DE1792187A1 - Process for the production of proteins from oxygenated hydrocarbons - Google Patents

Process for the production of proteins from oxygenated hydrocarbons

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DE1792187A1
DE1792187A1 DE19681792187 DE1792187A DE1792187A1 DE 1792187 A1 DE1792187 A1 DE 1792187A1 DE 19681792187 DE19681792187 DE 19681792187 DE 1792187 A DE1792187 A DE 1792187A DE 1792187 A1 DE1792187 A1 DE 1792187A1
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oxygenated
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microorganism
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Naslund Lars A
Cataneo Ferdinand C
Allen Clamen
Douros Jun John D
Cahn Robert P
Frankenfeld John W
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ExxonMobil Technology and Engineering Co
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Esso Research and Engineering Co
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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
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Description

, vor allem waeeerlOsllohen oxygenierten f, als prlalre Kohlenetoffquelle für dieses, especially waeeerlOsllohen oxygenated f, as a prlalre source of carbon for this

Verfahren. Nach einer besonderen AusftJhrungsform der Erfindung oxydiert oder teiloxydiert man Kohlenwasserstoff-Fraktionen wie flüssige oder gasfönt ige Erdölsohnltte und bringt sie dann zur Erzeugung von Produkten mit hohem Proteingehalt unter Fermentationsbedingungen mit Mikroorganismen zusammen. Das Verfahren kann kontinuierlich oder chargenweiße durchgeführt werden·Procedure. According to a special embodiment of the invention oxidized or partially oxidized hydrocarbon fractions such as liquid or gaseous petroleum oil and bring them then to produce high protein products together with microorganisms under fermentation conditions. The process can be carried out continuously or in batches will·

Der weltweite Mangel an Protein, Insbesondere an billigem tierischem Eiweiß, für die Ernährung von Menschen und Tieren ist bekannt. U'n diesem Eiweißmangel abzuhelfen, wurden in jüngster Zeit verschiedene biosynthetische Verfahren zur biologischen Herstellung von Protein durch Züchten von Mikrc-Organismen auf verschiedenen kohlenstoffhaltigen Nährböden,The global shortage of protein, especially cheap ones animal protein, for the nutrition of humans and animals is known. To remedy this protein deficiency, in recently various biosynthetic processes for biological production of protein by growing micro organisms on various carbonaceous nutrient media,

1G9842/QB911G9842 / QB91

BAD ORIGINALBATH ORIGINAL

entwickelt. Einet dieser Verfahren besteht darin, daß man verschiedene Mikroorganismen wie Hefe oder Bakterien auf fcohlehydrathaltigen Nährböden «Üohtet. für dieses Verfahren sind jedoch großen Mengen relativ teurer Kohlehydrate erforderlich, welohe su ziemlich hohen Herstellungskosten und Produktpreisen führen.developed. One of these methods is that one various microorganisms such as yeast or bacteria on nutrient media containing carbon hydrates. for this procedure however, large amounts of relatively expensive carbohydrates are required, which are quite expensive to manufacture and lead product prices.

Nach einen anderen, mehr versprechenden Verfahren zur biologischen Synthese von Protein für Nahrung^zwecke züchtet man Mikroorganismen auf erdölhaltigen Nährböden. Diese Art der fermentative« Proteinsynthese führt man im allgemeinen in eine» wässrigen Biosynthesebad duroh, welches Kohlenwasserstoffe; ein wässriges Wuohsmedium, Sauerstoff, Stickstoff und die sonst nooh erfordertionen Näheretoffe enthält und mit dem zu züchtenden Mikroorganismus geimpft wird. Bei diesem Verfahren geht man also von Kohlenwasserstoffen aus, welohe meistens in ausreichenden Mengen zur Verfügung stehen und billiger als Kohlehydrate sind. Es 1st auch bekannt, in Fermentationsverfahren biologische Katalysatoren zu verwenden. - Das erfindungsgemltsse blosynthetisohe Verfahren kann zur Biosynthese aller Mikroorganismen angewendet werden, welche auf oxygenierte Kohlenwasserstoffe, insbesondere oxygenierte Erdölkohlenwasserstoffe, enthaltenden Nährböden wachsen.According to another, more promising process for biological Synthesis of Protein for Food ^ Purposes one microorganisms on petroleum-containing culture media. This type of fermentative protein synthesis is generally carried out in an »aqueous biosynthesis bath duroh, which contains hydrocarbons; an aqueous living medium, oxygen, nitrogen and which otherwise nooh required and contains sewing materials is inoculated with the microorganism to be grown. In this process one starts from hydrocarbons, welohe are usually available in sufficient quantities and are cheaper than carbohydrates. It is also known in Fermentation processes use biological catalysts. - The inventive blosynthetisohe method can be used for Biosynthesis of all microorganisms are applied, which on oxygenated hydrocarbons, especially oxygenated Nutrient media containing petroleum hydrocarbons grow.

109Θ42/08Θ1109Θ42 / 08Θ1

badbath

FUr dan erfindungagemäeae Verfahren können a Ieο die .verschiedene ten Kikroorganieeen verwendet werden» jedooh eignen «loh bestirnte Mikroorganismen besondere gut für die Assimilation von oxygenierten Kohlenwaeseretoffen. Diese Mikroorganismen sind in den folgenden Tabellen 1 (Bakterien) und 2 (Hefen) mit Angabe ihrer ATCC-, CBS- oder QMB-Nummer zusammengestellt. Die Identifikatlonsnumnern beziehen sich auf Xulturen der American Type Culture Collection, Washington, D,C, USA (ATCC), des Centraalbureau voor Sohimmeloultures, Baarn, Holland (CBS) und der Quartermaster Culture Collection, Katlok, Mass., USA (QMB).For the inventive method, a Ieο the .various ten microorganisms are used »jedooh are particularly well suited for certain microorganisms the assimilation of oxygenated coal substances. These microorganisms are listed in the following tables 1 (bacteria) and 2 (yeasts) with their ATCC, CBS or QMB number. The identification numbers refer to X cultures of the American Type Culture Collection, Washington, D, C, USA (ATCC), of the Centraalbureau voor Sohimmeloultures, Baarn, Holland (CBS) and the Quartermaster Culture Collection, Katlok, Mass., USA (QMB).

109842/0891109842/0891

BAD ORIGINALBATH ORIGINAL Tab·!!· 1 - BakterienTab !! 1 - bacteria Abteilung KlaaaeDepartment of Klaaae

Ordnung Familie Okay family

Gattunggenus

ArtArt

Protophyt*—SoMzosgrcates-p-Psaudononadelee—Paeudomonadaoeae Paeudononaa-r-llgustriProtophyte * —SoMzosgrcates-p-Psaudononadelee — Paeudomonadaoeae Paeudononaa-r-llgustri

-pseudomallei--pseudomall-

-Eubaotarialee · -tttoroooooaceae-Eubaotarialee · -tttoroooooaceae

Micrococeua—oerificana
Sareina———— sp
Micrococeua-oerificana
Sareina ———— sp

Ihaalii
—Aonromobacteraeeae^Alcaligenea—sp
Ihaalii
—Aonromobacteraeeae ^ Alcaligenea — sp

—^Corynebaoteriaoeaei-Cellunonaa—— galba- ^ Corynebaoteriaoeaei-Cellunonaa—— galba

-Corynebaoterira—βρ-Corynebaoterira — βρ

Uv.Uv.

-ATCC-ATCC

-ATCC-ATCC

ATCCATCC

15523 1552* I49&715523 1552 * I49 & 7

•ATCC -ATCC JWCC *ATCC• ATCC -ATCC JWCC * ATCC

ipaurometeboltuB—ATCCipaurometeboltuB-ATCC

.Arthrobacte.Arthrobacte

T.T.

implex
sp
implex
sp

ATCCATCC

iATCCiATCC

LAotlnoiayoataoeae.LAotlnoiayoataoeae.

• IQrooba c ter ium~rhodocbrous------sATCC• IQrooba c ter ium ~ rhodocbrous ------ sATCC

Nooardi« , sp
.sp
Nooardi «, sp
.sp

15528 155»7 15525 1552615528 155 »7 15525 15526

1552915529

I553OI553O

69466946

1914019140

1380813808

- 4- 4th

Tabelle 2 - HefenTable 2 - Yeasts

Asoo- — «yceteeAsoo- «ycetee

Ordnungorder

Bndomyoetalee Bndomyoetalee

Familiefamily

Bodo- — aqreetaaeaeBodo- aqreetaaeae

on CDon CD

Unter
famllle Sacoharo~— nyeetoideae
Under
famllle Sacoharo ~ - nyeetoideae

GattungsGeneric Gattunggenus gruppegroup myoesmyoes ArtArt Hr.Mr. ATCC 8766ATCC 8766 myoopaeae aqroopslsmyoopaeae aqroopsls ATCCI3053ATCCI3053 oapsularlsoapsularls ATCC 2471ATCC 2471 ATCCI3053ATCCI3053 fibuligerfibular ATCC 2080ATCC 2080 javanenslsjavanensls ATCC 10628ATCC 10628 mallmall —Saccharo- ~r- Saocharo-—Saccharo- ~ r- Saocharo- bieporabiepora nyoeteaenyoeteae oererlsiaeoererlsiae CBSCBS rouxiirouxii ATCC 2624ATCC 2624 exiguusexiguus ATCCl0599ATCCl0599 taaroianustaaroianus ATCCl0606ATCCl0606 logoslogos ATCCl0603ATCCl0603 wlllianuswlllianus ATCCIO598ATCCIO598 uvarumuvarum ATCCl0612ATCCl0612 fragiliofragilio ATCCl0022ATCCl0022 lactislactis ATCClO689ATCC10689 roe eiroe egg ATCCl0664ATCCl0664 chevalier!chevalier! ATCCl0604ATCCl0604 fermentatlfermentatl ATCC 255IATCC 255I aoldifaclensaoldifaclens (B)(B) fruotuumfruotuum eleganselegans

Portmetsiin« - Tabelle Z - HefenPortmetsiin «- Table Z - Yeasts

Ordnungorder

Familiefamily

Unter« fainllieUnder «fainllie

Gattung»·
gruppe
Genus"·
group

Gattunggenus

ArtArt

Mr,Mr

-Hanaenula anomala CBS- Hanaenula anomala CBS

saturnua ATCC 2379saturnua ATCC 2379

■uaveo·■ uaveo ·

lens ATCC 9847lens ATCC 9847

aehneggii callfoxvaehneggii callfoxv

—Pichia—Pichia

nioanioa

ATCC IO68OATCC IO68O

eubpelll.eubpelll.

oulosa ATCC 1*462oulosa ATCC 1 * 462

mrakll IBIRL Y-12 ailvloola CBSmrakll IBIRL Y-12 ailvloola CBS

* CBS * CBS

icembrana- *icembrana- *

•faoien» ATCC 10649 Cs • Faoien »ATCC 10649 Cs

farino»a ATCC 2252 1 polyiDorpha ATCCI5158 fermentans ATCC 10651farino »a ATCC 2252 1 polyiDorpha ATCCI5158 fermentans ATCC 10651

Fortsetzung - Tabelle 2 - HefenContinued - Table 2 - Yeasts Abteilung Caaaa Ordnung FamilieDepartment of Caaaa order family

ο <o ODο <o OD

roro

cn COcn CO

Unterfamilie OattungB- Gattung Art
gruppe .
Subfamily OattungB- genus Art
group .

Hr.Mr.

ibaryomy-ibaryomy

cee-cee-

-Nadaonleae-Nadeonii-Nadaonleae-Nadeonii

-NenatoB-poroldeae. -NenatoB-poroldeae.

Hematoepora— Hematoepora—

hanaenll
kloeckeri
«ubgloboeue
vinl
hanaenll
kloeckeri
«Ubgloboeue
vinl

nicotianae
•fulvesoen«
elongata
nicotianae
• fulvesoen «
elongata

-ooryli-ooryli

-ΙΑ pot toidea*-ΙΑ pot toidea *

—- Crypto—-Crypto-j-Cryptooo— "•iBjperfecti ooooalea ooooaceae oooideae—- Crypto —- Crypto-j-Cryptooo— "• iBjperfecti ooooalea ooooaceae oooideae

Pungl -Lipomyoes-atakeylPungl-Lipomyoes-atakeyl

Crypto»— neoformans
eoccue
Crypto »- neoformans
eoccue

albioue
luteolua
albioue
luteolua

ATCCATCC

ATCCATCC

CBSCBS

CBSCBS

ATCCATCC

ATCCATCC

ATCCATCC

2557 106202557 10620

95649564

1064510645

1064410644

ATCC 10647ATCC 10647

ATCC 12659 ATCC 11259 ATCC 9981 ATCC Ϊ0666 ATCC 10671ATCC 12659 ATCC 11259 ATCC 9981 ATCC Ϊ0666 ATCC 10671

Fortsetzung - Tabelle 2 - HefenContinued - Table 2 - Yeasts Abteilung Klasse Ordnung FamilieDepartment class order family

unter- Oattungs- Gattung
faailie gruppe
under- Oatt- genus
faailie group

IrIr

—Torulopsis boladi—Torulopsis boladi

CO COCO CO

K>K>

ο cn molisahiaxuο cn molisahiaxu

dattll*dattll *

ephaericaephaerica

fwaatafwaata

»tellata»Tellata

sakesake

globoaagloboaa

vereatilievereatilie

anomalaanomala

inoonaplcuainoonaplcua

Erettanomytjee Erettanomytjee

ATCC 10670ATCC 10670

ACC IO69I AfCC 13195 ASCC 256O ASCC I279O KMG 10673 ASCC 1*478ACC IO69I AfCC 13195 ASCC 256O ASCC I279O KMG 10673 ASCC 1 * 478

CBSCBS

IO56O AICC 13563IO56O AICC 13563

ATCC 10559 ATCC 1056tATCC 10559 ATCC 1056t

Fortsetzung - Tabelle 2 - HefenContinued - Table 2 - Yeasts Abteilung KlasseClass department Ordnung Faallle unter- Oattungs- Order cases under- Oatt-

famllie gruppefamily group

ο «o et»ο «o et»

to O cn to to O cn to

Gattunggenus

Candid*-Candid * -

Mr.Mr.

nyooderaenyooderae ATCC
atcc
ATCC
atcc
10641
9889
10641
9889
kruaeikruaei ASOCASOC 2I592I59 mesenterloamesenterloa ATCCATCC IO569IO569 tropicaliatropicalia ATCCATCC I569I569 pseudotropioali·pseudotropioali ATOCATOC 25402540 Suilliereondii(H)Suilliereondii (H) ATCCATCC 95909590 hunioolahunioola ATCCATCC 1443814438 rugosarugosa ATCCATCC IO571IO571 zeylanolde»zeylanolde » ATCCATCC 1067410674 pellieulosapellieulosa ATCCATCC 21492149 utilisutilis ATCCATCC 9226 <9226 < lipolytica (E)lipolytica (E) ATCCATCC 8662 C*8662 C * carapsilcslacarapsilcsla ATCCATCC 7555 ·7555 StellatoideaStellatoidea ATCCATCC 1100611006 robusterobust scottlscottl ATCCATCC 1057210572 curvetacurveta ATCCATCC 1056710567 olausseniiolaussenii CBSCBS solanisolani ATCCATCC 14440 ^14440 ^ melibiosimelibiosi CBSCBS (D(D KJKJ

