DD228739A1 - METHOD FOR OBTAINING CELLULAR PARTICULAR RISISTS FACTORS - Google Patents

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DD228739A1 DD25038983A DD25038983A DD228739A1 DD 228739 A1 DD228739 A1 DD 228739A1 DD 25038983 A DD25038983 A DD 25038983A DD 25038983 A DD25038983 A DD 25038983A DD 228739 A1 DD228739 A1 DD 228739A1
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zepareth
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viral
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Peter Solisch
Helmut Bergmann
Harald Granzow
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Friedrich Loeffler Inst Insel
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Abstract

Das erfindungsgemaesse Verfahren zur Herstellung zellulaer-partikulaerer Resistenzfaktoren (ZEPARE) als Biotherapeutikum (ZEPARETH) ist eine Erfindung auf dem Gebiet der Zytologie mit dem Ziel physiologische Zellprodukte zur Substitutionstherapie in der Human- und Veterinaermedizin einzusetzen. ZEPARE sind charakterisiert durch Morphologie, Morphogenese, therapeutische Wirksamkeit sowie durch Unschaedlichkeit. Das aus embryonalen, aviaeren und kultivierten Zellen durch Reinigungs- und Anreicherungsverfahren hergestellte ZEPARETH findet Anwendung zur Therapie von Virus- und Tumorerkrankungen in der Human- und Veterinaermedizin.The method according to the invention for the production of cellulosic particulate resistance factors (ZEPARE) as a biotherapeutic (ZEPARETH) is an invention in the field of cytology with the aim of using physiological cell products for replacement therapy in human and veterinary medicine. ZEPARE are characterized by morphology, morphogenesis, therapeutic efficacy and safety. ZEPARETH, which is produced from embryonic, avian and cultured cells by means of purification and enrichment processes, is used to treat viral and tumor diseases in human and veterinary medicine.

Description

Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention

Die Erfindung betrifft die Nutzbarmachung eines neuen biologischen Wirkungsprinzips: Verfahren zur hochgereinigten Gewinnung von zellulär-partikulären Resistenzfaktoren (ZEPARE) und ihre Anwendung in der Human- und Veterinärmedizin als zellulär-partikuläres Resistenzfaktoren-Therapeutikum (ZEPARETH).The invention relates to the utilization of a new biological principle of action: a method for the highly purified recovery of cellular particulate resistance factors (ZEPARE) and their application in human and veterinary medicine as a cellular-particulate resistance factor therapeutic (ZEPARETH).

Charakteristika der bekannten technischen LösungenCharacteristics of the known technical solutions

Die vorliegenden Wirtschaftspatente mit Erfindungsansprüchen analoger Zielsetzung sind: DD 125 748, DD 137 785, DD 144 359, DD 145 705 und DD 156 667. Die in den genannten Erfindungen angegebenen Lösungswege wurden als Verfahren bezeichnet, die zur Gewinnung von Viren und von löslichen fetalen Proteinen geeignet sind. Ein wesentlicher Schritt dieser Verfahren ist die Anwendung von Detergenzien.The present commercial patents with claims of the invention analogous objectives are: DD 125 748, DD 137 785, DD 144 359, DD 145 705 and DD 156 667. The solutions indicated in the inventions mentioned were referred to as methods for obtaining viruses and soluble fetal Proteins are suitable. An essential step in these processes is the use of detergents.

Ziel der ErfindungObject of the invention

Oer nützliche Effekt der Erfindung, der im Vergleich zu den bereits bekannten Lösungen erreicht wird, besteht in Folgendem: ZEPARE werden insbesondere aus aviären, embryonalen, kultivierten oder aus permanenten, durch virale bzw. biochemische Stimuli angeregte Zellen oder anderen eukaryotischen Zellen gewonnen, gereinigt und zu einem Therapeutikum (ZEPARETH) aufgearbeitet, wobei Detergenzienbehandlung und infektiöse aber auch immunisierende Wirkungen von Viren weitgehend oder völlig vermieden werden muß. Diesem Vorgehen liegt die Absicht zugrunde ZEPARETH zur Behandlung von Tumor- und Viruserkrankungen des Menschen und der Nutztiere einzusetzen und Unschädlichkeit zu garantieren.The useful effect of the invention, which is achieved in comparison to the already known solutions, consists in the following: ZEPARE are obtained, purified and in particular from avian, embryonic, cultured or from permanent, stimulated by viral or biochemical stimuli cells or other eukaryotic cells prepared to a therapeutic (ZEPARETH), wherein detergent treatment and infectious but also immunizing effects of viruses must be largely or completely avoided. This approach is based on the intention to use ZEPARETH for the treatment of tumor and viral diseases of humans and livestock and to guarantee harmlessness.

