CZ355399A3 - Léčivo k prevenci karcinomu prsu - Google Patents

Abstract

Použití sloučeniny o struktuře vyjádřené obecnýmvzorcemI, ve kterémR1 aR2 jsou nezávisle na sobě zvoleny z hydroyskupiny a alkoxyskupiny o 1 až 4 atomech uhlíku aR3 aR4 jsou nezávisle na sobě zvoleny zmethylové skupiny nebo ethylové skupiny nebo R3 aR4 dohromady s atomem dusíku, ke kterémujsou připojeny, vytvářejíjako kruh pyrrolidini-, methylpyrrolidino-, dimethylpyrrolidiny-, piperidino-, morfolino-, nebo hexamethyleniminoskupinu, nebojejí farmaceuticky přijatelné soli či prekurzoru léčiva, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.

Description

Tento vynález se týká použití skupiny substituovaných benzo[b]thiofenových sloučenin nebo jejich farmaceticky přijatelných solí nebo prekurzoru léčiva, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.

Dosavadní stav techniky

Karcinom prsu či rakovina prsu je nejběžnější formou rakoviny a je druhou nejběžnější příčinou úmrtí žen v USA.

V letech 1994 a 1995 činí odhad nových případů rakoviny prsu u žen 182 000 s odhadem mortality 46 000.

V současné době se odhaduje, že statisticky má většina žen pravděpodobnost 1:10 rozvoje tohoto onemocnění během života. Karcinom prsu je značnou příčinou mortality u žen stejně tak jako příčinou neschopnosti, fyziologického traumatu a ekonomických ztrát. Značné procento žen s tímto onemocněním případně umírá na základě jeho účinků bud přímých nebo nepřímých vzhledem ke komplikacím, například metastázám, ztrátě celkového zdraví nebo kolaterálním efektům z terapeutických zákroků, jako jsou operace, ozáření či chemoterapie.

Epidemiologie tohoto onemocnění, i když je předmětem intenzivních výzkumů, je dosud málo známa. Ukazuje se, že existuje podstatná genetická složka, která některé pacientky predisponuje k onemocnění touto chorobou.

Dosud není jasné, zda je tato složka kausativní či permisivní nebo zda má pouze význam při předpovědi chorobného procesu. Je dlouhou dobu známo, že karcinom prsu se častěji vyskytuje v určitých rodinách, i když tato analýza nemůže poskytnout správnou předpověd výskytu onemocnění u jiných členů rodiny.

Provádí se značný objem klinických a farmakologických .výzkumů ve snaze objasnit vztah mezi hormonem estrogenem a příčinou, udržováním a léčbou karcinomu prsu. I když existuje řada znalostí o vztahu mezi estrogenem při udržování a léčbě tohoto onemocnění, existuje i značné množství rozporných skutečností spojených s účinkem estrogenu na epidemiologii tohoto onemocnění, to jest, zda estrogen je kausálním činitelem (karcinogenem) nebo zda je obligatorním koíaktorem (permisivním činitelem) při vzniku tohoto onemocnění.

Estrogeny zahrnující 17b-estradiol, estron a jejich účinné metabolity jsou hlavními hormony u žen spojenými s pohlavím, avšak navíc se ukazují být důležitými homeostatickými hormony u mužů i žen v jejich dospělosti. Normálně má každý určitou hladinu estrogenu.

Rakovina prsu u mužů je vzácným onemocněním a její výskyt činí 1 % ze všech případů nádorových onemocnění mužů. American Cancer Society uvádí, že v roce 1994 bylo diagnostikováno zhruba 1 000 mužů jako pacientů s karcinomem prsu s mortalitou odhadnutou na 300.

Duktální karcinom prsu in šitu (DCIS) je častou formou rakoviny prsu, při které maligní bučky epitelu proliferují v pružném systému bez mikroskopického průkazu • · • · · · • · ft · « « · · · ··· ···♦ ··

invaze basální membránou do obklopující tkáně prsu. Medián Stáří nemocných s DCIS v této době diagnózy je okolo 52 let Vzrůstající rozšíření použití mamografie vede k časné detekci DCIS, neboť většina případů se detekuje u jinak asymptomatických žen, které se podrobují mamograíickému skreeningu.

Hormonová substituční terapie (HRT), doporučovaná pro postmenopausální a perimenopausální ženy pro ulehčení kardiovaskulárních onemocnění, osteroporózy a jiných menopausálních následků, vyvolává značnou diskusi ohledně možnosti zvyšování rizika vzniku karcinomu prsu při této terapii. V současné době závěry ze studií hormonové substituční terapie, z nichž většina byly reprospektivní studie, ukazují malé zvýšení rizika.

Oproti problematické roli estrogenu při vzniku tohoto onemocnění se dosáhlo značného poznání (i když neúplného) týkajícího se úlohy estrogenu při vyvinutém karcinomu prsu. Estrogen je růstový faktor požadovaný většinou buněk karcinomu prsu v časných stádiích tohoto onemocnění. Bylo též zjištěno, avšak dosud se plně neví proč, že v průběhu tohoto onemocnění bučky nádoru ztrácejí svou citlivost vůči účinkům estrogenu. Případně se většina buněk karcinomu stává nadále nezávislými na estrogenu pro svůj růst a již nevykazují odpověd^v na jakoukoliv léčbu založenou na hormonech zahrnující “antiestrogeny, agonisty GNRH, progestiny a androgeny.

Značného přínosu se dosáhlo při použití terapeutických zásahů založených na hormonech. Nejužívanějším způsobem léčení je užívání tamoxifenu. Při této léčbě došlo k dramatickému zlepšení pětiletého přežívání u žen s • Φ φ ·* φφφφ φφ φφ • φφ φ · φ φφφφ φφφ φ φ φφφ φ φ φ · φ φφφφ φφ φ φφφ φφ φ • φ φφ φφφφφ ···· · φ· φφφ φφ φφ karcinomem prsu. Avšak dlouhodobé přežívání (přes 10 let) se nezlepšilo ve stejném rozsahu. Tento nedostatek zlepšení dlouhodobého přežívání se přisuzuje postupnému vývoji nádorových buněk od závislosti na estrogenů k nezávislosti. Proto i při nej lepších kombinací léčení (operace, ozáření a/nebo chemoterapie) je dlouhodobá prognóza pro nemocné špatná, zejména pokud se vyvíjejí metastázy. Je zde zřejmě značná potřeba zlepšení léčení a možná ještě důležitá potřeba prevence nového vzniku onemocnění (de novo).

V posledních deseti letech se uvádí, že antiestrogenová terapie, zejména užívání tamoxifenu, by se měla zkoumat ohledně možnosti prevence karcinomu prsu de novo. Avšak zejména vzhledem k nedostatku důkazu o prospěšnosti a ke známé a potenciální toxicitě tamoxifenu se u zdravých žen neprovádějí žádné prospektivní studie prevence.

Je zřejmé, že existuje značná potřeba preventivního ošetřování zaměřeného na karcinom prsu pro celou populaci včetně osob s vysokým nebo konkrétním rizikem, jak u mužů, tak i u žen.

Podstata vynálezu

Předmětem tohoto vynálezu je použití sloučeniny o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I φ ΦΦ φ • φ ····

Φ Φ Φ · φ · φ • φ · φ · · · · · • · φ φ φ φ · · · • ·· · φφφφ • φ· · φ· ΦΦ ΦΦ

R³ ι

ve kterém

R¹ a R² jsou nezávisle na sobě zvoleny z hydroxyskupiny a alkoxyskupiny o 1 až 4 atomech uhlíku a

R³ a R⁴ jsou nezávisle na sobě zvleny z methylové skupiny nebo ethylové skupiny nebo R³ a R⁴ dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, vytvářejí jako kruh pyrrolidino-, methylpyrrolidino-, dimethylpyrrolidinopiperidino-, morfolino- nebo hexamethyleniminoskupinu, nebo její farmaceticky přijatelné soli či prekurzoru léčiva, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.

Tento vynález umožňuje způsob profylaxe či prevence karcinomu prsu u nemocných potřebujících takové ošetřování, který zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny o struktuře vyjádřené svrchu uvedeným obecném vzorcem I.

Tento vynález dále umožňuje způsob prevence karcinomu ·· ···· • · · ··· ···· • · · · · ··· · 9 · · • ···· · · · ··· · · · • · ·· · ···· ···· · *« 999 ·· ·· prsu podáváním účinné dávky sloučeniny struktury vyjádřené obecným vzorcem I nebo její farmaceuticky přijatelné soli či prekurzoru léčiva po dostatečně dlouhou dobu osobám, u kterých nebyla zjištěna diagnóza rozvoje karcinomu prsu, avšak které byly stanoveny jako rizikové osoby.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou selektivními modulátory receptorů estrogenů (ŠERM), to jest sloučeniny vytvářející estrogenový agonismus v jedné či více žádaných cílových tkáních při vytváření estrogenového antagonismu a/nebo minimálního (tj. klinicky nevýznamného) agonismu v reprodukční tkáni, jako je tkáň prsu či dělohy.

Následuje podrobný popis vynálezu.

Tento vynález je založen na zjištění, že sloučenina struktury vyjádřené obecným vzorcem I popsaná výše je použitelná pro prevenci karcinomu prsu.

V celém tomto popisu a v připojených patentových nárocích mají obecné termíny své obvyklé významy.

Termíny prevence, profylaxe a předcházet znamenají snižování pravděpodobnosti, že se u nemocných vyvine karcinom prsu.

Pojem de novo, jak se užívá v tomto vynálezu, se týká transformace či metamorfózy normálních buněk

tkáně prsu na rakovinné či maligní buňky jako prvního kroku. Tato transformace může nastat ve stádiích stejných či dceřinných buněk evolučním procesem nebo může nastat v jednotlivém případu zvratu. Tento proces de novo lze uvažovat oproti metastázám, kolonizaci či rozšíření již transformovaných maligních buněk z primárního místa nádoru na nová místa. Tento vynález se též týká podávání sloučeniny obecného vzorce I nemocným, u kterých je riziko vývoje karcinomu prsu de novo.

Osoba, která nemá žádné zvláštní riziko vývoje karcinomu prsu de novo, je taková, u které se může vyvinout karcinom prsu de novo bez důkazu či podezření na potenciální onemocnění s rizikem vyšším než je normální riziko, u které nikdy nebyla diagnóza této choroby. Nejvyšším rizikovým faktorem přispívajícím k rozvoji karcinomu prsu je osobní anamnéza této choroby nebo dřívějšího výskytu této choroby, i když je tato osoba v remisi bez důkazu její přítomnosti. Dalším rizikovým faktorem je rodinná anamnéza této choroby.

Termín alkylová skupina znamená monovalentní skupinu odvozenou odstraněním atomu vodíku z methanu, ethanu nebo přímého či rozvětveného uhlovodíku a zahrnuje takové skupiny, jako je methylová skupina, ethylová skupina, propylová skupina, isopropylová skupina, n-butylová skupina, sek.butylová skupina, isobutylová skupina, terč.butylová skupina a podobně.

Pojem alkoxyskupina znamená alkylovou skupinu, jak se definuje výše, připojenou k mateřskému molekulovému zbytku atomem kyslíku a zahrnuje takové skupiny, jako je methoxyskupina, ethoxyskupina, propoxyskupína, isopropoxyskupina, n-butoxyskupina, sek.butoxyskupina, isobutoxy9 * skupina, terč.butoxyskupina a podobně. V tomto vynálezu je preferovanou alkoxyskupinou methoxyskupina.

Pojem prekurzor léku, jak se zde používá, znamená sloučeninu podle tohoto vynálezu nesoucí skupinu, která se v lidském organismu metabolicky štěpí, s poskytnutím terapeuticky účinné látky podle tohoto vynálezu. Prekurzory léků zejména zahrnují ty sloučeniny, ve kterých bud jeden ze substituentů R¹ a R² anebo oba tyto substituenty struktury ukázané výše jsou hydroxylové skupiny, které se chrání farmaceuticky přijatelnými skupinami pro ochranu hydroxylových skupin, které se v lidském organismu odštěpují, s poskytnutím odpovídající monohydroxylové či dihydroxylové sloučeniny podle tohoto vynálezu. Skupiny chránící hydroxylové skupiny se popisují v kapitole 2 monografie T.

V. Greene, a kol., Protective Groups in Organic Synthesis, druhé vydání, John Wiley & Sons, lne,, New York, 1991. Jako prekurzorové skupiny ochraňující hydroxylové skupiny se preferují jednoduché etherové a esterové skupiny.

Preferované sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnují

6-hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinoethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofen nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl či prekurzor a

6-hydroxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinoethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofen nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl či prekurzor.

Příprava sloučenin podle tohoto vynálezu

Výchozí látka pro způsob přípravy sloučeniny podle tohoto vynálezu se připravví v podstatě tak, jak popisuje C.

