DE1442118A1 - Process for the production of milk-coagulating ferment by growing molds - Google Patents

Process for the production of milk-coagulating ferment by growing molds

Info

Publication number
DE1442118A1
DE1442118A1 DE19621442118 DE1442118A DE1442118A1 DE 1442118 A1 DE1442118 A1 DE 1442118A1 DE 19621442118 DE19621442118 DE 19621442118 DE 1442118 A DE1442118 A DE 1442118A DE 1442118 A1 DE1442118 A1 DE 1442118A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
activity
ferment
milk
coagulating
production
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
DE19621442118
Other languages
German (de)
Inventor
Kei Arima
Shinjiro Iwasaki
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Meito Sangyo KK
Original Assignee
Meito Sangyo KK
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Meito Sangyo KK filed Critical Meito Sangyo KK
Publication of DE1442118A1 publication Critical patent/DE1442118A1/en
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
    • A23C19/02—Making cheese curd
    • A23C19/032—Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin
    • A23C19/0326—Rennet produced by fermentation, e.g. microbial rennet; Rennet produced by genetic engineering
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/58—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from fungi
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/931—Mucor
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/939—Rhizopus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

U42118U42118

Di. E. WIEGAND DIPL-ING. W. NIEAAANN DR. A*. KÖHLER DIPL-ING. C. GERNHARDTDi. E. WIEGAND DIPL-ING. W. NIEAAANN DR. A *. KÖHLER DIPL-ING. C. GERNHARDT

MÖNCHEN HAMBURGMÖNCHEN HAMBURG

55547« . 8000 Mönchen is, 23· September 19655547 ". 8000 monks is, 23 September 196

ΤΕΙΒΘβΑΜΜΕ: ΚΛβΡΑΤΕΝΤ NUSSBAUMSTRASSEtOΤΕΙΒΘβΑΜΜΕ: ΚΛβΡΑΤΕΝΤ NUSSBAUMSTRASSEtO

W, Io 813/62 7/frS P 14 42 118.W, Io 813/62 7 / frS P 14 42 118.

Meito Sangyo Kabushiki Kaisha Kikuidori, Nishi-ku, Fagoya (Japan)Meito Sangyo Kabushiki Kaisha Kikuidori, Nishi-ku, Fagoya (Japan)

Yerfahren zur Herstellung von milchkoagulierendem Ferment durch Züchten von Schlmmelpilz-enProcess for the production of milk coagulating agent Ferment by growing mold mushrooms

Die Erfindung bezieht^ sich auf ein Verfahren zwc Herstellung eine's1 neuen milchkoagulierenden Perments aurch Züchten von Schimmelpilzen in Nährmedien.The invention relates to a method ZWC ^ to manufacture a new milk coagulating's 1 Perments aurch culturing fungi in nutrient media.

909811/1028909811/1028

NMNM

In dor nachstehenden Beachreibung wird dao .durch Züchtung eier vorstehend genannten Pilze erhaltene lailohköaßU-lieronde Ferment alo »laikrobiologiaohes Labfenaent" bozeich.·* net. " .In the following comment, the lailohköassU-lieronde obtained by cultivating the above-mentioned mushrooms Ferment alo »laikrobiologiaohes Labfenaent" bozeichen. · * net. ".

Das bisher bekannte Labfermont atm Koagulieren von ftiloh v/ird ;aus den 4· Magen dos Kalbea gewonnen· Bieseo Foment "beait^t oine lcrSftigo Aktivität sur Kosgulierung von Kiloh und es findet in v/ei tea umfang bed der Käseherstellung Verwendung ♦ Des Ausgangaiaatorial· au seiner herstellung otöht . jedoch nicht in unbeschränkten Kennen aur Veriügung und ist teuer·The previously known Labfermont atm coagulation from ftiloh v / ird; obtained from the 4 · Magen dos Kalbea · Bieseo Foment "beait ^ t oine lcrSftigo activity sur Kosgulierung von Kiloh and it is widely used in cheese-making ♦ The output aiaatorial otöht from its manufacture. but not in unlimited knowledge aur and is expensive·

• Ihs, allßähseinen koagulieren Proteasen Milch. Sowohl l'roteaßen tierisolien Ursprungs, vyie Pepöin, *£xyp&Lnt Chyraotrypain» K^thepoin usw. als auch diejenigen pflanzlichen < Ursprünge, näa\liolv Papaint I3icint Broßtölain usw. beöitzen bis au eine» gewissen <^3?Äd Killchkoa^ulierende Aktivität· A(JiU die koii£julierenaö Aktivität dar durch Bakterien eraeugten' Iroteaeen» $·Β· Pa-eudOTdonae fluorescens, Jäaoilluis oubtilia und Ü^rratia «areeeoene ist bereits bekannt« Diese Proteaaen wirken jedoch auf Proteine stark spaltend» sie aei-• Ihs, its proteases coagulate milk. Both l'roteaßen animal isolien origin, vyie Pepöin, * £ xyp & Ln t Chyraotrypain »K ^ thepoin etc. as well as those of vegetable« origins, na \ liolv Papain t I 3 icin t Broschtölain etc. have up to a "certain" ^ 3? Ad Killchkoa ^ ulating activity · A (JiU the koii £ julateaö activity of the 'Iroteae' observed by bacteria '$ · Β · Pa-eudOTdonae fluorescens, Jäaoilluis oubtilia and Ü ^ rratia' areeeoene is already known. However, these proteas have a strong cleavage effect on proteins »They aei-

BAD 909811/1026 'BATH 909811/1026 '

gen eine niedrige Aktivität zur Koagulierung des Proteine und sie kommen zur praktischen Verwendung als milohkoagu-gen a low activity to coagulate the protein and they come to practical use as milohkoagu-

■'·.'■ lierende Permente nicht in Betracht.■ '·.' ■ lingering perments not taken into account.

