CZ308029B6

CZ308029B6 - 2,6-Disubstituované-9-cyklopentyl-9H-puriny, jejich použití jako léčiva a farmaceutické přípravky

Info

Publication number: CZ308029B6
Application number: CZ2017-157A
Authority: CZ
Inventors: Tomáš Gucký; Eva Řezníčková; Radek JORDA; Vladimír Divoký; Vladimír KRYŠtof; Tereza Radošová Muchová; Miroslav Strnad
Original assignee: Univerzita PalackĂ©ho v Olomouci
Priority date: 2017-03-20
Filing date: 2017-03-20
Publication date: 2019-11-06
Also published as: EP3601287B1; US20200087306A1; CZ2017157A3; US11028087B2; WO2018171819A1; EP3601287A1

Abstract

Řešení se týká 2,6-disubstituovaných-9-cyklopentyl-9H-purinů vzorce I vykazujících inhibiční aktivitu pro kinázy jakými jsou FLT3, CDK a PDGFR. Řešení dále zahrnuje farmaceutické přípravky obsahující tyto sloučeniny a jejich použití k léčení řady onkologických onemocnění, s výhodou akutní myeloidní leukemie AML.

Description

Tento vynález se týká nových 2,6-disubstituovaných-9-cyklopentyl-9H-purinů vykazujících inhibiční aktivitu pro kinázu FLT3 a PDGFR. Tyto sloučeniny a přípravky mohou být použity k léčbě akutní myeloidní leukemie (AML).

Dosavadní stav techniky

Akutní myeloidní leukemie (AML) je onkologické onemocnění charakterizované nekontrolovaným množením myeloidních hematopoetických progenitorových buněk v kostní dřeni. AML tvoří přibližně 30 % leukémií a její výskyt narůstá s věkem, přičemž jen 5-10 % pacientů s AML starších 60 let dosáhne dlouhodobého přežití (Schiffer, N Engl J Med. 2003; 349: 727-729). Pro mladší pacienty je pravděpodobnost přežití až 5x vyšší. Vývoj účinné a bezpečné léčby pro AML je proto nezbytný. Současná terapie AML je založena na klasických cytotoxických preparátech (např. cytarabin, fludarabin, daunorubicin, topotecan), jejichž účinnost není příliš vysoká. Nedávné poznatky molekulární biologie a sekvencování DNA přispěly k pochopení biologie AML a vedly k objevu řady genů s ní souvisejících (Rahman, Nature. 2014; 505: 302-308). Nejběžnější mutace v AML se nachází v genu FLT3, který kóduje membránovou receptorovou tyrosinkinázu blízce příbuznou KIT, FMS a PDGFR (Carow et al, Cytogen Cell Gen. 1995; 70: 255-257). Po vazbě extracelulámího ligandu dochází kdimerizaci receptoru FLT3, jeho autofosforylaci a aktivaci podřízených signálních drah včetně RAS/MAPK, JAK/STAT5 a PI3K/AKT. Tato signalizace stimuluje růst buněk a jejich proliferaci, přežívání a diferenciaci. Mutace FLT3 se vyskytují přibližně u 30 % pacientů s AML a úzce souvisí s negativní prognózou (Gilliland and Griffin; Blood. 2002; 100: 1532-1542). Méně běžně se u pacientů vyskytuje onkogenní forma receptorové kinázy FIP1L1-PDGFRA, vzniklá translokací a fůzí (Metzgeroth et al.; Leukemia. 2007; 21: 1183-8). Onkogenní aktivace PDGFR je popisována také u gliomů a sarkomů (Kumabe et al., Oncogene, 1992; 7: 627-633; Ostman and Heldin, Cancer Res. 2001; 80: 1-38), chronické myelomonocytámí leukemie (Magnusson et al., Blood 2002; 100: 1088-1091), karcinomu plic (Rámo et al., Cancer Biol Ther. 2009; 8: 2042-50) a gastrointestinálních tumorů (Heinrich et al., Science 2003; 299: 708-710).

FLT3 je považován za vhodný cíl protinádorové terapie, neboť (i) pacienti s mutacemi FLT3-ITD neodpovídají na standardní léčbu, (ii) existuje přímá souvislost mezi AML a aktivitou FLT3 (Pemmaraju et al.; Cancer. 2011; 117: 3293-304), (iii) specifická inhibice FLT3 potlačuje jednoznačně AML fenotyp (Wander et al.; Ther Adv Hematol. 2014; 5: 65-77; Pemmaraju et al.; Expert Opin Investig Drugs. 2014; 23:943-954).

Toxicita a omezená účinnost řady inhibitorů tyrosinkináz zjištěná v klinických experimentech stimulují další vývoj nových sloučenin s vyšší aktivitou a specifičností vůči FLT3 (Pemmaraju et al.; Expert Opin Investig Drugs. 2014; 23: 943-954). Mezi novější preparáty druhé generace patří quizartinib, crenolanib a PLX3397. Quizartinib (nanomolámí inhibitor FLT3) je schopen indukovat rychlou a kompletní regresi v podkožních xenograftech buněk MV4-11, které jsou odvozeny z FLT3-positivního pacienta s AML (Zarrinkar et al.; Blood. 2009; 114: 2984-2992). Quizartinib je pacienty dobře snášen a v klinických zkouškách vykazoval významnou schopnost indukovat kompletní nebo alespoň částečnou odpověď u pacientů s AML (Wander et al.; Ther Adv Hematol. 2014; 5:65-77). Další vysoce účinný inhibitor FLT3 crenolanib také vykazuje klinickou účinnost. Tento inhibitor je účinný dokonce na AML buňky s bodovými mutacemi ve FLT3, které jsou rezistentní ke quizartinibu (Zimmerman et al.; Blood. 2013; 122: 3607-3615). Navzdory pozitivním výsledkům patří získaná specifická rezistence k inhibitorům FLT3 k významným komplikacím vývoje nových léčiv. Mechanismy rezistence jsou různorodé a

- 1 CZ 308029 B6 zahrnují bodové mutace v kinázové doméně nebo zesílení buněčné signalizace podřízené receptoru FLT3 (Wander et al.; Ther Adv Hematol. 2014; 5: 65-77).

Heterogenita AML představuje významnou komplikaci vývoje účinných terapeutických postupů. Jednu z možných cest však zřejmě představuje kombinace inhibitorů FLT3 s inhibitory jiných onkogenních kináz. Vysokou účinnost vůči AML tak vykazují i některé multikinázové inhibitory se schopností zasahovat i FLT3 (Melisi et al.; Curr Opin Pharmacol. 2013; 13: 536-542). Do této skupiny patří např. selektivní inhibitory JAK2/FLT3 SB1578 a pacritinib (SB1518), které vstoupily do klinických pokusů (Poulsen et al.; J Comput Aided Mol Des. 2012; 26: 437-450). SB 1578 byl původně vyvinut pro terapii revmatoidní artritidy, pacritinib prošel druhou fází klinických zkoušek jako lék pro myelofibrosu a lymfomy. Další klinicky testovaný multikinázový inhibitor TG02 (SB1317) vykazuje účinnosti vůči FLT3, JAK2 a CDK (Goh et al.; Leukemia. 2012; 26: 236-243). Další významný inhibitor AMG 925 duálně selektivně inhibuje FLT3 a CDK4/6 (Keegan et al.; Mol Cancer Ther. 2014; 13: 880-889; Li et al.; J Med Chem. 2014; 57: 3430-3449). Tato sloučenina je schopna tlumit proliferaci i buněčných linií s rezistencí vůči některým jiným klinicky studovaným inhibitorům FLT3.

Přestože je v současnosti několik preparátů pro léčbu AML v klinickém vývoji, doposud žádný nebyl schválen pro běžné používání. Odborná veřejnost i pacienti stále čekají na nové léky, které by zásadně převyšovaly standardně používanou léčbu a znamenaly zásadní obrat pro pacienty.

Dokument US 2005/0187228 popisuje sloučeniny na bázi 2,6,9-trisubstituovaných purinů, které jsou strukturně nejbližší sloučeninám popsaným v tomto vynálezu. V uvedeném dokumentu však nejsou předloženy příklady účinnosti, a obecně je zmíněna pouze účinnost na kinázy cdkl, cdk2, cdk4, cdk5 a cdk7, není však vůbec zmíněn žádný předpoklad účinnosti na kinázu FLT3. Inhibice této kinázy je rozhodující pro účinnost proti leukémiím.

Tento vynález proto popisuje nové sloučeniny s unikátní strukturou, použitelné pro léčbu AML, neboť se vyznačují vysokou cytotoxicitou a vysoce neobvyklou selektivitou vůči buněčným liniím odvozeným od AML. Tento vynález je založen na sérii nových 2,6-disubstitutovaných 9cyklopentyl-9H-purinech se subnanomolámí inhibiční schopností vůči kináze FLT3. Sloučeniny jsou vhodné pro léčbu AML, a to včetně těch, které jsou rezistentní k jiným terapeutickým prostředkům, a také pro léčbu jiných nádorových onemocnění a poruch, které jsou způsobeny nebo souvisí s deregulovanými proteinkinázami. Předmětem tohoto vynálezu je popsat novou generaci jedinečných, vysoce účinných antileukemických sloučenin s vysokou selektivitou.

Předmět vynálezu

Tento vynález se týká derivátů 2,6-disubstituovaného-9-cyklopentyl-9H-purinu obecného vzorce la

(la)

-2CZ 308029 B6 ve kterých, substituent R1 zahrnuje skupiny

a

- Q je =CH- nebo =N-;

- X je vazba, CH₂, NH nebo C=O;

- m je 1 nebo 2 nebo 3;

- n je 1 nebo 2 nebo 3;

- s výhodou m a n jsou shodné;

- A je vybráno ze skupiny sestávající z O, N, CH, C; přičemž

- když A je O, pak o=p=0 a R², B a R³ nejsou přítomny,

- když A je N nebo CH, pak R² je vybrán z H, CH₂, CH₂CH3, a o=p=0 a B a R³ nejsou přítomny,

- když A je C, pak R² není přítomen, o je 1 nebo 2 nebo 3, p je 1 nebo 2 nebo 3, a B a R³jsou jak je definováno níže;

- B je vybráno z O a N, přičemž

- když B je O, pak R³ není přítomno,

- když B je N, pak R³ je vybráno z H, CH3, CřUCřL;

a jejich farmaceuticky přijatelné soli s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, nebo jejich adiční soli s kyselinami.

Nové deriváty obecného vzorce I jsou podskupinou derivátů obecného vzorce la, v nichž je-li X vazba, pak platí definice substituentové skupiny A:

- A je vybráno ze skupiny sestávající z N, CH, C; přičemž

- když A je N nebo CH, pak R² je vybrán z H, CHs, CH2CH3, a o=p=0 a B a R³ nejsou přítomny,

- když A je C, pak R² není přítomen, o je 1 nebo 2 nebo 3, p je 1 nebo 2 nebo 3, a B a R³jsou jak je definováno níže.

V případě, že jsou v molekule chirální centra, pak tento vynález zahrnuje i opticky aktivní isomery, jejich směsi a racemáty.

Dalším předmětem vynálezu jsou 2,6-disubstitutované-9-cyklopentyl-9H-puriny obecného vzorce la pro použití jako antileukemika při terapii akutní myeloidní leukemie (AML) vyznačující se standardní nebo mutantní formou kinázy FLT3. Za mutantní formy FLT3 lze považovat, kromě jiných, například, FLT3-ITD a FLT3 s bodovými mutacemi FLT3-D835Y, FLT3-D835H, FLT3D835V, FLT3-K663Q a FLT3-N841I.

Dalším předmětem vynálezu jsou 2,6-disubstitutované-9-cyklopentyl-9H-puriny obecného vzorce la pro použití při léčbě různých hematologických poruch spojených s eosinofilií a charakterizovaných deregulací kináz PDGFRA, PDGFRB, ale zejména pro chronickou eosinofilní leukémii, v níž je PDGFRA onkogenně aktivována translokací a fůzí za vzniku FIP1L1-PDGFRA. Sloučeniny obecného vzorce I mohou být dále využity pro léčbu jiných hematologických poruch spojených s eosinofilií jako je hypereosinofilní syndrom, lymfocytámí varianta hypereosinofilie a idiopatický hypereosinofilní syndrom, akutní myeloidní leukemie, Bbuněčná nebo T-buněčná akutní lymfoblastická leukemie, lymfoblastický lymfom nebo myeloidní sarkom exprimující FIP1 LI-PDGFRA.

2,6-Disubstitutované-9-cyklopentyl-9H-puriny obecného vzorce I mohou být vhodné i pro léčbu solidních tumorů s amplifikovaným, aktivovaným, deregulovaným nebo zvýšeně exprimovaným genem PDGFRA, jako jsou gliomy, sarkomy, gastrointestinální stromální tumory, nemalobuněčné karcinomy plic a další.

V jednom provedení je entita vybrána z následujících substituentů: 4-piperazin-l-ylfenylamino, 4-(4-methylpiperazin-1 -yljfenylamino, 4-(4-ethylpiperazin-1 -yl)-fenylamino, 4-(2-oxa-6azaspiro[3.3]hept-6-yl)fenylamino, 4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-fenylamino, 4-(6-methyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-yl)fenylamino, 4-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)fenylamino, 4pyrrolidin-1 -ylfenylamino.

-4CZ 308029 B6

V jednom provedení je entita vybrána z následujících substituentů: 4-morfolin-4ylmethylfenylamino, 4-piperazin-1 -ylmethylfenylamino, 4-(4-methylpiperazin-1 ylmethyljfenylamino, 4-(4-ethylpiperazin-l-ylmethyl)fenylamino, 4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept6-ylmethyl)fenylamino, 4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino, 4-(6-methyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino, 4-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2ylmethyljfenylamino.

V jednom provedení je entita vybrána z následujících substituentů: 4-morfolin-4ylkarbonylfenylamino, 4-piperazin-1 -ylkarbonylfenylamino, 4-(4-methylpiperazin-1 ylkarbonyljfenylamino, 4-(4-ethylpiperazin-1 -ylkarbonyljfenylamino, 4-(2-oxa-6azaspiro[3.3]hept-6-ylkarbonyl)fenylamino, 4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)fenylamino, 4-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)fenylamino, 4-(6-ethyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)fenylamino.

V jednom provedení vybrána z následujících substituentů: 6-(4-methylpiperazin-l-yl)pyridin-3ylamino, 6-(4-ethylpiperazin-l-yl)pyridin-3-ylamino, 6-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)pyridin3-ylamino, 6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3-ylamino, 6-(6-methyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3-ylamino, 6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3ylamino, 6-pyrrolidin-1 -ylpyridin-3-ylamino.

V jednom provedení je entita vybrána z následujících substituentů: 6-morfolin-4ylmethylpyridin-3-ylamino, 6-piperazin-1 -ylmethylpyridin-3-ylamino, 6-(4-methyl-piperazin-1

-5 CZ 308029 B6 ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-(4-ethylpiperazin-1 -ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-(2-oxa-6azaspiro[3.3]hept-6-ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin3-ylamino, 6-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-(6-ethyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-ylamino.

V jednom provedení je entita vybrána z následujících substituentů: 6-morfolin-4- ylkarbonylpyridin-2-ylamino, 6-piperazin-1 -ylkarbonylpyridin-2-ylamino, 6-(4-methylpiperazin1 -ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino, 6-(4-ethylpiperazin-1 -ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino, 6-(2-oxa6-azaspiro[3.3]hept-6-ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino, 6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino, 6-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)pyridin-2ylamino, 6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino.

V jednom provedení je R¹ 4-amino-cyklohexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-amino-cyklohexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminocyklohexylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminocyklohexylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminocyklohexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminocyklohexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminocyklohexylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminocyklohexylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxycyklohexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxycyklohexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxycyklohexylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxycyklohexylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxycyklohexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxycyklohexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxycyklohexylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxycyklohexylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

-6CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ 2-aminoethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-aminoethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-aminoethylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-aminoethylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-aminoethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-aminoethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-aminoethylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-aminoethylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-aminopropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-aminopropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-aminopropylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-aminopropylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-aminopropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-aminopropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-aminopropylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-aminopropylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminobutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminobutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminobutylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminobutylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminobutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminobutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminobutylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-aminobutylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

-7 CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ 5-aminopentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, Cil·,, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-aminopentylamino, Q je CH, X je vazba nebo Cil·, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-aminopentylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-aminopentylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-aminopentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-aminopentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-aminopentylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-aminopentylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-aminohexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-aminohexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-aminohexylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-aminohexylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-aminohexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-aminohexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-aminohexylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-aminohexylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ morfolin-4-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ morfolin-4-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ morfolin-4-ylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ morfolin-4-ylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ morfolin-4-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ morfolin-4-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ morfolin-4-ylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ morfolin-4-ylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

-8CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ piperazin-l-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperazin-l-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperazin-l-ylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperazin-l-ylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperazin-l-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperazin-l-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperazin-l-ylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperazin-l-ylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-methylpiperazin-l-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-methylpiperazin-l-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-methylpiperazin-l-ylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-methylpiperazin-l-ylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-methylpiperazin-l-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-methylpiperazin-l-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-methylpiperazin-l-ylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-methylpiperazin-l-ylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperidin-l-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperidin-l-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperidin-l-ylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperidin-l-ylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperidin-l-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperidin-l-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperidin-l-ylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ piperidin-l-ylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

-9CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ pyrrolidin-l-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ pyrrolidin-l-ylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ pyrrolidin-l-ylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH₂CH3.

V jednom provedení je R¹ pyrrolidin-l-ylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH₂CH3.

V jednom provedení je R¹ pyrrolidin-l-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ pyrrolidin-l-ylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ pyrrolidin-l-ylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH₂CH3.

V jednom provedení je R¹ pyrrolidin-l-ylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH₂CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxycyklopentylamino, 3-hydroxycyklopentylamino, Qje CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxycyklopentylamino, 3-hydroxycyklopentylamino, Qje CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, ch3, ch₂ch₃.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxycyklopentylamino, 3-hydroxycyklopentylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH₂CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxycyklopentylamino, 3-hydroxy-cyklopentylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH₂CH₃.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxycyklopentylamino, 3-hydroxycyklopentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxycyklopentylamino, 3-hydroxycyklopentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, ch3, ch₂ch₃.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxycyklopentylamino, 3-hydroxycyklopentylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH₂CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxycyklopentylamino, 3-hydroxycyklopentylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH₂CH₃.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxymethylpiperidin-l-yl, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxymethylpiperidin-l-yl, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxymethylpiperidin-l-yl, Qje CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH₂CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxymethylpiperidin-l-yl, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH₂CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxymethylpiperidin-l-yl, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxymethylpiperidin-l-yl, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxymethylpiperidin-l-yl, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH₂CH3.