·· ·· • · · • ·

D. Jones v U.S. patentech Č. látky mají obecný vzorec 1:

418 068 a 4 133 814. Výchozí

(1) ve kterém

R⁵ a R® jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo skupina chránící hydroxylovou skupinu.

Skupiny R® ,a R« chránící hydroxylová skupiny jsou zbytky, které se úmyslně zavádějí během určité fáze přípravy pro ochranu skupin, které by jinak mohly v průběhu chemických reakcí reagovat, a pot^ se odstraní v další fázi syntézy. Jelikož sloučeniny nesoucí takové chránící skupiny jsou především důležité jako chemické meziprodukty (i když některé deriváty mohou též vykazovat biologickou účinnost), jejich přesná struktura nemá kritický význam. Četné reakce

pro vytváření, odstraňování a přeměnu těchto chránících skupin se popisují v řadě standartních prací včetně např. Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press (London a New York, 1973), T. V. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981), a The Peptides, sv. I, Schrooder a Lubke, Academie Press, (London a New York, 1965).

Reprezentativní skupiny pro ochranu hydroxylových skupin žahrnují např. -Ci-C4 alkylovou skupinu, -C1-C4 alkoxyskupinu, -CO-(Ci-Ce alkylovou skupinu), -SO2-(C4-C« alkylovou skupinu) a skupinu -CO-Ar, ve které Ar je benzylová skupina nebo případně substituovaná íenylová skupina. Pojem substituovaná íenylová skupina se vztahuje k fenylové skupině mající jeden nebo více substituentů zvolených ze souboru zahrnujícího Ci-C4 alkylovou skupinu, C1-C4 alkoxyskupinu, hydroxylovou skupinu, nitroskupinu, atom halogenu a tri(chlor nebo fluor)methylovou skupinu. Pojem atom halogenu znamená atom bromu, atom chloru, atom fluoru a atom jodu.

Pro sloučeninu obecného vzorce 1 jsou preferovanými substituenty R^B a R® methylová skupina, isopropylová skupina, benzylová skupina a methoxymethylová skupina. Sloučeniny, ve kterých R⁵ i R® jsou methylové skupiny, se připraví způsobem popsaným ve výše citovaném Jonesově patentu.

Lze též připravit sloučeninu obecného vzorce 1, ve které se selektivně odstraní substituent R⁵ chránícího hydroxylovou skupinu s ponecháním substituentu R® chránící hydroxylovou skupinu jako části konečného produktu. Totéž platí v případě, ve kterém se selektivně odstraňuje • 4

4 ·

4 4

4 4 4

4· ·· substituent R® chránící hydroxylovou skupinu s ponecháním substituentu R³ chránícího hydroxylovou skupinu na místě. Např. R³ může být isopropylová skupina nebo benzylová skupina a R® methylová skupina. Isopropylová nebo benzylová skupina se selektivně odstraní standartními způsoby a methylová chránící skupina R® se ponechá jako část konečného produktu.

Jak ukazuje reakční schéma I, první kroky způsobu pro přípravy určitých sloučenin podle tohoto vynálezu zahrnují selektivní umístění odstupující skupiny R⁷ v poloze 3 sloučeniny obecného vzorce 1 s vytvořením sloučeniny obecného vzorce 2, připojení produktu této reakce s fenolem 3 s chráněnou hydroxylovou skupinou v poloze 4 s vytvořením sloučeniny obecného vzorce 4 a selektivní odstranění skupiny R⁰ chránící hydroxylovou skupinu s vytvořením sloučeniny obecného vzorce 5. V sekvenci kroků ukázaných v reakčním schématu 1 se skupiny R³ a R® a R® chránící hydroxylové skupiny zvolí takovým způsobem, že lze v konečném kroku ochrannou skupinu R® odstranit za přítomnosti skupin R⁵ a R® chránících hydroxylové skupiny.

V prvním kroku reakčního schématu I se příslušná odstupující skupina umístí selektivně v poloze 3 výchozí látky obecného vzorce 1 standartními způsoby. Příslušné odstupující skupiny R⁷ zahrnují sulfonaty, jako jsou methansulíonat, 4-brombenzensulíonat, toluensulfonat, »

ethansulfonat, isopropansulíonat, 4-methoxybenzensulfonat, 4-nitrobenzensulfonat, 2-chlorbenzensulíonat, triílat a podobné, halogeny, jako je atom bromu, atom chloru a atom jodu, a další příbuzné odstupující skupiny. Avšak pro

zajištění správného umístění odstupující skupiny se preferují vyjmenované halogeny a zejména se preferuje atom bromu.

Popisovaná reakce se provádí standartními způsoby. Např. při použití preferovaných halogenačních prostředků reaguje ekvivalent tohoto halogenačního prostředku, přednostně bromu, s ekvivalentem substrátu obecného vzorce 1 ve vhodném rozpouštědle, jako je např. chloroform nebo kyselina·octová. Reakce obvykle probíhá při teplotě od zhruba 40 °C do zhruba 80 °C.

Reakční produkt z výSe popsaného kroku, sloučenina obecného vzorce II, poté reaguje s fenolem 3 s chráněnou hydroxylovou skupinou v poloze 4 s vytvořením sloučeniny obecného vzorce 4, ve které je R⁰ selektivně odstranitelná skupina chránící hydroxylovou skupinu. Obecně může být skupina ochraňující hydroxylovou skupinu v poloze 4 kterákoliv známá chránící skupina, kterou lze selektivně odstranit bez odstranění v tomto případě skupiny R⁵ a, je-li přítomna, skupiny R® sloučeniny obecného vzorce 3. Preferované skupiny R⁰ chránící hydroxylové skupiny zahrnují methoxymethylovou skupinu, jestliže R⁵ a/nebo R® nejsou methoxymethylová a benzylová skupina. Z nich se zvláStě preferuje benzylová skupina. Fenolové reakční složky s hydroxylovou skupinou chráněnou v poloze 4 jsou komerčně dostupné nebo se mqhou připravit standartními způsoby.

Spojovací reakce mezi sloučeninou obecného vzorce 2 a sloučeninou obecného vzorce 3 je v oboru známa jako Ullmanova reakce a obecně probíhá standartními způsoby [viz např. Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms a Structure, čtvrté vydání, 3-16, (J. March, redakce, John • · ··

Wiley & Sons, lne. 1992), C. D. Jones, J. Chem. Soc. Perk.

Trans. I, 407 (1992)].

Obecně se ekvivalentní množství dvou arylových substrátů za přítomnosti až ekvimolárního množství katalyzátoru jodidu měďného a příslušného rozpouštědla vaří pod zpětným chladičem pod inertní atmosférou. Přednostně reaguje ekvivalent sloučeniny obecného vzorce 2, ve kterém R^? je atom bromu, s ekvivalentním množstvím 4-benzyloxyfenolu za přítomnosti ekvivalentu oxidu měďného.

Příslušná rozpouštědla pro tuto reakci jsou rozpouštědla či směsi rozpouštědel zůstávající v průběhu reakce inertní. Obvykle jsou preferovanými rozpouštědly organické báze, zejména bráněné báze, jako je např.

2,4,6,-kollidin.

Teplota použitá v tomto kroku obecně postačuje pro uskutečnění dokončení této spojovací reakce a ovlivňuje požadovanou dobu. Pokud se reakční směs vaří pod zpětným chladičem pod inertní atmosférou, jako je atmostéra dusíku, je doba do dokončení reakce obvykle od zhruba 20 do zhruba 60 h.

Po spojení sloučeniny obecného vzorce 2 se sloučeninou obecného vzorce 3 s vytvořením sloučeniny obecného vzorce 4 s,e sloučenina obecného vzorce 5 připraví selektivním odstraněním skupiny R⁵ chránící hydroxylovou skupinu sloučeniny obecného vzorce/4 dobře známými redukčními způsoby. Je naprosto nutné, aby tento selektivní způsob neovlivnil skupinu R⁵ a, je-li přítomna, též skupinu R⁶ chránící hydroxylové skupiny.

·· i · · · · • · · · ··· ···· ·· • ·

Pokud R⁰ je preferovaným benzylovým zbytkem a R^s i R®, je-li přítomna, jsou methylové skupiny, provede se tento krok Btandartními způsoby hydrogenolýzy. Obvykle se substrát obecného vzorce 4 přidává ke vhodnému rozpouštědlu či směsi rozpouštědel s následným přídavkem donoru protonů pro zrychlení reakce a příslušného hydrogenačního katalyzátoru.

Příslušné katalyzátory zahrnují ušlechtilé kovy a oxidy, jako je palladium, platina a oxid rhoditý na podložce, jako je uhlík nebo uhličitan vápenatý. Z nich se zvláště preferuje palladium na uhlíku, zejména 10% palladium na uhlíku. Rozpouštědla pro tuto reakci jsou rozpouštědla či směsi rozpouštědel zůstávající inertní v průběhu reakce. Obvykle se preferuje ethylacetat a C1-C4 alifatické alkoholy, zejména ethanol. Pro tuto reakci slouží kyselina chlorovodíková jako vhodný a preferovaný donor protonů.

Při průběhu při teplotě okolí a tlaku v rozmezí od zhruba 206,8 kPa (30 psi) do zhruba 344,7 kPa (50 psi) probíhá tato reakce zvláště rychle. Postup této reakce se může monitorovat standartními chromatografickými způsoby, jako je chromatografie na tenké vrstvě.

Jak ukazuje reakční schéma II, po přípravě sloučeny obecného vzorce ,5 se provede reakce se sloučeninou obecného vzorce

R4RSN-(CH₂ )z '-Q (6) ve kterém ·· » · · J • · · · • · ·

99999 99 • 9 · 9 · « · · * • · · 9 · • · · · • ♦ · ·

E⁴ a R^s se definují výše a

Q je atom bromu nebo přednostně atom chloru, s vytvořením sloučeniny obecného vzorce 7. Sloučenina obecného vzorce 7 se poté zbaví chránící skupiny s vytvořením sloučeniny obecného vzorce I.

Reakční schéma II

OR

R³

OR⁽

H la, R^J = R^ó lb, R⁵ = H lc, R⁶ = H

V prvním kroku způsobu reakčního schématu II se reakce provede standartními způsoby. Sloučenina obecného vzorce 6 je komerčně dostupná, nebo se připraví způsoby dobře známými tomu, kdo má běžnou zkušenost v oboru. Přednostně se používá hydrochlorid sloučeniny obecného vzorce 6. Ve zvláště preferovaných případech sloučeniny podle tohoto vynálezu se používá 2-chlorethylpiperidinhydrochlorid.

Obecně reaguje alespoň 1 ekvivalent sloučeniny obecného vzorce 5 s 2 ekvivalenty sloučeniny obecného vzorce 6 za přítomnosti aleport 4 ekvivalentů uhličitanu alkalického kovu, přednostně uhličitanu sodného, a příslušného rozpouštědla.

Vhodnými rozpouštědly pro tuto reakci jsou rozpouštědla či směsi rozpouštědel zůstávající inertní v průběhu reakce. Preferuje se N,N-dimethylformamid, zejména jeho bezvodá forma. Teplota používaná v tomto kroku by měla být dostatečná pro zajištění dokončení této alkylační reakce. Obvykle je dostačující a preferovanou teplota okolí. Popisovaná reakce přednostně probíhá pod inertní atmosférou, zejména pod atmosférou dusíku.

Za preferovaných reakčních podmínek proběhne tato reakce do svého dokončení v průběhu zhruba 16 až zhruba 20 h. Postup této reakce lze monitorovat standartními chromatografickými způsoby.

V alternativním způsobu přípravy sloučeniny podle tohoto vynálezu ukázaném na reakčním schématu III níže reaguje sloučenina obecného vzorce 5 v alkalickém prostředí s přebytkem alkylačního prostředku sloučeniny obecného

vzore© 8:

Q-(CH₂)_n-Q' (8) ve kterém

Q a Q jsou stejné nebo rozdílné odstupující skupiny.

Příslušné odstupující skupiny jsou ty, které se uvádějí výše.

I

Reakční schéma III

la, R⁵ = R⁶ = h lb, R⁵ = H

IC, R⁶ = H '

Preferovaný alkalický roztok pro tuto alkylační reakci obsahuje uhličitan draselný v některém inertním rozpouštědle, jako je např. methylethylketon nebo dimethylforamid. V tomto řešení se nechráněná hydroxylová skupina

obecného vzorce 5 převádí na íenoxidový ion, který vytěsňuje jednu z odstupujících skupin alkylačního prostředku.

Tato reakce postupuje nejlépe, jestliže se alkalický roztok obsahující reakční složky a činidla přivede k varu pod zpětným chladičem a vaří se do dokončení reakce. Při použití methylethylketonu jako preferovaného rozpouštědla jsou reakční časy v rozmezí od zhruba 6 h do zhruba 20 h.

