DD228439A1 - MEDIUM FOR THE DEHUMIDIFICATION, LIQUID AND FREEZER CONSERVATION OF PUTER SPERMA - Google Patents

MEDIUM FOR THE DEHUMIDIFICATION, LIQUID AND FREEZER CONSERVATION OF PUTER SPERMA Download PDF

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DD228439A1 DD26913684A DD26913684A DD228439A1 DD 228439 A1 DD228439 A1 DD 228439A1 DD 26913684 A DD26913684 A DD 26913684A DD 26913684 A DD26913684 A DD 26913684A DD 228439 A1 DD228439 A1 DD 228439A1
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Gerd-Peter Schramm
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Inst Gefluegelwirtschaft Merbi
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Abstract

Medium zur Verduennung, Kurz- und Langzeitkonservierung von Putersperma, bestehend aus Saccharose, Na-L-Glutamat, Laktose, Fruktose, Inositol, Dinatriumphosphat, Kaliummonophosphat und TES, das geeignet ist fuer die Verduennung und Fluessiglagerung ueber 6 Stunden und darueber bei Ausdehnung der Inseminationsintervalle von 7 auf 14 Tage sowie zur Langzeitkonservierung und folgende Bestandteile in g/100 ml aqua bidest. besitzt:Saccharose4,50Na-L-Glutamat1,00Laktose1,00Fruktose1,00Inositol0,50Na2HPO40,86KH2PO40,08TES10,201 N-Tris (hydroxymethyl) methyl-2-aminoethan sulphonic acidMedium for the seduction, short-term and long-term preservation of perineum, consisting of sucrose, Na-L-glutamate, lactose, fructose, inositol, disodium phosphate, potassium monophosphate and TES, which is suitable for sedimentation and fluid storage over 6 hours and then with extension of Inseminationsintervalle from 7 to 14 days and for long-term preservation and the following ingredients in g / 100 ml double-distilled water. has: sucrose4,50Na-L-glutamate1,00 lactose1,00 fructose1,00inositol0,50Na2HPO40,86KH2PO40,08TES10,201 N-tris (hydroxymethyl) methyl-2-aminoethane sulphonic acid

Description

-A--A-

Titeltitle

Medium zur Verdünnung, Flüssig- und Gefrierkonservierung von PuterspermaMedium for dilution, liquid and frozen preservation of peruvial sperm

Anwendungsgebiet Die Erfindung betrifft ein Medium zur Verdünnung und Lagerung von Putersperma, wie es für die Kurzzeitkonservierung über 6 Stunden und darüber sowie Langzeitkonservierung über beliebige Zeiten in den Zucht- und Reproduktionsebenen der Putenproduktion bei Anwendung der künstlichen Besamung benötigt wird.Field of application The invention relates to a medium for the dilution and storage of peruvial sperm, as required for short-term preservation over 6 hours and above and long-term preservation over any time in the breeding and reproduction levels of turkey production using artificial insemination.

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen In der Erfindungsbeschreibung SU 596 234- werden 2 Medien beschrieben, die für die·Verdünnung des Spermas bei dessen Versamung innerhalb von 15 bis 20 Minuten nach Gewinnung geeignet sind. Das Befruchtungsergebnis wird mit 85,A- bis 89,3 %, der Schlupf mit 75,1 bis 78,3 % angegeben. Die Verdünnerbestandteile sind Na-L-Glutamat, Zucker, Magnesiumsulphat, Methionin, Zitronensäure und Tris. In der Erfindungsbeschreibung SU 980 706 ist ein Verdünner angegeben, der für die Flüssigkonservierung von Geflügelsperma geeignet ist. Mit 7 bzw. 24 Stunden gelagertem Hahnensperma werden 92,6 bzw. 90,1 % Befruchtung erreicht. Nach 72stündiger Aufbewahrung soll die Fertilität der Eier bei 57,1 % liegen. Dieses aus Saccharose, Glukose, Natriumzitrat, Natriumkarbonat, Kaliumphosphat und 10 %iger Essigsäure bestehende Medium soll auch zur Flüssig-Characteristic of the Known Technical Solutions In the description of the invention SU 596 234- 2 media are described which are suitable for the dilution of the sperm during its assimilation within 15 to 20 minutes after extraction. The fertilization result is given as 85, A- to 89.3 %, the slip as 75.1 to 78.3%. The diluent components are Na-L-glutamate, sugar, magnesium sulphate, methionine, citric acid and Tris. In the invention description SU 980 706 a thinner is specified, which is suitable for the liquid preservation of poultry semen. With 7 or 24 hours of stored rooster sperm, 92.6 and 90.1 % fertilization are achieved. After 72 hours of storage, the fertility of the eggs should be 57.1 % . This medium consisting of sucrose, glucose, sodium citrate, sodium carbonate, potassium phosphate and 10% acetic acid should also be

