CZ390697A3 - Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy, způsob jeho inhibování, cysteinová proteáza jím inhibovaná, farmaceutický prostředek, který ho obsahuje, způsob léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou, způsob jejího detegování a diaminová sloučenina - Google Patents

Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy, způsob jeho inhibování, cysteinová proteáza jím inhibovaná, farmaceutický prostředek, který ho obsahuje, způsob léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou, způsob jejího detegování a diaminová sloučenina Download PDF

Info

Publication number
CZ390697A3
CZ390697A3 CZ973906A CZ390697A CZ390697A3 CZ 390697 A3 CZ390697 A3 CZ 390697A3 CZ 973906 A CZ973906 A CZ 973906A CZ 390697 A CZ390697 A CZ 390697A CZ 390697 A3 CZ390697 A3 CZ 390697A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
peptidyl
group
carbon atoms
hydrogen
alkyl
Prior art date
Application number
CZ973906A
Other languages
English (en)
Inventor
Jeffrey Lee Klaus
David Rasnick
James T. Palmer
Elaine Yee-Lin Kuo
Original Assignee
Arris Pharmaceutical Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Arris Pharmaceutical Corporation filed Critical Arris Pharmaceutical Corporation
Publication of CZ390697A3 publication Critical patent/CZ390697A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/20—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carbonic acid, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/215—Radicals derived from nitrogen analogues of carbonic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/16—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom
    • C07C311/18—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/22—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with hetero atoms directly attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/26—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy, způsob jeho inhibování, cysteinová proteáza jím inhibovaná, farmaceutický prostředek, který ho obsahuje, způsob léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou, způsob jejího detegování a diaminová sloučenina
Oblast techniky
Tento vynález se týká reversibilního inhibitoru cysteinové proteázy, způsobu jeho inhibování, cysteinové proteázy, která je jím inhibována, farmaceutického prostředku, který obsahuje reversibilní inhibitor cysteinové proteázy, způsobu léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou, způsobu detegování cysteinové proteázy a diaminové sloučeniny.
Dosavadní stav vynálezu
Cysteinové nebo thiolové proteázy obsahují cysteinový zbytek v aktivním místě, které je zodpovědné za proteolýzu. Jelikož cysteinové proteázy jsou zahrnuty v četných onemocněních, včetně artritidy, muskulární dystrofie, zánětu, nádorové invaze, glomerulonefritidy, malarie a dalších infekcí pocházejících od parazitů, způsoby jejich selektivního a irreversibilního deaktivování poskytují příležitosti pro kandidáty nových léčivých přípravků. Viz například Esser R. E. a spol.: Arthritis and Rheumatism 37, 236 (1994), Meijers M.H.M. a spol.: Agents Actions 39 (zvláštní konferenční vydání), C219 (1993), Machleidt W. a spol.: Fibrinolysis 6, Suppl. 4, 125 (1992), Sloane B.F. a spol.: Biomed. Biochim. Acta 50, 549 (1991), Duffy M. J. : Clin. Exp. Metastasis 10, 145 (1992), Rosenthal P.J., Wollish W.S., Palmer J.T., Rasnick D.: J. Clin. Investigations 88, 1467 (1991), Baricos W.H. a spol.: Arch. Biochem. Biophys. 288. 468 (1991), Thornberry N.A. a spol.: Nátuře 356, 768 (1992).
Nízkomolekulární inhibitory cysteinových proteáz byly popsány Richem: Inhibitory proteinázy (kapitola 4: Inhibitory cysteinových proteináz), Elsevier Science Publishers (1986).
• · • · · ·
• ·· • · · • · · · • · · · • · · ·
Mezi tyto inhibitory patří peptidové aldehydy, které tvoří hemithioacetály s cysteinem aktivního místa proteázy. Viz například Cheng H., Keitz P. a Jones J.B.: J. Org. Chem. 59, 7671 (1994). Nevýhodou aldehydů je jejich in vivo a chemická nestabilita.
Způsoby selektivního a irreversibilního inhibování cysteinových proteáz spoléhají na alky láci peptidovými a-fluormethylketony [Rasnick D.: Anal. Biochem. 149. 416 (1985).], diazomethyl-ketony [Kirschke H., Shaw E.: Biphys. Res. Commun. 101, 454 (1981), acyloxymethyl-ketony [Krantz A. a spol.: Biochemistry 30. 4678 (1991) a Krantz A. a spol. : USA patent 5 055 451, vydaný 8. října 1991).] a ketosulfoniovými solemi [Walker B., Shaw E. : Fed. Proč. Fed. Am. Soc. Exp. Biol. 44., 1433 (1985).
Mezi další skupiny inhibitorů cysteinových proteáz patří epoxysukcinyl-peptidy včetně E-64 a jeho analog [Hanada K. a spol.: Agric. Biol. Chem. 42, 523 (1978), Sumiya S. a spol.: Chem. Pharm. Bull. 40, 299 (1992), Gour-Salin B.J. a spol.: J. Med. Chem. 36, 720 (1993), α-dikarbonylové sloučeniny, které souhrnně popisuje Mehdi S.: Bioorganic Chemistry 212. 249 (1993) a N-peptidyl-O-acyl-hydroxamáty [Bromme D., Neumann U., Kirschke H., Demuth H.-U.: Biochim. Biophys. Acta 1202. 271 (1993). Nedávno byly popsán další souhrn způsobů reversibilně a irreversibilně inhibující cysteinové proteázy, viz Shaw E.: Advances in Enzymology and Related Areas of Molecular Biology 63, 271 (1990).
Podstata vynálezu
Předmětem předloženého vynálezu je získat nové inhibitory cysteinové proteázy, které fungují reversibilně a vedou k těsné vazbě (nízké disociační konstanty) mezi inhibitorem a cílovým enzymem. Dalším předmětem je získat tyto nové inhibitory cysteinové proteázy pro použití v různých terapeutických aplikacích.
• · ·
V souladu s předcházejícími předměty jedno provedení podle předloženého vynálezu poskytuje reversibilní inhibitory cysteinové proteázy, které obsahují dva N-substituenty navázané ethylendiaminem nebo substituovaným ethylendiaminem, při čemž disociační konstanta inhibice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ a uvedené N-substituenty jsou vybrány ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulfinylu, sylfinyl-peptidylu, karbamoylu a karbamoyl-peptidylu.
Získává se také reversibilní inhibitor cysteinové proteázy obecného vzorce
A-N N—X r3 r«
V tomto aspektu A a X znamenají N-substituenty, které jsou vybrány ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulfinylu, sylfinyl-peptidylu, karbamoylu a karbamoyl-peptidylu. Rt znamená buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec a R2 znamená buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec. Avšak buď jak R1 tak R2 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituentů R, a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku. R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu. Disociační konstanta inhibice K( proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
Získávají se také reversibilní inhibitory cysteinové proteázy obecného vzorce
Dále se získávají reversibilní inhibitory cysteinové pro teázy obecného vzorce
Dále se získávají reversibilní inhibitory cysteinové proteázy obecného vzorce
V tomto aspektu n znamená číslo od 1 do 10, PG znamená chránící skupinu a AA znamená aminokyselinu. R1 znamená buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec a R2 znamená buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec. Avšak buď jak R, tak R2 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituentú R1 a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku. R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu. Skupina -SO2R9 znamená sulfonylovou skupinu. Disociační konstanta in5
hibice K, proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
Dále se získává reversibilní inhibitor cysteinové proteázy obecného vzorce
V tomto aspektu n znamená číslo od 1 do 10 a AA znamená aminokyselinu. R, znamená buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec a R2 znamená buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec. Avšak buď jak R1 tak R2 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituentu R1 a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku. R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu. Skupina -SO2R9 znamená sulfonylovou skupinu. Disociační konstanta inhibice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
Další aspekt tohoto vynálezu poskytuje reversibilní inhibitory cysteinové proteázy obecného vzorce
V tomto aspektu n znamená číslo od 1 do 10, PG znamená chránící skupinu a AA znamená aminokyselinu. R1 znamená buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec a R2 znamená buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec. Avšak • · · · · · · · · · · ♦· · · · • · · · · ···· • · · · · ······· ······ ··· ···· ·· ·· ··· ·· ·· buď jak R, tak R2 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituentů R, a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku. R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu. Skupina -SO^ znamená sulfonylovou skupinu. Disociační konstanta inhibice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
Další aspekt podle vynálezu poskytuje způsoby inhibování inhibitoru cysteinové proteázy, vyznačující se tím, že se reversibilně váže inhibitor cysteinové proteázy podle vynálezu na cysteinovou proteázu.
Další aspekt poskytuje cysteinové proteázy inhibované inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu.
Tento vynález dále poskytuje způsoby léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou tím, že se paceintovi podává terapeuticky efektivní dávka inhibitoru cysteinové proteázy podle vynálezu a farmaceutické prostředky obsahující inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu.
Tento vynález poskytuje také způsoby detegování cysteinové proteázy ve vzorku, vyznačující se tím, že zahrnuje testování vzorku na proteázovou aktivitu použitím proteázového substrátu. Vzorek se pak testuje na proteázovou aktivitu V přítomnosti známé koncentrace inhibitoru cysteinové proteázy a stanoví se množství cysteinové proteázy.
V následující části spisu jsou stručně popsány připojené obrázky.
Obrázky ΙΑ, 1B, 1C, ID, 1E, 1F, 1G, 1H, II, 1J, 1K, IL,
1M, IN, 10, IP, IQ, IR, 1S, 1T, 1U, IV, 1W, IX, 1Y, 1Z, 1AA,
1BB, 1CC a 1DD popisují struktury některých inhibitorů cysteinových proteáz podle vynálezu. Jsou uvedeny struktury, zkrácené názvy a kinatická data, jak jsou podrobněji popsány v příkladech. Kinetická data jsou uvedena v mikromolárních jednotkách.
·· ···· • ·
• ·· ·· • · · ♦ · · • · · · · • · ·· · · · • · · · • · · · · ♦·
Obrázek 2 popisuje schematickou syntézu inhibitore cysteinové proteázy s Rg substituenty na ethylendiaminových částech.
1. Karbonyldiimidazol, NH3/THF; 2. HCl/dioxan, CH2C12/ether; 3. RpSOgCl, triethylamin (TEA), THF; 4. LAH nebo vhodné redukční činidlo, THF, var pod zpětným chladičem; 5. HCl/dioxan, CH2C12/ /ether; PG-AA^-OH, NMM, IBCF, THF při -10 °C.
Obrázek 3 ukazuje schematickou syntézu inhibitore cysteinové proteázy s R2 substituenty na ethylendiaminových částech.
1. LíA1H4 (LAH) nebo vhodné redukční čindilo, THF, var pod zpětným chladičem; 2. HCl/dioxan, CH2Cl2/ether; 3. R^SOgCl, TEA, THF, -10 °C; 4. H2/Pd/C nebo vhodný katalyzátor, HCl/dioxan, EtOH; 5. PG—ΑΑ,-ΟΗ, N-methylmorfolin (NMM), isobutyl-chlorformiát (IBCF), THF, -10 °C.
Obrázek 4 ukazuje schematickou syntézu inhibitore cysteinové proteázy s R? a substituenty na piperazinových částech.
1. Aktivace kyseliny: pyr, TC, THF, -10 °C; 2. bis(trimethylsilyl)acetamid (BSA), TEA, THF; 3. HBr/AcOH; 4. TEA, EtOH; 5. LAH nebo vhodné redukční činidlo, THF, var pod zpětným chladičem;
6. HCl/dioxan, CH2Cl2/ether; 7. I^SO^l, TEA, THF; 8. H2/Pd/C nebo vhodný katalyzátor, EtOH; 9. pyr, TC, THF, -10 °C; 10. sloučenina 2, BSA, TEA, THF.
Obrázek 5 ukazuje schematickou syntézu inhibitore cysteinové proteázy s R1 a R6 substituenty na piperazinových částech. Stupeň 1 je aktivace kyseliny: pyridin (pyr), thionylchlorid (TC) , THF, při -10 °C; 2. bis (trimethylsilyl) acetamid (BSA), TEA, THF; 3. HBr/AcOH; 4. TEA, EtOH; 5. LAH nebo vhodné redukční činidlo, THF, var pod zpětným chladičem; 6. HCl/dioxan, CH2C12/ether; 7. pyr, TC, THF; 8. sloučenina 1, BSA, TEA, THF;
9. H2/Pd/C nebo vhodný katalyzátor, HCl/dioxan, Et2O; 10. Ιψ5Ο2Ο1, TEA, THF.
Podstata vynálezu
Předložený vynález se týká nových inhibitore cysteinové φφ · · · φ · · · φφ ·· φφ φ φφφφ φφφφ φ · φφ φ φφφφ φ φφφ φ φ φ φφφφ φ ······ φφφ φφφφ φφ φφ φφφ φφ φφ proteázy. Předpokládá se, že tento enzym je reversibilně inhibován prostřednictvím interakcí mezi N-blokujícími skupinami a skupinou R1 nebo Rg inhibitoru a povrchem vazebných míst enzymu vodíkovou vazbou a hydrofobními interakcemi.
Inhibitory podle předloženého vynálezu obvykle inhibuji cysteinové proteázy a neinhibují serinové, aspartylové a zinkové proteázy. Mechanismus působení serinové proteázy byl popsán Walshem C. v Enzymatic Reaction Mechanisms”, str. 94 až 97, W.H.Freeman and Co. , San Francisco 1979. Serin v aktivním místě reaguje s karbonylem substrátu za vzniku tetrahedrálního meziproduktu. Inhibitory podle tohoto vynálezu nemají karbonyl v místě ataku nukleofilu a nejsou citlivé na působení serinových proteáz.
V některých provedeních však mohou mít inhibitory proteáz podle předloženého vynálezu aktivitu proti jiným typům proteáz, jako jsou serinové, aspartylové a jiné metaloproteázy, ale v menším rozsahu. Proteázové inhibitory podle vynálezu mohou mít aktivitu zvláště proti serinovým proteázám, například vykazují aktivitu proti chymotrypsinu.
Cysteinové proteázy jsou skupinou proteáz, které v aktivním místě nesou thiolovou skupinu. Tyto proteázy se nalézají v bakteriích, virech, eukaryotických mikroorganismech, rostlinách a zvířatech. Cysteinové proteázy mohou být obecně klasifikovány jako proteázy patřící k jedné ze čtyř nebo více superskupin. Mezi příklady cysteinových proteáz, které mohou být inhibovány novými inhibitory cysteinových proteáz podle předloženého vynálezu, patří, ale bez omezení na ně, rostlinné cysteinové proteázy, jako je papain, ficin, aleurain, oryzain a aktinidin, savčí cysteinové proteázy, jako jsou kathepsiny Β, H, J, L, N, S, T, O, 02 a C (kathepsin C je znám také jako dipeptidyl-peptidáza I), enzym konvertující interleukin (ICĚ), neutrální proteázy aktivované vápníkem, kalpain I a II, bleomycinová hydroláza, virové cysteinové proteázy, jako je pikornian 2A a 3C, aftovirová endopeptidáza, kardiovirová endopeptidáza, ·· ···♦ ·· « ·· ·· * · · «··· ···· • ♦ ·· · ···· « ···· ···»·♦· ······ ··· ···· ·· ·· ··· ·♦ ·· komoviróvá endopeptidáza, polyvirové endopeptidázy I a II, adenovirová endopeptidáza, dvě endopeptidázy viru chestnut blight, togavirová cysteinová endopeptidáza, stejně jako cysteinové proteázy polio a rhinovirů, a cysteinové proteázy, o nichž je známo, Že jsou podstatné pro Životní cykly parazita, jako jsou proteázy z druha Plasmodia, Entamoeba, Ochocera, Trypansoma, Leishmania, Haemonchus, Dictyostelium, Therileria a Schistosoma, jako jsou ty, které souvisejí s malarií (P. falciparium), trypanosomy (T. cruzi, tento enzym je znám také jako kruzian nebo kruzipain), myší P. vinckei a C. elegans cysteinová proteáza. Pro rozšíření seznamu cysteinových proteáz, které mohou být inhibovány inhibitory cysteinových proteáz podle předloženého vynálezu, viz Rawlings a spol.: Biochem. J. 290, 205 (1993), který je zde výslovně zahrnut jako odkaz.
Inhibitory cysteinových proteáz jsou tedy užitečné v rozmanitých použitích. Inhbitory podle předloženého vynálezu se používají například pro kvantifikování množství cysteinové proteázy ve vzorku a používají se tedy v testech a diagnostických soupravách pro stanovení množství cysteinových proteáz v krvi, mízní tekutině, slinách nebo jiných vzorcích tkání vedle bakteriálních, houbových, rostlinných, kvasinkových, virových nebo savčích buněčných kultur. Ve výhodném provedení je tedy vzorek testován použitím standardního proteázového substrátu. Přidá se známá koncentrace inhibitoru cysteinové proteázy a nechá se navázat na příslušnou přítomnou cysteinovou proteázu. Pak se nechá znovu proběhnout test proteázy a ztráta aktivity se srovná s aktivitou cysteinové proteázy použitím způsobu dobře známých odborníkům z oblasti techniky.
Získává se tedy způsob inhibování proteázy, při čemž inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu se mohou přidávat ke vzorku cysteinové proteázy, takže vznikne komplex cysteinová proteáza/inhibitor cysteinové proteázy.
Inhibitory cysteinové proteázy jsou dále užitečné také pro odstranění, identifikování nebo inhibování znečišťujících cys·· ····
teinových proteáz ve vzorku. Například inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu se přidávají ke vzorkům, kde je nežádoucí proteolytická degradace znečišťujícími cysteinovými proteázami. Inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu se mohou také vázat na chromatografický nosič způsoby dobře známými v oblasti techniky. Vznikne tak afinitní chromatografická kolona. Vzorek obsahující nežádoucí cysteinovou proteázu se nechá proběhnout kolonou, aby se proteáza odstranila. Stejný způsob se může použít také k identifikování nových proteáz.
Ve výhodném provedení jsou inhibitory cysteinové proteázy užitečné pro inhibování cysteinových proteáz souvisejících s četnými onemocněními. Zvláště jsou inhibovány kathepsiny B, L a S, kruzain, kalpainy I a II a enzym konvertující interleukin 18·. Tyto enzymy jsou příklady lysosomálních cysteinových proteáz zahrnutých v širokém spektru onemocnění vyznačujících se degradací tkání. Mezi tato onemocnění patří, ale bez omezení na ně, atritida, muskulární dystrofie, zánět, invaze nádoru, glomerulonefritida, infekce pocházející od parazitů, Alzheimerova choroba, zánět dásní a rakovinové metastáze. Například savčí lysosomální thiolové proteázy hrají důležitou roli v intracelulární degradaci proteinů a v opracování některých peptidových hormonů. Enzymy podobné kathepsinům B a L se uvolňují z nádorů a mohou být zahrnuty v metastázi nádorů. Kathepsin L je přítomen v synoviální kapalině nemocného člověka a v transformovaných tkáních. Podobně je pozorováno uvolnění kathepsinu Ba dalších lysosomálních proteáz z polymorfonukleárních granulocytů a makrofágů u poranění a zánětu.
Inhibitory cysteinové proteázy nacházejí uplatnění také u mnoha jiných onemocnění, mezi něž patří, bez omezení na ně, zánět dásní, malárie, leischmanióza, filariáza, osteoporóza a ostoartritida a další bakteriální a parazitární infekce. Tyto sloučeniny nabízejí aplikace také u virových onemocnění, které jsou založeny na inhibování proteáz nutných pro virovou replikaci. Například mnohé pikornoviry, mezi něž patří poliovir, vir • Φ ···· φ φ · ·♦ φφ • φ · φ φφ φ φ φ φ • · · φ φ φ φ φ φ • φ · φ φ φ φ φφφ φ φ • ΦΦΦΦΦ φφφ • ΦΦ φφ φφ ··· φφ ·· způsobující onemocnění nohou a úst a rhinovirus, kódují cysteinové přoteázy, které jsou podstatné pro štěpení virových polyproteinů.
Tyto sloučeniny nabízají aplikaci také při poruchách zahrnujících enzym konvertující interleukin-ΐβ (ICE), cysteinovou proteázu odpovědnou za opracování interelukinu 15, například při léčení onemocnění na bázi zánětu a imunity plic, dýchacích cest, centrálního nervového systému a obklopujících membrán, očí, uší, kloubů, kostí, pojivových tkání, kardiovaskulárního systému včetně perikardu, gastrointestinálního a urogenitálního systému, kůže a mukózních membrán. Mezi tyto stavy patří infekční onemocnění, při nichž aktivní infekce existuje v kterémkoliv místě těla, jako je meningitida a salpingitida, komplikace infekcí včetně septického šoku, rozseté intravaskulární koagulace a/nebo syndromu úzkosti při dýchání u dospělých osob, akutního nebo chronického zánětu způsobeného antigenem, protilátkou a/nebo ukládáním komplementu, zánětlivých stavů včetně artritidy, chalangitidy, kolitidy, encefalitidy, endokarditidy, glomerulonefritidy, hepatitidy, myokarditidy, pankreatitidy, perikarditidy, reperfúzního poškození a vaskulitidy. Mezi onemocnění, která jsou založena na imunitě patří, ale bez Omezení na ně, stavy, které zahrnují T-buňky a/nebo makrofágy, jako je akutní a opožděná hypersenzitivta, odmítnutí štěpu a onemocnění štěp versus hostitel, autimunní onemocnění, která zahrnují diabetes melitus typu I a sklerózu multiplex. Inhibitory podle předloženého vynálezu mohou léčit také reabsorpce kostí a chrupavek a rovněž i onemocnění vedoucí k nadměrnému ukládání extracelulární matrice, jako je intersticiální pulmonární fibróza, cirhóza, systémová skleróza a tvorba keloidu. Tyto inhibitory mohou být užitečné také při léčení některých nádorů, které produkují IL 1 jako autokrinní růstový faktor a při prevenci kachexie související s některými nádory. Také apoptosa a smrt buněk souvisejí s ICE a ICE-podobnými aktivitami a mohou být léčeny inhibitory podle předloženého vynálezu.