- 10CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxymethylpiperidin-l-yl, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CHs, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylpiperidin-l-yl, Q je CH, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylpiperidin-l-yl, Q je CH, X je vazba nebo CII₂, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylpiperidin-l-yl, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylpiperidin-l-yl, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylpiperidin-l-yl, Q je N, X je vazba nebo ClI₂, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylpiperidin-l-yl, Q je N, X je vazba nebo Clh, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylpiperidin-l-yl, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylpiperidin-l-yl, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylamino, Q je CH, X je vazba nebo Clh, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylamino, Q je N, X je vazba nebo Clh, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylamino, Q je N, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-hydroxyethylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-hydroxypropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIh, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-hydroxypropylamino, Q je CH, X je vazba nebo Clh, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-hydroxypropylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-hydroxypropylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-hydroxypropylamino, Q je N, X je vazba nebo Cl L, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-hydroxypropylamino, Q je N, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-hydroxypropylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 11 CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ 3-hydroxypropylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxybutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxybutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxybutylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxybutylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxybutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxybutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxybutylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-hydroxybutylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-hydroxypentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-hydroxypentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-hydroxypentylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-hydroxypentylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-hydroxypentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-hydroxypentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-hydroxypentylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-hydroxypentylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-hydroxyhexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-hydroxyhexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-hydroxyhexylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-hydroxyhexylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-hydroxyhexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-hydroxyhexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-hydroxyhexylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 12CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ 6-hydroxyhexylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylmethylammo, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylmethylammo, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylmethylammo, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylmethylammo, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylmethylammo, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylmethylammo, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylmethylammo, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylmethylammo, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylethylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylethylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylethylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylethylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpropylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpropylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpropylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 13CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpropylamino, Q je N, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylbutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylbutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylbutylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylbutylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylbutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylbutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylbutylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylbutylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpentylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpentylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpentylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ aminokarbonylpentylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-dimethylaminoethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-dimethylaminoethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-dimethylaminoethylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-dimethylaminoethylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-dimethylaminoethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-dimethylaminoethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 2-dimethylaminoethylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 14CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ 2-dimethylaminoethylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-dimethylaminopropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-dimethylaminopropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-dimethylaminopropylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-dimethylaminopropylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-dimethylamino-propylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-dimethylaminopropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-dimethylaminopropylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-dimethylaminopropylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-dimethylaminobutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-dimethylaminobutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-dimethylaminobutylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-dimethylaminobutylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-dimethylaminobutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-dimethylaminobutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-dimethylaminobutylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 4-dimethylaminobutylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-dimethylaminopentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-dimethylaminopentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-dimethylaminopentylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-dimethylaminopentylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-dimethylaminopentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-dimethylaminopentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 5-dimethylaminopentylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 15CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ 5-dimethylaminopentylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CHs, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-dimethylaminohexylamino, Q je CH, X je vazba nebo ClI₂, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-dimethylaminohexylamino, Q je CH, X je vazba nebo Cil·, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-dimethylaminohexylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-dimethylaminohexylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-dimethylaminohexylamino, Q je N, X je vazba nebo CIl·, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-dimethylaminohexylamino, Q je N, X je vazba nebo Clh, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-dimethylaminohexylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 6-dimethylaminohexylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-amino-2-hydroxypropylamino, Q je CH, X je vazba nebo Cl l·, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-amino-2-hydroxypropylamino, Q je CH, X je vazba nebo Clh, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-amino-2-hydroxypropylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-amino-2-hydroxypropylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-amino-2-hydroxypropylamino, Q je N, X je vazba nebo Cl l·, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-amino-2-hydroxypropylamino, Q je N, X je vazba nebo Cil·, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-amino-2-hydroxypropylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ 3-amino-2-hydroxypropylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylethylamino, Q je CH, X je vazba nebo Cil·, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylethylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylethylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylethylamino, Q je N, X je vazba nebo CIl·, m=2, n=2, A je N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH₂, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylethylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 16CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ ureylethylamino, Q je N, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpropylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpropylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpropylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpropylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylbutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylbutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylbutylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylbutylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylbutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylbutylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylbutylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylbutylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpentylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpentylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpentylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylpentylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 17CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ ureylpentylamino, Q je N, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylhexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylhexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylhexylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylhexylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylhexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylhexylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylhexylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ ureylhexylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylethylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylethylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylethylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylethylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylethylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylethylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpropylamino, Q je CH, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpropylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpropylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpropylamino, Q je N, X je vazba nebo CH2, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpropylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 18CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ guanidylpropylamino, Qje N, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylbutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylbutylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylbutylamino, Q je CH, X je C=O, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylbutylamino, Q je CH, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylbutylamino, Q je N, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylbutylamino, Q je N, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylbutylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylbutylamino, Qje N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpentylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpentylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpentylamino, Q je CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpentylamino, Q je N, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpentylamino, Qje N, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpentylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylpentylamino, Q je N, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylhexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylhexylamino, Q je CH, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylhexylamino, Q je CH, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylhexylamino, Qje CH, X je C=0, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylhexylamino, Q je N, X je vazba nebo CIL, m=2, n=2, A je N, R² není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylhexylamino, Qje N, X je vazba nebo CIL, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

V jednom provedení je R¹ guanidylhexylamino, Q je N, X je C=0, m=2, n=2, A je O nebo N, R²není přítomen nebo R² je H, CH3, CH2CH3.

- 19CZ 308029 B6

V jednom provedení je R¹ guanidylhexylamino, Q je N, X je C=O, A je C, m=l, n=l, o=l, p=l, B je O nebo N, R³ není přítomen nebo R³ je H, CH3, CH2CH3.

(4-aminocyklohexyl)N²-(4-aminobutyl)-9N²-(4-aminobutyl)-9N²-(4-aminocyklohexyl)[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)fenyl]-9H-purin-2,6-diamin,

S výhodou jsou látky obecného vzorce I vybrány ze skupiny zahrnující N²9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin, cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin, cyklopentyl-N⁶- [4-(4-ethylpiperazin-1 -yljfenyl] -9H-purin-2,6-diamin, 9-cyklopentyl-N⁶cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino)-9H-purin-2-ylamino] -butan-1 -ol, aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-pyrrolidin-l-ylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin), aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)pyridin-3-yl]-9H-purin-2,6diamin, diamin.

4-[9(N²-(4N²-(4N²-(5-aminopentyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6S výhodou jsou látky obecného vzorce la vybrány ze skupiny zahrnující N²-(4aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin, N²-(4aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin, N²-(4aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-yl-fenyl)-9H-purin-2,6-diamin, N²-(4aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin, N²-(4-aminobutyl)9-cyklopentyl-N⁶-[4-(4-ethylpiperazin-l-yl)fenyl]-9H-purin-2,6-diamin, N²-(4aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)fenyl]-9H-purin-2,6diamin, 4-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino)-9H-purin-2-ylamino]-butan-l-ol, (N²-(4-aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-pyrrolidin-l-ylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin), N²(4-aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(2-oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl)pyridin-3-yl]-9H-purin-

2.6- diamin, N²-(5-amino-pentyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6diamin, 9-cyklopentyl-N²-(4-dimethylamino-butyl)-N⁶-(6-morfolin-4-ylpyridin-3-yl)-9H-purin-

2.6- diamin.

Farmaceutické přípravky

Terapeutický přípravek obsahuje od 1 do 95 % aktivní látky, přičemž jednorázové dávky obsahují přednostně od 20 do 90 % aktivní látky a při způsobech aplikace, které nejsou jednorázové, obsahují přednostně od 5 do 20 % aktivní látky. Jednotkové dávkové formy jsou např. potahované tablety, tablety, ampule, lahvičky, čípky nebo tobolky. Jiné formy aplikace jsou např. masti, krémy, pasty, pěny, tinktury, rtěnky, kapky, spreje, disperze atd. Příkladem jsou tobolky obsahující od 0,05 g do 1,0 g aktivní látky.

Farmaceutické přípravky podle předloženého vynálezu jsou připravovány známým způsobem, např. běžným mícháním, granulací, potahováním, rozpouštěcími nebo lyofilizačními procesy.

Přednostně jsou používány roztoky aktivních látek a dále také suspenze nebo disperze, obzvláště izotonické vodné roztoky, suspenze nebo disperze, které mohou být připraveny před použitím, např. v případě lyofilizovaných preparátů obsahujících aktivní látku samotnou nebo s nosičem jako je mannitol. Farmaceutické přípravky mohou být sterilizovány a/nebo obsahují excipienty, např. konzervační přípravky, stabilizátory, zvlhčovadla a/nebo emulgátory, rozpouštěcí činidla, soli pro regulaci osmotického tlaku a/nebo pufiry. Jsou připravovány známým způsobem, např. běžným rozpouštěním nebo lyofilizací. Zmíněné roztoky nebo suspenze mohou obsahovat látky zvyšující viskozitu, jako např. sodnou sůl karboxymethylcelulózy, dextran, polyvinylpyrrolidon nebo želatinu.

Olejové suspenze obsahují jako olejovou složku rostlinné, syntetické nebo semisyntetické oleje obvyklé pro injekční účely. Oleje, které zde mohou být zmíněny, jsou obzvláště kapalné estery mastných kyselin, které obsahují jako kyselou složku mastnou kyselinu s dlouhým řetězcem majícím 8-22, s výhodou pak 12-22 uhlíkových atomů, např. kyselinu laurovou, tridekanovou, myristovou, pentadekanovou, palmitovou, margarovou, stearovou, arachidonovou a behenovou, nebo odpovídající nenasycené kyseliny, např. kyselinu olejovou, alaidikovou, eurikovou, brasidovou a

-20CZ 308029 B6 linoleovou, případně s přídavkem antioxidantů, např. vitaminu E, β-karotenu nebo 3,5-di-tert-butyl4-hydroxytoluenu. Alkoholová složka těchto esterů mastných kyselin nemá více než 6 uhlíkových atomů a je mono- nebo polyhydrická, např. mono-, di- nebo trihydrické alkoholy jako metanol, etanol, propanol, butanol nebo pentanol a jejich isomery, ale hlavně glykol a glycerol. Estery mastných kyselin jsou s výhodou např. ethyl oleát, isopropyl myristát, isopropyl palmitát, „Labrafil M 2375“ (polyoxyethylen glycerol trioleát, Gattefoseé, Paříž), „Labrafil M 1944 CS“ (nenasycené polyglykolované glyceridy připravené alkoholýzou oleje z meruňkových jader a složené z glyceridů a esterů polyethylen glykolu; Gattefoseé, Paříž), „Labrasol“ (nasycené polyglykolované glyceridy připravené alkoholýzou TCM a složené z glyceridů a esterů polyethylen glykolu; Gattefoseé, Paříž) a/nebo „Miglyol 812“ (triglycerid nasycených mastných kyselin s délkou řetězce Cs až C12 od Hůls AG, Německo) a zvláště rostlinné oleje jako bavlníkový olej, mandlový olej, olivový olej, ricinový olej, sezamový olej, sójový olej a zejména olej z podzemnice olejně.

Příprava injekčního přípravku se provádí za sterilních podmínek obvyklým způsobem, např. plněním do ampulí nebo lahviček a uzavíráním obalů.

Např. farmaceutické přípravky pro orální použití se mohou získat smícháním aktivní látky s jedním nebo více tuhými nosiči, případnou granulací výsledné směsi, a pokud je to požadováno, zpracováním směsi nebo granulí do tablet nebo potahovaných tablet přídavkem dalších neutrálních látek.

Vhodné nosiče jsou obzvláště plnidla jako cukry, např. laktóza, sacharóza, mannitol nebo sorbitol, celulózové preparáty a/nebo fosforečnany vápníku, s výhodou fosforečnan vápenatý nebo hydrogenfosforečnan vápenatý, dále pojivá jako škroby, s výhodou kukuřičný, pšeničný, rýžový nebo bramborový škrob, methylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, sodná sůl karboxymethylcelulózy a/nebo polyvinylpyrrolidin, a/nebo pokud požadováno desintegrátory jako výše zmíněné škroby a dále karboxymethylový škrob, zesítěný polyvinylpyrrolidin, alginová kyselina a její soli, s výhodou alginát sodný. Další neutrální látky jsou regulátory toku a lubrikanty, s výhodou kyselina salicylová, talek, kyselina stearová a její soli jako stearát hořečnatý a/nebo vápenatý, polyethylen glykol nebo jeho deriváty. Jádra potahovaných tablet mohou být potažena vhodnými potahy, které mohou být odolné vůči žaludeční šťávě, přičemž používané potahy jsou mezi jinými koncentrované roztoky cukrů, které mohou obsahovat arabskou gumu, talek, polyvinylpyrrolidin, polyethylen glykol a/nebo oxid titaničitý, dále potahovací roztoky ve vhodných organických rozpouštědlech nebo směsích rozpouštědel, či pro přípravu potahů odolných vůči žaludeční šťávě roztoky vhodných celulózových preparátů jako acetylcelulózaftalát nebo hydroxypropylmethylcelulózaftalát. Barviva nebo pigmenty jsou přimíchávány do tablet nebo potahovaných tablet např. pro identifikaci nebo charakterizaci různých dávek účinné složky.

Farmaceutické přípravky, které mohou být užívány orálně, jsou také tvrdé tobolky ze želatiny nebo měkké uzavřené tobolky ze želatiny a změkčovadla jako glycerol nebo sorbitol. Tvrdé tobolky mohou obsahovat aktivní látku ve formě granulí, smíchanou např. s plnidly jako je kukuřičný škrob, pojivý nebo lubrikanty jako talek nebo stearát hořečnatý, a se stabilizátory. V měkkých tobolkách je aktivní látka přednostně rozpuštěna nebo suspendována ve vhodných kapalných látkách neutrální povahy jako mazací tuk, parafínový olej nebo kapalný polyethylen glykol či estery mastných kyselin a ethylen nebo propylen glykolu, přičemž je také možno přidat stabilizátory a detergenty např. typu esterů polyethylen sorbitanových mastných kyselin.

Další formy orálního podávání jsou např. sirupy připravované běžným způsobem, které obsahují aktivní složku např. v suspendované formě a v koncentraci okolo 5 až 20 %, přednostně okolo 10 % nebo podobné koncentrace, která umožňuje vhodnou individuální dávku, např. když je měřeno 5 nebo 10 ml. Ostatní formy jsou např. práškové nebo kapalné koncentráty pro přípravu koktejlů, např. v mléce. Takovéto koncentráty mohou být také baleny v množství odpovídajícím jednotkové dávce.

-21 CZ 308029 B6

Farmaceutické přípravky, které mohou být používány rektálně, jsou např. čípky, které obsahují kombinaci aktivní látky se základem. Vhodné základy jsou např. přírodní nebo syntetické triglyceridy, parafínové uhlovodíky, polyethylen glykoly nebo vyšší alkoholy.

Přípravky vhodné pro parenterální podání jsou vodné roztoky aktivní složky ve formě rozpustné ve vodě, např. ve vodě rozpustná sůl nebo vodná injekční suspenze, která obsahuje látky zvyšující viskozitu, např. sodnou sůl karboxymethylcelulózy, sorbitol a/nebo dextran, a stabilizátory tam kde je to vhodné. Aktivní látka může být také přítomna ve formě lyofilizátu společně s excipienty kde je to vhodné a může být rozpuštěna před parenterální aplikací přidáním vhodných rozpouštědel. Roztoky, které jsou použity pro parenterální aplikaci, mohou být použity např. i pro infuzní roztoky. Preferovaná konzervo vadla jsou s výhodou antioxidanty jako kyselina askorbová, nebo mikrobicidy kyselina sorbová či benzoová.

Tinktury a roztoky obvykle obsahují vodně-etanolickou bázi, ke které jsou přimíchána zvlhčovadla pro snížení odpařování jako jsou polyalkoholy, např. glycerol, glykoly a/nebo polyethylen glykol, dále promazávadla jako estery mastných kyselin a nižších polyethylen glykolů, tj. lipofilní látky rozpustné ve vodné směsi nahrazující tukové látky odstraněné z kůže etanolem, a pokud je to nutné, i ostatní excipienty a aditiva.

Vynález se také vztahuje na procesy nebo metody pro léčení nemocí zmíněných výše. Látky mohou být podávány profýlakticky nebo terapeuticky jako takové nebo ve formě farmaceutických přípravků, přednostně v množství které je efektivní proti zmíněným nemocem, přičemž u teplokrevných živočichů, např. člověka, vyžadujícího takovéto ošetření, je látka používána zejména ve formě farmaceutického přípravku. Na tělesnou hmotnost okolo 70 kg je aplikována denní dávka látky okolo 0,1 až 5 g, s výhodou 0,5 až 2 g.

Objasnění výkresů

Obrázek 1 shrnuje výsledky analýzy fosforylace FLT3 v buňkách MV4-11 (exprimujících FLT3ITD) ovlivněných látkami 264 a 270 pomocí imunoblotingu. Buňky byly vystaveny různým koncentracím látek 264 a 270 na dobu 1 hodiny a následně byla sledována míra fosforylace vybraných tyrosinových reziduí FLT3.

Obrázek 2 ukazuje výsledky analýzy fosforylace PDGFR v buňkách EOL-1 ovlivněných látkami 264 a 270 pomocí imunoblotingu. Buňky byly vystaveny různým koncentracím látek 264 a 270 na dobu 1 hodiny a následně byla sledována míra fosforylace vybraných tyrosinových reziduí PDGFR.

Obrázek 3 shrnuje studium proteinů zapojených v podřízených signálních drahách FLT3 v buňkách MV4-11 ovlivněných látkami 264 a 270 na 1 hodinu.

Obrázek 4 shrnuje studium proteinů zapojených v podřízených signálních drahách PDGFR v buňkách EOL-1 ovlivněných látkami 264 a 270 na 1 hodinu.

Obrázek 5 ukazuje výsledky studia relativní aktivity caspas-3/7 v buněčných liniích MV4-11 a K562 po ovlivnění testovanou látkou 264.

Obrázek 6 ukazuje výsledky cytometrické analýzy buněčného cyklu linií MV4-11 a MOLM-13 po ovlivnění testovanou látkou 264.

Obrázek 7 shrnuje výsledky studia fosforylace FLT3 v myším xenograftu MV4-11 vlivem látky 264 a Quizartinibu. Jednotlivé dráhy odpovídají odlišným zvířatům.

-22CZ 308029 B6

Příklady uskutečnění vynálezu

Následující příklady slouží k ilustraci vynálezu, aniž by omezovaly jeho rozsah. Pokud není uvedeno jinak, veškerá procenta jsou uváděna jako hmotnostní.

Výchozí látky a pomocný materiál pro přípravu sloučeniny I lze získat z komerčních zdrojů (Sigma, Aldrich, Fluka, atd.) nebo mohou být připraveny, jak je popsáno níže.

Chromatografie na tenké vrstvě byla prováděna na deskách s oxidem křemičitým 60 F254 (Merck) za použití CHCF / MeOH jako mobilní fáze. Detekce skvrn byla provedena pomocí UV záření (254 a 365 nm). Chromatografické čištění meziproduktů a finálních produktů bylo prováděno na koloně s oxidem křemičitým Davisil 40-63 mikronů (Grace se Davision). Elementární analýza byla prováděna na analyzátoru EA 1112 (Thermo Scientific).

Body tání byly stanoveny na Koflerově bloku a nebyly korigovány. 1H NMR spektra byla měřena v CDC13 nebo v DMSO-d6 při 300 K na spektrometru Bruker Avance 300 NMR (300 MHz) v TMS jako interním standardu; chemické posuny jsou popsány v ppm, a vazebné konstanty v Hz. Hmotnostní spektry byla měřena za použití LCQ hmotnostním spektrometru s iontovou pastí (Finnigan MAT, San Jose, CA, USA). Merck silikagel Kieselgel 60 (zrnitost 230400) byl použit na sloupcovou chromatografii. Elementární analýzy (C,H,N) byly měřeny na EA1108 CHN analyzátoru (Fison Instruments); jejich hodnoty (C, Η, N) dopovídaly vypočteným v rámci přijatelných limitů. Quadrupolová hmotnostní spektra byla měřena na přístroji Micromass ZMD detektoru s ionizací elektrosprayem.

Výchozí 2,6-dichlor-9-cyklopentyl-9H-purin byl připraven Mitsunobovou alkylační metodou z

2,6-dichlorpurinu a cyklopentanolu. Některé z použitých derivátů 4-substituovaného anilinu a derivátů 2-substituovaného-5-aminopyridinu jsou komerčně dostupné, zatímco některé byly připraveny s pomocí běžných syntetických přístupů. Substituce 4-brom-nitrobenzenu, resp. 2brom-5-nitropyridinu příslušnými cyklickými sekundárními aminy vedla k derivátům (3), které byly následně redukovány vodíkem na paládiu za atmosférického tlaku za vzniku odpovídajících derivátů (4), N,N-disubstitutuovaného-benzen-l,4-diaminu, resp. N²,N²-disubstitutuovanéhopyridin-2,5-diaminu (viz schéma 1).

Schéma 1

Obecný postup přípravy derivátů (4)

Směs 4-fluornitrobenzenu, resp. 5-brom-2-nitropyridinu (1,00 mmol), odpovídajícího sekundárního aminu (1,05 mmol) a uhličitanu draselného (2,00 mmol) v ethanolu (10 ml) byla zahřívána při teplotě 100 °C za stálého míchání v takové ampuli v inertní atmosféře (argon) po dobu 4 hodin. Průběh reakce byl sledován pomocí tenkovrstevné chromatografie na silikagelu v soustavě chloroform-methanol, 19:1. Po ochlazení na laboratorní teplotu se reakční směs odpaří na rotační vakuové odparce. Odparek se rozdělí mezi dichlormethan (25 ml) a vodu (25 ml). Vodná fáze se extrahuje ještě 2 x 25 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se promyjí vodou, solankou, vysuší síranem sodným a odpaří na rotační vakuové odparce. Do dalšího stupně se použije bez dalšího čištění. Surový produkt z předchozí reakce (0,75 mmol) se podrobí

-23CZ 308029 B6 hydrogenaci za atmosferického tlaku v methanolu (50 ml) na 5% paládiu na aktivním uhlí (50 mg). Po spotřebování vypočteného množství vodíku se reakční směs zfiltruje přes křemelinu, promyje malým množstvím methanolu a odpaří na rotační vakuové odparce. Surový produkt se rozpustí v 50 ml 2 M vodné kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se 25 ml dichlormethanu. Vodná fáze byla neutralizována 5% vodným hydrogenuhličitanem sodným, vyloučená sraženina byla odsáta na fritě a promyta vodou. Produkt byl vysušen v exsikátoru nad oxidem fosforečným.

Příklad 1

6-(4-Nitrofenyl)-2-oxa-6-aza-spiro[3.3]heptan

Výtěžek: 72 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C11H12N2O3 (220.22): C, 59.99; H, 5.49; N,

12.72. Nalezeno: C, 59.66; H, 5.12; N, 12.19. HPLC-MS (ESI+): 221.36 (99.7%). GC-MS (El, M+ (rel.int. m/z): 220 (21), 150 (100), 120 (57). II NMR (DMSO_d₆): 4.19-4.21(m, 4H), 4.704.72 (m, 4H), 6.44 (d„ J=9.15, 2H), 8.04 (d, J= 9.15, 2H)

4-(2-Oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)fenylamin

Výtěžek: 58 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C11H14N2O (190.24): C, 69.45; H, 7.42; N,

14.73. Nalezeno: C, 69.13; H, 7.12; N, 14.96. HPLC-MS (ESI+): 191.5 (99.7%). GC-MS (El, M+ (rel.int. m/z): 190 (11), 132 (100). II NMR (DMSO_d₆): 3.72-3.75(m, 4H), 4.40 (s(br), 2H, NH₂), 4.65-4.68 (m, 4H), 6.21 (d, J= 8.16, 2H, ArH), 6.46 (d, J= 8.15, 2H, ArH)

Podobně byly připraveny 4-(N,N-disubstituované aminomethyl)fenylaminy a 6-(N,Ndisubstituované aminomethyl)-pyridin-3-ylaminy (8) reduktivní aminací 4-nitrobenzaldehydu nebo 5-nitropyridin-2-karbaldehydu s odpovídajícím sekundárním aminem za použití triacetoxyborohydridu sodného v Ν,Ν-dimethylformamidu. V dalším kroku byla redukována nitroskupina hydrazinem na Raneyově niklu (viz schéma 2).

