CZ38727U1 - Roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitorů cholinesteráz - Google Patents
Roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitorů cholinesterázInfo
- Publication number
- CZ38727U1 CZ38727U1 CZ2025-42987U CZ202542987U CZ38727U1 CZ 38727 U1 CZ38727 U1 CZ 38727U1 CZ 202542987 U CZ202542987 U CZ 202542987U CZ 38727 U1 CZ38727 U1 CZ 38727U1
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- detection
- solution
- cholinesterase inhibitors
- substrate
- reagent
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Úřad průmyslového vlastnictví v zápisném řízení nezjišťuje, zda předmět užitného vzoru splňuje podmínky způsobilosti k ochraně podle § 1 zák. č. 478/1992 Sb.
CZ 38727 UI
Roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitoru cholinesteráz
Oblast techniky
Technické řešení se týká oblasti jednoduché detekce inhibitoru cholinesteráz pomocí enzymatické reakce s využitím chromogenních činidel.
Dosavadní stav techniky
Detekce inhibitorů cholinesteráz patří mezi nej aktuálnější problémy analytické chemie, protože se týká velké skupiny farmakologicky vysoce účinných látek, které se extenzivně využívají nejen v medicíně a zemědělství (pesticidy), ale nejtoxičtější z nich si nadále udržují svůj význam i v oblasti vojenství jako bojové chemické látky typu sarin a VX [Gupta R. C. (Ed.): Handbook of toxicity of Chemical warfare agents. Elsevier, Amsterdam 2015],
V současné době se k analýze inhibitoru cholinesteráz používá celá škála metod a technik založených na kolorimetrii, spektrofotometru, elektrochemii, plynové chromatografii, kapalinové chromatografii apod. Zvláštní skupinu tvoří jednoduché prostředky polní i laboratorní analýzy, jako jsou detekční papírky a pásky, detekční barvy a pasty, nebo v poslední době detekční spreje, jejichž hlavní předností je možnost detekce analytu na površích bez nutnosti odebrat vzorek.
Významnou skupinu (nejen jednoduchých prostředků) tvoří metody založené na enzymatické (cholinesterázové) reakci, zvláště pak na reakci doprovázené indikací stupně inhibice pomocí barevných indikátoru [Břízová A., Pitschmann V.: Simple Chemical and cholinesterase methods for the detection of nerve agents using optial evaluation. Biosensors 13, 995 (2023)]. Jedním z nej známějších indikátorů je 5,5'-dithiobis(2-nitrobenzoová kyselina), tj. Ellmanovo činidlo, obecně používané ke stanovení thiolů, s nimiž reaguje za vzniku žlutého 5-thio-2- nitrobenzoátu [Ellman G. L., Courtney D. K., Featherstone R. M.: A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity. Biochem. Pharmacol. 7, 88-95 (1961)]. Jeho nevýhodou je extrémní citlivost na pH, což omezuje jeho dlouhodobé uchovávání ve formě roztoku, včetně roztoku do detekčních sprejů. Při pH<6 je reakce Ellmanova činidla s thioly pomalá a při pH>9 poskytuje nežádoucí žlutý hydrolytický produkt. Již dříve bylo zjištěno, že mnohem vyšší odolnost vůči alkalickému prostředí mají asymetrické disulfidy, například 5-(2- aminoethyl)dithio-2-nitrobenzoát, který byl již dříve navržen jako stabilnější alternativa Ellmanova činidla pro detekci thiolů [Zhu J., Dhimitruka I., Pei D.: 5-(2-Aminoethyl)dithio-2- nitrobenzoate as a more base-stable alternative to Ellman's reagent. Org. Lett. 6(21 ), 3809-3812 (2004)]. Použití tohoto činidla pro enzymatickou detekci inhibitorů cholinesteráz podle technického řešení odstraňuje nebo omezuje některé nedostatky spojené s Ellmanovým činidlem.
Podstata technického řešení
Podstatou technického řešení je roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitoru cholinesteráz, který obsahuje 0,01 až 0,03 g 5-(2-aminoethyl)dithio-2-nitrobenzoátu a 0,1 až 0,5 g butyrylthiocholin jodidu ve 100 ml destilované vody.
Základním prvkem technického řešení je zavedení nového redoxního činidla 5-(2- aminoethyl)dithio-2-nitrobenzoátu. které vyniká vysokou stabilitou v alkalické prostředí (až do pH 13). Bylo také zjištěno, že i v přítomnosti substrátu butyrylthiocholin jodidu je nové redoxní činidlo ve vodném roztoku dostatečně stabilní, aby mohlo být aplikováno pro různé formy použití prostředků enzymatické detekce inhibitorů cholinesteráz. Stabilita takového roztoku je v porovnání se stabilitou v pufrovaných roztocích (pH 7-8) mnohem vyšší. Funkci navrženého činidla
- 1 CZ 38727 UI v detekčním systému ukazuje obr. 1.
