CZ2002114A3

CZ2002114A3 - Prostředek s trvalým uvolňováním, způsob jeho výroby a jeho pouľití

Info

Publication number: CZ2002114A3
Application number: CZ2002114A
Authority: CZ
Inventors: Yasutaka Igari; Yoshio Hata; Kazumichi Yamamoto
Original assignee: Takeda Chemical Industries, Ltd.
Priority date: 1999-07-15
Filing date: 2000-07-13
Publication date: 2002-04-17
Also published as: BR0012400A; CA2378714A1; DE60034568T2; ATE360413T1; DE60034568D1; US20080014237A1; NZ516466A; US7265157B1; PL352499A1; HUP0202880A3; NO20020084L; ZA200200347B; NO20020084D0; EP1197208A4; HUP0202880A2; IL147417A0; SK342002A3; EP1197208B1; HK1042237A1; AU5853000A

Description

Prostředek s trvalým uvolňováním, způsob jeho výroby a jeho použití

Oblast techniky

Předložený vynález se týká prostředku s trvalým uvolňováním farmakologický aktivní látky a způsobu jeho výroby.

Dosavadní stav techniky

Japonský patentový spis A-7-97334 popisuje přípravek s trvalým uvolňováním, který obsahuje fysiologicky aktivní peptid nebo jeho sůl a biologicky degradovatelný polymer, který má volnou koncovou karboxylovou skupinu, a rovněž způsob jeho výroby.

Britské patentové spisy č. 2 209 937, 2 234 169, 2 234 896 a 2 257 909 a evropská patentová přihláška bez rešeršní zprávy č. 626 170 popisují prostředek, který jako bázi obsahuje biologicky degradovatelný polymer obsahující ve vodě nerozpustnou sůl, jako je pamoát peptidu nebo proteinu, připravenou odděleně, a rovněž způsob jeho výroby.

Spis WO 95/15767 popisuje embonát (pamoát) cetrorelixu (LH-RH antagonista) a způsob jeho výroby a popisuje, že tento pamoát, i když je uzavřen v biologicky degradovatelném polymeru, vykazuje provedení uvolňující peptid ekvivalentní pamoátu, který existuje nezávisle.

Podstata vynálezu

Je získán nový prostředek, který obsahuje fysiologicky aktivní látku ve vysoké koncentraci, jejíž nadbytečné počáteční uvolňování je potlačeno, čímž se dosáhne stabilní rychlosti uvolňování po prodlouženou dobu (s výhodou asi 6 měsíců nebo déle).

►· tttt

Autoři předloženého vynálezu vyvinuli úsilí vyřešit shora popsané problémy a nakonec objevili, že tím, že se umožní, aby fysiologicky aktivní látka a hydroxynaftová kyselina spolu koexistovaly při vytvoření prostředku, může být fysiologicky aktivní látka zavedena do prostředku ve vysoké koncentraci; dále pak že uzavřením těchto dvou složek polymerem kyselina mléčná - kyselina glykolová může být fysiologicky aktivní látka uvolňována takovou rychlostí uvolňování, která je odlišná než rychlost, kterou se fysiologicky aktivní látka uvolňuje z prostředku vyrobeného z fysiologicky aktivní látky a hydroxynaftové kyseliny připraveného v nepřítomnosti polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová; že tato rychlost uvolňování může být regulována výběrem vlastností polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová a množstvím hydroxynaftové kyseliny; že počáteční nadbytečné uvolňování lze bezpečně potlačit i při vysoké koncentraci, při čemž se dosáhne trvalého uvolňování po mimořádné prodlouženou dobu (s výhodou asi 6 měsíců nebo déle); a také že použitím polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnostní (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (a dále že lze získat přípravek s uspokojivým trvalým uvolňováním. Jako výsledek dalšího úsilí byl ukončen tento vynález.

Předložený vynález tedy poskytuje:

1) prostředek s trvalým uvolňováním, který obsahuje farmakologicky aktivní látku nebo její sůl, hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl a polymer kyselina mléčná kyselina glykolová nebo jeho sůl, při čemž produkt váženého průměru molekulové hmotnosti uvedeného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová v množství (pmoly) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) uvedeného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je od 1 200 000 do 3 000 000 (včetně),

2) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž se jako farmakologicky aktivní látka používá fysiologicky aktivní peptid, • · · · · · 9 ·«·· • · · · · · 9 · · « ······ 9 · 9 · · « w 9 9 9 · * 9 «99 99 99 999 9« 9999

3) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž se jako farmakologicky aktivní látka používá LH-RH derivát,

4) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž se jako hydroxynaftová kyselina používá 1-hydroxy-2-naftová kyselina nebo 3-hydroxy-2-naftová kyselina,

5) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž se jako hydroxynaftová kyselina používá 1 -hydroxy-2-naftová kyselina,

6) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž % molámího poměru mezi kyselinou mléčnou a kyselinou glykolovou je 100/0 až 40/60,

7) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž % molámího poměru mezi kyselinou mléčnou a kyselinou glykolovou je 100/0,

8) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž vážený průměr molekulové hmotnosti polymeru je asi 3000 až asi 100 000,

9) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 8), v němž vážený průměr molekulové hmotnosti polymeru je asi 20 000 až asi 50 000,

10) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 3), v němž se jako LH-RH derivát používá peptid obecného vzorce

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z, v němž Y znamená DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal nebo DHis(lmBzl) a Z znamená NH-C₂H₂ nebo Gly-NH_2l

11) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž množství (pmoly) koncové karboxylové skupiny polymeru je 50 až 90 pmolů na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru, ·· • · · »« · · ·

12) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 3), v němž molární poměr hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a LH-RH derivátu nebo jeho soli je 3:4 až 4:3,

13) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 3), který obsahuje LH-RH derivát nebo jeho sůl v množství 12 % hmotnostních až 24 % hmotnostních vztaženo na prostředek v trvalým uvolňováním,

14) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž fysiologicky aktivní látka nebo její sůl je mírně rozpustná ve vodě nebo je rozpustná ve vodě,

15) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), který znamená přípravek pro injekci,

16) způsob výroby prostředku s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), který zahrnuje odstranění rozpouštědla ze směsi farmakologicky aktivní látky nebo její soli, polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo její soli a hydroxynaftové kyseliny nebo její soli,

17) způsob podle shora uvedeného bodu ad 16), který zahrnuje smíchání farmakologicky aktivní látky nebo její soli s roztokem polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo její soli a hydroxynaftové kyseliny nebo její soli v organickém rozpouštědle, dispergování této směsi a následující odstranění organického rozpouštědla,

18) způsob výroby podle shora uvedeného bodu ad 16), v němž farmakologicky aktivní látka nebo její sůl znamená vodný roztok obsahující farmakologicky aktivní látku nebo její sůl, • ·· • 9 9

9 9

9999

19) způsob výroby podle shora uvedeného bodu ad 16), v němž sůl farmakologicky aktivní látky znamená sůl s volnou bází nebo kyselinou,

20) léčivo, které obsahuje prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1),

21) profylaktické nebo terapeutické činidlo proti rakovině prostaty, hyperplazii prostaty, endometrióze, hysteromyomu, metrofibromu, předčasné pubertě, dysmenoree nebo rakovině mléčné žlázy nebo jako antikoncepční činidlo, které obsahuje prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 3),

22) prostředek s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 1), v němž se farmakologicky aktivní látka nebo její sůl uvolňuje po dobu alespoň 6 měsíců nebo déle, a

23) prostředek s trvalým uvolňováním, který obsahuje farmakologicky aktivní látku nebo její sůl, 1-hydroxy-2-naftovou kyselinu nebo její sůl a biologicky degradovatelný polymer nebo jeho sůl.

Dále tento vynález poskytuje:

24) způsob výroby prostředku s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 16), který zahrnuje výrobu emulze vody v oleji, která má jako vnitřní vodnou fázi kapalinu obsahující fysiologicky aktivní látku nebo její sůl a jako olejovou fázi roztok obsahující kyselinu mléčnou - kyselinu glykolovou nebo její sůl a hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl s následujícím odstraněním rozpouštědla,

25) způsob výroby prostředku s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 16), který zahrnuje výrobu emulze vody v oleji, která má jako vnitřní vodnou fázi kapalinu obsahující hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl a jako olejovou fázi roztok ·· * ·· obsahující fysiologicky aktivní látku nebo její sůl a kyselinu mléčnou - kyselinu glykolovou nebo její sůl s následujícím odstraněním rozpouštědla,

26) způsob výroby prostředku s trvalým uvolňováním podle shora uvedeného bodu ad 16), který zahrnuje smíchání farmakologicky aktivní látky nebo její soli s hydroxynaftovou kyselinou nebo její solí, rozpuštění této směsi a potom odstranění organického rozpouštědla, a

27) způsob výroby prostředku s trvalým uvolňováním podle kteréhokoliv ze shora uvedených bodů ad 24) až ad 26), v němž způsob odstranění rozpouštědla znamená způsob sušení ve vodě.

I když fysiologicky aktivní látka použitá v předloženém vynálezu není zvlášť omezena, pokud je farmaceuticky užitečná, může znamenat nepeptidovou sloučeninu nebo peptidovou sloučeninu. Nepeptidová sloučenina může znamenat například agonistu, antagonistu a sloučeninu, která má na enzym inhibiční účinek. Příkladem výhodné peptidové sloučeniny je fysiologicky aktivní peptid s molekulovou hmotností asi 300 až asi 40 000, s výhodou asi 400 až asi 30 000, výhodněji asi 500 až asi 20 000.

Takovým fysiologicky aktivním peptidem může být například hormon uvolňující luteinizační hormon (LH-RH), insulin, somatostatin, růstový hormon, hormon uvolňující růstový hormon (GH-RH), prolaktin, erythropoietin, adrenokortikální hormon, hormon stimulující melanocyty, hormon uvolňující hormon štítné žlázy, hormon stimulující hormon štítné žlázy, luteinizační hormon, hormon stimulující folikuly, vasopresin, oxytocin, kalcitonin, gastrin, serektin, pankreozymin, cholecystokin, angiotensin, lidský placentový laktogen, lidský chorionický gonadotropin, enkefalin, endorfin, KYOTORHINE, tuftsin, thymopoietin, thymosin, THYMOTHYMRIN, brzlíkový humorální faktor, krevní brzlíkový faktor, nádorový nekrotický faktor, faktor indukující kolonie, motilin, DEINORPHINE, bombesin, neurotensin, cerulein, bradykinin, atriální natriuretický faktor, nervový růstový faktor, buněčný růstový faktor, neurotrofní hor• · • ·· mon, peptid antagonizující endothelin a jejich deriváty stejně jako jejich fragmenty a jejich deriváty.

V předloženém vynáleuz se fysiologicky aktivní látka může používat jako taková nebo jako její farmaceuticky přijatelná sůl.

Sůl fysiologicky aktivní látky, která má bázickou skupinu, jako je aminová skupina, může například znamenat sůl s anorganickou kyselinou (označovanou také jako anorganická volná kyselina) (např. kyselina uhličitá, kyselina hydrogenuhličitá, kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina dusičná, kyselina boritá a podobné) a s organickou kyselinou (označovanou také jako organická volná kyselina) (např. kyselina jantarová, kyselina octová, kyselina propionová, kyselina trifluoroctová a podobné).

Sůl fysiologicky aktivní látky, která má kyselou skupinu, jako je karboxylová skupina, může znamenat například sůl s anorganickou bází (označovanou také jako anorganická volná báze) (např. alkalický kov, jako je sodík a draslík, alkalická zemina, jako je vápník a hořčík) nebo s organickou bází (označovanou také jako anorganická volná báze) (např. organickým aminem, jako je triethylamin, a bázickou aminokyselinou, jako je arginin). Fysiologicky aktivní peptid může tvořit kovovou komplexní sloučeninu (např. měďnatý komplex, zinečnatý komplex a podobně).

Výhodným příkladem takového fysiologicky aktivního peptidů je LH-RH derivát nebo jeho sůl, který je užitečný pro léčení onemocnění závislého na hormonu, zvláště rakoviny závislé na pohlavním hormonu (např. rakoviny prostaty, rakoviny dělohy, rakoviny prsní žlázy, rakoviny podvěsku mozkového a podobných), onemocnění závislého na pohlavním hormonu, jako je hyperplazie prostaty, endometrióza, hysteromyom, předčasná puberta, dymenorea, amenorea, premenstruační syndrom, syndrom mnohamístného vaječníku a podobně, a užitečný jako antikoncepční činidlo (nebo činidlo proti neplodnosti, jestliže se využívá zpětnovazebný efekt po přerušeném podávání). Jako příklad lze uvést také LH-RH derivát, nebo jeho sůl, který je užitečný při léčení benigního nebo maligního nádoru, který není závislý na pohlavním hormonu, ale je citlivý na LH-RH.

Typicky může LH-RH derivát nebo jeho sůl znamenat například peptidy popsané v Treatment with GnRH analogs: Controversies and perspectives, The Parthenon Publishing Group Ltd. (1996), a v japonských patentových spisech W-3-503165, A-3-101695, 7-97334 a 8-259460.

LH-RH derivát může znamenat například LH-RH agonistu nebo LH-RH antagonistu, příkladem druhého z nich může být například farmakologicky aktivní peptid obecného vzorce I

X-D2Nal-D4CIPhe-D3Pal-Ser-A-B-Leu-C-Pro-DALaNH₂ (I), v němž X znamená N(4H2-furoyl)Gly nebo NAc, A znamená zbytek vybraný z NMeTyr, Tyr, Aph(Atz) a NMeAph(Atz), B znamená zbytek vybraný z DLys(Nic), DCit, DLys(AzaglyNic), DLys(AzaglyFur), DhArg(Et₂), DAph(Atz) a DhCi a C znamená Lys(Nisp), Arg nebo hArg(Et₂) nebo jeho sůl.

LH-RH agonista může znamenat například farmakologicky aktivní peptid obecného vzorce II

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z (II), v němž Y znamená zbytek vybraný z DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal a DHis(lmBzl) a Z znamená NH-C₂H₅ nebo Gly-NH₂ nebo jeho sůl. Jedním zvláště výhodným je peptid, v němž Y znamená DLeu a Z znamená NH-C₂H₅ (tj. peptid vzorce 5-oxo-Pro-His-T rp-Ser-T yr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H5).

Jakýkoliv z těchto peptidů se může vyrábět způsobem popsaným v předcházejících odkazech a specifikacích stejně jako způsobem, který je s nimi v souladu.

• ·· • · · • · ♦«	• · <9 • * · · • · ·	• · • · • »	• · 9 9 9 9
·· · * ·	« · · · *	• ·	• » · ·

Následuje seznam zde použitých zkratek

Zkratka:	Název:
N(4H2-furoyl)Gly:	N-tetrahydrofuroyl-glycinový zbytek,
NAc:	N-acetylová skupina,
D2Nal:	D-3-(2~naftyl)alaninový zbytek,
D4CIPhe:	D-3-(4-chlor)fenylalaninový zbytek,
D3Pal:	D-3-(3-pyridyl)alaninový zbytek,
NMeTyr:	N-methyltyrosinový zbytek,
Aph(Atz):	N-[5'-(3'-amino-1 Ή-1 ',2',4'-triazolyl)]-fenylalaninový zbytek,
NMeAph(Atz):	N-methyl-t5^,-(3^,-amino-1’H-r,2’,4'-triazolyl)]-fenylalaninový zbytek,
DLys(Nic):	D-(e-N-nikotinoyl)lysinový zbytek,
Dcit:	D-citrulinový zbytek,
DLys(AzaglyNic):	D-(azaglycylnikotinoyl)lysinový zbytek,
DLys(AzaglyFur):	D-(azaglycylfuranyl)lysinový zbytek,
DhArg(Et)₂:	D-(N, N'-diethyl)homoargininový zbytek,
Daph(Atz):	D-N-[5’-(3'-amino-1 Ή-1 ',2',4'-triazolyl)]-fenylalaninový zbytek,
DhCi:	D-homocitrulinový zbytek,
Lys(Nisp):	(e-N-isopropyl)lysinový zbytek,
hArg(ET)₂:	(N,N'-diethyl)homoargininový zbytek,
DSer(tBu):	O-terc-butyl-D-serin a
Dhis(lmBzl):	N'^m-benzyl-D-histidin.

Jinak, pokud jde o aminokyseliny, jestliže jsou označeny zkratkami, tyto zkratky mají významy, které lze nalézt v nomenklatuře IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature, European Journal of Biochemistry 1984, 138, 9 až 37, nebo znamenají to, jak je zvykem v oblasti techniky. Aminokyseliny, i když existují jejich optické isomery, znamenají L formu, pokud není jinak uvedeno.

• · φ φ φ φ φφφ φφφ φ φ · · φ φ φ φ φ φφφ φφ φ φ φφφ φφ φφφφ

Hydroxynaftová kyselina, která se používá v tomto vynálezu, znamená naftalen, na který je navázána na různé atomy uhlíku jedna hydroxylová skupina a jedna karboxylová skupina. Existuje tedy celkem čtrnáct isomerů, které se navzájem liší v poloze hydroxylové skupiny ve vztahu v poloze 1 a poloze 2 naftalenového kruhu, na které je navázána karboxylová skupina. Tento vynález může používat jakýkoliv z těchto isomerů stejně jako jejich směs v jakémkoliv poměru. Jak je níže popsáno, ten isomer, který má vyšší disociační konstantu kyseliny, je výhodný, nebo je výhodný ten, který má nižší pKa (pKa = -log 10 Ka, kde Ka je disociační konstanta kyseliny). Výhodný je isomer, který je mírně rozpustný ve vodě.

Výhodným je také ten isomer, který je rozpustný v alkoholu (například ethanolu a methanolu). Výraz rozpustný v alkoholu znamená, že rozpustnost, například v methanolu, je 10 nebo více g/l.

I když pKa 3-hydroxy-2-naftové kyseliny (pKa = 2,708, Kagakubinran, II, Nippon Kagakukai, publikováno 25. září 1969) je jedinou známou pKa isomerů hydroxynaftové kyseliny, srovnání pKa třech isomerů hydroxybenzoové kyseliny slouží pro získání užitečných informací. Tak pKa 3-hydroxybenzoové kyseliny a 4-hydroxybenzoové kyseliny jsou 4 nebo více, zatímco pKa 2-hydroxybenzoové kyseliny (kyselina salicylová) je podstatně nižší (= 2,754). Podle toho 3-hydroxy-2-naftová kyselina, 1-hydroxy-2-naftová kyselina a 2-hydroxy-1-naftová kyselina, z nichž každá má karboxylovou skupinu a hydroxylovou skupinu navázané na přilehlých atomech uhlíku naftalenového kruhu, jsou výhodné ze 14 shora popsaných isomerů.

Hydroxynaftová kyselina může znamenat sůl. Takovou solí může být například sůl s anorganickou bází (např. alkalickým kovem, jako je sodík a draslík, a kovem alkalické zeminy, jako je vápník a hořčík), s organickou bází (např. organickým aminem, jako je triethylamin, a bázickou aminokyselinou, jako je arginin) a nebo s přechodným kovem (např. zinkem, železem a mědí) stejně jako komplexní sůl.

« · · ·

Příklad způsobu výroby hydroxynaftoátu farmaceuticky aktivní látky podle vynálezu je popsán níže.

1) Roztok hydroxynaftové kyseliny v hydratovaném organickém rozpouštědle se nanese a adsorbuje na kolonu se slabě bázickým ionexem až do nasycení. Potom se přidá hydratované organické rozpouštědlo, aby se odstranil nadbytek hydroxynaftové kyseliny a potom roztok fysiologicky aktivní látky nebo její soli v hydratovaném organickém rozpouštědle, aby došlo k výměně iontů. Výsledný eluát se zbaví rozpouštědla. Takové hydratované organické rozpouštědlo obsahuje jako organické rozpouštědlo alkohol (např. methanol, ethanol), acetonitril, tetrahydrofuran, dimethylformamid a podobné. Způsob odstranění rozpouštědla a vysrážení soli může znamenat způsob obecně známý nebo způsob, který je s ním v souladu. Například rozpouštědlo se odpaří s použitím vakua na rotačním odpařováku.

2) Výměnný ion silně bázického ionexu na koloně se nejdříve nahradí hydroxidovým iontem a potom se přidá roztok fysiologicky aktivní látky nebo její soli v hydratovaném organickém rozpouštědle, při čemž se bázické skupiny zamění za hydroxidy. Isolovaný eluent se použije pro rozpuštění hydroxynaftové kyseliny v menším než ekvivalentním množství, zahustí se tak, aby došlo k vysrážení soli, která se po promytí vodou suší, jestliže je to nutné.

Jelikož hydroxynaftoát fysiologicky aktivní látky je mírně rozpustný ve vodě, i když se rozpustnost může měnit podle použité fysiologicky aktivní látky, může se použít jako přípravek s trvalým uvolňováním využívající schopnosti trvale uvolňovat fysiologicky aktivní peptidové soli samotné nebo se může dále sestavit na prostředek s trvalým uvolňováním.

Polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová v tomto vynálezu znamená polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně), s výhodou 1 500 000 až 2 600 000 (včetně), s tím, že s výhodou se používá ten polymer, který má volnou koncovou karboxylovou ksupinu.

• 9· 9 · 9 *99	9 9 9 9 9 9 9 «99	9 9 9 9 ♦ ·	99 9 · 9
9 9 9 9	99 999	99	9 9 9 9

Polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová může existovat ve formě soli. Takovou solí může být například sůl s anorganickou bází (např. alkalickým kovem, jako je sodík a draslík, a kovem alkalické zeminy, jako je vápník a hořčík), s organickou bází (např. organickým aminem, jako je triethylamin, a bázickou aminokyselinou, jako je arginin) nebo s přechodným kovem (např. zinkem, železem a mědí) stejně jako komplexní sůl.

Tento polymer má % molární poměr mezi kyselinou mléčnou a kyselinou glykolovou v rozmezí s výhodou od asi 100/0 do asi 40/60, výhodněji od asi 100/0 do asi 50/50. S výhodou se používá také homopolymer kyseliny mléčné, jehož % molární poměr je 100/0.

Poměr optických isomerů kyseliny mléčné, která znamená alespoň jednu opakující se jednotku shora popsaného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová, jestliže existuje jako D-forma/L-forma (% molární), je s výhodou asi 75/25 až asi 25/75. Často se používají ty, které mají poměr D-forma/L-forma (% molární) zvláště asi 60/40 až asi 30/70.

Shora popsaný vážený průměr molekulové hmotnosti polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je obvykle asi 3000 až asi 100 000, s výhodou asi 3000 až asi 60 000, výhodněji asi 3000 až asi 50 000, zvláště asi 20 000 až 50 000.

Polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová podle vynálezu může znamenat například polymer, který má vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová 1 200 000 až 3 000 000 (včetně), výhodněji polymer, který má vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová 1 500 000 až 2 600 000 (včetně).

0 • 00 ♦ 0 · • 0 00 »00 ·♦

Polydisperzita (vážený průměr molekulové hmotnosti/číselný průměr molekulové hmotnosti) je obvykle asi 1,2 až asi 4,0, s výhodou asi 1,5 až asi 3,5, výhodněji asi 1,7 až asi 3,0.

Množství volných karboxylových skupin shora popsaného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru je obvykle asi 20 až asi 1000 pmolú, výhodněji asi 40 až asi 1000 pmolů. Dále výhodné množství je asi 40 až asi 95 pmolů, zvláště asi 50 až asi 90 mmolů.

Výhodnými příklady jsou:

1) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 100 000 a jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

2) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 60 000 a jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

3) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 50 000 a jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

4) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 20 000 až asi 50 000 a jehož vážený průměr molekulové hmotnosti • 00 0 0 • 0 0 0 0 0

0000 · ·

0 0 0 0 0 • «0 00 00 000 vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

5) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 μηηοΐύ a jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

6) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož množství (v pmoíech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 μιτιοίύ a jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

7) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 100 000 (včetně), 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

8) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 100 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na • ·· ·· * ·· ·· ♦ · · · ♦ · · φ « « · • Φ ·· · · Φ · · 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

999 99 99 999 99 999· jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

9) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 60 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 μηηοΐύ a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

10) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 60 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

11) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 50 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

12) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 50 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové • ft ftft · ftft ftft • ftftftft ftftftft • •ft ··· ftft fc ftft ftft · ftfcft • ftft ftft ftftft ftft ftftftft hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně),

13) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 20 000 až asi 50 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v frmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 200 000 až 3 000 000 (včetně), a

14) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 20 000 až asi 50 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je

200 000 až 3 000 000 (včetně).

Výhodnějšími příklady jsou;

15) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 100 000 a 2] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až

600 000 (včetně),

16) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 60 000 a 2] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku φ · φ φφ ·· φ ·· • ΦΦ φφφφ φ φφφφ φφ φ φφ φ φφφ φφ φ φφφ φφφ φφ φφ φφφ φφ φφφφ hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

17) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 50 000 a 2] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

18) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 20 000 až asi 50 000 a 2] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

19) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 pmolů a 2] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

20) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 2] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

21) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 100 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových • · · · · φ · ·· • · · · · « · · · φφφ φφ φ φφ · φ φ φ φ φ «φφ • φφ ·· φφφ ·· «φφφ karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je

500 000 až 2 600 000 (včetně),

22) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 100 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

23) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3 000 až asi 60 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 μιηοΐύ a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

24) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3 000 až asi 60 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

9 9« 99

999 9 99 9 • 9 9 9 9 9 • 99 99 9 999 • 99 9« ·9 999 9· 9999

25) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3000 až asi 50 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

26) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 3 000 až asi 50 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně),

27) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 20 000 až asi 50 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 20 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně), a

28) polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová 1] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti je asi 20 000 až asi 50 000, 2] jehož množství (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová je asi 40 až asi 1000 pmolů a 3] jehož vážený průměr molekulové hmotnosti vynásobený množstvím (v pmolech) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je 1 500 000 až 2 600 000 (včetně).

φ ·φ φφ φ φφ φφ φφφ φφφφ · · « · • φφφ φφφ φ · φ φ φ φ · φ φ φφφφ · φφφ φφ φ «φφ

ΦΦ· φφ φφ .φφφ φφ φφφφ

Vážený průměr molekulové hmotnosti, číselný průměr molekulové hmotnosti a polydisperzita znamenají molekulovou hmotnost jako polystyrenu stanovenou gelovou chromatografií (GPC) použitím 15 monodisperzních polystyrenů jako standardů, jejichž vážené průměry molekulových hmotností jsou 1 110 000, 707 000, 455 645, 354 000, 189 000, 156 055, 98 900, 66 437, 37 200, 17 100, 9830, 5870, 2500, 1303 a 504 a polydisperzita je z těchto hodnot vypočtena. Stanovení se provádí použitím zařízení GPC s vysokou rychlostí (TOSO, HLC-8120GPC, detekce diferenčním indexem lomu) spolu s GPC kolonou KF804Lx2 (Showa Denko) a s chloroformem jako mobilní fází. Průtoková rychlost byla 1 ml/minutu.

Zde uvedené množství volných karboxylových skupin znamená takové množství, které se stanoví způsobem značení (zde dále označovaným jako množství karboxylových skupin na základě způsobu značení). Typicky, v případě polymléčné kyseliny, W mg polymléčné kyseliny se rozpustí ve 2 ml směsi 5N kyseliny chlorovodíková/acetonitril (4:96 obj. dílům) a spojí se se 2 ml 0,01 M roztoku hydrochloridu 2-nitrofenylhydrazinu (ONPH) (5N kyselina chlorovodíková/acetonitril/ethanol = 1,02/35/15) a 2 ml 0,15M roztoku hydrochloridu 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimidu (pyridin/ethanol = 4/96 obj. dílům). Potom se směs nechá reagovat 30 minut při 40 °C a pak se rozpouštědlo oddestiluje. Zbytek se promyje vodou (čtyřikrát), rozpustí se ve 2 ml acetonitirlu, spojí se s 1 ml 0,5 molů/l ethanolického roztoku hydroxidu draselného a nechá se reagovat 30 minut při 60 °C. Reakční směs se zředí 1,5N vodným roztokem hydroxidu sodného, aby se připravilo Y ml, které se zkoumají na absorbanci při 544 nm A(/cm) použitím 1,5N vodného roztoku hydroxidu sodného jako referenčního standardu. Na druhé straně se vodný roztok DL-mléčné kyseliny použije jako standard, aby se stanovily jeho volné karboxylové skupiny C molů/l alkalickou titrací a podrobí se ONPH způsobu značení, aby se převedla na hydrazid D,L-mléčné kyseliny. Jeho absorbance se pak stanoví jako B (/cm) při 544. Na tomto základě se vypočte molární množství volných karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru podle následující rovnice:

[COOH] = (mol/g) = (AYC)/(WB).

• 99 ·· * tttt tttt • 9 9 · 9 99 tttttttt • tttttt ·· · tttt tt

9«tt··· tttttt tt tt tttttt tttttt ··· tttttt tttt ·· tttttt tt* tttttttt

Toto množství karboxylových skupin může být získáno také rozpuštěním polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová ve směsi rozpouštědel toluen-aceton-methanol a titrací výsledného roztoku na karboxylové skupiny alkoholickým roztokem hydroxidu draselného použitím fenolftaleinu jako indikátoru (zde dále je hodnota získaná tímto způsobem označována jako množství karboxylových skupin na základě alkalické titrace).

Jelikož rychlost, kterou se polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová degraduje a mizí, se obvykle snižuje při sníženém poměru glykolové kyseliny, ačkoliv může velmi silně záviset na složení kopolymeru, molekulové hmotnosti nebo množství volných karboxylových skupin, je možné prodloužit trvání uvolňování tím, že se sníží množství kyseliny glykolové nebo že se zvýší molekulová hmotnost současně se snížením množství volných karboxylových skupin.

Takový polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová lze vyrobit například nekatalytickou dehydratační kondenzační polymerací (japonský patentový spis A-61-28521) z kyseliny mléčné a kyseliny glykolové nebo polymerací s otevřením kruhu z cyklických diesterových sloučenin, jako jsou laktidy a glykolidy (Encyclopedic Handbook of Biomaterials and Bioengineeríng Part A: Materials, díl 2, Marcel Dekker, lne., 1995). I když polymer získaný shora známou popsanou polymerací s otevřením kruhu může někdy znamenat polymer, který nemá na svém konci žádnou volnou karboxylovou skupinu, tento polymer může být převeden na polymer, který má jisté množství karboxylových skupin na jednotku hmotnosti, například pomocí hydrolýzy popsané v evropské patentové přihlášce č. 0 839 525 před jeho použitím.

Polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, který má koncovou volnou karboxylovou skupinu, se může snadno vyrobit známým způsobem (například nekatalytickou dehydratační kondenzační polymerací, japonský patentový spis A-61-28521) nebo následujícími způsoby.

• a·	•Φ	*	aa	• a
• a ·	a	•	··	a	•	a ·
• ···	•	•	a	9	•	a
• · 4		*	•	•	a	a
		aaa	··	a* a a

1) Nejdříve se cyklická esterová sloučenina podrobí polymeraci použitím polymeračního katalyzátoru v přítomnosti derivátu hydroxymonokarboxylové kyseliny s chráněným karboxylem (např. íerc-butyl-D-laktát, benzyl-L-laktát) nebo derivátem hydroxydikarboxylové kyseliny s chráněným karboxylem (např. dibenzyl-tartronát, di-řerc-butyl-dihydroxyethylmalonát).

Shora uvedený derivát hydroxymonokarboxylové kyseliny s chráněným karboxylem nebo derivát hydroxydikarboxylové kyseliny s chráněným karboxylem mohou znamenat například derivát hydroxykarboxylové kyseliny, jehož karboxylová skupina (-COOH) je amidována (-CONH₂) nebo esterifikována (-COOR) s tím, že výhodný je derivát hydroxykarboxylové kyseliny, jehož karboxylová skupina (-COOH) je esterifikována (-COOR).

R ve shora uvedeném esteru může například znamenat alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, jako je methylová, ethylová, propylová, isopropylová, butylová a řerc-butylová skupina, cykloalkylovou skupinu se 3 až 8 atomy uhlíku, jako je cyklopentylová skupina a cyklohexylová skupina, arylovou skupinu se 6 až 12 atomy uhlíku, jako je fenylová skupina a α-naftylová skupina, aralkylovou skupinu se 7 až 14 atomy uhlíku zahrnující fenyl-alkyl(s 1 až 2 atomy uhlíku)ovou skupinu, jako je benzylová a fenethylová skupina, nebo a-naftyl-alkyl(s 1 až 2 atomy uhlíku)ovou skupinu, jako je α-naftylmethylová skupina. Ze shora uvedených skupin jsou výhodné řerc-butylová skupina a benzylová skupina.

Shora uvedená cyklická esterová sloučenina může například znamenat cyklickou sloučeninu, která má alespoň jednu esterovou vazbu v kruhu. Jejich typickými příklady jsou cyklická monoesterová sloučenina (lakton) a cyklická diesterová sloučenina (laktid).

Shora uvedená cyklická monoesterová sloučenina může například znamenat 4-členný cyklický lakton ((β-propiolakton, β-butyrolakton, β-isovalerolakton, β-kaprolakton, β-isokaprolakton, B-methyl-B-valerolakton a podobné), 5-členný cyk-

lický lakton (γ-butyrolakton, γ-valerolakton a podobné), 6-členný cyklický lakton (δ-valerolakton a podobné), 7-členný cyklický lakton (ε-kaprolakton a podobné), 4-dioxanon, 1,5-dioxepan-2-on a podobné.

Shora uvedená cyklická diesterová sloučenina může znamenat například sloučeninu obecného vzorce

v němž R¹ a R² mají stejný nebo různý význam a každý znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, jako je methylová, ethylová, propylová, isopropylová, butylová a řerc-butylová skupina) a laktid, v němž R¹ znamená atom vodíku a R² znamená methylovou skupinu nebo jak R¹ tak R² znamená atom vodíku.

Jejich příklady jsou typicky glykolid, L-laktid, D-laktid, DL-laktid, meso-laktid, 3-methyl-1,4-dioxan-2,5-dion (včetně optických isomerů) a podobně.

Shora uvedený polymerační katalyzátor může znamenat například katalyzátor na bázi organického cínu (např. cínoktylát, dibutylcíndilaurát, tetrafenylcín), katalyzátor na bázi hliníku (např. triethylaluminium) a katalyzátor na bázi zinku (např. diethylzinek).

Katalyzátory na bázi hliníku a na bázi zinku jsou výhodné pro účel odstraňování rozpouštědla snadno po reakci, zatímco katalyzátor na bázi zinku je výhodný pro účel zajištění bezpečnosti zbylého katalyzátoru, pokud nějaký existuje.

Rozpouštědlem pro polymerační katalyzátor je benzen, hexan, toluen a podobná rozpouštědla s tím, že zvláště výhodný je hexan a toluen.

Způsob polymerace může znamenat polymeraci ve velkém, při níž se reakční složka používá jako roztavená, nebo polymerační roztok, v níž se reakční složka používá rozpuštěná ve vhodném rozpouštědle (například v benzenu, toluenu, xylenu, dekalinu a dimethylformamidu). Výhodným rozpouštědlem je toluen, xylen a podobně. I když teplota polymerace není zvlášť omezena, polymerace ve velkém může používat teplotu, při níž reakční složky na počátku reakce nebo vyšší teplotě, obvykle 100 až 300 °C, roztají a polymerace v roztoku používá obvykle teplotu místnosti až teplotu 150 °C s použitím zpětného chladiče pro var nebo reaktoru odolného vůči tlaku, jestliže reakní teplota překračuje teplotu varu reakčního roztoku. I když doba, po kterou polymerace probíhá, může být různá, podle teploty polymerace, podle dalších podmínek reakce a podle zamýšlených vlastností polymeru, může být například 10 minut až 72 hodiny. Po reakci se reakční směs rozpustí ve vhodném rozpouštědle (například acetonu, dichlormethanu, chloroformu), spojí se s kyselinou (například kyselinou chlorovodíkovou, anhydridem kyseliny octové, kyselinou trifluoroctovou), aby se polymerace ukončila, a potom se vysráží, například smícháním s rozpouštědlem, které nerozpouští zamýšlený produkt (například alkoholem, vodou, etherem, isopropyletherem) podle standardního způsobu, ph čemž se isoluje polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, který má na svém ω-konci chráněnou karboxylovou skupinu.

Způsob polymerace podle vynálezu používá derivát hydroxykarboxylové kyseliny s chráněným karboxylem (např. řerc-butyl-D-laktát, benzyl-L-laktát) nebo derivát hydroxydikarboxylové kyseliny s chráněným karboxylem (např. dibenzyl-tartronát, di-řerc-butyl-dihydroxyethylmalonát) místo činidla pro přenos protonového řetězce, jako je methanol, který se konvenčně používá.

Použitím takového derivátu hydroxykarboxylové kyseliny s chráněným karboxylem (např. řerc-butyl-D-laktátu, benzyl-L-laktátu) nebo derivátu hydroxydikarboxylové kyseliny s chráněným karboxylem (např. dibenzyl-tartronátu, di-řerc-butyl-dihydroxyethylmalonátu) jako činidla pro přenos protonového řetězce 1] je možné regulovat molekulovou hmotnost na základě přívodu prostředku a 2] odstranění chrá-

nících skupin po polymeraci slouží k získání volné karboxylové skupiny na ω-konci výsledného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová.

2) Potom se z polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová, který má na svém ω-konci chráněnou karboxylovou skupinu, získaného polymeraci ve shora uvedeném stupni ad 1), odstraní chránící skupina, takže se získá zamýšlený polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, který má na svém ω-konci volnou karboxylovou skupinu.

Chránící skupina může být odstraněna způsobem, který je obecně znám. I když tento způsob může znamenat jakýkoliv způsob, pokud slouží k odstranění chránící skupiny bez toho, aby byla nepříznivě ovlivněna esterová vazba poly(hydroxykarboxylové kyseliny), typicky může znamnat redukci, rozklad kyselinou a podobné.

Redukční způsob může znamenat například katalytickou hydrogenaci použitím katalyzátoru (např. paladia na uhlí, paladiové černě, oxidu platičitého), redukci sodíkem v kapalném amoniaku a redukci dithiothreitolem. V tom případě, kdy polymer má například karboxylovou skupinu chráněnu benzylovou skupinou na svém ω-konci, se katalyticky hydrogenuje; polymer se typicky rozpustí v ethylacetátu, dichlormethanu, chloroformu a podobném rozpouštědle, přidá se paladium na uhlí, a za teploty místnosti se po dobu asi 20 minut až asi 4 hodin za intenzivního míchání probublává vodík, čímž se dosáhne odstranění chránící skupiny.

Kyselý rozklad může znamenat například rozklad kyselinou použitím anorganické kyseliny (například kyseliny fluorovodíkové, kyseliny bromovodíkové, kyseliny chlorovodíkové) nebo organické kyseliny (např. kyseliny trifluoroctové, kyseliny methansulfonové, kyseliny trifluormethansulfonové) stejně jako jejich směsí. Jestliže je to nutné, kyselý rozklad se může provádět v přítomnosti vychytávače kationtů (např. anisolu, fenolu a thioanisolu). V tom případě, kdy má například polymer karboxylovou skupinu chráněnu řerc-butylovou skupinou na svém ω-konci a podrobuje se rozkladu kyselinou, polymer se typicky rozpustí v dichlormethanu, xylenu,

toluenu nebo v podobném rozpouštědle a spojí se s kyselinou trifluorvodíkovou v příslušném množství, nebo se tento polymer rozpustí v kyselině trifluoroctové. Potom se směs míchá asi jednu hodinu za teploty místnosti, čímž se dosáhne odstranění chránící skupiny.

Rozklad kyselinou se s výhodou může provádět také ihned po polymerační reakci. V takovém případě slouží také jako terminační reakce polymerace.

Jestliže je to nutné, polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, získaný shora popsaným odstraněním chránící skupiny, se také může podrobit kyselé hydrolýze, aby se upravil vážený průměr molekulové hmotnosti, číselný průměr molekulové hmotnosti nebo množství koncových karboxylových skupin, podle toho, co je zapotřebí. Typicky se může použít způsob, který je popsán v evropské patentové přihlášce č. 0 839 525, nebo způsob, který je s ním v souladu.

Polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, který byl získán jak shora popsáno, se může použít jako základ pro výrobu přípravku s trvalým uvolňováním.

Polymer, který má na svém konci nespecifickou volnou karboxylovou skupinu, se může vyrobit známým způsobem (například viz spis WO 94/15587).

Dále pak polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, jehož konec byl převeden na volnou karboxylovou skupinu chemickým zpracováním po polymeraci s otevřením kruhu, je dostupný komerčně, například od Boehringer Ingelheim KG.

Polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová může být přítomen jako sůl (jako jsou ty, jejichž seznam je shora uveden), která se může vyrobit například a) způsobem, při němž polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, který má shora popsanou karboxylovou skupinu a který je rozpuštěn v organickém rozpouštědle, se spojí s vodným roztokem obsahujícím anorganickou bázi (například alkalický kov, jako je sodík a draslík, kov alkalické zeminy, jako je vápník a hořčík) nebo s organickou

bází (např. organickým aminem, jako je triethylamin, bázickou aminokyselinou, jako je arginin), aby se uskutečnila reakční výměna iontů; následuje isolace polymeru ve formě soli; b) způsobem, ve kterém se sůl slabé kyseliny s bází, uvedené shora v seznamu pod ad a) (například acetát a glykolát), rozpustí v roztoku shora popsaného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová, který má karboxylovou skupinu, v organickém rozpouštědle a potom se isoluje polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová ve formě soli, nebo c) způsobem, při němž se shora popsaný polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, který má karboxylovou skupinu a který je rozpuštěn v organickém rozpouštědle, spojí se solí slabé kyseliny (například acetátem a glykolátem) nebo oxidem přechodného kovu (například zinkem, železem, mědí) a potom se isoluje polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová ve formě soli.

I když se hmotnostní poměr farmakologicky aktivní látky v prostředku podle vynálezu může měnit, podle typu farmakologicky účinné látky, podle požadovaných farmakologických účinků a podle jejich doby trvání, obvykle znamená asi 0,001 až asi 50 % hmotnostních, s výhodou asi 0,02 až asi 40 % hmotnostních, výhodněji asi 0,1 až asi 30 % hmotnostních, nejvýhodnějí 12 až 24 % hmotnostních v případě fysiologicky aktivního peptidu nebo jeho soli vztaženo na celkové množství fysiologicky aktivní látky nebo její soli, hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli, jestliže poslední tři složky jsou obsaženy v prostředku s trvalým uvolňováním, a asi 0,012 až asi 80 % hmotnostních, s výhodou asi 0,1 až asi 50 % hmotnostních v případě nepeptidové fysiologicky aktivní látky nebo její soli. Podobná rozmezí hmotnostních poměrů lze použít i tehdy, jestliže je obsažena fysiologicky aktivní látka a hydroxynaftová kyselina. V případě prostředku s trvalým uvolňováním obsahujícím sůl fysiologicky účinného peptidu (označovaný zde jako ad A)) s hydroxynaftovou kyselinou (označovanou zde jako ad B)) hmotnostní poměr ad A) vztaženo na celkové množství složek ad A) + ad B) je obvykle asi 5 až asi 90 % hmotnostních, s výhodou asi 10 až asi 85 % hmotnostních, výhodněji asi 15 až asi 80 % hmotnostních, zvláště asi 30 až asi 80 % hmotnostních.

·· ·· • ··

V případě prostředku s trvalým uvolňováním, který obsahuje tři složky, konkrétně fysiologicky aktivní látku nebo její sůl, hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl a polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho sůl, množství hydroxynaftové kyseliny nebo její soli na 1 mol fysiologicky aktivní látky nebo její soli je asi

1/2 až asi 2 moly, s výhodou asi 3/4 až asi 4/3 molu, zvláště asi 4/5 až asi 6/5 molu.

Postup pro navržení prostředku podle vynálezu je diskutován níže s odkazem na prostředek s trvalým uvolňováním obsahujícím tři složky, konkrétně fysiologicky aktivní látku, hydroxynaftovou kyselinu a polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová, kde základní látkou je fysiologicky aktivní látka. V tomto případě prostředek obsahuje fysiologicky aktivní látku jako základ a hydroxynaftovou kyselinu jako kyselinu, každá z nich má svoji disociační rovnováhu v hydratovaném stavu nebo v přítomnosti stopových množství vody v jakémkoliv bodu času během výroby prostředku v jakémkoliv případě, který znamená zahrnutí do prostředku jako volná forma nebo jako sůl. Jelikož sůl, kterou hydroxynaftová kyselina mírně rozpustná ve vodě tvoří spolu s fysiologicky aktivní látkou, je považována za mírně rozpustnou ve vodě, i když rozpustnost může velice záviset na použité fysiologicky aktivní látce, disociační rovnováha slouží příznivě pro vytvoření takové soli mímě rozpustné ve vodě.

Aby se vyrobil prostředek, který obsahuje základní fysiologicky aktivní látku ve vysoké koncentraci, je z hlediska shora diskutované disociační rovnováhy výhodné protonovat téměř veškerou fysiologicky aktivní látku za vzniku shora popsané soli mímě rozpustné ve vodě. Pro tento účel je výhodné, aby hydroxynaftová kyselina nebo její sůl byla zahrnuta v takovém množství, které je alespoň ekvivalentní fysiologicky aktivní látce nebo její soli.

Mechanismus, kterým se fysiologicky účinná látka obsažená v prostředku trvale uvolňuje, je potom diskutován níže. Fysiologicky aktivní látka byla většinou protonována a existuje společně s doprovázejícím protiontem ve shora popsaném prostředku. Protiion znamená hlavně hydroxynaftovou kyselinu. Po podání prostředku živému tělu polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová podléhá degradaci za vzniku oligomerů a monomerů, každý z výsledných oligomerů (oligomery kyselina mléčná - kyselina glykolová) a monomerů (kyselina mléčná nebo kyselina glykolová) má jistě jednu karboxylovou skupinu, která také může sloužit jako protiion pro fysiologicky aktivní látku. I když se fysiologicky aktivní látka uvolňuje takovým způsobem, který zahrnuje přenos elektrického náboje, tj. uvolňuje se jako sůl doprovázená protiiontem, přenášející protiontové částice mohou znamenat například hydroxynaftové kyseliny, oligomery kyselina mléčná - kyselina glykolová (které mají přenositelné molekulové hmotnosti) a monomery (kyselina mléčná nebo kyselina glykolová).

Jestliže jsou současně přítomny dvě nebo více kyselin, obecně se převážně tvoří sůl se silnou kyselinou, i když toto převládání se může měnit, podle poměru. Pokud se týká pKa hydroxynaftové kyseliny, pKa například 3-hydroxy-2-naftové kyseliny je 2,708 (Kagakubinran, II, Nippon Kagakukai, publikováno 25. září 1969). Na druhé straně pKa karboxylové skupiny oligomerů kyselina mléčná - kyselina glykolová není známo, ale lze ho vypočítat z pKa kyseliny mléčné nebo kyseliny glykolové (= 3,86 nebo 3,83) podle principu, že změnu volné energie zavedením substituentu lze podrobit aproximaci na základě aditivního pravidla. Příspěvek substituentu k disociační konstantě byl stanoven a může být použit (Tabulka 4.1, pKa Prediction for Organic Acid and Bases, D. D. Perrin, B. Dempsey a E. P. Sergeant, 1981). Hodnoty pKa hydroxylové skupiny a esterové vazby jsou následující:

ApKa(OH) = -0,90 a delatpKa(esterové vazby) = -1,7.

Podle toho se tedy pKa karboxylové skupiny v oligomerů kyselina mléčná kyselina glykolová, jestliže se vezme v úvahu příspěvek esterové vazby, která je nejbližší k disociované skupině, vypočte následovně:

pKa = pKa(kyseliny mléčné nebo kyseliny glykolové) - ApKa(OH) + ApKa(esterové vazby) = 3,06 nebo 3,03.

Podle toho hydroxynaftová kyselina je kyselina, která je silnější než kyselina mléčná (pKa = 3,86), kyselina glykolová (pKa = 3,83) a oligomer kyselina mléčná - kyselina glykolová (pKa = 3,93), a je tedy možné, že se ve shora popsaném prostředku tvoří převážně sůl hydroxynaftové kyseliny a fysiologicky aktivní látky a že vlstnosti této soli převažujícím způsobem určují profil trvalého uvolňování fysiologicky aktivní látky z prostředku. Fysiologicky aktivní látka, která se zde používá, může například znamenat shora uvedenou fysiologicky aktivní látku.

V této souvislosti skutečnost, že sůl, která je vytvořena z hydroxynaftové kyseliny a fysiologicky aktivní látky, je ve vodě mírně rozpustná spíše než ve vodě nerozpustná, slouží úspěšně ve prospěch mechanismu trvalého uvolňování. Jelikož tedy převládající existence soli hydroxynaftové kyseliny, která je silnější než oligomer kyselina mléčná - kyselina glykolová a monomery z přenositelných solí fysiologicky účinné látky v časném stadiu uvolňování, jak je zřejmé z diskuse shora popsaných disociačních konstant, umožňuje, aby rozpustnost a provedení distribuce v tkání soli byly určující faktory pro rychlost uvolňování fysiologicky aktivní látky, počáteční schéma uvolňování látky může být upraveno podle toho, jaké množství hydroxynaftové kyseliny se přidá. Pokles množství hydroxynaftové kyseliny a zvýšení množství vytvořených oligomerů a monomerů jako důsledek hydrolýzy polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová vede následně k postupnému převládání mechanismu uvolňování fysiologicky aktivní látky, jejíž protiionty jsou oligomery a monomery, při čemž se udržuje stabilní uvolňování fysiologicky aktivní látky i když je hydroxynaftová kyselina v podstatě ze shora popsaného prostředku vyčerpána. Zvýšenou účinnost při zahrnování fysiologicky aktivní látky během způsobu výroby prostředku s trvalým uvolňováním a schopnost potlačit počáteční nadměrné uvolňování po podání zahrnuté fysiologicky aktivní látky lze vysvětlit podobným způsobem.

Také úlohu hydroxynaftové kyseliny v prostředku s trvalým uvolňováním obsahujícím hydroxynaftoát fysiologicky aktivního peptidů lze vysvětlit podobně na základě shora popsaného mechanismu.

Pojem ve vodě nerozpustný, jak se zde používá, znamená, že hmotnost látky rozpuštěná v 1 litru roztoku po míchání uvedené látky při teplotě 40 nebo méně °C po dobu 4 hodin v destilované vodě je 25 nebo méně mg.

Pojem mírně nerozpustný ve vodě, jak se zde používá, znamená, že shora popsaná hmotnost je větší než 25 mg, ale nikoliv větší než 5 g. Jestliže příslušnou látkou je sůl fysiologicky aktivní látky, potom hmotnost fysiologicky aktivní látky rozpuštěné podle shora popsaného způsobu je definována podle shora popsané definice.

I když morfologie prostředku s trvalým uvolňováním není zvlášť omezena, jsou výhodné mikročástice, zvláště mikrokuličky (také označované jako mikrotobolky v případě prostředku s trvalým uvolňováním, který obsahuje polymer kyselina mléčná kyselina glykolová). Zde uvedená mikrokulička znamená injektovatelnou kulatou mikročástici, která má schopnost být dispergována v roztoku. Morfologie může být potvrzena například pozorováním pomocí rastrovacího elektronového mikroskopu.

Způsob výroby prostředku s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu, který obsahuje fysiologicky aktivní látku nebo její sůl, hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl a polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho sůl, je popsán níže s použitím příkladů mikrotobolek.

I) Způsob sušení ve vodě

i) Způsob oleje ve vodě

Nejdříve se tedy podle tohoto způsobu připraví roztok hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli v organickém rozpouštědle. Organické rozpouštědlo použité pro výrobu přípravku s trvalým uvolňováním podle vynálezu má s výhodou teplotu tání 120 nebo méně °C.

ft ·· • ft • ftftft	ftft · • « ftft • ftft	·· · · • · « · • · ♦
ftft ftft	ftft ftftft	• · ft · · ·

Takové organické rozpouštědlo může znamenat například halogenovaný uhlovodík (např. dichlormethan, chloroform, dichlorethan, trichlorethan a tetrachlormethan), ether (např. ethylether a isopropylether), ester mastné kyseliny (např. ethylacetát a butylacetát), aromatický uhlovodík (např. benzen, toluen a xylen), alkohol (např. ethanol a methanol), stejně jako acetonitril. Jako organické rozpouštědlo pro polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho sůl je zvláště výhodný dichlormethan.

Jako organické rozpouštědlo pro hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl je zvláště výhodný alkohol nebo směs alkoholu a halogenovaného uhlovodíku.

Hydroxynaftová kyselina nebo její sůl a polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho sůl se mohou rozpouštět odděleně a potom se navzájem smíchat nebo se obě složky mohou rozpustit ve směsi organických rozpouštědel v jistém poměru. Z rozpouštědel se s výhodou používá směs halogenovaného uhlovodíku a alkoholu s tím, že zvláště výhodná je směs dichlormethanu a ethanolu.

Obsah ethanolu ve směsi organických rozpouštědel dichlormethanu a ethanolu, jestliže se jako organické rozpouštědlo používá ethanol smíchaný s dichlormethanem, je obvykle asi 0,01 až asi 50 % objemových, výhodněji asi 0,05 až asi 40 % objemových, zvláště asi 0,1 až asi 30 % objemových.

I když koncentrace polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová v roztoku organického rozpouštědla se může měnit podle molekulové hmotnosti polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová a podle typu organického rozpouštědla, je obvykle asi 0,5 až asi 70 % hmotnostních, výhodněji asi 1 až asi 60 % hmotnostních, zvláště asi 2 až asi 50 % hmotnostních, jestliže se jako organické rozpouštědlo používá dichlormethan.

Koncentrace hydroxynaftové kyseliny nebo její soli v organickém rozpouštědle, jestliže se jako organické rozpouštědlo používá směs dichlormethanu a ethanolu, je • ·· ·* · ·* ·· ··· ···· ···· • ··· · · · · * · * · ··· * · φ ·· * · * · * ·· »· · · obvykle asi 0,01 až asi 10 % hmotnostních, výhodněji asi 0,1 až asi 5 % hmotnostních, zvláště asi 0,5 až asi 3 % hmotnostní.

K roztoku hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a takto získaného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová se přidá a rozpustí se v něm nebo se v něm disperguje farmakologicky aktivní látka nebo její sůl. Potom se k vodné fázi přidá výsledný roztok organického rozpouštědla obsahující prostředek sestávající z farmakologicky aktivní látky nebo její soli, hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová. Vytvoří se tak emulze O (olejová fáze) ve W (vodná fáze). Potom se rozpouštědlo v olejové fázi odpaří nebo disperguje ve vodné fázi, při čemž se připraví mikrotobolky. Objem této vodné fáze je obvykle asi 1-násobek až asi 10 000-násobek, výhodněji asi 5-násobek až 5000-násobek, zvláště výhodně asi 10-násobek až asi 2000-násobek olejové fáze.

Vnější shora popsaná vodná fáze může obsahovat emulgační činidlo. Takové emuigační činidlo může obvykle znamenat jakékoliv emulgační činidlo, které je schopné vytvořit stabilní emulzi O/W. Jedním typicky používaným je aniontové povrchově aktivní činidlo (oleát sodný, stearát sodný, laurylsulfát sodný a podobné), neiontové povrchově aktivní činidlo (ester mastné kyseliny a polyoxyethylen-sorbitanu [Tween 80, Tween 60, dostupné od ATRASPOWDER, derivát polyoxyethylenového ricinového oleje [HCO-60, HCO-50, dostupné od NIKKO CHEMICALS]), polyvinylpyrrolidon, polyvinylalkohol, karboxymethylcelulosa, lecithin, želatina, kyselina hyaluronová a podobné. Jakékoliv ze shora uvedených činidel se může používat samotné nebo ve vzájemné kombinaci s jinými. Koncentrace je s výhodou asi 0,0001 až asi 10 % hmotnostních, výhodněji asi 0,001 až asi 5 % hmotnostních.

K vnější fázi se může přidat osmotické činidlo. Toto osmotické činidlo může znamenat jakoukoliv látku, která dodává vodnému roztoku osmotický tlak.

Takové osmotické činidlo může například znamenat polyalkohol, monoalkohol, monosacharid, disacharid, oligosacharid, aminokyselinu stejně jako jejich deriváty.

Shora uvedený polyalkohol může znamenat například trihydroxyalkohol, jako je glycerin, pentahydroxyalkohol, jako je arabitol, xylitol a adonitol, hexahydroxyalkohol, jako je mannitol, sorbitol a dulcitol. Ze shora uvedených je výhodným hexahydroxyalkohol s tím, že zvláště výhodný je mannitol.

Shora uvedený monohydroxyalkohol může znamenat například methanol, ethanol a isopropylalkohol, při čemž výhodný je ethanol.

Shora uvedený monosacharid může znamenat například pentosu, jako je arabinosa, xylosa, ribosa a 2-deoxyribosa, hexosu, jako je glukosa, fruktosa, galaktosa, mannosa, sorbosa, rhamnosa a fukosa, při čemž výhodnou je hexosa.

Shora uvedený oligosacharid může znamenat například trisacharid, jako je maltotriosa a rafinosa, a tetrasacharid, jako je stachyosa, při čemž výhodný je trisačharid.

Deriváty shora popsaného monosacharidu, disacharidu a oligosacharidů mohou znamenat například glukosamin, galaktosamin, kyselinu glukuronovou a kyselinu galakturonovou.

Shora uvedená aminokyselina může znamenat jakoukoliv L-aminokyselinu, jako je glycin, leucin a arginin. Výhodný je L-arginin.

Mohou se používat jakákoliv z těchto osmotických činidel, a to samotná nebo ve vzájemné kombinaci.

Jakékoliv z těchto osmotických činidel se používá v takové koncentraci, aby poskytlo takový osmotický tlak vnější vodné fáze, aby byl asi 1/50-násobek až 5-násobek, s výhodou asi 1/25-násobek až asi 3-násobek osmotického tlaku fysiologického solného roztoku.

Způsob odstranění organického rozpouštědla může znamenat jakýkoliv způsob, který je znám sám o sobě, nebo způsob, který je s ním souladu. Například se organické rozpouštědlo může odpařit za atmosferického tlaku nebo za postupně snižovaného tlaku za míchaní použitím příslušného míchadla, magnetického míchadla nebo utrazvukového zařízení, nebo se odpaří upravením vakua pomocí vakuového odpařováku a nebo se odpaří postupně použitím dialyzační membrány.

Takto získané mikrotobolky se isolují odstřeďováním nebo filtrací. Jakékoliv volné formy fysiologicky aktivní látky nebo její soli, hydroxynaftové kyseliny nebo její soli, ředidla, emulgačního činidla a podobných uložených na povrchu mikrotobolky se několikrát opláchnou destilovanou vodou a potom se opět dispergují v destilované vodě a lyofilizují se.

Během způsobu výroby se může přidat protiagregační činidlo, aby se zabránilo agregaci mezi částicemi. Takovým protiagregačním činidlem může být například polysacharid rozpustný ve vodě, jako je mannitol, laktosa, glukosa a škroby (jako je kukuřičný škrob), aminokyselina, jako je glycin, protein, jako je fibrin a kolagen. Z nich se s výhodou používá mannitol.

Po lyofilizaci se voda a organické rozpouštědlo obsažené v mikrotobolce může odstranit, jestliže je to nutné, za sníženého tlaku a zahřátím, při čemž se zabraňuje spojení mezi mikrotobolkami. S výhodou se zahřátí provádí za teploty, která je nepatrně vyšší než přechodný bod skelného přechodu polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová stanovený diferenčním skanovacím kalorimetrem se zvyšující se teplotou o 10 až 20 °C za minutu. Přechodný bod skelného přechodu polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová na teplotu vyšší než asi o 30 °C než je tato teplota, je rozmezí teploty, při které se zahřívání provádí výhodněji. S výhodou se zahřívání provádí za teploty v rozmezí přechodného bodu skelného přechodu polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová do teploty vyšší než přechodná teplota skelného přechodu o 10 °C, výhodněji při teplotě v rozmezí od přechodného bodu

• 0 9 99 99 • * ·· 9 · 9 · • « 9 9 9 9 • · · · 9 · · ·9φ 999 • · ··· · 9 9999 skelného přechodu do teploty, která je vyšší než přechodný bod skelného přechodu o 5°C.

I když doba zahřívání může být různá, podle množství mikrotobolky a podobně, obvykle je asi 12 hodin až asi 168 hodin, s výhodou asi 24 hodin až asi 120 hodin, zvláště asi 48 hodin až asi 96 hodin po tom, co teplota samotné mikrotobolky dosáhne dané teploty.

Způsob zahřívání není zvlášť omezen, pokud umožňuje stejnoměrné zahřívání celé mikrotobolky.

Takovým způsobem zahřívání může být například způsob zahřívání a sušení v termostatové komoře, fluidní nádobě, mobilní nádobě nebo peci nebo zahřívání a sušení v mikrovlnné troubě. Z těchto způsobů je výhodný způsob zahřívání a sušení v termostatové komoře.

ii) Způsob W/O/W (1)

Za prvé, výhodný je roztok polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli v organickém rozpouštědle. Organické rozpouštědlo a koncentrace polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli v organickém rozpouštědle jsou podobné, jak bylo shora popsáno pod (l)(l). Jestliže se používá organické rozpouštědlo, poměr je také podobný k těm, které byly shora popsány pod (l)(i).

K takto získanému roztoku polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli v organickém rozpouštědle se přidá fysiologicky aktivní látka nebo její sůl a ta se rozpustí nebo se disperguje. Potom se výsledný roztok organického rozpouštědla (olejová fáze) obsahující prostředek sestávající z fysiologicky aktivní látky nebo její soli a polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli spojí s roztokem hydroxynaftové kyseliny nebo její soli [v takovém rozpouštědle, jako je voda, vodné rozpouštědlo, jako je alkohol (např. methanol a ethanol), vodný roztok ·» »Φ φ Φ Φ φ

Φ Φ Φ • Φ φφφ φφφ φφ • Φ α

pyridinu nebo vodný roztok dimethylacetamidu]. Směs se emulguje známým způsobem, například homogenizátorem nebo ultrazvukem. Vytvoří se tak emulze W/O.

Potom se výsledná emulze W/O sestávající z fysiologicky aktivní látky nebo její soli, hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli přidá k vodné fázi, takže se vytvoří emulze W (vnitřní vodná fáze)/O (olejová fáze)/W (vnější vodná fáze), načež se z olejové fáze odpaří rozpouštědlo. Připraví se tak mikrotobolka. Objem této vnější vodné fáze je obvykle asi 1 -násobek až 10 000-násobek, výhodněji asi 5-násobek až asi 5000-násobek, zvláště asi 10-násobek až asi 2000-násobek objemu olejové fáze.

Emulgační činidlo a osmotické činidlo, která se mohou přidat ke shora uvedené vnější vodné fázi, a následná příprava je podobná jako ta, která byla shora popsána pod (I) (i)· (iii) Způsob W/O/W (2)

Nejdříve se připraví roztok hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli v organickém rozpouštědle. Výsledný roztok organického rozpouštědla se nazývá olejová fáze. Tento způsob výroby je podobný jako shora popsaný způsob pod (l)(i). Nebo se také může hydroxynaftová kyselina nebo její sůl a polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho sůl připravit odděleně v roztocích organického rozpouštědla a potom se oba roztoky smíchají. I když koncentrace polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli v roztoku organického rozpouštědla může být různá podle molekulové hmotnosti polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová a podle typu organického rozpouštědla, obvykle je asi 0,5 až asi 70 % hmotnostních, výhodněji asi 1 až asi 60 % hmotnostních, zvláště asi 2 až asi 50 % hmotnostních, jestliže se jako organické rozpouštědlo používá dichlormethan.

ΦΦ ·* φ * · Φ Φ 4 ··» « Φ φ • · Ο · Φ · φ

ΦΦ φ Φ • Φ Φ Φ • Φ Φ

ΦΦΦ ·« Φ ΦΦ »* *Φ· «Φ ΦΦΦΦ

Potom se připraví roztok nebo disperze fysiologicky aktivní látky nebo její soli s roztokem hydroxynaftové kyseliny nebo její soli [v takovém rozpouštědle, jako je voda a směs vody s alkoholem, jako je alkohol (např. methanol a ethanol)].

Koncentrace, na kterou se přidá fysiologicky aktivní roztok nebo jeho sůl, je obvykle 0,001 mg/ml až 10 mg/ml, výhodněji 0,1 mg/ml až 5 mg/ml, zvláště 10 mg/ml až 3 mg/ml.

Může se přidat známé solubilizační činidlo a stabilizační činidlo. Pro rozpuštění nebo dispergování fysiologicky aktivní látky a přísad, se může provádět zahřívání, třepání nebo míchání, pokud se neztrácí aktivita. Výsledný vodný roztok je dále označován jako vnitřní vodná fáze.

Takto získaná vnitřní vodná fáze a olejová fáze, jak bylo shora popsáno, se emulgují známým způsobem, například použitím homogenizátoru nebo ultrazvukem. Vznikne tak emulze W/O.

Objem olejové fáze, která se má smíchat, je obvykle asi 1-násobný až 1000-násobný, výhodněji 2-násobný až 100-násobný, zvláště asi 30-násobný až 1-násobný než je objem vnitřní vodné fáze.

Výsledná emulze W/O má obvykle asi 0,01 až asi 10 Pa.s, s výhodou asi 0,1 až asi 5 Pa.s při asi 12 až 20 °C.

Potom se výsledná emulze W/O sestávající z fysiologicky aktivní látky nebo její soli, hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli přidá k vodné fázi. Vytvoří se emulze W (vnitřní vodná fáze)/O (olejová fáze)/W (vnější vodná fáze), načež se z olejové fáze odpaří rozpouštědlo nebo rozpouštědlo difunduje do vnější vodné fáze. Připraví se tak mikrotobolka. Objem této vnější vodné fáze je obvykle asi 1-násobek až asi 10 000-ná• *· ·· » ·» «· ·· » ···· ··«· • ··» · · ♦ · · -t ··· · · · ··· ··· ·· ·* »·· »· ·*·· sobek, výhodněji asi 5-násobek až 50 000-násobek, zvláště asi 10-násobek až asi 2000-násobek objemu olejové fáze.

Emulgační činidlo a osmotické činidlo, která se mohou přidat ke shora uvedené vnější vodné fázi, a následující příprava jsou podobné jako ty, které byly shora popsána pod (I) (i).

(II) Způsob dělení fází

Když se tímto způsobem vyrobí mikrotoblka, po částech se za míchání koacervační činidlo přidá k roztoku prostředku, který obsahuje farmakologicky aktivní látku nebo její sůl, hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl a polymer kyselina mléčná kyselina glykolová nebo jeho sůl v organickém rozpouštědle popsaném u shora uvedeného způsobu sušení ve vodě (I), takže se vysráží mikrotobolka, která ztuhne. Toto koacervační činidlo představuje asi 0,01-násobek až asi 1000-násobek, s výhodou asi 0,05-násobek až asi 500-násobek, zvláště asi 0,1-násobek až asi 200-násobek objemu olejové fáze.

Koacervační činidlo není zvlášť omezeno, pokud znamená polymerní, minerální nebo rostlinnou sloučeninu mísitelnou s organickým rozpouštědlem a pokud umožňuje, aby komplex fysiologicky aktivní látky nebo její soli, s hydroxynaftovou kyselinou nebo její solí a polymerem kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli byl rozpuštěn. Jejich typickými příklady jsou silikonový olej, sezamový olej, sojový olej, kukuřičný olej, bavlníkový olej, kokosový olej, lněný olej, minerální oleje, hexan, heptan a podobné. Jakákoliv z těchto látek se může používat samotná nebo ve vzájemné kombinaci.

Takto získaná mikrotobolka se isoluje, promyje se opakovaně například heptanem, takže se vyrobí prostředek sestávající z farmakologicky aktivní látky nebo její soli, hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho soli bez jakéhokoliv koacervačního činidla a dalšího materiálu.

Potom se za sníženého tlaku vysuší. Promytí se alternativně provede také způsobem, který je podobný způsobu popsanému u způsobu sušení ve vodě ve shora uvedeném odstavci (l)(i). Potom následuje lyofilizace s následujícím sušením za zahřívání.

(III) Způsob sušení rozprašováním

Jestliže se tímto způsobem vyrábí mikrotobolka, roztok obsahující farmakologicky aktivní látku nebo její sůl, hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl a polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho sůl v organickém rozpouštědle popsaný ve shora uvedeném způsobu sušení ve vodě (I) se rozprašuje tryskou do sušící komory rozprašující sušárny, při čemž se v mimořádně krátké době odpaří organické rozpouštědlo v kapičkách mikročásteček. Vyrobí se tak mikrotobolka. Taková tryska může znamenat například duální fluidní trysku, tlakovou trysku, trysku s rotujícím diskem a podobné. Potom následuje promytí, jestliže je to nutné, podobným způsobem, jako je způsob popsaný u způsobu sušení ve vodě shora popsaného v (I). Potom následuje lyofilizace a následně se provede sušení za zahřívání.

Dávková forma mikrotobolky, která je jiná než shora popsaná mikrotobolka, se může připravit tak, že se roztok, který obsahuje farmakologicky aktivní látku nebo její sůl, hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl a polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho sůl v organickém rozpouštědle, popsaný ve způsobu sušení ve vodě shora uvedeného způsobu výroby mikrotobolky (I), podrobí operaci například s rotačním odpařovákem, kde se organické rozpouštědlo a voda odpaří dosucha za regulace vakua, následuje rozpráškování použitím tryskového mlýnu a podobně, při čemž se získá jemný prášek (také označovaný jako mikročástice).

Potom se rozpráškovaný jemný prášek může promýt podobným způsobem, jako je způsob popsaný u způsobu sušení ve vodě shora uvedeného způsobu výroby mirkotobolky (I). Potom následuje lyofilizace a následně se provede sušení za zahřívání.

Mikrotobolka nebo jemný prášek zde získaný umožňuje takové uvolňování léčiva, které odpovídá rychlosti degradace použitého polymeru kyselina mléčná kyselina glykolová.

Prostředek s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu může znamenat jakoukoliv dávkovou formu, jako je mikrokulička, mikrotobolka, jemný prášek (mikročástice) a podobně. S výhodou existuje ve formě mikrotobolky.

Prostředek s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu může být sestavován jako takový nebo se může používat jako výchozí materiál pro výrobu jakýchkoliv rozmanitých dávkových forem, jako je intramuskulámí, subkutánní nebo tkáňová injekce nebo implantační přípravek, nazální, rektální a nitroděložní mukózní přípravek, orální přípravek (např. pevná dávková forma, jako je tobolka zahrnující tvrdé a měkké tobolky, granule a prášek, kapalný přípravek, jako je sirup, emulze a suspenze) a podobné.

Jestliže se prostředek s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu sestavuje do přípravku ve formě injekce, připravuje se jako vodná suspenze společně s dispergačním činidlem (např. povrchově aktivním činidlem, jako je Tween 80 a HCO-60, polysacharidem, jako je hyaluronát sodný, karboxymethylcelulosa, alginát sodný a podobné), ochranným činidlem (např. methylparabenem a propylparabenem), isotonickým činidlem (např. chloridem sodným, mannitolem, sorbitolem, glukosou a prolinem), nebo se disperguje společně s rostlinným olejem, jako je sezamový olej a kukuřičný olej. Připraví se tak olejová suspenze, takže se získá prakticky použitelný přípravek s trvalým uvolňováním ve formě injekce.

Velikost částice prostředku s trvalým uvolňováním, jestliže se používá jako suspenzní injekční přípravek, je přijatelná, jestliže umožňuje, že existuje uspokojivé dispergování a dochází k uspokojivému projití jehlou injekční stříkačky. Střední velikost částic může být například asi 0,1 až asi 300 pm, s výhodou asi 0,5 až asi 150 pm, výhodněji asi 1 až asi 100 pm.

• ·

9 9 ·· 99 • · · · • 9 <·

999 · · 9999

Aseptický přípravek prostředku s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu se může získat například způsobem, při kterém se celý způsob výroby provádí aseptický, způsobem používajícím sterilizaci γ-paprsky nebo způsobem, při kterém se přidá ochranné činidlo, i když neexistuje žádné zvláštní omezení.

Jelikož prostředek s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu má nízkou toxicitu, může se používat jako bezpečné farmaceutické činidlo u savců (např. člověka, dobytka, prasat, psů, koček, myší, krys a králíků).

I když se dávka prostředku s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu může měnit podle typu a obsahu fysiologicky aktivní látky jako hlavní složky, podle dávkové formy, podle trvání uvolňování farmakologicky účinné látky, podle cílového onemocnění a podle cílového živočicha, může znamenat efektivní množství farmakologicky aktivní látky. Jednotlivá dávka farmakologicky aktivní látky jako hlavní složky, jestliže přípravek s trvalým uvolňováním znamená šestiměsíční přípravek, je s výhodou asi 0,01 mg až asi 10 mg/kg tělesné hmotnosti za den u dospělého, výhodněji asi 0,05 mg až 5 mg/ tělesné hmotnosti.

Jednotlivá dávka prostředku s trvalým uvolňováním je s výhodou asi 0,05 mg až asi 50 mg/kg tělesné hmotnosti za den u dospělého, výhodněji asi 0,1 mg až asi 30 mg/kg tělesné hmotnosti.

Frekvence podávání může být jednou za několik týdnů, jednou za měsíc nebo jednou za několik měsíců (např. 3, 4 nebo 6 měsíců), podle typu a obsahu fysiologicky aktivní látky jako hlavní složky, podle dávkové formy a podle trvání uvolňování farmakologicky aktivní látky.

I když prostředek s trvalým uvolňováním podle předloženého vynálezu se může používat jako profylaktické a terapeutické činidlo proti různým onemocněním v závislosti na typu farmakologicky aktivní látky, která je v něm obsažena, může, jestliže obsahuje LH-RH derivát jako farmakologicky aktivní látku, se může používat jako ··· ·· ·· ··· ·· ···· profylaktické a terapeutické činidlo proti onemocněním závislým na hormonech, zvláště rakovině závislé na pohlavních hormonech (např. rakovině prostaty, rakovině dělohy, rakovině prsu, rakovině podvěsku mozkového a podobně), onemocněním závislým na pohlavních hormonech, jako je hyperplazie prostaty, endometrióza, hysteromyom, předčasná puberta, dysmenorea, amenorea, premenstruační syndrom, syndrom vícemístného vaječníku a podobně, a je užitečný jako antikoncepční činidlo (nebo proti neplodnosti, jestliže se využije zpětnovazbný efekt po přerušení antikoncepce). Je také užitečný při léčení benigního nebo maligního nádoru, který není závislý na pohlavních hormonech, aleje citlivý na LH-RH.

Příklady provedení vynálezu

Předložený vynález je dále popsán pomocí následujících příkladů a pokusů, které nejsou zamýšleny jako omezení tohoto vynálezu.

Příklad 1

Roztok 1,2 g acetátu 5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-DLeu-Leu-Arg-Pro-NH-C₂H₅(zde dále stručně označovaný jako peptid A, Takeda Chemical Industries, Ltd.) rozpuštěný v 1,2 ml destilované vody se smíchá s roztokem 4,62 g polymeru DL-mléčné kyseliny (vážený průměr molekulové hmotnosti: 40 600; číselný průměr molekulové hmotnosti: 21 800; množství koncových karboxylových skupin: 52,7 pmolu/g) a 0,18 g 1 -hydroxy-2-naftové kyseliny ve směsi rozpouštědel 8,25 ml dichlormethanu a 0,45 ml ethanolu, a emulguje se použitím homogenizátoru za vzniku emulze W/O. Potom se emulze W/O nalije do 1200 ml 0,1% (hmotn.) vodného roztoku polyvinylalkoholu (EG-40, Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), který byl předtím uchováván při 15 °C, a míchá se použitím turbinového homogenizátoru rychlostí 7000 otáček za minutu. Vytvoří se emulze W/O/W. Tato emulze W/O/W se míchá 3 hodiny za teploty místnosti, aby se nechal dichlormethan a ethanol odpařit nebo difundovat do vnější vodné vrstvy. Potom olejová fáze ztuhla, prosela se sítem o velikosti ok 75 pm, odstřeďuje se 5 minut pň 2000 otáčkách za minutu (05PR-22, Hitachi, Ltd.), aby se • ··· · · · · • · · · · · • · ··· ·· «··· vysrážela mikrotobolka, která se pak isoluje. Tato mikrotobolka se opět disperguje v destilované vodě, opět se odstřeďuje a promyje se, aby se odstranily volné složky, načež se isoluje. Isolovaná mikrotobolek se přidá malé množství destilované vody, aby se opět dispergovala. V téo směsi se rozpustí 0,3 g mannitolu a potom se směs lyofilizuje, aby se získal prášek. Isolované množství v % hmotnostních mikrotobolky bylo 46,91 % a obsah peptidu A v mikrotobolce byl 18,7 %, zatímco obsah 1 -hydroxy-2-naftové kyseliny byl 2,57 %.

Příklad 2

Roztok 1,2 g acetátu peptidu A rozpuštěného v 1,2 ml destilované vody se smíchá s roztokem 4,62 g polymeru DL-mléčné kyseliny (vážený průměr molekulové hmotnosti: 40 600; číselný průměr molekulové hmotnosti: 21 800; množství koncových karboxylových skupin: 52,7 pmolu/g) a 0,18 g 3-hydroxy-2-naftové kyseliny rozpuštěné ve směsi rozpouštědel 7,5 ml dichlormethanu a 0,45 ml ethanolu, a emulguje se použitím homogenizátoru za vzniku emulze W/O. Potom se směs zpracuje podobným způsobem jako v příkladu 1, takže se získá prášek mikrotobolek. Isolované množství v % hmotnostních mikrotobolky bylo 53,81 % a obsah peptidu A v mikrotobolce byl 17,58 %, zatímco obsah 3-hydroxy-2-naftové kyseliny byl 2,49 %.

Pokus 1

Kolem 45 mg každé mikrotobolky získané v příkladech 1 a 2 se disperguje v 0,3 ml disperzního media (0,15 mg karboxymethylcelulosy, 0,3 mg polysorbátu 80, 15 mg mannitolu rozpuštěného v destilované vodě) a podá se subkutánně injekční jehlou 22G do dorsální oblasti SD krysího samce starého 7 týdnů. Po předem dané době se krysa usmrtí a zbývající mikrotobolka zůstávající v místě podání se odebere, prozkoumá se na obsah peptidu A, který se podělí počátečním obsahem a získá se tak % zbytku, které je uvedeno v tabulce 1.

Tabulka 1 % peptidů A ve zbytku

	příklad 1	příklad 2
1 den	92,9 %	93,7 %
2 týdny	74,6 %	78,8 %
4 týdny	56,0 %	58,0 %
8 týdnů	31,6 %	36,0 %
12 týdnů	28,3 %	32,3 %
16 týdnů	24,5 %	26,8 %
20 týdnů	17,8%	23,8 %
26 týdnů	12,6%	15,6%

Jak je zřejmé z tabulky 1, jak mikrotobolka z příkladu 1, která obsahuje 1-hydroxy-2-naftovou kyselinu, tak mikrotobolka z příkladu 2, která obsahuje 3-hydroxy-2-naftovou kyselinu, by mohla obsahovat farmaceuticky aktivní látku ve vysokých koncentracích a vykazovat mimořádně vysoký účinek na potlačování počátečního nadměrného uvolňování fysiologicky aktivní látky. Žádná z těchto mikrotobolek neposkytovala trvalé uvolňování fysiologicky aktivní látky po mimořádně prodlouženou dobu konstantní rychlostí.

Příklad 3

Roztok 1,2 g acetátu peptidů A rozpuštěného v 1,2 ml destilované vody se smíchá s roztokem 4,62 g polymeru DL-mléčné kyseliny (vážený průměr molekulové hmotnosti: 32 000; číselný průměr molekulové hmotnosti: 17 800; množství koncových karboxylových skupin: 72,1 gmolu/g) a 0,18 g 3-hydroxy-2-naftové kyseliny rozpuštěné ve směsi rozpouštědel 7,5 ml dichlormethanu a 0,45 ml ethanolu, a ··· ·· i· ··· ·· ···· emulguje se použitím homogenizátoru za vzniku emulze W/O. Potom se směs zpracuje podobným způsobem jako v příkladu 1, takže se získá prášek mikrotobolek. Isolované množství v % hmotnostních mikrotobolky bylo 51,2 % a obsah peptidu A v mikrotobolce byl 18,05 %, zatímco obsah 3-hydroxy-2-naftové kyseliny byl 2,42 %.

Pokus 2

Kolem 250 mg mikrotobolky získané v příkladu 3 se disperguje v 1,5 ml disperzního media (0,75 mg karboxymethylcelulosy, 1,5 mg polysorbátu 80 a 75 mg mannitolu rozpuštěného v destilované vodě) a podá se intramuskulámě injekční jehlou 22G do zadku bígla. Na druhé straně se asi 125 mg této mikrotobolky disperguje v 0,75 ml disperzního media (0,375 mg karboxymethylcelulosy, 0,75 mg polysorbátu 80 a 37,5 mg mannitolu rozpuštěného v destilované vodě) a podá se subkutánně injekční jehlou 22G do zadku bígla. Po předem dané době se odebere krev z cévy přední tlapy a zkoumá se množství peptidu A a testosteronu v seru. Tato množství jsou uvedena v tabulce 2.

Tabulka 2

Intramuskulární podávání

	peptid A (ng/ml)	testosteron (ng/ml)
1 den	7,33	5,31
2 týdny	0,76	0,46
4 týdny	0,91	0,58
8 týdnů	3,65	0,25 nebo méně
12 týdnů	1,56	0,25 nebo méně
16 týdnů	1,14	0,25 nebo méně
20 týdnů	0,59	0,25 nebo méně
26 týdnů	0,53	0,25 nebo méně
28 týdnů	0,48	0,25 nebo méně
30 týdnů	0,33	0,26
32 týdnů	0,37	0,79
34 týdnů	0,22	1,41
36 týdnů	0,14	0,94

«·· ·· φφ ··» ·· φφ*

Subkutánní podávání

	peptid A (ng/ml)	testosteron (ng/ml)
1 den	17,61	2,79
2 týdny	0,99	1,95
4 týdny	0,62	1,50
8 týdnů	0,76	0,68
12 týdnů	1,77	0,25 nebo méně
16 týdnů	1,57	0,25 nebo méně
20 týdnů	1,23	0,25 nebo méně
26 týdnů	1,93	0,33
28 týdnů	0,35	1,59
30 týdnů	0,25	2,00

Jak je zřejmé z tabulky 2, hladina fysiologicky aktivní látky v krvi se udržuje až po dobu asi 26 týdnů, během které hladina tstosteronu, jako index účinnosti, se udržuje na normální hladině nebo níže a potom se začíná regenerovat na normální hladinu v období asi 28 týdnů až 34 týdnů jako odpověď na snížení hladiny fysiologicky aktivní látky v krvi. I když je hydroxynaftová kyselina v přípravku obsažena, fysiologicky aktivní látka byla přítomna stabilně v mikrotoblce po prodlouženou dobu bez ztráty své aktivity, při čemž se trvale uvolňuje. Je také zřejmé, že stabilní účinnost byla vykazována bez ohledu na způsoby podávání.

Příklad 4

Roztok 86,2 g polymeru DL-mléčné kyseliny (vážený průměr molekulové hmotnosti: 28 300; číselný průměr molekulové hmotnosti: 14 700; množství koncových karboxylových skupin stanovené způsobem značení: 69,2 μίτιοίυ^) rozpuštěného v 67 g dichlormethanu a 87,7 g roztoku získaného rozpuštěním 9 g 3-hydro• · ♦

• ··

xy-2-naftové kyseliny ve 210 g dichlormethanu a 16,2 g ethanolu se smíchají a teplota se upraví na 28,8 °C. 219,2 g tohoto roztoku organických rozpouštědel se odváží a smíchá se s vodným roztokem 20,4 acetátu peptidu A rozpuštěného v 18,8 g destilované vody udržované na 54,8 °C. Tato směs se míchá 5 minut, aby se pouze zhruba emulgovala, potom se emulguje použitím homogenizátoru při 10 000 otáčkách za minutu po dobu 5 minut za vzniku emulze W/O. Potom se tato emulze W/O ochladí na 12,7 °C a během 5 minut a 11 vteřin se nalije do 20 litrů 0,1% (hmotnostní) vodného roztoku polyvinylalkohoíu (EG-40, Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), který se předtím udržuje na 12,7 °C a míchá se pomocí zařízení Homomic Line Flow (Tokushukikai) rychlostí 9000 otáček za minutu. Vytvoří se tak emulze W/O/W. Tato emulze W/O/W se během 30 minut upraví na 15 °C a potom se míchá 2 hodiny a 30 minut s upravováním teploty tak, aby se dichlormethan a ethanol nechaly odpařit nebo difundovat do vnější vodné vrstvy. Olejová fáze potom ztuhne, prošije se sítem o velikosti otvorů 75 um, odstřeďuje se kontinuálně při 2000 otáčkách za minutu ((H-600S, Kokusanenshinki). Vysráží se mikrotobolka, která se pak isoluje. Isolovaná mikrotobolka se opět disperguje v malém množství destilované vody, prošije se sítem o velikosti otvorů 90 pm, v této směsi se rozpustí 12,3 g mannitolu a potom se směs lyofilizuje, takže se získá prášek. Výtěžek jako hmotnost mikrotobolek byla 84,4 g, což odpovídá isolovaným 75,7 %, a obsah peptidu A byl 17,8 %, zatímco obsah 3-hydroxy-2-naftové kyseliny byl 2,5 %.

Příklad 5

Roztok 107,8 g polymeru DL-mléčné kyseliny (vážený průměr molekulové hmotnosti: 27 700; číselný průměr molekulové hmotnosti: 15 700; množství koncových karboxylových skupin stanovené způsobem značení: 69,8 pmolu/g) rozpuštěný v 83,9 g dichlormethanu a 110,2 g roztoku získaného rozpuštěním 7,5 g 1-hydroxy-2-naftové kyseliny ve 175,8 g dichlormethanu a 13,5 g ethanolu se smíchají a teplota se upraví na 28,2 °C. 274,2 g tohoto roztoku organických rozpouštědel se odváží a spojí se s vodným roztokem 25,6 acetátu peptidu A rozpuštěného ve 23,52 g destilované vody udržované na 52,4 °C. Tato směs se míchá 5 minut, aby se pouze

• · · • · · • ftftft	• ♦ ft	• · ft	• ft	ft · • · •
• •	• •	• · •
• · ·	•	«	•	•	•	•
ftftft · ·		ftft	ftftft	ft ft		• ftftft

zhruba emulgovala. Potom se emulguje použitím homogenizátoru při 10 080 otáčkách za minutu po dobu 5 minut za vzniku emulze W/O. Potom se tato emulze W/O ochladí na 12,5 °C a během 3 minut a 42 vteřin se nalije do 25 litrů 0,1% (hmotnostní) vodného roztoku polyvinylalkoholu (EG-40, Nippon Synthetic Chemical Industry Co., Ltd.), který se předtím udržuje na 13,1 °C, a míchá se pomocí zařízení Homomic Line Flow (Tokushukikai) rychlostí 7000 otáček za minutu. Vytvoří se tak emulze W/O/W. Tato emulze W/O/W se během 30 minut upraví na 15 °C a potom se míchá 2 hodiny a 30 minut s upravováním teploty tak, aby se dichlormethan a ethanol odpařily nebo difundovaly do vnější vodné vrstvy. Olejová fáze potom ztuhne, prošije se sítem o velikosti otvorů 75 nm a odstřeďuje se kontinuálně při 2000 otáčkách za minutu (H-600S, Kokusanenshinki). Vysráží se mikrotobolka, která se pak isoluje. Isolovaná mikrotobolka se opět disperguje v malém množství destilované vody, prošije se sítem o velikosti otvorů 90 pm, v tomto roztoku se rozpustí 15,4 g mannitolu a potom se směs lyofilizuje, takže se získá prášek. Výtěžek jako hmotnost mikrotobolek byla 105,7 g, což odpovídá isolovaným 75,8 %, a obsah peptidů A byl 17,8 %, zatímco obsah 1-hydroxy-2-naftové kyseliny byl 2,8 %.

Příklad 6

Roztok 107,6 g polymeru DL-mléčné kyseliny (vážený průměr molekulové hmotnosti: 30 800; číselný průměr molekulové hmotnosti: 13 900; množství koncových karboxylových skupin stanovené způsobem značení: 66,3 pmolu/g) rozpuštěný v

83,3 g dichlormethanu a 109,7 g roztoku získaného rozpuštěním 7,5 g 1-hydroxy-2-naftové kyseliny ve 175 g dichlormethanu a 13,5 g ethanolu se smíchá a teplota se upraví na 28,7°C. 274,3 g tohoto roztoku organických rozpouštědel se odváží a spojí se s vodným roztokem 24,89 g acetátu peptidů A rozpuštěného ve 23,49 g destilované vody udržované na 51,2 °C. Tato směs se míchá 5 minut, aby se pouze zhruba emulgovala. Potom se emulguje použitím homogenizátoru při 10 070 otáčkách za minutu po dobu 5 minut za vzniku emulze W/O. Potom se tato emulze W/O ochladí na 12,8 °C a během 4 minut a 13 vteřin se nalije do 25 litrů 0,1% (hmotnostní) vodného roztoku polyvinylalkoholu (EG-40, Nippon Synthetic Chemical Industry Co.,

Ltd.), který se předtím udržuje na 13,3 °C, a míchá se pomocí zařízení Homomic Line Flow (Tokushukikai) rychlostí 7000 otáček za minutu. Vytvoří se tak emulze W/O/W. Tato emulze W/O/W se během 30 minut upraví na 15 °C a potom se míchá 2 hodiny a 30 minut s upravováním teploty tak, aby se dichlormethan a ethanol odpařily nebo aby difundovaly do vnější vodné vrstvy. Olejová fáze potom ztuhne, prošije se sítem o velikosti otvorů 75 pm a odstřeďuje se kontinuálně při 2000 otáčkách za minutu (H-600S, Kokusanenshinki). Vysráží se mikrotobolka, která se pak isoluje. Isolovaná mikrotobolka se opět disperguje v malém množství destilované vody, prošije se sítem o velikosti otvorů 90 pm, v tomto roztoku se rozpustí 15,4 g mannitolu a potom se směs lyofilizuje, takže se získá prášek. Výtěžek jako hmotnost mikrotobolek byl 101,9 g, což odpovídá isolovaným 73,1 %, a obsah peptidů A byl 17,3 %, zatímco obsah 1-hydroxy-2-naftové kyseliny byl 2,9 %.

Pokus 3

Kolem 45 mg každé mikrotobolky získané v příkladech 5 a 6 se disperguje v 0,3 ml disperzního media (0,15 mg karboxymethylcelulosy, 0,3 mg polysorbátu 80 a 15 mg mannitolu rozpuštěného v destilované vodě) a podá se subkutánně injekční jehlou 22G do dorsální oblasti SD krysího samce starého 7 týdnů. Po předem dané době se krysa usmrtí a zbývající mikrotobolka zůstávající v místě podání se odebere a prozkoumá se na obsah peptidů A, který se podělí počátečním obsahem a získá se tak % zbytku, který je uveden v tabulce 3.

« ·* • · · 9 · ··	99 9 9 • *	9 9 9 9	99	• · • · 9
9 •	« •
• · ·	9 9	•	•	•	9
·· · 9 9	99	··«	• ·		9999

Tabulka 3 % peptidů A ve zbytku

	příklad 5	příklad 6
1 den	87,0 %	90,5 %
1 týden	80,0 %	83,2 %
2 týdny	72,3 %	73,5 %
4 týdny	57,6 %	58,0 %
8 týdnů	48,2 %	46,7 %
12 týdnů	34,5 %	32,8 %
16 týdnů	23,1 %	22,0 %
20 týdnů	14,7 %	13,4%
26 týdnů	6,1 %	3,3 %

Jak je zřejmé z tabulky 3, jak mikrotobolky z příkladu 5 tak 6, které obsahují 1-hydroxy-2-naftovou kyselinu a které se odlišují v molekulové hmotnosti polymeru mléčné kyseliny a báze, by mohly obsahovat farmaceuticky aktivní látku ve vysoké koncentraci, i když obě byly vyráběny v množství asi 125 g, a vykazovaly mimořádně vysoký účinek na potlačování počátečního nadměrného uvolňování fysiologicky aktivní látky. Žádná z těchto mikrotobolek neposkytovala trvalé uvolňování fysiologicky aktivní látky po mimořádně prodlouženou dobu konstantní rychlostí.

Průmyslová aplikovatelnost

Prostředek s trvalým uvolňováním podle vynálezu obsahuje farmakologicky aktivní látku ve vysoké koncentraci, potlačuje nadměrné počáteční uvolňování této látky a udržuje si stabilní rychlost uvolňování po prodlouženou dobu (s výhodou asi 6 měsíců nebo déle).

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Prostředky s trvalým uvolňováním, vyznačující se tím, že obsahují farmakologicky aktivní látku nebo její sůl, hydroxynaftovou kyselinu nebo její sůl a polymer kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo jeho sůl, při čemž produkt váženého průměru molekulové hmotnosti uvedeného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová v množství (pmoly) koncových karboxylových skupin na jednotku hmotnosti (v gramech) uvedeného polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová je od 1 200 000 do 3 000 000 (včetně).
2. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se je, t í m, že se-jake-farmakologicky účinná látka používá fýsiologicky aktivní peptid.
3. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se

-Jfi.

t í m, že se-jake farmakologicky účinná látka používá LH-RH derivát.
4. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se

J*Pt í m, že se^jaka hydroxynaftová kyselina používá 1 -hydroxy-2-naftová kyselina nebo 3-hydroxy-2-naftová kyselina.
5. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se je t í m, že so jaké hydroxynaftová kyselina používá 1-hydroxy-2-naftova kyselina.
6. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se t í m, že % molárního poměru mezi kyselinou mléčnou a kyselinou glykolovou je 100/0 až 40/60.

• «9 • 9 99

99 9999
7. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se t í m, že % molámího poměru mezi kyselinou mléčnou a kyselinou glykolovou je 100/0.
8. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se t í m, že vážený průměr molekulové hmotnosti polymeru je asi 3000 až asi 100 000.
9. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 8, vyznačující se t í m, že vážený průměr molekulové hmotnosti polymeru je asi 20 000 až asi 50 000.
10. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 3, vyznačující se t í m, že ee-jeke LH-RH derivát používá· peptid obecného vzorce

5-oxo-Pro-His-Trp-Ser-Tyr-Y-Leu-Arg-Pro-Z, v němž Y znamená DLeu, DAla, DTrp, DSer(tBu), D2Nal nebo DHis(lmBzl) a Z znamená NH-C₂H₂ nebo Gly-NH₂.
11. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se t í m, že množství (v pmolech) koncové karboxylové skupiny polymeru je 50 až 90 μιτιοίύ na jednotku hmotnosti (v gramech) polymeru.
12. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 3, vyznačující se t í m, že molámí poměr hydroxynaftové kyseliny nebo její soli a LH-RH derivátu nebo jeho soli je 3:4 až 4:3.
13. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 3, vyznačující se t í m, že obsahuje LH-RH derivát nebo jeho sůl v množství 12 % hmotnostních až 24 % hmotnostních vztaženo na prostředek v trvalým uvolňováním.

• *· ·· • · φ 9 · φ • Φ·· · 9

99 99

9 9 9 9

9 9 9

9 9 9 9 9 9 ··· ·· ΦΦ ΦΦΦ

9 9 9

ΦΦ ΦΦΦΦ
14. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se t í m, že fysiologicky účinná látka nebo její sůl je mírně rozpustná ve vodě nebo je rozpustná ve vodě.
15. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se t í m, že znamená přípravek pro injekci.
16. Způsob výroby prostředku s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se t í m, že zahrnuje odstranění rozpouštědla ze směsi farmakologický účinné látky nebo její soli, polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo její soli a hydroxynaftové kyseliny nebo její soli.
17. Způsob výroby podle nároku 16, v y z n a č u j í c í se t í m, že zahrnuje smíchání farmakologický účinné látky nebo její soli s roztokem polymeru kyselina mléčná - kyselina glykolová nebo její soli a hydroxynaftové kyseliny nebo její soli v organickém rozpouštědle, dispergování této směsi a následující odstranění organického rozpouštědla.
18. Způsob výroby podle nároku 16, v y z n a č u j í c í se t í m, že farmakologicky účinná látka nebo její sůl znamená vodný roztok obsahující farmakologicky aktivní látku nebo její sůl.
19. Způsob výroby podle nároku 16, v y z n a č u j í c í se t í m, že sůl farmakologicky účinné látky znamená sůl s volnou bází nebo kyselinou.
20. Léčivo, vyznačující se tím, že obsahuje prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1.
21. Profylaktické nebo terapeutické činidlo proti rakovině prostaty, hyperplazii prostaty, endometrióze, hysteromyomu, metrofibromu, předčasné pubertě, dysmenoree nebo rakovině mléčné žlázy nebo antikoncepční činidlo, vyΦΦ • φφ φφ * »♦ ·· • * ·· φφφφ φφφ φ φ · • φ ♦ φ · φ · • ♦ · φφφ φφ φφφ φφ φφφφ značující se tím, že obsahuje prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 3.
22. Prostředek s trvalým uvolňováním podle nároku 1, vyznačující se

11 m, že farmakologicky účinná látka nebo její sůl se uvolňuje po dobu alespoň 6 měsíců nebo déle.
23. Prostředek s trvalým uvolňováním, vyznačující se tím, že obsahuje farmakologicky aktivní látku nebo její sůl, 1-hydroxy-2-naftovou kyselinu nebo její sůl a biologicky degradovatelný polymer nebo jeho sůl.