CZ9904239A3

CZ9904239A3 - Kyanoamidiny jako inhibitory buněčné proliferace

Info

Publication number: CZ9904239A3
Application number: CZ19994239A
Authority: CZ
Inventors: Erik Rytter Ottosen
Original assignee: Leo Pharmaceutical Products Ltd. A/S (Lovens Kemiske Fabrik Produktionsaktieselskab)
Priority date: 1998-05-15
Filing date: 1998-05-15
Publication date: 2001-01-17

Abstract

Řešení se týká dosud neznámých sloučenin charakterizovaných vzorcem I, nebo jejich tautomerními formami, přičemž připojení pyridinového kruhu bývá v poloze 2, 3 nebo 4, a v kterých Rj představuje jeden nebo více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující vodík, halogen, amino, trifluorometyl, nitro, kyano, karboxy, nebo alkyl, alkoxy nebo alkoxykarbonyl substituenty, jejichž C atom pochází z polohy 1 až 4; Q představuje C4-C9 divalentní uhlovodíkový radikál, který může být alifatický, větvený, nasycený nebo nenasycený; X představuje metylen, kyslík, síru nebo dusík, a R představuje vodík nebo jeden či více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující hydroxy, amino, halogen, trifluorometyl, kyano, nitro, karboxy, karbamoyl, metylendioxy, nebo alkyl, alkoxy, alkylthio, alkylamino, nebo alkoxykarbonyl substituenty, jejich C atom pochází z polohy 1 až 4; ajejich farmaceuticky přijatelné netoxické sole a N-oxidy. Tyto sloučeniny mají význam v humánní i veterinární lékařské praxi při onemocněních charakterizovaných nežádoucí buněčnou proliferaci

Description

Kyanoamidiny jako inhibitory buněčné proliferace

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká dosud neznámé třídy sloučenin, která vykazuje silnou inhibiční aktivitu na nežádoucí buněčnou proliferací, například buněk kůže a nádorových buněk. Předkládaný vynález se dále týká farmaceutických preparátů obsahujících tyto sloučeniny, dávkovačích jednotek těchto preparátů a jejich použití v léčbě a profylaxi nemocí charakterizovaných abnormální buněčnou diferenciací a/nebo buněčnou proliferací, jako jsou například psoriáza a nádorové t

onemocnění.

Popis vynálezu

Sloučeniny předkládaného vynálezu jsou reprezentovány obecným vzorcem I

nebo jejich tautomerními formami, přičemž připojení pyridinového kruhu bývá v poloze 2, 3, nebo 4, a v kterých Ri představuje jeden nebo více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující vodík, halogen, amino, trifluorometyl, nitro, kyano, karboxy, nebo alkyl, alkoxy nebo alkoxykarbonyl substituenty, jejichž C atom pochází z polohy 1 až 4; Q představuje C4-C9 divalentní uhlovodíkový radikál, který může být alifatický, větvený, nasycený nebo nenasycený; X představuje metylen, kyslík, síru nebo dusík, a R představuje vodík nebo jeden či více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující hydroxy, amino, halogen, trifluorometyl, kyano, nitro, karboxy, karbamoyl, metylendioxy, nebo alkyl, •··· · ·· ·· alkoxy, alkylthio, alkylamino, nebo alkoxykarbonyl substituenty, jejichž C atom pochází z polohy 1 až 4.

Pokud předkládané sloučeniny obsahují jeden nebo více asymetrických uhlíkových atomů, mohou tvořit optické izomery nebo diastereomery. Předkládaný vynález zahrnuje také takovéto izomery i jejich směsi.

Sloučeniny mohou být použity ve formě jejich solí tvořených farmaceuticky přijatelnými anorganickými nebo organickými kyselinami, jako jsou například kyselina chlorovodíková, bromovodíková a jodovodíková, kyselina fosforečná, sírová, dusičná, 4-toluensulfonová, metansulfonová, mravenčí, octová, propionová, citrónová, vinná, jantarová, benzoová a maleinová.

Dokonce i v případě, že předkládané sloučeniny se po perorálním podání dobře absorbují, může být někdy výhodné připravit vhodné bioreverziblní deriváty sloučenin předkládaného vynálezu, tj . připravit takzvané pro-léky, nejlépe deriváty, jejichž fyzikálně-chemické vlastnosti vedou ke zlepšené rozpustnosti při fyziologickém pH, a/nebo ke zlepšené absorpci, a/nebo zlepšené bio-dostupnosti dané sloučeniny.

