DE1088911B - Process for the isolation of gibberellic acid from aqueous fermentation media - Google Patents
Process for the isolation of gibberellic acid from aqueous fermentation mediaInfo
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Description
Verfahren zur Isolierung von Gibberellinsäure aus wäßrigen Fermentationsmedien Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Isolationsverfahren und insbesondere auf ein verbessertes Verfahren zur Isolierung von Gibberellinsäure aus wäßrigen Fermentationsmedien.Process for the isolation of gibberellic acid from aqueous fermentation media The present invention relates to an isolation method, and more particularly to an improved method for the isolation of gibberellic acid from aqueous Fermentation media.
Es ist bekannt, bei mikrobiologischen Verfahren einen gewünschten Stoff aus dem Nährmedium durch Extraktion mit einem organischen Lösungsmittel zu gewinnen, wie es beispielsweise in der deutschen Patentschrift 619977 für die Herstellung von Zitronensäure durch Gärung und ihre Gewinnung aus den Gärlaugen mit Hilfe eines geeigneten Extraktionsmittels, z. B. ein Gemisch von Alkohol und Äther, sowie in der deutschen Patentschrift 81.4 890 für die Herstellung von Butandiol-(2,3) oder weiterhin für die Penicillingewinnung beschrieben ist. Ein solches Extraktionsverfahren läßt sich jedoch keineswegs auf ein beliebiges anderes Gärverfahren übertragen, da die Eigenschaften des Nährmediums bzw. der Gärlaugen und des anderen gewünschten Produkts ganz andere und nicht verwechselbar sind.It is known to obtain a desired substance from the nutrient medium by extraction with an organic solvent in microbiological processes, as described, for example, in German patent specification 619977 for the production of citric acid by fermentation and its extraction from the fermentation liquors with the help of a suitable extractant, e.g. . B. a mixture of alcohol and ether, as well as in the German patent 81.4 890 for the production of butanediol (2,3) or further for the penicillin production is described. However, such an extraction process can in no way be transferred to any other fermentation process, since the properties of the nutrient medium or the fermentation liquors and the other desired product are completely different and cannot be confused.
Für die Gewinnung von Gibberellinsäure aus einer wäßrigen Lösung derselben, beispielsweise aus einem Fermentationsmedium, ist es bekannt, diese durch Adsorption an Holzkohle zu isolieren und anschließend die Gibberellinsäure daraus zu eluieren und aus dem Eluat zu gewinnen. Dieses Verfahren bedingt jedoch mehrere Stufen und die Gewinnung größerer Mengen an teurem Material, wie Holzkohle, und von Spezialapparaturen.For obtaining gibberellic acid from an aqueous solution of the same, for example from a fermentation medium, it is known to do this by adsorption to isolate on charcoal and then to elute the gibberellic acid from it and to be obtained from the eluate. However, this process requires several stages and the extraction of large quantities of expensive material, such as charcoal, and of special equipment.
Es wurde nun gefunden, daß Gibberellinsäure aus einer wäßrigen Fermentationslösung derselben isoliert werden kann, indem diese wäßrige Fermentationslösung mit einem geeigneten organischen Lösungsmittel extrahiert wird, wie beispielsweise mit Athylacetat, worauf dann die Gibberellinsäure aus diesem Lösungsmittel gewonnen wird.It has now been found that gibberellic acid from an aqueous fermentation solution the same can be isolated by this aqueous fermentation solution with a suitable organic solvent is extracted, such as with ethyl acetate, whereupon the gibberellic acid is obtained from this solvent.
Erfindungsgemäß wird ein verbessertes Verfahren zur Isolierung von Gibberellinsäure aus einem wäßrigen Fermentationsmedium vorgeschlagen, welches dadurch gekennzeichnet ist, daß das wäßrige Fermentationsmedium mit einem mit Wasser nicht oder nur teilweise mischbaren organischen Lösungsmittel aus der Gruppe der Ester, Alkohole und Ketone mit nicht mehr als 8 Kohlenstoffatomen extrahiert und die Gibberellinsäure danach aus dem Lösungsmittel mit bekannten Mitteln gewonnen wird.According to the invention an improved method for the isolation of Gibberellic acid proposed from an aqueous fermentation medium, which thereby is characterized in that the aqueous fermentation medium with one with water does not or only partially miscible organic solvents from the group of esters, Alcohols and ketones with no more than 8 carbon atoms are extracted and the gibberellic acid is then obtained from the solvent by known means.
