CZ308568B6 - Naftalimidofurany pro aplikace v molekulární biologii - Google Patents
Naftalimidofurany pro aplikace v molekulární biologii Download PDFInfo
- Publication number
- CZ308568B6 CZ308568B6 CZ2018-671A CZ2018671A CZ308568B6 CZ 308568 B6 CZ308568 B6 CZ 308568B6 CZ 2018671 A CZ2018671 A CZ 2018671A CZ 308568 B6 CZ308568 B6 CZ 308568B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- mmol
- lysoser
- naphthalimidofurans
- fluorescence
- fluorescent
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D491/06—Peri-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B57/00—Other synthetic dyes of known constitution
- C09B57/08—Naphthalimide dyes; Phthalimide dyes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
- C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
- C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
- C09K2211/1029—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
Řešením jsou naftalimidofurany obecného vzorce I, nesoucí vhodné funkční skupiny, a jejich použití pro přípravu prostředku k selektivnímu značení buněčných organel ve fluorescenční mikroskopii a jako fluorescenční sondy pro aplikace v molekulární biologii.
Description
Naftalimidofurany pro aplikace v molekulární biologii
Oblast techniky
Vynález se týká použití sloučenin založených na naftalimidofiiranech obecného vzorce I, nesoucí vhodné funkční skupiny. Tyto sloučeniny lze využít v oblasti selektivní intracelulámí lokalizace.
Dosavadní stav techniky
Spektroskopické metody založené na použití fluorescenčních sond jsou jednou z nej výkonnějších a nej důležitějších analytických technik. Tyto metody vynikají především jednoduchým instrumentálním uspořádáním, nízkou cenou, vysokou citlivostí a jejich poměrně snadnou použitelností pro in vitro a in vivo aplikace. [H. Kobayashi, M. Ogawa, R. Alford, P. L. Choyke and Y. Urano, New Strategies for Fluorescent Probe Design in Medical Diagnostic Imaging. Chem Rev, 2010, 110, 2620-2640] Použití fluorescenčních sond se významně podílí na studiu, porozumění a vysvětlení řady biochemických a biologických jevů a procesů. Kromě toho jsou vhodně konstruované fluorescenční sondy a biologické molekuly značené fluoroforem klíčovou částí molekulárních zobrazovacích technik používaných v moderních diagnostických metodách [H. Kobayashi, M. Ogawa, R. Alford, P. U. Choyke and Y. Urano, New Strategies for Fluorescent Probe Design in Medical Diagnostic Imaging. Chem Rev, 2010, 110, 2620-2640] a opticky řízených chirurgických operacích. [G. A. Sonn, A. S. Behesnilian, Z. K. Jiang, K. A. Zettlitz, E. J. Lepin, L. A. Bentolila, S. M. Knowles, D. Lawrence, A. M. Wu and R. E. Reiter, Fluorescent Image-Guided Surgery with an Anti-Prostate Stem Cell Antigen (PSCA) Diabody Enables Targeted Resection of Mouse Prostate Cancer Xenografts in Real Time. Clin Cancer Res, 2016, 22, 1403-1412] Příprava a studium nových fluorescenčních motivů a vývoj nových fluorescenčních sond jsou proto jedním z nej důležitějších témat analytické a bioanalytické chemie.
Existuje celá řada fluoroforů běžně používaných v biochemické a biologické oblasti. Deriváty naftalimidu jsou díky svým vynikajícím fotofýzikálním vlastnostem jedním z nejvíce studovaných fluorescenčních sond. Naftalimidové deriváty vykazují širokou škálu vhodných fluorescenčních vlastností, jako je vysoká fotostabilita, vysoký kvantový výtěžek fluorescence, velké posuny Stokesova pásu, fotochemická stabilita a snadná modifikace struktury. Naftalimidové deriváty se tak často využívají při konstrukci fluorescenčních senzorů [R. M. Duke, E. B. Veale, F. M. Pfeffer, P. E. Kruger and T. Gunnlaugsson, Colorimetric and fluorescent anion sensors: an overview of recent developments in the use of 1,8-naphthalimidebased chemosensors. Chem Soc Rev, 2010, 39, 3936-3953] a činidel k zobrazování buněčných částí. [S. Baneijee, E. B. Veale, C. M. Phelan, S. A. Murphy, G. M. Tocci, L. J. Gillespie, D. O. Frimannsson, J. M. Kelly and T. Gunnlaugsson, Recent advances in the development of 1,8naphthalimide based DNA targeting binders, anticancer and fluorescent cellular imaging agents. Chem Soc Rev, 2013, 42, 1601-1618], Dalšími často používanými a dlouhodobě studovanými fluorofory jsou kumarinové deriváty (benzopyranony). Spolu s poměrně snadnou syntézou a substituční variabilitou se kumariny používají jako fluorofory v oblasti fluorescenčních chemosenzorů [K. Zamojc, M. Zdrowowicz, D. Jacewicz, D. Wyrzykowski and L. Chmurzynski, Fluorescent and Luminescent Probes for Monitoring Hydroxyl Radical under Biological Conditions. Crit Rev Anal Chem, 2016, 46, 160-169] či fluorescenční barviva pro značení biomolekul nebo buněčné zobrazování. [Q. Zheng and L. D. Lavis, Development of photostable fluorophores for molecular imaging. Curr Opin Chem Biol, 2017, 39, 32-38; M. Tasior, D. Kim, S. Singha, M. Krzeszewski, K. H. Ahn and D. T. Gryko, pi-Expanded coumarins: synthesis, optical properties and applications. J. Mater. Chem. C, 2015, 3, 1421-1446], Jiný typ používaných fluoroforů je založen na benzofiiranovém skeletu. Podobně jako kumariny a naftalimidy mají benzo- a naftofurany vhodné fyzikálně-chemické vlastnosti. Tyto fluorofory se používají pro konstrukci solvatochromických barviv [M. Koh, W. S. Kim and M. Lee,
-1CZ 308568 B6
Exploration of a New Solvatochromic Dye Bearing the Excited-State Intramolecular Proton Transfer Functionality. Bull. Korean Chem. Soc., 2016, 37, 556-560] nebo fluorescenčních barviv pro biologické aplikace. [O. lamshanova, P. Mariot, V. Lehen'kyi and N. Prevarskaya, Comparison of fluorescence probes for intracellular sodium imaging in prostate cancer cell lines. Eur Biophys J, 2016, 45, 765-777; K. Nagy, E. Orban, S. Bosze and P. Kele, Clickable longwave mega-stokes fluorophores for orthogonal chemoselective labeling of cells. Chem Asian J, 2010, 5, 773-777; G. Galvani, K. H. Vardhan Reddy, C. Beauvineau, N. Ghermani, F. MahuteauBetzer, M. Alami and S. Messaoudi, Conversion of 3-Bromo-2H-coumarins to 3-(Benzofuran-2yl)-2H-coumarins under Palladium Catalysis: Synthesis and Photophysical Properties Study. Org. Lett., 2017, 19,910-913],
Ve vývoji nových fluoroforů pro konstrukci fluorescenčních sond se používají dva možné způsoby jejich konstrukce. První způsob zahrnuje přípravu látek se dvěma nebo více fluorofory v jedné molekule (hybridní molekuly, kde je každý fluorofor kovalentně nebo přes vhodnou spojku připojen k jinému). Druhou možností je příprava fluoroforu přikondenzováním jiného fluoroforu nebo další (hetero) aromatické části. Tyto prokonjugované fluorofory jsou označovány jako πexpandované fluorofory a jde tak o přípravu nového fluoroforového jádra, tudíž nové chemické entity.
