DE1902607B

DE1902607B - Process for the production of lysolecithin

Info

Publication number: DE1902607B
Authority: DE
Inventors: Hans Dipl.-Chem. Dr. 5158 Horrem Betzing
Original assignee: A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln-Braunsfeld

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur weil die Abspaltung der zweiten Fettsäure wesentlichThe present invention relates to a method for because the cleavage of the second fatty acid is essential

Herstellung von Lysolecithin mit hohem Gehalt an ι langsamer erfolgt als die Abspaltung derersten Fettsäure,Production of lysolecithin with a high content of ι takes place more slowly than the splitting off of the first fatty acid,

ungesättigten Fettsäuren aus Phosphatidylcholin, d. h. wird praktisch nur ein Fettsäurerest abgespalten.unsaturated fatty acids from phosphatidylcholine, d. H. practically only a fatty acid residue is split off.

Lecithin aus pflanzlichen oder tierischen Quellen. Die Bildung von Glycerylphosphorylcholin ist durchLecithin from vegetable or animal sources. The formation of glycerylphosphorylcholine is through

Lysolecithin ist ein durch Abspaltung eines Fett- 5 Wahl des speziellen Mediums und des milden Alkalis säurerestes wasserlöslich gemachtes Lecithin. Seine weitgehend zurückgedrängt. Die abgespaltenen Fett-Herstellung erfolgt bisher durch Hydrolyse von ehe- säuren liegen in Form der Ester des zur Reaktion vermisch reinem Lecithin (Phosphatidylcholin) auf enzy- wendeten Alkohols vor, woraus folgt, daß die Reakmatischem Wege mittels der Phospholipase A des tion in einer Alkoholyse bzw. Umesterung der Fett-Schlangengifts. Bekannt ist auch die Herstellung eines io säure besteht.Lysolecithin is produced by splitting off a fat 5 Choice of the special medium and the mild alkali acid residue water-solubilized lecithin. Its largely pushed back. The split off fat production up to now has been carried out by hydrolysis of matrimonial acids lying in the form of the esters of the mixture for the reaction pure lecithin (phosphatidylcholine) on enzyme-used alcohol, from which it follows that the reactive Paths by means of the phospholipase A des tion in an alcoholysis or transesterification of the fat snake venom. The production of an io acid is also known.

synthetischen Mono-oleyl-lysolecithins, einer Verbin- Das Hauptprodukt Lysolecithin weist Überraschendung, die bei pharmakologischen Untersuchungen eine derweise einen hohen Gehalt an ungesättigten Fett-Verbesserung der Kontraktionsfähigkeit des Herzens säuren auf. Die Tatsache, daß praktisch die gesamten zeigte. ungesättigten, vor allem auch die essentiellen Fettsäu-synthetic mono-oleyl-lysolecithin, a compound The main product lysolecithin has surprising, which in pharmacological studies one of such a high level of unsaturated fat improvement the contractility of the heart acidify. The fact that practically the whole showed. unsaturated, especially the essential fatty acids

Bei der bekannten enzyroatischen Hydrolyse des 15 ren des Phosphatidylcholins im verfahrensgemäß ge-Lecithins mit Phospholipase A wird im wesentlichen wonnenen Lysolecithin noch vorhanden sind, beweist, die in /5-Stellung des Glyzerinrestes stehende Fettsäure daß die hydrolytische Abspaltung der Fettsäuren aus abgespalten. Da die ungesättigten Fettsäuren des Le- dem Phosphatidylcholinmolekül auch in «-Stellung cithins im wesentlichen sich gerade in dieser /3-Stel- stattfindet, in der sich bevorzugt die gesättigten Fettlung befinden, erhält man daher mit der bekannten 20 säuren befinden; im Gegensatz zur enzymatischen enzymatischen Methode nur ein Lysolecithin, welches Spaltung mit Phospholipase A, die praktisch ausrelativ arm an ungesättigten Fettsäuren ist. schließlich die in /S-Stellung stehenden ungesättigtenIn the known enzymatic hydrolysis of the 15 ren of phosphatidylcholine in the ge-lecithin according to the method with phospholipase A essentially recovered lysolecithin is still present, proves the fatty acid in the / 5-position of the glycerol residue that the hydrolytic splitting off of the fatty acids from cleaved. Since the unsaturated fatty acids of the leather phosphatidylcholine molecule are also in the «position cithins essentially takes place in this / 3-place, in which the saturated fat is preferred are located, one therefore obtains with the known 20 acids located; in contrast to the enzymatic enzymatic method only a lysolecithin, which cleavage with phospholipase A, which is practically relative is low in unsaturated fatty acids. finally the unsaturated ones in the / S position

