DE102005054918A1 - Pharmaceutically active substance, useful for treating tumor diseases, comprises a non-purified poison aggregate obtained from animals of the species Sicarius, preferably of the species oweni - Google Patents
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Abstract
Description
Die Nutzung biogener Gifte begann in der Geschichte der Menschheit schon in der Urzeit als sie zur Erlegung von Beutetieren mit vergifteten Waffen diente.The Use of biogenic poisons already began in the history of mankind in prehistoric times when they were poisoned to kill prey Weapons served.
Zur gefahrlosen Anwendung dieser Gifte waren jedoch von Anfang an gewisse Grundkenntnisse über deren Behandlung und Wirksamkeit erforderlich.to safe use of these poisons, however, were certain from the start Basic knowledge about their treatment and effectiveness required.
Die weiter durchgeführten Versuche, die Zusammensetzung des chemischen Aufbaus biogener Gifte zu entschlüsseln, führten später zur gezielten Suche bestimmter Wirkstoffe als eigentliche Verursacher beobachteter Wirkungen.The carried on further Trials, the composition of the chemical structure of biogenic poisons to decode, led later for the targeted search of certain active substances as the actual polluters observed effects.
Insbesondere nach der von Paracelsus (1493–1541) erhobenen Forderung, die Wirkstoffe von Arzneipflanzen zu isolieren, die zur Entwicklung der latrochemie, also der Chemie hinsichtlich ihres ärztlichen Anwendungsbereichs, beitrug, dürften diese Bemühungen verstärkt haben. Vor allem die Kunst des Destillierens von Stoffen wurde in den Dienst der Forschung gestellt und lieferte eine Vielzahl ätherischer Öle und flüchtiger Stoffe. Aber für die Isolierung anderer Wirkstoffe oder gar für deren chemische Aufschlüsselung waren die damals bekannten Methoden unzureichend. Erst zu Beginn des 19. Jahrhunderts war die Entwicklung der technischen Fertigkeiten in der Chemie weit genug fortgeschritten, die Ära der Isolierung von reinen Wirkstoffen aus biologischem Material einzuleiten.Especially after that of Paracelsus (1493-1541) raised demand to isolate the active ingredients of medicinal plants, those concerning the development of latrochemistry, ie chemistry her medical Scope, contributed, likely these efforts reinforced to have. Above all the art of distilling fabrics was in provided the service of research and delivered a variety of essential oils and volatile Substances. But for the isolation of other active substances or even their chemical breakdown the then known methods were inadequate. Only at the beginning The 19th century was the development of technical skills advanced far enough in chemistry, the era of isolation of pure To introduce active substances from biological material.
Zunächst nutzte man, zur Abtrennung der gesuchten Wirkstoffe von den Begleitstoffen, die Unterschiede in der Löslichkeit der untersuchten Substanzen in verschiedenen Lösungsmitteln. Beobachtet wurden hierbei, zum Beispiel mit Fällungsmitten, die Unterschiede im Verteilungsverhalten zwischen zwei nicht mischbaren flüssigen Phasen, in der Flüchtigkeit und in der chemischen Reaktivität, Einen gewaltigen Aufschwung in der Trenntechnik, dem Weg zur Ermittlung von Wirkstoffen zur Bekämpfung von Krankheiten, machte die Entwicklung chromatographischer Verfahren in der Mitte des 20. Jahrhunderts möglich. Ausgehend von der Verteilung zwischen einer mobilen und einer stationären flüssigen Phase, von der Adsorption, den Molekülsiebeffekten, dem Ionenaustausch, der Affinität (insbesondere von Proteinen) zu bestimmten chemischen Verbindungen (z.B. Enzymsubstraten) und der Beweglichkeit geladener Moleküle im elektrischen Feld, wurde eine Vielzahl neuer Trenntechniken entwickelt Derzeit werden Tumore, als die gefährlichsten und gefürchtetsten Krankheiten unserer Zeit auf eine sehr radikale und wenig umweltschonende Weise bekämpft. Als einfache kennzeichnende Schlagworte können hier gelten: Stahl, Strahl und Chemotherapie.First used one, for the separation of the sought-after active ingredients from the accompanying substances, the differences in solubility the examined substances in different solvents. Were observed here, for example, with precipitation centers, the Differences in distribution behavior between two immiscible liquid Phases, in the volatility and in chemical reactivity, A huge boom in separation technology, the path to discovery of active substances to combat Diseases, made the development of chromatographic procedures possible in the middle of the 20th century. Starting from the distribution between a mobile and a stationary liquid phase, from adsorption, the molecular sieve effects, the Ion exchange, the affinity (especially proteins) to certain chemical compounds (e.g. Enzyme substrates) and the mobility of charged molecules in the electrical Field, a variety of new separation techniques has been developed Currently Tumors are considered the most dangerous and dreaded diseases our time in a very radical and less environmentally friendly way fought. As a simple characteristic keywords can apply here: steel, beam and chemotherapy.
Das bedeutet einmal, dass Tumore, falls einigermaßen erreichbar, im Prinzip mit dem Stahl eines Messers herausgeschnitten, durch eine breitgefächerte Bestrahlung verbrannt, oder über eine so genannte Chemotherapie mit, auch gesunde Zellen angreifenden, aggressiven Zytostatika zerstört werden.The means once that tumors, if reasonably achievable, in principle cut out with the steel of a knife, through a wide-spread irradiation burned, or over a so-called chemotherapy with, even healthy cells attacking, destroys aggressive cytotoxic drugs become.
Sowohl bei normalen Behandlungen mit dem Skalpell als auch mit ionisierender Strahlung ist eine räumliche Begrenzung des Operationsgebiets nicht möglich. Es werden zwangsläufig auch gesunde Körperzellen vernichtet. Die unerwünschten Nebenwirkungen der Chemotherapie sind allgemein bekannt.Either for normal scalpel and ionizing treatments Radiation is a spatial Limitation of the operating area not possible. It will inevitably too healthy body cells destroyed. The unwanted Side effects of chemotherapy are well known.
Im Gegensatz hierzu wurde aber auch versucht eine Krebstherapie die ihren Namen verdient auf subtilere Weise zu ermöglichen. Zu diesem Zweck wurde auf den reichen Schatz der Natur zurückgegriffen.in the Contrary to this, however, a cancer therapy was also tried to make their name deserved in a more subtle way. For this purpose was resorted to the rich treasure of nature.
Es werden hierzu, unter anderen, viele aus giftigen Lebewesen isolierte, stark wirksame Stoffe in therapeutischen Dosen als Arzneistoffe genutztIt among other things, many are isolated from poisonous creatures, highly effective substances in therapeutic doses as drugs used
So
ist aus der
Es werden hierbei in der Hauptsache ein Peptidtoxin aus dem Gift dieser Spinnenart, eine weitere aus dem Gift gewonnene antagonistisch wirkende Substanz und/oder eine Kombination dieser Bestandteile medizinisch genutzt.It are here mainly a peptide toxin from the venom of this Spider species, another antagonistic substance derived from the poison Substance and / or a combination of these ingredients medically used.
Es kann dieser Wirkstoff zur Behandlung von Tumorerkrankungen sowie parallel bzw. unterstützend zu Tumoroperationen eingesetzt werden und Rest – Tumorgewebe zerstört werden. Bei der Therapie können genetisch veränderte Körperzellen (Tumorzellen) zerstört werden, da der betreffende Wirkstoff die veränderte Oberflächenstruktur solcher Zellen erkennt und komplikationsfrei abtötet Der Gesamtgiftgehalt dieser Spinnenart, sozusagen ein Cocktail verschiedener Substanzen, ist auf Grund seiner bereits in geringen Dosen letalen Wirkung, nicht pharmazeutisch einsetzbar.It This drug can be used to treat tumors as well parallel or supportive be used for tumor surgery and residual tumor tissue destroyed. In the therapy can genetically modified body cells (Tumor cells) destroyed because the active substance in question is the changed surface structure recognizes such cells and kills without complications The total poison content of this Spider, a cocktail of various substances, so to speak due to its already lethal effect in low doses, not pharmaceutically usable.
