DE19807063A1 - Gepackte Kapillaren, insbesondere für die Enantiomerentrennung - Google Patents

Gepackte Kapillaren, insbesondere für die Enantiomerentrennung

Info

Publication number
DE19807063A1
DE19807063A1 DE19807063A DE19807063A DE19807063A1 DE 19807063 A1 DE19807063 A1 DE 19807063A1 DE 19807063 A DE19807063 A DE 19807063A DE 19807063 A DE19807063 A DE 19807063A DE 19807063 A1 DE19807063 A1 DE 19807063A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
capillary
sorbent
separation
packed
chiral
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE19807063A
Other languages
English (en)
Inventor
Gottfried Blaschke
Marco Girod
Michael Schulte
Bezham Chankvetadze
Kerstin Krause
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Merck Patent GmbH
Original Assignee
Merck Patent GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Patent GmbH filed Critical Merck Patent GmbH
Priority to DE19807063A priority Critical patent/DE19807063A1/de
Priority to PCT/EP1999/000844 priority patent/WO1999042192A1/de
Priority to EP99914449A priority patent/EP1054716A1/de
Priority to JP2000532197A priority patent/JP2002503823A/ja
Publication of DE19807063A1 publication Critical patent/DE19807063A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/60—Construction of the column
    • G01N30/6052—Construction of the column body
    • G01N30/6073—Construction of the column body in open tubular form
    • G01N30/6078—Capillaries
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
    • B01D15/3833—Chiral chromatography
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B57/00—Separation of optically-active compounds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/34—Size selective separation, e.g. size exclusion chromatography, gel filtration, permeation
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
    • B01D15/3861—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36 using an external stimulus
    • B01D15/3885—Using electrical or magnetic means
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/50—Conditioning of the sorbent material or stationary liquid
    • G01N30/56—Packing methods or coating methods
    • G01N2030/562—Packing methods or coating methods packing
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/60—Construction of the column
    • G01N30/6052—Construction of the column body