Reakční produkt z tohoto kroku, sloučenina obecného vzorce 9, poté reaguje se sloučeninou obecného vzorce 10 zvolenou ze seznamu 1-piperidin, 1-pyrrolidin, methyl-1-pyrrolidin, dimethyl-l-pyrrolidin, 4-morfolin, dimethylamin, diethylamin, diisopropylamin, nebo 1-hexamethylenimin stardartními způsoby s obdržením sloučenin obecného vzorce 7. Přednostně se používá hydrochlorid sloučeniny obecného vzorce 10 a zvláště preferovaným je piperidinhydrochlorid. Reakce se obvykle provádí s alkylovanou sloučeninou obecného vzorce 9 v některém inertním rozpouštědle, jako je bezvodý dimethylforamid a reakční směs se zahřívá na teplotu v rozmezí od zhruba 60 °C do zhruba 110 °C. Při zahřívání reakční směsi na preferovanou teplotu okolo 90 °C, je doba reakce pouze od zhruba 30 min do zhruba 1 h. Avšak změny reakční ch podmínek ovlivní dobu potřebnou pro dokončení této reakce. Postup tohoto reakčního kroku lze monitorovat standartními chromatografickými způsoby.

Určité preferované sloučeniny obecného vzorce I se obdrží odštěpením skupin chránících hydroxylové skupiny R®a, jsou-li přítomny, R⁵ sloučeniny obecného vzorce I dobře známými způsoby. Četné reakce pro tvorbu a odstranění takových chránících skupin se popisují v řadě standartních prací včetně např. Protective Groups in Organic Chemistry,

Plenům Ργθββ (London a New York, 1973), T. V. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Viley, (New York, 1981), a The Peptides, sv. I, Schrooder a Lubke, Academie Press (London a New York, 1965). Způsoby pro odstranění preferovaných Bkupin R^? a/nebo Ρ^θ chránících hydroxylová skupiny, zejména methylových skupin a methoxymethylových skupin, se v podstatě popisují v příkladech.

Alternativní a preferovaný způsob přípravy sloučenin podle tohoto vynálezu ukazuje reakční schéma IV. Ve způsobu, který se zde popisuje, se atom síry sloučeniny obecného vzorce 2 oxiduje na sulioxid 11, který poté reaguje s některou nukleofilní skupinou pro zavedení spojovacího atomu kyslíku sloučeniny obecného vzorce I. Sulíoxidový zbytek sloučeniny obecného vzorce 12 se poté redukuje s obdržením určitých sloučenin podle tohoto vynálezu.

Reakční schéma IV

V prvním kroku tohoto způsobu se sloučenina obecného vzorce 2 selektivní oxiduje na sulíoxid 12. Je k dispozici řada známých způsobů pro tento krok [viz např. M. Madesclai23 re, Tetrahedron, 42 (20), 5459-5495 (1986), B. M,. Trošt a kol., Tetrahedron Letters, 22 (14), 1287-1290 (1981), J. Drabowicz a kol., Synthetic Communications, 11 (12), 1025-1030 (1981), J. B. Kramer a kol., 34th National Organic Symposium, Williamsburg, VA. , 11-15. června 1995]. Avšak mnoho oxidačních činidel zajišťuje pouze nízkou konverzi na žádaný produkt s významnou oxidací do vyššího stupně na sul ion. Preferovaný způsob však převádí sloučeninu obecného vzorce 2 na sulíoxid obecného vzorce 12 s vysokým výtěžkem s nízkým vytvářením nebo bez vytváření sulfonů. Tento způsob zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce 2 s 1 až zhruba 1,5 ekvivalentů peroxidu vodíku ve směsi zhruba 20 % až zhruba 50 % kyseliny triíluoroctové v methylenchoridu. Tato reakce probíhá při teplotě od zhruba 10 °C do zhruba 50 °C a do dokončení obvykle vyžaduje dobu od zhruba 1 do zhruba 2 h.

Dále se v poloze 3 vytěsní odstupující skupina E⁷ požadovaným nukleofilním derivátem obecného vzorce 13. Tyto nukleofi lni deriváty se připravují standartními způsoby.

V tomto kroku tohoto způsobu se kyselý proton nukleofilni skupiny odstraní zpracováním bází, přednostně slabým přebytkem hydridu sodného nebo kalium-terc.butoxidu, v polárním aprotickém rozpouštědle, přednostně v dimethylforamidu nebo tetrahydrofuranu. Ostatní použitelné báze zahrnují uhličitan draselný a uhličitan sodný. Navíc lze použít další rozpouštědla, jako je dioxan nebo dimethylsulfoxid. Deprotonace obvykle probíhá při teplotách mezi zhruba 0 °C a zhruba 30 °C a dokončení obvykle vyžaduje dobu 30 min. Poté se přidá sloučenina obecného vzorce XIV k roztoku nekleofilní sloučeniny. Vytěsňovací reakce probíhá při teplotě mezi 0 °C a zhruba 50 °C a obvykle vyžaduje dobu zhruba

1 až zhruba 2 h. Produkt se oddělí standartními způsoby.

V dalším kroku tohoto způsobu se sulfoxid obecného vzorce 14 redukuje na benzothiofenovou sloučeninu obecného vzorce I.

V případě požadavku lze skupinu nebo skupiny chránící hydroxylové skupiny produktu a soli produktu ve způsobu ukázaném v reakčním schématu 4 odstranit v kterémkoliv kroku.

Prekurzorové esterové sloučeniny obecného vzorce I se připraví náhradou hydroxylových zbytků v poloze 6 a/nebo v poloze 4 , pokud jsou přítomné, zbytkem vzorce -0C0(C1-C5 alkylová) skupina nebo -OSC>2(C2-C$ alkylová) skupina dobře známými způsoby. Viz například U.S. patent č.

358 593.

Jestliže se například požaduje -OCO(Ci-C« alkylová) skupina, ponechá se reagovat mono- nebo dihydroxysloučenina obecného vzorce I s prostředkem, jako je acylchlorid, bromid, kyanid nebo azid nebo s příslušným anhydridem či směsným anhydridem. Reakce se vhodným způsobem provádějí v bázickém rozpouštědle, jako je pyridin, lutidin, chinolin nebo isochinolin nebo v terciárním aminu, jako je triethylamin, tributylamin, methylpiperidin a podobně. Reakci lze též provést v některém inertním rozpouštědle, jako je ethylacetát, dimethylformamid, dimethylsulfoxid, dioxan, dimethoxyethan, acetonitril, acetpn, methyl-ethylketon a podobně, ke kterému se přidá alespoň jeden ekvivalent látky zachycující kyselinu (kromě případů citovaných níže), jako je terciární amin. V případě požadavku lze použít acylační katalyzátory, jako je 4-dimethylaminopyridin nebo • » ·· · ·· ·· • ···· · · · · • · · · · · · · • · · · · · · · · · • · · · · · · · · ······· ·· ··· ·· ··

4-pyrrolidinopyridin [viz např. Haslam a kol., Tetrahedron,

2409-2433 (1980)].

Tyto reakce lze provést při mírných teplotách v rozmezí od zhruba -25 °C do zhruba 100 °C, často pod inertní atmosférou, jako je plynný dusík. Avšak pro průběh reakce je obvykle vhodná teplota okolí.

Acylace hydroxylové skupiny v poloze 6 a/nebo v poloze 4' se též .může provést reakcemi příslušné karboxylové kyseliny v inertním organickém rozpouštědle katalyzovanými kyselinou. Používají se kyselé katalyzátory, jako jsou kyselina sírová, kyselina polyfosforečná, kyselina methansulfonová a podobně.

Výše citované esterové prekurzorové sloučeniny lze též obdržet přípravou aktivního esteru příslušné kyseliny, jako je ester vytvořený se známými činidly, jako je cyklohexylkarbodiimid, acylimidazoly, nitroíenoly, pentachlorfenol, N-hydroxysukcinimid a 1-hydroxybenzotriazol [viz např. Bull. Chem. Soc. Japan, 38, 1979 (1965) a Chem. Ber., 788 a 2024 (1970)].

Každý z výše popsaných způsobů poskytujících -0C0(Ci-C5 alkylové) skupiny se provádí v rozpouštědle, jak se diskutuje výše. Tyto způsoby, které neprodukují kyselý produkt v průběhu reakce, ovšem nevyžadují použití prostředku pro zachycení kyseliny v reakční směsi.

Pokud se požaduje sloučenina obecného vzorce I, ve ✓ které se hydroxylová skupina v poloze 6 nebo 4 převádí na -0S02(C2~C6 alkylovou) skupinu, ponechá se reagovat mononebo dihydroxysloučenina, např. s anhydridem sulfonové • ·· ·· · ·· ·· • · · · · · · · · ·· ·

9 · 9 · 9 9·· ·· ··· ··«« ··· ···· ·· ··· ·· ·· kyseliny nebo derivátem příslušná sulfonové kyseliny, jako je sulfonylchlorid, sulionylbromid nebo suliony1amonná sůl, jak popisují King a Monoir, J. Am. Soc., 97, 2566-2567 (1975). Dihydroxysloučenina může též reagovat s příslušným anhydridem sulfonové kyseliny nebo se směsnými anhydridy sulíonových kyselin. Takové reakce se provádějí za podmínek popsaných výše v diskusi reakce s kyselými halidy a podobně.

Příprava farmaceuticky přijatelných solí sloučenin podle tohoto vynálezu .

I když v lékařských způsobech léčby podle tohoto vynálezu lze použít formu volné báze sloučeniny obecného vzorce I, preferuje se příprava a použití farmaceuticky přijatelné formy soli. Sloučeniny použité ve způsobech podle tohoto vynálezu primárně vytvářejí farmaceuticky přijatelné kyselé adiční soli s širokým rozmezím organických a anorganických kyselin. Tyto soli se též považují za součást obsahu tohoto vynálezu.

Termín farmaceuticky přijatelné soli, jak se používá v celém tomto popisu a v připojených nárocích, označuje soli typů popsaných v článku Bergeho a kol., J. Pharmaceutical Science, 66, 1-19 (1977). Vhodné farmaceuticky přijatelné soli zahrnují soli tvořené typickými anorganickými kyselinami, jako je kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina jodovodíková, kyselina dusičná, kyselina sírová, kyselina fosforečná, kyselina fosforičitá, a podobně, stejně tak jako soli odvozené od organických kyselin, jako jsou alifatické monokarboxylové a dikarboxylové kyseliny, alkanové kyseliny substituované fenylovou skupinou, hydroxyalkanové a hydroxyalkandiové kyseliny, aromatické kyseliny, alifatické • ·· ·· · ·· ·· ··· · · · · · · · · · • · ··· ···· • · · · · <····· ·· ··· · · · · ··· ···· ·· ··· ·· ·· a aromatické sulfokyseliny. Tyto farmaceuticky přijatelné adiční soli organických kyselin zahrnují acetat, fenylacetat, trifluoracetat, akrylat, askorbat, benzoat, chlorbenzoat, dinitrobenzoat, hydroxybenzoat, methoxybenzoat, methylbenzoat, o-acetoxybenzoat, naftalen-2-benzoat, bromid, isobutyrat, fenylbutyrat, b-hydroxybutyrat, butin-1,4-dioat, hexin-1, 4-dioat, kaprat, kaprylat, chlorid, cinnamat, citrát, formiat, fumarat, glykolat, heptanoat, hippurat, laktat, malat, maleat, hydroxymaleat, malonat, mandelat, mesylat, nikotinat, isonikotinat, nitrát, oxalat, ftalat, tereftalat, fosfát, monohydrogeníosfat, dihydrogenfosfat, metafosfat, pyrofosfat, propiolat, propionat, fenylpropionat, Balicylat, sebakat, sukcinat, suberat, sulfát, bisulfat, pyrosulfat, sulfit, bisulfit, sulfonat, benzensulfonat, p-bromfenylsulfonat, chlorbenzensulfonat, ethansulfonat, 2-hydroxyethansulfonat, methansulíonat, naftalen-l-sulíonat, naftalen-2-sulfonat, p-toluensulfonat, xylensulfonat, tartarat a podobné. Preferovanými solemi jsou hydrochloridové a oxalatové soli.

Farmaceuticky přijatelné kyselé adiční soli se obvykle vytvářejí reakcí sloučeniny obecného vzorce I s ekvimolárním množstvím nebo se slabým molárním přebytkem kyseliny. Reakční složky se obecné spojí ve společném rozpouštědle, jako. je diethylether nebo ethylacetat. Soli se normálně vysrážejí, z roztoku v průběhu zhruba 1 h až 10 d a mohou se oddělit filtrací, nebo lze rozpouštědlo odstranit konvenčními prostředky.

Farmaceuticky přijatelné soli mají obecně zvýšenou rozpustnost ve srovnání se sloučeninou, od které se odvozují, a proto jsou vhodnější pro přípravky ve formě • v ·* · ♦ # ·· • · ··· φ φ · φ φ φφφ φφφφ φφφφ φφφφφ φ φ φφφ φφφφ • ΦΦ φφφφ φφ φφφ «φ φφ kapalin či emulzí.

farmaceutické prostředky

Sloučenina podle tohoto vynálezu se podává různými způsoby včetně perorálního, rektálního, transdermálního, subkutánního, intravenózního, intramuskulárního a intranasálního podávání. Tato sloučenina se přednostně formuluje před podáváním, o jehož způsobu rozhoduje ošetřující lékař.. Proto je dalším aspektem tohoto vynálezu farmaceutický prostředek obsahující účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli, která může případně obsahovat účinné množství estrogenů či progestinu a farmaceuticky přijatelnou nosnou látku, zřeďovací látku či pomocnou látku.