Inhibitory cysteinové přoteázy podle předloženého vynálezu ···· • 4
4 se dále používají pro zesílení účinku léčivé látky. Například terapeutická činidla, jako jsou antibiotika nebo protinádorové léčivé látky, mohou být deaktivována proteolýzou endogenními cysteinovými proteázami, což způsobuje, Že podáváná léčivá látka je méně účinná nebo neaktivní. Například bylo ukázáno, že bleomycin, protinádorová látka, může být hydrolyzován bleomycinhydrolázou, cysteinovou proteázou [Sebti a spol: Cancer Res. 227 (leden 1991).]. Inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu mohou být tedy podávány pacientovi spolu s terapeutickým činidlem, aby se zesílila nebo zvýšila účinnost léčivé látky. Toto společné podávání může znamenat podávání simultánní, jako je například směs inhibitoru cystěinové proteázy a léčivé látky, nebo odděleně simultánní nebo postupné podávání.
Bylo ukázáno, že inhibitory cysteinové proteázy také inhibují růst bakterií, zvláště lidských pathogenních bakterií [Bjorck a spol.: Nátuře 337. 385 (1989).]. Inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu se tedy mohou používat jako antibakteriální činidla pro zpoždění nebo inhibování růstu některých bakterií.
Inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu nacházejí použití také jako činidla, která snižují poškození hostitelských organismů bakteriálními cysteinovými proteázami. Například Staphylococcus produkuje velmi aktivní extracelulázovou cysteinovou proteážu, která degraduje nerozpustný elastin, možná přispívající k destrukci pojivové tkáně, jak je vidět u bakteriálních infekcí, jako je septicemie, septická artritida a otitida. Viz Potempa a spol.: J. Biol. Chem. 263(6), 2664 (1988) . ]. Inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu se tedy mohou používat pro léčení bakteriálních infekcí pro zabránění poškození tkáně.
Předložený vynález obecně poskytuje nové peptidomimetické a od peptidů odvozené inhibitory cysteinové proteázy pro použití jako reversibilní inhibitory cysteinové proteázy. Pojem inhibitor cysteinové proteázy, jak je zde používán, znamená ta13
·· • ••v ·♦ · ·· « ·
• · * • • • · • · • •
• • • • • • · • ·
• • · • • » • · · · • •
• • · • • • • • •
• · · · • · • · ·· · • · • ·
kový inhibitor, který inhibuje cysteinové proteázy. Ve výhodném provedení inhibitory cysteinové proteázy znamenají inhibitory specifické pro cysteinové proteázy. To znamená, že neinhibují jiné typy proteáz, jako je serinová, aspartylová nebo jiné metal loproteázy. V jiných provedeních však inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu mohou inhibovat rovněž jiné typy proteáz. Například mohou být účinné proti serinovým proteázám.
Pojem reversibilní, jak se zde používá, znamená, že se inhibitor váže nekovaletně na enzym a je odlišován od irreversibilní inhibice. Viz Walsh: Enzymatic Reaction Mechanisme, Freemen and Co., N.Y. 1979. Reversibilní v této souvislosti znamená pojem, kterému rozumí odborníci z oblasti techniky. Reversibilní inhibitory cysteinové proteázy navíc znamenají kompetitivní inhibitory, to znamená, že soutěží se substrátem v reversibilním navázání na enzym, při čemž navázání inhibitoru a substrátu je vzájemně výlučné. Stechiometrie inhibice je navíc 1:1, to znamená, že jedna molekula inhibitoru postačuje pro inhibici jedné molekuly enzymu.
Pokud není jinak uvedeno, následující pojmy, používané v tomto popisu a nárocích, jsou definovány pro účely této přihlášky a mají významy uvedené níže:
Alkyl, jako ve slovech alkyl, alkyoxyskupinu, alkylthioskupina, alkylsulfonyl, alkylkarbamoyl, dialkylkarbamoyl, heteroarylalkyl, arylaiky1 a podobně, znamená přímou nebo rozvětvenou, nasycenou nebo nenasycenou uhlovodíkovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku nebo s uvedeným počtem atomů uhlíku (např. methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sek.butyl, isobutyl, terč, butyl, vinyl, allyl, 1-propenyl, isopropenyl, 1-butenyl,
2-butenyl, 3-butenyl, 2-methylallyl, ethinyl, 1-propinyl,
2-propinyl atd.).
Cykloalkyl, jako ve slovech cykloalkyl a cykloalkylalkyl, znamená nasycenou nebo nenasycenou, monocyklickou nebo polycyklickou uhlovodíkovou skupinu se 3 až 20 atomy uhlíku nebo ·· ···· s uvedeným počtem atomů uhlíku, při čemž atom uhlíku s volnou vazbou znamená člen nearomatického kruhu, a jakýkoliv jeho kar bocyklický ketonový nebo thioketonový derivát (např. pojem cykloalkyl zahrnuje cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexy 1, cyklohexeny1, bicyklo[2.2.2]okty1, 1,2,3,4-tetrahydro-1-naftyl, oxocyklohexyl, dioxocyklohexyl, thiocyklohexyl, 9-fluorenyl atd.).
Heterocykloalkyl, jako vé slovech heterocykloalkyl, heterocykloalkylalkanoylaminová, herocykloalkylkarbonyl a podobných, znamená cykloalkyl jak shora uvedeno, při čemž 1 až 5 z uvedených atomů uhlíku je nahraženo heteroatomem, který je vybrán z atomu dusíku, kyslíku, síry, fosforu nebo arsenu, při čemž atom s volnou valencí znamená člen nearomatického kruhu, a jakýkoliv jejich derivát heterocyklického ketonu, thioketonu sulfonu nebo sulfoxidu (např. pojem heterocykloalkyl zahrnuje piperidyl, pyrrolidinyl, pyrrolinyl, imidazolidinyl, indolinyl, chinuklidinyl, morfolinyl, piperazinyl, N-methylpiperazinyl, piperadinyl, 4,4-dioxo-4-thiapiperidinyl, 1,2,3,4-tetrahydro-3-isochinolyl, 2,4-diaza-3-oxo-7-thia-6-bicyklo[3.3.0]oktyl atd.). Heterocykloalkyl se 6 atomy uhlíku tedy zahrnuje morfolinyl, piperazinyl, piperidinyl a podobné.
Aryl znamená aromatickou monocyklickou nebo polycýklickou uhlovodíkovou skupinu se 6 až 14 atomy uhlíku nebo s označeným počtem atomů uhlíku a jakýkoliv její karbocyklický ketonový nebo thioketonový derivát, při čemž atom uhlíku s volnou valencí znamená člen aromatického kruhu (např. aryl zahrnuje fenyl, naftyl, antracenyl, fenantrenyl, 1,2,3,4-tetrahydro-5-naftyl, 1-oxo-l,2-dihydro-5-naftyl, l-thioxo-l,2-dihydro-5-naftyl atd.). Pro účely této přihlášky aryl zahrnuje heteroaryl. Heteroaryl znamená aromatickou monocyklickou nebo polycyklickou uhlovodíkovou skupinu s celkem 5 až 14 atomy nebo s vyznačeným počtem atomů, při čemž 1 až 5 vyznačených atomů uhlíku je nahrazeno heteroatomem vybraným z atomu dusíku, kyslíku, síry, fosforu nebo arsenu, při čemž atom s volnou valencí znamená člen aromatického kruhu, a jakýkoliv jeho heterocyklic•··· ·· φ ··«· φ φ φφφ φ · · φ φ φ · φ φφφφ • φ φ φ · φ φφφφ φ φ φ φ φ φ φφφ φ · φ · φφφ «· · · ký ketonový nebo thioketonový derivát (např. pojem heteroaryl zahrnuje thienyl, furyl, pyrrolyl, pyrimidinyl, isoxazolyl, oxazólyl, indolyl, benzo[b]thienyl, isobenzofuranyl, purinyl, isochinolyl, pteridinyl, pyrimidinyl, imidazolyl, pyridyl, pyrazolyl, pyrazinyl, 4-oxo-l,2-dihydro-l-naftyl, 4-thioxo-l,2-dihydro-l-naftyl atd.). Heteroaryl se 6 atomy uhlíku tedy zahrnuje pyridyl, pyrimidinyl a podobné skupiny.
1,2-Fenylendimethylen znamená dvojvaznou skupinu obecného vzorce -CH2Č^H4CH2-. Například skupina obecného vzorce R13-Y-Z-X3, v níž Y znamená -N(RU), Z znamená -CH(R16)-, X3 znamená karbonyl a R14 společně s R16 tvoří 1,2-difenylendimethylen, znamená l,2,3,4-tetrahydro-3-isochinolylkarbonyl a jeho substituované deriváty a jednotlivé stereoisomery a směsi stereoisomerů. Substituované deriváty 1,2-fenylendimethylenové dvojvazné skupiny mohou obsahovat hydroxyskupinu na jakémkoliv atomu uhlíku v kruhovém systému nebo oxoskupinu na kterémkoliv atomu uhlíku nenasyceného kruhu.
Methylen, jako v methylen se 3 až 4 atomy uhlíku nebo methylen se 3 až 7 atomy uhlíku, znamená přímou, nasycenou, dvojvaznou skupinu s uvedeným počtem atomů uhlíku. Například methylen se 3 až 4 atomy uhlíku zahrnuje trimethylen(-(CH2)3-) a tetramethylen(-(CH2)4-). Skupina obecného vzorce R13-Y-Z-X3-, v níž Y znamená -N(R14), Z znamená -CH(R16)-, X3 znamená karbonyl a Ru společně s R16 tvoří trimethylen, znamená 2-pyrrolidinylkarbonyl a jeho jednotlivé stereoisomery a směsi stereoisomerů. Substituované deriváty trimethylenové a tetramethylenové dvojvazné skupiny mohou obsahovat hydroxyskupinu nebo její chráněný derivát nebo oxoskupinu na kterémkoliv z atomů uhlíku kruhu. Vhodné chránící skupiny hydroxyskupiny jsou uvedeny níže.
Oxamethylen se 3 až 7 atomy uhlíku a azamethylen se 3 až 7 atomy uhlíku znamená shora uvedený methylen, v němž je označený atom uhlíku nahrazen atomem kyslíku nebo dusíku. Například oxamethylen s 5 atomy uhlíku zahrnuje 3-oxapentamethylen (-CH2CH2OCH2CH2-) a 2-oxapentamethylen (-CH2OCH2CH2CH2-) .
φφ ···· φ φ φ ·· φφ · · · · · · · · · • · φ·· φφφφ φ φφφ φ φ φ φφφφ φ φφφ · · φ φφφ φφφφ φ« ·φ φφφ φφ ··
Skupina, obecného vzorce -CfOJNR^R,, tedy znamená 4-morfolinylkarbonylovou skupinu, když Rw a Rn spolu tvoří 3-oxapentamethylen a 1-piperazinylkarbamoylovou skupinu, když R10 a RT1 spolu tvoří 3-azapentamethylen.
'•Přilehlý'’, jak se používá ve spojení R16 společně s přilehlým Ru, znamená, že atomy, na které jsou R16 a Ru napojeny, jsou dále spolu navzájem spojeny.
V nej širším provedení inhibitory cystě lnové proteázy podle předloženého vynálezu obsahují dva N-substituenty spojené ethylendiaminovou nebo piperazinovou skupinou.
Mezi vhodné N-substituenty patřím ale bez omezení na ně, acyl, alkyloxykarboyl, sulfonyl, sulfamoyl, peptidy1, karbamoyl, sulfinyl, aralkyl nebo atom vodíku nebo jejich kombinace, které zahrnují, ale bez omezení na ně, acyl-peptidyl, alkyloxykarbonyl-peptidyl, sulf ony 1-peptidyl, sulfamoyl-peptidyl, karbamoyl-peptidy 1 a sulfinyl-peptidyl.
Ve výhodném provedení reversibilní inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu obsahují prostředky obecného vzorce 1
Ra (1)·
V tomto provedení A a X znamenají N-substituenty vybrané ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, karbamoylu, karbamoyl-peptidylu, sulfinylu a sulfinyl-peptidylu. R1 a R2 znamenají atom vodíku nebo aminokyselinový řetězec, při čemž *· ···· · · · ·· ·· • · · ···· ···» • « · · · ···· • ♦ · 9 · ··«···· ·····* 9 9 9
9999 99 99 999 99 99 pouze jeden z nich znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku. R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu svázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu.
Acyl zde znamená skupinu -COR7. Mezi vhodné skupiny R? patří, ale bez omezení na ně, alkyl (tvořící alkanoyl), cykloalkyl (tvořící cykloalkylkarbonyl), cykloalkylaiky1, cykloalkylalkenyl, aryl (tvořící aroyl) nebo aralkyl. V tomto případě alkyl s výhodou znamená alkyl se 3 až 5 atomy uhlíku, zvláště ethyl. Cykloalky1 znamená skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, s výhodou cyklopentyl nebo cyklohexyl. Cykloalkylaiky1 nebo cykloalkylakenyl s výhodou znamená skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalkylu, zvláště s 5 nebo 6 atomy uhlíku, a s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště s 1 atomem uhlíku, v jejich alkylové nebo alkylenové části. Heterocykloalkyl (tvořící heterocykloalkylkarbonyl) je rovněž výhodný, popřípadě substituovaný skupinou vybranou z hydroxylu, alkylu, heterocykloalkylu, alkanoylu, alky loxykarbonylu, arylalkyloxykarbonylu a heterocykloalkylkarbonylu. Aryl s výhodou znamená fenyl. Aralkyl s Výhodou znamená fenylalkyl se 7 až 12 atomy uhlíku, zvláště benzyl. Případnými substituenty arylové nebo aralkylové části jsou jeden nebo dva alkyly s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 5 atomy uhlíku, atom halogenu s atomovým číslem od 9 do 35, hydroxyl a/ /nebo aminová skupina, s výhodou jeden nebo dva methyly, methoxyskupiny, atomy chloru, bromu nebo fluoru, hydroxyly nebo aminové skupiny, zvláště jeden hydroxyl, aminová skupina, atom chloru, bromu nebo fluoru, popřípadě v chráněné formě, jestliže je to vhodné, nitroskupina, alkyl nebo arylsulfonyl nebo atomem halogenu substituovaný alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště trifluotmethyl. Patří sem také perfluorskupiny, jako je perfluor-alkyl, aryl a aralkyl.
Zvláště výhodnou skupinou R? je: 1. alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, s výhodou ethyl, 2. cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku, s výhodou cyklopentyl nebo cyklohexyl, 3. cykloalkyl(se 3 až atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku), zvláště cykloalt· · · · · · kyl(s 5 až 6 atomy uhlíku)-methyl, 4. cykloalkyl(se 3 až 7 atomy uhlíku)alkenyl(s 1 až 5 atomy uhlíku), zvláště cykloalkyl (s 5 až 6 atomy uhlíku)-methylen, 5. fenyl, 6. fenylalkyl se 7 až 12 atomy uhlíku, zvláště benzyl, 7. aryl nebo aralkyl substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, atomu halogenu, hydroxylu a aminové skupiny, s výhodou jednou nebo dvěma skupinami vybranými z methylu, methoxyskupiny, atomu chloru, bromu a fluoru, hydroxylu a aminové skupiny, výhodněji hydroxylem, aminovou skupinou nebo atomem chloru, bromu nebo fluoru, 11, aryl nebo aralkyl substituovaný jedním nebo dvěma halogenem substituovanými alkyly s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště trifluormethylem, nitroskupinou, sulfonylem nebo arylsulfonylem, jestliže je to vhodné, pak v chráněné formě, 12. perfluorskupiny, jako je perfluor-alkyl, aryl a aralkyl. Mezi nejvýhodnější acylové skupiny R7 patří fenyl a 4-morfolinyl.
Výhodnými acylovými skupinami jsou alkyloxykarbonylalkanoyl, arylalkanoyl, aroyl a alkanoyl (popřípadě substituované skupinou vybranou z kar boxy skupiny, alkyloxykarbonylu a heterocykloalkylakanoylaminové skupiny) , cykloalkylkarbonyl, heterocykloalkylkarbonyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z hydroxylu, alkylu, heterocykloalkylu, alkanoylu, alkyloxykarbonylu, arylalkyloxykarbonylu a heterocykloalkylkarbonylu), arylalkanoyl a aroyl.
”Acyl-peptidyl nebo peptidyl-acyl zde znamená peptidylovou skupinu navázanou na acylovou skupinu. Tomu je třeba rozumět tak, že peptidylová skupina je navázána na jeden z atomů dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové části a acylová skupina je navázána na peptidylovou skupinu. Volnou koncovou funkcí acyl-peptidylové skupiny je tedy skupina R?. Pořadí funkcí se tedy liší podle toho, jestli A nebo X znamená acyl-peptidyl, tato skupina se nazývá acyl-peptidyl, jestliže popisuje skupinu A, a peptidyl-acyl, jestliže popisuje skupinu X. Obecný vzorec 2 ukazuje inhibitor cysteinové proteázy s acyl-peptidylovou skupinou v poloze A a peptidyl-acylovou skupinu v poloze X, při to čemž n znamená číslo od 1 do 10.
• to
• · · ·· ·«
II e-—r7 (2)
Jak je shora uvedeno, výběr peptidylových skupin bude záviset na proteáze, která má být inhibována.
Peptidyl zde znamená peptidovou nebo peptidomimetickou strukturu. V některých provedeních peptidyl znamená jedinou aminokyselinu. V jiných provedeních peptidylová skupina obsahuje alespoň dvě aminokyseliny spojené peptidovou vazbou nebo isosterem. Peptidylová skupina může obsahovat až 10 aminokyselin, výhodná je 1 až 7 aminokyselin, i když inhibitory cysteinové proteázy mají obvykle délku od 1 do 4 aminokyselin, protože v terapeutických aplikacích jsou obvykle žádány menší inhibitory.
Peptidylová skupina může obsahovat přirozeně se vyskytující aminokyseliny a peptidové vazby nebo syntetické peptidomimetické struktury, tj. analogy”. “Aminokyselina, zbytek peptidu nebo peptidyl, jak se zde tyto pojmy používají, tedy znamenají jak přirozeně se vyskytující tak syntetické aminokyseliny, tj. analogy aminokyselin. Například pro účely podle vynálezu lze homo-fenylalanin považovat za aminokyselinu. Aminokyselina zahrnuje také zbytky aminokyselin, jako je prolin nebo hydroxyprolin. Tento pojem, jak se zde používá, se týká také částí aminokyselin, jako je aminokyselinový postranní řetězec. Rv R2, R5, R6 a R16 mohou tedy například znamenat aminokyselinové postranní řetězce, které zahrnují přirozeně se vyskytující aminokyselinové postranní řetězce stejně jako nepřirozeně se vyskytující analogy postranních řetězců, jak jsou zde popsány. Postranní řetězce mohou mít buď (R) nebo (S) konfigura4· ···· «·« · • 4· € · · · ·4 • 4« ·«4 ci. Ve výhodném provedení jsou aminokyseliny v (S) nebo L-konfiguraci.
Jestliže se používají nepřirozeně se vyskytující postranní řetězce, t.j. analogy aminokyselin, mohou se používat neaminokyselinové substituenty, například pro zabránění nebo zpoždění in vivo degradace. Mezi tyto ne-aminokyselinové substituenty normálně patří, ale bez omezení na ně, alkyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z hydroxylu, alkyloxyskupiny, aminové skupiny, alkylaminové skupiny, dialkylaminové skupiny, ureidoskupiny, alkylureidoskupiny , merkaptoskupiny, alkylthioskupiny, kar boxy skup iny, karbamoylu, alkylkarbamoylu, dialkylkarbamoylu, alkylsulfinylu, alkylsulfonylu, guanidinové skupiny, skupiny —P(0) (OR12)2-, —OP(O) (OR12)2 nebo -0P(0) (R12)2, v nichž každý R12 nezávisle znamená atom vodíku nebo alkyl nebo jeho chráněný derivát), cykloalkyl, cykloalkylalkyl, cykloalkylalkenyl, skupina vybraná z arylu (včetně heteroarylu) a arylalkylu (včetně heteroarylalkylu a heteroarylalkenylu) (které mohou být popřípadě na svém arylovém kruhu substituovány jednou až třemi skupinami vybranými z hydroxylu, aminové skupiny, guanidinové skupiny, atomu halogenu, alkylu popřípadě substituovaného atomem halogenu, alkyloxyskupiny a arylu, nebo jejich chráněného derivátu) , alkoxyskupina, kyanová skupina, karboxyskupina, alkyloxykarbonyl, alkanoyl, karbamoyl, alkylkarbamoyl, dialkylkarbamoyl, alkyloxy(alkyl)karbamoyl nebo aminoalkylkarbamoyl. V takovém případě alkyl s výhodou znamená alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, s výhodou rozvětvený, zvláště isobutyl. Cykloalkyl s výhodou znamená cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku, s výhodou cyklopentyl nebo cyklohexyl. Cykloalkylalkyl nebo cykloalkylalkenyl s výhodou znamená skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalky lu, zvláště s 5 nebo 6 atomy uhlíku, asi až 5 atomy uhlíku, zvláště s 1 atomem uhlíku, v jejich alkylových nebo alkylenových částech. Aryl s výhodou znamená fenyl nebo naftyl, zvláště
2-naftyl. Heteroaryl s výhodou znamená pyridinyl, thienyl, zvláště 2-thienyl, nebo furyl, zvláště 2-furyl. Heteroarylalkyl a heteroalkenyl s výhodou obsahuje 1 až 6 atomfi uhlíku, zvláště 1 atom uhlíku ve svých alkylových nebo alkylenových částech.
«· «99· •» · · · ♦ · • · 9 9 9 99 9 9 99
9 9 9 9 99 9 9
999 9 9 ♦ ····· • ••«··999
999 9 99 ·♦ 999 9999
Heteroarylová část heteroarylalkylu a heteroalkylalkylenu má shora uvedený význam jako výhodná pro heteroaryl. Aralkyl s výhodou znamená fenylalkyl se 7 až 12 atomy uhlíku, zvláště nafty lmethyl, benzyl a fenylethyl. Alkoxyskupina s výhodou obsahuje 1 až 5 atomů uhlíku, s výhodou znamená methoxyskupinu. Acyloxyskupina s výhodou obsahuje 2 až 6 atomů uhlíku, s výhodou znamená acetoxyskupinu. Případnými substituenty arylové nebo aralkylové části jsou s výhodou jeden až tři skupiny vybrané z alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, atomy halogenu s atomovým číslem od 9 do 35, hydroxy 1 a/nebo aminové skupiny, s výhodou jedna nebo dvě skupiny vybrané z methylu, methoxylu, atomu chloru, bromu nebo fluoru, hydroxylu a aminové skupiny, zvláště pak jeden hydroxyl, aminová skupina, atom chloru, bromu nebo fluoru, popřípadě v chráněné formě, jestliže je to vhodné, nebo atomem halogenu substituovaný alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště trifluormethyl.