Weiterhin ist ein Ferment bekannt, welches die- Gerinnung von Milch hervorruft und welches man duroh Züchten dee Pilzes Hucor rouxii auf einem geeigneten Hahrmedium, vorzugsweise auf Reis,erzeugen kann·Furthermore, a ferment is known which causes the coagulation of milk and which can be produced by growing the mushroom Hucor rouxii on a suitable keeping medium, preferably on rice.

Das durch Züchten von Muoor rouxii erhältliche Ferment hat jedoch nur eine niedrige milchkoagulierende Aktivitat, so daß es zur praktischen Verwendung anstelle von aus dem Kälbermagen stammenden Lab nicht in Betraoht kommt. However, the obtainable by cultivating Muoor rouxii ferment has only a low milk-coagulating activity, so that it instead on the practical use of originating from the calf stomach rennet does not come into Betraoht.

BAD ORIGINAU 909811/1026BAD ORIGINAU 909811/1026

U42118U42118

neues Es ist Hauptzweok der Erfindung, ein/milchkoagulieren-new It is the main purpose of the invention to

des mikrobiologisches labferment sehr niedriger Proteasenaktivität, jedoch beachtlich hoher milchkoagulierender Aktivität durch Züchtung von Schimmelpilzen herzustellen.the microbiological rennet of very low protease activity, however, considerably high milk coagulating activity by growing molds.

Ein weiterer Zweck der Erfindung ist die Isolierung des mikrobiologischen Labferments aus dem Medium und die Herstellung dieses Fermentes in fertiger Form.Another purpose of the invention is the isolation of the microbiological rennet from the medium and the production of this ferment in finished form.

Es wurde erfindungsgemäß festgestellt, daß man in technischem Ausmaß und auf billigem Wege ein neues milchkoagulierendes Ferment, d.h. ein mikrobiologisches Labferment, mit sehr niedriger Proteasenaktivität, jedoch hoher milchkoagulierender Aktivität herstellen kann, wenn man Muoor pusillus Lindt, dessen Varietäten oder natürlichen und künstlichen Mutanten, welche die meisten der typischen Eigenschaften des Stammpilzes besitzen, verwendet. Bisher war man der Meinung, daß diese Pilze keine milohkoagulierenden Fermente von praktischem Wert erzeugen.According to the invention, it has been found that a new milk coagulating agent can be found on an industrial scale and inexpensively Ferment, i.e. a microbiological rennet, with very low protease activity, but high milk-coagulating activity, if Muoor pusillus Lindt, its varieties or natural and artificial mutants, which have most of the typical properties of the parent mushroom, are used. Until now it was believed that these fungi were not coagulant To produce ferments of practical value.

BAD ORiGlNALORIGlNAL BATHROOM

90981 1/102690981 1/1026

Das Verfahren gemäß der Erfindung zur Herstellung von milolikoagulierendem Ferment duroh'-.Züohten von Sohimmelpilzen in Kohlehydrate, Stickstoffsubstanzen und organische Salze enthaltenden Nährmedien bei üblichen Temperaturen und pH-Werten ist dadurch gekennzeichnet, daß man als Schimmelpilz Mucor pusillus Lindt bzw. dessen Mutanten verwendet.The method according to the invention for the preparation of Milolicoagulating ferment duroh '-. Growing of soy mushrooms in carbohydrates, nitrogenous substances and organic Nutrient media containing salts at normal temperatures and pH values is characterized in that the mold Mucor pusillus Lindt or its mutants used.

Wie bereits angegeben, ist es bekannt, daß Muoor rouxii auf einem geeigneten Nährmedium, vorzugsweise Reis, ein die Koagulierung hervorrufendes Ferment bildet. Es war jedoch nicht zu erwarten, daß Mucor pusillus Lindt ein milchkoagulierendes Ferment mit sehr niedriger Eroteasenaktivität und beachtlich hoher milchkoagulierender Aktivität in hoher Ausbeute in dem Medium erzeugt. Weiterhin wurde festgestellt, daß von den Pilzen der Gattung Mucor, zu denen eine große Anzahl von Species gehört, zahlreiche der Species keine Fermente der gewünschten Labfermentaktivität bilden. Weiterhin zeigt Muoor pusillus Lindt deutlich unterschiedliche Eigenschaften gegenüber Mucor rouxii. In einer Koji-Schräg-As already indicated, it is known that Muoor rouxii on a suitable nutrient medium, preferably rice, a die Coagulation-inducing ferment forms. It was, however not to be expected that Mucor pusillus Lindt is a milk coagulating agent Ferment with very low erotease activity and considerably high milk coagulating activity in high yield generated in the medium. It was also found that of the mushrooms of the genus Mucor, to which a large Belongs to a number of species, many of the species do not form ferments of the desired rennet activity. Farther Muoor pusillus Lindt shows clearly different properties compared to Mucor rouxii. In a koji oblique