Celkové účinné složky v těchto prostředcích činí 0,1 až 99,9 hmotnostních % přípravku. Farmaceuticky přijatelným se míní nosič, zřeďovací látka, pomocná látka a sůl kompatibilní s ostatními složkami přípravku a nepoškozující jeho příjemce.

Farmaceutický přípravek podle tohoto vynálezu se připraví způsoby známými v oboru s použitím dobře známých a snadno dostupných složek. Například sloučenina obecného vzorce I, buď samotná nebo v kombinaci s některým estrogenem či progestinem, se mísí s běžnými pomocnými látkami, zřeďovacími látkami či nosnými látkami a zpracovává se do formy tablet, tobolek, suspenzí, roztoků, injekčních přípravků, aerosolů, prášků a podobně.

Celkové množství aktivních složek v těchto prostředcích činí 0,1 až 99,9 hmotnostních % přípravku.

• ·

Pojem farmaceuticky přijatelný znamená nosič, zřeďovací látku, pomocnou látku a sůl kompatibilní s ostatními složkami prostředku a nepoškozující jeho příjemce.

Přípravky se mohou zvláště formulovat pro perorální podávání v tuhé či kapalné formě pro parenterální injekce, pro lokální či aerosolové podávání nebo pro rektální či vaginální podávání pomocí čípku.

Farmaceutické přípravky podle tohoto vynálezu se mohou podávat lidem a jiným savcům perorálně, rektálně, intravaginálně, parenterálně, lokálně (pomocí prášků, mastí, krémů či kapek), bukálně či sublingválně nebo jako perorální či nasální sprej. Pojem parenterální podávání se zde týká způsobů podávání zahrnujících intravenózní, intramuskulární, intraperitoneální, intrasternální, subkutánní či intraartikulární injekci či infuzi.

Farmaceutické prostředky podle tohoto vynálezu pro parenterální podávání zahrnují sterilní vodné či nevodné roztoky, disperze, suspenze ci emulze stejně tak jako sterilní prášky, které se rozpouštějí bezprostředně před použitím na sterilní roztoky či Buspenze. Příklady vhodných sterilních vodných a nevodných nosičů, zřeďovacích prostředků, rozpouštědel či vehikul zahrnují vodu, fyziologický roztok, ethanol, polyoly [jako je glycerol, propylenglykol, póly(ethylenglykol) a podobně] a jejich vhodné směsi, rostlinné oleje (jako je olivový olej) a organické estery použitelné v injekcích, jako je ethyloleat. Správná fluidita se zajišťuje například použitím povlakových materiálů, jako je lecitin, udržováním správného rozměru částice v případě disperzí a suspenzí a použitím povrchově aktivních látek.

• · • 9

Parenterální prostředky mohou též obsahovat adjuvantní látky, jako jsou konzervační činidla, smáčedla, emulgační prostředky a dispergační prostředky. Prevence působení mikroorganismů se zaručuje použitím antibakteriálních a antifungálních prostředků, například parabenu, chlorbutanolu, kyseliny íenolsorbové a podobně. Může se též požadovat použití isotonických prostředků, jako jsou cukry, chlorid sodný a podobně. Prodloužená absorpce injekčních prostředků se může zajietit zavedením prostředků, které zpožďují' absorpci, jako je monostearat hlinitý a želatina.

V některých případech je pro prodloužení účinku léku žádoucí zpomalit absorpci léku po subkutánní či intramuskulární injekci. To lze uskutečnit použitím kapalné suspenze nebo krystalického či amorfního materiálu o nízké rozpustnosti ve vodě nebo rozpuštěním či suspendováním léku v olejovém vehikulu. V případě subkutánní či intramuskulární injekce suspenze obsahující formu léku o nízké rozpustnosti ve vodě závisí rychlost absorpce léku na jeho rychlosti rozpouštění.

Injekční depotní přípravky sloučeniny podle tohoto vynálezu se připravují vytvořením mikroopouzdřených matric léku v biodegradabilních polymerech, jako jsou kyselina polymléčná, polyglykolová, kopolymery kyseliny mléčné a glykolové a polyorthoestery a polyanhydridy, což jsou materiály, jejichž'popis lze v oboru nalézt. V závislosti na poměru léku k polymeru a vlastnostech daného použitého polymeru je možno kontrolovat rychlost uvolňování léku.

Injekční prostředky se sterilizují, například průchodem filtry zadržujícími bakterie nebo předchozí sterilizací složek směsi před jejich smísením, bud při • · přípravě anebo těsně před přípravou (jako je tomu v případě balení ve dvou odděleních obsahujícího stříkačku).

Pevné dávkové formy pro perorální podávání zahrnují tobolky, tablety, pilulky, prášky a granule. V těchto tuhých dávkových formách se účinná složka mísí s alespoň jedním inertním farmaceuticky přijatelným nosičem, jako je citrát sodný nebo dikalciumfosfat a/nebo s (a) plnidly nebo nastavovadly, jako jsou škroby, laktosa, glukosa, mannitol a kyselina křemičitá, (b) s pojivý, jako je karboxymethylcelulosa, alginaty, želatina, póly(vinylpyrrolidon), sacharosa a akáciová klovatina, (c) s prostředky udržujícími vlhkost, jako je glycerol, (d) s rozvolňovadly, jako je agar, uhličitan vápenatý, bramborový nebo tapiokový škrob, kyselina alginová, křemičitany a uhličitan sodný, (e) s roztoky zpožďujících prostředků, jako je parafin, (f) s prostředky zrychlujícími absorpci, jako jsou kvarterní amonné sloučeniny, (g) se zvlhčovadly, jako je cetylalkohol a glycerolmonostearat, (h) s absorbenty, jako je kaolin a infusoriová hlinka a (i) s mazivy, jako je mastek, stearat vápenatý, stearat hořečnatý, pevné póly(ethylenglykoly), laurylsulfat sodný a jejich směsi. V případě tobolek, tablet a pilulek mohou též dávkové formy obsahovat pufry.

Pevné přípravky podobného typu mohou též obsahovat náplň v měkkých či tvrdých želatinových tobolkách s použitím pomocných látek, jako je laktosa, stejně tak jako vysokomolekulárních póly(ethylenglykolů) a podobně.

Pevné dávkové formy, jako jsou tablety, dražé, tobolky, pilulky a granule, lze též připravit s povlaky či obaly, jako jsou enterické povlaky nebo jiné povlaky dobře známé v oboru přípravy léčiv. Povlaky mohou obsahovat zne32 • · · • · • · ♦ • · · • · · • · * průhledňující prostředky nebo prostředky uvolňující účinnou složku (složky) v dané části trávicího traktu, jako jsou například povlaky rozpustné v kyselině pro uvolňování účinné složky (složek) v žaludku nebo povlaky rozpustné v zásaditém prostředí pro uvolňování účinné složky (složek) ve střevním traktu.

Účinná složka (složky) může být též mikroopouzdřená v povlaku s pozdrženým uvolňováním, kde mikrotobolky tvoří část prostředku v pilulce či tobolce.

Kapalné dávkové formy pro perorální podávání sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnují roztoky, emulze, suspenze, sirupy a elixíry. Navíc k účinným složkám mohou kapalné prostředky obsahovat inertní zřeďovací prostředky obvykle užívané v oboru, jako je voda nebo jiná farmaceuticky přijatelná rozpouštědla, solubilizační prostředky a emulgátory, jako je ethanol, isopropanol, ethylkarbonat, ethylacetat, benzylalkohol, benzylbenzoat, propylenglykol,

1,3-butylenglykol, dimethylformamid, oleje (zejména olej z bavlněných semen, drcených ořechů, kukuřice, klíčků, oliv, ricinový olej a sezamový olej), glycerol, tetrahydrofurfurylalkohol, póly(ethylenglykoly), estery mastných kyselin se sorbitolem a jejich směsi.

Kromě inertních rozpouštědel mohou kapalné perorální prostředky též obsahovat adjuvantní prostředky, jako jsou smáčedla, emulgátory a suspenzační prostředky, a sladidla, příchutě a prostředky pro úpravu vůně.

Kapalná suspenze může navíc k účinné složce (účinným složkám) obsahovat suspenzační prostředky, jako jsou ethoxylované isostearylalkoholy, polyoxyethylensorbitol a » · ·· • · · · ♦ · · · «0 0 · · • · · _Λ *

0· ·· sorbitansstery, mikrokrystalická celulosa, metahydroxid hlinitý, bentonitová hlinka, agar a tragakant a jejich směsi.

Prostředky pro rektální nebo intravaginální podávání se připravují smísením jedné či více sloučenin podle tohoto vynálezu s vhodnými nedráždivými pomocnými látkami, jako je kakaové máslo, polyethylenglykol nebo jakýkoliv čípkový vosk, který je při teplotě místnosti tuhý, avšak při teplotě \> lidském těle kapalní, takže taje v rektu nebo vaginální dutině s uvolňováním aktivní složky (aktivních složek). Sloučeniny se rozpouštějí v roztaveném vosku, vytvarují do žádaného tvaru a ponechají se ztvrdnout do konečného stavu čípku.

Sloučenina podle tohoto vynálezu se též může podávat ve íormě liposomů. Jak je v oboru známo, odvozují se liposomy obecně od fosíolipidů nebo jiných lipidových látek. Liposomové prostředky se připravují jako monolamelární nebo multilamelární hydratované kapalné krystaly, které jsou dispergované ve vodném prostředí. Je možno použít jakýkoliv farmaceuticky přijatelný a metabolizovatelný lipid schopný vytváření liposomů. Daný prostředek ve formě liposomů může navíc obsahovat kromě jedné či více aktivních složek podle tohoto vynálezu stabilizační prostředky, pomocné látky, ochranné látky a podobně. Preferovanými lipidy jsou fosfolipidy a fosíatidylcholiny (lecithiny), přirozené i syntetické.

Způsoby přípravy liposomů jsou v oboru dobře známy, jak popisuje např. Prescott, redakce, Methods in Cell Biology, sv. XIV, Academie Press, New York, N. Y. (1976), str. 33 a další • ·

Způsob podle tohoto vynálezu

Vyvolání nádorů mamy u krys podáním karcinogenu N-nitroso-N-methylmočoviny je uznávaným zvířecím modelem pro studium rakoviny prsu, který je vhodný pro analýzu účinků chemopreventivních prostředků.

Ve dvou oddělených studiích se krysím samicím Sprague-Dawley o stáří 55 dnů podává intravenózně (studie 1) nebo intřaperitoneálně (studie 2) dávka 50 mg N-nitroso-N-methylmočoviny na 1 kg tělesné hmotnosti 1 týden před dodáváním diety ad libitum obsahující různá množství

a) 6-hydroxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinylethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofenhydrochloridu,

b) (Z)-2-[4-(1,2-diíenyl-l-butenyl)fenoxy]N,N-dimethylethanaminové báze nebo

c) kontrolní látky.

Kontrolní látka obsahuje vehikulum používané v kombinaci s účinnými složkami.

Ve studii 1 dávky 60 mg/kg diety a 20 mg/kg diety odpovídají zhruba srovnatelným dávkám 3 a 1 mg/kg tělesné hmotnosti testovaného zvířete.

Ve studii 2 dávky 20, 6, 2 a 0,6 mg/kg diety odpovídají zhruba srovnatelným dávkám 1, 0,3, 0,1 a 0,03 mg/kg tělesné hmotnosti testovaného zvířete. Krysy se pozorují ohledně toxicity, váží a vyšetřují pohmatem ohledně tvorby tumoru jedenkrát týdně. Zvířata se usmrtí po 13 týdnech (studie 1) nebo po 18 týdnech (studie 2) a tumory se ověří a zváží při pitvě. Výsledky těchto studií ukazuje tabulka 1 (studie 1) a tabulka 2 (studie 2) níže.