Im Gegensatz zu bekannten Lösungen wird die Wirksamkeit durch die Anwendung physiologischer Substanzen und die Unschädlichkeit durch das Fehlen von dem Organismus fremden Informationsträgern (viraler Nukleinsäuren) bedingt.In contrast to known solutions, the effectiveness is due to the use of physiological substances and harmlessness due to the absence of foreign information carriers (viral nucleic acids) to the organism.

Wesen der ErfindungEssence of the invention

Der Erfindung liegt die ultrastrukturelle Beobachtung zugrunde, daß sich differenzierende, embryonale, permanente, blbphysikalfsch-biochemisch geschädigte ün’d virusinfizierte eukäryotische Zellen ZEPARE produzieren. ZEPARE werden repräsentiert durch 20 bis 60 nm große, sphärische Partikeln mit fakultativem elektronendichtem Innenkörper. Die Partikeln sind eingeiagert in eine wenig strukturierte oder stark elektronendichte Matrix und befinden sich in zytoplasmatischen Vakuolen. Die Bildung von ZEPARE scheint an den Membranen oder in deren Nähe zu erfolgen. Durch Öffnung der zytoplasmatischen Vakuolen / . oder durch Zellzerstörung gelangen ZEPARE in den extrazelluiären Raum, in einigen Fällen eingebettet in Zellresten. ZEPARE werden in ihrer Unversehrtheit durch Chioroformbehandlung verändert (Schädigung der Hülle). Ihre Reindarstellung ist durch Negativkantrastierung im Elektronenmikroskop feststellbar. Die Reindarstellung erfolgt nach Zelldestruktion, Abtrennung von andersartigen Zellbestandteiien und Konzentration. Ultrastrukturelle Vergleichsbeobachtungen (ZEPARE in Kapillarendothelzeilen des Myokard [Schwein, Schaf] bei Virusinfektion [Schweinepest, Rinderleukose], in BHK-21-Zellen nach MKS-Virusinfektion und Glukoseshift, in van der Maaten-Zeilen bei Reolikation von Rinderleukosevirus u. a.) und Therapieversuche (SOUSCH, P., BERGMANN, H., LIEBERMANN, H., HNO-Praxis 8, 113-117, 1983) führten zu der Bezeichnung „ZEPARE" und zu folgender Hypothese ihrer Funktion: ZEPARE sind hormonartige Sekretionsprodukte zur Wahrung bzw. Wiedererlangung des physiologischen intrazellulären Informationstransfer. Von der Zelle abgegeben dienen sie allen Zelien im System. ZEPARE bilden ein phylogenetisch ursprüngliches Prinzip zur Sicherung des physiologischen Ablaufes der Embryogenese, des Schutzes vor Onkogenen, Viren und anderen das zelluläre Informationssystem verändernder Einflüsse. Sie werden im Verlaufe der gesamten Labensspanne bei Säugern u. a. von Endothelzellen produziert. ZEPARE besitzen Interspezies-Wirksamkeit, ihre therapeutische Anwendung stellt eine biogene Substitutionstherapie dar.The invention is based on the ultrastructural observation that produce differentiating, embryonic, permanent, blbphysikalfsch-biochemically damaged ün'd virus-infected eukaryotic cells ZEPARE. ZEPARE are represented by 20 to 60 nm spherical particles with facultative electron-dense inner bodies. The particles are incorporated in a poorly structured or highly electron-dense matrix and are located in cytoplasmic vacuoles. The formation of ZEPARE seems to occur at or near the membranes. By opening the cytoplasmic vacuoles. or by cell destruction, ZEPARE enter the extracellular space, in some cases embedded in cell debris. ZEPARE are altered in their integrity by chloroform treatment (damage to the shell). Their pure representation is determined by negative Kantrastierung in the electron microscope. The purification is done after cell destruction, separation of different cell constituents and concentration. Ultrastructural comparative observations (ZEPARE in capillary endothelial cells of the myocardium [swine, sheep] in viral infection [swine fever, bovine leucosis], in BHK-21 cells after FMD virus infection and glucosathesis, in van der Maaten lines in rollover of bovine leucosis virus, etc.) and therapeutic trials (SOUSCH , P., BERGMANN, H., LIEBERMANN, H., ENT practice 8, 113-117, 1983) led to the name "ZEPARE" and to the following hypothesis of their function: ZEPARE are hormone-like secretion products for preserving or regaining the physiological Delivered from the cell, they serve all the cells in the system ZEPARE forms a phylogenetically original principle for ensuring the physiological course of embryogenesis, protecting against oncogenes, viruses, and other factors altering the cellular information system, and contributing them throughout the lab span Mammals produced by endothelial cells include Zepare's own Inters Pezies effectiveness, their therapeutic application is a biogenic substitution therapy.