Description

Es wurde ein vereinfachtes Verfahren zur Herstellung von Kapillaren gefunden, bei denen nur ein unbedeutender kurzer Teil des Sorbensbettes erhitzt werden muß, und dennoch ein stabiles Sorbensbett erzeugt wird. Dieses Verfahren ist insbesondere für die Anwendung bei chiralen Trenn­ materialien geeignet. Die erfindungsgemäß hergestellten Trennkapillaren eignen sich besonders gut für die HPLC. Somit wird eine stabile mit Sorbens gepackte miniaturisierte Trennkapillare bereitgestellt.
Gegenstand der Erfindung sind mit partikulären Sorbentien gepackte Kapil­ laren, die über die gesamte Länge einen konstanten Innendurchmesser aufweisen, wobei das Sorbensbett durch verfestigte Bereiche begrenzt ist, die durch Hitzebehandlung erzeugt werden. Gegenstand der Erfindung sind insbesondere solche Kapillaren, die mit einem chiralen Sorbens ge­ füllt sind.
Gegenstand der Erfindung ist auch ein Verfahren zur Herstellung erfindungsgemäßer mit partikulären Sorbentien gepackten Kapillare umfassend folgende Arbeitsschritte:
  • a) Verschließen eines Endes einer handelsüblichen fused-silica Kapillare mit einer Fritte;
  • b) Befestigung eines Reservoirs am anderen Ende besagter Kapillare;
  • c) Bereitstellen einer homogenen Suspension eines partikulären Sorbens in einem Lösungsmittel;
  • d) Einfüllen der besagten Suspension in das Reservoir;
  • e) Füllen der Kapillare mit Sorbens aus dem Reservoir durch Druckfiltration;
  • f) Austausch des Lösungsmittels gegen Wasser;
  • g) Erhitzen schmaler mit Sorbens gefüllter Zonen der Kapillare an beiden Enden des Sorbensbettes, wobei durch Hitzebehandlung des Sorbens eine Fritte entsteht.
Gegenstand der Erfindung ist schließlich die Verwendung von erfindungs­ gemäßen mit partikulären Sorbentien gepackte Kapillare für die Trennung mindestens zweier Substanzen, insbesondere mittels Flüssigkeitschroma­ tographie.
Die Abb. 1 bis 6 stellen Elutionsdiagramme von Trennungen ver­ schiedener Racemate dar; experimentelle Einzelheiten sind in den Anwen­ dungsbeispielen A bis F beschrieben.
Die erfindungsgemäß verwendeten fused-silica Kapillaren sind bekannt; ihr Innendurchmesser beträgt 5 µm bis ca. 500 µm, ihre Länge 3 cm bis ca. 1 m. Weitere Einzelheiten sind dem Fachmann bekannt und beispielsweise auch in den genannten Dokumenten zum Stand der Technik beschrieben. Bevorzugt werden Kapillaren mit einem Innendurchmesser zwischen 50 und 150 µm verwendet.
Erfindungsgemäß geeignete partikuläre Sorbentien bestehen bevorzugter­ weise aus Kieselgel (SiO2). Kieselgel kann ohne weiter Veränderung als Sorbens verwendet werden. Um die Variationsmöglichkeiten für die Tren­ nung zu vergrößern, ist es aber üblich, den Basisträger (SiO2) zu derivati­ sieren und Separationseffektoren einzuführen. Derartige Separations­ effektoren bewirken die Trennung. Entsprechend dem Trennprinzip (z. B. Ionenaustausch- oder reversed phase Chromatographie oder Enantio­ merentrennung) werden in dem Fachmann bekannter Weise geeignete Gruppierungen (z. B. für die Ionenaustauschchromatographie SO3H- oder COOH-Gruppen, für die reversed-phase Chromatographie z. B. C18-Alkyl- oder Phenylgruppen und für Enantiomerentrennungen chirale Gruppen eingeführt. Die erfindungsgemäß verwendeten partikulären Sorbentien können porös oder unporös sein; ihre Partikelgröße beträgt bevorzugter­ weise 2 bis 10 µm (mittlere Partikelgröße; Median); kleinere Sorbensparti­ kel können grundsätzlich ebenfalls verwandt werden. In Kapillaren mit größerem Innendurchmesser (z. B. 300 µm) können auch größere Sorbens­ partikel verwandt werden (z. B. 15 µm). Die Partikelgröße hängt also in dem Fachmann einsichtlicherer Weise mit dem Innendurchmesser der ver­ wendeten Kapillare zusammen.
Chirale Trennmaterialien für die Trennung von Enantiomeren sind in großer Anzahl im Stand der Technik bekannt. Diese chiralen Trenn­ materialien bestehen entweder aus der chiralen Verbindung selbst (zum Beispiel Cellulosetriacetat) oder aber ein chiraler Separationseffektor ist auf einen Basisträger aufgezogen oder chemisch an einen Basisträger gebunden. Dabei können sowohl Kieselgele als auch organische Poly­ mere als Basispolymer dienen; Trennmaterialien mit Kieselgel (SiO2) als Basisträger sind erfindungsgemäß bevorzugt. Außerdem ist es möglich, chirale Separationseffektoren, die mit einer stationären Phase in Wech­ selwirkung treten, dem Elutionsmittel zuzusetzen (dynamische Belegung).
Chirale Separationseffektoren sind in großer Zahl bekannt; die wichtigsten Gruppen bekannter chiraler Separationseffektoren sind:
  • a) Aminosäuren und ihre Derivate, z. B. L-Phenylalanin, oder D-Phenyl­ alanin, Ester oder Amide von Aminosäuren oder acylierte Aminosäuren oder Oligopeptide;
  • b) natürliche und synthetische Polymere mit einer Asymmetrie oder Dis­ symmetrie in der Hauptkette; dazu gehören Proteine (z. B. saures α1- Glycoprotein, Rinderserumalbumin, Cellulase; siehe J. Chrom. 264, Seiten 63-68 (1983), J. Chrom. 269, Seiten 71-80 (1983), WO 91/12 221), Cellulose und Cellulosederivate, sowie andere Polysaccharide und deren Derivate (z. B. Cellulosetribenzoat, Cellulosetribenzylether, Cellulose-trisphenylcarbamat, Cellulose-tris-3-chlorobenzoat, Amylose­ tris-(3,5-dimethylphenylcarbamat), Cellulose-tris-(3,5-dimethylbenzoat), Cellulose-tris-(3,5-dimethylphenylcarbamat); siehe EP 0 147 804, EP 0 155 637, EP 0 718 625);
  • c) Cyclodextrine und Cyclodextrinderivate (z. B. J. High Resol.Chrom. & Chromat. Comm 3 Seiten 147-148 (1984); EP 0 407 412; EP 0 445 604);
  • d) Polymere mit Asymmetriezentren in der Seitenkette (z. B. EP 0249 078; EP 0 282 770; EP 0 448 823);
  • e) Polymere, die um chirale Strukturen polymerisiert werden ("inprint"- Polymere (z. B. J. Chromat. 707, Seiten 199-203 (1995); J. Chromat. 694, Seiten 3-13 (1995)).
Die Trennkapillare wird bevorzugterweise nach dem bekannten Suspen­ sionsverfahren gepackt. Dazu wird das Sorbens in einem Lösungsmittel suspendiert. Die Suspension wird gegebenenfalls homogenisiert, z. B. durch Behandlung mit Ultraschall, und in ein Reservoir, das mit der zu füllenden Kapillare verbunden ist, gefüllt. Die Kapillare ist am anderen Ende mit einer Fritte geschlossen. Anschließend wird Lösungsmittel durch das Reservoir in die Kapillare gepumpt und somit das Sorbensbett in der Kapillare erzeugt. Als Reservoir kann beispielsweise eine in der Chroma­ tographie übliche Vorsäule dienen. Für die Säulenpackung geeignete Lösungsmittel und Lösungsmittelgemische, sowie die weiteren Parameter (z. B. Porendurchmesser der Fritte, Druck und Fördergeschwindigkeit beim Packen der Säule, Wahl der Pumpe) sind dem Fachmann bekannt und in Handbüchern beschrieben.
Für das Packen der Kapillare werden im allgemeinen organische Lösungsmittel benutzt; die Hitzebehandlung zur Erzeugung der Fritten erfolgt bevorzugterweise in wäßriger Umgebung. Deswegen wird das für das Packen der Säule verwendete Lösungsmittel gegen Wasser ausgetauscht, indem man, gegebenenfalls unter Zwischenschaltung eines mit Wasser gut mischbaren organischen Lösungsmittels, Wasser durch die gepackte Säule pumpt. Diese Vorgehensweise ist dem Fachmann vertraut.
Die Bedingungen für die Hitzebehandlung, die zur Erzeugung der Fritten führt, sind grundsätzlich bekannt: Besonders gut geeignet ist eine Draht­ schlaufe aus Ni-Cr-Draht; der Strom wird so eingestellt, daß (in Abhängig­ keit vom Durchmesser der Kapillare) für ca. 30 Sekunden bis ca. 2 Minuten die für die Fritte vorgesehene Stelle der gepackten Kapillare erhitzt wird. Dabei entstehen im Innern der Kapillare typischerweise Temperaturen zwischen 100 und 400°C.
Das Verfahren für die Herstellung von fused-silica Kapillaren, Innendurch­ messer 75-100 µm, die mit chiralen chromatographischen Sorbentien ge­ füllt sind, wird in den Beispielen im Detail beschrieben. Diese Kapillaren erlauben die "nano-scale" Enantiomerentrennung in normal-phase und reversed-phase HPLC, als auch in der Kapillarelektrochromatographie.
Auch ohne weitere Ausführungen wird davon ausgegangen, daß ein Fach­ mann die obige Beschreibung im weitesten Umfang nutzen kann. Die be­ vorzugten Ausführungsformen und Beispiele sind deswegen lediglich als beschreibende, keineswegs als in irgendeiner Weise limitierende Offen­ barung aufzufassen.
Die vollständige Offenbarung aller vor- und nachstehend aufgeführten Anmeldungen, Patente und Veröffentlichungen sind durch Bezugnahme in diese Anmeldung eingeführt.
Beispiele Beispiel 1 Herstellung einer mit einem chiralen Sorbens (chirales Polymethacrylamidderivat auf Kieselgel) gepackten Trennkapillare
Eine 40 cm lange kommerziell erhältliche fused-silica Kapillare mit einem Innendurchmesser von 100 µm wird auf der einen Seite mit einer kommer­ ziell erhältlichen metallischen HPLC-Fritte verbunden. Die andere Seite wird mit einer HPLC-Vorsäule (4.6×50 mm) verschraubt, die als Reservoir für die Suspension des Packungsmaterials dient. 50 mg des chiralen Sorbens (kovalent an Silicagel gebundenes chirales Polyacrylamid; Parti­ keldurchmesser 5 µm; ChiraSpher®, Fa. Merck KGaA; Darmstadt, DE) werden in einem n-Hexan/2-Propanol-Gemisch (9/1 (V/V)) suspendiert und 15 Minuten im Ultraschallbad behandelt. Die Suspension wird in die Vor­ säule gefüllt und der Druck langsam auf 400-600 bar gesteigert. Nach Er­ reichen des gewünschten Drucks wird für weitere 30 Minuten gepumpt, anschließend wird die Pumpe abgestellt und der Druck langsam abgebaut. Danach wird für mindestens 60 Minuten Wasser durch die Kapillare ge­ pumpt. Anschließend werden die beiden Fritten hergestellt: Dazu erhitzt man eine möglichst kleine Zone des chiralen Sorbens mit einer Öse aus Ni-Cr-Draht für 40 Sekunden. Anschließend kann die Kapillare mit dem organischen oder wäßrigen Fließmittel, das in der chiralen Trennung zum Einsatz kommen soll, umgespült werden. Bei Verwendung eines leitfähigen Fließmittels können elektrochromatographische Trennungen durchgeführt werden.
Beispiel 2 Herstellung einer mit einem chiralen Sorbens (Cellulose­ derivat auf Kieselgel) gepackten Trennkapillare
Entsprechend wie in Beispiel 1 beschrieben wird eine Kapillare mit einem chiralen Sorbens gefüllt, das Kieselgel als Basisträger und Cellulose-tris- (3,5-dimethylphenylcarbamat) als Separationseffektor aufweist. Dazu wird das Handelsprodukt CHIRACEL® OD (Fa. DAICEL, JP) verwendet.
Anwendungsbeispiel A Enantiomerentrennung von Lopirazepam
Die nach der obigen Vorschrift (Beispiel 1) gepackte Trennkapillare wurde in ein kommerzielles Kapillarelektrophoresegerät (HP 3D, Hewlett-Packard, Waldbronn, Deutschland) eingebaut und etwa 30 Minuten mit einem n- Hexan/1,4-Dioxan/2-Propanol-Gemisch (60/39/1, v/v) umgespült. Danach wurde das chirale Arzneimittel Lopirazepam (Racemat; 1 mg/ml) mit einem Druck von 12 bar für 6 Sekunden injiziert, und die nano-chromatographi­ sche Enantiomerentrennung mit relativ geringem Druck (12 bar) durchge­ führt. Die Basislinientrennung der Enantiomeren wurde erreicht:
Das Elutionsdiagramm ist in Abb. 1 dargestellt (UV-Absorption bei λ = 254 nm),
Anwendungsbeispiel B Enantiomerentrennung von Bendroflumethiazid
Die nach der obigen Vorschrift (Beispiel 1) gepackte Trennkapillare wurde in ein kommerzielles Kapillarelektrophoresegerät (HP 3D Hewlett-Packard, Waldbronn, Deutschland) eingebaut und etwa 30 Minuten mit einem Methanol/Wasser-Gemisch 60/40, v/v) umgespült. Danach wurde das chirale diuretische Arzneimittel Bendroflumethiazid (Racemat; 3 mg/ml) mit einem Druck von 12 bar für 6 Sekunden injiziert und die nano­ chromatographische Enantiomerentrennung mit relativ geringem Druck (12 bar/2.5 bar Gegendruck) durchgeführt. Die Basislinientrennung der Enantiomeren wurde erreicht:
Das Elutionsdiagramm ist in Abb. 2 dargestellt (UV-Absorption bei λ = 214 nm).
Anwendungsbeispiel C Enantiomerentrennung von Bendroflumethiazid
Die nach der obigen Vorschrift (Beispiel 1) gepackte Trennkapillare wurde in ein kommerzielles Kapillarelektrophoresegerät (HP 3D Hewlett-Packard, Waldbronn, Deutschland) eingebaut und etwa 30 Minuten mit einem Methanol/50 mM NaH2PO4-Gemisch (60/40, v/v) umgespült. Danach wurde das chirale diuretische Arzneimittel Bendroflumethiazid (Racemat; 3 mg/ml) mit einem Druck von 12 bar für 6 Sekunden injiziert, und die nano-chroma­ tographische Enantiomerentrennung mit relativ geringem Druck (12 bar/4 bar Gegendruck) durchgeführt.
Die Basislinientrennung der Enantiomeren wurde erreicht:
Das Elutionsdiagramm ist in Abb. 3 dargestellt (UV-Absorption bei λ = 214 nm).
Anwendungsbeispiel D Enantiomerentrennung von Bendroflumethiazid
Die nach der obigen Vorschrift (Beispiel 1) gepackte Trennkapillare wurde in ein kommerzielles Kapillarelektrophoresegerät (HP 3D, Hewlett-Packard, Waldbronn, Deutschland) eingebaut und etwa 30 Minuten mit einem Methanol/50 mM NaH2PO4- Gemisch (60/40, v/v) umgespült. Danach wurde das chirale diuretische Arzneimittel Bendroflumethiazid (Racemat; 3 mg/ml) mit einem Druck von 12 bar für 6 Sekunden injiziert, und die kombi­ nierte nano-chromatographische/ elektrochromatographische Enantio­ merentrennung mit relativ geringem Druck (12 bar/4 bar Gegendruck), und einer angelegten Spannung von 10 kV durchgeführt. Die Basislinien­ trennung der Enantiomeren wurde erreicht:
Das Elutionsdiagramm ist in Abb. 4 dargestellt (UV-Absorption bei λ = 214 nm).
Anwendungsbeispiel E Enantiomerentrennung von Stibenoxid
Nach der Vorschrift aus Beispiel 2 wurde eine Kapillare mit OD-Material gefüllt und in ein kommerzielles Kapillarelektrophoresegerät (HP 3D, Hewlett-Packard, Waldbronn, Deutschland) eingebaut und etwa 30 Minuten mit einem n-Hexan/i-Propanol-Gemisch umgespült. Danach wurde Stilbenoxid (Racemat; 1 mg/ml) mit einem Druck von 10 bar für 30 Sekunden injiziert und die nano-chromatographische Trennung bei einem Druck von 10 bar durchgeführt.
Es wurde eine Basislinientrennung der beiden Enantiomeren erreicht:
Das Elutionsdiagramm ist in Abb. 5 dargestellt (UV-Absorption bei λ = 214 nm).
Anwendungsbeispiel F Enantiomerentrennung von Glutethimid
Nach der Vorschrift aus Beispiel 2 wurde eine Kapillare mit OD-Material gefüllt und in ein kommerzielles Kapillarelektrophoresegerät (HP 3D, Hewlett-Packard, Waldbronn, Deutschland) eingebaut und etwa 30 Minu­ ten mit Methanol gespült. Danach wurde Glutethimid (Racemat; 1 mg/ml) mit einem Druck von 10 bar für 30 Sekunden injiziert und die nano­ chromatographische Trennung bei einem Druck von 10 bar durchgeführt. Es wurde fast eine Basislinientrennung der beiden Enantiomeren erreicht:
Das Elutionsdiagramm ist in Abb. 6 dargestellt (UV-Absorption bei λ = 214 nm).
Die besonderen Eigenschaften dieser Kapillaren umfassen folgendes:
  • 1) Die Enantiomerentrennung kann in mindestens drei unterschiedlichen Modi (normal-phase HPLC, reversed-phase HPLC und Elektrochromato­ graphie) in ein und derselben Kapillare durchgeführt werden. Höchstwahr­ scheinlich ist die gleiche Kapillare auch für die Enantiomerentrennung in der SFC (supercritical fluid chromatography) geeignet.
  • 2) Es ist möglich, hocheffiziente HPLC-Trennungen bei sehr geringem Druck durchzuführen. Das erlaubt die Nutzung von kommerziell erhältlichen Kapillarelektrophorese-Systemen (z. B. HP 3D, Hewlett- Packard, Waldbronn, Deutschland oder MDQ, Beckmann Instruments, Fullerton, CA, USA) zur Durchführung von hocheffizienten chiralen HPLC- Trennungen.
  • 3) Die Herstellung der Fritten in der Trennkapillare erlaubt "on­ capillary"-Detektion, wodurch zusätzliche Übergänge von der Trennkapillare zum Detektor nicht notwendig sind. Gleichzeitig besteht keine Notwendigkeit mehr für spezielle nano-Injektoren und nano- Detektorzellen, wie sie für die Anwendung von konventionellen narrow- und micro-bore HPLC-Kapillaren erforderlich sind.
  • 4) Die Herstellung der Kapillaren wird insbesondere dadurch vereinfacht, daß die chiralen Adsorbentien einmalig mit einem Druck von 400-600 bar gepackt werden, und dann beide Fritten (inlet und outlet) in der mit chiralem Adsorbens gefüllten Zone durch kurzfristige lokale Erhitzung hergestellt werden. Dadurch entfällt das mehrmalige Füllen und Entleeren der Kapillare.

Claims (6)

1. Mit partikulären Sorbentien gepackte Kapillare, die über die gesamte Länge einen konstanten Innendurchmesser aufweist, dadurch gekennzeichnet, daß das Sorbensbett durch verfestigte Bereiche begrenzt ist, die durch Hitzebehandlung erzeugt werden.
2. Gepackte Kapillare nach Anspruch 1 enthaltend ein chirales Sorbens.
3. Verfahren zur Herstellung einer mit partikulären Sorbentien gepackten Kapillare umfassend folgende Arbeitsschritte:
  • a) Verschließen eines Endes einer handelsüblichen fused-silica Kapillare mit einer Fritte;
  • b) Befestigung eines Reservoirs am anderen Ende besagter Kapillare;
  • c) Bereitstellen einer homogenen Suspension eines partikulären Sorbens in einem Lösungsmittel;
  • d) Einfüllen der besagten Suspension in das Reservoir;
  • e) Füllen der Kapillare mit Sorbens aus dem Reservoir durch Druckfiltration;
  • f) Austausch des Lösungsmittels gegen Wasser;
  • g) Erhitzen schmaler mit Sorbens gefüllter Zonen der Kapillare an beiden Enden des Sorbensbettes, wobei durch Hitzebehandlung des Sorbens eine Fritte entsteht.
4. Verwendung einer mit partikulären Sorbentien gepackte Kapillare nach Anspruch 1 oder 2 für die Trennung mindestens zweier Substanzen.
5. Verwendung nach Anspruch 4, wobei die Trennung durch Flüssig­ keitschromatographie erfolgt.
6. Verwendung nach Anspruch 4, wobei die Trennung durch Elektro­ chromatographie erfolgt.
DE19807063A 1998-02-20 1998-02-20 Gepackte Kapillaren, insbesondere für die Enantiomerentrennung Withdrawn DE19807063A1 (de)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19807063A DE19807063A1 (de) 1998-02-20 1998-02-20 Gepackte Kapillaren, insbesondere für die Enantiomerentrennung
PCT/EP1999/000844 WO1999042192A1 (de) 1998-02-20 1999-02-09 Gepackte kapillaren, insbesondere für die enantiomerentrennung
EP99914449A EP1054716A1 (de) 1998-02-20 1999-02-09 Gepackte kapillaren, insbesondere für die enantiomerentrennung
JP2000532197A JP2002503823A (ja) 1998-02-20 1999-02-09 特にエナンチオマー分離用の充填細管

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19807063A DE19807063A1 (de) 1998-02-20 1998-02-20 Gepackte Kapillaren, insbesondere für die Enantiomerentrennung

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE19807063A1 true DE19807063A1 (de) 1999-08-26

Family

ID=7858335

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19807063A Withdrawn DE19807063A1 (de) 1998-02-20 1998-02-20 Gepackte Kapillaren, insbesondere für die Enantiomerentrennung

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP1054716A1 (de)
JP (1) JP2002503823A (de)
DE (1) DE19807063A1 (de)
WO (1) WO1999042192A1 (de)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10042451A1 (de) * 2000-08-29 2002-03-14 Studiengesellschaft Kohle Mbh High-Throughput Verfahren zur Bestimmung der Enantiomereneinheit von chiralen Verbindungen

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007268341A (ja) * 2006-03-30 2007-10-18 National Institute Of Advanced Industrial & Technology キャリア流体中から目的物質を吸着するための装置
PT3213065T (pt) 2014-10-27 2020-11-13 Hoffmann La Roche Sistemas e métodos de cromatografia rplc-sfc bidimensional

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3706890A1 (de) * 1987-03-04 1988-09-15 Bayer Ag Optisch aktive (meth)acrylamide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung zur racematspaltung
EP0459241B1 (de) * 1990-05-29 1994-10-26 Waters Investments Limited Verfahren und Vorrichtung zum Durchführen der Kapillarelektroforese
DE69630109T2 (de) * 1996-05-20 2004-04-08 Agilent Technologies, Inc. (n.d.Ges.d.Staates Delaware), Palo Alto Kapillarsäule für chromatographische Trennungen und Verfahren zur Herstellung

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10042451A1 (de) * 2000-08-29 2002-03-14 Studiengesellschaft Kohle Mbh High-Throughput Verfahren zur Bestimmung der Enantiomereneinheit von chiralen Verbindungen

Also Published As

Publication number Publication date
WO1999042192A8 (de) 1999-10-14
WO1999042192A1 (de) 1999-08-26
EP1054716A1 (de) 2000-11-29
JP2002503823A (ja) 2002-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Chirica et al. Silicate entrapped columns—new columns designed for capillary electrochromatography
Lelièvre et al. Capillary electrochromatography: operating characteristics and enantiomeric separations
Dermaux et al. Applications of capillary electrochromatography
Nilsson et al. Molecularly imprinted polymer formats for capillary electrochromatography
Li et al. Continuous beds for microchromatography: cation-exchange chromatography
Wistuba et al. Recent progress in enantiomer separation by capillary electrochromatography
Lämmerhofer et al. Separation of enantiomers by capillary electrochromatography
Carter-Finch et al. Enantiomeric separations by capillary electrochromatography using a macrocyclic antibiotic chiral stationary phase
Ong et al. Separation of water-and fat-soluble vitamins by micellar electrokinetic chromatography
US20030213732A1 (en) Sol-Gel monolithic column with optical window and method of making
Sepaniak et al. Evaluation of a dual-cyclodextrin phase variant of capillary electrokinetic chromatography for separations of nonionizable solutes
CH637843A5 (de) Verfahren zum packen einer chromatographiesaeule.
Aturki et al. Use of β-cyclodextrin polymer as a chiral selector in capillary electrophoresis
Szemaán et al. Use of cyclodextrins and cyclodextrin derivatives in high-performance liquid chromatography and capillary electrophoresis
DE10393207T5 (de) Chromatographiesäule sowie Verfahren zur Kontrolle der Sorbensdichte
Treadway et al. Highly efficient capillary columns packed with superficially porous particles via sequential column packing
Wang et al. Homochiral iron-based γ-cyclodextrin metal-organic framework for stereoisomer separation in the open tubular capillary electrochromatography
Wistuba et al. Enantiomeric separation by capillary electrochromatography using monolithic capillaries with sol‐gel‐glued cyclodextrin‐modified silica particles
Chirica et al. A simple procedure for the preparation of fritless columns by entrapping conventional high performance liquid chromatography sorbents
DE19807063A1 (de) Gepackte Kapillaren, insbesondere für die Enantiomerentrennung
EP1126275A2 (de) Kapillarsäule aus geschmolzenem Siliziumdioxid mit Photopolymerbestandteilen
Perchepied et al. Insights in column packing processes of narrow bore and capillary-scale columns: Methodologies, driving forces, and separation performance–A tutorial review
Angus et al. Aspects of column fabrication for packed capillary electrochromatography
US6224775B1 (en) Method of separating chemical mixtures
Bächmann et al. New particles as pseudostationary phase for electrokinetic chromatography

Legal Events

Date Code Title Description
8139 Disposal/non-payment of the annual fee