Takové deriváty jsou například pyridyl N-oxid deriváty sloučenin předkládaného vynálezu, které jsou připravovány oxidací pyridyl N vhodnou oxidační látkou, například kyselinou 3-chloroperbenzoovou v inertním rozpouštědle, například dichlormetanu.

Ke zlepšení fyzikálně-chemických vlastností a/nebo rozpustnosti daných sloučenin mohou být použity také jiné vhodné metody.

N-alkyl-N'-kyano-N-pyridylguanidiny, popsané v patentu United Kingdom Patent No. 1489879, jsou silnými aktivátory draslíkových kanálů s vyjádřeným prekapilárním vazodilatačním účinkem, snižujícím tak celkovou periferní rezistenci u zvířat • · i člověka. Tímto jsou tyto látky užitečné jako antihypertenzíva. Stejná biologická aktivita byla popsána pro celou řadu blízce příbuzných N-alkyl-N'kyanopyridinkarboxamidinů (Nakajima, T. et al., Chem. Pharm. Bull., 42, 2475-2490, (1994), a patent United States Patent č. 5,,3508). Jak je uvedeno v mezinárodním patentu International Patent No. PCT/DK93/00291, datum registrace 13. září 1993, Publication No. WO 94/06770, vedlo zavedení aryloxyobsahujících radikálů do alifatických skupin výše citovaného U.K. patentu ke vzniku sloučenin vykazujících specifičtější farmakologické účinky na izolované tkáně a buňky s žádnými nebo zanedbatelnými účinky na ⁸⁶Rb-eflux z draslíkových kanálů, ve srovnání se známými účinky sloučenin definovaných ve výše zmíněném U.K. patentu.

Sloučeniny předkládaného vynálezu inhibují proliferaci různých nádorových buněčných linií v kulturách v podobných koncentracích jako při použití nejúčinnějších známých sloučenin (srovnej s tabulkou 1). Avšak sloučeniny předkládaného vynálezu vedou ve srovnání se sloučeninami z předchozích studií k signifikantnímu prodloužení doby přežití u krys s nádorovým onemocněním, což z těchto sloučenin činí potencionálně užitečná antineoplastická chemoterapeutika.

Inhibice nádorové proliferace byla studována na různých typech lidských nádorových buněčných linií. Tyto zkoumané buněčné linie zahrnovaly buněčné linie malobuněčného plicního karcinomu (NYH) a karcinomu prsu (MCF-7) za použití následujícího obecného postupu:

Buňky byly kultivovány in vitro po dobu 24 hodin za přítomnosti sloučenin předkládaného vynálezu. DNA syntéza byla měřena pomocí inkorporace [3H] thymidinu a byl vypočítáván medián inhibičních koncentrací sloučenin (IC₅o) · Výsledky jsou uvedeny v Tabulce 1.

• · ·· ·· • · ·

Tabulka 1

Inhibice proliferace nádorových buněk in vitro u lidského malobuněčného karcinomu (NYH) a lidského karcinomu prsu (MCF-7) pomoci sloučenin následujících příkladů předkládaného vynálezu.

Sloučenina z	medián inhibičních koncentrací sloučenin (IC₅₀)
NYH	MCF-7
Příklad č.l	39	350
Příklad č.2	340	540
Příklad č.3	350	740
Předchozí studie A	Netestováno	10000
Předchozí studie B	380	920
Předchozí studie C	45	250

A: N^-kyano-NZ-oktyl-S-pyridinkarboxamidin, Chem. Pharm. Bull. 42, 2475-2490, (1994)

B: N-kyano-N'-(4-fenoxybutyl)-N-4-pyridylguanidin, příklad 14 v PCT/ DK93/00291

C: N-kyano-N'-(5-fenoxypentyl)-N-4-pyridylguanidin, příklad 18 v PCT/DK93/00291

Tyto výsledky ukazují, že sloučeniny předkládaného vynálezu jsou schopné inhibovat proliferaci nádorových buněk in vitro ve stejných nebo srovnatelných koncentracích než při použití sloučenin z předcházejících studií (viz tabulka 1).

