CZ301597B6 - Kombinace monoklonálních protilátek nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo a farmaceutický prípravek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující - Google Patents
Kombinace monoklonálních protilátek nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo a farmaceutický prípravek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující Download PDFInfo
- Publication number
- CZ301597B6 CZ301597B6 CZ20080697A CZ2008697A CZ301597B6 CZ 301597 B6 CZ301597 B6 CZ 301597B6 CZ 20080697 A CZ20080697 A CZ 20080697A CZ 2008697 A CZ2008697 A CZ 2008697A CZ 301597 B6 CZ301597 B6 CZ 301597B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- fab fragments
- monoclonal antibodies
- tumor
- bmp
- combination
- Prior art date
Links
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 title claims abstract description 18
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 title claims abstract description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract 5
- 108010049955 Bone Morphogenetic Protein 4 Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 102100024505 Bone morphogenetic protein 4 Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 102000048143 Insulin-Like Growth Factor II Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 50
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims description 8
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 abstract description 10
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 abstract description 2
- 201000003911 head and neck carcinoma Diseases 0.000 abstract 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 abstract 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 20
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 206010041857 Squamous cell carcinoma of the oral cavity Diseases 0.000 description 4
- 102000013127 Vimentin Human genes 0.000 description 4
- 108010065472 Vimentin Proteins 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 208000010655 oral cavity squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 210000005048 vimentin Anatomy 0.000 description 4
- 206010004146 Basal cell carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 101001076292 Homo sapiens Insulin-like growth factor II Proteins 0.000 description 3
- 102100025947 Insulin-like growth factor II Human genes 0.000 description 3
- 102100033420 Keratin, type I cytoskeletal 19 Human genes 0.000 description 3
- 102100023972 Keratin, type II cytoskeletal 8 Human genes 0.000 description 3
- 108010066302 Keratin-19 Proteins 0.000 description 3
- 108010070511 Keratin-8 Proteins 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000007705 epithelial mesenchymal transition Effects 0.000 description 2
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940068935 insulin-like growth factor 2 Drugs 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 1
- 102000008137 Bone Morphogenetic Protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 102100040615 Homeobox protein MSX-2 Human genes 0.000 description 1
- 101000762379 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101000967222 Homo sapiens Homeobox protein MSX-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000934372 Homo sapiens Macrosialin Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000038455 IGF Type 1 Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010031794 IGF Type 1 Receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010031792 IGF Type 2 Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000282842 Lama glama Species 0.000 description 1
- 102100025136 Macrosialin Human genes 0.000 description 1
- 208000003445 Mouth Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012197 amplification kit Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 229940124650 anti-cancer therapies Drugs 0.000 description 1
- 229940124691 antibody therapeutics Drugs 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 230000004791 biological behavior Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000001728 clone cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000013267 controlled drug release Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000012987 lip and oral cavity carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N n-(2-hydroxypropyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical compound CC(O)CNC(=O)C(C)=C OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Kombinace monoklonálních protilátek proti rustovým faktorum IGF-2 a BMP-4 nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo, zejména pro použití pri lécbe karcinomu, výhodne dlaždicového karcinomu hlavy a krku. Rešení dále zahrnuje také farmaceutický prípravek obsahující monoklonální protilátky proti IGF-2 a BMP-4 a prípadne také cytostatikum. Monoklonální protilátky jsou s výhodou humanizované a mohou být dále navázány na nosic z rozpustného polymeru.
Description
Kombinace monoklonálních protilátek nebo jejich Fab fragmentů pro použiti jako léčivo a farmaceutický přípravek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující
Oblast techniky
Vynález se týká monoklonálních protilátek proti růstovým faktorům IGF-2 a BMP-4 pro použití v kombinaci jako léčivo, zejména při léčbě karcinomů, s výhodou dlaždicových karcinomů.