Da bekanntlich gerade die ungesättigten und ins- Fettsäuren abspaltet. Während durch den Angriff der besondere die mehrfach urgesättigten Fettsäuren für Phospholipase ausschließlich «-Lysolecithin entsteht, die therapeutische Bedeutung der Lecithine von großer 25 liegt im Lysolecithin des vorliegenden Verfahrens ein Wichtigkeit sind, besteht seit langem der Wunsch, Gemisch von α- und jö-Lysolecithin vor, was für die Lysolccithine mit hohem Gehalt an mehrfach ungesät- biologische Wirkung von großer Bedeutung ist. tigten Fettsäuren herzustellen. Wegen der Empfindlich- Hajdu und Mitarbeiter (J. Pharmacol. Exptl. Thekeit der mehrfach ungesättigten Fettsäuren ist eine rap., 120 (1957) S. 99), die bei «-Lysolecithinen, her-Synthese praktisch nicht möglich. Versuche, durch eine 30 gestellt durch Einwirkung von Phospholipase A auf unspezifische wäßrige Hydrolyse der Lecithine mittels natürliches Phosphatidylcholin, am isolierten Frosch-Säuren oder Alkalihydroxyden zu solchen Lysolecithi- herzen eine digitalisähnliche Wirkung nachweisen nen zu gelangen, zeigten keinen Erfolg, da hierbei im konnten, haben bei Anwendung einer Mischung von wesentlichen Glycerylphosphorylcholin durch Abspal- «- und /?-Lysolecithin außerdem noch eine Erhöhung tung beider Fettsäuren bzw. sogar eine Hydrolyse bis 35 des Minutenvolumens durch Verbesserung der Konzur Glyzerinphosphorsäure durch Abspaltung auch traktionsfähigkeit des Herzens feststellen können,
des Cholinrestcs eintritt. Im allgemeinen können die Reaktionsgemische nachAs is well known, it is precisely the unsaturated and ins- fatty acids that split off. While the attack of the special polyunsaturated fatty acids for phospholipase exclusively results in-lysolecithin, the therapeutic importance of the lecithins of greater 25 is important in the present process, there has long been a desire to use a mixture of α- and jö-lysolecithin what is of great importance for the lysol cithins with a high content of polyunset-biological effects. to produce saturated fatty acids. Because of the sensitivity of Hajdu and co-workers (J. Pharmacol. Exptl. Thekeit der polyunsaturated fatty acids is rap., 120 (1957) p. 99), the synthesis of "lysolecithins" is practically impossible. Attempts to achieve a digitalis-like effect on isolated frog acids or alkali hydroxides by the action of phospholipase A on unspecific aqueous hydrolysis of the lecithins by means of natural phosphatidylcholine, on isolated frog acids or alkali hydroxides, have shown no success, since the When using a mixture of essential glycerylphosphorylcholine through splitting off and / or lysolecithin, we were also able to determine an increase in both fatty acids or even hydrolysis of up to 35 minutes by improving the concentration of glycerol phosphoric acid through splitting off and the traction ability of the heart,
of the choline residue occurs. In general, the reaction mixtures can according to

