DE1793478A1 - Alisol connections - Google Patents
Alisol connectionsInfo
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
- A61K36/884—Alismataceae (Water-plantain family)
Description
Köln, den 18.9.1968 AvK/Ax/HzCologne, September 18, 1968 AvK / Ax / Hz
27, Doshomachi 2-chome, Higashi-ku, Osaka (Japan).27, Doshomachi 2-chome, Higashi-ku, Osaka (Japan).
Alis ο1-VerbindungenAli's ο1 connections
Die Erfindung betrifft Aliso!verbindungen, die erstmals durch, die Anmelderin hergestellt worden sind und hypoch-olesterinämisclie Wirkung haben.The invention relates to Aliso! Connections, which for the first time by, the applicant have been manufactured and hypoch-olesterinämisclie Have an effect.
Die Erfindung betrifft speziell ein Verfahren zur Herstellung von Alisol-A-Verbindungen der Formel (I) durch eine chemische Umwandlung von Alisol-B-Yerbindungen der Formel (II) sowie ein Verfahren zur Isolierung von natürlich, vorkommenden Alisol-B-Verbindungen: The invention particularly relates to a method of manufacture of Alisol-A compounds of formula (I) by a chemical Conversion of Alisol-B-Y compounds of the formula (II) as well as a method for isolating naturally occurring Alisol-B compounds:
(I)(I)
Alisol-A-Verbindungen Alisol-A connections
(II)(II)
Alisol-B-Verbindungen Alisol-B connections
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Hierin stehen R , R , R-^ und R jeweils für ein Wasserstoffatom, einen Acylrest einer niederen Monocarbonsäure mit nicht mehr als 2I- Kohlenstoffatomen oder einen niederen Alkoxycarbonylrest mit nicht mehr als 5 Kohlenstoffatomen, oder R2 und R^ bilden gemeinsam einen Alkylidenrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen.Herein, R, R, R- ^ and R each represent a hydrogen atom, an acyl radical of a lower monocarboxylic acid with not more than 2 carbon atoms or a lower alkoxycarbonyl radical with not more than 5 carbon atoms, or R 2 and R ^ together form an alkylidene radical with 1 to 5 carbon atoms.
Die Rhizome der Pflanze Alismataceae», insbesondere Alisma-The rhizomes of the plant Alismataceae », in particular Alisma-
Jammels Plantogo-aquatica L. var. Orientale » werden seitJammels Plantogo-aquatica L. var. Orientale » have been since
langem als chinesisches Arzneimittel verwendet, jedoch war nichts darüber bekannt, welchen wesentlichen Bestandteil ^ oder welche wesentlichen Bestandteile sie enthielten.Long used as a Chinese medicine, however, nothing was known about which essential ingredient ^ or what essential components they contained.
Es gelang den Erfindern, aus den Rhizomen der Pflanze zwei neue Triterpene, die als Alisol A und Alisol B bezeichnet werden, und hinsichtlich der chemischen Struktur verwandt sind, und die jeweiligen Monoacetate zu isolieren. Die chemischen Strukturen dieser natürlich vorkommenden Tr!terpene wurden nun von der Anmelderin wie folgt geklärt:The inventors succeeded in producing two rhizomes of the plant new triterpenes, called Alisol A and Alisol B, which are related in terms of chemical structure, and to isolate the respective monoacetates. The chemical Structures of these naturally occurring terpenes have now been established clarified by the applicant as follows:
Alisol A: Formel (i), in der R1,-R2, R-5 und R4 für Wasserstoff atome stehen.Alisol A: Formula (i), in which R 1 , -R 2 , R- 5 and R 4 represent hydrogen atoms.
ι ρ ■ 2l Alisol A-monoacetat: Formel (i), in der R , R und R für ι ρ ■ 2l Alisol A monoacetate: Formula (i) in which R, R and R for
Wasserstoffatome stehen und R^ für einen Acetylrest steht.Are hydrogen atoms and R ^ is an acetyl radical.
Alisol B: Formel (II), in der R1 und R2 für Wasserstoffatome ™ stehen.Alisol B: Formula (II) in which R 1 and R 2 stand for hydrogen atoms ™.
Alisol B-monoacetat: Formel (II), in der R für ein Wasser-Alisol B-monoacetate: Formula (II), in which R stands for a water
p
stoffatom und R für eine Acetylgruppe steht.p
atom and R stands for an acetyl group.
Hauptgegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Umwandlung von Alisol-B-Verbindungen in A lisol-A-Verbindungen au:!1 chemischem Wege sowie ein Verfahren zur Herstellung von Alisol B und/oder seines 23-Monoacetats durch Extraktion der Pflanze Alismataceae oder deren verarbeitete Bestandteile.The main object of the invention is a process for converting Alisol-B compounds into Alisol-A compounds au :! 1 chemical route and a process for the production of Alisol B and / or its 23-monoacetate by extraction of the plant Alismataceae or their processed components.
Die Erfindung betrifft ferner neue und wertvolle Verbindungen, die mit Alisol A und Alisol B eng verwandt sind.The invention also relates to new and valuable compounds, which are closely related to Alisol A and Alisol B.
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Alisol B und sein 23-Monoacetat werden aus einer Pflanze der Gruppe Alismataceae oder deren verarbeiteten Bestandteile erhalten. Als Ausgangsmaterialien werden für dieses Verfahren Pflanzen der Gattung Alismataeeae verwendet, z.B. Sägittaria trifolia L.,Sägittaria Aginashi Makino, Sägittaria Pygmaea MIg., Alisma Plantago-aquatica L., Alisma Plantago L.var. Orientale Samueles, Alisma canaliculatum A.Br.et Bouche und Caldesia reniformis Makino. Die ganze Pflanze kann verwendet werden, jedoch werden im allgemeinen vorteilhaft die Rhizome gebraucht. Im allgemeinen ist es vorteilhaft, getrocknete und zerstoßene Materialien zu verwenden, jedoch sind auch frische Materialien geeignet.Alisol B and its 23-monoacetate are derived from a plant of the Alismataceae group or their processed components obtain. The starting materials used for this process Plants of the genus Alismataeeae are used, e.g. Sägittaria trifolia L., Sägittaria Aginashi Makino, Sägittaria Pygmaea MIg., Alisma Plantago-aquatica L., Alisma Plantago L.var. Orientale Samueles, Alisma canaliculatum A.Br.et Bouche and Caldesia reniformis Makino. Whole plant can be used, but rhizomes will generally be beneficial second hand. In general it is advantageous to use dried and crushed materials, but fresh ones are also possible Materials suitable.
Die erste Stufe des Verfahrens gemäß der Erfindung umfaßt die Extraktion der vorstehend genannten Materialien mit einem geeigneten Lösungsmittel. Bei Verwendung von Frischmaterial wird die Extraktion vorteilhaft in einem Homogenisator vorgenommen. The first stage of the method according to the invention comprises the Extraction of the above materials with a suitable solvent. When using fresh material, the extraction is advantageously carried out in a homogenizer.
Als Lösungsmittel für die Extraktion eignen sich beispielsweise Petroläther, Erdölbenzin, alicyclische oder aromatische Kohlenwasserstoffe, z.B. Gyclohexan, Benzol und Toluol, halogenierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Chloroform, Methylenchlorid und Tetrachlorkohlenstoff, Ester,z.B. Ithylacetat und Butylacetat, und Ketone, z.B./Methylethylketon und Methylisobutylketon, sowie Gemische von zwei oder mehreren dieser Lösungsmittel. Die besten Ergebnisse werden erhalten, wenn Chloroform als organisches Lösungsmittel verwendet wird.Examples of suitable solvents for the extraction are Petroleum ether, petroleum spirit, alicyclic or aromatic hydrocarbons, e.g. cyclohexane, benzene and toluene, halogenated hydrocarbons, e.g. chloroform, methylene chloride and carbon tetrachloride, esters, e.g. Ethyl acetate and butyl acetate, and ketones, e.g. / methyl ethyl ketone and methyl isobutyl ketone, and mixtures of two or more of these solvents. The best results are obtained when using chloroform is used as an organic solvent.
Nach der Extraktion wird das Lösungsmittel bei Normaldruck oder vermindertem Druck abdestilliert» wobei ein roher Extrakt erhalten wird. In dieser Stufe sind keine besonderen Vorsichtsmaßnahmen notwendig, weil die natürlich vorkommenden Alisolverbindungen ziemlich stabil sind.After the extraction, the solvent is at normal pressure or reduced pressure »being a crude extract is obtained. No special precautions are necessary at this stage because of the naturally occurring alisol compounds are pretty stable.
Der so erhaltene Extrakt enthält in überwiegender Menge Alisol B und sein 23-Monoacetat, insbesondere das letztere etwa inThe extract obtained in this way contains predominantly Alisol B and its 23-monoacetate, in particular the latter approximately in
% O 9 8 0 9 / 1 6 1 2 A ■ r. % O 9 8 0 9/1 6 1 2 A ■ r .
4ie 10-fachen Menge, im Vergleich zu Ali sol A und seinem 24--Monoacetat. Die beiden letztgenannten Verbindungen werden gleichzeitig mit Alisol B oder seinem 23-Monoacetat extrahiert. 4 times the amount compared to Ali sol A and its 24 - monoacetate. The latter two compounds are extracted simultaneously with Alisol B or its 23-monoacetate.
Es ist zu bemerken, daß der rohe Extrakt einer Behandlung zur Umwandlung der Alisol B-Verbindungen in Alisol A-Verbindungen unterworfen werden kann. Hierauf wird später ausführlich eingegangen. It should be noted that the crude extract was subjected to a treatment to convert the Alisol B compounds to Alisol A compounds can be subjected. This will be discussed in detail later.
TJm Alisol B und/oder sein 23-Monoacetat vom rohen Extrakt zu isolieren, wird der Extrakt der Adsorption oder Teilungschromatographie unter Verwendung eines geeigneten Adsorptionsmittels (Träger) unterworfen. Hierbei werden gewöhnlich sowohl Alisol B als auch sein 23-Monoacetat erhalten, Wenn die Pflanze der Gattung Alismataceae oder der rohe Extrakt mit einem geeigneten Verseifungsmittel behandelt wird, um die Abtrennung: der nicht verseifbaren neutralen Lipide davon zu erleichtern,/ .das 23-Monoacetat von Alisol B ebenfalls verseift und hierdurch in Alisol B umgewandelt und als Alisol B isoliert. In dieser Phase kann der Epoxydring in Alisol B je nach den Reaktionsbedingungen teilweise offen sein, wobei fast ausschließlich ein Epimeres von Alisol A (24~epi-Alisol A) gebildet wird, jedoch stört die gleichzeitige Anwesenheit von 24~epi-Alisol A nicht die anschließende Stufe der Reinigung von Alisol B, und das Epimere selbst kann gegebenenfalls durch Chromatographie auf die nachstehend beschriebene Weise isoliert werden.To isolate Alisol B and / or its 23-monoacetate from the crude extract, the extract is subjected to adsorption or partition chromatography using a suitable adsorbent (carrier). Usually both Alisol B as well as its 23-monoacetate can be obtained if the plant of the genus Alismataceae or the raw extract with a suitable one Saponification is treated to facilitate the separation: of the unsaponifiable neutral lipids of it, / .the 23-monoacetate of Alisol B is also saponified and thereby converted into Alisol B and isolated as Alisol B. In this phase, the epoxy ring in Alisol B can depending on the Reaction conditions are partially open, being almost exclusively an epimer of Alisol A (24 ~ epi-Alisol A) is formed however, the simultaneous presence of 24 ~ epi-Alisol A does not interfere with the subsequent purification stage from Alisol B, and the epimer itself can optionally be isolated by chromatography in the manner described below will.