Schéma 2

Obecný postup přípravy látek (8)

K roztoku 4-nitrobenzaldehydu nebo 5-nitropyridin-2-karbaldehydu (3.00 mmol) v bezvodém Ν,Ν-dimethylformamidu (10.0 ml) se za stálého míchání za laboratorní teploty prikapává roztok triacetoxyborohydridu sodného (3.00 mmol) a kyseliny octové (3.00 mmol) v bezvodém Ν,Νdimethylformamidu (10.0 ml). Reakční směs se míchá dále za laboratorní teploty po dobu 4 hodin. Poté se přidá 10 ml methanolu a odpaří se na rotační vakuové odparce. Odparek se rozdělí mezi 5% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (15 ml) a ethylacetát (15 ml). Vodná fáze se ještě dvakrát extrahuje 15 ml ethylacetátu. Spojené organické fáze se promyjí solankou, vysuší síranem sodným a odpaří na rotační vakuové odparce. Surový produkt (7) se čistí kolonovou chromatografií na silikagelu za použití mobilní fáze o složení petrolether - ethylacetát 3:1.

Nitroderivát (7) se rozpustí v ethanolu (5 ml) a přidá se Raneyův nikl (50 mg). Reakční směs se zahřívá na teplotu 50 °C za stálého míchání a během 30 minut se přikapává 80 % hydrazin hydrát

-24CZ 308029 B6 (15.0 mmol). Reakční směs se dále zahřívá po dobu 30 min při 50 °C a po ochlazení na laboratorní teplotu se zfiltruje přes křemelinu a promyje ethanolem. Filtrát se odpaří na rotační vakuové odparce a surový produkt se čistí kolonovou chromatografií na silikagelu za použití mobilní fáze o složení chloroform - methanol 4:1.

Příklad 2

6-(4-Nitrobenzyl)-2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptan

Výtěžek: 57 %; Elementární analýza: Vypočteno pro C12H14N2O3 (234.26): C, 61.53; H, 6.02; N, 11.96. Nalezeno: C, 61.22; H, 6.12; N, 11.92. HPLC-MS (ESI+): 235.27 (98.7%). Ή NMR (DMSO.de): 3.32-3.35 (m, 4H), 3.63 (s, 2H, CH₂), 4.60-4.63 (m, 4H), 7.52 (d, J= 8.67, 2H, ArH), 8.16 (d,J= 8.67, 2H, ArH)

4-(2-Oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-ylmethyl)fenylamin

Výtěžek: 86 %; Elementární analýza: Vypočteno pro C12H16N2O (204.24): C, 70.56; H, 7.90; N, 13.71. Nalezeno: C, 70.45; H, 7.82; N, 13.29. HPLC-MS (ESI+): 205.32 (96.7%). Ή NMR (DMSO.de): 3.70-3.73(m, 4H), 4.45 (s(br), 2H, NH₂), 4.52-4.55 (m, 4H), 6.25 (d, J= 7.80, 2H, ArH), 6.49 (d, J= 7.80, 2H, ArH)

Poslední typ použitých prekursorů, 4-amino-N,N-disubstituované benzamidy a 5-aminopyridin-2karboxyl-N,N-disubstituované amidy byly připraveny reakcí 4-nitrobenzoyl chloridu, resp. 5nitro-pyridin-2-karbonyl chloridu s odpovídajícím sekundárním aminem. Následná redukce nitroskupiny hydrazine hydrátem na Raneyově niklu poskytla požadované deriváty 12 (viz schéma 3).

Schéma 3

Obecný postup přípravy derivátů 12:

K roztoku 4-nitrobenzoylchloridu, resp. 5-nitropyridin-2-karbonyl chloridu (20.0 mmol) a trimethylaminu (20.0 mmol) v tetrahydrofuranu (15.0 ml) se za stálého míchání za laboratorní teploty přikapává odpovídající sekundární amin. Po ukončení přidávání se reakční směs zahřívá při teplotě 50 °C po dobu 120 min. Po ochlazení na laboratorní teplotu se vyloučená sraženina odsaje a promyje malým množstvím tetrahydrofuranu. Filtrát se odpaří na rotační vakuové odparce a čistí se krystalizací z ethanolu.

Získaný nitroderivát (10.00 mmol) se rozpustí v ethanolu (5.0 ml) a přidá se Raneyův nikl (50 mg). Reakční směs se zahřívá na teplotu 50 °C a za stálého míchání se během 30 min přidává hydrazin hydrát 80% (15.0 mmol). Reakční směs se dále zahřívá po dobu 30 min při teplotě 50 °C, poté se ochladí na laboratorní teplotu, zfiltruje se přes křemelinu a promyje ethanolem. Filtrát se odpaří na rotační vakuové odparce a surový produkt se čistí kolonovou chromatografií na silikagelu v soustavě chloroform-methanol 4:1.

Příklad 3

-25CZ 308029 B6

6-(4-Nitrobenzoyl)-2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptan

Výtěžek: 93 %; Elementární analýza: Vypočteno pro C12H12N2O4 (248.23): C, 58.06; H, 4.87; N, 11.29. Nalezeno: C, 58.24; H, 5.12; N, 11.01. HPLC-MS (ESI+): 249.26 (99.4%). II NMR (DMSO.de): 3.72-3.76 (m, 4H), 4.94-5.02 (m, 4H), 8.02 (d, J= 8.32, 2H, ArH), 8.54 (d, J= 8.32, 2H, ArH)

4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-ylkarbonyl)anilin

Výtěžek: 76 %; Elementární analýza: Vypočteno pro C12H14N2O2 (218.25): C, 66.04; H, 6.47; N, 11.29. Nalezeno: C, 65.79; H, 6.58; N, 12.51. HPLC-MS (ESI+): 219.30 (95.4%). II NMR (DMSO.de): 3.82-3.88 (m, 4H), 4.41 (s(br), 2H, NH₂), 4.54-4.58 (m, 4H), 6.51 (d, J= 7.55, 2H, ArH), 7.29 (d, J= 7.55, 2H, ArH)

Nukleofilní substituce v poloze 6-purinového jádra byla prováděna reakcí 9-cyklopentyl-2,6dichlor-9H-purinu (13) s odpovídajícím 4-substituovaným anilinem nebo 2-substitutuovaným 5aminopyridinem za přítomnosti Hiinigovy báze za vzniku látek (15). Některé z uvedených látek (15) byly rovněž připraveny reakcí bromderivátu (14) s odpovídajícím sekundárním aminem za upravených podmínek Hartwig-Buchwaldovy aminace (viz schéma 4).

a: sdpsvidsšřd primární .amin; DIPEA, o

-26CZ 308029 B6

b: odpovídající sekundární amin; Pd(dba) ₂, racBINAP, t - BuOK, toluen; 100 °C 10 - 48 hodin Schéma 4

Obecný postup A přípravy látek 15:

K suspenzi 9-cyklopentyl-2,6-dichlor-9H-purinu (13) (1.98 mmol) ve směsi n-propanolu a (10 ml) a N,N-diisopropyl-N-ethylaminu (8.72 mmol) se přidá odpovídající primární amin (2.18 mmol). Suspenze se zahřívá při teplotě 100 °C v tlakové trubici v inertní atmosféře (argon) při teplotě 100°C po dobu 20 až 36 hodin. Průběh reakce se průběžně kontroluje tcnkovrstcvnou chromatografií. Po ukončení reakce se ochladí na laboratorní teplotu a odpaří se na rotační vakuové odparce. Odparek se rozdělí mezi vodu (50 ml) a dichlormethan (50 ml). Vodná fáze se ještě dvakrát extrahuje dichlormethanem. Spojené organické fáze se promyjí vodou, solankou, vysuší se síranem sodným a odpaří na rotační vakouvé odparce. Surový produkt se čistí krystalizací ze směsi petrolether - ethylacetát 3:1.

Příklad 4 (2-Chlor-9-cyklopentyl-9H-purin-6-yl)-(4-pyrrolidin-1 -yl-fenyl)amin

Výtěžek: 92%. Elementární analýza: Vypočteno pro C20H23CIN6 (382.89): C, 62.74; H, 6.05; N, 21.95. Nalezeno: C, 62.54; H, 5.82; N, 21.83. HPLC-MS (ESI+): 384 (99.9%). II NMR (DMSO. d₆): 1.63-1.81(m, 2H), 1.86-1.99(m, 8H), 2.14-2.21(m, 2H), 3.19-3.23(m, 4H, CH2), 4.81(qui, J=7.17, 1H, CH), 6.53(d, J=8.73, 2H, ArH), 7.519(d, J=8.73, 2H, ArH), 8.32(s, 1H, CH), 9.92(s, 1H, NH)

-27CZ 308029 B6

Příklad 5 (2-Chlor-9-cyklopentyl-9H-purin-6-yl)-(4-morfolin-4-y-fenyl)amin

Výtěžek: 72%. Elementární analýza: Vypočteno pro C20H23CIN6O (398.89): C, 60.22; H, 5.81; N, 21.07. Nalezeno: C, 60.25; H, 5.88; N, 21.19. HPLC-MS (ESI+): 400.7 (98.5%). II NMR (DMSO.de): 1.79-1.83(m, 2H), 1.85-1.96(m, 4H), 2.27-2.36(m, 2H), 3.14-3.18 (m, 2H), 3.883.90 (m, 2H), 4.94 (qui, J=7.32, 1H, CH), 6.97(d, J=8.94, 2H, ArH), 7.65(d, J=8.94, 2H, ArH), 7.80(s (br), 1H, NH), 7.83(s, 1H, CH).

¹³C NMR (DMSO.de): 23.91, 33.04, 49.89, 55.97, 66.96, 116.54, 119.28, 121.89, 130.84, 138.78, 148.11, 150.70, 152.48, 154.03

Příklad 6 ((2-Chlor-9-cyklopentyl-9H-purin-6-yl)-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)amin)

Výtěžek: 69 %. Elementární analýza: Vypočteno pro CziFUClNeO (412.92): C, 61.08; H, 6.10; N, 20.35. Nalezeno: C, 61.33; H, 5.99; N, 20.02. HPLC-MS (ESI+): 414.2 (99.5%). II NMR (CDCls): 1.78-1.82(m, 2H), 1.84-1.99 (m, 4H), 2.28-2.36 (m, 2H), 2.47-2.52 (m, 4H), 3.53 (s, 2H), 3.70-3.74 (m, 4H), 4.95 (qui, J= 5.4, 1H), 7.37(d, J=8.22, 2H, ArH), 7.74(d, J=8.22, 2H, ArH), 7.86(s, 1H, CH).

Příklad 7 (2-Chlor-9-cyklopentyl-9H-purin-6-yl)-[4-(4-ethylpiperazin-l-yl)-fenyl]amin)

Výtěžek: 82 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C22H28CIN7 (425.96): C, 62.03; H, 6.63; N, 23.02. Nalezeno: C, 61.93; H, 6.79; N, 23.22. HPLC-MS (ESI+): 427.3 (99.5%). Ή NMR (CDCI3): 1H NMR (CDC13): 1.16 (t, J=7.2, 3H, CH₃), 1.77-1.81 (m, 2H), 1.90-1.95 (m, 4H), 2.26-2.32 (m, 2H), 2.48 (q, J=7.02, 2H, CH₂), 2.62-2.66 (m, 4H), 3.21-3.25 (m, 4H), 4.91 (qui, J=6.9, 1H, CH), 6.97 (d, J=9.00, 2H, ArH), 7.63 (d, J=9.00, 2H, ArH), 7.80-7.83 (m, 2H, CH, NH). ¹³C NMR (CDCI3): 11.40, 17.90, 23.26, 32.42, 48.92, 51.82, 52.24, 55.28, 57.79, 116.15, 118.63, 121.18, 129.79, 138.06, 147.64, 150.01, 151.85, 153.40.

-28CZ 308029 B6

Příklad 8 (2-Chlor-9-cyklopentyl-9H-purin-6-yl)-[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)fenyl]amin)

Výtěžek: 74 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C21H23CIN6O (410.90): C, 61.38; H, 5.64; N, 20.45. Nalezeno: C, 61.14; H, 5.39; N, 20.19. HPLC-MS (ESI+): 411.9 (97.7%). II NMR (DMSO d-6): 1.67-1.72 (m, 2H), 1.84-1.99 (m, 4H), 2.11-2.18 (m, 2H), 2.45-2.50 (m, 4H), 4.70,472(m, 4H), 3.92-3.94 (m, 4H), 4.81 (qui, J= 5.4, 1H), 6.43(d, J=8.70, 2H, ArH), 7.53(d, J=8.70, 2H, ArH), 8.33(s, 1H, CH), 9.99(s, 1H, NH).

Příklad 9 (2-Chlor-9-cyklopentyl-9H-purin-6-yl)-(6-morfolin-4-ylpyridin-3-yl)amin

Výtěžek: 88 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C19H22CIN7O (399.88): C, 57.07; H, 5.55; N, 24.52. Nalezeno: C, 57.23; H, 5.21; N, 24.14. HPLC-MS (ESI+): 400.9 (99.5%). II NMR (DMSO.de): 1.79-1.83 (m, 2H), 1.85-1.96 (m, 4H), 2.27-2.36 (m, 2H), 3.14-3.18 (m, 2H), 3.883.90 (m, 2H), 4.91 (qui, J=6.55, 1H, CH), 6.93 (s, 1H, ArH), 7.41-7.47 (m, 2H, ArH), 7.98 (s, 1H), 8.25 (s(br), 1H, NH)

Obecný postup B přípravy látek 15

Směs bromoderivátu 14 (0.35 mmol), odpovídajícího sekundárního aminu (0.40 mmol), terč, butoxidu draselného (0.53 mmol), rac-BINAP (30 μιηοΐ), paládium bis(dibenzylideneacetonu) (15 μιηοΙ) v bezvodém toulenu (5.0 ml) se zahřívá v inertní atmosféře (argon) za stálého míchání v tlakové ampuli při teplotě 100 °C po dobu 10-48 hodin. Po ochlazení na laboratorní teplotu se reakční směs zfiltruje přes křemelinu, promyje toluenem a odpaří na rotační vakuové odparce. Odparek se rozdělí mezi vodu (15 ml) a ethylacetát (15 ml). Vodná fáze se ještě dvakrát extrahuje ethylacetátem. Spojené organické fáze se promyjí vodou, solankou a vysuší síranem sodným. Odpaří se na rotační vakuové odparce. Surový produkt se čistí kolonovou chromatografií na silikagelu za použití mobilní fáze o složení chloroform - methanol (19:1).

-29CZ 308029 B6

Příklad 10 [4-(2-Chlor-9-cyklopentyl-9H-purin-6-ylamino)fenyl]-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6yl)methanon

Výtěžek: 58 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C22H23CIN6O2 (438.91): C, 60.20; H, 5.28; N, 19.15. Nalezeno: C, 60.19; H, 5.14; N, 18.89. HPLC-MS (ESI+): 439.9 (95.9%). II NMR (DMSO d-6): 1.67-1.72 (m, 2H), 1.84-1.99 (m, 4H), 2.11-2.18 (m, 2H), 2.47-2.52 (m, 4H), 4.76 (qui, J= 5.5, 1H), 4.95-5.06 (m, 4H), 7.78 (d, J=8.90, 2H, ArH), 8.57 (d, J=8.90, 2H, ArH), 8.35 (s, 1H, CH), 9.92 (s, 1H, NH).

Substituce atomu chloru v poloze 2-purinového jádra byla prováděna reakcí s nadbytkem odpovídajícího primárního nebo sekundárního aminu v 1,2-ethandiolu za teploty 160 °C (viz

Schéma 5

Obecný postup přípravy látek (16):

Směs 2-chlor-9-cyklopentyl-9H-purin-6-substituovanéhoamino derivátu (15) (1.00 mmol) a odpovídajícího primárního nebo sekundárního aminu (10.0 mmol) v 1,2-ethandiolu (5,0 ml) se zahřívá za stálého míchání při teplotě 160 °C po dobu 4 hodin v inertní atmosféře (argon) v tlakové ampuli. Po ochlazení na laboratorní teplotu se reakční směs zředí ethylacetátem (40 ml) a promyje se vodou (40 ml). Organická fáze se promyje vodou, solankou, vysuší se síranem sodným a odpaří na rotační vakuové odparce. Surový produkt se čistí kolonovou chromatografií na silikagelu v soustavě chloroform - methanol (4:1, v/v).

-30CZ 308029 B6

Příklad 11 N²-(4-Aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)fenyl]9H-purin-2,6-diainin

Výtěžek: 82 %. Elementární analýza: Vypočteno pro CzvHseNsO (488.63): C, 66.37; H, 7.43; N, 22.93. Nalezeno: C, 66.11; H, 7.08; N, 22.69. HPLC-MS (ESI+): 489.7 (98.3%). Ή NMR (DMSO d-6): II NMR (DMSO d-6): 1.67-2.07 (m, 14H), 2.11-2.18 (m, 2H), 2.45-2.50 (m, 4H), 4.71-4.74 (_m, 4H), 3.92-3.94 (m, 4H), 4.83 (qui, J= 5.4, 1H), 5.48 (d, J=5.44, 1H, NH), 6.48 (d, J=8.50, 2H, ArH), 7.55 (d, J=8.50, 2H, ArH), 8.32 (s, 1H, CH), 9.95 (s, 1H, NH).

Příklad 12 (N²-(4-Aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-pyrrolidin-l-ylfenyl)-9H-purin-2,6diamin)

Výtěžek: 92 %. Elementární analýza: Vypočteno pro CVJEgNx (460.62): C, 67.80; H, 7.88; N, 24.33. Nalezeno: C, 67.71; H, 7.49; N, 24.01. HPLC-MS (ESI+): 461.7 (99.6%). Ή NMR (DMSO d-6): 1.17-1.38 (m, 2H), 1.74-2.06 (m, 14H), 2.20-2.24 (m, 4H), 2.75 (sep, J=4.26, 1H), 3.27-3.31 (m, 4H), 3.81 (sex, J=5.97, 1H), 4.69-4.79 (m, 2H), 6.56 (d, J=8.73, 2H, ArH), 7.36 (s(br), 1H, NH), 7.52 (s, 1H, CH), 7.58 (d, J=8.73, 2H, ArH).