Es wurde nun überraschenderweise festgestellt, daß Abtrennung der entstandenen Fettsäureester unmittelman durch eine milde Alkoholyse zu neuen bisher bar verwendet werden. Falls man jedoch reines Lysonicht bekannten Lysolecithinen gelangt, bei denen der +o lecithin wünscht, so muß aus dem Reaktionsgemisch Prozentsatz der ungesättigten Fettsäuren mindestens das entstandene Glycerylphorylcholin entfernt werden, dem Ausgangsmaterial entspricht. Das Verfahren zur was erfindungsgemäß durch Verwendung von Dichlor-Herstellung von Lysolecithin bzw. vorwiegend Lyso- äthan bzw. Dichloräthylen als Lösungsmittel geschieht, lecithin enthaltenden Gemischen mit Lecithin oder Ein besonders geeignetes Lecithinausgangsmaterial Lecithin und Glyzerylphosphorylcholin mit hohem Ge- 45 ist das nach der deutschen Patentschrift 1 053 299 erhalt an mehrfach ungesättigten Fettsäuren aus ehe- haltene Phosphatidylcholin der Soja-Bobne. Bei Anmisch reinem Lecithin pflanzlicher oder tierischer Her- wendung des erfindungsgemäßen Verfahrens entsteht kunft durch Abspalten eines Fettsäurerestes besteht hiermit bis zu 80% Lysolecithin mit mehr als 70% erfindungsgemäß darin, daß man das in Methanol oder ungesättigten Fettsäuren im Fettsäureanteil. Als Äthanol gelöste Lecithin unter Schutz eines inerten 50 schwaches Alkali sind Magnesium- und Calciumoxid Gases bei Ausschluß von Licht, Luft und Feuchtigkeit besonders geeignet, aber auch Magnesiumhydroxidmit schwach alkalischen Mitteln, vorzugsweise mit carbonat und Magnesiumcarbonat sowie Natriumhandelsüblichem MgO bei erhöhten Temperaturen hydrogencarbonat und Natriumcarbonat sind noch oder mit frisch aktiviertem MgO bei Zimmertempera- brauchbar. Auch Ammoniak wirkt in geringer Konturen, einer milden Alkoholyse unterwirft, dann die 55 zentration als schwaches Alkali im Sinne der Erfin-Lösung neutralisiert, durch Dialyse gegen Petroläther dung, weshalb man die Spaltung auch in wasserfreier oder durch wiederholte Extraktion mit kaltem Aceton alkoholischer Ammoniaklösung durchführen kann, die entstandenen Fettsäureester abtrennt, worauf man Als Lösungsmittel können Methanol und Äthanol verim Falle der Herstellung reinen Lysolecithins durch wendet werden; Methanol in Verbindung mit aktivier-Behandlung mit Dichloräthan bzw. Dichloräthylen 60 tem Magnesium bzw. Calciumoxid stellt die bevorzugte Glyzerylphosphorylcliolin entfernt und in bekannter Ausführungsform dar.It has now been found, surprisingly, that the fatty acid esters formed are separated off immediately can be used by a mild alcoholysis to new bar. But if you don't have pure lyso known lysolecithins, in which the + o desires lecithin, must be removed from the reaction mixture Percentage of unsaturated fatty acids at least the glycerylphorylcholine that has formed is removed, corresponds to the starting material. The method for what according to the invention by using dichloro production of lysolecithin or mainly lysoethane or dichloroethylene happens as a solvent, Mixtures containing lecithin with lecithin or a particularly suitable lecithin starting material Lecithin and glycerylphosphorylcholine with a high level of 45 are obtained according to German patent 1,053,299 of polyunsaturated fatty acids from married phosphatidylcholine from soy bobne. When mixing pure lecithin of vegetable or animal origin using the method according to the invention By splitting off a fatty acid residue, there is up to 80% lysolecithin with more than 70% according to the invention in that one in methanol or unsaturated fatty acids in the fatty acid portion. When Ethanol dissolved lecithin under the protection of an inert weak alkali are magnesium and calcium oxide Gas especially suitable when light, air and moisture are excluded, but also magnesium hydroxide weakly alkaline agents, preferably with carbonate and magnesium carbonate as well as commercially available sodium MgO at elevated temperatures, hydrogen carbonate and sodium carbonate are still or usable with freshly activated MgO at room temperature. Ammonia also works in small contours, subjected to mild alcoholysis, then centration as a weak alkali in the sense of the Erfin solution neutralized by dialysis against petroleum ether, which is why the split is also in anhydrous or by repeated extraction with cold acetone alcoholic ammonia solution, the fatty acid esters formed are separated off, whereupon methanol and ethanol can be used as solvents Case of producing pure lysolecithin by turning; Methanol in conjunction with activating treatment with dichloroethane or dichloroethylene 60 tem magnesium or calcium oxide is the preferred Glycerylphosphorylcliolin removed and in a known embodiment.