Schéma analytické reakce
Příklady uskutečnění technického řešení
Roztok se připraví rozpuštěním 0,02 g 5-(2-aminoethyl)dithio-2-nitrobenzoátu a 0,2 g butyrylthiocholin jodidu ve 100 ml destilované vody: roztok je bezbarvý až slabě nažloutlý. Pro detekci inhibitorů cholinesteráz se roztok použije v kombinaci s vhodně upravenou butyrylcholinesterázou, buď v roztoku, nebo na nosiči. V nepřítomnosti inhibitorů cholinesteráz vzniká žluté zabarvení, naopak v jejich přítomnosti k žádné změně zabarvení nedochází nebo intenzita žlutého zabarvení je mnohem nižší.
Průmyslová využitelnost
Technické řešení je využitelné pro přípravu roztoku jako součásti detekčních sprejů, detekčních trubiček nebo podobných jednoduchých kolorimetrických prostředků detekce inhibitorů cholinesteráz pro potřeby speciálních jednotek Armády České republiky nebo Hasičského záchranného sboru.
Claims (1)
1. Roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitorů cholinesteráz, vyznačující setím, že obsahuje 0,01 až 0,03 g 5-(2-aminoethyl)dithio-2-nitrobenzoátu a 0,1 až 0,5 g
5 butyrylthiocholin jodidu ve 100 ml destilované vody.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2025-42987U CZ38727U1 (cs) | 2025-07-04 | 2025-07-04 | Roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitorů cholinesteráz |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2025-42987U CZ38727U1 (cs) | 2025-07-04 | 2025-07-04 | Roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitorů cholinesteráz |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ38727U1 true CZ38727U1 (cs) | 2025-07-17 |
Family
ID=96498439
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2025-42987U CZ38727U1 (cs) | 2025-07-04 | 2025-07-04 | Roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitorů cholinesteráz |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ38727U1 (cs) |
-
2025
- 2025-07-04 CZ CZ2025-42987U patent/CZ38727U1/cs active IP Right Grant
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI98569C (fi) | Heteropolyhapon vaikealiukoisen suolan käyttö analyytin määritykseen, vastaava määritysmenetelmä sekä tähän sopiva aine | |
| Nunes et al. | Acetylcholine enzyme sensor for determining methamidophos insecticide: evaluation of some genetically modified acetylcholinesterases from Drosophila melanogaster | |
| CS228127B2 (en) | Reagencni cinidlo | |
| EP0159870A2 (en) | Method for the determination of mercapto compounds and reagent for use therein | |
| Ayaz et al. | A novel acetylcholinesterase inhibition based colorimetric biosensor for the detection of paraoxon ethyl using CUPRAC reagent as chromogenic oxidant | |
| Pohanka et al. | Preparation and performance of a colorimetric biosensor using acetylcholinesterase and indoxylacetate for assay of nerve agents and drugs | |
| US8642273B2 (en) | Ligand sensing fluorescent acetylcholinesterase for detection of organophosphate activity | |
| US20150353987A1 (en) | Rapid Tests for the Detection of Inhibitors of Enzymes and Human Exposure to the Same | |
| CZ38727U1 (cs) | Roztok s chromogenním činidlem a substrátem pro detekci inhibitorů cholinesteráz | |
| WO2014116727A1 (en) | One-step rapid assay for the detection of inhibitors of enzymes | |
| Vidilaseris et al. | A high-throughput method for orthophosphate determination of thermostable membrane-bound pyrophosphatase activity | |
| US5236848A (en) | Procedure and agent for the determination of nitrate ions | |
| US4120754A (en) | Detection of alkylating compounds | |
| Pitschmann et al. | Cholinesterase inhibitor biosensors | |
| EP0672169A1 (en) | Biosensor for detection of and distinguishing between cholinesterases inhibitors | |
| Hoskovcová et al. | Modified cholinesterase technology in the construction of biosensors for organophosphorus nerve agents and pesticides detection | |
| US20050054025A1 (en) | Stabilized enzymes for detecting and monitoring chemical toxins | |
| White et al. | Enzyme-based detection of Sarin (GB) using planar waveguide absorbance spectroscopy | |
| Savić et al. | Evaluation of an in-house developed colorimetric and other assays for PET-degrading activity | |
| CZ35564U1 (cs) | Kolorimetrický trubičkový detektor sarinu s využitím reakce na kyanovodík | |
| WO2009103985A1 (en) | Method and kit | |
| Aristova et al. | Colorimetric determination of QAC based on its inhibitory effect on holinesterase | |
| Pitschmann et al. | Biochemical Detection of Cholinesterase Inhibitors in Water with a New Two-Component Chromogenic Reagent | |
| US3597160A (en) | Colorimetric method for determining thiols | |
| SK73694A3 (en) | Detecting tube of inhibitors of cholinesterases in air and water |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG1K | Utility model registered |
Effective date: 20250717 |