CZ289832B6 - Léčivo pro léčení nebo prevenci samičí sexuální dysfunkce - Google Patents

Abstract

Pou it tetracyklick²ch deriv t obecn ho vzorce I a jejich fyziologicky p°ijateln²ch sol a solv t , nap° klad hydr t , kde R.sup.0.n. je H nebo halogen nebo alkyl s 1 a 6 C; R.sup.1.n. je H, alkyl s 1 a 6 C, alkenyl nebo alkinyl v dy s 1 a 6 C, halogenalkyl s 1 a 6 C, cykloalkyl se 3 a 8 C, cykloalkylalkyl se 3 a 8 C v cykloalkylu a 1 a 3 C v alkylu, pop° pad substituovan² fenylalkyl s 1 a 3 C v alkylu nebo pop° pad substituovan² heteroarylalkyl s 1 a 3 C v alkylu, kde heteroarylem je thienyl, furyl nebo pyridyl; R.sup.2 .n.je pop° pad substituovan² monocyklick² aromatick² kruh ze skupiny benzen, thiofen, furan a pyridin nebo pop° pad substituovan² bicyklick² syst m; a R.sup.3.n. je H nebo alkyl s 1 a 3 C; nebo R.sup.1.n. a R.sup.3.n. spole n znamenaj 3- nebo 4- lenn² alkylov² nebo alkenylov² °et zec; pro v²robu l iva pro l en nebo prevenci sami sexu ln dysfunkce, jak orgasmick dysfunkce. L ivo m s v²hodou formu vhodnou pro or ln pod v n .\

Description

Oblast techniky

Vynález se týká léčiva pro léčen nebo prevenci samičí sexuální dysfunkce.

Dosavadní stav techniky

Žádný uspokojivý prostředek pro léčení nebo prevence samičí sexuální dysfunkce není až dosud k dispozici.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je použití tetracyklických derivátů obecného vzorce I

a jejich fyziologicky přijatelných solí a solvátů, například hydrátů, kde

R° znamená atom vodíku nebo halogenu nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku,

R¹ znamená atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, alkenyl nebo alkinyl vždy o 2 až 6 atomech uhlíku, halogenalkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku v cykloalkylové a 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, fenylalkyl o 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, popřípadě substituovaný 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny atom halogenu, alkyl nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku nebo methylendioxyskupina, nebo heteroarylalkyl o 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, kde heteroarylovou částí je thienyl, furyl nebo pyridyl, popřípadě substituované 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny atom halogenu, alkyl nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku,

R² znamená případně substituovaný monocyklický aromatický kruh ze skupiny benzen, thiofen, furan a pyridin nebo případně substituovaný bicyklický systém

připojený ke zbytku molekuly přes jeden z uhlíkových atomů benzenového kruhu, přičemž kondenzovaný kruh A je 5- nebo 6-členný kruh, nasycený nebo částečně nebo zcela nenasycený a obsahující atomy uhlíku a popřípadě jeden nebo dva heteroatomy ze skupiny kyslík, síra a dusík, případnými substituenty na benzenovém kruhu mohou být 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny atom halogenu, hydroxyskupina, alkyl nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku, -CO₂R^b, halogenalkyl, halogenalkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku, kyanoskupina, nitroskupina nebo skupina -NR^aR^b, kde R^a a R^b znamenají

-1 CZ 289832 B6 atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, R^a může rovněž znamenat alkanoyl o 2 až atomech uhlíku nebo alkylsulfonyl o 1 až 6 atomech uhlíku, případně substituenty na kruhu A mohou být 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny atom halogenu, alkyl nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku a fenylalkyl o 1 až 3 atomech uhlíku v alkylová části, popřípadě dále substituovaný shora uvedeným způsobem, a

R³ znamená atom vodíku nebo alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, nebo

R¹ a R³ společně znamenají 3- nebo 4-členný alkylový nebo alkenylový řetězec;

pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci samičí sexuální dysfunkce.