io
Stav techniky
Dlaždicové karcinomy představují celosvětově 6. nejčastější typ zhoubného bujení. Přes veškerý pokrok ve včasné diagnostice a terapii je jejich léčba devastující a velmi málo efektivní (Argiris, is A., Eng, C.: Epidemiology, staging, and screening of head and neck cancer. In Brockstein, B.,
Masters, G., eds. Head and Neck Cancer. Boston, Kluwer Academie Publishers, 2003. pp. 1560). Podobně jako u jiných typů nádorů hrají při vzniku těchto tumorů významnou roli kmenové buňky. Ty se podílejí nejen na vzniku nádoru, ale i na jeho šíření organismem pacienta a jsou odpovědné za rezistenci nádoru vůči chemoterapii. Kvůli svým biologickým vlastnostem mohou být odpovědné i za opětovné vzplanutí onemocnění po jeho zdánlivém vyléčení (Motlík, J.,
Klíma, I, Dvořánková, B., Smetana, K. Jr.: Porci ne epidermal stem cells as a biomedícal model for wound healing and normal/malignant epithelial cell propagation. Theriogenology 67: 105lll, 2007).
Zdravé tkáňové kmenové buňky potřebují pro zachování svých kmenových vlastností vhodné prostředí, tzv. niché. Ačkoliv toto mikroprostfedi je intenzivně studováno, je jeho reprodukce v podmínkách ex vivo problematická. Tato skutečnost brání širšímu zavedení tkáňových kmenových buněk do klinické medicíny, protože expanze kmenových buněk je ve tkáňové kultuře dosud obtížná. Řada studií naznačuje, že vhodné mikroprostfedi pro fungování nádorových kme30 nových buněk představuje stroma nádoru. To je tvořeno řadou buněčných typů včetně fibroblastú. Stroma nádoru potom ovlivňuje výživu nádorových buněk stimulací vrůstání cév do nitra nádoru a dokonce se zdá, že i celkové biologické chování šíření nádoru je ovlivněno aktivitou stromatu (Condon, M., S,: The role of the stromal microenvironment in prostatě cancer. Sem. Cancer Biol. 15: 132-137, 2005; Ailles, L., E., Weissman, L, L.: Cancer stem cells in solid tumors. Current Opinion Biotechnol. 18:460*466,2007),
Experimentálně bylo stanoveno, že fibroblasty stromatu karcinomů basocelulámího i spinocelulámího typu vycházejících z dlaždicových epitelů mají vysokou biologickou aktivitu. Dokonce jsou schopny měnit biologické vlastnosti diferencovaných keratinocytú směrem k buňkám bl ízkým keratinocytům nádorovým včetně tzv. epiteliálně-mesenchymálního přechodu. Tento jev je odpovědný za šíření nádorového klonu organismem pacienta. Biologickou aktivitu si fíbroblasty nádorového stromatu zachovávají, i když jsou permeabilní membránou odděleny od keratinocytú. Lze tedy předpokládat, že za popsaný jev je odpovědná produkce cytokinů a růstových faktorů fibroblasty nádorového stromatu (Lacina, L., Dvořánková, B., Smetana, K. Jr. ,
Chovanec, M., Plzák, J., Tachezy, R., Kideryová, L, Kučerová, L., Čada, Z., Bouček, J., Kodet, R., André, S., Gabius, H.-J.: Markér profiling of normál keratinocytes identifies the stroma from squamous celt carcinoma of the oral cavity as a modulátory microenvironment in co-culture. Int. Radiation. Biol. 83 : 837-848, 2007; Lacina, L., Smetana, K., Jr., Dvořánková, B., Pytlík, R„ Kideryová, L., Kučerová, L., Plzáková, Z., Štork, J., Gabius, H.-J., André, S.: Stromal fíbroblasts from basal cell carcinoma affect phenotype of normál keratinocytes Brit. J. Dermatol. 156; 819829,2007).
Zablokování vlivu nádorového stromatu na nádorové kmenové buňky by tedy mohlo inhibovat růst nádorového klonu a šíření nádoru (Hofmeister, V., Schrama, D„ Becker, J,, C,: Anti-cancer therapies targeting the tumor stroma, Cancer Immunol. Immunother. 57: 1-17, 2008; Kenny, P.,
-1CZ 301597 B6
A., Lee, G., Y., Bissell, M., J.: Targeting the tumor microenvironment Front. Biosci. 12: 34683474, 2007).
Předkládaný vynález řeší výše uvedený problém zablokování vlivu nádorového stromatu na s nádorové kmenové buňky.