Portsetzung ~ Tabelle 2 - HefenPorting ~ Table 2 - Yeasts

Abteilung KlasseClass department

Ordnung Familie Uhter- Order of the Uhter family

familifamily

O CO OOO CO OO

roro

O σι co Gattungs- Gattung Art
gruppe
O σι co genus genus Art
group

■Kloeckera—a piculata
africana
corticis
javanica
lafarii
magna
■ Kloeckera — a piculata
africana
corticis
javanica
lafarii
magna

JTrigonop-JTrigonop-

Hr«Mr"

sissis

.Trichosporoideae — Tricho-Bporon Trichosporoideae - Tricho-Bporon

-Rhodotoruloideae .Rhodoto·
rulla
-Rhodotoruloideae .Rhodoto ·
rulla

.variablilis (C).variablilis (C)

.pullulans.pullulans

cutaneuocutaneuo

infestansinfestans

er icetunhe icetun

oapitajtumoapitajtum

fermentanefermentans

behrendli
.glutinis (0)
behrendli
.glutinis (0)

rubrarubra

mucilaginosamucilaginosa

aurantiacaaurantiaca

rainutarainuta

ATCC 1063* ATCC 10632 ATCC 10635 ATCC IO636 ATCC IO638 ATCC 10640ATCC 1063 * ATCC 10632 ATCC 10635 ATCC IO636 ATCC IO638 ATCC 10640

CBS 1040CBS 1040

ATCC 1O67T ATCC 14255ATCC 1O67T ATCC 14255

ATCC
ATCC
ATCC
ATCC
ATCC
ATCC
ATCQ
ATCC
ATCC
ATCC
ATCC
ATCC
ATCC
ATCC
ATCC
ATCQ
ATCC
ATCC

1067810678

1066310663

1067510675

1446514465

25272527

94499449

25032503

1065710657

IO658IO658

Mlcroooccus ctrificanas (14987), welcher von Dr. R.B. Kallio tt al. Journal of Bacteriology, Vol. 78» Mo. 5, Seite 44l-448 (September 1959) isoliert und Identifiziert wurde, 1st besondere geeignet. Dieses Bacterium hat die folgenden weiteren Merkmale:Mlcroooccus ctrificanas (14987), which was developed by Dr. R.B. Kallio tt al. Journal of Bacteriology, Vol. 78 »Mon. 5, pp. 44l-448 (September 1959) Isolated and Identified 1st particularly suitable. This bacterium has the following additional characteristics:

Morphologie: Die Zellen sind klein und rund und haben die Neigung, in stickstoffreichen alten Kulturen und Medien eine elliptische Form anzunehmen. Zellen aus definierten Medien haben durchschnittlich einen Durchmesser von 0,5 bis 1,0 Micron und Zellen aus komplexen Medien durchschnittlich einen Durchmesser von 1,0 bis 2,0 Micron. Die Zellen treten einzeln oder in Kaufen auf. Unbewegliche metachromatische Körner und pseudanophlle Körner wurden nicht beobachtet.Morphology: The cells are small and round and have the Propensity to be in nitrogen-rich ancient cultures and media assume an elliptical shape. Cells from defined media have an average diameter of 0.5 up to 1.0 micron and cells made from complex media have an average diameter of 1.0 to 2.0 microns. The cells occur individually or in clusters. Immobile metachromatic grains and pseudanophyllic grains were made not observed.

Qram-Beaktlon: Negativ. ,Qram Beaktlon: Negative. ,

Die Kolonien auf definiertem Agar sind klein (1 mm), rund konvex mit ganzem Rand. Die Kolonien auf Nähragar sind größer (2 bis 5 am), erhaben niuköe und allgemein rund.The colonies on defined agar are small (1 mm), round convex with a whole border. The colonies on nutrient agar are larger (2 to 5 am), raised niuköe and generally round.

Innerhalb einer Art können viele verschiedene Rassen aufgrund von Variationen oder natürlichen oder Induzierten Mutationen vorliegen.Within a species there can be many different races due to variations or natural or induced Mutations are present.

Die Morphologie und Waohstumeelgensohaften anderer in denThe morphology and wholesomeness of others in the

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BAD ORiQINAJLBAD ORiQINAJL

obigen Tabellen aufgeführter Organismen sind in der USA-Patentschrift 3 508 035 beschrieben.Organisms listed above are in the United States patent 3 508 035.

Die Wuchsmedien bestehen aus einem Mineralsalze enthaltenden wässrigen Medium und Überschüssigem Sauerstoff, Der Sauerstoff kann in Jeder von den eingeimpften Mikroorganismen leicht assimilierbaren Form eingebracht Herden. Es können auch sauerstoffhaltige Verbindungen als Sauerstofflleferanten verwendet werden, so lange sie das Wachstum der Mikroorganls~ menzellen und die Umwandlung der oxydierten Kohlenwasserstoffe in Mikroorganismenzellen nicht beeinträchtigen. Der Sauerstoff kann in Form eines sauerstoffhaltigen Oases wie Luft mit Atmosphärendruck oder erhöhtem Druck oder als mit Sauerstoff angereicherte Luftmi ö einem Sauerstoffgehalt bis zu 70 bis 9OJ6 zugeführt werden. Im allgemeinen werden etwa 0,1 bis etwa 10 und vorzugsweise etwa 0,8 bis, etwa 2,4 Vdumteile Luft Je Minute Je Voluiatell Flüssigkeit im Fermente tor in den Reaktor eingeführt. ·The growth media consist of a mineral salt containing aqueous medium and excess oxygen, the oxygen can be present in any of the inoculated microorganisms easily assimilable form introduced flocks. Oxygen-containing compounds can also act as oxygen suppliers can be used as long as they support the growth of microorganisms ~ do not affect the cells and the conversion of the oxidized hydrocarbons in microorganism cells. Of the Oxygen can be in the form of an oxygen-containing oase such as air at atmospheric pressure or elevated pressure or as oxygen-enriched air with an oxygen content up to 70 to 9OJ6 can be fed. In general are about 0.1 to about 10 and preferably about 0.8 to, About 2.4 parts of air per minute per volume of liquid introduced into the reactor in the fermenter. ·

Für das biologische Wachstum 1st die Anwesenheit von Stickstoff wichtig. Als Stickstoffquelle kann Jede organische oder anorganische stickstoffhaltige Verbindung verwendet werden, welohe Stickstoff in einer von den wachsenden Mikroorganismen metabolisoh nutzbaren Form abgibt« HierfürThe presence of nitrogen is important for biological growth. Any organic nitrogen source can be used as a nitrogen source or inorganic nitrogen-containing compound can be used, which nitrogen is grown in one of the Microorganisms releases metabolisoh usable form «For this

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BAOOBiOtNAi.BAOOBiOtNAi.

eignen sich beispielsweise organische Stickstoffverbindungen wie Proteine, säure-hydrolysierte Proteine, enzymatisch aufgeschlossene Proteine, Aminosäuren, Hefeextrakte, Asparagin und Harnstoff„ Geeignete anorganische Stickstoffverbindungen sind Ammoniak, Ammoniumhydroxyd, Salpetersäure oder Salze derselben wie Ammoniumphosphate Ammoniumeitrat, Ammoniumsulfat, Ammoniumnitrat und saures Ammoniumpyrophosphat. Bin sehr vorteilhaftes Verfahren zum Einbringen von Stickstoff besteht in der Verwendung von Ammoniumhydroxyd, Ammoniumphosphat oder saurem Ammoniumphosphat; das letztere kann in Form des Salzes selbst zugesetzt oder durch Einleiten von Ammoniakgas in die Nährlösung oder Zugabe von Ammoniumhydroxyd zu der Nährlösung, welche vorher mit Phosphorsäure versetzt wurde, in situ in dem wässrigen Fermentationsmedium erzeugt werden. Auf diese Weise wird der gewünschte pH-Bereich von 5,0 bis 8,5 eingehalten und der erforderliche Stickstoff zur Verfügung gestellt. Bei Verwendung von Hefen als Mikroorganismen liegt der bevorzugte pH-Bereich zwischen 5,0 und 7#5 und insbesondere zwischen 4,0 und 5,0. Bei Verwendung von Bacterien als Mikroorganismen ist ein pH-Wert zwischen 5,0 und 8,5>z.B, von 7,0, vorteilhaft. Ammoniumhydroxyd kann in Mengen von etwa 0,08 bis 0,20 und vorzugsweise von etwa 0,1 bis etwa 0,15 g Stickstoff je g erzeugte getrocknete Zellen zuorganic nitrogen compounds such as proteins, acid-hydrolyzed proteins, enzymatic, are suitable Digested proteins, amino acids, yeast extracts, asparagine and urea “Suitable inorganic nitrogen compounds are ammonia, ammonium hydroxide, nitric acid or salts thereof such as ammonium phosphates, ammonium citrate, Ammonium sulfate, ammonium nitrate and ammonium acid pyrophosphate. A very advantageous method of introducing nitrogen is to use ammonium hydroxide, Ammonium phosphate or acid ammonium phosphate; the latter can be added in the form of the salt itself or by introducing or adding ammonia gas to the nutrient solution Ammonium hydroxide to the nutrient solution, which was previously mixed with phosphoric acid, in situ in the aqueous solution Fermentation medium are generated. In this way, the desired pH range of 5.0 to 8.5 is maintained and the necessary nitrogen is provided. If yeasts are used as microorganisms, the preferred pH range between 5.0 and 7 # 5 and in particular between 4.0 and 5.0. When using bacteria as Microorganisms is a pH between 5.0 and 8.5> e.g. of 7.0, advantageous. Ammonium hydroxide can be used in amounts from about 0.08 to 0.20, and preferably from about 0.1 to about 0.15 g of nitrogen per g of dried cells produced

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BAD ORIGINALBATH ORIGINAL

dem Bioeynthesebad gegeben werden. Dies entspricht etwa 0,01 bis etwa 1,0 Gew.56 und vorzugsweise etwa 0,1 bis etwa 0,15 Gew.Jt Stickstoff auf das gesamte Biosynthesebad.be given to the bioeynthesis bath. This corresponds approximately 0.01 to about 1.0% by weight and preferably about 0.1 to about 0.15% by weight of nitrogen on the entire biosynthesis bath.

Außer Sauerstoff und Stickstoff müssen auch noch die erforderlichen Mengen bestimmter mineralischer Nährstoffe im Nährmedium verfügbar sein, um das gewünschte Wachstum der Mikroorganismen und die größtmögliche Assimilation der oxydierten Kohlenwasserstoffe durch die Mikroorganismenzellen zu erzielen„ So müssen in dem wässrigen Wuohsmedium noch Kalium, Natrium, Eisen, Magnesium, Calcium, Mangan, Phosphor und weitere Nährstoffe enthalten sein, welche auf beliebige Weise und vorzugsweise in Fora ihrer wässrigen Salze eingebracht werden.In addition to oxygen and nitrogen, you also need the required amounts of certain mineral nutrients be available in the nutrient medium in order to achieve the desired growth of the microorganisms and the greatest possible assimilation to achieve the oxidized hydrocarbons through the microorganism cells “So must in the aqueous living medium Potassium, sodium, iron, magnesium, calcium, manganese, phosphorus and other nutrients may still be contained, which on in any manner and preferably in the form of their aqueous salts.

So kann Kalium beispielsweise als Kaliumchlorid, Kaliumphosphat, Kaliumsulfat, Kaliumeitrat, Kaliumcetat oder Kaliumnitrat zugesetzt werden· Elsen und Phosphor können in Form von Sulfaten und Phosphaten, z.B. als Elsensulfat und Eisenphosphat eingebracht werden. Der Hauptanteil Phosphor wird im allgemeinen als Ammoniumphosphat zugegeben. Bei Verwendung von Ammoniumphosphat oder saurem Ammoniumphosphat dient dieses gleichzeitig als Stickstoff- und Phosphorlieferant für die wachsenden Mikroorganismenzellene For example, potassium can be added as potassium chloride, potassium phosphate, potassium sulfate, potassium citrate, potassium acetate or potassium nitrate. Most of the phosphorus is generally added as ammonium phosphate. When using ammonium phosphate or acidic ammonium phosphate, this also serves as a nitrogen and phosphorus supplier for the growing microorganism cells e

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BADBATH

Die Zusammensetzung des FermentatJonsmediurae, Insbesondere für Bacterien, kann zu Beginn der Fermentation beispielsweise in den folgenden Bereichen liegen: The composition of the fermentateJonsmediurae, in particular for bacteria, at the beginning of the fermentation, for example, can be in the following areas:

Bestandteilcomponent Konzentration in g je LiterConcentration in g per liter 55 üblichermore common ** 7-I37-I3 bevorzugtermore preferred möglicherpossible 0505 Bereicharea O.2-O.9O.2-O.9 BereiohReady Bereicharea C5C5 5-80'5-80 ' 0.005-0.040.005-0.04 10-5010-50 oxygenierte
Kohlenwasser
stoffe
oxygenated
Hydrocarbon
fabrics
4-1204-120 Z ZU Z TO 0.2-0.6
0.005-0.04
0.2-0.6
0.005-0.04
2-82-8
K2HPO4 K 2 HPO 4 O.5-I5O.5-I5 0.005-0.040.005-0.04 8-128-12 (NH4J2HPO4 (NH 4 I 2 HPO 4 515515 loo Gew.So. *loo wt. * 0.3-0.80.3-0.8 Na2SO4 Na 2 SO 4 0.1-1.00.1-1.0 O.OI-O.O3O.OI-O.O3 FeSO4.7Hg^FeSO 4 .7Hg ^ 0.002-0.0.002-0. O.3-O.5
Ο.Ολ-0.03
O.3-O.5
Ο.Ολ-0.03
MgSO4^H2O
MnSO4.7HgO
MgSO 4 ^ H 2 O
MnSO 4 .7HgO
0.1-0.7
0.002-0.
0.1-0.7
0.002-0.
0.Ολ-0.030.Ολ-0.03
NaClNaCl 0.002-0.0.002-0. Wasserwater DifferenDifferen

Weiterhin können die folgenden mineralischen Nährstoffe noch in Spurenmengen enthalten sein:The following mineral nutrients may also be contained in trace amounts:

1 0 9 S 4 2 / 0 5 9 11 0 9 S 4 2/0 5 9 1

BAO ORIGINALBAO ORIGINAL

BeetandteilComponent part möglicher
Bereich
possible
area
Konzentration InConcentration In me; ^liiter me; ^ liiter
0-0.4
0-0.06
0-1.2
0-0.4
0-0.06
0-1.2
üblicher
Bereich
more common
area
bevorzugter
Bereich
more preferred
area
ZnSO4.H2O
Na2MoSO4. HgO
CoCl2
ZnSO 4 .H 2 O
Na 2 MoSO 4 . HgO
CoCl 2
0-0.080-0.08 0-0.2
0-0.05
0-1.1
0-0.2
0-0.05
0-1.1
■X- ■
0-0.2
0-0.04
0-1.2
■ X- ■
0-0.2
0-0.04
0-1.2
H3BOjH 3 BOj 0-0.20-0.2 0»0,070 »0.07 0-0.060-0.06 CuSO4.5H2OCuSO 4 .5H 2 O 0-0.140-0.14 04 .2504 .25 0-0.20-0.2 CaCl2-OH2OCaCl 2 -OH 2 O 0-0.010-0.01 o-o.ι? oo. ι? 0-0.120-0.12 NiCI^.6H2ONiCI ^ .6H 2 O P-O.008P-O.008 0-0.0060-0.006

Die nötigen und möglichen Nährstoffe können natürlich auch in Form anderer Salze oder Säuren als der oben angegebenen zugesetzt werden.The necessary and possible nutrients can of course also may be added in the form of salts or acids other than those specified above.