Weise das Lysolecithin isoliert. Durch die spezielle Die Wahl des zur Umesterung verwendeten AgensWay the lysolecithin is isolated. Due to the specific choice of the agent used for transesterification

chemisch induzierte Spaltung des Lecithins mit schwa- ist in Verbindung mit der Reaktionstemperatur undchemically induced cleavage of the lecithin with schwa- is in connection with the reaction temperature and

chem Alkali in alkoholischer Lösung gelangt man re- der Reaktionszeit von entscheidendem Einfluß auf diechem alkali in alcoholic solution can be found to have a decisive influence on the reaction time

lativ schnell zu Reaktionsgemischen, die einen hohen 65 Zusammensetzung des Endproduktes. Außerdem spieltrelatively fast to reaction mixtures that have a high 65 composition of the end product. Also plays

Anteil an Lysolecithin aufweisen, da durch die Alkoho- bei den Oxiden des Calciums und des Magnesiums de-Have a proportion of lysolecithin, as the alcohol in the oxides of calcium and magnesium

lyse in Gegenwart von schwachem Alkali die Spaltung ren Aktivität eine wichtige Rolle. So wurde gefunden,lysis in the presence of weak alkali, the cleavage ren activity plays an important role. So it was found

auf der Stufe der Lysoverbindungen stehen bleibt bzw. daß man mit einem handelsüblichen Magnesiumoxidremains at the level of the lyso compounds or that one with a commercially available magnesium oxide

3 43 4

wie es ζ. B. als Magnesium usta im Handel ist, nach etwa des Lysolecithins ergibt folgende Durchschnittswerte:like it ζ. B. as Magnesium usta is on the market, after about the lysolecithin results in the following average values:

3stündigem Kochen in Methanol unter Rückfluß einen Gesätt C 13 0°/3 hours of boiling in methanol under reflux a saturated C 13 0 ° /

Gehalt an Lysolecithin von etwa 5O°/o erreicht. Wird Gesätt C¹* 2'5⁰ZLysolecithin content of about 50% reached. Will sat C ¹ * 2'5 ⁰ Z

ein solches Magnesiumoxid durch Stehen an der Luft Ungesätt. c"¹ ............ 70°/°such magnesium oxide unsaturated by standing in air. c " ¹ ............ 70 ° / °

desaktiviert, so muß man bereits 7 Stunden unter 5 Ungesätt c"² !!!..!. 720°/°deactivated, you have to be under 5 unsaturated c " ² !!! ..!. 720 ° / °

Rückfluß kochen, um zum gleichen Ergebnis zu ge- Uneesätt c"³ 5S⁰/⁰ Reflux cook to the same conclusion about overall Uneesätt c ^"3 5S ^{^0/0}

langen. Mit einem bei 300 bis 1000° C geglühten Magne- ^s ' " ' '°long. With an annealed at 300 to 1000 ° C magnesium ^s '' '' °

siumoxid genügt es, wenn man 30 Minuten zum Sieden Demgegenüber zeigt ein Lysolecithin, das aus demsium oxide, it is enough if you boil for 30 minutes

erhitzt, oder man kann auf ein Erhitzen völlig verzieh- gleichen Ausgangsmaterial, nämlich Phosphatidyl-heated, or one can completely warp the same starting material, namely phosphatidyl-

ten und braucht nur noch etwa 4 Stunden bei Raum- 10 cholin aus Sojabohnen, jedoch mittels des enzymati-and only needs about 4 hours with room choline from soybeans, but by means of the enzymatic

temperatur zu rühren, um zur gleichen Menge Lyso- sehen Hydrolyseverfahrens durch Schlangengift austemperature to stir to see the same amount of lyso hydrolysis process by snake venom

lecithin 211 gelangen. Die stets einhergehende Bildung Crotalus adamanteus erhalten wurde, eine deutlichlecithin 211. The always accompanying formation Crotalus adamanteus was obtained one clearly

von Glycerylphosphorylcholin kann auf ein Mini- andere Fettsäurebesetzung:Glycerylphosphorylcholine can have a mini other fatty acid composition:

mum herabgesetzt werden, wenn man die Reaktion bei Gesätt C 26 7 °/mum be reduced if the reaction at sat C 26 7 ° /