Z definice aminokyselinového postranního řetězce je specificky vyloučena skupina oxo. Ethylendiamin tedy neobsahuje peptidové vazby.
Peptidylová funkce může být také nakreslena, jak je uvedeno v obecném vzorci a a b
(a) (b) , v nichž n znamená číslo 0 až 9, X3-X4 znamená vazbu vybranou z
-C(O)NRU-, -CH2NR14-, -C(O)CH2- a NRUC(O)-, Y znamená skupinu
-CH(RU)- nebo -NRU~ a Z znamená skupinu -(CH2)2-, -C(R15) (R16)nebo -N(R16)~, při čemž Ru znamená atom vodíku nebo jak níže uvedeno, R15 znamená atom vodíku nebo methyl a každý R16 znamená aminokyselinový postranní řetězec. Každý R16 tedy nezávisle na ·«·· « · · 4 4 4 4 · 4 · 4 • · · 4 · 4 · 4 ♦
4 4 4 4 · 4 «4444
4··· 4· ·· «444 44 ·· 44» ···· sobě znamená atom vodíku, alkyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou ze skupiny zahrnující hydroxyl, alkyloxyskupinu, aminovou skupinu, alkylaminovou skupinu, dialkylaminovou skupinu, ureidoskupinu, alkylureidoskupinu, merkaptoskupinu, alkylthioskupinu, karboxyskupinu, karbamoyl, alkylkarbamoyl, dialkylkarbamoy1, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl a guanidinovou skupinu, skupinu -P(O) (OR12)2, -OP(O) (OR12)2 nebo -OP(O) (R12)2, v nichž každý R12 znamená nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkyl nebo jeho chráněný derivát), cykloalkyl, cykloalkylalkyl, skupinu vybranou z arylově a arylalkylové skupiny (která je popřípadě substituována na svém arylovém kruhu jedním až třemi skupinami vybranými z hydroxylu, aminové skupiny, guanidinové skupiny, atomu halogenu, popřípadě atomem halogenu substituovaného alkylu, alkyloxyskupiny a arylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým Ru tvoří dvojvaznou skupinu vybranou z methylenové skupiny se 3 až 4 atomy uhlíku a
1,2-fenylendimethylenové skupiny (která je popřípadě substituována hydroxylem, jeho chráněným derivátem nebo oxoskupinou).
Peptidylová skupina může obsahovat také další funkční skupiny, jak je na obrázku 3 níže označeno ”PG. Chránící skupina PG v obecném vzorci 3 může tak znamenat skupinu blokující aminový konec peptidu nebo značku, jak jsou tyto pojmy definovány níže. Pod pojmem skupina blokující aminový konec peptidu se zde rozumí například skupiny, mezi něž patří, ale bez omezení na ně, alkyloxykarbonýlalkanoyl (s výhodou s celkem 2 až 10 atomy uhlíku), alkyloxykarbonyl (s výhodou celkem se 2 až 10 atomy uhlíku, zvláště terč.butoxykarbonyl (BOC) nebo benzyloxykarbonyl (CBZ, Z)), alkanoyl (s výhodou s celkem 2 až 10 atomy uhlíku a popřípadě substituovaný skupinou vybranou z karboxyskupiny, alkyloxykarbonylu a heterocykloalkylalkanoylaminové skupiny), cykoloalkylkarbonyl (s výhodou s celkem 4 až 8 atomy uhlíku), heterocykloalkylkarbonyl (s výhodou s celkem 6 až 10 atomy, popřípadě substituovaný skupinou vybranou z hydroxylu, alkylu, heterocykloalkylu, alkanoylu, alkyloxykarbonylu, arylalkyloxykarbonylu a heterocykloalkylkarbonylu, zvláště heterocykloalkylkarbonyl obecného vzorce -C(0) NR10Rn, v němž R10 « · · · · · • · a Rn spqlečně tvoří azamethylen se 2 až 6 atomy uhlíku, oxamethylen se 2 až 6 atomy uhlíku nebo methylen se 3 až 7 atomy uhlíku, zvláště oxapentamethylen, takže vznikne 4-morfolinylkarbonyl (Mu)), arylaikyloxykarbonyl (s výhodou obsahující aryl se 6 až 10 atomy uhlíku a alkyloxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku) , karbamoyl, alkylkarbamoyl (s výhodou s celkem 2 až 6 atomy uhlíku), dialkylkarbamoyl (s výhodou celkem se 2 až 11 atomy uhlíku) , arylkarbamoyl (s výhodou s dekem 7 až 11 atomy uhlíku) , ary laiky lkarbamoyl (s výhodou obsahující aryl se 6 až 10 atomy uhlíku a alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku), arylalkanoyl (s výhodou obsahující aryl se 6 až 10 atomy uhlíku a alkanoyl s celkem 1 až 6 atomy uhlíku), aroyl (s výhodou s celkem 7 až 11 atomy uhlíku a zvláště benzoyl), alkylsulfonyl (s výhodou s 1 až 10 atomy uhlíku), arylalkylsulfonyl (s výhodu obsahující aryl se 6 až 10 atomy uhlíku a alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku), alkylsulfamoyl (s výhodou s 1 až 5 atomy uhlíku), dialkylsulfamoyl (s výhodou se 2 až 10 atomy uhlíku), arylsulfonyl (se 6 až 10 atomy uhlíku včetně heteroarylsulfónylu, s výhodou obsahujícího heteroaryl s celkem 4 až 8 atomy), arylsulfamoyl (s výhodou se 6 až 10 atomy uhlíku, zahrnující heteroarylsulfamoyl, s výhodou obsahující heteroaryl se 4 až 8 atomy), alkylsulfinyl (s výhodou s 1 až 5 atomy uhlíku), dialkylaminosulfinyl (s výhodou se 2 až 10 atomy uhlíku) a arylsulfinyl (s výhodou obsahující aryl se 6 až 10 atomy uhlíku zahrnující heteroarylsulfinyl, který s výhodou obsahuje heteroaryl se 4 až 8 atomy). Dočasné chránící skupiny jsou známy z oblasti techniky, viz Greene: Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, 1991, který je zde zahrnut jako odkaz.
Obecný vzorec 3 ukazuje inhibitor cysteinové proteázy s peptidylovými skupinami jak v poloze A tak X, při čemž n znamená Číslo od 1 do 5:
<· φ «· · ·· β «φφ · • * · ·φ«φ Φ « Φ 4 • · Φ Φ ·«ΦΦΦ • ΦΦΦ φ < φ φφφφ φ • ΦΦΦ··«·· • ΦΦΦ · · «* Φ · Φ φφφ ·
Aminokyseliny nebo zbytky peptidů jsou normálně napojeny peptidovou vazbou nebo napojením, tj. peptidickou karbamoylovou skupinou, tj. -CONH-. Ve výhodném provedení vazba mezi atomy dusíku ethylendiaminové části nebo piperazinové části a skupinou A a X znamená peptidovou vazbu. Podobně, jestliže peptidylová skupina obsahuje dvě nebo více aminokyselin, vazba mezi těmito dvěma s výhodou znamená peptidovou vazbu. Vazba mezi aminokyselinami peptidylové skupiny však může znamenat peptidovou isostérickou nebo peptidomimetickou vazbu, jako je CO-CH2, CH2-NH, azapeptid a retro-inversní vazby, jak je ukázáno spojením X3-X4 v obecných vzorcích a a b.
R, R« (4)
Obecný vzorec 4 ukazuje inhibitor cysteinové proteázy s peptidylovými skupinami obsahujícími dvě aminokyseliny jako jak skupinu A tak skupinu X. V obecném vzorci 4 tedy vazba A-B znamená peptidovou nebo peptidomimetickou vazbu. PG znamená chránící skupinu, jak shora uvedeno, a Q může znamenat buď atom uhlíku nebo atom dusíku. Jak bude oceněno, stejným způsobem se mohou přidat další aminokyseliny. Mělo by to být chápáno tak, že tyto struktury neodrážejí přesně situaci, v níž jedna nebo více aminokyselin znamená prolin.
Vhodné amninokyseliny peptidylových skupin podle vynálezu jsou obecně původně vybrány na základě pravidel řídících substrátovou specifičnost cysteinových proteáz. To znamená, že budou použity takové kombinace aminokyselin, které udělují specifičnost enzymu, který má být inhibován.
Tomu je třeba rozumět tak, že pořadí aminokyselinových postranních řetězců v inhibitoru je významné při zacílení inhibitoru. Jak je dále popsáno níže, aminokyselinový postranní řetě• · · · * · φ φ ♦· · • ♦ · φ φ · ·· · φ φφφ · · * φφφ ·· φφφφφφ· · φ *··« ·· ·· ··· «· ·· zec připojený k ethylendiaminové nebo piperazinové struktuře inhibitoru, jak je obecně odkazováno jak R/1 nebo Rg”, bude tedy zaujímat polohu S1 vazebného místa substrátu enzymu, když je inhibitor navázán na enzym. To znamená, že například Rg” aminokyselinový postranní řetězec cílové skupiny znamená P^ zbytek inhibitoru. Podobně, jestliže peptidylová skupina je poloze A, anminokyselinový postranní řetězec peptidylove skupiny, která je nejblíže ethylendiaminové části, bude zaujímat polohu S2 vazebného místa substrátu enzymu, když je inhbitor navázán na enzym, a tedy jde o P2 zbytek. Jestliže jsou přítomny, budou další aminokyselinové postranní řetězce peptidylu zaujímat polohy P3, P4 atd.
Naopak, jestliže peptidylová skupina zaujímá polohu X, aminokyselinové postranní řetězce zaujímají polohu S/7, S27 atd. vazebného místa substrátu enzymu. Tyto aminokyselinové postranní řetězce jsou považovány za P,7, P27 atd. zbytky inhibitoru. Jak odborníci z oblasti tehcniky ocení, je možné mít peptidylové skupiny jak v poloze A tak v poloze X, aby byla udělena zvýšená specifičnost inhibitoru pro příslušnou cysteinovou proteázu, která má být inhibována.
Tomu by mělo být rozuměno tak, že inhibitory podle předloženého vynálezu mají potenciálně jistou symetrii, která by mohla ovlivnit nomenklaturu. Tak například jestliže skupiny A a X jsou stejné, inhibitor lze považovat za inhibitor, který má skupinu R1 v jedné konformaci a skupinu Rg v opačné konformaci. Bez ohledu na teorii se předpokládá, že A je vázána v polohách P a skupina X je vázána v polohách p' enzymu.
Výběr aminokyselinových postranních řetězců skupin Rv R2, Rj, R6 a R16 a aminokyselin skupin A a X se provede pomocí dostupných informací o substrátové specifičnosti přoteázy a je rutinní pro odborníka z oblasti techniky zabývající se komerčně dostupnými substráty. Například enzym konvertující interleukin-lB vykazuje největší specifičnost uvedenou pro cysteinovou proteázu vzhledem k substrátu, což vyžaduje aspartylový po4 • · stranní řetězec v poloze P-v Podskupina papainu cysteinových proteáz má místo s rozšířenou specifičností obsahující pět až sedm významných podmíst s dominantním S2, což je hydrofóbní kapsa, která váže velmi dobře fenylalanylu podobné postranní řetězce. Kathepsin B, podobný papainu, akceptuje v S2 fenylalaninový postranní řetězec stejně jako arginylový postranní •'inhibitory proteinázy v Tissue Physiology, Barret a Inhibitory cysteinových proYork 1986, která je zde vý slovně zařazena jako odkaz. Specifičnost enzymu konvertujíčího interleukin 1B (ICE) byla zkoumána také Thornberrym a spol., viz výše, také tato citace je zde zařazena jako odkaz. Tabulka 1 uvádí seznam některých výhodných aminokyselinových postranních řetězců pro polohy P, a P2 (R1 a R2) pro četné cysteinové proteázy.
řetězec. Pro obecný přehled viz Research Monographs in Cell and spol. (red.), díl 12, kapitola 4: teáz, Daniel Rich, Elsevier, New
Tabulka 1
enzym P2 P, (R1 nebo R2)
papain Phe, Tyr, 2-naftyl, Arg, Lys, Lys(e-Z), gua-
Leu, Nle, Ile, Ala nidino-fenylalanin, Hph,
Nle
kathepsin B Phe, Tyr, Tyr(I2) , Arg, Lys, Lys(e-Z), gua-
2-naftyl, Arg, gua- nidino-fenylalanin, Hph,
nidino-fenylalanin, Cit, Nle
Cit*
kathepsin L Phe, Tyr, 2-naftyl Arg, Lys, Lys(e-Z), gua-
nebo kruzain nidino-fenylalanin, Hph,
Cit, Nle
kathepsin S Phe, Tyr, 2-naftyl, Arg, Lys, Lys(e-Z), gua-
Val, Leu, Nle, Ile, nidino-fenylalanin, Hph,
Ala Cit, Nle
DPP-1 Gly, Ala Phe, Tyr
kalpain Val, leu, Nle, Ile, Tyr, Phe, Met, Met(O2) ,
Phe Val
« · • · · · • · · · * · « · · · 9 * ···«»· · · « *·φ· « · ·· ··· «· * ·
Tabulka 1 (dokončení)
enzym P2 P1 (R1 nebo R2)
ICE Ala, Val, His Asp
kathepsin 02 Leu, Met, Nle Arg, Lys, Lys(e-Z), guanidino-fenylalanin, Hph, Nle
*citrulin
Jak bude oceněno odborníky z oblasti techniky, jestliže se používají analogy nepřirozeně se vykytujících aminokyselinových postranních řetězců, budou tyto řetězce nejdříve vybrány na základě sterických a biochemických podobností s přirozeně se vyskytujícími podstranními řetězci.
Alkyloxykarbony1 zde znamená skupinu -COORg, v níž C znamená atom uhlíku a O znamená atom kyslíku. V tomto provedení mezi vhodné skupiny Rg patří, ale bez omezení na ně, alkyl, cykloalkyl, cykloalkylaiky1, aryl nebo aralkyl (tvořící arylalkyloxykarbonyl) . V takovém případě alkyl s výhodou znamená skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště ethyl. Cykloalkyl znamená skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, s výhodou cyklopentyl nebo cyklohexyl. Cykloalkylalkyl znamená s výhodou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalkylu, zvláště s 5 nebo 6 atomy uhlíku, a s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště s 1 atomem uhlíku v alkylové části. Aryl s výhodou znamená fenyl. Aralkayl s výhodou znamená fenylalkyl se 7 až 12 atomy uhlíku, zvláště benzyl. Případné substituenty arylové nebo aralkylové části s výhodou znamenají jednu nebo dvě skupiny nezávisle na sobě vybrané z alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, atomu halogenu s atomovým číslem od 9 do 35, hydroxyskupiny a/nebo aminové skupiny, s výhodou jednu nebo dvě skupiny vybrané z methylu, methoxyskupiny, atomu chloru, bromu nebo fluoru, hydroxyskupiny a/nebo aminové skupiny, zvláště jeden hydroxyl, • · • · ···♦ aminovou skupinu, atom chloru, bromu nebo fluoru, popřípadě chráněné, jestliže je to vhodné, nitroskupinu, alkyl, arylsulfonyl nebo atomem halogenu substituovaný alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště trifluormethyl.
Zvláště výhodnými jsou 1. alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště ethyl, 2. cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku, s výhodou cyklopentyl nebo cyklohexyl, 3. cykloalkyl(se 3 až 7 atomy uhlíku) alkyl (s 1 až 5 atomy uhlíku), s výhodou cykloalkyl(s 5 až 6 atomy uhlíku)-methyl, 4. cykloalkyl(se 3 až 7 atomy uhlíku)alkenylalkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku), zvláště cykloalkylalkenyl(s 5 až 6 atomy uhlíku)-methyl, 5. fenyl, 6. fenylaiky1 se 7 až 12 atomy uhlíku, s výhodou benzyl, 7. alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku substituovaný alkyloxyskupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, atomem halogenu, hydroxylovou skupinou nebo aminovou skupinou s alkylovou skupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, s výhodou substituovanou jednou nebo dvěma skupinami vybranými z methylu, methoxyskupiny, atomu chloru, bromu a fluoru, hydroxylu a aminové skupiny, nej výhodně ji hydroxy lem, aminovou skupinou nebo atomem chloru, bromu nebo fluoru, 8. alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku substituovaná nitroskupinou, alkylovou skupinou nebo arylsulfonylovou skupinou, popřípadě chráněná, jestliže je to vhodné, 9. alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku substituovaný atomem halogenu, s výhodou trifluormethylém, 10. aryl nebo aralkyl substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z alkylové skupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, atomu halogenu, hydroxylu nebo aminové skupiny, s výhodou substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z methylu, methoxyskupiny, atomu chloru, bromu nebo fluoru, hydroxy lu a aminové skupiny, výhodněji hydroxylem, aminovou skupinou nebo atomem chloru, bromu nebo fluoru, 11. aryl nebo aralkyl substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z atomem halogenu substituovaného alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště trifluormethylu, nitroskupinou, sulfonylem nebo arylsulfonylem, jestliže je to vhodné, pak v chráněné formě.
Mezi výhodné alkyloxykarbonyly patří, ale bez omezení na • · · ··· ·· ♦ ♦ · ♦· • φ φ φ φ φ« · · φ· • 9 φ Φ Φ * Φ Φ· • φ Φ Φ φ Φ Φ ·ί· »Φ φ Φ φ φ Φ Φ · ·« ♦ ··· ·Φ »« ····· *· ně, BoC, CBZ a Z.
·' Pept idy 1 -a Iky 1 oxykarbony 1 nebo a lky loxykarbony 1 -pept i dyl” zde znamená peptidylovou skupinu napojenou na alkyloxykarbonylovou skupinu. Tomu je třeba rozumět tak, že peptidylová skupina je napojena na jeden z atomů dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové části a že alkyloxykarbonylová skupina je napojena na peptidylovou skupinu. Volnou koncovou funkcí alkyloxykarbonyl-peptidylové skupiny je tedy skupina R6 obecného vzorce 5. Jak shora popsáno pro acyl-peptidyl, pořadí funkcí se liší podle toho, jestli skupina A nebo skupina X je skupinou, která znamená alkyloxykarbonyl-peptidyl. Tato skupina může být nazvána alkyloxykarbonyl-peptidylovou částí, jestliže se popisuje skupina A, a peptidyl-alkyloxykarbonylovou částí, jestliže se popisuje skupina X. Obecný vzorec 5 ukazuje inhibitor cysteinové proteázy s alkyloxykarbonyl-peptidylovými skupinami jak v poloze A tak v poloze X, při čemž n znamená číslo od 1 do 5, a AA znamená aminokyselinu:
Ra r4 (5) .
Sulfonyl zde znamená skupinu -SO?R9/ při čemž S znamená atom síry a O znamená atom kyslíku. Atom síry je napojen na jeden z atomů dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové části, a tedy sulfonylová skupina znamená také sulfonamid, vzhledem k napojení na dusíkovou skupinu. Skupina R9 sulfonylové části může zahrnovat, ale bez omezení na ně, alkyl (tvořící alkylsulfonyl), substituovaný alkyl, cykloalkyl, cykloalkylaiky1, cykloalkylalkenyl, aryl (tvořící arylsulfonyl, včetně heteroarylu (tvořícího heteroarylsulfonyl)) nebo aralkyl (tvořící arylalkylsulfonyl). V tomto případě alkyl s výhodou znamená • 4 ««·· 9· *·· ·· • 9 9 9 9 99 9 9 99
9 9 9 99 9 9
9 99 · 4 « ·«» ·♦ »····· · «· ·>·· ·· »♦ ··· «· ·· skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, s výhodou methyl. Substituovaný alkyl s výhodou znamená skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, nesoucí substituce alkoxyskupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, atomem halogenu š atomovým číslem od 9 do 35, hydroxyskupinou a/nebo aminovou skupinou, s výhodou substituovanou jednou nebo dvěma skupinami vybranými z methylu, methoxyskupiny, atomu chloru, bromu a fluoru, hydroxylu a aminové skupiny, výhodněji hydroxylem, aminovou skupinou nebo atomem chloru, bromu nebo fluoru, popřípadě v jejich chráněné formě, nitroskupinou, alkylem nebo arylsulfonylem nebo atomem halogenu substituovaným alkylem s 1 až 5 atomy Uhlíku, zvláště trifluormethylem. Cykloalkyl s výhodou znamená skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, s výhodou cyklopentyl nebo cyklohexyl. Cykloalkylaiky 1 nebo cykloalkylalkenyl s výhodou znamená skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalkylu, zvláště s 5 nebo 6 atomy uhlíku a s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště s 1 atomem uhlíku v jejich alkylových nebo alkylenových částech. Aryl s výhodou znamená fenyl, pentafluorfenyl nebo naftyl. Aralkyl s výhodou znamená fenylalkyl se 7 až 12 atomy Uhlíku, zvláště benzyl nebo fenethyl. Případnými substituenty arylové nebo aralkylové části jsou s výhodou jedna nebo dvě skupiny vybrané z alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, atomu halogenu s atomovým číslem od 9 do 35, hydroxylu a/nebo aminové skupiny, s výhodou jedna nebo dvě skupiny vybrané z methylu, methoxylu, atomu chloru, bromu nebo fluoru, hydroxylu nebo aminové skupiny, zvláště pak jeden hydroxyl, aminová skupina, atom chloru, bromu nebo fluoru, popřípadě v chráněné formě, jestliže je to vhodné, nitroskupina, alkyl nebo arylsulfonyl nebo atomem halogenu substituovaný alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště trifluormethyl.
