DE1134071B

DE1134071B - Process for the preparation of new derivatives of the tetracycline antibiotics

Info

Publication number: DE1134071B
Application number: DEE20145A
Authority: DE
Inventors: Dr Francesco Lauria; Dr Willy Logemann
Original assignee: Carlo Erba SpA
Current assignee: Pfizer Italia SRL
Priority date: 1959-11-23
Filing date: 1960-11-07
Publication date: 1962-08-02
Also published as: DE1134071C2

Description

Verfahren zur Herstellung von neuen Derivaten der Tetracyclin-Antibiotica Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von neuen Derivaten der Tetracyclin-Antibiotica, die in Wasser leicht löslich sind, dabei einen nahezu neutralen pH-Wert ergeben und bei oraler, intravenöser und intramuskulärer Anwendung wirksam sind.Process for the preparation of new derivatives of the tetracycline antibiotics The present invention relates to a method of making new Derivatives of the tetracycline antibiotics, which are easily soluble in water, are included give a nearly neutral pH and with oral, intravenous and intramuscular Application are effective.

Der Ausdruck »Tetracyclin-Antibiotica<c soll, wenn er in der vorliegenden Beschreibung verwendet wird, Chlortetracyclin, Oxytetracyclin, Tetracyclin; Desmethyltetracyclin und solche Derivate dieser Verbindungen umfassen, die antibiotisch wirksam sind.The term "tetracycline antibiotics" is intended when used in the present Description used is chlortetracycline, oxytetracycline, tetracycline; Desmethyltetracycline and include those derivatives of these compounds which are antibiotic.

Es ist bekannt, daß in Wasser leicht lösliche Derivate des Tetracyclins erhalten werden, wenn man Tetracyclin mit Formaldehyd und bestimmten Aminoverbindungen, z. B. einem Dialkylamin, Piperidin, Morpholin oder Piperazin, umsetzt. Die Aminomethylgruppe, die dadurch.in das Molekül des Tetracyclins eingeführt wird, kann an ein Kohlenstoffatom des Tetracyclin-Ring-Systems (deutsche Auslegeschriften 1044806 und 1063 598) oder an das Stickstoffatom der Carbonsäureamidgruppe des Tetracyclinmoleküls (britische Patentschrift 809 585 und deutsches Patent 1088481) gebunden sein. Die so erhaltenen Aminomethylderivate sind antibakteriell genauso wirksam wie Tetracyclin, wenn man sie intravenös anwendet; sie sind jedoch wesentlich weniger wirksam als Tetracyclin, wenn man sie oral anwendet (E. N. Ewald und G. S. Redin, Antibiotics and Chemotherapy, 1960, S. 419 bis 421).It is known that derivatives of tetracycline which are readily soluble in water obtained by using tetracycline with formaldehyde and certain amino compounds, z. B. a dialkylamine, piperidine, morpholine or piperazine. The aminomethyl group, which is thereby introduced into the molecule of the tetracycline can be attached to a carbon atom the tetracycline ring system (German Auslegeschriften 1044806 and 1063 598) or to the nitrogen atom of the carboxamide group of the tetracycline molecule (British Patent 809 585 and German Patent 1088481). The so obtained Aminomethyl derivatives are as antibacterial as tetracycline, if one using it intravenously; however, they are much less effective than tetracycline, when used orally (E. N. Ewald and G. S. Redin, Antibiotics and Chemotherapy, 1960, pp. 419 to 421).

Eine Reihe von Aminosäuren sind außerdem nichtbefähigt, mit Tetracyclin-Antibioticsis und Formaldehyd unter Bildung von wasserlöslichen Produkten, die eine genügende Stabilität gegenüber Hydrolyse besitzen und für parenterale Zwecke verwendet werden können, zu reagieren. Beispielsweise ist das durch Umsetzung von 1 Mol Tetracyclin, 1 Mol Formaldehyd und 1 Mol Glykokoll erhaltene Produkt in wäßrigerLösung so instabil, daß das schwer lösliche Tetracyclin nach kurzer Zeit ausfällt. Wenn man Ornithin oder Arginin an Stelle von Glykokoll verwendet, werden Produkte erhalten, die gleichfalls eine schlechte Stabilität gegenüber Wasser besitzen.A number of amino acids are also disabled with tetracycline antibioticsis and formaldehyde with the formation of water-soluble products, which are sufficient Have stability to hydrolysis and be used for parenteral purposes able to respond. For example, by converting 1 mole of tetracycline, 1 mole of formaldehyde and 1 mole of glycoll obtained product in aqueous solution so unstable that that the sparingly soluble tetracycline precipitates after a short time. If you have ornithine or if arginine is used instead of glycocolla, products are obtained which likewise have poor stability against water.

Es wurde nun gefunden, daß neue Derivate der Tetracyclin-Antibiotica, die eine gute Stabilität gegenüber Wasser besitzen, erhältlich sind, wenn man 1 Mol eines Tetracyclin-Antibioticums mit etwa 1 bis 2 Mol Formaldehyd und etwa 1 Mol Lysin umsetzt. Die so erhaltenen Produkte sind bei parenteraler und oraler Anwendung wirksam.It has now been found that new derivatives of the tetracycline antibiotics, which have a good stability towards water, can be obtained by 1 Moles of a tetracycline antibiotic with about 1 to 2 moles of formaldehyde and about 1 Mol lysine converts. The products thus obtained are for parenteral and oral use effective.

Die Umsetzung zwischen den drei vorstehend erwähnten Komponenten kann in einem Ein-Stufen-Verfahren durchgeführt werden, indem man gleichzeitig alle drei Komponenten miteinander umsetzt. Man kann aber auch derart verfahren, daß man zuerst den Formaldehyd mit einer der beiden anderen Komponenten umsetzt und dann die verbleibende Komponente zufügt.The reaction between the three components mentioned above can be can be done in a one-step process by doing all three at the same time Components with each other. But one can also proceed in such a way that one first the formaldehyde reacts with one of the other two components and then the remaining one Add component.

Als Tetracyclin-Antibiotica wird vorzugsweise Tetracyclin in Form der freien Base verwendet. Der Formaldehyd wird vorzugsweise in der Form von wäßrigen oder alkoholischen Lösungen verwendet. An Stelle von Formaldehyd kann man auch Verbindungen verwenden, die Formaldehyd unter den Reaktionsbedingungen zu bilden vermögen.Tetracycline is preferably used as the tetracycline antibiotics in the form the free base is used. The formaldehyde is preferably in the form of aqueous or alcoholic solutions are used. Compounds can also be used in place of formaldehyde use that are able to form formaldehyde under the reaction conditions.

Die Umsetzung wird zweckmäßig in Gegenwart von Lösungs- oder Verdünnungsmitteln durchgeführt. Vorzugsweise werden organische Lösungsmittel, wie Methanol, oder Gemische aus Wasser und organischen Lösungsmitteln verwendet. Wasser allein kann nicht als Lösungsmittel verwendet werden.The reaction is expediently carried out in the presence of solvents or diluents carried out. Organic solvents such as methanol or mixtures are preferred used from water and organic solvents. Water alone cannot be considered Solvents can be used.

Die Ein-Stufen-Reaktion wird zweckmäßig bei einer etwas erhöhten Temperatur, z. B. 30 bis 40°C, durchgeführt, wobei Methanol oder Gemische aus Methanol und wenig Wasser als Lösungsmittel verwendet werden.The one-stage reaction is expediently carried out at a slightly elevated temperature, z. B. 30 to 40 ° C carried out, with methanol or mixtures of methanol and a little Water can be used as a solvent.

Wenn man in zwei Stufen arbeitet, kann man beispielsweise Lysin mit 1 Mol Formaldehyd in wäßriger oder alkoholischer Lösung oder mit 2 Mol Formaldehyd in wäßriger Lösung umsetzen. Das so gebildete Zwischenprodukt kann aus der Lösung isoliert, in Methanol und wenig Wasser gelöst und dann zu der Lösung des Tetracyclins in Methanol bei einer Temperatur von ungefähr 30 bis 40°C gegeben werden.If you work in two stages, you can use lysine, for example 1 mole of formaldehyde in aqueous or alcoholic solution or with 2 moles of formaldehyde convert in aqueous solution. That so educated Intermediate product can isolated from the solution, dissolved in methanol and a little water and then added to the solution of the tetracycline in methanol at a temperature of about 30 to 40 ° C will.

Wenn man Tetracyclin und Formaldehyd in der ersten Stufe umsetzt, wird die Umsetzung zweckmäßig durchgeführt, indem man Tetracychn in einem geeigneten Verdünnungsmittel, wie Butanol, suspendiert, den Formaldehyd bei normaler Temperatur zufügt und das so erhaltene Gemisch etwa 30 Minuten unter Rückfluß zum Sieden erhitzt. Das Reaktionsprodukt wird durch Abkühlen ausgefällt und isoliert. Das isolierte Produkt und die äquivalente Menge Lysin werden in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Methanol, gelöst, und die Lösung wird, wie vorstehend erwähnt, auf eine geringfügig erhöhte Temperatur erhitzt.If you react tetracycline and formaldehyde in the first stage, the reaction is expediently carried out by placing tetracychn in a suitable Diluents, such as butanol, suspend the formaldehyde at normal temperature and the mixture thus obtained is heated to boiling under reflux for about 30 minutes. The reaction product is precipitated and isolated by cooling. The isolated The product and the equivalent amount of lysine are dissolved in a suitable solvent, such as methanol, and the solution, as mentioned above, is reduced to a minor extent heated elevated temperature.

Die chemische Konstitution der Reaktionsprodukte ist noch nicht vollständig aufgeklärt. Wahrscheinlich ist das Reaktionsprodukt ein Lysinomethyltetracyclin der allgemeinen Formel A-CHZ-B, worin A den Rest eines Tetracyclin-Antibioticums und B den Rest von Lysin darstellen. Die Analyse bestätigt die Richtigkeit dieser Annahme. Die optische Drehung der Reaktionsprodukte ist verschieden von den Werten des entsprechenden Tetracyclin-Antibioticums bzw. Lysins. Das Reaktionsprodukt ist gegenüber Wasser verhältnismäßig stabil. Die wäßrigen Lösungen der Reaktionsprodukte bleiben bei Zimmertemperatur etwa 24 Stunden klar. Dadurch wird es ermöglicht, die Reaktionsprodukte durch Gefriertrocknung ihrer wäßrigeii Lösungen zu isolieren.The chemical constitution of the reaction products is not yet complete enlightened. The product of the reaction is likely a lysinomethyl tetracycline of the general formula A-CHZ-B, where A is the residue of a tetracycline antibiotic and B represent the remainder of lysine. The analysis confirms the correctness of this Adoption. The optical rotation of the reaction products is different from the values of the corresponding tetracycline antibiotic or lysine. The reaction product is relatively stable to water. The aqueous solutions of the reaction products remain clear for about 24 hours at room temperature. This enables the To isolate reaction products by freeze-drying their aqueous solutions.

Bezüglich der therapeutischen Eigenschaften der neuen Produkte wurde folgendes festgestellt: Die Blutspiegel von Patienten, die teils einer Behandlung mit dem erfindungsgemäß hergestellten L-Lysinomethyltetracyclin, teils mit Pyrrolidinomethyltetracyclin (einem Produkt entsprechend der deutschen Auslegeschrift 1044806) und teils mit Tetracyclinhydrochlorid unterworfen wurden, sind in Abb. 1 gezeigt. Die Produkte wurden intravenös verabreicht. Aus Abb. 1 ist ersichtlich, daß das gemäß der Erfindung hergestellte Produkt zu höheren Blutspiegeln führt als die beiden anderen Produkte. Jeder Patient erhielt 100 mg (berechnet auf Tetracyclinbase). Diese Dosis wurde in jedem Fall auf einmal verabreicht. Aus Abb.2 ist ersichtlich, daß das gemäß der Erfindung hergestellte Produkt bei einer Beobachtungsdauer bis zu 24 Stunden auch höhere Blutspiegel gibt als Pyrrolidinomethyltetracyclin (ein Produkt entsprechend der deutschen Auslegeschrift 1044806), wenn die Produkte intramuskulär verabreicht werden. Jeder Patient erhielt 250 mg (berechnet auf Tetracyclinbase). Diese Dosis wurde in jedem Fall auf einmal verabreicht. Abb. 3 zeigt die Blutspiegel, die sich mit dem erfindungsgemäß hergestellten L-Lysinomethyltetracyclin und Tetracyclinhydrochlorid ergeben, wenn die Produkte oral verabreicht werden. Jeder Patient erhielt 150 mg (berechnet auf Tetracyclinbase) alle 6 Stunden. Abb. 3 zeigt die Blutspiegel, die nach 6, 12, 30 und 54 Stunden erhalten wurden. Die Blutspiegel, die mit dem gemäß der Erfindung hergestellten Produkt erhalten wurden, waren höher als die Blutspiegel, die mit Tetracyclinhydrochlorid erhalten wurden. Tabelle 4 zeigt die Toxizität gegenüber Mäusen von Tetracyclinhydrochlorid, Pyrrohdinomethyltetracyclin (einem gemäß dem Verfahren der deutschen Auslegeschrift 1044806 hergestellten Produkt) und L-Lysinomethyltetracyclin (einem gemäß der Erfindung hergestellten Produkt). Der Ausdruck DL" bedeutet die akute Toxizität in mg/kg. Die Produkte wurden intravenös verabreicht. Das Volumen jeder Dosis betrug 0,4 bis 0,6 m1/20 g. Die Dosen wurden mit einer Geschwindigkeit von 1 ml/Minute verabreicht. Aus Tabelle 4 ergibt sich, daß die Toxizität des gemäß der Erfindung hergestellten Produktes beträchtlich geringer ist als die Toxizitäten der beiden anderen Produkte. Tabelle 4 Tetracyclin- Pyrrolidino- L-Lysino- hydrochlorid methyl- methyl- tetracyclin tetracyclin DL") ........ 220 125 320 DL5o, berech- net auf Tetra- cyclinhydro- chlorid ...... 220 115 , 253 Aus den Abb. 1 bis 3 und Tabelle 4 ergibt sich die Möglichkeit, die Dosis des L-Lysinomethyltetracyclins zu vermindern, um die gleichen Blutspiegel und die gleichen therapeutischen Effekte zu erhalten, die mit Pyrrolidinomethyltetracyclin oder Tetracyclinhydrochlorid erhältlich sind. Beispiel 1 5 g Tetracyclinbase werden in 100 ml Methanol gelöst. Zu dieser Lösung werden 2,25 g von L-Lysinhydrochlorid in 7 ml Wasser und 1 ml 38 %igem Formaldehyd gegeben.With regard to the therapeutic properties of the new products, the following was determined: The blood levels of patients who were partly subjected to treatment with the L-lysinomethyltetracycline produced according to the invention, partly with pyrrolidinomethyltetracycline (a product according to German Auslegeschrift 1044806) and partly with tetracycline hydrochloride are shown in Fig 1 shown. The products were administered intravenously. From Fig. 1 it can be seen that the product made according to the invention leads to higher blood levels than the other two products. Each patient received 100 mg (calculated on a tetracycline base). This dose was given all at once in each case. From Fig. 2 it can be seen that the product produced according to the invention, with an observation period of up to 24 hours, also gives higher blood levels than pyrrolidinomethyltetracycline (a product according to the German Auslegeschrift 1044806) when the products are administered intramuscularly. Each patient received 250 mg (calculated on a tetracycline base). This dose was given all at once in each case. FIG. 3 shows the blood levels which result with the L-lysinomethyltetracycline and tetracycline hydrochloride produced according to the invention when the products are administered orally. Each patient received 150 mg (calculated on a tetracycline base) every 6 hours. Fig. 3 shows the blood levels obtained after 6, 12, 30 and 54 hours. The blood levels obtained with the product made according to the invention were higher than the blood levels obtained with tetracycline hydrochloride. Table 4 shows the toxicity to mice of tetracycline hydrochloride, pyrrohdinomethyltetracycline (a product produced according to the method of German Auslegeschrift 1044806) and L-lysinomethyltetracycline (a product produced according to the invention). The term DL "means the acute toxicity in mg / kg. The products were administered intravenously. The volume of each dose was 0.4-0.6 ml / 20 g. The doses were administered at a rate of 1 ml / minute. Aus Table 4 shows that the toxicity of the product prepared according to the invention is considerably lower than the toxicities of the other two products. Table 4 Tetracycline- Pyrrolidino- L-Lysino- hydrochloride methyl- methyl- tetracycline tetracycline DL ") ........ 220 125 320 DL5o, calculated net on tetra cyclinhydro chloride ...... 220 115, 253 From Figs. 1 to 3 and Table 4 it is possible to reduce the dose of L-lysinomethyltetracycline in order to obtain the same blood levels and the same therapeutic effects that are obtainable with pyrrolidinomethyltetracycline or tetracycline hydrochloride. Example 1 5 g of tetracycline base are dissolved in 100 ml of methanol. 2.25 g of L-lysine hydrochloride in 7 ml of water and 1 ml of 38% formaldehyde are added to this solution.

Die Lösung wird bei Zimmertemperatur 3 Stunden stehengelassen und dann im Vakuum bei einer niedrigen Temperatur beinahe zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wird in 25 ml destilliertem Wasser gelöst und lyophilisiert. Er wird schließlich im Vakuum über P205 getrocknet.The solution is left to stand at room temperature for 3 hours and then concentrated almost to dryness in vacuo at a low temperature. Of the The residue is dissolved in 25 ml of distilled water and lyophilized. He will eventually dried in vacuo over P205.

Die so erhaltene hellgelbe Substanz schmilzt bei 190 bis 195°C. Ausbeute 6,8 g = 94,5% der Theorie. Analyse für CzoH"N401o - HCI: Berechnet ... C 54,49 0/0, H 5,99 0/0, N 8,76 0/0; gefunden ... C 55,18 0/0, H 6,710/0, N 8,58 0/0. Feuchtigkeit 7,78 0/0 (bestimmt nach der Karl-Fischer-Methode).The light yellow substance obtained in this way melts at 190 to 195 ° C. Yield 6.8 g = 94.5% of theory. Analysis for CzoH "N401o - HCl: Calculated ... C 54.49 0/0, H 5.99 0/0, N 8.76 0/0; found ... C 55.18 0/0, H 6.710 / 0, N 8.58 0/0. Moisture 7.78 0/0 (determined by the Karl Fischer method).

Beispiel 2 1 ml 38 %iger wäßriger Formaldehyd wird zu einer Lösung von 5 g Tetracyclinbase in 160 ml Methanol gegeben; unter Rühren wird bei 30°C 1,75 g DL-Lysin in 3 ml Wasser und 10 ml Methanol gegeben. Nach wenigen Minuten bildet sich ein Niederschlag. Das Rühren wird ungefähr 2 Stunden fortgesetzt. Der Niederschlag wird abfiltriert und mit einer geringen Menge Methanol-Äther gewaschen. Nach dem Trocknen im Vakuum bei 60°C wird ein in Wasser sehr leicht lösliches, gelbes Pulver erhalten; es schmilzt oberhalb 200°C unter langsamer Zersetzung. Ausbeute 5,8 g = 85 0/0 der Theorie.Example 2 1 ml of 38% strength aqueous formaldehyde becomes a solution of 5 g of tetracycline base added to 160 ml of methanol; while stirring, it becomes 1.75 at 30.degree g DL-lysine in 3 ml water and 10 ml methanol. Forms after a few minutes a precipitate. Stirring is continued for about 2 hours. The precipitation is filtered off and washed with a small amount of methanol-ether. After this Drying in vacuo at 60 ° C. results in a yellow powder which is very easily soluble in water obtain; it melts above 200 ° C with slow decomposition. Yield 5.8g = 85 0/0 of theory.

Analyse für C"H"N401o: Berechnet ... C 57,79 0/0, H 6,35 0/0, N 9,25 0/0; gefunden ... C 57,59 0/0, H 6,82 0/0, N 8,52 0/0. Das Produkt kann in ein Säure-Additions-Salz übergeführt werden (z. B. mit anorganischen Säuren, wie Salzsäure, Schwefelsäure, oder mit organischen Säuren, wie Ameisen-, Essig-, Oxal-, Zitronen- und Ascorbinsäure). Die Bildung der Additionssalze kann durch Lösen des Produktes in Wasser und Zugabe der äquivalenten Menge Säure erfolgen. Beispiel 3 2,4m1 38 %iger wäßriger Formaldehyd werden zu einer Lösung von 6 g Tetracyclin in 200 ml Methanol bei einer Temperatur von 30°C gegeben.Analysis for C "H" N4010: Calculated ... C 57.79 0/0, H 6.35 0/0, N 9.25 0/0; Found ... C 57.59 0/0, H 6.82 0/0, N 8.52 0/0. The product can be converted into an acid addition salt (e.g. with inorganic acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid, or with organic acids such as formic, acetic, oxalic, citric and ascorbic acid). The addition salts can be formed by dissolving the product in water and adding the equivalent amount of acid. Example 3 2.4 ml of 38% strength aqueous formaldehyde are added to a solution of 6 g of tetracycline in 200 ml of methanol at a temperature of 30.degree.

2 g L-Lysin werden in einer Mischung von 3,4 ml Wasser und 12 ml Methanol gelöst und zu der ersten Lösung zugegeben. Das Verfahren wird analog Beispiel 2 durchgeführt. Das Produkt ist ein gelbes Pulver, das löslich in Wasser ist und sich langsam oberhalb 190°C zu zersetzen beginnt. Ausbeute 6 g = 740/0 der Theorie. [,%]-D5- -195° (0,5% Wasser). Beispiel 4 Zu einer Lösung von 5 g Tetracyclinbase in 200 ml Methanol werden langsam unter Rühren bei Zimmertemperatur 1,78 g L-Hydroxymethyllysin, gelöst in 1,5 ml Wasser und 2 ml Methanol, gegeben.2 g of L-lysine are in a mixture of 3.4 ml of water and 12 ml of methanol dissolved and added to the first solution. The procedure is analogous to Example 2 carried out. The product is a yellow powder that is soluble in water and is itself slowly begins to decompose above 190 ° C. Yield 6 g = 740/0 of theory. [,%] - D5- -195 ° (0.5% water). Example 4 To a solution of 5 g of tetracycline base in 200 ml Methanol are slowly added while stirring at room temperature 1.78 g of L-hydroxymethyl lysine, dissolved in 1.5 ml of water and 2 ml of methanol.

Der Niederschlag wird nach 90 Minuten abfiltriert, mit Äther gewaschen und im Vakuum bei 50°C getrocknet.The precipitate is filtered off after 90 minutes and washed with ether and dried in vacuo at 50 ° C.

Das so erhaltene Produkt ist ein gelbes Pulver, das sich langsam oberhalb 200°C zersetzt. Ausbeute 5 g = 73,7% der Theorie.The product thus obtained is a yellow powder that slowly rises above it Decomposed at 200 ° C. Yield 5 g = 73.7% of theory.

Analyse für C20H38N4010 Berechnet ... C 57,79 0/0, H 6,35 0/0, N 9,25 0/0; gefunden ... C 57,12 0/0, H 6,33 0/0, N 9,44 0/0. Feuchtigkeit: 6,7 0/a. Das L-Hydroxymethyllysin kann wie folgt erhalten werden: 1 Mol L-Lysin wird in einer kleinen Menge von wäßrigem Methanol gelöst. Zu der so erhaltenen Löbang wird eine Lösung von 1 Mol Formaldehyd in Methanol zugegeben. Das Reaktionsprodukt wird ausgefällt, abfiltriert und mit einer kleinen Menge Methanol gewaschen. Beispiel 5 1 ml 38 %iger wäßriger Formaldehyd wird zu einer Lösung von 5 g Tetracyclin in 160 ml Methanol gegeben. Unter Rühren bei 30°C werden 1,75 g L-Lysinbase in 3 ml Wasser und 10 ml Methanol zugegeben. Nach wenigen Minuten beginnt die Ausfällung. Das Rühren wird 2 Stunden fortgesetzt. Der Niederschlag wird abfiltriertundmiteiner kleinen Menge Methanol-Äther gewaschen. Nach dem Trocknen im Vakuum bei 60°C wird ein gelbes, in Wasser leicht lösliches Pulver erhalten; es schmilzt oberhalb 200°C unter langsamer Zersetzung. Die Ausbeute beträgt 82 0/0; [x]2D5- -200° (0,50/0 Wasser).Analysis for C20H38N4010 Calculated ... C 57.79 0/0, H 6.35 0/0, N 9.25 0/0; Found ... C 57.12 0/0, H 6.33 0/0, N 9.44 0/0. Humidity: 6.7 0 / a. The L-hydroxymethyl lysine can be obtained as follows: 1 mole of L-lysine is dissolved in a small amount of aqueous methanol. A solution of 1 mol of formaldehyde in methanol is added to the Löbang obtained in this way. The reaction product is precipitated, filtered off and washed with a small amount of methanol. Example 5 1 ml of 38% strength aqueous formaldehyde is added to a solution of 5 g of tetracycline in 160 ml of methanol. 1.75 g of L-lysine base in 3 ml of water and 10 ml of methanol are added with stirring at 30 ° C. Precipitation begins after a few minutes. Stirring is continued for 2 hours. The precipitate is filtered off and washed with a small amount of methanol-ether. After drying in vacuo at 60 ° C., a yellow powder which is readily soluble in water is obtained; it melts above 200 ° C with slow decomposition. The yield is 82%; [x] 2D5-200 ° (0.50 / 0 water).

Analyse für Ca0H"N4010: Berechnet ... C 57,79 0/0, H 6,35 0/0, N 9,25 0/0; gefunden ... C 57,300/0, H 5,950/0, N 9,020/0. Feuchtigkeit: 10,49 0/0.Analysis for CaOH "N4010: Calculated ... C 57.79 0/0, H 6.35 0/0, N 9.25 0/0; found ... C 57.300/0, H 5.950/0, N 9.020 / 0. Humidity: 10.49 0/0.

Beispiel 6 1,1 ml 35%iger alkoholischer Formaldehyd werden zu einer Lösung von 5 g Tetracyclin in 200 ml Methanol gegeben. 1,65 g z.-Lysin werden unter Rühren bei 35'C in einem Gemisch von 5 ml Wasser und 7 ml Methanol gelöst und zu der ersten Lösung gegeben. Die Suspension wird 90 Minuten gerührt und dann filtriert. Der Niederschlag wird mit einer geringen Menge Äther gewaschen. Die Ausbeute beträgt 5,2 g eines gelben Pulvers, das sich oberhalb 200°C zu zersetzen beginnt.Example 6 1.1 ml of 35% alcoholic formaldehyde becomes a Added solution of 5 g of tetracycline in 200 ml of methanol. 1.65 g of z.-lysine are taken under Stirring at 35'C dissolved in a mixture of 5 ml of water and 7 ml of methanol and added given the first solution. The suspension is stirred for 90 minutes and then filtered. The precipitate is washed with a small amount of ether. The yield is 5.2 g of a yellow powder which begins to decompose above 200 ° C.

Entsprechende Produkte wurden aus Oxytetracyclin, Desmethylchlortetracyclin und Desmethyltetracychn hergestellt, wenn an Stelle des im Beispiel 6 verwendeten Tetracyclins die vorstehend genannten Antibiotica verwendet wurden.Corresponding products were made from Oxytetracycline, Desmethylchlortetracycline and desmethyltetracychn when used in place of that in Example 6 Tetracycline the antibiotics mentioned above were used.

Die chemisch-physikalischen Eigenschaften der erhaltenen Produkte sind wie folgt: Derivat des Oxytetracyclins Zersetzt sich langsam bei 240°.C [a]ö' = -100° ± 4 (0,50/0 in Wasser) Derivat des Desmethylchlortetracyclins Zersetzt sich langsam bei 190°C 14]o5 =-242° ± 4 (0,50/0 in Wasser) Derivat des Desmethyltetracyclins Zersetzt sich langsam bei 180'C [4]o5 = -238° :L 4 (0,5% in Wasser) Beispiel 7 10,5 g Tetracyclinbase werden in 160 ml tertiärem Butanol suspendiert; zu dem so erhaltenen Gemisch werden 4,1 ml 38 %iger wäßriger Formaldehyd und einige wenige Kristalle von Natriumcarbonat unter Rühren zugegeben.The chemical-physical properties of the products obtained are as follows: Derivative of oxytetracycline decomposes slowly at 240 ° .C [a] ö '= -100 ° ± 4 (0.50 / 0 in water) derivative of desmethylchlorotetracycline decomposes slowly at 190 ° C 14] o5 = -242 ° ± 4 (0.50 / 0 in water) Derivate of desmethyltetracycline Decomposes slowly at 180'C [4] o5 = -238 °: L 4 (0.5% in water) Example 7 10.5 g of tetracycline base are suspended in 160 ml of tertiary butanol; 4.1 ml of 38% strength aqueous formaldehyde and a few crystals of sodium carbonate are added to the mixture thus obtained with stirring.

Das Gemisch wird 15 Minuten bei Zimmertemperatur gerührt, dann zum Sieden erhitzt.und 30 Minuten unter Rückfluß erhitzt. Die Lösung wird, während sie noch heiß ist, filtriert, um Spuren von unlöslichem Material zu entfernen. Das Filtrat wird auf Raumtemperatur gekühlt, der so erhaltene Niederschlag abfiltriert und im Vakuum bei 50°C getrocknet.The mixture is stirred for 15 minutes at room temperature, then for Boiling heated.and heated under reflux for 30 minutes. The solution will be while they is still hot, filtered to remove traces of insoluble material. The filtrate is cooled to room temperature, the resulting precipitate is filtered off and im Vacuum dried at 50 ° C.

Das Produkt ist ein hellgelbes Pulver, das in Wasser leicht löslich ist und sich oberhalb 190'C zu zersetzen beginnt.The product is a light yellow powder that is easily soluble in water and begins to decompose above 190 ° C.

Zu einer Lösung von 2 g dieser Substanz in 60 ml Methanol wird eine Lösung von 0,618 g L-Lysin in 1 ml Wasser und 4 ml Methanol gegeben. Es beginnt bald eine Ausfällung; das Rühren wird 1 Stunde fortgesetzt. Der Niederschlag wird abfil triert und im Vakuum bei 50°C getrocknet. Das Produkt ist ein gelbes, in Wasser leicht lösliches Pulver, das dieselben charakteristischen Merkmale besitzt wie das im Beispiel 5 beschriebene Produkt. Ausbeute 1,6 g = 590/0 der Theorie. 14]ä5 - -200° (0,5% Wasser). Analyse für C"H"N401o: Berechnet ... C 57,79 0/0, H 6,35 0/0, N 9,25 %; gefunden ... C 57,42 0/0, H 6,67 0/0, N 9,47 0/0. Feuchtigkeit: 5,47 0/0. Beispiel 8 Zu einer Lösung von 3 g Chlortetracyclin in 150 ml Methanol werden bei Zimmertemperatur 0,55 ml 38 %iger wäßriger Formaldehyd und eine Lösung von 1,15 g L-Lysinhydrochlorid in 3 ml Wasser gegeben. Das Gemisch wird 4 Stunden bei Zimmertemperatur gerührt. Der Niederschlag wird abfiltriert und mit Methanol-Äther gewaschen. Das so erhaltene Produkt bildet nach dem Trocknen im Vakuum bei 60°C ein gelbes Pulver, das sich oberhalb 190°C zu zersetzen beginnt. Ausbeute 3,23 g = 800/0 der Theorie.A solution of 0.618 g of L-lysine in 1 ml of water and 4 ml of methanol is added to a solution of 2 g of this substance in 60 ml of methanol. Precipitation soon begins; stirring is continued for 1 hour. The precipitate is filtered off and dried at 50 ° C. in vacuo. The product is a yellow powder which is readily soluble in water and has the same characteristic features as the product described in Example 5. Yield 1.6 g = 590/0 of theory. 14] - 5 - -200 ° (0.5% water). Analysis for C "H" N4010: Calculated ... C 57.79%, H 6.35%, N 9.25%; Found ... C 57.42 0/0, H 6.67 0/0, N 9.47 0/0. Moisture: 5.47 0/0. Example 8 To a solution of 3 g of chlorotetracycline in 150 ml of methanol, 0.55 ml of 38% aqueous formaldehyde and a solution of 1.15 g of L-lysine hydrochloride in 3 ml of water are added at room temperature. The mixture is stirred for 4 hours at room temperature. The precipitate is filtered off and washed with methanol-ether. The product obtained in this way forms a yellow powder after drying in vacuo at 60.degree. C., which begins to decompose above 190.degree. Yield 3.23 g = 800/0 of theory.

Analyse für CasH31C1N401o - HCI: Berechnet ... C 51,70%, H 5,680/0, N 8,310/0; gefunden . .. C 52,04 0/0, H 6,07 0/0, N 7,58 0/0. Feuchtigkeit: 0,99 0/0.Analysis for CasH31C1N401o - HCI: Calculated ... C 51.70%, H 5.680 / 0, N, 8.310 / 0; found . .. C 52.04 0/0, H 6.07 0/0, N 7.58 0/0. Moisture: 0.99 0/0.

Claims

PATENT CLAIMS: 1. Process for the preparation of new derivatives of tetracycline antibiotics by reacting 1 mole of a tetracycline antibiotic with 1 to 2 moles of formaldehyde and 1 mole of a third reactive component containing an amino group at temperatures of 30 to 40 ° C in the presence a solvent such as methanol, characterized in that lysine is used as the third reactive component containing an amino group.

2. The method according to claim 1, characterized characterized in that as tetracycline antibiotic tetracycline and lysine as L-lysine be used.

3. The method according to claim 1, characterized in that the reaction is carried out in two stages, in that either the tetracycline antibiotic or lysine are first reacted with formaldehyde alone and only the reaction product formed is reacted with the remaining reaction component. Documents considered: German Auslegeschrift No. 1 044 806.