Temperaturen unterhalb +20"C (= Zimmertempera- 15 Gesätt c" 4S⁰/⁰ Temperatures below +20 "C (= Zimmertempera- 15 Sat. c" 4S ^{^0/0}

tür) ablaufen läßt, wobei die Reaktionszeit entspre- Ungesätt c"* 6 7°/°door) can run, the response time corresponding to Unsaturated c "* 6 7 ° / °

eilend verlängert werden muß. Die Konzentration des Ungesätt c"² . ... 573⁰/°must be hastily extended. The concentration of unsaturation c " ^2. ... 573 ⁰ / °

Phosphatidylcholins in der Reaktionslösung hat keinen Ungesätt c'"³ 48 °/°Phosphatidylcholine in the reaction solution has no unsaturation c '" ³ 48 ° / °

nennenswerten Einfluß auf den Reaktionsverlauf, ' ¹⁸ ' °significant influence on the course of the reaction, ' ¹⁸ ' °

anders dagegen verhält es sich mit der Menge an Ma- 20 Geht man von tierischem Phosphatidylcholin, z. B. gnesium- bzw. Calciumoxid. Eine Erhöhung dieser die gewonnen aus Eilecithin, das an sich weniger unge-Umesterung bewirkenden Stoffe führt zu einer be- sättigte Fettsäuren enthält, aus, so ergibt das vorlisschleunigten Lysolecithinbildung, aber gleichzeitig auch gende Verfahren überraschenderweise ein Lysolecithin, zu einem Anstieg an unerwünschtem Glycerylphos- das etwa 41°/₀ ungesättigte Fettsäuren enthält, wähphorylcholin. Eine Konzentrationsabnahme verlang- 25 rend man auf bekannte Weise durch enzymatische samt die Lysolecithinbildung und führt zwangläufig zu Hydrolyse mittels Schlangengift ein Lysolecithin mit einer längeren Reaktionszeit. etwa 95 % gesättigten Fettsäuren, d. h. also ein Pro-Die nach dem vorliegenden Verfahren erhaltenen dukt, das nur einen geringen Anteil von etwa 5 % unProdukte stellen in der Regel Substanzgemische dar, gesättigten Fettsäuren, aufweist, enthält,
die neben dem Lysolecithin noch unverbrauchtes .30The situation is different, however, with the amount of Ma. B. magnesium or calcium oxide. An increase in the amount of lysolecithin obtained from egg lecithin, which in itself results in less non-transesterification leads to saturated fatty acids, results in the accelerated formation of lysolecithin, but at the same time also the slowing process surprisingly results in a lysolecithin, leading to an increase in undesired glyceryl phosphate. containing about 41 ° / _{0-unsaturated} fatty acids, wähphorylcholin. A decrease in concentration is required in a known manner by enzymatic and lysolecithin formation and inevitably leads to hydrolysis by means of snake venom, a lysolecithin with a longer reaction time. about 95% saturated fatty acids, ie a product obtained according to the present process, which contains only a small proportion of about 5% unProducts usually represent mixtures of substances, saturated fatty acids,
the unused next to the lysolecithin .30