Die Indikation für ZEPARETH lautet: Virusbedingte und tumoröse Erkrankungen. Es wurde gefunden, daß insbesondere aviäre, embryonale, kultivierte und stimulierte permanente Zellen ZEPARE in großen Mengen produzieren, daß diese mit Hilfe biophysikalischer und biochemischer Verfahren (Fällungen, Ultrazentrifugation u. a.) hochgereinigt dargesteilt und daß das zur Anwendung fertiggestelite Therapeutikum durch zusätzliche Inaktivierungsmaßnahmen von unerwünschten endogenen biologischen Informationsträgern freigehalten werden können.The indication for ZEPARETH is: viral and tumorous diseases. In particular, avian, embryonic, cultured and stimulated permanent cells have been shown to produce ZEPARE in large quantities, to be highly purified by biophysical and biochemical methods (precipitation, ultracentrifugation, etc.), and to provide the endogenous therapeutic by additional inactivation of undesirable endogenous agents biological information carriers can be kept free.

Anwendungsbeispiele ZEPARETH wird biotechnisch hergesteilt aus: A) Entenvollembryonen B) Kälbernieren C) BHK-21-Zellen D) van der Maaten-ZeilenExamples of use ZEPARETH is biotechnologically derived from: A) duck full embryos B) calf kidney C) BHK-21 cells D) van der Maaten cells

Das Herstellungsverfahren kann folgende Einzelschritte umfassen: Fragmentierung der Gewebe; Anlage von Zellkulturen in Rollereinrichtung; Bebrütung über das Schließen des Zellrasens hinaus; stimulierende Virusinfektion (z. B. apathogene Picornaviren) oder Glukoseshift bei permanenten Zellen (z. B. BHK-21 -Zellen); Ernte und Sedimentierung der Kulturzellen; Aufnahme des Sediments in serumfreier gepufferter Lösung; Aufschließung der Kulturzellen; Abtrennung unerwünschter Zellbestandteiie durch Gefrier-Tau-Zyklus oder anderer Verfahren und Zentrifugation; ZEPARE in der wäßrigen Phase; Ultrazentrifugation; Aufnahme des ZEPARE-Sediment in Tris-Puffer; Abtrennung letzter Fremdbestandteile durch Zentrifugation; Aufnahme des Überstandes; Inaktivierung; Annullierung von ZEPARETH; Prüfung auf Freisein von mikrobiellen Kontaminanten insbesondere von Viren; Prüfung auf Erhaltungszustand und Menge von ZEPARE im ZEPARETH. Gegenüber diesen einfachen Präparationsschritten sind auch moderne Verfahren derTrennung biogener Stoffe geeignet (HOSTETTMANN, K.r Naturwissenschaften 70,186-189, 1983).The manufacturing process may comprise the following individual steps: fragmentation of the tissues; Installation of cell cultures in roller equipment; Incubation beyond closing the cell lawn; stimulating viral infection (eg, apathogenic picornaviruses) or glucosic shift in permanent cells (eg, BHK-21 cells); Harvest and sedimentation of the culture cells; Absorption of the sediment in serum-free buffered solution; Unraveling of the cultural cells; Separation of unwanted cell components by freeze-thaw cycle or other methods and centrifugation; ZEPARE in the aqueous phase; ultracentrifugation; Uptake of ZEPARE sediment in Tris buffer; Separation of the last impurities by centrifugation; Recording the supernatant; inactivation; Cancellation of ZEPARETH; Testing for the absence of microbial contaminants, in particular viruses; Check for condition and quantity of ZEPARE in ZEPARETH. Modern methods of separating biogenic substances are also suitable in comparison with these simple preparation steps (HOSTETTMANN, K.r. Naturwissenschaften 70, 186-189, 1983).