Als Verseifungsmittel eignen sich beispielsweise Alkalihydroxyde oder -carbonate, insbesondere Natriumhydroxyd, Ealiumhydroxyd, Natriumbicarbonat, Kaliumbicarbonat, Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat und Gemische dieser Verbindungen.Suitable saponifying agents are, for example, alkali metal hydroxides or carbonates, in particular sodium hydroxide, potassium hydroxide, Sodium bicarbonate, potassium bicarbonate, sodium carbonate, potassium carbonate and mixtures of these compounds.
Als Adsorptionsmittel (Träger) für die chromatographische Behandlung eignen sich die üblicherweise für die Chromatographie verwendeten Materialien, z.B. Aluminiumoxyd, Silicagel, synthetisches Magnesiumsilicat (Plorisil), Kieselsäure, Aktivkohle, Hyfro-Supercel, Stärke, Diatomeenerde und Stärke-As an adsorbent (carrier) for the chromatographic treatment the materials commonly used for chromatography are suitable, e.g. aluminum oxide, silica gel, synthetic Magnesium silicate (Plorisil), silica, activated carbon, Hyfro-Supercel, starch, diatomaceous earth and starch
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filterpapier. Für die Großherstellung ist die Verwendung iron Silicagel, Aluminiumoxyd oder Aktivkohle zu empfehlen.filter paper. For large-scale production, the use is iron Silica gel, aluminum oxide or activated carbon are recommended.
Als Lösungsmittel, das als Entwickler "bei der Chromatographie gemäß der Erfindung dient, eignen sich beispielsweise Erdölbenzin, Äthyläther, Benzol, Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff, Methylenchlorid, Ithylaeetat, Aceton, Methanol, Äthanol und ji-Butanol sowie deren Gemische in verschiedenen Mengenverhältnissen. .As a solvent, that as a developer "in chromatography serves according to the invention, for example petroleum spirit, Ethyl ether, benzene, chloroform, carbon tetrachloride, Methylene chloride, ethyl acetate, acetone, methanol, ethanol and ji-butanol and mixtures thereof in various proportions. .
Die oben genannte chromatographische Behandlung wird vorteilhaft in mehreren Zyklen kontinuierlich oder abwechselnd durchgeführt. Palis erforderlich, wird zwischen jeweils zwei Zyklen eine Lösungsmittelbehandlung vorgenommen. Alisol B und sein 23-Monoacetat werden auf die vorstehend beschriebene Weise von der fettlöslichen Fraktion isoliert.The above-mentioned chromatographic treatment is advantageously carried out continuously or alternately in several cycles. Palis is required between every two cycles carried out a solvent treatment. Alisol B and its 23-monoacetate are prepared in the manner described above isolated from the fat-soluble fraction.
Durch Umkristallisation aus Äthylacetat wird Alisol B in Form von farblosen Prismen vom Schmelzpunkt 166 bis 168 C (gemessen auf einem Kofier—Block) erhalten. Es hat eine spezifische Drehung [a] ^p von +13O±7°(C=1,0, Chloroform). Es hat die Bruttoformel C^qBy recrystallization from ethyl acetate, Alisol B is measured in the form of colorless prisms with a melting point of 166 to 168 C ( on a Kofier pad). It has a specific one Rotation [a] ^ p of + 130 ± 7 ° (C = 1.0, chloroform). It has Gross formula C ^ q
Ebenso wie Alisol B kristallisiert sein 23-Monoacetat. Es bildet bei Umkristallisation aus Äthylacetat oder einem Gemisch von Äthylacetat und η-Hexan farblose Prismen vom Schmelzpunkt I 162 bis 164-0C (gemessen auf dem Kofier-Block) und hat eine spezifische Drehung Γα]Jp von +12ii6°(C=1,0, Chloroform).Just like Alisol B, its 23-monoacetate crystallizes. It forms with recrystallization from ethyl acetate or a mixture of ethyl acetate and η-hexane, colorless prisms, melting point I 162 164- 0 C (measured on the Kofler block) and has a specific rotation Γα] Jp of + 12ii6 ° (C = 1 , 0, chloroform).
Das auf diese Weise erhaltene Alisol B kann mit Hilfe geeigneter Acylierungsmittel beispielsweise zum Alisol B-23-monoacetat und/oder zum 11,23-Diacetat von Alisol B acyliert werden. Wenn das Acetat hergestellt werden soll, kann die Acetylierung zweckmäßig bei Raumtemperatur mit Essigsäureanhydrid in Pyridin oder auch mit Acetylchlorid in N,N-Dimethylformamid vorgenommen werden. The Alisol B obtained in this way can be acylated to Alisol B-23-monoacetate and / or to the 11,23-diacetate of Alisol B, for example, with the aid of suitable acylating agents. If the acetate is to be prepared, the acetylation can expediently be carried out at room temperature with acetic anhydride in pyridine or with acetyl chloride in N, N-dimethylformamide .
Alieol A und/oder sein 24-Monoaoetat, die im ursprünglichen Extrakt enthalten sind, können gegebenenfalls auch in der gleichen Weise wie Alisol B und sein Monoacetat aus anderenAlieol A and / or its 24 mono acetate, which are in the original Extract may also be included in the same way as Alisol B and its monoacetate from others
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Fraktionen isoliert werden, die gewöhnlich bei der Elution der Fraktionen anfallen, die Alisol B und/oder sein 23-Monoacetat enthalten. Das auf die vorstehend beschriebene Weise abgetrennte Alisol A und sein 24-Monoacetat fallen jedoch nur in geringer Menge an, weil diese Verbindungen im allgemeinen in unbedeutenden Mengen im Extrakt vorhanden sind.Fractions are isolated that usually occur upon elution of the fractions that contain Alisol B and / or its 23-monoacetate. This in the manner described above however, separated Alisol A and its 24-monoacetate only fall in small amounts because these compounds are generally present in insignificant amounts in the extract.
Angesichts ihrer hypoeh&esterinämischen Wirkung der Alisol A-Verbindungen ist es erwünscht, die Alisol B-Verbindungen in Alisol Α-Verbindungen umzuwandeln.Given their hypoeh & esterinemic effects of the Alisol A compounds it is desirable to convert the Alisol B compounds into Alisol Α compounds.
Gemäß der Erfindung wird die gewünschte Umwandlung vorgenommen, indem die Alisol B-Verbindungen mit einer Säure gewöhnlich in der Flüssigphase behandelt werden. Es ist zu bemerken, daß die Alisol B-Verbindungen nicht auf das na tür Ii eh. vorkommende Alisol B und sein 23-Monoaeetat beschränkt sind, sondern die durch die Formel (II) dargestellten Verbindungen umfassen.According to the invention, the desired conversion is carried out by usually converting the Alisol B compounds to an acid the liquid phase are treated. It should be noted that the Alisol B compounds do not apply to what is naturally occurring Alisol B and its 23-monoacetate are limited but include the compounds represented by the formula (II).
Als Säuren eignen sich für den Zweck beispielsweise Garbonsäuren, z.B. Ameisensäure, Essigsäure, Oxalsäure, Citronensäure, Benzoesäure, Hydroxybenzoesäuren Mineralsäuren, z.B. Schwefelsäure, Salzsäure, Phosphorsäure und Sulfonsäuren, z.B. p-Toluolsulfonsäure und Benzolsulfonsäure. Lewis-Säuren, z.B. Bortrifluorid und Aluminiumchlorid, können im allgemeinen ebenfalls verwendet werden. Die besten Ergebnisse werden mit Schwefelsäure erhalten. Die genannten Säuren können allein oder in Kombination verwendet werden.Suitable acids for the purpose are, for example, carboxylic acids, e.g. formic acid, acetic acid, oxalic acid, citric acid, Benzoic acid, hydroxybenzoic acids, mineral acids, e.g. Sulfuric acid, hydrochloric acid, phosphoric acid and sulfonic acids such as p-toluenesulfonic acid and benzenesulfonic acid. Lewis acids, e.g. Boron trifluoride and aluminum chloride can also generally be used. The best results will be obtained with sulfuric acid. The acids mentioned can be used alone or in combination.
Das Verfahren gemäß der Erfindung wird vorzugsweise in Gegenwart eines Lösungsmittels durchgeführt. Geeignet sind die verschiedenen Äther, z.B. Ithyläther, Dioxan, Tetrahydrofuran und Äthylenglykoldimethyläther, niedere Alkohole, z.B. Methanol und Äthanol, aromatische Kohlenwasserstoffe, z.B. Benzol und Toluol, und halogenierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Chloroform, Methylenohlorid und Tetrachlorkohlenstoff. Außer den vorstehend genannten Lösungsmitteln können saure Lösungsmittel, wie Ameisensäure und Essigsäure, vorteilhaft verwendet werden, da sieThe method according to the invention is preferably carried out in the presence carried out a solvent. They are suitable various ethers, e.g. ethyl ether, dioxane, tetrahydrofuran and ethylene glycol dimethyl ether, lower alcohols, e.g. methanol and ethanol, aromatic hydrocarbons such as benzene and toluene, and halogenated hydrocarbons such as chloroform, Methylene chloride and carbon tetrachloride. Except for the ones above Said solvents, acidic solvents such as formic acid and acetic acid can be used advantageously because they
gleichzeitig als Lösungsmittel und als Säure, die gemäß der Erfindung zu.verwenden ist, wirksam sind. Diese Lösungsmittel können auch in Mischung mit geeigneten Wassermengen verwendet werden.at the same time as a solvent and as an acid, which according to the Invention to.use is effective. These solvents can also be used in admixture with suitable amounts of water will.
Die Reaktion wird gewöhnlich bei Raumtemperatur (etwa 18 bis 300C) oder bei erhöhter Temperatur (etwa 30 bis 900O) durchgeführt. Die optimale Temperatur variiert mit den verschiedenen Arten von Ausgangsmaterialien, Lösungsmitteln, Säuren und anderen Bedingungen. Die Reaktion ist gewöhnlich in etwa 0,5 bis 1,5 Stunden beendet.The reaction is usually carried out at room temperature (about 18 to 30 ° C.) or at an elevated temperature (about 30 to 90 ° C.). The optimum temperature varies with the various kinds of raw materials, solvents, acids and other conditions. The reaction is usually complete in about 0.5 to 1.5 hours.