-aii.84-0209-320-aii.84-0209-320

konservierung von Puterspermien verwendet werden können. Konkrete Angaben dazu fehlen jedoch. In der Erfindungsbeschreibung GB 2 102 668 ist ein Verdünner (BPSE-II) genannt, der für die Konservierung von Putersperma über 18 Stunden ohne Abfall der Befruchtungsfähigkeit der Spermien geeignet ist.preservation of peruvial sperm can be used. Specific details are missing. In the description of the invention GB 2 102 668 a diluent (BPSE-II) is called, which is suitable for the preservation of Putersperma over 18 hours without decreasing the fertility of the sperm.

Er besteht aus Kaliumdiphosphat, Natriumglutamat, Kaliumnitrat, Fruktose, Natriumacetat, TES, Kaliummonophosphat und Magnesiumchlorid. Mit frisch verdünntem bzw. 6 Stunden gelagertem Sperma werden über eine 15wöchige Reproduktionsperiode kumulativ 93 bis 95 % Befruchtung erreicht. Auch eine I8stündige Ejaku-1ataufbewahrung soll ohne Einfluß auf die Befruchtungskapazität der Spermatozoen sein. Es ist weiterhin ein Verdünner von IAKE und CHERMS bekannt, der sich aus Natriumglutamat, Kaliumzitrat, Magnesiumacetat, Glukose, BES (NN-Bis (2 hydroxyethyl) -2-aminoethane sulfonic acid) und Natronlauge zusammensetzt. Es wird berichtet·; daß er für Lagerzeiten bis zu 48 Stunden verwendet werden kann. Wird das Sperma während der zweitätigen Aufbewahrung kontinuierlich bewegt, sollen bei wöchentlicher Insemination von 0,06 ml 3-fach verdünntem Ejakulat Befruchtungsergebnisse in Höhe von 84 % erhalten werden. Wenig erfolgreich waren bisher die Untersuchungen zur Gefrierkonservierung von Putersperma. Während mit langzeitkonserviertem Hahnensperma Befruchtungsresultate bis zu 90 % erreicht werden, liegen die günstigsten Ergebnisse nach Insemination von gefriergetauten Puterejakulaten zwischen 30 und 50 %. Dieses Pertilitätsniveau ist für die Putenzüchtung und -reproduktion ohne Interesse.It consists of potassium diphosphate, sodium glutamate, potassium nitrate, fructose, sodium acetate, TES, potassium monophosphate and magnesium chloride. With freshly diluted sperm stored for 6 hours or more, cumulative 93 to 95 % fertilization is achieved over a 15-week reproductive period. An 8-hour storage of ejaku-1at should also have no influence on the fertilization capacity of the spermatozoa. There is also known a diluent of IAKE and CHERMS composed of monosodium glutamate, potassium citrate, magnesium acetate, glucose, BES (NN-bis (2-hydroxyethyl) -2-aminoethane sulfonic acid) and caustic soda. It is reported·; that it can be used for storage for up to 48 hours. If the semen is continuously agitated during the two-day storage period, fertilization results of 84 % should be obtained with weekly insemination of 0.06 ml of 3-fold diluted ejaculate. So far, the studies on the preservation of frozen peruvial sperm have not been very successful. While fertilization results of up to 90 % can be achieved with long-term preserved rooster sperm, the best results after freeze-thawed puterejakulate insemination are between 30 and 50 %. This level of pertility is of no interest to the turkey breed and reproduction.

Ziel der ErfindungObject of the invention

Ziel der Erfindung ist die Entwicklung eines Mediums zur Verdünnung, Kurzzeit- und Langzeitkonservierung von Putersperma bei weitgehender Erhaltung der Befruchtungsfähigkeit. Die Effektivität der künstlichen Besamung soll gesteigert werden, indem Spermagewinnung und Insemination zu physiologisch optimalen Zeiten erfolgt.The aim of the invention is the development of a medium for dilution, short-term and long-term preservation of peruvial sperm while largely preserving the fertility. The effectiveness of artificial insemination should be increased by sperm collection and insemination at physiologically optimal times.

Darlegung des Wesens der Erfindung Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Medium zur Verdünnung sowie Kurz- und Langzeitkonservierung von Putersperma durch Auswahl, neue Zuordnung und Mengendosierung bekannter Komponenten zu entwickeln.DISCLOSURE OF THE INVENTION The invention has for its object to develop a medium for dilution and short-term and long-term preservation of peruvial sperm by selecting, assigning new and quantitative dosage of known components.

Es wurde gefunden, daß ein Medium folgender Zusammensetzung die gestellten Anforderungen erfüllt:It has been found that a medium of the following composition fulfills the requirements:

Saccharose 4,50 gSucrose 4.50 g

Na-L-Glutamat 1 ,00Na-L-glutamate 1, 00

Laktose 1,00Lactose 1.00

Fruktose 1,00Fructose 1.00

Inositol 0,50Inositol 0.50

Na2HPO4 0,86Na 2 HPO 4 0.86

KH2PO4 . 0,08KH 2 PO 4 . 0.08

TES1 0,20TES 1 0.20

aqua bidest. 100 mldouble distilled water. 100 ml

N-Tris (hydroxymethyl) methyl-2-aminoethan sulphonic acidN-tris (hydroxymethyl) methyl-2-aminoethane sulphonic acid

In den Tabellen werden Beispiele für die Eignung des Mediums zur Verdünnung und Kurzzeitkonservierung gegeben.The tables give examples of the suitability of the medium for dilution and short-term preservation.

Beispiel I veranschaulicht die Ergebnisse der Konservierungseignungsprüfung des Mediums im Vergleich zum Beltsville-Poultry-Semen-Extender (BPSE-II) nach SEXTON (1982) bei 6stündiger Lagerung über einen Zeitraum von 11 Wochen. Beispiel II verdeutlicht die Eignung des Mediums zur Verdünnung und Plüssigkonservierung unter Feldbedingungen über einen Zeitraum von 14 Wochen.Example I illustrates the results of the media preservation suitability test compared to the Beltsville Poultry Semen Extender (BPSE-II) according to SEXTON (1982) when stored for 6 hours over a 11 week period. Example II illustrates the suitability of the medium for dilution and placental preservation under field conditions over a 14 week period.

Beispiel III zeigt die Wirkung von 7 bis 14 Tage-Inseminationsintervallen bei Verwendung von mit dem Medium verdünntem bzw. gelagertem Sperma auf die Fertilität der Eier über einen Zeitraum von 16 Wochen.Example III shows the effect of 7 to 14 day insemination intervals using semen diluted with the medium on the fertility of the eggs over a period of 16 weeks.