Některé naftalimidopyranony (sloučeniny s pyranonovým kruhem) byly popsány jako sloučeniny pro barvení polyesterových vláken [Η. M. Deger, R. Erckel and H. Fruehbeis, Benzo[de]pyrano[3,2-g]isoquinoline derivatives useful as dyestuffs. Patent EP 65743 Bl, 1982], V tomto patentu je zmíněna příprava jednoho regioizomeru s kondenzovaným pyranonem Knoevenagelovou kondenzací 3-hydroxy-4-formyl-N-methylnaftalimidu s diethylmalonátem nebo 2-(heteroaryl)acetonitrilem, která poskytla sloučeniny s ethoxykarbonylovou nebo (hetero)aromatickou substitucí na pyranonovém kruhu.
Některé naftalimidofůrany (sloučeniny s furanovým kruhem) byly již publikovány jako interkalující DNA a protinádorová činidla [C. Bailly, C. Carrasco, A. Joubert, C. Bal, N. Wattez, Μ. P. Hildebrand, A. Lansiaux, P. Colson, C. Houssier, M. Cacho, A. Ramos and M. F. Brana, Chromophore-Modified Bisnaphthalimides: DNA Recognition, Topoisomerase Inhibition, and Cytotoxic Properties of Two Mono- and Bisfuronaphthalimides. Biochemistry, 2003, 42, 41364150; M. F. Brana, M. Cacho, M. A. Garcia, B. de Pascual-Teresa, A. Ramos, Μ. T. Dominguez, J. M. Pozuelo, C. Abradelo, M. F. Rey-Stolle, M. Yuste, M. Banez-Coronel and J. C. Lacal, New Analogues of Amonafide and Elinafide, Containing Aromatic Heterocycles: Synthesis, Antitumor Activity, Molecular Modeling, and DNA Binding Properties. J. Med. Chem., 2004, 47, 1391-1399; Z. F. Tao, X. Qian, J. Tang, Synthesis of Furonaphthalimides as Novel DNA Intercalates. Dyes Pigments, 1996, 30, 247-252; M. Fernandez Brana, A. Ramos Gonzalez, M. Cacho Izquierdo, S. Rajamaki, N. Acero de Mesa, J. M. Pozuelo Gonzalez, D. Munoz-Mingarro Martinez, Preparation of 1,8-naphthalimide derivatives for therapeutic use as antiproliferative/anticancer agents, Patent ES 2191532B1, 2003; A. D. Patten, G. J. Pacofsky, S. P. Seitz, E. A. Akamike, R. J. Chemey, R. F. Kaltenbach, M. J. Orwat, Preparation of bis-imide polycyclic and heterocyclic chromophores as tumoricidals. WO 9500490 Al, 1995 (uděleno uděleno na Taiwanu a JARu); X. Qian, H. Yin, Y. Xu, M. Xiao, J. Li, L.Lin, J. Ding, Preparation of naphthalimide derivatives for inhibiting growth of tumor cell and mutant cell. CN 100465177C, 2007], fotosenzitizátory [X. H. Qian, J. Tang, J. D. Zhang and Y. L. Zhang, Synthesis of Furonaphthalimides with Potential Photosensitizing Biological Activity. Dyes Pigments, 1994, 25, 109-114], látky pro studium fluorescenčních vlastností [X. Qian, Y. Zhang, K. Chen, Z. Tao, Y. Shen, A study on the relationship between Stoke's shift and low frequency half-value component of fluorescent compounds. Dyes Pigments, 1996, 32, 229-235] nebo chemiluminiscenční sonda pro singletový kyslík [W. Adam, X. H. Qian and C. R. Sahamoller, Synthesis and Photooxygenation of 2,3,6-Trimethylfůro[2,3-b][l]naphtho[4a,7a-e,f)pyrida-5,7dione, A Potential Chemiluminescent Probe for Singlet Oxygen. Tetrahedron, 1993, 49, 417422], Všechny výše uvedené publikace a patenty popisují pouze syntézu a deriváty bez jakýchkoliv skupin na naftalimidofůranu vhodných pro další syntetickou modifikaci, která je
-2CZ 308568 B6 naprosto klíčová pro jejich využití v molekulární biologii (připravené deriváty neměly furanový kruh substituovaný nebo nesly methylové skupiny).
Připravili jsme dva regioizomery naftalimidofuranu Rap-Stoermerovou reakcí naftalimid-ohydroxykarbaldehydů s ethylbromacetátem za přítomnosti báze. Vedle toho, pro porovnání vlastností, jsme připravili i dva regioizomery naftalimidopyranonu reakcí naftalimid-ohydroxykarbaldehydů s ethylmalonátem v přítomnosti piperidinu. Oba syntetické postupy vedou k derivátům nesoucím ethoxykarbonylovou skoupinu na novém kruhu, která je vhodná pro další syntetické modifikace.
Naftalimidofůrany s funkčními skupinami a jejich aplikace jako fluorescenční sondy jsou předmětem tohoto vynálezu.
Podstata vynálezu
Tyto fluorescenční sondy mají dvě funkční skupiny a skupiny vhodné pro další modifikaci: jeden na imidovém dusíku (Rl) a druhý na fůranovém kruhu (R2). Vhodné skupiny v těchto polohách mohou sloužit jako cílící skupiny pro specifickou a selektivní subcelulámí lokalizaci, reaktivní místo pro připojení k biomolekulám nebo jako modulátor rozpustnosti a lipofility.