Prodloužení doby přežití u krys s nádorovým onemocněním bylo studováno na LEW/Mol inbredních krysích samicích inokulovaných buňkami Yoshidova sarkomu v počtu 2xl0⁷ buněk. Krysám postiženým nádorovým onemocněním (6 zvířat ve skupině) byla perorálně podávána zkoumaná látka jednou denně od třetího dne po transferu nádorových buněk až do jejich úmrtí nebo zvýšení tělesné hmotnosti o 10% jako následek nádorové proliferace. Pro výpočet ILS (zlepšené přežití) byl použit průměr přežití ve dnech u léčených versus neléčených krys. ILS = ((průměr léčených/průměr kontrolních)-1)*100%. Výsledky jsou uvedeny v Tabulce 2.

Tabulka 2

Přežití krys postižených Yoshidovým tumorem léčených sloučeninou definovanou v Příkladu 1 předkládaného vynálezu.

Léčba	Sloučenina	Dávka (mg/kg, p.o. )	Zvýšené přežití (ILS)^#%
Žádná	-	-	0, 0'
Sloučenina definovaná v předkládaném vynálezu	Příklad č. 1	10	60
		20	90
		30	102
Předchozí studie C		50	35

#: ILS = ((průměr léčených/průměr kontrolních)-1)*100% *: Neléčená zvířata postižená nádorovým onemocněním umírají mezi sedmým a devátým dnem

Tyto výsledky ukazují, že sloučeniny předkládaného vynálezu jsou schopny prodloužit přežití u krys postižených Yoshidovým sarkomem při nižších koncentracích a s vyšší ILS než je tomu u sloučenin v příkladu 18 v patentu PCT/DK93/00291.

Sloučeniny předkládaného vynálezu jsou dobře tolerovány, nejsou toxické a vykazují popsané prospěšné aktivity s žádným nebo minimálním účinkem na systémový tlak krve. Tyto sloučeniny mohou být obecně podány perorálně, intravenózně, intraperitoneálně, intranazálně nebo transdermálně.

Předkládaný vynález se také týká metod přípravy požadovaných sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem I. Sloučeniny charakterizované vzorcem I mohou být snadno připraveny standardními postupy detailně známými v oboru. Na následujícím reakčním schématu jsou znázorněny použitelné postupy.

• · ·

Schéma 1: Syntéza sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem I

Rt

'0or

N—O=N

R or N

N—O=N

lile

ΟΝ— CebN lila

Illb

H₂N—Clil

R

N-Q-X

N—C=N

Ri, Q, X a R jsou definovány jako je popsáno pro sloučeniny charakterizované obecným vzorcem I (viz výše)

Poznámky ke schématu 1

a) Metanol, 20°C, 1-24 hodin (viz obecný postup 1)

Předkládané sloučeniny jsou zamýšleny k použití ve farmaceutických preparátech užitečných v léčbě výše zmíněných onemocnění.

Požadované množství sloučeniny charakterizované vzorcem (I) (tímto považované za aktivní složku) pro terapeutický efekt se samozřejmě liší v závislosti na specifické sloučenině, způsobu podání· a typu savce, který je léčen. Vhodná dávka sloučeniny charakterizované vzorcem (I) pro systémovou léčbu je 0,1 až 400 mg na kilogram tělesné váhy, nejlépe 1,0 až 100 na kilogram tělesné váhy, například 5 až 20 mg/kg; podáno jedenkrát či vícekrát denně. , • 9 9·· 9 9 9

999 9 9 9 9 9 •9 9 99999

9 9 9

Denní dávka (pro dospělé) může dosahovat 1 mg až 10000 mg, nejlépe 70-5000 mg, což ve veterinární praxi odpovídá dávkám od 0,1 až 400 mg/kg tělesné váhy.

Ačkoli je možné podávat aktivní složku samotnou jako nezpracovanou chemickou sloučeninu, je doporučováno podávat ji ve formě farmaceutického preparátu, který může být tvořen aktivní složkou ve koncentraci od 0,1% do 99% jeho váhy. Dávkovači jednotky preparátu obsahují mezi 0,5 mg a 1 g aktivní látky. Pro topické podání tvoří aktivní složka nejlépe od 1% do 20% váhy preparátu, ale aktivní složka může tvořit až 50% w/w. Preparáty vhodné pro nazální nebo bukální podání mohou obsahovat 0,1% až 20% w/w, například 2% w/w, aktivní složky.

Termínem „dávkovači jednotka,, je míněna jednotka, tj. jedna dávka, kterou je možno podat pacientovi a s kterou může být jednoduše manipulováno při zachováni fyzikální a chemické stability jednotkové dávky tvořené buď aktivním materiálem jako takovým, nebo jeho směsí s pevnými nebo tekutými farmaceutickými diluenty nebo nosiči.

