aus
einem Nahrungsmittel- oder einem Futtermittelprodukt
besteht.
10. Verwendung eines Bioreaktors gemäss Anspruch 7 oder 9
zur Ansäuerung von Getränken.
11. Verwendung eines Bioreaktors gemäss Ansprüchen 3 bis
6 zur Herstellung von alkoholischen Getränken.
12. Verwendung eines Bioreaktors gemäss Anspruch 11 zur
Herstellung von Bier oder Apfelwein (Cider).
13. Verwendung eines Bioreaktors gemäss Anspruch 11 zur
Herstellung von Wein oder Schaumwein.
14. Verwendung eines Bioreaktors gemäss Anspruch 12 zur
Sekundärfermentation von Bier.
15. Verwendung eines Bioreaktors gemäss einem der
Ansprüche 2 bis 6 zur Herstellung von im wesentlichen
alkoholfreiem Bier.
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19848623A DE19848623A1 (de) | 1998-10-21 | 1998-10-21 | Preiswerte Immobilisierungsmatrizen aus natürlichen Materialien |
| AU10415/00A AU1041500A (en) | 1998-10-21 | 1999-10-20 | Immobilisation matrices consisting of lignocellulose material and use thereof |
| PCT/EP1999/007970 WO2000023561A2 (de) | 1998-10-21 | 1999-10-20 | Immobilisierungsmatrizen aus lignocellulosematerial und deren verwendung |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19848623A DE19848623A1 (de) | 1998-10-21 | 1998-10-21 | Preiswerte Immobilisierungsmatrizen aus natürlichen Materialien |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE19848623A1 true DE19848623A1 (de) | 2000-04-27 |
Family
ID=7885236
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE19848623A Withdrawn DE19848623A1 (de) | 1998-10-21 | 1998-10-21 | Preiswerte Immobilisierungsmatrizen aus natürlichen Materialien |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| AU (1) | AU1041500A (de) |
| DE (1) | DE19848623A1 (de) |
| WO (1) | WO2000023561A2 (de) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002068578A1 (en) * | 2001-02-23 | 2002-09-06 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Fibrous inert support for fermentation of clear beer and wine |
| EP2141222A1 (de) * | 2008-06-30 | 2010-01-06 | InBev S.A. | Verbessertes Bierbrauverfahren |
| AU2015201673B2 (en) * | 2008-06-30 | 2016-09-15 | Inbev S.A. | An improved method of brewing beer |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1417296B2 (de) | 2001-07-26 | 2016-08-24 | DuPont Nutrition Biosciences ApS | Verfahren zur verbesserung des körpers und geschmacks von malzgetränken |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0361165A1 (de) * | 1988-09-27 | 1990-04-04 | Cultor Ltd. | Immobilisierte Hefe verwendende Methode zur Herstellung von Ethanol und alkoholischen Getränken |
| EP0424794A2 (de) * | 1989-10-27 | 1991-05-02 | Cultor Ltd. | Verfahren zur Herstellung eines alkoholfreien Malzgetränkes |
| DE4111879A1 (de) * | 1991-04-12 | 1992-10-15 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Verfahren zur herstellung von alkoholfreiem bier und dafuer geeignete vorrichtung |
| DE4137474A1 (de) * | 1991-11-14 | 1993-05-19 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Verfahren zur kontinuierlichen schnellreifung von bier |
| DE4239612A1 (de) * | 1992-11-25 | 1994-05-26 | Cultor Oy | Bioreaktor mit immobilisierten, Milchsäure-produzierenden Bakterien und dessen Verwendung in Fermentationsverfahren |
| WO1998049264A1 (en) * | 1997-04-29 | 1998-11-05 | Oy Panimolaboratorio - Bryggerilaboratorium Ab | Method for the maturation of beer |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB896439A (en) * | 1959-12-28 | 1962-05-16 | Glaxo Lab Ltd | Cellulose derivatives useful as anion-exchange materials and their application |
| BE890811A (fr) * | 1981-10-21 | 1982-02-15 | Wallone Region | Procede d'immobilisation de cellules sur un support solide |
| DE4239605A1 (de) * | 1992-11-25 | 1994-05-26 | Cultor Oy | Verfahren zur Herstellung von alkoholfreiem Bier und Vorrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens |
-
1998
- 1998-10-21 DE DE19848623A patent/DE19848623A1/de not_active Withdrawn
-
1999
- 1999-10-20 WO PCT/EP1999/007970 patent/WO2000023561A2/de not_active Ceased
- 1999-10-20 AU AU10415/00A patent/AU1041500A/en not_active Abandoned
