DD262872A1 - PROCESS FOR SYNTHESIS OF PROTEIN-MICROBIAL BIOMASS - Google Patents

PROCESS FOR SYNTHESIS OF PROTEIN-MICROBIAL BIOMASS Download PDF

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Wolfgang Babel
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Abstract

Das Verfahren betrifft die Herstellung von eiweissreicher mikrobieller Biomasse, indem heterotrophe Substrate einzeln oder im Gemisch durch Zugabe einer energie- bzw. reduktionsaequivalente liefernden Verbindung energetisch optimiert werden, so dass Wachstum und Vermehrung durch das Kohlenstoffaufkommen limitiert und nicht durch die zur Verfuegung gestellte Energie limitiert werden. Bei Bakterien kann der Reinproteingehalt bei Verwendung von Acetat als Kohlenstoffquelle in der Kombination mit Glucose als Energielieferant auf etwa 60% gesteigert werden und bei Hefen beim Wachstum auf einer Mischung von Hexadecan bzw. Ethanol plus Formiat sowie Hexadecan plus Isopropanol auf etwa 44% bzw. sogar etwa 55%.The method relates to the production of protein-rich microbial biomass by heterotrophic substrates are energetically optimized individually or in admixture by adding an energy- or reduction-equivalent supplying compound, so that growth and multiplication limited by the carbon amount and not limited by the energy provided , For bacteria, the purity of pure protein when using acetate as a carbon source in combination with glucose as an energy source can be increased to about 60% and for yeasts when growing on a mixture of hexadecane or ethanol plus formate and hexadecane plus isopropanol to about 44% or even about 55%.

Description

Anwendungsgebietfield of use

Die Erfindung betrifft ein biotechnologisches Verfahren zur Herstellung eiweißreicher Biomasse durch aerobe kontinuierliche Vermehrung von Bakterien und Hefen auf Gemischen von kohlenstoffheterotrophen Substraten. Die mikrobielle Biomasse kann als Tierfutter, als Quelle von Eiweiß für die menschliche Ernährung oder von Enzymen für analytische Zwecke genutzt werden.The invention relates to a biotechnological process for producing protein-rich biomass by aerobic continuous propagation of bacteria and yeasts on mixtures of carbon heterotrophic substrates. The microbial biomass can be used as animal feed, as a source of protein for human nutrition or as an enzyme for analytical purposes.

Charakteristik der bekannten technischen LösungenCharacteristic of the known technical solutions

Für die Erzeugung mikrobieller Biomasse als Tierfutter oder als QueHe von Eiweiß für die menschliche Ernährung werden sog. heterotrophe Substrate rein oder in Form von Abprodukten der chemischen Industrie bzw. Landwirtschaft eingesetzt. Solche heterotrophen Substrate sind Zucker (Hexosen, Pentoseni, Säuren (Essigsäure), Alkohole (Ethanol, Methanol), Kohlenwasserstoffe (Erdöldestillat., z. B. Parex, oder Methan). Sie werden meist allein, aber auch in Form von nichtbeabsichtigten Mischungen (z. B. Sulfitablauge) oder bewußt kombinierten Gemischen verwendet (WP-DD 139870) Der aerobe Wachstums- und Vermehrungsprozeß wird chemostatisch geführt. Die im Ergebnis eines solchen Prozesses entstehende Biomasse hai eine bestimmte Zusammensetzung. Das Verhältnis der makromolekularen bzw. polymeren Hauptbestandteile (Kohlenhydrate, Lipide, Proteine, Nucleinsäuren) ist bei einer gegebenen Mikroorganismenspezies u.a. abhängig von der Wachstumsgeschwindigkeit (Durchflußrate), von der Art der Limitation und der Kohlenstoff und Energiequelle. Die Wachstumsgeschwindigkeit wirkt sich vor allem auf den RNS-Gehalt aus (Maalöe, 0., N. O. Kjeldgaard: Control of macromolecule synthesis. Benjam Inc., New York, Amsterdam 1966), so daß, wenn der Proteingehalt als Rohprotein bestimmt wird, der Eindruck entsteht, der Proteingehalt sei bei höherer Wachstumsgeschwindigkeit (Durchflußrate) größer. Tatsächlich ist der Reinproteingehalt nahezu unabhängig von der Geschwindigkeit. Er ist am höchsten, wenn der kontinuierliche Prozeß über die Kohlenstoff- und Energiequelle (heterotrophes Substrat) limitiert wird.For the production of microbial biomass as animal feed or as QueHe of protein for human nutrition so-called heterotrophic substrates are used purely or in the form of waste products of the chemical industry or agriculture. Such heterotrophic substrates are sugars (hexoses, pentoses, acids (acetic acid), alcohols (ethanol, methanol), hydrocarbons (petroleum distillate, eg, parex or methane), and are usually used alone, but also in the form of unintentional mixtures ( The aerobic growth and propagation process is carried out chemostatically and the biomass produced as a result of such a process has a specific composition: the ratio of the main macromolecular and polymeric constituents (carbohydrates , Lipids, Proteins, Nucleic Acids) in a given microorganism species depends, among other things, on the rate of growth (rate of flow), the type of limitation and the carbon and energy source The growth rate mainly affects the RNA content (Maalöe, 0., NO Kjeldgaard: Control of macromolecule synthesis, Benjam Inc., New York, Amsterdam 1966), so there If the protein content is determined as the crude protein, the impression of the protein content is at a higher growth rate (flow rate) is greater. In fact, the pure protein content is almost independent of the speed. It is highest when the continuous process via the carbon and energy source (heterotrophic substrate) is limited.