Připravili jsme fluorescenční sondy pro lysosomální zobrazování nesoucí alkylovou skupinu na imidovém dusíku pro rychlý transport do buněk a s A'-(2-(dimcthylamino)cthyl)amidovc skupinou pro lysosomální zaměřování na pyranonovém nebo fůranovém kruhu.
Předmětem vynálezu jsou naftalimidofůrany obecného vzorce I, kde Ri je H, alkyl Cl až Cl2, allyl, propargyl, benzyl, glykolový řetězec s počtem 1 až 8 glykolových (-OCH2CH2-) opakujících se jednotek končící O-alkyl substituentem Cl až C12 nebo -OH skupinou, kde R2 je COORi, CON(Ri)2, kde oba substituenty Ri mohou být stejné nebo rozdílné, CONH(CH2)xN(Ri)2, kde x je 2 až 6 a kde oba substituenty Ri mohou být stejné nebo rozdílné, CONH(CH2)xNY, kde x má výše uvedený význam a Y je -CH2-A-CH2CH2-, kde A je CH2, CH2CH2, CH2O, CH2S, CH2SO, CH2SO2, CH2NH, CH2NR1, kde X = O, Z = CH; R2C a Z jsou spojeny dvojnou vazbou (R2C=Z) nebo kde X = CH, Z = O; R2C a X jsou spojeny dvojnou vazbou (R2C=X).
Látky obecného vzorce I mají fluorescenční vlastnosti; substituenty Ri a R2 jsou funkční skupiny zajišťující selektivní lokalizaci do buněčných organel, napomáhají rozpustnosti a ovlivňují lipofilitu, proto je možná jejich značná variabilita. Látky obecného vzorce I lze tak využít
-3CZ 308568 B6 v oblasti selektivní intracelulámí lokalizace jako fluorescenční sondy pro selektivní značení buněčných organel. Tyto látky jsou relativně snadno připravitelné, mají nízkou toxicitu a vykazují požadované vlastnosti pro to, aby našly uplatnění ve fluorescenční mikroskopii pro biologické studie jako fluorescenční sondy.
Příprava a vlastnosti naftalimidofuranů jsou doloženy následujícími příklady, aniž by jimi byly, jakkoliv omezeny.
Objasnění výkresů
Obrázek 1 znázorňuje fluorescenční spektra látek 2 (LysoSer 2), 4 (LysoSer 4), 6 (LysoSer 6), 8 (LysoSer 8) a 10 (LysoSer 10) ve čtyřech různých solventech (PBS pufr, ethanol, methanol, DMSO).
Obrázek 2 znázorňuje fluorescenční spektra látek 2, 4, 6 a 8 (LysoSer 16) ve čtyřech různých solventech (PBS pufr, ethanol, methanol, DMSO).
Obrázek 3 znázorňuje srovnání lokalizace látek 2, 4, 6, 8 (1 μΜ) a srovnání se specifickou lysosomální probou LysoTracker Green DND-26. (A) obrázek stejné části buněk ukazující fázový kontrast (vlevo) a celulámí fluorescenci (vpravo). (B) Lysosomální lokalizace látek 2, 4, 6 a 8. Látky byly inkubovány s komerční próbou pro specifické barvení lysosomů LysoTracker Green DND-26 (LT-G) na třech buněčných liniích (HF-P4, BLM, a A-2058). Snímky byly zachyceny pomocí konfokálního mikroskopu Leica TCS SP8 WLL SMD-FLIM s použitím čočky HC PL APO CS2 63x / 1.2W.
Obrázek 4 znázorňuje fluorescenci a intracelulámí lokalizaci látky 10 (50 nM (nahoře), 100 (uprostřed) a 200 nM (dole)) a srovnání se specifickou lysosomální probou LysoTracker Green DND-26. (A) obrázek stejné části buněk ukazující fázový kontrast (vlevo) a celulámí fluorescenci (vpravo). (B) Lysosomální lokalizace látky 10. Látka byla inkubována s komerční próbou pro specifické barvení lysosomů LysoTracker Green DND-26 (LT-G) na třech buněčných liniích (HF-P4, BLM, a A-2058). Snímky byly zachyceny pomocí konfokálního mikroskopu Leica TCS SP8 WLL SMD-FLIM s použitím čočky HC PL APO CS2 63x / 1,2 W.
Obrázek 5 znázorňuje fluorescenci a intracelulámí lokalizaci látky 12 (200 nM) se specifickou lysosomální probou LysoTracker Green DND-26. (A) obrázek stejné části buněk ukazující fázový kontrast (vlevo) a celulámí fluorescenci (vpravo). (B) Lysosomální lokalizace látky 12. Látka byla inkubována s komerční próbou pro specifické barvení lysosomů LysoTracker Green DND-26 (LT-G) na třech buněčných liniích (HF-P4, BLM, a A-2058). Snímky byly zachyceny pomocí konfokálního mikroskopu Leica TCS SP8 WLL SMD-FLIM s použitím čočky HC PL APO CS2 63x/l,2 W.
Obrázek 6 znázorňuje cytotoxicitu látek 2 (LysoSer 13), 4 (LysoSer 14), 6 (LysoSer 15) a 8 (LysoSer 16) na třech buněčných liniích.
Obrázek 7 znázorňuje photobleaching látky 10 (LysoSer 10) a LysoTracker Green DND-2
Příklady uskutečnění vynálezu
Příklad 1. Příprava naftalidopyranonu 1
-4CZ 308568 B6
2-Hexyl-5-hydroxy-l,3-dioxo-2,3-dihydro-lH-benzo[<7e]isochinolin-6-karbaldehyd (650 mg, 2,0 mmol) byl smísen s diethylmalonátem (0,4 ml, 420 mg, 2,6 mmol) a piperidinem (5 kapek) v ethanolu (15 ml). Reakční směs byla míchána za refluxu přes noc a poté odpařena do sucha. Produkt byl čištěn pomocí flash chromatografie (dichlormethan/methanol 97:3). Bylo získáno 620 mg (74 %) látky 1. Ή NMR (500 MHz, CDC13): 9,28 (IH, d, 0,8, H20), 8,67 (IH, dd, 7,3, 1,0, H10), 8,64 (IH, dd, 8,5, 1,0, H8), 8,52 (IH, d, 0,8, H4), 8,00 (IH, dd, 8,5, 7,3, H9), 4,50 (2H, q, 7,1, H24), 4,18 (2H, ~t, 7,7, H14), 1,73 (2H, ~kv, 7,7, H15), 1,47 (3H, t, 7,1, H25), 1,43 (2H, m, H16), 1,38-1,29 (4H, m, H17 a H18), 0,89 (3H, ~t, 7,2, H19). 13C NMR (126 MHz, CDCh): 163,40 (C12), 163,10 (C23), 162,58 (C2), 155,66 (C22), 155,34 (C5), 142,79 (C20), 130,83 (CIO), 129,80 (C9), 128,74 (C7), 128,19 (C3), 127,43 (C8), 125,23 (C13), 123,83 (Cil), 121,07 (C4), 120,61 (C21), 116,46 (C6), 62,79 (C24), 41,15 (C14), 31,64 (C17), 28,14 (C15), 26,90 (C16), 22,69 (C18), 14,41 (C25), 14,17 (C19). HRMS (ESI+): pro C^FUNiCkNai [M + Na]+ 444,14176; nalezeno 444,14185.