Preparáty veterinární i pro použití v humánní medicíně, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, jsou tvořeny aktivní složkou s farmaceuticky přijatelným nosičem a případně dalšími složkami. Nosič (e) musí být „přijatelné,, ve smyslu kompatibility s ostatními složkami preparátů a nesmí mít škodlivé účinky pro příjemce takového preparátu.

Preparáty zahrnují formy vhodné pro perorální, rektální, parenterální (včetně subkutánního, intramuskulárního, intravenózního a intraperitoneálního) podání.

Preparáty mohou být snadno prezentovány ve formě dávkovačích jednotek a mohou být připraveny jakoukoli z metod známých ve farmacii. Všechny metody zahrnují krok navázání aktivní složky na nosič, který tvoří jednu nebo více složek. Obecně mohou být • · • ·· · ♦ flfl ·· • · · · ♦ · •·· fl · ···· • · · · · flflflflflfl • · · · · • · · ······· ·· flfl preparáty jednotně připraveny přidáním aktivní složky k tekutému nosiči, nebo rozdělit pevný nosič, a nebo použít obě metody, a poté v případě nutnosti upravit produkt do požadovaného preparátu.

Preparáty předkládaného vynálezu, které jsou vhodné k perorálnímu podání, mohou být ve formě oddělených jednotek jako jsou kapsle, sáčky, tablety nebo pastilky, každá obsahujíc předem určené množství aktivní složky; ve formě prášku nebo granul, ve formě roztoku nebo suspenze ve vodné nebo nevodné kapalině, nebo ve formě olejové emulze ve vodě, nebo vodné emulze v oleji. Aktivní složka může být také podána ve formě bolu, lektvaru, nebo pasty.

Preparáty určené pro rektální podání mohou být ve formě čípků obsahující aktivní složku a nosič, jako je například kakaové máslo, nebo mohou být ve formě náplavu.

Preparáty vhodné k parenterálnímu podání jsou tvořeny sterilním olejovým nebo vodným preparátem s aktivní složkou, která je nejlépe izotonická s krví příjemce preparátu.

Navíc k výše zmíněným složkám mohou preparáty tohoto vynálezu obsahovat jednu nebo více dalších složek, jako jsou například diluenty, pufry, dochucující látky, vazebné látky, povrchově aktivní látky, zpevňující látky, lubrikanty, konzervační látky, například metylhydroxybenzoát (včetně antioxidačních látek), emulzifikující látky a podobně.

Preparáty mohou dále obsahovat další terapeuticky aktivní sloučeniny, které jsou obvykle aplikovány v léčbě výše zmíněných patologických stavů, například antineoplastické látky, které mohou vést k synergickým účinkům na nádorové buňky.

• ·♦♦· · ·· ·· «« • · · ···· · · · · ···· · · · ·· · • · · · · · ······ • · · · · · ··· ··· ··· ···· ·· ··

Příklady provedení vynálezu

Předkládaný vynález bude nyní popsán následujícími obecnými postupy a příklady:

Příklady sloučenin I jsou zobrazeny v Tabulce 3.

Všechny body tání jsou neopraveny. Pro ¹³C NMR (nukleárně magnetická rezonanční) spektra (300 MHz) jsou citovány hodnoty chemického posunu (δ) pro roztoky deuteriochloroformu (CDC1₃) a hexadeuterodimetylsulfoxidu (DMSO-d₆) relativně k vnitřnímu tetrametylsilanu (δ 0,00) nebo chloroformu (¹³C NMR) (pokud není jinak specifikováno). Chromatografie byla provedena na silica gelu.

Tabulka 3

Příklady sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem I.

Sloučenina č.	Příklad Č.	2, 3 nebo 4 pyridyl	Ri	Q	X	R
101	1	3	H	(CH₂) ₆	0	4-Cl
102	2	3	H	(CH₂)₆	0	2-OCH3
103	3	3	H	(CH₂)s	O	3,4-0CH₂0
104	4	3	H	(ch₂)₆	O	2,4,6-tri-Cl
105	5	3	H	(CH₂)_s	0	4-F
106	6	3	H	(CH₂ ) 6	0	3,5-di-OCH;
107	7	3	H	(CH₂)₆	O	3-C1
108	8	3	H	(CH₂) 6	0	2-NO₂
109	9	3	H	(CH₂) 6	O	2-C1
110	10	3	H	(CH₂)₆	0	2,3-di-Cl
111	11	3	H	(CH₂) 6	0	4-Cl, 3-CH;
112	12	3	H	(CH₂)e	ch₂	H
113	13	3	H	(CH₂) 4	0	H
114	14	3	H	(CH₂) ₇	O	4-Cl
115	15	3	H	(CH₂) 5	0	4-Cl
116	16	2	H	(CH₂)6	0	4-Cl
117	17	4	H	(CH₂)₆	0	4-Cl