Příklad 13 N²-(4-Aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin

Výtěžek: 88 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C24H34N8O (450.58): C, 63.97; H, 7.61; N, 24.87. Nalezeno: C, 64.11; H, 7.38; N, 24.59. HPLC-MS (ESI+): 451.8 (100.0%). II NMR (DMSO d-6): 1.39-1.45 (m, 2H), 1.54-1.59 (m, 2H), 1.65-1.69 (m, 2H), 1.87-2.10 (m, 6H), 2.58 (t, J=6.60, 2H), 2.97 (s(br), 2H, NH₂), 3.02-3.05 (m, 4H), 3.27 (q, J=6.36, 2H), 3.72-3.75 (m, 4H), 4.68 (qui, J=7.26, 1H), 6.86 (d, J=8.94, 2H, ArH), 7.81 (d, J= 8.94, 2H, ArH), 7.85 (s, 1H,

-31 CZ 308029 B6

CH), 9.14 (s(br), 1H, NH). ¹³C NMR (DMSO.d₆): 23.61, 26.20, 46.03, 49.14, 66.09, 69.05, 77.07,

115.24, 121.08, 132.87, 136.10, 146.16, 152.6, 158.76, 167.19, 168.40, 185.05

Příklad 14 N²-(4-aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶- [4-(4-ethylpiperazin-1 -yl)fenyl] -9H-purin-2,6diamin

Výtěžek: 92 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C26H39N9 (477.65): C, 65.38; Η, 8.23; N, 26.39. Nalezeno: C, 65.29; H, 7.89; N, 26.39. HPLC-MS (ESI+): 478.91 (96.7%). II NMR (DMSO d-6): 1.02 (t, J=7.11, 3H), 1.38-1.42 (m, 2H), 1.51-1.57 (m, 2H), 1.63-1.68 (m, 2H), 1.85-2.09 (m, 6H), 2.35 (q, J=7.11, 2H), 2.55 (t, J=7.26, 2H), 2.98 (s(br), 2H, NH₂), 3.03-3.06 (m, 4H), 3.22-3.29 (m, 6H), 4.67 (qui, J=7.62, 1H), 6.52 (t, J=5.94, 1H, NH), 6.85 (d, J=8.70, 2H, ArH), 7.80 (d, J=8.70, 2H, ArH), 7.85 (s, 1H), 9.11 (s(br), 1H, NH) ¹³C NMR (DMSO.de): 11.94, 23.62, 26.74, 31.69, 40.05, 46.28, 48.88, 51.56, 52.36, 54.28, 112.18, 115.43, 121.10, 132.43, 136.20, 146.23, 151.97, 158.81

Příklad 15 1 - Amino-3- {6- [4-(4-ethylpiperazin-1 -yl)fenylamino] -9-cyklopentyl-9H-purin-2ylamino }propan-2-ol

Výtěžek: 92 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C25H37N9O (479.62): C, 62.61; H, 7.78; N, 26.28. Nalezeno: C, 62.84; H, 7.52; N, 26.12. HPLC-MS (ESI+): 479.78 (97.5%). 1.01 (t, J=6.92, 3H), 1.81-1.85 (m, 2H), 1.89-1.96 (m, 4H), 2.27-2.36 (m, 2H), 2.37 (q, J=6.92, 2H), 2.53-2.66 (m, 4H), 2.72-2.75 (m, 2H), 2.78 (s(br), 2H, NH₂), 3.03-3.06 (m, 4H), 3.10 (t, J= 6.25, 2H), 3.183.22 (m, 4H), 4.02 (s(br), 1H, OH), 4.65 (qui, J=7.32, 1H), 6.94 (d, J=8.97, 2H, ArH), 7.54 (t, J=6.25, 1H, NH), 7.66 (d, J=8.97, 2H, ArH), 7.85 (s, 1H), 9.12 (s(br), 1H, NH)

Příklad 16 N²-(4-Aminocyklohexyl)- 9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)- 9H-purin-

2,6-diamin

Výtěžek: 94 %. Elementární analýza: Vypočteno pro CVIExNxO (490.64): C, 66.09; H, 7.81; N, 22.84. Nalezeno: C, 66.04; H, 7.59; N, 22.61. HPLC-MS (ESI+): 491.65 (98.2%). Ή NMR (CDCh): 1.14-1.28 (m, 4H), 1.77-1.81 (m, 2H), 1.81-1.86 (m, 4H), 1.88-1.96 (m, 4H), 2.26-2.38 (m, 2H), 2.48 (sep, J = 3.65, 1H), 3.02 (s (br), 2H, NH₂), 3.19-3.21 (m, 4H), 3.48 (sex, J=5.25, 1H), 3.55 (s, 2H), 3.73-3.76 (m, 4H), 3.87 (m, 4H), 4.95 (qui, J= 5.7, 1H), 7.64 (d, J=7.95, 2H, ArH), 7.82 (d, J=7.95, 2H, ArH), 7.91 (s, 1H, CH). ¹³C NMR (DMSO_d₆): 11.94, 23.62, 26.74, 31.69, 40.05, 46.28, 48.88, 51.56, 52.36, 54.28, 112.18, 115.43, 121.10, 132.43, 136.20, 146.23, 151.97, 158.81

-32CZ 308029 B6

Příklad 17 (9-Cyklopentyl-2-morfolin-4-yl-9H-purin-6-yl)-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)ainin

Výtěžek: 96 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C25H33N7O2 (463.58): C, 64.77; H, 7.18; N, 21.15. Nalezeno: C, 64.69; H, 7.01; N, 21.42. HPLC-MS (ESI+): 465.69 (99.8%). Ή NMR (DMSO d-6): 1.02 (t, J=7.11, 3H), 1.38-1.42 (m, 2H), 1.51-1.57 (m, 2H), 1.63-1.68 (m, 2H), 1.85-2.09 (m, 6H), 2.35 (q, J=7.11, 2H), 2.55 (t, J=7.26, 2H), 2.98 (s(br), 2H, NH₂), 3.03-3.06 (m, 4H), 3.22-3.29 (m, 6H), 4.67 (qui, J=7.62, 1H), 6.52 (t, J=5.94, 1H, NH), 6.85 (d, J=8.70, 2H, ArH), 7.80 (d, J=8.70, 2H, ArH), 7.85 (s, 1H), 9.11 (s(br), 1H, NH)

Příklad 18 [9-Cyklopentyl-2-(4-methylpiperazin-l-yl)-9H-purin-6-yl]-(4-morfolin-4ylmethylfenyl)amin

Výtěžek: 96 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C25H33N7O2 (476.62): C, 65.52; H, 7.61; N, 23.51. Nalezeno: C, 65.74; H, 7.92; N, 23.37. HPLC-MS (ESI+): 478.83 (99.7%). Ή NMR (DMSO d-6): 1.10 (s, 3H), 1.62-1.69 (m, 2H), 1.87-1.93 (m, 4H), 1.96-2.03 (m, 2H), 2.15-2.17 (m, 4H), 2.31-2.35 (m, 4H), 3.13-3.15 (m, 4H), 3.69-3.72 (m, 4H), 3.87-3.90 (m, 4H), 4.25 (s, 2H), 4.69 (qui, J=6.89, 1H), 7.31 (d, J=7.89, 2H, ArH), 7.91 (s, 1H), 8.06 (d, J= 7.89, 2H, ArH)

Příklad 19 (9-Cyklopentyl-2-piperidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)amin

Výtěžek: 96 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C26H35N7O (461.60): C, 67.65; H, 7.64; N, 21.24. Nalezeno: C, 67.29; H, 7.38; N, 21.03. HPLC-MS (ESI+): 463.78 (99.7%). II NMR (DMSO d-6): 1.32-1.38 (m, 2H), 1.62-1.69 (m, 2H), 1.87-1.93 (m, 4H), 1.96-2.03 (m, 2H), 2.152.12 (m, 8H), 2.31-2.35 (m, 4H), 3.13-3.15 (m, 4H), 3.69-3.72 (m, 4H), 4.23 (s, 2H), 4.69 (qui, J=6.75, 1H), 7.27 (d, J=8.02, 2H, ArH), 7.83 (s, 1H), 8.93 (d, J= 8.02, 2H, ArH)

-33CZ 308029 B6

Příklad 20 N²-(6-Aminohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6diamin

Výtěžek: 74 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C27H40N8O (492.66): C, 65.82; H, 8.18; N, 22.74. Nalezeno: C, 65.96; H, 8.02; N, 22.64. HPLC-MS (ESI+): 493.93 (99.4%). II NMR (DMSO d-6): 1.25-1.34 (m, 8H), 1.51-1.57 (m, 2H), 1.63-1.70 (m, 2H), 1.87-2.09 (m, 4H), 2.312.35 (t, J=6.75, 2H, NH₂), 3.26 (q, J= 6.75, 2H, CH₂), 3.39 (s, 2H, CH₂), 3.53-3.59 (m, 4H), 4.69 (qui, J=6.96, 1H, CH), 6.62 (t, J=6.18, 1H, NH), 7.17 (d, J=8.25, 2H, ArH), 7.88 (s, 1H, CH), 7.95 (d, J=8.25, 2H, ArH), 9.32 (s(br), 1H, NH)

Příklad 21 N²-(5-Aminopentyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6diamin

Výtěžek: 74 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C26H38N8O (478.63): C, 65.24; H, 8.00; N, 23.14. Nalezeno: C, 65.56; H, 8.05; N, 22.92. HPLC-MS (ESI+): 479.90 (99.7%). Ή NMR (DMSO-d₆): 1.33-1.44 (m, 4H), 1.52-1.56 (m, 2H), 1.63-1.70 (m, 2H), 1.87-2.35 (m, 8H), 2.312.34 (m, 4H), 2.53 (t, J=6.42, 2H, NH₂), 3.26 (q, J= 6.42, 2H, CH₂), 3.40(s, 2H, CH₂), 3.55-3.58 (m, 4H), 4.69 (qui, J=7.80, 1H, CH), 6.60 (t, J=4.89, 1H, NH), 7.18 (d, J=8.40, 2H, ArH), 7.88 (s, 1H, CH), 7.95 (d, J=8.40, 2H, ArH), 9.33 (s(br), 1H, NH)

Příklad 22 N²-(4-Aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3-yl)-9H-purin-

2,6-diamin

Výtěžek: 94 %. Elementární analýza: Vypočteno pro C25H35N9O (477.61): C, 62.87; H, 7.39; N, 26.39. Nalezeno: C, 62.61; H, 7.11; N, 26.02. HPLC-MS (ESI+): 478.57 (98.2%). II NMR (CDCI3): 1.29-1.49 (m, 4H), 1.77-1.79 (m, 2H), 1.97-2.04 (m, 4H), 2.21-2.26 (m, 6H), 2.86 (sep, J= 5.26, 1H), 3.14-3.18 (m, 4H), 3.83 (sex, J=4.02, 1H), 3.88-3.91 (m, 4H), 4.73 (qui, J= 5.74, 1H), 4.86 (d, J= 4.02, 1H, NH), 6.91 (s, Ih, ArH), 7.46-7.49 (m, 2H, ArH), 8.02 (s, 1H), 8.26 (s(br), 1H, NH)

-34CZ 308029 B6

Příklad 23 (9-Cyklopentyl-2-morfolin-4-yl-9H-purin-6-yl)-(6-morfolin-4-ylpyridin-3-yl)amin

Výtěžek: 87 %. Elementární analýza: Vypočteno pro CzsHsoNsO (450.54): C, 61.31; H, 6.71; N, 24.87. Nalezeno: C, 61.54; H, 6.48; N, 24.26. HPLC-MS (ESI+): 451.57 (97.6%). Ή NMR (CDCh): 1.78-1.80 (m, 2H), 1.96-2.02 (m, 4H), 2.19-2.23 (m, 2H), 3.14-3.22 (m, 8H), 3.88-3.91 (m, 4H), 4.71 (qui, J= 5.26, 1H), 6.86 (s, 1H, ArH), 7.43-7.47 (m, 2H, ArH), 8.01 (s, 1H), 8.32 (s(br), 1H, NH)

Příklad 24 N²-(4-Amino-butyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6diamin

Výtěžek: 85 %. Elementární analýza: Vypočteno pro CzsHseNsO (464,61): C, 64.63; H, 7.81; N, 24.12. Nalezeno: C, 64.47; H, 7.43; N, 23.88. HPLC-MS (ESI+): 465.8 (96.7%). II NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 1.38-1.66 (m, 6H), 1.87-1.92 (m, 6H), 2.07-2.09 (m, 4H), 2.53 (t, J=6.78,2H), 3.17 (q, J=6.39, 2H), 3.30 (s, 2H), 3.39-3.55 (m, 4H), 4.69 (qui, J=7.11, 1H), 6.64 (t, J=5.34, 1H), 7.18 (d, J=8.28, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.95 (d, J=8.28, 2H), 9.34 (s (br), 1H)

-35CZ 308029 B6

Tabulka 2. Příklady látek připravených podle obecných postupů A a B přípravy látek (15).

Číslo	NÁZEV SLOUČENINY	ELEMENTÁRNÍ ANALÝZA	MS (ZMD)
		Vypočteno./Nalezeno [%]	[M-H]-	[M+H]⁺
1	N²-(4-aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4morfolin-4-yl-fenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 65.52/65.41; H, 7.61/7.36; N 23.51/23.25	475.64	477.55
2	N²-(4-aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4piperazin-l-ylmethyl-(fenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 66.23/66.18; H, 8,03/8.29; N, 25.74/25.65	488.59	490.62
3	{4-[2-(4-aminocyklohexylamino)-9-cyklopentyl9H-purin-6-ylamino] -fenyl} -(4-methylpiperazin-1 yl)methanon	C, 64.96/64.78; H, 7.59/7.64; N, 24.35/24.48	516.54	518.72
4	N²-(4-aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(4ethyl-piperazin-1 -yl)pyridin-3-yl] -9H-purin-2,6diamin	C, 66.23/66.38; H 8.03/8.15; N, 25.74/25.62	488.41	490.78
5	N²-(4-aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(2oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-ylmethyl)-pyridin- 3yl]- 9H-purin-2,6-diamin	C, 64.39/64.21; H, 7.40/7.56; N, 25.03/25.14	502.43	505.68
6	{5-[2-(4-aminocyklohexylamino)-9-cyklopentyl9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl}-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 62.77/62.64; H, 7.02/7.14; N, 27.11/27.26	515.48	517.52
7	4- {9-cyklopentyl-6- [4-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3 ]hept-2-yl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} cyklohexanol	C, 66.91/66.78; H, 7.62/7.47; N, 22.29/22.41	501.62	503.48
8	4-{9-cyklopentyl-6-[4-(6-ethyl-2,6-diazaspiro- [3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino]-9H-purin-2ylamino} cyklohexanol	C, 67.90/67.74; H, 7.98/7.82; N, 21.11/21.26	529.81	531.64
9	{4-[2-(4-hydroxycyklohexylamino)-9-cyklopentyl- 9H-purin-6-ylamino]fenyl}morfolin-4-ylmethanon	C, 64.14/64.02; H 6.98/6.74; N 19.39/19.04	504.61	506.72
10	4-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3- ylamino) -9H-purin-2-ylamino] cyklohexanol	C, 62.74/62.47; H 7.16/7.36; N 23.41/23.56	477.52	479.81
11	4-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin- 3 -ylamino) -9H-purin-2-ylamino] cyklohexanol	C, 63.39/63.52; H 7.37/7.36; N 22.75/23.01	491.58	493.72
12	{5-[2-(4-hydroxycyklohexylamino)-9-cyklopentyl9H-purin-6-ylamino] pyridin-2-yl} morfolin-4-ylmethanon	C, 61.64/61.48; H 6.76/6.48; N 22.12/22.00	505.61	507.63
13	N²-(2-aminoethyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin- 4-yl-fenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 62.54/62.65; H, 7.16/7.27; N, 26.52/26.38	422.47	424.58
14	N²-(2-aminoethyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-piperazin- l-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 63.42/63.56; H, 7.64/7.52; N, 28.94/28.79	434.53	436.33
15	{4-[2-(2-aminoethylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]fenyl} (4-methylpiperazin-1 -yl)methanon	C, 62.18/62.29; H, 7.18/7.31; N, 27.19/27.38	462.34	464.52
16	N²-(2-aminoethyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(4-ethylpiperazin-l-yl)-pyridin-3-yl]-9H-purin-2,6-diamin	C, 61.31/61.47; H, 7.61/7.53; N, 31.09/31.19	449.52	451.63
17	N²-(2-aminoethyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(2-oxa-6aza-spiro[3.3]hept-6-ylmethyl)pyridin-3-yl]-9Hpurin-2,6-diamin	C, 61.45/61.59; H, 6.95/6.78; N, 28.04/28.14	448.31	450.57
18	{5-[2-(2-aminoethylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 59.72/59.64; H, 6.54/6.37; N, 30.28/30.17	461.35	463.74
19	N²-(3-aminopropyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(6-	C, 65.05/65.13; H,	460.54	462.37

-36CZ 308029 B6

	methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)fenyl]-9H- purin-2,6-diamin	7.64/7.52; N, 27.31/27.47
20	N²-(3-aminopropyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(6-ethyl- 2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenyl]-9Hpurin-2,6-diamin	C, 66.23/66.37; H, 8.03/8.18; N, 25.74/25.63	488.47	490.55
21	{4-[2-(3-aminopropylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]fenyl}morfolin-4-yl-methanon	C, 62.05/61.98; H, 6.94/7.12; N, 24.12/24.32	463.64	465.71
22	N²-(3-aminopropyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(6- morfolin-4-yl-pyridin-3-yl)-9H-purin-2,6-diainin	C, 60.39/60.59; H, 7.14/7.28; N, 28.81/29.02	436.50	438.49
23	N²-(3-aminopropyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(6morfolin-4-ylmethylpyridin-3-yl-9H-purin-2,6diamin	C, 61.18/61.41; H, 7.37/7.20; N, 27.92/27.74	450.60	452.49
24	{5-[2-(3-aminopropylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]pyridin-2-yl} morfolin-4-ylmethanon	C, 59.34/59.17; H, 6.71/6.54; N, 27.08/27.19	464.23	466.39
25	N²-(4-aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-piperazinl-yl-fenyl)-9H-purin-2,6-diainin	C, 64.11/64.21; H, 7.85/7.73; N, 28.04/28.18	448.61	450.76
26	N²-(4-aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(4methylpiperazin-l-ylmethyl)fenyl]-9H-purin-2,6diamin	C, 65.38/65.44; H, 8.23/8.37; N 26.39/26.47	476.53	478.74
27	{4- [2-(4-aminobutylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]fenyl} -(4-methylpiperazin-1 -yl)methanon	C, 63.52/63.74; H, 7.59/7.41; N, 25.64/25.44	490.61	492.55
28	N²-(4-aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(2-oxa-6aza-spiro[3.3]hept-6-yl)pyridin-3-yl]-9H-purin2,6-diamin	C, 62.18/62.22; H, 7.18/7.31; N, 27.19/27.32	462.58	464.71
29	N²-(4-aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(2-oxa-6aza-spiro[3.3]hept-6-ylmethyl)pyridin-3-yl]-9Hpurin-2,6-diamin	C, 62.87/62.72; H, 7.39/7.44; N, 26.39/26.51	476.67	478.74
30	{5- [2-(4-aminobutylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 61.20/61.35; H, 6.99/6.82; N, 28.55/28.42	489.52	491.48
31	N²-(5-aminopentyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(2,6diazaspiro[3.3]hept-2-yl)fenyl]-9H-purin-2,6diamin	C, 65.66/65.47; H, 7.84/7.71; N, 26.50/26.43	474.67	476.51
32	N²-(5-aminopentyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(6methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenyl]9H-purin-2,6-diainin	C, 66.77/66.62; H, 8.20/8.37; N, 25.03/25.11	502.78	504.56
33	{4-[2-(5-aminopentylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]fenyl}-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 65.51/65.42; H, 7.77/7.64; N, 23.71/23.58	530.66	532.89
34	N²-(5-aminopentyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(6-morfolin- 4-yl-pyridin-3-yl)-9H-purin-2,6-diainin	C, 61.91/62.11; H, 7.58/7.63; N, 27.07/27.39	464.61	466.72
35	N²-(5-aminopentyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(6-morfolin- 4-ylmethyl- pyridin-3-yl-9H-purin-2,6-diamin	C, 62.61/62.41; H, 7.78/7.49; N, 26.28/26.18	478.53	480.54
36	{5- [2-(5-aminopentylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -morfolin-4-ylmethanon	C, 60.83/60.94; 7.15/6.92; 25.54/25.74	492.58	494.59
37	N²-(6-ammohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin- 4-yl-fenyl)-9H-purin-2,6-diainin	C, 65.24/64.99; 8.00/7.87; 23.41/23.09	477.63	479.52
38	N²-(6-ammohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin- 4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 65.82/65.68; H, 8.18/8.25; N, 22.74/22.58	491.55	493.73
39	{4-[2-(6-aminohexylamino)-9-cyklopentyl-9Hpuri n-6-y lanii no \| feny 1} pi pcrazi n-1 -ylmethanon	C, 64.13/64.25; H, 7.77/7.63; N, 24.93/24.82	504.88	506.67

-37CZ 308029 B6

40	N²-(6-aminohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(4methylpiperazin-1 -yl)pyridin-3-yl] -9H-purin-2,6diamin	C, 63.39/63.24; H, 8.18/8.27; N, 28.43/28.55	491.59	493.75
41	N²-(6-aminohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[6-(4-ethylpiperazin-l-ylmethyl)pyridin-3-yl]-9H-purin-2,6diamin	C, 64.58/64.41; H, 8.52/8.64; N, 26.90/26.79	519.65	521.76
42	{5-[2-(6-aminohexylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino] -pyridin-2-yl )-(2,6diazaspiro [3.3 ]hept-2-yl) -methanon	C, 62.52/62.37; H, 7.38/7.46; N, 27.01/27.17	517.54	519.63
43	(9-cyklopentyl-2-morfolin-4-yl-9H-purin-6-yl)-[4- (6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-fenyl]amin	C, 65.80/65.67; H, 7.22/7.34; N, 23.61/23.48	473.72	475.49
44	(9-cyklopentyl-2-morfolin-4-yl-9H-purin-6-yl)-(4- morfolin-4-ylmethylfenyl)amin	C, 64.77/64.69; H, 7.18/7.01; N, 21.15/21.42	463.71	465.69
45	[4-(9-Cyklopentyl-2-morfolin-4-yl-9H-purin-6- ylamino) -fenyl] -morfolin-4-yl-methanon	C, 62.88/62.74; H 6.54/6.76; N 20.53/20.14	476.51	478.62
46	(9-cyklopentyl-2-morfolin-4-yl-9H-purin-6-yl)-(6- morfolin-4-ylpyridin-3-yl)-amin	C, 61.31/61.54; H, 6.71/6.48; N, 24.87/24.26	449.49	451.57
47	(9-Cyklopentyl-2-morfolin-4-yl-9H-purin-6-yl)-(6- morfolin-4-ylmethylpyridin-3-yl)-amin	C, 62.05/62.12; H, 6.94/6.78; N, 24.12/24.23	463.67	465.61
48	[5-(9-Cyklopentyl-2-morfolin-4-yl-9H-purin-6- ylamino)-pyridin-2-yl] -piper azin-1 -yl-methanon	C, 60.36/60.45; H, 6.54/6.48; N, 26.40/26.55	476.42	478.51
49	9-cyklopentyl-2-piperazin-l-yl-9H-purin-6-yl)-[4- (4-methyl-piperazin-1 -yl)fenyl] amin	C, 65.05/65.21; H, 7.64/7.52; N, 27.31/27.43	460.72	462.57
50	(9-Cyklopentyl-2-piperazin-1 -yl-9H-purin-6-yl)[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-ylmethyl)fenyl]amin	C, 65.80/65.69; H, 7.22/7.14; N, 23.61/23.48	473.49	475.52
51	[4-(9-Cyklopentyl-2-piperazin-1 -yl-9H-purin-6ylamino)-fenyl]-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 64.65/64.53; H, 7.03/7.18; N, 25.13/25.28;	500.57	502.53
52	(9-Cyklopentyl-2-piperazin-1 -yl-9H-purin-6-yl)- [6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3-yl]amin	C, 62.59/62.44; H, 7.00/7.11; N, 30.41/30.28	459.61	461.55
53	(9-Cyklopentyl-2-piperazin-1 -yl-9H-purin-6-yl)[6-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-yl]amin	C, 63.91/63.83; H, 7.43/7.57; N, 28.67/28.79	487.71	489.55
54	[5-(9-Cyklopentyl-2-piperazin-1 -yl-9H-purin-6ylamino)-pyridin-2-yl]-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3 ]hept-2-yl)methanon	C, 62.77/62.83; H, 7.02/7.17; N, 27.11/27.23	515.72	517.61
55	[9-cyklopentyl-2-(4-methylpiperazin-1 -yl)-9H- purin-6-yl]-(4-morfolin-4-yl-fenyl)amin	C, 64.91/65.12; H, 7.41/.7.50; N 24.22/24.56	461.60	463.58
56	[9-cyklopentyl-2-(4-methylpiperazin-1 -yl)-9Hpurin-6-yl]-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl)amin	C, 65.52/65.74; H, 7.61/7.92; N, 23.51/23.37	476.91	478.83
57	{4- [9-Cyklopentyl-2-(4-methylpiperazin-1 -yl)-9Hpurin-6-ylamino]fenyl} -morfolin-4-yl-methanon	C, 63.65/63.58; H, 6.99/6.83; N, 22.84/22.73	489.72	491.49
58	[9-Cyklopentyl-2-(4-methylpiperazin-1 -yl)-9Hpurin-6-yl]-(6-piperazin-l-yl-pyridin-3-yl)amin	C, 62.31/62.43; H, 7.41/7.53; N, 30.28/30.37	461.48	463.53
59	[9-Cyklopentyl-2-(4-methylpiperazin-1 -yl)-9Hpurin-6-yl] - [6-(4-methylpiperazin-1 -ylmethyl)pyridin-3-yl]amin	C, 63.65/63.57; H, 7.81/7.92; N, 28.55/28.69	489.74	491.71
60	{5- [9-Cyklopentyl-2-(4-methylpiperazin-1 -yl)-9Hpurin-6-ylamino] -pyridin-2-yl} -(4-ethylpiperazinl-yl)methanon	C, 62.52/62.43; H, 7.38/7.52; N, 27.01/27.20	517.57	519.54
61	(9-cyklopentyl-2-piperidin-l-yl-9H-purin-6-yl)-[4-	C, 67.95/67.82; H,	458.51	460.63

