CZ20022779A3 - Způsob purifikace fermentačního bujónu - Google Patents

Způsob purifikace fermentačního bujónu Download PDF

Info

Publication number
CZ20022779A3
CZ20022779A3 CZ20022779A CZ20022779A CZ20022779A3 CZ 20022779 A3 CZ20022779 A3 CZ 20022779A3 CZ 20022779 A CZ20022779 A CZ 20022779A CZ 20022779 A CZ20022779 A CZ 20022779A CZ 20022779 A3 CZ20022779 A3 CZ 20022779A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
fermentation broth
extraction solvent
butyl acetate
statin compound
statin
Prior art date
Application number
CZ20022779A
Other languages
English (en)
Inventor
Vilmos Keri
Lajos Deak
Ilona Forgacs
Original Assignee
Biogal Gyogyszergyar Rt.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biogal Gyogyszergyar Rt. filed Critical Biogal Gyogyszergyar Rt.
Publication of CZ20022779A3 publication Critical patent/CZ20022779A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
    • C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D309/28—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D309/30—Oxygen atoms, e.g. delta-lactones

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

OBLAST TECHNIKY
Předkládaný vynález souvisí sloučenin z fermentačního bujónu, vynález s izolací statinů v krystalické formě.
se způsobem purifikace Konkrétněji souvisí tento z fermentačního bujónu
DOSAVADNÍ STAV TECHNIKY
Komplikace kardiovaskulárního onemocnění, jako infarkt myokardu, mrtvice nebo periferní cévní onemocnění, jsou příčinou poloviny úmrtí ve Spojených Státech. Vysoká hladina lipoproteinu o nízké hustotě (LDL) v krevním řečišti je spojena s tvorbou poruch koronárního řečiště, které brání toku krve a může dojít k prasknutí a šíření trombózy. Goodman a Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutícs, 879, (Joel G. Hardman a kol., eds. 9. vydání, 1996). Bylo ukázáno, že snížení hladiny plasmových LDL snižuje riziko klinických případů u pacientů s kardiovaskulárním onemocněním a u pacientů, kteří nemají kardiovaskulární onemocnění, ale mají hypercholesterolémii. Studie4S (Scandinavian Simvastatin Survival Study Group), 1994; Lipid Research Clinics Program, 1984a, 1984b.
Statinové léky jsou v současnosti terapeuticky nejúčinnější léky dostupné pro snižování hladiny LDL v krevním řečišti u pacientů, s rizikem kardiovaskulárního onemocnění. Tato skupina léků zahrnuje, mezi jiným, lovastatin, simvastatin, pravastatin a
Mechanismus působení statinových léků byl compactin, fluvastatin vysvětlen poměrně do detailu. Porušují syntézu cholesterolu a • · · · ·· ·· ·· • ··· · · · · * · · • · · · · · · · • ·· ······ · • · ······ ···· ··· ··· ·· ·· ···· dalších sterolů v játrech kompetitivní inhibici enzymu 3hydroxy-3-methylglutaryl-koenzym A reduktasy („HMG-CoA reduktasa). HMG-CoA reduktasa katalyzuje přeměnu HMG-CoA na mevalonát, což je limitující krok rychlosti boisyntézy cholesterolu. Jeho inhibice tedy vede ke snížení rychlosti tvorby cholesterolu v játrech.
Compactin je běžný lékařský název chemické sloučeniny 2methylbutanová kyselina 1,2,3,7,8,8a-hexahydro-7-methyl-8-[2tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-1-naftalenyl ester o vzorci:
Compactin
Compactin, také nazývaný mevastatin, byl první statinový lék, který se ukázal být inhibitorem HMG-CoA reduktasy. Compactin byl purifikován z Penicillium citrinum a Penicillium adametzioides. (Viz U.S. Patent 3,983,140; 4,049,495 a; 5,691,173, které jsou zde uvedeny odkazem.)
Lovastatin je běžný lékařský název chemické sloučeniny 2methylbutanová kyselina 1,2,3,7,8,8a-hexahydro-3,7-dimethyl8-[2-tetrahydro-4-hydroxy-6-oxo-2H-pyran-2-yl)ethyl]-1naftalenyl ester o vzorci:
Lovastatin
Lovastatin, také nazývaný mevinolin, se od compactinu liší pouze v přítomnosti methylové skupiny a může být izolován z Aspergillus tereus. (Viz U.S. Patenty čísel 4,294,926; 4,420,491; 4,319,039; a 4,294,896, které jsou zde uvedeny odkazem.) Lovastatin byl také izolován z několika dalších mikroorganismů. (Viz britský patent číslo GB 2,046,737; německý patent číslo 44 02 591; kanadský patent číslo 2,129,416; a maďarský patent číslo HO 208,997.)
Compactin a Lovastatin, stejně jako další statiny, existují jako hydroxykyseliny s otevřeným kruhem a v laktonové formě, jak je ukázáno:
lakton hydroxykyselina
Rovnováha mezi laktonem a hydroxykyselinou ztěžuje purifikaci, neboť volná kyselina a laktonová forma statinových sloučenin mají odlišné polarity. Způsob purifikace jedné formy pravděpodobně odstraní další formu, čímž se snižuje celkový výtěžek. Pro izolaci statinových sloučenin s velkým výtěžkem musí tedy obvykle být během jejich purifikace postupováno velmi opatrně.
• · • ·
U.S. Patent číslo 5,202,029 souvisí s procesem purifikace laktonové formy statinových sloučenin použitím HPLC. Surový fermentační bujón (tj. lovastatin, simvastatin, pravastatin, fluvastatin a mevastatin) je rozpuštěn v organickém rozpouštědle a eluován přes HPLC kolonu. Statin se z kolony eluuje jako látka rozpuštěná v eluátu. Eluát je částečně odpařen a následně je přidána voda pro indukci krystalizace.
* Hlavní nevýhodou pro produkci v průmyslovém měřítku je vysoká nákladnost chromatografických kolon.
U.S.Patent číslo 5,616,595 souvisí s nepřetržitým procesem pro znovuzískání široké palety ve vodě nerozpustných sloučenin z fermentačního bujónu tečnou filtrací. Tento proces může být aplikován na laktonovou formu lovastatinu, pravastatinu a simvastatinu. Proces zahrnuje cyklování fermentačního bujónu přes filtr, který zadržuje nerozpustnou sloučeninu. Sloučenina je rozpuštěna v rozpouštědle a roztok je filtrován. Roztok požadované sloučeniny je sbírán jako filtrát a požadovaná sloučenina může být dále purifikována. Jelikož jsou tyto . sloučeniny ve vodě nerozpustné, vyžaduje tento proces rozpouštědlo pro rozpouštění, a vyžaduje filtrační membrány pro vícenásobné použití. Opakovaná filtrace činí tento proces velmi nákladným pro výrobu ve velkém měřítku.