* ·· ·

Obecný postup 1: Spojení sloučenin charakterizovaných obecným

94 '44 4

9 9

499 44 9

9

49

vzorcem II se	sloučeninami	charakterizovanými obecným vzorcem
lila, Illb	nebo IIIc	vedoucí ke vzniku sloučenin

charakterizovaných obecným vzorcem I.

Sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem lila, Illb, nebo IIIc (5 mmol) byla rozpuštěna v metanolu (10 ml) a byla přidána sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem II (10 mmol) v metanolu (10 ml) . Reakční směs byla míchána při pokojové teplotě po dobu typicky 18 hodin. Poté byla reakční směs odpařena ve vakuu, což vedlo ke vzniku hrubého produktu. Tento hrubý produkt byl dále purifikován, například krystalizací nebo chromatograficky za vzniku sloučeniny uvedené v titulku.

Příklad 1:

N² - kyano-N¹- (6-(4-chlorofenoxy)hexyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 101)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(4-chlorofenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití metanolu/dichlormetanolu 1:20 jako eluentu s následným rozetřením látky v dietyléteru.

Mp (Bod tání): Sublimuje při 69°C.

¹³C NMR (CDCl₃):ó 168, 0, 157, 6, 152,5, 147,5, 135, 3, 129, 3,

128,7, 125, 4, 123, 6, 117, 1, 115, 8, 68, 0, 42,9, 29,0, 28,3,

26, 6, 25,7

Příklad 2:

Y-kyano-N¹- (6-(4-metoxyfenoxy) hexyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 102)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(4-metoxyfenoxy)hexylamin w · • · • · • ··· ·· • · • r · · « · ·

N-kyano-3Výchozí sloučenina

Illb:

Izopropyl pyridinkarboxyimidát

Mp (Bod tání): 87-88°C

42,8, 28,9

Příklad 3:

//-kyano-N¹- (6-(3, 4-metylendioxyfenoxy) hexyl) -3- pyridin karboxamidin (Sloučenina 103)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(3,4-metylendioxyfenoxy)hexylamin Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití metanolu/dichlormetanolu 1:20 jako eluentu s následnou krystalizaci z metanolu.

Mp (Bod tání): 130-131°C ¹³C NMR (CDC1₃) :δ 167,7, 154,0, 151,9, 147,8, 147,7, 140, 9,

135,4, 128, 6, 123, 4, 117,3, 107, 9, 105, 5, 100, 8, 97, 6, 68, 0,

41, 9, 28, 5, 27,5, 26,0, 25,1

Příklad 4:

A^-kyano-N¹- ( 6- (2,4, 6-trichlorfenoxy) hexyl) -3- pyridin karboxamidin (Sloučenina 104)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(2,4,6-trichlorfenoxy)hexylamin Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití etylacetátu jako eluentu s následnou krystalizaci z chloroformu/dietyléteru.

·9· 9 «

·· ♦ ·· «9 · • » • 9 • 9 99

Příklad 5:

Ař-kyano-AT¹- (6-(4-fluorofenoxy)hexyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 105)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(4-fluorofenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl V-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití dichlormetanu/ metanolu/amoniaku (aq.) 95:5:1 jako eluentu.

¹³C NMR (DMSO-d₆) :δ 167,8, 157, 9, 154, 9, 154,7, 153, 2, 152,3,

152,0, 147, 8, 135, 5, 128, 6, 123, 4, 117,3, 115,8, 115, 36, 115,5,

115.5, 67,8, 41, 9, 28, 5, 27, 5, 26, 0, 25,1

Příklad 6:

At-kyano-N¹-_(6- (3, 5-dimet oxy fenoxy) hexyl) -3-_pyridin karboxamidin (Sloučenina 106)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(3, 5-dimetoxyfenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl V-kyano-3pyridinkarboxyimidát

¹³C NMR (DMSO-ds) :δ 167, 7, 161,1, 160, 5, 152, 0, 147, 7, 135,4,

128.6, 123, 4, 117,3, 93,1, 92,7, 67, 3, 55, 0, 41, 9, 28,5, 27,5,

26, 0, 25,1

Příklad 7:

4 4 4 4 4 //-kyano-AZ¹- (6-(3-chlorofenoxy)hexyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 107)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(3-chlorofenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití dichlormetanu/ metanolu/amoniaku (aq.) 95:5:1 jako eluentu s následným rozetřením v dietyléteru.