Zvláště výhodnými skupina sulfonylové skupiny jsou 1. alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště ethyl, 2. cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku, s výhodou cyklopentyl nebo cyklohexyl, 3. cykloalkyl(se 3 až 7 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) , s výhodou cykloalkyl(s 5 až 6 atomy uhlíku)-methyl, 4. cykloalkylalkenyl (se 3 až 7 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) , s výhodou cykloalkylalkenyl(s 5 až 6 atomy uhlíku)-methyl, • fa ···« fafa fa fafa fa* • fa fa fafa fafa fafa·· fafa fa · fa fa fa fafa fa fafa· fa fa fa fafa·· fa • fa fa fa fa fa fafa· • fafa· «fa fafa fafafa ·· fafa
5. fenyl, 6. fenylaiky 1 se 7 až 12 atomy uhlíku, s výhodou benzyl, 7. alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku substituovaný alkyloxyskupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, atomem halogenu, hydroxylovou skupinou nebo aminovou skupinou s alkylovou skupinou s 1 až 5 atomy uhlíku, s výhodou substituovanou jednou nebo dvěma skupinami vybranými z methylů, methoxyskupiny, atomu chloru, bromu a fluoru, hydroxylu a aminové skupiny, nejvýhodněji hydroxylem, aminovou skupinou nebo atomem chloru, bromu nebo fluoru, 8. alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku substituovaná nitroskupinou, alkylovou skupinou nebo arylšulfonylovou skupinou, popřípadě chráněná, jestliže je to vhodné, 9. alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku substituovaný atomem halogenu, s výhodou trifluormethylem, 10. aryl nebo aralkyl substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z alkylové skupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, atomu halogenu, hydroxylu nebo aminové skupiny, s výhodou substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z methylu, methoxyskupiny, atomu chloru, bromu nebo fluoru, hydroxylu a aminové skupiny, výhodněji hydroxylem, aminovou skupinou nebo atomem chloru, bromu nebo fluoru, 11. aryl nebo aralkyl substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z atomem halogenu substituovaného alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště trifluormethylu, nitroskupinami, sulfonyly nebo arylsulfonylu, jestliže je to vhodné, pak v chráněné formě.
Zvláště výhodný je fenyl, naftyl a benzyl.
peptidyl-sulfonyl nebo sulfonyl-peptidyl zde znamená peptidylovou skupinu navázanou na sulfonylovou skupinu. Jak shora uvedeno, peptidylová skupina je navázána na jeden z atomu dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové části a sulfonylová skupina je navázána na peptidylovou skupinu. Volnou koncovou funkcí su 1 fony 1-peptidylevé skupiny je tedy skupina R^·. Jak shora popsáno pro acyl-peptidyl, pořadí funkcí se liší podle toho, jestli skupina A nebo skupina X je skupinou, která znamená sulfonyl-peptidyl. Tato skupina může být nazvána sulfonyl-peptidylovou částí, jestliže se popisuje skupina A a pepti·· ···· • · ·· to to· • · ·· ♦ ♦ · ·· • · · toto ···· ·« >· • ·· ·· toto « · «· • «· ·· • · toto · · to to to ·· • toto toto ·· dyl-sulfonylovou částí, jestliže se popisuje skupina X. Obecný vzorec 6 ukazuje inhibitor cysteinové proteázy se sulfonyl-peptidylovými skupinami jak v poloze A tak v poloze X, při čemž n znamená číslo od 1 do 5 a AA znamená aminokyselinu:
(6)
Sulfamoyl” zde znamená skupinu -SO2NR10Rn, v níž S znamená atom síry, O znamená atom kyslíku a N znamená atom dusíku. Atom síry sulfonu je navázán na jeden z atomů dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové skupiny. V některých provedeních sulfamoyl obsahuje skupinu -SO2NHR10, při čemž H znamená atom vodíku, v jiných provedeních obsahuje skupinu -so2NR10Rn.
Mezi vhodné skupiny -NHR10 a -NR10Rt1 patří, ale bez omezení na ně, skupina NH2, NH-alkyl (tvořící sulfamoyl), NH-cykloalkyl, NH-cykloalkylaiky1, NH-aryl (tvořící arylsulfamoyl nebo heteroarylsulfamoyl), NH-aralkyl, N-dialkyl (tvořící dialkylsulfamoyl) a N-alkylaryl. Cykloalkyl znamená skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, s výhodou cyklopentyl nebo cyklohexyl. Cykloalkylalkyl znamená s výhodou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku v cykloalkylu, zvláště s 5 nebo 6 atomy uhlíku, a s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště s 1 atomem uhlíku v alkylové části. Aryl s výhodou znamená fenyl nebo heteroaryl. Aralkayl s výhodou znamená fenylaiky1 se 7 až 12 atomy uhlíku, zvláště benzyl. Případné substituenty arylove nebo aralkylové části s výhodou znamenají jednu nebo dvě skupiny nezávisle na sobě vybrané z alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupiny s 1 až 5 atomy uhlíku, atomu halogenu s atomovým číslem od 9 do 35, hydroxyskupiny a/nebo aminové skupiny, s výhodou jednu nebo dvě skupiny vybrané z methylu, methoxyskupiny, atomu chloru, bromu nebo fluoru, hydro·· ···· xyskupiijy a/nebo aminové skupiny, zvláště jeden hydroxyl, aminovou skupinu nebo atom chloru, bromu nebo fluoru, popřípadě chráněné, jestliže je to vhodné, nitroskupinu, alkyl, arylsulfonyl nebo atomem halogenu substituovaný alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, zvláště trifluormethyl.
Ve výhodném provedení skupiny R10 a Rn skupiny obecného vzorce -NR^R^ jsou spolu svázány tak, že tvoří 5 nebo 6-členné alicyklické nebo heteroalicyklické skupiny. Výhodným je piperidin, morfolin, pyrrolidin, piperazin nebo substituovaný piperazin.
Peptidyl-sulfamoyl zde znamená peptidylovou skupinu navázanou na sulfamoylovou skupinu. Jak shora uvedeno, peptidylová skupina je navázána na jeden z atomů dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové části a sulfamoylová skupina je navázána na peptidylovou skupinu. Volnou koncovou funkcí sulfamoyl-peptidylové skupiny je tedy skupina R10. Jak shora popsáno pro acyl-peptidyl, pořadí funkcí se liší podle toho, jestli skupina A nebo skupina X je skupinou, která znamená sulfamoyl-peptidyl. Tato skupina může být nazvána sulfamoyl-peptidylovou částí, jestliže se popisuje skupina A a peptidyl-sulfamoylovou částí, jestliže se popisuje skupina X. Obecný vzorec 7 ukazuje inhibitor cysteinové proteázy se sulfamoyl-peptidylovou skupinou v poloze A a peptidyl-sulfamoylovou skupinou v poloze X, při čemž n znamená číslo od 1 do 10 a AA znamená aminokyselinu:
(7)
Sulfinyl zde znamená skupinu -SO2R9, v níž S znamená atom síry, O znamená atom kyslíku a R9 znamená jak shora uvedeno.
·· ···* • ·
Atomy siry a kyslíku jsou spolu svázány dvojnou vazbou. Atom síry je navázán na jeden z atomů dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové skupiny. Mezi výhodné sulfinylové skupiny patří alkylsulfinyl, dialkylaminosulfinyl a arylsulfinyl, který zahrnuje heteroarylsulfinyl.
Sulf inyl-peptidyl· zde znamená peptidylovou skupinu navázanou na sulfinylovou skupinu. Jak shora uvedeno, peptidylová skupina je navázána na jeden z atomů dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové části a sulfinylová skupina je navázána na peptidylovou skupinu. Volnou koncovou funkcí sulfiny1-peptidylové skupiny je tedy skupina R^,. Jak shora popsáno, pořadí funkcí se liší podle toho, jestli skupina A nebo skupina X je skupinou, která znamená sulfinyl-peptidyl. Tato skupina může být nazvána sulfinyl-peptidylovou Částí, jestliže se popisuje skupina A, a peptidyl-sulfinylovou částí, jestliže se popisuje skupina X. Obecný vzorec 8 ukazuje inhibitor cysteinové proteázy se sulfinyl-peptidylovou skupinou v poloze A a peptidyl-sulfinylovou skupinou v poloze X, při čemž n znamená číslo od 1 do 10 a AA znamená aminokyselinu:
(8).
Karbamoyl zde znamená skupinu -CONR10Rn, H znamená atom vodíku, C znamená atom uhlíku a O znamená atom kyslíku. R10 a Rn znamenají jak shora uvedeno.
Pojem karbamoyl-peptidyl zahrnuje jak karbamoyl-peptidyl tak peptidyl-karbamoyl. To znamená, že v jednom provedení je karbamoyl navázán na jeden z atomů dusíku ethylendiaminové nebo piperazinové části a peptidylová skupina je navázána na karbqmoyl. V tomto provedení je koncovou funkcí peptidyl. Peptidylová část může být alternativně navázána na ethylendiaminovou nebo piperazinovou část a karbamoylová část připojena na peptidyl. V tomto případě je koncovou funkcí karbamoy1. Tato dvě provedení jsou znázorněna níže obecným vzorce 9 (karbamoy1-peptidyl) a 10 (peptidy1-karbamoyl) jako obsahující část X. Tomu by mělo být rozuměno tak, že obecné vzorce 9 a 10 neznázorftují přesně strukturu, jestliže jednou z aminokyselin je prolin.
(9)
(10)
Dva N-substituenty podle vynálezu jsou napojeny ethylendiaminovou nebo substituovanou ethylendiaminovou skupinou. Ethylendiaminová skupina zde znamená skupinu -NH-CH2-CH2-NH~, v níž N znamená atom dusíku, C znamená atom uhlíku a H znamená atom vodíku. Dva N-substituenty, označené zde jako A a X jsou každý navázán na jeden z atomů dusíku ethylendiaminu. Navázaný zde znamená kovalentní připojení. V jednom provedení mají tedy inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu strukturu obecného vzorce 11 (11) .
Tomu by mělo být rozuměno tak, že zobrazení ethylendiaminové skupiny a dalších skupin jako skupiny, která má jistou konformaci, je pouze obrazné. Obecný vzorec 11 a další ethylendiaminové Části mohou být tedy znázorněny jako obecný vzorec 11A:
(11A).
Ve výhodném provedení jsou N-substituenty napojeny substituovanou ethylendiaminovou částí. Substituovaný ethylendiamin” zde znamená ethylendiaminovou skupinu, která má jeden nebo více atomů vodíku nahrazeno skupinou substituentu. Tomu by mělo být porozuměno tak, že substituovaný ethylendiamin neobsahuje peptidovou vazbu. To znamená, že ani R1 ani R2 nesmí znamenat karbony 1 .
Ve výhodném provedení je ethylendiamin substituován skupinou R na kterémkoliv atomu uhlíku ethylenu. Tedy, jak je uvedeno v obecném vzorci 12, R1 a R2 znamenají buď atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec. Tomu by mělo být rozuměno tak, Že pouze jeden ze substituentú R, a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a že druhý znamená atom vodíku. S výhodou R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a R1 znamená atom vodíku.
R, \
A- / -N Vx
H H
(12) .
Jak bude oceněno odborníky z oblasti techniky, existuje
velký počet možných kombinací A a X. Jakákoliv skupina A může být zkombinována s jakoukoliv skupinou X. V jednom provedení skupina A a X znamenají stejnou skupinu. Například skupina A může znamenat sulfonyl-peptidylovou skupinu a skupina X může znamenat peptidyl-sulfonylovou skupinu. Tomu by však mělo být porozuměno tak, že i když například jak skupina A tak X znamenají sulfonyly, skupiny obou sulfonylů nemusí znamenat stejné skupiny. Podobné je pravdou i pro další provedení. V alternativním provedení skupina A a skupina X znamenají různé skupiny .
Jestliže R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a R1 znamená atom vodíku, výhodné kombinace skupiny A a X jsou uvedeny v tabulce 2.
Tabulka 2
výhodná skupina A výhodná skupina X
PAEBG-aminokys e1ina* sulfony1
PAEBG-pept idy1 sulfonyl
alky1oxykarbony1-peptidy1 sulfonyl
su1fony1-peptidy1 sulfonyl
karbamoy1-pept idy1 sulfonyl
sulfamoyl-peptidyl sulfonyl
acyl-peptidyl sulfonyl
sulflny1-peptidy1 sulfonyl
·· ···· ··
Tabulka 2 (dokončení)
výhodná skupina A výhodná skupina X
PG-aminokyselina peptidy1-PAEBG
alky1oxykarbony1-peptidy1 pept idy1-PAEBG
sulfonyl-peptidyl peptidyl-PAEBG
karbamoy1-peptidy1 peptidyl-PAEBG
sulfamoy1-peptidy1 pept idy1-PAEBG
acy1-peptidy1 peptidyl-PAEBG
sulfiny1-peptidy1 peptidyl-PAEBG
* PAEBG znamená skupinu blokující aminový konec peptidu nebo PG
Jestliže Rj znamená aminokyselinový postranní řetězec a R2 znamená atom vodíku, výhodné kombinace skupin A a X jsou uvedeny v tabulce 3.
Tabulka 3
výhodná skupina A výhodná skupina X
sulfonyl peptidyl-PAEBG
sulfonyl peptidyl-alkyloxykarbonyl
sulfonyl peptidyl-sulfonyl
sulfonyl pept idy1-karbamoy1
sulfonyl peptidyl-sulfamoyl
sulfonyl peptidy1-acyl
sulfonyl peptidyl-sulfinyl
PAEBG-peptidyl aminokyselina-PG
PAEBG-peptidyl peptidyl-alkyloxykarbonyl
PAEBG-peptidyl peptidyl-sulfonyl
PAEBG-peptidy1 peptidy1-karbamoy1
PAEBG-peptidyl peptidyl-sulfamoyl
PAEBG-peptidyl peptidyl-acyl
PAEBG-peptidyl peptidyl-sulfinyl
·· ···· ·· • ·· ··
• · • • e ·· . • · • ·
• • • · • • · ··
• • • · · • • ··· • ·
• • < • · • • • ·
···· '·· ·· ··· • to • ·
Výhodné skupiny A a X uvedené v tabulkách 2 a 3 se stejně tak aplikují na níže popsané piperazinové části.
Ve výhodném provedení je ethylendiamin substituován na atomech dusíku ethylendiaminu, jako je uvedeno v obecném vzorci
1. V tomto provedení buď oba R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu navázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu. Pojmem ethylen nebo ethylenová skupina se zde rozumí skupina (-CH2CH2-), tj. nasycená vazba atom uhlíku-atom uhlíku, sloužící ke spojení dvou sp3-hybridizovaných atomů uhlíku; tj. tyto dva atomy uhlíku ethylenové skupiny nejsou spolu vázány dvojnou vazbou. Substituovaný ethylen zde znamená ethylenovou skupinu, která má jeden z atomů vodíku ethylenu nahrazen skupinou substituentu, t j. skupina (-CH2CHR-),v níž R znamená R5 nebo R6, jak uvedeno níže. Jestliže R3 a R4 tvoří ethylen nebo substituovaný ethylen, substituovaná ethylendiaminová část znamená piperazinovou část, která dále může být sub stituována nebo nesubstituována. To znamená, že atomy uhlíku piperazinové části nemusí míž Žádnou skupinu substituentu, tj. pouze atom vodíku, jak je uvedeno v obecném vzorci 13, skupinu R1 nebo R2, jak je uvedeno v obecném vzorci 14, skupinu R5 nebo R6, jak je uvedeno v obecném vzorci 15, nebo jak skupinu R1 tak R6 nebo jak R2 tak R5 (obecné vzorce 16 a 17) .
(13)
(14)
Ve výhodném provedení R2 znamená aminokyselinový postranní v
řetězec β R1 znamená atom vodíku.
(15)
>
\
(16)
Λ
A--N N—X
\ J (17)
/ Rs
V obecných vzorcích 16 a 17 je tomu třeba rozumět tak, že dvě skupiny substituentu na šestičlenném heterocyklickém kruhu piperazinu jsou navzájem v para-poloze; to znamená, že mohou existovat substituce skupin na R, a R6 nebo R2 a Rj. Rv R2, R5 a R6 znamenají nezávisle na sobě atom vodíku nebo aminokyselinový postranní řetězec.
Ve výhodném provedení inhibitory cysteinové proteázy podle • ·
předloženého vynálezu mají peptidylovou část jako skupinu A a sulfonylovou část jako skupinu XM a skupinu Rg, tedy znamenají sloučeniny obecného vzorce 18 a 18A. Jak bude odborníky z oblasti techniky oceněno, obecný vzorec 18 nepředstavuje přesně strukturu, jestliže jedna nebo více aminokyselin peptidy lové skupiny znamená prolin.
(18A) .
Jestliže inhibitory cysteinové přoteázy mají obecný vzorec 18 a 18A, inhibitory mají s výhodou skupinu Rg. Navíc je výhodné, jestliže n znamená 1 nebo 2. V jednom provedení R3 a R4 znamenají atom vodíku, v jiném výhodném provedení R3 a R4 společně tvoří nesubstituovaný ethylen, takže vznikne piperazin, který má jedinou skupinu substituentu na Rg.
Ve výhodném provedení inhibitory cysteinové přoteázy mají sulfonyl-petidylovou část jako skupinu ”AM a sulfonylovou část jako skupinu X”, a skupinu Rz a mají tedy obecný vzorec 19 a
19A (jestliže aminokyselina neznamená prolin):
(19)
r9
N---~S----Rfl
I II r4 o (19A)
Jestliže inhibitory cysteinové proteázy mají obecný vzorec 19 a 19A, mají inhibitory s výhodou skupinu R2. Navíc n s výhodou znamená číslo 1 nebo 2. Jak bylo shora uvedeno, tato struktura není přesná, jestliže jedna nebo víc z aminokyselin peptidy lu znamená prolin. V jednom provedení R3 a R4 znamenají atom vodíku, ve výhodném provedení R3 a R4 společně tvoří nesubstituovaný ethylen, takže vznikne piperazin, který má jedinou skupinu substituentu na R2.
Ve výhodném provedení inhibitory cysteinové proteázy podle vynálezu mají acyl-peptidylovou část jako skupinu A a sulfonylovou část jako skupinu X”, jak je uvedeno v obecném vzorci 20 a 20A (jestliže aminokyselina neznamená prolin):
•9 9 999
Jestliže inhbitory cysteinové proteázy mají obecný vzorec 20 a 20A, inhibitory mají s výhodou skupinu R2- S výhodou n znamená číslo 1 nebo 2. V jednom provedení R3 a R4 znamenají atom vodíku, v jiném provedení R3 a R4 společně tvoří nesubstituovaný ethylen, takže vznikne piperazin, který má jedinou skupinu substituentu na R2.
Mezi výhodná provedení patří tedy sloučeniny obecného vzorce I
(I), v němž A a X nezávisle na sobě znamenají skupinu obecného vzorce R1j-X1-, v němž R13 znamená atom vodíku, alkyloxykarbonylalkanoyl, alkyloxykarbonyl, alkanoyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z kar boxy skupiny, alkyloxykarbonylu a heterocykloalkylalkanoylaminové skupiny), cykloalkylkarbonyl a heterocykloalkylkarbonyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z hydroxylu, alkylu, heterocykloalkylu, alkanoylu, alkyloxykarbonylu, arylalkyloxykarbonylu a heterocykloalkylkarbonylu), arylalkyloxykarbonyl, karbamoyl, alkylkarbamoyl, dialkylkarbamoyl, arylkarbamoyl, arylaikylkarbamoyl, arylalkanoyl, aroyl, alkylsulf onyl, arylsulfonyl, arylalkylsulfonyl, alkylsulfamoyl, dialkylsulfamoyl, arylsulfamoyl, heteroarylsulfamoyl, alkylsulf?nyl, dialkylaminosulfinyl nebo arylsulfinyl a X, znamená vazbu nebo dvojvaznou skupinu obecného vzorce a nebo b
(a) (b), v nichž n znamená číslo 0 až 9, X3-X4 znamená vazbu vybranou z -C(O)NR14-, -CH2NR14-, -C(O)CH2- a NR14C(O)-, Y znamená skupinu -CH(RU)- nebo -NR14~ a Z znamená skupinu -(CH2)2~, -C(R15) (R16) nebo -N(R16)-, při Čemž R14 znamená atom vodíku nebo jak níže uvedeno, R15 znamená atom vodíku nebo methyl a každý R16 znamená nezávisle na sobě atom vodíku, alkyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou ze skupiny zahrnující hydroxy1, alkyloxyskupinu, aminovou skupinu, alkylaminovou skupinu, dialkylaminovou skupinu, ureidoskupinu, alkylureidoskupinu, merkaptoskupinu, alkylthioskupinu, karboxyskupinu, karbamoyl, alkylkarbamoyl, dialkylkarbamoyl, alkylsulfinyl, alkylsulfony1 a guanidinovou skupinu, skupinu -P(0) (OR12)2, -OP(O) (OR12)2 nebo -OP(O) (R12)2, v nichž každý R12 znamená nezávisle ná sobě atom vodíku nebo alkyl nebo jeho chráněný derivát), cykloalkyl, cykloalkylalkyl, skupinu vybranou z arylové a arylalkylové skupiny (která je popřípadě substituována na svém arylovém kruhu jednou až třemi skupinami vybranými z hydroxylu, aminové skupiny, guanidinové skupiny, atomu halogenu, popřípadě atomem halogenu substituovaného alkylu, alkyloxyskupiny a arylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým R14 tvoří dvojvaznou skupinu vybranou z methylenové skupiny se 3 až 4 atomy uhlíku a
1,2—fenylendimethylenové skupiny (která je popřípadě substituována hydroxylem, jeho chráněným derivátem nebo oxoskupinou) s tím, že jak X tak A nezmanají současně atom vodíku,
R, i R2 znamená atom vodíku nebo jeden z nich znamená kyanovou skupinu, karboxyskupinu, alkyloxykarbonylovou, alkanoylovou, karbamoylovou, alkylkarbamoylovou, dialkylkarbamoylovou, alkyloxy(alkyl)karbamoylovou nebo aminoalkylkarbamoylovou skupinu, R16 znamená jak shora uvedeno nebo skupinu R13-X2-, při čemž R13 znamená jak shora uvedeno a X2 znamená dvojvaznou skupinu obecného vzorce a nebo b jak shora uvedeno, a R3 a R4 spo45 ·· ··· · · · · • ··« · · · ·· · · · ······ · · · ···* ·· ·· ··· ·· ·· léčně tvoří popřípadě substituovaný ethylen nebo nezávisle znamenají R14, jak shora uvedeno, a farmaceuticky přijatelné soli, jednotlivé isomery a jejich směsi.