Zur Abhängigkeit des Proteingehaltes von der Kohlenstoff- und Energiequelle bei einer gegebenen Mikroorganismenspezies und unter sonst gleichen Bedingungen gibt es keine systematischen Untersuchungen, so daß auch keine Kenntnisse über eine etwaige Kausalität zwischen der Art (Qualität) des heterotrophen Kohlenstoffsubstrates und Proteingehalt existieren. Bekannt ist, daß bei Verwendung von Acetaldehyd allein oder in Kombination mit einer anderen wasserlöslichen sauerstoffhaltigen Kohlenstoffquelle der Rohproteingehalt bei Candida utilis und Brettanomyces spec, um bis zu 10% höher ist (DD-WP 240026) als bei Hefen, die auf Rübenzucker, Hexosen und Pentosen, Ethanol und Essigsäure sowie auf einem Gemisch Saccharose/Ethanol gewachsen sind (s. DD-WP 142452, Alroy, Y. u. S.Tannenbaum: Biotechnol. Bioeng. X, 239,1973; Litchfield, J.H.: Science 219, 740,1983); Goldberg,!.: Single Cell Protein. Springer Verlag Berlin 1985.There are no systematic studies on the dependence of the protein content of the carbon and energy source on a given microorganism species and under otherwise identical conditions, so that there is also no knowledge about a possible causality between the type (quality) of the heterotrophic carbon substrate and protein content. It is known that when using acetaldehyde alone or in combination with another water-soluble oxygen-containing carbon source, the crude protein content in Candida utilis and Brettanomyces spec is up to 10% higher (DD-WP 240026) than in yeasts based on beet sugar, hexoses and Pentoses, ethanol and acetic acid and grown on a mixture of sucrose / ethanol (see DD-WP 142452, Alroy, Y. and S. Tannenbaum: Biotechnol.Biengeng X, 239.1973, Litchfield, JH: Science 219, 740 , 1983); Goldberg,!.: Single Cell Protein. Springer Verlag Berlin 1985.

Der Rohproteingehalt von Hefen auf diesen Substraten liegt bei 52 bis 58%. Alleinige Bedingung für den erhöhten Proteingehalt . gemäß DD WP 240026 ist die Anwesenheit von Acetaldehyd als Kohlenstoff- und Energiequelle.The crude protein content of yeasts on these substrates is 52 to 58%. Sole condition for the increased protein content. according to DD WP 240026, the presence of acetaldehyde as a carbon and energy source.

Ziel der ErfindungObject of the invention

Das Ziel der Erfindung besteht darin, ein Verfahren zur Erzeugung von mikrobieller Biomasse zu entwickeln, das einen hohen Proteingehalt in der Biomasse garantiert.The object of the invention is to develop a process for the production of microbial biomass, which guarantees a high protein content in the biomass.

Darlegung des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, mikrobielle Biomasse hohen Eiweißgehaltes unter Verwendung heterotropher Substrate, jedoch ohne Acetaldehyd als Kohlenstoff- und Energiequelle zu benutzen.The invention has for its object to use microbial biomass high protein content using heterotrophic substrates, but without acetaldehyde as a carbon and energy source.