-38CZ 308029 B6

	(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)-fenyl]amin	7.24/7.37; N, 21.33/21.50
62	(9-Cyklopentyl-2-piperidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)[4-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenyl]amin	C, 69.10/69.32; H, 7.87/7.94; N, 23.03/23.24	485.59	487.73
63	[4-(9-Cyklopentyl-2-piperidin-1 -yl-9H-purin-6ylamino) -fenyl] -morfolin-4-yl-methanon	C, 65.66/65.42; H 6.99/6.71; 20.62/20.87	474.60	476.52
64	(9-Cyklopentyl-2-piperidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)[6-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3-yl]amin	C, 65.93/65.78; H, 7.45/7.61; N, 26.62/26.74	472.56	474.67
65	(9-Cyklopentyl-2-piperidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)[6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-yl]amin	C, 67.04/67.21; H, 7.84/7.93; N, 25.13/25.02	500.64	502.84
66	[5-(9-Cyklopentyl-2-piperidin-1 -yl-9H-purin-6ylamino) -pyridin-2-yl] -morfolin-4-yl-methanon	C, 63.01/62.87; 6.77/6.45; 23.51/23.11	475.61	477.63
67	1 - {9-cyklopentyl-6- [4-(4-ethylpiperazin-1 yl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino }propan-2-ol	C, 62.61/62.84; H, 7.78/7.52; N, 26.28/26.12	477.76	479.78
68	1 - [9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino)-9H-purin-2-ylamino]propan-2-ol	C, 63.84/63.78; H, 7.37/7.29; N, 21.71/21.67	450.49	452.63
69	{l-[2-(2-hydroxypropylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino]fenyl} -piperazin-1 -yl-methanon	C, 62.05/62.14; H, 6.94/6.87; N, 24.12/24.23	463.51	465.71
70	1 - {9-cyklopentyl-6- [6-(4-methylpiperazin-1 -ylpyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino }propan-2ol	C, 61.17/61.31; H, 7.37/7.52; N, 27.92/27.71	450.41	452.63
71	1 - {9-cyklopentyl-6- [6-(4-ethylpiperazin-1 -ylmethyl)pyridin-3 -ylamino] -9H-purin-2-ylamino} propan-2-ol	C, 62.61/62.83; H, 7.78/7.65; N, 26.28/26.41	478.69	480.55
72	{5-[2-(2-hydroxypropylamino)-9-cyklopentyl-9Hpurin-6-ylamino] -pyridin-2-yl} -(2,6-diazaspiro- [3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 60.36/60.22; H, 6.54/6.72; N, 26.40/26.63	476.44	478.71
73	2- {9-cyklopentyl-6- [4-(2-oxa-6-azaspiro[3. 3]hept6-yl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} butan-1 -ol	C, 64.77/64.56; H, 7.18/7.24; N, 21.15/21.34	462.63	464.49
74	2- {9-cyklopentyl-6- [4-(6-methyl-2,6-diazaspiro- [3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino]-9H-purin-2-ylamino }butan-1 -ol	C, 66.09/66.24; H, 7.81/7.97; N, 22.84/22.73	489.51	491.57
75	{4- [2-( 1 -hydroxymethylpropylamino)-9-cyklopentyl-9H-purin-6-ylamino] fenyl} -(6-ethyl-2,6diazaspiro [3.3] hept-2-yl) -methanon	C, 66.09/65.82; H, 7.81/8.06; N, 22.84/22.51	489.60	491.72
76	2-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3- ylamino)-9H-purin-2-ylamino] butan-1 -ol	C, 61.04/61.32; H 7.13/6.99; N 24.76/24.55	451.62	453.55
77	2- [9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin- 3- ylamino)-9H-purin-2-ylamino]butan-1 -ol	C, 61.78/61.42; H 7.34/7.52; N 24.02/23.74	465.51	467.63
78	{5- [2-( 1 -hydroxymethylpropylamino)-9-cyklopentyl-9H-purin-6-ylamino] -pyridin-2-yl} morfolin-4-yl-methanon	C, 59.98/59.85; H 6.71/7.11; N 23.32/23.02	479.55	481.63
79	(9-cyklopentyl-2-pyrrolidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)- (4-morfolin-4-yl-fenyl)-amin	C, 66.49/66.62; H, 7.21/7.39; N, 22.61/22.82; O, 3.69/3.81	432.53	434.72
80	(9-cyklopentyl-2-pyrrolidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)- [4-(4-methyl-piperazin-1 -ylmethyl)fenyl] amin	C, 67.80/67.61; H, 7.88/7.64; N, 24.33/24.41	459.73	461.67
81	[4-(9-cyklopentyl-2-pyrrolidin-1 -yl-9H-purin-6ylamino)-fenyl]-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)methanon	C, 65.94/65.73; H, 6.60/6.43; N, 20.70/20.56; O, 6.76/6.53	472.44	474.63
82	(9-cyklopentyl-2-pyrrolidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)-	C, 65.05/65.23; H,	460.52	462.74

-39CZ 308029 B6

	[6-(4-ethyl-piperazin-1 -yl)pyridin-3-yl] -amin	7.64/7.41; N, 27.31/27.16
83	(9-cyklopentyl-2-pyrrolidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)[6-(4-ethyl-piperazin-1 -ylmethyl)pyridin-3-yl] amin	C, 65.66/65.78; H, 7.84/7.67; N, 26.50/26.39	474.40	476.53
84	[5-(9-cyklopentyl-2-pyrrolidin-1 -yl-9H-purin-6ylamino)-pyridin-2-yl] -(4-ethylpiperazin-1 -yl)methanon	C, 63.78/63.62; H, 7.21/7.37; N, 25.75/25.89; O, 3.27/3.43	488.54	490.77
85	2-{9-cyklopentyl-6-[4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2yl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} cyklopentanol	C, 65.80/65.67; H, 7.22/7.38; N, 23.61/23.79; O, 3.37/3.51	473.48	475.72
86	2-{9-cyklopentyl-6-[4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2ylmethyl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} cyklopentanol	C, 66.37/66.21; H, 7.43/7.57; N, 22.93/22.78; 0,3.27/3.15	487.71	489.52
87	{4- [9-cyklopentyl-2-(2-hydroxycyklopentylamino)-9H-purin-6-ylamino] -fenyl} -(6-methyl2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)methanon	C, 65.09/65.21; H, 7.02/7.18; N, 21.69/21.82; O, 6.19/6.31	515.69	517.71
88	2-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3- ylamino) -9H-purin-2-ylamino] cyklopentanol	C, 62.05/62.36; H 6.94/6.78; N 24.12/24.02	463.55	465.63
89	2-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]cyklopentanol	C, 62.74/62.41; H 7.16/6.99; N 23.41/23.66	477.60	479.62
90	{5- [9-cyklopentyl-2-(2-hydroxycyklopentylamino)-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl} morfolin-4-yl-methanon	C, 60.96/60.81; H, 6.55/6.43; N, 22.75/22.88; O, 9.74/9.62	491.43	493.49
91	3-[9-cyklopentyl-6-(4-piperazin-l-yl-fenylamino)- 9H-purin-2-ylamino]cyklopentanol	C, 64.91/64.78; H, 7.41/7.33; N, 24.22/24.41; O, 3.46/3.59	461.47	463.65
92	3- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-methylpiperazin-1 -ylmethyl) -fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} cyklopentanol	C, 66.09/66.18; H, 7.81/7.95; N, 22.84/22.67; 0,3.26/3.18	489.58	491.73
93	{4-[9-cyklopentyl-2-(3-hydroxycyklopentylamino)-9H-purin-6-ylamino]fenyl} -(4-ethylpiperazin-1 -yl)methanon	C, 64.84/64.93; H, 7.38/7.22; N, 21.60/21.48; O, 6.17/6.26	517.55	519.74
94	3-{9-cyklopentyl-6-[6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2yl)-pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} cyklopentanol	C, 63.14/63.23; H, 6.99/6.73; N, 26.51/26.43; O, 3.36/3.54	474.52	476.55
95	3-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-ylaminoamino]9H-purin-2-ylamino} cyklopentanol	C, 64.39/64.27; H, 7.40/7.59; N, 25.03/25.17; O, 3.18/3.27	502.74	504.57
96	{5-[9-cyklopentyl-2-(3-hydroxycyklopentylamino)-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -(6ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 63.26/63.34; H, 7.01/7.23; N, 23.71/23.54	530.53	532.59
97	{1 - [9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)9H-purin-2-yl]piperidin-2-yl} -methanol;	C, 65.39/65.19; H, 7.39/7.15; N, 20.53/20.64	476.61	478.62
98	{1 - [9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino)-9H-purin-2-yl]piperidin-2-yl} -methanol	C, 65.96/65.82; H 7.59/7.25; N, 19.94/20.12	490.52	492.82
99	{4- [9-cyklopentyl-2-(2-hydroxymethylpiperidin-1 yl)-9H-purin-6-ylamino] fenyl} -morfolin-4-ylmethanon	C, 64.14/64.12; H 6.98/7.12; N, 19.39/19.52	504.72	506.75
100	{l-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3- ylamino)-9H-purin-2-yl]piperidin-2-yl} -methanol	C, 62.74/62.65; H, 7.16/7.27; N, 23.41/23.57	477.51	479.67
101	{1 - [9-cyklopentyl-6-(6-piperazin-1 -ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-yl]piperidin-2-yl} methanol	C, 63.52/63.43; H, 7.59/7.48; N, 25.64/25.49	490.59	492.73

-40CZ 308029 B6

102	{5- [9-cyklopentyl-2-(2-hydroxymethylpiperidin-1 yl)-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl}-(4-ethylpiperazin-1 -yl)-methanon	C, 63.02/63.17; H, 7.37/7.43; N, 23.62/23.54	532.59	534.71
103	2-(l-{9-cyklopentyl-6-[4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-fenylamino] -911-puri n-2-y 1} pipcridi n2-yl)ethanol	C, 66.90/66.82; H, 7.62/7.74; N, 22.29/22.41	501.69	503.54
104	2- {1 - [9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino) -9H-purin-2-yl] -piperidin-2-yl} ethanol	C, 66.51/66.82; H 7.77/7.52; N, 19.39/19.22	504.63	506.71
105	(4- {9-cyklopentyl-2- [2-(2-hydroxyethyl)piperidin- 1 -yl] -9H-purin-6-ylamino} fenyl)-morfolin-4-ylmethanon	C, 64.72/64.98; H, 7.18/7.32; N 18.87/18.95	518.45	520.74
106	2-{ l-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylpyridin-3ylamino) -9H-purin-2-yl]piperidin-2-yl} ethanol	C, 63.39/63.58; H, 7.37/7.54; N, 22.75/22.46	491.63	493.62
107	2-{ l-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin-3-ylainino)-9H-purin-2-yl]piperidin-2-yl} ethanol	C, 64.01/64.13; H, 7.56/7.43; N, 22.12/22.09	505.57	507.62
108	(5- {9-cyklopentyl-2- [2-(2-hydroxyethyl)piperidinl-yl]-9H-purin-6-ylamino}pyridin-2-yl)-piperazin1-yl-methanon	C, 62.41/62.55; H, 7.18/7.29; N, 24.26/24.17	518.59	520.61
109	2- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-methylpiperazin-1 -yl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} ethanol	C, 63.26/63.37; H, 7.39/7.45; N, 25.67/25.59	435.48	437.61
110	2- {9-cyklopentyl-6- [4-(2-oxa-6-azaspiro[3. 3]hept- 6-ylmethyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} ethanol	C, 64.12/64.23; H, 6.95/6.73; N, 21.81/21.75	448.61	450.66
111	{4- [9-cyklopentyl-2-(2-hydroxyethylamino)-9Hpurin-6-ylamino]fenyl}-(2,6-diazaspiro[3.3]hept2-yl)-methanon	C, 62.32/62.45; H, 6.54/6.42; N, 24.23/24.50	461.51	463.60
112	2-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3-yl- amino)-9H-purin-2-ylamino]ethanol	C, 59.42/59.12; H, 6.24/6.55; N 26.40/26.12	423.50	425.52
113	2-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethyl- pyridin-3 -ylamino)-9H-purin-2-ylamino] ethanol	C, 60.26/59.85; H, 6.24/6.25; N, 24.76/24.55	437.50	439.52
114	{5- [9-cyklopentyl-2-(2-hydroxyethylamino)-9Hpurin-6-ylamino] -pyridin-2-yl} -morfolin-4-ylmethanon	C, 58.39/58.69; H, 6.24/6.53; N, 24.76/24.63	451.62	453.52
115	3-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)- 9H-purin-2-ylamino] propan-1 -ol	C, 63.14/62.88; H, 7.14/6.95; N, 22.41/22.13	436.52	438.62
116	3-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl- amino)-9H-purin-2-ylamino]propan-1 -ol	C, 63.84/63.56; H, 7.37/3.18; N 21.71/21.95	450.55	452.62
117	{4-[9-cyklopentyl-2-(3-hydroxypropylamino)-9H- purin-6-ylamino]fenyl} -morfolin-4-yl-methanon	C, 61.92/61.78; H, 6.71/6.93; N, 21.06/21.22	464.59	466.48
118	3-[9-cyklopentyl-6-(6-piperazin-l-yl-pyridin-3-yl- amino)-9H-purin-2-ylamino]propan-1 -ol	C, 60.39/60.22; H, 7.14/7.31; N, 28.81/28.66	436.41	438.67
119	3- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-methylpiperazin-1 -ylmethyl)-pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} propan-l-ol	C, 61.91/61.78; H, 7.58/7.44; N, 27.08/27.24	464.52	466.63
120	{5-[9-cyklopentyl-2-(3-hydroxypropylamino)-9Hpurin-6-ylamino] -pyridin-2-yl} -(4-ethylpiperazinl-yl)-methanon	C, 60.83/60.72; H, 7.15/7.29; N, 25.54/25.43	492.69	494.55
121	3-{9-cyklopentyl-6-[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept- 6-yl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} butan-1 -ol	C, 64.77/64.56; H, 7.18/7.26; N, 21.15/21.24	464.47	462.58
122	3-{9-cyklopentyl-6-[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept- 6-ylmethyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} butan-l-ol	C, 65.39/65.12; H, 7.39/7.26; N, 20.53/20.78	476.12	478.71

-41 CZ 308029 B6

123	{4-[9-cyklopentyl-2-(4-hydroxybutylamino)-9Hpurin-6-ylamino] -fenyl} -(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 64.26/64.34; H, 7.19/7.25; N, 22.21/22.36	503.55	505.74
124	4-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino} butan-1 -ol	C, 63.52/63.48; H, 7.19/7.26; N, 25.64/25.48	490.51	492.60
125	4-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro- [3.3 ]hept-2-ylmethyl) -pyridin-3 -ylamino] -9Hpurin-2-ylamino }butan-1 -ol	C, 64.13/64.22; H, 7.77/7.63; N, 24.93/24.72	504.73	506.64
126	{5-[9-cyklopentyl-2-(4-hydroxybutylamino)-9Hpurin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -morfolin-4-ylmethanon	C, 59.98/60.10; H 6.71/6.55; N, 23.32/23.51	479.55	481.54
127	5-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)- 9H-purin-2-ylamino] -pentan-1 -ol	C, 64.49/64.55; H, 7.58/7.70; N, 21.06/20.85	464.60	466.62
128	5 - [9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino)-9H-purin-2-ylamino]pentan-1 -ol	C, 65.11/65.27; H, 7.78/7.64; N, 20.44/20.59	478.54	480.55
129	{4- [9-cyklopentyl-2-(5-hydroxypentylamino)-9Hpurin-6-ylamino]fenyl} -piperazin-1 -yl-methanon	C, 63.39/63.42; H, 7.37/7.55; N, 22.75/22.87	491.67	493.58
130	5- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-methylpiperazin-1 -yl)pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} pentan-1 ol	C, 62.61/62.77; H, 7.78/7.85; N, 26.28/26.36	478.51	480.67
131	5- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-ethylpiperazin-1 -ylmethyl)pyridin-3 -ylamino] -9H-purin-2-ylamino} pentan-l-ol	C, 63.88/63.73; H, 8.14/8.23; N, 24.83/24.72	506.54	508.72
132	{5- [9-cyklopentyl-2-(5-hydroxy-pentylamino)-9Hpurin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)-methanon	C, 61.64/61.57; H, 6.76/6.85; N, 22.12/22.26	505.48	507.65
133	6-{9-cyklopentyl-6-[4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2- yl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} hexan-1 -ol	C, 66.09/66.21; H, 7.81/7.95; N, 22.84/22.61	489.67	491.61
134	6-{9-cyklopentyl-6-[4-(6-methyl-2,6-diazaspiro- [3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino]-9H-purin-2-ylamino} hexan- l-ol	C, 67.15/67.23; H, 8.16/8.29; N, 21.60/21.77	517.77	519.65
135	{4- [9-cyklopentyl-2-(6-hydroxyhexylamino)-9Hpurin-6-ylamino]fenyl}-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 65.91/65.77; H, 7.74/7.55; N, 20.50/20.44	545.70	547.73
136	6-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3-yl- amino)-9H-purin-2-ylamino]hexan-1 -ol	C, 62.48/62.51; H, 7.55/7.25; N, 23.32/23.12	479.60	481.72
137	6-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin- 3 -ylamino) -9H-purin-2-ylamino]hexan- l-ol	C, 63.13/63.45; H, 7.74/7.51; N, 22.65/22.23	493.60	495.72
138	{5- [9-cyklopentyl-2-(6-hydroxyhexylamino)-9Hpurin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -morfolin-4-ylmethanon	C, 61.40/61.12; H, 7.13/6.88; N, 22.03/22.16	507.70	509.80
139	2-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylfenylamino)- 9H-purin-2-ylamino] acetamid	C, 60.53/60.72; H, 6.47/6.17; N 25.67/25.85	435.63	437.61
140	2-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl- amino)-9H-purin-2-ylamino]acetamid	C, 61.31/61.19; H, 6.71/6.53; N, 24.87/24.64	449.43	451.58
141	2- {9-cyklopentyl-6- [4-(piperazin-1 -karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} acetamid	C, 59.60/59.44; H, 6.31/6.22; N, 27.20/27.41	462.57	464.42
142	2- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-methylpiperazin-1 -yl)pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} acetamid	C, 58.65/58.71; H, 6.71/6.63; N, 31.09/31.24	449.48	451.43
143	2- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-methylpiperazin-1 -ylmethyl)-pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} acetamid	C, 59.46/59.39; H, 6.94/6.73; N, 30.15/30.28	463.52	465.63