Beispiel IExample I Einlage St.Insole St. Befruchtung %Fertilization% Schlupf Befruchtung Einlage % % Fertilization slip insert%% 462 515 830 847462 515 830 847 88,3 86,6 90,9 86,388.3 86.6 90.9 86.3 Verdünnerthinner 555 536555 536 95,7 88,295.7 88.2 81,0 77,5 75,1 66,281.0 77.5 75.1 66.2 55 BPSV BPSE-IIBPSV BPSE-II Beispiel IIExample II Einlage St.Insole St. Befruchtung % Fertilization % Schlupf Befruchtung' Einlage % % Slip fertilization 'insert%% 1010 Spermachargesemen batch 11.468 12.49711,468 12,497 94,9 92,594.9 92.5 81,5 77,3 81,8 75,781.5 77.3 81.8 75.7 frischverdünnt 3-5 Stunden gelagertstored freshly diluted for 3-5 hours Beispiel IIIExample III Inseminations- Einlage Befruchtung intervall d St. % Insemination insole Fertilization interval d St. % 1515 Spermachargesemen batch 7 14 7 147 14 7 14 2020 frischverdünnt frischverdünnt 6 Stunden gelagert 6 Stunden gelagertfreshly diluted freshly diluted stored 6 hours stored for 6 hours

Zur Gefrierkonservierung wird als Kryoprotektor Äthylenglykol verwendet..Mit gefriergetautem Sperma in einer Dosierung von 0,18 bis 0,20 ml, das innerhalb von 30 Minuten nach Rekonstituierung inseminiert wurde, sind über einen Zeitraum von 6 Wochen die in Tabelle IV ausgewiesenen Ergebnisse erreicht..Ethylene glycol is used as a cryoprotectant for cryopreservation. Frozen semen at a dose of 0.18-0.20 ml, which was inseminated within 30 minutes of reconstitution, achieved the results reported in Table IV over a period of 6 weeks. ,

Beispiel IVExample IV Einlage St.Insole St. Befruchtung % Fertilization % Schlupf Befruchtung %Hatching fertilization% Einlage % Deposit % Inseminations- intervall dInsemination interval d 117 112117 112 54,7 88,454.7 88.4 75,0 74,775.0 74.7 41,0 66,141.0 66.1 7 3-47 3-4

Durch Verwendung des vorgeschlagenen Mediums kann flüssigkonserviertes Putersperma mindestens 6 Stunden ohne Befruchtungsdepressionen gelagert werden. Die Besamungsintervalle können von 7 auf 10 bis 14 Tage erweitert werden. Mit gefriergetautem Sperma werden Befruchtungsergebnisse von züchterischem Interesse, größer als 60 %, erreicht. Damit sind die Voraussetzungen für die Einrichtung von Spermabanken und den internationalen Spermaaustausch gegeben.By using the proposed medium, liquid preserved peruvial sperm can be stored for at least 6 hours without fertilization depressions. The insemination intervals can be extended from 7 to 10 to 14 days. With freeze-thawed sperm fertilization results of breeding interest, greater than 60 %, are achieved. Thus, the conditions for the establishment of sperm banks and the international semen exchange are given.

Claims (1)

Patentanspruchclaim Medium zur Verdünnung, Kurz- und Langzeitkonservierung von Putersperma, dadurch gekennzeichnet, daß es aus Saccharose, Na-L-Glutamat, Laktose, Pruktose, Inositol, Dinatriumphosphat, Kaliummonophosphat und TES besteht und folgende Zusammensetzung der Bestandteile in g/100 ml aqua bidest. be— stitzt:Medium for dilution, short-term and long-term preservation of peruvial sperm, characterized in that it consists of sucrose, Na-L-glutamate, lactose, prukose, inositol, disodium phosphate, potassium monophosphate and TES and the following composition of the components in g / 100 ml of double-distilled water. staged: Saccharose 4,50Sucrose 4.50 Na-L-Glutamat 1 ,00Na-L-glutamate 1, 00 Laktose 1,00Lactose 1.00 Pruktose 1,00Prukose 1.00 Inositol 0,50Inositol 0.50 Na2HPO4 0,86Na 2 HPO 4 0.86 KH2PO4 0,08KH 2 PO 4 0.08 TES1 0,20TES 1 0.20 N-Tris (hydroxymethyl) methyl-2-aminoethan sulphonic acidN-tris (hydroxymethyl) methyl-2-aminoethane sulphonic acid
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