Mp (Bod tání): 77-79°C ¹³C NMR (DMSO-ds) :δ 167,7, 159, 6, 152, 0, 147,8, 135, 5, 133,7,

130,7, 128, 6, 123, 4, 120, 2, 117,3, 114,3, 113, 5, 67, 7, 41,9,

28, 3, 27, 5, 26,0, 25,1

Příklad 8:

N²-kyano-N¹- (6-(2-nitrofenoxy)hexyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 108)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(2-nitrofenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Mp (Bod tání) : 103-106°C ¹³C NMR (DMSO-ds) :δ 167, 9, 152, 1, 151, 3, 147,9, 139, 7, 135, 6,

134,4, 128, 8, 124,9, 123, 5, 120, 4, 117, 4, 115, 1, 69, 1, 42,1,

28, 3, 27, 7, 26, 0, 25,0

Příklad 9:

• · · · • · • · « · · • · ·

T^-kyano-N¹- (6-(2-chlorofenoxy)hexyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 109)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(2-chlorofenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití dichlormetanu/ metanolu/amoniaku (aq.) 95:5:1 jako eluentu s následným rozetřením v chloroformu/dietylu 1:4.

Mp (Bod tání) : 108-109°C ¹³C NMR (DMSO-d₆) :δ 167, 9, 154,0, 152, 1, 147, 9, 135, 6, 129,9,

128,7, 128,3, 123, 5, 121, 4, 121,3, 117, 4, 113, 9, 68, 4, 42, 0,

28,4, 27,7, 26,1, 25,2

Příklad 10:

At-kyano-N¹-_(6-(2, 3-dichlorofenoxy) hexyl)_-3pyridinkarboxamidin (Sloučenina 110)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(2,3-chlorofenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Krystalizace z metanolu.

Mp (Bod tání): 141-142°C ¹³C NMR (DMSO-d₆) :δ 167, 7, 155, 5, 152, 0, 147, 8, 135, 5, 132,2,

128,6, 128,4, 123, 4, 121,8, 120, 0, 117, 3, 112, 2, 69, 0, 41, 9,

28,3, 27,5, 25, 9, 25,0

Příklad 11:

ftť-kyano-N¹-_(6- (4-chloro-3-me tyl fenoxy) hexyl)_-3pyridinkarboxamidin (Sloučenina 111)

• · ·

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(4-chloro-3-metylfenoxy)hexylamin Výchozí sloučenina Iiib: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Mp (Bod tání): 91-92°C ¹³C NMR (CDC1₃) :δ 167,9, 157,5, 152,4, 147,6, 136,9, 135,2,

129,5, 128,6, 125, 6, 123, 5, 117,2, 117, 0, 113,0, 67,9, 42, 8,

29, 1, 28,3, 26, 6, 25, 7, 20,3

Příklad 12:

^-kyano-N¹- (9-fenylnonyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina

112)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 9-fenylnonylamin

Výchozí sloučenina Iiib: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití dichlormetanu/ metanolu/amoniaku (aq.) 90:10:1 jako eluentu s následným rozetřením v pentanu.

Mp (Bod tání): 54-57°C ¹³C NMR (CDC1₃) :δ 167, 9, 152,5, 147,9, 142, 8, 135, 3, 128,7,

128,4, 128,2, 125, 6, 123, 5, 117, 1, 43, 0, 36, 0, 31,5, 29, 4,

29, 3, 29, 2, 28,4, 26,9

Příklad 13:

^-kyano-N¹-_(4-fenoxybutyl)_-3-_pyridinkarboxamidin (Sloučenina 113)

Obecný postup 1.

* · ·

Výchozí sloučenina II: 4-fenoxybutylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití dichlormetanu/ metanolu/amoniaku (aq.) 90:10:1 jako eluentu.