In der Folgezeit wurden zahlreiche Wirkstoffe gegen verschiedenste Tumorarten und andere Krankheiten auf der Basis biogener Gifte und anderer biogener Wirkstoffe entwickelt.In In the following years, numerous active substances were used against the most diverse Types of tumors and other diseases based on biogenic toxins and developed other biogenic agents.
Für eine großtechnische Anwendung dieser Wirkstoffe werden jedoch große Mengen benötigt, die im Hinblick auf die geringen Mengen an Grundstoffen, die von den einzelnen Tierarten gewonnen werden können, nicht zu realisieren sind.For a large-scale However, use of these agents requires large amounts of With regard to the small quantities of basic substances used by the individual animal species can not be realized are.
Es ist deshalb die Aufgabe des erfindungsgemäßen Wirkstoffs Mittel und Verfahren zur Behandlung von Tumorerkrankungen auf der Basis biogener Grundstoffe zur Verfügung zu stellen, die es erlauben größere Mengen an Wirkstoff zu produzieren.It is therefore the object of the active ingredient according to the invention means and methods for the treatment of tumor diseases based on biogenic raw materials to disposal to provide, which allow larger quantities to produce active ingredient.
Diese Aufgabe wird von den Wirkstoffen mit den Merkmalen der Ansprüche 1 bis 13 sowie dem Verfahren nach Anspruch 29 gelöst.These Task is the active ingredients with the features of claims 1 to 13 and the method according to claim 29 solved.
Ein wesentlicher Aspekt bei der Gewinnung des erfindungsgemäßen Wirkstoffs ist der, dass der Giftcocktail von Spinnen der Gattung Sicarius und hierbei von Tieren der Arten oweni, testaceus, hahnii und alpospinosus, sowie von Spinnen der Gattung Loxosceles und hierbei von Tieren der Arten deserta, spiniceps, bergeri, distincta, rufipes, longipes und Mallorca 1 und 2, Menorca, gewonnen wird.One essential aspect in the recovery of the active ingredient according to the invention is that the poison cocktail of spiders of the genus Sicarius and animals of the species oweni, testaceus, hahnii and alpospinosus, as well as of spiders of the genus Loxosceles and hereby of animals of the species deserta, spiniceps, bergeri, distincta, rufipes, longipes and Mallorca 1 and 2, Menorca.
Die
verwendeten Spinnenarten sind im Folgenden näher beschrieben:
Die sechsäugigen Spinnen
der Familie Sicaridae (Sandspinne) kommen in Südafrika und Südamerika vor.
Die Weibchen erreichen eine Körperlänge von
15 mm, die Männchen
von 10 mm. Die Beinspannweite beträgt bis zu etwa 5 cm. Diese
Spinnen wirken sehr flach und gedrungen und die Beine sind verhältnismäßig lang,
schlank und wenig behaart. Sie werden in Ruhestellung meist geradlinig
zur Seite gestreckt. Diese Spinnen laufen sehr schnell und verbergen
ihren Körper
im Sand indem sie körnerweise
Sand auf sich werfen. Sandspinnen werden bis zu 15 Jahren alt.The types of spider used are described in more detail below:
The six-eyed spiders of the family Sicaridae (sand spider) occur in South Africa and South America. The females reach a body length of 15 mm, the males of 10 mm. The leg span is up to about 5 cm. These spiders look very flat and stocky and the legs are relatively long, slender and hairy. At rest, they are usually stretched straight to the side. These spiders walk very fast and hide their bodies in the sand throwing granular sand on them. Sand spiders are up to 15 years old.
Fossile Funde belegen, dass die Gattung Sicarius seit 120 Millionen Jahren Evolutionsgeschichte physiologisch unverändert und perfekt an ihren Lebensraum angepasst ist. Diese Spinnenart produziert einen hochtoxischen, für ihre Betetiere und den Menschen letalen Giftcocktail. nach der Einbringung der Gifte in den Körper der Beutetiere werden in kurzer Zeit spezifische Körperzellen angegriffen-Organe lösen sich auf und Gewebe verflüssigt sich innerlich und kann von der betreffenden Spinne aufgesogen werden. Der Giftcocktail wirkt partiell zellzerstörend.fossil Findings prove that the genus Sicarius has been around for 120 million years Evolutionary history physiologically unchanged and perfect for her Habitat is adapted. This spider species produces a highly toxic, for your Praying animals and humans lethal poison cocktail. after the introduction the poisons in the body The prey animals become specific body cells in a short time solve attacked organs on and liquefied tissues inwardly and can be absorbed by the spider in question. The poison cocktail partially destroys the cell.
Innerhalb des Tierreichs sind die Arten Sicarius albospinosus, Sicarius hahnii, Sicarius oweni, und Sicarius testaceus die Tiere mit den am stärksten toxischen Giften.Within of the animal kingdom are the species Sicarius albospinosus, Sicarius hahnii, Sicarius oweni, and Sicarius testaceus the animals with the most toxic Poisons.
Spinnen der Arten Loxosceles kommen in den wärmeren bis zu den tropischen Gegenden von Nordamerika, Mittelamerika, Südamerika und der Karibik in etwa 50 Arten vor. In Afrika, bis in das Mittelmeergebiet und Südeuropa sind ungefähr 20 Arten zu finden.be crazy of the species Loxosceles come in the warmer to the tropical Regions of North America, Central America, South America and the Caribbean in about 50 species ago. In Africa, to the Mediterranean and Southern Europe are about 20 species to find.
Die meist in hell – bis dunkelbraunen, einheitlichen Tönen gefärbten Tiere erreichen eine Körperlänge (ohne Beine) von 8 bis 15 Millimetern. Die Beine und der Körper sind fein behaart, aber im Gegensatz zu vielen anderen braunen Spinnen haben sie keine Stacheln an den Beinen. Bei vielen Arten der Gattung findet sich auf dem Prosoma dorsal ein violinähnliches Muster, daher der englische Trivialname „Violin Spider". Eine sichere Identifizierung der Gattung Loxosceles ist das Augenmuster. Während die meisten Spinnen acht Augen besitzen, sind es nur sechs bei dieser Gattung. Diese sind paarweise anterior und lateral angeordnet. Einige nicht – giftige Spinnen besitzen eine ähnliche Augenformation, allerdings fehlt diesen dann die besagte Färbung des Prosomas.The mostly in bright - until dark brown, uniform tones colored Animals reach a body length (without Legs) from 8 to 15 millimeters. The legs and the body are finely hairy, but unlike many other brown spiders they have no spikes on the legs. In many species of the genus there is a violin-like pattern on the prosoma dorsal, hence the English trivial name "Violin Spider. "A safe Identification of the genus Loxosceles is the eye pattern. While most Spiders have eight eyes, there are only six in this genus. These are arranged in pairs anteriorly and laterally. Some non-toxic spiders own a similar one Ocular formation, but then this is missing the said color of the prosoma.
Diese Spinnen sind vor allem in der Nacht aktiv und sehr scheu. Ihr Netz ist unregelmäßig aufgebaut. Als Schutzraum suchen sie sich dunkle Stellen unter Steinen, in deren Ritzen, oder auch unter Laub.These Spiders are active especially at night and very shy. Your network is irregular. As a shelter, they seek out dark places under stones, in their cracks, or under leaves.
Bei den mit Weickmanni 1 und Weickmanni 2 bezeichneten Arten handelt es sich nicht um bekannte Arten, die schon einen allgemein bekannten Namen aufweisen, sondern um zwei Arten die vom Erfinder auf Mallorca neu entdeckt wurden.at the species designated Weickmanni 1 and Weickmanni 2 it is not a known species that is already well known Have names, but two species by the inventor of Mallorca were rediscovered.
Die Wahl eines betreffenden Namens obliegt hierbei stets demjenigen der diese neue Art beschreibt.The Choosing a name in question is always the responsibility of the person which describes this new style.
Da
es sich eindeutig um Arten der Gattung Loxosceles handelt werden
für die
beiden neuen Arten die Namen
Loxosceles Weickmanni 1 und
Loxosceles
Weickmanni 2
gewählt.Since they are clearly species of the genus Loxosceles are for the two new species, the names
Loxosceles Weickmanni 1 and
Loxosceles Weickmanni 2
selected.
Der
Grundstoff für
den erfindungsgemäßen Wirkstoff
wird bei den angeführten
Spinnenarten auf die folgende Weise gewonnen:
Zur manuellen
Gewinnung, oder auch Melkung genannt, des Giftcocktails werden bevorzugt
subadulte Weibchen der betreffenden Spinnentiere mit den Fingern
einer Hand in Rückenlage
fixiert und durch Berühren
mit der stumpfen Seite einer auf eine sterile Spritze aufgesetzten
sterilen Kanüle
an den Chelizeren zur Abgabe des Giftes stimuliert. Die Raumtemperatur
sollte dabei zwischen 21 ° C
bsi 27 °C
und die Luftfeuchtigkeit zwischen 50% und 70% betragen.The raw material for the active ingredient according to the invention is obtained in the following types of spider species:
For manual extraction, or also called milking, of the poison cocktail, preferably subadult females of the respective arachnids are fixed in the supine position with the fingers of one hand and stimulated by touching with the blunt side of a sterile cannula placed on a sterile syringe to the chelicer to deliver the poison. The room temperature should be between 21 ° C to 27 ° C and the humidity between 50% and 70%.
Dabei ist bevorzugt, dass die Stimulationszeit nicht länger als 80 Sekunden dauert, da sonst das betreffende Tier einem unnötigen Stress ausgesetzt wird. Nach dem Escheinen des Gifttropfens an den Giftklauen wird dieser mit der Spritze über die Kanüle aufgezogen. Für jedes Tier wird eine neue Spritze mit einer neuen Kanüle verwendet. Anschließend wird die Kanüle mit der Kanülenschutzhülle wieder verschlossen.there it is preferred that the stimulation time does not last longer than 80 seconds, otherwise the animal in question will be exposed to unnecessary stress. After the appearance of the poison drop at the poison claws this becomes with the syringe over the cannula reared. For Each animal will use a new syringe with a new cannula. Subsequently becomes the cannula with the needle guard again locked.
Der erhaltene, ungereinigte Wirkstoff wird in normalen Zellkulturflaschen in Anwesenheit von normalem DMEM/Ham's F12 – Medium bei 37 °C bebrütet und wächst in der Folge rasch.Of the obtained, unpurified drug is in normal cell culture bottles in the presence of normal DMEM / Ham's F12 medium at 37 ° C and incubated grows in the episode quickly.
Hierbei handelt es sich offenbar um Mikroorganismen die im Wesentlichen aus Eiweiß, also Prionen, bestehen, denn ihr Wachstum ist sowohl in aerober als auch in anaerober Atmosphäre zu verzeichnen.in this connection these are apparently microorganisms, essentially from egg whites, that is, prions, because their growth is both aerobic as well as in an anaerobic atmosphere to record.
Dieses Wachstum der Mikroorganismen gewährleistet prinzipiell eine Lieferung auch größerer Mengen an Wirkstoff.This Ensures growth of microorganisms in principle a supply of even larger amounts of active ingredient.
Eine pharmazeutisch wirksame Menge dieses Wirkstoffs wird dann jeweils nach Bedarf erhitzt, um eventuelle giftige Bestandteile zu zerstören, und in einer Kochsalzlösung aufbereitet.A pharmaceutically effective amount of this active ingredient is then respectively heated as needed to destroy any toxic components, and in a saline solution edited.
Die Wirksamkeit des erfindungsgemäßen Wirkstoffs wurde an nativem Gewebe überprüft. Es ergaben sich folgende Ergebnisse
- 1) Mischkultur aus gesundem Gewebe und Gewebe aus Brustkrebs einer 23 – jährigen Frau. Nach 3 Tagen war nur noch gesundes Gewebe auffindbar.
- 2) Mischkultur aus gesundem Gewebe und Gewebe aus Brustkrebs einer 54 – jährigen Frau. Dasselbe Ergebnis.
- 3) Mischkultur aus gesundem Gewebe und Gewebe aus Brustkrebs einer 60 – jährigen Frau. Nach 4 Tagen war nur noch gesundes Gewebe auffindbar.
- 4) Mischgewebe aus gesundem Gewebe und aus Brustkrebs einer 38 – jährigen Frau, wobei der Anteil an Tumorgewebe sehr hoch war. Nach 6 Tagen waren nur noch ca. 25% der ursprünglichen Tumorzellen vorhanden.
- 5) kleinzelliges Bronchialkarzinom einer 53 jährigen Frau. Nach 5 Tagen war kein Tumorgewebe mehr auffindbar.
- 6) Mischgewebe aus gesundem Gewebe und aus einem Prostatakarzinom eines 47 – jährigen Mannes. Nach 8 Tagen war kein Tumorgewebe mehr vorhanden.
- 1) Mixed culture of healthy tissue and tissue from breast cancer of a 23 - year - old woman. After 3 days, only healthy tissue was found.
- 2) Mixed culture of healthy tissue and tissue from breast cancer of a 54 - year - old woman. The same result.
- 3) Mixed culture of healthy tissue and tissue from breast cancer of a 60 - year - old woman. After 4 days only healthy tissue was found.
- 4) Mixed tissues of healthy tissue and breast cancer of a 38 - year - old woman, the proportion of tumor tissue was very high. After 6 days, only about 25% of the original tumor cells were present.
- 5) small cell bronchial carcinoma of a 53-year-old woman. After 5 days, no tumor tissue was found.
- 6) Blended tissue from healthy tissue and from a prostate carcinoma of a 47 - year - old man. After 8 days no tumor tissue was present.
Insgesamt eignen sich folgende Behandlungsfälle für eine Therapie mit dem erfindungsgemäßen Wirkstoff:
- 1) kleinzelliges Bronchial – Ca
- 2) Mamma – Ca, auch pt – 21
- 3) Hodgkin – Lymphon
- 4) Non Hodgkin – Lymphon
- 5) Astrozytome I, II und III
- 6) Glioblastom
- 7) Nierenzell – Ca
- 8) Malignes Melanom
- 9) Colon – Ca
- 10) Lebermetastasen (Chemokrebs)
- 11) Knochenmetastasen (Chemokrebs)
- 12) Prostata – Ca
- 13) Gebärmutterhalskrebs
- 14) Eierstockkrebs
- 15) Adenokarzinome
- 16) Pankreas – Ca
- 1) small cell bronchial - approx
- 2) mamma - Ca, also pt - 21
- 3) Hodgkin's lymphoma
- 4) Non Hodgkin's lymphoma
- 5) astrocytomas I, II and III
- 6) glioblastoma
- 7) Kidney cell - Ca
- 8) Malignant melanoma
- 9) Colon - Ca
- 10) Liver metastases (chemocancer)
- 11) Bone metastases (chemocancer)
- 12) Prostate - approx
- 13) cervical cancer
- 14) Ovarian cancer
- 15) adenocarcinomas
- 16) Pancreas - Ca
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