-42CZ 308029 B6

144	2- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-ethylpiperazin-1 karbonyl)pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2-ylaminojacetamid	C, 58.52/58.64; H, 6.55/6.67; N, 28.44/28.39	491.51	493.65
145	3-{9-cyklopentyl-6-[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept- 6-yl)-fenylamino] -911-puri n-2-y lami no} propionamid	C, 62.32/62.51; H, 6.54/6.42; N, 24.23/24.11	461.51	463.60
146	3-{9-cyklopentyl-6-[4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2ylmethyl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} propionamid	C, 63.14/63.22; H, 6.99/6.87; N, 26.51/26.73	474.53	476.57
147	3-{9-cyklopentyl-6-[4-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karbonyl)fenylamino]-9H-purin-2ylamino} propionamid	C, 62.01/62.12; H, 6.60/6.52; N, 25.03/25.20	502.55	504.61
148	3-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro- [3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-ylamino] -9Hpurin-2-ylamino} -propionamid	C, 61.88/61.96; H, 7.19/7.08; N, 27.76/27.62	503.57	505.68
149	3-{9-cyklopentyl-6-[6-(morfolin-4-karbonyl)pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} propionamid	C, 57.61/57.81; H, 6.10/5.98; N, 26.29/26.51	478.52	480.62
150	4-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)- 9H-purin-2-ylamino] butyramid	C, 62.05/62.13; H, 6.94/7.05; N, 24.12/24.16	463.57	465.62
151	4-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl- amino)-9H-purin-2-ylamino]butyramid	C, 62.74/62.84; H, 7.16/7.18; N, 23.41/23.56	477.58	479.62
152	4- {9-cyklopentyl-6- [4-(morfolin-4-karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} butyramid	C, 60.96/60.78; H, 6.55/6.67; N, 22.75/22.51	491.51	493.56
153	4-[9-cyklopentyl-6-(6-piperazin-l-yl-pyridin-3- ylamino) -9H-purin-2-ylamino] butyramid	C, 59.46/59.37; H, 6.94/6.75; N, 30.15/30.26	463.52	465.63
154	4- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-methylpiperazin-1 -ylmethyl)-pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} butyramid	C, 60.95/60.79; H, 7.37/7.41; N, 28.43/28.55	491.59	493.66
155	4- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-ethylpiperazin-1 karbonyl)pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2-ylamino} butyramid	C, 59.98/59.81; H, 6.97/6.89; N, 26.90/26.77	519.56	521.67
156	amid 5-{9-cyklopentyl-6-[4-(2,6-diazaspiro[3. 3] hept-2-yl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} pentanové kyseliny	C, 63.78/63.64; H, 7.21/7.36; N, 25.75/25.64	488.61	490.59
157	amid 5-{9-cyklopentyl-6-[4-(6-methyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino]-9Hpurin-2-ylamino } pentanové kyseliny	C, 64.96/64.81; H, 7.59/7.47; N, 24.35/24.17; O, 3.09/3.22	516.64	518.61
158	amid 5-{9-cyklopentyl-6-[4-(morfolin-4karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} pentanové kyseliny	C, 61.64/61.88; H, 6.76/6.45; N, 22.12/21.96	505.60	507.72
159	amid 5-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylpyridin- 3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]pentanové kyseliny	C, 60.11/59.88; H, 6.94/6.74; N, 26.29/26.00	478.63	480.66
160	amid 5-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]pentanové kyseliny	C, 60.83/60.63; H 7.15/7.18; N, 25.54/25.63	492.62	494.64
161	amid 5-{9-cyklopentyl-6-[6-(morfolin-4karbonyl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino} pentanové kyseliny	C, 59.16/59.42; H, 6.55/6.89; N, 24.83/24.55	506.58	508.62
162	amid 6-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylfenylamino)-9H-purin-2-ylamino]hexanové kyseliny	C, 63.39/63.47; H, 7.37/7.21; N, 22.75/22.67; O, 6.50/6.61	491.59	493.57

-43CZ 308029 B6

163	amid 6- [9-cyklopentyl-6-(4-piperazin-1 -ylmethylfenylamino)-9H-purin-2-ylamino]hexanové kyseliny	C, 64.13/64.27; H, 7.77/7.64; N, 24.93/24.87	504.61	506.73
164	amid 6- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-methylpiperazin-1 karbonyl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} hexanové kyseliny	C, 63.02/63.14; H, 7.37/7.50; N, 23.62/23.43	532.71	534.64
165	amid 6- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-ethylpiperazin-1 yl)-pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} hexanové kyseliny	C, 62.28/62.37; H, 7.74/7.65; N, 26.90/26.79	519.63	521.70
166	amid 6-{9-cyklopentyl-6-[6-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-ylmethyl)-pyridin-3-ylamino]-9Hpurin-2-ylamino} hexanové kyseliny	C, 62.41/62.55; H, 7.18/7.24; N, 24.26/24.17	518.57	520.69
167	amid 6-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-methyl-2,6diazaspiro[3.3]heptan-2-karbonyl)pyridin-3ylamino] -9H-purin-2-ylamino } hexanové kyseliny	C, 61.52/61.44; H, 7.01/7.16; N, 25.62/25.58	545.65	547.64
168	9-cyklopentyl-N²-(2-dimethylaminoethyl)-N⁶-[4(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)fenyl]-9Hpurin-2,6-diamin	C, 66.23/66.15; H, 8.03/8.18; N, 25.74/25.82	488.61	490.72
169	9-cyklopentyl-N²-(2-dimethylaminoethyl)-N⁶-(4morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 64.63/64.05; H, 7.18/7.32; N, 24.12/24.15	463.60	465.58
170	{4- [9-cyklopentyl-2-(2-dimethylaminoethylamino)-9H-purin-6-ylamino] -fenyl} -morfolin-4yl-methanon	C, 62.74/62.46; H, 7.16/6.93; N, 23.41/23.66	477.63	479.70
171	9-cyklopentyl-N²-(2-dimethylaminoethyl)-N⁶-(6- morfolin-4-yl-pyridin-3-yl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 61.91/61.88; H, 7.58/7.40; N, 27.07/26.83	464.61	466.72
172	9-cyklopentyl-N²-(2-dimethylaminoethyl)-N⁶-(6morfolin-4-ylmethyl-pyridin-3-yl)-9H-purin-2,6diamin	C, 61.91/61.87; H, 7.58/7.46; N, 27.08/27.15	464.55	466.61
173	{5- [9-cyklopentyl-2-(2-dimethylaminoethylamino)-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl} piperazin-1 -yl-methanon	C, 60.23/60.31; H, 7.16/7.25; N, 29.27/29.18	477.57	479.70
174	9-cyklopentyl-N²-(3-dimethylaminopropyl)-N⁶-[4(4-methyl-piperazin-1 -yl)fenyl] -9H-purin-2,6diamin	C, 65.38/65.27; H, 8.23/8.37; N, 26.39/26.45	476.57	479.63
175	9-cyklopentyl-N²-(3-dimethylaminopropyl)-N⁶-[4(4-ethyl-piper azin-1 -ylmethyl)fenyl] -9H-purin2,6-diamin	C, 66.50/66.42; H, 8.57/8.51; N, 24.93/24.88	504.62	506.73
176	{4-[9-cyklopentyl-2-(3-dimethylaminopropylamino)-9H-purin-6-ylamino]fenyl}-(2-oxa-6azaspiro[3.3]hept-6-yl)-methanon	C, 64.26/64.18; H, 7.19/7.27; N, 22.21/22.37	503.59	505.61
177	9-cyklopentyl-N⁶-[6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2yl)-pyridin-3-yl]-N²-(3-dimethylaminopropyl)-9Hpurin-2,6-diamin	C, 63.00/63.14; H, 7.61/7.58; N, 29.39/29.45	475.60	477.48
178	9-cyklopentyl-N²-(3-dimethylamino-propyl)-N⁶[6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-yl]-9H-purin-2,6-diamin	C, 64.84/64.75; H, 8.16/8.24; N, 27.00/27.09	517.67	519.75
179	{5-[9-cyklopentyl-2-(3-dimethylaminopropylamino)-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl} morfolin-4-yl-methanon	C, 60.83/60.66; H, 7.15/6.93; N, 25.54/25.12	492.60	494.63
180	9-cyklopentyl-N²-(4-dimethylaminobutyl)-N⁶-(4- morfolin-4-yl-fenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 65.24/65.13; H, 8.00/7.81; N, 23.41/23.11	477.63	479.62
181	9-cyklopentyl-N²-(4-dimethylaminobutyl)-N⁶-(4morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 65.82/65.59; H, 8.18/8.39; N, 22.74/22.56	491.65	493.68

-44CZ 308029 B6

182	{4- [9-cyklopentyl-2-(4-dimethylaminobutylamino)-9H-purin-6-ylamino]fenyl} -morfolin-4-ylmethanon	C, 64.01/63.82; H, 7.56/7.39; N, 22.12/21.88	505.65	507.72
183	9-cyklopentyl-N²-(4-dimethylaminobutyl)-N⁶-(6- morfolin-4-yl-(pyridin-3-yl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 62.61/62.55; H, 7.78/7.85; N, 26.28/26.36	478.57	480.60
184	9-cyklopentyl-N²-(4-dimethylaminobutyl)-N⁶-(6piperazin-l-ylmethylpyridin-3-yl)-9H-purin-2,6diamin	C, 63.39/63.47; H, 8.18/8.27; N, 28.43/28.32	491.61	493.68
185	{5- [9-cyklopentyl-2-(4-dimethylaminobutylamino)-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -(4methylpiperazin-1 -yl)-methanon	C, 62.28/62.39; H, 7.74/7.86; N, 26.90/26.71	519.58	521.69
186	9-cyklopentyl-N²-(5-dimethylaminopentyl)-N⁶-[4(4-ethyl-piperazin-l-yl)fenyl]-9H-purin-2,6diamin	C, 67.02/67.14; H, 8.73/8.65; N, 24.26/24.35	518.65	520.70
187	9-cyklopentyl-N²-(5-dimethylaminopentyl)-N⁶-[4(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-ylmethyl)fenyl]-9Hpurin-2,6-diamin	C, 67.15/67.22; H, 8.16/8.23; N, 21.60/21.78	517.69	519.65
188	{4- [9-cyklopentyl-2-(5-dimethylaminopentylamino)-9H-purin-6-ylamino]fenyl}-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)-methanon	C, 65.51/65.42; H, 7.77/7.82; N, 23.71/23.65	530.68	532.72
189	9-cyklopentyl-N²-(5-dimethylaminopentyl)-N⁶-[6(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3yl]-9H-purin-2,6-diamin	C, 65.38/65.31; H, 8.32/8.40; N, 26.29/26.35	531.70	533.69
190	9-cyklopentyl-N²-(5-dimethylaminopentyl)-N⁶-(6morfolin-4-ylmethylpyridin-3-yl)-9H-purin-2,6diamin	C, 63.88/63.51; H, 8.14/8.02; N, 24.83/24.51	506.71	508.75
191	{5- [9-cyklopentyl-2-(5-dimethylaminopentylamino)-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl} morfolin-4-yl-methanon	C, 62.17/62.36; H, 7.54/7.78; N, 24.16/23.96	520.74	522.71
192	9-cyklopentyl-N²-(6-dimethylaminohexyl)-N⁶-(4- morfolin-4-ylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 66.37/66.51; H, 8.35/8.61; N, 22.01/21.95	505.74	507.68
193	9-cyklopentyl-N²-(6-dimethylaminohexyl)-N⁶-(4morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 66.89/66.75; H, 8.52/8.57; N, 21.52/21.57	519.65	521.74
194	{4- [9-cyklopentyl-2-(6-dimethylaminohexylamino)-9H-purin-6-ylamino]fenyl [piperazin-1 ylmethanon	C, 65.26/65.21; H, 8.12/8.19; N, 23.62/23.55	532.67	534.75
195	9-cyklopentyl-N²-(6-dimethylaminohexyl)-N⁶-[6(4-methyl-piperazin-l-yl)pyridin-3-yl]-9H-purin2,6-diamin	C, 64.58/64.51; H, 8.52/8.48; N, 26.90/26.86	519.65	521.69
196	9-cyklopentyl-N²-(6-dimethylaminohexyl)-N⁶-[6(4-ethyl-piper azin-1 -ylmethyl)pyridin-3 -yl] -9Hpurin-2,6-diamin	C, 65.66/65.59; H, 8.82/8.87; N, 25.52/25.59	547.74	549.83
197	{5- [9-cyklopentyl-2-(6-dimethylaminohexylamino)-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl} -(2-oxa6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)-methanon	C, 63.60/63.55; H, 7.55/7.59; N, 23.02/23.09; 5.84/5.79	546.67	548.71
198	1 -amino-3- {9-cyklopentyl-6- [4-(6-methyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-yl)fenylamino]-9H-purin-2ylamino} -propan-2-ol	C, 62.87/62.83; H, 7.39/7.34; N, 26.39/26.27	476.59	478.65
199	1 -amino-3- {9-cyklopentyl-6- [4-(6-methyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino]-9Hpurin-2-ylamino }propan-2-ol	C, 63.52/63.48; H, 7.59/7.63; N, 25.64/25.61	490.61	492.57
200	{4-[2-(3-amino-2-hydroxypropylamino)-9-cyklo- pentyl-9H-purin-6-ylamino] fenyl} -morfolin-4-yl-	C, 59.98/59.64; H 6.71/6.50; N, 23.32/23.01	479.55	481.63

-45CZ 308029 B6

	methanon
201	l-amino-3-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylpyridin-3-ylainino)-9H-purin-2-ylamino]propan-2ol	C, 58.26/58.41; H, 6.89/6.63; N, 27.79/27.55	452.61	454.63
202	l-amino-3-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]propan-2-ol	C, 59.08/58.78; H, 7.11/7.15; N, 26.96/26.74	466.48	468.52
203	{5-[2-(3-amino-2-hydroxypropylamino)-9-cyklopentyl-9H-purin-6-ylamino]pyridin-2-yl} morfolin-4-yl-methanon	C, 57.37/57.41; H, 6.49/6.41; N, 26.18/26.07	480.51	482.61
204	{2- [9-cyklopentyl-6-(4-piperazin-1 -ylfenylamino)- 9H-purin-2-ylamino] -ethyl} -močovina	C, 59.46/59.51; H, 6.94/6.89; N, 30.15/30.08	463.62	465.53
205	(2- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-methylpiperazin-1 -ylmethyl)-fenylamino]-9H-purin-2-ylamino}ethyl)močovina	C, 60.95/60.88; H, 7.37/7.31; N, 28.43/28.37	491.60	493.65
206	(2-{9-cyklopentyl-6-[4-(morfolin-4-karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-y lamino } ethyl)močovina	C, 58.40/58.11; H, 6.33/6.56; N, 25.54/25.13	492.55	494.57
207	{2-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3- ylamino) -9H-purin-2-ylamino] ethyl} močovina	C, 56.64/56.93; H, 6.48/6.19; N, 30.02/29.85	465.54	467.58
208	{2-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]ethyl} močovina	C, 57.48/57.14; H, 6.71/6.48; N, 29.15/29.00	479.55	481.56
209	(2-{9-cyklopentyl-6-[6-(morfolin-4-karbonyl)pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2-ylamino}ethyl)močovina	C, 55.86/55.91; H, 6.11/6.15; N, 28.32/28.22	493.51	495.59
210	{3-[9-cyklopentyl-6-(4-piperazin-l-yl-fenylamino)-9H-purin-2-ylamino]propyl}močovina	C, 60.23/60.18; H, 7.16/7.24; N, 29.27/29.19	477.53	479.62
211	(3- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-methylpiperazin-1 ylmethyl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} propyl)močovina	C, 61.64/61.60; H, 7.56/7.63; N, 27.65/27.59	505.66	507.73
212	(3- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-ethylpiperazin-1 karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} propyl)močovina	C, 60.65/60.73; H, 7.16/7.22; N, 26.20/26.14; H, 5.98/5.79	533.59	535.62
213	(3-{9-cyklopentyl-6-[6-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino } propyl)močovina	C, 58.52/58.66; H, 6.55/6.71; N, 28.44/28.32	491.55	493.51
214	(3-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3 ]hept-2-ylmethyl) -pyridin-3 -ylamino] -9Hpurin-2-ylamino } propyl)močovina	C, 60.77/60.69; H, 7.37/7.45; N, 28.87/28.71	532.72	534.65
215	(3-{9-cyklopentyl-6-[6-(morfolin-4-karbonyl)pyridin-3-ylamino] -911-purin-2-y lamino} propy 1)močovina	C, 56.68/56.47; H, 6.34/6.55; N, 27.54/27.69	507.54	509.51
216	{4-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylfenylamino)- 9H-purin-2-ylamino] butyl} močovina	C, 60.83/60.52; H, 7.15/6.98; N, 25.54/25.13	492.60	494.62
217	{4- [9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino)-9H-purin-2-ylamino]butyl}močovina	C, 61.52/61.52; H, 7.35/7.28; N, 24.83/24.78	506.62	508.60
218	(4-{9-cyklopentyl-6-[4-(morfolin-4-karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-y lamino } butyl)močovina	C, 59.87/59.66; H, 6.76/6.75; N, 24.17/24.00	520.70	522.69
219	{4-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3- ylamino) -9H-purin-2-ylamino] butyl} močovina	C, 58.28/58.61; H, 6.93/6.72; N, 28.32/28.55	493.55	495.63
220	{4-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethyl- pyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]butyl} -	C, 59.04/59.16; H, 7.13/7.20; N, 27.54/27.45	507.59	509.55

-46CZ 308029 B6

	močovina
221	(4- {9-cyklopentyl-6- [6-(piperazin-1 -karbonyl)pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} butyl)močovina	C, 57.56/57.50; H, 6.76/6.84; N, 29.54/29.48	520.60	522.74
222	(5- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-ethylpiperazin-1 -yl)fenylamino] -91 bpuri n-2-y laini no} pcnty 1)močovina	C, 62.90/62.81; H, 7.92/7.87; N, 26.20/26.15; 0, 2.99/2.75	533.73	535.69
223	(5- {9-cyklopentyl-6- [4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3] hept-6-ylmethyl)fenylamino]-9H-purin-2ylamino} pentyl) -močovina	C, 63.02/63.15; H, 7.37/7.45; N, 23.62/23.53; 0, 6.00/6.07	532.64	534.60
224	(5- {9-cyklopentyl-6- [4-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karbonyl)fenylamino]-9H-purin-2ylamino} pentyl) -močovina	C, 62.12/62.20; H, 7.19/7.25; N, 24.98/24.82; 0, 5.71/5.66	559.65	561.71
225	(5-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro- [3.3]hept-2-yl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino } pentyl)močovina	C, 61.40/61.34; H, 7.55/7.67; N, 28.13/28.25; 0, 2.92/2.84	546.63	548.73
226	{5-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]pentyl} močovina	C, 59.75/59.55; H, 7.33/7.01; N, 26.80/26.97	521.64	523.66
227	(5-{9-cyklopentyl-6-[6-(morfolin-4-karbonyl)pyridin-3-ylamino] -911-purin-2-y lamino} penty 1)močovina	C, 58.19/58.22; H, 6.76/6.45; N, 26.10/25.88	535.60	537.70
228	{6-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)- 9H-purin-2-ylamino] hexyl} močovina	C, 62.17/62.00; H, 7.54/7.33; N, 24.17/24.29	520.61	522.64
229	{6- [9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl- amino)-9H-purin-2-ylamino]hexyl}močovina	C, 62.78/62.59; H, 7.71/7.52; N, 23.53/23.67	534.66	536.72
230	(6-{9-cyklopentyl-6-[4-(morfolin-4-karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-y lamino} hexyl)močovina	C, 61.18/61.24; H, 7.15/7.26; N, 22.93/22.78; 0, 8.73/8.60	548.62	550.60
231	{6-[9-cyklopentyl-6-(6-piperazin-l-ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]hexyl} močovina	C, 60.54/60.62; H, 7.71/7.78; N, 28.76/28.65; 0, 2.99/2.80	534.65	536.72
232	(6- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-methylpiperazin-1 karbonyl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino } hexyl)močovina	C, 59.66/59.73; H, 7.33/7.29; N, 27.33/27.27; 0, 5.68/5.72	562.69	564.75
233	N-(2- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-ethylpiperazin-1 ylmethyl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} ethyl)guanidin	C, 61.76/61.83; H, 7.77/7.65; N, 30.47/30.39	504.61	506.70
234	N-(2-{9-cyklopentyl-6-[4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-karbonyl)-fenylamino]-9H-purin-2ylamino} ethyl)guanidin	C, 59.51/59.62; H, 6.39/6.43; N, 27.76/27.65; 0, 6.34/6.29	503.57	505.61
235	N-(2-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-methyl-2,6diazaspiro [3.3] hept-2-yl) -pyridin-3 -ylamino] -9Hpurin-2-ylamino} ethyl)guanidin	C, 58.76/58.82; H, 6.99/6.84; N, 34.26/34.18	489.55	491.63
236	N-{2-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]ethyl} guanidin	C, 57.60/57.23; H, 6.94/6.72; N, 32.13/32.00	478.55	480.52
237	N-(2-{9-cyklopentyl-6-[6-(morfolin-4-karbonyl)pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2-ylamino}ethyl)guanidin	C, 55.97/55.84; H, 6.33/6.12; N, 31.22/31.05	492.51	494.63
238	N-{3-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)-9H-purin-2-ylamino]propyl} guanidin	C, 60.23/60.54; H, 7.16/6.95; N, 29.27/29.36	477.54	479.62