Claims (1)

- 1 - 503 89- 1 - 503 89 Erfindungsanspruch:Invention claim: Verfahren zur Gewinnung zellulär-partikulärer Resistenzfaktoren als Therapeutikum gegen Virus- und Tumorerkrankungen, gekennzeichnet dadurch, daß eukariotische Zellen, insbesondere aviäre, embryonale kultivierte und durch Virusinfektion oder Giucoseshift stimulierte permanente Zellen in an sich bekannter Weise isoliert und gereinigt, vorzugsweise in Roiler- oder Suspensionskultur gewonnen, mit Ultraschall destruiert, anschließend in gepufferter physiologischer Salzlösung resuspendiert und von unerwünschten Zellbestandteilen durch Zentrifugation befreit werden, und daß das Sediment aus dem Überstand durch Ultrazentrifugation oder andere Trennungsverfahren abgetrennt und in gepufferte physiologische Salzlösung eingeleitet wird.A method for obtaining cellular-particulate resistance factors as a therapeutic against viral and tumor diseases, characterized in that eukaryotic cells, in particular avian, embryonic cultured and stimulated by virus infection or Giucoseshift permanent cells in a conventional manner isolated and purified, preferably in Roiler or suspension culture recovered, ultrasonically disrupted, then resuspended in buffered physiological saline and freed of undesired cell components by centrifugation, and the sediment is separated from the supernatant by ultracentrifugation or other separation techniques and introduced into buffered physiological saline. Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention Die Erfindung betrifft die Nutzbarmachung eines neuen biologischen Wirkungsprinzips: Verfahren zur hochgereinigten Gewinnung von zellulär-partikulären Resistenzfaktoren (ZEPARE) und ihre Anwendung in der Human- und Veterinärmedizin als zellulär-partikuläres Resistenzfaktoren-Therapeutikum (ZEPARETH).The invention relates to the utilization of a new biological principle of action: a method for the highly purified recovery of cellular particulate resistance factors (ZEPARE) and their application in human and veterinary medicine as a cellular-particulate resistance factor therapeutic (ZEPARETH). Charakteristika der bekannten technischen LösungenCharacteristics of the known technical solutions Die vorliegenden Wirtschaftspatente mit Erfindungsansprüchen analoger Zielsetzung sind: DD 125 748, DD 137 785, DD 144 359, DD 145 705 und DD 156 667. Die in den genannten Erfindungen angegebenen Lösungswege wurden als Verfahren bezeichnet, die zur Gewinnung von Viren und von löslichen fetalen Proteinen geeignet sind. Ein wesentlicher Schritt dieser Verfahren ist die Anwendung von Detergenzien.The present commercial patents with claims of the invention analogous objectives are: DD 125 748, DD 137 785, DD 144 359, DD 145 705 and DD 156 667. The solutions indicated in the inventions mentioned were referred to as methods for obtaining viruses and soluble fetal Proteins are suitable. An essential step in these processes is the use of detergents. Ziel der ErfindungObject of the invention Der nützliche Effekt der Erfindung, der im Vergleich zu den bereits bekannten Lösungen erreicht wird, besteht in Folgendem: ZEPARE werden insbesondere aus aviären, embryonalen, kultivierten oder aus permanenten, durch virale bzw. biochemische Stimuli angeregte Zellen oder anderen eukaryotischen Zellen gewonnen, gereinigt und zu einem Therapeutikum (ZEPARETH) aufgearbeitet, wobei Detergenzienbehandlung und infektiöse aber auch immunisierende Wirkungen von Viren weitgehend oder völlig vermieden werden muß. Diesem Vorgehen liegt die Absicht zugrunde ZEPARETH zur Behandlung von Tumor- und Viruserkrankungen des Menschen und der Nutztiere einzusetzen und Unschädlichkeit zu garantieren.The useful effect of the invention, achieved in comparison to the already known solutions, is as follows: ZEPAREs are obtained, purified and purified in particular from avian, embryonic, cultured or permanent cells stimulated by viral or biochemical stimuli or other eukaryotic cells prepared to a therapeutic (ZEPARETH), wherein detergent treatment and infectious but also immunizing effects of viruses must be largely or completely avoided. This approach is based on the intention to use ZEPARETH for the treatment of tumor and viral diseases of humans and livestock and to guarantee harmlessness. Im Gegensatz zu bekannten Lösungen wird die Wirksamkeit durch die Anwendung physiologischer Substanzen und die Unschädlichkeit durch das Fehlen von dem Organismus fremden Informationsträgern (viraler Nukleinsäuren) bedingt.In contrast to known solutions, the effectiveness is due to the use of physiological substances and harmlessness due to the absence of foreign information carriers (viral nucleic acids) to the organism. Wesen der ErfindungEssence of the invention Der Erfindung liegt die ultrastrukturelle Beobachtung zugrunde, daß sich differenzierende, embryonale, permanente, biöphysikalisch-biochemisch geschädigte "und virusinfizierte eukaryotische Zellen ZEPARE produzieren. ZEPARE werden repräsentiert durch 20 bis 60 nm große, sphärische Partikeln mit fakultativem elektronendichtem Innenkörper. Die Partikeln sind eingelagert in eine wenig strukturierte oder stark elektronendichte Matrix und befinden sich in zytoplasmatischen Vakuolen. Die Bildung von ZEPARE scheint an den Membranen oder in deren Nähe zu erfolgen. Durch Öffnung der zytoplasmatischen Vakuolen . odsr durch Zellzerstörung gelangen ZEPARE in den extrazellulären Raum, in einigen Fällen eingebettet in ZeNresten. ZEPARE werden .in ihrer Unversehrtheit durch Chioroformbehandlung verändert (Schädigung der Hülle). Ihre Reindarstellung ist durch Negativkantrastierung im Elektronenmikroskop feststellbar. Die Reindarsteliung erfolgt nach Zeildestruktion, Abtrennung von andersartigen Zallbestandteilen und Konzentration. Ultrastrukturelle Vergieichsbeobachtungen (ZEPARE in Kapillarendothelzeilen des iVtyokard [Schwein, Schaf] bei Virusinfektion [Schweinepest, Rinderleukose], in BHK-21 -Zellen nach MKS-Virusinfektion und Glukoseshift, in van der Maaten-Zeilen bei Replikation von Rinderleukosevirus u. a.) und Therapieversuche (SOLISCH, ?., BERGMANN, H., LIEBERMANN, H., HNO-Praxis8, 113-117, 1983) führten zu der Bezeichnung „ZEPARE" und zu folgender Hypothese ihrer Funktion: ZEPARE sind hormonartige Sekretionsprodukte zur Wahrung bzw. Wiedererlangung des physiologischen intrazellulären Informationstransfer. Von der Zelle abgegeben dienen sie allen Zelien im System. ZEPARE bilden ein phylogenetisch ursprüngliches Prinzip zur Sicherung des physiologischen Ablaufes der Embryogenese, des Schutzes vor Onkogenen, Viren und anderen das zelluläre Informationssystem verändernder Einflüsse. Sie werden im Verlaufe der gesamten Lebensspanne bei Säugern u. a. von Endothelzellen produziert. ZEPARE besitzen Interspezies-Wirksamkeit, ihre therapeutische Anwendung stellt eine biogene Substitutionstherapie dar.The invention is based on the ultrastructural observation that differentiating, embryonic, permanent, biophysically-biochemically damaged and virus-infected eukaryotic cells produce ZEPARE, represented by 20 to 60 nm spherical particles with an optional electron-dense inner body ZEPARE seems to form on or near the membranes, opening the cytoplasmic vacuoles, or destroying the cells, causing ZEPARE to enter the extracellular space, in some cases embedded in the cytoplasmic vacuole Zeife residues ZEPARE are modified in their intactness by chloroform treatment (damage to the shell) .The image of their purification can be determined by negative-tone scanning in an electronmicroscope spicy Zallbestandteilen and concentration. Ultrastructural comparisons (ZEPARE in capillary endothelial cells of the iVtyokard [pig, sheep] in viral infection [swine fever, bovine leucosis], in BHK-21 cells after FMD virus infection and glucose shift, in van der Maaten lines in replication of bovine leucosis virus, etc.) and therapeutic trials (SOLISCH , ?., BERGMANN, H., LIEBERMANN, H., ENT-Praxis8, 113-117, 1983) led to the name "ZEPARE" and to the following hypothesis of their function: ZEPARE are hormone-like secretion products for the preservation or recovery of the physiological intracellular Transferring