Phosphatidylcholin sowie Glycerylphosphorylcholin Beispiel 1
und Fettsäureester enthalten. Mittels üblicher Dialyse 300 g chemisch reines Phosphatidylcholin, gewondurch einen dünnen Gummischlauch oder durch eine nen aus dem Phosphatidgemisch der Soja-Bohne, werwiederholte Behandlung mit kaltem Aceton lassen sich den unter Rühren und Schutz eines inerten Gases in die Fettsäureester schnell und auf einfache Weise 35 4,51 Methanol gelöst und mit 30 g Magnesiumoxid, quantitativ entfernen. Die so resultierenden Gemische aktiviert durch l,5stündiges Glühen bei 850" C, unter aus Lysolecithin, Phosphatidylcholin und Glyceryl- Ausschluß von Luft und Feuchtigkeit 4,2 Stunden bei phosphorylcholin können zur intravenösen Injektion 18°C gerührt. Nach dem Abtrennen des Magnesiumverwendet werden. Um hierfür klare Lösung zu er- oxids, zweckmäßigerweise mit Hilfe einer Filterhülse, halten, empfiehlt sich ein kleiner Zusatz eines Alkali- 40 wird die Lösung zur Neutralisation 20 bis 30 Minuten salzes der Desoxychlosäure- bzw. Apocholsäure. mit 45 g saurem Aluminiumoxid gerührt und dann Hierdurch wird auch der restliche an sich wasserun- filtriert. Nach dem Abdampfen des Methanols im lösliche Lecithin-Anteil des Reaktionsgemisches voll- Vakuum unter Inertgasschutz wird der zähe, ölige ständig wasserlöslich. Rückstand mittels Petroläther in einen geeigneten Sollte die Entfernung des Glycerylphosphorylcholins 45 Gummischlauch überführt und 8 Stunden gegen Petrolerwünscht sein, so behandelt man das Substanzgemisch äther (Kp. 30 bis 5O⁰C) im Soxhlet dialysiert. Nach mit Dichloräthan bzw. Dichlorethylen, dem zur Ver- dem Abziehen des Lösungsmittels im Vakuum unter besserung der Ausbeute zweckmäßigerweise 5 % Stickstoff bleiben im Dialysat die Fettsäuremethylester Äthanol zugefügt wurde. Dabei gehen Phosphatidyl- (Ausbeute 102 g = 34%), im Retentat eine fast farbcholin und Lysolecithin in Lösung, während das GIy- 50 lose, pastenartige Substanz zurück, die aus einer Micerylphosphorylcholin dagegen ungelöst zurückbleibt, schung von Lecithin, Lysolecithin und GPC besteht, so daß es durch anschließende Filtration praktisch Zur Abtrennung des GPC wird die Substanz in 1,8 1 quantitativ entfernt werden kann. Dichloräthan-Äthanol (95:5) aufgenommen, vom Un-Aus dem resultierenden Gemisch kann das Lyso- löslichen abfiltriert und die klare Lösung durch Delecithin mit Hilfe einer Gegenstromverteilung im Sy- 55 stillation im Vakuum unter Stickstoff vom Lösungsstem: Petroläther — 98% Methanol (2:1) oder durch mittel befreit. Es resultieren 155 g (= 52%) einer fast präparative Dünnschichtchromatographie auf Kiesel- farblosen Substanz pastenartiger Konsistenz, die nach gelplatten isoliert und quantitativ bestimmt werden. dünnschichtchromatographischer Trennung und an-Eine typische Analyse eines nach dem erfindungs- schließender Phosphor-Bestimmung aus 52,5 % Lysogemäßen Verfahren erhaltenen Lysolecithins aus Phos- .60 lecithin und 47,5% Lecithin besteht,
phatidylcholin der Soja-Bohne zeigt folgende Werte: Das Substanzgemisch ergibt folgende Analysen-Gesamtphosphor 5,95 % ^werte: Phosphatidylcholine and Glycerylphosphorylcholine Example 1
and fatty acid esters. Using conventional dialysis, 300 g of chemically pure phosphatidylcholine, obtained through a thin rubber tube or from a mixture of phosphatides from the soy bean, and repeated treatment with cold acetone, the fatty acid esters can be converted quickly and easily into the fatty acid esters with stirring and protection of an inert gas 35 4 , 51 dissolved methanol and remove quantitatively with 30 g of magnesium oxide. The resulting mixtures activated by annealing for 1.5 hours at 850 "C, with the exclusion of air and moisture from lysolecithin, phosphatidylcholine and glyceryl for 4.2 hours at phosphorylcholine can be stirred for intravenous injection at 18 ° C. Can be used after the magnesium has been separated off. In order to maintain a clear solution for this purpose, expediently with the aid of a filter sleeve, it is advisable to add a small amount of an alkali salt, the solution is stirred for 20 to 30 minutes to neutralize the deoxychlosic acid or apocholic acid with 45 g of acidic aluminum oxide After the evaporation of the methanol in the soluble lecithin portion of the reaction mixture under full vacuum under inert gas protection, the viscous, oily becomes permanently water-soluble. Residue by means of petroleum ether in a suitable rubber hose transferred and 8 hours against petroleum be desired, so treat If the substance mixture is ethereal (bp. 30 to 5O ⁰ C) overnight in a Soxhlet apparatus. After dichloroethane or dichloroethylene, to which the fatty acid methyl ester ethanol was added to remove the solvent in vacuo while improving the yield, expediently 5% nitrogen remaining in the dialysate. Phosphatidyl (yield 102 g = 34%), in the retentate almost color choline and lysolecithin go into solution, while the glycylic, paste-like substance, which remains undissolved from a micerylphosphorylcholine, consists of lecithin, lysolecithin and GPC so that it can practically be removed by subsequent filtration to separate the GPC, the substance in 1.8 l can be removed quantitatively. Dichloroethane-ethanol (95: 5) taken up, the lysol soluble can be filtered off from the un-from the resulting mixture and the clear solution through delecithin with the help of countercurrent distribution in the sy- 55 stillation in vacuo under nitrogen from the solution system: petroleum ether - 98% methanol (2: 1) or exempted by medium. 155 g (= 52%) of an almost preparative thin-layer chromatography on a silica-colorless substance of paste-like consistency result, which are isolated and quantitatively determined using gel plates. Thin-layer chromatographic separation and a typical analysis of a lysolecithin obtained by the phosphorus determination according to the invention from 52.5% lyso-compliant method consists of phosphorus .60 lecithin and 47.5% lecithin,
Soy bean phatidylcholine shows the following values: The mixture of substances gives the following analysis total phosphorus ^{values of 5.95%:}

Jodzahl 89Iodine number 89

PhösphoV-Choun-MoiverhältniV '." ~ϊ|θϊ% ^6s Phosphor 4,75%PhösphoV-Choun-MoiverhaltniV '. "~ ϊ | θϊ% ^6s phosphorus 4.75%

Cholin 23,50%Choline 23.50%

Fettsäuren 52,00%Fatty acids 52.00%

Jödzahf " 77" ^Cholin ¹⁸»⁹°/oJödzahf "77" ^choline ¹⁸ » ^9%

Fettsäuren 61,5%Fatty acids 61.5%

Die gaschromatographische Analyse der Fettsäuren Phosphor-Cholin-Molverhältnis ... 1,01Gas chromatographic analysis of the fatty acids phosphorus-choline molar ratio ... 1.01

Claims

5 65 6

The gas chromatographic determination of the fat nitrogen is distilled off. 22 g of a mixture result

acids results in the following average values: mixture of 80% lysolecithin and 20% lecithin.

Palmitic Acid 10.8% Example 5

Oleic acid ..................... 6.5 ° / ° ⁵ ^ ⁰ S Phosphatidylcholine of vegetable origin

Tinnkäiii-p 748 »/ ° with stirring and protection of an inert gas

jwinoj saure /^,c /η jwinoj acid / ^, c / η ·*»■».* « ■ .. ,«» » . . < .......· * »■». * «■ ..,« »». . < .......