Mezi sloučeniny obecného vzorce I patří sloučeniny, v nichž A znamená skupinu obecného vzorce R^-X.j-, v němž r13 znamená atom vodíku, alkyloxykarbonylalkanoyl s celkem 3 až 10 atomy uhlíku, alkoxy(s 1 až 9 atomy uhlíku)karbonyl, alkanoyl se 2 až 10 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z karboxyskupiny, alkyloxy(s 1 až 9 atomy uhlíku)karbony lu a heterocykloalkyl(se 4 až 8 atomy uhlíku)alkanoyl(se 2 až 10 atomy uhlíku)aminové skupiny), cykloalkylkarbonyl se 4 až 8 atomy uhlíku, heterocykloalkyl(se 4 až 8 atomy uhlíku)karbonyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z hydroxylu, alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, heterocykloalkylu(se 4 až 8 atomy uhlíku), alkanoylu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkyl(s 1 až atomy uhlíku)oxykarbonylu, aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku)alkyl (s 1 až 5 atomy uhlíku)oxykarbonylu a heterocykloalkyl(se 4 až 8 atomy uhlíku)karbonylu), aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)oxykarbonyl, karbamoyl, alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)karbamoyl, dialkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)karbamoyl, ary1(se 6 až 10 atomy uhlíku)karbamoyl, arylfse 6 až 10 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)karbamoyl, aryl(se až 10 atomy uhlíku)alkanoyl(s 1 až 5 atomy uhlíku), aroyl(se až 11 atomy uhlíku), alkyl(s 1 až 10 atomy uhlíku)sulfonyl, dialkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)sulfamoyl, aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku)sulfonyl, aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)sulfonyl nebo heteroaryl(se 4 až 8 atomy uhlíku)sulfonyl a X, znamená dvojvaznou skupinu obecného vzorce a, v němž n znamená číslo 0 až 5, X^Xj znamená vazbu vybranou z -C(O)NRU-, Y znamená skupinu N(RU)-, Z znamená skupinu -CH (R16)-, R16 znamená atom vodíku nebo jak níže uvedeno a R8 znamená cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku, cykloalkyl(se 3 až 7 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku), pyridyl, thienyl, furyl, imidazolyl, indoly1, pyridylalkyl(s 1 až 6 atomy uhlíku), thienylalkyl(s 1 až 6 atomy uhlíku), furylalkyl(s 1 až 6 atomy uhlíku) , imidazolylalkyl (s 1 až 6 atomy Uhlíku) , indolyl- alkyl(s 1 až 6 atomy uhlíku), alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)(popřípadě substituovaný skupinou vybranou z merkaptoskupiny, karboxyskupiny, aminové skupiny, methylthioskupinu, methylsulfonylu, karbamoylu, dimethylkarbamoylu, guanidinové a hydroxylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu), skupinu vybranou z fenylu, naftylu, fenylalkylu(s 1 až 6 atomy uhlíku), naftylalkylu(s 1 až 6 atomy uhlíky) (popřípadě substituovaného na arylovém kruhu jednou až třemi skupinami vybranými z aminové skupiny, hydroxylu, atomu chloru, bromu, fluoru nebo jodu, methylu, trifluormethylu, methoxyskupiny a fenylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým Ru tvoří dvoj vaznou skupinu vybranou z methylenu (se 3 až 4 atomy uhlíku) a 1,2-fenylendimethylenu (který je popřípadě substituován hydroxylovou skupinou, jeho chráněným derivátem nebo oxoskupinou), X znamená skupinu obecného vzorce -SÍO)^, v němž R^ znamená alkyl (s 1 až 5 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z aminové skupiny, atomu chloru, bromu nebo fluoru, hydroxyskupiny a methoxyskupiny nebo jejich chráněného derivátu), perhalogen-alkylsulfonyl s 1 až 5 atomy uhlíku, cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku, cykloalkyl(se 3 až 7 atomy uhlíku)-alkyl (s 1 až 7 atomy uhlíku) nebo skupinu vybranou z fenylu, pentafluorfenylu, naftylu a fenylalkylu(s 1 až 6 atomy uhlíku) (který je popřípadě substituován na svém arylovém kruhu jednou až dvěma skupinami vybranými z aminové skupiny, atomu chloru, bromu a fluoru, hydroxylové skupiny, methoxyskupiny a popřípadě atomem halogenu substituované methylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu),
R1 znamená atom vodíku, R2 znamená R16 jak shora uvedeno a R3 i R4 znamená atom vodíku nebo společně tvoří popřípadě substituovaný ethylen.
Mezi další výhodné sloučeniny tohoto provedení patří sloučeniny, v nichž n znamená číslo 0 až 2, R2 znamená R16 jak níže uvedeno, R3 a R4 společně tvoří popřípadě substituovanou ethylenovou skupinu, R13 znamená atom vodíku, alkoxy(se 4 až 8 atomy uhlíku)karbonyl, alkanoyl se 2 až 6 atomy uhlíku (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z karboxyskupiny, alkyl(s 1 až ·· ···· • #· atomy uhlíku)oxykarbonylu a heterocykloalkyl (se 4 až 6 atomy uhlíku)alkanoyl (se 4 až 8 atomy uhlíku)aminové skupiny), skupinu -C(O)NR10R11ř v níž Rw a Rn společně tvoří azamethylen se 2 až 6 atomy uhlíku, oxamethylen se 2 až 6 atomy uhlíku nebo methylen se 3 až 7 atomy uhlíku, cykloalkyl (se 4 až 8 atomy uhlíku) karbonyl, benzyloxykarbonyl, acetyl, benzoyl nebo dimethylsulfamoyl, Rg znamená cykloalkyl s 5 až 6 atomy uhlíku, cykloalkyl (s 5 až 6 atomy uhlíku)methyl, 3-pyridyl, 2-thienyl, 2-furyl, 4—imidazolyl, 3-indoly1, 3-pyridylmethyl, 2-thienylmethyl,
2-furylmethyl, 4-imidazolylmethyl, 3-indolylmethyl, methoxyskupinu, acetoxyskupinu, alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný skupinou vy branou z merkaptoskupiny, kar boxy skupiny, aminové skupiny, methylthioskupiny, methylsulfonylu, karbamoylu, dimethylkarbamoylu, guanidinové a hydroxylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu) , skupinu vybranou z fenylu, 1-naftylu, 2-naftylu, benzylu, 1-naftylmethylu, 2-naftylmethylu a 2-fenylethylu (popřípadě substituovaného na arylovém kruhu jednou skupinou vybranou z hydroxylu, aminové skupiny, atomu chloru, bromu a fluoru nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým Ru tvoří dvoj vaznou skupinu vybranou z methylenu(se 3 až 4 atomy uhlíku) a 1,2-fenylendimethylenu (který je popřípadě substituován hydroxylovou skupinou, jeho chráněným derivátem nebo oxoskupinou) a R9 znamená alkyl (s 1 až 5 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z aminové skupiny, atomu chloru, bromu nebo fluoru a hydroxyskupiny nebo jejich chráněného derivátu), perfluoralkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, cykloalkyl s 5 až 6 atomy uhlíku, cykloalkyl(s 5 až 6 atomy uhlíku)methyl nebo skupinu vybranou z fenylu, naftylu a benzylu (který je popřípadě substituován jednou skupinou vybranou z aminové skupiny, hydroxylu, atomu chloru, bromu nebo fluoru nebo jejich chráněného derivátu) .
Mezi zvláště výhodné sloučeniny tohoto provedení patří sloučeniny, v nchž n znamená číslo 0 až 1, R2 znamená butyl,
2-fenylethyl, 2-methylsulfonylethyl, 2-terc.butoxykarbonylethyl, 2-terč.butoxykarbonylmethy1, 4-terč.butoxykarbonylamino- •· ···· ·· • φ φ · φ φ
butyl, 4-benzoylaminobutyl nebo benzoyloxymethyl, R13 znamená atom vodíku, terč.butoxykarbonyl, benzyloxykarbonyl, acetyl,
3-karboxypropionyl, 3-methoxykarbonylpropionyl, biotinylaminohexanoyl, fenylacetyl, benzoyl, dimethylsulfamoyl, benzylsulf onyl, 1-piperazinylkarbonyl, 4-methyl-l-piperazinylkarbonyl nebo 4-morfolinylkarbonyl, R16 znamená 3-pyridylmethyl, 2-thienylmethyl, 2-furylmethyl, 4-imidazolylmethyl, 3-indolylmethyl, alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z merkaptoskupiny, karboxyskupiny, aminové skupiny, methylthioskupiny, methylsulfonylu, karbamoylu, dimethylkarbamoylu, guanidinové a hydroxylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu), skupinu vybranou z benzylu, 1-naftylmethylu, 2-nafty lmethylu a 2-fenylethylu (popřípadě substituovaného na arylovém kruhu jednou skupinou vybranou z hydroxylu, aminové skupiny, atomu chloru, bromu a fluoru nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým R3 nebo R13 tvoří dvoj vaznou skupinu vybranou z methylenu(se 3 až 4 atomy uhlíku) a 1,2-fenylendimethylenu (který je popřípadě substituován hydroxylovou skupinou, jejím chráněným derivátem nebo oxoskupinou) a Rg znamená methyl, trifluormethyl, popřípadě substituovaný fenyl, 2-naftyl nebo 2-fenylethyl.
Mezi zvláště výhodná provedení patří ty sloučeniny, v nichž n znamená číslo 0, R2 znamená butyl, 2-fenylethyl nebo
2- methylsulfonylethyl, R13 znamená atom vodíku, terč.butoxykarbonyl, benzyloxykarbonyl, biotinylaminohexanoyl, benzoyl,
1- piperazinylkarbonyl, 4-methyl-l-piperazinylkarbonyl nebo 4-morfolinylkarbonyl, R16 znamená alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, popřípadě substituovaný benzyl, 1-naftylmethyl, 2-naftylmethyl,
3— pyridinylmethyl nebo 2-methylsulfonylethyl a Rg znamená fenyl, 1-naf tyl nebo 2—fenylethyl.
Jak je uvedeno na obrázku 1, mezi •výhodné inhibitory podle vynálezu patří (první je zkratka):
Mu-Phe-retro-(D,L)-PheSO2Ph:
2- benzyl-4- (morfolinkarbonylfenylalanyl) -1-fenylsulfonylethylendiamin, • ♦
Mu-Phe-retro-(D,L)-LeuSO2Ph:
2-isobutyl-4- (morfolinkarbonylfenylalanyl) -1-fenylsulfonylethylendiamin,
Mu-Tyr-retro-(D,L)-LeuSO2Ph:
2-isobutyl-4-(morfolinkarbonyltyrosyl) -1-fenylsulfonylethy lendiamin,
Mu-Phe-retro-(D,L)HphSO2Ph:
4- (morfo1inkarbony1feny1a1any1)-2-fenethy1-1-fenylsulfony1- ethylendiamin,
Mu-Tyr-retro-(D,L)Hph-SO2Ph:
4- (morfolinkarbony1tyrosy1) - 2-fenethy1-1-feny1su1fony1ethylendiamin,
Mu-Tyr-retro-(D,L)-NleSO2Ph:
2-butyl-4-(morfolinkarbonyltyrosyl)-1-fenylsulfonylethylendiamin ,
Mu—Np2-retro-(D,L)-NleSQ2Ph:
2-butyl-4- (morfolinkarbonyl-2-naftylalanyl) -1-fenylsulfonylethy lendiamin ,
Boc-Np2-retro-(D,L)-NleSO2Ph:
4- (terč, butoxykar bony 1-2-naftylalanyl) -2-butyl-l-fenylsulfonylethylendiamin,
Piv-Np2-retro-(D,L)-NleSO2Ph:
2-butyl-4- (pivaloyl-2-naftlalanyl) -1-fenylsulfonylethylendiamin,
Mu—Np2-retro-(D,L)-HphSO2Ph:
4-(morfolinkarbonyl-2-naftylalanyl) -2-fenethyl-l-fenylsulfonylethylendiamin,
Boc-Np2-retro-(D,L)-HphSO2Ph:
4- (terč. butoxykarbonyl-2-naf tylalanyl) -2-fenethyl-l-fenylsulfonylethylendiamin,
Mu-Phe-pip-retro-(D,L)-LeuSO2Ph:
2-isobuty1-4-(morfolinkarbonylfenylalanyl)-1-fenylsulfonyl-
1,4-piperazin,
Mu-Phe-pip-retro-(D,L)-HphSO2Ph:
4-(morfolinkarbonylfenylalanyl)-2-fenethyl-l-fenylsulfonyl-
1,4-piperazin, ·· ···· ·· · ·· ·· «4 « 4 4444 4·· · 44 · 4 · · ·
4·· · · · · · · ··
4········ ···· 44 ·· 4·4 ··4·
Z-Np2—retro—(D,L)-NleSO22Np:
4-(benzyloxykarbonyl-2-naftylalanyl) -2-butyl-l- (2-naftylsulfonyl) -ethylendiamin,
Bzac-Np2-retro- (D, L) -NleSO22Np:
4-(benzylaminokarbonyl-2-naftylalanyl)-2-butyl-l-(2-naftylsulfonyl) -ethylendiamin,
BzlSO2-Np2-retro- (D,L) -NleSO22Np:
4-(benzylsulfonyl-2-naftylalanyl)-2-butyl-l-(naftylsulfonyl)ethylendiamin,
Mu-Np2-pip-retro-(D,L)-NleSO22Np:
2-butyl-4- (morfolinkarbonyl-2-naftylalanyl) -1- (2-naf ty lsulfo- nyl) -1,4-piperazin,
MeOSuc-Np2-pip-retro-(D,L)-NleSO22Np:
2-butyl-4- (methoxykarbonylpropionyl-2-naf tylalanyl) -1- (2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazin,
Z-Np2-pip-retro- (D,L) -NleSO22Np:
4-(benzyloxykarbonyl-2-naf tylalanyl) -2-butyl-l- (2-naf ty lsulfonyl) -1,4-piperazin,
Bzac-Np2-pip-retro-(D,L)-NleSO22Np:
4-(benzylaminokarbonyl—2-naftylalanyl)-2-butyl-l-(2-naftylsulfonyl) -1, 4-piperazin,
BzlS02-Np2-pip-retro- (D, L) -NleSO22Np:
4-(benzylsulfonyl-2-naftylalanyl)-2-butyl-l-(naftylsulfonyl)-
1.4- piperazin,
PhS02-Np2-pip-retro- (D, L) -NleSO22Np:
2-butyl-l-(2-naftylsulfony)—4-(fenylsulfonyl-2-naftylalanyl)-
1.4- piperaz in, tBac-Np2-pip-retro-(D,L)-NleSO2Np:
2-butyl-4-(tec.butylaminokarbonyl-2-naftylalanyl)-1-(2-naf- tylsulfonyl)-1,4-piperazin,
Mu-Phe-pip-GlySO2Ph:
4-(morfolinkarbonylfenylalanyl) -1-fenylsulfonyl)-1,4—piperazin,
Z-Np2 -pip-GlySO22Np:
4- (benzyloxykarbonyl-2-naftylalanyl) -1- (2-naftylsulfonyl) -1,4-piperaz in, ·♦ ····
Phac-Np2-pip-GlySO22Np:
I-(2-naftylsulfony)-4-(fenylacetyl-2-naftylalanyl)-2-butyl-l,4-piperazin, t-iBuac-Np2-pip-GlySO22Np:
4- (terč, butylacety 1-2-nafty lalanyl) -1- (2-naf tylsulf onyl) 1,4-piperazin,
Boc-Np 2—pip-GlySO22Np:
4- (terč.butoxykarbony 1-2-naftylalanyl) -1- (2-naftylsulfonyl) -
1,4-piperazin,
Z -Np2 -pip-Gly SO2Bz 1:
4— (benzyloxykarbonyl-2-naf tylalanyl) -1-benzylsulfonyl-1,4-piperazin a
Phac-Np2-pip-GlySO2Bz 1:
1-benzylsulf onyl-4- (fenylacetyl-2-nafty lalanyl) -1,4-piperazin.
Mezi další výhodné sloučeniny (neuvedené na obrázku 1) patří:
Z-leu-pip-GlySO2Np2:
- (benzyloxykarbonylleucyl) -1- (2-naf tylsulf onyl) -1,4-piperazin, Z-ala-pip-GlySO2Np2:
4- (benzyloxykarbony lalanyl) -1- (2-naf tylsulf ony) -1,4-piperazin, NplSO2-leu-pip-GlySO2Np2:
4—(l—naftylsulfonylleucyl) -1- (2-naf tylsulf onyl) -1,4-piperazin, Np2SO2-leu-pip-Glyso2Np2:
4-(2-naf tylsulf onylleucyl) -1- (2-naf tylsulf onyl) -1,4-piperazin, PP-leu-pip-GlySO2Np2:
4-[4- (1-piperidyl) -1-piperidoylleucyl] -1- (2-naf tylsulf onyl) -
1,4-piperazin,
Np2-arg-pip-GlyZ:
- (2-naftylsulfonylarginyl) -1-benzyloxykarbonyl-l, 4-piperazin,
Np2-tyr-Z-le-pip-GlyS02Np2:
4- (2-naftylsulfonyItorysyl) -l- (2-naftylsulfonyl) -1,4-piperazin, MP-leu-pip-retro- (D, L) -HphSO2Np2 :
4- (4-methylpiperazinoylleucyl) -1- (2-naf tylsulf onyl) -2-(2-fenylethyl)-1,4-piperazin, iBoc-nap2-pip-Z-le-pip-GlyS02Np2:
4- [ isobutoxykarbonyl- (2-naftyl) alany 1 ] -1- (2-naftylsulfony 1) • ·
1,4-piperazin,
PM-nap2-pip-GlySO2Np2:
4- [4-piperidylmethoxykarbonyl-(2-naftyl) alanyl]-1- (2-naf tylsulf onyl) -1,4-piperazin,
Bl-nap2-pip-SO2Np2:
4-[6-benzimidazolyl-(2-naftyl)alanyl]-1-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazin a
MP-leu-pip-retro-(D,L)-NleSO2Np2:
2-butyl-4- (4-methylpiperazinoylleucyl) -1- (2-naftylsulf onyl) -1,4-piperazin.
Mezi další výhodné sloučeniny podle vynálezu patří: tBoc-leu-pip-(D,L)-(MeO)(Me)NCOGlySO2Np2:
4-(terč.butoxylkarbony 1 leucyl) -3-(N-methoxy) (N-methyl)karbamoyl-1-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazin,
Z-leu-pip-retro-(D,L) -MeOCOGlySO2Np2: 4-(benzyloxykarbonylleucyl) -2-methoxykarbonyl-l-(2-naf tylsulfonyl)-1,4-piperazin,
Z-leu-pip-retro- (D, L) -HOCOGlySO2Np2:
4- (benzyloxykarbonylleucyl) -2-karboxy-1- (2-naftylsulfonyl) -1,4-piperazin,
Z-leu-pip-retro-(D,L)-EtACOGlySO2Np2 : 4-(benzyloxykarbonylleucyl)-2—ethylkarbamoyl-l-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazin a
Z-leu-pip-retro- (D, L) -AEtACOGlySO2Np2:
4-(benzyloxykarbonylleucyl)-2-(2-aminoethylkarbamoyl)-.1-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazin.
V některých provedeních je důležitá stereochemie aminokyselinových postranních řetězců v polohách R,, R2, Rg a R6. To znamená, že aminokyselinové postranní řetězce mohou mít buď (D) nebo (R) konfiguraci nebo (L) nebo (S) konfiguraci.
Ve výhodném provedení je disociační konstanta inhibice proteázy s inhibitorem, obvykle nazývaná odborníky z oblasti techniky K,, nanejvýš 100 μΜ. Pojem vazebná konstanta nebo disociační konstanta nebo jejich gramatické ekvivalenty zde
• · · · • · ·· • · · · · • · · • 0 ·· znamenají* rovnovážnou disociační konstantu pro reversibilní asociaci inhibitoru s enzymem. Disociační konstanty jsou definované a stanovené jak níže uvedeno.
Určení disočiačních konstant je známo v oblasti techniky. Například pro reversibilní inhibiční reakce, jako jsou reakce podle předloženého vynálezu, je reakční schéma následující:
(rovnice 1)
Enzym a inhibitor se spojí za vzniku komplexu enzym-inhibitor E.I. Předpokládá se, že tento stupeň bude rychlý a reversibilní, při čemž nedochází k žádným chemickým změnám. Enzym a inhbitor jsou spolu drženy nekovaletními silami. V této reakci k1„ znamená rychlostní konstantu druhého řádu tvorby reversibilního komplexu E.I. Konstanta k2 je rychlostní konstanta prvního řádu disociace reversibilního komplexu E.I. V této reakci Ki = k 2/kr
Měření rovnovážné konstanty K, probíhá podle způsobů dobře známých odborníkům z oblasti techniky, jak je popsáno v příkladech. Například testy obvykle používají syntetické chromogenní nebo fluorogenní substráty.
Případné hodnoty K, mohou být vyhodnoceny použitím Dixonova grafu, jak popsal Irwin Segel v Enzyme Kinetics: Behavior and analysis of rapid equilibrium and steady-state enzyme systems, Wiley-Interscience Publication, John Wiley and Sons, New York 1975, nebo pro kompetitivní vazebné inhibitory z následující rovnice:
l-(Vj/v0) = [I]/ ([I] + K, (H ([S]/KM))) (rovnice 2) , v níž v0 znamená rychlost hydrolýzy substrátu v nepřítomnosti inhibitoru a vt- znamená rychlost v přítomnosti kompetitivního inhibitoru.
······ ·· · ·· ·· « · · ···· · · · · · · · · · · · ·· • ♦ · · · ······ · ······ · · · • ••4» *« ·· ♦·· ·· ♦·
Tomu je třeba rozumět tak, že disociační konstanty jsou zvláště užitečným způsobem kvantifikování účinnosti enzymu s příslušným substrátem nebo inhibitorem a jsou často používány v oblasti techniky jako takové. Jestliže nějaký inhibitor vykazuje velmi nízkou Kj, jde o účinný inhibitor. Inhbitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu mají tedy disociační konstanty Kj nanejvýš 100 μΜ. Výhodná provedení mají inhibitory, které vykazují disociační konstanty nanejvýš 10 μΜ, nanejvýš 1 μΜ, při čemž nejvýhodnější provedení mají disociační konstanty nanejvýš 100 nM.
Ve výhodném provedení jsou inhibitory cysteinové proteázy chirální. Pojem chirální” nebo jeho gramatické ekvivalenty zde znamenají takovou sloučeninu, která vykazuje asymetrii. To znamená, že chirální sloučenina není identická se svým zrcadlovým Obrazem. Ve výhodném provedení jsou tedy sloučeniny podle předloženého vynálezu čisté diasteroisomery. Chirální sloučeniny, a zvláště chirální inhibitory cysteinové proteázy, jsou užitečné podle předloženého vynálezu, protože biologické systémy, a enzymy zvláště, jsou stereospecifické a zvýhodňují (S) nebo L-formu aminokyselin. Ve výhodném provedení tedy skupiny A a X inhibitorů cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu bu-dou mít aminokyselinové postranní řetězce v (S) nebo L-konfiguraci, i když stejné inhibitory mohou využívat aminokyselinových postranních řetězců v (R) nebo D-konfiguraci.
V alternativních provedeních prostředky podle předloženého vynálezu nejsou čisté epimery, ale jsou směsi, které obsahují oba epimery.
Syntéza inhibitorů cysteinových proteáz podle předloženého vynálezu probíhá následujícím způsobem.
Syntéza inhibitorů cysteinové proteázy se skupinami A a
X navázanými substituovanými ethylendiaminovými řetězci je ukázána obecně na obrázcích 2 a 3. Pro nesubstituované ethylendiaminové řetězce R1 a R2 znamenají atom vodíku. Obrázek 3 ukazuje syntézu Rv obrázek 4 popisuje syntézu R2. Obě schémata jsou uvedena s peptidylovou skupinou jako představitelem části A a sulfonylovou skupinou jako představitelem části X. Odborníci z oblasti techniky však ocení, že tato schémata mohou být použita pro syntetizování inhibitorů cysteinové proteázy s jinými skupinami A a X.
Syntéza inhibitorů cysteinových proteáz s R2 a R5 substituovaným piperazinem jako vazbou je obecně uvedena na obrázku 4. U nesubstituovaných piperazinů R2 a R5 znamenají atom vodíku. Jak bylo shora uvedeno, peptidylová skupina je uvedena jako představitel skupiny A a sulfonylová skupina jako představitel skupiny X. Jak shora uvedeno, odborníci z oblasti techniky ocení, že tato schémata mohou být použita pro syntetizování inhibitorů cysteinové proteázy s jinými skupinami A a X.
Syntéza inhibitorů cysteinových proteáz s R1 a R6 substituovaným piperazinem jako vazbou je obecně uvedena na obrázku
5. U nesubstituovaných piperazinů R1 a R6 znamenají atom vodíku. Jak bylo shora uvedeno, peptidylová skupina je uvedena jako představitel skupiny A” a sulfonylová skupina jako představitel skupiny X”. Jak shora uvedeno, odborníci z oblasti techniky ocení, že tato schémata mohou být použita pro syntetizování inhibitorů cysteinové proteázy s jinými skupinami A a X.
Meziprodukty užitečné pro přípravu sloučenin podle vynálezu, v nichž R1 nebo R2 znamená karboxyskupinu, karbamoyl, alky lkarbamoyl, dialkylkarbamoyl, alkoxy(alkyl)karbamoyl nebo aminoalkylkarbamoyl, jsou komerčně dostupné nebo mohou být snadno připraveny odbodníkem z oblasti techniky. Například reaktivní piperazinové meziprodukty, v nichž R1 nebo R2 tvoří amidový derivát, se mohou připravit acylací příslušného aminu nebo jeho chráněného derivátu příslušně chráněnou karboxylovou kyselinou (např. N-chráněnou 2-piperazinkarboxylovou kyselinou) a potom se chránící skupina odstraní. Chráněná piperazinkarboxylová kyselina se připraví z komerčně dostupného výchozího materiálu standardní chemií ochranných skupin.
φφ φ φφ φ • · · · · ·· φφφ» • φ φ · · φ · φ φ • φ φ φ φ φ · φφφ φ · ······ φφφ φφφφ ·· φφ φφφ φφ ··
Jak bude odborníky z oblasti techniky oceněno, shora uvedené syntetické způsoby se mohou používat pro syntetizování inhibitorů cysteinové proteázy podle vynálezu. Represenativní příklady takových syntéz jsou uvedeny v příkladech.
V jednom provedení se inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu dále vyčistí, jestliže je to nutné, po syntéze, například aby se odstranily nezreagované materiály. Například inhibitory cysteinových proteáz podle předloženého vynálezu mohou být krystalovány nebo se mohou nechat projít chromatografickými kolonami, při čemž čisté inhibitory se eluují směsí rozpouštědel.
Jakmile jsou jednou inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu vyrobeny, mohou se snadno testovat jejich inhibiční účinky. Inhibitor se nejdříve testuje na cysteinovou proteázu, na kterou byla vybrána cílová skupina inhibitoru, jak shora uvedeno. Mnohé cysteinové proteázy a jejich odpovídající chromogenní substráty jsou také komerčně dostupné. Rozmanité cysteinové proteázy se tedy rutinně testují syntetickými chromogenními substráty v přítomnosti a bez přítomnosti inhibitoru cysteinové proteázy, aby se potvrdil inhibiční účinek sloučeniny, při čemž se používají způsoby známé z oblasti techniky. Účinné inhibitory se pak podrobí kinetické analýze, aby se vypočetly hodnoty Kj a stanoví se disociační konstanty.
Jestliže sloučenina inhibuje alespoň jednu cysteinovou proteázu, jde o inhibitor cysteinové proteázy pro účely tohoto vynálezu. Výhodná provedení mají inhibitory, které vykazují správné kinetické parametry proti alespoň cílové cysteinové proteáze.
V některých případech není cysteinové proteáza komerčně dostupná ve vyčištěné formě. Inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu se mohou testovat také na účinnost použitím biologických testů. Například se mohou inhibitory přidat k buňkám nebo tkáním, které obsahují cysteinové pro<
• fa • · fa
*· ···· • fa
«· ·· • fafa fa * · fa fa • fafa fa teázy, a změří se biologické účinky.
V jednom provedení se inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu syntetizují nebo modifikují tak, že se sníží nebo vůbec zabrání in vivo a in vitro proteolytické degradaci inhibitorů. Obecně se to provádí zahrnutím syntetických aminokyselin, derivátů nebo substituentů do inhibitoru Cysteinové proteázy. S výhodou se do inhibitoru cysteinové proteázy zahrne pouze jedna ne-přirozeně se vyskytující aminokyselina nebo aminokyselinový postranní řetězec, takže zacílení inhibitoru na enzym není významně ovlivněno. Některá provedení , která používají delší inhibitory cysteinové proteázy, obsahující četné zacílené zbytky, mohou tolerovat více než jeden syntetický derivát. Navíc, substituenty typu nepřirozeně se vyskytujících aminokyselin mohou předstírat navázání přirozeně se vyskytujícího postranního řetězce na enzym. Takže je tolerován více než jeden syntetický substituent. Nebo se také mohou pro snížení nebo zabránění degradace inhibitoru používat peptidové isostery. V tomto provedení se resistence modifikovaných inhibitorů cysteinové proteázy může testovat na různé známé komerčně dostupné proteázy in vitro, aby se stanovila jejich proteolytická stabilita. Slibní kandidáti se mohou rutinně testovat na zvířecích modelech, například pomocí značených inhibitorů, aby se stanovila in vivo stabilita a účinnost.
V jednom provedení se inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu označují. Značený inhibitor cysteinové proteázy zde znamená takový inhibitor cysteinové proteázy, který má připojen alespoň jeden prvek, isotop nebo chemickou sloučeninu tak, aby byla umožněna detekce inhibitoru cysteinové proteázy nebo inhibitoru cysteinové proteázy navázaného na cysteinovou proteázu. Označení spadá obecně do tří skupin: a) isotopické značky, které mohou být radioaktivní nebo mohou znamenat těžké isotopy, b) imunní značky, kterými mohou být protilátky nebo antigeny, a c) barevná nebo fluorescenční barviva. Značky mohou být zahrnuty do inhibitoru cysteinové proteázy v jakékoliv poloze. Mezi příklady vhodných značek patří 14C, 3H, biotin a fluorescenční značky dobře známé z oblasti techniky.
• to ···· • to • · · to · toto ·· • · · ·· ·· · ·· ·♦·· ·· ·· • ·· ·· <· ·· · · • ♦· ·· • · ···· · • · · · ··· ·· ··
Ve výhodném provedení se inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu podávají pacientovi pro léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou. Poruchy související s cysteinovou proteázou nebo jejich gramatické ekvivalenty zde znamenají patholgické stavy, které souvisejí s cysteinovou proteázou. Při některých prouchách tento stav souvisí se zvýšenými hladinami cysteinových proteáz. Například artritida, muskulární dystrofie, zánět, invaze nádoru a glomerulonefritida jsou poruchy, které všechny souvisejí se Zvýšenými hladinami cysteinových proteáz. U jiných poruch nebo onemocnění tento stav souvisí s výskytem extracelulární aktivity cysteinové proteázy, která není přítomna v normální tkáni. V jiných provedeních cysteinová poroteáza souvisí se schopností pathogenu, jako je virus, infikovat hostitelský organismus nebo replikovat v hostitelském organismu.
Mezi specifické příklady stavů nebo poruch, které souvisejí s cysteinovou proteázou, patří, ale bez omezení na ně, artritida, muskulární dystrofie, zánět, invaze nádoru, glomerulonefritida, malarie, Alzheimerova nemoc, poruchy související s rozpadem autoimunního systému, periodontální onemocnění, metastáze rakoviny, poranění, zánět, zánět dásní, leischmanióza, filariáza, osteoporóza a osteoartritida, další bakteriální infekce a infekce získané od parazitů a další jak shora uvedeno. Zvláště jsou zde, jak shora uvedeno, zahrnuty poruchy související s enzymem konvertujícím interleukin lfi (ICE).
V tomto provedení se terapeuticky účinná dávka inhibitoru cysteinové proteázy podává pacientovi. Terapeuticky účinná dávka zde znamená takovou dávku, která poskytuje účinky, kvůli kterým se podává. Přesné dávkování bude záviset na poruše, která se má léčit, a na množství cysteinové proteázy, která má být inhibována, a bude zajištěno zručným odborníkem z oblasti techniky použitím známých způsobů. Obecně se inhibitory cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu podávají v množství 1 až • · • ·>
1000 mg za den. Například, jak shora uvedeno, některé poruchy souvisejí se zvýšenými hladinami cysteinových proteáz. Díky stechiometrii inhibiční reakce (1:1) bude podávaná dávka přímo úměrná množství přebývající cysteinové proteázy. Dále, jak je známo v oblasti techniky, se musí vzít v úvahu úprava degradace inhibitoru, systémové versus místní podávání a rychlost syntézy nové proteázy, stejně jako věk, tělesná hmotnost, obecný zdravotní stav, pohlaví, dieta, doba podávání, interakce léčivých látek a intenzita onemocnění; tyto podmínky na základě rutinního experimentování odborník z oblasti techniky vezme v úvahu při stanovení dávky.
Pacient pro účely předloženého vynálezu zahrnuje jak lidi tak další živočichy a organismy. Tyto způsoby jsou tedy použitelné jak v humánní tak veterinární medicíně. Mezi veterinární aplikace patří například, ale bez omezení na ně, psi, hovězí dobytek, kočky, prasata, kozy, koně a ovce, stejně jako další domácí zvířata včetně plazů, jako jsou ještěrky, želvy a hadi, ptáci, jako pěnkavy a členové skupiny papoušků, dále pak králíci, hlodavci, jako jsou krysy, myši, morčata a křečci, obojživelníci, ryby a členovci. Mohou být léčena také cenná nedomestikovaná zvířata, jako jsou zvířata v ZOO. Ve výhodném provedení je pacientem savec, v nejvýhodnějším provedení je pacientem člověk.
Podávání inhibitorů cysteinové proteázy podle předloženého vynálezu se může provádět různými způsoby, včetně, ale bez omezení na ně, orálního, subkutánního, intravenózního, intranazálního, transdermálního, intraperitoneálního, intramuskulárního, intrapulmonárního, vaginálního, rektálního nebo nitroočního. V některých případech, například při léčení ran a zánětu, se mohou inhibitory cysteinové proteázy aplikovat přímo jako roztok nebo sprej.
Farmaceutické přípravky podle předloženého vynálezu obsahují inhibitor cysteinové proteázy ve formě, která je vhodná pro podávání pacientovi. Ve výhodném provedení jsou farmaceu• · · · · · · · · • · ♦ · · ♦ · · · · · · ······ ··· • ·«· ·· ·« ··· ·· ·· tické přípravky ve formách rozpustných ve vodě, jako tehdy, když jsou přítomny jako farmaceuticky přijatelné soli, což znamená jak soli s bázemi tak soli s kyselinami. Farmaceuticky přijatelná adiční sůl s kyselinou znamená takové soli, které si zachovávají biologickou účinnost volné báze a které nejsou biologicky nebo jinak nežádoucí, vyrobené z anorganických kyselin, jako je kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová, dusičná, fosforečná a podobně, a organických kyselin, jako je kyselina octová, propionová, glykolová, pyrohroznová, šťavelová, maleinová, malonová, jantarová, fumarová, vinná, citrónová, benzoová, skořicová, mandlová, methansulfonová, ethansulfonová, p-toleunesulfonová, salicylová a podobné. Farmaceuticky přijatelné adiční soli s bází zahrnuje takové soli, které jsou odvozeny od anorganických bází, jako jsou sodné, draselné, lithné, amonné, vápenaté, hořečnaté, železité, zinečnaté, měďnaté, manganaté, hlinité a podobné soli. Zvláště výhodnými jsou amonné, draselné, sodné, vápenaté a hořečnaté soli. Mezi soli odvozené od farmaceuticky přijatelných organických netoxických bází patří soli primárních, sekundárních a terciárních aminů, substituované aminy včetně přirozeně se vyskytujících substituovaných aminů, cyklických aminů a bazických anexů, jako je isopropylamin, trimethylamin, diethylamin, triethylamin, triprolyamin a ethanolamin.
Farmaceutické přípravky mohou obsahovat také jednu nebo více z následujících složek: nosné proteiny, jako je sérový albumin, pufry, plnidla, jako je mikrokrystalická celulóza, laktóza, kukuřičné a jiné škroby, vazebná činidla, sladidla a další ochucovací činidla, barvící činidla a polyethylenglykol. Přísady jsou dobře známy v oblasti techniky a jsou používány v rozmanitých přípravcích.
Následující příklady slouží k plnějšímu popsání způsobu používání shora popsaného vynálezu a uvádějí nejlepší způsoby pro provedení různých aspektů tohoto vynálezu. Tomu je třeba rozumět tak, že tyto příklady v žádném případě neslouží k omezení správného rozsahu tohoto vynálezu, ale jsou zde uvedeny spíše pro ilustraci. Všechny citace, které jsou zde citovány, jsou zde zahrnuty jako odkazy.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Syntéza inhibitoru cysteinové proteázy s karbamoyl-peptidylovou skupinou A, sulfonylovou skupinou X a ethylendiaminovým základním skeletem
Pokud není jinak uvedeno, všechny reakce se provádějí v inertní atmosféře argonu za teploty místnosti. THF byl oddestilován od natriumbenzofenonketylu. Všechna další rozpouštědla a komerčně dostupné materiály byly použity bez dalšího čištění. Pokud není jinak uvedeno, byla všechna reakční činidla získána od Aldrich, Tne.
4- (Morfolinkarbonylfenylalanyl) -2-fenethyl-l-fenylsulfonyl-ethylendiamin (Mu-Phe-retro-(D,L) -Hph-SO2Ph)
K suspenzi homofenylalaninu (Synthetech)(7 g, 39,1 mmolu) v destilované vodě (21,5 ml) se přidá 2M sodný NaOH (21,5 ml). Po 5 minutách se suspenze vyčeří a přidá se fenylsulfonylchlorid (5,48 ml, 43 mmolťl). Po 2 h se pH reakční směsi 2M vodným NaOH (5 ml) upraví na 12 a směs se extrahuje diethyletherem (2 x 10 ml). Hodnota pH vodné vrstvy se 6M HC1 (10 ml) upraví na 1 a produkt se extrahuje EtOAc (100 ml), vysuší nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se rozetře s diethyletherem (2 x 100 ml) , zfiltruje, a pumpou se vysuší dosucha. Získá se 8,74 g (70 % hmotn.) fenylsulfonylhomofenylalaninu.
K roztoku 4-morfolinkarbonylfenylalaninu (Mu-heOH, 0,14 g, 0,48 mmolu, připravený podle způsobu podpsaného v Esser R.
a spol.: Arthritis and Rheumatism 37, 236 (1994)) v THF (10 ml) při -10 °C se přidá 4-methylmorfolin (0,11 ml, 0,96 mmolu) a • ♦ ·· • · · · ♦ · ♦ · · ···· • ♦··.·.· 9 ···· · ······ ··· ···· ·· ♦ ♦ ··· ·· ·· isobutyl-chlorformiát (64 μΐ, 0,48 mmolu). Po 5 minutách aktivace se přidá hydrochlorid 2-fenethyl-l-fenylsulfonylethylendiaminu (0,15 g, 0,44 mmolu, připravený konverzí N-fenylsulfonylhómofenylalaninu na amid reakcí s CDI/NH3/THF, následující redukcí karbonylamidu lithiumaluminiumhydridem na odpovídající amin a zpracováním s HC1 v dioxanu). Po 1 h se reakční směs zředí dichlormethanem (50 ml) a promyje se 1M HC1 (50 ml) a nasyceným vodným NaHCO3 (50 ml) , vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se zředí dichlormethanem (5 ml) a vysráží se hexanem (200 ml), zfiltruje a ve vakuu se vysuší dosucha. Získá se 0,22 g (89 % hmotn.) žádaného produktu.
Každý vzorek byl chromatografován na tenké vrstvě (TLC). Vzorek byl zviditelněn UF světlem při 254 nm, potom ninhydrinem, bromkresolovou zelení nebo vybarvením p-anisaldehydem. Retenční faktor (Rf) Mu-Phe-retro-(D,L)-Hph-S02Ph byl 0,67 (10% MeOH/CH2Cl2) .
Příklad 2
Syntéza inhibitoru cysteinové proteázy s acyl-peptidylovou A skupinou, sulfonylovou X skupinou a ethylendiaminovým základním skeletem
Syntéza 2-butyl-4-(pivaloyl-2-naftylalanyl)-1-fenylsulfonyl-ethylendiaminu (zkráceně Piv-Np2-retro-(D,L)-NleSO2Ph)
K roztoku hydrochloridu methylesteru norleucinu (4,87 g,
26,8 mmolu) v THF (20 ml) se přidá triethylamin (8,22 ml, 59 mmolů) a fenylsulfonylchlorid (3,76 ml, 30 mmolů). Po 16 h se rozpouštědlo za sníženého tlaku odstraní. Odparek se rozpustí V EtOAc (100 ml) a promyje se 1M HC1 a nasyceným vodným NaHCO3, vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Získá se 6,04 g (79 % hmotn.) methylesteru N-fenylsulfonylnorleucinu.
♦ · ···· ·* · ·· ·« • · ♦ · · ·· · · · # ·· · · · ···· • · ♦ · · · · ···· · ······ · · · ···· ·· ·· ·»· ·· ··
K roztoku terč. butoxykarbonyl-2-naf tylalaninu (Synthetech) (0,59 g, 1,88 mmolu) v THF (25 ml) při -10 °C se přidá 4-methy lmorfolin (0,41 ml, 3,8 mmolu) a isobutyl-chlorformiát (0,25 ml, 1,88 mmolu). Po 5 minutách aktivace se přidá hydrochlorid
2-(D,L)-butyl-l-fenylsulfonylethylendiaminu (0,5 g, 1,7 mmolu, připravený konverzí methylesteru N-fenylsulfonylnorleucinu na odpovídajáící kyselinu působením vodného hydroxidu sodného, vznikem amidu reakcí s CDI/NH3, následující redukcí karbonylamidu na odpovídající amin a zpracováním š HCl v dioxanu). Po 1 h se reakční směs zředí ethylacetátem (100 ml) a promyje se 1M HCl (50 ml) a nasyceným vodným NaHCO3 (50 ml), vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se rozetře s hexanem (15 ml) a vysuší se ve vakuu. Získá se 0,40 g (76 % hmotn.) Boc-Np2-retro-(D,L)-NleS02Ph.
K roztoku hydrochloridu Np2-retro-(D,L)-NleS02Ph (0,97 g, 1,98 mmolu, připravený konverzí Boc-Np2-retro-(D,L) -NleSOgPh na hydrochlorid Np2-retro-(D,L)-NleSO2Ph působením HCl/dioxan) v THF (25 ml) při -10 °C se přidá pivaloylchlorid (0,27 ml, 2,2 mmolu) a 4-methylmorfolin (0,48 ml, 4,4 mmolu) . Po 1 h se reakční směs zředí dichlormethanem (100 ml) a promyje se 1M HCl (100 ml) a nasyceným vodným NaHC03 (100 ml), vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Získá se 0,66 g (66 % hmotn.) Piv-Np2-retro-(D,L)-NleSO2Ph, TLC: Rf = 0,3 (20% EtOAc/CH2Cl2) .
Příklad č. 3
Syntéza inhibitoru cysteinové proteázy obsahující sulfonyl-peptidylovou A skupinu, sulfonylovou X skupinu a piperazinový základní skelet
Syntéza 2-butyl-l-(2-naftylsulfonyl)-4-(fenylsulfonyl-2-naftylalanyl)-1,4-piperazin, zkráceně PhS02-Np2-pip-retro-(D,L)-NleSO22Np
K roztoku Z-Nle-OH (10 g, 38 mmolů) v THF (100 ml) se při
·« · · · ·· ··· ··
-10 °C přidá pyridin (6,7 ml, 83 mmolů) a thionylchlorid (3,02 ml, 42 mmolů). Po 30 minutách se přidá triethylamin (11,6 ml, 83 mmolů) a ethylester N-benzylglycinu (5,4 ml, 42 mmolů). Po 2 h se reakční směs zředí EtOAc (200 ml) a promyje se 1M HC1 (150 ml) a nasyceným vodným NaHCO3 (150 ml), vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Získá se 16,61 g (100 % hmotn.) ethylesteru Z-norleucyl-N-benzylglycinu .
K roztoku hydrobromidu ethylesteru norleucyl-N-benzylglycinu (14,6 g, 38 mmolů, připravený konverzí ethylesteru Z-norleucyl-N-benzylglycinu na hydrobromidovou sůl působením (30% (hmotn.)) HBr v HOAc) v EtOH (50 ml) se přidá triethyleamin (13,2 ml, 94 mmolů). Po 2 h se rozpouštědlo odstraní za sníženého tlaku. Odparek se rozpustí v EtOAc (100 ml) a promyje se 1M HC1 (100 ml) a nasyceným vodným NaHC03 (100 ml), vysuší se nad MgSO4 a zfiltruje. Zředí se diethyletherem (300 ml) a nechá se 2 h při 0 °C. Tento roztok se pak zfiltruje a pevná látka se vysuší ve vakuu. Získá se 6,3 g (64 % hmotn.) l-benzyl-3-butyldiketo-1,4-piperazinu.
K roztoku dihydrochloridu l-benzyl-3-butyl-l,4-piperazinu (2,2 g, 8,2 mmolu, připravený konverzí l-benzyl-3-butyldiketo-1,4-piperazinu na 4-benzyl-3-butyl-l,4-piperazin redukcí lithiumaluminumhydridem a následujícím působením HCl/dioxan) v THF (50 ml) se přidá BSA (4,4 ml, 18 mmolů), triethylamin (2,5 ml, 18 mmolů) a 2-naftylsUlfonylchlorid (2 g, 9 mmolů). Po 16 h se reakční směs zředí EtOAc (100 ml) a promyje se 1M HC1 (100 ml) a nasyceným vodným NaHCO3 (100 ml) , vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se zředí dichlormethanem (100 ml) . K roztoku se přidá směs MgSO4/aktivní uhlí/oxid křemičitý (1:1:1, 5 g) , směs se vaří pod zpětným chladičem 5 minut a zfiltruje. Rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Získá se 2,7 g (80 % hmotn.) 4-benzyl-2-butyl-l-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazinu.
K roztoku Z-(2-naftylalaninu) (2,1 g, 5,9 mmolu, přípravě-
ný konverzí 2-naftylalaninu (Synthetech) na jeho Z-derivát působením benzyloxykarbonylchloridu) v THF (50 ml) při -10 °C se přidá pyridin (0,96 ml, 12 mmolů) a thionylchlorid (0,43 ml,
5,9 mmolu). Po 30 minutách se přidá roztok hydrochloridu 2-butyl-l-(2-naftlsulfonyl)-l,4-piperazinu (2,4 g, 5,4 mmolu, připravený konverzi l-benzyl-3-butyl-l-(2-naftylsulfonyl) -1,4-piperazinu na 2-butyl-l-(2-naftylsulfonyl) -1,4-piperazin působením H2/5% (hmotn.) Pd/C/IPA (isopropanol) v Parrově hydrogenační aparatuře a následujícím působením HCl/dioxan), BSA (1,5 ml,
5,9 mmolu) a triethylamin (1,7 ml, 12 mmolů) v CH2C12 (50 ml) . Po 1 h se reakční směs zředí dichlormethanem (100 ml) a promyje se 1 M HC1 (100 ml) a nasyceným vodným NaHC03, vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se zředí diethyletherem (10 ml) a vysráží se hexanem (100 ml), zfiltruje a vysuší se vakuu. Získá se 1,7 g (43 % hmotn.) 4-(Z-(2-naftyl-alanyl))-2-butyl-l-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazinu.
K roztoku hydrobromidu 4-(2-naftylalanyl)-2-butyl-l-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazinu (0,2 g, 0,35 mmolu, připravený ze Z derivátu působením 30% (hmotn.) HBr v AcOH) v THF (20 ml) při -10 °C se přidá BSA (0,19 ml, 0,76 mmolu), fenylsulfonylchlorid (50 μΐ, 0,38 mmolu) a triethylamin (0,11 ml, 0,76 mmolu) . Po 1 h se reakční směs zředí EtOAc (50 ml) a promyje se 1 M HC1 (50 ml) a nasyceným vodným NaHCO3 (100 ml) , vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se zředí dichlormethanem (5 ml) a vysráží se diisopropyletherem (50 ml) , zfiltruje a vysuší se vakuu. Získá se 0,1 g (43 % hmotn.) konečného produktu. TLC: Rf = 0,78 (50% EtOAc/ /CH2C12) .
·♦···· ··· ··* · ·· ·· ··· ·· 9©
Příklad č. 4
Syntéza inhibitoru cysteinové proteázy obsahující alkyloxykarbonyl-peptidylovou A skupinu, sulfonylovou X skupinu a piperazinový základní skelet
Syntéza 4-(benzyloxykarbonyl-2-naftylalanyl)-1-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazinu, zkráceně Z-Np2-pip-GlySO2Np
K suspenzi piperazinu (3,4 g, 40 mmolů) v THF (100 ml) při 0 °C se přidá BSA (9,8 ml, 40 mmolů) a 2-naftyIsulfonylchlorid (3 g, 13 mmolů) . Po 30 minutách se reakční směs zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se zředí dichlormethanem (100 ml), promyje se nasyceným vodným NaHCO3 (100 ml), vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se rozetře s diethyletherem (20 ml)/hexanem (20 ml) a vysuší se vakuu. Získá se 3,4 g (92 % (hmotn.) l-(2-naftylsulfonyl)-1,4-piperazinu.
K roztoku Z-(2-naftylalaninu) (2,1 g, 5,8 mmolu) v THF (50 ml) při 0 °C se přidá pyridin (0,97 ml, 11 mmolů) a thionylChlorid (0,43 ml, 6 mmolů). Po 30 minutách se přidá 1-(2-naftylsulfonyl)-l,4-piperazin (1,5 g, 5,4 mmolu) a triethylamin (1,7 ml, 12 mmolů) . Po 1 h se reakční směs zředí EtOAc (100 ml) a promyje se 1M HC1 (100 ml) a nasyceným vodným NaHCO3 (100 ml), vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Produkt se zředí dichlormethanem (20 ml), vysráží hexanem (200 ml), zfiltruje a vysuší se ve vakuu. Získá se 1,8 g (55 % hmotn.) žádaného produktu. TLC: Rf = 0,39 (50% EtOAc/hexan).
······ · · · φ · ·· • · · · φφφ « φ * · φ φ φ φ φ φφφφ ♦ φφφ φ · φ «φφφ φ ·*··«· φφφ ··♦· «0 ·♦ φφφ φφ «φ
Příklad č. 5
Syntéza inhibitoru cysteinové proteázy obsahující acylpeptidy1ovou A skupinu, sulfonylovou X skupinu a piperazinový základní skelet
Syntéza l-benzylsulfonyl-4-(fenylacetyl-(2-naftylalanyl))-1,4-piperazinu, zkráceně Phac-Np2-pip-GlySO2Bzl
K suspenzi piperazinu (4 g, 46 mmolů) v THF (100 ml) při -10 °C se přidá BSA (11,5 ml, 46 mmolů) a α-toluensulfonylchlorid (3 g, 15 mmolů). Po 1 h se reakční směs zfiltruje, zředí se EtOAc (100 ml), promyje se nasyceným vodným NaHCO3, vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se rozetře s diethyletherem (20 ml)/hexanem (20 ml) a vysuší se pumpou. Získá se 2,5 g (67 % hmotn.) pevného 1-benzylsulfony1-1,4-piperaz inu.
K roztoku Z-(2-naftylalaninu) (0,81 g, 6,9 mmolu) v THF (50 ml) se přidá pyridin (1,12 ml, 13,7 mmolu) a thiónylchlorid (0,5 ml, 6,9 mmolu). Po 30 minutách se přidá roztok 1-benzylsulf onyl-1,4-piperazinu (1,5 g, 6,2 mmolu), BSA (3,4 ml, 13,7 mmolu) a triethylamin (1,9 ml, 13,7 mmolu) v THF (50 ml). Po 2 h se reakční směs zředí EtOAc (200 ml) a promyje se 1M HC1 (200 ml) a nasyceným vodným NaHCO3 (200 ml), vysuší se nad MgSO4, zfiltruje a rozpouštědlo se za sníženého tlaku odstraní. Odparek se rozpustí v dichlormethanu (30 ml) , vysráží se hexanem (200 ml), zfiltruje a vysuší se ve vakuu. Získá se 1,5 g (70 % hmotn.) 4-(benzyloxykarbonyl)-2-(2-naftylalanyl)-l-benzylsulfonyl-1,4-piperazinu, Z-Np2-pip-GlySO2Bzl.
K roztoku 4-(2-naftylalanyl)-1-benzylsulfOnyl-1,4-piperazinu (0,40 g, 0,77 mmolu, připraveného konverzí Z-Np2-pip-GlySO2Bzl na jeho hydrobromid působením 30% HBr v AcOH) v THF (50 ml) při -10 °C se přidá fenylacetylchlorid (0,11 ml, 0,84 mmolu) a triethylamin (0,23 ml, 1,7 mmolu). Po 1 h se reakční směs zředí EtOAc (100 ml) a promyje se 1M HC1 (100 ml) a nasy···· ·· · 99 99 • · · · · « * · · · · * · · · · ·· ·· • « ♦ · · * · · · · * * *·*««· · * « «·«* ·· ·· «·· ·« ·· ceným vodným NaHCO3 (100 ml), vysuší se nad MgSO4 a zfiltruje. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Odparek se rozpustí v dichlormethanu (10 ml), vysráží se hexanem (100 ml), zfiltruje a vysuší se ve vakuu. Získá se 0,28 g (65 % hmotn.) žádaného produktu. TLC: Rf = 0,39 (20% EtOAc/CH2Cl2).
Zbývající sloučeniny uvedené na obrázku 1 se syntetizují shora popsanými způsoby.
Příklad 6
Kinetiky inhibice
Podmínky pro kathepsin B: 50mM fosforečnan, pH 6,0, 2,5mM EDTA, 2,5 mM DTT. Substrát: [Z-Arg-Arg-AMC] = 50 μΜ (Km = 190 μΜ). Test při 25 °C byl započat přidáním kat B (konečná koncentrace lOnM). Zvýšení fluorescence při 450 nm s excitací u 380 nm bylo sledováno po dobu 2 minut. Bylo zaznamenáno snížení rychlosti hydrolýzy substrátu po přidání různých koncentrací inhibitoru. Test byl v pozorovaném rozmezí lineární. Bylo provedeno dvoj í měření.
Podmínky pro kathepsin L: 50mM acetát, pH 5,5, 2,5mM EDTA,
2,5 mM DTT. Substrát: [Z-Phe-Arg-AMC] = 5 μΜ (Km = 2μΜ). Test při 25 °C byl započat přidáním kat L (konečná koncentrace lnM) . Zvýšení fluorescence při 450 nm s excitací u 380 nm bylo sledováno po dobu 2 minut. Bylo zaznamenáno snížení rychlosti hydrolýzy substrátu po přidání různých koncentrací inhibitoru. Test byl v pozorovaném rozmezí lineární. Bylo provedeno dvojí měření.
Podmínky pro kathepsin S: 50mM fosforečnan, pH 6,5, 2,5mM
EDTA, 2,5 mM DTT. Substrát: [Z-Val-Val-Arg-AMC] = 10 μΜ (Km = μΜ) . Test při 25 °C byl započat přidáním kat S (konečná koncentrace 30nM). Zvýšení fluorescence při 450 nm s excitací u
380 nm bylo sledováno po dobu 2 minut. Bylo zaznamenáno snížení rychlosti hydrolýzy substrátu po přidání různých koncentrací inhibitoru. Test byl v pozorovaném rozmezí lineární. Bylo provedeno dvojí měření.
Podmínky pro kruzain byly stejné jako podmínky pro kathepsin L š tou výjimkou, že Km pro tento substrát byla 1/íM.
Příslušné hodnoty Kj byly vyhodnoceny Dixonovým grafem, jak popsal Irwin Segal v Enzyme Kinetics: Behavior and analysis of rapid eguilibrium and steady-state enzyme systems, Wiley-Interscience Publication, John Wiley and Sons, New York 1975 nebo pro kompetitivně se vázající inhibitory z následující rovnice:
- Vj/Vo = [I]/{[1] + K,.(1 + [Si/ις,)} , kde vo znamená rychlost hydrolýzy substrátu v nepřítomnosti inhibitoru, zatímco v; znamená rychlost v přítomnosti kompetitivního inhibitoru.

Claims (19)

  1. PATENTOVÉ
    NÁROKY
    1. Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy, který obsahuje dva Ν-substituenty navázané ethylendiaminem nebo substituovaným ethylendiaminem, při čemž disociační konstanta inhibice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ a uvedené N-substituenty jsou vybrány ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulfinylu, sylfinyl-peptidylu, karbamoylu a karbamoyl-peptidylu,
  2. 2. Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy obecného vzorce
    A n N—X
    R3 v němž A a X znamenají N-substituenty, které jsou vybrány ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulf iny lu, sylfinyl-peptidylu, karbamoylu a karbamoyl-peptidylu,
    R1 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku,
    R2 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku, při čemž buď A) jak R1 tak R2 znamená atom vodíku nebo B) jeden ze substituenta R1 a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku, a
    R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu, při čemž disociační konstanta inhibice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
    ·· «··«
  3. 3. Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy podle nároku
    2, v němž R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec.
  4. 4. Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy podle nároku
    2 obecného vzorce
    R, \ / / A--N rx
  5. 5. Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy podle nároku
    2 obecného vzorce r5 v němž R5 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku, při čemž buď jak R2 tak R5 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituentů R2 a R3 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku.
  6. 6. Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy podle nároku
    2 obecného vzorce
    • to ·· • · • • · • • · • • • · · • • · • · • •toto « · ··
    v němž n znamená číslo od 1 do 10,
    PG znamená chránící skupinu,
    AA znamená aminokyselinu,
    R znamená aminokyselinový postranní řetězec a
    -SC^R? znamená sulfonylovou skupinu.
  7. 7.
    Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy podle nároku
    2 obecného vzorce v němž n znamená číslo od 1 do 10,
    PG znamená chránící skupinu,
    AA znamená aminokyselinu a
    -SO2R9 znamená sulfonylovou skupinu.
  8. 8. Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy podle nároku
    2 obecného vzorce
    R3 r4 O v němž n znamená číslo od 1 do 10,
    AA znamená aminokyselinu a
    -SC^R? znamená sulfonylovou skupinu.
    Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy podle nároku
    2 obecného vzorce
  9. 9.
    ♦ · fafa··
  10. 10. Způsob inhibování inhibitoru cysteinové proteázy, vyznačující se tím, že zahrnuje reversibilní navázání inhibitoru cysteinové proteázy obecného vzorce
    R,’R
    H .
    A-—N Nx
    II
    R3R<
    v němž A a X znamenají N-substituenty, které jsou vybrány ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulfinylu, sylfinyl-peptidylu, karbamoyluakarbamoyl-peptidylu,
    R1 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku,
    R2 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku, při čemž buď jak R1 tak R2 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituentů R, a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku, a
    R-j a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu, při čemž disociační konstanta inhibice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
  11. 11. Cysteinová proteáza inhibovaná inhibitorem cysteinové proteázy obecného vzorce ·· ···· ·· · ·· ·· ·· · · · ·· f··· • · · · · · · · · • · · · · · · ··· · · ·♦«··· ··· ···♦ ·· ··· ·· 99
    7' A—N \ rx 1 r3 1 R<
    v němž A a X znamenají Ν-substituenty, které jsou vybrány ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulfinylu, sylfinyl-peptidylu, karbamoyluakarbamoyl-peptidylu,
    R1 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku,
    R2 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku, při čemž buď jak R, tak R2 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituentů R1 a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku, a
    R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu, při čemž disociační konstanta inhibíce Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
  12. 12. Způsob léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou, vyznačující s e t 1 m, že se pacientovi podává therapeuticky efektivní dávka inhibitoru cysteinové proteázy obecného vzorce v němž A a X znamenají N-substituenty, které jsou vybrány • · · ze.skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulfinylu, sylfinyl-peptidylu, karbamoyluakarbamoyl-peptidylu,
    R1 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku,
    R2 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku, při čemž buď jak R1 tak R2 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituenta R1 a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku, a
    R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu, při čemž disociační konstanta inhibice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
  13. 13. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje inhibitor cysteinové proteázy obecného vzorce
    R3 r4 v němž A a X znamenají N-substituenty, které jsou vybrány ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulfinylu, sylfinyl-peptidylu, karbamoylua karbamoy1-peptidylu,
    Rt znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku,
    R2 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku, při čemž buď jak R1 tak R2 znamená atom • · · ·· · • ♦ · · • · · · · • 9 9 9 9
    9999 99 99
    9 9999
    999999
    9 9 999
    9 9 99999
    9 9 99
    999 9999 vodíku nebo jeden ze substituentů R1 a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku, a
    R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu, při čemž disociační konstanta inhi.bice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
  14. 14. Způsob detegování cysteinové proteázy ve vzorku, vyznačující se t í m, že zahrnuje:
    a) testování uvedeného vzorku na proteázovou aktivitu použitím proteázového substrátu,
    b) testování proteázové aktivity v přítomnosti známé koncentrace inhibitoru cysteinové proteázy, při čemž tento inhibitor znamená sloučeninu obecného vzorce
    A N N X
    R3 r4 f
    v němž A a X znamenají N-substituenty, které jsou vybrány ze skupiny sestávající z acylu, acyl-peptidylu, alkyloxykarbonylu, alkyloxykarbonyl-peptidylu, sulfonylu, sulfonyl-peptidylu, peptidylu, sulfamoylu, sulfamoyl-peptidylu, sulfinylu, sylfinyl-peptidylu, karbamoylua karbamoyl-peptidylu,
    R1 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku,
    R2 znamená a) aminokyselinový postranní řetězec nebo b) atom vodíku, při čemž buď jak R, tak R2 znamená atom vodíku nebo jeden ze substituentů R1 a R2 znamená aminokyselinový postranní řetězec a druhý znamená atom vodíku, a
    R3 a R4 znamenají atom vodíku nebo jsou spolu vázány za vzniku ethylenu nebo substituovaného ethylenu.
    4 Φ při. čemž disociační konstanta inhibice Kj proteázy s inhibitorem není větší než 100 μΜ.
  15. 15. Diaminová sloučenina obecného vzorce I (I) , v němž A a X znamenají nezávisle na sobě skupinu obecného vzorce R^-Xj-, v němž R13 znamená atom vodíku, alkyloxykarbonylalkanoyl, alkyloxykarbonyl, alkanoyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z karboxyskupiny, alkyloxykarbonylu a heterocykloalkylalkanoylaminové skupiny), cykloalkylkarbonyl a heterocykloalkylkarbonyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z hydroxylu, alkylu, heterocykloalkylu, alkanoylu, alkyloxykarbonylu, arylalkyloxykarbonylu a heterocykloalkylkarbonylu), arylalkyloxykarbonyl., karbamoyl, alkylkarbamoyl, dialkylkarbamoyl, arylkarbamoyl, arylaikylkarbamoyl, arylalkanoyl, aroyl, alkylsulfonyl, arylsulfonyl, arylalkylsulfonyl, alkylsulfamoyl, dialkylsulfamoyl, arylsulfamoyl, alkylsulfinyl, dialkylaminosulfinyl nebo arylsulfinyl a X, znamená vazbu nebo dvojvaznou skupinu obecného vzorce a nebo b v nichž n znamená číslo 0 až 9, X3-X4 znamená vazbu vybranou z -C(O)NRm-, -CH2NRu~, -ČÍČÁCH.,- a NRUC(O)-, Y znamená skupinu -CH(R14)~ nebo -NRU- a Z znamená skupinu -(CH2)2-,
    -C(R15) (R16)~ nebo -N(R16)-, při čemž Ru znamená atom vodíku nebo jak níže uvedeno, R15 znamená atom vodíku nebo methyl a každý R16 znamená nezávisle na sobě atom vodíku, alkyl (popřípadě substituovaný skupinou vybranou ze skupiny za·· ··«· • ♦ · · · ···· ♦ · ♦ · · · « ··* · · • · · · · · ··· ···· 4· ·· ··· ·» ·· hrnující -hydroxy1, alkyloxyskupinu, aminovou skupinu, alky laminovou skupinu, dialkylaminovou skupinu, ureidoskupinu, alkylureidoskupinu, merkaptoskupinu, alkylthioskupinu, kar boxy skup inu, karbamoyl, alkylkarbamoyl, dilakylkarbamoyl, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl a guanidinovou skupinu, skupinu -P(0) (OR12)2, -OP (O) (OR12)2 nebo -OP (O) (R12)2, v nichž každý R12 znamená nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkyl nebo jeho chráněný derivát) , cykloalkyl, cykloalkylalkyl, skupinu vybranou z arylové a arylalkylové skupiny (která je popřípadě substituována na svém arylovém kruhu jedním až třemi skupinami vybranými z hydroxylu, aminové skupiny, guanidinové skupiny, atomu halogenu, popřípadě atomem halogenu substituovaného alkylu, alkyloxyskupiny a arylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým R14 tvoří dvojvaznou skupinu vybranou z methylenové skupiny se 3 až 4 atomy uhlíku a 1,2-fenylendimethylenové skupiny (která je popřípadě substituována hydroxylem, jeho chráněným derivátem nebo oxoskupinou) s tím, že jak X tak A nezmanají současně atom vodíku,
    R1 i Rg znamená atom vodíku nebo jeden z nich znamená kyanovou skupinu, kar boxy skup inu, alkyloxykarbonylovou, alkanoylovou, karbamoylovou, alkylkarbamoylovou, dialkylkarbamoylovou, alkyloxy (alkyl) karbamoylovou nebo aminoalkylkarbamoylovou skupinu, R16 znamená jak shora uvedeno nebo skupinu R13-X2-, při čemž R13 znamená jak shora uvedeno a X2 znamená dvojvaznou skupinu obecného vzorce a nebo b jak shora uvedeno, a R3 a R4 společně tvoří popřípadě substituovaný ethylen nebo nezávisle znamenají R14, jak shora uvedeno, a farmaceuticky přijatelné soli, jednotlivé isomery a jejich směsi.