Pod pojmem samičí sexuální dysfunkce se rozumí především organismická dysfunkce.

Ve výhodném provedení vynálezu má léčivo formu vhodnou pro orální podávání.

Sloučeniny podle vynálezu jsou potentními inhibitory cyklických guaosin-3',5'-monofosfátfosfodiesteras (cGMP PDE). WO 95/19 978, který nebyl zveřejněn do prioritního data předložené přihlášky, také popisuje syntézy sloučenin podle vynálezu a jejich použitelnost u dalších nemocí spojených s inhibicí cGMP PDE.

Vhodné jednotlivé sloučeniny podle vynálezu pro použití v léčení samičí sexuální dysfunkce zahrnují:

Cis-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-(4-pyrÍdylmethyl)-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyraziono[2', 1': 6,1 ]pyrido[3,4-b] indol-1,4-dion.

Cis-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-6-(2,3-dihydrobenzo[b]furan-5-yl)-2-methyl-pyraziono[2',l':6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dion;

Cis-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-6-(5-brom-2-thienyl)-2-methyl-pyraziono[2^,,r:6,l]pyrido[3,4-b]indol-l ,4-dion;

Cis-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-butyl-6-(4-methylfenyl)-pyraziono[2', l':6, l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dion;

(6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-izopropyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyraziono[2',r:6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dion;

(6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-cyklopentyI-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyraziono[2', Γ:6,1 ]pyrido[3,4-b] indol-1,4-dion;

(6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-cyklopropylmethyl-6-(4-methoxyfenyl)-pyraziono[2', 1': 6,1 Jpyrido [3,4-b] indol-1,4-dion;

(6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-6-(3-chlor-4-methoxyfenyl)-2-methyl-pyraziono[2', Γ :6,1 ]pyrido[3,4-b] indol-1,4-dion;

(6R, 12aR}-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-methyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyraziono[2', 1': 6,1 ]pyrido[3,4-b] indol-1,4-dion;

-2CZ 289832 B6 (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-6-(3,4-methylendioxyfenyl)pyraziono[2',1': 6,1 ]pyrido[3,4-b]indol-l ,4-dion;

(5aR, 12R, 14 aS)— 1 ,2,3,5,6,11,12,14a-oktahydro-12-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyrrolo[l,2:4',5']-pyraziono[2',l':6,l]pyrido[3,4-b]indol-5-l,4-dion;

Cis-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-cyklopropyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyraziono[2', 1 ': 6,1 ]pyr ido[3,4-b] indol-1,4-dion;

(3 S,6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-3-methyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyraziono[2', Γ: 6,1 ]pyrido[3,4-b] indol-1,4-dion;

a jejich fyziologicky přijatelné soli a solváty (např. hydráty).

Specifickými sloučeninami podle vynálezu jsou:

(6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-methyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyraziono[2',r:6,l]pyrido[3,4-b]-indol-l,4-dion (Sloučenina A); a (3 S,6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2,3-dimethyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyraziono[2',r:6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dion (Sloučenina B);

a jejich fyziologicky přijatelné soli a solváty (např. hydráty).

Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že sloučeniny obecného vzorce I, a zejména sloučeniny A a B, jsou vhodné pro léčení samičí sexuální dysfunkce. Sloučeniny mohou být podávány orálně, a tím se vyhne nevýhodám spojeným si.c. podáním. Proto se předložený vynález týká použití sloučenin vzorce I, a zejména sloučenin A a B, nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí, nebo farmaceutické kompozice obsahující jednu nebo druhou entitu, pro výrobu léčiva pro léčebné nebo preventivní léčení samičí sexuální dysfunkce.