Podstata vynálezu io Předmětem předkládaného vynálezu je kombinace pro použití jako léčivo, obsahující monoklonální protilátky proti IGF-2 a proti BMP-4 nebo jejich Fab fragmenty.
Význakem předkládaného vynálezu je kombinace monoklonálních protilátek proti IGF-2 a proti BMP-4 nebo jejich Fab fragmentů pro použití pří léčbě karcinomu.
Ve výhodném provedení je význakem překládaného vynálezu kombinace monoklonálních protilátek proti IGF-2 a proti BMP-4 nebo jejich Fab fragmentů pro použití při léčbě dlaždicového karcinomu, zejména dlaždicového karcinomu hlavy a krku.
2o Význakem vynálezu je dále to, že monoklonální protilátky mohou být humanizované.
Dalším význakem vynálezu je to, že monoklonální protilátky mohou být navázány na nosič z rozpustného hydrofilního polymeru. Rozpustným hydrofilním polymerem podle vynálezu může být např. N-(2-hydroxypropyI)metakrylamid, Ν,Ο-dimetakryloylhydroxylamin.
Předmětem předkládaného vynálezu je dále farmaceutický přípravek obsahující monoklonální protilátky proti IGF-2 a proti BMP-4 nebo jejich Fab fragmenty. Monoklonální protilátky mohou být humanizované.
Ve výhodném provedení obsahuje farmaceutický přípravek monoklonální protilátky nebo jejich Fab fragmenty navázané na nosič z rozpustného hydrofilního polymeru. Výhodněji obsahuje farmaceutický přípravek dále cytostatika.
Farmaceutický přípravek lze připravit např. rozpuštěním lyofilizovaných protilátek proti IGF-2 (80-250 mg) a proti BMP-4 (3-10 mg) v 500 - 1000 ml infuzního roztoku (např. Ringerův, Hartmanův, Darrowův či 5% roztok glukózy). Takovýto farmaceutický přípravek pak může být intravenózně aplikován pacientovi.
Původci tohoto vynálezu bylo zjištěno, že ovlivnění pronádorově působících růstových faktorů
IGF-2 (Insulin-like growth factor-2; Brady, G., Crean, S., Naik, P,, Kapas, S.: Upregulation of IGF-2 and IGF-1 receptor expressíon in oral cancer cell lineš. Int. J. Oncol. 31: 875-881,2007) a BMP-4 (Bone morphogenetic factor-4; Hamada, S., Satoh, K., Hirota, M., Kimura, K., Kanno, A., Masamune, A., Shimosegawa, T.: Bone morphogenetic protein 4 induces epithelial-mesenchymal transition through MSX2 induction on pancreatic cancer cell line. J. Cell. Physiol. 213:
768-774, 2007) má významný terapeutický efekt. Navíc bylo zjištěno, že pronádorově působící
IGF-2 a BMP-4 nejsou významně exprimovány zdravým epitelem, ale jsou přítomny v nádorovém ložisku (viz Tab.l v příkladu 1).
Současná inhibice aktivity IGF-2 a BMP-4 tak potlačí pozitivní vliv stromatu na nádorovou kme50 novou buňku a změní tak mikroprostředí nádoru směrem ke stimulaci zvýšené diferenciace buněk nádorového klonu. Uvedená terapeutická modalita zlepší efektivitu již dříve využívaných léčebných postupů (chirurgické odstranění nádoru, ozáření, chemoterapie). Výše uvedené růstové faktory se uplatňují zejména při vývoji savčího zárodku, jejich význam u zdravého jedince je postnatálně nízký (Gilbert, S., E.: Developmental Biology. Sinauer Associates, Sunderland, MA,
2000). Aplikace inhibitorů účinků BMP-4 a IGF-2 pacientovi by proto byla provázena minimem
-2CZ 301597 B6 vedlejších účinků. Vzhledem k možnému riziku alergizace pacienta myší monoklonální protilátkou je možno využít technologie humanizovaných protilátek (Nissim, A., Chemajovski Y.
Historical development of monoclonal antibody therapeutics. In Chemajovski, Y. and Nissim, A.
eds. Therapeutic Antibodies. Handbook of Experimental Pharmacology. Springer Verlag, Berlin5 Heidelberg, 2008, pp. 3-18).
Vzhledem k tomu, žeje známo, že se díky odlišnosti stavby nádorových cév syntetické polymery hromadí v místě nádoru, je možno Fab fragmenty, celé molekuly monoklonální protilátky či molekuly humanizované protilátky navázat na rozpustný hydrofilní polymemí nosič. Tím lze io dosáhnout vyšší koncentrace terapeutické protilátky v nádorovém stromatu. Pokud konjugát obsahuje i cytostatikum, lze tím dosáhnout lokálně vysoké koncentrace účinné látky v nádoru (Ulbrich, K., Pechar, M., Strohalm, J., Šubr, V., Říhová, B.: Synthesis of biodegradable polymers for controlled drug release. AnnN Y Acad Sci. 831: 47-56,1997).
Příklady
Příklad 1:
Fibroblasty stromatu dlaždicového karcinomu byly izolovány jak bylo detailně popsáno (Lacina, L., Dvořánková, B., Smetana, K. Jr. , Chovanec, M.} Plzák, J., Tachezy, R., Kideiyová, L, Kučerová, L., Čada, Z., Bouček, J., Kodet, R., André, S., Gabius, H.-J.: Markér profiling of normál keratinocytes identífies the stroma from squamous cell carcinoma of the oral cavity as a modulátory mícroenvironment in co-culture. Int. Radiation. Biol. 83: 837-848, 2007; Lacina, L., Smetana, K., Jr., Dvořánková, B., Pytlík, R., Kideryová, L., Kučerová, L., Plzáková, Z., Stork, J., Gabius, H.-J., André, S.: Stromal fibroblasts from basal cell carcinoma affect phenotype of normál keratinocytes Brit. J. Dermatol. 156: 819-829, 2007). V krátkosti, nádorová tkáň byla za sterilních podmínek desintegrována. Z fragmentů tkáně migrovaly buňky, jejichž fenotyp byl kontrolován. V okamžiku, kdy měly tyto buňky pouze známky fibroblastů (Vimentin+/CD34/CD68+) byla migrace přerušena a buňky byly dále kultivovány pro další užití. Celková RNA z těchto buněk byla izolována kitem „RNeasy® Micro Kit” (QIAGEN lne., USA) a ve dvou krocích přepsána do cRNA kitem „Ilíumina® TotalPrep RNA Amplification Kit” (Ambion lne., USA). Podobně byla získána i RNA z normálních zdravých fibroblastů a přepsána do cRNA.
Kromě toho byla stejně získána RNA z normálních a nádorových fibroblastů kultivovaných pod vlivem normálních keratinocytů. Tato RNA byla rovněž přepsána do cRNA. Pomocí systému BeadStation 500 (Ilíumina, San Diego, CA, USA) byl hodnocen transkripční profil všech studovaných typů fibroblastů. Důraz byl kladen na rozdíl v transkripci růstových faktorů u fibroblastů nádorového stromatu a fibroblastů netransformovaného epitelu. Transkripce 560 genů byla u nádorových fibroblastů snížena či zvýšena ve srovnání s normálními fibroblasty. Na základě tohoto výsledku lze očekávat, že vliv fibroblastů nádorového stromatu na nádorový klon bude velmi komplexní. Na základě analýzy zapojení jednotlivých růstových faktorů do signalizačních kaskád nádorového klonu byly vybrány 2 produkty následujících genů, jejichž ovlivnění by mohlo mít významný terapeutický efekt (víz tabulka).
-3CZ 301597 B6
Tabulka 1 :
| Gen | Růstový faktor | Význam | SCCF: HF mRNA tn vitro | SCCF: HF IMCCH in vitro | Normální tkáň IMCCH biopsie | Nádorové stroma IMCCH biopsie |
| IGF2 | IGF-2 | pronádorový Brady et al., 2007 | 15 | 2 | + | |
| BMP4 | BMP-4 | pronádorový Hamada et al., 2007 | 10 | 2 | + |
IGF-2- Insulin like growth factor-2
BMP-4- Bone morphogenetic factor-4
IMCCH-imunocytochemický průkaz proteinu
SCCF: HF- poměr transkripce u nádorových stromálních (SCCF) a normálních lidských (HF) fíbroblastů io
Příklad 2:
Buňky stromatu dlaždicového karcinomu byly připraveny a kultivovány dle detailního návodu (Lacina, L., Dvořánková, B., Smetana, K. Jr., Chovanec, M., Plzák, J., Tachezy, R., Kideryová,
L, Kučerová, L., Čada, Z., Bouček, J., Kodet, R., André, S., Gabius, H.-J.: Markér profiling of normál keratinocytes identifies the stroma from squamous cell carcinoma of the oral cavity as a modulátory microenv iron ment Ín co-culture. Int. Radiation. Biol. 83: 837-848, 2007; Lacina, L., Smetana, K,, Jr,, Dvořánková, B., Pytlík, R,, Kideryová, L,, Kučerová, L,, Plzáková, Z,, Stork, J., Gabius, H.-J., André, S.: Stromal fibroblasts from basal cell carcinoma affect phenotype of nor20 mal keratinocytes Brit. J. Dermatol. 156: 819-829, 2007). Zkráceně, stromální fíbroblasty byly vysety v hustotě 20 000 buněk/cm v kultivačním médiu obsahujícím obvykle Eaglovo minimální esenciální médium (MEM) s neesenciálními aminokyselinami a pyruvátem sodným, glutaminem (0,3 mg/ml), 10% telecím sérem, hydrokortisonem (0,5 μΜ/ml), penicilinem (200 jednotek/ml), streptomycinem (0,1 mg/ml), insulinem (5 pg/ml), choleratoxinem (10'l°M) a epidermálním růstovým faktorem (10 ng/ml) a HEPES (10 mM). Toto médium (kondicionované médium) bylo použito ke kultivaci lidských i nterfoliku lamích keratinocytů bez podpůrných buněk (20 000 buněk/cm2) na sklech potažených kolagenem. Kultivace probíhala při teplotě 37 °C a zvýšeném parciálním tlaku (5%) CO2. V paralelní skupině byly kultivovány keratinocyty v kondicionovaném médiu a monoklonálními protilátkami proti IGF-2 (klon 75 015) v koncentraci 20 pg/ml kultivačního média a BMP-4 (klon 66 119) v koncentraci 3 pg/ml kultivačního média (R&D Systems, Minneapolis, MN 55 413, USA). Kromě toho byly paralelně kultivovány i stejné keratinocyty ve výše popsaném médiu bez přídavků. Kultivace všech experimentálních skupin probíhala 6 dní. Potom byla skla vyňata, buňky fixovány paraformaldehydem a pomocí imunocytochemie byly znázorněny antigeny (keratin 8, keratin 19 a vimentin). Výsledky jsou uvedeny v tabulce:
| Studovaný znak | Samotné medium (%) | Kondicionované medium (%) | Kondicionované medium + anti-IGF-2 anti-BMP-4 (%) |
| Keratin 8 | 0 | 5 | 0 |
| Keratin 19 | 0 | 90 | 0 |
| Vimentin | 0 | 5 | 0 |
-4CZ 301597 B6
Příklad 3
Keratinocyty byly kultivovány spolu s podpůrnými buňkami linie 3T3 (Lacina, L., Dvořánková, 5 B., Smetana, K. Jr., Chovanec, M., Plzák, I, Tachezy, R., Kideiyová, L, Kučerová, L., Čada, Z.,
Bouček, J., Kodet, R., André, S., Gabius, H.-J.: Markér profiling of normál keratinocytes identifies the stroma from squamous cell carcinoma of the oral cavity as a modulátory microenvironment in co-culture. Int. Radiation. Biol. 83: 837-848, 2007). 3T3 fibroblasty v hustotě 7000 buněk/cm2 a proliferaci zastavenou mitomycinem-c v koncentraci 25 pg/ml (po dobu 6 io hod) byly kokultivovány s lidskými interfolikulámími keratinocyty v hustotě 20 000 buněk/cm2 ve výše popsaném kultivačním médiu s přídavkem BMP-4 (koncentrace 30 ng/ml, R&D Systems) a IGF-2 (koncentrace 5 ng/ml, R&D Systems). V kontrolním experimentu byly kultivovány keratinocyty s 3T3 bez růstových faktorů a keratinocyty s 3T3 v kondicíonovaném médiu (viz výše). Další zpracování vzorků bylo identické s příkladem 1. Výsledky jsou shrnuty v následující is tabulce.
| Studovaný znak | Samotné medium (%) | Kondicionované medium (%) | Samotné medium + IGF-2+ BMP-4 (%) |
| Keratin 8 | 0 | 5 | 0 |
| Keratin 19 | 5 | 30 | 20 |
| Vimentin | 5 | 40 | 40 |
Příklady 2 a 3 ukazují, že BMP-4 a IGF-2 hrají důležitou roli ve změně fenotypu normálních 20 keratinocytů směrem k nádorovému proagresivnímu fenotypu. Zablokováním jejich aktivity se tento fenotyp normalizuje. Tato skutečnost ukazuje, že mesenchymálně-epitelová interakce hraje důležitou roli v existenci a progresi dlaždicových karcinomů a její inhibice například pomocí specifických protilátek včetně protilátek humanizovaných a Fab fragmentů a protilátek navázaných na polymemí rozpustné nosiče či jiných inhibitorů by mohla být využita pro terapeutické účely jako adjuvantní léčebná modalita.
Claims (9)
- 30 PATENTOVÉ NÁROKY1. Kombinace pro použití jako léčivo, vyznačená tím, že obsahuje monoklonální protilátky proti IGF-2 a proti BMP-4 nebo jejich Fab fragmenty.
- 2. Kombinace podle nároku 1 pro použití při léčbě karcinomu.
- 3. Kombinace podle nároku 1 pro použití při léčbě dlaždicového karcinomu, s výhodou dlaždicového karcinomu hlavy a krku.
- 4. Kombinace podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, vyznačená tím, že monoklonální protilátky nebo jejich Fab fragmenty jsou humanizované.
- 5. Kombinace podle kteréhokoliv z nároků laž4, vyznačená tím, že monoklonální 45 protilátky nebo jejich Fab fragmenty jsou navázány na nosič z rozpustného hydrofilního polymeru.-5CZ 301597 B6
- 6. Farmaceutický přípravek, vyznačený tím, že obsahuje monoklonální protilátky proti IGF-2 a proti BMP-4 nebo jejích Fab fragmenty.
- 7. Farmaceutický přípravek podle nároku 6, vyznačený tím, že monoklonální proti5 látky nebo jejich Fab fragmenty jsou humanizované.
- 8. Farmaceutický přípravek podle nároku6 nebo 7, vyznačený tím, že monoklonální protilátky nebo jejich Fab fragmenty jsou navázané na nosič z rozpustného hydrofílní ho polymeru.io
- 9. Farmaceutický přípravek podle nároku 8, vyznačený tím, že dále obsahuje cytostatikum.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20080697A CZ301597B6 (cs) | 2008-11-03 | 2008-11-03 | Kombinace monoklonálních protilátek nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo a farmaceutický prípravek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20080697A CZ301597B6 (cs) | 2008-11-03 | 2008-11-03 | Kombinace monoklonálních protilátek nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo a farmaceutický prípravek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2008697A3 CZ2008697A3 (cs) | 2010-04-28 |
| CZ301597B6 true CZ301597B6 (cs) | 2010-04-28 |
Family
ID=42113129
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20080697A CZ301597B6 (cs) | 2008-11-03 | 2008-11-03 | Kombinace monoklonálních protilátek nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo a farmaceutický prípravek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ301597B6 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ303227B6 (cs) * | 2011-04-15 | 2012-06-06 | Univerzita Karlova V Praze | Kombinace protilátek nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo a farmaceutický prostredek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030134790A1 (en) * | 2002-01-11 | 2003-07-17 | University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey | Bone Morphogenetic Protein-2 And Bone Morphogenetic Protein-4 In The Treatment And Diagnosis Of Cancer |
| WO2007022172A1 (en) * | 2005-08-17 | 2007-02-22 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Human monoclonal antibodies that specifically bind igf-ii |
| WO2007070432A2 (en) * | 2005-12-13 | 2007-06-21 | Astrazeneca Ab | Binding proteins specific for insulin-like growth factors and uses thereof |
-
2008