Příklad 2. Příprava naftalidopyranonu 2
Látka 1 (100 mg, 0,24 mmol) byla smí sena s 2M vodným roztokem hydroxidu sodného (5 ml) v ethanolu (5 ml) a reakční směs byla míchána za refluxu po dobu 2 h. Poté byla směs okyselena kyselinou octovou do slabě kyselého pH. Vzniklá pevná látka byla odfiltrována, promyta vodou a usušena za vakua. Bylo získáno 90 mg (96 %) odpovídající kyseliny; ta byla použita do dalšího reakčního kroku bez dalšího čištění. Kyselina (85 mg, 0,22 mmol) byla reagována s oxalylchloridem (3 ml; 2M v dichlormethanu) s N,JV-dimethylfbrmamidem (2 kapky) jako katalyzátorem v dichlormethanu (5 ml) při teplotě místnosti po dobu 2 h. Pak byla reakční směs odpařena do sucha a bylo získáno 89 mg (100%) odpovídajícího chloridu kyseliny. Chlorid kyseliny (89 mg, 0,22 mmol) byl reagován s A'.A'-dimcthylcthylcndiamincm (25 mg, 0,28 mmol) a triethylaminem (36 mg, 0,36 mmol) v dichlormethanu (5 ml) při teplotě místnosti přes noc. Reakční směs byla odpařena do sucha. Produkt byl čištěn pomocí flash chromatografie (dichlormethan/methanol 9:1). Bylo získáno 88 mg (88%, 84% celkový výtěžek) látky 2 (LysoSer 13). Ή NMR (500 MHz, CDCh): 9,61 (IH, s, H20), 9,19 (IH, brt, 5,9, NH), 8,73 (IH, dd, 8,4, 1,0, H8), 8,67 (IH, dd, 7,4, 1,0, H10), 8,51 (IH, d, 0,6, H4), 8,00 (IH, dd, 8,4, 7,4, H9), 4,17 (2H, ~t, 7,7, H14), 4,02 (2H, br q, 5,9, H24), 3,30 (2H, br s, H25), 2,89 (6H, br s, H26), 1,73 (2H, ~kv, 7,6, H15), 1,43 (2H, ~kv, 7,5, H16), 1,39-1,29 (4H, m, H17 a H18), 0,90 (3H, t, 7,1, H19). 13C APT NMR (126 MHz, CDCh): 163,33 (C12), 162,51 (C2 or C23), 162,45 (C2 or C23), 160,22 (C22), 154,46 (C5), 142,68 (C20), 131,06 (CIO), 129,91 (C9), 128,82 (C7), 128,14
-5 CZ 308568 B6 (C3), 127,93 (C8), 125,35 (C13), 123,71 (Cl 1), 120,75 (C4), 120,33 (C21), 117,28 (C6), 56,89 (C25), 43,88 (C26), 41,16 (C14), 35,51 (br, C24), 31,64 (C17), 28,13 (C15), 26,90 (C16), 22,70 (C18), 14,18 (C19). HRMS (ESC): pro C26H30N3O5 [M + H]+ 464,21800; nalezeno 464,21829.
Příklad 3. Příprava naftalidopyranonu 3
2-Hexyl-6-hydroxy-l,3-dioxo-2,3-dihydro-lH-benzo[de]isochinolin-5-karbaldehyd (650 mg, 2,0 mmol) byl smisen s diethyl malonátem (0,4 ml, 420 mg, 2,6 mmol) a piperidinem (5 kapek) v ethanolu (15 ml). Reakční směs byla míchána za refluxu přes noc a poté odpařena do sucha. Produkt byl čištěn pomocí flash chromatografíe (dichlormethan/methanol 97:3). Bylo získáno 590 mg (70 %) látky 3. Ή NMR (500 MHz, CDCI3): 8,87 (1H, dd, 8,4, 1,2, H8), 8,77 (1H, dd, 7,4, 1,2, H10), 8,76 (1H, s, H20), 8,71 (1H, s, H4), 7,94 (1H, dd, 8,4, 7,4, H9), 4,47 (2H, q, 7,2, H24), 4,17 (2H, ~t, 7,7, H14), 1,73 (2H, m, H15), 1,45 (3H, t, 7,2, H25), 1,45-1,30 (6H, m, H16, H17 a H18), 0,89 (3H, ~t, 7,1, H19). 13C NMR (126 MHz, CDCh): 163,56 (C12), 162,90 (C2), 162,54 (C23), 156,44 (C6), 155,35 (C22), 148,78 (C20), 134,18 (CIO), 130,89 (C4), 130,45 (C13), 129,12 (C8), 128,57 (C9), 123,26 (Cil), 121,31 (C7), 119,87 (C3), 119,08 (C21), 114,26 (C5), 62,55 (C24), 40,92 (C14), 31,66 (C17), 28,18 (C15), 26,91 (C16), 22,70 (C18), 14,38 (C25), 14,18 (C19). HRMS (ESE): pro C^FKNiCkNai [M + Na]+ 444,14176; nalezeno 444,14184.