Linolenic acid 5 4 ° / dissolved in 31% methanol and mixed with 37.5 g of commercially available chemicals

° Magnesium oxide (Magnesia usta) under 3.2 hours

Example 2 heated to reflux. After the reaction

lo mixed at room temperature takes place the further

300 g of phosphatidylcholine are as described above, working up analogously to Example 1. Yield 165 g of a ben 61 in methanol and treated with 30 g of calcium oxide mixture of 51% lysolecithin and 49% lecithin, powder activated by heating for 2 hours at 450 ⁰ C. . · Ι _Ä
fourth, stirred for 1 hour at room temperature. Example 6
The oxide is filtered off and the methanolic solution 15 70 g of chemically pure phosphatidylcholine is then neutralized unsung by adding 5 ml of 5% methanol! - under the protection of an inert gas in 1 liter of methanol-sheared hydrochloric acid. After evaporation dissolves, 13.6 g of a 25% NH ₃ solution are added to the solvent in vacuo under nitrogen (corresponding to a 0.2 M NH ₃ solution) and the residue is removed to separate the fatty acid methyl solution at room temperature 24 hours self-ester treated repeatedly with cold acetone, left by * o. After neutralization with 2.2 ml of 25% distillation in vacuo, freed from acetone and then HCl, the solvent is distilled off in vacuo under inert in about 21 dichloroethane-ethanol (95: 5) gas protection. Ermen the further work-up. After filtering, the clear solution is described as follows under Example 1 and 2, respectively. The solvent was then removed in vacuo under nitrogen. Finally, 42 g of a mixture of 49% lyso-It results in 195 g (= 65%) of an almost colorless sub-as lecithin and 51% lecithin,
punch of paste-like consistency, which after thin.
Layer or column chromatographic analysis from patent claims:
55% lysolecithin and 45% lecithin. 1. Process for the production of lysolecithin. . with a high content of unsaturated fatty acids or Example 3 _{3O containing} predominantly such lysolecithms

200 g of chemically pure phosphatidylcholine are mixed with lecithin or lecithin and glyce, while stirring and with the protection of an inert gas, dissolved in rylphosphorylcholine from chemically pure Leci-11 ethanol and mixed with 30 g of calcium oxide (activated by plant or animal origin by heating at 450 ⁰ C for 2 hours ) 10 hours with cleavage of a fatty acid residue, characterized in that ge-40 ⁰ C with the exclusion of air and moisture indicates that this is done in methanol or stirred. After filtering off the oxide, the lecithin dissolved in ethanol is stirred for 20 minutes under the protection of an inert solution for neutralization with 40 g of acid gas with exclusion of light, air and moist aluminum oxide, then filtered activity with weak alkaline agents, preferably and Finally, the solvent is distilled off in vacuo using commercially available MgO at elevated Tem nitrogen. To remove the temperature formed or with freshly activated MgO in fatty acid ethyl ester, the residue is repeatedly treated with room temperature, a mild alcoholysis of cold acetone and then thrown by distillation, then the solution is neutralized and freed from acetone by vacuum under nitrogen. It alyse against petroleum ether or by repeated remain 150 g (= 75%) ^"mes mixture of 45% extraction with cold acetone, the resultant lysolecithin, 50% lecithin and 5% ^Gp C back. 45 separates fatty acid esters, which in the case of. . Production of pure lysolecithin by treatment B e 1 s ρ 1 e 1 4 ^ dichloroethane or dichloroethylene glyceryl

100 g of phosphatidylcholine are removed in 1.21 of methanol and phosphorylcholine removed in a known manner

dissolved and with 10 g of activated calcium oxide, as isolated in the lysolecithin.

Example 3, stirred for 1.33 hours at 2O ⁰ C. 50 2. The method according to claim 1, characterized

After removing the oxide, the solution is used to draw that one as a weakly alkaline agent

Neutralize for another 30 minutes with 20 g of acidic aluminum-activated calcium oxide and, if the

miniumoxid stirred, then filtered and then working temperatures,

the methanol in a vacuum under inert gas protection 3. The method according to claim 1 or 2, characterized

distilled. The resulting fatty acid methyl esters are characterized by the fact that the reaction mixture is used

that by dialysis in a rubber tube versus by treatment with acidic aluminum oxide

Petroleum ether (see Example 1) removed quantitatively. neutralized.

After the petroleum ether has been distilled off under stick- 4. The method according to claim 1 to 3, characterized in that

substance, the residue in 400 ml dichloroethane indicates that to remove the glycine

Ethanol (95: 5) absorbed, from the insoluble 60 rylphosphorylcholine dichloroethane or dichloro

filtered and the solvent used in vacuo under ethylene to which 5% ethanol are added.