Farmaceuticky přijatelné soli sloučenin vzorce I, a zejména sloučenin A a B, které obsahují bazické centrum, jsou kyselé adiční soli vytvořené s farmaceuticky přijatelnými kyselinami. Příklady zahrnují hydrochlorid, hydrobromid, síran nebo hydrogensíran, fosforečnan nebo hydrogenfosforečnan, acetát, benzoát, sukcinát, fumarát, maleát, laktát, citrát, vinan, glukonát, methansulfonát, benzensulfonát a p-toluensulfonátové soli. Sloučeniny vzorce I, a zejména sloučeniny A a B, mohou také poskytnout farmaceuticky přijatelné kovové soli, zejména soli alkalických kovů, s bázemi. Příklady zahrnují sodné a draselné soli.

Obvykle je u lidí preferovanou cestou orální podání sloučenin podle vynálezu, které je nejběžnější a vyhýbá se nevýhodám spojeným s i.c. podáním. V podmínkách, kdy příjemce trpí polykacími poruchami nebo narušenou absorpcí léčiva po orálním podání, může být léčivo podáno parenterálně, např. sublingválně nebo bukálně.

Při podání ženám v léčebném nebo preventivním léčení výše identifikovaných poruch bude orální dávkování sloučeniny vzorce I, a zejména sloučenin A a B, obvykle v rozmezí od 0,5 do 800 mg denně pro průměrného dospělého pacienta (70 kg). Proto pro typického dospělého pacienta obsahují jednotlivé tablety nebo kapsle od 0,2 do 400 mg účinné látky, ve vhodném farmaceuticky přijatelném vehikulu nebo nosiči, pro podání v jedné nebo násobných dávkách, jednou nebo několikrát denně. Dávkování pro bukální nebo sublingvální podání je typicky v rozmezí od 0,1 do 400 mg na jednu dávku, jak je požadováno. V praxi lékař stanoví aktuální dávkovači režim, který bude pro jednotlivého pacienta nejvhodnější, a bude se měnit s věkem, hmotností a stavem každého pacienta. Uvedená dávkování jsou exemplární nebo průměrný

-3CZ 289832 B6 případ, ale jsou individuální případy, v nichž se může zvažovat vyšší nebo nižší dávkovači rozmezí, a které jsou v rozsahu tohoto vynálezu.

Pro použití pro lidi může být sloučenina vzorce I, a zejména sloučenina A a B, podána samotný, ale obvykle se podává ve směsi s farmaceutickým nosičem zvoleným s ohledem na uvažovanou cestu podání a standardní farmaceutickou praxi. Například může být sloučenina podána orálně, bukálně nebo sublingválně, ve formě tablet obsahujících excipienty, jako je škrob nebo laktóza, nebo v kapslích nebo vajíčkách, buď samotný nebo ve směsi s excipienty, nebo ve formě léčebných nápojů nebo suspenzí obsahujících ochucovadlo nebo barvicí činidla. Takové kapalné přípravky mohou být připraveny s farmaceuticky přijatelnými přísadami, jako jsou suspendační činidla (jako methylcelulóza, semisyntetický glycerid, jako je witepsol, nebo směsi glyceridů, jako je směs oleje z meruňkových jader a esterů PEG-6, nebo směsi PEG-8 a kaprylové/kaprinové glyceridy).

Sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny jakýmkoliv vhodným postupem známým ze stavu techniky, a nebo následně uvedeným postupem, který tvoří součást předloženého vynálezu. Postup byl dříve v podstatě popsán v WO95/19 978.

Postup přípravy sloučeniny vzorce I zahrnuje zpracování sloučeniny vzorce Π

(v němž Alk znamená C^alkyl, např. methyl nebo ethyl, a Hal je atom halogenu, např. chlor) s primárním aminem Κ’ΝΗι ve vhodném rozpouštědle jako je alkohol (např. methanol nebo ethanol) nebo směs rozpouštědel, vhodně při teplotě od 20 °C do teploty refluxu (tedy při asi 50 °C).