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0361165A1 (de) * | 1988-09-27 | 1990-04-04 | Cultor Ltd. | Immobilisierte Hefe verwendende Methode zur Herstellung von Ethanol und alkoholischen Getränken |
| EP0424794A2 (de) * | 1989-10-27 | 1991-05-02 | Cultor Ltd. | Verfahren zur Herstellung eines alkoholfreien Malzgetränkes |
| DE4111879A1 (de) * | 1991-04-12 | 1992-10-15 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Verfahren zur herstellung von alkoholfreiem bier und dafuer geeignete vorrichtung |
| DE4137474A1 (de) * | 1991-11-14 | 1993-05-19 | Forschungszentrum Juelich Gmbh | Verfahren zur kontinuierlichen schnellreifung von bier |
| DE4239612A1 (de) * | 1992-11-25 | 1994-05-26 | Cultor Oy | Bioreaktor mit immobilisierten, Milchsäure-produzierenden Bakterien und dessen Verwendung in Fermentationsverfahren |
| WO1998049264A1 (en) * | 1997-04-29 | 1998-11-05 | Oy Panimolaboratorio - Bryggerilaboratorium Ab | Method for the maturation of beer |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 07039892 A * |
| Chemical Abstracts: Ref. 127:14896 zu JP 09100187 A2 * |
| JP Patents Abstracts of Japan: 2-222681 A.,C-780,Nov. 21,1990,Vol.14,No.531 * |
| Ref. 89:72500 zu JP 53044685 A2 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002068578A1 (en) * | 2001-02-23 | 2002-09-06 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Fibrous inert support for fermentation of clear beer and wine |
| EP2141222A1 (de) * | 2008-06-30 | 2010-01-06 | InBev S.A. | Verbessertes Bierbrauverfahren |
| WO2010000688A1 (en) * | 2008-06-30 | 2010-01-07 | Inbev S.A. | An improved method of brewing beer |
| AU2015201673B2 (en) * | 2008-06-30 | 2016-09-15 | Inbev S.A. | An improved method of brewing beer |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU1041500A (en) | 2000-05-08 |
| WO2000023561A3 (de) | 2000-09-28 |
| WO2000023561A2 (de) | 2000-04-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sawant et al. | Fungal citric acid production using waste materials: a mini-review | |
| Saeed et al. | Loofa (Luffa cylindrica) sponge: review of development of the biomatrix as a tool for biotechnological applications | |
| DE60210451T2 (de) | Kombiniert kontinuierlicher / stapelweiser vergärungsprozess | |
| Beech | Cider making and cider research: a review | |
| JPH02276583A (ja) | エタノール生成物の製造方法 | |
| DE4239612A1 (de) | Bioreaktor mit immobilisierten, Milchsäure-produzierenden Bakterien und dessen Verwendung in Fermentationsverfahren | |
| DE2216887A1 (de) | Verfahren zum Einblasen von Gas in eine Suspension von Mikroorganismen | |
| CN107418807A (zh) | 一种有机葡萄果酒的生产方法 | |
| DE69016920T2 (de) | Verfahren zur Herstellung eines alkoholfreien Malzgetränkes. | |
| CN111100825B (zh) | 一株芽孢杆菌及其在工业中的应用 | |
| EP0006671B1 (de) | Verfahren zur Erhaltung lebender Mikroorganismen | |
| EP0041610B1 (de) | Coimmobilisate aus gärfähigen Hefen mit angekoppelten Enzymen sowie ihre Herstellung und Verwendung | |
| CN104830626A (zh) | 一种野樱桃果酒的降酸方法 | |
| WO2000023561A2 (de) | Immobilisierungsmatrizen aus lignocellulosematerial und deren verwendung | |
| CN107384673A (zh) | 一种不添加二氧化硫有机葡萄果酒的生产方法 | |
| Kumar et al. | Application of nano/micro-tubular cellulose of Indian origin for alcoholic fermentation and cold pasteurization of contaminated water | |
| Nogueira et al. | Apple cider fermentation | |
| CN103990441B (zh) | 一种基于改性细菌纤维素的重金属离子吸附剂制备方法 | |
| DE69316564T2 (de) | Verfahren und Vorrichtung zur Herstellung eines alkoholfreien Biers | |
| Roushdi et al. | Factors improving the steeping process of corn grains. Part I. Effect of steeping process, artificial drying, scratching and storage | |
| US5612072A (en) | Process for the production of non-alcoholic or low alcohol malt beverage | |
| Letaief | Wine making process | |
| CN102051355B (zh) | 一种固定化酸性脲酶酶膜的制备方法及应用 | |
| Kyzas et al. | Oenological Additives | |
| US612746A (en) | Albert munsciie |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| OM8 | Search report available as to paragraph 43 lit. 1 sentence 1 patent law | ||
| 8139 | Disposal/non-payment of the annual fee |