Příklad 4. Příprava naftalidopyranonu 4
Látka 3 (130 mg, 0,30 mmol) byla smísena s 2M vodným roztokem hydroxidu sodného (5 ml) v ethanolu (5 ml) a reakční směs byla míchána za refluxu po dobu 2 h. Poté byla směs okyselena kyselinou octovou do slabě kyselého pH. Vzniklá pevná látka byla odfiltrována, promyta vodou a usušena za vakua. Bylo získáno 115 mg (95 %) odpovídající kyseliny; ta byla použita do dalšího reakčního kroku bez dalšího čištění. Kyselina (110 mg, 0,28 mmol) byla reagována s oxalylchloridem (3 ml; 2M v dichlormethanu) s W-dimcthylformamidcm (2 kapky) jako katalyzátorem v dichlormethanu (5 ml) při teplotě místnosti po dobu 2 h. Pak byla reakční směs odpařena do sucha a bylo získáno 115 mg (100 %) odpovídajícího chloridu kyseliny. Chlorid kyseliny (115 mg, 0,28 mmol) byl reagován s W-dimcthylcthylcndiamincm (27 mg, 0,31 mmol) a triethylaminem (40 mg, 0,40 mmol) v dichlormethanu (5 ml) při teplotě místnosti přes noc. Reakční směs byla odpařena do sucha. Produkt byl čištěn pomocí flash chromatografíe (dichlormethan/methanol 9:1). Bylo získáno 110 mg (85%, 81% celkový výtěžek) látky 4 (LysoSer 14). Ή NMR (500 MHz, CDCh): 9,11 (1H, d, 0,4, H20), 8,93 (1H, brt, 5,3, NH), 8,84
-6CZ 308568 B6 (1H, dd, 8,4, 1,2, H8), 8,77 (1H, dd, 0,4, 0,3, H4), 8,76 (1H, dd, 7,4, 1,2, H10), 7,94 (1H, ddd, 8,4, 7,4, 0,3, H9), 4,18 (2H, ~t, 7,7, H14), 3,69 (2H, q, 5,9, H24), 2,72 (2H, brt, 6,5, H25), 2,44 (6H, s, H26), 1,73 (2H, ~kv, 7,6, H15), 1,43 (2H, ~kv, 7,5, H16), 1,38-1,27 (2H, m, H17 aH18), 0,89 (3H, t, 7,2, H19). 13C NMR (126 MHz, CDC13): 163,52 (C12), 162,83 (C2), 161,18 (C23), 160,06 (C22), 155,28 (C6), 148,38 (C20), 133,99 (CIO), 131,14 (C4), 130,26 (C13), 128,77 (C8), 128,62 (C9), 123,31 (CH), 121,21 (C7), 120,24 (C3), 119,65 (C21), 115,18 (C5), 57,75 (C25), 45,15 (C26), 40,94 (C14), 37,51 (C24), 31,66 (C17), 28,17 (C15), 26,90 (C16), 22,69 (C18), 14,18 (C19). HRMS (EST): pro C26H30N3O5 [M + H]+ 464,21800; nalezeno 464,21837
Příklad 5. Příprava naftalidofuranu 5, spadajícího pod obecný vzorec I.
2-Hexyl-5-hydroxy-l,3-dioxo-2,3-dihydro-lH-benzo[<7e]isochinolin-6-karbaldehyd (650 mg, 2,0 mmol) byl smísen s ethyl bromacetátem (0,3 ml, 453 mg, 2,7 mmol) a uhličitanem draselným (830 mg, 6,0 mmol) v acetonitrilu (15 ml). Reakční směs byla míchána za refluxu 2 dny a poté odpařena do sucha. Produkt byl čištěn pomocí flash chromatografíe (dichlormethan). Bylo získáno 450 mg (57 %) látky 5. 'HNMR (500 MHz, CDC13): 8,83 (1H, d, 1,0, H4), 8,65 (1H, dd, 7,4, 1,2, H10), 8,49 (1H, dd, 8,2, 1,2, H8), 8,07 (1H, d, 1,0, H20), 7,90 (1H, dd, 8,2, 7,4, H9), 4,53 (2H, q, 7,1, H23), 4,20 (2H, ~t, 7,7, H14), 1,75 (2H, ~kv, 7,6, H15), 1,49 (3H, t, 7,1, H24), 1,44 (2H, ~kv, 7,5, H16), 1,36 (2H, m, H17), 1,35 (2H, m, H18), 0,90 (3H, t, 7,1, H19). 13C NMR (126 MHz, CDC13): 164,10 (C12), 163,88 (C2), 158,88 (C22), 153,43 (C5), 148,82 (C21), 130,06 (CIO), 129,34 (C8), 128,14 (C9), 128,07 (C6), 126,71 (C7), 125,71 (C13), 123,83 (Cil), 122,92 (C3), 117,97 (C4), 112,27 (C20), 62,30 (C23), 41,00 (C14), 31,70 (C17), 28,22 (C15), 26,96 (C16), 22,72 (C18), 14,49 (C24), 14,20 (C19). HRMS (EST): pro C23H24NiO5 [M + H]+ 394,16490; nalezeno 394,16513.
Příklad 6. Příprava naftalidofuranu 6, spadajícího pod obecný vzorec I.
Látka 5 (118 mg, 0,3 mmol) byla smí sena s Λζ/V-dimethylethylendiaminem (1 ml) v ethanolu (10 ml). Reakční směs byla míchána za refluxu přes noc a poté odpařena do sucha. Produkt byl čištěn pomocí flash chromatografíe (dichlormethan/methanol 9:1). Bylo získáno 112 mg (86 %) látky 6 (LysoSer 15). ‘HNMR (500 MHz, CD3SOCD3): 8,86 (1H, dd, 8,2, 1,2, H8), 8,85 (1H, br t, 5,8, NH), 8,67 (1H, d, 1,0, H4), 8,53 (1H, dd, 7,4, 1,2, H10), 8,39 (1H, d, 1,0, H20), 8,00 (1H, ddd, 8,2, 7,4, 0,3, H9), 4,06 (1H, ~t, 7,5, H14), 3,45 (2H, td, 6,7, 5,8, H23), 2,47 (2H, překryto, H24), 2,24 (6H, s, H25), 1,65 (1H, ~kv, 7,4, H15), 1,36 (2H, m, H16), 1,35-1,26 (4H, m, H17 a H18), 0,87 (3H, ~t, 7,1, H19). 13C NMR (126 MHz, CD3SOCD3): 163,30 (C12), 163,12 (C2),
157,37 (C22), 152,23 (C21), 151,45 (C5), 130,26 (C8), 129,37 (CIO), 128,56 (C6), 128,08 (C9), 126,13 (C7), 124,78 (C13), 122,81 (Cll), 121,14 (C3), 116,58 (C4), 109,13 (C20), 57,84 (C24), 45,07 (C25), 39,94 (C14), 36,86 (C23), 30,93 (C17), 27,39 (C15), 26,17 (C16), 21,94 (C18), 13,89 (C19). HRMS (ESI+): pro C25H30N3O4 [M + H]+ 436,22308; nalezeno 436,22327.