¹³C NMR (CDC1₃) :δ 168,0, 158, 6, 152,5, 147,6, 135,2, 129,6,

128,7, 123, 5, 121,0, 117,2, 114,5, 67,2, 42, 6, 26,6, 25,3

Příklad 14:

Ah-kyano-N¹- (7-(4-chlorofenoxy) heptyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 114)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 7-(4-chlorofenoxy)heptylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl N-kyano-3pyridinkarboxyimidát

Purifikace: Chromatografie za použití metanolu/dichlormetanu 1:20 jako eluentu.

¹³C NMR (DMSO-ds) :δ 167,9, 157, 4, 152, 0, 147, 7, 135, 4, 129, 1,

128,6, 123, 9, 123,4, 117, 3, 116, 1, 67, 7, 42,0, 28, 4, 28,3,

27,5, 26, 2, 25,3

Příklad 15:

A^-kyano-AZ¹- (5-(4-chlorofenoxy)pentyl) -3- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 115)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 5-(4-chlorofenoxy)pentylamin

Výchozí sloučenina Illb: Izopropyl AZ-kyano-3pyridinkarboxyimidát

¹³C NMR (DMSO-ds) :δ 167,8, 157,4, 152, 0, 147,7, 135, 4, 129, 1,

128,6, 124,0, 123,4, 117,3, 116,1, 67, 6, 41, 8, 28,1, 27, 3, 22,8 • · • · • ·

Příklad 16:

ΑΓ-kyano-N^{* 1}- (6- (4-chlorofenoxy)hexyl) -2- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 116)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(4-chlorofenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina lila: Metyl N-kyano-2-pyridinkarboxyimidát Purifikace: Rozetření v metanolu a dietyléteru.

Mp (Bod tání): 80-81°C ¹³C NMR (CDC1₃) :δ 160, 7, 157,7, 148,5, 147,3, 137,9, 129,3,

126,9, 125,4, 123, 1, 116, 8, 115,8, 68,0, 42,2, 29,3, 29,0,

26,5, 25,7

Příklad 17:

Y-kyano-N¹- (6-(4-chlorofenoxy) hexyl) -4- pyridinkarboxamidin (Sloučenina 117)

Obecný postup 1.

Výchozí sloučenina II: 6-(4-chlorofenoxy)hexylamin

Výchozí sloučenina IIIc: Izopropyl N-kyano-4-pyridin karboxyimidát

Purifikace: Rozetření v metanolu a dietyléteru.

Mp (Bod tání): 117-118°C

Příklad 18:

Kapsle kapsle obsahuje:

Ař-kyano-N¹- (6-(4-chlorofenoxy)hexyl) -3- pyridinkarboxamidin (aktivní sloučenina) Polyetylén glykol

100 mg 962 mg ·· ·

Želatinová kapsle č. 00 Želatina

122 mg

Příklad 19:

Tablety

Výroba 10000 tablet

I ň^-kyano-N^{1 II III}- (6-(4-chlorofenoxy)hexyl) -3- pyridin karboxamidin (aktivní sloučenina) 10,000 kg

Crosscarmellose sodium 0,300 kg

II Hydroxypropylmetyl celulóza, typ s nízkou viskozitou

0,200 kg

Sorbimacrogol oleát 0,010 kg

Purifikovaná voda q.s.

III Crosscarmellose sodium 0,200 kg

Koloidní bezvodá silica 0,050 kg

Magnesium stearát 0,050 kg

Směs I je dokonale promíchána ve vysoce účinném mixéru, namočena do směsi II a granulována do vytvoření vlhké hmoty. Vlhký granulát je vysoušen v sušičce při vstupní teplotě vzduchu 60°C až do dosažení aktivity granulátu ve vodě 0,3-0,4 (= v rovnováze se vzduchem o 30-40% R.H.).

Vysušený granulát je protlačen přes síto s velikostí otvorů 850 um.

Získaný granulát je nakonec smíšen se směsí III v kónickém mixéru. Hotový granulát je stlačen do tablet o hmotnosti 1071 mg a dostatečné tvrdosti.