BAD ORiGiNAL 909811/1026 ORiGiNAL BATHROOM 909811/1026

1U2118 - t - 1U2118 - t -

öü&rkultur bei J)O0G zoi^t i.Iucor puoüilluü Lindt .Vorhultenj I)Io »uniichot v/oiiiüo j.Kolonio färbt »ioli nach BiI-dung von öporaitgion #rau o.'icr grauuraun* Me Höhender ^Kolonie lot niedriger als 2 bill. Die .Spor&nßiophorttn -oiad aunächat durchalolitig tuvd iiirtioa und versweig-eu· sich nioht» AnachliQBöend vorawoi^ön aie eich unter Bildung von öporan- ^ien an den öpitseu. Die 5 Ms 20 liikron breiten ilporiui&io-· phoron nohwon uoi üpr Hoifö oine graue Farbe an» In don iaoißtün Piillon ??rf olg* <äiö Bildung von .üeheiäewänden in diör Vdiha der Spiteen. Die Sporaii^ion kokon «inen Quertsohnitt von ^O biß 90 Hikron und aehcn outweder grau oder graubraun au«* Dio Columellaö Bind iiollbruun und entv/oder β ir oder birnonl'ornig mit oinoia Lüngfödurehjaeaijtir von 10 bis 50 Mikron« iiporangloplioren Bind rund und beeitaen einen jJux'cli-öü & rkultur bei J) O 0 G zoi ^ t i.Iucor puoüilluü Lindt. Vorhultenj I) Io »uniichot v / oiiiüo j.Kolonio stains» ioli after the formation of öporaitgion #rau o.'icr grauuraun * Me Höhender ^ colony lot lower than 2 bill. The .Spor & nßiophorttn -oiad aunächat durchalolitig tuvd iiirtioa and verse-eu · nioht »AnachliQBöend vorawoi ^ ön aie eich with the formation of öporan ^ ien to the öpitseu. The 5 Ms 20 liikron wide ilporiui & io- · phoron nohwon uoi üpr Hoifö oine gray color to »In don iaoißtün Piillon ?? rf olg * <äi ö formation of .üeheiäew walls in diör Vdiha der Spiteen. The Sporaii ^ ion cocon "inen Quertsohnitt of ^ O to 90 microns and also out neither gray or gray-brown au" * Dio Columellaö Bind iiollbruun and entv / or β ir or pearly or pearly with oinoia Lüngfödurehjaeaijtirioren from 10 to 50 microns "iiporanglo a jJux'cli-

von 2,5 bis 4 wikron« Es werden weder Chla&ydo» sporen nooh 2ygosporen boobaolitet· Diejenigen Pilze, die j unter andureii Kulturbedingungen ijözüchtet vnirden, wurden nicht betiobrieben^ doch "üüu&zQn diejenigonf welche.in einem Kulturmedium wie Malaagar oder Kortoffolagar geaUolitet wurden, praktieoh die ^leioUeu'Eigenschaften· Me li&uptunterechißde iswiöouen den oharalcteriötißchön Kigenoohaf ten von Uuaor pudfillus Xjlndt und Muoor rouxli sind in der den Tabelle I ausomsiöngösteilt: " ...from 2.5 to 4 wikron "There are neither Chla &ydo" spore Nooh 2ygosporen boobaolitet · Those fungi that j under andureii culture conditions ijözüchtet vnirden were not betiobrieben ^ but were "üüu & Zqn diejenigon f geaUolitet welche.in a culture medium as Malaagar or Kortoffolagar, Praktieoh die ^ leioUeu 'properties · Me li & uptunterechißde iswiöouen den oharalcteriötißschön Kigenoohaf ten of Uuaor pudfillus Xjlndt and Muoor rouxli are divided into the table I ausomsiöngösteile: "...

■ ' . BAD ORIGINAL■ '. BATH ORIGINAL

9098 11/1026 " ·9098 11/1026 "

Charakteristische Iiiftenschaften von llucor pus-illns Lin3t und Ilucor rouxliCharacteristic properties of Ilucor pus-illns Lin3t and Ilucor rouxli

PiIgPiIg

Höhe det· Kolonie, rci Height det · colony, rci

"5"UcLs-"5" UcLs-

Sporan^Iosporen temperSporan ^ Iosporen temper

Pora I?uroji;3eGc?.»r (f.-Ό ChI;isa.vdosTjQren tür" 0CPora I? Uroji; 3eGc?. »R (f.-Ό ChI; isa.vdosTjQren door" 0 C

co ο ccco ο cc

* pussillus Lindt* pussillus Lindt

rouxiirouxii

2 '2 '

