DE1517733A1 - Resistant strains of Rhizobium bacteria for introduction into legume seeds and process for their production - Google Patents
Resistant strains of Rhizobium bacteria for introduction into legume seeds and process for their productionInfo
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Description
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Verfahren zur Herstellung einer für die Impfung von Leguminosesamen vorgesehenen BakterienkulturProcess for the production of a bacterial culture intended for the inoculation of legume seeds
Priorität: vom 23. Dezember 1965 aufgrund der Priority : from December 23, 1965 due to the
schwedischen Patentanmeldung 16 754/65Swedish patent application 16 754/65
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer für die Impfung von leguminosesamen vorgesehenen Bakterienkultur. Diese frei in der Erde lebenden Bakterien besitzen die Fähigkeit, die Wurzeln von Leguminosen-Pflanzen, die zu der Familie Leguminosae gehören, zu befallen. Dies verursacht Knötchen, die sich an den Wurzeln der Leguminosen-Pflanzen bilden, und unter bestimmten Bedingungen können diese Knötchen den Stickstoff der Luft fixieren und in eine organisch gebundene Form umwandeln. Diese Stickstoff-Fixierung wird in der Landwirtschaft für die Genius epr ο duk tion von Protein und als erdverbesserndes Mittel verwendet.The present invention relates to a method for producing one intended for the inoculation of legume seeds Bacterial culture. These bacteria, which live freely in the earth, have the ability to remove the roots of legume plants, belonging to the Leguminosae family. This causes nodules that are located on the roots of the legume plants form, and under certain conditions these nodules can fix the nitrogen in the air and turn it into an organic one convert bound shape. This nitrogen fixation is used in agriculture for the genius production of protein and used as a soil improver.
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Neue Unterlagen (Art 7 11 Abe. 2 Nr. I Sate 3 des Änderung«)«, ν. 4. 9..New documents (Art 7 11 Abe. 2 No. I Sate 3 of the amendment «)«, ν. 4. 9 ..
Aufgabe der Erfindung ist es, Rhizobiumstämme zu schaffen, die so resistent sind, daß man aus den Staunen Bakterien erhält, die nach der Impfung der Samen mit ihnen auf diesen Samen langer als bisher üblich selbst unter ungünstigen Bedingungen, wie Hitze und Trockenheit, am Leben gehalten werden. Auch ist es Aufgabe, solche Bakterienstämme zu erhalten, daß die Impfung rechtzeitig vor dem Aussähen erfolgen kann, und zwar zweckmäßigerweise zentral in dem Laden des Saatgutverkäufers. Dann kann das Saatgut leicht zum Säen an die Landwirte verteilt werden. Es ist bekannt, daß nicht alle Rhizobiumstämme mit allen Leguminose-Fflanzen Stickstoff filierende Symbiosen bilden, sondern daß die Stickstoff bindende Fähigkeit sowohl von der fraglichen Pflanze wie auch von den Bakterien abhängt. Es gibt verschiedene sogenannte Impfgruppen, was bedeutet, daß eine Rhizobiumart üblicherweise eine Stickstoff-bindende Symbiose nur mit einer oder einigen wenigen nahe verwandten Leguminosefamilien bilden. Beispielsweise gibt Rhizobium· trifoli eine wirksame Stickstoff-Fixierung mit Klee, aber nicht mit Erbsen und Wicken, und Rhizobium leguminosarum gibt eine wirksame Stickstoff-Fixierung mit Erbsen und Bohnen, aber nicht mit Klee. Durch Impfung eines Leguminosen-Samens mit einer geeigneten Rhizobiumart ist es daher möglich, einen Befall der Wurzeln mit geeigneten Rhizobiumbakterien zu bekommen, wenn die Wurzeln so aus den Samen keimen, daß sie die Bildung von Knötchen und die Fixierung von Stickstoff fördern. ,The object of the invention is to create Rhizobium strains, which are so resistant that you get bacteria from your amazement, which after the inoculation of the seeds with them on them Seeds are kept alive longer than usual even under unfavorable conditions such as heat and drought. It is also the task to preserve such bacterial strains that the vaccination can take place in good time before sowing, and expediently in the center of the seed seller's shop. Then the seeds can easily be sent to the sowing Farmers are distributed. It is known that not all rhizobium strains with all legume plants contain nitrogen Form filing symbioses, but that the nitrogen-binding ability of both the plant in question and of depends on the bacteria. There are different so-called vaccination groups, which means that a Rhizobium species usually has a nitrogen-binding symbiosis with only one or a few form closely related legume families. For example, Rhizobium trifoli gives an effective nitrogen fixation with clover, but not with peas and vetch, and Rhizobium leguminosarum gives an effective nitrogen fixation with peas and beans, but not with clover. By inoculating a legume seed with a suitable Rhizobium species, it is therefore possible to obtain a Infestation of the roots with suitable Rhizobium bacteria to get when the roots germinate from the seeds in such a way that they the Promote nodule formation and fixation of nitrogen. ,
Bisher wurde das Verfahren üblicherweise auf die Weise ausgeführt, daß man die Erde oder Torfkultür der betreffenden Rhizobien in Wasser suspendierte und dann unmittelbar vor demSo far the procedure has usually been carried out in the manner that the soil or peat cultivation of the rhizobia in question suspended in water and then immediately before
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Aussäen die Saat mit dieser Suspension befeuchtete. Das Verfahren muflte dabei von dem Landwirt selbst ausgeführt werden. Abgesehen davon, daß dieses Verfahren zeitraubend und mühsam ist, war das Ergebnis nicht immer das erwartete, sondern man fand, daß die Bakterien zu einem großen Teil absterben, wenn der behandelte Samen in trockenen Zustand überführt wird, bevor er in die Erde gelangt, oder wenn die Erde zu trocken ist. Es ist also das Wetter im Augenblick des Aussäens von Wichtigkeit , da trockenes und heißes Wetter das Absterben der Bakterien auf der Saat fördert.Sow the seeds moistened with this suspension. The process had to be carried out by the farmer himself. Besides being time consuming and arduous, the result was not always what you expected, it was you found that the bacteria die to a large extent when the treated seed is put in a dry state before it gets into the earth, or when the earth is too dry. So the weather at the time of sowing is important , as dry and hot weather promotes the death of the bacteria on the seed.
Die Erfindung basiert nun auf der Erkenntnis, daß innerhalb einer Population von Rhizobiumbakterien ein bestimmter Unterschied der Fähigkeit, trockenen und heißen Bedingungen zu widerstehen, vorliegt und daß dieser Unterschied von der Tatsache abhängt, daß die Bakterien nicht gleichmäßig sind, sondern als unterschiedliche Stämme mit unterschiedlioher Widerstandsfähigkeit erscheinen.The invention is based on the knowledge that within a population of Rhizobium bacteria there is a certain difference the ability to withstand dry and hot conditions and that this difference depends on the fact that the bacteria are not uniform, but as different strains with different resistance appear.
Es wurde nun gefunden, daß eine Selektion aktiver, resistenter Rhizobiumstämme in einfacher Weise durch das Verfahren nach der Erfindung getroffen werden kann und daß diese Stämme ihre Fähigkeit, Leguminosen zu befallen und Stickstoff zu fixieren, während einer beachtlichen Zeitspanne, wenigstens vom Augenblick der Impfung der Saat an bis zum Augenblick der Aussaat, behalten. It has now been found that a selection is more active, more resistant Rhizobium strains in a simple manner by the method according to the Invention can be made and that these strains increase their ability to infect legumes and fix nitrogen while a considerable period of time, at least from the moment of inoculation of the seed to the moment of sowing.
Das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung einer für die Impfung von Leguminose-Samen vorgesehenen Bakterienkultur, dieThe inventive method for producing a for Inoculation of legume seeds provided bacterial culture that
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widerstandsfähige Bakterienstämme der Rhizobiumfamilie enthält, die gute Befall- und Stickstoffblndungefähigkeiten in -Symbiose mit Pflanzen der leguminose-Familie aufweisen, ist dadurch gekennzeichnet, daß man eine Bakterienkultur der erwünschten Rhizobiumart oder Impfgruppe, mit guten Befall- und Stiokstofffähigkeiten in an sich bekannter Weise auf einem Hhizobiumsubstrat züchtet und dann selektiert, indem man sie einer Trocknung bei einer Temperatur von höchstens etwa 95° C unterzieht und so gegen Trocknung empfindliche Bakterienetamme abtötet, worauf man die restliche, gegen das Trocknen r&stenten Zellen gegebenenfalls mindestens einem weiteren Züchtungs-Contains resistant bacterial strains of the Rhizobium family, which have good infestation and nitrogen blocking capabilities in symbiosis with plants of the leguminous family characterized in that a bacterial culture of the desired Rhizobium species or vaccination group, with good infestation and Fuel capacities in a known manner on one Hhizobium substrate grows and then selected by manipulating them subjecting it to drying at a temperature of no more than about 95 ° C and thus bacterial strains sensitive to drying kills, whereupon the remaining cells, which are resistant to drying, are possibly at least one further cultivation
und Selekt/ionszyklus der gleichen Art unterwirft und vermehrt.and selection cycle of the same species subjected and increased.
Die Behandlung kann durch überführung der Bakterienkultur auf ein Trockenmittel, beispielsweise mit hygroskopischem Charakter, wie Silioagel, durchgeführt werden. Auch andere herkömmliche Trockenverfahren können angewendet werden, wie beispielsweise Belüften mit einem geeigneten, gegebenenfalls erhitzten Gas oder Gasgemisch oder Vakuumtrocknen oder aber Sprühtrocknen. Auch kann, wenn erwünscht, Wärmestrahlung alleine.oder in Verbindung mit einer anderen Methode angewendet werden. Auch ist es möglich, Ultraviolettlichtbestrahlung anzuwenden, wobei man gegen Sonneneinstrahlung resistente Stämme erhält.Treatment can be carried out by transferring the bacterial culture on a desiccant, for example with a hygroscopic character, such as silica gel, can be carried out. Other conventional drying processes can also be used, such as, for example, ventilation with a suitable, optionally heated one Gas or gas mixture or vacuum drying or spray drying. If desired, thermal radiation can also be used alone. Or in Can be used in conjunction with a different method. It is also possible to use ultraviolet light irradiation, whereby strains resistant to solar radiation are obtained.
Im folgenden wird die Erfindung unter Bezugnahme auf die nachfolgenden Beispiele weiter erläutert.The invention is further illustrated below with reference to the following examples.
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ORIGINAL INSPECTEDORIGINAL INSPECTED
ist in den Tinten aufgeführten Tabellen gezeigt, wobei alle ei'ne gute !Fähigkeit anzustecken und zusammen mit den fragilchen Pflanzen Stickstoff zu binden zeigten. Diese Stämme wurden getrennt auf Rhizobiumsubstraten nach Dorn (siehe beispielsweise Marta Dorn: Über den Einfluß phythopatogener Pilze auf die Entwicklung und Infektionskraft von drei Rhizobiumarten, Zentralblatt für Bakteriologie 109, Seite 120, 1956) •gezüchtet. Die Stämme wurden dann unter aseptischen Bedingungen auf der einen Seite von semi-permeablen Membranen verschmiert, die Membrane wurden dann mit der beschmierten Seite nach oben auf das gleiche Substrat gelegt, dem 2$ Agar-Agar zugesetzt war, um ein festes Substrat zu erhalten. Nach drei bis fünf Tagen bei 28° 0, nachdem die Bakterien ausreichend gewachsen waren, wurden die Membrane mit der daran hängenden Bakte:*- rienmaase unter aseptischen Bedingungen in halb mittrockenem Blaugel (Silicagel mit Feuchtigkeitsindikator) gefüllte Präparatröhren überführt, in denen man die Bakterien zwei Tage bei 28° C trocknen ließ, worauf die Temperatur dann auf 70° C gesteigert wurde, wo sie sieben Tage gehalten wurde. Die Membrane mit den Bakterien wurden dann wieder auf Agar-Platten mit Dorns Substrat gebracht, wobei die die Behandlung überlebenden Bakterien sich vermehrten und Kolonien bildeten» Diese wurden als Mutterkulturen für das zur Impfung von Leguminosesamen verwendete Material und die nachfolgenden Vergleichsversuche benutzt. Natürlich ist es auch möglich, das Verfahren zu wiederholen, und die Zeit sowie auch die Temperatur der Behandlung können variiert werden, je nach der speziellen Resistenz des Ausgangsmaterials und der erwünschten Resistenz des Endmaterials. 909826/0650is shown in the inks listed tables, all a good ability to infect and together with the fragile Plants showed to bind nitrogen. These strains were separated on Rhizobium substrates according to Dorn (see for example Marta Dorn: On the influence of phythopathogenic fungi on the development and infectious power of three Rhizobium species, Zentralblatt für Bakteriologie 109, page 120, 1956) • bred. The logs were then aseptic smeared on one side by semi-permeable membranes, the membranes were then placed with the smeared side up on the same substrate to which 2 $ agar-agar was added was to obtain a solid substrate. After three to five days at 28 ° 0, after the bacteria have grown sufficiently were, the membrane with the attached bacteria: * - rienmaase under aseptic conditions in semi-medium dry Blue gel (silica gel with moisture indicator) filled preparation tubes are transferred, in which the bacteria are kept for two days Let dry at 28 ° C, whereupon the temperature then increased to 70 ° C where it was held for seven days. The membranes with the bacteria were then put back on agar plates brought with Dorn's substrate, whereby the bacteria that survived the treatment multiplied and colonies formed »These were used as mother cultures for the material used for inoculating legume seeds and the subsequent comparative experiments used. Of course, it is also possible to repeat the procedure, and the time, as well as the temperature of the treatment can be varied, depending on the specific resistance of the starting material and the desired resistance of the Final material. 909826/0650
Nach diesem Selekt/ionsverfahren erhielt man resistente Stämme,
und ein Vergleich zwischen den Ausgangsstammen und den in
dieser Weise klassifizierten Stämmen wurde durchgeführt. Die
Bakterien wurden unter aseptischen Bedingungen in Wasser in der Größenordnung von dem Zehnfachen, das geeignete Mengen von
ine:
(R)Resistant strains were obtained according to this selection process, and a comparison was made between the original strains and the strains thus classified. The bacteria were grown under aseptic conditions in water on the order of ten times the appropriate amounts of ine:
(R)
/■a\/ ■ a \
inertem Klebstoff, in diesem Fall Bentonite v ' oder Modocolinert adhesive, in this case Bentonite v 'or Modocol
enthält, suspendiert. Diese Suspensionen wurden dann auf Samen und im Laboratorium auf Glasperlen mit einem Durchmesser von 2 mm untersucht. Durch die Zugabe von Klebstoff haften die Bakterien gut an den Samen und Glasperlen an. Die Glasperlen wurden anstelle von Samen verwendet, wenn man quantitative Messungen der Abtotungsgeschwindigkeit unter Laboratoriumsbedingungen durchführte. Die Samen wurden verwendet, wenn man die Bildung von Knötchen und die Stickstoff-Fixierung untersuchte.contains, suspended. These suspensions were then placed on seeds and in the laboratory on diameter glass beads examined by 2 mm. By adding glue, the bacteria adhere well to the seeds and glass beads. The glass beads were used in place of seeds when making quantitative measurements of killing rate under laboratory conditions carried out. The seeds were used in studying nodule formation and nitrogen fixation.
Die oben gezeigten Versuche auf Glasperlen ergaben die folgenden Ergebnisse:The experiments on glass beads shown above gave the following results:
Zur Untersuchung des Klassifizierungseffektes nach der Erfindung wurde die Zeit der Abtötung von 99$ verschiedener in der unten aufgeführten Tabelle angegebener Rhizobiumstämme für den unbehandelten Ausgangsstamm und für einen bei 70° C während sieben Tagen klassifizierten Stamm bestimmt. Suspensionen der einzelnen Bakterienkulturen wurden auf Glasperlen mit 2 mm Durchmesser unter aseptischen Bedingungen überführt, dann ließ man sie trocknen und bei 28° C und einer relativen Feuchtigkeit von 50 bis 70$ stehen. Verschiedene Suspensionen von unterschiedlicher Verdünnung wurden von jedem untersuchten Stamm hergestellt, daIn order to examine the classification effect according to the invention, the kill time was different from $ 99 in the below listed table of specified Rhizobium strains for the untreated Starting strain and determined for a strain classified at 70 ° C for seven days. Suspensions of each Bacterial cultures were transferred to glass beads 2 mm in diameter under aseptic conditions, then left dry and stand at 28 ° C and a relative humidity of $ 50 to $ 70. Different suspensions of different Dilutions were made from each strain examined since
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ORIGtNAL INSPECTEDORIGtNAL INSPECTED
die Ausgangekulturen viel su konzentriert waren, sie können Hunderte von Hillionen Zellen pro Milliliter enthalten. Diethe starting cultures were far too concentrated; they may contain hundreds of millions of cells per milliliter. the
5 6 7 dünnt, und man fand, dafl Verdünnungen von 10 , 10 , 10' und5 6 7, and it was found that dilutions of 10, 10, 10 'and 10 geeignet waren, die schätzungsweise eine Menge von 10.000, 1.000, 100 und 10 Zellen pro Milliliter enthielten, wobei eine Verdünnung jeweils zehnmal stärker war als die nächst höhere Verdünnung. Von jeden Stamm, den unbehandelten wie den klassifizierten, wurden je vier Suspensionen hergestellt, d. h. zusammen 8 Suspensionen je untersuchter Hhizobiumstamm. Jede Suspension in einer Menge von 2,0 Millilitern wurde über 70 g, etwa 3.500 Stück, Glasperlen in einem 500-Milliliter-Erlenmeyer-Kolben verteilt, der während der Versuchszeit von mehr als iwei Monaten bei 28° G und einer Feuchtigkeit von 50 - 70jl stehengelassen wurde. Unmittelbar am Anfang und in Intervallen von 7-10 Tagen wurden Proben von etwa 100 Glasperlen von jedem Präparat abgezogen. Die Zahl lebender Zellen in jeder Probe wurde durch Lebendauszählung bestimmt. (Siehe beispielsweise R. A. Stanier, M. Doudoroff und S. A. Adelberg, General Microbiology, MaoMillan Jb Co., London 1958).10 were suitable, estimated to contain 10,000, 1,000, 100 and 10 cells per milliliter, with one Dilution was ten times stronger than the next higher dilution. Four suspensions were prepared from each strain, the untreated as well as the classified. H. altogether 8 suspensions per examined Hhizobium strain. Every Suspension in an amount of 2.0 milliliters was about 70 g, about 3,500 pieces, glass beads distributed in a 500-milliliter Erlenmeyer flask, which during the test period of more than two months at 28 ° G and a humidity of 50 - 70jl was left standing. Immediately at the beginning and at 7-10 day intervals, samples of about 100 glass beads were taken from each Preparation withdrawn. The live cell number in each sample was determined by live counting. (See for example R. A. Stanier, M. Doudoroff and S. A. Adelberg, General Microbiology, MaoMillan Jb Co., London 1958).
Die Glasperlen in der Probe wurden mit 5 Millilitern Wasser unter aseptischen Bedingungen eine halbe Stunde geschüttelt, wobei sich die Zellen von den Glasperlen lösten und in die Wasserphase gingen. Bekannte Fraktionen dieser 5-Milliliter-Waseerphase wurden dann auf der Oberfläche von Agar-Kulturplatten verteilt, wobei man die einzelnen Zellen zu sichtbaren Kolonien auf den Platten wachsen ließ. Aus der Zahl der Kolonien auf den Platten, der Zahl der Glasperlen der Probe undThe glass beads in the sample were shaken with 5 milliliters of water under aseptic conditions for half an hour, whereby the cells detached from the glass beads and went into the water phase. Known fractions of this 5-milliliter water phase were then distributed on the surface of agar culture plates, whereby the individual cells could be seen Growing colonies on the plates. From the number of colonies on the plates, the number of glass beads of the sample and
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und der pro Platte verteilten Fraktion der Probe wurde die Zahl der lebenden Bakterien pro Glasperle der Probe naoh der folgenden Formel berechnet:and the fraction of the sample distributed per plate became the number of living bacteria per glass bead of the sample approx calculated using the following formula:
a · baway
worin η die Zahl der lebenden Bakterien pro Glasperle der Probe, M die Zahl der Kolonien pro Platte, a die Zahl der Glasperlen der Probe und b die auf der Platte verteilte Fraktion der 5*Milliliter-Wasserphase bedeutet.where η is the number of living bacteria per glass bead of the sample, M is the number of colonies per plate, a is the number of Glass beads of the sample and b denotes the fraction of the 5 * milliliter water phase distributed on the plate.
Sie Versuchsbedingungen wurden so gewählt, daß M zwischen 10 und 200, a in der Größenordnung von 100 und b 0,1, 0,01, 0,001 oder 0,0001 ist. Durch Bestimmung von η unmittelbar nach der Behandlung der Glasperlen mit den Bakteriensuspensionen erhielt man auf diese Weise einen Ausgangswert nQ cum Zeitpunkt 0 für die verschiedenen Stämme, fiederholte Bestimmungen von η wurden dann in Intervallen von 7-10 Tagen durchgeführt. Sa die Bakterien naoh und naoh auf den Glasperlen absterben, hat man zu erwarten, daß nach einer bestimmten Zeit η » 0,01 · nQ wird. Sies bedeutet, daß nur 1j6 der zum Zeitpunkt 0 lebenden Zellen noch am Leben ist oder daß die Bakterien zu 99^ abgetötet wurden. Je länger es dauert, daß dieser Abtötungsgrad erreicht wird, desto resistenter ist dieser Stamm. Sie folgende Tabelle I, in der die Zeiten zur Abtötung von 99# für verschiedene Stämme in Tagen angegeben sind, zeigt, daß die ausgewählten Stämme viel resistenter und besser als die Ausgangsstämme, sind, mit Ausnahme des Luzerne-Stammes, der schonThe experimental conditions were chosen so that M is between 10 and 200, a is on the order of 100 and b is 0.1, 0.01, 0.001 or 0.0001. By determining η immediately after the treatment of the glass beads with the bacterial suspensions, an initial value n Q cum time 0 was obtained for the various strains; repeated determinations of η were then carried out at intervals of 7-10 days. If the bacteria die near and near on the glass beads, one has to expect that after a certain time η »0.01 · n Q will be. This means that only 1j6 of the cells living at time 0 are still alive or that 99 ^ of the bacteria have been killed. The longer it takes for this degree of destruction to be reached, the more resistant this strain is. The following Table I, in which the times for the destruction of 99 # for various strains are given in days, shows that the selected strains are much more resistant and better than the starting strains, with the exception of the alfalfa strain, which is already
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ORIGINAL INSPECTEDORIGINAL INSPECTED
bei Beginn eine große Resistenz besitzt,has a high resistance at the beginning,
Stammselected
tribe
stammStarting
tribe
Wicken-Stammleguminosarum pea
Sweet peas trunk
Vergleichende Kulturversuche auf Samen wurden ±i der folgenden Wei3e durchgeführt:Comparative culture trials on seeds were ± i of the following Wei3e carried out:
Stämme von 3 Rhizobiumarten, Rhizobium^rifoli, Rhizobiuujmeliloti und Rhizobiumieguminosarum, wurden als unbehandelte Ausgangsstämme Rt, Rm und Rl sowie 7 Tage bei 70° G selektiert, Rt 7, Rm 7 und Rl 7, untersucht. Samen wurden zur Zeit 0 mit einer verdünnten Suspension von Bakterien der betreffenden Stämme geimpft, und von den trockenen Samen wurde eine bestimmte Zahl herangezogen, um verschieden lange vom Zeitpunkt 0 an zu wachsen. In jedem dieser Fälle wurden Proben zur Abschätzung der Bakterienzahl pro Samen entnommen. Die Zahl der gewachsenen Pflanzen, die Knötchen zeigten, wurde aufgezeichnet. In Tabelle II sind die Ergebnisse von sechs solchen Experimenten aufgezeichnet. In der letzten Spalte eines -Jeden Experimentes ist die Zahl lebender Bakterien pro Samen in bestimmtenStems of 3 species of Rhizobium, Rhizobium ^ rifoli, Rhizobiuujmeliloti and Rhizobiumieguminosarum, were used as untreated parent strains Rt, Rm and Rl and 7 days at 70 ° G selected, Rt 7, Rm 7 and Rl 7, examined. Seeds were at the time 0 with a dilute suspension of bacteria of the respective strains was inoculated, and from the dry seeds a certain one was inoculated Number used to grow from time 0 onwards for different lengths of time. In each of these cases, samples were used for assessment taken from the number of bacteria per seed. The number of plants grown showing nodules was recorded. Table II shows the results of six such experiments. In the last column of each experiment is the number of living bacteria per seed in certain
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Zeitabständen nach der Impfung wiedergegeben." Die entsprechenden rechten Spalten geben die Zahl der Pflanzen von 10 wieder, die eine wirksame Knötchenbildung zeigten.Intervals after vaccination are shown. "The corresponding right-hand columns represent the number of plants out of 10 that showed effective nodulation.
Sas Ergebnis in der Tabelle zeigt, daß es durch Selektion nach der Erfindung möglich ist, Knötchenbildung nach einer beachtlich längeren Zeit zwischen Impfung und Aussäen zu erhalten als mit dem entsprechenden unselektierten Material.The result in the table shows that, by selection according to the invention, it is possible to considerably reduce nodule formation after one longer time between inoculation and sowing than with the corresponding unselected material.
- 11- 11
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- 11 -Tabelle II- 11 -Table II
Sage nach der ImpfungTell the vaccination
Zahl der Bakterien pro SamenNumber of bacteria per seed
Pflanzen mit Knötchen pro PflanzenPlants with nodules per plant
Zahl der Bakterien pro SamenNumber of bacteria per seed
Pflanzen mit Knötchen pro PflanzenPlants with nodules per plant
Rt RtRt Rt
Samen von Medioago sativa, Luzerne Medioago sativa, alfalfa seeds
Rm RmRm Rm
Samen von Pisum sativum, Erbse RlSeeds of Pisum sativum, pea Rl
Rl 7Rl 7
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