  16. 16. Diaminová sloučenina podle nároku 15, v němž A znamená skupinu obecného vzorce R13-Xt~, v němž R13 znamená atom vodíku, alkyloxykarbonylalkanoyl s celkem 3 až 10 atomy uhlíku, alkoxy(s 1 až 9 atomy uhlíku)karbonyl, alkanoyl se
    2 až 10 atomy uhlíku (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z karboxyskupiny, alkyloxy(s 1 až 9 atomy uhlíku)79 karbonylu a heterocykloalkyl(se 4 až 8 atomy uhlíku)alkanoyl (se 2 až 10 atomy uhlíku) aminové skupiny) , cykloalkylkarbonyl se 4 až 8 atomy uhlíku, heterocykloalkyl(se 4 až 8 atomy uhlíku)karbony! (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z hydroxylu, alkylu s 1 až 5 atomy uhlíku, heterocykloalkylu(se 4 až 8 atomy uhlíku), alkanoylu s 1 až
    5 atomy uhlíku, alkyl (s 1 až 5 atomy uhlíku) oxykarbonylu, aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)oxykarbonylu a heterocykloalkyl (se 4 až 8 atomy uhlíku)karbony lu) , aryl (se 6 až 10 atomy uhlíku) alkyl (s 1 až 5 atomy uhlíku)oxykarbonyl, karbamoyl, alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) karbamoyl, dialkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)karbamoyl, aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku)karbamoyl, aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku) alkyl (s 1 až 5 atomy uhlíku)karbamoyl, aryl (se
    6 až 10 atomy uhlíku) alkanoyl (s 1 až 5 atomy uhlíku), aroyl(se 7 až 11 atomy uhlíku), alkyl(s 1 až 10 atomy uhlíku) sulfonyl, dialkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)sulfamoyl, aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku)sulfonyl, aryl(se 6 až 10 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)sulfonyl nebo heteroary1(se 4 až 8 atomy uhlíku)sulfonyl a X1 znamená dvojvaznou skupinu obecného vzorce a, v němž n znamená Síslo 0 až 5, znamená vazbu vybranou z -C(O)NR14~, Y znamená skupinu N(R14)--, Z znamená skupinu -CH(R16)-, R16 znamená atom vodíku nebo jak níže uvedeno a R8 znamená cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku, cykloalkyl(se 3 až 7 atomy uhlíku)alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku), pyridy1, thienyl, furyl, imidazolyl, indolyl, pyridylalkyl(s 1 až 6 atomy uhlíku), thienylalkyl(s 1 až 6 atomy uhlíku), furylalkylfs 1 až 6 atomy uhlíku), imidazolylalkyl(s 1 až 6 atomy uhlíku), indolylalkyl(s 1 až 6 atomy uhlíku) , alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)(popřípadě substituovaný skupinou vybranou z merkaptoskupiny, karboxyskupiny, aminové skupiny, methylthioskupinu, methylsulfonylu, karbamoylu, dimethylkarbamoylu, guanidinové a hydroxylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu) , skupinu vybranou z fenylu, naftylu, fenylalkylu(s 1 až 6 atomy uhlíku), naftylalkylu(s 1 až 6 atomy uhlíky) (popřípadě substituovaného na arylovém
    ·· • ··♦ ·· • ·· ·· • · • • • ·· • · • 9 • • • · • 9 9 99 • • • 9 • • • 999 • • • • 9 • • • 9 • • ···· ·· ·· ··· 9 9 ·*
    kruhu jednou až třemi skupinami vybranými z aminové skupiny, hydroxylu, atomu chloru, bromu, fluoru nebo jodu, methylu, trifluormethylu, methoxyskupiny a fenylově skupiny nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým Ru tvoří dvojvaznou skupinu vybranou z methylenu(se 3 až 4 atomy uhlíku) a 1,2-fenylendimethylenu (který je popřípadě substituován hydroxylovou skupinou, jeho chráněným derivátem nebo oxoskupinou), X znamená skupinu obecného vzorce -SfO)^, v němž R? znamená alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z aminové skupiny, atomu chloru, bromu nebo fluoru, hydroxyskupiny a methoxyskupiny nebo jejich chráněného derivátu), perhalogen-alkylsulfonyl s 1 až 5 atomy uhlíku, cykloalkyl se 3 až 7 atomy uhlíku, cykloalkyl(se 3 až 7 atomy uhlíku)-alkyl(s 1 až 7 atomy uhlíku) nebo skupinu vybranou z fenylu, pentafluorfenylu, naftylu a fenylalkylu(s 1 až 6 atomy uhlíku) (který je popřípadě substituován na svém arylovém kruhu jednou až dvěma skupinami vybranými z aminové skupiny, atomu chloru, bromu a fluoru, hydroxylové skupiny, methoxyskupiny a popřípadě atomem halogenu substituované methylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu),
    R, znamená atom vodíku, R2 znamená R16 jak shora uvedeno a
    R3 i r4 znamená atom vodíku nebo společně tvoří popřípadě substituovaný ethylen.
  17. 17. Diaminová sloučenina podle nároku 16, v němž n znamená číslo 0 až 2, R2 znamená R16 jak níže uvedeno, R3 a R4 společně tvoří popřípadě substituovanou ethylenovou skupinu, R13 znamená atom vodíku, alkoxy(se 4 až 8 atomy uhlíku)karbony1, alkanoyl se 2 až 6 atomy uhlíku (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z karboxyskupiny, alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku)oxykarbonylu a heterocykloalkyl(se 4 až 6 atomy uhlíku)alkanoyl(se 4 až 8 atomy uhlíku)aminové skupiny), skupinu -C(O)NR10R1lz v níž Rw a Rn společně tvoří azamethylen se 2 až 6 atomy uhlíku, oxamethylen se • · · ·
    2 až 6 atomy uhlíku nebo methylen se 3 až 7 atomy uhlíku, cykloalkyl(se 4 až 8 atomy uhlíku) kar bony 1, benzyloxykarbonyl, acetyl, benzoyl nebo dimethylsulfamoyl, Rg znamená cykloalkyl s 5 až 6 atomy uhlíku, cykloalkyl(s 5 až 6 atomy uhlíku)methyl, 3-pyridyl, 2-thienyl, 2-furyl, 4-imidazolyl, 3-indolyl, 3-pyridylmethyl, 2-thienylmethyl, 2-furylmethyl, 4-imidazolylmethyl, 3-indolylmethyl, methoxyskupinu, acetoxyskupinu, alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z merkaptoskupiny, karboxyskupiny, aminové skupiny, methylthioskupiny, methylsulfonylu, karbamoylu, dimethylkarbamoylu, guanidinové a hydroxylové skupiny nebo jejich chráněného derivátu), skupinu vybranou z fenylu, 1-naftylu, 2-naftylu, benzylu,
    1-naftylmethylu, 2-naftylmethylu a 2-fenylethylu (popřípadě substituovaného na arylovém kruhu jednou skupinou vybranou z hydroxylu, aminové skupiny, atomu chloru, bromu a fluoru nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým Ru tvoří dvojvaznou skupinu vybranou z methylenu (se 3 až 4 atomy uhlíku) a 1,2-fenylendimethylénu (který je popřípadě substituován hydroxylovou skupinou, jeho chráněným derivátem nebo oxoskupinou) a Rg znamená alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný jednou nebo dvěma skupinami vybranými z aminové skupiny, atomu chloru, bromu nebo fluoru a hydroxyskupiny nebo jejich chráněného derivátu), perfluoralkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, cykloalkyl s 5 až 6 atomy uhlíku, cykloalkyl(s 5 až 6 atomy uhlíku)methyl nebo skupinu vybranou z fenylu, naftylu a benzylu (který je popřípadě substituován jednou skupinou vybranou z aminové skupiny, hydroxylu, atomu chloru, bromu nebo fluoru nebo jejich chráněného derivátu) .
  18. 18. Diaminová sloučenina podle nároku 17, v níž n znamená číslo 0 až 1, R2 znamená butyl, 2-fenylethyl, 2-methylsulfonylethy1, 2-terč.butoxykarbony!ethyl, 2-terč.butoxykarbony lmethyl, 4-terc*butoxykarbonylaminobutyl, 4-benzoylaminobutyl nebo benzoyloxymethyl, R13 znamená atom vodíku, • · terč.butoxykarbonyl, benzyloxykarbonyl, acetyl, 3-karboxypropionyl, 3-methoxykarbonylpropionyl, biotinylaminohexanoyl, fenylacetyl, benzoyl, dimethylsulfamoyl, benzylsulfonyl, 1-piperazinylkarbonyl, 4-methyl-l-piperazinylkarbonyl nebo 4-morfolinylkarbonyl, R|6 znamená 3-pyridylmethyl, 2-thienylmethyl, 2-furylmethyl, 4-imidazolylmethyl,
    3-indolylmethyl, alkyl(s 1 až 5 atomy uhlíku) (popřípadě substituovaný skupinou vybranou z merkaptoskupiny, karboxyskupiny, aminové skupiny, methylthioskupiny, methylsulfonylu, karbamoylu, dimethylkarbamoylu, guanidinové a hydroxy lové skupiny nebo jejich chráněného derivátu) , skupinu vybranou z benzylu, 1-naftylmethylu, 2-naftylmethylu a 2-fenylethylu (popřípadě substituovaného na arylovém kruhu jednou skupinou vybranou z hydroxylu, aminové skupiny, atomu chloru, bromu a fluoru nebo jejich chráněného derivátu) nebo společně s přilehlým R3 nebo R13 tvoří dvojvaznou skupinu vybranou z methylenu(se 3 až 4 atomy uhlíku) a 1,2-fenylendimethylenu (který je popřípadě substituován hydroxylovou skupinou, jejím chráněným derivátem nebo oxoskupinou) a Rg znamená methyl, trifluormethyl, popřípadě substituovaný fenyl, 2-naftyl nebo 2-fenylethyl.
  19. 19. Diaminová sloučenina podle nároku 18, v níž n znamená číslo 0, R2 znamená butyl, 2-fenylethyl nebo 2-methylsulfonylethyl, R13 znamená atom vodíku, terč.butoxykarbonyl, benzyloxykarbonyl, biotinylaminohexanoyl, benzoyl, 1-piperazinylkarbonyl, 4-methyl-l-piperazinylkarbonyl nebo 4-morfolinylkarbonyl, R16 znamená alkyl s 1 až 5 atomy uhlíku, popřípadě substituovaný benzyl, 1-naftylmethyl, 2-naftylmethyl, 3-pyridinylmethyl nebo 2-methylsulfonyl- ethyl a Rg znamená fenyl, 1-naftyl nebo 2-fenylethyl.
    Zastupuje:
CZ973906A 1995-06-07 1996-06-03 Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy, způsob jeho inhibování, cysteinová proteáza jím inhibovaná, farmaceutický prostředek, který ho obsahuje, způsob léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou, způsob jejího detegování a diaminová sloučenina CZ390697A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US47499395A 1995-06-07 1995-06-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ390697A3 true CZ390697A3 (cs) 1998-04-15

Family

ID=23885799

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ973906A CZ390697A3 (cs) 1995-06-07 1996-06-03 Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy, způsob jeho inhibování, cysteinová proteáza jím inhibovaná, farmaceutický prostředek, který ho obsahuje, způsob léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou, způsob jejího detegování a diaminová sloučenina

Country Status (15)

Country Link
US (1) US6030946A (cs)
EP (1) EP0832099A1 (cs)
JP (1) JPH11507045A (cs)
KR (1) KR19990022395A (cs)
CN (1) CN1192219A (cs)
AR (1) AR002328A1 (cs)
AU (1) AU723658B2 (cs)
CA (1) CA2222972A1 (cs)
CZ (1) CZ390697A3 (cs)
NO (1) NO975742L (cs)
NZ (1) NZ309560A (cs)
PL (1) PL323710A1 (cs)
TW (1) TW438591B (cs)
WO (1) WO1996040737A1 (cs)
ZA (1) ZA964751B (cs)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA199800353A1 (ru) * 1995-10-30 1998-12-24 Смитклайн Бичам Корпорейшн Ингибиторы протеаз
US6586466B2 (en) 1995-10-30 2003-07-01 Smithkline Beecham Corporation Carbohydrazide-protease inhibitors
WO1997016177A1 (en) 1995-10-30 1997-05-09 Smithkline Beecham Corporation Method of inhibiting cathepsin k
SK8599A3 (en) * 1996-07-30 2000-03-13 Arris Pharm Corp Disubstituted cyclic compound, process for its preparation, pharmaceutical composition and method of the treatment of an animal
US5830850A (en) * 1996-08-28 1998-11-03 Mount Sinai School Of Medicine Of The City Of New York Methods for the treatment of bone resorption disorders, including osteoporosis
FR2760193B1 (fr) * 1997-02-28 1999-05-28 Transgene Sa Lipides et complexes de lipides cationiques et de substances actives, notamment pour la transfection de cellules
DE69835430T2 (de) * 1997-05-30 2007-03-08 Takeda Pharmaceutical Co. Ltd. Sulfonamidderivate, ihre herstellung und verwendung
CN1290254A (zh) 1998-02-05 2001-04-04 武田药品工业株式会社 氨磺酰衍生物及其制备和用途
US20030144175A1 (en) 1998-12-23 2003-07-31 Smithkline Beecham Corporation Protease inhibitors
US6294539B1 (en) * 1999-01-19 2001-09-25 Advanced Syntech, Llc Heterocyclic hydroxamic acid derivatives as MMP inhibitors
CA2360740A1 (en) 1999-03-02 2000-09-08 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as reversible inhibitors of cathepsin s
US6420364B1 (en) * 1999-09-13 2002-07-16 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compound useful as reversible inhibitors of cysteine proteases
ATE244235T1 (de) * 1999-09-13 2003-07-15 Boehringer Ingelheim Pharma Heterocyclische verbindungen als reversible inhibitoren von cysteinproteasen
JP2003513972A (ja) 1999-11-10 2003-04-15 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション プロテアーゼ阻害剤
AU1588901A (en) 1999-11-10 2001-06-06 Smithkline Beecham Corporation Protease inhibitors
JP2003513924A (ja) 1999-11-10 2003-04-15 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション プロテア−ゼ阻害剤
EA005893B1 (ru) 2000-03-21 2005-06-30 Смитклайн Бичам Корпорейшн Ингибиторы протеаз
EP1315971A2 (en) * 2000-07-31 2003-06-04 The Regents of The University of California Model for alzheimer's disease and other neurodegenerative diseases
US20070105841A1 (en) * 2000-08-14 2007-05-10 Breitenbucher J G Method for treating allergies using substituted pyrazoles
US20070117785A1 (en) * 2000-08-14 2007-05-24 Butler Christopher R Substituted pyrazoles and methods of treatment with substituted pyrazoles
EP1309592B9 (en) * 2000-08-14 2007-02-28 Ortho-McNeil Pharmaceutical, Inc. Substituted pyrazoles
US7332494B2 (en) 2000-08-14 2008-02-19 Janssen Pharmaceutica, N.V. Method for treating allergies using substituted pyrazoles
US7309703B2 (en) * 2000-08-14 2007-12-18 Ortho Mcneil Pharmaceutical, Inc. Substituted pyrazoles
AU2001286454B2 (en) 2000-08-14 2006-09-14 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Substituted pyrazoles
US20050101587A9 (en) * 2000-08-14 2005-05-12 Butler Christopher R. Method for treating allergies using substituted pyrazoles
EP1315741A2 (en) * 2000-09-06 2003-06-04 Ortho-McNeil Pharmaceutical, Inc. A method for treating allergies
AU2002232400A1 (en) * 2000-11-06 2002-05-15 U.S. Army Medical Research And Materiel Command Reversed amidines and methods of using for treating, preventing, or inhibiting leishmaniasis
US6706754B2 (en) 2000-11-06 2004-03-16 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Reversed amidines and methods of using for treating, preventing, or inhibiting leishmaniasis
HUP0303540A2 (hu) * 2000-12-20 2004-01-28 Bristol-Myers Squibb Pharma Co. Diaminok mint kemokin receptor aktivitás modulátorai, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk
US6706712B2 (en) 2000-12-20 2004-03-16 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Cyclic derivatives as modulators of chemokine receptor activity
US6710061B2 (en) 2001-03-09 2004-03-23 Ortho-Mcneil Pharamceutical, Inc. Aminopyrrolidine sulfonamides as serine protease inhibitors
US6538017B2 (en) 2001-03-09 2003-03-25 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Aminopyrrolidine sulfonamides as serine protease inhibitors
US6982263B2 (en) 2001-06-08 2006-01-03 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Nitriles useful as reversible inhibitors of cysteine proteases
US6780985B2 (en) 2001-11-08 2004-08-24 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Polynucleotide and polypeptide sequences of Canine Cathepsin S
US6784288B2 (en) 2001-11-08 2004-08-31 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Polynucleotide and polypeptide sequences of monkey cathepsin S
YU34604A (sh) * 2001-11-14 2006-08-17 Aventis Pharmaceuticals Inc. Oligopeptidi kao inhibitori katepsina s i kompozicije koje ih sadrže
DE10231574A1 (de) 2002-07-11 2004-01-29 Sartorius Ag Membran, Vorrichtung und Verfahren zum Entfernen von Proteasen aus Flüssigkeiten
US7384970B2 (en) * 2003-03-24 2008-06-10 Irm Llc Inhibitors of cathepsin S
US7109243B2 (en) * 2003-03-24 2006-09-19 Irm Llc Inhibitors of cathepsin S
US7173051B2 (en) * 2003-06-13 2007-02-06 Irm, Llc Inhibitors of cathepsin S
US7256207B2 (en) * 2003-08-20 2007-08-14 Irm Llc Inhibitors of cathepsin S
US20060122266A1 (en) * 2004-08-11 2006-06-08 Photini Sinnis Methods and compositions for malaria prophylaxis
WO2008137758A2 (en) 2007-05-04 2008-11-13 Mdrna, Inc. Amino acid lipids and uses thereof
AU2008350907A1 (en) * 2007-12-11 2009-08-27 Viamet Pharmaceuticals, Inc. Metalloenzyme inhibitors using metal binding moieties in combination with targeting moieties
EP2198879A1 (en) 2008-12-11 2010-06-23 Institut Curie CD74 modulator agent for regulating dendritic cell migration and device for studying the motility capacity of a cell
GB201218084D0 (en) 2012-10-09 2012-11-21 Univ Aston Novel compounds and methods for use in medicine

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3859337A (en) * 1969-06-11 1975-01-07 Stauffer Chemical Co Ethylenediaminetetraacetic acid anhydride derivatives
IT1150959B (it) * 1980-06-10 1986-12-17 Simes Sostanze datate di attivita' antispastica vasale e procedimenti per la loro preparazione
JPH0832698B2 (ja) * 1987-05-08 1996-03-29 日本ケミファ株式会社 ピペラジン誘導体
WO1992008709A1 (de) * 1990-11-15 1992-05-29 Pentapharm Ag Meta-substituierte phenylalanin-derivate
AU1354292A (en) * 1991-03-18 1992-10-21 Pentapharm Ag Parasubstituted phenylalanine derivates
CA2133761A1 (en) * 1993-02-10 1994-08-18 Jorg Sturzebecher Piperazides of substituted phenylalanine derivates as thrombin inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
JPH11507045A (ja) 1999-06-22
EP0832099A1 (en) 1998-04-01
CN1192219A (zh) 1998-09-02
NZ309560A (en) 1999-08-30
AU723658B2 (en) 2000-08-31
ZA964751B (en) 1997-01-08
AR002328A1 (es) 1998-03-11
US6030946A (en) 2000-02-29
AU5975596A (en) 1996-12-30
WO1996040737A1 (en) 1996-12-19
CA2222972A1 (en) 1996-12-19
KR19990022395A (ko) 1999-03-25
TW438591B (en) 2001-06-07
NO975742D0 (no) 1997-12-05
PL323710A1 (en) 1998-04-14
NO975742L (no) 1998-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ390697A3 (cs) Reversibilní inhibitor cysteinové proteázy, způsob jeho inhibování, cysteinová proteáza jím inhibovaná, farmaceutický prostředek, který ho obsahuje, způsob léčení poruch souvisejících s cysteinovou proteázou, způsob jejího detegování a diaminová sloučenina
EP3953330B1 (en) Nitrile-containing compounds useful as antiviral agents for the treatment of a coronavirus infection
Levy et al. Matrix metalloproteinase inhibitors: a structure− activity study
AU709114B2 (en) Inhibitors of interleukin-1beta converting enzyme
TWI504597B (zh) 結合於細胞凋亡抑制蛋白（ｉａｐ）之桿狀病毒ｉａｐ重複序列（ｂｉｒ）區域之化合物
RU2242480C2 (ru) Ингибиторы интерлейкин-1 бета-превращающего фермента
WO2022021841A1 (zh) 一种新型冠状病毒主蛋白酶的抑制剂及其制备方法和用途
CA2217682A1 (en) Thrombin inhibitors
DE69735545T2 (de) Verwendung von beta-blatt mimetika als protease und kinase hemmer und alshemmer eines transkriptionsfaktors
EP2123665A2 (en) Inhibitors of interleukin-1Beta converting enzyme
CZ298197A3 (cs) Reverzibilní inhibitory proteas
EP2635570B1 (en) Novel specific hcv ns3 protease inhibitors
BR112017000730B1 (pt) Derivados de pirrolidinona como inibidores de metap-2
EP2864296A1 (en) 2h-imidazol-4-amine compounds and their use as bace inhibitors
US7910556B2 (en) PAR-2 agonist
EP0858262B1 (en) Thrombin inhibitors
EP0518676A2 (en) Cyclic renin inhibitors
NZ517603A (en) Azacycloalkanone serine protease inhibitors
RU2166503C2 (ru) Производные тиазола, способ их получения, фармацевтическая композиция на их основе и промежуточное соединение
DE19636623A1 (de) Abgewandelte Aminosäuren, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zu ihrer Herstellung
US8133864B2 (en) PAR-2 agonist
AU2011291398A1 (en) Antifungal agents and uses thereof
DE3902615A1 (de) Aminomethyl-peptide, verfahren zur herstellung und ihre verwendung in arzneimitteln
US20030216301A1 (en) Thrombin inhibitors
SK9092002A3 (en) Carboxamide diazepin derivatives, preparation method, use as medicines, pharmaceutical compositions and use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic