CZ286444B6

CZ286444B6 - Antimicrobial preparations

Info

Publication number: CZ286444B6
Application number: CZ19962217A
Authority: CZ
Inventors: David Oppong; Vanja M King
Original assignee: Buckman Labor Inc
Priority date: 1994-01-27
Filing date: 1995-01-24
Publication date: 2000-04-12
Also published as: DK0741517T3; CZ221796A3; EP0741517B1; FI962991A0; ZA9410122B; WO1995020319A1; US5441981A; CA2180649A1; CA2180649C; SK98696A3; AU683719B2; EP0741517A1; US5726206A; AU1607095A; BR9506607A; FI117037B; CN1074899C; US5654330A; DE69503603D1; JPH09508621A

Description

Antimikrobiální prostředky

Oblast techniky

Předložený vynález se vztahuje k určitým prostředkům a způsobům použitelným pro regulaci růstu jednoho nebo více mikroorganismů a pro zabránění škod způsobených bakteriemi a houbami na různých produktech, materiálech nebo prostředích, zvláště průmyslových produktech, materiálech nebo prostředích. Tyto produkty, materiály nebo prostředí zahrnují dřevnou buničinu, dřevné štěpky, stavební dříví, lepidla, obklady, zvířecí kůže, papírenské louhy, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky, toaletní přípravky, geologická vrtací maziva, petrochemikálie, agrochemické prostředky, nátěrové hmoty, kůže, dřevo, kapaliny v kovoprůmyslu, vody chladicích věží, činící břečky, škrob, bílkovinné materiály, akrylátové latexové nátěrové emulze a textil.

Nové prostředky a způsoby zahrnující prostředky předloženého vynálezu vykazují neočekávanou synergickou aktivitu vůči mikroorganismům včetně bakterií a hub. Specificky je vynález zaměřen na použití prostředků a způsobů zahrnujících halogenovaný acetofenon a nejméně jednu organickou kyselinu, její sůl nebo ester.

Dosavadní stav techniky

Řada produktů, materiálů nebo prostředí uvedených výše, za vlhka nebo podrobena působení vody, je náchylná k poškození nebo odbourání bakteriemi nebo houbami, pokud se nepřijmou opatření k zbránění těchto poškození nebo odbourání. K regulaci poškození nebo odbourání způsobeného mikroorganismy se používají různé průmyslové mikrobicidy, ale některé z těchto biocidů mají problematickou použitelnost, protože mají nepříjemný zápach, mají vysokou cenu, vykazují nízký stupeň účinnosti a/nebo vytváří rizika vzhledem ke skladování, použití a/nebo zacházení.

Například použití tak oblíbených průmyslových mikrobicidů jako jsou organické sloučeniny rtuti, organické sloučeniny cínu a chlorované fenoly se dostává pod sílící regulační tlak v současné době vzhledem k jejich vysoké toxicitě a zájmu o jejich nepříznivé účinky na prostředí. V důsledku toho průmysl pokračuje ve vyhledávání zlepšených biocidů, které mají nízkou toxicitu a jsou schopny vykazovat prodloužený biocidní účinek při běžných hladinách použití.

Japonská patentová přihláška 58-183,606 se vztahuje k fungicidům a činidlům regulujícím řasy obsahujícím směs acetofenonové sloučeniny s 3,5-dimethyl01,2,5-2H-tetrahydrothiadiazin-2thionem; methylenbisthiokyanátem; l,4-bis(bromacetoxy)-2-butenem; l,2-bis(bromacetoxy)ethanem; 2-brom-2-nitro-l,3-propandiolem; nebo se směsí komplexu 5-chlor-2-methyl-4isothiazidin-3-onu a soli kovu a komplexem 2-methyl—4-isothiazolin-3-onu a soli kovu.

Samotné organické kyseliny mohou být použity k regulaci mikroorganismů, a zatímco některé z těchto sloučenin jsou obecně považovány za bezpečné, mnohé z nich mají nízkou účinnost vůči bakteriím a houbám, pokud se nepoužijí extrémně vysoké koncentrace. V nadměrných koncentracích mohou být tyto organické kyseliny drahé a dokonce mohou působit korozi určitých průmyslových materiálů. Je tedy žádoucí způsob, který může zabránit nadměrnému používání organických kyselin a tedy snížit náklady.

Alternativně halogenované acetofenony mohou být použity samotné v nízkých koncentracích jako biocidy s nízkou toxicitou. Ovšem v nízkých koncentracích halogenované acetofenony mají sklon k zužování antimikrobiálního spektra a selhávání v úplné zábraně růstu mikroorganismů.

- 1 CZ 286444 B6

Podstata vynálezu

Předložený vynález je odpovídajícím způsobem zaměřen na mikrobicidní prostředky a způsoby, což zahrnuje ty prostředky, které podstatně odstraňují jeden nebo více problémů, omezení a nevýhod stavu techniky. Zvláště jsou prostředky podle předloženého vynálezu schopny regulovat růst nejméně jednoho mikroorganismu, zvláště hub a bakterií, po prodloužené časové období a jsou bezpečné a hospodárné při použití. Předložený vynález je také zaměřen na metody nebo postupy regulace růstu alespoň jednoho mikroorganismu.

Předložený vynález poskytuje přípravek k regulaci růstu alespoň jednoho mikroorganismu, což zahrnuje synergicky účinné množství halogenovaného acetofenonu, alespoň jednu organickou kyselinu, její sůl nebo ester. Prostředek poskytuje vysokou mikrobicidní aktivitu v nízkých koncentracích vůči širokému rozmezí mikroorganismů.

Předložený vynález také poskytuje způsob regulace růstu alespoň jednoho mikroorganismu v nebo na materiálu nebo prostředí náchylnému k napadení mikroorganismy, což zahrnuje krok přidání prostředku podle předloženého vynálezu, kde složky prostředku jsou obsaženy v synergicky účinných množstvích, k materiálu nebo prostředí.

Navíc předložený vynález poskytuje způsob zabránění poškození produktu, materiálu nebo prostředí způsobenému bakteriemi a/nebo houbami, což zahrnuje krok přidání prostředku podle předloženého vynálezu, kde složky prostředku jsou přítomny v synergicky účinných množstvích, k produktu, materiálu nebo prostředí.

Synergicky účinná množství se mění v souladu s materiálem nebo prostředím, na které se působí, a mohou být pro jednotlivé použití rutinně určeny bez přílišného experimentování zkušeným pracovníkem v oboru.

Předložený vynález rovněž zahrnuje oddělené přidání halogenovaného acetofenonu a nejméně jedné organické kyseliny, její sole nebo esteru, k produktu, materiálu nebo prostředí výše uvedenému. V souladu s tímto provedením se složky jednotlivě přidávají do systému tak, že konečné množství halogenovaného acetofenonu a alespoň jedné organické kyseliny, její soli nebo esteru, přítomné v systému v době používání je synergicky účinné množství požadované k regulaci růstu alespoň jednoho mikroorganismu.

Prostředky předloženého vynálezu jsou také použitelné při ochraně různých typů průmyslových produktů, prostředí a materiálů, které jsou náchylné k napadení mikroorganismy. Tyto produkty, prostředí nebo materiály zahrnují, ale nejsou tak omezeny, barviva, pasty, stavební dříví, kůže, textil, buničinu, dřevné štěpky, činící břečky, papírenské louhy, polymemí emulze, nátěrové hmoty, papír a jiná povlaková a lepicí činidla, kapaliny v kovoprůmyslu, geologická vrtací maziva, petrochemikálie, chladicí vodní systémy, farmaceutické přípravky, kosmetické a toaletní přípravky.

Prostředky mohou být také použity v agrochemických přípravcích pro účely ochrany semen nebo úrody vůči mikrobiálnímu poškození.

Dodatečné výhody vynálezu budou zčásti uvedeny dále v popisu, který následuje a dále zčásti vyplynou z popisu nebo mohou být zjištěny používáním vynálezu. Výhody vynálezu mohou být uskutečněny a získány způsobem součástí a kombinací zvláště uvedených v nárocích.

Je třeba porozumět, že jak předcházející obecný popis, tak i následující podrobný popis jsou pouze příkladné a vysvětlující a neomezují předložený vynález, jak je nárokován.

-2CZ 286444 B6

Jsou-li dva chemické mikrobicidy kombinovány v jeden produkt nebo přidány odděleně, jsou možné tři výsledky:

1) Chemikálie v produktu vytvoří aditivní (neutrální) účinek.

2) Chemikálie v produktu vytvoří antagonistický (negativní) účinek, nebo

3) Chemikálie v produktu vytvoří synergický (pozitivní) účinek.

Aditivní účinek nemá ekonomickou výhodu proti jednotlivým složkám. Antagonistický účinek vytvoří negativní dopad. Pouze synergický účinek, který je méně pravděpodobný než aditivní nebo antagonistický účinek, poskytne pozitivní účinek a tedy poskytne ekonomickou výhodnost.

V literatuře o mikrobicidech je dobře známo, že není teoretická metoda, která by poskytla pravděpodobnost znalostí před skutečným testováním, zda budou získány aditivní, antagonistické nebo synergické účinky smísením dvou biocidů za vzniku přípravku.

Mikrobicidní prostředky kombinující halogenované acetofenony s alespoň jednou organickou kyselinou, její soli nebo esterem, vykazují neočekávaný synergický účinek v porovnání se samotnými složkami. Tak tyto prostředky dosahují vysoké, tj. vyšší než aditivní, mikrobicidní účinnosti při nízkých koncentracích vůči širokému rozmezí mikroorganismů. Příklady mikroorganismů zahrnují houby a bakterie jako jsou, ale nejsou tak omezeny, Trichoderma harzianum a Pseudomonas aeruginosa. Tyto dva organismy jsou některé z nejběžnějších organismů spojených s poškozováním produktů, materiálů nebo prostředí. Neboť tyto dva jsou také některými z nejobtížněji regulovatelných organismů, má se za to, že prostředek předloženého vynálezu je účinný vůči většině bakterií a hub. Výhodně má prostředek předloženého vynálezu nízkou toxicitu.

V souladu s prostředky předloženého vynálezu je halogenovaný acetofenon výhodně halogenovaný hydroxyacetofenon a výhodněji má vzorec:

Y v němž X je halogen a Y je halogen nebo Η. X je výhodně Br, F, Cl nebo I a Y je H, Br, F, Cl nebo I. Nejvýhodněji je halogenovaným acetofenonem podle tohoto vynálezu 2-brom-4'hydroxyacetofenon. Příprava monosubstituo váných 2-bromacetofenonů je popsána v U.S. Patentu č. 3 193 448, jehož uvedení je zcela zahrnuto odkazem. 2-Brom-4'-hydroxyacetofenon nebo BHAP je obchodně dostupný a je také snadno připravitelný z obchodně dostupných surovin.

Organickými kyselinami předloženého vynálezu jsou jakékoliv organické kyseliny, které poskytují synergický účinek, jsou-li kombinovány s halogenovaným acetofenonem. Příklady organických kyselin zahrnují aromatické organické kyseliny, cyklické organické kyseliny, alifatické organické kyseliny, jejich sole nebo estery. Specifické příklady účinných organických kyselin podle vynálezu zahrnují kyselinu dehydracetovou, kyselinu oktanovou, kyselinu nonanovou, kyselinu mravenčí, kyselinu sorbovou, kyselinu octovou, kyselinu šťavelovou, kyselinu glykolovou, kyselinu citrónovou, kyselinu jablečnou, kyselinu propionovou, kyselinu laurovou, kyselinu undecylenovou, kyselinu benzoovou nebo deriváty kyseliny benzoové jako

-3CZ 286444 B6 kyselinu 2-hydroxybenzoovou, kyselinu 3-hydroxybenzoovou nebo kyselinu 4-hydroxybenzoovou, methylparabenát nebo propylparabenát.

Mohou být použity sole organických kyselin, výhodně ty, které obsahují vápník, zinek, draslík nebo sodík, jako je benzoan sodný a sorban draselný. Výhodnými estery jsou parabenáty, jako je methylparabenát a propylparabenát.

V souladu s předloženým vynálezem mohou být také použity směsi těchto organických kyselin, solí nebo esterů. Použijí-li se tyto směsi v kombinaci s halogenovaným acetofenonem, má alespoň jedna organická kyselina ve směsi synergický vztah s halogenovaným acetofenonem. Organické kyseliny, sole a estery použitelné ve vynálezu jsou komerčně dostupné nebo mohou být připraveny z komerčně dostupných surovin.

Organická kyselina může být zvolena, například, na základě slučitelnosti kyseliny s produkty, materiály nebo prostředími. Slučitelnost se snadno určí přidáním organické kyseliny k produktu, materiálu nebo prostředí, které má být použito.

Slučitelnost může být stanovena podmínkami, jako je rozpustnost v kapalném systému a/nebo postrádání reaktivity s předmětnou kapalinou. Například při použití v kapalném systému je výhodné, aby organická kyselina byla volně rozpustná nebo dispergovatelná v určitém kapalném systému a poskytla jednotný roztok nebo disperzi. Příklady kapalných systémů jsou činící břečky, papírenské louhy, vody chladicích věží a nátěrové hmoty.

V souladu s předloženým vynálezem může být prostředek ve formě tuhé látky, disperze, emulze nebo roztoku v závislosti na určitém použití. Dále složky prostředku mohou být aplikovány odděleně nebo mohou být nejprve zkombinovány a pak aplikovány na produkt, materiál nebo prostředí.

Prostředek předloženého vynálezu může být připraven v kapalné formě rozpuštěním složek (A) a (B) v organickém rozpouštědle.

V následující diskusi výhodných provedení je složkou (A) 2-brom-4'-hydroxyacetofenon a složkou (B) alespoň jedna organická kyselina, její sůl nebo ester.

Jak bylo popsáno výše, složky (A) a (B) přípravku jsou používány v synergický účinných množstvích. Hmotnostní poměry (A) k (B) se mění v závislosti na typu mikroorganismu, a rovněž na produktech, materiálech nebo prostředích, na které je prostředek aplikován. Zkušený pracovník v oboru může snadno určit odpovídající hmotnostní poměry pro specifické použití.

V předloženém vynálezu hmotnostní poměr složky (A) ke složce (B) výhodně sahá od 0,01:99 do 99:0,01, výhodněji od 1:30 do 30:1 a nejvýhodněji od 1:5 do 5:1.

Podle předloženého vynálezu jsou také výhodná následující přibližná rozmezí hmotnostních poměrů BHAP k následujícím organickým kyselinám:

BHAP:	kyselina benzoová	1:1,7	až	1:333
BHAP:	benzoan sodný	1:167	až	0,1:133
BHAP:	kyselina sorbová	1:1,7	až	1:133
BHAP:	sorban draselný	1:33	až	1:267
BHAP:	kyselina p-hydroxybenzoová	1:1,7	až	0,1:133
BHAP:	kyselina dehydracetová	1:6,7	až	1:67
BHAP:	kyselina propionová	1:8	až	1:333
BHAP:	methylparabenát	1:3	až	0,1:333

-4CZ 286444 B6

BHAP BHAP BHAP BHAP BHAP BHAP BHAP BHAP BHAP BHAP BHAP propylparabenát kyselina nonanová kyselina oktanová kyselina undecylenová kyselina laurová kyselina mravenčí kyselina octová kyselina šťavelová kyselina citrónová kyselina jablečná kyselina glykolová

1:1,7 až 0,1:333 1:17 až 1:133 1:1,7 až 1:133 1:1,7 až 0,1:167 1:1,7 až 1:333 1:1,7 až 1:333 1:8 až 1:266 1:1,7 až 1:133 1:1,7 až 1:133 1:1,7 až 1:67 1:3 až 1:133

Obecně ovšem může být získána účinná fungicidní a baktericidní odezva, pokud se použije synergická kombinace v koncentracích od 0,01 do 3000 ppm 2-brom—4-hydroxyacetofenonu, výhodněji od 0,1 do 1000 ppm, a nejvýhodněji od 0,1 do 500 ppm a od 0,1 ppm do 1 hmotnostního % organické kyseliny, výhodněji od 0,1 do 5000 ppm a nej výhodněji od 0,1 do 2000 ppm.

Předložený vynález také poskytuje způsob regulace růstu alespoň jednoho mikroorganismu v nebo na materiálu nebo prostředí náchylném k napadení mikroorganismem, který zahrnuje krok použití přípravku předloženého vynálezu, kde složky přípravku jsou přítomny v synergicky účinných množstvích, na materiál nebo prostředí.

Navíc předložený vynález poskytuje způsob zabránění poškození produktu, materiálu nebo prostředí způsobeného bakteriemi a/nebo houbami, který zahrnuje krok aplikace prostředku předloženého vynálezu, kde složky prostředku jsou přítomny v synergicky účinných množstvích, na uvedený produkt, materiál nebo prostředí. Například prostředek může být použit k zabránění poškození semen nebo úrody, jako je bavlna, ječmen, rýže, kukuřice, tabák, atd.

Způsob a rychlost aplikace prostředku se mění v závislosti na zamýšleném použití prostředku. Například prostředek může být aplikován postřikem nebo roztíráním na materiál nebo produkt. Materiál nebo produkt může být také ošetřen namáčením ve vhodném přípravku prostředku. U kapalných nebo kapalině podobných prostředí může být prostředek přidán do prostředí vlitím nebo odměřením vhodným zařízením tak, že vznikne roztok nebo disperze obsahující prostředek. Používá-li se jako kapalný ochranný prostředek, například, prostředek může být připraven jako vodná emulze. Je-li to nezbytné, může být k přípravku přidán tenzid.

V souladu s vynálezem mohou být přidány dodatečné složky, jako insekticidy a podobně, k předchozím přípravkům, bez ovlivnění synergických účinků prostředku. Insekticidy, které mohou být použity zahrnují, ale nejsou tak omezeny, pyrethriny, nikotin, chlordan, parathiony a methoxychlor.

Synergická aktivita kombinací popsaných výše byla ověřena za použití standardních laboratorních technik, jak je uvedeno níže. Následující příklady jsou zamýšleny k osvětlení, nikoliv k omezení, rozsahu předloženého vynálezu.

-5CZ 286444 B6

Příklady provedení vynálezu

Mikrobiologické vyhodnocení

A. Fungální vyhodnocení

Nejprve bylo připraveno médium obsahující glukózu a minerální sole přidáním 0,7 g KH2PO4, 0,7 g MgSO₄.7H₂O, 1,0 g NH4NO3, 0,005 g NaCl, 0,002 g FeSO₄.7H₂O, 0,002 g ZnSO₄.7H₂O, 0,001 g MnSO₄.7H₂O a 10 g glukózy do 1 litru deionizované vody. pH média bylo nastaveno 1M NaOH na 6. Médium pak bylo dávkováno v 5 ml množstvích do zkumavek a autoklávováno při 121 °C po 20 minut.

Houba, Trichoderma harzianum, byla pěstována na šikmém bramborovém dextrózovém agaru 7 až 10 dnů a suspenze spor byla připravena smytím spor ze šikmé kultury do sterilního fyziologického roztoku. Po přidání biocidů v požadované koncentraci ke sterilnímu médiu obsahujícímu glukózu a minerální sole byla přidána suspenze spor houby. Výsledná koncentrace spor byla přibližně 10⁶ cfu/ml. Inokulované médium bylo inkubováno při 28 °C 14 dnů.

B. Bakteriální vyhodnocení

Byla připravena živná půda (2,5 g/litr deionizované vody) a pH nastaveno 1M HC1 na 6. Tato byla dávkována po 5 ml množstvích do zkumavek a autoklávována 20 minut při 121 °C. Po přidání biocidů v požadované koncentraci k živné půdě bylo přidáno 100 mikrolitrů suspenze buněk Pseudomonas aeruginosa přibližně 9,3 x 10⁸ cfc/ml a inkubováno při 37 °C po 48 hodin.

V příkladech 1 až 19 byl prokázán synergický účinek testováním kombinace 2-brom-4'hydroxyacetofenonu (BHAP) označeného jako složka A a odpovídající organické kyseliny, její sole nebo esteru, označené jako složka B v sérii testů v proměnných poměrech a koncentračních rozsazích vůči houbě Trichoderma harzianum a rovněž také vůči bakterii Pseudomonas aeruginosa při použití způsobů popsaných výše.

Pro každou složku A a B ve směsi obsahující A a B a pro každou složku A a B působící samotnou byly stanoveny nejnižší koncentrace, které úplně zabraňují růstu houby po dva týdny a bakterie po 48 hodin. Tyto koncentrace byly použity jako koncové body pro výpočty synergismu. Koncové body pro složky samotné nebo ve směsích popsaných výše pak byly porovnány s koncovými body pro čisté aktivní složky samotné v podobně připravených baňkách nebo zkumavkách.

Synergismus byl prokazován způsobem popsaným autoiy Kuli, E. C., Eisman, P. C., Sylwestrwicz, H. D., a Mayer, R. L. 1961. Applied Microbiology. 9: 538-541, v níž:

QA/Qa + QB/Qb je menší než 1

Qa = koncentrace látky A v ppm (parts per million), působící samotné, která poskytla koncový bod.

Qb = koncentrace látky B v ppm, působící samotné, která poskytla koncový bod.

QA = koncentrace látky A v ppm, ve směsi, která poskytla koncový bod.

QB = koncentrace látky B v ppm, ve směsi, která poskytla koncový bod.

Pokud je součet QA/Qa a QB/Qb větší nezjedná, je indikován antagonismus a je-li součet roven jedné, je indikována aditivita. Pokud je součet těchto hodnot menší než jedna, existuje synergismus.

-6CZ 286444 B6

Tento postup pro prokázání synergismu v prostředcích tohoto vynálezu je široce používán a přijímán. Podrobnější informace je poskytnuta v článku autorů Kuli a spol. Další informace týkající se tohoto postupu jsou obsaženy vU.S. Patentu č. 3 231 509, jehož uvedení je zcela zahrnuto odkazem.

Příklady prokazují, že v převážné většině vzorků kombinace BHAP s odpovídající organickou kyselinou poskytuje synergický výsledek (udaný hodnotóu poměru menší než jedna). Bylo několik příkladů, jako v Tabulce 2, <1.2 nebo <1,4, kde synergické výsledky byly neprůkazné, protože koncové body pro kyseliny použité samotné nebyly stanoveny.

Zkušenému pracovníku v oboru bude zřejmé, že mohou být prováděny různé modifikace a obměny v prostředcích a způsobech předloženého vynálezu, aniž by došlo k odchýlení od smyslu nebo rozsahu vynálezu. Tedy je zamýšleno, že předložený vynález pokrývá modifikace a obměny tohoto vynálezu při zabezpečení, že spadají do rozsahu připojených nároků a jejich ekvivalentů.

Příklad 1

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina benzoová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Qa/Q₃	Qs/Qb	QA/Qa + Qe/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	—	—	—
	—	7,5	—	250	0,25	0,5	0,75
	—	15	—	25	0,5	0,05	0,55
	—	15	—	50	0,5	0,1	0,6
	—	15	-	100	0,5	0,2	0,7
	-	15	-	250	0,5	0,5	1
	—	—	500	-	-	-	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	—	0,3	-	100	0,04	0,4	0,44
	—	0,75	-	100	0,1	0,4	0,5
	—	1,5	—	50	0,2	0,2	0,4
	—	1,5	-	100	0,2	0,4	0,6
	—	3	—	10	0,4	0,04	0,44
	—	3	—	25	0,4	0,1	0,5
	—	3	-	50	0,4	0,2	0,6
	—	3	—	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

Příklad 2

Složka A = BHAP

Složka B = benzoan sodný

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Qa/Qq + Qe/Qb
Psendomonas aeruginosa	7,5		—	-	-	-	-
	-	0,75	-	1000	0,1	1	<1,1
	-	1,5	-	1000	0,2	1	<1,2
	-	3	-	500	0,4	0,5	0,9
	-	3	-	1000	0,4	1	<1,4
	-	-	> 1000	-	-	-	-

Poznámka: Kombinace vůči Trichoderma harzianum nebyly synergické.

Příklad 3

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina sorbová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Qa/Qí	Qs/Qb	Qa/Q₃ + Qe/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	—	—	—
	-	3	-	500	0,1	0,5	0,6
	-	7,5	-	100	0,25	0,1	0,35
	—	7,5	-	250	0,25	0,25	0,5
	-	7,5	-	500	0,25	0,5	0,75
	-	15	—	25	0,5	0,03	0,53
	-	15	-	50	0,5	0,05	0,55
	-	15	-	100	0,5	0,1	0,6
	—	15	-	250	0,5	0,25	0,75
	-	15	-	500	0,5	0,5	1
	—	—	1000	—	—	—	—
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—		—	—	—
	-	0,3	-	100	0,04	0,4	0,44
	—	0,75	—	100	0,1	0,4	0,5
	-	1,5	-	50	0,2	0,2	0,4
	—	1,5	-	100	0,2	0,4	0,6
	-	3	-	10	0,4	0,04	0,44
	—	3	—	25	0,4	0,1	0,5
	-	3	-	50	0,4	0,2	0,6
	—	3	—	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

-8CZ 286444 B6

Příklad 4

Složka A = BHAP

Složka B = sorban draselný

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Qa/Q₃	Qb/Qb	Qa/Q₃ + Qb/Qb
Trichoderma harzianum	30	-	-	-	-	—	-
	-	7,5	-	2000	0,25	1	1,25
	—	15	-	500	0,5	0,25	0,75
	-	15	-	1000	0,5	0,5	< 1
	-	15		2000	0,5	1	<1,5
	-	-	>2000	-	-	-	-

Poznámka: Kombinace vůči Pseudomonas aeruginosa nebyly synergické.

Příklad 5

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina p-hydroxybenzoová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Qa/Qs	Qb/Qb	Qa/Q₃ + Qb/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	—		—
	-	1,5	-	2000	0,05	1	< 1,05
	-	3	-	2000	0,1	1	<1,1
	-	7,5	-	500	0,25	0,25	0,5
	—	7,5		1000	0,25	0,5	0,75
	-	15	-	25	0,5	0,01	0,51
	-	15	-	50	0,5	0,03	0,53
	-	15	-	100	0,5	0,05	0,55
		15	—	250	0,5	0,13	0,63
	—	15	—	500	0,5	0,25	0,75
	-	-	>2000	-	-	-	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	-	0,3	—	250	0,04	0,5	0,54
	-	0,75	—	100	0,1	0,2	0,3
	—	0,75	—	250	0,1	0,5	0,6
	-	1,5	—	50	0,2	0,1	0,3
	—	1,5	-	100	0,2	0,2	0,4
	-	1,5	-	250	0,2	0,5	0,7

-9CZ 286444 B6

Příklad 5 - pokračování

Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qb/Qb	Qa/Qí + Qe/Qb
-	3	-	25	0,4	0,05	0,45
-	3	-	50	0,4	0,1	0,5
-	3	-	100	0,4	0,2	0,6
-	3	-	250	0,4	0,5	0,9
-	-	500	-	-	-	-

Příklad 6

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina dehydracetová ίο Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Q_A/Qa + Qs/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	—	—	-
	-	7,5	—	100	0,25	0,2	0,45
	-	7,5	-	250	0,25	0,5	0,75
	-	15	-	100	0,5	0,2	0,7
	-	15	-	250	0,5	0,5	1
	-	-	500	—	-	—	—
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	—	1,5	-	100	0,2	0,4	0,6
	-	3	-	25	0,4	0,1	0,5
	-	3	-	50	0,4	0,2	0,6
	-	3	-	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

Příklad 7

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina propionová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Q_A/Qa ⁺ Qs/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	—	—	-
	-	7,5	-	1000	0,25	1	1,25
	—	15	—	250	0,5	0,13	0,63
	-	15	-	500	0,5	0,25	0,75

-10CZ 286444 B6

Příklad 7 - pokračování

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qs/Qb	Q_A/Qa + Qe/Qb
	-	15	-	1000	0,5	0,5	< 1
	-	-	2000	—	-	-	—
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	-	0,3	-	100	0,04	0,4	0,44
	-	0,75	-	100	0,1	0,4	0,5
	-	1,5	-	100	0,2	0,4	0,6
	-	3	-	25	0,4	0,1	0,5
	—	3	-	50	0,4	0,2	0,6
	—	3	—	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

Příklad 8

Složka A = BHAP

Složka B = methylparabenát io Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Qa/Q₃ + Qe/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—			—
	-	3	-	500	0,1	0,5	0,6
	-	7,5	-	100	0,25	0,1	0,35
	-	7,5	-	250	0,25	0,25	0,35
	-	7,5	-	500	0,25	0,5	0,75
	-	15	-	100	0,5	0,1	0,6
	—	15	—	250	0,5	0,25	0,75
	—	15	-	500	0,5	0,5	1
	—	—	1000	—	—	—	—
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	-	0,3	-	1000	0,04	1	< 1,04
	-	0,75	-	1000	0,1	1	<1,1
	—	1,5	-	500	0,2	0,5	0,7
	-	1,5	-	1000	0,2	1	<1,2
	-	3	-	10	0,4	0,01	0,41
	—	3	—	25	0,4	0,03	0,43
	-	3	-	50	0,4	0,05	0,45
	—	3	—	100	0,4	0,1	0,5
	-	3	-	250	0,4	0,25	0,65
	—	3	—	500	0,4	0,5	0,9
	-	3	-	1000	0,4	1	1,4
	-	-	> 1000	-	-	-	-

-11CZ 286444 B6

Příklad 9

Složka A = BHAP

Složka B = propylparabenát

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Qa/Qs	Qs/Qb	Qa/Q₃ + Qs/Qb
Trichoderma harzianum	30	-	—	-	—	-	-
	—	1,5	-	250	0,05	0,5	0,55
	-	3	-	250	0,1	0,5	0,6
	-	7,5	-	100	0,25	0,2	0,45
	-	7,5	-	250	0,25	0,5	0,75
	—	15	-	50	0,5	0,1	0,6
	—	15	-	100	0,5	0,2	0,7
	—	15	-	250	0,5	0,5	1
	-	-	500	-	-	—	—
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—		—	—	—	—
	-	0,3	-	500	0,04	0,5	0,54
	-	0,3	-	1000	0,04	1	< 1,04
	-	0,75	-	500	0,1	0,5	0,6
	-	1,5	-	250	0,2	0,25	0,45
	-	1,5	-	500	0,2	0,5	0,7
	-	3	-	5	0,4	0,01	0,41
	—	3	-	10	0,4	0,01	0,41
	-	3	-	25	0,4	0,03	0,43
	-	3	-	50	0,4	0,05	0,45
	-	3	-	100	0,4	0,1	0,5
	-	3	-	250	0,4	0,25	0,65
	—	3	-	500	0,4	0,5	0,9
	-	-	> 1000	-	-	-	-

Příklad 10

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina nonanová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Q_a	Qs/Qb	Qa/Qs + Qs/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	—	—	-
	-	15	-	250	0,5	0,5	< 1
	-	—	500	—	-	-	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	-	0,75	-	100	0,1	0,4	0,5

-12CZ 286444 B6

Příklad 10 - pokračování

Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	QiýQb	Qa/Q₃ + Qe/Qb
—	1,5	—	100	0,2	0,4	0,6
—	3	-	50	0,4	0,2	0,6
—	3	-	100	0,4	0,4	0,8
-	-	250	-	-	-	-

Příklad 11

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina oktanová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Q_A/Qa + Qe/Qb
Trichoderma harzianum	30	-	-	-	—	-	—
	—	7,5	-	100	0,25	0,2	0,45
	—	7,5	-	250	0,25	0,5	0,75
	—	15	-	25	0,5	0,05	0,55
	—	15	-	50	0,5	0,1	0,6
	-	15	-	100	0,5	0,2	0,7
	—	15	-	250	0,5	0,5	1
	—	—	500	—	-	—	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	-	1,5	-	100	0,2	0,4	0,6
	—	3	-	50	0,4	0,2	0,6
	—	3	—	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

Příklad 12

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina undecylenová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Qa/Qs + Qe/Qb
Trichoderma harzianum	30	-	—	—	—	—	—
	-	1,5	-	1000	0,05	0,5	0,55
	—	3	-	500	0,1	0,25	0,35
	-	3	-	1000	0,1	0,5	0,6

-13CZ 286444 B6

Příklad 12 - pokračování

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qs/Qb	Qa/Qq + Q_B/Q_b
	-	7,5	-	250	0,25	0,13	0,38
	-	7,5	-	500	0,25	0,25	0,5
	-	7,5	-	1000	0,25	0,5	0,75
	-	15	—	25	0,5	0,01	0,51
	-	15	-	50	0,5	0,03	0,53
	-	15	-	100	0,5	0,05	0,55
	-	15	-	250	0,5	0,13	0,63
	-	15	—	500	0,5	0,25	0,75
	-	15	—	1000	0,5	0,5	1
	-	—	2000	-	—	—	—
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	-
	-	0,3	—	500	0,04	0,5	0,54
	-	0,75	-	250	0,1	0,25	0,35
	-	0,75	-	500	0,1	0,5	0,6
	-	1,5	—	250	0,2	0,25	0,45
	-	1,5	-	500	0,2	0,5	0,7
	-	3		250	0,4	0,25	0,65
	-	3	-	500	0,4	0,5	0,9
	-	-	1000	-	-	-	-

Příklad 13

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina laurová ío Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qs/Qb	Q_A/Qa + Qs/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	-	—	—
	-	7,5	-	50	0,25	0,03	0,28
	—	7,5	-	100	0,25	0,05	0,30
	—	7,5	—	250	0,25	0,13	0,38
	-	7,5	-	500	0,25	0,25	0,5
	-	7,5	-	1000	0,25	0,5	0,75
	-	7,5	-	2000	0,5	1	<1,5
	—	15	-	25	0,5	0,01	0,51
	-	15	-	50	0,5	0,03	0,53
	-	15	-	100	0,5	0,05	0,55
	—	15	-	250	0,5	0,13	0,63
	—	15	—	500	0,5	0,25	0,75
	-	15	-	1000	0,5	0,5	< 1
	-	15	-	2000	0,5	1	<1,5

-14CZ 286444 B6

Příklad 13 - pokračování

	Qa	Qa	Q_b	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Qa/Q₃ + Qe/Qb
	-	-	>2000	-	-	-	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	—	3	—	100	0,4	0,1	0,5
	-	3	-	250	0,4	0,25	0,65
	—	3	-	500	0,4	0,5	0,9
	-	3	-	1000	0,4	1	<1,4
	-	-	> 1000	-	-	-	-

Příklad 14

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina mravenčí ίο Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	QA^Qa	QB/Qb	Qa/Q₃ + Qe/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	—	—	—
	—	3	—	1000	0,1	0,5	0,6
	-	3	-	2000	0,1	1	<1,1
	—	7,5	—	250	0,25	0,13	0,38
	—	7,5	—	500	0,25	0,25	0,5
	-	7,5	-	1000	0,25	0,5	0,75
	-	7,5	-	2000	0,25	1	< 1,25
	-	15	-	25	0,5	0,01	0,51
	-	15	-	50	0,5	0,03	0,53
		15	-	100	0,5	0,05	0,55
	-	15	-	250	0,5	0,13	0,63
	-	15	-	500	0,5	0,25	0,75
	-	15	-	1000	0.5	0,5	< 1
	-	-	>2000	-	-	-	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	—	0,3	-	50	0,04	0,5	0,54
	—	0,75	—	50	0,1	0,5	0,6
	—	1,5	-	25	0,2	0,25	0,45
	—	1,5	—	50	0,2	0,5	0,7
	—	3	—	10	0,4	0,1	0,5
	—	3	-	25	0,4	0,25	0,65
	—	3	-	50	0,4	0.5	0,9
	-	-	100	-	-	-	-

-15CZ 286444 B6

Příklad 15

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina octová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Q_A/Qa + Qtj/Qb
Trichoderma harzianum	30	—	—	—	—	—	-
	-	7,5	-	2000	0,25	1	< 1,25
	-	15	-	1000	0,5	0,5	< 1
	-	15	-	2000	0,5	1	<1,5
	-	-	>2000	-	-	-	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	—	0,75	—	50	0,1	0,5	0,6
	-	1,5	-	50	0,2	0,5	0,7
	-	3	—	25	0,4	0,25	0,65
	-	3	—	50	0,4	0',5	0,9
	-	-	100	-	-	-	-

Příklad 16

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina šťavelová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Q_B/Q_b	Q_A/Qa + QB/Qb
Trichoderma harzianum	30	—		—	-	-	-
	-	15	-	1000	0,5	0,5	< 1
	-	15	-	2000	0,5	1	<1,5
	-	-	>2000	-	-	-	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	—	0,3	—	100	0,04	0,4	0,44
	-	0,75	—	100	0,1	0,4	0,5
	—	1,5	—	50	0,2	0,2	0,4
	—	1,5	—	100	0,2	0,4	0,6
	—	3	—	5	0,4	0,02	0,42
	—	3	-	10	0,4	0,04	0,44
	—	3	—	25	0,4	0,1	0,5
	-	3	-	50	0,4	0,2	0,6
	—	3	—	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

-16CZ 286444 B6

Příklad 17

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina citrónová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Qa/Qh	QB/Qb	Qa/Q₃ + Qs/Qb
Trichoderma harzianum	30	-	-	—	—	—
	-	15	-	1000	0,5	0,5	< 1
	-	15	-	2000	0,5	1	< 1,5
	-	-	>2000	-	-	-	-
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	—	—	—	—	—
	—	0,75	—	100	0,1	0,4	0,5
	—	1,5	—	100	0,2	0,4	0,6
		3	—	50	0,4	0,2	0,6
	—	3	—	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

Příklad 18

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina jablečná

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Q_B/Qb	Q_A/Qa + Qe/Qb
Pseudomonas aeruginosa	7,5	-	-	—	—	—	—
	—	1,5	—	50	0,2	0,2	0,4
	-	1,5	-	100	0,2	0,4	0,6
		3	—	5	0,4	0,02	0,42
	-	3	-	10	0,4	0,04	0,44
	—	3	-	25	0,4	0,1	0,5
	-	3	-	50	0,4	0,2	0,6
	—	3	—	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

Poznámka: Kombinace vůči Trichoderma harzianum nebyly synergické.

-17CZ 286444 B6

Příklad 19

Složka A = BHAP

Složka B = kyselina glykolová

Testovaný organismus Množství poskytující koncové body (ppm)

	Qa	Qa	Qb	Qb	Q_A/Qa	Qe/Qb	Q_A/Qa ⁺ Qe/Qb
Pseudomonas aeruginosa	7,5	—	-	-	-	-	-
	-	0,75	-	50	0,1	0,2	0,3
	—	0,75	—	100	0,1	0,4	0,5
	-	1,5	-	50	0,2	0,2	0,4
	-	1,5	-	100	0,2	0,4	0,6
	-	3	-	10	0,4	0,04	0,44
	-	3	-	25	0,4	0,1	0,5
	-	3	—	50	0,4	0,2	0,6
	-	3	—	100	0,4	0,4	0,8
	-	-	250	-	-	-	-

Poznámka: Kombinace vůči Trichoderma harzianum nebyly synergické.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Prostředek pro regulaci růstu alespoň jednoho mikroorganismu, vyznačující se tím, že obsahuje synergicky účinná množství (A) halogenovaného acetofenonu a (B) alespoň jedné organické kyseliny, její sole nebo esteru, kde halogenovaný acetofenon má obecný vzorec ve kterém Xje halogen a Y je halogen nebo vodík, a kde jsou organická kyselina, její sůl nebo ester vybrány ze skupiny zahrnující kyselinu benzoovou, benzoan sodný, kyselinu phydroxybenzoovou, methylparabenát, propylparabenát, kyselinu dehydracetovou, kyselinu oktanovou, kyselinu nonanovou, kyselinu mravenčí, kyselinu sorbovou, sorban draselný, kyselinu octovou, kyselinu šťavelovou, kyselinu glykolovou, kyselinu citrónovou, kyselinu jablečnou, kyselinu propionovou, kyselinu laurovou, kyselinu undecylenovou, jejich sole nebo estery jednotlivě a jejich směsi.
2. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že mikroorganismem je bakterie nebo houba.
3. Prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, že uvedenou bakterií nebo houbou je Trichoderma harzianum nebo Pseudomonas aeruginosa.

-18CZ 286444 B6
4. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že X je Br, F, Cl nebo I a Y je H, Br, F, Cl nebo I.
5. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že halogenovaným acetofenonem je 2-brom^T-hydroxyacetofenon.
6. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že hmotnostní poměr (A) ku (B) je od 1:30 do 30:1.
7. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že koncentrace složek je od 0,1 do 1000 ppm halogenovaného acetofenonu a od 0,1 do 5000 ppm organické kyseliny.
8. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že organickou kyselinou je kyselina benzoová.
9. Způsob regulace růstu alespoň jednoho mikroorganismu v nebo na produktu, materiálu nebo prostředí náchylnému knapadení uvedeným mikroorganismem, vyznačující se tím, že zahrnuje krok aplikace prostředku zahrnujícího synergicky účinná množství pro regulaci růstu (A) halogenovaného acetofenonu a (B) nejméně jedné organické kyseliny, její sole nebo esteru, na uvedený produkt, materiál nebo prostředí, kde halogenovaný acetofenon má vzorec, ve kterém X je halogen a Y je halogen nebo H

Y a kde jsou organická kyselina, její sůl nebo ester vybrány ze skupiny zahrnující kyselinu benzoovou, benzoan sodný, kyselinu p-hydroxybenzoovou, kyselinu dehydracetovou, kyselinu oktanovou, kyselinu nonanovou, kyselinu mravenčí, kyselinu sorbovou, sorban draselný, kyselinu octovou, kyselinu šťavelovou, kyselinu glykolovou, kyselinu citrónovou, kyselinu jablečnou, kyselinu propionovou, kyselinu laurovou, kyselinu undecylenovou, methylparabenát, propylparabenát, jejich sole a estery jednotlivě a jejich směsi.
10 Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že mikroorganismus je vybrán z bakterií nebo hub.
11. Způsob podle nároku 10, vyznačující Trichoderma harziamim a Pseudomonas aeruginosa.
12. Způsob podle nároku 9, vyznačující se Br, F, Cl, nebo I.
13. Způsob podle nároku 9, vyznačující se benzoová.

se tím, že bakterií nebo houbou je tím, že X je Br, F, Cl nebo I a Y je H, tím, že organickou kyselinou je kyselina
14. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že halogenovaným acetofenonem je 2-brom-4'-hydroxyacetofenon.

-19CZ 286444 B6
15. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že produktem, materiálem nebo prostředím je dřevná buničina, dřevné štěpky, stavební dříví, nátěrové hmoty, usně, lepivé povlaky, zvířecí kůže, činící břečky, papírenské louhy, kapaliny v kovoprůmyslu, petrochemikálie, farmaceutické přípravky, vody chladicích věží, kosmetika, toaletní přípravky, textil,

5 geologická vrtací maziva nebo agrochemické prostředky pro ochranu úrody nebo semen.
16. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že koncentrace složek je od 0,1 do 1000 ppm halogenovaného acetofenonu a od 0,1 do 5000 ppm organické kyseliny.