Ein sehr befriedigendes Nährmedium wird beispielsweise
wie folgt hergestellt:
A very satisfactory nutrient medium is, for example
manufactured as follows:

-Medium:-Medium: (NH4J2HPO4 (NH 4 I 2 HPO 4 g/l Leitungswasserg / l tap water K2HPO4 K 2 HPO 4 ""'■■' 'ler ; :'" ■'■""'■■''ler; : '"■' ■ Na2SO4 Na 2 SO 4 *■■"■' ι'* ■■ "■ 'ι' 0,50.5

Diese Mischung wird mit 10 ml/Liter der folgenden "Salzlösung Aw versetzt: This mixture is mixed with 10 ml / liter of the following "saline solution A w :

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g/l destilliertes Wasserg / l distilled water

4040

PeSO^. 71^0 2PeSO ^. 71 ^ 0 2

2 NaCl ♦ 22 NaCl ♦ 2

Das P1-Medium hat einen pH-Wert von 7»8. Bei einer Abwandlung wird das Phosphat in Form von Phosphorsäure zugesetzt.The P 1 medium has a pH of 7 »8. In a modification, the phosphate is added in the form of phosphoric acid.

Bei Hefen werden »it den folgenden Medien I, II und III befriedigende Ergebnisse erzielt}In the case of yeasts, the following media I, II and III achieved satisfactory results}

Medium It g/l Leitungswasser Medium It g / l tap water

NaHPO4UaH2O 2,5NaHPO 4 UaH 2 O 2.5

KH2PO4 3,5KH 2 PO 4 3.5

MgUO4-TK2O 1,0MgUO 4 -TK 2 O 1.0

MaCl 0,5MaCl 0.5

5,05.0

der pH-Wert wird auf 6,5 eingestellt.the pH is adjusted to 6.5.

Medium II»Medium II »

Dieses Medium hat die gleiche Zusammensetzung wie Medium I, This medium has the same composition as medium I,

wird Jedoch noch mit 0v001ji Hefeextrakt als Wuchsstoff versetstiHowever, 0 v 001ji yeast extract is still used as a growth substance

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BADBATH

Medlu» HI; Dieses Medium hat ebenfalls die gleiche Zusammensetzung wie Medium I, wird jedooh noch mit 2 ppn Biotin als Wuchsstoff versetzt. Medlu »HI; This medium also has the same composition as medium I, but 2 ppn biotin is added as a growth substance.

Die Wuchsstoffe werden dem Orundmedlun zugesetzt« um das Wachstum der verschiedenen Hefen zu beschleunigen.The growth substances are added to the Orundmedlun «to the Accelerate growth of various yeasts.

Wenn Mücroorganlsnen zuerst auf oxygenierten Kohlenwasserstoffen als primärer Kohlenstoffquelle kultiviert werden, waohsen sie manchmal schwer, so daß es erforderlich 1st« Mikroorganismen als Impfstoff zu verwenden, welche vorher auf einen gleichen Nährboden gezüchtet wurden und an diesen angepaßt sind. Außerdem waohsen selbst Mikroorganismen, insbesondere Hefen, welche in 0«genwart eines die erforder-Hohen lehrelemente enthaltenden wässrigen Mineralischen Medium kultiviert wurden, manohmal schwer, da die KUltür nicht die Wuohafsktoren enthllt, welche in KohlehydratnMhrmedlen vorneöden sind, es sei denn» mti» setzt die*· wuehefaittoreo tu. ^When microorganisms are first cultivated on oxygenated hydrocarbons as the primary carbon source, sometimes they are heavy so that it is necessary « Microorganisms to use as a vaccine, which beforehand were grown on the same nutrient medium and are adapted to this. In addition, microorganisms themselves in particular yeasts, which in the presence of one of the required levels aqueous minerals containing teaching elements Medium cultivated, manoh times difficult, since the KUltür does not contain the welfare factors found in carbohydrate flour are front odors, unless »mti» sets the * · wuehefaittoreo do. ^

Das Waohatua der verwendeten Hefen wird durch Zugab· sehr geringenMeng· HefeextraJct (ein an den lebenswichtigenThe waohatua of the yeasts used is determined by adding very low quantity yeast extract (one of the vital

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BAD ORIGINALBATH ORIGINAL

Nutriliten, d.h. den durch Hydrolyse einer Hefe erhaltenen Wuchsstoffen reiches Produkt) oder« allgemeiner, der wesentlichen Nutriliten zu dem Kulturmedium gefördert. Zu den Nutrillten oder Wuchsstoffen gehören Biotin, Pantothensäure, Nicotinsäure, Thiamin, Inosit und Pyridoxin. Der Hefeextrakt wird im allgemeinen, bezogen auf das wässrige Fermentationsmedium, in Mengen der Größenordnung von 25 ppm zugesetzt. Je nach den gewählten Wachstunsbedingungen kann diese Menge natürlich auch größer oder kleiner sein. Es kann bei den einzelnen Mikroorganismen auch erforderlich sein, dem Wuchsmedium eine geringe Menge SchaunverhUtungsmittel zuzusetzen.Nutrilites, i.e. the product rich in growth substances obtained by hydrolysis of a yeast) or, more generally, the essential ones Nutrilites promoted to the culture medium. The grooves or growth substances include biotin, pantothenic acid, Nicotinic acid, thiamine, inositol and pyridoxine. The yeast extract is generally, based on the aqueous fermentation medium, added in amounts of the order of 25 ppm. Depending on the selected growth conditions, this amount can of course also be bigger or smaller. It can be with the individual microorganisms may also be necessary to add a small amount of antifouling agent to the growth medium.

Die Temperatur des Biosynthesebades kann Je nach dem verwendeten Mikroorganismus zwischen etwa 200C und etwa 55°C liegen, jedoch werden bei Bacterien»Temper»turen von etwa 25°C bis etwa 45°C, z.B. etwa 35°C, bevorzugt. Eer pH-Wert liegt dabei vorzugsweise im Bereich von 5,5 bis 8,5, z.B. bei 7*0«The temperature of the Biosynthesebades can, depending on the microorganism used is between about 20 0 C and about 55 ° C, however, be in bacteria "temper" temperatures of about 25 ° C to about 45 ° C, eg about 35 ° C, are preferred. The pH value is preferably in the range from 5.5 to 8.5, for example 7 * 0 «

Bei Verwendung von Hefen liegt die Temperatur je nach dem gezüchteten Mikroorganismus zwischen etwa 200C und 47°C, jedoch werden Temperaturen im Bereich von etwa 200C bis 400C, z.B. 300C, bevorzugt. Der pH-Wert liegt dabei im Bereich von 3#0 bis-7,5 und vorzugsweise zwischen 4,0 und 5,0, z.B. bei etwa ^,5.When using yeast, the temperature is, depending on the cultured microorganism is between about 20 0 C and 47 ° C, however, temperatures in the range of about 20 0 C to 40 0 C, for example 30 0 C, preferably. The pH value is in the range from 3.0 to -7.5 and preferably between 4.0 and 5.0, for example about 1.5.

1 0 % 8 A 2 / 0 5 9 1
BAD ORIGiNAl
1 0 % 8 A 2/0 5 9 1
ORIGINAL BATHROOM

17S218717S2187

Bel den bekannten ?cr*entationsverfahren, welch« unter Verwendung von Kohlenwasserstoffen diirehgeitthrt werden, beeteht die gröÄt· Schwierigkeit darin* daß di« Kohlenweeeeretoffe in Wasser unlöelloh sind und daher hohe Mieohenergien und/oder oheiileche Emulgatoren erforderlioh sind, uiB 'die Kohlenwasserstoff phase gut die pergiert zu halten. Dies let besonders wichtig, wenn hohe FernentatIons· gesonwlndigkeiten oder hohe Zellenausbeuten ersielt werden sollen. Außerdem entwickelt sich bei diesen Verfahren eine beträohtliohe Menge Wlree, welche entfernt werden euß, was meist mit verfügbare« Kühlwasser geschieht, jedoch Xueerst unwirtschaftlich ist.In the known cr * entation processes, which are processed using hydrocarbons, the greatest difficulty is that the coal fuels are insoluble in water and therefore high energy levels and / or non-hot emulsifiers are required, the hydrocarbon phase can be used well to keep the pergiert. This is particularly important if high remote action sensitivities or high cell yields are to be achieved. In addition, a considerable amount of water develops in these processes, which must be removed, which is usually done with available cooling water, but is extremely uneconomical.

Viele dieser Naohteile, welche bei Verwendung von, geradkettlgen Kohlenwasserstoffen auftreten» können beseitigt werden und das Verfahren kann wesentlich flexibler gestaltet werden, wenn «an als lUhrstoff teilweise oxydierte Kohlenwaeeerstoff e verwendet, welche belspislawelee aus einen Alkohol, s.B* Äthanol, oder Hiacbunge» von Alkoholen« Aldehyden, Ketonen, Setern, Xthern und Slturen bestehen lcöonen. wie bereits erwähnt wurde, besteht ein Vorteil des erfindungsgemKssen Verfahrene darin» da0 - da dieMany of these sewing parts, which when using, straight chain Hydrocarbons occur »can be eliminated and the process can be made much more flexible are used when partially oxidized carbons are used as the fuel, which are made of one Alcohol, see B * Ethanol, or Hiacbunge "from alcohols" Aldehydes, ketones, setters, xethers and syllables exist lcoons. as mentioned earlier, there is an advantage of the method according to the invention therein »da0 - da die

Uüwandlung von Kqhlenwasseratoffen tu oxydierten VerbindungenConversion of hydrocarbons to oxidized compounds

unter Wärmeentwicklung stattfindet und diese oxydiertentakes place with the development of heat and these oxidized

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Verbindungen Zwischenprodukte im Fennantat ions verfahren darstellen - die bei dieser Vorumwandlung entwickelte Reaktionswärme vor dem eigentlichen Permentatlonsprozefi im gewünschten Orade entfernt werden kann. Dies führt zu einer sehr vorteilhaften Verminderung der Wärmeentwicklung im Fermentationsprozefi, welohe zwisohen etwa 10 und 2Q$ liegt. Weitere Vorteile der Verwendung von sauerstoffhaltig«! Ausgangsstoffen sind die Verminderung derCompounds represent intermediate products in the phenantation process - the one developed during this preliminary transformation Heat of reaction before the actual permentation process can be removed in the desired orade. This leads to a very advantageous reduction in the development of heat in the fermentation process, which between about 10 and 2Q $ lies. Other advantages of using oxygenated «! Starting materials are the reduction of the

erforderlichen Mlsohenergie, da die Löslichkeit des Nährstoffes durch die Oxydation wesentlich erhöht wird, und die Verminderung der erforderlichen Luftmenge.required Mlsohenergie, since the solubility of the nutrient is substantially increased by the oxidation, and the reduction in the amount of air required.

Die Kohlenstoffquelle und vorzugsweise die einzige Kohlen« stoffquelle für das erfindungsgemässe Fermentationsverfahren sind oxygenierte Kohlenwasserstoffe, welohe nicht aus Kohlehydraten wie Zuckern oder Stärke oder Cellulose bestehen· Diese oxygenlerten Kohlenwasserstoffe sollten mehr als 50Ji, vorzugsweise mehr als 8o£ und insbesondere 100% des erforderlichen Kohlenstoffes liefern. Sie können aus Alkoholen, % Ketonen« Aldehyden, Betern und Säuren bestehen, vorzugsweise sue Verbindungen Bit etwa 1 bis 50 Kohlenstoffatomen la Molekül, welohe duroh Oxydation von Erdölfraktionen erhalten werden. Bevorzugt werden oxygenierte Kohlenwasserstoffe, welohe aus" Krdölfraktionen mit etwa 2 bis 20 Kohlen*The source of carbon and preferably the only coal « source of material for the fermentation process according to the invention are oxygenated hydrocarbons, which are not made from Carbohydrates such as sugars or starch or cellulose consist.These oxygenated hydrocarbons should be more than 50Ji, preferably more than £ 80 and especially 100% of the required Deliver carbon. They can consist of alcohols,% ketones, aldehydes, prayers and acids, preferably Sue compounds bit about 1 to 50 carbon atoms la molecule which are obtained by oxidation of petroleum fractions. Oxygenated hydrocarbons are preferred, welohe from "crude oil fractions with about 2 to 20 coals *

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BAD ORIGINALBATH ORIGINAL

atoffatoeen lit Molekül erhalten werden· Insbesondere werden Alkohole alt 2 bis 10 Kohlenstoffatomen 1» Molekül und, vor alle« Äthylalkohol bevorzugt.atoffatoeen lit molecule can be obtained · in particular Alcohols old 2 to 10 carbon atoms 1 »molecule and, above all «ethyl alcohol preferred.

Die Erfindung wird im folgenden anhand der beigefügten Zeiohnung näher erläutert, in welcher eine Ausführungeform des Verfahrens scheraatisoh dargestellt iat.The invention is explained in more detail below with reference to the attached drawing, in which an embodiment of the procedure scheraatisoh presented iat.

Bei diesem Verfahren führt man eine Kohlenwasserstoff-» Fraktion wie leichte Maphtha oder eine C^-C^g-Fraktion duroh eine Leitung 1 in eine Oxydationazone 10 ein« Xm vorliegenden Falle wird die Oxydationazone mit erhöhter Temperatur und geringer Umwandlung Je Durchgang betrieben. Die Oxydation kann katalytisch oder nicht-fcatalytisch erfolgen und gegebenenfalls in Gegenwart ton freier Borsäure oder Boroxydverbindungen durchgeführt werden, welche die Bildung von Alkoholen in der Qxydationsaone fördern· In diesem Falle wird vor der weiter unten beschriebenen Alkoholextraktioß eise Hydrolyse und Borsäureentfernung durchgeführt. Duroh eine Leitung 2 wird Luft in die Oxydatlonssone geführt« Die Teeperatür liegt twiachen etwa 120° und 205°C, z.B. bei etwa 1630C, Der Druck in der Zone 10 wird auf etwa 1,05 bis 17*5 »tu, x.B. auf etwa 8,75 atu," gehalten.In this process, a hydrocarbon fraction such as light maphtha or a C ^ -C ^ g fraction is introduced through a line 1 into an oxidation zone 10. In the present case, the oxidation zone is operated at elevated temperature and lower conversion per pass. The oxidation can be catalytic or non-catalytic and, if necessary, carried out in the presence of free boric acid or boron oxide compounds which promote the formation of alcohols in the oxidation zone.In this case, hydrolysis and boric acid removal are carried out before the alcohol extraction described below. Duroh a line 2, air is fed into the Oxydatlonssone "The Teeperatür twiachen is about 120 ° and 205 ° C, for example at about 163 0 C, The pressure in the zone 10 is at about 1.05 to 17 * 5" tu, xB held at about 8.75 atu, ".

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JAVMOFIO OAB BAD OBIQiNAL.JAVMOFIO OAB BAD OBIQiNAL.