gutWell

weniglittle

rundaround

ei- oäer
kugelför-egg oäer
spherical

2*5 - 42 * 5 - 4

4-54-5

koinekoine

vielemany

15-515-5

COCO

Nachstehend wird das Verfahren gemäß der Erfindung be- , schrieben, durch welches ein Pilz aus der Gruppe Mucor pusillus Lindt, der zur Gattung Mucoi1 gehör.t, sowie dessen Varietäten und natürlichen und künstlichen Mutanten, welche äie meisten der typischen Eigenschaften des Stammpilzes aufweisen, gezüchtet werden, wobei in dem Medium mikrobiologisches Labferment gebildet wird. Dieses Ferment wird hierauf konzentriert und isoliert'. Unter dem Ausdruck Konzentrieren, Isolieren und Gewinnen des mikrobiologischen Labfermentes ist das Verfahren zur Überführung dieses Fermentes in einen reineren Zustand als seinen Rohzustand oder in einen Zustand gemeint, in welchem es in höherer Konzentration oder höherer Reinheit vorliegt. Das gemäß der Erfindung zur Züchtung der Pilze verwendete Medium kann jedes geeignete künstliche oder natürliche Medium sein, sofern es mindestens eine Quelle für Kohlenstoff und Stickstoff und anorganische Salze enthält. Als Kohlenstoffquelle können die. Monosaccharide, Disaccharide und Polysaccharide verwendet werden, welohe durch die Pilze assimiliert werden können, z.B. Rohrzucker, Lactose, Glucose oder Stärke. In gleicher Weise können als Stickstoffquelle eine große Anzahl von Stickstoffverbindungen verwendet werden, sofern sie assimilierbar sind, wie anorganische Ammoniumsalze, Aminosäuren und eine große Anzahl anderer Eiweißstoffe. Zu den anorganischen Salzen gehören z.B. Phosphate, Magnesium-The method according to the invention is described below, by means of which a fungus from the group Mucor pusillus Lindt, belonging to the genus Mucoi 1 , and its varieties and natural and artificial mutants, which have most of the typical properties of the parent fungus have, are grown, wherein microbiological rennet is formed in the medium. This ferment is then concentrated and isolated '. The expression concentrating, isolating and recovering the microbiological rennet means the process for converting this ferment into a purer state than its raw state or into a state in which it is present in a higher concentration or higher purity. The medium used for growing the mushrooms according to the invention can be any suitable artificial or natural medium so long as it contains at least one source of carbon and nitrogen and inorganic salts. As a carbon source, the. Monosaccharides, disaccharides and polysaccharides can be used which can be assimilated by the fungi, for example cane sugar, lactose, glucose or starch. Likewise, a large number of nitrogen compounds can be used as the nitrogen source, provided they can be assimilated, such as inorganic ammonium salts, amino acids and a large number of other protein substances. The inorganic salts include, for example, phosphates, magnesium

' BAD OPJGsNAL 909811/1026'BAD OPJGsNAL 909811/1026

oalao, Caloiuicsalso und zaiilreicho anor^anlaclio S Judonfallo kanu dio Stickotofl"- oder Kqhlenetofiuuello -,ίβα natürlichen oder kilna tliohcm .Medium© von J odor Art eein, oofern j*le von dom verwendeten %ilz gebraucht werden kann»· Alü ein horvorzugtes ilcdium kann V/eiaonlcloio . . . verwöndot worden. Sülbstvorständlioh hängen die hlon^ön ■ an Xohlonstoff- und Stiokstoffquellen und die Suaamiaön-'ö doe'^ediumo von dor AnpaüaunößfUliigkcit dea aur de» rdkrobiolo^iüchen Lab-föruantaa verwendeten Pilzes ab. .oalao, Caloiuicsalso and zaiilreicho anor ^ anlaclio S Judonfallo kanu dio Stickotofl "- or Kqhlenetofiuuello -, ίβα natural or kilna tliohcm .Medium © by J odor Art eein, if j * le from dom used % ilz can be used» · Alü been ilcdium can V / eiaonlcloio... verwöndot. Sülbstvorständlioh hang HLON ^ ön ■ at Xohlonstoff- and Stiokstoffquellen and Suaamiaön-'ö doe '^ ediumo of dor AnpaüaunößfUliigkcit dea aur de "rdkrobiolo ^ iüchen Lab föruantaa used from fungus. .

Obgleich diö Süciitungötömperatur von dora jeweils verwendeten ?ili! abhäiigt, eignet sich in allgeaoinen oino Tomperatur awisohön 20° und 4O0C. Gewönnlich führt inan die 2üoiitmii5 etwa 2 bi« 7 2a^ö teit Hilfe einer flüssigen Kultur oder öiiior festen Kultur boi pH 3 bis 8» insbesondere $l\ 5 biö 7 und voraugevraiae unter aurobon Üadingungen durcli· .la Falle einer flUsaigen Kultur kann jaan eine Oborfliichenkultur verwendön« Besaore Ergebnisse v/erdcn mit Schuttolkulturen oder ßubaerskulturen eriialten. Als ürgebnis dor -2üGhtung wird das ailohkoagulierende zaikrobiolo-,gißoiio Labfercient i«i Kedluia gebildet· 2ur Isolierung des Pöraönta aus dora Kulturaiüdium wird es in Pailö einer festen Kultur ait tfaaser oder einer wäaorigen. Lösung extraliiert·Although the Süciitungötömperatur used by dora? Ili! abhäiigt, is in allgeaoinen Oino Tomperatur awisohön 20 ° and 4O 0 C. Gewönnlich leads inan the 2üoiitmii5 about 2 bi "7 ^ ö 2a teit the aid of a liquid culture or solid culture öiiior boi pH 3 to 8» particular $ l \ 5 biö In the case of a liquid culture, a surface culture can be used. As a result of this, the ailohcoagulating zaikrobiolo-, gissoiio Labfercient i «i Kedluia is formed. Solution extralated

BAD ORIGiNAL 909811/102 6ORIGINAL BATHROOM 909811/102 6

In Pall« ο !nor flüssigen Kultur wird rtas üycol abgetrennt j man erhält ein© f eimhth&lti^ Lb'r>unß· Ale wäöüri&e Liiaun-(jcn können ßolcLo verwandet worden, die iJalao wlo Natriumchlorid* Kaliumchlorid usw., tJäuran» wie Saliseüure Zitro«'In Pall ο! Nor liquid culture, rtas ycol is separated off you get a © f eimhth & lti ^ Lb'r> unß · Ale wäöüri & e Liiaun- (jcn can ßolcLo been used, the iJalao wlo sodium chloride * Potassium chloride, etc., tjäuran "like Saliseüure Zitro" '

nonaUurti, Soüigßäura, uüvv· enthalten» sov;iu verschiüdene andorü Sypen von Pufforliteunggn.nonaUurti, Soüigßäura, uüvv · contain »sov; iu different andorü types of Pufforliteunggn.

Diö das aikrobiologißch© Jjabfersaent enthaltende Löoung kann hierauf eingeengt oder verfestigt werden» indem wan Köinigungabehändlungön, wie Fallung j-it organischen Lööunseoitteln# ÄuüßalÄon» L'in<mgen unter varRindörtera Druoic» Keinigung ßdt Hilfe von lonenaustauöoli&rn uew« duronführt· Als sur ?ällun£c verwendete Lösxüißanittel können Eiit Waeoer mischbare organische'Lösungsmittel, wio Methanol Äthanol» Isopropanol, Aceton usw." verwendet werden· Zuia Aussalzen kann jedes Salz .verwendet ~xteraent welches sich leioht in \faeaer löat» vae Aimaaniumaulfat» !»atriumtiulfat,The lion containing the aicrobiological © Jjabfersaent can then be narrowed or solidified »by wan cleaning, such as precipitation j-it organic solvents # ÄuüßalÄon» L'in <may be under varRindordea Druoic «no ßdt help from lonnustauöoli £ c used Lösxüißanittel can EIIT Waeoer miscible organische'Lösungsmittel, wio methanol ethanol »isopropanol, acetone, etc. are used" · Zuia salting, any salt .Used ~ t xteraen which itself! "atriumtiulfat leioht in \ faeaer löat» uAE Aimaaniumaulfat "

uew*
^emäß dsr Erfindung hergestellte mikrobiologischeuew *
^ Microbiological produced according to the invention

basit&t jEigenschaftön, dia sich deutlich von den bisher bekannten i'roteason tierischen oder pflanzlichen Ur£ij>run&B oder solcher Proteaoenj die von anderen Kikroban gebildet werden» untorechoiden. z/ Basit & t jEigenschaftön, which clearly differ from the previously known i'roteason animal or vegetable Ur £ ij> run & B or such proteaoenj which are formed by other Kikroban »undorechoiden. z /

ORfGfNALORfGfNAL

909811/10 2 6909811/10 2 6

1442 T18'1442 T18 '

ΰαο nikrobiolo^iocho Labferr.ont beaitat cine kräftige lailohkoußttlieror.do Aktivität,'; doch iutsuino I'roteaoenaktivitiit ßöhr schwach· . . .ΰαο nikrobiolo ^ iocho Labferr.ont beaitat cine vigorous lailohkoußttlieror.do activity, '; but iutsuino I'roteaoenaktivitiit ßöhr weak ·. . .

Die milchkoagulierenie Aktivität des isikrobiologiochen liabferriontöü aoigt ahnlich v/ie daa Juabftjrraent miß dera 4« "Kiirbürin&ßGn oi:io starke Aktivität in sauren pH*The milk coagulating activity of the isikrobiologiochen liabferriontöü aoigt similarly v / ie daa Juabftjrraent miss dera 4 «" Kiirbürin & ßGn oi: io strong activity in acidic pH *

Kit stQigendora pH nirast seine Aktivität ab, Ia alkali- Kit stQigendora pH drops its activity, Ia alkaline

sehen pH-Boreich iüt dio Aktivitätsee pH-Boreich iut the activity

Bei dör -^rBtülluug von ^utifk beträg"t" der s gehalt, der in dio wolke übergeht, nach 150 Minuten etwa 20 i> (Leütinint n&oh Kjöldahl)· Ifa eouitdae Moment eich praktißch ßloich vorhält v/icj Labfcrmont, wird das Caeoin 4or Miloh vorteilhaft verwendet. Bei der Boßtimmung der Proteaoenaktivitat deo.jaikrobiolosißchöii ijabfernenteis nach. Anöoii unter Verwendung der enteprochenden Iwenge an ?orwenten, wolohe die gleiche nilclikoaguliörende Aktivität • zeigen, beträft die Absorption bei 660 t?.^ im Pallo der sauren ^rotoaee aua Aepergillus ssaitoi 0,641 (optiä3o)ie DicUte) und von Labforsient 0,059» v/Mhrend die von nikro-Labfermont waniger ala 0,102 botri'/jt» DiesWith dör - ^ rBtülluug by ^ utifk, the s content, which passes into the cloud, amounts to about 20 i> after 150 minutes (Leütinint n & oh Kjöldahl) · Ifa eouitdae moment eich practically ßloich holds v / icj Labfcrmont, becomes the Caeoin 4or Miloh used to advantage. When determining the protean activity deo.jaikrobiolosißchöii ijabfernenteis after. Anöoii using the enteprochenden ivy orwents, which show the same nile clicoagulant activity, the absorption at 660 t? While that of nikro-Labfermont waniger ala 0.102 botri '/ jt »This

, daß das Labr&raent ^emUß der Erfindung von voll-that the Labr & raent ^ em must of the invention of full-

BAD ORIGINAL 90981 1 /1026BATH ORIGINAL 90981 1/1026

ständig anderer Art ist als die übliche Protease, da; seine . BilChkoagu-liereTide ARti.vitäx ungewöhnlich t-tark im Vergleich zu seiner Pro teasenaktivität ist«is always of a different type than the usual protease, there; his . BilChkoagu-liereTide ARti.vitäx is unusually t-strong compared to its protease activity «

Da das gemäß der E.rzünduT\f>; hergestellte xn'ikrobiologi-SChe5 FerioeJfit .durch Züchtung von Mikroben erhalten, wird, kann mafi es auf billigem Wage in großtechnischem Maßstab herstelJeit. Ls ist vielseitiger Anwendung fähig, z.B. zxir Herstellung von Desserts, Eiscreme und für andere Zwecke, z.B. zuj: Herstellung von Konfekt.Since that according to the E.ründuT \ f>; produced xn'i krobiologi-SChe5 FerioeJfit. is obtained by cultivating microbes, it can be produced on a cheap scale on an industrial scale. It can be used in a variety of ways, e.g. for the production of desserts, ice cream and for other purposes, e.g. for the production of confectionery.

BADBATH

909811/1026909811/1026

H42118 - 13 -H42118 - 13 -

Erfindung wird naohötehend anhand von Beispielen nHher fr^äutert.The invention is illustrated by means of examples nH earlier ^ utes.

r r Beiapiel 1Example 1

1§ 'If41© Weiüsenkleie wurden »it 7 Teilen Wasser ver*1§ 'If41 © white bran were mixed with 7 parts of water

« Naoh dem Voriaiuohen wurde die Mat» ο θ '15 Minuten bei gekocht. Dio itooae wurde nach dom Abkülilen mit at atom von Mucor pusillua Lindt (IAiM F-27) ansölmpft 0 inkubiert. Am dritten. Xag erreichte die milch-«After the Voriaiuohen the mat was cooked» ο θ '15 minutes at. Dio itooae was by dom Abkülilen with at atom of Mucor pusillua Lindt (IAIM F-27) 0 ansölmpft incubated. On the third. Xag reached the dairy

Aktivität ihr Maximum. Die V/elaenkleie wurde So ml Waaser ,je Io g veraotat und 1 fttunde beiActivity at its maximum. The V / elaenkleie was So ml Waaser, each Io g veraotat and 1 fttunde at

atehea gelassen,· Ilior^ur wurde daa Kyoel I u»4 «an erhielt 4o ml der B&krobiol& Labfarment enthaltondon Lüoung. Di& oilchkoEmulierendeatehea left, · Ilior ^ ur was daa Kyoel I u "4" received 40 ml of the B & krobiol & Labfarment contains London Lüoung. Di & oilchko emulating

«iiasaa Extrakt θ ο betrug 6oo Soxhlet %%m \$M$s Lösung pulverisierter entrahmter weloh« 5,Aqo Mol OüloiUBiQhlorid enthielt· Somit erhielt man &ua Io β V/eiaonkloio 32 ooo Einheiten mikrobiologisohe sailoI^Goaiiulierendea Ferment. Hierauf wurde dieser Extrakt »it Ataiaoniumaulfat auf einen Hättigurigs^rad von o,22 bie ot66 aua^eealaen. PraktiBch die gesamte Aktivität ging iit|$&· Ballung über. Weitorhia kann eine Fällung mit einer Aktivität von 78$, Qo'f>t, ·6ο^ bzw. 75$ mit Hilfe organiso&er der nachstehend genannten Konzentrationen"Iiasaa extract θ o was 600 Soxhlet %% m \ $ M $ s solution of powdered skimmed weloh" 5, Aqo Mol OüloiUBiQhlorid contained · Thus one received & ua Io β V / eiaonkloio 32,000 units of microbiological sailoI ^ Goaiiulierenda ferment. Then, this extract "was it Ataiaoniumaulfat a Hättigurigs ^ rad o, 22 o t bie 66 ouch ^ eealaen. Practically the entire activity was carried out with | $ & · agglomeration. Weitorhia can produce a precipitation with an activity of $ 78, Qo'f> t, · 6ο ^ or $ 75 with the help of organisers of the concentrations given below

BAD ORIGINAL 90981 1 /1026 Γ" ..BAD ORIGINAL 90981 1/1026 Γ "..

worden: Äthanol ?ο#» Mothanol 75#» Aceton 66$been: Ethanol? ο # »Mothanol 75 #» Acetone 66 $

und luopropanol 7o#· DIo Aktivität des auf diese Weiseand luopropanol 7o # · DIo activity of this way