• · • · • ·

Tabulka 1

Prevence karcinomu mamy u krysích samic Sprague-Dawley podáváním 6-hydroxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinylethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofenhydrochloridu (příklad 15)

Ošetření	Krysy bez tumorů	Průměrný počet tumorů na krysu	Průměrné žatí· žení tumorem na krysu (g)
Kontroly Sloučenina	3/24 (12 %)	3,0	11,0
z př. 15 60 mg/kg diety Sloučenina	11/12 (92 X)	0,08	0,05
z př. 15 20 mg/kg diety	11/12 (92 X)	0,08	0,03

Tabulka 2

Prevence karcinomu mamy u krysích samic Sprague-Dawley podáváním 6-hydroxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinylethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofenhydrochloridu (příklad 15) nebo tamoxiíenové báze • ·

Ošetření

Krysy bez tumorů

Průměrný počet tumorů na krysu

Průměrné zatížení tumorem na krysu (g)

Kontrola	6/23	(26	*)	1,8	9,0
Sloučenina z př. 15 20 mg/kg diety	11/12	(92	*)	0,08	0,43
Sloučenina z př. 15 6 mg/kg diety	7/12	(58		0,50	1,50
Sloučenina z př. 15 2 mg/kg diety	8/12	(67		0,50	3,40
Sloučenina z př. 15 0,6 mg/kg diety	6/12 l	(50	*)	0,75	1,60
Tamoxifenová	7/11	(64	*)	0,33	0,52

báze 2 mg/kg diety

• ·

- 37 Tamoxifenová 7/12 (58 %) 09,83 2,10 báze

0,6 mg/kg diety

Vyšetření údajů z tabulky 1 ukazuje, že podávání sloučeniny z příkladu 15 tohoto vynálezu vede k významnému poklesu výskytu tumoru (87 %) průměrného počtu tumorů na krysu (97 96) a průměrné zátěže krysy tumorem (99 &) ve srovnání s kontrolami.

Vyšetření údajů z tabulky 2 ukazuje, že tak nízké dávky, jako je 0,6 mg/kg diety sloučeniny z příkladu 15 tohoto vynálezu, jsou dostatečné k významnému snížení výskytu tvorby tumoru, počtu tumorů na krysu a průměrné zátěže krysy tumorem při srovnání s kontrolami. Požadované účinky vykazují závislost na dávce a jsou srovnatelné s účinky tamoxiíenu.

Pozorování účinku při všech testovaných dávkách brání konečnému srovnání mezi těmito dvěma sloučeninami, neboť výskyt plató lze pozorovat i při nižších dávkách obou sloučenin. Avšak údaje z tabulek 1 a 2 ukazují, že sloučenina z příkladu 15 je alespoň tak účinná jako tamoxiíen či účinnější při inhibici či prevenci karcinomu mamy.

Proto je podávání účinného množství sloučeniny podle tohoto vynálezu, zejména 6-hydroxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinoethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofenu použitelným způsobem profylaxe, prevence či inhibice tvorby tumoru mamy.

Pojem účinné množství, jak se zde používá, znamená množství sloučeniny podle tohoto vynálezu, které je schopné ulehčit symptomy stavů, které se zde popisují. Specifická dávka sloučeniny podávané podle tohoto vynálezu se určuje konkrétními podmínkami týkajícími se daného případu, např. účinností podávané sloučeniny, cestou podávání, stavem pacienta a patologických stavem, který je třeba léčit. Obvyklá denní dávka bude obsahovat netoxickou dávkovou úroveň od zhruba 5 do zhruba 600 mg/d sloučeniny podle tohoto vynálezu. Preferované denní dávky budou obecně od zhruba 15 do zhruba 80 mg/d,

Přesná dávka Be určí v souladu se standardní praxí v lékařské oblasti titrace dávky pro pacienta, to jest v počátečním podáváním nízké dávky sloučeniny a postupným zvyšováním až do zjištění dosažení žádaného terapeutického účinku.

Příklady Provedení vynálezu

Následující příklady se uvádějí pro další ilustraci přípravy sloučeniny podle tohoto vynálezu. Příklady se nemají chápat jako omezení obsahu tohoto vynálezu, který se definuje v přiložených nárocích.

Data NMR pro následující příklady se obdrží na přístroji NMR GE 300 MHz a, pokud se neuvádí jinak, používá se jako rozpouštědlo dimethylsulfoxid s šesti atomy deuteria.

Příklad 1 • · · !

• · • ···· ·· ·· ·· • · * · » · · · » · · « • · · « ·· ♦·

Příprava oxalatové soli [6-methoxy -3-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfeny1) ]benzo[b]thiofenu

Krok a

Příprava [6-methoxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-brom]benzo[b]-thiofenu h₃co

och₃

K roztoku [6-methoxy-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu (27,0 g, 100 mmol) v 1,10 litrů chloroformu se při 60 oC přidává po kapkách brom (15,98 g, 100 mmol) jako

- 40 roztok v 200 ml chloroformu. Po ukončení přidávání se reakční směs ochladí na teplotu místnosti a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu s obdržením 34,2 g (100 %) [6-methoxy-2-(4-methoxyíenyl)-3-brom]benzo[b3thiofenu ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 83 až 85 ®C.

*H NMR (DMSO-ds) <5 7,70-7,72 (m, 4H), 7,17 (dd, J 8,6, 2,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 8,4 Hz, 2H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 349, 350.

Vypočítané množství pro CisHigOzSBr (%) : C 55,03, H 3,75. Nalezené množství (%) : C 54,79, H 3,76.

Krok b

Příprava [6-methoxy-2-(4-methoxyfenyl)“3-(4-bsnzyloxy)-fenoxy ]benzo[b]thiofenu

K roztoku [6-methoxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-brom]benzo[b]thiofenu (34,00 g, 97,4 mmol) v 60 ml kollidinu pod atmosférou dusíku se přidá 4-benzyloxyfenoi (38,96 g, 194,8 r

i

999 mmol) a jodid měďný (14,5 g, 97,4 mmol). Výsledná směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 48 h. Při ochlazení na teplotu místnosti se směs rozpustí v acetonu (200 ml) a anorganické tuhé látky se odstraní filtrací. Filtrát se odpaří ve vakuu a zbytek se rozpustí v methylenchloridu (500 ml). Methylenchloridový roztok se promyje 3N roztokem kyseliny chlorovodíkové (3 x 300 ml), poté IN roztokem hydroxidu sodného (3 x 300 ml). Organická vrstva se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Zbytek se vyjme 100 ml ethylacetátu a vytvořená bílá tuhá látka oddělená filtrací je [6-methoxy~2-(4-methoxyfenyl)3benzoCb]thiofen (4,62 g, 17,11 mmol). Filtrát se odpaří ve vakuu a ponechá se projít krátkou náplní silikagelu (s methylenchloridem jako elučním činidlem) pro odstranění výchozího materiálu. Filtrát se odpaří ve vakuu a zbytek se ponechá vykrystalovát z hexanu/ethylacetatu s obdržením 7,19 g [6-methoxy-2-(4-methoxyfenyl )-3-(4-benzyloxy)fenoxy3benzo[b]thiofenu ve formě bělavé krystalické tuhé látky. Matečný louh se odpaří a vyčistí chromatografií na Bililkagelu (hexan/ethylacetat 80:20) s obdržením dalších 1,81 g produktu. Celkový výtěžek [6-methoxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-(4-benzyloxy)fenoxy3 benzo[bjthiofenu je 9,00 g (24 % vzhledem k výchozí látce). Bázický extrakt se okyselí na pH 4 5N roztokem kyseliny chlorovodíkové a výsledná sraženina se oddělí filtrací a vysuší s obdržením 13,3 g 4-benzyloxyfenolu o teplotě tání 100 až 103 °C.

1H NMR (CDClg): ó 7,60 (d, J = 8,8 Hz, 2H),

7,39-7,24 (m, 7H), 6,90-6,85 (m, 7H·), 4,98 (s, 2H), 3,86 (s, 3H), 3,81 (s, 3H),

Hmotnostní spektrometrie FD: 468.

· ·· «·

Vypočítané množství pro C29H24O4S (%) : C 74,34, H 5,16. Nalezené množství (X): C 74,64, H 5,29.

Krok c

Příprava [6-methoxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-(4-hydroxy)fenoxy]benzo[bjthiofenu

OCH

K roztoku [6-methoxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-(4-benzyloxy)fenoxy]benzo[b]thiofenu (1,50 g, 3,20 mmol) v 50 ml _Λ ethylacetátu a 10 ml IX koncentrované kyseliny chlorovodíkové v ethanolu se přidá 10 X palladium na uhlíku (300 mg). Směs se hydrogenuje při tlaku 281 kPa (40 psi) po dobu 20 min a poté je reakce ukončena, jak lze posoudit na základě chromatografie na tenké vrstvě. Směs se ponechá projít Cel item pro odstranění katalyzátoru a filtrát se odpaří ve vakuu na bílou tuhou látku. Surový produkt se ponechá projít vrstvou silikagelu (s chloroformem jako elučním činidlem). Odpaření poskytuje 1,10 g (91 X) [6-methoxy-2-(4~methoxy* 4 • ·

1H NMR (DMSO-ds) <5 9,10 (s„ 1H), 7,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,52 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,89 (dd, J = 8,8, 2,1 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 6,63 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,72 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 378.

Vypočítané množství pro C22HÍBO4S (%) : C 69,82, H 4,79. Nalezené množství (%): C 70,06, H 4,98.

Krok d

Příprava oxalatové soli [6-methoxy-3-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]íenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

K roztoku [6-methoxy-2-(4-methoxyfeny 1)-3-(4-hydroxy)fenoxy]benzo[b]thiofenu (1,12 g, 2,97 mmol) v 7 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu se pod atmosférou dusíku přidá uhličitan česný (3,86 g, 11,88 mmol). Po míchání po dobu 10 min se přidá 2-chlorethylpiperidinhydrochlorid (1,10 g, 1,48 mmol). Výsledná směs se míchá po dobu 18 h při teplotě okolí. Provede se rozdělení mezi chloroform/vodu (100 ml každého z těchto rozpouštědel). Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje chloroformem (3 x 50 ml).

Organické vrstvy se'spojí a promyjí vodu (2 x 100 ml).

Sušení organické vrBtvy (síranem sodným) a odpaření poskytuje olejovitou kapalinu, která se chromatograíuje na silikagelu (2% směs methanol/chloróform). Žádané frakce se odpaří na olejovitou kapalinu, která se rozpustí v 10 ml ethylacetátu a zpracuje kyselinou šťavelovou (311 mg, 3,4 mmol). Po míchání po dobu 10 min se vytvoří bílá sraženina, která se^. oddělí filtrací a vysuší s obdržením 1,17 g (70 %) ·« ·· • · · « ♦ · · • 9 · • · · * * ·* • 9 9

9 9

9 · * 9 9 ethylacetátu a zpracuje kyselinou šťavelovou (311 mg, 3,4 mmol). Po míchání po dobu 10 min se vytvoří bílá sraženina, která se oddělí filtrací a vysuší s obdržením 1,17 g (70 %) [6-methoxy-3-[4-[2-(1-piperidiny1)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl) ]benzo[b] thiofenu ve formě oxalatové soli o teplotě tání 197 až 200 °C (s rozkladem).

iH NMR (DMS0-d$) δ 7,60 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,55 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,91. (dd, J = 8,8, 1,1 Hz, 1H), 6,87 (s, 4H), 4,19 (široký t, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,32 (široký t, 2H), 3,12-3,06 (m, 4H), 1,69-1,47 (m, 4H), 1,44-1,38 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 489.

Vypočítané množství pro 02 9¾ i NO4S. 0,88 HO2CCO2H («):C 64,95, H 5,80, N 2,46. Nalezené množství (*) C 64,92, H 5,77, N 2,54.

Příklad 2

Příprava [6-methoxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxyjfenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[bjthiofenhydrochloridu

• ·

- 45 Zpracování oxalatové soli z příkladu 1 vodnou íází s obdržením volné báze a následnou reakcí s diethyletherem nasyceným kyselinou chlorovodíkovou poskytuje sloučeninu podle nadpisu o teplotě tání 216 až 220 °C.

*H NMR (DMSO-dí) δ 10,20 (široký s, 1H), 7,64 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,59 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,96 (dd, J - 9,0, 1,5 Hz, 1H), 6,92 (q, J_AB = 9,0 Hz, 4 Η), 4,31 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,43 (m, 4H), 2,97 (m, 2H), 1,77 (m, 5H), 1,37 (m, 1H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 489.

Vypočítané množství pro C29H31NO4S. 1,0 HC1 (%) : C 66,21, H 6,13, N 2,66. Nalezené množství (£): C 66,46, H 6,16, N 2,74.

Příklad 3

Příprava [6-methoxy-3-[4-[2-(1-pyrrolidiny1)ethoxy]íenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

H₃CO

OCH₃

i.

Sloučenina podle nadpisu se připraví stejným způsobem jako sloučenina z příkladu 1. Teplota tání je 95 až °C.

1H NMR (DMSO-ds) <5 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,58

(t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,51 (m, 4H), 1,66 (m, 4H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 477.

Vypočítané množství pro C₂₀H29NO4S (%) : C 70,71, H 6,15, N 2,99. Nalezené množství (*): C 70,59, H 6,15, N 3,01

Příklad 4

Příprava [6-methoxy-3-[4-[2-(1-hexamethylenimino)ethoxy]íenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

H₃CO

OCH ₃

Sloučenina podle nadpisu se připraví stejným způsobem jako sloučenina z příkladu 1. Její bod tání je 189 až 192 °C.