-47CZ 308029 B6

239	N-{3-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino) -9H-purin-2-ylamino] propyl} guanidin	C, 60.95/60.87; H, 7.37/7.43; N, 28.43/28.32; 0,3.25/3.14	491.57	493.65
240	N-(3-{9-cyklopentyl-6-[4-(piperazin-1 -karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino }propyl)guanidin	C, 59.39/59.48; H, 6.98/6.83; N, 30.47/30.39; O, 3.16/3.22	504.60	506.67
241	N-(3-{9-cyklopentyl-6-[4-(2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karbonyl)-fenylamino]-9H-purin-2ylamino }propyl)guanidin	C, 60.33/60.25; H, 6.82/6.75; N, 29.77/29.81; 0,3.09/3.15	516.59	518.62
242	N-(3-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino }propyl)guanidin	C, 60.21/60.15; H, 7.38/7.44; N, 32.41/32.35	517.61	519.63
243	N-{3-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridin-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]propyl} guanidin	C, 58.40/58.11; H, 7.15/6.99; N, 31.21/31.45	492.61	494.61
244	N-(3-{9-cyklopentyl-6-[6-(morfolin-4-karbonyl)pyridin-3-ylamino] -911-purin-2-y lamino} propy 1)guanidin	C, 56.79/56.48; H, 6.55/6.85; N, 30.35/30.00	506.59	508.62
245	N-{4-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-yl-fenyl- amino)-9H-purin-2-ylamino]butyl} guanidin	C, 60.95/60.87; H, 7.37/7.12; N, 28.43/28.09	491.64	493.58
246	N-{4-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino) -9H-purin-2-ylamino] butyl} guanidin	C, 61.64/61.73; H, 7.56/7.63; N, 27.65/27.51; O, 3.16/3.09	505.67	507.71
247	N-(4- {9-cyklopentyl-6-[4-(piperazin-1 -karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino }butyl)guanidin	C, 60.09/60.17; H, 7.18/7.11; N, 29.65/29.60; 0,3.08/3.15	518.63	520.69
248	N-(4- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-methy-piperazin-1 yl)pyridin-3-ylamino] -9H-purin-2-ylamino} butyl)guanidin	C, 59.27/59.33; H, 7.56/7.49; N, 33.17/33.09	505.66	507.60
249	N-(4- {9-cyklopentyl-6- [6-(4-ethylpiperazin-1 ylmethyl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino }butyl)guanidin	C, 60.65/60.71; H, 7.92/7.89; N, 31.43/31.39	533.73	535.79
250	N-(4-{9-cyklopentyl-6-[6-(2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karbonyl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin2-ylamino }butyl)guanidin	C, 58.63/58.59; H, 6.81/6.89; N, 31.56/31.48; O, 3.00/3.09	531.68	533.71
251	N-(5-{9-cyklopentyl-6-[4-(6-ethyl-2,6-diazaspiro- [3.3]hept-2-yl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} pentyl)guanidin	C, 63.83/63.92; H, 7.94/7.87; N, 28.23/28.17	544.71	546.75
252	N-{5-[9-cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenylamino) -9H-purin-2-ylamino] pentyl} guanidin	C, 62.28/61.95; H, 7.74/7.85; N, 26.90/26.65	519.63	521.72
253	N-(5-{9-cyklopentyl-6-[4-(morfolin-4-karbonyl)fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} -pentyl)guanidin	C, 60.65/60.95; H, 7.16/7.20; N, 26.20/26.10	533.62	535.70
254	N-{5-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-yl-pyridin-3ylamino) -9H-purin-2-ylamino] pentyl} guanidin	C, 59.15/59.00; H, 7.35/7.62; N, 30.35/30.42	506.58	508.60
255	N-{5-[9-cyklopentyl-6-(6-morfolin-4-ylmethylpyridm-3-ylamino)-9H-purin-2-ylamino]pentyl} guanidin	C, 59.86/60.11; H, 7.54/7.21; N, 29.54/29.33	520.63	522.70
256	N-(5-{9-cyklopentyl-6-[6-(morfolin-4-karbonyl)pyridin-3-ylamino] -911-purin-2-y lamino} pcnly 1)guanidin	C, 58.30/58.39; H, 6.96/6.87; N, 28.76/28.64; O, 5.97/5.89	534.66	536.60
257	N- {6- [9-cyklopentyl-6-(4-piperazin-1 -ylfenylamino)-9H-purin-2-ylamino]hexyl} guanidin	C, 62.40/62.53; H, 7.95/7.90; N, 29.65/29.59	518.66	520.72

-48CZ 308029 B6

258	N-(6- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-methylpiperazin-1 ylmethyl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} hexyljguanidin	C, 63.59/63.65; H, 8.28/8.36; N, 28.13/28.06	546.70	548.77
259	N-(6- {9-cyklopentyl-6- [4-(4-ethylpiperazin-1 karbonyl)-fenylamino] -9H-purin-2-ylamino} hexyljguanidin	C, 62.58/62.64; H, 7.88/7.71; N, 26.76/26.66; O, 2.78/2.83	574.81	576.76
260	N-(6-{9-cyklopentyl-6-[6-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-yl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino} hexyljguanidin	C, 60.77/60.69; H, 7.37/7.43; N, 28.87/28.73; O, 3.00/3.06	532.64	534.72
261	N-(6-{9-cyklopentyl-6-[6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)-pyridin-3-ylamino]-9H-purin-2ylamino} hexyljguanidin	C, 61.51/61.63; H, 7.74/7.65; N, 30.74/30.65	545.65	547.70
262	N-(6-{9-cyklopentyl-6-[6-(6-methyl-2,6-diazaspiro [3.3 ]heptan-2-karbonyl) -pyridin-3 -ylamino] 9H-purin-2-ylamino} hexyljguanidin	C, 60.60/60.72; H, 7.37/7.42; N, 29.25/29.17; O, 2.78/2.69	573.68	575.74
263	(N²-(4-amino-cyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4- pyrrolidin-1 -ylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin)	C, 67.80/67.71; H, 7.88/7.49; N, 24.33/24.01	459.72	461.70
264	N²-(4-Aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4morfolin-4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 66.09/66.04; H, 7.81/7.59; N, 22.84/22.61	459.64	491.65
265	N²-(4-aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin- 4-ylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 63.97/64.11; H, 7.61/7.38; N, 24.87/24.59	449.62	451.58
266	N²-(4-aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(4-ethyl- piperazin-l-yl)fenyl]-9H-purin-2,6-diamin	C, 65.38/65.29; H, 8.23/7.89; N, 26.39/26.39	476.86	478.91
267	N²-(5-aminopentyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin- 4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 65.24/65.56; H, 8.00/8.05; N, 23.14/22.92	477.82	479.90
268	(9-cyklopentyl-2-piperidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)-(4morfolin-4-ylfenyl)amin	C, 67.65/67.29; H, 7.64/7.38; N, 21.24/21.03	461.84	463.78
269	N²-(4-aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(6- morfolin-4-yl-pyridin-3-yl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 62.87/62.61; H, 7.39/7.11; N, 26.39/26.02	476.52	478.57
270	N²-(4-Aminobutyl)-9-cyklopentyl-N⁶-(4-morfolin- 4-ylmethylfenyl)-9H-purin-2,6-diamin	C, 64.63/64.54; H, 7.81/7.63; N, 24.12/24.00.	463.60	465.55
271	(9-cyklopentyl-2-piperidin-1 -yl-9H-purin-6-yl)-(4morfolin-4-ylmethylfenyl)amin	C, 67.65/67.38; H, 7.64/7.50; N, 21.24/20.88.	460.55	462.62
272	N²-(4-aminocyklohexyl)-9-cyklopentyl-N⁶-[4-(2oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl)fenyl]-9H-purin-2,6diamin	C, 66.37/66.11; H, 7.43/7.08; N, 22.93/22.69	487.61	489.72
273	1 -amino-3- {6- [4-(4-ethylpiperazin-1 -yljfenylamino] -9-cyklopentyl-9H-purin-2-ylamino} propan-2-ol	C, 62.61/62.88; 7.78/7.92; N, 26.28/26.46	478.60	480.58
274	2-[9-Cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl- amino)-9H-purin-2-ylamino]ethanol	C, 63.14/63.18; H, 7.14/7.28; N, 2241/22.08	436.55	438.62
275	3-[9-Cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl- amino)-9H-purin-2-ylamino]propan-1 -ol	C, 63.84/63.95; H, 7.37/7.51; N, 21.71/21.39	450.61	452.60
276	4-[9-Cyklopentyl-6-(4-morfolin-4-ylmethylfenyl- amino)-9H-purin-2-ylamino]butan-1 -ol	C, 64.49/64.28; H, 7.58/7.62; N, 21.06/20.88	464.60	466.63

Příklad 25 Protinádorová aktivita nových sloučenin in vitro

Jednou z hlavních vlastností určujících možný protinádorový účinek nových sloučenin in vivo je jejich cytotoxicita. Jedním z parametrů studovaných v rámci testů cytotoxicity je integrita cytoplazmatické membrány živých buněk. Příkladem může být mikrotitrační metoda pro studium pro liferace a cytotoxicity využívající acetometoxy derivát calceinu (Calcein AM), která je hojně využívána v programech pro screening nových sloučenin nebo při testování chemosenzitivity.

-49CZ 308029 B6

Intracelulámí esterázy živých buněk konvertují calcein AM na fluorescenční calcein, jehož signál odpovídá počtu živých buněk v kultuře.

V experimentech byly použity následující buněčné linie: MV4-11 (akutní myeloidní leukémie, FLT3-ITD pozitivní), MOLM-13 (akutní myeloidní leukémie, FLT3-ITD pozitivní), THP-1 (akutní myeloidní leukémie, wt FLT3), U937 (monocytická leukémie, wt FLT3), EOL-1 (eosinofilní leukémie exprimující FIP1L1-PDGFRA), H1703 (nemalobuněčný karcinom plic s amplifikací PDGFRA). Buňky byly kultivovány v médiu RPMI-1640 obsahujícím 10 % fetálního séra, penicilín (100 U/ml) a streptomycin (100 pg/ml). Kasumi-1 (akutní myeloidní leukémie, s mutací Asn822Lys v genu KIT) buňky byly kultivovány v médiu RPMI-1640 obsahujícím 15 % fetálního séra, penicilín (100 U/ml) a streptomycin (100 pg/ml). Buněčné linie K562 a MCF-7 byly kultivovány v médiu DMEM obsahujícím 10 % fetálního séra, penicilín (100 U/ml) a streptomycin (100 pg/ml). Všechny buněčné linie byly udržovány za standardních kultivačních podmínek (37 °C, 5 % CO2). Pro testování cytotoxicity byly buňky vysazeny do 96-jamkových mikrotitračních destiček a následující den byly k buňkám přidány testované látky v různých koncentracích vždy v triplikátu. Po uplynutí 72 hodinové inkubace byl k buňkám přidán roztok Calceinu AM (finální koncentrace 1 pg/ml; Thermo Scientific, USA) a inkubován další hodinu. Po uplynutí této doby byla změřena fluorescence živých buněk při 485 nm/538 nm (ex/em) za pomoci přístroje Fluoroskan Ascent microplate reader (Labsystems). Hodnoty EC50 odpovídající koncentraci látky, která je letální pro 50 % nádorových buněk, byly odečteny z křivek závislosti buněčné viability na koncentraci testované látky.

Cytotoxicita nových látek byla testována na panelu buněčných linií s odlišným histogenetickým původem. Významná účinnost byla stanovena zejména u FLT3-ITD pozitivních AML linií a také u linie EOL-1 exprimující fúzní protein FIP1L1-PDGFRA, kde se hodnoty EC50 pohybovaly v rozsahu nízkých nanomolámích koncentrací (Tabulka 3). Kromě toho několik sloučenin bylo aktivních i na linii H1703 odvozené od nemalobuněčného karcinomu plic, která se vyznačuje amplifikací genu PDGFRA.

Tabulka 3: In vitro antiproliferační aktivita vybraných nových sloučenin

Hodnoty EC50 (pM)
Sloučenin a	MV4-11	MOLM- 13	EOL-1	Kasumi-1	THP-1	U937	HL60	K562	MCF-7	H1703
2	0.010	0.015	0.023	0.481	2.280	1.797	3.509	1.570	0.520	n.a.
263	0.018	0.024	0.030	0.569	3.114	3.171	3.931	1.270	1.330	n.a.
3	0.018	0.020	0.015	1.229	3.025	3.661	1.291	1.229	0.273	n.a.
5	0.011	0.014	0.019	0.588	0.903	0.440	1.210	0.432	0.410	n.a.
8	0.042	0.056	0.049	0.636	2.099	1.354	1.419	0.391	0.220	n.a.
14	0.083	0.025	0.054	0.781	1.862	1.454	2.681	1.562	1.520	n.a.
18	0.049	0.030	0.057	0.924	1.803	2.291	1.442	1.876	1.120	n.a.
27	0.024	0.019	0.053	0.637	0.624	0.794	0.989	0.570	0.265	n.a.
264	0.001	0.001	0.006	0.523	0.865	0.616	n.a.	0.450	0.196	0.156
1	0.001	0.004	0.008	0.944	1.013	2.128	n.a.	1.186	0.320	0.189
28	0.001	0.004	0.013	0.839	0.514	0.605	n.a.	1.049	0.925	0.214
172	0.003	0.017	0.014	1.501	1.522	1.484	n.a.	1.162	0.430	0.350
149	0.007	n.a.	n.a.	1.013	n.a.	n.a.	n.a.	1.173	0.688	n.a.
155	0.164	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	5.170	4.705	n.a.
156	0.001	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	0.840	0.697	n.a.

-50CZ 308029 B6

266	0.018	0.014	0.074	n.a.	2.986	3.769	n.a.	1.430	2.150	0.978
265	0.017	0.016	0.039	n.a.	>4	>4	n.a.	3.740	3.255	0.482
270	0.029	0.014	0.036	n.a.	1.242	>4	n.a.	1.810	2.105	0.564
179	0.013	0.078	0.225	n.a.	>4	n.a.	n.a.	n.a.	2.210	n.a.
182	0.002	0.017	0.040	1.684	1.503	0.631	n.a.	4.215	1.595	n.a.
183	0.005	0.005	0.014	0.183	0.360	0.400	n.a.	0.980	0.665	n.a.
199	0.011	0.043	n.a.	0.227	0.925	1.003	n.a.	1.365	0.670	n.a.
267	0.032	0.020	0.071	1.248	2.418	3.629	n.a.	1.790	2.265	n.a.
38	0.086	0.064	0.276	1.233	3.590	2.920	n.a.	4.570	5.546	n.a.
272	0.003	0.004	0.022	0.773	0.693	0.638	n.a.	1.180	1.055	0.412
44	0.061	0.060	0.400	0.470	>10	9.348	n.a.	5.105	6.170	0.927
56	0.066	0.050	0.378	0.797	8.971	8.364	n.a.	2.745	3.295	0.708
271	0.701	0.431	1.366	2.160	>10	7.615	n.a.	8.275	12.20	n.a.
58	0.017	0.017	0.056	0.492	1.132	0.794	n.a.	0.695	0.440	n.a.
269	0.004	n.a.	0.010	n.a.	n.a.	1.488	n.a.	1.355	0.960	n.a.
46	0.020	n.a.	0.377	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.
274	0.074	n.a.	0.503	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.
275	0.066	n.a.	0.730	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.
276	0.029	n.a.	0.308	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.

n.a.: nebylo analyzováno

Příklad 26 Kinázová inhibiční aktivita nových sloučenin

Kinázy CDKl/Cyklin B a CDK2/Cyklin E byly vyprodukovány v hmyzích buňkách SÍ9 za pomoci bakulo virové infekce a přečištěny na koloně NiNTA column (Qiagen). CDK5/p35 a CDK7Cyklin H/MAT1, FLT3 WT, FLT3-ITD a FLT3 D835 byly zakoupeny od společnosti ProQinase GmbH. Kinásová reakce probíhala za přítomnosti 1 mg/ml histonu Hl (pro CDK1, CDK2 a CDK5), peptidu (YSPTSPS)₂KK (pro CDK7) nebo substrátu AGLT (pro FLT3), 15/15/0.15/1.5/1 μΜ ATP (pro CDK1/CDK2/CDK5/CDK7/FLT3), 0.05 μθΐ [γ-³³Ρ]ΑΤΡ a testované sloučeniny v celkovém objemu 10 μΕ v reakčním pufru (60 mM HEPES-NaOH, pH 7,5, 3 mM MgCh, 3 mM MnCE, 3 μΜ Na-orthovanadát, 1,2 mM DTT, 2,5 μg / 50 μΐ PEGzo.ooo). Reakce byly zastaveny přidáním 5 μΐ 3% vodného roztoku H3PO4. Vzorky byly naneseny na P-81 fosfocelulózovou membránu (Whatman), která byla následně 3x promyta 0,5% vodným roztokem H3PO4 a usušena na vzduchu. Kinázová inhibice byla stanovena za pomoci digitálního analyzátoru obrazu FLA-7000 (Fujifilm) a byla vyjádřena jako hodnota IC50 udávající koncentraci testované látky způsobující snížení aktivity enzymu na 50 %.

Jak ukazuje tabulka 4, všechny sloučeniny jsou vysoce účinnými inhibitory jak nemutované formy FLT3 (FLT3 WT), tak i mutovaných variant FLT3-ITD a FLT3 s bodovou mutací D835. Hodnoty IC50 se pohybovaly v nízkých nanomolámích koncentracích. Kromě toho tyto nově připravené sloučeniny vykazují i aktivitu vůči několika CDK.

Tabulka 4: Kinázová inhibiční aktivita vybraných nových sloučenin IC50 (μΜ).

Sloučenina	Hodnoty IC50 (μΜ)
FLT3 WT	FLT3 ITD	FLT3 D835	CDK1	CDK2	CDK5	CDK7
2	0.015	0.004	0.003	0.045	0.008	0.065	n.a.
263	0.021	0.003	0.011	0.082	0.031	0.359	n.a.
3	0.021	0.007	0.003	0.034	0.004	0.058	n.a.

-51 CZ 308029 B6

4	0.022	0.002	0.005	0.028	0.004	0.027	0.082
7	0.026	0.005	0.011	0.013	0.006	0.030	0.197
14	0.014	0.004	0.010	0.037	0.004	0.065	n.a.
20	0.015	0.004	0.004	0.040	0.005	0.044	n.a.
27	0.019	0.002	0.011	n.a.	0.002	n.a.	n.a.
264	0.013	0.001	0.009	n.a.	0.007	0.034	0.178
1	0.023	0.002	0.007	n.a.	0.017	n.a.	n.a.
28	0.010	0.003	0.002	n.a.	0.028	n.a.	n.a.
172	0.011	0.003	0.005	n.a.	0.016	n.a.	n.a.
171	0.037	0.015	0.010	n.a.	0.005	n.a.	n.a.
155	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	2.600	n.a.	n.a.
174	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	16.404	n.a.	n.a.
156	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	0.006	n.a.	n.a.
266	0.013	0.002	0.003	n.a.	0.586	n.a.	n.a.
265	0.023	0.004	0.007	n.a.	0.642	n.a.	n.a.
270	0.006	0.002	0.005	n.a.	0.625	n.a.	n.a.
179	0.090	0.012	0.023	n.a.	0.040	n.a.	n.a.
182	0.013	n.a.	n.a.	n.a.	0.005	n.a.	n.a.
185	0.020	n.a.	n.a.	n.a.	0.003	n.a.	n.a.
199	0.013	n.a.	n.a.	n.a.	0.005	n.a.	n.a.
267	0.025	n.a.	n.a.	6.049	2.039	3.709	n.a.
38	0.021	n.a.	n.a.	6.160	3.556	8.164	n.a.
272	0.013	n.a.	n.a.	0.094	0.025	0.059	n.a.
44	0.034	n.a.	n.a.	n.a.	1.723	n.a.	n.a.
56	0.088	n.a.	n.a.	n.a.	1.917	n.a.	n.a.
271	0.073	n.a.	n.a.	n.a.	1.977	n.a.	n.a.
60	0.021	n.a.	n.a.	n.a.	0.028	n.a.	n.a.
269	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	0.008	n.a.	n.a.
46	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	0.951	n.a.	n.a.
274	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	1.170	n.a.	n.a.
275	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	3.012	n.a.	n.a.
276	n.a.	n.a.	n.a.	n.a.	1.804	n.a.	n.a.

n.a.: nebylo analyzováno

Příklad 27 Kinázová selektivita nové látky 264

Kinázové inhibiční vlastnosti látky 264 byly testovány pomocí biochemických testů vůči dalším rekombinantním kinázám (Tabulka 5) za použití koncentrace lOnM ve společnosti Cama

Biosciences.

Látka 264 vykazovala silnou inhibiční aktivitu zejména vůči FLT3, PDGFRa/β a významná ίο inhibiční aktivita byla změřena i vůči TRK, CAMK2, SIK, YES, FMS, KIT (D816V), MNK2,

ACK a SRC.