- Proces pro izolaci lovastatinu v laktonové formě je popsán v U.S Patentu číslo 5,712,130. V tomto procesu je lovastatin extrahován z fermentačního bujónu butylacetátem. Výsledný roztok je poté odstředěn a vodná fáze je odstraněna. Organická fáze je destilována za vakua nad 40°C, což kromě zakoncentrování roztoku také podporuje tvorbu laktonu v důsledku odstranění vody. Krystaly lovastatinového laktonu se tvoří během chlazení a jsou rekrystalizovány do čistoty 90% nebo vyšší. Před použitím jako farmaceutika musí však být krystalizovaný lovastatin dále purifikován, což snižuje celkový výtěžek a přidává další náklady.
• ·
POPIS VYNÁLEZU
Známé metody pro izolaci statinu z fermentačního bujónu procesem ekonomickým v průmyslovém měřítku, nedosahují farmaceuticky přijatelné úrovně čistoty nebo vyžadují chromatografickou separaci pro dosažení vysoké čistoty. Předmětem předkládaného vynálezu je splnit potřebu pro * jednoduchý, rychlý proces s vysokým výtěžkem pro izolaci statinů z fermentačního bujónu ve farmaceuticky přijatelné úrovni čistoty (tj. ne méně než 98,5%).
Dalším předmětem předkládaného vynálezu je proces pro izolaci statinové sloučeniny z fermentačního bujónu, kde statinová sloučenina zahrnuje karboxylovou kyselinu, která je schopna tvořit lakton a kondenzovaný bicyklický kruh. Proces zahrnuje tyto kroky: extrakce statinové sloučeniny z fermentačního bujónu spojením fermentačního bujónu s extrakčním rozpouštědlem, a extrakcí statinové sloučeniny z fermentačního bujónu do extrakčního rozpouštědla, kde extrakční rozpouštědlo je hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo; oddělení hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla od fermentačního bujónu; zakoncentrování roztoku hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla obsahujícího extrahovanou statinovou sloučeninu; a purifikace . extrahované statinové sloučeniny krystalizací.
Další předmětem předkládaného vynálezu je proces izolace statinové sloučeniny z fermentačního bujónu, kde statinová sloučenina zahrnuje karboxylovou kyselinu, která je schopna tvořit lakton a kondenzovaný bicyklický kruh, proces zahrnuje tyto kroky:
(a) předběžná úprava fermentačního bujónu za alkalických podmínek pro odstranění nepolárních nečistot;
• · (b) extrakce statinové sloučeniny z fermentačního bujónu do hydrofobního organického extrakčniho rozpouštědla;
(c) odděleni hydrofobního organického extrakčniho rozpouštědla od fermentačního bujónu;
(d) zakoncentrování roztoku hydrofobního organického extrakčniho rozpouštědla obsahujícího extrahovanou statinovou sloučeninu (e) promytí zakoncentrovaného roztoku hydrofobního organického extrakčniho rozpouštědla vodným roztokem obsahujícím bázi pro purifikaci laktonu; a (f) purifikace extrahované statinové sloučeniny krystalizací.
DETAILNÍ POPIS VYNÁLEZU
Předkládaný vynález je proces pro získání vysoce purifikovaných krystalů statinových sloučenin z fermentačního bujónu, jak je doloženo purifikaci compactinu a lovastatinu. Každý běžně orientovaný v oboru pozná, že proces předkládaného vynálezu může být použit k purifikaci jiných sloučenin, které jsou vytvořeny mikrobiálním nebo enzymovým procesem, a které obsahují lakton, jako simvastatin, pravastatin a fluvastatin. Každý běžně orientovaný v oboru také pozná, že optimální podmínky pro purifikaci statinové sloučeniny, se mohou lišit v závislosti na konkrétní izolované statinové sloučenině, fermentačním bujónu a mikroorganismu produkujícím danou sloučeninu.
Přednostní forma předkládaného vynálezu zahrnuje kroky: (i) předběžná úprava fermentačního bujónu za alkalických podmínek pro odstranění nepolárních nečistot; (ií) extrakce statinu za kyselých podmínek jako hydroxykyselina nebo lakton z fermentačního bujónu do hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla; (iii) oddělení hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla od fermentačního bujónu; (iv) zakoncentrování hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla obsahujícího extrahovanou statinovou sloučeninu za tvorby laktonu; a (v) purifikace extrahované statinové sloučeniny krystalizací.
Podle alternativní formy vynálezu, krok předběžné úpravy fermentačního bujónu za alkalických podmínek je vynechán.
Podle alternativní formy vynálezu, před krystalizací je zakoncentrovaný roztok hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla promyt vodným roztokem obsahujícím bázi pro zvýšení výtěžku. Přednostní bazické roztoky obsahují hydroxid amonný (NH4OH, pH přibližně 7,5 až přibližně 10), nebo přibližně 1-5% (w/w) hydrogenuhličitan sodný (NaHCO3) nebo uhličitan sodný (Na2CO3) .
Předběžná úprava fermentačního bujónu za alkalických podmínek
Předběžná úprava fermentačního bujónu zahrnuje úpravu fermentačního bujónu za alkalických podmínek následovanou extrakcí do hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla nebo směsi rozpouštědla. Alkalické podmínky v kroku předběžné úpravy hydrolyzují statinový lakton na odpovídající statinovou hydroxykyselinu. (Andrew Streitweiser, Jr. A Clayton Heathcock, Introduction to Organic Chemistry, 858-60 MacMillan Publishing Co, druhé vydání, 1981). Statinová hydroxykyselina je zadržena ve vodném fermentačním bujónu, zatímco mastné a olejové látky, stejně jako nepolární organické nečistoty z fermentačního bujónu, se oddělí do hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla nebo směsi rozpouštědla. Předběžná úprava fermentačního bujónu za alkalických podmínek tedy vede k celkové purifikaci statinové • · » · nečistot ve krystalizace.
hydroxykyseliny, a to oddělením statinové hydroxykyseliny od nečistot.
Odstranění nepolárních nečistot zlepšuje celkový výtěžek krystalizace a má se za to, že přítomnost nepolárních fermentačním bujónu snižuje celkový výtěžek Předběžná úprava fermentačního bujónu za alkalických podmínek tedy odstraňuje nepolární nečistoty z fermentačního bujónu a tím se značně zvyšuje celkový výtěžek krystalizace.
Během kroku předběžné úpravy je pH fermentačního bujónu nebo směsi fermentačního bujónu a hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla upraveno na alkalickou hodnotu. pH je vhodně upraveno přídavkem anorganické báze nebo organického aminu. Přednostní anorganické báze nebo organické aminy zahrnují NaOH, KOH, LiOH, Ca(OH)2, NH4OH a triethylamin. Nejpřednostněji je bází NaOH. pH je mezi přibližně 7 a přibližně 13,9. Pro compactin a lovastatin je vhodnější upravit pH do rozmezí od přibližně 8,5 do přibližně 10,0. Nejvhodnější pH pro compactin a lovastatin je pH přibližně 9,0 přibližně 9,6.
Inkubace předběžné úpravy za alkalických podmínek může být provedena za teplot od přibližně 15°C do přibližně 100°C. Teploty o přibližně 15-20°C vedou ke snížení celkového výtěžku purifikovaného statinu.
Od přibližně 80°C do přibližně 100°C jsou přednostní inkubační podmínky pro předběžnou úpravu přibližně 15 minut při pH od přibližně 12,0 do přibližně 13,9. Od přibližně 55°C do přibližně 65°C jsou přednostní inkubační podmínky pro předběžnou úpravu přibližně 2 hodiny při pH od přibližně 9,0 do přibližně 9,6. Od přibližně 15°C do přibližně 25°C jsou přednostní inkubační podmínky pro předběžnou úpravu 48 hodin při pH od přibližně 9,0 do přibližně 9,6.
Hydrofobní organická extrakční rozpouštědla používaná při předběžné úpravě zahrnují, ale nejsou omezena na í8 ·* • ♦
9 9
9 9999 butylacetát, n-butylacetát, t-butylacetát, ethylacetát, propylacetát, ethylformiát, butylmethylketon, dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, toluen, acetonitril, methylformiát, methanol, ethanol, í-propanol, npropanol, n-butanol, i-butanol, t-butanol, amylalkohol a benzylalkohol.
Nebo mohou hydrofobní organická extrakční rozpouštědla používaná při předběžné úpravě zahrnovat směs jakýchkoliv rozpouštědel shora uvedených. Organická rozpouštědla pro alkalickou extrakci zahrnují, ale nejsou omezena na ibutylacetát, n-butylacetát, t-butylacetát, ethylacetát, propylacetát, ethylformiát, butylmethylketon, dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, . toluen, a benzylalkohol.
Přednostní hydrofobní organická extrakční rozpouštědla používaná při předběžné úpravě jsou i-butylacetát, ethylacetát a toluen. Nejpřednostnější hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo je i-butylacetát. Alkoholy také fungují, ale nejsou upřednostňovány kvůli regeneraci rozpouštědla. Nicméně alkoholy jsou přítomny v případě acetátů v alkalickém pH. Alkoholy napomáhají otevření laktonových kruhů za alkalických podmínek. Předběžná úprava může být také prováděna bez extrakčních činidel.
V této přednostní formě, po předběžné úpravě, je rozpouštědlo v kontaktu s fermentačním bujónem, za alkalických podmínek, dokud mastné a olejové látky a další nepolární organické nečistoty nejsou z fermentačního bujónu podstatně odstraněny. Tenkovrstvá chromatografie nebo jakýkoliv jiný způsob, včetně subjektivního úsudku, může být použit ke zjištění míry odstranění nepolárních nečistot z fermentačního bujónu. Pro optimální odstranění nečistot mohou být použity násobné extrakce. Ale, je-li pro alkalickou extrakci použit i-butylacetát, jedna nebo dvě extrakce jsou vysoce účinné. Přednostně je alkalická extrakce prováděna • ·····* «·· ··* ·9 9 9 99 9 9 objemem rozpouštědla, který je mezi přibližně 20% a 50% (v/v) objemu fermentace.
ÚPRAVA pH PŘED EXTRAKCÍ FERMENTAČNÍHO BUJÓNU ZA KYSELÝCH
PODMÍNEK
Přednostně je pH purifikovaného fermentačního bujónu upraveno silnou kyselinou mezi hodnoty přibližně 1,0 a přibližně 6,4 před extrakcí statinové sloučeniny do hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla.
Preferovaná oblast pH je jak pro Lovastatin tak pro Compactin mezi přibližně 2,0 a přibližně 4,5. Přednostní oblast pH pro Pravastatin je mezi přibližně 4,5 a přibližně 6,0. Přednostními kyselinami pro úpravu pH jsou kyselina sírová a kyselina fosforečná. Extrakce statinové sloučeniny může být také provedena úpravou pH hydrofobního extrakčního rozpouštědla na oblast od přibližně 1,0 do přibližně 6,4.
EXTRAKCE STATINOVÉ SLOUČENINY JAKO HYDROXOKYSELINY NEBO
LAKTONU ZA KYSELÝCH PODMÍNEK
Hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo jev kontaktu s purifikovaným fermentačním bujónem za kyselých podmínek, dokud hydroxykyselina a lakton nejsou z fermentačního bujónu podstatně odstraněny. Tenkovrstvá chromatografie nebo jakýkoliv jiný způsob, včetně subjektivního úsudku, může být použit ke zjištění míry znovuzískání laktonu do hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla. Pro optimální znovuzískání může být použito násobných extrakcí hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo butylacetát a pH je v optimální oblasti, jak je uvedeno shora, dvě nebo tři extrakce jsou však vysoce účinné. Přednostní extrakce je prováděna objemem fermentačního bujónu, který je přibližně dvojnásobný než objem organického extrakčního rozpouštědla.
Je-li jako použit i—
Nejpřednostnějším hydrofobním organickým extrakčním rozpouštědlem pro extrakci compactinu je i-butylacetát. Další vhodná hydrofobní organická extrakční rozpouštědla zahrnují, ale nejsou omezena na, n-butylacetát, t-butylacetát, ethylacetát, propylacetát, ethylformiát, butylmethylketon, dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan a toluen. Přednostními extrakčními rozpouštědly jsou ibutylacetát, n-butylacetát, ethylacetát a butylmethylketon. Při kyselé extrakci se směsi rozpouštědel nepoužívají.
Oddělení fází fermentačního bujónu a hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla
Fermentační bujón může být od hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla oddělen způsoby známými v oboru. Přednostní způsoby pro oddělení zahrnují protiproudou extrakci. Známá zařízení pro tento způsob jsou oddělovače. Po oddělení fází může být čistota rozpouštědla zlepšena promýváním vodou.
Zakoncentrování hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla
Objem hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla je po oddělení fází snížen. Snížení objemu může být dosaženo odpařením za sníženého tlaku při teplotě mezi přibližně 30 až přibližně 90°C. Odpařování je přednostně prováděno za sníženého tlaku a teploty mezi přibližně 40 až přibližně 70°C. Anebo je odpařování hydrofobního rozpouštědla prováděno za zvýšené teploty (přibližně pod 90°C), za sníženého tlaku nebo za atmosférického tlaku.
Purifikace extrahované statinové sloučeniny krystalizací
Hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo je odpařováno, dokud koncentrace statinové sloučeniny, která má být krystalizována, není mezi 50 až 250 g/1. Lovastatin je • · * ♦ * * <
• » * • · · • · · • « · · · ·· ·» ♦ <
♦ <ι optimálně krystalizován při koncentraci od 80 do 100 g/1; compactin je optimálně krystalizován při koncentraci od 130 do 170 g/1; a pravastatin je optimálně krystalizován při koncentraci od 80 do 120 g/1.
Krystalizace může být prováděna přes noc při teplotě okolí. Přednostní teplota je v rozmezí od přibližně -10 do přibližně 5°C. Nejpřednostněji je krystalizace prováděna přibližně 20 hodin při přibližně -10°C.
Krystalizace může být prováděna v jakémkoliv následujícím rozpouštědle nebo v kombinaci následujících rozpouštědel: ethanol, i-propanol, n-propanol, i-butanol, n-butanol, tbutanol, ethylacetát, aceton, methanol, acetonitril, ethylformiát, i-butylacetát, t-butylacetát, n-butylacetát, toluen, propylacetát a butylmethylketon. Přednostní rozpouštědla zahrnují toluen, isopropanol, i-butylacetát nebo směs ethanolu a vody. Nejpřednostnějšími rozpouštědly jsou ibutylacetát a směs ethanol-voda.
Krystaly získané procesem přednostní formy obsahují méně než 3,6% (w/w) nečistot a jsou získány ve výtěžku vyšším než 75% (w/w). Pro purifikaci statinu, získaného rekrystalizací z vody:ethanolu, je přednostní poměr vody k ethanolu přibližně od 0,8 do 2,0. Nejpřednostnější poměr vody k ethanolu je od 0,9 do 1,2. Krystaly získané přednostní formou jsou čisté alespoň z 98,5% (w/w).
Předkládaný vynález bude dále vysvětlen v následujících příkladech. Pokud není uvedeno jinak, všechny výtěžky jsou uvedeny v %(w/w) a představují celkové výtěžky nebo výtěžky všech kroků. Předkládaný vynález by však neměl být chápán jako tímto omezený. Každý běžně orientovaný v oboru pozná, jak pozměnit příklady příprav tak, aby bylo dosaženo žádaných výsledků.
PŘÍKLADY
PŘÍKLAD 1: Izolace Compactinu φ<
ΦΦ ·φ ♦ φ φ φ φ φ φ φ · φ φφφ
ΦΦ φφφ ΦΦ Φ· φφφφ
Fermentační bujón (70 m3) , obsahující 350 kg compactinu, byl připraven způsoby dobře známými v oboru. (Viz, např. U.S.Patent 3,983, 140; 4,049,495 a 5,691,173). K vodnému fermentačnímu bujónu (70 m3) byl kontinuálním způsobem přidán i-butylacetát (35 m3) a voda (35 m3) . Hodnota pH byla upravena přidáním koncentrovaného NaOH na přibližně 9,0 až 9,6. Směs byla poté zahřáta na 60°C a při této teplotě byla udržována 2 hodiny. Výsledné organické a vodné fáze byly odděleny pomocí protiproudé separace. Pro odstranění tvorby emulze během separace byl ke směsi přidán lauryl sulfát sodný.
Purifikovaný fermentační bujón byl okyselen kyselinou sírovou na pH přibližně 2,0-4,5. Poté byl kontinuálně přidán i-butylacetát (35 m3) a po míchání in šitu, byla kontinuálně oddělena i-butylacetátová fáze obsahující compactin.
i-butylacetátová fáze byla koncentrována za vakua na objem přibližně 2,150 L. Koncentrovaný roztok byl ponechán stát přes noc při 0-5°C, kde compactin vykrystalizoval s 78%(w/w) výtěžkem a v čistotě 93% (w/w). Surový compactin byl poté rekrystalizován ze směsi 1,2:0,9 ethanol:voda s 75% (w/w) výtěžkem a v čistotě 99% (w/w).
PŘÍKLAD 2: Izolace compactinu bez předpurifikačního kroku fermentačního bujónu za alkalických podmínek
Fermentační bujón obsahující compactin byl připraven jako v Příkladu 1. Fermentační bujón (50 L) byl okyselen kyselinou sírovou na pH přibližně 2,0-4,5. Poté byl přidán ibutylacetát (25 L) a voda (25 L) a po 0,5 hodinovém míchání, byla oddělena i-butylacetátová fáze obsahující compactin. Extrakce byla opakována s čistým i-butylacetátem (25 L). Spojená i-butylacetátová fáze byla koncentrována za vakua na objem přibližně 1,5 L. Koncentrovaný roztok byl ponechán stát přes noc při 0-5°C, kde compactin vykrystalizoval s 33%(w/w) výtěžkem a v čistotě 94,5% (w/w). Zatím co Příklad 1 ukazuje ·· -9 * ·· tt 44
4 44 44 ♦ 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 4 ·
4· 444444 4 • 4 4 4 4 4 4 4
4444 444 444 44 44 444· použití alkalické extrakce, Příklad 2 se liší v tom, že demonstruje použití technologií bez alkalické extrakce.
PŘÍKLAD 3: Izolace Compactinu: předběžná úprava fermentačního bujónu za alkalických podmínek koncentrovaného i-butylacetátu a promyti pomocí NaHCO3
Fermentační bujón byl připraven jako v Příkladu 1.
K vodnému fermentačnímu bujónu (50 L) byl přidán ibutylacetát (25 L) a voda (25 L) . Hodnota pH byla upravena koncentrovaným NaOH na přibližně 9,0-9,6. Směs byla poté zahřáta na 60 °C a byla udržována při této teplotě po 2 hodiny. Poté byly fáze odděleny. Pro odstranění tvorby emulze během separace byl ke směsi přidán dodecyltrimethyl amonium chlorid. Purifikovaný fermentační bujón byl okyselen kyselinou sírovou na pH přibližně 2,0-4,5. Poté byl přidán ibutylacetát (25 L) a po 0,5 hodinovém míchání, byla oddělena i-butylacetátová fáze, obsahující compactin. Kyselá extrakce byla opakována s čistým i-butylacetátem (25 L).
Spojená i-butylacetátová fáze byla koncentrována za vakua na objem přibližně 1,5 L. Koncentrovaný roztok byl naředěn na objem přibližně 8 L a byl promyt saturovaným hydrogenuhličitanem sodným. Promytý roztok byl znovu koncentrován na 1,5 L a byl ponechán stát přes noc při 0-5°C, kde compactin vykrystalizoval s 76,5% (w/w) výtěžkem a v čistotě 98,9% (w/w).
Bez použití předběžné alkalické extrakce je compactin získán pouze s 39%(w/w) výtěžkem a v čistotě 99,1%(w/w).
PŘÍKLAD 4: Izolace compactinu: účinek snížené teploty během předběžné úpravy fermentačního bujónu za alkalických podmínek
Fermentační bujón byl připraven jako v Příkladu 1. K vodnému fermentačnímu bujónu (50 L) byl přidán i-butylacetát (25 L) a voda (25 L). Hodnota pH byla upravena koncentrovaným • 4 »♦
NaOH na přibližně 9,0-9,6. Směs byla udržována při teplotě přibližně 15 až 20°C po 2 hodiny. Poté byly fáze odděleny. Pro odstranění tvorby emulze během separace byl ke směsi přidán dodecyltrimethyl amonium chlorid. Purifikovaný fermentační bujón byl okyselen kyselinou sírovou na pH přibližně 2,0-4,5. Poté byl přidán i-butylacetát (25 L) a po 0,5 hodinovém míchání, byla oddělena i-butylacetátová fáze obsahující compactin. Extrakce byla opakována s čistým ibutylacetátem (25 L). Spojená i-butylacetátová fáze byla koncentrována za vakua na objem přibližně 1,5 L. Koncentrovaný roztok byl ponechán stát přes noc při 0-5°C, kde compactin vykrystalizoval. Surový compactin byl poté rekrystalizován ze směsi 1,2:0,9 ethanol:voda. Celkový výtěžek byl 67% (w/w) a čistota 99,1% (w/w).
PŘÍKLAD 5: Izolace compactinu: účinek kyselého pH 1,0-2,0 při kyselé extrakci a snížené teplotě během krystalizace
Fermentační bujón byl připraven jako v Příkladu 1. K vodnému fermentačnímu bujónu (50 L) byl přidán ibutylacetát (25 L) a voda (25 L) . Hodnota pH byla upravena koncentrovaným NaOH na přibližně 9,0-9,6. Směs byla udržována při teplotě 60°C po 2 hodiny) Poté byly fáze odděleny. Pro odstranění tvorby emulze během separace byl ke směsi přidán dodecyltrimethyl amonium chlorid. Purifikovaný fermentační bujón byl okyselen kyselinou sírovou na pH přibližně 1,0-2,0. Poté byl přidán i-butylacetát (25 L) a po 0,5 hodinovém míchání, byla oddělena i-butylacetátová fáze obsahující compactin. Kyselá extrakce byla opakována s čistým i-butylacetátem (25 L).
Spojená i-butylacetátová fáze byla koncentrována za vakua, dokud koncentrace compactinu nebyla přibližně 150 g/1. Koncentrovaný roztok byl ponechán přibližně 20 hodin při teplotě přibližně -10°C. Krystaly byly filtrovány a promyty i-butylacetátem. Surový compactin byl poté rekrystalizován ze ·♦ -φ • · · · φ φ φ φ φφφφ »♦* » ·· φφ φφ φφ φ φ φφφ φφφ φ * φ φ φ φφφ φ φ φφφ φφφ φφφ φφ φφ Φφφφ směsi 1,2:0,9 ethanol:voda. Compactin byl získán s výtěžkem 67% (w/w) a v čistotě 98,8% (w/w). Kyselá extrakce (při pH 1,0-2,0) snížila výtěžek.
Byl-li postup tohoto příkladu kroku předběžné úpravy fermentačního bujónu za alkalických podmínek proveden při 15°C, byl celkový výtěžek compactinu snížen na 60% (w/w) a na čistotu 98,7% (w/w).
PŘIKLAD 6: Izolace Lovastatinu
Fermentační bujón obsahující lovastatin byl připraven způsoby dobře známými v oboru. (Viz U.S.Patent, 5,403,728; 4,420,491; 4,342,767; 4,319,039 a 4,294,846). K vodnému fermentačnímu bujónu (50 L) byl přidán i-butylacetát (25 L) a voda (25) . Hodnota pH byla upravena koncentrovaným NaOH na přibližně 9,0-9,6. Směs byla ohřátá na teplotu 60 ±5°C, a byla udržována při této teplotě po 2 hodiny. Poté byly fáze odděleny. Pro odstranění tvorby emulze během separace byl ke směsi přidán dodecyltrimethyl amonium chlorid.
Purífíkovaný fermentační bujón byl okyselen kyselinou sírovou na pH přibližně 2,0-4,5. Poté byl přidán ibutylacetát (25 L) a po 2 hodinovém míchání, byla oddělena ibutylacetátová fáze obsahující lovastatin. Extrakce byla opakována s čistým i-butylacetátem (25 L) ·.Spojená i-butylacetátová fáze byla koncentrována za vakua, na objem 2,7 L. Koncentrovaný roztok byl ponechán stát přibližně 36 hodin při teplotě -10°C, kde lovastatin vykrystalizoval s výtěžkem 76% (w/w) a v čistotě 96,4% (w/w). Surový lovastatin byl poté rekrystalizován ze směsi 1,2:0,9 ethanol:voda, s výtěžkem 71,4% (w/w) a v čistotě 98,7% (w/w).
PŘÍKLAD 7: Izolace lovastatinu bez předběžné úpravy fermentačního bujónu za alkalických podmínek
Fermentační bujón obsahující lovastatin byl připraven jako v Příkladu 6. Fermentační bujón (50 L) byl okyselen
44 4 4 4 4 4 9 <44 *4 · 4 4 *4 4 44 4
• • 4 4 • • i 4
4 4 4 4 4 4 4 •
«4«· 44 · 4 4 4 4 4 4 · 4444
kyselinou sirovou na pH přibližně 2,0-4,5. Poté byl přidán ibutylacetát (25 L) a voda (25 L) a po 2 hodinovém mícháni, byla oddělena í-butylacetátová fáze obsahující lovastatin. Extrakce byla opakována s čistým i-butylacetátem (25 L) . Spojená í-butylacetátová fáze byla koncentrována za vakua, na objem 2,7 L. Koncentrovaný roztok byl ponechán stát přibližně 36 hodin při teplotě -10°C, kde lovastatin vykrystalizoval s výtěžkem 26% (w/w) a v čistotě 88% (w/w).
PŘÍKLAD 8: Izolace lovastatinu : aplikace promytí NaHCCb
Fermentační bujón byl připraven jako v Příkladu 6. K vodnému fermentačnímu bujónu (50 L) byl přidán ibutylacetát (25 L) a voda (25 L) . Hodnota pH byla upravena koncentrovaným NaOH na přibližně 9,0-9,6. Směs byla ohřátá na teplotu přibližně 60 °C a byla udržována při této teplotě přibližné po 2 hodiny. Poté byly fáze odděleny. Pro odstranění tvorby emulze během separace byl ke směsi přidán dodecyltrimethyl amonium chlorid. Purifikovaný fermentační bujón byl okyselen kyselinou sírovou na pH přibližně 2,0-4,5. Poté byl přidán i-butylacetát (25 L) a po 2 hodinovém míchání, byla oddělena i-butylacetátová fáze obsahující compactin. Extrakce byla opakována s čistým i-butylacetátem (25 L) .
i-butylacetátová fáze byla koncentrována za vakua, na objem přibližně 2,7 L. Koncentrovaný roztok byl naředěn na objem přibližně 11 1 a byl promyt nasyceným hydrogenuhličitanem sodným. Promytý roztok byl znovu zakoncentrován na 2,7 L a byl ponechán stát 36 hodin při teplotě -10°C, kde byl lovastatin získán ve výtěžku 73,4% (w/w) a v čistotě 98,8% (w/w).
• 4
4 •
• ••4
♦ 4 44 ▼ <
• ♦ 4 • 44 * ·
4· 4444

Claims (25)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY:
    1. Proces pro izolaci statinové sloučeniny z fermentačniho bujónu, kde statinová sloučenina zahrnuje karboxylovou kyselinu schopnou tvorby laktonu a kondenzovaný bicyklický kruh, zahrnující tyto kroky:
    (a) předběžná úprava alkalických podmínek nečistot;
    fermentačniho bujónu za pro odstranění nepolárních (b) extrakce statinové sloučeniny z fermentačniho bujónu spojením fermentačniho bujónu š extrakčním rozpouštědlem, a extrakce sloučeniny z fermentačniho bujónu do extrakčního rozpouštědla, kde extrakční rozpouštědlo je hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo;
    (c) oddělení hydrofobního organického rozpouštědla od fermentačniho bujónu;
    extrakčního (d) zakohcentrování roztoku hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla obsahujícího extrahovanou statinovou sloučeninu; a (e) purifikace extrahované statinové sloučeniny krystalizací.
  2. 2. Proces podle patentového nároku 1, kde statinová sloučenina je inhibitor HMG-CoA reduktasy.
  3. 3. Proces podle patentového nároku 1, kde statinová sloučenina je vybrána ze skupiny zahrnující lovastatin, compactin a pravastatin.
    «· · φ φφ Φφ φφ φφφφ φφφφ φφφ φφ φφφφφ φ φ «φ φφφφφφφ φ φ φφφφφφ φφφφ φφφ φφφ φφ φφ φφφφ
  4. 4. Proces podle patentového nároku 1, dále zahrnuje krok předběžné úpravy fermentačního bujónu za alkalických podmínek obsahujícího statinovou sloučeninu.
  5. 5. Proces podle patentového nároku 4, kde během kroku předběžné úpravy fermentačního bujónu, je fermentační bujón udržován při:
    (a) teplotě mezi přibližně 15°C a přibližně 100°C;
    (b) pH mezi přibližně 7,0 a přibližně 13,9; a (c) časové periodě mezi 0 a přibližně 48 hodinami.
  6. 6. Proces podle patentového nároku 4, kde během kroku předběžné úpravy fermentačního bujónu, je fermentační bujón udržován při:
    (a) teplotě mezi přibližně 55°C a přibližně 65°C;
    (b) pH mezi přibližně 9,0 a přibližně 9,6; a (c) časové periodě přibližně 2 hodiny.
  7. 7. Proces podle patentového nároku 4, dále zahrnuje krok úpravy pH fermentačního bujónu použitím anorganických bází, vybraných ze skupiny sestávající z hydroxidu amonného, NaOH, KOH, LiOH a Ca(OH)2.
  8. 8. Proces podle patentového nároku 1, kde extrakční krok zahrnuje spojení fermentačního bujónu s hydrofobním organickým extrakčním rozpouštědlem.
  9. 9. Proces podle patentového nároku 4, kde hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo předběžné úpravy je vybráno ze skupiny obsahující i-butylacetát, n-butylacetát, tbutylacetát, ethylacetát, propylacetát, ethylformiát, butylmethylketon, dichlormethan, chloroform,
    4* 4 «44 • 4 ·<· 44 4 4 • · 4 « ·
    4 4 * 4 4 4 4
    4 4 4 4 4
    44 4» 444 44* 4· *4 »4 • · * # « 4
    4 4 4 • · ·
    4· 4444 tetrachlormethan, dichlorethan, toluen, acetonitril, methylformiát, methanol, ethanol, i-propanol, n-propanol, n-butanol, i-butanol, t-butanol, amylalkohol a benzylalkohol, a jejich směsi.
  10. 10. Proces podle patentového nároku 8, kde hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo je í-butylacetát, nbutylacetát, t-butylacetát, ethylacetát, propylacetát, i ethylformiát, butylmethylketon, dichlormethan, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan nebo toluen.
  11. 11. Proces podle patentového nároku 1, kde krok extrakce statinové sloučeniny z fermentačního bujónu dále zahrnuje úpravu pH fermentačního bujónu mezi přibližně 1,0 až přibližně 6,4.
  12. 12. Proces podle patentového nároku 11, kde pH fermentačního bujónu je upraveno mezi přibližně 2,0 až přibližně 4,5.
  13. 13. Proces podle patentového nároku 11, kde pH fermentačního bujónu je upraveno kyselinou vybranou ze skupiny zahrnující kyselinu sírovou a kyselinu fosforečnou.
    í .
  14. 14. Proces podle patentového nároku 1, kde krok extrakce statinové sloučeniny z fermentačního bujónu dále zahrnuje úpravu pH hydrofobního organického extrakčniho rozpouštědla kroku (b), mezi přibližně 1,0 až přibližně 6,4.
  15. 15. Proces podle patentového nároku 1, kde hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo kroku (b) je vybráno ze skupiny zahrnující í-butylacetát, n-butylacetát, tbutylacetát, ethylacetát, propylacetát, ethylformiát, • 4 4 4« ♦ · 4 ♦ ·
    4 4 4 4 4 4
    4 4 4 4 4
    44 44 4*»4 chloroform, kroku (b) je
    44 *
    4 4 44 4 • 4 • · · • 4
    44*4 444 4 butylmethylketon, dichlormethan, tetrachlormethan, dichlorethan a toluen.
  16. 16. Proces podle patentového nároku 1, kde po hydrofobní organické extrakční rozpouštědlo v kontaktu s vodným roztokem obsahujícím bázi.
  17. 17. Proces podle patentového nároku 16, kde báze je vybrána ze skupiny sestávající z hydroxidu amonného, NaHCO3 a Na2CO3.
  18. 18. Proces podle patentového nároku 1, organické extrakční rozpouštědlo je statinová sloučenina je compactin.
    kde hydrofobní i-butylacetát a
  19. 19. Proces podle patentového zakoncentrování roztoku extrakčního rozpouštědla nároku 1, hydrofobního obsahujícího kde krok organického extrahovanou statinovou sloučeninu je proveden za sníženého tlaku,
  20. 20. Proces podle patentového nároku 1, kde krok zakoncentrování roztoku hydrofobního organického extrakčního rozpouštědla obsahujícího extrahovanou statinovou sloučeninu je proveden odpařením při teplotě pod přibližně 90°C.
  21. 21. Proces podle patentového nároku 1, kde krok krystalizace je proveden při teplotě mezi přibližně -10°C a přibližně 20 °C.
  22. 22. Proces podle patentového nároku 21, kde krok krystalizace je proveden při teplotě mezi přibližně 0°C a přibližně 5°C.
    ·φφ< φ
    Φ* ΦΦ ΦΦ » Φ ΦΦΦ Φ « <» Φ Φ
    Φ Φ · Φ € Φ « φ φ · » φ φφ φφ φφφφ
  23. 23. Proces podle patentového nároku 21, kde krok krystalizace je proveden při teplotě mezi přibližně -10°C a 0°C.
  24. 24. Proces podle patentového nároku 1, kde krok purifikace extrahované statinové sloučeniny krystalizací je proveden použitím rozpouštědla vybraného ze skupiny obsahující ethanol, i-propanol, n-propanol, i-butanol, t-butanol, ethylacetát, aceton, ethylformiát, i-butylacetát, butylacetát, toluen, propylacetát a butylmethylketon, a jejich směsi.
    n-butanol, methanol, acetonitril, t-butylacetát, n25. Proces pro izolaci statinové sloučeniny z fermentačního bujónu, kde statinové sloučenina zahrnuje karboxylovou kyselinu schopnou tvorby laktonu a kondenzovaného bicyklického kruhu, proces zahrnuje tyto kroky:
    (a) předběžná úprava alkalických podmínek nečistot;
    fermentačního bujónu za pro odstranění nepolárních (b) extrakce statinové sloučeniny z fermentačního bujónu spojením fermentačního bujónu s hydrofobním extrakčním rozpouštědlem, a extrakce statinové sloučeniny z fermentačního bujónu do hydrofobního rozpouštědla;
    (c) oddělení hydrofobního organického rozpouštědla od fermentačního bujónu;
    extrakčního (d) zakoncentrování roztoku hydrofobního rozpouštědla obsahujícího extrahovanou statinovou sloučeninu;
    «0 · • · ·· · • 0 • · · • · «000 000 · 0* 00 00 0 0 0 0 0 • 0 0 · · • 0 0 0 0 0 • · · · · • 00 00 0000 (e) promytí koncentrovaného roztoku hydrofobního rozpouštědla vodným roztokem obsahujícím bázi; (f) purifikace extrahované statinové krystalizaci. sloučeniny Proces podle patentového nároku 25, kde vodný bazický
    roztok zahrnuje hydroxid amonný, NaHCO3 a Na2CO3.
  25. 27. Proces podle patentového nároku 25, kde statinová sloučenina je inhibitorem HMG-CoA reduktasy.
    •—Je—-z4e—pe-paXh^qpTOc-es—purifikaee--'S-ta-ti-novýic'h—sdrou-šejiin z f ermentačního bujónu^trakcí a krystalizaci. Fermentační bujón je podroben předběžné úpravě, která zahrnuje alkalickou předběžnou úpravu a alkalickou purSfikaci. Po této proceduře předběžné úpravy je statinová sloucěndna . extrahována za kyselých podmínek do hydrofobního rozpouštědly a purifikována krystalizaci. Organické extrakční rozpouštědlo je koncentrováno......~~a..... poté—extrahováno....... slabou bází. Slatinová.
    ^sloučenina je purifikována krystalizaci.
CZ20022779A 2000-02-24 2001-01-25 Způsob purifikace fermentačního bujónu CZ20022779A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US18452200P 2000-02-24 2000-02-24

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20022779A3 true CZ20022779A3 (cs) 2003-02-12

Family

ID=22677241

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20022779A CZ20022779A3 (cs) 2000-02-24 2001-01-25 Způsob purifikace fermentačního bujónu

Country Status (18)

Country Link
US (1) US6387258B1 (cs)
EP (1) EP1263979A4 (cs)
JP (1) JP3740062B2 (cs)
KR (1) KR20030013373A (cs)
CN (1) CN1406283A (cs)
AU (2) AU3654301A (cs)
CA (1) CA2400952A1 (cs)
CZ (1) CZ20022779A3 (cs)
HR (1) HRP20020683A2 (cs)
HU (1) HUP0300073A3 (cs)
IL (1) IL151290A0 (cs)
IS (1) IS6521A (cs)
PL (1) PL357946A1 (cs)
RU (1) RU2265665C2 (cs)
SK (1) SK12012002A3 (cs)
WO (1) WO2001062949A1 (cs)
YU (1) YU63602A (cs)
ZA (1) ZA200206496B (cs)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2003213024A1 (en) * 2002-02-13 2003-09-04 Teva Gyogyszergyar Zartkoruen Mukodo Reszvenytarsasag Method for extracting a macrolide from biomatter
US7452692B2 (en) * 2002-02-13 2008-11-18 Teva Gyógyszergyár Zártkörüen Müködö Részvénytársaság Method for extracting a macrolide from biomatter
ES2204285B1 (es) * 2002-05-20 2005-03-01 Ercros Industrial, S.A. Procedimiento para el aislamiento y purificacion de lovastatina.
KR100540761B1 (ko) * 2002-08-09 2006-01-16 코바이오텍 (주) 프라바스타틴 나트륨의 제조방법
TW200504079A (en) * 2003-03-31 2005-02-01 Biogal Gyogyszergyar Crystallization and purification of macrolides
US20060169199A1 (en) * 2003-03-31 2006-08-03 Vilmos Keri Crystallization and purification of macrolides
WO2004111255A1 (en) * 2003-06-09 2004-12-23 TEVA Gyógyszergyár Részvénytársaság Ion-exchange filtration of fermentation broth
US7220357B2 (en) * 2003-07-24 2007-05-22 Teva Gyógyszergyár Zártkörúen Múkó´dó´Résvénytársaság Method of purifying macrolides
ES2239533B1 (es) * 2004-03-01 2006-12-16 Ercros Industrial, S.A. Procedimiento para la obtencion de compactina.
WO2005111024A1 (en) * 2004-05-14 2005-11-24 Pfizer Products Inc. Pyrimidine derivatives for the treatment of abnormal cell growth
TW200637835A (en) * 2004-12-22 2006-11-01 Teva Gyogyszergyar Zartkoruen Mukodo Reszvenytarsasag Method of purifying tacrolimus
CN101802208B (zh) * 2007-09-27 2016-05-18 Reg生命科学有限责任公司 通过提取式发酵减少原料中杂质的毒性作用
WO2009078033A2 (en) * 2007-12-18 2009-06-25 Themis Medicare Limited Isolation and recovery of simvastatin in lactone form or in the form of an acid salt from the harvested fermentation broth
EP2103309A3 (de) * 2008-03-19 2012-09-12 SCHWEIGERT, Florian Verfahren zur Extraktion und zum Nachweis von fettlöslichen Inhaltsstoffen aus biologischen Materialien
US20120156794A1 (en) * 2008-03-19 2012-06-21 Florian Schweigert Method for the extraction and detection of fat-soluble components from biological materials
IN2009MU00380A (cs) * 2009-02-18 2010-04-02
WO2010117342A1 (en) * 2009-04-08 2010-10-14 Nanyang Polytechnic A plant extract comprising statins and preparation techniques and uses thereof
CN102746262B (zh) * 2011-04-22 2014-06-04 广东蓝宝制药有限公司 一种康百汀纯化方法
CN102993145B (zh) * 2011-09-19 2015-06-03 北大方正集团有限公司 一种提取纯化洛伐他汀的方法
CN102875505B (zh) * 2012-08-02 2015-08-05 丽珠集团新北江制药股份有限公司 一种美伐他汀的提取精制工艺
CN102827123B (zh) * 2012-08-02 2015-04-22 丽珠集团新北江制药股份有限公司 美伐他汀的分离提取工艺
US9861962B2 (en) * 2013-10-08 2018-01-09 Industry Foundation Of Chonnam National University Selective surface impregnation method for catalytically active materials on particulate catalyst support using mutual repulsive force and soblubility difference between hydrophilic solvent and hydrophobic solvent
RU2585234C2 (ru) * 2013-12-27 2016-05-27 Открытое акционерное общество "Красфарма" Способ получения компактина
RU2585233C2 (ru) * 2013-12-27 2016-05-27 Открытое акционерное общество "Красфарма" Промышленный способ получения компактина
CN106083789A (zh) * 2016-06-07 2016-11-09 山东鲁抗医药股份有限公司 从发酵液中沉淀分离提取洛伐他汀的方法
CN114133331A (zh) * 2021-12-10 2022-03-04 广东蓝宝制药有限公司 一种回收获得高纯度普伐他汀酯的方法

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5612114B2 (cs) 1974-06-07 1981-03-18
US4049495A (en) 1974-06-07 1977-09-20 Sankyo Company Limited Physiologically active substances and fermentative process for producing the same
JPS5925599B2 (ja) 1979-02-20 1984-06-19 三共株式会社 新生理活性物質モナコリンｋおよびその製造法
US4319039A (en) 1979-06-15 1982-03-09 Merck & Co., Inc. Preparation of ammonium salt of hypocholesteremic fermentation product
US4294926A (en) 1979-06-15 1981-10-13 Merck & Co., Inc. Hypocholesteremic fermentation products and process of preparation
US4294846A (en) 1979-09-21 1981-10-13 Merck & Co., Inc. Hypocholesteremic fermentation products and products of preparation
US4342767A (en) 1980-01-23 1982-08-03 Merck & Co., Inc. Hypocholesteremic fermentation products
US4420491A (en) 1980-05-28 1983-12-13 Merck & Co., Inc. Hypocholesteremic fermentation products and process of preparation
US5202029A (en) 1991-03-13 1993-04-13 Caron Kabushiki Kaisha Process for purification of hmg-coa reductase inhibitors
HU208997B (en) 1992-06-17 1994-02-28 Gyogyszerkutato Intezet Microbiological method for producing mevinoline
HU210867B (en) * 1992-11-04 1995-10-30 Biogal Gyogyszergyar Method for extraction and purification of mevinolin from culture medium
SI9300047A (en) 1993-01-29 1994-09-30 Krka Microbiological method for preparation of lovostatin and/or mevinoline acid
SI9300303A (en) * 1993-06-08 1994-12-31 Krka Tovarna Zdravil Process for isolation of hypolipemic effective substance
US5409820A (en) 1993-08-06 1995-04-25 Apotex, Inc. Process for the production of lovastatin using Coniothyrium fuckelii
US5616595A (en) 1995-06-07 1997-04-01 Abbott Laboratories Process for recovering water insoluble compounds from a fermentation broth
US5989877A (en) 1995-08-03 1999-11-23 Gist-Brocades B.V. Selective process for the deacylation of acylated compounds
NZ280074A (en) * 1995-09-21 1997-05-26 Apotex Inc Substituted For Sco "compactin" produced by penicillium adametzioides g smith
SI9800046A (sl) * 1998-02-18 1999-08-31 LEK, tovarna farmacevtskih in kemi�nih izdelkov, d.d. Postopek za pridobivanje inhibitorjev HMG-CoA reduktaze visoke čistosti
SK282679B6 (sk) * 1999-04-16 2002-11-06 Biotika, A. S. Spôsob izolácie lovastatínu z vyfermentovanej pôdy

Also Published As

Publication number Publication date
EP1263979A4 (en) 2003-05-21
SK12012002A3 (sk) 2003-02-04
EP1263979A1 (en) 2002-12-11
ZA200206496B (en) 2003-09-23
RU2002122746A (ru) 2004-02-20
CA2400952A1 (en) 2001-08-30
HRP20020683A2 (en) 2004-12-31
HUP0300073A3 (en) 2004-10-28
HUP0300073A2 (en) 2003-05-28
RU2265665C2 (ru) 2005-12-10
WO2001062949A1 (en) 2001-08-30
IL151290A0 (en) 2003-04-10
AU3654301A (en) 2001-09-03
JP2003523751A (ja) 2003-08-12
IS6521A (is) 2002-08-22
AU2001236543B2 (en) 2005-02-03
US6387258B1 (en) 2002-05-14
CN1406283A (zh) 2003-03-26
PL357946A1 (en) 2004-08-09
YU63602A (sh) 2006-01-16
KR20030013373A (ko) 2003-02-14
JP3740062B2 (ja) 2006-01-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20022779A3 (cs) Způsob purifikace fermentačního bujónu
AU2001236543A1 (en) Method of purifying a fermentation broth
EP0702679B1 (en) Process for the isolation of lovastatin
WO1994029292A9 (en) Process for the isolation of lovastatin
BG64289B1 (bg) М...&#39;од за пол&#34;-аван... на hmg-coa р...д&#34;к&#39;азни инхиби&#39;ори &#39; ви&#39;ока -и&#39;&#39;о&#39;а
US7052886B2 (en) Process for the isolation of lovastatin
JP3236282B1 (ja) プラバスタチンを精製する方法
US20080300305A1 (en) Method of purifying pravastatin
CA2425882A1 (en) Method of purifying pravastatin or its pharmacologically acceptable salt
US7566792B2 (en) Method for the manufacture of Lovastatin
ES2204285B1 (es) Procedimiento para el aislamiento y purificacion de lovastatina.
WO2006035295A1 (en) Process for the purification of lovastatin
US6812007B1 (en) Process for the isolation and purification of mevinolin
HK1053642A (en) Method of purifying pravastatin or its pharmacologically acceptable salt