¹H NMR (DMS0-d«) δ 10,55 (široký s, 1H), 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 6,95 (dd, J = 9,0, 2,0 Hz, H), 6,86 (s, 4H), 3,94 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 2,80 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,66 (m, 4H), 1,53 (m,' 8H) .

Vypočítané množství pro Cg_oHgg N0₄S. 1,0 HC1 (%) C 66,71, H 6,35, N 2,59. Nalezené množství (%) : C 66,43, H 6,46, N 2,84.

Příklad 5

Příprava (6-methoxy-3-[4-[2-(1-N,N-diethylamino)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl) ]benzo[b]thiofenhydrochloridu > ·ΗΟ

HgCO

OCH « φ· φφφφ • φ φ » φ φ

Sloučenina podle nadpisu se připraví stejným způsobem jako sloučenina v příkladu 1. Její teplota tání je

196 až 198 °C.

iH NMR (DMSO-ds) 6 10,48 (široký s, 1H), 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,59 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 6,97 (dd, J = 9,0, 2,0 Hz, 1H), 6,87 (q J_AB = 9,0 Hz, 4H), 4,25 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,54 (m, 2H), 3,09 (m, 4H), 2,00 (m, 3H), 1,88 (m,'3H).

Vypočítané množství pro CzbH₃iN0₄S. 1,5 HCl (Sá) : C 63,18, H 6,15, N 2,63. Nalezené množství (%): C 63,46, H 5,79, N 2,85.

Příklad 6

Příprava [6-methoxy-3-[4-[2-(morfolino)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzoCb]thiofenhydrochloridu

Ο^Ί ‘HCl h₃co

och₃

• ·

Sloučenina podle nadpisu se připraví stejným způsobem jako sloučenina z příkladu 1. Její teplota tání je 208 až 211 °C.

^ΧΗ NMR (DMSO-d^) <S 10,6 (široký s, 1H), 7,63 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,20 (J = 9,0 Hz,

1H), 7,00 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 6,97 (dd, J = 9,0, 2,0 Hz, 1H), 6,91 (q J _AS = 9,0 Hz, 4H), 4,29 (m, 2H), 4,08-3,91 (m, 4H), 3,82 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,59-3,42 (m, 4H),

3,21-3,10 (m, 2H)..

Vypočítané množství pro C₂₀ H29NO5S. 1,0 HCl (%) : C 63,09, H 5,73, N 2,65. Nalezené množství (%): C 63,39, H 5,80, N 2,40.

Příklad 7

Příprava [6-hydroxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]íenoxy 3-2-(4-hydroxyfeny1)]benzo[b]thiofenu

HO

S

OH • ♦ • · ·

9 · • · ·

9 · • « [6-Methoxy-3-[4-[2-(1-piperidiny1)ethoxy 3 fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenhydrochlorid (10,00 g,

19,05 mmol) se rozpustí v 500 ml bezvodého methylenchloridu a ochladí na 8 °C. K tomuto roztoku se přidá bromid boritý (7,20 ml, 76,20 mmol). Výsledná směs se míchá při teplotě 8 °C po dobu 2,5 h. Reakce se ukončí přídavkem 1 litru nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného do míchaného roztoku ochlazeného na 0 °C. Methylenchloridová vrstva se odstraní a zbývající tuhé látky se rozpustí ve směsi methanol/ethylacetat. Vodná vrstva se poté extrahuje 5% směsí methanol/ethylacetat (3 x 500 ml). Veškeré organické extrakty (ethylacetatové a methylenchloridové) se spojí a vysuší síranem sodným. Provede se odpaření ve vakuu a hnědá tuhá látka se podrobí chromatografii (na silikagelu 1% až 7% směsí methanol/chloroform) s obdržením 7,13 g (81 %) [6-hydroxy-3-[4-[2-(1-piperidiny1)ethoxy]fenoxy3-2-(4-hydroxyfenyl)jbenzo[b]thiofenu ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 93 °C.

iH NMR (DMSO-ds) δ 9,73 (široký s, 1H), 9,68 (široký s, 1H), 7,45 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,21 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 8,6, 1,8 Hz, 1H (maskovaný), 6,81 (s, 4H), 6,75 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 3,92 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,56 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,36 (m, 4H), 1,43 (m, 4H), 1,32 (m, 2H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 462.

Vypočítané množství pro C27H27NO4S (Sš) : C 70,20, H 5,90, N 3,03. Nalezené množství (%): C 69,96, H 5,90, N 3,14.

Příklad 8 • * ·· «

Λ ♦ · • · · • · · · • · ·

9 «

Příprava oxalatové solí [6-hydroxy-3-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-hydroxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

Sloučenina podle nadpisu se připraví s 80% výtěžkem z volné báze. Její teplota tání je 246 až 249 °C ( s rozkladem).

1H NMR (DMSO-de) 6 7,45 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,22 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,87 (dd, J = 8,6, 1,8 Hz, 1H, maskovaný), 6,84 (s, 4H), 6,75 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,08 (široký t, 2H), 3,01 (Široký t, 2H), 2,79 (m, 4H), 1,56 (m, 4H), 1,40 (m, 2H) .

Hmotnostní spektrometrie FD: 462.

Vypočítané množství pro C2FH27NO4S. 0,75 HO2CCO2H (%) : C 64,63, H 5,42, N 2,64. Nalezené množství : C 64,61, H 5,55, N 2,62.

Příklad 9

Příprava [6-hydroxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-hydroxyfenyl)]benzo[b]thiofenhydrochloridu

Sloučenina podle nadpisu se připraví s výtěžkem 91 % zpracováním odpovídající volné báze diethyletherem nasyceným kyselinou chlorovodíkovou. Její teplota tání je 158 až 165 °C.

1H NMR (DMSO-ds) 6 9,79 (s, 1H), 9,74 (s, 1H), 7,40 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,86 (q J_AB = 9,3 Hz, 4H), 6,76 (dd, J = 8,6, 2,0 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,26 (široký t, 2H), 3,37 (m, 4H), 2,91 (m, 2H), 1,72 (m, 5H), 1,25 (m, 1H).

t

Hmotnostní spektrometrie FD: 461.

Vypočítané množství pro C_2?Hz7N0₄S. 1,0 HCI (*) : C 65,11, H 5,67, N 2,81. Nalezené množství (%): C 64,84, H ·* · 00 00

000 0 00 0

0 0 0 0 0 0

0 000 00 0

0 0 0 0 0 0

00 0 00 00

5,64, N 2,91.

Příklad 10

Příprava [6-hydroxy-3-[4-[2-(1-pyrrolidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-hydroxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

Sloučenina podle nadpisu se připraví z produktu příkladu 3 způsobem podobným způsobu použitému v příkladu 7 výše. Její teplota tání je 99 až 113 °C.

1H NMR (DMS0-d«) 6 9,75 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 7,50 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,25 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,80 (dd, J - 9,0, 2,0 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 9,0 Hz> 2H), 3,93 (m, 2H), 2,73 (m, 2H), 2,53 (m, 4H), 0,96 (t, J = 7,0 Hz, 4H).

) i

Vypočítané množství pro ΟζδΗζδΝΟήβ.Ο,δ HzO (%); C 68,40, H 5,74, N 3,07. Nalezené množství (%) : C 68,52, H 6,00, N 3,34.

• · • · • · * • · · • · · • ·

Příklad 11

Příprava [6-hydroxy-3-·[4-[2-(1-hexamethylenimino)ethoxy] fenoxy]-2-(4-hydroxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

Sloučenina podle nadpisu se připraví z produktu příkladu 4 způsobem podobným způsobu použitému v příkladu 7 výše. Její teplota tání je 125 až 130 °C.

iH NMR (DMSO-de) 6 9,75 (s, 1H), 9,71 (s, 1H), 7,50 (d, J - 9,0 Hz, 2H), 7,26 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,85 (s, 3H), 6,80 (dd, J = 9,0, 2,0 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 9,0 Hz), 3,94 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,80 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,66 (m, 4H), 1,53 (m, 8H).

Vypočítané množství pro CzeHzsNOdS (%) : C 70,71, H 6,15, N 2,94. Nalezené množství (%): C 70,67, H 6,31, N 2,93.

Příklad 12

• · · · · · · ·· ··· ·· ··

Příprava [6-hydroxy-3-[4-[2-(1-N,N-diethylamino)ethoxy]fenoxy]-2-(4-hydroxyfeny1)]benzo[ b]thiofenu

Sloučenina podle nadpisu se připraví z produktu příkladu 5 způsobem podobným způsobu použitému v příkladu 7 výše. Její teplota tání je 137 až 141 °C.

iH NMR (DMSO-d«) 6 9,75 (s, 1H), 9,71 (s,

1H), 7,49 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,85 (s, 4H),' 6,80 (dd, J = 9,0, 2,0 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 3,95 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,74 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,51 (m, 4H), 1,66 (m, 6H).

Vypočítané množství pro C₂cH27N0₄S (*) : C 69,46, H 6,05, N 3,12. Nalezené množství (%): C 69,76, H 5,85, N 3,40.

Příklad 13

Příprava [6-hydroxy-3-[4-[2-(morfolino)ethoxy]fenoxy]-2-(4-hydroxyfenyl)]benzo[b]thiofenhydrochloridu

Sloučenina podle.nadpisu se připraví z produktu příkladu 6 způsobem podobným způsobu použitému v příkladu 7 výše. Její teplota tání je 157 až 162 °C.

¹H NMR (DMSO-ds) 6 10,60 (široký s, 1H), 9,80 (s, 1H), 9,75 (s, 1H), 7,50 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 7,28 (d, J =

2,0 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,92 (q J _AB = 9,0 Hz, 4H), 6,81 (dd, J = 9,0, 2,0 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 4,30 (m, 2H), 3,95 (m, 2H), 3,75 (m, 2H), 3,51 (m, 4H), 3,18 (m, 2H).

Vypočítané množství pro C26H25NO5S.HCI : C 62,46, H 5,24, N 2,80. Nalezené množství (*) : C 69,69, H 5,43, N 2,92.

Příklad 14

Příprava [6-hydroxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-257 • ·

-4-(methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

OCH ₃ ·» · · • · 4 • · 4 • · « » · · 4 • · · ·

Krok a

Příprava kyseliny 6-methoxybenzo[b]thiofen-2-boronové

H₃CO b-^oh

OH

K roztoku 6-methoxybenzo[b]thiofenu (18,13 g, 0,111 mol) ve 150 ml bezvodého tetrahydrofuranu se při teplotě 60 °C přidává po kapkách z injekční stříkačky n-butyllithium (76,2 ml, 0,122 mol', 1,6 M roztok v hexanu). Po míchání po dobu 30 min se injekční stříkačkou přidává triisopropylborat (28,2 ml, 0,122 mol). Výsledná směs se ponechá postupně ohřát na 0 °C a poté se rozdělí mezi IN roztok kyseliny chlorovodíkové a ethylacetat (po 300 ml). Vrstvy se oddělí a organická vrstva se vysuší síranem sodným. Odpaření ve vakuu poskytuje bílou tuhou látku, která se zpracuje směsí φφ φφ » φ φ <

> Φ Φ <

ethyletheru a hexanu. Filtrace poskytuje 16,4 g (71 %) kyseliny 6-methoxybenzo[b]thioíen-2-boronové ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 200 °C ( s rozkladem).

iH NMR (DMSO-ds) 6 7,83 (s, 1H), 7,78 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,97 (dd, J = 8,6, 2,0 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 208.

Krok b

Příprava [6-methoxy-2-(4-methansulfonyloxyfenyl)]benzo[b]~ thiofenu

K roztoku kyseliny 6-methoxybenzo[b]thioíen-2-boronové (3,00 g, 14,4 mmol) ve 100 ml toluenu se přidá 4-(methansulfonyloxy)íenylbromid (3,98 g, 15,8 mmol) a poté 16 ml 2,0 N roztoku uhličitanu sodného. Po míchání po dobu 10 min se přidá tetrakistrifenylfosfinpalladium (0,60 g, 0,52 mmol) a výsledná směs se vaří pod zpětným chladičem po dobu 5 h. Reakční směs se poté ponechá ochladit na teplotu místnosti, při které se produkt vysráží z organické fáze. Vodná fáze se odstraní a organická vrstva se odpaří ve vakuu na tuhou

* ·· • · · • ·	• · • · • ·	• • · •	• •	·· • •	• •
• ·	• ·	♦	•	•	•
·· ····	• ·	···		• ·

látku. Triturace z ethyletleru poskytuje tuhou látku, která se odfiltruje a odpaří ve vakuu s obdržením 3,70 g (77 % [6-methoxy-2-(4-methansulfonyloxyfenyl)]benzo[b]thiofenu ve formě hnědé tuhé látky o teplotě tání 197 až 201 °C.

1H NMR (DMSO-de) 6 7,82-7,77 (m, 3H), 7,71 (D,J = 8,8 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 6,98 (dd, J = 8,7, 1,5 Hz, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,39 (s, 3H) .