Das wäßrige Fermentationsmedium, welches die Gibberellinsäure enthält und das als Ausgangsmaterial verwendet wird, kann in bekannter Weise erhalten werden, beispielsweise kann dies aus einem wäßrigen Filtrat bestehen, das aus einem Gibberellinsäure enthaltenden Fermentationsmedium besteht und das durch den Wuchs eines Gibberellinsäure erzeugenden Pilzes auf einem geeigneten wäßrigen Nährmittelmedium erhalten wird. Für diesen Zweck ist der Pilz Gibberella fujikuroi geeignet, jedoch können auch andere Gibberellinsäure erzeugenden Pilze oder entsprechende Mutationen derselben verwendet werden.The aqueous fermentation medium containing the gibberellic acid and which is used as the starting material can be obtained in a known manner, for example, this can consist of an aqueous filtrate consisting of a gibberellic acid containing fermentation medium and that by the growth of a gibberellic acid producing fungus is obtained on a suitable aqueous nutrient medium. The Gibberella fujikuroi mushroom is suitable for this purpose, but you can also other gibberellic acid-producing fungi or corresponding mutations thereof be used.
Als geeignete organische Lösungsmittel, welche aus der Ester, Ketone, Alkohole und Äther enthaltenden Gruppe ausgewählt werden und die bei dem Extraktionsverfahren gemäß der Erfindung angewandt werden können, seien beispielsweise genannt: Äthylacetat, n-Butylacetat, Isoamylacetat, Diäthylcarbonat, Äthylpropionat, Äthyln-butyrat, n-Butyllactat, Isopropylacetat, ß-Äthoxyäthylacetat, Methoxybutylacetat, Methyl-n-propylketon, Cyclohexänon, Diäthylketon, Methylisobutylketon, Methylcyclohexanon, Methyläthylketon, Benzylalkohol, sec.-Butanol, Cyclohexanol und n-Butanol. Es ist darauf hinzuweisen, daß dieses Lösungsmittel auch aus einer Mischung von Lösungsmitteln bestehen kann, wie beispielsweise einer Mischung aus n-Butanol und n-Butylacetat oder einer Mischung aus Isoamylacetatundn-Amylacetat, wie sie im technischen Amylacetat vorliegt.As suitable organic solvents, which consist of esters, ketones, Alcohols and ethers containing group are selected and used in the extraction process can be used according to the invention, include, for example: ethyl acetate, n-butyl acetate, isoamyl acetate, diethyl carbonate, ethyl propionate, ethyl n-butyrate, n-butyl lactate, Isopropyl acetate, ß-ethoxyethyl acetate, methoxybutyl acetate, methyl-n-propyl ketone, Cyclohexanone, diethyl ketone, methyl isobutyl ketone, methylcyclohexanone, methyl ethyl ketone, Benzyl alcohol, sec-butanol, cyclohexanol and n-butanol. It should be pointed out that this solvent can also consist of a mixture of solvents, such as a mixture of n-butanol and n-butyl acetate or a mixture from isoamyl acetate and n-amyl acetate, as found in technical amyl acetate.
Bevorzugte Lösungsmittel sind Athylacetat, Isoamylacetat, Methyl-n-propylketon und Methylisobutylketon. Das filtrierte wäßrige Fermentationsmedium, welches Gibberellinsäure enthält und das als Ausgangsmaterial verwendet wird, wird vorzugsweise vor dem Extrahieren mit dem entsprechenden organischen Lösungsmittel auf einen pH-Wert zwischen 1,5 und 4,0 eingestellt. Die Gibberellinsäure kann aus dem so erhaltenen organischen Lösungsmittelextrakt in bekannter Weise isoliert werden, indem beispielsweise dieser Extrakt konzentriert werden kann und das so erhaltene Rohprodukt dann in bekannter Weise gereinigtwird, um reine Gibberellinsäure zu ergeben.Preferred solvents are ethyl acetate, isoamyl acetate, methyl-n-propyl ketone and methyl isobutyl ketone. The filtered aqueous fermentation medium containing gibberellic acid and which is used as the starting material is preferably used before extraction with the appropriate organic solvent a pH set between 1.5 and 4.0. The gibberellic acid can be obtained from the organic solvent extract can be isolated in a known manner by, for example this extract can be concentrated and the crude product thus obtained then in is purified in a known manner to give pure gibberellic acid.
Ein geeignetes Verfahren zum Reinigen der Gibberellinsäure besteht darin, daß die Gibberellinsäure aus dem organischen Lösungsmittel-- mittels einer Pufferlösung eines pH-Wertes von 6 _bis 8-.extrahiert wird. Der Pufferextrakt wird dann auf einen pH-Wert von 3 bis 4 angesäuert, und die hierbei frei werdende Gibberellinsäure wird dann mit Äthylacetat-extrahiert. Das Äthylacetat wird dann mit Natriumsulfat getrocknet und auf eine kleine Menge verringert, wodurch fast reine Gibberellinsäure auskristallisiert. Um eine vergrößerte Ausbeute an dem erwünschten Material zu erhalten, kann Leichtbenzin zugesetzt werden, -Die Erfindung ist in den folgenden Beispielen erläutert, ohne darauf beschränkt zu sein. Beispiel 1 31 eines Kulturfiltrats, das etwa 117 mg Gibberellinsäure enthält, werden auf einen pH-Wert von 3 eingestellt und -dreimal mit Athylacetat.extrahiert, wobei jedesmal 1,51. verwendet werden. Die ersten und zweiten Extrakte werden vereinigt und auf eine Menge von 100 ccm eingedampft und dann zweimal mit einem Phosphatpuffer extrahiert, wobei jedesmal--25 ccm angewandt werden. Der Phosphatpuffer besteht aus 136 g primärem Kaliumphosphat und 24 g Kaliumhydroxyd, die mit destilliertem Wasser auf 11 aufgefüllt---werden; der pn-Wert dieser Lösung beträgt 6,3. Die Pufferextrakte werden vereinigt, auf einen pn-Wert von 3,5 bis 3,8 eingestellt und zweimal mit je 70 ccm Äthylacetat extrahiert. Die vereinigten Äthylacetatextrakte werden dann auf ein kleines Volumen eingedampft und Leichtbenzin zugesetzt, wobei Gibberellinsäure auskristallisiert. Auf diese Weise werden 72 mg Gibberellinsäure erhalten, die bei 233 bis 235°C unter Zersetzung schmilzt. Beispiel 2 1 1 eines Kulturfiltrats; das schätzungsweise 39 mg Gibberellinsäure enthält, wird auf einen pH-Wert von 3 eingestellt und zweimal mit je 1 1 Butylacetat extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden eingedampft, und das .Rohprodukt wird in der im Beispiel 1 beschriebenen Weise gereinigt. Auf diese Weise werden 8 mg Gibberellin--säure erhalten, die bei 233 bis 235°C unter Zersetzung schmilzt. Beispiel 3 21 eines Kulturfiltrats, das schätzungsweise 378 mg Gibberellinsäure enthält, werden auf einen pH-Wert von -3 eingestellt und zweimal mit j e 21 Äthylacetat extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden eingedampft, und das erhaltene Rohprodukt wird in der im Beispiell beschriebenen Weise gereinigt. Auf diese Weise werden "268 mg Gibberellinsäure erhalten, die bei 233 bis 235°C unter Zersetzung schmilzt.One suitable method for purifying the gibberellic acid is in that the gibberellic acid from the organic solvent - by means of a Buffer solution of pH 6 to 8 is extracted. The buffer extract is then acidified to a pH value of 3 to 4, and the gibberellic acid released in the process is then extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate is then treated with sodium sulfate dried and reduced to a small amount, producing almost pure gibberellic acid crystallized out. To obtain an increased yield of the desired material, mineral spirits can be added, -The invention is illustrated in the following examples explained without being limited to it. Example 1 31 of a culture filtrate containing contains about 117 mg gibberellic acid are adjusted to a pH of 3 and extracted three times with ethyl acetate, each time 1.51. be used. The first and second extracts are combined and made up to an amount of 100 cc evaporated and then extracted twice with a phosphate buffer, each time - 25 ccm can be applied. The phosphate buffer consists of 136 g of primary potassium phosphate and 24 g of potassium hydroxide, which are made up to 11 with distilled water ---; the pn value of this solution is 6.3. The buffer extracts are pooled on set a pn value of 3.5 to 3.8 and twice with 70 cc of ethyl acetate each time extracted. The combined ethyl acetate extracts are then reduced to a small volume evaporated and added mineral spirits, whereby gibberellic acid crystallizes out. In this way 72 mg of gibberellic acid are obtained, which at 233 to 235 ° C below Decomposition melts. Example 2 1 1 of a culture filtrate; the estimated 39 mg gibberellic acid is adjusted to pH 3 and twice extracted with 1 l of butyl acetate each time. The combined extracts are evaporated, and the raw product is purified in the manner described in Example 1. on in this way 8 mg of gibberellic acid are obtained, which at 233 to 235 ° C below Decomposition melts. Example 3 21 of a culture filtrate estimated to be 378 mg gibberellic acid are adjusted to a pH of -3 and twice extracted with 21 ethyl acetate. The combined extracts are evaporated, and the crude product obtained is purified in the manner described in the example. In this way, "268 mg of gibberellic acid are obtained, which at 233 to 235 ° C melts with decomposition.
Beispiel 4 - 21 eines Kulturfiltrats, das schätzungsweise zwischen 690 und 886 mg Gibberellinsäure enthält, werden auf einen pH-Wert von 3 eingestellt und dreimal mit Äthylacetat extrahiert, wobei entsprechend 1, 2 und nochmals 1 1 Äthylacetat verwendet werden. Der erste und zweite Extrakt werden vereinigt und auf 100 ccm eingedampft und dann zweimal mit j e 25 ccm einer Phosphatpufferlösung extrahiert. Die Phosphatpufferlösung besteht aus 136 g primärem Kaliumphosphat und 24 g Kaliumhydroxyd, die mit destilliertem Wasser auf 1 1 aufgefüllt und auf einen pg-Wert von 6,3 eingestellt wird. Die Pufferextrakte werden vereinigt, auf einen pn-Wert von 3,5 bis 3,8 eingestellt und zweimal mit Äthylacetat extrahiert, wobei jedesmal 70 ccm verwendet werden.Example 4-21 of a culture filtrate estimated to be between 690 and 886 mg of gibberellic acid are adjusted to a pH of 3 and extracted three times with ethyl acetate, whereby 1, 2 and again 1 1 Ethyl acetate can be used. The first and second extracts are combined and evaporated to 100 ccm and then twice with 25 cc each of a phosphate buffer solution extracted. The phosphate buffer solution consists of 136 g of primary potassium phosphate and 24 g of potassium hydroxide, which are made up to 1 1 with distilled water and to one pg value of 6.3 is set. The buffer extracts are combined, on one pn value set from 3.5 to 3.8 and extracted twice with ethyl acetate, wherein 70 cc can be used each time.
Die vereinigten Äthylacetatextrakte werden dann auf ein kleines Volumen eingedampft, und Leichtbenzin wird zugesetzt, wodurch Gibberellinsäure auskristallisiert. Auf diese Weise werden 708 mg Gibberellinsäure erhalten, die bei 233 bis 235°C unter Zersetzung schmilzt.The combined ethyl acetate extracts are then reduced to a small volume evaporated, and mineral spirits is added, whereby gibberellic acid crystallizes out. In this way 708 mg of gibberellic acid are obtained, which at 233 to 235 ° C below Decomposition melts.
Wenn der dritte Extrakt des Kulturfiltrats in entsprechender Weise gereinigt wird, so werden noch weitere 38 mg Gibberellinsäure erhalten. Beispiel 5 7,21 eines Kulturfiltrats, das schätzungsweise 450 mg Gibberellinsäure im Liter enthält, werden durch Zusatz von Phosphorsäure auf einen pH-Wert von 2,5 eingestellt und dann dreimal mit je 3,61 Äthylacetat extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden auf eine Menge von -11 eingedampft und dann dreimal mit wäßriger Natriumbicarbonatlösung extrahiert, so daß der pn-Wert der wäßrigen Phase 7 beträgt. Hierbei werden jeweils 500, 150 und 150 ccm Natriumbicarbonatlösung verwendet. Der wäßrige Extrakt wird auf einen pH-Wert von 3,5 eingestellt und dann dreimal mit Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft. Die auskristallisierende Gibberellinsäure wird abfiltriert, mit Äthylacetat gewaschen und im Vakuum getrocknet. Auf diese Weise werden 2,55 g Gibberellinsäure erhalten, die bei 233 bis 234°C unter Zersetzung schmilzt.If the third extract of the culture filtrate is purified in a corresponding manner, a further 38 mg of gibberellic acid are obtained. EXAMPLE 5 7.21 of a culture filtrate containing an estimated 450 mg of gibberellic acid per liter are adjusted to a pH of 2.5 by adding phosphoric acid and then extracted three times with 3.61 of ethyl acetate each time. The combined extracts are evaporated to an amount of -11 and then extracted three times with aqueous sodium bicarbonate solution so that the pn value of the aqueous phase is 7. 500, 150 and 150 ccm of sodium bicarbonate solution are used in each case. The aqueous extract is adjusted to pH 3.5 and then extracted three times with ethyl acetate. The extracts are combined and evaporated in vacuo. The gibberellic acid which crystallizes out is filtered off, washed with ethyl acetate and dried in vacuo. In this way, 2.55 g of gibberellic acid are obtained, which melts at 233 to 234 ° C. with decomposition.
Das beschriebene Verfahren wird mit der Abwandlung wiederholt, daß hierbei das Äthylacetat durch Amylacetat als Lösungsmittel ersetzt wird. Hierbei werden in ähnlicher Weise 2,33 g Gibberellinsäure erhalten, welche bei 233 bis 234°C unter Zersetzung schmilzt. Beispiel 6 11251 eines Kulturfiltrats, welches schätzungsweise 400 mg Gibberellinsäure im Liter enthält, werden unter Verwendung eines Podbielniak-Extraktors mit Äthylacetat bei einem pH-Wert von 2,8 extrahiert. Der aus 541 bestehende Extrakt wird im Vakuum auf ein Volumen von 351 eingedampft. Das so erhaltene Konzentrat wird dann mit einer wäßrigen Pufferlösung dreimal extrahiert und nach dem Mischen der Extrakte auf einen pH-Wert von 9,5 eingestellt. Zur Extraktion werden 10, 5 und 21 Pufferlösung verwendet. Der erste, aus 101 bestehende Extrakt wird dreimal mit Äthylacetat, und zwar unter Verwendung von 5, 2,5 und 1,251 extrahiert und nach dem Vermischen mit dem Lösungsmittel auf einen pH-Wert von 3 eingestellt. Die zweiten und dritten Pufferlösungsextrakte, die insgesamt 51 ausmachen, werden vereinigt und zweimal mit 2;5 und 1,51 Äthylacetat extrahiert. Sämtliche Äthylacetatextrakte werden vereinigt und durch ein Diatomeenerdefilter filtriert und teilweise über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Die vereinigten Extrakte werden unter Vakuum in zwei Portionen konzentriert. Wenn das Volumen der Lösung bis auf 750 ccm verringert ist, erfolgt eine Kristallisation der Gibberellinsäure, und. die Konzentrierung wird unterbrochen. Die Mischung wird abgekühlt und filtriert und der feste Rückstand mit Äthylacetat gewaschen und an der Luft getrocknet. Durch Konzentration der Mutterlaugen werden weitere Mengen des Feststoffes erhalten. Die Gesamtmenge an in dieser Weise erhaltener Gibberellinsäure beträgt 313,2 g, und dieses Produkt schmilzt bei 234 bis 235°C unter Zersetzung. Beispiel 7 Im folgenden wird die Wirksamkeit der Extraktion der Gibberellinsäure aus einem wäßrigen Fermentationsmedium unter Anwendung verschiedener Lösungsmittel beschrieben.The procedure described is repeated with the modification that here the ethyl acetate is replaced by amyl acetate as a solvent. Here 2.33 g of gibberellic acid are obtained in a similar manner, which at 233 to 234 ° C melts with decomposition. Example 6 11251 of a culture filtrate which is estimated to be 400 mg of gibberellic acid per liter are made using a Podbielniak extractor extracted with ethyl acetate at pH 2.8. The extract consisting of 541 is evaporated to a volume of 351 in vacuo. The concentrate thus obtained is then extracted three times with an aqueous buffer solution and after mixing the extracts adjusted to a pH of 9.5. 10, 5 and 21 buffer solution used. The first extract, consisting of 101, is used three times extracted with ethyl acetate using 5, 2.5 and 1.251 and after adjusted to a pH of 3 after mixing with the solvent. The second and third buffer solution extracts totaling 51 are combined and extracted twice with 2.5 and 1.51 ethyl acetate. All ethyl acetate extracts are combined and filtered through a diatomaceous earth filter and partially over dried anhydrous sodium sulfate. The combined extracts are under vacuum concentrated in two servings. When the volume of the solution is reduced to 750 cc the gibberellic acid crystallizes, and. the concentration will be interrupted. The mixture is cooled and filtered, and the solid residue washed with ethyl acetate and air dried. By concentrating the mother liquors further amounts of the solid are obtained. The total of doing this gibberellic acid obtained is 313.2 g and this product melts at 234 up to 235 ° C with decomposition. Example 7 The following is the effectiveness the extraction of gibberellic acid from an aqueous fermentation medium Use of different solvents described.
Eine wäßrige Gibberellinsäurelösung, welche durch Auslösen von 0,5 g feinpulverisierter Gibberellinsäure in 250 ccm destilliertem Wasser hergestellt worden ist, wird filtriert, um nicht gelöstes Material zu entfernen. 25 ccm dieser Lösung werden dann mit wäßriger N/100-Natriumhydroxydlösung titriert unter Verwendung von Phenolphthalein als Indikator. Die hierbei verwendete Natriumhydroxydlösung wird notiert (X).An aqueous gibberellic acid solution, which by dissolving 0.5 g of finely powdered gibberellic acid in 250 cc of distilled water is filtered to remove undissolved material. 25 cc of this Solutions are then titrated using N / 100 aqueous sodium hydroxide solution of phenolphthalein as an indicator. The sodium hydroxide solution used here is noted (X).
25 ccm der Gibberellinsäurelösung werden dann 1 Minute lang mit 25 ccm des zu prüfenden Lösungsmittels in einem mit einem Stopfen versehenen Scheidetrichter geschüttelt. Die sich absetzende wäßrige Phase wird ablaufen gelassen, mit wäßriger N/100-Natriumhydroxydlösung unter Verwendung von Phenolphthalein als Indikator titriert und der festgestellte Titer notiert (Y). Dann wird eine Grundbestimmung unter Verwendung von 25 ccm destilliertem Wasser und 25 ccm Lösungsmittel durchgeführt. Die wäßrige Phase wird wiederum ablaufen gelassen und mit wäßriger N/100-Natriumhydroxydlösung titriert und der kleine Grundtiter (B) notiert.25 cc of the gibberellic acid solution are then mixed with 25 for 1 minute ccm of the solvent to be tested in a separating funnel fitted with a stopper shaken. The settling aqueous phase is allowed to run off with aqueous Titrated N / 100 sodium hydroxide solution using phenolphthalein as an indicator and the determined titer is noted (Y). Then a basic provision is made using performed with 25 cc of distilled water and 25 cc of solvent. The watery one Phase is again allowed to drain and with aqueous N / 100 sodium hydroxide solution titrated and the small basic titer (B) noted.
Die prozentuale Wirksamkeit der Extraktion wird nach folgender Formel
errechnet
Die prozentuale Wirksamkeit der Extraktion ergibt sich für eine Reihe von Lösungsmitteln
aus folgender Tabelle:
Claims (3)
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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GB1203766X | 1957-04-05 | ||
GB2950288X | 1957-04-05 | ||
GB1088911X | 1957-04-05 |
Publications (1)
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DE1088911B true DE1088911B (en) | 1960-09-15 |
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Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE619977C (en) * | 1930-10-04 | 1935-10-10 | Wilhelm Klapproth Dr Ing | Process for the production of citric acid by fermentation |
DE814890C (en) * | 1945-08-20 | 1951-09-27 | Melle Usines Sa | Process for the production of butanediol (2, 3) and butanolone (2, 3) by fermentation |
-
1958
- 1958-04-03 DE DEI14667A patent/DE1088911B/en active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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