Die als Produkt gewünschten Alisol Α-Verbindungen werden aus dem Reaktionsgemisch durch übliche Reinigungsmethoden isoliert. Beispielsweise wird Wasser zum Reaktionsgemisch gegeben und die "Fällung, die sich aus dem Gemisch abscheidet, abfiltriert» Nach einer anderen Methode wird das Reaktionsprodukt extrahiert, indem mit einem geeigneten organischen Lösungsmittel, das mit Wasser nicht mischbar ist, z.B. Benzol, Äthylacetat oder Chloroform, ausgeschüttelt wird.The Alisol Α compounds desired as a product are made from isolated from the reaction mixture by customary purification methods. For example, water is added to the reaction mixture and the "precipitate that separates out of the mixture is filtered off" According to another method, the reaction product is extracted by using a suitable organic solvent, that is immiscible with water, e.g. benzene, ethyl acetate or chloroform, is extracted.
Die so erhaltenen Alisol Α-Verbindungen können durch Umkristallisation oder durch Adsorption oder Teilungschromatographie auf die vorstehend im Zusammenhang mit der Isolierung der natürlich vorkommenden Alisol B-Verbindungen beschriebene Weise direkt gereinigt werden. Im letzteren Fall können als Adsorptionsmittel (Träger) die oben genannten Materialien verwendet werden, aber in diesem Fall wird Silicagel besonders bevorzugt·The Alisol Α compounds obtained in this way can by recrystallization or by adsorption or partition chromatography on the above in connection with the isolation of the natural occurring Alisol B compounds can be cleaned directly. In the latter case can be used as an adsorbent (Carrier) the above materials can be used, but in this case silica gel is particularly preferred
Auf diese Weise wird beispielsweise reines Alisol A als farbloses Pulver erhalten. Die Verbindung hat eine spezifische Drehung [a] ^6 von +100i5°0(0=1,0, Chloroform). Reines 24-Monoacetat von Alisol A bildet farblose Prismen vom Schmelzpunkt 194 bis 196°C (gemessen auf dem Kofier Block) und hat eine spezifische Drehung ja] ^ von +86-^5°(0=1,0, Chloroform).In this way, for example, pure Alisol A is obtained as a colorless powder. The compound has a specific rotation [a] ^ 6 of + 100i5 ° 0 (0 = 1.0, chloroform). Pure 24-monoacetate from Alisol A forms colorless prisms with a melting point of 194 to 196 ° C (measured on the Kofier block) and has a specific rotation of + 86- ^ 5 ° (0 = 1.0, chloroform).
Es ist bemerkenswert, daß diese Umwandlung mit Säuren das Ringsystem der Ali so !verbindungen im allgemeinen nicht beeinträchtigt und die Stereochemie an der 24-Stellung der Alisol B-It is noteworthy that this conversion with acids generally does not affect the ring system of the ali so! Compounds and the stereochemistry at the 24-position of the Alisol B-
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Ausgangsverbindungen in den gebildeten Alisol-A-Verbindungen unverändert bleibt.Starting compounds in the formed Alisol-A compounds remains unchanged.
Während der Umwandlungsreaktion können jedoch einige Änderungen bei den Substituenten zwischen Alisol B-Verbindungen (II) und Alisol Α-Verbindungen (i) an den Stellungen 11 und sowie an den Stellungen 24 und 25 eintreten, an denen die Epoxygruppe in den Alisol B-Verbindungen unter Bildung von zwei sauerstoffhaltigen Gruppen in den Alisol A-Verbindungen geöffnet wird. Beispielsweise wandert die Acylgruppe an der 2>-Stellung zur 24-Stellung, wie es der Fall ist, wenn das 235-Monoacetat von Alisol B in das 24-Monoacetat von Alisol A umgewandelt wird.However, some changes may occur during the conversion reaction for the substituents between Alisol B compounds (II) and Alisol Α compounds (i) in positions 11 and as well as at positions 24 and 25, at which the epoxy group in the Alisol B compounds with the formation of two oxygen-containing groups in the Alisol A compounds is opened. For example, the acyl group at the 2> position migrates to the 24 position, as is the case when the Alisol B 235 monoacetate to Alisol A 24 monoacetate is converted.
Ein weiteres Beispiel der Änderungen, die bei den Substituenten eintreten, ist der Fall, in dem Alisol B in Essigsäure erhitzt wird. Hierbei wird die entsprechende Acyloxygruppe an der 24-Stellung der Alisöl-A-Verbindung eingeführt.Another example of the changes that occur in the substituents is the case where Alisole B is in acetic acid is heated. Here, the corresponding acyloxy group is introduced at the 24-position of the alis oil A compound.
Ein weiteres interessantes Beispiel einer.solchen Modifikation in den Substituenten ist der Fall, in dem die Alisol B-Verbindung mit der Säure in einem niederen aliphatischen Keton, z.B. Aceton oder Methyläthylketon, zusammengeführt wird. Hierbei wird die gebildete Alisol Α-Verbindung als 23,24-Ketonid oder, wenn die 2j5-Stellung durch eine Acyloxygruppe besetzt ist, als 24,25-Ketonid erhalten. Für die Herstellung des Ketonids eignen sich die gleichen Säuren, die vorstehend im Zusammenhang mit der allgemeinen Umwandlung genannt wurden, jedoch werden vorzugsweise beispielsweise Schwefelsäure, p-Toluolsulfonsäure und Lewis-Säuren, wie Bortrifluorid, verwendet. Von den Ketonen ist Aceton am vorteilhaftesten.Another interesting example of such a modification in the substituents is the case in which the alisole B compound with the acid in a lower aliphatic ketone, e.g. acetone or methyl ethyl ketone. Here the formed Alisol Α-compound is called 23,24-ketonide or, if the 2j5-position is occupied by an acyloxy group, obtained as 24,25-ketonide. For the production of the Ketonids are the same acids that have been mentioned above in connection with the general conversion, however, sulfuric acid, p-toluenesulfonic acid, and Lewis acids such as boron trifluoride, for example, are preferably used. Of the ketones, acetone is the most beneficial.
Eine Alisol B-Verbindung wird beispielsweise in Aceton oder einem Gemisch von Aceton und üblichen Lösungsmitteln, wie Chloroform und Methylenchlorid, gelöst oder suspendiert, worauf die SgUre zugesetzt wird. Die Reaktion wird 10 bis Minuten bei Raumtemperatur durchgeführt. Das erhaltene Ketonid läßt sich durch Behandlung mit einer Säure in einem wäßrigen Medium leicht in die entsprechende vic. DihydroxyverbindungAn Alisol B compound is for example in acetone or a mixture of acetone and common solvents such as Chloroform and methylene chloride, dissolved or suspended, whereupon the SgUre is added. The response will be 10 to Performed minutes at room temperature. The ketonide obtained can easily be converted into the corresponding vic by treatment with an acid in an aqueous medium. Dihydroxy compound
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umwandeln. Die Bildung des Ketonids stellt ferner einen vorteilhaften Weg für die Herstellung der Alisol Α-Verbindungen aus den Alisol B-Verbindungen dar. Beispielsweise ist es möglieh, das so erhaltene Alisol A(23,24-)-acetonid oder das 23-Monoacetat von Alisol A(24,25)-acetonid in einem wässrigen Medium in Gegenwart der oben genannten Säure in Alisol A bzw. dessen 24—Monoacetat umzuwandeln.convert. The formation of the ketonide is also advantageous Way for making the Alisol Α connections from the Alisol B compounds. For example, it is possible the thus obtained Alisol A (23,24 -) - acetonide or the 23-monoacetate of Alisol A (24.25) acetonide in an aqueous Medium in the presence of the above-mentioned acid in Alisol A or to convert its 24-monoacetate.
Wie bereits erwähnt, zeigen die erfindungsgemäßen Alisolverbindungen eine bemerkenswerte hypocholesterinämische Wirkung.As already mentioned, the alisol compounds according to the invention show a remarkable hypocholesterolemic effect.
Versuchattempt
Hypocholesterinämische Wirkung von ALMA (Alisol A-24—monoacetat) bei Ratten, die eine atherogene Diät erhielten.Hypocholesterolemic Effects of ALMA (Alisol A-24-monoacetate) in rats given an atherogenic diet.
Männliche Ratten vom Stamm Weanling SD-JCL/T, die ein Gewicht von etwa 100 g hatten, wurden in Gruppen von je 5 Tieren eingeteilt. Die Tiere wurden einzeln in sauberen Metallkäfigen untergebracht und erhielten eine atherogene Diät (Diät B), die 1% Cholesterin und 0,2$ Natriumcholat mit bzw. ohne Testverbindung enthielt + . Die Testverbindung wurde nach Auflösung in Diäthyläther oder Äthanol mit dem Futter gemischt. Nach 10 Tagen wurden die Ratten getötet, worauf unmittelbar das Blutplasma und die Leber entnommen wurden. Das Gesamtcholesterin im Plasma und in der Leber wurde mit einem Autoanalysator bzw. durch die Liebermann-Burchard-Reaktion bestimmt.Male rats of the Weanling SD-JCL / T strain, weighing about 100 g, were divided into groups of 5 animals each. The animals were housed individually in clean metal cages and received an atherogenic diet (Diet B) containing 1% cholesterol and 0.2% sodium cholate with and without test compound + . The test compound was mixed with the feed after dissolution in diethyl ether or ethanol. After 10 days, the rats were sacrificed, after which the blood plasma and the liver were immediately removed. The total cholesterol in the plasma and in the liver was determined with an autoanalyzer or by the Liebermann-Burchard reaction.
Die starke hypocholesterinämische Wirkung von ALMA bei verschiedenen Dosen ergibt sich aus den Werten in Tabelle 1. Trotz der Verfütterung einer verhältnismäßig großen Menge Cholesterin (Λ% im Futter) übte bereits eine ALMA-Menge von nur ein Zehntel oder weniger des Cholesteringewichts eine deutliche hypocholesterinämische Wirkung aus, erkennbar an der Verminderung des Gesamtcholesterine im Blutplasma und des C/P-Verhältnisses sowie an der Verbesserung des Lipidbildes der Leber.The strong hypocholesterolemic effect of ALMA at different doses can be seen from the values in Table 1. Despite the feeding of a relatively large amount of cholesterol (Λ% in the feed), an ALMA amount of only one tenth or less of the cholesterol weight exerted a marked hypocholesterolemic effect out, recognizable by the reduction of the total cholesterol in the blood plasma and the C / P ratio as well as by the improvement of the lipid picture of the liver.