information from the cell to all the cells in the system, ZEPARE is a phylogenetically original principle for ensuring the physiological course of embryogenesis, protection against oncogenes, viruses and other cellular information system-altering influences, over the entire lifespan of mammals produced by endothelial cells, etc. ZEPARE have Interspez ies effectiveness, their therapeutic application represents a biogenic substitution therapy. Die Indikation für ZEPARETH lautet: Virusbedingte und tumoröse Erkrankungen. Es wurde gefunden, daß insbesondere aviäre, embryonale, kultivierte und stimulierte permanente Zeilen ZEPARE in großen Mengen produzieren, daß diese mit Hilfe biophysikalischer und biochemischer Verfahren (Fällungen, Ultrazentrifugation u. a.) hochgereinigt dargestellt und daß das zur Anwendung fertiggestellte Therapeutikum durch zusätzliche Inaktivierungsmaßnahmen von unerwünschten endogenen biologischen Informationsträgern freigehalten werden können.The indication for ZEPARETH is: viral and tumorous diseases. In particular, avian, embryonic, cultured and stimulated permanent cells have been found to produce ZEPARE in large quantities, highly purified by biophysical and biochemical methods (precipitation, ultracentrifugation, etc.), and additional therapeutic inactivation of undesired endogenous therapeutic agents biological information carriers can be kept free. Anwendungsbeispieleapplications ZEPARETH wird biotechnisch hergestellt aus:ZEPARETH is biotechnologically manufactured from: A) EntenvollembryonenA) Duck full embryos B) KälbernierenB) Calf kidney C) BHK-21-ZellenC) BHK-21 cells D) van der Maaten-ZellenD) van der Maaten cells Das Herstellungsverfahren kann folgende Einzelschritte umfassen: Fragmentierung der Gewebe; Anlage von Zelikulturen in Rollereinrichtung; Bebrütung über das Schließen des Zellrasens hinaus; stimulierende Virusinfektion (z. B. apathogene Picornaviren) oder Glukoseshift bei permanenten Zellen (z. B. 8HK-21-Zellen); Ernte und Sedimentierung der Kulturzellen; Aufnahme des Sediments in serumfreier gepufferter Lösung; Aufschließung der Kulturzellen; Abtrennung unerwünschter Zellbestandteiie durch Gefrier-Tau-Zykius oder anderer Verfahren und Zentrifugation; ZEPARE in der wäßrigen Phase; Ultrazentrifugation; Aufnahme des ZEPARE-Sediment in Tris-Puffer; Abtrennung letzter Fremdbestandteile durch Zantrifugation; Aufnahme des Überstandes; Inaktivierung; Ampullierung von ZEFARETH; Prüfung auf Freisein von mikrowellen Kontaminanten insbesondere von Viren; Prüfung auf Erhaltungszustand und Menge von ZEPARE im ZEPARETH. Gegenüber diesen einfachen Präparationsschritten sind auch moderne Verfahren der Trennung biogener Stoffe geeignet (HOSTETTMANN, K., Naturwissenschaften 70, 186-189, 1983).The manufacturing process may comprise the following individual steps: fragmentation of the tissues; Installation of cell cultures in roller equipment; Incubation beyond closing the cell lawn; stimulating viral infection (eg, apathogenic picornaviruses) or glucosic shift in permanent cells (eg, 8HK-21 cells); Harvest and sedimentation of the culture cells; Absorption of the sediment in serum-free buffered solution; Unraveling of the cultural cells; Separation of unwanted cell constituents by freeze-thawing cycle or other methods and centrifugation; ZEPARE in the aqueous phase; ultracentrifugation; Uptake of ZEPARE sediment in Tris buffer; Separation of the last foreign components by Zantrifugation; Recording the supernatant; inactivation; Ampoule of ZEFARETH; Testing for the absence of microwaves contaminants, in particular viruses; Check for condition and quantity of ZEPARE in ZEPARETH. Compared with these simple preparation steps, modern methods of separating biogenic substances are also suitable (HOSTETTMANN, K., Naturwissenschaften 70, 186-189, 1983).
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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DE4435352A1 (en) * 1994-09-20 1996-03-28 Peter Dr Med Habil Solisch Medicines for the treatment of AIDS
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