Příklad 7. Příprava naftalidofiiranu 7, spadajícího pod obecný vzorec I
2-hexyl-6-hydroxy-1,3-dioxo-2,3-dihydro-1 //-benzo[de]isochinolin-5-karbaldehyd (650 mg,
2,0 mmol) byl smisen s ethyl bromacetátem (0,3 ml, 453 mg, 2,7 mmol) a uhličitanem draselným (830 mg, 6,0 mmol) v acetonitrilu (15 ml). Reakční směs byla míchána za refluxu 2 dny a poté odpařena do sucha. Produkt byl čištěn pomocí flash chromatografíe (dichlormethan). Bylo získáno 320 mg (41 %) látky 7. Ή NMR (500 MHz, CDCI3): 8,87 (1H, s, H4), 8,76 (1H, dd, 8,2, 1,2, H8), 8,66 (1H, dd, 7,4, 1,2, H10), 7,89 (1H, ddd, 8,2, 7,4, 0,3 to H4, H9), 7,78 (1H, s, H20), 4,50 (2H, q, 7,1, H23), 4,18 (2H, ~t, 7,7, H14), 1,74 (2H, ~kv, 7,7, H15), 1,47 (3H, t, 7,1, H24), 1,44 (2H, ~kv, 7,4, H16), 1,38-1,29 (4H, m, H17 a H18), 0,89 (3H, ~t, 7,2, H19). 13C NMR (126 MHz, CDCI3): 164,18 (C12), 163,95 (C2), 158,89 (C22), 154,59 (C6), 147,25 (C21), 131,08 (CIO), 127,82 (C9), 127,78 (C13), 127,47 (C4), 126,99 (C8), 123,86 (C5), 123,51 (Cll), 119,92 (C3), 119,54 (C7), 115,21 (C20), 62,07 (C23), 40,86 (C14), 31,70 (C17), 28,22 (C15), 26,95 (C16), 22,71 (C18), 14,49 (C19), 14,19 (C24). HRMS (ESE): pro C23H24N1O5 [M + H]+ 394,16490; nalezeno 394,16459.
Příklad 8. Příprava naftalidofuranu 8, spadajícího pod obecný vzorec I.
Látka 7 (118 mg, 0,3 mmol) byla smísena s Λ'.Λ'-dimcthylcthylcndiamincm (1 ml) v ethanolu (10 ml). Reakční směs byla míchána za refluxu přes noc a poté odpařena do sucha. Produkt byl čištěn pomocí flash chromatografíe (dichlormethan/methanol 9:1). Bylo získáno 108 mg (83 %) látky 8 (LysoSer 16). Ή NMR (500 MHz, CD3SOCD3): 8,88 (1H, br t, 5,7, NH), 8,86 (1H, s, H4), 8,77 (1H, dd, 8,2, 1,2, H8), 8,53 (1H, dd, 7,4, 1,2, H10), 8,02 (1H, dd, 8,2, 7,4, H9), 7,86 (1H, s, H20), 4,04 (2H, ~t, 7,5, H14), 3,46 (2H, td, 6,7, 5,7, H23), 2,52 (2H, t, 6,7, H24), 2,25 (6H, s, H25), 1,63 (2H, ~kv, 7,4, H15), 1,35 (2H, m, H16), 1,36-1,25 (4H, m, H17 a H18), 0,86 (3H, ~t, 7,1, H19). 13C NMR (126 MHz, CD3SOCD3): 163,35 (C2), 163,10 (C12), 157,40 (C), 152,50 (C6), 150,26 (C21), 130,03 (CIO), 127,97 (C9), 127,31 (C4), 126,45 (C13), 126,35 (C8), 124,11 (C5), 122,79 (Cll), 118,76 (C3), 118,63 (C7), 111,08 (C20), 58,01 (C24), 45,09 (C25), 39,80 (C14), 36,82 (C23), 30,94 (C17), 27,41 (C15), 26,17 (C16), 21,96 (C18), 13,89 (C19). HRMS (ESC): pro C25H30N3O4 [M + H]+ 436,22308; nalezeno 436,22343.
-8CZ 308568 B6
Příklad 9. Příprava naftalidofuranu 9, spadajícího pod obecný vzorec I.
Látka 9 byla připravena postupem uvedeným v příkladu 5, s tím, že jako výchozí látka byl použit 2-methyl-5-hydroxy-1,3-dioxo-2,3-dihydro-lH-benzo[<7e]isochinolin-6-karbaldehyd (510 mg, 2,0 mmol). Bylo získáno 330 mg (51 %) látky 9.
Příklad 10. Příprava naftalidofuranu 10, spadajícího pod obecný vzorec I.
Látka 10 byla připravena postupem uvedeným v příkladu 6, stím, že jako výchozí látka byla použita látka 9 (65 mg, 0,2 mmol). Bylo získáno 65 mg (88 %) látky 10.
Příklad 11. Příprava naftalidofuranu 11, spadajícího pod obecný vzorec I.
Látka 11 byla připravena postupem uvedeným v příkladu 7, s tím, že jako výchozí látka byl použit 2-methyl-6-hydroxy-l,3-dioxo-2,3-dihydro-lH-benzo[<7e]isochinolin-5-karbaldehyd (510 mg, 2 mmol). Bylo získáno 300 mg (46 %) látky 11.
Příklad 12. Příprava naftalidofuranu 12, spadajícího pod obecný vzorec I.
Látka 12 byla připravena postupem uvedeným v příkladu 8, s tím, že jako výchozí látka byla použita látka 11 (65 mg, 0,2 mmol). Bylo získáno 60 mg (82 %) látky 11.
-9CZ 308568 B6
Příklad 13. Spektrální vlastnosti látek 2, 4, 6, 8 a 10
Spektrální charakteristiky připravených látek 2, 4, 6, 8 a 10 byly získány za použití UV / VIS a fluorescenčních studií. Látky byly měřeny ve čtyřech různých rozpouštědlech (DMSO, methanol, ethanol a fosfátový pufir). Látky byly rozpuštěny v DMSO a zásobní roztok byl zředěn na konečnou koncentraci 1 μΜ nebo 0,1 μΜ. Naměřená spektra a výsledné hodnoty absorpčního maxima a emisí jsou shrnuty v tabulce 1 a na obrázku 1 a 2. Všechny připravené látky mají absorpční maximum v oblasti ultrafialového záření 350 až 400 nm a maximální emise v oblasti od 400 do 450 nm. Látky 6 (LysoSer 6), 8 (LysoSer 8) a 10 (Lysoser 10) s furanovým motivem vykazovaly vyšší fluorescenční intenzity než látky 2 (LysoSer 2) a 4 (LysoSer 4) s pyranonovým motivem.
Tabulka 1. Absorpční a emisní maxima látek 2, 4, 6, 8 a 10 v různých rozpouštědlech
| Látka | Rozpouštědlo | Absorbční maximum (nm) | Emisní maximum (nm) |
| 2 | DMSO | 379 | 440 |
| EtOH | 388 | 448 | |
| MeOH | 387 | 442 | |
| PBS | 389 | 448 | |
| 4 | DMSO | 368 | 432 |
| EtOH | 319 | 434 | |
| MeOH | 317 | 435 | |
| PBS | 320 | 437 | |
| 6 | DMSO | 373 | 424 |
| EtOH | 376 | 422 | |
| MeOH | 373 | 421 | |
| PBS | 373 | 429 | |
| 8 | DMSO | 368 | 416 |
| EtOH | 341 | 415 | |
| MeOH | 341 | 416 | |
| PBS | 360 | 428 | |
| 10 | DMSO | 377 | 435 |
| EtOH | 365 | 410 | |
| MeOH | 372 | 420 | |
| PBS | 377 | 431 |
Příklad 14. Intracelulámí studie látek 2, 4, 6, 8, 10 a 12
Intracelulámí lokalizace látek 2, 4, 6, 8, 10 a 12 v živých buňkách byla studována na konfokálním mikroskopu Leica TCS SP8 WLL SMD-FLIM (vybavený impulzním laserem o délce 405 nm) při 37 °C za použití čočky HC PL APO CS2 63x / 1,2 W. Schopnost účinnosti látek 2, 4, 6, 8, 10 a 12 vstoupit a eventuálně zabarvit specifické intracelulámí kompartmenty (lysosomy) byla testována s použitím tří různých buněčných linií (lidské fibroblastové buňky HFP4 a dvě melanomové buněčné linie A-2058 a BLM). Jako ko-lokalizační látka byl použit komerčně dostupný LysoTracker Green DND-26. Buňky byly současně barveny látkami 2, 4, 6, 8 (1 pM), látkou 10 (200 nM, 100 nM a 50 nM), látkou 12 (200 nM) a LysoTracker Green DND26 (200 nM) po dobu 30 minut za růstových podmínek a snímky byly zachyceny konfokálním mikroskopem. Měření potvrdila, že látky 2, 4, 6, 8, 10 a 12 zabarvují lysozomální kompartment podobně jako LysoTracker Green DND-26 (obrázek 3 až 5). Látky 2, 4, 6, 8, 10 a 12 poskytly modrou intenzivní fluorescenci. Podle pořízených snímků lze usoudit, že nej vyšší intenzita fluorescence (při zachování selektivity) byla dosažena pomocí látek 6 (LysoSer 6), 8 (LysoSer 8), 10 (LysoSer 10) a 12 (LysoSer 10) s furanovým motivem.
- 10CZ 308568 B6
Příklad 15. Cytotoxicita látek 2, 4, 6 a 8
Pro test cytotoxicity látek 2, 4, 6 a 8 byl použit kolorimetrický test buněčné metabolické aktivity. Buňky (HF-P4, BLM a A-2058) kultivovány za standardních podmínek v kultivačním médiu (DMEM s 10% FBS). Po 24 hodinách kultivace byly buňky umístěny na 96-jamkové destičky při hustotě 5000 buněk na jamku. Buňky byly uchovávány za standardních podmínek kultury dalších 24 hodin. Po uplynutí této doby bylo médium odstraněno a bylo přidáno médium testovanými sloučeninami a kultivováno po dobu 48 hodin. Poté se médium vyměnilo tetrazoliovým barvivém MTT a inkubovalo se 2 hodiny (37 °C). Po dvouhodinové inkubaci bylo žluté tetrazolové barvivo odstraněno a byl přidán DMSO, který se redukoval na fialový formazan v živých buňkách. Toto bylo následováno zkouškou s čtečkou NanoQuant mikrotitrační destičky od firmy Tecan. Absorbance převedeného barviva byla měřena při vlnové délce 570 nm s referencí 630 nm.
Na základě testů proliferace MTT a cytotoxicity byla stanovena hodnota IC50 (koncentrace inhibující růst buněk). Měření cytotoxicity látek 2, 4, 6 a 8 v různých koncentracích (0 až 10 μΜ) ukázala, že látky nevykazují téměř žádnou toxicitu nebo nízkou toxicitu (obrázek 6). Tyto koncentrace jsou o jeden až dva řády vyšší než koncentrace používané pro měření jejich intracelulámí lokalizace.
Průmyslová využitelnost
Naftalimidofurany jsou využitelné jako prostředek pro fluorescenční mikroskopii. Jejich využití spočívá vtom, že je lze použít jako fluorescenční sondy pro selektivní značení buněčných organel.
Claims (3)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Naftalimidofůrany obecného vzorce I,(I), kde Ri je H, alkyl Cl až Cl2, allyl, propargyl, benzyl, glykolový řetězec s počtem 1 až 8 glykolových (-OCH2CH2-) opakujících se jednotek končící O-alkyl substituentem Cl až C12 nebo -OH skupinou, kde R2 je COORi, CON(Ri)2, kde oba substituenty Ri mohou být stejné nebo rozdílné, CONH(CH2)xN(Ri)2, kde x je 2 až 6 a kde oba substituenty Ri mohou být stejné nebo rozdílné, CONH(CH2)xNY, kde x má výše uvedený význam a Y je -CH2-A-CH2CH2-, kde A je CH2, CH2CH2, CH2O, CH2S, CH2SO, CH2SO2, CH2NH, CH2NR1, kde X = O, Z = CH; R2C a Z jsou spojeny dvojnou vazbou (R2C=Z) nebo kde X = CH, Z = O; R2C a X jsou spojeny dvojnou vazbou (R2C=X).
- 2. Použití naftalimidofiiranů obecného vzorce I podle nároku 1, pro přípravu prostředku k selektivnímu značení buněčných organel ve fluorescenční mikroskopii.
- 3. Použití naftalimidofiiranů obecného vzorce I podle nároku 1, jako fluorescenčních sond pro aplikace v molekulární biologii.
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2018-671A CZ308568B6 (cs) | 2018-12-03 | 2018-12-03 | Naftalimidofurany pro aplikace v molekulární biologii |
| EP19817943.4A EP3891153B1 (en) | 2018-12-03 | 2019-12-03 | Naphthalimidofurans for applications in molecular biology |
| PCT/CZ2019/050060 WO2020114531A1 (en) | 2018-12-03 | 2019-12-03 | Naphthalimidofurans for applications in molecular biology |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2018-671A CZ308568B6 (cs) | 2018-12-03 | 2018-12-03 | Naftalimidofurany pro aplikace v molekulární biologii |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2018671A3 CZ2018671A3 (cs) | 2020-06-10 |
| CZ308568B6 true CZ308568B6 (cs) | 2020-12-09 |
Family
ID=68847906
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2018-671A CZ308568B6 (cs) | 2018-12-03 | 2018-12-03 | Naftalimidofurany pro aplikace v molekulární biologii |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP3891153B1 (cs) |
| CZ (1) | CZ308568B6 (cs) |
| WO (1) | WO2020114531A1 (cs) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4578469A (en) * | 1981-05-22 | 1986-03-25 | Hoechst Aktiengesellschaft | Benzo[de]pyrano[3,2-g]isoquinoline derivatives useful as dyestuffs |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5416089A (en) | 1993-06-24 | 1995-05-16 | The Du Pont Merck Pharmaceutical Company | Polycyclic and heterocyclic chromophores for bis-imide tumoricidals |
| ES2191532B1 (es) | 2001-05-28 | 2005-02-16 | Fundacion Universitaria San Pablo - Ceu | Derivados de naftalimidas heterociclicas como agentes antiproliferativos. |
| CN100465177C (zh) | 2006-08-16 | 2009-03-04 | 华东理工大学 | 氧、氮杂环并萘酰亚胺类化合物及其生物应用 |
-
2018
- 2018-12-03 CZ CZ2018-671A patent/CZ308568B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2019
- 2019-12-03 EP EP19817943.4A patent/EP3891153B1/en active Active
- 2019-12-03 WO PCT/CZ2019/050060 patent/WO2020114531A1/en not_active Ceased
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4578469A (en) * | 1981-05-22 | 1986-03-25 | Hoechst Aktiengesellschaft | Benzo[de]pyrano[3,2-g]isoquinoline derivatives useful as dyestuffs |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Choi, Seon-Ae, et al. "Structural effects of naphthalimide-based fluorescent sensor for hydrogen sulfide and imaging in live zebrafish." Scientific reports 6 (2016): 26203 * |
| Feng, Wei, et al. "A 1, 8-naphthalimide-derived turn-on fluorescent probe for imaging lysosomal nitric oxide in living cells." Chinese Chemical Letters 27.9 (2016): 1554-1558; ISSN: 1001-8417 * |
| Liu, Tianyu, et al. "Quantitatively mapping cellular viscosity with detailed organelle information via a designed PET fluorescent probe." Scientific reports 4 (2014): 5418; ISSN: 2045-2322 * |
| Sun, Yue, et al. "A 4-hydroxynaphthalimide-derived ratiometric fluorescent probe for hydrazine and its in vivo applications." Sensors and Actuators B: Chemical 208 (2015): 512-517; ISSN: 0925-4005 * |
| Zhang, Weijie, et al. "Ratiometric fluorescence probe for hydrazine vapor detection and biological imaging." Journal of Materials Chemistry B 6.48 (2018): 8085-8089; ISSN: 2050-7518 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP3891153B1 (en) | 2024-01-31 |
| CZ2018671A3 (cs) | 2020-06-10 |
| EP3891153A1 (en) | 2021-10-13 |
| WO2020114531A1 (en) | 2020-06-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhang et al. | Near-infrared fluorescent probes based on piperazine-functionalized BODIPY dyes for sensitive detection of lysosomal pH | |
| Gao et al. | A fluorescent dye with large Stokes shift and high stability: synthesis and application to live cell imaging | |
| Zhang et al. | A ratiometric lysosomal pH probe based on the coumarin–rhodamine FRET system | |
| Vegesna et al. | pH-activatable near-infrared fluorescent probes for detection of lysosomal pH inside living cells | |
| Kim et al. | Far-red/near-infrared emitting, two-photon absorbing, and bio-stable amino-Si-pyronin dyes | |
| Wang et al. | A six-membered-ring incorporated Si-rhodamine for imaging of copper (ii) in lysosomes | |
| Wang et al. | Rational design of novel near-infrared fluorescent DCM derivatives and their application in bioimaging | |
| CN107098923A (zh) | 一类红光与近红外发射溶酶体靶向荧光染料及其制备方法与用途 | |
| Plater et al. | The synthesis and evaluation of o-phenylenediamine derivatives as fluorescent probes for nitric oxide detection | |
| Zhao et al. | Maximizing the thiol-activated photodynamic and fluorescence imaging functionalities of theranostic reagents by modularization of BODIPY-based dyad triplet photosensitizers | |
| Gong et al. | A near-infrared fluorescent probe based on a novel rectilinearly π-extended rhodamine derivative and its applications | |
| CN108504130B (zh) | 一种花菁类荧光染料及其合成方法 | |
| Zhu et al. | Near-infrared cyanine-based sensor for Fe 3+ with high sensitivity: its intracellular imaging application in colorectal cancer cells | |
| CN105367566B (zh) | 取代的香豆素-噻唑橙衍生物及其制备方法和用途 | |
| Zhang et al. | A series of novel NIR fluorescent dyes: Synthesis, theoretical calculations and fluorescence imaging applications in living cells | |
| Qiu et al. | Amino-substituted C-coumarins: Synthesis, spectral characterizations and their applications in cell imaging | |
| CN108864058A (zh) | 一类氧杂蒽酮类荧光染料及应用 | |
| Havlík et al. | Versatile fluorophores for bioimaging applications: π-expanded naphthalimide derivatives with skeletal and appendage diversity | |
| US20040054195A1 (en) | Xanthene derivatives | |
| Beč et al. | Synthesis and spectroscopic characterization of multifunctional D-π-A benzimidazole derivatives as potential pH sensors | |
| EP4103652A1 (en) | Fluorescent rhodamine dyes with enhanced cell permeability | |
| CN112010838B (zh) | 一种基于萘酰亚胺-吲哚衍生物的细胞内质网荧光探针及其应用 | |
| CN104327537A (zh) | 一种具有生物膜透性潜能的氧杂蒽类荧光染料及其制备方法 | |
| Li et al. | Deep-red to near-infrared fluorescent dyes: Synthesis, photophysical properties, and application in cell imaging | |
| WO2002055512A1 (en) | Xanthene derivatives |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20241203 |