- 2008-11-03 CZ CZ20080697A patent/CZ301597B6/cs not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030134790A1 (en) * | 2002-01-11 | 2003-07-17 | University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey | Bone Morphogenetic Protein-2 And Bone Morphogenetic Protein-4 In The Treatment And Diagnosis Of Cancer |
| WO2007022172A1 (en) * | 2005-08-17 | 2007-02-22 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Human monoclonal antibodies that specifically bind igf-ii |
| WO2007070432A2 (en) * | 2005-12-13 | 2007-06-21 | Astrazeneca Ab | Binding proteins specific for insulin-like growth factors and uses thereof |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Nosho a kol. (2005) Br. J. Cancer 92, 1193-1200 * |
| Rothhammer a kol. (2005) Cancer Res. 65, 448-56 * |
| Sayer a kol. (2005) Gynecol. Oncol. 96, 355-61 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ303227B6 (cs) * | 2011-04-15 | 2012-06-06 | Univerzita Karlova V Praze | Kombinace protilátek nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo a farmaceutický prostredek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2008697A3 (cs) | 2010-04-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Benton et al. | Matrigel: from discovery and ECM mimicry to assays and models for cancer research | |
| Yap et al. | Liver sinusoidal endothelial cells promote the differentiation and survival of mouse vascularised hepatobiliary organoids | |
| Xin et al. | Expansion of CD26 positive fibroblast population promotes keloid progression | |
| US9821013B2 (en) | Compositions and methods for induction and modulation of angiogenesis and methods and assays for identifying angiogenesis modulators | |
| Sensi et al. | Preclinical three‐dimensional colorectal cancer model: The next generation of in vitro drug efficacy evaluation | |
| KR20110106302A (ko) | 암 치료를 위한 세포외 기질 조성물 | |
| US11053476B2 (en) | Generation of cancer stem cells and use thereof | |
| BR112015028193B1 (pt) | Suporte para cicatrização de feridas | |
| Chen et al. | Doxorubicin-polyglycerol-nanodiamond conjugates disrupt STAT3/IL-6-mediated reciprocal activation loop between glioblastoma cells and astrocytes | |
| Kwak et al. | Synergistic antitumor effects of combination treatment with metronomic doxorubicin and VEGF-targeting RNAi nanoparticles | |
| Khan et al. | In-vitro pre-treatment of cancer cells with TGF-β1: a novel approach of tail vein lung cancer metastasis mouse model for anti-metastatic studies | |
| KR20190118523A (ko) | 엑소좀 기반의 면역세포의 교차분화 방법 | |
| JP2022105712A (ja) | 被検化合物の脈管新生阻害活性の評価方法 | |
| Pearse et al. | Inhibition of tumour necrosis factor‐α by antisense targeting produces immunophenotypical and morphological changes in injury‐activated microglia and macrophages | |
| US20180280446A1 (en) | Agent for Treating Urinary Incontinence Including Stem Cells Derived from Amniotic Fluid | |
| Tsai et al. | The inhibition of angiogenesis and tumor growth by denbinobin is associated with the blocking of insulin-like growth factor-1 receptor signaling | |
| KR102050223B1 (ko) | 배아줄기세포로부터 소장 오가노이드의 제조방법 | |
| CZ301597B6 (cs) | Kombinace monoklonálních protilátek nebo jejich Fab fragmentu pro použití jako lécivo a farmaceutický prípravek tyto protilátky nebo jejich Fab fragmenty obsahující | |
| Williams | Angiogenesis and the greater omentum | |
| CN113995753A (zh) | 一种中药分子槐果碱在制备治疗胶质母细胞瘤药物上的应用 | |
| Im et al. | 2D and 3D co-spatial compartmentalized patch to enhance the therapeutic efficacy of keratinocytes for wound closure | |
| TW201440785A (zh) | 組織再生促進劑 | |
| Al‐Kharboosh et al. | Therapeutic potential and impact of nanoengineered patient‐derived mesenchymal stem cells in a murine resection and recurrence model of human glioblastoma | |
| Oktem et al. | Effect of apoptosis and response of extracellular matrix proteins after chemotherapy application on human breast cancer cell spheroids | |
| TW201009077A (en) | Isolation and cultivation system for normal or tumorigenic stem cell |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20171103 |