DE1916332A1

DE1916332A1 - Nucleic acids for immunosuppression

Info

Publication number: DE1916332A1
Application number: DE19691916332
Authority: DE
Inventors: Hugo Seinfeld; Brendel Dr Walter
Original assignee: Bayer AG
Current assignee: Bayer AG
Priority date: 1969-03-29
Filing date: 1969-03-29
Publication date: 1970-10-08

Abstract

Xenologic nucleic acids are used as immunosuppressives in transplant operations, and for the treatment of autoimmune illness or allergies.

Description

Xenologe Nucleinsäuren als immunsupressive llirkstoffe Die therapeutische Beeinflussung von autoimmunen Krankheiten, z.B. erworben haemolytische Anämie, akute Polyathritis, sowie die Behandlung von Transplantaten, z.B. von Niere, Haut, Herz, und außerdem die Therapie von allergischen Krankheiten stellen für die Medizin noch immer ein schwieriges Problem dar.Xenologic nucleic acids as immunosuppressive agents The therapeutic Influencing autoimmune diseases, e.g. acquired hemolytic anemia, acute Polyathritis, as well as the treatment of transplants, e.g. of kidneys, skin, heart, and besides the therapy of allergic diseases still make for medicine always a difficult problem.

Üblicherweise werden die Therapie der autoimmunen Krankheiten sowie die Therapie von Transplantatempfängern heute mit Cytostatica, Corticosteroiden und Antilymphozytenserum durchgeführt. Von diesen sind die Zystostatika sehr toxisch und müssen außerdem in sehr hohen Dosen verwendet werden. Die Steroide zeigen sehr oft die verschiedensten unerwünschten Nebenwirkungen, die zum Absetzen der Medikation zwingen.Usually the therapy of autoimmune diseases as well the therapy of transplant recipients today with cytostatics, corticosteroids and anti-lymphocyte serum performed. Of these, the cystostatics are very toxic and must also be used in very high doses. The steroids show a lot often a wide variety of undesirable side effects leading to medication discontinuation to force.

Auch das-Antilymphozytenserum hat erhebliche Nachteile: sie bestehen darin, daß das Serum nur sehr mühsam hergestellt werden kann und daher nicht jederzeit in beliebiger Menge zur Verfügung steht, und daß es außerdem als Eiweiß Antigeneigenschaften besitzt, die zu erheblichen Nebenwirkungen führen können, Alle drei Substanzgruppen befriedigen auch nicht bezüglich der Stärke ihrer Wirksamkeit und verlieren bei der längeren Anwendung am selben Patienten diese Wirkung nahezu völlig.The antilymphocyte serum also has considerable disadvantages: they exist in the fact that the serum can only be produced with great difficulty and therefore not at any time is available in any quantity, and that it also has antigenic properties as a protein that can lead to significant side effects, All three substance groups are also unsatisfactory in terms of the strength of their effectiveness and lose at prolonged use on the same patient has this effect almost completely.

Es wurde nun gefunden, daß man diese Nachteile überwinden kann, wenn man xenologe Nucleinsäuren als immunsupressive Wirkstoffe verwendet.It has now been found that these disadvantages can be overcome if xenologous nucleic acids are used as immunosuppressive agents.

Als xenologe Nucleinsäuren konncn in erster Linie solche aus Rinderföten in Frage, aber auch xenologe Nucleinsäuren aus anderen Säugetieren, und zwar nicht nur aus den Pöten, sondern auch aus den erwachsenen Tieren, können erfindungsgemäß verwendet werden. Aus diesen Rlaterialien werden die xcnologen Nucleinsällren nach literaturbekannten llethoden hergestellt.As xenologous nucleic acids, primarily those from bovine fetuses can be used in question, but also xenologous nucleic acids from other mammals, and indeed not only from the pots, but also from the adult animals, can according to the invention be used. From these materials the xnologous nucleic acids are formed methods known from the literature.

In erster Linie kommt hier die heiße Phenolextraktion nach G.P. Georgiev, V.L. i-iantieva, Biochim. Biophys. Acta (Amsterdam), Band 61, Seite 153, (1962) infrage.First and foremost, the hot phenol extraction according to G.P. Georgiev, V.L. i-iantieva, Biochim. Biophys. Acta (Amsterdam), Volume 61, Page 153, (1962) in question.

Gegenüber den oben genannten bisher verwendeten Mitteln haben die erfindungsgemäß zu verwendenden xenologen Nucleinsäuren den großen Vorteil völlig untoxisch zu sein. Diese Ungiftigkeit geht so weit, daß die Höchstdosen, die den Versuchstieren in gelöster Form gegeben werden können, zu keinerlei Toxizitätsarscheinungen rühren. Irgendwelchen physiologischen Nebenwirkungen werden nicht beobachtet.Compared to the means previously used above, the xenologous nucleic acids to be used according to the invention have the great advantage completely to be non-toxic. This non-toxicity goes so far that the maximum doses that the Test animals can be given in dissolved form, without any signs of toxicity stir. No physiological side effects are observed.

Die erfindungsgemäß zu verwendenden Substanzen sind außerdem selbst nicht antigen, führen daher nicht zur Antikörperbildung.The substances to be used according to the invention are also themselves not antigenic, therefore do not lead to antibody formation.

Darüber hinaus haben die xenologen Nucleinsäuren den großen Vorteil, wesentlich wirksamer zu sein, als die bisher verwendeten obengenannten Verbindungen.In addition, the xenologous nucleic acids have the great advantage of to be much more effective than the compounds previously used above.

Die in der nachstehenden Tabelle zusammengefaßten Versuche über veranschaulichen die erfindungsgemäße Behandlung von Transplantaten.The experiments summarized in the table below over illustrate the treatment of transplants according to the invention.

TABELLE Tierzahl Empfänger Spender Transplantat-(Sprague- (Duckrey 6, überlebenszeit Dowley- Black Ratten) in Tagen Ratten) I 25 --~-- 20 mg A/kg i.p. 24 und mehr 3 Stunden vor Transplantation II 8 ----- physiologische 9 + 1 NaCl-Lösung T A B E L L E Tierzahl Empfänger Spender Transplantat-(Sprague-Dovlcy- (Duckrey 6, überlebenszeit Ratten) Black Ratten) in Tagen III III 25 20 mg A/kg i.p. ----- 14 + 2,2 3 Stunden vor Transplantation IV 8 physiologische ----- 9 j 1,2 NaCl-Lösung i.p. TABLE Number of animals Recipients Donors Graft (Sprague- (Duckrey 6, survival time Dowley-Black rats) in days rats) I 25 - ~ - 20 mg A / kg i.p. 24 and more 3 hours before transplantation II 8 ----- physiological 9 + 1 NaCl solution T A B E L L E Number of animals Recipient Donor Transplant- (Sprague-Dovlcy- (Duckrey 6, survival time rats) Black rats) in days III III 25 20 mg A / kg i.p. ----- 14 + 2.2 3 hours before transplant IV 8 physiological ----- 9 j 1.2 NaCl solution i.p.

Die als Spender verwendeten Inzuchtratten vom Stamm Duckrey 6, Black Ratten wurden drei Stunden vor der Entn£..;le des Hauttransplantats mit 20 mg/kg der Lösung A i.p. einmal behandelt (1). The inbred rats from the Duckrey 6, Black strain, used as donors Rats were given 20 mg / kg of the skin graft three hours before removal of solution A i.p. treated once (1).

Die Lösung A enthält 50 mg/ml einer xenologen Nucleinsäure, dargestellt aus Rinderföten. Drei Stunden nach der Injektion wurde ein Haut stück auf Empfängerratten vom Start Sprague-Dowley transplantiert. Eine entsprechende Kontrollgruppe wurde ebenso behandelt nur daß statt der xenologen Nucleinsäurelösung physiologische Kochsalzlösungen injiziert werden (II). Solution A contains 50 mg / ml of a xenologous nucleic acid, shown from beef fetuses. A piece of skin was placed on recipient rats three hours after injection transplanted from the start Sprague-Dowley. A corresponding control group was established likewise only treats that instead of the xenologous nucleic acid solution, physiological saline solutions be injected (II).

In einem weiteren Versuch behandelte man die Empfängerratten (Sprague-Dowley) mit 20 mg/kg Lösung A i.p. drei Stunden vor der Transplantation (III); eine Kontrollgruppe (IV) wurde lediglich mit physiologischer Kochsalzlösung behandelt. In a further experiment the recipient rats (Sprague-Dowley) were treated with 20 mg / kg solution A i.p. three hours before transplant (III); a control group (IV) was treated with physiological saline only.

In beiden Kontrollgruppen stoßen die Tiere das Transplantat um den 9. Tag nach der Operation ab. In both control groups, the animals push the graft around the Day 9 after the operation.

Werden die Empfängertiere drei Stunden vor der Operation mit xenologischer Nucleinsäure behandelt, so findet sich eine deutliche Verlängerung der Transplantatüberlebenszeit auf ca. The recipient animals are treated with xenological three hours before the operation Nucleic acid treated, there is a significant increase in graft survival time to approx.

14 Tage, entsprechend ca. 50 % Transplantatverlängerung, im Vergleich zur Kontrolle. 14 days, corresponding to approx. 50% graft lengthening, in comparison for control.

Noch wesentlich deutlicher ist der therapeutische Erfolg, wenn die Spendertiere drei Stunden vor der Transplantation mit 20 mg/kg xenologischer Nucleinsäure behandelt werden. In diesem Falle waren die Transplantate'noch nach 24 Tagen intakt. Der Versuch wurde zu diesem Zeitpunkt abgebrochen, um die Hautstücke histologisch zu untersuchen. The therapeutic success is even clearer when the Donor animals with 20 mg / kg xenological nucleic acid three hours before transplantation be treated. In this The grafts were still behind Intact for 24 days. The experiment was stopped at this point in order to remove the pieces of skin to be examined histologically.

Claims

1. Use of xenologous nucleic acids as an immunosuppressive agent.

2. Use of xenologic nucleic acids as an agent for the therapy of Transplant recipients.

3. Use of xenologous nucleic acid as an agent for therapeutic Influencing autoimmune diseases.

4. Use of xenologous nucleic acids as an agent for the therapy of allergic diseases-.