Erfindungsgemäß wird die Aufgabe so gelöst, daß einem heterotrophen Substrat ein weiteres zugemischt wird, das in der Mischung lediglich als Energie- und/oder Reduktionsäquivalente-Lieferant fungiert, so daß bei chemostatischer heterotrophes Substrat limitierter Kultivierung Wachstum und Vermehrung nicht mehr wie allgemein für heterotrophe Substrate zutreffendAccording to the invention, the object is achieved in that a heterotrophic substrate is mixed with another, which acts only in the mixture as an energy and / or reduction equivalent supplier, so that in chemostatic heterotrophic substrate limited cultivation growth and multiplication no longer as generally for heterotrophic substrates applicable

durch das Energieangebot, sondern von Kohlenstoff kontrolliert wird. Wird gleichzeitig dafür gesorgt, daß der Stickstoff überschüssig bleibt, dann wird der auf dem Wege der Metabolisierung des Kohlenstoffsubstrates gebildete zentrale Präcursor maximal, d. h. bis zur Kohlenstoffmetabolismus determinierten Grenze, in dem energieaufwendigen Prozeß der Proteinsynthese verbraucht. Dadurch steigt der Proteingehalt über den mit den verschiedenen heterotrophen Substraten, wenn sie allein oder in Gemischen eingesetzt werden, möglichen, wobei der RNS-Gehalt praktisch konstant ist und bei Hefen um etwa S% liegt, wenn, die energetisch optimierten Gemische bei den gleichen Geschwindigkeiten wie die Einzelsubstrate, die auch in Mischungen • Kohlenstoff- und Energiequelle zugleich sind, chemostatisch in Zellsubstanz konvertiert werden. Im allgemeinen (bei Einzelsubstraten bzw. Mischungen von Substraten mit physiologisch gleichen Funktionen) bedeutet hohe Proteinausbeute nicht maximale Wachstumsausbeute. Letztere wird erreicht, indem vermehrt energiemoderate Makromoleküle bzw. Polymere (z.B. Lipide, Kohlenhydrate) synthetisiert werden. Bei Verwendung von energetisch aufgebesserten Substratgemischen sind Wachstums- und Proteinausbeute gekoppelt. Abhängig vom verwendeten Produktstamm kommen als Energie- bzw. Wasserstoff-Donor verschiedene Verbindungen in Frage, u. a. auch Ameisensäure wie experimentell nachgewiesen worden ist (DD-WP 213946). Sie ist auch zur Steigerung des Proteingehaltes geeignet. In einem Massenprozeß dürfte Ameisensäure jedoch aus Gründen des Preises und der Verfügbarkeit, insbesondere aber weil ihr Kohlenstoff als CO2 unvermeidbar verloren geht, keine Bedeutung bzw. nur unter bestimmten Bedingungen erlangen. Vorteilhaft ist es, Substanzen zu verwenden, die materiell nicht verloren gehen, sondern nachdem sie als Energiequelle „ausgebeutet" worden sind, (vielleicht sogar hochveredelt) wieder gewonnen werden können.controlled by the supply of energy but by carbon. At the same time, if nitrogen is left in excess, then the central precursor formed by the carbon substrate metabolism will maximally be consumed in the energy-consuming process of protein synthesis, ie, the limit determined up to the carbon metabolism. This increases the protein content above that possible with the various heterotrophic substrates when used alone or in mixtures, where the RNA content is practically constant and in yeasts is around S%, if the energetically optimized mixtures are at the same rates how the single substrates, which are also in mixtures at the same time • Carbon and energy source, are chemostatically converted into cell substance. In general (for single substrates or mixtures of substrates with physiologically identical functions) high protein yield does not mean maximum growth yield. The latter is achieved by synthesizing more and more energy-modest macromolecules or polymers (eg lipids, carbohydrates). When using energetically improved substrate mixtures growth and protein yield are coupled. Depending on the product used, various compounds are suitable as energy or hydrogen donor, including formic acid as experimentally demonstrated (DD-WP 213946). It is also suitable for increasing the protein content. In a mass process, however, formic acid is unlikely to gain any importance or only under certain conditions for reasons of price and availability, but especially because its carbon is inevitably lost as CO 2 . It is advantageous to use substances that are not materially lost, but after they have been "exploited" as an energy source, (perhaps even highly refined) can be recovered.