'·«'■
erhaltenen raikrobioloüiüchoa Puriaeatoo betrug loo itoxhlet·» £inheitdn/{sgi während die ICälbermagonlabformentva.bletten der Ohr* Hansens Laboratory, Inc eine Aktivität von 2oο '· «' ■
obtained raikrobioloüiüchoa Puriaeatoo was loo itoxhlet · »£ inheitdn / {sgi while the ICälbermagonlabformentva.bletten der Ohr * Hansens Laboratory, Inc an activity of 2oο

' Bolspiel 2 ' Bolspiel 2

Ein lo$ pulverieierte,- entrahmte Ktloh, I^ Oluoooe ?), otl5i Hefe extrakt, l/2oo Mol GaOl2 enthaltende a Medium wurde mit einemStamra von Mucor pua.iilue Iiindt (IAU F-27). beimpit, Kaoh 4 Xagea Scnütteln ter Kultur bei 3o°C wurde da» 1.Iy ο el abfiltriert, und man erhielt eine Fermetttlösung· Eie Aktivität dieeer Permentiöeung betrug 115 Soxklet-Einnoiton/ral; ßoriit entapraoh. 1 ml ο,ο5 Kg Labförmonttabletton. Aus dieser Lüuung wurde in ähnlicher Woiue wie In Beispiel 1 ein goreinigtea festes FermeutpräparatA lo $ powdered, - skimmed Ktloh, I ^ Oluoooe?), O t l5i yeast extract, l / 2oo mol GaOl 2 a medium was with a stamra of Mucor pua.iilue Iiindt (IAU F-27). beimpit, Kaoh 4 Xagea Scnütteln ter culture at 3o ° C was there, "1.Iy ο el filtered off, to give a Fermetttlösung · ovum activity dieeer Permentiöeung was 115 Soxklet-Einnoiton / ral; ßoriit entapraoh. 1 ml ο, ο5 kg rennet tray. From this solution, a goreinigtea solid Fermeut preparation was made in a similar way as in Example 1

Bei3Piel Bei3Piel \\

2ine Sporönauspenoion von Muoor puaiilua Lindt (XAM ^27) \mrde einer Beatrahlunß mit HUntgenetrahlen von 37 4oo Röntgen unterworfen· Haoh U.er Bestrahlung betrug die Lebensfähigkeit der Sporen 1$· 33er aus ά&η Sporen2ine Sporönauspenoion of Muoor puaiilua Lindt (XAM ^ 27) \ mrde subjected to a radiation with HUntgenetrrahlen of 37,4oo x-rays · Haoh U.er irradiation the viability of the spores was 1 $ · 33er from ά & η spores

■ .. Λ · BAD ORfGIfML■ .. Λ · BAD ORfGIfML

90981 1/1026 '"·.· . . I 90981 1/1026 '"·. ·.. I

1U21181U2118

nit "to le der Monooporon-ZUohtungQciothode orhaltono S wurde untor don gloiohon Kultui^bedin&ungGn, wie Bio in Beispiel 1 boüohriouön sind, gezüchtet und extrahiert.nit "to le of the Monooporon-ZUohtungQciothode orhaltono S was untor don gloiohon Kultui ^ bedin & ungGn, like Bio in Example 1 are boüohriouön, grown and extracted.

Aktivität des Extrakts "betruß 2ooo Soxhlot-Einheiton/nl.Activity of the extract "was 2,000 Soxhlot units / nl.

Sine äporensuspension von Mucor puai.llus Lindt (IAK F-27) wurde der Bestrahlung mit einer 15 W-Laiape für pitraviolettaterilisatlon 12ο Sekunden lang in einem Abstand von 3o cm unterworfen.Its outer suspension from Mucor puai.llus Lindt (IAK F-27) was irradiated with a 15 W Laiape for pitraviolettaterilisatlon for 12ο seconds in one Subject to a distance of 30 cm.

Nach der Bestrahlung betrug die Sporenlebensfähigkeit ο ,liv. Die Sporon wurden der gleichen Arbeitaweise wie in Beispiel 3 zur Herstellung eines Extrakte unterworfen· Die Aktivität des so erhaltenen Extrakte betrug 3ooo ; öoxhlet-Eiixheiten/ml.After irradiation, the spore viability was ο, liv. The sporons were made in the same way as in Example 3 subjected to the preparation of an extract The activity of the extract thus obtained was 3,000; Ooxhlet units / ml.

BAD ORIGINAL 90981 1/1026BAD ORIGINAL 90981 1/1026

Claims (1)

PatentanspruchClaim Verfahren zur Herstellung von milchkoagulierendem Ferment durch Züchten von-Schimmelpilzen in Kohlehydrate, Stiokstoffsubstanzen und organische Salze enthaltenden Hahrmedien bei üblichen Temperaturen und pH-Werten, daduroh gekennzeichnet, daß man als Schimmelpilz Muoor pusilLus Lindt bzw. dessen Mutanten verwendet»Process for the preparation of milk coagulating agent Ferment by growing mold into carbohydrates, Containing nitrogen substances and organic salts Holding media at normal temperatures and pH values, daduroh marked that the mold used is Muoor pusilLus Lindt or its mutants » 9 09 8 11 /102 §e3 9 09 8 11/102 § e3 Unterlagen- --Documents- --
DE19621442118 1961-07-20 1962-01-26 Process for the production of milk-coagulating ferment by growing molds Pending DE1442118A1 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2566461 1961-07-20

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE1442118A1 true DE1442118A1 (en) 1969-03-13

Family

ID=12172048

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19621692334 Pending DE1692334B1 (en) 1961-07-20 1962-01-26 Cheese making
DE19621442118 Pending DE1442118A1 (en) 1961-07-20 1962-01-26 Process for the production of milk-coagulating ferment by growing molds

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19621692334 Pending DE1692334B1 (en) 1961-07-20 1962-01-26 Cheese making

Country Status (4)

Country Link
US (1) US3151039A (en)
CH (1) CH442196A (en)
DE (2) DE1692334B1 (en)
GB (1) GB970331A (en)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3275453A (en) * 1964-04-21 1966-09-27 Pfizer & Co C Milk-curdling enzyme elaborated by endothia parasitica
JPS4427714B1 (en) * 1966-02-26 1969-11-17
FR1556473A (en) 1967-04-18 1969-02-07
US3616233A (en) * 1969-02-19 1971-10-26 Baxter Laboratories Inc Removing esterase from microbial rennin
DE3132936A1 (en) * 1981-08-20 1983-03-03 Henkel KGaA, 4000 Düsseldorf "METHOD FOR PRODUCING ACID PROTEASE AND THESE FORMING MUTANTS OF THE RHIZOPUS GENUS"
US4526792A (en) * 1982-11-02 1985-07-02 S.A. Presure Granday Process of producing a coagulant composition for cheese production
US4721673A (en) * 1983-09-01 1988-01-26 Genex Corporation Recovery and activation process for microbially produced calf prochymosin
US5082775A (en) * 1984-05-11 1992-01-21 Berlex Laboratories, Inc. Efficient process for isolating insoluble heterologous protein using non-ionic detergents
US4690826A (en) * 1986-05-15 1987-09-01 Canadian Patents And Development Limited Bacterial enzyme used as cheese ripening aid
DK47493D0 (en) * 1993-04-27 1993-04-27 Novo Nordisk As METHOD OF PRODUCING CHEESE

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2936265A (en) * 1954-10-25 1960-05-10 American Cyanamid Co Proteolytic enzyme and methods for its production
US2848371A (en) * 1956-01-23 1958-08-19 Noda Ind And Scient Res Lab Method of producing and purifying a new proteolytic enzyme
US2997395A (en) * 1958-07-11 1961-08-22 Nat Res Dev Process for the manufacture of cheese curd
US2989400A (en) * 1959-07-01 1961-06-20 Baumann Roman Process for making peanut cheddar cheese

Also Published As

Publication number Publication date
CH442196A (en) 1967-08-31
GB970331A (en) 1964-09-23
US3151039A (en) 1964-09-29
DE1692334B1 (en) 1972-06-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE4134854C2 (en)
DE2050714C2 (en) Polysaccharide with anti-tumor activity, process for its preparation and its use as an active ingredient in anti-tumor agents
DE1442118A1 (en) Process for the production of milk-coagulating ferment by growing molds
DE3402647A1 (en) METHOD FOR OBTAINING COLONY-STIMULATING FACTOR AND KALLIKREIN FROM HUMAN URINE
DE3531612A1 (en) Process for the preparation of hyaluronic acid
DE1642656A1 (en) Highly active urate oxidase and its production
DE3049773T1 (en) Process for the production of pectin from plant tissues
DE2024586C3 (en)
DE1517777C3 (en) Process for the production of uricase from a yeast of the species Candida utilis which has been adjusted to uricase with uric acid
DE2021465A1 (en) Method for obtaining sterol dehydrase
DE1617397C3 (en) Production of a tumor static agent by growing Streptococcus haemolyticus
CH651063A5 (en) METHOD FOR OBTAINING ANABOLIC, BREATHABILIZING, LOW-MOLECULAR ACTIVE SUBSTANCES FOR PROPHYLACTIC, THERAPEUTIC, CELL AND TISSUE CULTURAL TECHNICAL PURPOSES.
DE1517752C3 (en) Process for the production of pullulanase
DE1642663A1 (en) Method of making uricase
DE1642622A1 (en) Process for the production of a new ferment for curdling milk
DE1944493A1 (en) Process for the production of pentitols
DE1442118C (en) Process for the production of milk-coagulating ferment by growing mold
DE2058371A1 (en) Process for the preparation of 6-aminopenicillanic acid
DE1442118B (en) Process for the production of milk-coagulating ferment by growing mold
DE2239210A1 (en) METHOD FOR THE DECOMPOSITION OF REFINOSE USING ALPHA-GALACTOSIDASE
DE664428C (en) Process for the production of tanning extracts from sulphite cellulose waste liquor
AT96830B (en) Process for producing a culture medium for influenza bacilli and for producing vaccines therefrom.
DE971230C (en) Process for the isolation of active substances from animal organs
DE964089C (en) Process for the biological production of vitamin B.
DE1442141A1 (en) Process for the production of gentiobiosis

Legal Events

Date Code Title Description
SH Request for examination between 03.10.1968 and 22.04.1971
E77 Valid patent as to the heymanns-index 1977