Tabulka 5: Kinázová selektivita nové látky 264 kinázy inhibice kinázové

-52CZ 308029 B6

	aktivity látkou 264(10nM)
PDGFRp, FLT3, CLK1, TRKÁ, TRKC, QIK, TRKB, CaMK28, SIK, PDGFRa, YES, FMS, CAMK2y, KIT (D816V), MNK2, ACK, SRC, PDGFRa(V561D)	100 - 90 %
DDR1, DDR2, LCK, PDGFRa(D842V), PHKG1, MER, MNK1, ITK, CaMK2a, MUSK, SLK, FLT4, LYNb, FYN (isoform b), CLK2, LOK, LYNa, ALK (L1196M), FGR, FYN (isoform a), FLT1, CDK2/CycA2, DYRK1B, MAP4K2, HCK, MARK4, KDR, CDK5/p25, FRK, ALK (F1174L), KIT, MSTI	89 - 60 %
CDK9/CycTl, CDK2/CycEl, EPHB1, MARK3, AXL, SRPK2, ALK, IRR, MARK1, ABL, ARG, CDK7/CycH/MATl, ΟΑΜΚ2β, NPM1ALK, NuaKl, FGFR2, CDK4/CycD3, BLK, KIT (D816E), DYRK1A, PAK5, FGFR1, JAK3, HER4, MARK2, TSSK1, ΑΜΡΚα2/β1/γ1, PHKG2, EML4-ALK, TEC, ALK (R1275Q), RET (S891A), IRAK4, FGFR1 (V561M)	59 - 40 %
IRAKI, EPHA1, TXK, PKN1, HGK, FGFR3, ABL (E255K), FES, LTK, TNK1, EGER (d746-750), KIT (V560G), MLK3, EPHB4, CRIK, FER, CK18, NuaK2, PDGFRa(T674I), PIK3CA/PIK3R1, SYK, MLK1, TYRO3, MAP3K3, HIPK4, FGFR3 (K650E), EGER (L858R), TNIK, PAK4, CHK1, CKla, YES (T348I), FGFR3 (K650M), PKD2, INSR, CDC2/CycBl, PKD3, ΡΚΟζ, KIT(V654A), AMPKal/βΙ/γΙ, PKCr, RET, CDK3/CycEl, PYK2, EPHA8, ABL (T315I), EPHB2, AurB, BTK, BMX, RET (M918T), NDR2, PKD1, RET (G691S), SRPK1, ROS, NDR1, FAK, JAK2, MELK, EGER (L861Q), DCAMKL2, MST3, CLK3, RSK4, RSK3, EGER, RSK2, MST4, IGF1R, MST2, EPHA4, CKls, Haspin, P70S6K, PAK6, LATS2, EPHA2, RET (Y791F), MOS, JNK1, PKC8, IKKa, BRAF, PKCs, RSK1, CSK, CDK6/CycD3, PRKX, MINK, PKR, COT, ROCK1, FGFR4 (V550L), EPHA5, HIPK2, ΡΚΑί'β, PKC0, TBK1, NEK2, PKACa, skMLCK, CaMKlb, FGFR4(V550E), MET(Y1235D), HIPK3, ROCK2, RON, EPHB3, BRK, MAP3K5, AurA/TPX2, MAP3K2, PLK2, BRSK1, JAK1, AurC, MAP2K6, FGFR4, MLK2, KIT (T670I), TYK2, PIM1, ΜΚΟΚβ, AKT2, CKlyl, KIPK1, PEK, DYRK2, CGK2, MET, SPHK2, MAP2K7, CaMKla, NEK9, CHK2, MAP3K4, ΙΚΚε, EPHA3, DLK, TAOK2, MET (M1250T), SGK, PLK3, MAPKAPK5, DYRK3, MAP2K4, MGC42105, PKCa, NEK1, ΡΑΚΙ, PGK, AurA, EPHA7, Erk2, ΡΚΟβ2, SRM, MSSK1, JNK2, PKCy, CKly3, SGK3, CaMK4, CKly2, PBK, TIE2, Erk5, DAPK1, MRCKa, PKACy, MAP3K1, BRSK2, ρ7086Κβ, PKCr\|, MET(D1228H), Ο8Κ3β, JNK3, EGFR(T790M/L858R), TSSK2, ρ38β, ρ38γ, WNK1, ΡΚΟβΙ, TSSK3, PLK1, WNK2, RAFI, NEK6, NEK4, ρ38α, MSK1, CDC7/ASK, MSK2, PIM2, WNK3, EGFR(T790M), BRAF(V600E), MAP2K5, MAP2K1,PDHK2, EEF2K, TAK1-TAB1, MAPKAPK2, SPHK1, EPHA6, PIM3, ρ38δ, ΟΚ2α2/β, EGFR(d746-750/T790M), GSK3a, NEK7, PDK1, HER2, AKT3, ΙΚΚβ, MAPKAPK3, ΟΚ2α1/β, PDHK4, MAP2K2, PASK, MAP2K3, SGK2, AKT1, PAK2, Erkl	<40%

Příklad 28 Sloučeniny inhibují fosforylaci FLT3 a PDGFRA a ovlivňují jejich podřízené signální dráhy in vitro

Za účelem potvrzení kinázové inhibiční aktivity nových sloučenin na buněčné úrovni, byly buňky MV4-11 s FLT3-ITD a buňky EOL-1 exprimující fúzní protein FIP1L1-PDGFRA analyzovány po hodinovém působení testovaných látek. Ovlivněné buňky byly sklizeny centrifúgací a homogenizovány v extrakčním pufřu (10 mM HEPES pH 7,4, 1 mM EDTA, 1

-53CZ 308029 B6 mM EGTA, 5 mM KC1, 1,5 mM MgCl₂, 0,5% NP40, 1 mM DTT, ImM NaF, 0,1 mM Na₃VO₄, 1 mM PMSF, 0,5 pg/ml Leupeptin, 2 pg/ml Aprotinin) 25 minut na ledu. Vzorky byly centrifůgovány při 10,000 g po dobu 30 minut při 4 °C, pomocí metody podle Bradfordové byla změřena koncentrace proteinů v jednotlivých vzorcích a srovnána na stejnou koncentraci. 30 pg celkových protein bylo následně separováno pomocí elektroforézy v polyakrylamidovém gelu za denaturačních podmínek a následně přeneseno na nitrocelulózovou membránu. Membrány byly vyblokovány v 5% BSA v TBS s 0,1% Tween 20 a inkubovány přes noc se specifickými protilátkami proti FLT3 (klon 8F2), fosfo-FLT3 Y589/591 (30D4), fosfo-FLT3 Y591 (33G6), fosfo-FLT3 Y842 (10A8), fosfo-FLT3 Y969 (C24D9), PDGFRA (D1E1E), fosfo-PDGFRA Y849/PDGFRB Y857 (C43E9), fosfo-PDGFRA Y1018, p44/42 MAPK (Erkl/2), fosfo-p44/42 MAPK (Erkl/2) (Thr202/Tyr204), Stat5, fosfo-Stat5(Tyr694), Stat3 (79D7), fosfo-Stat3 (Tyr705) (D3A7), MEK1/2 (D1A5), fosfo-MEKl/2 (Ser217/221), které byly zakoupeny od společnosti Cell Signaling, USA, a-tubulin (DM1A, Sigma Aldrich, USA) a PCNA (PC-10, věnována Dr. B. Vojtěškem). Všechny primární protilátky byly rozpuštěny v 5% BSA v TBS s 0,1% Tween 20. Jako sekundární protilátky byly použity protilátky značené křenovou peroxidázou (králičí protilátka proti myším imunoglobulinům a prasečí protilátka proti králičím imunoglobulinům, Cell Signaling, USA), které byly následně vizualizovány pomocí chemiluminiscenčního kitu (Thermo Scientific, USA).

Analýza buněk MV4-11 s FLT3-ITD ovlivněných novými sloučeninami odhalila silnou inhibici fosforylace několika tyrosinových residuí receptorové kinázy FLT3 (Y589, Y591, Y842) již působením nízkých nanomolámích koncentrací. Obrázek 1 ukazuje příklad inhibice fosforylace FLT3 různými koncentracemi látek 264 a 270. Látky 264 a 270 rovněž účinně redukovaly fosforylaci několika tyrosinových residuí PDGFRA v buňkách EOL-1 (Obrázek 2).

Nové sloučeniny jsou schopné nejen deaktivovat receptory FLT3 a PDGFR na buněčné úrovni, ale rovněž blokovat jejich podřízené signální dráhy. Analýzy potvrdily schopnost látek 264 a 270 redukovat fosforylaci Erkl/2, STAT5 a STAT3, proteinů, které jsou zapojeny v signálních kaskádách FLT3 a PDGFR v MV4-11 resp. EOL-1 buňkách (Obrázky 3 a 4).

Příklad 29 Nové sloučeniny indukují apoptózu

Měření proapoptotických vlastností nových sloučenin bylo založeno na kvantifikaci enzymatické aktivity caspas-3/7 (podle Carrasco et al., 2003, BioTechniques, 34(5): 1064-67). Buňky linie MV4-11 a K562 byly vysazeny do 96-jamkové mikrotitrační desky a inkubovány přes noc. Další den byly k buňkám přidány testované látky a po uplynutí 24 hodinové inkubace byl do jamek přidán reakční pufir (150 mM HEPES pH 7.4, 450 mM NaCl, 150 mM KC1, 30 mM MgC12, 1.2 mM EGTA, 1.5% Nonidet P40, 0.3% CHAPS, 30% sacharóza, 30 mM DTT, 3 mM PMSF) s fluorescenčně značeným peptidovým substrátem Ac-DEVD-AMC (150 μΜ; Sigma Aldrich). Po 4 hodinách inkubace při teplotě 37 °C byla změřena aktivita caspas-3/7 na přístroji Fluoroskan Ascent (Labsystems) při 346 nm/442 nm (ex/em).

Analýzy prokázaly, že u linie MV4-11 s FLT3-ITD dochází k významné aktivaci caspas-3/7 již působením subnanomolámích koncentrací, zatímco u linie K562 je aktivace caspas docíleno působením mikromolámích koncentrací. Obrázek 5 ukazuje příklad aktivace caspas působením různých koncentrací látky 264.

-54CZ 308029 B6

Příklad 30 Nové látky indukují blok buněčného cyklu v G1 fázi a aktivují apoptózu

Buňky MV4-11 a MOLM-13 (FLT3-ITD pozitivní) byly ovlivněny na dobu 24 hodin testovanými látkami, sklizeny centrifůgací a zafixovány 70% vychlazeným ethanolem. Po nabarvení propidium jodidem (finální koncentrace 10 pg/ml; Sigma-Aldrich, USA), byl měřen relativní obsah DNA pomocí průtokového cytometru Cell Lab Quanta SC (Beckman Coulter, USA).

Nové sloučeniny indukovaly výrazný blok buněčného cyklu v G1 fázi u obou testovaných buněčných linií již v nízkých nanomolámích koncentracích. Vyšší koncentrace zvyšovaly počet buněk v sub-Gl fázi, které odpovídají buňkám apoptotickým. Příklad výsledků analýzy buněčného cyklu buněk ovlivněných látkou 264 shrnuje obrázek 6.

Příklad 31 Kombinace nových látek s dalšími protinádorovými sloučeninami

Stanovení proapoptotických vlastností nových sloučenin v kombinaci s dalšími protinádorovými látkami bylo založeno na měření enzymatické activity caspas-3/7 (podle Carrasco et al; BioTechniques. 2003, 34: 1064-67).

Buňky linie MV4-11 v počtu 50000 buněk na jamku byly přes noc kultivovány v 96-jamkové mikrotitrační desce a následující den byly ovlivněny vhodnými koncentracemi testovaných látek v kombinaci. Po uplynutí 24 hodinové inkubace byl do jamek přidán reakční pufir (150 mM HEPES pH 7.4, 450 mM NaCl, 150 mM KC1, 30 mM MgC12, 1.2 mM EGTA, 1.5% Nonidet P40, 0.3% CHAPS, 30% sacharóza, 30 mM DTT, 3 mM PMSF) s fluorescenčně značeným peptidovým substrátem Ac-DEVD-AMC (150 μΜ; Sigma Aldrich). Po 4 hodinách inkubace při teplotě 37 °C byla změřena aktivita caspas-3/7 na přístroji Fluoroskan Ascent (Labsystems) při 346 nm/442 nm (ex/em). Analýza prokázala zesílení účinku nových látek vlivem dalších protinádorových sloučenin (Tabulka 6).

Tabulka 6: Relativní aktivita caspas-3/7 v buňkách MV4-11 po ovlivnění látkou 264 kombinovanou s dalšími protinádorovými sloučeninami.

kombinace	relativní aktivita caspas-3/7 koncentrace (nM)
0	1	10	100
264	1.00	-	3.51	6.32
264 + cytarabin (500 nM)	1.69	1.88	5.72	>10
264 + daunorubicin (100 nM)	1.31	2.16	6.21	>10
264 + topotecan (50 nM)	1.15	1.70	3.70	8.55
264 + paclitaxel (100 nM)	1.27	2.79	5.67	>10
264 + pictilisib (100 nM)	1.00	0.95	6.28	>10
264 + tofacitinib (100 nM)	1.00	-	6.57	>10

Příklad 32 Aktivita nové látky 264 in vivo

Samicím athymických nu/nu myší (stáří 8 týdnů) bylo subkutánně implantováno 5^X 10⁶ buněk MV4-11 ve směsi s Matrigelem (1:1; High concentration basement membrane Matrigel, Corning) a tumory byly ponechány růst až do velikosti 500-800 mm³. Hmotnost myší a velikost tumorů byla kontrolována 3x týdně a za účelem studie byly myši náhodně rozděleny do testovacích skupin po 4-5 myších.

Myším byla podána jedna dávka nové sloučeniny 264 (10 mg/kg, formulace v okyseleném fýziologickém roztoku) pomocí intraperitoneální injekce nebo dávka Quizartinibu (10 mg/kg, formulace v 5% hydroxypropyl- β-cyklodextrinu) perorálně. Myši byly usmrceny ve 2 časových bodech (2h, 24h) od podání testovaných látek. Po resekci a mechanické desintegraci tumorů byly

-55CZ 308029 B6 buňky promyty PBS, zlyzovány v ledově-vychlazeném lyzačním pufiru (10 mM HEPES pH 7,4, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 5 mM KC1, 1,5 mM MgCE, 10 mM β-glycerolphosphate, ImM NaF, 0,1 mM NasVCh, 0,1 mM PMSF, 10 pg/ml Leupeptin, 2 pg/ml Aprotinin, 1 mM DTT) a zcentrifugovány. Vzorky (50 pg celkových protein) byly separovány pomocí SDS-PAGE a přeneseny na nitrocelulózovou membránu. Účinek látky 264 na fosforylaci kinázy FLT3 byl porovnán s účinkem Quizartinibu, známého specifického inhibitoru FLT3.

Hladina fosforylovaného FLT3 byla již 2 hodiny od podání látky 264 snížena o 95 % a tento účinek zůstal trvalý i 24 hodin od podání látky 264. Naproti tomu, u Quizartinibu byla hladina fosforylovaného FLT3 24 hodin od podání opět zvýšená (Obrázek 9). Výsledky Quizartinibu jsou ve shodě s již dříve publikovanými daty (Zarrinkar et al., Blood 114 (14): 2984—92). Inhibiční účinek testované látky byl zřejmý i z analýzy fosforylace STAT5, kdy látka 264 redukovala hladinu fosforylované formy STAT5 o 95 % oproti kontrole, tedy o něco více než Quizartinib.

Příklad 33 Suché tobolky

5000 tobolek, každá obsahující jako aktivní složku 0,25 g jedné ze sloučenin vzorce I se připraví následujícím postupem:

Složení

Aktivní složka

Talek

Pšeničný škrob

Magnézium stearát

Laktóza

1250 g

180 g

120 g g

g

Postup přípravy: Rozetřené látky jsou protlačeny přes síto s velikostí ok 0,6 mm. Dávka 0,33 g směsi je přenesena do želatinové tobolky pomocí přístroje na plnění tobolek.

Příklad 34 Měkké tobolky

5000 měkkých želatinových tobolek, každá z nich obsahující jako aktivní složku 0,05 g jedné z látek obecného vzorce I jako aktivní složky se připraví následujícím postupem:

Složení

Aktivní složka

Lauroglykol

250 g litry

Postup přípravy: Prášková aktivní látka je suspendována v Lauroglykolu® (propylenglykol laurát, Gattefoseé S. A., Saint Priest, Francie) a rozetřena ve vlhkém pulverizátoru na velikost částic asi 1 až 3 Cm. Dávka o velikosti 0,419 g směsi je potom přenesena do měkkých želatinových tobolek pomocí přístroje na plnění tobolek.

Příklad 35 Měkké tobolky

5000 měkkých želatinových tobolek, každá z nich obsahující jako aktivní složku 0,05 g jedné ze sloučenin obecného vzorce I jako aktivní ingradience se připraví následujícím postupem:

Složení

Aktivní složka

PEG 400

Tween 80

250 g litr litr

-56CZ 308029 B6

Postup přípravy: Prášková aktivní složka je suspendována v PEG 400 (polyethylenglykol o Mr mezi 380 a 420, Sigma, Fluka, Aldrich, USA) a Tween® 80 (polyoxyethylen sorbitan monolaurát, Atlas Chem. Ind., Inc., USA, dodává Sigma, Fluka, Aldrich, USA) a rozetřena ve vlhkém pulverizátoru na částice o velikosti 1 až 3 pm. Dávka o velikosti 0,43 g směsi je potom přenesena do měkkých želatinových tobolek pomocí přístroje na plnění tobolek.

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

1. 2,6-Disubstituovaný-9-cyklopentyl-9H-purin obecného vzorce I

(I) ve kterém,

- R1 je vybrán ze skupiny sestávající ze substituentů:

-57CZ 308029 B6

- Q je =CH- nebo =N-;

- m je 1 nebo 2 nebo 3;

- n je 1 nebo 2 nebo 3;

- s výhodou m a n jsou shodné;

- X je vazba; A je vybráno ze skupiny sestávající z N, CH, C; přičemž

- když A je N nebo CH, pak R² je vybrán z H, CH3, CH2CH3, a o=p=0 a B a R³ nejsou přítomny,

- když A je C, pak R² není přítomen, o je 1 nebo 2 nebo 3, p je 1 nebo 2 nebo 3, a B a R³ jsou jak je definováno níže;

- B je vybráno z O a N, přičemž

- když B je O, pak R³ není přítomno,

- když B je N, pak R³ je vybráno z H, CH3, CH2CH3;

- nebo X je CH2, NH nebo C=O; A je vybráno ze skupiny sestávající z O, N, CH, C; přičemž

- když A je O, pak o=p=0 a R², B a R³ nejsou přítomny,

- B je vybráno z O a N, přičemž

- když B je O, pak R³ není přítomno,

- když B je N, pak R³ je vybráno z H, CH3, CH2CH3;

a farmaceuticky přijatelné soli látky obecného vzorce I s alkalickými kovy, amoniakem či aminy, nebo adiční soli látky obecného vzorce I s kyselinami.

2. 2,6-Disubstituovaný-9-cyklopentyl-9H-purin obecného vzorce I podle nároku 1, kde R¹ je vybrán z:

3. 2,6-Disubstituovaný-9-cyklopentyl-9H-purin obecného vzorce I podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, kde X je vazba nebo CH2.

4. 2,6-Disubstituovaný-9-cyklopentyl-9H-purin obecného vzorce I podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, kde m a/nebo n a/nebo o a/nebo p jsou 1 nebo 2, s výhodou m a n jsou oba shodné, a/nebo o a p jsou oba shodné.

5. 2,6-Disubstituovaný-9-cyklopentyl-9H-purin obecného vzorce I podle kteréhokoliv z předcházejících nároků, kde A je C; m, n, o a p jsou 1; a B je O nebo N.

6. 2,6-Disubstituovaný-9-cyklopentyl-9H-purin obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, kde Entita

-58CZ 308029 B6

,ε· je vybrána z následujících substituentů: 4-piperazin-l-yl-fenylamino, 4-(4-methylpiperazin-lyljfenylamino,

4-(4-ethylpiperazin-1 -yljfenylamino,

4-(2-oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6yljfenylamino, 4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)fenylamino, 4-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept2-yl)fenylamino,

4-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)fenylamino,

4-pyrrolidin-lylfenylamino, 4-morfolin-4-ylmethylfenylamino, 4-piperazin-l-ylmethylfenylamino, 4-(4methylpiperazin-1 -ylmethyljfenylamino, 4-(4-ethylpiperazin-1 -ylmethyljfenylamino, 4-(2-oxa-6aza-spiro[3.3]hept-6-ylmethyl)fenylamino, 4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino, 4(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)fenylamino, 4-(6-ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2ylmethyljfenylamino, 4-morfolin-4-ylkarbonylfenylamino, 4-piperazin-1 -ylkarbonylfenylamino, 4-(4-methylpiperazin-1 -ylkarbonyljfenylamino, 4-(4-ethylpiperazin-1 -ylkarbonyljfenylamino, 4(2-oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-ylkarbonyl)fenylamino, 4-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2ylkarbonyljfenylamino, 4-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)fenylamino, 4-(6ethyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)fenylamino, 6-piperazin-l-yl-pyridin-3-ylamino, 6(4-methylpiperazin-1 -yl)pyridin-3-ylamino, 6-(4-ethylpiperazin-1 -yl)pyridin-3-ylamino, 6-(2oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6-yl)pyridin-3-ylamino, 6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3ylamino, 6-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3-ylamino, 6-(6-ethyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-yl)pyridin-3-ylamino, 6-pyrrolidin-l-yl-pyridin-3-ylamino, 6-morfolin-4ylmethyl-pyridin-3-ylamino, 6-piperazin-1 -ylmethyl-pyridin-3-ylamino, 6-(4-methylpiperazin-1 ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-(4-ethylpiperazin-1 -ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]hept-6-ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3ylamino, 6-(6-methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-(6-ethyl-2,6diazaspiro[3.3]hept-2-ylmethyl)pyridin-3-ylamino, 6-morfolin-4-ylkarbonyl-pyridin-2-ylamino, 6-piperazin-1 -ylkarbonyl-pyridin-2-ylamino, 6-(4-methylpiperazin-1 -ylkarbonyl)pyridin-2ylamino, 6-(4-ethylpiperazin-l-ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino, 6-(2-oxa-6-aza-spiro[3.3]hept-6ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino, 6-(2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino, 6-(6methyl-2,6-diazaspiro[3.3]hept-2-ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino, 6-(6-ethyl-2,6diazaspiro [3.3 ]hept-2-ylkarbonyl)pyridin-2-ylamino.

7. 2,6-Disubstituované-9-cyklopentyl-9H-puriny obecného vzorce la ve kterém, (la)

- R1 je vybrán ze skupiny sestávající ze substituentů: