DD234222A1

DD234222A1 - MEDIUM FOR THE DEGRADATION, LIQUID AND FREEZER CONSERVATION OF ERPELSPERMA

Info

Publication number: DD234222A1
Application number: DD26913584A
Authority: DD
Inventors: Gerd-Peter Schramm
Original assignee: Inst Gefluegelwirtschaft Merbi
Priority date: 1984-11-06
Filing date: 1984-11-06
Publication date: 1986-03-26

Abstract

Medium zur Verduennung, Kurz- und Langzeitkonservierung von Erpelsperma bestehend aus Na-L-Glutamat, Glukose, Inositol, Kaliumdihydrogenphosphat und Dikaliumhydrogenphosphat, das geeignet ist, fuer die Fluessigkonservierung ueber 6 Stunden sowie die Langzeitkonservierung und folgende Bestandteile in g/100 ml qua bidest. besitzt:Na-L-Glutamat2,85Glukose0,50Inositol0,25KH2PO40,28K2HPO43H2O0,47Medium for the seduction, short-term and long-term preservation of peat sperm consisting of Na-L-glutamate, glucose, inositol, potassium dihydrogen phosphate and dipotassium hydrogen phosphate, which is suitable for liquid preservation over 6 hours and the long-term preservation and the following components in g / 100 ml qua-bid. has: Na-L-Glutamat2,85Glukose0,50Inositol0,25KH2PO40,28K2HPO43H2O0,47

Description

field of use

Die Erfindung betrifft ein Medium zur Verdünnung und Lagerung von Erpelsperma, wie es für die Kurzzeitkonservierung über sechs Stunden und darüber sowie für die Landzeitkonservierung in den Zucht- und Reproduktionsebenen der Entenproduktion bei Anwendung der künstlichen Besamung benötigt wird.The invention relates to a medium for the dilution and storage of terrestrial sperm, as required for short-term preservation over six hours and above and for land conservation in the breeding and reproduction levels of duck production using artificial insemination.

Characteristic of the known technical solutions

ONISHI und Mitarbeiter verdünnten Erpelsperma mit Ringer-Lösung, welche aus NaCI, CaCI₂, KCI, Na₂CO₃ besteht, und erhielten eine 78%ige Befruchtung, wenn die Zahl der inseminierten Spermien mindestens bei 46 Millionen lag. Dieses Medium besitzt keine Konservierungseigenschaften und ist deshalb nur für die Sofortversamung geeignet. WATANABE untersuchte verschiedene Verdünnerlösungen in bezug auf ihre fertilitätserhaltende Wirkung. Die günstigsten Befruchtungsergebnisse wurden bei Anwendung eines Hühnerdotter-Zitratsverdünners erreicht. Mit 24 und 48 Stunden bei 5⁰C gelagertem Sperma sollen mehr als 80% Fertilität der Eier erreicht worden sein. In eigenen Untersuchungen führte die Anwendung dieses Mediums jedoch zur Infertilität der Spermien.ONISHI and coworkers diluted Ringer's solution containing Ringer's solution consisting of NaCl, CaCl ₂ , KCl, Na ₂ CO ₃ , and received 78% fertilization when the number of sperm injected was at least 46 million. This medium has no preservative properties and is therefore only suitable for immediate replacement. WATANABE investigated various thinner solutions with regard to their fertility-preserving effect. The most favorable fertilization results were achieved using a chicken dotter citrate diluent. With sperm stored at 5 ^° C. for 24 and 48 hours, more than 80% of egg fertility is said to have been achieved. In their own studies, however, the use of this medium led to sperm infertility.

REIMSCHÜSSEL ermittelte die höchsten Befruchtungsergebnisse in Höhe von 90,2% bei Verdünnung des Erpelspermas mit einem Glutamatverdünner. Das Verdünnungsverhältnis lag bei 1+2, das Inseminationsintervall bei zweimal je Woche. Der Glutamatverdünner besitzt aber ebenfalls keine Konservierungseigenschaften und ist damit nur zur Sofortversamung geeignet. DAVTJAN und STARYGIN berichteten über die Eignung der Medien A-5, A-7 und VIRGZ-2 zur Verdünnung von Erpelsperma. Die unter anderem aus Natriumacetat, Natriumglutamat, Dinatriumkarbonat, Glukose, Essigsäure und Phosphatpuffer bestehenden Lösungen sind ebenfalls nur für die Sofortversamung geeignet.DIET FOOD found the highest fertilization results at 90.2% on dilution of the eruption sperm with a glutamate diluent. The dilution ratio was 1 + 2, the insemination interval twice a week. However, the glutamate diluent also has no preservative properties and is therefore only suitable for immediate replacement. DAVTJAN and STARYGIN reported on the suitability of media A-5, A-7 and VIRGZ-2 for dilution of maul sperm. The solutions consisting of sodium acetate, sodium glutamate, disodium carbonate, glucose, acetic acid and phosphate buffer, among others, are also suitable only for immediate remission.

ANDREEV und SAKHACKIJ verdünnten das Sperma mit einem Phosphatpuffermedium, dem als KryoprotektorÄthylenglykol bzw. Dimethylformamid in Konzentrationen von jeweils 15% zugesetzt war. Das gefriergetaute Sperma führte zu 23,8 bzw. 30,0% Befruchtung. Die Inseminationsdosis betrug 60 bis 80 Millionen aktiver Spermien, das Besamungsintervall 2 bis 4 Tage. Das Befruchtungsergebnis ist in dieser geringen Höhe ohne züchterische Relevanz. Über Befruchtungsergebnisse zwischen 20,0 bis 26,8% nach Insemination von gefrierkonserviertem Moschuserpelsperma, das drei Jahre gelagert war, informierten auch WATANABE und Mitarbeiter. Die Autoren verwendeten einen Glukose-Dotter-Verdünner und den Kryoprotektor Glycerol. Diese Befruchtungsergebnisse liegen ebenfalls zu niedrig.ANDREEV and SAKHACKIJ diluted the semen with a phosphate buffer medium to which was added, as cryoprotectant, ethylene glycol or dimethylformamide at concentrations of 15% each. The freeze-thawed sperm led to 23.8 and 30.0% fertilization. The insemination dose was 60 to 80 million active sperm, the insemination interval 2 to 4 days. The fertilization result is of no relevance to breeding at this low altitude. WATANABE and coworkers also reported fertility results ranging from 20.0% to 26.8% after freeze-preserved musk pork semen insemination, which had been stored for three years. The authors used a glucose-yolk thinner and the cryoprotectant glycerol. These fertilization results are also too low.

Object of the invention

Ziel der Erfindung ist die Entwicklung eines Mediums zur Verdünnung, Kurz-und Langzeitkonservierung von Erpelsperma bei weitgehender Erhaltung der Befruchtungsfähigkeit. Die Effektivität der künstlichen Besamung soll gesteigert werden, indem Spermagewinnung und Insemination zu physiologisch optimalen Zeiten erfolgen.The aim of the invention is the development of a medium for dilution, short-term and long-term preservation of erruption sperm while largely preserving the fertility. The effectiveness of artificial insemination should be increased by sperm collection and insemination at physiologically optimal times.

Explanation of the essence of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Medium zur Verdünnung sowie Kurz-und Langzeitkonservierung von Erpelsperma durch Auswahl, neue Zuordnung und Mengendosierung bekannter Komponenten zu entwickeln.The invention has for its object to develop a medium for dilution and short-term and long-term preservation of Erpelsperma by selecting new assignment and quantity dosing of known components.

Es wurde gefunden, daß ein Medium folgender Zusammensetzung die gestellten Anforderungen erfüllt:It has been found that a medium of the following composition fulfills the requirements:

Na-L-Glutamat 2,85 gNa L-glutamate 2.85 g

Glukose 0,50 gGlucose 0.50 g

Inositol 0,25 gInositol 0.25 g

KH₂PO₄ 0,28 gKH ₂ PO ₄ 0.28 g

K₂HPO₄ x 3 H₂O 0,47 gK ₂ HPO ₄ x 3 H ₂ O 0.47 g

aqua bidest. ad 100 ml - double distilled water. ad 100 ml -

Beispiel I verdeutlicht die Eignung des Mediums zur Verdünnung und Kurzzeitkonservierung. Als Tiermaterial fanden Moschusenten (Cairina moschata) Verwendung, der Prüfzeitraum umfaßte 6 Wochen, das Besamungsintervall lag bei 3 bis 4 Tagen.Example I illustrates the suitability of the medium for dilution and short-term preservation. Muscovy ducks (Cairina moschata) were used as animal material, the test period comprised 6 weeks, the insemination interval was 3 to 4 days.

Example I

Variantevariant

Eizahl StückEgg number piece

Befruchtungfertilization

natürlich verpaarte Kontrolle (1,5) unverdünntes Frischsperma Flüssigsperma, frischverdünnt Flüssigsperma, 3 Stunden gelagert Flüssigsperma, 6 Stunden gelagertnaturally verpaarte control (1.5) undiluted fresh semen liquid sperm, freshly diluted liquid sperm, stored for 3 hours liquid sperm, stored for 6 hours

72,4 86,4 87,9 85,2 87,272.4 86.4 87.9 85.2 87.2

Zur Gefrierkonservierung wird als KryoprotektorÄthylenglykol verwendet. Mit gefriergetautem Sperma wurden die in Beispiel Il aufgeführten Befruchtungsergebnisse ebenfalls bei Moschusenten erzielt.For cryopreservation, ethylene glycol is used as the cryoprotectant. With freeze-thawed sperm, the fertilization results listed in Example II were also achieved in musk ducks.

Example Il

Inseminationsintervall Einlage . BefruchtungInsemination interval insert. fertilization

Tage Stück. %Days piece. %

(2mal/Woche) 146 56,2(2 times / week) 146 56.2

Omal/Woche) 157 80,3Omal / week) 157 80.3

Durch Verwendung des vorgeschlagenen Mediums ist eine Kurzzeitkonservierung bei Erhalt der vollen Befruchtungsfähigkeit bis zu 6 Stunden möglich. Es ist keine Erhöhung des Besamungsintervalls und der Besamungsdosis notwendig. Das enge Verdünnungsverhältnis von 1:1 bewirkt eine hohe Verdünnerökonomie. Die Spermagewinnung und Insemination kann zeitlich getrennt werden und damit zu den optimalen Zeiten erfolgen. Mit gefriergetautem Sperma werden wesentlich höhere Befruchtungsergebnisse als in der Literatur mitgeteilt erzielt. Damit sind die Voraussetzungen für die Einrichtung von Spermabanken und den internationalen Spermaaustausch gegeben. Die Ergebnisse werden mit intravaginaler Insemination ohne Entfernung des Kryoprotektors aus der Spermiensuspension erhalten.By using the proposed medium, short-term preservation is possible for up to 6 hours while maintaining full fertility. There is no need to increase the insemination interval and the insemination dose. The narrow dilution ratio of 1: 1 results in a high dilution economy. The sperm collection and insemination can be separated in time and thus take place at the optimal times. With freeze-thawed sperm significantly higher fertilization results are achieved than reported in the literature. Thus, the conditions for the establishment of sperm banks and the international semen exchange are given. The results are obtained with intravaginal insemination without removal of the cryoprotectant from the sperm suspension.

Claims

Claim:

Medium for dilution, short-term and long-term preservation of terrestrial sperm, characterized in that it consists of Na-L-glutamate, glucose, inositol, potassium hydrogen phosphate and dipotassium hydrogen phosphate and the following composition of the components in g / 100 ml bidistilled. has:

Na L-glutamate 2.85

Glucose 0.50

Inositol 0.25

KH ₂ PO ₄ 0.28

K ₂ HPO ₄ x 3 H ₂ O 0.47