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End- Futter- Leberkörper- auf- gege- nähme, wicht
wicht, g/Eatte/ in %
g Tag des Körperge wichtsEnd feed liver body ingested weight
weight, g / weight / in%
g day of body weight
Ge- Phos- C/P* Tri-Ge Phos- C / P * Tri-
samt- pho- gly-velvet- pho- gly-
chole- Ii- öerid sterin pidchole- Ii- öerid sterin pid
Leberlipide (g/100 g)Liver lipids (g / 100 g)
Rohes Gesamt- Phospho-Fett chole- lipid sterinRaw total phospho-fat cholelipid sterol
139137
139
11,911.8
11.9
7,176.63
7.17
187266
187
166144
166
1,131.84
1.13
6647 "
66
7,909.41
7.90
1,862.37
1.86
2,092.18
2.09
tiere
ALMA. 0,0125%Comparison
animals
ALMA. 0.0125%
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Ge samt choIe sterin/Pho spholipidTotal choIe sterol / Pho spholipid
Versuch 2Attempt 2
ALMA, Alisol A, Alisol B-23-monoacetat und Alisol B wurden auf ihre Wirkung "bezüglich der Verminderung der gesteigerten Lipide im Blutplasma und in der Leber bei einer Dosis von 0,1% in der Diät (etwa 90 mg/kg Körpergewicht) im Vergleich zu ß-Sitosterol (ß-Sit), Cholestan-Triol (GT) und p-Chlorphenoxyisobuttersäure (GPIB), die als Mittel zur Senkung des Cholesterinspiegels bekannt und.weitgehend angewendet werden, untersucht. Die Ergebnisse sind in Tabelle 2 als prozentuale Wirksamkeit angegeben, die nach der folgenden Formel berechnet wurde:ALMA, Alisol A, Alisol B-23 monoacetate, and Alisol B were on their effect "in terms of reducing the increased Lipids in the blood plasma and in the liver at a dose of 0.1% in the diet (about 90 mg / kg body weight) in comparison to ß-sitosterol (ß-sit), cholestane triol (GT) and p-chlorophenoxyisobutyric acid (GPIB), which are known and widely used as a means of lowering cholesterol levels examined. The results are shown in Table 2 as percentages Efficacy indicated, calculated according to the following formula became:
C-T C: Wert der VergleichsgruppeC-T C: value of the comparison group
Wirksamkeit (%)= χ 100 N: Wert der normalen GruppeEffectiveness (%) = χ 100 N: value of the normal group
- G-N Τ: Wert der behandelten Gruppe.- G-N Τ: value of the treated group.
chole
st er in/
Phospho-
lipid im
PlasmaTotal-
chole
is he in /
Phospho-
lipid im
plasma
fettliver
fat
chole-
sterin
in der
LeberTotal-
chole-
sterol
in the
liver
23-monoacetatAlisol B- 0.1%
23-monoacetate
chole-
sterin
im
PlasmaTotal-
chole-
sterol
in the
plasma
Die Ergebnisse zeigen, daß ALMA sowie einige andere Verbindungen gemäß der Erfindung eine stärkere Wirkung hinsichtlich der Senkung des Oholesteringehaltes haben als die bekannten Verbindungen.The results show that ALMA as well as some other compounds according to the invention have a stronger effect in terms of lowering the Oholesterin content than the known compounds.
Eines der Merkmale der Alisolverbindungen ist ihre niedrige Toxizität. Beispielsweise hat ALMA eine LD1-Q von mehr alsOne of the characteristics of the alisol compounds is their low toxicity. For example, ALMA has an LD 1 -Q greater than
209809/1615209809/1615
5100 mg/kg bei oraler Verabfolgung an Mäuse.5100 mg / kg when administered orally to mice.
Wenn die Verbindungen gemäß der Erfindung zur Behandlung oder Verhütung von S^§ffeolesterinämie verwendet werden, beträgt die orale Tagesdosiß gewöhnlich etwa 0,5 bis 2 g, vorzugsweise etwa 1 g bei ErwachsenemWhen the compounds according to the invention are used for the treatment or prevention of sffeolesterolemia, the oral daily dose is usually about 0.5 to 2 g, preferably about 1 g for adults
Die Verbindungen können allein oder in Kombination mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger oder zusammen mit anderen Medikamenten mit oder ohne anderen pharmazeutisch unbedenklichen Träger verabfolgt werden. Die Verbindungen werden in jedem Fall als Pulver, Tabletten, Kapseln, Sirupe, Lösungen usw. oral gegeben. Die Wahl des Trägers hängt von der bevorzugten Darreichungsform, der Löslichkeit der Verbindungen und der jeweiligen örtlichen pharmazeutischen Praxis ab.The compounds can be used alone or in combination with a pharmaceutically acceptable carrier or together with others Medicines with or without other pharmaceutically acceptable ones Carriers are administered. The compounds are always available as powders, tablets, capsules, syrups, solutions etc. given orally. The choice of carrier depends on the preferred dosage form and the solubility of the compounds and the respective local pharmaceutical practice.
Bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung werden in folgenden Beispielen beschrieben.Preferred embodiments of the invention are described in the following examples.
2 kg des Ehizoms von Alisma Plantago-aquatica L. werden gemahlen und zweimal mit je 5 1 Chloroform jeweils 4 Stunden extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt und das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 110 g eines dunkelbraunen Öls zurückbleiben. Dieses öl wird in 1 1 Benzol gelöst und die erhaltene Lösung der Säulenchromatographie unter Verwendung von 320 g Kieselgel unterworfen. Die Säule wird zuerst mit 4· 1 Benzol eluiert. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels werden 48 g einer Fraktion (I) erhalten, die überwiegend aus einem höheren Fettsäureester besteht·2 kg of the ehizome of Alisma Plantago-aquatica L. are ground and extracted twice with 5 l of chloroform each time for 4 hours. The extracts are combined and the solvent is distilled off, 110 g of a dark brown oil remaining. This oil is dissolved in 1 1 of benzene and the obtained solution was subjected to column chromatography using 320 g of silica gel. The pillar comes first eluted with 4 x 1 benzene. After evaporation of the solvent, 48 g of a fraction (I) are obtained, which predominantly consists of consists of a higher fatty acid ester
Die Säule wird dann mit 2,4 1 eines Gemisches von Benzol und Chloroform (3*1)» 3.1 Chloroform und 1 1 eines Gemisches von Chloroform und Äthylacetat (1s1) eluiert. Die Eluate werden vereinigt und die Lösungsmittel abdestilliert, wobei 43 g einer braunen öligen Substanz (Fraktion II) zurückbleiben.The column is then with 2.4 1 of a mixture of benzene and chloroform (3 * 1) »3.1 chloroform and 1 1 of a mixture of Chloroform and ethyl acetate (1s1) eluted. The eluates are combined and the solvents were distilled off, 43 g of a brown oily substance (fraction II) remaining.
209609/1612.209609/1612.
Die Säule wird weiter mit 1,5 1 Äthylacetat und dann mit 2 1 Aceton eluiert, wobei 20 g eines gelben öligen Produkts (Fraktion III) erhalten werden.The column is further with 1.5 1 ethyl acetate and then with 2 1 Acetone eluted to give 20 g of a yellow oily product (Fraction III).
Die .Fraktion II wird in 200 ml Benzol gelöst und auf eine Säule gegeben, die mit 300 kg Kieselgel gefüllt ist. Die Säule wird zuerst mit 2,1 1 eines Gemisches von Benzol und Aceton (20:1) eluiert, wobei 17 g einer öligen Substanz erhalten werden. Dann wird beim Durchgang eines Gemisches von Benzol und Aceton (10:1) das 23-Monoacetat von Alisol B durch Elution abgetrennt. Das Lösungsmittel wird von dem das Alisol :B-23-monoacetat enthaltende Eluat (800 ml) abdestilliert, wobei 8,1 g eines gelben öligen Produkts zurückbleiben. Das öl wird an einem kalten Ort stehengelassen, wobei sich Kristalle abscheiden, die abfiltriert (Ausbeute 1,1 g) und in einer geringen Menge Äthylacetat gelöst und dann mit η-Hexan versetzt werden. Die Lösung wird stehengelassen, wobei sich, reines 23-Monoacetat von Alisol B in Form von farblosen Prismen abscheidet, die bei 162 bis 164-0C. schmelzen.The fraction II is dissolved in 200 ml of benzene and placed on a column filled with 300 kg of silica gel. The column is first eluted with 2.1 liters of a mixture of benzene and acetone (20: 1) to obtain 17 g of an oily substance. Then, when a mixture of benzene and acetone (10: 1) has passed through, the 23-monoacetate is separated from Alisol B by elution. The solvent is distilled off from the eluate (800 ml) containing the alisol: B-23 monoacetate, leaving 8.1 g of a yellow oily product. The oil is left to stand in a cold place, whereupon crystals separate out, which are filtered off (yield 1.1 g) and dissolved in a small amount of ethyl acetate, and then η-hexane is added. The solution is allowed to stand, whereby, deposited pure 23-monoacetate of Alisol B in the form of colorless prisms, melting at 164- 162 0 C..
[a]jp+1210 (0=1,0, Chloroform).[a] jp + 121 0 (0 = 1.0, chloroform).
Elementaranalyse: C HElemental analysis: C H
Berechnet für C52H50Oc: 74,67 9,79Calculated for C 52 H 50 Oc: 74.67 9.79
Gefunden: 74,81 9,71 * Found: 74.81 9.71 *
Die Fraktion III (20g) wird in 200 ml Athylacetat gelöst. Die Losung wird durch eine Säule von 50 g chromatographischer Aktivkohle gegeben. Die Säule wird mit 2 1 Ithylacetat eluiert, wobei 15 g Eluat (gelbe ölige Substanz) erhalten werden.Fraction III (20 g) is dissolved in 200 ml of ethyl acetate. the Solution is chromatographic through a column of 50 g Given activated charcoal. The column is eluted with 2 l of ethyl acetate, whereby 15 g of eluate (yellow oily substance) are obtained.
Die Säulenchromatographie wird dann unter Verwendung von 320 g Kieselgel vorgenommen. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (7t1) eluiert. Beim ersten Durchgang von 500 ml des Lösungsmittelgemisches wird 1 g einer gelben öligen Fraktion entfernt. Beim weiteren Durchgang von 1 1 des Losungsmittelgemisch.es werden 1,1 g einer Alisol B-Fraktior eluiert. Die letztgenannte Fraktion wird erneut mit einer Säule von 20 g Kieselgel chromatographiert· Die Säule wird Column chromatography is then carried out using 320 g of silica gel. The column is eluted with a mixture of benzene and acetone (7t1). In the first pass of 500 ml of the solvent mixture, 1 g of a yellow oily fraction is removed. 1.1 g of an Alisol B fraction are eluted during the further passage of 1 liter of the solvent mixture. The latter fraction is chromatographed again with a column of 20 g of silica gel . The column is
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mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (5:1) eluiert, wobei 240 mg Alisol B erhalten werden. Durch Umkristallisation aus Äthylacetat werden, farblose Prismen vom Schmelzpunkt 166 bis 1680C gebildet, [α] ψ +130° (0-1,0, Chloroform).eluted with a mixture of benzene and acetone (5: 1) to give 240 mg of Alisol B. Colorless prisms by recrystallization from ethyl acetate, made of melting point 166 to 168 0 C, [α] ψ + 130 ° (0-1.0, chloroform).
Elementaranalyse: Berechnet für C,q] Gefunden:Elemental analysis: calculated for C, q] Found:
100 g des dunkelbraunen Öls, das aus Alisma Plantago-aquatica P- L. durch die in Beispiel 1 beschriebene erste Extraktion mit Chloroform erhalten wurde, werden 4 Stunden zusammen mit 1 1 Methanol, 200 ml Wasser und 40 g wasserfreiem Kaliumcarbonat am Rückfluß erhitzt. Ein größerer Teil des Methanols wird durch Destillation entfernt. Zum Rückstand werden 800 ml Wasser gegeben. Das Gemisch wird zweimal durch Ausschütteln mit je 800 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschichten werden vereinigt, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 30 g eines braunen, nicht verseifbaren, neutralen Lipids zurückbleiben.100 g of the dark brown oil obtained from Alisma Plantago-aquatica P- L. by the first extraction described in Example 1 with Chloroform was obtained, 4 hours together with 1 1 Methanol, 200 ml of water and 40 g of anhydrous potassium carbonate are heated under reflux. A larger part of the methanol becomes removed by distillation. 800 ml of water are added to the residue. The mixture is shaken twice extracted with 800 ml of ethyl acetate each time. The ethyl acetate layers are combined, washed with water and dried. That Solvent is distilled off, whereby 30 g of a brown, non-saponifiable, neutral lipids remain.
Dieses nicht verseifbare neutrale Lipid wird auf eine Kolonne gegeben, die mit 60 g chromatographischer Aktivkohle gefüllt P ist. Die Säule wird dreimal mit je 1,2 1 Benzol eluiert, wobei die Fraktionen I, II und III im Gewicht von 16,5 S, 4,5 g bzw. 1,1 g erhalten werden. Durch weitere Elution der Säule mit Äthylacetat wird eine Fraktion erhalten, die Alisol A enthält.This non-saponifiable, neutral lipid is applied to a column which is filled with 60 g of chromatographic activated carbon P is. The column is eluted three times with 1.2 l of benzene each time, with the fractions I, II and III in the weight of 16.5 S, 4.5 g and 1.1 g, respectively. Further elution of the column with ethyl acetate gives a fraction which is Alisol A contains.
Die Fraktionen II und III werden vereinigt und der Säulenchromatographie mit 150 g Kieselgel unterworfen. Beim ersten Durchlauf von 1 1 eines Gemisches von Benzol und Aceton (10:1) werden 1,2 g einer gelben öligen Substanz abgetrennt, Beim anschließenden Durchgang von 1,1 1 eines Gemisches von Benzol und Aceton (7:1) werden 2,6, g einer Fraktion, die Alisol B enthält, als gelbes öl erhalten. Diese Alisol B-Fraktion wird mit 20 g Kieselgel auf die in Beispiel 1 beschriebene Weise chromatographiert, wobei Alisol B (2,0 g) isoliert wird.The fractions II and III are combined and the column chromatography subjected to 150 g of silica gel. On the first run of 1 1 of a mixture of benzene and acetone (10: 1) 1.2 g of a yellow oily substance are separated, with the subsequent passage of 1.1 l of a mixture of benzene and acetone (7: 1), 2.6 g of a fraction containing Alisol B are obtained as a yellow oil. This Alisol B fraction will Chromatographed with 20 g of silica gel in the manner described in Example 1, Alisol B (2.0 g) being isolated.
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Durch Umkristallisation aus Äthylacetat werden farblose Prismen vom Schmelzpunkt 166 bis 1680C erhalten.Recrystallization from ethyl acetate colorless prisms of melting point 166 to 168 0 C.
1,3 kg der aus dem Rhizom von Alisma Plantago-aquatica L.var. Orientale Samuels,erhaltenen neutralen Lipidfraktion wird an einer Säule von 2,6 kg Aktivkohle chromatographiert. Die Säule wird mit Benzol, Äthylacetat und einem Gemisch von Äthylacetat und Methanol (1:1) eluiert, wobei eine Fraktion I (950 g), eine Fraktion II (235 g) und eine Fraktion III (63 g) erhalten werden»1.3 kg of the from the rhizome of Alisma Plantago-aquatica L.var. Oriental Samuels, obtained neutral lipid fraction is chromatographed on a column of 2.6 kg of activated carbon. the Column is eluted with benzene, ethyl acetate and a mixture of ethyl acetate and methanol (1: 1), a fraction I (950 g), a fraction II (235 g) and a fraction III (63 g) are obtained »
Die Fraktion I wird an einem kühlen Ort stehengelassen, wobei sich Kristalle abscheiden, die abfiltriert und mit einem Gemisch von η-Hexan und Äthylacetat (8:1) gewaschen werden, wobei rohe Kristalle erhalten werden. Die Kristalle werden erneut an einer Säule von 500 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (10:1) eluiert, wobei 30 g farblose Kristalle des 23-Monoacetats von Alisol B erhalten werden.Fraction I is left to stand in a cool place, whereupon crystals separate out, which are filtered off and mixed with a mixture washed by η-hexane and ethyl acetate (8: 1) to obtain crude crystals. The crystals will be chromatographed again on a column of 500 g of silica gel. The column is filled with a mixture of benzene and acetone (10: 1) eluted, whereby 30 g of colorless crystals of 23-monoacetate of Alisol B can be obtained.
Durch Umkristallisation aus einem Gemisch von η-Hexan und Aceton werden 22 g reine Kristalle von Alisol B-23-monoacetat vom Schmelzpunkt 162 bis 1640C erhalten.Recrystallization from a mixture of η-hexane and acetone, 22 g of pure crystals of Alisol be B-23-monoacetate of melting point 162 to 164 0 C obtained.
Umwandlung von Alisol B-Verbindungen in Alisol A-Verbindungen " Conversion of Alisol B connections into Alisol A connections "
Alisol B (500 mg) wird in einem Gemisch von 2 ml Dioxan und 1 ml Wasser gelöst. Zur Lösung werden 100 mg p-Toluolsulfonsäure gegeben. Das Gemisch wird 1 Stunde bei Raumtemperatur stehengelassen. Zum Reaktionsgemisch werden 30 ml Wasser gegeben. Alisol B (500 mg) is dissolved in a mixture of 2 ml of dioxane and 1 ml of water. 100 mg of p-toluenesulfonic acid are added to the solution given. The mixture is 1 hour at room temperature ditched. 30 ml of water are added to the reaction mixture.
Das wässrige Gemisch wird zweimal mit ge 20 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatextrakte werden vereinigt, zweimal mit je 20 ml Wasser gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 480 mg eines farblosen, sirupartigen Rückstandes erhalten werden, der überwiegend Alisol A enthält.The aqueous mixture is washed twice with 20 ml of ethyl acetate extracted. The ethyl acetate extracts are combined, washed twice with 20 ml of water each time and dried. The solvent is distilled off, 480 mg of a colorless, syrupy residue being obtained, which is predominantly Alisol A contains.
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Durch Chromatographie des rohen Produkts an einer Säule von 35 g Kieselgel unter Verwendung eines Gemisches von Benzol und Aceton (3:1) als Elutionsmittel und Abdampfen des Lösungsmittels von dem das Alisol A enthaltenden Eluat (550 ml) werden 300 mg reines Alisol A als farbloses Pulver erhalten. [α]2/1 +99° (0=1,0, Chloroform).Chromatography of the crude product on a column of 35 g of silica gel using a mixture of benzene and acetone (3: 1) as the eluent and evaporation of the solvent from the eluate containing the alisol A (550 ml) gives 300 mg of pure Alisol A as colorless Powder received. [α] 2/1 + 99 ° (0 = 1.0, chloroform).
Eine Lösung von 300 mg des 23-Monoacetats von Alisol B in einem Gemisch von 0,8 ml Eisessig und 0,3 ml Wasser wird 2 Stunden bei 700C gehalten. Zum Reaktionsgemisch werden 10 ml Wasser gegeben. Das wässrige Gemisch wird dreimal mit je 20 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt und zweimal mit je 20 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen wird das Lösungsmittel abdestilliert, wobei 280 mg einer blaßgelben öligen Substanz zurückbleiben. Ein Tropfen Äthylacetat wird zur öligen Substanz gegeben, die dann stehengelassen wird, wobei sich farblose Kristalle abscheiden, die abfiltriert und mit einer geringen Menge Äthylacetat gewaschen werden. Hierbei werden 170 mg Kristalle erhalten. Durch Umkristallisation aus Aceton werden 95 mg reines 24-Monoacetat von Alisol A vom Schmelzpunkt 194- bis 19,60C erhalten. 25 A solution of 300 mg of the 23-monoacetate of Alisol B in a mixture of 0.8 ml of glacial acetic acid and 0.3 ml of water for 2 hours at 70 0 C is maintained. 10 ml of water are added to the reaction mixture. The aqueous mixture is extracted three times with 20 ml of ethyl acetate each time. The extracts are combined and washed twice with 20 ml of water each time. After drying, the solvent is distilled off, leaving 280 mg of a pale yellow oily substance. A drop of ethyl acetate is added to the oily substance, which is then left to stand, whereupon colorless crystals separate out, which are filtered off and washed with a small amount of ethyl acetate. 170 mg of crystals are obtained here. Recrystallization from acetone to get 24-monoacetate of Alisol A melting point of 194- to 19.6 0 C 95 mg pure. 25th
Eine Lösung von 30 g Alisol B in 30 ml Eisessig wird 4-5 Minuten auf 800C erhitzt. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck abdestilliert. Zum Rückstand werden 100 ml Äthylacetat gegeben. Das Gemisch wird über Nacht stehengelassen, wobei sich farblose Kristalle abscheiden, die abfiltriert und mit einer geringen Menge Äthylacetat gewaschen werden, wobei 12 g 24-Monoacetat von Alisol A erhalten werden.A solution of 30 g Alisol B in 30 ml of glacial acetic acid is heated for 4-5 minutes at 80 0 C. The solvent is distilled off under reduced pressure. 100 ml of ethyl acetate are added to the residue. The mixture is left to stand overnight, colorless crystals separating out, which are filtered off and washed with a small amount of ethyl acetate, 12 g of 24-monoacetate from Alisol A being obtained.
Das Filtrat wird mit der Waschflüssigkeit vereinigt und das Lösungsmittel abdestilliert. Der Rückstand wird mit einer Säule von 280 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wirdThe filtrate is combined with the washing liquid and that Solvent distilled off. The residue is chromatographed on a column of 280 g of silica gel. The pillar will
mit 4 1 eines Gemisches von Benzol und Aceton (20:1.) und dann mit 3,2 1 eines Gemisches von Benzol und Aceton (7:1) eluiert, wobei eine !Traktion von 2,5 g und eine Fraktion von 8g abgetrennt werden. Die Säule wird dann mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (5*1) eluiert, wobei 10 g einer Fraktion erhalten werden, die das 24-Monoacetat von Alisol A enthält. Eine Behandlung dieser Fraktion mit Äthylacetat ergibt 6 g 24-Monoacetat von Alisol A. Die Gesamtausbeute "beträgt 18 g.eluted with 4 l of a mixture of benzene and acetone (20: 1.) and then with 3.2 l of a mixture of benzene and acetone (7: 1), where a traction of 2.5 g and a fraction of 8g can be separated. The column is then filled with a mixture eluted by benzene and acetone (5 * 1), leaving 10 g of a fraction containing the 24-monoacetate of Alisol A. Treatment of this fraction with ethyl acetate gives 6 g 24-monoacetate from Alisol A. The total yield "is 18 g.
Eine Lösung von 500 mg Alisol B in einem Gemisch von 2 ml ™ Dioxan, 1 ml Wasser und 0,05 ml 1Obiger wässriger Schwefel-" säure wird 90 Minuten bei Raumtemperatur (25 C) stehengelassen. Nach Zugabe von 20 ml Wasser zum Reaktionsgemisch wird dieses zweimal durch Ausschütteln mit 40 ml und 30 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschichten werden vereinigt, zweimal mit je 40 ml Wasser gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei einA solution of 500 mg Alisol B in a mixture of 2 ml ™ Dioxane, 1 ml of water and 0.05 ml of 1Obiger aqueous sulfur " acid is left to stand at room temperature (25 ° C.) for 90 minutes. After adding 20 ml of water to the reaction mixture, this is extracted twice by shaking with 40 ml and 30 ml of ethyl acetate extracted. The ethyl acetate layers are combined, washed twice with 40 ml of water each time and over sodium sulfate dried. The solvent is distilled off, with a
Rückstand erhalten wird, der Alisol A enthält.A residue containing Alisol A is obtained.
500 mg des Kickstandes werden mit 3 ml Pyridin und 3 ml Essigsäureanhydrid acetalisiert, indem man das Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur (250C) stehenläßt. Hierbei werden 630 mg ~ des rohen Acetats erhalten. Das Acetat wird durch Säulenchro- " matographie mit 20 g Kieselgel gereinigt. Die Säule wird mit 700 ml eines Gemisches von Benzol und Aceton (J?'.Λ) eluiert, wobei 390 mg 11,23,24-Triacetat von Alisol A erhalten werden.500 mg of the kick stand are acetalized with 3 ml of pyridine and 3 ml of acetic anhydride, by standing the mixture is left overnight at room temperature (25 0 C). This gives 630 mg ~ of the crude acetate. The acetate is purified by column chromatography with 20 g of silica gel. The column is eluted with 700 ml of a mixture of benzene and acetone (J? '. Λ) , 390 mg of 11,23,24-triacetate of Alisol A being obtained .
Durch ümkristallisation aus einem Gemisch von Methanol und Äthylenchlorid werden farblose Nadeln vom Schmelzpunkt 231 bis 233°C gebildet, [ex]ψ +56,1?0 (0=1,0, Chloroform).By ümkristallisation from a mixture of methanol and ethylene chloride colorless needles are made of melting point 231 to 233 ° C, [ex] ψ +56, 1? 0 (0 = 1.0, chloroform).
Elementaranalyseι £ SElemental analysisι £ p
Berechnet für C56H56Og: 70,58 8,91 Gefunden; 70,10 9,15Calculated for C 56 H 56 Og: 70.58 - 8.91; found; 70.10 9.15
1,3 g des 11,23,24-(Priacetats von Alisol A werden 6 Stunden in einem Gemisch von 70 ml Methanol und 35 ®-l einer 10bigen wässrigen Kaliumcarbonatlösung erhitzt. Das Lösungsmittel wird abdestilliert^. Zum. Rüßkatand werden 200 ml Wasser gegeben. 1.3 g of the 11,23,24- (Priacetats of Alisol A are 6 hours in a mixture of 70 ml of methanol and 35 ®-l 10bigen an aqueous potassium carbonate heated. The solvent is distilled ^. For. Rüßkatand 200 ml of water given.
2 υ 9 8 09 / l b 1 £ 2 υ 9 8 09 / l b £ 1
Das wässrige Gemisch wird zweimal mit je I50 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschichten werden vereinigt, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 1,1 g einer farblosen klebrigen Substanz erhalten werden. Diese Substanz wird auf eine Säule von 70 g Kieselgel gegeben. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (3:1) eluiert.The aqueous mixture is washed twice with 150 ml of ethyl acetate each time extracted. The ethyl acetate layers are combined with Water washed and dried. The solvent is distilled off, whereby 1.1 g of a colorless sticky substance are obtained. This substance is applied to a column of 70 g Given silica gel. The column is eluted with a mixture of benzene and acetone (3: 1).
Das Lösungsmittel wird von 1,5 1 des Eluats, das Alisol A enthält, abdestilliert. Hierbei werden 800 mg Alisol A als farbloses Pulver erhalten, jot] Jp +99° (0=1,0, Chloroform).The solvent is 1.5 l of the eluate, the Alisol A contains, distilled off. This gives 800 mg of Alisol A as a colorless powder, jot] Jp + 99 ° (0 = 1.0, chloroform).
2 kg des getrockneten Ehizoms von Alisma Plantago-aquatica L. var. Orientale Samuels werden mit Methanol extrahiert. Der Extrakt wird mit Äthylacetat weiter extrahiert. 100 g der erhaltenen fettlöslichen Fraktion werden zusammen mit 500 ml Essigsäure und 50 ^l Wasser 2 Stunden bei 800C gehalten. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand in 400 ml Äthylacetat gelöst. Die Äthylacetatlösung wird zweimal mit je 4-00 ml Wasser gewaschen und dann über Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 95 g einer rötlich braunen öligen Substanz erhalten werden. Diese Substanz wird auf eine Säule von 200 g chromatographischer Aktivkohle gegeben. Die Säule wird, mit 5 1 Benzol und dann mit 6 1 Äthylacetat eluiert. Das Lösungsmittel wird vom Äthylacetat-Eluat abdestilliert, wobei 12 g einer gelben öligen Substanz zurückbleiben.2 kg of the dried ehizome of Alisma Plantago-aquatica L. var. Orientale Samuels are extracted with methanol. The extract is further extracted with ethyl acetate. 100 g of the fat-soluble fraction obtained are kept at 80 ° C. for 2 hours together with 500 ml of acetic acid and 50 ^ l of water. The solvent is distilled off under reduced pressure and the residue is dissolved in 400 ml of ethyl acetate. The ethyl acetate solution is washed twice with 4-00 ml of water each time and then dried over sodium sulfate. The solvent is distilled off, 95 g of a reddish brown oily substance being obtained. This substance is placed on a column of 200 g of chromatographic activated carbon. The column is eluted with 5 liters of benzene and then with 6 liters of ethyl acetate. The solvent is distilled off from the ethyl acetate eluate, 12 g of a yellow oily substance remaining.
Diese Substanz wird an einer Säule von 200 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird zuerst mit 1 1 eines Gemisches von Benzol und Aceton (10s1) eluiert· Die Elution wird dann mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (5:1) fortgesetzt. Der durch Elution mit den ersten beiden Litern des Lösungsmittels erhaltene Teil von 2,5 g wird verworfen. Die Elution mit 1,2 1 des Lösungsmittels ergibt 4,2 g einer gelben Öligen Substanz, die überwiegend das 24-Monoacetat von Alisol A enthält.This substance is chromatographed on a column of 200 g of silica gel. The column is first eluted with 1 liter of a mixture of benzene and acetone (10s1). The elution is then continued with a mixture of benzene and acetone (5: 1). The one by eluting with the first two liters of the solvent the 2.5 g portion obtained is discarded. Elution with 1.2 l of the solvent gives 4.2 g of a yellow oily Substance that is predominantly the 24-monoacetate of Alisol A contains.
Die Elution wird weiter mit einem Gemisch, von Benzol und Aceton (3:1) fortgesetzt. Der mit dem ersten Liter des Lösungsmittels erhaltene Teil (1,8 g) wird verworfen. Der anschließend mit weiteren 4 1 des Lösungsmittels erhaltene Teil ergibt 1,2 g einer Fraktion, die Alisol A enthält.Elution is continued with a mixture of benzene and Acetone (3: 1) continued. The portion (1.8 g) obtained with the first liter of the solvent is discarded. The subsequently part obtained with a further 4 l of the solvent gives 1.2 g of a fraction which contains Alisol A.
3,2 g der das 24-Monoacetat von Alisol A enthaltenden Fraktion werden mit einer geringen Menge Ithylacetat behandelt, wobei sich eine kristalline Substanz abscheidet. Die Kristalle werden abfiltriert und mit einer geringen Menge Äthylacetat gewaschen, wobei 2,2 g 24—Monoacetat von. Alisol A erhalten werden. Durch Umkristallisation aus Aceton werden farblose Prismen vom Schmelzpunkt 1°A bis 1°/6°C erhalten.3.2 g of the fraction containing the 24-monoacetate of Alisol A. are treated with a small amount of ethyl acetate, whereby a crystalline substance is deposited. The crystals are filtered off and washed with a small amount of ethyl acetate washed, 2.2 g of 24-monoacetate of. Alisol A obtained will. Recrystallization from acetone turns colorless Obtain prisms with a melting point of 1 ° A to 1 ° / 6 ° C.
t t
t
52 6* ' »0 72
52 6 * ' »
Die das Alisol A enthaltende Fraktion (1,2 g) wird erneut an einer Säule von 70 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (3:1) eluiert. Aus der das Alisol A enthaltenden Fraktion werden 700 mg eines farblosen Pulvers von Alisol A erhalten. [*]j6 +98,8° (0=1,0, Chloroform).The fraction containing the Alisol A (1.2 g) is chromatographed again on a column of 70 g of silica gel. The column is eluted with a mixture of benzene and acetone (3: 1). From the fraction containing the Alisol A, 700 mg of a colorless powder of Alisol A are obtained. [*] j 6 + 98.8 ° (0 = 1.0, chloroform).
Dieses Produkt wird mit Essigsäureanhydrid und Pyridin acetyliert, indem das Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur stehen gelassen wird. Das Alisol A-triacetat wird aus Methanol umkristallisiert, wobei 720 mg 11,23,24-Triacetat von Alisol A erhalten werden,This product is acetylated with acetic anhydride and pyridine, by letting the mixture stand at room temperature overnight. The Alisol A triacetate is recrystallized from methanol, 720 mg of 11,23,24-triacetate of Alisol A being obtained,
50 g einer fettlöslichen Fraktion, die aus dem Bhizom von Alisma Plantago-aquatica L. var. Orientale Samuels, auf die in Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellt worden ist, werden zusammen mit200 ml Dioxan, 75 ml Wasser und 15 g Oxalsäure 2 Stunden bei 800C gehalten. Das Lösungsmittel wir* durch Destillation unter vermindertem Druck zurückgewonnen50 g of a fat-soluble fraction, which has been prepared from the bhizome of Alisma Plantago-aquatica L. var. Orientale Samuels, in the manner described in Example 1, together with 200 ml of dioxane, 75 ml of water and 15 g of oxalic acid for 2 hours at 80 0 C held. The solvent is recovered by distillation under reduced pressure
2Ö9Ö09/1 Öl 22Ö9Ö09 / 1 oil 2
und der Rückstand in 250 ml Äthylacetat gelöst. Die Lösung wird dreimal durch Schütteln mit 200 ml, 150 ml und 150 ml Wasser gewaschen und dann mit wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 47 g einer braunen öligen Substanz zurückbleiben. Diese Substanz wird an einer Säule von 100 g chromatographischer Aktivkohle chromatographiert. Die Säule wird zuerst mit 2,5 1 Benzol und dann mit 3 1 Äthylacetat eluiert. Das Lösungsmittel wird vom Eluat abdestilliert, wobei 6,3 g einer gelben öligen Substanz erhalten werden.and the residue dissolved in 250 ml of ethyl acetate. The solution is shaken three times with 200 ml, 150 ml and 150 ml Washed with water and then dried with anhydrous sodium sulfate. The solvent is distilled off, with 47 g a brown oily substance remain. This substance is chromatographed on a column of 100 g of activated carbon chromatographed. The column is eluted first with 2.5 liters of benzene and then with 3 liters of ethyl acetate. The solvent will distilled off from the eluate, 6.3 g of a yellow oily substance being obtained.
^ Diese Substanz wird erneut an einer Säule von 100 g Kieselgel ^ chromatographiert. Die Säule wird zuerst mit 500 ml eines Gemisches von Benzol und Aceton (10:1) und dann mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (5*1) eluiert. 1,2 g der gelben öligen Substanz, die mit dem Durchlauf von 30 ml bei der ersten Elution erhalten werden, werden verworfen. Aus den anschließend mit weiteren 800 ml Lösungsmittel erhaltenen Eluaten werden 20 g einer gelben öligen Substanz erhalten, die überwiegend das 24-Monoacetat von Alisol A enthält.^ This substance is again applied to a column of 100 g of silica gel ^ chromatographed. The column is first filled with 500 ml of a mixture eluted from benzene and acetone (10: 1) and then with a mixture of benzene and acetone (5 * 1). 1.2 g of the yellow oily substance with the passage of 30 ml at the first elution are discarded. From the then obtained with a further 800 ml of solvent 20 g of a yellow oily substance which predominantly contains the 24-monoacetate of Alisol A are obtained.
Die Säule wird weiter mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (3:1) eluiert. 1 g der mit den ersten 50 ml Lösungsmittel erhaltenen Fraktion wird verworfen. Durch weitere Elution der Säule mit 2 1 Lösungsmittel werden 0,7 g einer Fraktion " erhalten, die Alisol A enthält.The column is continued with a mixture of benzene and acetone (3: 1) eluted. 1 g of the solvent with the first 50 ml obtained fraction is discarded. Further elution of the column with 2 liters of solvent gives 0.7 g of a fraction "which contains Alisol A.
Die in der oben beschriebenen Weise erhaltene Fraktion, die das 24-Monoacetat von Alisol A enthält, wird mit einer geringen Menge Äthylacetat behandelt, wobei sich farblose Kristalle des 24—Monoacetats von Alisol A abscheiden. Die Kristalle werden abfiltriert und mit einer geringen Menge Äthylacetat ge- > waschen, wobei 1,2 g 24-Monoacetat von Alisol A erhalten werden. Durch Umkristallisation aus Aceton werden farblose Prismen vom Schmelzpunkt 194 bis 1960C gebildet.The fraction obtained in the manner described above, which contains the 24-monoacetate of Alisol A, is treated with a small amount of ethyl acetate, whereupon colorless crystals of the 24-monoacetate of Alisol A separate out. The crystals are filtered off and washed with a small amount of ethyl acetate, 1.2 g of 24-monoacetate from Alisol A being obtained. Colorless prisms with a melting point of 194 to 196 ° C. are formed by recrystallization from acetone.
[α] ψ +86° (0=1,0, Chloroform).[α] ψ + 86 ° (0 = 1.0, chloroform).
Anschließend wird die in der beschriebenen Weise erhaltene» das Alisol A enthaltende Fraktion (0,7 g) erneut an 30 gThen the » the fraction containing alisol A (0.7 g) again at 30 g
2 09809/16122 09809/1612
Kieselgel chromatographiert. Durch Elution mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (3j1) wird ein farbloses Pulver von Alisol A (Ausbeute 360 mg) erhalten. Durch Acetylierung der Verbindung mit Pyridin (2 ml) und Essigsäureanhydrid (2 ml) für 16 Stunden werden 460 mg rohes 11,23,24-Triacetat von Alisol A erhalten. Die Umkristallisation aus einem Gemisch von Eethylenchlorid und Methanol ergibt 380 mg farbloseChromatographed silica gel. By eluting with a mixture of benzene and acetone (3j1) becomes a colorless powder of Alisol A (yield 360 mg) was obtained. By acetylating the Compound with pyridine (2 ml) and acetic anhydride (2 ml) 460 mg of crude 11,23,24-triacetate are obtained for 16 hours Alisol A obtained. Recrystallization from a mixture of ethylene chloride and methanol gives 380 mg of colorless
Nadeln vom Schmelzpunkt 231 bis 233°CNeedles with a melting point of 231 to 233 ° C
24 ο ~, - χ24 ο ~, - χ
π +57 (0=0,5, Chloroform).π +57 (0 = 0.5, chloroform).
Beispiel 10Example 10 mm
Ein nicht verseifbares neutrales Lipid (9 g)? das bei der Verseifung einer fettlöslichen Fraktion von Alisma Plantagoaquatica L.var. Orientale Samuels erhalten worden ist, wird zusammen mit 70 ml Essigsäure und 15 ml Wasser 2 Stunden bei 800C gehalten. Das Lösungsmittel wird abdestilliert und der Rückstand in 150 ml.lthylacetat gelöst. Die Äthylacetatfraktion wird zweimal mit je 100 ml Wasser gewaschen und dann getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 9g eines braunen Rückstandes erhalten werden. Dieser Rückstand wird an einer Säule von 150 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird zuerst mit 2 1 eines Gemisches von Benzol und Aceton (5-1) und dann mit 2 1 eines Gemisches von Benzol und Aceton (3:1) eluiert, wobei 2,5 g einer gelben öligen Sub- % stanz erhalten werden, die überwiegend Alisol A enthält.A non-saponifiable neutral lipid (9 g)? that in the saponification of a fat-soluble fraction of Alisma Plantagoaquatica L.var. Oriental Samuels is kept together with 70 ml of acetic acid and 15 ml of water at 80 ° C. for 2 hours. The solvent is distilled off and the residue is dissolved in 150 ml of ethyl acetate. The ethyl acetate fraction is washed twice with 100 ml of water each time and then dried. The solvent is distilled off, 9 g of a brown residue being obtained. This residue is chromatographed on a column of 150 g of silica gel. The column is first treated with 2 1 of a mixture of benzene and acetone (5-1) and then a mixture of benzene and acetone with 2 1: are obtained, to thereby obtain 2.5 g of a yellow oily substance sub-% (1: 3) which mainly contains Alisol A.
Dieses Öl wird erneut an einer Säule von 70 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (3ϊ1) eluiert, wobei Fraktionen, die Alisol A enthalten, aufgefangen werden. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 1,5 g eines farblosen Pulvers von Alisol A erhalten werden.This oil is chromatographed again on a column of 70 g of silica gel. The column is eluted with a mixture of benzene and acetone (3ϊ1), with fractions containing Alisol A be caught. The solvent is distilled off, 1.5 g of a colorless powder of Alisol A being obtained will.
■3■ 3
Der vorstehend beschriebene Versuch wird unter Verwendung von Essigsäure allein wiederholt. Hierbei werden 1,5 S cLes 24-Monoace
halten.The experiment described above is repeated using acetic acid alone. Here 1.5 S cLes are 24-Monoace
keep.
Monoacetats von Alisol A vom Schmelzpunkt 196 bis 1980G er-Monoacetate of Alisol A with a melting point of 196 to 198 0 G
209809/1612209809/1612
1 g 11,23-Diacetat von Alisol B wird in einem Gemisch von 6 ml Eisessig und 2 ml Wasser gelöst. Das Gemisch wird 50 Minuten auf 70 C erhitzt. Zum Reaktionsgemisch werden 30 ml Wasser gegeben. Die gebildete weiße Fällung wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Durch Kristallisation dieses Produkts aus Methanol werden 300 mg kristallines 11,24-Diacetat von Alisol A erhalten. Die Mutterlauge wird an einer Säule von 20 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (5*1) eluiert, wobei 200 mg 11,24-Diacetat von Alisol A erhalten werden, das mit dem oben erhaltenen kristallinen Produkt vereinigt wird. Das Gemisch wird aus Methanol umkristallisiert, wobei farblose Nadeln vom Schmelzpunkt 204 bis 2060C erhalten werden, [α] ψ +86,7° (C=1,0, Chloroform).1 g of 11,23-diacetate from Alisol B is dissolved in a mixture of 6 ml of glacial acetic acid and 2 ml of water. The mixture is heated to 70 ° C. for 50 minutes. 30 ml of water are added to the reaction mixture. The white precipitate formed is filtered off, washed with water and dried. By crystallizing this product from methanol, 300 mg of crystalline 11,24-diacetate from Alisol A are obtained. The mother liquor is chromatographed on a column of 20 g of silica gel. The column is eluted with a mixture of benzene and acetone (5 * 1) to give 200 mg of 11,24-diacetate of Alisol A, which is combined with the crystalline product obtained above. The mixture is recrystallized from methanol to give colorless needles of melting point 204 to 206 0 C, [α] ψ + 86.7 ° (C = 1.0, chloroform).
Zu einer Lösung von 1 g Alisol B in 12 ml Aceton werden 0,2ml BF^-Ätherat gegeben. Das Gemisch wird 15 Minuten bei Raumtemperatur stehengelassen. Nach Zusatz von 50 ml Wasser zum Reaktionsgemisch wird dieses mit 30 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird nacheinander mit 20 ml Wasser, 20 ml einer 5%igen wässrigen Natriumbicarbonatlösung und dann mit 2 ml Wasser gewaschen.To a solution of 1 g of Alisol B in 12 ml of acetone, 0.2 ml BF ^ etherate given. The mixture is 15 minutes at room temperature ditched. After adding 50 ml of water to the The reaction mixture is extracted with 30 ml of ethyl acetate. The ethyl acetate layer is successively with 20 ml Water, 20 ml of a 5% aqueous sodium bicarbonate solution and then washed with 2 ml of water.
Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 1,2 g eines klebrigen Rückstandes erhalten werden. Der Rückstand wird an einer Säule von 30 g Kieselgel chromatographiert und mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (6:1) eluiert, wobei 750 g Alisol A (23,24)-acetonid als farbloses Pulver erhalten werden, (α]?2 +69,0° (01,0, Chloroform).The solvent is distilled off, 1.2 g of a sticky residue being obtained. The residue is chromatographed on a column of 30 g silica gel eluting with a mixture of benzene and acetone (6: 1) to give 750 g Alisol A (23,24) acetonide are obtained as a colorless powder, (α] 2 +? 69.0 ° (01.0, chloroform).
110 mg (23,24)-Acetonid von Alisol A werden mit 7 ml 80%iger110 mg (23.24) acetonide of Alisol A are mixed with 7 ml of 80% strength
inden auf 900C β]indene to 90 0 C β]
209ÖO9/1612209ÖO9 / 1612
Essigsäure 2 Stunden auf 900C erhitzt. Das ReaktionsgemischAcetic acid heated to 90 ° C. for 2 hours. The reaction mixture
wird zur Trockene eingedampft und der Rückstand an einer Säule von 10 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (2:1) eluiert, wobei 70 mg Alisol A erhalten werden.is evaporated to dryness and the residue is chromatographed on a column of 10 g of silica gel. The pillar will eluted with a mixture of benzene and acetone (2: 1) to give 70 mg of Alisol A.
HlP +"10^i2° (0=1,0, Chloroform).HIP + " 10 ^ 12 ° (0 = 1.0, chloroform).
50 5: ο***2 Π · 73 43
50 5: ο *** 2
Zu einer Lösung von 120 mg 23-Monoacetat von Alisol B in 4 ml Aceton werden 0,05 nil BIF^-Ätherat gegeben. Das Gemisch wird auf die in Beispiel 12 beschriebene Weise behandelt, wobei 120 mg eines Öls erhalten werden. Das Öl wird an einer Säule von 20 g Kieselgel chromätographiert. Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (10:1) eluiert, wobei 100 mg Alisol A(24,25)-acetonid-23-monoacetat erhalten werden, Durch Umkristallisation aus wässrigem Methanol werden 98 mg farblose Nadeln vom Schmelzpunkt 192 bis 193°G erhalten. [α]ψ +61,8° (0-1,0, Chloroform).To a solution of 120 mg of 23-monoacetate from Alisol B in 4 ml of acetone, 0.05 nil BIF ^ etherate are added. The mixture is treated in the manner described in Example 12 to give 120 mg of an oil. The oil is chromatographed on a column of 20 g of silica gel. The column is eluted with a mixture of benzene and acetone (10: 1), 100 mg of Alisol A (24.25) acetonide-23-monoacetate being obtained. Recrystallization from aqueous methanol gives 98 mg of colorless needles with a melting point of 192 to 193 ° G preserved. [α] ψ + 61.8 ° (0-1.0, chloroform).
150 mg Alisol A-(24-,25)-äcetonid-23-monoacetat werden mit 3 ml Dioxan und 0,5 ml 2n-Schwef el säure 1 Stunde bei 9O0C gehalten. Das Reaktionsgemisch wird mit 10 ml Wasser verdünnt und zweimal mit je 20 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt und mit 10 ml Wasser gewaschen. Nach dem Trocknen über Natriumsulfat wird das Lösungsmittel abdestilliert, wobei 130 ml eines farblosen klebrigen Rückstandes erhalten werden, der zur Kristallisation mit einer geringen Menge Äthylacetat behandelt wird. Die Kristalle werden abfiltriert und mit Äthylacetat gewaschen, wobei 70 mg 24-Monoacetat von Alisol A erhalten werden.150 mg Alisol A- (24, 25) are -äcetonid-23-monoacetate held with 3 ml of dioxane and 0.5 ml of 2N Schwef el acid for 1 hour at 9O 0 C. The reaction mixture is diluted with 10 ml of water and extracted twice with 20 ml of ethyl acetate each time. The extracts are combined and washed with 10 ml of water. After drying over sodium sulfate, the solvent is distilled off, 130 ml of a colorless, sticky residue being obtained, which is treated with a small amount of ethyl acetate for crystallization. The crystals are filtered off and washed with ethyl acetate, 70 mg of 24-monoacetate from Alisol A being obtained.
209809/ 161 2209809/161 2
Das Filtrat wird mit der Waschflüssigkeit vereinigt und das Lösungsmittel abdestilliert, wobei 50 mg Rückstand erhalten werden .■ Der Rückstand wird an einer Säule von 10 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird mit 70 ml eines Gemisches von Benzol und Aceton (3:1) eluiert, wobei 20 mg 24-Monoacetat von Alisol A erhalten werden.The filtrate is combined with the washing liquid and the solvent is distilled off, 50 mg of residue being obtained ■ The residue is on a column of 10 g of silica gel chromatographed. The column is filled with 70 ml of a mixture eluted by benzene and acetone (3: 1) to give 20 mg of 24-monoacetate from Alisol A.
Zu einer Lösung von 1 g Alisol B in 10 ml Aceton gibt man 0,01 ml Schwefelsäure und läßt das Gemisch 40 Minuten bei 28°C stehen. Man verdünnt das Reaktionsgemisch mit 5 ml einer 5$ig©n wäßrigen Bicarbonatlösung und gibt 30 ml Wasser zu.To a solution of 1 g of Alisol B in 10 ml of acetone is added 0.01 ml of sulfuric acid and the mixture is left for 40 minutes 28 ° C. The reaction mixture is diluted with 5 ml of a 5% aqueous bicarbonate solution and 30 ml of water are added.
Man extrahiert das so behandelte Reaktionsgemisch mit 30 ml Äthylacetat, wäscht zweimal mit 20 ml Wasser und trocknet mit' Natriumsulfat. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 1,18 g eines farblosen klebrigen Rückstandes erhalten werden.The reaction mixture treated in this way is extracted with 30 ml Ethyl acetate, washed twice with 20 ml of water and dried with sodium sulfate. The solvent is distilled off, whereby 1.18 g of a colorless sticky residue are obtained.
Der Rückstand wird in einem Gemisch von Benzol und Aceton (6:1) gelöst und an einer Säule von J>0 g Kieselgel chromatographiert. Die Säule wird mit dem gleichen Lösungsmittel eluiert, wobei 690 mg Alisol A-?23,24)-acetonid als farbloses Pulver erhalten werden. £aj r D +69,0 (C=I,O, Chloroform).The residue is dissolved in a mixture of benzene and acetone (6: 1) and chromatographed on a column of J> 0 g of silica gel. The column is eluted with the same solvent, 690 mg of Alisol A-? 23,24) acetonide being obtained as a colorless powder. £ aj r D +69.0 (C = I, O, chloroform).
Zu einer Lösung voft 1 g 23-Monoacetat von Alisol B in 10 ml Aceton gibt man 0,01 ml Schwefelsäure und läßt das Gemisch 80 Minuten bei 280C stehen. Man verdünnt das Reaktionsgemisch mit 5 ml einer 5#igen wäßrigen Bicarbonatlösung und gibt anschließend 30 ml Wasser zu. Das so behandelte Reaktionsgemisch extrahiert man mit 30 ml Äthylacetat. Man wäscht den Äthylacetatextrakt zweimal mit je 30 ml Wasser und trocknet mit Natriumsulfet. Man destilliert das Lösungsmittel ab, wobei 1,22 g eines farblosen klebrigen Rückstandes verbleiben.To a solution voft 1 g 23-monoacetate of Alisol B in 10 ml of acetone are from 0.01 ml of sulfuric acid and the mixture is left standing for 80 minutes at 28 0 C. The reaction mixture is diluted with 5 ml of a 5 # strength aqueous bicarbonate solution and then 30 ml of water are added. The reaction mixture treated in this way is extracted with 30 ml of ethyl acetate. The ethyl acetate extract is washed twice with 30 ml of water each time and dried with sodium sulfetate. The solvent is distilled off, leaving 1.22 g of a colorless, sticky residue.
20980 9/161220980 9/1612
Der Rückstand wird an einer Säule von 50 g Kieselgel Chromatograph! er t . Die Säule wird mit einem Gemisch von Benzol und Aceton (10:1) und dann mit 80 ml des gleichen Lösungsmittels eluiert, wobei 70 ^S "Verunreinigungen abgetrennt werden. Die Säule wird dann weiter mit 300 ml des gleichen Lösungsmittels eluiert, wobei 1,0 g Alisol A-(24,25)-acetonid-23-monoacetat als farblose klebrige Substanz erhalten wird.The residue is chromatographed on a column of 50 g of silica gel! he t. The column is filled with a mixture of benzene and Acetone (10: 1) and then eluted with 80 ml of the same solvent, separating 70 ^ S "impurities. The column is then further eluted with 300 ml of the same solvent, with 1.0 g of Alisol A- (24.25) -acetonide-23-monoacetate is obtained as a colorless sticky substance.
Durch Umkristallisation aus wässrigem Methanol werden farblose Nadeln oder Plättchen vom Schmelzpunkt 186 bis 1880C erhalten (Ausbeute 750 mg). Eine weitere Umkristallisation aus wässrigem Methanol ergibt reine Kristalle vom Schmelzpunkt 192 bis 193°0· Die reine Probe zeigt eine spezifische 22Colorless needles or platelets with a melting point of 186 to 188 ° C. are obtained by recrystallization from aqueous methanol (yield 750 mg). A further recrystallization from aqueous methanol gives pure crystals with a melting point of 192 to 193 ° 0. The pure sample shows a specific 22
Drehung [a] ^ von 64,1° (0=1,0, Chloroform).Rotation [a] ^ of 64.1 ° (0 = 1.0, chloroform).
209809/1612209809/1612
Claims (17)
verwendet, worin R und R jeweils H, einen Acylrest einer niederen Monocarbonsäure mit höchstens 4 Kohlenstoffatomen oder einen niederen Alkoxycarbonylrest mit höchstens 5 Kohlenstoffatomen bedeuten.1 2
used, in which R and R each signify H, an acyl radical of a lower monocarboxylic acid having a maximum of 4 carbon atoms or a lower alkoxycarbonyl radical having a maximum of 5 carbon atoms.
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