Hmotnostní spektrometrie FD: 334.

Vypočítané množství pro C15H14O4S2 (*): C 57,46, H 4,21. Nalezené množství (X): C = 57,76, H 4,21,

Krok c

Příprava [6-hydroxy-2-(4-methansulfonyloxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

OSO2CH3

K roztoku [6-methoxy-2-(4-methansulfonyloxyfenyl)]benzo[b]thiofenu ( 9,50 g, 28,40 mmol) v bezvodém methylen60 φ · chloridu (200 ml) se při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku přidává bromid boritý (14,20 g, 5,36 ml, 56,8 mmol). Výeledná směs se míchá při teplotě okolí po dobu 3 h. Reakce se ukončí pomalým nalitím do přebytku ledové vody. Po energickém míchání po dobu 30 min se bílá sraženina oddělí filtrací, promyje několikrát vodou a poté se vysuší ve vakuu s obdržením 8,92 g (98 %) [6-hydroxy-2-(4-methansulfonyloxyfenyl)benzo[b]thiofenu ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 239 až 243 °C.

*H NMR (DMSO-ds) <5 9,70 (s, 1H), 7,76 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,72 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,86 (dd, J = 8,7, 1,7 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 320.

Vypočítané množství pro Ci_BHizO₄S₂ (*) : C 56,23, H 3,77. Nalezené množství (X): C 56,49, H 3,68.

Krok d

Příprava [6-benzyloxy-2-(4-methansulfonyloxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

OSO₂CH₃

• ♦ · i • · · · · • · · · ·· ··

K roztoku [6-hydroxy-2-(4-methansulfonyloxyfenyl)]benzo[b]thiofenu (3,20 g, 10,0 mmol) v 75 ml bezvodého dimethyl formamidu se přidá uhličitan česný (5,75 g, 17,7 mmol) a poté benzylchlorid (1,72 ml, 11,0 mmol). Výsledná směs se energicky míchá po dobu 24 h. Rozpouštědlo se odpaří ve vakuu a tuhý zbytek se suspenduje ve 200 ml vody. Bílá sraženina se oddělí filtrací a několikrát se promyje vodou. Po vysušení ve vakuu se surový produkt suspenduje ve směsi hexan/ethylether 1:1. Tuhá látka se oddělí s obdržením 3,72 g (91 X) '[ 6-benzy loxy-2-(4-methansulf ony loxy fenyl) ]benzo[b]thiofenu ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 198 až 202 ®C.

iH NMR (DMSO-dg) <5 7,81-7,78 (m, 3H), 7,72 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,47-7,30 (m, 7H), 5,15 (s, 2H), 3,39 (s, 3H) .

Hmotnostní spektrometrie FD: 410.

Krok e

Příprava [6-benzyloxy-2-(4-hydroxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

OH

K roztoku [6-benzyloxy-2-(4-methansulfonyloxyfenyl)]benzo[b]thiofenu (12,50 g, 30,50 mmol) ve 300 ml bezvodého tetrahydrofuranu se pod atmosférou vodíku přidává při teplotě místnosti lithium-aluminiumhydrid (2,32 g, 61,0 mmol) po malých dílech. Poté se směs míchá při teplotě okolí po dobu 3 h a reakce se ukončí opatrným nalitím směsi do přebytku chladného 1,0 N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Vodná fáze se extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se poté promyje několikrát vodou a vysuší (síranem sodným) a odpaří Ve vakuu s obdržením tuhé látky. Chromatografie (chloroformem na silikagelu) poskytuje 8,75 g (87 %) [6-benzyloxy-2-(4-hydroxyfenyl)]benzo[b]thiofenu ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 212 až 216 °C.

iH NMR (DMSO-dí) δ 9,70 (s, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,51-7,30 (m, 8H), 7,00 (dd, J = 8,7, 2,2 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,13 (b, 2H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 331.

Vypočítané množství pro C2iHi«QzS : C 75,88 H 4,85. Nalezené množství : C 75,64, H 4,85.

Krok f

Příprava [6-benzyloxy-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu • · • 9 • · t · • · • ·

K roztoku [ 6-benzyloxy--2-(4-hydroxyfenyl) ] benzolů b] thiof enu (8,50 g, 26,40 mmol) ve 200 ml bezvodého dimethylformamidu se pod proudem dusíku při teplotě místnosti přidává po malých částech hydrid sodný (1,66 g, 41,5 mmol). Když skončilo vyvíjení plynu, přidává se po kapkách jodmethan (3,25 ml, 52,18 mmol). Reakční směs se míchá po dobu 3 h při teplotě okolí. Poté se rozpouštědlo odpaří ve vakuu a organická vrstva se promyje několikrát vodou. Poté ee organická vrstva vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu s obdržením 9,00 g (98 Sá) [6-benzyloxy-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 180 až 185 °C.

iH NMR (DMSO-de) δ 7,67-7,58 (m, 5H), 7,46-7,29 (m,

5H), 7,02 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H)', 6,98 (d, J = 8,7 Hz,

2H), 5,13 (s, 2H), 3,76 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 346.

• ·

Vypočítané množství pro C22HieO2S (%) : C 76,27, H

5,24. Nalezené množství (%): C 76,54, H 5,43.

·♦ *·

Krok g

Příprava [6-benzyloxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-brom]benzo[b]thiofenu

-WC

OCH [6-Benzyloxy-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofen 10,0 g, 28,9 mmol) se přidá do 200 ml chloroformu spolu s 10,0 g pevného hydrogenuhličitanu sodného při teplotě okolí. K této suspenzi se po kapkách přidává brom (1,50 ml, 29,1 mmol) v průběhu 30 min ve formě roztoku ve 100 ml chloroformu. Poté se přidá voda (200 ml) a vrstvy se oddělí. Organická fáze se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu na bílou tuhou látku. Krystalizace ze směsi methylenchlorid/methanol poskytuje 10,50 g (85 %) [6-benzyloxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-brom]benzo[b]thiofenu ve formě bílé tuhé látky o teplotě tání 146 až 150 °C.

1H NMR (DMSO-ds) 6 7,70 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,65-7,60 (m, 3H), 7,47-7,30 (m, 5H), 7,19 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,17 (s, 2H), 3,78 (s,

3H) .

9 9

9 «

9 ·

9 ·

9 ·

9

Hmotnostní spektrometrie FD: 346.

Vypočítané množství pro C22Hi?02SBr (%) : C 62,13, H 4,03. Nalezené množství (%): C 61,87, H 4,00.

Krok h

Příprava [6-benzyloxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-brom]benzo[b]thioíen-(S-oxidu)

Sloučenina podle nadpisu se připraví oxidací produktu z kroku g s 1,5 ekvivalentů peroxidu vodíku ve směsi kyseliny trifluoroctové s methylenchloridem. Produkt se oddělí jako žlutá tuhá látka krystalizací z ethylacetátu a jeho teplota tání je 202 až 205 °C.

1H NMR (DMSO-d®) 6 7,80 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,55 (d, J = &*4 Hz, 1H), 7,47-7,32 (m, 6H), 7,10 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 5,23 (s, 2H), 3,80 (s, 3H) .

Hmotnostní spektrometrie FD: 441.

« ·

Vypočítané množství pro CzzHirOaSBr (Sš) : C 59,87, H

3,88. Nalezené množství (%): C 59,59, H 3,78.

Krok i

Příprava [6-benzyloxy-3-[4-[2-(1-piperidiny1)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)Jbenzo[b]thiofen-(S-oxidu)

Reakce produktu z kroku i) výše s 4-(2-piperidinoethoxy)fenolem v bázi poskytuje sloučeninu podle nadpisu ve formě žluté olejovité kapaliny.

1H NMR (DMSO-ds) <5 7,76 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,8 Hz, 2H),,7,44-7,30 (m, 5H), 7,12 (dd, J = 8,6, 2,2 Hz, 1H), 7,03-6,93 (m, 5H), 6,85 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,18 (s, 2H), 3,94 (široký t, J = 5/8 Hz, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,56 (široký t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,37-2,34 (m, 4H),

1,45-1,32 (m, 6H) .

Hmotnostní spektrometrie FD: 592.

Vypočítané množství pro C3BH35NO5S (3á) : C 72,26, H

6,06, N 2,41. Nalezené množství (2á) : C 72,19, H 5,99, N

2,11.

Krok j

Příprava [6-benzyloxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]f enoxy-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thioíenu

Redukce produktu z kroku i) výše poskytuje sloučeninu podle nadpisu izolovanou s celkovým výtěžkem 95

%. Čištění na silikagelu 1 až 5% směsí methanol/chloroform poskytuje bělavou tuhou látku o teplotě tání 105 až 108 °C.

i'H NMR (DMSO-de) ó 7,62 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,45-7,30 (m, 5H), 7,15 (dd, J = 8,6 Hz, 1H), 7,00-6,94 (m, 3H), 6,82 (s,/4H), 5,13 (s, 2H), 3,92 (široký t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,55 (široký t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,37-2,34 (m, 4H), 1,44-1,31 (m, 4H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 565.

• · ·

Vypočítané množství pro C3BH3BNO4S (*) : C 74,31,

H 6,24, N 2,48. Nalezené množství (*): C 74,35, H 6,07, N

2,76.

Krok k

Příprava [6-hydroxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

OCH

K roztoku [6-benzyloxy-3-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu (8,50 g, 15,0 mmol) ve 300 ml<směsi ethanol/ethylacetat 5:1 se přidá palladiová čerň (1,50 g), formiat amonný (3,50 g, 55,6 mmol) a 30 ml vody. Výsledná směs se vaří pod zpětným chladičem a sleduje se chromatografií na tenké .vrstvě. Po zhruba 3 h se reakce považuje za ukončenou a roztok se ochladí na teplotu okolí. Směs se filtruje vrstvou Celitu pro oddělení katalyzátoru a filtrát se odpaří ve vakuu na tuhou látku. Koncentrát se rozdělí mezi nasycený roztok hydrogenuhliči69 tanu sodného a 5% směs ethanol/ethylacetat. Vrstvy se oddělí a organická fáze se vysuší síranem sodným a odpaří ve vakuu. Surový produkt se vyčistí chromatograficky (na silikagelu 1 až 5% směsí methanol/chloroform) s obdržením 6,50 g (91 %) [6-hydroxy-3-[4-[2-(1-piperidiny1)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu ve formě pěny, která se převede na tuhou látku triturací s hexanem. Její teplota tání je 174 až 176 °C.

1H NMR (DMSO-de) <5 9,77 (s, 1H), 7,56 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,81 (s, 4H), 6,76 (dd, J = 8,6, 2,0 Hz, 1H), 3,91 (široký t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,71 (s, 3H), 2,55 (široký t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,38-2,33 (m, 4H),

1,46-1,28 (Μ, 6H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 475.

Vypočítané množství pro C₂8H₂₉N0₄S (X) : C 70,71, H 6,15, N 2,94. Nalezené množství (%): C 70,46, H 5,93, N 2,71.

Příklad 15

Příprava hydrochloridu [6-hydroxy-3-[4-[2-(l-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

Produkt z příkladu 14 se převede na odpovídající hydrochlorid s výtěžkem 85 % zpracováním diethyletherem nasyceným chlorovodíkem v ethylacetátu s následnou krystalizací ze směsi ethanol/ethylacetat. Teplota tání produktu je 156 až 160 °C.

1H NMR (DMSO-d®) d 10,28 (široký s, 1H), 9,85 (s, 1H), 7,56 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,25 (d, J = 2,0 Hz, 1H),

7,06 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,87 (q, J_AB =9/3 Hz, 4H), 4,27 (široký t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,44-3,31 (m, 4H), 2,98-2,88 (m, 2H), 1,74-1,60 (m, 5H), 1,36-1,29 (m, 1H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 475.

Vypočítané množství pro C₂b H29NO4S. 1,0 HCI (%) : C 65,68, H 5,90, N 2,73. Nalezené množství (&) : C 65,98, H 6,11, N 2,64.

Příklad 16

Příprava [6-methoxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]- 71 ·· ·· ♦ ·· ·· • · · · ·· · · · · • ·· · · · · · ···· · · · · · · • ··· · · · · • ···· ·· ··· ·· ·· fenoxy]-(4-hydroxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

Krok a

Příprava [

6-methoxy-2-(4-benzyloxyfenyl)]benzo[b]thiofenu

Podle obecných způsobů kroků a) až g) z příkladu 14 se látka podle nadpisu obdrží s výtžžkem 73 % a její teplota tání je 217 až 221 °C.

·· ·· • · · · · • · 9 ·· ·· iH NMR (DMSO-de) ó 7,63-7,60 (m, 3H), 7,59-7,26 (m, 7H), 7,02 (d, J - 8,7 Hz, 2H), 6,96 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 3,88 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 346.

Vypočítané množství pro C22H10OZS (%) : C 76,27, H 5,24. Nalezené množství (%): C 76,00, H 5,25.

Krok b [ 6-Methoxy-2- (4-benzyloxyfeny1) -3-brom] benzo[b] thiof en

H₃CO

Sloučenina podle nadpisu se obdrží s výtěžkem 91 % a její teplota tání je 125 až 127 ®C, iH NMR (DMSO-ds) 6 7,64-7,61 (m, 4H), 7,46-7,31 (m, 5H), 7,15-7,09 (m, 3H), 5,15 (s, 2H), 3,82 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 346.

- 73 Vypočítané množství pro C22Hi?C^SBr (%) : C 62,13, H 4,03. Nalezené množství (%): C 62,33, H 3,93.

Krok c [6-Methoxy-2-(4-benzyloxyfenyl)-3-brom]benzo[b]thiofen-(S-oxid)

Sloučenina podle nadpisu se oddělí jako žlutá tuhá látka chromatograficky (chloroformem na silikagelu) a její teplota tání je 119 až 123 °C.

1H NMR (DMSO-d®) 6 7,73 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,8 Hz, 2H)., 7,55 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,46-7,31 (m, 5), 7,26 (dd, J = 8,,5, 2,2 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,8 Hz,

2H), 5,16 (s, 2H), 3,86 (s, 3H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 441.

Vypočítané množství pro CzzHizOgSBr (%) : C 59,87, H

3,88. Nalezené množství (%) : C 60,13, H 4,10.

I

Krok d [6-Methoxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-benzyloxyfenyl)]benzo[b]thiofen-(S-oxid)

Sloučenina podle nadpisu se obdrží ve formě žluté tuhé látky o teplotě tání 89 až 93 °C.

iH NMR (DMSO-de) <5 7,68 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,42-7,28 (m, 5H), 7,08-6,92 (m, 6H), 6,86 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,09 (s, 2H), 3,94 (široký t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,81 (s, 3H), 2,56 (široký t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,37-2,34 (m, 4H), 1,45-1,31 (m, 6H) .

Hmotnostní spektrometrie FD: 592.

Vypočítané množství pro CsbHssNOsS. 0,25 EtOAc (*) : C

71,62, H 6,18, N 2,32. Nalezené množství (%) : C 71,32, H

5,96, N 2,71.

- 75 Krok e [6-Methoxy-3-[4-[2-(1-piperidinyl)ethoxy]fenoxy]-2-(4-benzyloxyfenyl)benzo[b]thiofen

Sloučenina podle nadpisu se obdrží s výtěžkem 91 % a její teplota tání je 106 až 110 °C.

iH NMR (DMSO-ds) ó 7,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,54 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,42-7,28 (m, 5H), 7,13 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,82 (s, 4H), 5,08 (s, 2H), 3,92 (široký t, J =5,8 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H), 2,55 (široký t, J = 5,8 Hz, 2H), '2,37-2,33 (m, 4H), 1,44-1,31 (m, 4H) .

Hmotnostní spektrometrie FD: 565.

I

Vypočítané množství pro CsbHsbNO^S (X) : C 74,31, H

6,24, N 2,48. Nalezené množství (X): C 74,26, H 6,17, N

2,73.

« ·

- 76 Krok f

Příprava [6-methoxy-3-[4-[2-piperidiny1)ethoxy]fenoxy]-2-(4-hydroxyfeny1)]benzo[b]thiofenu

Sloučenina podle nadpisu se obdrží s výtěžkem 88 % a její teplota tání je 147 až 150 °C.

iH NMR (DMSO-ds) S 9,72 (s, 1H), 7,51 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,11 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,88 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1H), 6,81 (s, 4H), 6,76 (d, J = 8,6, 2H), 3,91 (široký t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,77 (s, 3H),

2,55 (široký t, J = ,5,9 Hz, 2H), 2,38-2,33 (m, 4H),

1,46-1,28 (m, 6 H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 475.

Vypočítané množství pro CzbH₂9N0₄S (%) : C 70,71, H 6,15, N 2,94. Nalezené množství (%) : C 71,00, H 6,17, N

Φ Φ φ φ φ · φ φ φ φ φ φ

2,94.

Příklad 17

Příprava [6-methoxy-3-[4-[2-(1-piperidiny1)ethoxy3 fenoxy]-2-(4-hydroxyíenyl)]benzo[b]thiofenhydrochloridu

Sloučenina podle nadpisu se připraví způsobem analogickým způsobu použitému v příkladu 15 s obdržením sloučeniny podle nadpisu o teplotě tání 215 až 217 °C, iH MNR (DMS0-d₅) <5 10,28 (široký s, 1H), 9,80 (s, 1H), 7,52 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,12 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,91-6,80 (m, 5H), 6,78 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,27 (široký t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,43-3,34 (m, 4H), 2,97-2,91 (m, 2H), 1,78-1,61 (m, 5H), 1,36-1,29 (m, 1H).

Hmotnostní spektrometrie FD: 475.

Vypočítané množství pro €20 H29NO4S. 1,0 HC1 (%) : C

65,68, Η 5,90, Ν 2,73. Nalezené množství (Κ): 0 65,87, Η 5,79, Ν 2,99.

Příklady prostředků

V následujících prostředcích pojem účinná složka znamená sloučeninu obecného vzorce I nebo její sůl či solvát.

Příklad prostředku 1

Želatinové tobolky

Složka Množství (mg/tobolka)

Účinná složka 0,1 - 1000

Škrob, NF 0-650

Škrob, prášek schopný tečení 0 - 650

Kapalný silikon, 3,5.10^-4 m²s^-* (350 cSt) 0 - 15

Příklad prostředku 2

Tablety

Složka

Množství (mg/tableta)

Účinná složka

Mikrokrystalická celulóza Odkuřovaný oxid křemičitý Kyselina stearová

2,5 - 1000 200 - 650

- 650 5-15

Příklad prostředku 3

Tablety

Složka Množství (mg/tableta)

Účinná složka 25 - 1000

Škrob 45 Mikrokrystalická celulóza 35 Polyvinylpyrrolidon 4 (jako 10X roztok ve vodě)

Sodná sůl karboxymethylcelulózy 4,5 Stearat hořečnatý 0,5 Mastek 1 z

Účinná složka, škrob a celulóza se ponechají projít sítem 0,355 mm (45 mesh U.S.) a důkladně promíchají. Roztok polyvinylpyrrolidonu se smíchá s výslednými prášky a poté se ponechá projít sítem 1,4 mm (14 mesh U.S.) a pečlivě promísí. Obdržené granule se vysuší při teplotě 50 až 60 °C a ponechají se projít sítem 1,18 mm (18 mesh U.S.).

Sodná sůl karboxymethylškrobu, stearat hořečnatý a mastek, které prošly předtím sítem 0,25 mm (60 mesh U.S.) se přidají ke granulím, které se po míchání lisují na tabletovacím stroji s obdržením tablet.

/

Příklad prostředku 4

Suspenze • 4 44 k · · « k 4 4 * k 4 4 «

4* ··

Složka

Množství (mg/5 ml)

Účinná složka

Sodná sůl karboxymethylcelolózy Sirup

Roztok kyseliny benzoové

Příchuť

Barvivo

Čištěná yoda do

0,1- 1000 mg 50 mg

1,25 mg 0,10 ml dle přání dle přání 5 ml

Lék se ponechá projít sítem 0,355 mm (45 mesh U.S.) a smíchá se se sodnou solí karboxymethylcelolózy a sirupem s vytvořením hladké pasty. Roztok kyseliny benzoové, příchuť a barvivo se zředí malým množstvím vody a přidá se za míchání. Poté se přidá dostatečné množství vody pro získání požadovaného objemu.

Příklad prostředku 5

Aerosol

Složka (Množství hmotnostních %)

Účinná složka , 0,25 Ethanol 25,75 Hnací plyn 22 (Chlordifluormethan)' 70,00 ✓ _t

Účinná složka se smísí s ethanolem a směs se přidá k podílu hnací látky 22 ochlazené na 30 °C a přenese se do plnicího zařízení. Požadované množství se poté plní do

♦ ♦ ·· nádoby z nerezavějící oceli a zředí zbývající hnací látkou.

Poté se k nádobě připojí ventilová jednotka. Příklad prostředku 6 Čípky
Složka	Množství (mg/čípek)
Účinná složka Glyceridy nasycených mastných kyselin	250 2000
Účinná složka se ponechá projít sítem 0,25 mm (60 mešh U.S.) a suspenduje se v glyceridech nasycené mastné kyseliny, které se předtím roztaví s použitím minimálního nezbytného tepla. Směs se poté nalije do čípkové formy o nominálním obsahu 2 g a ponechá se ochladit.
Příklad prostředku 7
Injekční prostředky
Složka	Množství
Účinná složka Izotonický fyziologický roztok	50 mg 1000 ml

Roztok složek vyjmenovaných výše se podává intravenózně pacientovi při rychlosti zhruba 1 ml/min.

Claims (15)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Použití sloučeniny o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I

   I ve kterém

   1 o >

   R a R jsou nezávisle na sobě zvoleny z hydroxyskupiny a alkoxyskupiny o 1 až 4 atomech uhlíku a

   R³ a R⁴ jsou nezávisle na sobě zvleny z methylové skupiny » nebo ethylové skupiny nebo R³ a R⁴ dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, vytvářejí jako kruh pyrrolidino-, methylpyrrolidino-, dimethylpyrrolidino-, piperidino-, morfolino- nebo hexamethyleniminoskupinu, nebo její farmaceticky přijatelné soli či prekurzoru léčiva, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
2. 2. Použití sloučeniny podle nároku 1, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I pro výrobu léčiva k prevenci • · ···· ·· ··«« • · • · · · • · · • · ·

   99 ·*· ·· • · · · • · · ♦ • · 9 9 9 • · · 9 ·· ·· karcinomu prsu, pokud nebyla stanovena diagnóza karcinomu prsu, avšak existuje vysoké riziko tohoto onemocnění.
3. 3. Použití sloučeniny podle nároku 1, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I, ve kterém oba substituenty R¹ a R² jsou hydroxyskupiny a ostatní substituenty mají význam uvedený v nároku 1, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
4. 4. Použití sloučeniny podle nároku 1, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I, ve kterém R¹ je hydroxyskupina, R² je alkoxyskupina o 1 až 4 atomech uhlíku a ostatní substituenty mají význam uvedený v nároku 1, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
5. 5. Použití sloučeniny podle nároku 4, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I, ve kterém R² je methoxyskupina a ostatní substituenty mají význam uvedený v nároku 4, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
6. 6. Použití sloučeniny podle nároku 2, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I, ve kterém oba substituenty R¹ a R² jsou hydroxyskupiny a ostatní substituenty mají význam uvedený v nároku 2, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
7. 7. Použití sloučeniny podle nároku 2, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I, ve kterém R¹ je hydroxyskupina, R² je alkoxyskupina o 1 až 4 atomech uhlíku a ostatní substituenty mají význam uvedený v nároku 2, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
8. 8. Použití sloučeniny podle nároku 7, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I, ve kterém R² je methoxyskupina • 9 9
9. 9 9 9

   9 9

   999» 9 »9 9999

   9 9 • 999 • 9

   9 9 « * 9 9 • ··

   9 9 9 • 9 a ostatní substituenty mají význam uvedený v nároku 4, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.

   9. Použití sloučeniny podle nároku 1, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I, ve kterém substituenty R³ a R⁴ dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, jako kruh tvoří piperidinoskupinu a ostatní substituenty mají význam uvedený v nároku 1, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
10. 10. Použití sloučeniny podle nároku 2, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem I, ve kterém substituenty R³ a R⁴ dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, jako kruh tvoří piperidinoskupinu a ostatní substituenty mají význam uvedený v nároku 1, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.

    vyjádřené

    Použití sloučeniny podle nároku 1, o struktuře obecným vzorcem ve kterém • ·»···· ·· ·· • · ··« · · · · • e · · · 9 · · « · · « ···»·»· · ··· ·· · 9 · 9 9 9 9 · · · •··9 9 99 999 99 99

    R² je hydroxyskupina nebo methoxyskupina, nebo její farmaceuticky přijatelné soli či prekurzoru léčiva, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
11. 12. Použití sloučeniny podle nároku 2, o struktuře vyjádřené obecným vzorcem ve kterém o

    R je hydroxyskupina nebo methoxyskupina, nebo její farmaceuticky přijatelné soli či prekurzoru léčiva, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
12. 13. Použití sloučeniny podle nároku 11, kterou je 6-hydroxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinoethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofen nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
13. 14. Použití sloučeniny podle nároku 11, kterou je 6-hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinoethoxy)86

    9 9 9· 9 fenoxy]benzo[b]thiofen nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
14. 15. Použití sloučeniny podle nároku 12, kterou je 6-hydroxy-2-(4-methoxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinoethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofen nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.
15. 16. Použití sloučeniny podle nároku 12, kterou je 6-hydroxy-2-(4-hydroxyfenyl)-3-[4-(2-piperidinoethoxy)fenoxy]benzo[b]thiofen nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, pro výrobu léčiva k prevenci karcinomu prsu.