Als besonders geeignete Substanzen hierfür erwiesen sich Glucose bei der Vermehrung von Bakterien auf Acetat als einziger Kohlenstoffquelle, und Formiat bzw. Isopropanoi bei der Vermehrung von Hefen auf Kohlenhydraten, Alkoholen und Kohlenwasserstoffen, insbesondere in der Kombination Hexadecan/Formiat, Ethanol/Formiat und Hexadecan/Isopropanol. Bei der Vermehrung der Bakterien, z. B. von Acinetobacter calcoaceticus auf Acetat betrug der Proteingehalt 45%. Nach Wachstum auf einer AcetaWGIucose-Mischung betrug der Reineiweißgehali etwa 60%, wobei die Wachstumsausbeute von etwa 0,4g/g auf etwa 0,63g/g gestiegen war. Dies bedeutet eine Erhöhung der Proteinsynthese um etwa 100% absolut. Im Falle von Hefen, demonstriert am Beispiel Candida maltosa, betrug der Reineiweßgehalt bei Wachstum auf Hexadecan bzw. Ethanol 38% bzw. 32 %. In der Kombination mit Formiat als zusätzlicher Energiequelle konnte der Eiweißgehalt auf etwa 44% der Trockensubstanz und bei der Kombination Hexadecan/Isopropanol sogar auf 55% gesteigert werden. Da gleichzeitig auch die Wachstumsausbeute gesteigert wird, ist die absolute vermehrte Menge an Protein entsprechend größer. Diese Steigerungen werden erreicht bei gleichen Geschwindigkeiten, so daß „über alles" auch die Raum/Zeit-Ausbeuten erhöht sindParticularly suitable substances for this proved glucose in the propagation of bacteria on acetate as sole carbon source, and formate or isopropanoi in the propagation of yeasts on carbohydrates, alcohols and hydrocarbons, especially in the combination hexadecane / formate, ethanol / formate and hexadecane / isopropanol. In the propagation of bacteria, z. B. of Acinetobacter calcoaceticus on acetate, the protein content was 45%. After growth on an Aceta Wglucose mixture, the pure protein content was about 60% with the growth yield increasing from about 0.4 g / g to about 0.63 g / g. This means an increase in protein synthesis by about 100% absolute. In the case of yeasts, demonstrated using the example of Candida maltosa, the pure egg content when grown on hexadecane or ethanol was 38% and 32%, respectively. In combination with formate as an additional energy source, the protein content could be increased to about 44% of the dry matter and in the combination hexadecane / isopropanol even to 55%. Since at the same time the growth yield is increased, the absolute increased amount of protein is correspondingly larger. These increases are achieved at the same speeds, so that "over everything" and the space / time yields are increased

Nachfolgend wird die Erfindung anhand von Ausführungsbeispielen näher erläutert. The invention will be explained in more detail by means of exemplary embodiments.

Ausführungsbeispieleembodiments Beispiel 1example 1

Acinetobacter calcoaceticus ZIMET11089 wird in einem für aerobe Kultivierung geeignetem Rührfermentor bei 30cC gezüchtet, der pH-Wert von 6,8 wird durch NaOH bzw. HCI konstant gehalten, die Gelöstsauerstoffkonzentration war größer als 20%. Die kontinuierliche Kultivierung (Limitation über die Kohlenstoffquelle) erfolgte auf Na-Acetat bzw. einer Mischung von Na-Acetat und Glucose als Kohlenstoff-und Energiequelle in einem Mineralmedium folgender Zusammensetzung (in mg/l):Acinetobacter calcoaceticus ZIMET11089 is cultured in a suitable cultivation for aerobic Rührfermentor at 30 c C, the pH value of 6.8 is kept constant by NaOH or HCl, the dissolved oxygen concentration was greater than 20%. Continuous cultivation (limitation via the carbon source) was carried out on Na acetate or a mixture of Na acetate and glucose as carbon and energy source in a mineral medium of the following composition (in mg / l):

NH4CINH 4 Cl 34003400 KH2PO4 KH 2 PO 4 310310 CaCI2 -2 H2OCaCl 2 -2H 2 O 2020 MgSO4-7 H2OMgSO 4 -7H 2 O 1515 FeSO4-7 H2OFeSO 4 -7H 2 O 55 ZnSO4-7 H2OZnSO 4 -7H 2 O 0,440.44 MnSO4-4 H2OMnSO 4 -4H 2 O 0,820.82 CuSO4 -5H2OCuSO 4 -5H 2 O 0,780.78 Na2MoO4-2 H2ONa 2 MoO 4 -2H 2 O 0,250.25

Bei einer Verdünnungsrate von 0,14h ' lag die Biomasseausbeute auf Acetat bei 0,38g/g, der Reineiweißgehalt betrug 46%. Bei simultaner Verwertung von Acetat und Glucose, angeboten in einem Mischungsverhältnis von 2,6:1 (in Mol), betrug die Wachstumsausbeute 0,63g/g Acetat, der Reineiweißgehalt lag in diesem Falle bei 63%.At a dilution rate of 0.14 h ', the biomass yield on acetate was 0.38 g / g, the pure protein content was 46%. With simultaneous utilization of acetate and glucose, offered in a mixing ratio of 2.6: 1 (in mol), the growth yield was 0.63 g / g of acetate, the pure protein content in this case was 63%.

Beispiel 2Example 2

Wird Acinetobacter calcoaceticus 69 IV, wie im Beispiel 1 angegeben aber bei einer Verdünnungsrate von 0,31 hr1 kultiviert, so werden auf Acetat allein 0,41 g Biomasse pro g Acetat mit einem Reineiweißgehalt von 44% erhalten. Auf der entsprechenden Mischung von Acetat und Glucose werden 0,64g Biomasse pro g Acetat mit einem Reineiweißgehalt von 59% erhalten.If Acinetobacter calcoaceticus 69 IV, as indicated in Example 1 but cultured at a dilution rate of 0.31 hr 1 , so be on acetate alone 0.41 g of biomass per g of acetate obtained with a pure protein content of 44%. On the appropriate mixture of acetate and glucose 0.64 g of biomass per g of acetate are obtained with a pure protein content of 59%.

Beispiel 3Example 3

Candida maltosa spez. wird in einem für aerobe Kultivierung geeigneten Rührfermentor bei 32°C, einem pH-Wert von 5,2 und einer Gelöstsauerstoff-Konzentration von mindestens 40% gezüchtet. Die chemostatische Kultivierung (Limitation der Kohlenstoff-Quelle) erfolgt auf Hexadecan allein bzw. einer Mischung von Hexadecan und Formiat als Kohlenstoff- und Energiequelle in einem Mineralmedium folgender Zusammensetzung (in mg/l):Candida maltosa spec. is grown in a stirred fermentor suitable for aerobic culture at 32 ° C, a pH of 5.2 and a dissolved oxygen concentration of at least 40%. The chemostatic cultivation (limitation of the carbon source) is carried out on hexadecane alone or a mixture of hexadecane and formate as carbon and energy source in a mineral medium of the following composition (in mg / l):

NH4CINH 4 Cl 7 6307 630 KH2PO4 KH 2 PO 4 28102810 MgSO4-7 H2OMgSO 4 -7H 2 O 590590 CaCI2-2 H2OCaCl 2 -2H 2 O 5555 FeSO4 -7 H2OFeSO 4 -7H 2 O 3838

MnSO4-3H2OMnSO 4 -3H 2 O 1717 ZnSO4-7H2OZnSO 4 -7H 2 O 2222 CuSO4-SH2OCuSO 4 -SH 2 O 44 CoCI2 ·4Η20CoCI 2 · 4Η 2 0 2,82.8 Na2MoO4-2 H2ONa 2 MoO 4 -2H 2 O 2,62.6 H3SO4 H 3 SO 4 44 KJKJ 2,62.6 Biotinbiotin 0,050.05 Thiaminthiamine 55 EDTAEDTA 450450

Bei einer Verdünnungsrate von 0,15h 1 lag die Biomasseausbeute auf Hexadecan bei 0,94g/g, der Reinproteingehalt betrug 38%. Bei simultaner Verwertung von Hexadecan und Formiat, angeboten in einem Mischungsverhältnis von 1:9,6 (in Mol), steigt die Biomasseausbeute auf 1,26g/g Hexadecan, der Reinproteingehalt in dieser Biomasse beträgt 44%.At a dilution rate of 0.15 h 1 , the biomass yield on hexadecane was 0.94 g / g, the pure protein content was 38%. With simultaneous utilization of hexadecane and formate, offered in a mixing ratio of 1: 9.6 (in mol), the biomass yield increases to 1.26 g / g hexadecane, the pure protein content in this biomass is 44%.

Beispiel 4Example 4

Candida maltosa wird wie unter Beispie! 3 beschrieben, bei einer Verdünnungsrate von 0,12h"' kultiviert. Als Kohlenstoff-und Energiequelle dienen Ethanol bzw. Ethanol und Formiat. Auf Ethanol wurde dabei eine 8iomasseausbeute von 0,60g/g erreicht, der Reinproteingehalt betrug 32%. Bei simultaner Verwertung von Ethanol und Formiat, angeboten in einem Mischungsverhältnis von 1:2,5 (in Mol), steigt die Biomasseausbeute auf 0,76g/g Ethanol, der Reinproteingehalt dieser Biomasse beträgt 44%.Candida maltosa is like under Beispie! 3, at a dilution rate of 0.12 h. "Ethanol and ethanol and formate were used as the carbon and energy source, while an alcohol yield of 0.60 g / g was achieved on ethanol, while the pure protein content was 32% of ethanol and formate, offered in a mixing ratio of 1: 2.5 (in mol), the biomass yield increases to 0.76 g / g ethanol, the pure protein content of this biomass is 44%.

Beispiel 5Example 5

Candida maliosa spez. wird wie unter Beispiel 3 beschrieben auf Hexadecan kultiviert. Der pH-Wert betrug 4,5 und die Verdünnungsrate 0,12 h~1. Bei simultaner Anwesenheit von Isopropsnol, angeboten in einem Mischungsverhältnis von 1:60 (in Mol), steigt die Biomasseausbeute auf 1,04g/g Hexadecan an, der Reinproteingehalt in dieser Biomasse beträgt 48%.Candida maliosa spec. is cultivated as described in Example 3 on hexadecane. The pH was 4.5 and the dilution rate was 0.12 h ~ 1 . In the simultaneous presence of isopropanol, offered in a mixing ratio of 1:60 (in mol), the biomass yield increases to 1.04 g / g hexadecane, the pure protein content in this biomass is 48%.

Beispiel 6Example 6

Candida maltosa spez. wird wie unter Beispiel 5 beschrieben, aber auf einem Mischungsverhältnis Hexadecan :lsopropanol von 1:300 (in Mo!) kultiviert. Die Biomasseausbeute steigt unter diesen Bedingungen auf 1,13g/g Hexadecan an, der Reinproteingehalt in dieser Biomasse beträgt 55%.Candida maltosa spec. is as described in Example 5, but cultured at a mixing ratio hexadecane: isopropanol of 1: 300 (in Mo!). The biomass yield increases under these conditions to 1.13 g / g hexadecane, the pure protein content in this biomass is 55%.

Claims (3)

1. Verfahren zur Synthese proteinreicher mikrobieller Biomasse durch aerobe chemostatische Kultivierung von Bakterien und Hefen auf heterotrophen Substraten, gelöst in mineralischen Nährmedien, gekennzeichnet dadurch, daß einem heterotrophen Substrat oder Substratgemischen, bestehend aus Substraten mit gleichen physiologischen Funktionen, ein energie- bzw. reduktionsäquivalenie iieferndes Substrat zugeführt wird, so daß die Vermehrung durch das Kohlenstoffangebot und nicht wie bei heterotrophen Substraten (oder Substratgemischen) üblich durch die zur Verfügung gestellte Energie !imitiert wird.1. A process for the synthesis of protein-rich microbial biomass by aerobic chemostatic cultivation of bacteria and yeasts on heterotrophic substrates, dissolved in mineral nutrient media, characterized in that a heterotrophic substrate or substrate mixtures consisting of substrates with the same physiological functions, an energy- or reduction equivalent iieferndes Substrate is supplied so that the multiplication by the carbon supply and not as in heterotrophic substrates (or substrate mixtures) is usually imitated by the energy provided. 2. Verfahren nach Anspruch 1, gekennzeichnet dadurch, daß Substrate so kombiniert und in einem Mischungsverhältnis zur simultanen Verwertung angeboten werden, daß der Biomasseertrag für die gegebene Kombination und den benutzten Stamm quantitativ und qualitativ maximal ist.2. The method according to claim 1, characterized in that substrates are combined and offered in a mixing ratio for simultaneous utilization, that the biomass yield for the given combination and the strain used is quantitative and qualitative maximum. 3. Verfahren nach Anspruch 1 und 2, gekennzeichnet dadurch, daß ais Energiespender bevorzugt Verbindungen verwendet werden, die aus dem Prozeß der Energiespendung hochveredelt hervorgehen und in dieser Form gewonnen werden können.3. The method according to claim 1 and 2, characterized in that ais energy source preferably compounds are used, which emerge highly refined from the process of energy and can be obtained in this form.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN114836331A (en) * 2022-04-26 2022-08-02 内蒙古工业大学 Candida utilis and application thereof

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