Claims

1. Sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem I

PATENTOVÉ NÁROKY nebo její tautomerní formy, přičemž připojení pyridinového kruhu bývá v poloze 2, 3, nebo 4, a v kterých Ri představuje jeden nebo více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující vodík, halogen, amino, trifluorometyl, nitro, kyano, karboxy, nebo alkyl, alkoxy nebo alkoxykarbonyl substituenty, jejichž C atom pochází z polohy 1 až 4; Q představuje C₄-C₉ divalentní uhlovodíkový radikál·, který může být alifatický, větvený, nasycený nebo nenasycený; X představuje metylen, kyslík, síru nebo dusík, a R představuje vodík nebo jeden či více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující hydroxy, amino, halogen, trifluorometyl, kyano, nitro, karboxy, karbamoyl, metylendioxy, nebo alkyl, alkoxy, alkylthio, alkylamino, nebo alkoxykarbonyl' substituenty, jejichž C atom pochází z polohy 1 až 4; a jejich farmaceuticky přijatelné netoxické sole a Noxidy.

2. Sloučenina charakterizovaná vzorcem I patentového nároku 1, v které je pyridinový kruh připojen v pozici 3, a v kterém Ri představuje vodík; Q představuje C₄-C₉ divalentní uhlovodíkový radikál, který může být alifatický, větvený, nasycený nebo nenasycený; X představuje metylen, nebo kyslík a R představuje vodík nebo jeden či více substituentů, které mohou být stejné nebo různé a jsou vybrané ze skupiny obsahující halogen, trifluorometyl, kyano, nitro, karbamoyl, metylendioxy, nebo alkyl, alkoxy, nebo alkoxykarbonyl substituenty, jejichž C atom

9 9 9 9 9 * ·· 99 · · • · · · · · · 9 9 9 · • 999 · 9 9999 pochází z polohy 1 až 4; a jejich farmaceuticky přijatelné netoxické sole a N-oxidy.

3. Sůl definovaná v patentovém nároku 1, kde sůl je vybrána ze skupiny obsahující sole vytvořené kyselinou chlorovodíkovou, bromovodíkovou a jodovodíkovou, kyselinou fosforečnou, kyselinou sírovou, kyselinou dusičnou, kyselinou ptoluensulfonovou, kyselinou metansulfonovou, kyselinou mravenči, kyselinou octovou, kyselinou propionovou, kyselinou citrónovou, kyselinou vinnou, a kyselinou maleinovou, a dále solemi lithia, sodíku, draslíku, hořčíku a vápníku, stejně tak jako amonnými solemi, Ci_₆ alkylaminy, Ci-₆ alkanoaminy, prokainem, cykloalkylaminy, benzylaminy a heterocyklickými aminy.

4. Sloučenina definovaná v patentovém nároku 1, která je vybrána ze skupiny tvořené sloučeninami:

A^-kyano-Aí¹-(6-(4-chlorofenoxy) hexyl) -3- pyridinkarboxamidin; AA-kyano-N¹-(6-(2-chlorofenoxy) hexyl) -3- pyridinkarboxamidin; ΛΓ-kyano -A7¹- (6- (3,4-metylendioxyfenoxy) hexyl) -3pyridinkarboxamidin;

ΛΑ’-kyano-AZ¹-(6-(2-nitrofenoxy) hexyl) -3- pyridinkarboxamidin;

a jejich solemi a čistými enanciomerními formami.

5. Farmaceutický preparát obsahující sloučeninu definovanou v jakémkoli z patentových nároků 1-4, a to buď samotný, nebo dohromady s nezbytnými přídatnými látkami.

6. Metoda léčby pacientů potřebujících léčbu, která je charakterizována podáním účinného množství jedné nebo více sloučenin definovaných v jakémkoli z patentových nároků 1-5 řečeným pacientům, a pokud je to nezbytné společně nebo souběžně s jednou nebo více jinými terapeuticky účinnými látkami.

• 000 0 * 00 00 00

000 0000 0000

0000 0 0 0000 0 00 0 00000000 0 0 0 0 0 0

7. Metoda definovaná v patentovém nároku 6 pro léčbu a profylaxi nemocí charakterizovaných nežádoucí buněčnou proliferaci, například buněk kůže a nádorových buněk.

8. Metoda přípravy sloučeniny charakterizované vzorcem I a definované v patentovém nároku 1, v které sloučenina charakterizovaná obecným vzorcem Ha, lib nebo líc v kterých R_: je stejné, jako je uvedeno výše, je podrobena reakci se sloučeninou charakterizovanou obecným vzorcem II kde R je stejné, jako je uvedeno výše, v metanolu nebo jiném vhodném rozpouštědle při pokojové nebo vyšší teplotě

9. Použití sloučeniny definované v patentovém nároku 1 ve výrobě léku pro terapii a profylaxi řady onemocnění charakterizovaných nežádoucí buněčnou proliferaci, například buněk kůže a nádorových buněk.