Sloučeninu vzorce Π lze vhodně připravit zpracováním sloučeniny vzorce ΙΠ se sloučeninou vzorce IV

O

JL /Hal Hal^y

D³ (IV) ^R ve vhodném rozpouštědle, jako je halogenovaný uhlovodík (např. trichlormethan nebo dichlormethan) nebo ether (například tetrahydrofuran), výhodně za přítomnosti báze jako je organický amin (například trialkylamin jako je triethylamin) nebo uhličitan nebo hydrogenuhličitan alkalického kovu (např. NaHCO₃). Reakce se vhodně provádí při teplotě od -20 do +20 °C (například kolem 0 °C).

Sloučenina vzorce I může být také připravena ze sloučeniny vzorce ΠΙ dvoustupňovým postupem přes sloučeninu vzorce II izolovanou bez purifikace.

-4CZ 289832 B6

Sloučeniny vzorce mohou být připraveny jako samostatné enantiomery ve dvou stupních z příslušného enantiomerů vzorce III nebo jako směsi (například racemáty) dvojic cis nebo trans izomerů z odpovídajících směsí dvojic cis a trans izomerů vzorce III.

Jednotlivé enantiomery sloučenin podle vynálezu mohou být připraveny z racemátů štěpením použitím postupů známých ze stavu techniky pro rozdělení racemických směsí na jejich enantiomemí složky, například použitím HPLC (vysokoúčinné kapalinové chromatografie) na chirální koloně, jako je Hypersil naftylmočovina.

Sloučeninu vzorce III lze vhodně připravit z alkylesteru tryptofanu vzorce V

(kde Alk je definováno dříve) nebo jeho soli (například hydrochloridové soli) s aldehydem R²CHO. Reakce běžně probíhá ve vhodném rozpouštědle, jako je halogenovaný uhlovodík (například dichlormethan) nebo aromatický uhlovodík (například toluen), za přítomnosti kyseliny, jako je kyselina trifluoroctová. Reakce se běžně provádí při teplotě od -20 °C do refluxu za tvorby sloučeniny vzorce ΠΙ s jednom kroku. Reakce se rovněž může provádět v rozpouštědle, jako je aromatický uhlovodík (například benzen nebo toluen), pod refluxem, výhodně použití Dean-Starkova přístroje k zachycování tvořené vody.

Reakcí se získá směs cis a trans izomerů, které mohou být buď individuálními enantiomery nebo racemáty páru cis nebo trans izomerů v závislosti na tom, zda se jako výchozí materiál použije racemický, nebo enantiomemě čistý alkylester tryptofanu. Jednotlivé cis nebo trans enantiomery se mohou vhodně oddělit ze své směsi frakční krystalizací nebo chromatografií (jako je mžiková kolonová chromatografie) použitím příslušných rozpouštědel a eluentů. Obdobně se může oddělit dvojice cis a trans izomerů chromatografií (například mžikovou kolonovou chromatografií) použitím příslušných eluens. Opticky čisté trans izomery mohou být také přeměněny na opticky čisté cis izomery použitím vhodných epimerizačních postupů, jeden takový postup zahrnuje zpracování trans izomerů nebo směsi (například 1:1 směsi) cis a trans izomerů methanolickým nebo vodným chlorovodíkem při teplotě od 0 °C do teploty refluxu roztoku. Potom se směs podrobí chromatografii (například mžikové kolonové chromatografii) k oddělení výsledných diastereoizomerů, nebo se v postupu, který používá vodný chlorovodík, požadovaný cis vysráží jako hydrochloridová sůl, která se potom izoluje filtrací.

Farmaceuticky přijatelné kyselé adiční soli sloučeniny vzorce I, a zejména sloučeniny A nebo B, které obsahují bazické centrum, mohou být připraveny běžným způsobem. Například, roztok volné báze může být zpracován s vhodnou kyselinou, buď samotnou nebo ve vhodném roztoku, a získaná sůl se izoluje buď filtrací nebo odpařováním pod vakuem z reakčního rozpouštědla. Farmaceuticky přijatelné bazické adiční soli mohou být získány analogickým postupem zpracováním roztoku sloučeniny A nebo B s vhodnou bází. Oba typy soli mohou být tvořeny nebo navzájem konvertovány technikami iontově-výměnné pryskyřice.