Die Reaktionsprodukte der Oxydation werden durch eine Leitung 3 aus der Zone 10 abgesogen und In eine Extraktionezone eingeführt. Sie enthalten etwa 10 bis 15£ oxydierte Produkte, welche mit einer duroh eine Leitung 4 in die Zone 20 eingeführten groflen Menge Wasser extrahiert werden. Das Wasser wird In einer Menge von 1 bis 90 Volumteilen, z.B. J5 bis Volumteilen wie etwa 9 Volumteilen je Volumteil durch die Leitung 5 eingeführtes teilweise oxydiertes Produkt verwendet. Das durch-die Leitung 4 zugeführte Extraktionsmittel kann aus reinem Wasser bestehen, jedoch wird vorzugsweise eine Nährlösung der oben beschriebenen Art verwendet. Durch eine Leitung 5 wird, vorzugsweise vor der Extraktion, eine Base wie Ammoniak in einer solchen Menge zugeführt, daß in der Lösung vorhandene Säuren vollkommen neutralisiert werden.The reaction products of the oxidation are passed through a pipe 3 sucked out of zone 10 and into an extraction zone introduced. They contain about 10 to 15 pounds of oxidized products, which introduced a line 4 into zone 20 with a duroh large amount of water can be extracted. The water is used in an amount of 1 to 90 parts by volume, e.g. J5 to Parts by volume such as 9 parts by volume per part by volume introduced through the line 5 partially oxidized product is used. The extractant supplied through line 4 can consist of pure water, but preferably a nutrient solution of the type described above is used. By a Line 5 becomes a base, preferably before the extraction such as ammonia supplied in such an amount that in the Any acids present in the solution are completely neutralized.

Da die oxygenierten Verbindungen in Wasser wesentlich besser löslich sind als die geradkettigen Kohlenwasserstoffe, werden bei der !Extraktion mit Wasser alle Oxydationsprodukte selektiv aus der Reaktionsmisohung entfernt. Hioht umgesetzte* Kohlenwasserstoffe werden aus der Zone 20 durch eine Leitung abgezogen und vorzugsweise durch eine Leitung 7 in die Oxydationszone 10 zurUokgeführt. Der Extrakt wird duroh eine Leitung θ aus der Zone 20 abgezogen und in eine Fermentetionszone 30 eingeführt. Duroh eine Leitung 15 werden soviel WasserSince the oxygenated compounds are much more soluble in water than the straight-chain hydrocarbons, During the extraction with water all oxidation products become selectively removed from the reaction mixture. Highly implemented * Hydrocarbons are withdrawn from zone 20 through a line and preferably through line 7 into the oxidation zone 10 lead to Uok. The extract becomes duroh a Line θ withdrawn from zone 20 and into a fermentation zone 30 introduced. Duroh a pipe 15 will be so much water

109842/0591 BAD ORIGINAL109842/0591 BATH ORIGINAL

und erforderliche Sals· zugegeben, das die gewünschten Ferwaiatatlonabedlngungen erzielt werden,and required sals · added that the desired Ferwaiatatlonabondungen be achieved,

Unter bestimmten Bedingungen kann es zwecksä£ig sein, den Extrakt durch eine Leitung 9 In «ine Zone 40 zu führen, wo man ihn mit Luft abstreift, «reiche durch eine Leitung 11 zugeführt und duroh eine Leitung 13 abgezogen wird. Die Luft kann dann wieder als Oxydationsluft in der Zone 10 verwendet werden. Die abgestreiften Produkte wjerden duroh eine Leitung 12 aus der Zone 40 abgezogen und Über die Leitung 8 in die Fermentationszone JO geführt. Das Proteinprodukt wird dann durch eine Leitung 14 aus der Fermentationszone JO abgezogen. Die Ernte der Proteinzellen von der Feroentationelösung kann dann auf verschiedene Weise, beispielsweise in zwei Stufen erfolgen. Dabei trennt aan die Zellen zunächst von der überstehenden Flüssigkeit ab, was beispielsweise durch Zentrifugieren (z.B. in einen geeohloseenen Behälter), Flüssigzyklone (oder Hydrozyklon), Verdampfen (z.B. als Rieselfil* oder Wischfilm), Filtrieren (z.B. Mikropocenf titration. Dialyse, umgekehrte Osmose), Ausflocken, Absetzen und Dekantieren (z.B. duroh Zugabe von Ausflockungsmittel^ Koagulationsmitteln oder Filtrationshilfen oder duroh pH- oder Teaperaturverinderungen) oder sonstige Trennverfahren oder Kombinationen dieser Verfahren erfolgen kann. Das abgetrennte ZellenkonzentratUnder certain conditions it can be useful that To lead the extract through a line 9 into a zone 40, where if it is wiped off with air, it is fed in through a line 11 and a line 13 is withdrawn. The air can then be used again as oxidation air in zone 10. The stripped products are passed through a pipe 12 withdrawn from zone 40 and passed through line 8 into fermentation zone JO. The protein product will then withdrawn through a line 14 from the fermentation zone JO. Harvesting the protein cells from the Fermentation solution can then take place in different ways, for example in two stages. Aan first separates the cells from the supernatant liquid from what, for example, by centrifugation (e.g. in an empty container), liquid cyclones (or hydrocyclone), evaporation (e.g. as a trickle fil * or Wiping film), filtering (e.g. micropocenf titration, dialysis, reverse osmosis), flocculation, settling and decanting (e.g. by adding flocculants ^ coagulants or filtration aids or duroh pH or tea temperature reductions) or other separation processes or combinations this procedure can be done. The separated cell concentrate

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BAD ORIQfKAL JArtiQitfBAD ORIQfKAL JArtiQitf

179Z187179Z187

kann dann getrocknet werden, beispielsweise durch Sprühtrocknen, Trommeltrocknen, Gefriertrocknen, Vakuumtrocknen, Hordentrockner Ofentrocknen oder durch sonstige Trockenverfahren oder Kombinationen dieser Verfahren. Unabhängig davon, welohes der obigen Verfahren zum Abtrennen und Trocknen der Proteinzellen angewendet wurde, erwies sich das erflndungsgemfisse Verfahren als außerordentlich wirtschaftlich, da es keine besonderen und umständlichen Trennverfahren und kein Auswaschen mit oberflächenaktiven Stoffen zur Entfernung von nicht umgesetzten Nährstoffen und Nebenprodukten erfordert (obwohl diese Behandlungen im weiteren Rahmen der Erfindung auch durchgeführt werden können), um ein Fertigprodukt mit sehr hohem Proteingehalt und keinen für Menschen und Tiere schädlichen Verunreinigungen zu erhalten·can then be dried, for example by spray drying, Drum drying, freeze drying, vacuum drying, tray dryer, oven drying or other drying methods or combinations of these methods. Regardless of which of the above methods for separating and Drying of the protein cells was used, the method according to the invention proved to be extremely economical, as there are no special and cumbersome separation processes and no washing out with surfactants to remove unreacted nutrients and by-products requires (although these treatments can also be carried out within the broader scope of the invention) to a finished product with a very high protein content and no contaminants harmful to humans or animals obtain·

Bei der Voroxydlerung der dem Peraentationsprozeö zugeführten Kohlenwasserstoff· werden Alkohole, Aldehyde, Keton·, Äther und verwandte- Säur··* und Esterverbindungen gebildet. Hierdurch wird der Verlust an Ausgangsmaterial in der Fernen· tationsluft vermindert und außerdem die Fermentationszelt verkürzt· Bei einer gegebenen Kohlenstoffanzahl haben die oxygenierten Verbindungen einen wesentlich niedrigeren Dampfdruck als die entsprechenden Kohlenwasserstoffe.During the pre-oxidation of the substances supplied to the peraentation process Hydrocarbons · alcohols, aldehydes, ketones ·, ethers and related acids ·· * and ester compounds are formed. Through this the loss of starting material in the remote ventilation air is reduced, as is the fermentation tent shortened · For a given number of carbon atoms, the oxygenated compounds have a significantly lower rate Vapor pressure than the corresponding hydrocarbons.

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BAD ORIGINAL JAt'BAD ORIGINAL YEAR '

Darüberhinaue Üben die Sauerstoffverbindungen aufgrund ihrer groBen W aaser löslichkeit nur einen geringen Bruchteil ihres Oesantdaftpfdruckes au·, wenn sie in verdünnten wässrigen Lösungen vorliegen, während die Xohlenwaseeretoffe euoh bei geringer Konzentration aufgrund ihrer sehr geringen Wasserlös Henkelt ihren gesaaten Dampfdruck ausüben. Infolgedeaaen nimmt die duroh die Fermentetionslösung geführte Luft wesentlich weniger oxygenierten Kohlenwasserstoff als gewöhnlichen Kohlenwasserstoff auf. Dies führt nicht nur zu einer starken Verminderung der Verluste bis herunter zu Null, wenn die abströmende Luft mit Wasser oder einer wässrigen Lösung gewasohen wird, sondern sohaltet praktisch auch die Feuer- und Explosionsgefahr aus, die immer besteht, wenn Kohlenwasserstoffe in bestimmten Verhältnissen alt Luft gemischt werden. ψ In addition, owing to their high solubility in water, the oxygen compounds only exert a small fraction of their oesant vapor pressure when they are in dilute aqueous solutions, while the hydrocarbonaceous substances exert their own vapor pressure at low concentrations due to their very low water solubility. As a result, the air passed through the fermentation solution absorbs significantly less oxygenated hydrocarbons than ordinary hydrocarbons. This not only leads to a strong reduction in losses down to zero if the outflowing air is washed with water or an aqueous solution, but also practically eliminates the risk of fire and explosion that always exists when hydrocarbons are old in certain proportions be mixed. ψ

Bel* erfindungsgeeAseen Verfahren wird die WHreeentwicklung la Fereentator elao vm etwa 10 bis ysjk gesenkt.Bel * erfindungsgeeAseen method, the WHree development la Fereentator elao vm about 10 to ysjk is lowered.

Der Hauptgedanke der vorliegenden Erfindung liegt alsoThe main idea of the present invention is thus

in der Verwendung von oxygenierten Stoffen wie oxygenierteein the use of oxygenated substances such as oxygenated tea

naturgas und oxygenierten BrdOlkohlenwesseratoffraktioaennatural gas and oxygenated BrdOlkohlenwesseratoffraktioaen

«it Siedepunkten bis zu etwa *85°C und insbesondere aolohen«With boiling points up to approx. * 85 ° C and especially aolohen

109842/0891109842/0891

BAD ORiGINAt.BAD ORiGINAt.

mit etwa 1 bi» JO Kohlenstoffatomen, Diese können aus Alkoholen, Estern, Aldehyden, Ketonen und Säuren bestehen.- Bevorzugte oxy genier te Verbindungen sind die Alkohole und insbesondere Äthylalkohol.. Weitsra gut geeignete oxygenierte Verbindungen sind beispialaauiso Iaopropyi-alkohol, Methyläthylketon, Essigsäure, Glycols, Huüyialkohcl, Aceton, Oebanoi, Carprinaäure, der "ibutylester der Sebacinsäure und Dimethylad!pat. Als Alkeαοle eignen sich beispielsweise Methanol,. Äthanol, n-Propanol, Isopropanol, geradkettige und verzweigte primäre C^- bis C-Q-Alkohole, 2°A*thylhexanol, Iaooctylalkohol, Olykol, Glycerin, Cyclohexanol, von Normaloder Isoparaffinen abgeleitete sekundäre C^- bis C,Q-Alkohole, Monoäthoxylate sekundärer Alkohole und Crotylalkohol (ungesättigter C^-Alkohol}. Geeignete Ketone und Aldehyde sind z.B. Aceton, Methyläthylketon, Methyllsobutylketon, Isoborneon, Cyclohexanon, Cyclopentanon, Stearylaldehyd, Laurylaldehyd, Acetaldehyd und Crotonaldehyd (ungeaättlger Cj1-Aldehyd). Geeignete Säuren sind Essigsäure« Propionaäure, Capronsäure, Caprinsäure, Laurinsäure, Ölsäure, Stearinsäure,* Linolsäure, Arachinsäure, Toluylsäure, Oxalsäure, Sebacinsäure, Terephthalsäure, Phthalsäure, Malonsäure, Hexahydroraellithsäure und Crotonsäure (ungesättigte C^-Säure). Als Ester eignen sich beispielsweise Methylacetat, Äthylacetat, Xthylbutyrat, Xthylstearat, Glykoldlacetat, Isopropylval^riat,with about 1 bi »JO carbon atoms, these can consist of alcohols, esters, aldehydes, ketones and acids. Preferred oxygenated compounds are the alcohols and especially ethyl alcohol .. Other well-suited oxygenated compounds are, for example, isopropyl alcohol, methyl ethyl ketone, acetic acid , Glycols, Huüyialkohcl, Aceton, Oebanoi, Carprinaäure, the "ibutyl ester of sebacic acid and Dimethylad! Pat. Suitable alkali oils are, for example, methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, straight-chain and branched primary C 1-4 alcohols, 2 ° A * thylhexanol, Iaooctylalkohol, Olykol, glycerol, cyclohexanol, of normal or isoparaffins derived secondary C. ^ - to C, Q alcohols, secondary alcohols Monoäthoxylate and crotyl alcohol (unsaturated C ^ -alcohol} Suitable ketones and aldehydes are acetone, methyl ethyl ketone , Methyl isobutyl ketone, isoborneone, cyclohexanone, cyclopentanone, stearylaldehyde, laurylaldehyde, acetaldehyde and crotonaldehyde (unsaturated Cj 1 -ald ehyd). Suitable acids are acetic acid, propionic acid, caproic acid, capric acid, lauric acid, oleic acid, stearic acid, * linoleic acid, arachidic acid, toluic acid, oxalic acid, sebacic acid, terephthalic acid, phthalic acid, malonic acid, hexahydroraellitic acid and crotonic acid (unsaturated C ^ acid). Suitable esters are, for example, methyl acetate, ethyl acetate, ethyl butyrate, ethyl stearate, glycol acetate, isopropyl val ^ riate,

109842/0591 BAD ORIGINAL·109842/0591 BATH ORIGINAL

Dimethylphthelet, Olyeeryltrioleat und aek.C12-Alkoholecetat. Beispiele für geeignete Äther sind Äthoxylate, DiKthyläther, Tetrahydrofuran und Dlieοpropylather.Dimethyl phthelet, oleoperyl trioleate and aek. C 12 alcohol acetate. Examples of suitable ethers are ethoxylates, diethyl ethers, tetrahydrofuran and Dlieοpropylather.

Naturgase wie Methan, Äthan, Propan und Butan können nach bekannten Verfahren, beispielsweise eine» Festetoffberieselungsverfahren oder in einem Reaktor Mit gepacktem Bett« mit Luft zu Alkoholen, Ketonen, Aldehyden, Äthern und Säuren oxydiert werden. Wie bereits erwähnt wurde, werden vorzugsweise oxydierte Substrate aus Kohlenwasserstoffraktlonen mit etwa 1 bis JO Kohlenstoffatomen und insbesondere solchen 1 bis 5 Kohlenstoff stollen verwendet· Die oxygenierten Verbindungen können natürlioh auch auf andere Welse und nach anderen Verfahren aus de «a C1- bis C50-KOhI enwasaerstoffen hergestellt werden. . *Natural gases such as methane, ethane, propane and butane can be oxidized with air to alcohols, ketones, aldehydes, ethers and acids using known processes, for example a "solid sprinkling process or in a reactor with a packed bed". As already mentioned, is preferably oxidized substrates of Kohlenwasserstoffraktlonen having about 1 are used cleats to JO carbon atoms, and especially those from 1 to 5 carbon · The oxygenated compounds may natürlioh to other catfish and by other methods of de «a C 1 - to C 50 -Carbon hydrogen is produced. . *

PUr das erfihdungsgealteee Verfahren kennen auoh okygenlerte Rohölfraktionen verwendet werden, beispielsweise eine solche mit der folgenden Zusammensetzung: %Okygenists are also familiar with the invention-based tea process Crude oil fractions are used, for example such with the following composition:%

1098^2/05911098 ^ 2/0591

BADBATH

1792T871792T87

,·. \ Mieohung A - Oxygenlerte Verbindungen, ·. \ Mieohung A - Oxygenated Compounds

MethylalkoholMethyl alcohol 56,6 *56.6 * Acetonacetone ÄthylalkoholEthyl alcohol 8,18.1 ÄthylaoetatEthyl acetate 2,72.7 MethylaoetatMethyl acetate DleethylpropanDleethylpropane o>o> tert.Butylalkoholtert-butyl alcohol 0,30.3 MethyläthylketonMethyl ethyl ketone 0,30.3 MethyllsopropenylketonMethyl isopropenyl ketone 0,30.3 Wasserwater 0,30.3

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläutert: Beispiel 1 The invention is illustrated in more detail by the following examples: Example 1

Bs wurde ein· Reihe kontinuierlicher aerober Feraentationsversuohe unter Verwendung des P1«Mediums und Äthylalkohol als einsiger Kohlenstoffquelle durchgeführt. Die Temperatur wurde auf 350C und der pH-Wert durch Zugabe von Ammoniuothydroxyd auf 7,0 gehalten. Oer Energieverbrauch lag aufgrund der Löslichkeit des Xthanole im Permentatlonsmedium unter 3,5 PS/100 Osllonen Nährlösung. Der Sauerstoffverbrauoh lag infolge der Verwendung von oxygenierte* Kohlenwasserstoff unter Ifc Je g Zellenausbeute. Die Ausbeute betrug etwa 0,6 g Zellen je g Äthanol. Die Ergebnisse sind im einzelnen in der folgenden Tabelle 3 susaanengestelltiBs was a series of continuous aerobic · Feraentationsversuohe using the P performed 1 "medium and ethyl alcohol as einsiger carbon source. The temperature was maintained at 35 0 C and the pH by addition of Ammoniuothydroxyd to 7.0. Oer energy consumption was due to the solubility of the Xthanole in Permentatlonsmedium below 3.5 PS / 100 Osllonen broth. The oxygen consumption was below Ifc per g cell yield due to the use of oxygenated * hydrocarbons. The yield was about 0.6 g cells per g ethanol. The results are shown in detail in Table 3 below

109842/0591109842/0591

BAD ORIGINALBATH ORIGINAL Tabelle 3Table 3

Versuch Verweilzeit Wachstums- £Xthanol Ausbeute Std. gesohwln- ia Ausgangs- g Zellendigkeit material g Äthanol fi/l/h _Trial Dwell time growth ethanol Yield hours total ia starting g cell end material g ethanol fi / l / h _

1 2,0 e,3 2,8 0,601 2.0 e, 3 2.8 0.60

2 1,5 10,5 2,6 0,592 1.5 10.5 2.6 0.59

3 1,5 10,3 2,6 0,553 1.5 10.3 2.6 0.55

Ein kontinuierliches Verfahren kann demnach mit geringem Energieverbrauch durchgeführt werden.A continuous process can therefore be carried out with little energy consumption.

Bei Verwendung einer C^g-Kohlenwasseratoffraktlon können bei dieser geringen Energiezufuhr entsprechende Wachsturnsgeschwindigkeiten nur durch Einführung großer Mengen Sauerstoff, d.h. etwa dreimal so viel Sauerstoff wie bei der Verwendung von Äthanol, erzielt werden (vergleiche Beispiel 4), Diese verminderte Sauerstoffausnutzung bei Verwendung von geradkettigern Kohlenwasserstoff beruht auf dem erhöhten Widerstand gegen den Massenübergang duroh die Anwesenheit einer % zusätzlichen Kohlenwasserstoffphase.When using a C ^ g-hydrocarbon fraction, at growth rates corresponding to this low energy input only by introducing large amounts of oxygen, i.e. about three times as much oxygen as with the Use of ethanol, can be achieved (see example 4), This reduced oxygen utilization when using straight-chain hydrocarbons is due to the increased resistance against the mass transfer by the presence of an additional% hydrocarbon phase.

Beispiel 2Example 2 Es wurden weitere kontinuierliche aerobe PeroentationsversucheFurther continuous aerobic peroentation attempts were made

auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1 unter Verwendung desin the same manner as in Example 1 using the

109842/0591109842/0591

BADBATH

Pj -Mediums und etwa 2Ji Äthanol bzw. Paraff lngemisoh durchgeführt. Das Parafflngenlsoh hatte die folgende Zusammensetzung: Pj medium and about 2 liters of ethanol or paraffin lngemisoh. The paraffin length had the following composition:

GeredkettleeGeredkettlee ParaffineParaffins 11 ,6, 6 °13° 13 3232 ,3, 3 C C l » «/~«/ ~ C16 C 16 2222nd ,6, 6 88th .1.1 C18 C 18 00 .8.8th °19° 19 0,010.01 Aromaten .Aromatics. unterunder

Öle Ergebnisse dieser Versuohe sind In der folgenden Tabelle k wiedergegeben.The results of these tests are given in Table k below.

109842/0591109842/0591

Tabelle 4Table 4 Kohlens toffqu·!leCarbon source!

Zusaneeneetsung der getrockneten Zellen flew JS Application of the dried cells flew JS

Äthanol
Äthanol
Äthanol
Äthanol
Äthanol
Äthanol
Äthanol
Ethanol
Ethanol
Ethanol
Ethanol
Ethanol
Ethanol
Ethanol

Paraffingenisoh
Paraffingemlsoh
Paraffingenisob
Parafflngenieoh
Paraffin isoh
Paraffin compound
Paraffin isob
Parafflngenieoh

Oeeautproteln - (K χ 6.85) Oeeautproteln - (K χ 6.85)

76,6 78,7 77,0 78,876.6 78.7 77.0 78.8

85^685 ^ 6

66,5 65,6 61,8 68,066.5 65.6 61.8 68.0

OesaetfettOily fat

4,04.0

6,06.0

2,3 3,1 5,62.3 3.1 5.6

12,1 15,0 17,4 19,912.1 15.0 17.4 19.9

Ascheash

J, 4,20J, 4.20

}.9β 4,10} .9β 4.10

4,70 4,144.70 4.14

Aus der obigen Tabelle geht hervor, dafl bei Venrendung von Äthanol wesentlich höhere Proteinauebeuten erzielt werden. Außerdee ist der Fettgehalt des Produktes bei Verwendung von Äthanol wesentlich geringer.The table above shows that when using ethanol significantly higher protein yields can be achieved. Besides is the fat content of the product is significantly lower when using ethanol.

Beispiel ?Example ?

Es wurden weitere kontinuierliche aerobe Fementatlonsversuohe durchgeführt, wobei wlederua Vergleiche swisohsn de» gleiohen Paraffingemlsoh wie in Beispiel 2 und Äthanol sowie xwisohen einer relativ geringen Energiezufuhr von 3 PS/100 Oallonen und einer relativ hohen Energiezufuhr von 10 PS/Oallonen angestellt wurden. Es wurden wieder jeweils 2 0sw.£ Äthanol b«i.Paraffinee*ieoh In einen P.-Mediua verwendet. Die Ergebnisse dieaer Versuche sind in der folgenden Tabelle 5 siis isswngea teilt»There were further continuous aerobic Fementatlonsversuohe carried out, whereby wlederua comparisons swisohsn de »equate Paraffin mixture as in Example 2 and ethanol and also xwisohen one relatively low energy input of 3 hp / 100 oallons and one relatively high energy input of 10 PS / Oallonen were employed. In each case 20% of ethanol were again used in paraffinee * ieoh In a P. mediua used. The results of these experiments are in the following table 5 siis isswngea divides »

109842/0591109842/0591

BADBATH

ar'ar ' ■'-■-,■ '- ■ -, Tabelle 5Table 5 «•ohstuwe-«• ohstuwe- eelektivltät -selectivity - mit Äthanolwith ethanol undand Paraffinparaffin C
*
C.
*
-- Analyse der trockenen ZellenAnalysis of the dry cells Asche
%
ash
%
ι Qesant-t: AolnoV
fett säuren
% %
ι Qesant-t: AolnoV
fatty acids
%%
60
55
60
55
H2O
%
W,
H 2 O
%
W,
psAoopsAoo Vergleichende FementationsversucheComparative Fementation Attempts geschwln-
dlgkelt
swift
dlgkelt
g Zellen g Zellen
Je g Je g C
Ausgangs- im
substrat Substrat
g cells g cells
Per g per g C
Starting in
substrate substrate
0o-0ehalt0 o content O^-Ver-O ^ -Ver- 44,944.9 NN 2,4
4,7
2.4
4.7
8,7
3,2
8.7
3.2
48
34
48
34

4,5
7,2

4.5
7.2
Galln.Galln. SubstratSubstrate 8,1
10,5
8.1
10.5
0,70 1,34
0,59 1,13
0.70 1.34
0.59 1.13
ti
der ImT^t
ti
the ImT ^ t
brauchneed 50,3
55,4
50.3
55.4
11,2
12,5
11.2
12.5
M
24,8
M.
24.8
16,0
20,6
16.0
20.6
52
52
52
52
iViV
33 8,5
10,7
8.5
10.7
0,71 0,83
0,54 0,64
0.71 0.83
0.54 0.64
41,0
57,0
41.0
57.0
48,
32,
48,
32,
47,0
44,7
47.0
44.7
3,2
7,0
3.2
7.0
4,7
4,7
4.7
4.7
4747 5:15: 1
ÄthanolEthanol 10,6
9,4
10.6
9.4
0,59 1,13
0,58 1,11
0.59 1.13
0.58 1.11
70,8
78,0
70.8
78.0
46,2
50,4
46.2
50.4
u·?
12,4
u ·?
12.4
3,6
5,9
3.6
5.9
8,6
22,1
8.6
22.1
4,4
10,1
4.4
10.1
co
co
co
co
1010 Paraffinparaffin 11,2
9,3
11.2
9.3
0,94 1,10
0,71 0,83
0.94 1.10
0.71 0.83
48,0
42,3
48.0
42.3
49,
57,
49,
57,
9,4
10,7
9.4
10.7
IOIO 1010 ÄthanolEthanol 49,5
53,0
49.5
53.0
45,
51,
45,
51,
CJ
cn
co
CJ
cn
co
Paraffinparaffin ,0
7
, 0
7th
II. ,0
► 0
, 0
► 0
,7, 7
,0, 0

- 54 -- 54 -

Aus den Werten in Tabelle 4 geht hervor, dad bei Verwendung von Äthylalkohol in Vergleich zu der Verwendung von Paraffin unerwartete vorteilhafte Ergebnisse erzielt werden. So wurde die Zellenausbeute in g Je g Kohlenstoff im Substrat bei 3 FS/IOO Oallonen von 0,83 auf 1,34 gesteigert. Ebenso wurden vorteilhafte Ergebnisse in Bezug auf den Sauerstoffgehalt des Produktes erzielt. Diese Vorteile sind signifikant bei relativ niedriger PS, wie Beispiele bei etwa 1-8 PS und insbesondere 3-4PS/1OO Oallonen zeigten.The values in Table 4 show that when used ethyl alcohol can produce unexpected beneficial results compared to the use of paraffin. So became the cell yield in g per g of carbon in the substrate increased from 0.83 to 1.34 with 3 FS / 100 oallons. Likewise were beneficial results in terms of oxygen content of the product. These benefits are significant at relatively low horsepower, such as examples at around 1-8 horsepower and in particular 3-4PS / 100 oallons showed.

Diese Werte weisen die gleichen Vorteile in der Qualität des Produktes aus wie die weiter oben für oxygenierte Substrate gezeigten, d.h. geringerer Fettgehalt und höherer Qehalt an Aminosäuren und Gesamteticketoff. Außerdem geht aus den Werten die Verbesserung der Pensefltationswlrkung bei Verwendung von oxygenierten Substraten hervor. So zeigen insbesondere die Werte bei der geringen Mischenergie (3 PS/100 Oallonen), daß bei Verwendung von Xthanol geringere Sauerstoffkonzentration^ zur Erzielung der gleichen Wache·* % tuassesohwlndigkelt als bei η-Paraffinen erforderlich sind» Die Vorteile der Verwendung oxygenierter Substrate bei geringem Energieaufwand gehen insbesondere aus dea näohsten Beispiel hervor.These values show the same advantages in quality of the product as described above for oxygenated substrates shown, i.e. lower fat content and higher content of amino acids and total ticket off. Also goes the improvement of the penultation effect from the values when using oxygenated substrates. This is shown in particular by the values for the low mixing energy (3 PS / 100 Oallonen) that when using Xthanol lower oxygen concentration ^ to achieve the same guard *% tuasses owlndigkelt than are necessary for η-paraffins » The advantages of using oxygenated substrates with low energy consumption go in particular from dea closest example.

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BAD OWQiN^ÖiHO QASBAD OWQiN ^ ÖiHO QAS Beispiel »Example "

Ea wurden weitere kontinuierliche aerobe Permentationsversuohe unter Verwendung eines P1-Mediums und Äthanol bei 25°C mit Micrococcus cerifloans durchgeführt. Die prozentuale Zunahme des Sauerstoffverbrauche gegenüber' der Verwendung eines n-Paraffinsubstrats 1st in der beigefügten Zeichnung mit der Kurve 1 dargestellt.Ea further continuous aerobic permeation tests were carried out using a P 1 medium and ethanol at 25 ° C. with Micrococcus cerifloans. The percentage increase in oxygen consumption compared to the use of an n-paraffin substrate is shown by curve 1 in the accompanying drawing.

Da das Äthanol im Fernentatlonsmedium löslich 1st, enthält der Fermentetor bei Verwendung von Xthanol ens Substrat eine Phase weniger als bei Verwendung von η-Pa raff inen. Infolgedessen wird bei Verwendung von Xthanol als einzige Kohlenetoffquelle und gleicher Energiezufuhr der Widerstand gegen den NassenUbergang vermindert und die Sauerausnutzung erhöht. So wird der Sauerstoffverbrauch bei Verwendung von Xthanol anstelle von n-Paraffinen bei einer Energiezufuhr von > PS/IOO Gallonen um 21OJ* erhöht (siehe Kurve 1). Hieraus geht hervor» dal *ur Erzielung der gleichen Waohstumsgesohwlndigkelt alt der gleichen geringen Energiezufuhr bei Verwendung von n-Paraffi nen die Triebkraft für den SauerstoffntassenUbergang erhöht werden müßte. Naoh den erhaltenen Ergebnissen müßte bei Verwendung von η-Paraffinen etwa die dreifache Sauerstoff« »enge kontinuierlich in den Permentator eingeführt werden»Since the ethanol in Fernentatlonsmedium 1st soluble, the Fermentetor when using Xthanol e n s comprises a substrate phase is less than when using η-Pa raff ynes. As a result, when ethanol is used as the only source of carbon and the same supply of energy, the resistance to the wet transition is reduced and the acidic utilization is increased. When using Xthanol instead of n-paraffins, the oxygen consumption is increased by 210J * with an energy supply of> PS / 100 gallons (see curve 1). From this it follows that in order to achieve the same growth rate as the same low energy supply when using n-paraffins, the driving force for the oxygen cup transition would have to be increased. According to the results obtained, when η-paraffins are used, about three times the oxygen "tightness" would have to be continuously introduced into the permentator.

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BADBATH

die gleiche Zellenausbeute zu erzielen. Ohne Anreicherung dee eintretenden Gasstromes mit Sauerstoff könnte die gleiche Wachstumsgesohwlndigkelt nur duroh Erhöhung der Energiezufuhr ersielt werden. So wird bei gleicher Zellenauebeute und einströmender Sauerstoffkonzentration durch die.Verwendung von Äthanol aufgrund seiner Löslichkeit im Fercientationemedlum der NaaaenUbergang weeentllch gefördert und eine Durchführung der Fermentation bei wesentlich geringerer Energiezufuhr ermöglicht. Oa diese Vorteile auf der Löslichkeit von«Äthanol beruhen, kann geschlossen werden, daß mit anderen lösliohen Substraten die gleichen Vorteile erzielt werden.to achieve the same cell yield. Without enrichment The incoming gas flow with oxygen could have the same growth rate, only by increasing it the energy supply can be obtained. So with the same Cell build-up and inflowing oxygen concentration through the use of ethanol due to its solubility in the Fercientationemedlum the NaaaenUbergang weeentllch promoted and enables fermentation to be carried out with significantly lower energy input. Oa this one Advantages based on the solubility of «ethanol can concluded that with other soluble substrates the same advantages can be achieved.

Beispiel 5Example 5

Eicosan (C20) wurde unter Verwendung einer Kaliuaperoanganatlöaung, welche eine geringe Menge Natriumhydroxyd enthielt, oxydiert; duroh die das Eloosan enthaltende LOsung wurde etwa 4 Stunden lang Luft geblasen, wobei die TeapsraturEicosan (C 20 ) was oxidized using a potassium peroanganate solution containing a small amount of sodium hydroxide; The solution containing the elosan was blown with air for about 4 hours at the tea temperature

der Löoung ISO0C betrug. Die Reaktionsaiwohung miMe altthe Löoung ISO was 0 C. The response warning miMe old

ν» Natriunhydroxyd neutralisiert und «it Wasser versetzt.ν "Sodium hydroxide neutralized and" water added.

Es bildete sich eine die Sauren enthaltende wässrige PhSSe4, welche abgelassen wurde. Die verbleibende füate wurde mit Hexan versetzt und nochmals mit Wasser extrahiert. Denn An aqueous PhSSe 4 containing the acids formed and was drained off. The remaining oil was treated with hexane and extracted again with water. Because

1098A2/06911098A2 / 0691

SADORlQfNAtSADORlQfNAt

wurde das Hexan entfernt und eine Phase von oxygenierten C12-C1g-Kohlerwasserfitoffen abgetrennt. In einem P1-Medium, welohes bezogen auf Kohlenetoff \% der oxygenierten C12-Cjg-Verbindungen enthielt, wurde bei 300C mit einer Rührgeschwindigkeit von 300 U/min Micrococcus cerificans (14987) gezüchtet.· Die Zellenausbeute betrug 3,46 g/l. Dies ist die nach der vorhandenen Kohlenstoff menge maximal erzielbare Ausbeute. Die mit diesem Substrat erhaltenen lebenswichtigenthe hexane was removed and a phase of oxygenated C 12 -C 1 g carbon dioxide was separated off. In a P 1 medium, welohes based \ on Kohlenetoff% of oxygenated C contained 12 -Cjg compounds, was grown at 30 0 C with a stirring speed of 300 rev / min Micrococcus cerificans (14987). The cells · yield was 3.46 g / l. This is the maximum achievable yield based on the amount of carbon present. The vital ones obtained with this substrate

Aminosäuren sind im Vergleich zu den mit einer C- Kohlen-Amino acids are compared to those with a C-carbon

16 wasserstoffraktion als Substrat erhaltenen Aminosäuren16 amino acids obtained hydrogen fraction as substrate

in der folgenden Tabelle 6 wiedergegeben.reproduced in the following table 6.

Tabelle 6Table 6

Lebenswichtige Cl6-Kohlen- Oxygenierte f> Erhöhung Aminosäuren wasserstoff C^-C^Yer· Vital C l6 carbon oxygenated f> increase amino acids hydrogen C ^ -C ^ Yer ·

3,23.2 bindungenties 1515th IsoleucinIsoleucine 5.05.0 3,73.7 1010 LeucinLeucine 4,64.6 5*55 * 5 22 LysinLysine 2,52.5 2,82.8 1212th PhenylalaninPhenylalanine 2,32.3 2,42.4 44th TyrosinTyrosine 0,70.7 4040 CystinCystine 1^41 ^ 4 1,61.6 1414th MethioninMethionine 3.73.7 4,14.1 1111 ThreolinThreolin 3.73.7 4,44.4 1919th ValinValine

Durch die Verwendung der oxygenierten Verbindungen im Vergleich zum C,^Kohlenwasserstoff wurde der Gehalt anBy using the oxygenated compounds in the Compared to the C, ^ hydrocarbon, the content of

109842/0591109842/0591

SchwefelamlnoaKuren (Cystin und Methionin) demnach um 21Ji erhöht und Insgesamt eine allgemeine Zunahme der lebenswichtigen Aminosäuren erzielt.Sulfur amlnoa cures (cystine and methionine) accordingly 21Ji increased and overall a general increase in essential amino acids.

Beispiel 6Example 6

In einem P^-Medium mit 1% der oben als "Mischung A" beschriebenen Mischung von oxygenierten Verbindungen wurde Micrococcus cerlficans (14987) bei j5O°C und 200 U/min gezüchtet. Es wurden eine Zellenausbeute von 2,66 g/l erzielt. Dies ist die maximal erzielbare Zellenausbeute, wenn man annimmt, daß die Mlkroorganismuszellen zu 30% aus Kohlenstoff bestehen und die Hälfte des Kohlenstoffes in COg übergeht. 0er auf der Mischung der oxygenierten Verbindungen gezüchtete Micrococcus ceriflcans zeigte gegenüber dem auf einer C^g-Kohlenwasserstoffraktion gezüchteten eine wesentliche Erhöhung des Schwefelaminosäurengehalts, nämlich um 14$, und des Proteingehaltes« nämlich um Dies geht aus der folgenden Tabelle 7 hervor:In a P ^ medium with 1% of the mixture of oxygenated compounds described above as "Mixture A", Micrococcus cerlficans (14987) was grown at 150 ° C. and 200 rpm. A cell yield of 2.66 g / l was achieved. This is the maximum achievable cell yield, assuming that the microorganism cells consist of 30% carbon and half of the carbon is converted into COg. Micrococcus ceriflcans grown on the mixture of oxygenated compounds showed a substantial increase in the sulfur amino acid content, namely by $ 14, and in the protein content by $ 14 compared to that grown on a C ^ g hydrocarbon fraction. This can be seen from the following table 7:

Tabelle 7Table 7

inosäureino acid
Schwefelaminosäuren lysin (N χ 6,25)Sulfur amino acids lysine (N χ 6.25)

SubstratSubstrate μ μ Aminosäure Je 100 g Protein Gesamtprotein*Amino acid per 100 g protein total protein *

Cl6-Kohlen- 1,86 4,57 61,7C 16 -carbons- 1.86 4.57 61.7

wasserstoffhydrogen

Mischung A (oxy- 2,12 5,01 72,2Mixture A (oxy- 2.12 5.01 72.2

genierte Verbindungen) generated connections)

*) Bestimmung nach JCJeldahl.*) Determination according to JCJeldahl.

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Wie aus Beispiel 5 und 6 hervorgeht, wächst Micrococoue oerlflcana auf einer Mischung von oxygenierten Verbindungen. Der geerntete Mikroorganismus weist einen hohen Proteingehalt, einen hohen Gehalt an lebenswichtigen Aminosäuren und eine gute Verteilung der für die Ernährung vorteilhaften Aminosäuren auf.As can be seen from Examples 5 and 6, Micrococoue grows oerlflcana based on a mixture of oxygenated compounds. The harvested microorganism has a high protein content, a high content of essential amino acids and a good distribution of those beneficial for nutrition Amino acids.

Beispiel 7Example 7

Es wurde eine Reihe von aeroben Fermentatlonsver£u chen unter Anwendung eines P-»Mediums und verschiedener oxygenierter Kohlenwasserstoffe bei einer Temperatur von t'rwa 300C durchgeführt. Als Mikroorganismus wurde Micrococcus cerifleans (14987) verwendet.A series of aerobic Fermentatlonsver £ u chen using a P- "medium and various oxygenated hydrocarbons at a temperature of t'rwa carried out 30 0 C. Micrococcus cerifleans (14987) was used as the microorganism.

Der Proteingehalt, der Index der lebenswichtigen Aminosäuren und das Aminosäureprofil der auf den verschiedenen reinen oxygenierten Kohlenwasserstoffen gezüchteten Mikroorganismen wurde nach den üblichen Verfahren bestimmt und auf übliche Welse berechnet« % The protein content, the index of the essential amino acids and the amino acid profile of the microorganisms grown on the various pure oxygenated hydrocarbons were determined according to the usual methods and calculated on the usual catfish « %

Der prozentuale Proteingehalt wurde aus dem nach dem Kjeldahl-Verfahren in Gewichts-% bestimmten Stickstoffgehalt der Zellen durch Multiplikation dieses Oehaltes mit 6,23 berechnet. Der Index der lebenswichtigen AndnosMuren in denThe percentage protein content was determined from the nitrogen content determined by the Kjeldahl method in% by weight of the cells by multiplying this content by 6.23 calculated. The index of the vital AndnosMuren in the

109842/0591109842/0591

BAD ORIGINALBATH ORIGINAL

~ 40 -~ 40 -

geernteten Zellen wurde nach dem Üblichen Verfahren unter Verwendung von Si als Vergleichsbasis bestimmt. Si wird ale Ideales Protein mit einem Index der lebenswichtigen Aminosäuren von 100,0 angesehen.harvested cells were taken according to the usual procedure Determined to use Si as a basis for comparison. Si will ale Ideal protein with an index of vital Amino acids of 100.0 considered.

Die Bestimmung des Arainosäureprofils der geernteten Zellen erfolgte für alle angegebenen Komponenten ohromatographiach mit Ausnahme von Tryptophan, welches mikrobiologischThe determination of the arainoacid profile of the harvested cells was carried out ohromatographiach for all specified components with the exception of tryptophan, which is microbiologically

bestimmt wurde.was determined.

Die Ergebnisse dieser Untersuchungen sind in der folgenden Tabelle 8 wiedergegeben.The results of these investigations are shown in Table 8 below.

109842/0591109842/0591

BAOORfQlNAtBAOORfQlNAt Tabelle 8Table 8

Auf verschiedenenOn different oxygeniertenoxygenated Äthylethyl .-.- 6,56.5 Verbindungen gezüchteter Mlcrooocfeus verificansConnections of cultivated Mlcrooocfeus verificans 5.765.76 Cetyl-Cetyl Methylmethyl 7,47.4 &ek.& ek. Ieo·»Ieo » 6,26.2 Nonoal-Nonoal Methylmethyl FensentationsbedingungenNotice conditions alkoholalcohol 4,24.2 Alkoholalcohol alkoholalcohol 5.15.1 Butyl-Butyl propyl-propyl 4,14.1 propyl-propyl ethylethyl Substrat (IJt bezogenSubstrate (IJt related 7,97.9 ÖlsäureOleic acid 7.07.0 alkoholalcohol . alkohol. alcohol 6,16.1 alkoholalcohol ketonketone auf Kohlenstoff)on carbon) 3,693.69 0,10.1 5,585.58 __ PP. 0,10.1 6,966.96 0,30.3 6,76.7 4,624.62 0,30.3 4,404.40 1,411.41 0,30.3 1,011.01 1,251.25 Zellengewicht,Cell weight, 8.88.8 4,24.2 10.810.8 g/1/24 Std.g / 1/24 hours 3,53.5 7,67.6 g-Aminoeäure jeg-amino acid each 3,63.6 100 g Protein100 g protein 3l43l4 g/1/48 Std.
«
g / 1/48 hours
«
2,32.3 0,20.2 6,16.1 5,55.5 2.12.1 5,95.9 5,25.2
Aminosäurenamino acids 4,64.6 0,40.4 4,84.8 3! 43! 4th 3,33.3 2,12.1 4.1 *4.1 * AlaninAlanine 6,16.1 8.48.4 6,36.3 5,6 .5.6. 6,26.2 4,64.6 6,46.4 5,35.3 ArgininArginine w, -w
3.5
w, -w
3.5
°·5° 5 0,20.2 3,83.8 0,10.1 0,2 ^0.2 ^
AsparsglnsMureAsparsglnsMure 0.40.4 3.13.1 0.40.4 l!?l !? 0,00.0 1,31.3 0,50.5 0 A0 A CysteinsaureCysteinic acid 3,73.7 9.49.4 0.20.2 6.56.5 0.10.1 8.28.2 5.9 *5.9 * CystinCystine 3,43.4 5,25.2 ^, ^
3,3
^, ^
3.3
\#,b
2,6
\ #, b
2.6
w, "^
3,2
w , "^
3.2
2,42.4 3.33.3 2,92.9
Qlutas)1 ntiMtintQlutas) 1 ntiMtint 2,32.3 3,33.3 3,33.3 2,52.5 1.61.6 2,72.7 GlycinGlycine 1>1> 2,72.7 2,72.7 2,32.3 3.03.0 2,52.5 HistidinHistidine 2,72.7 0.10.1 3,93.9 4,34.3 3.53.5 5.45.4 3,73.7 IsoleucinIsoleucine 6,66.6 ", *
2,9
", *
2.9
4,14.1 2,02.0 4,84.8 2,02.0 4,34.3 4,64.6
LeucinLeucine ;n.b.; n.a. 2,62.6 1,61.6 4,34.3 00 3,13.1 1.61.6 0,80.8 IjTS inIjTS in 78,7578.75 3,13.1 0.20.2 0,720.72 0.30.3 0,780.78 0,30.3 0.30.3 MethioninMethionine 4 68.4 4 68.4 2,62.6 69,7569.75 2,62.6 64,5064.50 2,5
2,4
2.5
2.4
Mȣti^ QFiI Ttsu 3 foxytfM ȣ ti ^ QFiI Ttsu3 foxytf 2^42 ^ 4 55,255.2 2,72.7 47,047.0 2,62.6 2%2% PhenylalaninPhenylalanine 3,43.4 111111 2,62.6 2,82.8 2,62.6 ErollnErolln 1.121.12 2,92.9 3,13.1 2,12.1 3,23.2 SerinSerine 44,63
57,9
44.63
57.9
2,12.1 1,81.8 4,04.0 1,81.8
ThreoninThreonine 3,53.5 n.b.n.b. 3.03.0 TyrosinTyrosine 0,670.67 o',67o ', 67 67,6067.60 n.b.n.b. ValinValine 74.1374.13 55,0055.00 53.553.5 55*6355 * 63 TryptophanTryptophan 51,351.3 50,350.3 45 145 1 Oesaetprotein (Mx6,25)Oily protein (Mx6.25) *ff TtTif dorrt πφ·** ff TtTif dorrt πφ *

n.b· m ntmta, Destisetnb · m ntmta, Destiset

Aue dar vorstehenden Tabelle geht hervor, das nach den erfindungagemäsaen Verfahren gezüchteter ItLcrocoocus oeriflcans die wertvolle Kombination von hohem Proteingehalt von über , hohen Index der lebenswichtigen Aminosäuren von Über und für Erntthrungszwecke vorteilhaften Aminosäureprofil aufweist, Koraus weiterhin die Brauchbarkeit der Erfindung zur blosynthetis en Erzeugung von Protein auf KuBerat Wirteohaftliehe Weise hervorgeht. Die Erfindung eignet sich alao ganz besonders zur Herstellung von proteinreichen Produkten «it hohen Nährwert für die menschliche und tierisch· Ernährung.The table above shows that according to the inventive method of cultured ItLcrocoocus oeriflcans the valuable combination of high protein content of over , High Index of Vital Amino Acids from Over and amino acid profile advantageous for harvesting purposes Koraus continues to demonstrate the usefulness of the invention for the blosynthetic production of protein on KuBerat Host liability way emerges. The invention is suitable alao especially for the production of protein-rich Products «with high nutritional value for human and animal · Nourishment.

Beispiel 8Example 8

Es wurden weitere aerobe Fermentationsversuche unter Verwendung eines P -Mediums mit 9 verschiedenen Bakterien bei einer Temperatur von 300C und mit einem Anfangs-pH von I9 8 durchgeführt. Als Substrat wurde Äthylalkohol verwendet. Der Stickstoffgehalt, der Proteingehalt, der Index der
lebenswichtigen Aminosäure und das Aainoaäureprofil wurden auf gleiche Weise wie in Beispiel 7 bestimmt. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle 9 wiedergegeben.
There were further carried out aerobic fermentation experiments using a P -Mediums with 9 different bacteria at a temperature of 30 0 C and an initial pH of I 9. 8 Ethyl alcohol was used as the substrate. The nitrogen content, the protein content, the index of
The essential amino acid and the amino acid profile were determined in the same manner as in Example 7. The results are shown in Table 9 below.

109842/0591109842/0591

Tabelle 9 Verschiedene auf Äthylalkohol gezüohtete Mikroorganismen Table 9 Various microorganisms grown on ethyl alcohol

FermentatlonabedingungenFermentation conditions

Mikroorganismus, ATCC-Kr. 15528 15522 15523 15524 15525 15526 15527 - 191*0Microorganism, ATCC-Kr. 15528 15522 15523 15524 15525 15526 15527 - 191 * 0

QMB -Nr. - - - - 1518QMB no. - - - - 1518

na Äthylalkoholna ethyl alcohol

Zellengewioht &/1/9A Std. g/1/48 Std.Cell weight & / 1 / 9A hrs. G / 1/48 hrs.

Aminosäurenamino acids

-»Alanin °Arginin- »Alanine ° arginine

"'Asparaginsäure"'Aspartic Acid

^Olutamineäure coiycin^ Olutamic acid coiycin

"^Isoleucin "iLeucin lysin Methionin"^ Isoleucine" iLeucine lysine methionine

MethioninsuXifoxydMethionine sulfoxide PhenylalaninPhenylalanine

Prolin Serin Threonin Tyrosin ValinProline Serine Threonine Tyrosine Valine

Gesamtprotein (Nx6,25)Total Protein (Nx6.25) AminosäureindexAmino acid index

1.6 1,61.6 1.6

4,04 3*64.04 3 * 6

6.7 7,16.7 7.1

5,95.9

5,05.0

6,5
0,2
0,3
7,6
6.5
0.2
0.3
7.6

3,13.1

§'5
4,5
1,6
0,3
2,6
2,4
2,8
§ ' 5
4.5
1.6
0.3
2.6
2.4
2.8

2,9
2,2
2.9
2.2

67^63
54,1
67 ^ 63
54.1

1,61.6

3,94
8,0
3.94
8.0

1,6 1,6 1,6 1,61.6 1.6 1.6 1.6

1,6 1,61.6 1.6

4f38 3*28 3.32 3,70 1,08 1,5 8,5 7,07 6,0 6,85 2,22 3,24 f 38 3 * 28 3.32 3.70 1.08 1.5 8.5 7.07 6.0 6.85 2.22 3.2

k Aminosäure Je 100 g Proteink amino acid per 100 g protein

6,26.2

0,10.1

0,40.4

9,39.3

3,5 3,3 2,73.5 3.3 2.7

1,81.8

0,3 2.40.3 2.4

2,5 2,7 3,0 2,12.5 2.7 3.0 2.1

68,'63 52,768, '63 52.7

0,1
0,4
0.1
0.4

8,8
3,7
3,2
3,1
5,9
8.8
3.7
3.2
3.1
5.9

2,6
2,8
2.6
2.8

2,42.4

4,1
68,69
57,5
4.1
68.69
57.5

6,26.2

5,35.3

7,07.0

0,10.1

5
8,0
2 · 5
8.0

3,7
3,1
3,1
3.7
3.1
3.1

1:11: 1

1,4
0.6
2,6
2,4
2,8
3,2
2,2
1.4
0.6
2.6
2.4
2.8
3.2
2.2

3,9
68,31
56,3
3.9
68.31
56.3

0,t)0, t)

0,5
8,2
3,3
1,6
3,0
0.5
8.2
3.3
1.6
3.0

,3
1,6
0,3
2,5
2,4
, 3
1.6
0.3
2.5
2.4

2,6
2,8
2,1
2.6
2.8
2.1

67^56
52,9
67 ^ 56
52.9

6,5
5,2
6,7
0,2
0,4
8,6
3,8
3,1
3,1
6.5
5.2
6.7
0.2
0.4
8.6
3.8
3.1
3.1

1,7
0,3
2,7
1.7
0.3
2.7

2,5
3,0
2.5
3.0

3,1
2,3
3.1
2.3

4,1
68,75
57,1
4.1
68.75
57.1

6,2 4,7 6,5 0,1 0,4 8,6 3,4 2,56.2 4.7 6.5 0.1 0.4 8.6 3.4 2.5

"4"4

0,4 2,7 2,8 2,20.4 2.7 2.8 2.2

3,9 2,1 4,03.9 2.1 4.0

67,69 56,367.69 56.3

5,0 4,05.0 4.0

5,5 0,1 0,2 16,9 3,7 3,0 1,8 3,4 6,9 0,9 0,1 1,5 2,55.5 0.1 0.2 16.9 3.7 3.0 1.8 3.4 6.9 0.9 0.1 1.5 2.5

2,6 1,2 3,22.6 1.2 3.2

§S»9 §S » 9

44,144.1

17921171792117

-M--M-

Aus Tabelle 9 geht hervor* daß die geprüften verschiedenen Bakterien leicht auf einen reinen oxygenierten Kohlenwasserstoff wachten. Alle neun Mikroorganismen hatten einen hohen Proteingehalt von Über 650, einen hohen Index der lebenswichtigen Aminosäuren von über 45# und ein für Nahrungszwecke vorteilhaftes Aminosäureprofil.Table 9 shows that the various tested Bacteria easily woke up to a pure oxygenated hydrocarbon. All nine had microorganisms a high protein content of over 650, a high index of vital amino acids of over 45 # and one amino acid profile beneficial for nutritional purposes.

Beispiel 9Example 9 Es wurde eine Reihe aerober Fermentationsversuche unterA number of aerobic fermentation attempts have been made Verwendung der Medien I, II und IiI und Äthanol bei 300CUsing the media I, II and III and ethanol at 30 0 C

mit den folgenden Hefen durchgeführt· Der pH-Wert wurde zwischen 3 und 6,5 und vorzugsweise zwischen 4 und gehalten.performed with the following yeasts · The pH was between 3 and 6.5 and preferably between 4 and held.

A. Saccharomycee cerevislae - CBSA. Saccharomycee cerevislae - CBS B. Sacoharomyces acidifaciena - ATCC 8766B. Sacoharomyces acidifaciena - ATCC 8766 C. Trlgonopeis variabllls - IiCC 10679C. Trlgonopeis variabllls - IiCC 10679 D. Hansenula anomale - CBSD. Hansenula anomalous - CBS E. Candida lipolytlca - ASCC 8662E. Candida lipolytic ca - ASCC 8662

F. Candida puloherrina - AfCC 9889 0. Rhodotorula glutinls - ATCC 2587 H. Candida guillieraondil - AtCC $3tg® F. Candida puloherrina - AfCC 9889 0. Rhodotorula glutinls - ATCC 2587 H. Candida guillieraondil - AtCC $ 3tg®

Der Stickstoffgehalt, der Proteingehalt, der In<!ex der lebenswichtigen Aminosäuren und das Aiainosliureprefil wurden wie in Beispiel 7 bestimmt. Die Ergebnis·· »Iod in den folgenden Tabellen 10 bis IJ The nitrogen content, the protein content, the In <! Ex of the essential amino acids and the amino acid content were determined as in Example 7. The result ·· »iodine in the following Tables 10 to IJ

e o.me o.m

VerschiedeneDifferent aufon Tabelle 10Table 10 II. IIII IIII IIIIII 8,28.2 « « Saccharomyces acidifaciensSaccharomyces acidifaciens Proteinprotein 5,85.8 IIII IIII ΙΙΪΙΙΪ IIIIII FermentationsbedingungenFermentation conditions 1,61.6 1,61.6 1,61.6 1,61.6 5,05.0 (Zygosaochapomyces)(Zygosaochapomyces) 5,25.2 10,210.2 1,61.6 1,61.6 1,61.6 1,61.6 Hefeyeast Äthylalkohol gezüchtete HefenEthyl alcohol grown yeasts 4,94.9 6,86.8 7,27.2 6,96.9 9,99.9 II. II. 5,15.1 6,66.6 6,26.2 7,77.7 8,38.3 6,06.0 Mediummedium 7272 7272 7272 9696 0,90.9 1,61.6 1,61.6 8,08.0 0,30.3 7272 7272 7272 7272 ml Äthylalkoholml of ethyl alcohol Aminosäure Je 100 gAmino acid 100 g each 00 2,12.1 4,54.5 0,30.3 0,50.5 Zellengewicht, g/lCell weight, g / l 5,45.4 7 77 7 6,76.7 11 611 6 9696 9696 0,60.6 8.88.8 9,49.4 6,86.8 5,55.5 5 "55 "5 Feeentationeseit, StdFeeentation since, hours 5,25.2 5^05 ^ 0 4,14.1 4,34.3 8 78 7 3,13.1 3,53.5 5,15.1 3,83.8 5*85 * 8 Aminosäurenamino acids t\, Saccharomyces cerevislae t \, Saccharomyces cerevislae 7,17.1 8,68.6 7,87.8 3,23.2 2,92.9 8,28.2 7,3
0,4
7.3
0.4
7,47.4
Al#nvti» A l # nvti » T
X
T
X
0,20.2 0,20.2 0,20.2 6,76.7 3,23.2 3,13.1 0,20.2 0,70.7 0,30.3 0^40 ^ 4
O
ro
O
ro
ArgininArginine 1,61.6 0,80.8 1,21.2 0,70.7 6,96.9 3,33.3 5,05.0 0,40.4 10 510 5 0,70.7 0,40.4
*·*
GD
* · *
GD
AsparaginsäureAspartic acid 6,36.3 10.510.5 1"5."51 "5." 5 12. "512. "5 1,21.2 5,75.7 6,06.0 11.211.2 3,33.3 8.48.4 8.08.0
CysteinsäureCysteic acid 4?4? *χ*, •
3,0
* χ *, •
3.0
3,93.9 3,63.6 0,50.5 7,27.2 1,01.0 8,78.7 2,72.7 3,43.4 3,03.0
toto CystinCystine 2,72.7 3.23.2 3.23.2 3,83.8 1,21.2 0,60.6 2,02.0 3,13.1 2,82.8 2,5
3,4
2.5
3.4
ft T ι ιίΐ ah1 η fi αϊ ι τ*λft T ι ιίΐ ah1 η fi αϊ ι τ * λ 6,66.6 2,92.9 3,23.2 3,23.2 3,53.5 0,50.5 2,82.8 4,74.7 5,15.1 3,43.4 5,45.4 GlycinGlycine 5,75.7 5,05.0 6,06.0 5,55.5 4,94.9 3,33.3 3,73.7 5,75.7 5,75.7 5,45.4 cn
co
cn
co
HistidinHistidine 7,17.1 5,75.7 6,66.6 6,66.6 5,15.1 1:11: 1 3,93.9 7*, 47 *, 4 0,80.8 6,06.0 1,11.1
—a—A IsoleucinIsoleucine 0,30.3 1,11.1 1,51.5 1,41.4 3,03.0 4,54.5 6,06.0 1,01.0 0,30.3 1,11.1 0,30.3 LeucinLeucine 0,80.8 0,20.2 00 0,50.5 5,35.3 2,72.7 2,42.4 0,30.3 3,03.0 0,20.2 3,03.0 lysinlysine 11.511.5 3,23.2 3,13.1 42,942.9 4,24.2 2,32.3 2,72.7 3,13.1 2,62.6 MethioninMethionine ** tJ
3,1
** tJ
3.1
2^82 ^ 8 l'%l '% 2,Q2, Q 76,976.9 43,443.4 38,438.4 3,33.3 4,54.5 2,92.9 3,33.3
M# thioniPHU 1T oxytüM # thioniPHU 1 T oxytü 2,92.9 3,93.9 4,54.5 4,44.4 67,467.4 63,063.0 4,24.2 4,34.3 4,14.1 PhenylalaninPhenylalanine 3,13.1 3,83.8 2,92.9 4,34.3 4,44.4 2,62.6 l\\ _, l \\ _, ProlinProline 5,15.1 2,92.9 6,06.0 2'8 2 ' 8 1,31.3 3.93.9 2*,82 *, 8 3,8 ^3.8 ^ SerinSerine 5,95.9 3,53.5 36,436.4 5,75.7 32,532.5 59,3 cd59.3 cd ThreoninThreonine 1,01.0 39,139.1 70,870.8 J4O,7J4O, 7 36.936.9 60,260.2 4 '"4 '" 59,0 fsj59.0 fsj TyrosinTyrosine 0,30.3 59,059.0 67,067.0 63,663.6 63I863I8 Valin *Valine * 2,92.9 Qesamtprotein (Hx6,25)Total protein (Hx6.25) 2,92.9 Amines Kur eindex ^Amines cure index ^ 4,14.1 4,34.3 3^83 ^ 8 33,333.3 60,860.8

4*4 *

W
W
W.
W.
HH
ββ ιι W
W
W.
W.
ίί
22 r
*
r
*
j!j! ιι SS.

B
B
B.
B.

VO 00VO 00

«0 O«0 O

* % VO W QO OA*% VO W QO OA

VO N-Mw t- fiVO N-Mw t- fi

_VO O Ma« MW 00_VO O Ma « MW 00

VO Ql Mw t^VO Ql Mw t ^

VO OlVO Ol

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Ν· O 00 W 00 OAVO OAt-VO Ol w KN KN KnO KNOOUNCVIΝ · O 00 W 00 OAVO OAt-VO Ol w KN KN KnO KNOOUNCVI

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1096^2/05911096 ^ 2/0591

BADBATH

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οΓί ^ Ο O t-KNKNKNUNVO O

4 * 43 S 109Ö42/05Ö14 * 43 S 109Ö42 / 05Ö1

Tabelle 13
Verschiedene auf Äthylalkohol gezüchtete Hefen
Table 13
Various yeasts grown on ethyl alcohol

Hefeyeast

Mediummedium

ml Äthylalkohol
Zellengewicht g/l
Fermentationezeit Std.
ml of ethyl alcohol
Cell weight g / l
Fermentation time hours

Aminosäuren, Amino acids ,

AlaninAlanine

ArgininArginine

AsparaginsäureAspartic acid CystelnsXureCystelnsXure

CystinCystine

GlutamineÄureGlutamic acid

GlycinGlycine

HistidinHistidine

IsoleucinIsoleucine

G. Rhodotorula glutinisG. Rhodotorula glutinis H. Candida guilllenaondliH. Candida guilllenaondli

Methionin
nethi'onineulfoatyu
!taenylalaniri .
Prolin
Methionine
nethi'onineulfoatyu
! taenylalaniri.
Proline

Oe*a*tproteJÄ (*c6,25)Oe * a * tproteJÄ (* c6,25)

IPiIPi

III 1,6 4,7 72III 1.6 4.7 72

I I III I II

1,6 1,6 X,61.6 1.6 X, 6

5,2 5,9 6,85.2 5.9 6.8

96 96 4896 96 48

II 1,6 7,6 48II 1.6 7.6 48

III 1,6 4,8 48III 1.6 4.8 48

III 1,6 5,0 48III 1.6 5.0 48

st st Aminosäure Je κ ProteinAmino acid Je κ protein

.6.6

,5 7,9 0,1 0,6 7,8 3.3 2.7 4.1 6.2 6,2 1.5 0.3 5.f, 5 7.9 0.1 0.6 7.8 3.3 2.7 4.1 6.2 6.2 1.5 0.3 5.f

I; 4
3,2
5,2
5.3
1.1
I; 4th
3.2
5.2
5.3
1.1

4,9 3,3 5,9 0,24.9 3.3 5.9 0.2

w — 2,7 2,1 2,6- w - 2.7 2.1 2.6

0,8 0,2 2,5 2,9 3.5 3.3 2,2 4?:l40.8 0.2 2.5 2.9 3.5 3.3 2.2 4 ?: l 4

48.948.9

8,48.4

3,7 8,6 0,23.7 8.6 0.2

8,9 2,08.9 2.0

4,9 1.3 7,9 1,1 0,24.9 1.3 7.9 1.1 0.2

2,3 3,32.3 3.3

5,05.0

5,15.1

·>? 41,4·>? 41.4

61,261.2

12,5 3,6 8,112.5 3.6 8.1

0.5 0,4 10,2 8,9 f,l 4,3 1,1 7,00.5 0.4 10.2 8.9 f, l 4.3 1.1 7.0

0,9 0.3 2,00.9 0.3 2.0

3,1 4,7 4,53.1 4.7 4.5

1.11.1

35,6 55.335.6 55.3

7.7 4,47.7 4.4

7,5 0.37.5 0.3

3*i 8.1 3 * i 8.1

3.13 |.l3.13 | .l

«.4 4,1 6,6«.4 4.1 6.6

0,9 0,60.9 0.6

8,7 2,9 3.18.7 2.9 3.1

5. 5,5. 5,

2,52.5

fc,2fc, 2

*.o*.O

42,0 60.642.0 60.6

2.§2.§

}*2 4.3 2.3 3,5} * 2 4.3 2.3 3.5

IlIl

* S* S

Aus den vorstehenden Tabellen 10 bla 1? geht hervor, daß 1) Hefen zwar auf einem oxygenierten Kohlenwasserstoff in einfachen Mineralsalzmedien (Medium I) w&ehuen, das Wachstum jedoch durch Zugabe von Wuchsfaktoren (z.B. Hefeextrakt) wesentlich gesteigert werden kann (Medien II und III) undFrom the above tables 10 bla 1? it is clear, that 1) yeasts live on an oxygenated hydrocarbon in simple mineral salt media (medium I), growth however, growth factors (e.g. yeast extract) can be increased significantly (media II and III) and

2) die erfindungsgemäsa gezüchteten Hefen die wertvolle Kombination von hohem Proteingehalt, hohem Gehalt an lebenswichtigen Aminosäuren und für die Ernährung vorteilhaftem Aminosäureprofil aufweisen, woraus weiter hervorgeht, daß nach dem erfindungsgemässen Verfahren durch Züchten von Hefen auf oxygenierten Kohlenwasserstoffen ein wertvolles Proteinprodukt auf biosynth^tischem Wege auf äußerst wirtschaftliche Weise erzeugt werden kann. CIe Erfindung eignet sich also Insbesondere zur Her·» stellung von proteinreichen Produkten mit hohem Nährwert für die menschliohe und tierische Ernährung.2) the yeasts cultivated according to the invention have the valuable combination of high protein content, high content of essential amino acids and an amino acid profile which is advantageous for nutrition, from which it can furthermore be seen that, according to the method according to the invention, by cultivating yeasts on oxygenated hydrocarbons, a valuable protein product is obtained by biosynthetic pathways can be produced in an extremely economical manner . The invention is therefore particularly suitable for the production of protein-rich products with a high nutritional value for human and animal nutrition.

bbtsoh.bbtsoh.

109642/0691109642/0691

BADBATH

Claims (1)

PatentanspruchClaim 1. Verfahren zur Herstellung von proteinreichen Produkten duztoh aerobe Fermentation, dadurch·zeichnet, daβ man ala prlmSre Kohlenetoffquelle ooqrgenierte Kohlen-Wasserstoffe verwendet, welche eich von Erdölfraktionen mit etwa 1 bis 30 Kohlenstoffatomen im Molekül ableiten, die Fermentation unter aeroben Bedingungen in eine« wässrigen anorganische Salze enthaltenden Wuehsmedlum unter Verwendung von Mikroorganismen «Bad Aufrechterhaltung einer Temperatur von etwa 200C bis *7°C und eines pH-wertes von etwa 3,0 bis 8,5 durchfahrt und danach «in1. A process for the production of protein-rich products using aerobic fermentation, characterized in that, as a primary carbon source, ooqrgenated hydrocarbons are used, which are derived from petroleum fractions with about 1 to 30 carbon atoms in the molecule, fermentation under aerobic conditions in an aqueous one Wuehsmedlum containing inorganic salts using microorganisms "bath maintaining a temperature of about 20 0 C to * 7 ° C and a pH value of about 3.0 to 8.5 drive through and then" in protelnrelchea produkt erntet.protelnrelchea product reaps. ■ - ■■-;■. ■:■■ - .;-5r;.^> ■ - ■■ -; ■. ■: ■■ -. ; -5r ; . ^> 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekewzeiohoe», 4*0 man al· Mikroorganismue eine.der Hefen2. The method according to claim 1, characterized in that gekewzeiohoe », 4 * 0 one al microorganism one of the yeasts 3acoharo«ycea cereviaiae OBg 3acoharo «ycea cereviaiae OBg Saocharoeyoea aoldlfaolea· Hißt* 8756Saocharoeyoea aoldlfaolea Hißt * 8756 Trigc^nopais variabllla CBB 10%0Trigc ^ nopais variabllla CBB 10% 0 Hanaenula anoatla ISBSHanaenula anoatla ISBS Candida lipolytioa ATOC 8662Candida lipolytioa ATOC 8662 Candida puloherrima &Ψ* 1$!ύ£. Candida puloherrima & Ψ * $ 1! Ύ £. Rhodotorula glutinia AtCC 25C7Rhodotorula glutinia AtCC 25C7 Candida guillierawodli ATCC 9390Candida guillierawodli ATCC 9390 verwendet und die Fermentation unter Äui*echterb*lti*ig einer Temperatur von etwa 200C bis *0°C und ein·· pH-wertea vonused and the fermentation under Äui * real * lti * ig a temperature of about 20 0 C to * 0 ° C and a pH value of etwa 3f0 bis 7#5 durohfÜhJTt.about 3 f 0 to 7 # 5 durohfÜhJTt. 10II42/0S91 .10II42 / 0S91. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, das ■an al* microorganism!« eine der Bakterien2. The method according to claim 1, characterized in that ■ an al * microorganism! «One of the bacteria Brevlbaeterlua Inaeotlphlliua ATCC 15528Brevlbaeterlua Inaeotlphlliua ATCC 15528 PfteudoMonas Ugustrl ATCC 15522PfteudoMonas Ugustrl ATCC 15522 PseudoBonaa pseudonallei ATCC 15523PseudoBonaa pseudonallei ATCC 15523 Pseudononas orvilla ATCC 15524Pseudononas orvilla ATCC 15524 AXoallgeriB ep ATCC 15525AXoallgeriB ep ATCC 15525 CelluiDonae galba ATCC I5526CelluiDonae galba ATCC I5526 BrevlbaeterluB healil ATCC 15527BrevlbaeterluB healil ATCC 15527 Jttorooocoue cerlfloans ATCC 14987Jttorooocoue cerlfloans ATCC 14987 Saroina ap QHS 1518 KatiokSaroina ap QHS 1518 Katiok Arthrobaoter ap ATCC 19140Arthrobaoter ap ATCC 19140 verwendet und die Fermentation unter Aufrechterhaltung einer Temperatur von etwa 250C bis 450C und eines pH-Wertes von 5,0 bis 8,5 durchführt.used and the fermentation while maintaining a temperature of about 25 0 C to 45 0 C and a pH of 5.0 to 8.5 carries out. 4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass nan Alkohole, Aldehyde, Ester, Äther, Ketone oder Säuren als oxygenierte Kohlenwasserstoffe verwendet.4. The method according to claim 1, characterized in that nan alcohols, aldehydes, esters, ethers, ketones or acids are used as oxygenated hydrocarbons. 5· Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daβ man ein· Mischung von Alkoholen, Aldehyden, Ketonen und Estern sdt etwa 1 bis etwa 18 Kohlenstoffatom« la Molekül al« oaqrgtnlsrt* Kohlenwasserstoffe verwendet.5. The method according to claim 1, characterized in that a mixture of alcohols, aldehydes, ketones and esters has about 1 to about 18 carbon atoms per molecule Al «oaqrgtnlsrt * hydrocarbons used. 6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dad nan einen Alkohol alt etwa 1 bis 18 Kohlenstoffatosen la Molekül als oxygenlerten Kohlenwasserstoff verwendet.6. The method according to claim 1, characterized in that dad An alcohol is about 1 to 18 carbon atoms old la molecule used as an oxygenated hydrocarbon. 109842/0691109842/0691 'BADORlQINAi.'BADORlQINAi. Λ-Λ- 7. Verfahren nach Anspruch 6* dadurch gekennzeichnet, daß «an In wesentlichen Äthylalkohol verwendet.7. The method according to claim 6 *, characterized in that «Used in essential ethyl alcohol. 8. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß nan Methylalkohol, eek. Butylalkohol, Iaopropylalkohol, n-Butyl*lkohol oder Cetylalkohol verwendet,8. The method according to claim 6, characterized in that nan methyl alcohol, eek. Butyl alcohol, iaopropyl alcohol, n-butyl alcohol or cetyl alcohol is used, 9. Verfahren naoh Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß nan in wesentlichen Methyläthylketon als oxygenierten Kohlenwasserstoff verwendet. *9. The method naoh claim 4, characterized in that Nan essentially uses methyl ethyl ketone as an oxygenated hydrocarbon. * 1O.Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man die Hefe in einen NKhrnedlun suchtet» welches einen Hefeextrakt enthält.1O.Verfahren according to claim 2, characterized in that one looks for the yeast in a NKhrnedlun »which one Contains yeast extract. 11.Verfahren naoh Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß nan als Mikroorganismus Microooccue oerifloans (14987) verwendet. ., . .. _·.. ■; ]■■-:■■- ■:.: K, 11.Verfahren naoh claim 5, characterized in that nan used as the microorganism Microooccue oerifloans (14987). .,. .. _ · .. ■; ] ■■ -: ■■ - ■:.: K, 12.Verfahren nach Anspruch }, dadurch gekennaielohnet, dug nan als Mikroorganismus Micrococous eerlfloans (149&Ύ) und als oxygenierten Kohlenwasserstoff Äthylalkohol verwendet·12.Verfahren according to claim}, thereby kennaielohnet, dug nan as a microorganism Micrococous eerlfloans (149 & Ύ) and used as an oxygenated hydrocarbon ethyl alcohol 1098A2/0S811098A2 / 0S81 .Kontinuierliches Verfahren zur Herstellung von proteinreichen Produkten durch aerobe Fermentation nach den Ansprüchen 1 bis 12, dadurch gekennzeichnet, öats man den oxygen!erten Kohlenwasserstoff, ein nicht-begrenzendes wässriges anorganische Salze enthaltendes Wuchsmedium und überschüssiges saueretoffhaltiges Gas kontinuierlich.Continuous process for the production of high protein Products by aerobic fermentation according to claims 1 to 12, characterized in that öats man the oxygenated hydrocarbon, a non-limiting one aqueous growth medium containing inorganic salts and excess oxygen-containing gas continuously in einen den oxygenlerten Kohlenwasserstoff und dasinto one the oxygenated hydrocarbon and that -den-the wKssrlge Medium enthalten/und vorher mit einem Mikroorganismus beimpften Reaktor unter kräftigem Rühren des Reaktorinhaltes einführt und kontinuierlich ein proteinreiches Produkt erntet.wKssrlge medium contained / and beforehand with a microorganism inoculated reactor with vigorous stirring of the reactor contents imports and continuously harvests a protein-rich product. 14.Verfahren nach Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß man die Flüssigkeit eine etwa das 1,5- bis 4-Poehe der Mindestentwicklungszeit des verwendetΛ Mikroorganismus entsprechende Zelt lang im Reaktor verweilen läßt.14.Verfahren according to claim 13, characterized in that the liquid is about 1.5 to 4 pounds Minimum development time of the microorganism used Lets stay in the reactor for a long time. 15.Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß nan das sauerstoffhaltig« Gas im Verhältnis von etwa % 0,5 bis 4 Volumteilen Luft Je Volunteil Flüssigkeit im Reaktor je Minute je Qe*.% trockene Zellen im Reaktor je Flusslgkeitsverwellselt in Stundn In den Reaktor einführt.15.Verfahren according to claim 12, characterized in that nan the oxygen-containing «gas in the ratio of about % 0.5 to 4 parts by volume of air per part by volume of liquid in the reactor per minute per Qe *.% Dry cells in the reactor per Flusslgkeitsverellselt in hours Introduces reactor. 109l42/0£g1109l42 / 0 £ g1 BAD ORIGINAL,BATH ORIGINAL, 16.Verfahren naoh Aittpfueh 1% daduroh gekennzeichnet, dafi fcan kontinuierliche eine O9I bis 10 Oetr.ff oxygenierte Kohlenwasserstoffe enthaltende Nlechung herstellt·16. The process indicated by Aittpfueh 1% daduroh that continuously produces a concentration containing O 9 I to 10 Oetr.ff oxygenated hydrocarbons. 17.Verfahren naeh Anspruoh IJ, dadurch gekennzeichnet, daß »an die Verweilseit im Reaktor auf 1,5 bis 4 Stunden einstellt.17.Verfahren according to Anspruoh IJ, characterized in that »The time spent in the reactor is 1.5 to 4 hours adjusts. .Verfahren nach Anspruch IJ, dadurch gekennzeichnet, da6.Method according to claim IJ, characterized in that da6 aan eine 0,5Ji bis 55t oxygenierten Kohlenwasserstoff enthaltende Mischung herstellt und alt Sauerstoff angereicherte Luft Bit einen Sauerstoffgehalt bis zu 90$ einfuhrt.aan containing 0.5 to 55 tons oxygenated hydrocarbon Mixtures and introduces old oxygen-enriched air bit an oxygen content of up to $ 90. hb:aoh.hb: aoh. 1O9I42/QS011O9I42 / QS01 BADBATH
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