Sloučeniny z vynálezu se izolují v souvislosti s molekulami rozpouštědla krystalizací nebo odpařením z příslušného rozpouštědla.

Syntézy sloučenin A a B a meziproduktů pro jejich použití jsou doloženy následujícími příklady.

-5CZ 289832 B6

V příkladové části dále se používají následující zkratky:

MeOH (methanol)

EtOH (ethanol).

Příklad provedení vynálezu

Meziprodukt 1 (54) (1R,3R-Methyl l,2,3,4-tetrahydro-l-(3,4-methylendioxyfenyl)-9H-pyrido[3,4-b]indol-3karboxylát, cis izomer

Do míchaného roztoku methylesteru D-tryptofanu (11 g) a piperonalu (7,9 g) v bezvodém 15 CH2CI2 (400 ml) ochlazeném na 0 °C se po kapkách přidává kyselina trifluoroctová (7,7 ml) a roztok se ponechá reagovat při okolní teplotě. Po 4 dnech se žlutý roztok zředí CH₂C1₂ (200 ml) a promyje se nasyceným vodným roztokem NaHCO₃, potom vodou (3x200 ml) a suší se nad Na₂SO4. Organická vrstva se odpaří za sníženého tlaku a zbytek obsahující dva geometrické izomery se purifikuje mžikovou chromatografií eluováním dichlormethan/ethylacetátem (97/3) za 20 vzniku, jako prvního produktu eluce, sloučeniny uvedené v názvu (6,5 g).

t.t.: 154 °C.

Meziprodukt 2 (83) (1R,3R-Methyl l,2,3,4-tetrahydro-2-(2-chlorpropionyl)-l-(3,4-methylendioxyfenyl)-9Hpyrido[3,4-b]indol-3-karboxylát

Do roztoku (R)-(+)-2-chlorpropionové kyseliny (191 μΐ, 2,2 mmol) v bezvodém dichlormethanu 30 (30 ml) se přidá dicyklohexylkarbodiimid (0,45 g, 2,2 mol). Potom se přidá meziprodukt 1 (0,7 g, mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti po 20 hodin. Vzniklá sraženina dicyklohexylmočoviny se odstraní filtrací, filtrát se odpaří ve vakuu a surový produkt se purifikuje mžikovou chromatografií eluováním toluenem/ethylacetátem: 95/5. Získaná olejovitá sloučenina potom krystalizuje z ether/hexanu za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako bledě žlutých krystalů 35 (0,74 g).

t.t.: 126 až 128 °C.

Příklad 1 (78) (Sloučenina A) (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexyhydro-2-methyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyrazino[2', 1': 6,1 ]pyrido[3,4-b]indol-l ,4-dion

a) Do míchaného roztoku meziproduktu 1 (0,5 g) a NaHCO₃ (0,14 g) v bezvodém CHC1₃ (20 ml) se přidá po kapkách chloracetylchlorid (0,27 ml) při 0 °C. Získaná směs se míchá po 1 hodinu při stejné teplotě a ředí se CHC1₃ (20 ml). Potom se přidá do směsi za míchání po kapkách voda (10 ml), potom nasycený roztok NaHCO₃. Organická vrstva se promývá vodou až do neutrality a suší se nad Na₂SO4. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá (6R,12aR)-methyl l,2,3,4-tetrahydro-2-chloracetyl-l-(3,4-methylendioxyfenyl}-9H-pyrido[3,4-b]indol-3-karboxylát jako olej, který krystalizuje z etheru za vzniku pevné látky (0,38 g, b.t.: 233 °C), která se použije bez další purifikace v příštím kroku.

b) Do míchané suspenze chloracetylového meziproduktu (0,37 g) v MeOH (20 ml) se přidá při 55 teplotě místnosti roztok methylaminu (33% v EtOH) (0,4 ml) a získaná směs se zahřívá při 50 °C

-6CZ 289832 B6 pod dusíkem po dobu 16 hodin. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v CH2CI2 (50 ml). Po promytí vodou (3x20 ml), sušení nad Na₂SO4 a odpaření do sucha se zbytek purifikuje mžikovou chromatografií eluováním s CPLCh/MeOH (99/1) a rekrystalizuje z 2-propanolu za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako bílých krystalů (0,22 g).

t.t.: 302 až 303 °C.

Analýzy pro C2₂H₁₉N₃O4:

Vypočteno: C, 67,86; H, 92; N, 10,79;

Nalezeno: C, 67,77; H, 4,92; N, 10,74% [a]²⁰ _D = +71,0° (C = 1,00; CHClj).

Příklad 2(117) (Sloučenina B) (3S,6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2,3-dimethyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyrazino[2', Γ :6,1 ]pyrido[3,4-b]indol-l ,4-dion

Do míchaného roztoku meziproduktu 2 (0,3 g, 0,68 mmol) v THF (30 ml) se přidá při teplotě místnosti roztok methylaminu (33% v EtOH) (0,68 ml) a získaná směs se zpracuje pod refluxem pod dusíkem po dobu 6 dní. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v CH2CI2 (50 ml). Po promytí vodou (2,25 ml), sušení nad Na2SO₄ a odpaření do sucha se surový produkt purifikuje mžikovou chromatografií eluováním dichlormethan/methanolem (99/1). Získaný olejovitý zbytek krystalizuje z methanolu za vzniku sloučeniny uvedené v názvu jako bílých krystalů (40 mg).

t.t: 307 až 309 °C.

Analýza pro C23H21N3O4:

Vypočteno: C, 68,47; H, 5,25; N, 10,42;

Nalezeno: C 68,35; H, 5,33; N, 10,42% [a]²⁰ _D: = + 65,2 (C = 1,15; CHC1₃).

Následující sloučenina se připraví podobně:

Příklad 3 (3 S,6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-3-methyl-6-(3,4-methylendioxyfenyl)-pyrazino[2', 1':6, l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dion jako bílé krystaly použitím amoniaku jako báze

t.t.: 319 až 321 °C

Analýza pro C22HUN3O4:

Vypočteno: C, 67,86; N, 5,17; N, 10,79;

Nalezeno: C, 67,86; H, 5,17; N, 10,72 %.

[a]²⁰ _D = +107° (c = 1; pyridin).

Sloučenina A a B byly začleněny do farmaceutických přípravků, a detaily těchto přípravků jsou uvedeny dále.

Tablety pro orální podání

A. Přímé lisování

1. Účinná složka	mg/tabletu 50,0
Crospovidon USNF Stearát hořečnatý pH Eur Bezvodá laktóza	8,0 1,0 141,0

Účinná složka se prošije a smísí se s excipienty. Získaná směs se slisuje do tablet.

2.	mg/tabletu
Účinná složka	50,0
Koloidní oxid křemičitý Crospovidon Stearát hořečnatý Ph Eu Mikrokrystalická celulóza USNF	0,5 8,0 1,0 139,5

Účinná složka se prošije a smísí se s excipienty. Získaná směs se slisuje do tablet.

B. Mokrá granulace

1.	mg/tabletu
Účinná složka Polyvinylpyrrolidon Polyethylenglykol Polysorbat 80 Stearát hořečnatý Ph Eu Kroskarmelóza sodná Koloidní oxid křemičitý Mikrokrystalická celulóza USNF	50,0 150,0 50,0 10,0 2,5 25,0 2,5 210,0

Polyvinylpyrrolidon, polyethylenglykol a polysorbat 80 se rozpustí ve vodě. Výsledný roztok se použije ke granulaci účinné složky. Po usušení se granule prošijí, potom se vytlačují při zvýšených teplotách a tlacích. Extrudát se mele a/nebo prošije, potom se smísí smikrokrystalickou celulózou, kroskarmelózou sodnou, koloidním oxidem křemičitým a stearátem hořečnatým. Získaná směs se slisuje do tablet.

2.	mg/tabletu
Účinná složka Polysorbat 80 Laktóza Ph Eur Škrob BP Předgelovatěný kukuřičný škrob BP Stearát hořečnatý BP	50,0 3,0 178,0 45,0 22,5 1,5

Účinná složka se prošije a smísí s laktózou, škrobem a předgelovatěným kukuřičným škrobem. Polysorbat 80 se rozpustí v purifikované vodě. Přidá se příslušný objem roztoku polysorbatu a prášek se granuluje. Po usušení se granulát prošije a smísí se se stearátem hořečnatým. Potom se granulát slisuje do tablet.

Tablety s jinou účinností se připraví v odpovídajícím poměru účinné složky k ostatním excipientům.

Tablety potažené filmem

Výše zmíněné tabletovací směsi byly potaženy filmem

Potahovací suspenze	% hmotn/hmotn.
„Opadry“ bílá t	13,2
Purifikovaná voda pH Eu	do 100,0*

* Voda se neobjevila v konečném výrobku. Maximální teoretická hmotnost pevné látky aplikované během potahování byla 20 mg/tabletu.

+ „Opadry“ bílá je chráněný materiál získatelný od Colorcon Limited, UK, který obsahuje hydroxypropylmethylcelulózu, oxid titaničitý a triacetin.

Tablety byly potaženy filmem použitím potahové suspenze v běžném zařízení pro potahování filmem.

Kapsle

1.	mg/kapsle
Účinná složka	50,0
Laktóza	148,5
Polyvinylpyrrolidon	100,0
Stearát hořečnatý	1,5
Účinná složka se prošije a smísí s excipienty. Směs se naplní do tvrdých želatinových kapslí velikosti č. 1 použitím vhodného zařízení.
2.	mg/kapsle
Účinná složka	50,0
Mikrokrystalická celulóza	233,5
Laurylsíran sodný	3,0
Crospovidon	12,0
Stearát hořečnatý	1,5

Účinná složka se prošije a smísí se s excipienty. Směs se naplní do tvrdých želatinových kapslí velikosti č. 1 použitím vhodného zařízení.

Je možné připravit i jiná dávkování změnami poměru účinné látky kexcipientu, hmotnosti náplně, a, pokud je to nezbytné, velikost kapslí.

3.	mg/kapsle
Účinná složka	50,0
Labrafil M1944CS	do 1,0 ml

Účinná látka se prošije a smísí se s Labrafilem. Suspenze se plní do měkkých želatinových kapslí použitím vhodného zařízení.

-9CZ 289832 B6

Inhibiční účinek na cGMP-PDE cGMP-PDE účinnost sloučenin z předloženého vynálezu se měří použitím jednostupňové zkoušky uzpůsobené Wellsem a kol. (Wells, J.N., Baird, C.E., Wu, Y.J. a Hardman, J.G., Biochim. Biphys. Acta 384,430 (1975)). Reakční médium obsahovalo 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 5 mM Mg-acetátu, 250 pg/ml 5'-nukleotidázy, 1 mM EGTA a 0,15 μΜ 8-[H³]-cGMP. Použitým enzymem byl lidský rekombinantní PDE v (ICOS, Seattle USA).

Sloučeniny podle vynálezu byly rozpuštěny vDMSO, nakonec přítomném ve 2% testech. Inkubační doba byla 30 minut, během nichž celková konverze substrátu nepřesáhla 30 %.

Hodnoty IC₅o testovaných sloučenin byly stanoveny zodpovídajících koncentračních křivek použitím obvyklých koncentrací v rozmezí od 10 mM do 10 μΜ. Testy oproti jiným PDE enzymům používajících standardní metody také ukazují, že sloučeniny z vynálezu jsou vysoce selektivní pro CGMP specifický PDE enzym.

Měření hladin cGMP

Byly použity buňky z krysího aortálního hladkého svalstva (RSMC) připravené podle Chamleye a kol., v Cell Tissue Res. 177, 503-522 (1977) mezi 10. a 25. průchodem v soutoku ve 24-prohlubňových kultivačních nádobách. Kultivační médium bylo odsáto a přeneseno PBS (0,5 ml) obsahujícím testovanou sloučeninu v příslušné koncentraci. Po 30 minutách při 37 °C byly částice guanylatcyklasy stimulovány přídavkem ANF (100 nM) po 10 minut. Na konci inkubace bylo prostředí odebráno a byly provedeny dvě extrakce přídavkem 65% ethanolu (0,25 ml). Dva ethanolické extrakty byly spojeny a odpařeny do sucha použitím Speed-vac systému. c-GMP byla měřena po acetylaci scintilačním proximitním imunotestem (AMERSHAM).

U sloučenin podle předloženého vynálezu bylo nalezeno, že typicky vykazují hodnoty EC₅o menší než 500 nM a hodnoty EC₅₀ menší než 5. Hodnoty in vivo testu pro reprezentativní sloučeniny podle vynálezu jsou uvedeny v následující tabulce 1:

Tabulka 1.

Příklad č.	ICsonM	EC50pM
1	2	0,2
2	2	0,2

Výše uvedené hodnoty dokládají schopnost předmětných sloučenin podle vynálezu inhibovat cGMP PDE, a tudíž jejich použitelnost při léčení samičí sexuální dysfunkce.

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (3)

1. Použití tetracyklických derivátů obecného vzorce a jejich fyziologicky přijatelných solí a solvátů, například hydrátů, kde

R° znamená atom vodíku nebo halogenu nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku,

R¹ znamená atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, alkenyl nebo alkinyl vždy o 2 až 6 atomech uhlíku, halogenalkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku v cykloalkylové a 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, fenylalkyl o 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, popřípadě substituovaný 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny atom halogenu, alkyl nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku nebo methylendioxyskupina, nebo heteroarylalkyl o 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, kde heteroarylovou částí je thienyl, furyl nebo pyridyl, popřípadě substituované 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny atom halogenu, alkyl nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku

R² znamená případně substituovaný monocyklický aromatický kruh ze skupiny benzen, thiofen, furan a pyridin nebo případně substituovaný bicyklický systém připojený ke zbytku molekuly přes jeden z uhlíkových atomů benzenového kruhu, přičemž kondenzovaný kruh A je 5- nebo 6-členný kruh, nasycený nebo částečně nebo zcela nenasycený a obsahující atom uhlíku a popřípadě jeden nebo dva heteroatomy ze skupiny kyslík, síra a dusík, případnými substituenty na benzenovém kruhu mohou být 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny atom halogenu, hydroxyskupina, alkyl nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku, -CO₂R^b, halogenalkyl, halogenalkoxyskupina vždy o 1 až

6 atomech uhlíku, kyanoskupina, nitroskupina nebo skupina -NR^aR^b, kde R^a a R^b znamenají atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, R^a může rovněž znamenat alkanoyl o 2 až

7 atomech uhlíku nebo alkylsulfonyl o 1 až 6 atomech uhlíku, případnými substituenty na kruhu A mohou být 1, 2 nebo 3 substituenty ze skupiny atom halogenu, alkyl nebo alkoxyskupina vždy o 1 až 6 atomech uhlíku a fenylalkyl o 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, popřípadě dále substituovaný shora uvedeným způsobem, a

R³ znamená atom vodíku nebo alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, nebo

R¹ a R³ společně znamenají 3- nebo 4-členný alkylový nebo alkenylový řetězec;

pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci samičí sexuální dysfunkce.

2. Použití podle nároku 1, kde léčivo má formu vhodnou pro orální podávání.

3. Použití podle nároku 1 nebo 2, kde sexuální dysfunkcí je orgazmická dysfunkce.